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米拉贝隆

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  • 有关米拉贝隆缓释片含量测定问题

    在做米拉贝隆缓释片含量时,含量忽高忽低,有时同一样品含量100%,有时是97%,用的流动相0.1%三氟乙酸和乙腈 色 谱柱 WATERS XBRIDGE C18 4.6mm*250mm柱温 35°,波长250,样品配制没有差错,为什么会出现这种情况?

  • 烟嘧磺隆和吡嘧磺隆农药制剂液相检测不到啦

    各位大侠,我用紫外检测器做烟嘧磺隆和吡嘧磺隆农药样品, 标样都没有问题,出峰很好。但是将农药制剂稀释后进样,完全没有峰了。也将标样直接添到制剂中再稀释,但是仍然没有峰出来。用液质质进样,该样品吡嘧磺隆是没有问题的,烟嘧磺隆也能出峰但有一定干扰,请教一下,液相紫外检测器做不出该农药样品这到底是什么问题呢?

  • 【第三届原创参赛】溶胶凝胶法制备烟嘧磺隆分子印迹固相微萃取搅拌棒及应用

    【第三届原创参赛】溶胶凝胶法制备烟嘧磺隆分子印迹固相微萃取搅拌棒及应用

    维权声明:本文为sibianjing原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。溶胶凝胶法制备烟嘧磺隆分子印迹固相微萃取搅拌棒及应用司汴京,周杰*(山东农业大学化学与材料科学学院,山东 泰安271018)摘要:本实验采用溶胶-凝胶法制备了烟嘧磺隆分子印迹吸附萃取搅拌棒涂层。考察了其制备条件,并采用扫描电镜表征了涂层的性质,证明涂层表面形态均一,耐溶剂冲洗,稳定性好。实验表明自制涂层对烟嘧磺隆具有良好的萃取效率。实验还利用自制烟嘧磺隆固相微萃取搅拌棒,建立了搅拌棒吸附萃取-高效液相色谱-紫外检测(SBSE-HPLC-UV)联用分析测定水样中烟嘧磺隆的方法。方法的线性范围在1.0-10.0nmol/L检出限为0.7nmol/L。方法回收率为96.0%(RSD=2.7%)。关键词:搅拌棒吸附萃取, 溶胶-凝胶法,分子印迹, 烟嘧磺隆搅拌棒吸附萃取(Stir bar sorptive extraction, SBSE)是由Erik Baltussen等人于1999年提出的,是在固相微萃取(Solid Phase Micro Extraction,SPME)基础上发展起来的一种新型样品预处理技术。该技术与固相微萃取一样集提取、净化、浓缩和进样为一体,具有简单、高效、快速、重现性好、绿色无溶剂等优点,并在萃取过程中吸附搅拌棒自身完成搅拌,避免了在Fiber SPME中搅拌子的竞争吸附,而且其萃取固定相的体积比SPME大50倍以上,因此富集倍数明显提高,非常适合痕量分析。在SBSE技术中,萃取固定相的制备非常重要,因为萃取固定相,在萃取时要经过溶胀和摩擦,对目标分子要有特定的识别性能,制备过程十分困难。烟嘧磺隆是是一类新型、高效、广谱、安全的磺酰脲类除草剂,由于这类化合物的特性,在环境痕量分析中成为一个重要的课题。本文利用分子印迹技术,以γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷为交联剂,甲基丙烯酸为功能单体,烟嘧磺隆为印迹分子制备了对烟嘧磺隆具有特定识别性能的SBSE涂层,并对其性能进行评价。1 实验部分1.1.1试剂 烟嘧磺隆(99.5%,山东农业大学植物保护学院),甲基丙烯酸(MAA,99.0%天津巴斯夫化工有限公司)使用前减压蒸馏除去阻聚剂;乙腈(色谱纯 99.8%,天津市永大化学试剂开发中心),γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷(MPTMS,分析纯, 曲阜市华荣化工新材料有限公司)使用前减压蒸馏除去阻聚剂;偶氮二异丁腈(AIBN,化学纯,天津市北联精细化学品开发有限公司)使用前重结晶。其他试剂均为色谱纯或分析纯。实验用水为二次重蒸水。1.1.2 实验仪器:KQ-50B型超声波振荡器,昆山市超声仪器有限公司; HJ-4多头磁力搅拌器,金坛市医疗仪器厂;RE-52AA旋转蒸发器,上海亚荣生化仪器厂。UV-2450紫外可见分光光度计(日本岛津公司),恒温水浴(日本岛津公司)[font=Times New

  • 单克隆抗体的制备过程及原理是什么?

    [font='calibri'][size=13px]单克隆抗体的制备过程及原理是什么?[/size][/font][font='宋体'][size=13px]义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商,目前已成功交付了数以万计的抗体项目,客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]针对定制单克隆抗体,义翘神州提供了一套全面的解决方案。我们将与您通力合作,完成从抗原设计、纯化和抗体验证的完整过程。义翘神州拥有包括杂交瘤、噬菌体抗体库和单B细胞在内的抗体发现平台, 我们可根据您感兴趣的靶点、抗体应用和时间表等,来选择最合适的技术平台。 此外,义翘神州还提供ELISA、WB、流式细胞术、IHC、基于细胞的筛选、亲和力检测等多种表征和筛选技术,确保最终鉴定到最佳的抗体,以满足研究、诊断和治疗领域等应用。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]单克隆抗体的制备原理:[/size][/font][font='宋体'][size=13px]单克隆抗体(MAb)是针专一的抗原决定簇产生的抗体,单克隆技术又名杂交瘤技术起源于1975年,由G.K?hler和Milstein创立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]单克隆抗体的制备过程:[/size][/font][font='宋体'][size=13px]1、免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]2、细胞融合 采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]3、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。[/size][/font][font='宋体'][size=13px]5、单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。[/size][/font][font='宋体'][size=13px][url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体定制服务[/b][/url]推荐:https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/size][/font]

