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达非那新

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  • 氨基他达那非残留

    各位好!如题,