  • 欣赏一下瑞士阿尔卑斯山脉的皮拉图斯山独特风光

    欣赏一下瑞士阿尔卑斯山脉的皮拉图斯山独特风光

    [b][color=#cc0000]此次旅游去了[b][color=#cc0000]瑞士阿尔卑斯山脉的皮拉图斯山,[/color][/b]欣赏一下皮拉图斯山的独特风光:[/color][color=#cc0000]皮拉图斯山(Mt. Pilatus)是一座俯瞰瑞士中部名城琉森(卢塞恩)的阿尔卑斯山峰。皮拉图斯山由数座山峰组成,海拔2128米的Tomlishorn峰,海拔2119米的Esel峰位于皮拉图斯齿轨登山列车站的上方。整个山体位于上瓦尔登州、下瓦尔登州和琉森(卢塞恩)州交界处。在琉森(卢塞恩)的卡佩尔廊桥边一抬头就能看见流传着龙的传说的巍峨险峻的皮拉图斯山。皮拉图斯山被认为是琉森(卢塞恩)的门户,在琉森有皮拉图斯大街、皮拉图斯电台、皮拉图斯直升机公司,可见人们对皮拉图斯山的钟爱。皮拉图斯山以拥有世界最陡的齿轨登山列车和“金色环游”项目而成为世界级的景点。沿途能欣赏到高山植被的变化,雄奇的山体和偶尔从眼前掠过的羚羊。山顶有龙道、餐厅、酒店、纪念品商店、观景台和名为“龙之论坛”的设备完善的会议大厅。[/color][/b][color=#cc0000][b]一、高空索道(高空吊仓)门票1[/b][/color][color=#cc0000][b][img=,400,]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201710131824_01_1841897_3.jpg[/img][/b][/color]

  • 【原创大赛】SPE-HPLC大米中苄嘧磺隆残留量测定

    【原创大赛】SPE-HPLC大米中苄嘧磺隆残留量测定

    SPE-HPLC大米中苄嘧磺隆残留量测定摘要 苄嘧磺隆是选择性内吸传导型除草剂。药剂在水中迅速扩散,经杂草根部和叶片吸收后转移到其它部位,阻碍支链氨基酸生物合成。敏感杂草生长机能受阻、幼嫩组织过早发黄,抑制叶部、根部生长。能有效防治稻田1年生及多年生阔叶杂草和莎草,能被杂草根、叶吸收并传到其他部位。对水稻安全,适用于稻田防除1年生及多年生阔叶杂草和莎草,效果良好。 建立了SPE-HPLC测定大米中苄嘧磺隆残留量的检测方法。试样中残留的苄嘧磺隆用二氯甲烷提取,提取液经正己烷净化后,用C18固相萃取柱和氟罗里硅土固相萃取柱,用配有紫外检测器的液相色谱检测,回收率稳定。总结本文采用Smart Prep Ectractor全自动固相萃取仪(Horizon )装置、Labtech C18固相萃取柱、Florisil固相萃取柱、LC600二元高压梯度高效液相色谱(北京莱伯泰科仪器有限公司)和Multivap-8平行浓缩仪(北京莱伯泰科仪器有限公司)大米中测定苄嘧磺隆回收率为85%,五组重复性RSD为3.4%。实验结果表明,经上述仪器及设备,苄嘧磺隆重现性及回收率好,本方法准确可靠,操作方便。

  • 袁隆平称未来超级杂交水稻高度可能达2米

    袁隆平称未来超级杂交水稻高度可能达2米中国工程院院士、国家杂交水稻工程技术中心主任袁隆平提出,超级杂交稻未来株型将走“超模”路线,身高将长到1.8米,甚至2米,三年内大面积超级稻亩产将实现超过1000公斤的目标。这是袁隆平院士第五次来印度推广杂交水稻,他向来自美国、越南、菲律宾、马达加斯加等近40个国家的农业官员和专家介绍超级杂交稻未来变化的趋势,以及超高产最新研究成果。两个月前,袁隆平院士在国家杂交水稻工程技术中心的一次专家研讨会上,将超级杂交稻的发展战略交给其科研团队讨论,其中的一个重要内容就是,超级杂交稻未来株型将达到1.8米甚至2米。9月23日晚,国家杂交水稻工程技术中心谭炎宁博士告诉记者,现在育种实行的是半低秆,也就是株高约1.2米到1.3米,高秆将是超级杂交稻发展的战略。根据“稻谷产量=生物学产量(植株全部干重)×经济系数(经济产量占生物产量的比重)”的公式,要进一步提高水稻产量,需要保持在经济系数不变的前提下,提高生物学产量;适当增加株高,可能是提高生物学产量的理想途径。对于近2米株高的水稻,稻谷品质会不会改变、稻田下杂草是不是茂盛、如何施肥、是否影响收割等系列问题,谭炎宁认为,只要模式成立的话(保持经济系数不变),这些问题都可以解决。袁隆平院士很多年前就做过“禾下乘凉梦”,也就是水稻长得像高粱一样高,稻穗像扫帚,谷粒如花生米,他就坐在像瀑布一样的稻谷下乘凉。看来,袁隆平院士这次是想让梦想成为现实。

  • 制备单克隆抗体的基本流程及原理

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production][b]单克隆抗体[/b][/url]([/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体])源于单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆,具有高度的均一性和特异性,仅针对某一特定抗原表位。在生物医学研究、疾病诊断以及某些疾病治疗(如传染病和癌症)中单克隆抗体发挥着至关重要的作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前,制备单克隆抗体的主流技术包括[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/hybridoma-technology][b]杂交瘤技术[/b][/url]、[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/phage-display-antibody][b]噬菌体抗体库技术[/b][/url]和[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]单个[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/single-b-cell-technology][b]细胞技术[/b][/url]。杂交瘤技术通过融合免疫小鼠的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞与骨髓瘤细胞,筛选出能够特异性分泌抗体的杂交瘤细胞,进而生产并纯化得到单克隆抗体。噬菌体抗体库技术则利用基因工程技术,将抗体基因与噬菌体基因相连接,使抗体以融合蛋白的形式呈现在噬菌体表面,通过与靶蛋白的结合,筛选出具有特定亲和力的噬菌体展示抗体。而单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞技术则基于每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞仅含有一对功能性的重链和轻链,每个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞仅产生一种特异性抗体的特性,直接从单个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞中扩增抗体基因,从而获得单克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]制备单克隆抗体的基本流程:[/font][/b][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体])抗原制备[/font][/font][font=宋体][font=宋体]一般来说,抗原可以是蛋白(天然蛋白或重组蛋白)、多肽、小分子等。依据需求选择和制备合适的免疫原对于抗体开发至关重要。义翘神州在蛋白抗原、多肽抗原制备积累了丰富的经验,可提供专业的抗原制备服务。另外,义翘神州还成功制备出[/font][font=Calibri]6000[/font][font=宋体]多种重组蛋白产品,可作为抗原用于动物免疫和抗体筛选,欢迎订购。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体])动物免疫[/font][/font][font=宋体][font=宋体]通常选用[/font][font=Calibri]Balb/c[/font][font=宋体]小鼠作为免疫动物,根据抗原的特性制定免疫方案,包括免疫抗原纯度、抗原量、免疫方法和途径等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫方法一般有常规免疫法、脾内一次性免疫法、短程免疫法和体外免疫法等,免疫途径主要有皮下注射、腹腔注射和静脉注射。脾内一次性免疫法具有用量少、免疫程序短、不加佐剂且所得单克隆抗体的特异性较高等特点。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]常规免疫周期如下:第一次免疫(抗原[/font][font=Calibri]+[/font][font=宋体]弗氏完全佐剂,皮下注射)、第二次免疫(抗原[/font][font=Calibri]+[/font][font=宋体]弗氏不完全佐剂,皮下注射)、第三次免疫(抗原[/font][font=Calibri]+[/font][font=宋体]不加佐剂,皮下或静脉注射)、第四次免疫(抗原[/font][font=Calibri]+[/font][font=宋体]不加佐剂,静脉注射)。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体])细胞融合[/font][/font][font=宋体]细胞融合前准备:[/font][font=宋体][font=宋体]脾淋巴细胞制备:取已经免疫的[/font][font=Calibri]Balb/c[/font][font=宋体]小鼠的脾脏,制备淋巴细胞,通常每只小鼠可得[/font][font=Calibri]1x10^8-2.5x10^8[/font][font=宋体]个脾细胞;同时摘除眼球采血,并分离血清作为抗体检测时的阳性对照血清。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]骨髓瘤细胞制备:骨髓瘤细胞应该和免疫动物属于同一品系,便于细胞融合以及产生大量[/font][font=Calibri]Ab[/font][font=宋体]。融合前骨髓瘤细胞维持的方式,对成功得到杂交瘤非常重要。目的是使骨髓瘤细胞处于对数生长的时间尽可能长,融合前不能少于[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]周;冻存的细胞在复苏后要生长[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]周才能处于适合于融合的状态。[/font][/font][font=宋体]饲养细胞:常用的饲养细胞有胸腺细胞、正常脾细胞和腹腔巨噬细胞。饲养细胞促进杂交瘤细胞增殖的机制可能是释放非种属特异性的生长刺激因子,为杂交瘤细胞提供必要的生长条件;也可能是满足新生杂交瘤细胞对细胞密度的依赖性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞融合:细胞融合方法有病毒介导的细胞融合、聚乙二醇([/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体])介导细胞融合、电融合。[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]融合相邻骨髓瘤和[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]或抗体分泌细胞的质膜,形成具有两个或更多核的单细胞。异核体保留这些核,直到核膜在有丝分裂前溶解。电融合通过施加脉冲电场连接相邻细胞的膜。电融合比[/font][font=Calibri]PEG[/font][font=宋体]更加有效,结果具有重现性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体])杂交瘤筛选以及单克隆鉴定[/font][/font][font=宋体][font=宋体]骨髓瘤细胞和脾细胞融合之后,由于细胞融合是随机的,因此要利用[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]培养基筛选杂交瘤细胞。骨髓瘤细胞缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶([/font][font=Calibri]HGPRT[/font][font=宋体]),对氨蝶呤钠敏感,在[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]选择培养液中不能生长;免疫脾细胞虽然有[/font][font=Calibri]HGPRT[/font][font=宋体],但不能在体外无限繁殖。因此只有融合的杂交瘤细胞,才能在[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]选择培养液中无限繁殖。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]得到融合的杂交瘤细胞后,需要进一步筛选特异性抗体。将融合的细胞进行充分有限稀释,使分配到培养板的每一孔中的细胞数在[/font][font=Calibri]0[/font][font=宋体]至数个细胞之间([/font][font=Calibri]30%[/font][font=宋体]的孔为[/font][font=Calibri]0[/font][font=宋体]才能保证每个孔中是单个细胞),培养后取上清液用[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]法选出抗体高分泌性的细胞,这一过程常被称作克隆化。将这些阳性细胞再进行克隆化,应用特异性抗原包被的[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]找出针对目标抗原的抗体阳性细胞株,增殖后进行冻存、体外培养或动物腹水培养。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体])单克隆抗体大量制备[/font][/font][font=宋体]利用杂交瘤细胞大规模制备单克隆抗体主要有两种方式:体外培养法和腹水制备法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]体外培养可以采用单层细胞培养的形式,也可以采用悬浮培养的形式。单层细胞培养法是各个实验室最常用的,是将杂交瘤细胞加入培养瓶中,用完全培养基培养,细胞浓度以[/font][font=Calibri]1.0X10^6~2.0X10^6[/font][font=宋体]个[/font][font=Calibri]/mL[/font][font=宋体]为宜,然后收集培养上清液。如果想在体外高效率地大量制备单克隆抗体,就必须高密度培养杂交瘤细胞,充分利用培养基的立体空间。单位体积内细胞数量越多,产生的单克隆抗体就越多,浓度就越高,产量就越大。义翘神州提供杂交瘤体外培养抗体生产服务,成功率[/font][font=Calibri]99%[/font][font=宋体],可采用低血清或无血清培养基进行高密度悬浮培养,生产规模从毫克级到克级不等,满足客户的不同需求。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]腹水制备法是通过将杂交瘤细胞接种于小鼠腹腔内,并产生腹水,可得到大量的腹水单抗。这种方式能够在相对短的时间内获得大量高浓度的抗体,而且成本低、操作相对简单以及不需要复杂的培养条件。然而,这种方法也有一些限制,比如腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白(包括[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]),因此在很多情况下要提纯后才能使用,而且还有污染动物病毒的危险。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体技术:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-technology[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]杂交瘤技术:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/hybridoma-technology[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 【分享】e龙员工非法下载公司商业秘密案判赔1.5万

    以后大家可是要小心啦,尤其签有商业保密合约的同仁!http://www.sina.com.cn 2007年09月30日 03:33 新京报  本报讯 (记者 吕佳瑜 通讯员 曹静) e龙公司员工杨某在离职时带走公司大量商业信息,因认为这些信息属于商业秘密,e龙公司将杨某诉至法院,要求其赔偿经济损失。近日,丰台法院一审判决杨某停止侵权行为,并赔偿e龙公司1.5万元。  e龙公司诉称,杨某离职前系公司技术部程序员。其2005年8月至2006年7月在公司工作期间,利用工作便利,先后多次登录公司电脑系统内的主数据库,下载大量商业信息,包括客户姓名、联系方式、电子邮件、入住酒店名称及价格等,下载内容已占到公司同期商业信息总量的80%以上,杨某将其复制并带离公司。  此案审理过程中,经对杨某带走的信息进行知识产权鉴定,结论为上述信息属于商业秘密。  e龙公司认为,杨某非法下载属于公司的商业秘密信息并保存,给公司造成极大的经济损失,要求赔偿各项经济损失5.3万元。  庭审过程中,杨某对e龙公司起诉的基本事实没有异议。但他表示,e龙公司并没有按照劳动合同内容给其上保险,而保密协议是在劳动合同全部履行情况下才生效的,所以他没有履行保密协议的义务。  法院审理认为,杨某的行为已构成对e龙公司商业秘密的侵犯,应当承担相应的法律责任。

  • 中国科学家屠呦呦获拉斯克奖 距诺贝尔奖一步之遥

    屠呦呦 女,生于1930年12月,中国中医研究院终身研究员兼首席研究员,青蒿素研究开发中心主任。1980年聘为硕士生导师,2001年聘为博士生导师。突出贡献是创制新型抗疟药———青蒿素和双氢青蒿素。北京大学生命科学院院长饶毅在科学网上发博客详细介绍了屠呦呦和她的青蒿素。饶毅认为,尽管在青蒿素到底是谁先发现的,曾引起争议,但屠呦呦提出用乙醚提取这一步,至今被认为是当时发现青蒿粗提物有效性的关键所在。不少学者认为,屠呦呦今年80岁高龄,其履历除了发现青蒿素之外,关于她的介绍平凡得不能再平凡,但她的成就与袁隆平的水稻一样获得世界承认。“拉斯克奖”被看作是诺贝尔奖的“风向标”,素有“美国的诺贝尔奖”之誉。1997年以来的诺贝尔生理学或医学奖获得者中,近一半也是拉斯克奖得主。http://news.ifeng.com/mainland/detail_2011_09/14/9157208_0.shtml

  • 世界最高水平探针:碳纳米管原子力显微镜探针隆重上市!

    世界最高水平探针:碳纳米管原子力显微镜探针隆重上市!超高分辨率,超长使用寿命!CNT AFM probes CNT probes from us include two series: high resolution and high aspect ratio applications. http://www.appmaterials.com/news.files/cnt%20afm%20probe2.jpg http://www.appmaterials.com/news.files/cnt%20afm%20probe3.jpg Tip features:A carbon nanotube/nanocone of 2 nm radius of curvature right at the apex of regular silicon probe, either tapping or contact mode. Probe with perfect alignment,orientation of CNT is better than ±5º. Tightly controlled CNT length, 0.6µm±200nm, 1.5µm±200nm, 5µm±500nm. Very high resolution (2nm ROC versus 10nm ROC of regular probe). Long lifetime (Months versus hours of regular probe). CNT probes are in stock and ready to ship with highly competitive price.

  • 【天瑞论文奖】+【第三届原创】烟嘧磺隆分子印迹聚合物识别特性的光谱研究

    维权声明:本文为sibianjing原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。摘要:用紫外及红外分光光度法研究了印迹分子和单体之间的作用力, 结果表明随着甲基丙烯酸浓度的增加, 紫外吸收曲线的最大吸收波长发生红移, 说明两者之间存在氢键作用力; 经红外光谱分析进一步表明烟嘧磺隆的—NH、-S=O 和C=O 可以氢键和甲基丙烯酸的—COOH 之间有氢键作用。采用原位聚合法制备烟嘧磺隆分子印迹棒状聚合物, 除去印迹分子的聚合物留下了对印迹分子特异识别的结合位点。此聚合物可用来做吸附填料, 固相微萃取涂层材料,用以分离富集环境样品中的烟嘧磺隆。关键词:分子印迹;烟嘧磺隆;分子识别

  • 【元宵节活动】猜灯谜,挂灯笼,喜气洋洋闹元宵啦!

    【元宵节活动】猜灯谜,挂灯笼,喜气洋洋闹元宵啦!

    抽奖平台全面开放,可以抽大奖啦啦啦啦~~恭喜@symmacros @牛二 @一片枫叶 @夏天的雪 @zal @zyl3367898 @avih1981 @沧海青城 @路云@xing-xing 答对问题,获得抽奖机会,快去看看吧~~抽奖平台本周五关闭哦~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~一、 活动介绍正月十五到,仪器论坛有热闹,你发问题,他来猜,大红灯笼挂起来!在这个传统佳节到来之际,仪器信息网祝全体仪器人节日快乐。为感谢大家对仪器信息网的支持,为回馈广大坛友对论坛的支持和关注,特开展“猜灯谜,挂灯笼,喜气洋洋,闹元宵”活动。大家所获得的灯笼虽然不能挂在家里,但却可以参与抽奖,收获意外的惊喜,快来参与吧。切忌不要灌水喔!二、 活动时间:2015年3月5日——2015年3月15日24点结束三、 活动规则l 所有的注册用户在仪器论坛技术版面发帖,帖子类型选择“元宵节活动”,审核通过后即可参与活动。l 参与活动的帖子内容必须为问题形式的,可以为给出仪器图片或者零部件等猜仪器名称、仪器故障求助、实验问题求助等,但是帖子内容要够新颖,所提问题必须描述详尽、上传的图片必须清晰,否则审核不予通过哦~~l 审核通过后的帖子,获得10个用户回复且内容必须是技术性的,发帖人即可获得一个灯笼奖励。同时,发帖人负责将最佳答案(1人)告诉本次活动组织者(在帖子回复中@荆棘鸟fiona即可),可再获得一个灯笼。l 每个活动帖的最佳答案提供者将会获得一个灯笼,但不能是发帖人自己哈~l 凡获得灯笼的用户均可抽奖,每个灯笼代表一次抽奖机会,点击灯笼抽奖品,100%有奖!!!抽奖时间截止为2015年3月16日中午12点,逾期作废。注:本活动不能与其他活动同时参与,且活动中灌水帖被删除后,将会重新计算帖子回复数,累计至获得灯笼。活动抽奖页面:http://bbs.instrument.com.cn/boardlist/Activities/yuanxiaojie一等奖:高级羊绒围巾二等奖:论坛纪念T恤三等奖:真皮名片夹四等奖:肩颈按摩器五等奖:20积分纪念奖:5积分抽奖所获得的实物奖励,会在活动结束后统一发放,积分奖励随时抽到即会发放。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/03/201503051500_537300_2648817_3.jpg

  • 液相测定烟嘧磺隆

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]测定烟嘧磺隆标品不出峰是什么原因?

  • 【求助】拉曼背景太高

    各位前辈大家好,有个问题想请教一下大家。我做了一些拉曼,图谱呈阶梯型上升,也分不清哪些是peak哪些是背景,想请教一下除了增加表面有拉曼活性的样品之外,还有没有其他办法增强信号,让背景显示是平的?我用的是renishaw一个拉曼仪器,激光波长约510纳米。请各位踊跃发表看法,谢谢!

  • 单克隆抗体与多抗定义、制备、应用上有何区别?

    [font=宋体]本文主要介绍了单克隆抗体与多克隆抗体的定义,并介绍单抗、多抗在制备流程、特点及应用上的区别。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单抗与多抗的定义:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]抗原上可以引起机体产生抗体的分子结构叫做抗原决定簇,也称为抗原表位。一个抗原可以有许多不同的抗原决定簇,因此,机体也可以产生多种不同的抗体。由单一[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞克隆产生的高度均一、仅识别某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体(单抗)。而由多个[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞克隆产生的,受到多种抗原决定簇刺激并可以与多种抗原表位结合的抗体就是多克隆抗体(多抗)。从某种角度而言,多抗是多种单抗的混合物。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单抗和多抗制备上的区别:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]经过特定抗原处理过的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过细胞融合的方法得到杂交瘤细胞,经[/font][font=Calibri]HAT[/font][font=宋体]培养基筛选、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测效价后就得到阳性克隆株,最后进行细胞培养或将细胞注入到动物(一般为[/font][font=Calibri]balb/c[/font][font=宋体]小鼠)腹腔中用腹水培养,收集上清[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]腹水纯化后就能得到单克隆抗体。而制备多克隆抗体就没有单克隆抗体繁琐,只需将抗原(纯度越高越好)直接注入到动物体内进行免疫,经过[/font][font=Calibri]3~4[/font][font=宋体]次免疫,[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]测其效价合格后,收集血液离心得到上清,纯化后即能得到多克隆抗体。因此多抗制备周期比单抗的短,多抗首次制备价格也比单抗要低。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]单抗多抗应用上的区别:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]单抗和多抗都有各自鲜明的特点与优势。单克隆抗体的特异性高,一旦制备成功就可以永续的生产完全一致的单克隆抗体,因此可以对其特异性进行全面、系统地验证。但如果所识别的抗原表位被破坏,实验的结果将会受到很大的影响,这也是单抗的缺点之一。而多克隆抗体的特异性较差,即使是使用相同的抗原制备多抗,不同批次间也会存在差异,因而在特异性、一致性方面有很大的局限。所以在用多抗做免疫检测时,更容易造成背景,例如在[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]中有杂带,在[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]中背景较深等等。虽然还存在着交叉反应[/font][font=Calibri]*[/font][font=宋体]的问题,但由于多抗识别多个抗原表位,即使是有少数几个抗原表位被破坏或者抗原构象改变,实验的结果也不会受到影响。在相同条件下,使用多抗可以提高检测的灵敏度,对于丰度偏低的蛋白也更容易检出。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]如果对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多([/font][font=Calibri]WB/IP/IF/ICC[/font][font=宋体]等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体],可以选择制备单克隆抗体。若对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]检测,可以选择制备多克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州是一家抗体试剂和定制抗体的领先供应商,目前已成功交付了数以万计的抗体项目,客户涵盖科研院校、生物制药公司、诊断公司和其他生物技术公司等。目前提供单克隆抗体定制服务和多克隆抗体定制服务。想了解更多关于单抗和多抗区别详情可以查看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体][font=宋体]多克隆抗体定制服务:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/polyclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单克隆抗体制备:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/monoclonal-antibody-production[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

  • 尼龙6、尼龙66、尼龙56、尼龙1313...这些尼龙纤维你分的清吗?

    [b]导读[/b][size=14px]尼龙是美国杰出的科学家卡罗瑟斯(Carothers)及其领导下的一个科研小组研制出来的,是世界上出现的第一种合成纤维。尼龙的出现使纺织品的面貌焕然一新,它的合成是合成纤维工业的重大突破,同时也是高分子化学的一个非常重要里程碑。[/size][size=14px]1935年以己二酸与己二胺为原料制得聚合物,由于这两个组分中均含有6个碳原子,当时称为聚合物66。他又将这一聚合物熔融后经注射针压出,在张力下拉伸称为纤维。这种纤维即聚酰胺66纤维,1939年实现工业化后定名为耐纶(Nylon),是最早实现工业化的合成纤维品种。[/size][size=14px][b]一、尼龙6(PA6)[/b][/size][size=14px]英文名称:Polyamide6 or Nylon6,简称PA6;尼龙6,又称聚酰胺6,即聚己内酰胺,由己内酰胺开环缩聚而得。[/size][size=14px]呈半透明或不透明的乳白树脂,具有优越的机械性能、刚度、韧性、耐磨性和机械减震性,良好的绝缘性和耐化学性能。广泛应用于汽车零部件、电子电气零等多个领域。[/size][size=14px][b]二、尼龙66(PA66)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide66 or Nylon6;简称PA66;尼龙66,又称聚酰胺66,即聚己二酰己二胺。[/size][size=14px]与尼龙6 相比较,其机械强度、刚度、耐热和耐磨性,抗蠕变性能更好,但冲击强度和机械减震性能下降。在汽车、无人机、电子电气等有着广泛的应用。[/size][size=14px][b]三、尼龙1010(PA1010)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide1010;Nylon1010;简称PA1010。尼龙1010,又称聚酰胺1010,即聚葵二酰葵二胺。[/size][size=14px]尼龙1010是以蓖麻油为基础原料而制得的,是我国上海赛璐珞厂首先研制成功并实现工业化。其最大的特点是具有高度延展性,可牵伸至原长的3~4倍,而且拉伸强度高,冲击性和低温性优良,-60℃下不脆,同时具有极佳的耐磨性、超高的韧性和良好的耐油性,广泛应用于航天、电缆、光缆、金属或线缆的表面涂覆等。[/size][size=14px][b]四、尼龙610(PA610)[/b][/size][size=14px]英文名:Poly[imino-1,6-hexanediylimino(1,10-dioxo-1,10-decanediyl)];Polyamide 610;Nylon 610;简称PA610。尼龙610,又称聚酰胺610,即聚葵二酰己二胺。[/size][size=14px]呈半透明奶白色。其强度介于尼龙6与尼龙66之间。比重小,结晶性较低,吸水性低,尺寸稳定性好,耐磨性好,能自熄。用于精密塑料配件,输油管、容器、绳索、传送带、轴承、纺织机械零部件、电气电子中的绝缘材料和仪表壳等。[/size][size=14px][b]五、尼龙612(PA612)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyhexamethylene dodecanamide;Polyamide 612;Nylon 612;简称PA612。尼龙612,又称聚酰胺612,即聚十二烷酰己二胺。[/size][size=14px]尼龙612是一种韧性较好的尼龙,密度比610小,有极低的吸水率,优良的耐磨性能,较小的成型收缩率,耐水解性和尺寸稳定性优良。最主要的用途是做高档牙刷的单丝和电缆包覆。[/size][size=14px][b]六、尼龙11(PA11)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide11 or Nylon11;简称PA11。尼龙11,又称聚酰胺11,即聚十一内酰胺。[/size][size=14px]呈白色半透明体。其突出的特点是熔融温度低而加工温度宽,吸水性低,低温性能良好,可在-40℃~120℃保持的良好柔韧性。主要用于汽车输油管、制动系统软管、光纤电缆包覆、包装薄膜、日用品等。[/size][size=14px][b]七、尼龙12(PA12)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide12 or Nylon12;简称PA12。尼龙12,又称聚酰胺12,即聚十二酰胺。[/size][size=14px]它类似尼龙11,但其密度、熔点和吸水率比尼龙-11低。由于其含有较大量的增韧剂而具有聚酰胺和聚烯烃相结合的性能。其突出的特点是分解温度高,吸水性低,耐低温性能优良。主要用于汽车输油管、仪表板、油门踏板、刹车软管,电子电器的消声部件、电缆护套。[/size][size=14px][b]八、尼龙46(PA46)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide46 or Nylon46;简称PA46。尼龙46,又称聚酰胺46,即聚己二酰丁二胺。[/size][size=14px]其突出的特点是具有高结晶度,耐高温、高刚性,高强度。主要用于汽车发动机及周边部件,如缸盖、油缸底座、油封盖、变速器。电气工业中用作接触器、插座、线圈骨架、开关等对耐热性、抗疲劳强度要求很高的领域。[/size][size=14px][b]九、尼龙6T(PA6T)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide6T or Nylon6T;简称PA6T。尼龙6T,又称聚酰胺6T,即聚对苯二甲酰己二胺。[/size][size=14px]其突出的特点是耐高温(熔点为370℃,玻璃化温度为180℃,可在200℃下长期使用),高强度、尺寸稳定,耐焊接性好使得PA6T特别适用于黏着技术(SMT)用电子连接器。主要用于汽车部件,油泵盖、空气滤清器,耐热电器部件如电线束接线板、熔断器等。[/size][size=14px][b]十、尼龙9T(PA9T)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide9T or Nylon9T;简称PA9T。尼龙-9T,又称聚酰胺-9T,即聚对苯二甲酰壬二胺。[/size][size=14px]其突出的特点是:吸水性小,吸水率为0.17%;耐热性好(熔点为308℃,玻璃化温度为126℃),其焊接温度高达290℃。主要用于电子、电器、信息设备和汽车部件。[/size][size=14px][b]十一、尼龙10T(PA10T)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide10T or Nylon10T;简称PA10T。尼龙10T,又聚酰胺10T,即聚对苯二甲酰癸二胺。[/size][size=14px]其主要特点是具有非常低的吸湿性,耐高温,优异的韧性、刚性和尺寸稳定性,流动性和加工性能好,容易着色,焊接熔合线强度高,熔点高达300~316℃,密度为1.42g/cm3。PA10T中具有苯环和较长的二胺柔性长链,使得大分子具有一定的柔顺性,从而具有较高的结晶速率和结晶度,适用于快速成型。广泛应用于LED反射支架、电机端盖、电刷支架、齿轮等。[/size][size=14px][b]十二、透明尼龙(半芳香族尼龙)[/b][/size][size=14px]英文名:polytrimethyl hexamethylene terephthalamide;transparent polyamide resin;透明尼龙是无定形聚酰胺,化学名称为:聚对苯二甲酰三甲基己二胺。[/size][size=14px]对可见光的透过率达85%~90%。其以在尼龙成分中加入具有共聚和立体障碍的成分来抑制尼龙的结晶,从而产生非结晶和难结晶的结构,它保持了尼龙原有的强韧性,并得到透明的厚壁制品。透明尼龙的力学性能、电性能、机械强度和刚性与PC和聚砜几乎属于同一水平。[/size][size=14px][b]十三、尼龙1414(PA1414)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide1414;Kevlar;Nylon1414。简称PA1414。聚对苯二甲酰对苯二胺(Polyphthalamide)。[/size][size=14px]分子主要由具有刚性的苯环组成,属于高刚性聚合物,其分子结构具有高度的对称性和规整性,大分子链之间有很强的氢键,使得该聚合物具有高强度、高模量、耐高温、低密度、热收缩性小、尺寸稳定性好等特点,能制成高强度、高模量纤维。[/size][size=14px][b]十四、尼龙1313(芳纶1313)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide1313;Nomex;Nylon1313;简称PA1313。间苯二甲酰氯和间苯二胺为单体进行缩聚而得。[/size][size=14px]Nomex具有远高于脂肪族PA的力学性能和耐热性能([color=#021eaa]作为纤维织物,寿命是脂肪族PA纤维布的8倍,棉布的20倍[/color]),良好的耐热老化性(250℃经2000h热老化后,表面电阻率和体积电阻保持不变),在较高温度或潮湿的环境下仍可保持较好的电性能。主要用于 H级电绝缘材料和制备高性能纤维(HT-1纤维)。[/size][size=14px][b]十五、尼龙56(PA56)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide56 or Nylon56;简称:PA56。尼龙56由戊二胺和己二酸缩聚而成,戊二胺的提取可以来自天然生物中。[/size][size=14px]环保、性能佳、能提高终端织物的舒适性。[/size][size=14px][color=#000000]它的吸水率、玻璃化温度、强度、柔软度、吸湿性、回弹性都优于尼龙6、尼龙66、涤纶的部分产品。[/color][/size][size=14px][b]十六、尼龙1212(PA1212)[/b][/size][size=14px]英文名:Polyamide1212;Nylon1212;简称PA1212。由十二二胺和十二二酸缩聚而得。[/size][size=14px]PA1212吸水率在尼龙中最低、尺寸稳定性好,、耐油、耐碱、耐磨性好、耐化学品、透明性好、低温下具有极好的韧性。广泛用于航天、汽车、纺织、仪表、医疗器材等。[/size][align=left][b][font=-apple-system-font, BlinkMacSystemFont, Arial, sans-serif][size=14px]来源:[/size][/font][size=14px][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][b][size=14px]染整百科[/size][/b][/font][/size][/b][/align][size=18px][color=#00bbec]声明:[/color][/size][color=#888888]部分图文信息来源互联网,版权归属原作者。本公众号为学习交流平台,并不用于商业目的。如有侵权请及时告知,经核实后删除;[/color]

  • 【转帖】美国拟制定氯吡嘧磺隆、乙草胺等杀虫剂的残留许可限量

    2009年10月7日,美国发布通报,美环保署拟制定杀虫剂Meptyldinocap、氯吡嘧磺隆、多杀菌素的许可限量。 本最终法规规定葡萄内/表Meptyldinocap,2-(1-methylheptyl)-4,6-dinitrophenyl (2E)-2-butenoate及按Meptyldinocap表示的2,4-DNOP, 2,4-dinitro-6-(1-methylheptyl)phenol混合残留的许可限量为:0.20 ppm。 本最终法规规定大豆种内的氯吡嘧磺隆(Halosulfuron-methyl)及其代谢物及降解物残留许可限量为:0.05 ppm。许可限量合格性将通过检测产品内/表氯吡嘧磺隆(Halosulfuron-methyl, methyl3-chloro-5-[[[[(4,6-dimethoxy-2-pyrimidinyl)amino]carbonyl]amino]sulfonyl]-1-methyl-1H-pyrazole-4-carboxylate来确定。 本最终法规规定以下作物内/表两种相关活性成分:Spinosyn A (Factor A CAS#131929-60-7)或2-[(6-deoxy-2,3,4-tri-O-methyl-[alpha]-L-manno-pyranosyl)oxy]-13-[[5-(dimethylamino)-Tetra-hydro-6-methyl-2H-pyran-2-yl]oxy]-9-ethyl-2,3,3a,5a,5b,6,9,10,11,12,13,14,16a,16b-tetrad-cahydro-14-methyl-1H-as-Indaceno[3,2-d]oxacyclododecin-7,15- dione 及Spinosyn D (Factor D CAS#131929-63-0) 或2-[(6-deoxy-2,3,4-tri-O-methyl-[alpha]-L-manno-pyranosyl) oxy]-13-[[5- (dimethyl-amino)-tetrahydro-6-methyl-2H-pyran-2-yl]oxy]-9-ethyl-2,3,3a,5a,5b,6, 9,10,11,12,13,14,16a,16b-tetradecahydro-4,14-methyl-1H-as-Indaceno[3,2-d]Oxacy-clododecin-7,15-dione组成的多杀菌素(Spinosad)残留许可限量:杏壳:19 ppm;坚果树14组:0.10 ppm;开心果:0.10 ppm;酸枣:0.10 ppm及石榴:0.30 ppm。 2009年9月24日,美国发布通报,美国环保署拟制定杀虫剂乙草胺的许可限量。 本最终法规规定了以下作物内/表杀虫剂乙草胺(Acetochlor) ,包括其代谢物及降级物的许可限量:轧棉副产品:4.0 ppm 未去纤维棉籽:0.6 ppm 大豆粉:1.2 ppm及大豆种:1.0 ppm。这些残留限量标准合格性只能通过检测乙草胺(acetochlor)、2-chloro-2''''-methyl-6-ethyl-N-ethoxymethylacetanilide及其含半EMA及半HEMA的代谢物来确定。(信息来源:中国技术性贸易措施网)

  • 单克隆抗体制备技术方式的优缺点介绍

    [font=宋体][font=宋体]单克隆抗体([/font][font=Calibri]Monoclonal antibodies[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]mAb[/font][font=宋体])是由[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞产生,并能特异性靶向抗原的免疫球蛋白。单克隆抗体不仅是生物化学、分子生物学和医学研究中必不可少的工具,其在临床治疗上的应用也以革命性的速度改进了多种疑难杂症的治疗方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1975[/font][font=宋体]年[/font][font=Calibri]Khler[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Milstein[/font][font=宋体]提出的杂交瘤技术([/font][font=Calibri]Hybridoma technology[/font][font=宋体]),使得大量获得单克隆抗体成为可能,为基础研究及其临床应用提供了无限潜力。其他科学和技术进步也促进了单克隆抗体的发展、丰富了单克隆抗体的制备方法。 经过近[/font][font=Calibri]50[/font][font=宋体]年的发展,单克隆抗体制备方法不再局限于免疫小鼠的淋巴细胞术,噬菌体展示技术([/font][font=Calibri]Phage display[/font][font=宋体])、人源抗体转基因小鼠([/font][font=Calibri]Human antibody-producing mice[/font][font=宋体])和单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术([/font][font=Calibri]Single B cell antibody technology[/font][font=宋体])也都陆续登上舞台。这些方法虽然有各自的局限性,但都已广泛应用于单克隆抗体筛选。同时,这些技术都不完全是独立存在的,如果能充分利用各技术的优点,采用灵活的方法将各技术优化组合就能更加高效、快速地进行抗体开发。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]一、杂交瘤技术[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]杂交瘤技术是一种将[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞与骨髓瘤细胞融合生产小鼠单克隆抗体的传统方法,是目前应用最广泛的单克隆生产技术。在这种技术中,首先收集免疫小鼠的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞,并将其与[/font][font=Calibri]BALB/c[/font][font=宋体]小鼠骨髓瘤细胞融合,从而形成永生化的杂交瘤细胞。然后筛选杂交瘤细胞,鉴定出能生产特异性抗体的单克隆细胞株。十几年后,[/font][font=Calibri]1988[/font][font=宋体]年,兔单克隆抗体制备方法首次被《[/font][font=Calibri]Science[/font][font=宋体]》杂志报道 [/font][font=Calibri][1][/font][font=宋体]。该研究使用小鼠[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]兔异种杂交瘤方法生产兔单克隆抗体,但鼠[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]兔异种杂交瘤细胞分泌抗体的效率较低、不稳定,且无法长时间分泌抗体。时间进展到[/font][font=Calibri]90[/font][font=宋体]年代中期,[/font][font=Calibri]1995[/font][font=宋体]年,《[/font][font=Calibri]PNAS[/font][font=宋体]》报道了能稳定生产兔单抗的兔[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]兔杂交瘤细胞。但兔杂交瘤细胞也被证明不如常规鼠杂交瘤细胞稳定,这大大阻碍了其实验室水平的广泛使用。并且,由于融合和转化效率低下,使用兔杂交瘤细胞生产单克隆抗体在应用推广中受到了极大的限制。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]经过多年发展及应用,杂交瘤技术作为一种成熟的产生鼠单克隆抗体的方法已被广泛应用于多种抗体的生产。然而,由于缺乏合适的骨髓瘤融合伴侣,杂交瘤技术一直局限于免疫啮齿动物。[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]世纪[/font][font=Calibri]80[/font][font=宋体]年代,《[/font][font=Calibri]PNAS[/font][font=宋体]》报道了一种应用人杂交瘤技术生产治疗用抗体的文章 [/font][font=Calibri][3][/font][font=宋体]。利用该方法可以在无额外修饰的情况下产生天然的人源抗体,并用于临床治疗。随着融合伴侣和电融合技术的发展,人杂交瘤细胞融合成功率逐步增加,这将在未来促进治疗性抗体的开发。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]二、噬菌体展示技术[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1990[/font][font=宋体]年开始,噬菌体展示技术被视为一种新的产生单克隆抗体的方法。这种方法是从淋巴细胞中收获抗体可变区基因([/font][font=Calibri]V gene[/font][font=宋体])全集,克隆[/font][font=Calibri]VHs[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]VLs[/font][font=宋体]的组合并与外壳蛋白融合后表达于丝状噬菌体表面,然后筛选表达特异性抗体的噬菌体。与受限于啮齿动物的杂交瘤技术相比,噬菌体展示技术已经成功用于任何已知免疫球蛋白基因的物种中筛选和分离单克隆抗体。[/font][font=Calibri]2000[/font][font=宋体]年,[/font][font=Calibri]Rader[/font][font=宋体]等人首次介绍了应用噬菌体展示技术生产兔单克隆抗体的全过程。在这篇文章中,[/font][font=Calibri]Rader[/font][font=宋体]等人用噬菌体展示技术筛选和人源化的人[/font][font=Calibri]A33[/font][font=宋体]兔抗体,不仅对人[/font][font=Calibri]A33[/font][font=宋体]抗原有高特异性,且保留高亲和力。目前,噬菌体展示技术因为其高效、简便及体外控制在原核或真核系统中原则参数的能力正逐步成为生产治疗用抗体的重要技术平台。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]随着我们对抗体结构、功能和序列多样性研究的不断深入,除了原有的抗体库外,一种新的合成抗体库技术也在不断发展。例如,[/font][font=Calibri]HuCAL&Ylanthia[/font][font=宋体]文库中,为了使筛选出的人源抗体能更好的进行分子识别,将精确设计的序列插入抗原结合位点,并优化设计多种可变重链、轻链框架区域 [/font][font=Calibri][7-10][/font][font=宋体]。随着文库设计和筛选方法的不断进步,合成抗体文库将成为快速生产具有高特异性和高亲和力单克隆抗体不可或缺的工具。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]三、人源抗体转基因小鼠[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1985[/font][font=宋体]年,[/font][font=Calibri]Alt[/font][font=宋体]等人首次提出将人抗体基因引入小鼠种系并使用转基因小鼠中产生人抗体的想法 [/font][font=Calibri][11,12][/font][font=宋体]。随着基因编辑技术的进步,使用人源抗体转基因小鼠生产人源化抗体已不再是天方夜谭。与其他技术相比,使用人源抗体转基因小鼠有许多优势,如无需人源化、具有更多的生物多样性,且由于体内成熟具有天然的亲和力。但是,人免疫球蛋白体量庞大对转基因小鼠抗体生产是一个巨大的挑战。为了克服这些困难,研究人员们通过使用不同策略已成功地获得转基因动物表达的人源抗体库,如全人源抗体小鼠和嵌合人源抗体小鼠等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]四、单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]虽然杂交瘤技术和噬菌体展示技术已经在单克隆抗体生产中广泛应用,但它们依然存在较难克服的缺点制约着抗体生产过程。近些年,为了克服杂交瘤技术细胞融合效率低,噬菌体展示技术导致重链、轻链的天然同源配对丢失等问题,单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术正被逐步开发和应用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]简单来说,单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术包含以下几个步骤:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]a.[/font][font=宋体]从外周血或免疫器官中初步提取淋巴细胞;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]b.[/font][font=宋体]使用磁性活化细胞分选([/font][font=Calibri]MACS[/font][font=宋体])或荧光活化细胞分选([/font][font=Calibri]FACS[/font][font=宋体])技术鉴定和分离出特定的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]c.[/font][font=宋体]将分离出的[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞进行单细胞培养;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]d.[/font][font=宋体]使用逆转录聚合酶链式反应([/font][font=Calibri]RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体])和抗体特异性引物鉴定单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分泌抗体的特异性;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]e.[/font][font=宋体]扩增特异抗体基因;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]f.[/font][font=宋体]将抗体基因克隆到表达载体中,并在细菌或细胞系统中表达;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]g.[/font][font=宋体]纯化表达产生的抗体,并用[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]等方法进行评估。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术现在已广泛用于人和小鼠单克隆抗体生产,如一些治疗性中和单抗,可用于治疗多种疾病,包括癌症、自身免疫性疾病和传染性疾病亡[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]总结[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]种方式制备单克隆抗体的优缺点[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/hybridoma-technology][b]杂交瘤技术[/b][/url]:[/font][font=宋体]优势:技术成熟、研发成本低[/font][font=宋体]劣势:周期长、融合率低、需要进行人源化[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]人源抗体转基因小鼠:[/font][font=宋体]优势:[/font][font=宋体]①可用杂交瘤技术获得人源抗体[/font][font=宋体]②良好的免疫原性[/font][font=宋体]③亲和力高[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]劣势:[/font][font=宋体]①存在免疫耐受[/font][font=宋体]②依然有鼠抗产生[/font][font=宋体]③难以免疫毒性抗原[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/phage-display-antibody][b]噬菌体展示技术[/b][/url]:[/font][font=宋体]优势:[/font][font=宋体]①基因来源灵活[/font][font=宋体]②随机库可以避免免疫耐受[/font][font=宋体]③可以灵活,特异得调整设计方案[/font][font=宋体]④可长时间保存[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]劣势:[/font][font=宋体]①重链轻链非天然配对[/font][font=宋体]②展示效率具有偏好性[/font][font=宋体]③需要再次进行功能验证[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗体技术:[/font][/font][font=宋体]优势:[/font][font=宋体]①无需杂交瘤融合[/font][font=宋体]②制备周期短[/font][font=宋体]③重链、轻链天然配对[/font][font=宋体]④无需合成基因[/font][font=宋体]⑤可直接获得各物种抗体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]劣势:[/font][font=宋体]①需要新鲜样本[/font][font=宋体]②抗原特异性细胞比例低[/font][font=宋体]③操作环境要求严格[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services][b]单克隆抗体制备服务[/b][/url],同时拥有流式单[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞分选平台、噬菌体抗体库技术平台、杂交瘤开发平台…… 可供大家选择,有需求或者了解具体详情可以查看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/monoclonal-antibody-production-services[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 平板细胞克隆形成试验

    概念:细胞克隆形成率即细胞接种存活率,表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆,而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。基本步骤:1、取对数生长期的各组细胞,分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞,并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。2、将细胞悬液作梯度倍数稀释,每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL 37℃预温培养液的皿中,并轻轻转动,使细胞分散均匀。置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2~3周。3、经常观察,当培养皿中出现肉眼可见的克隆时,终止培养。弃去上清液,用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液,加适量GIMSA应用染色液染10~30分钟,然后用流水缓慢洗去染色液,空气干燥。4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片,用肉眼直接计数克隆,或在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率 =(克隆数/接种细胞数)×100%平板克隆形成试验方法简单,适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好,不能有细胞团,接种密度不能过大。

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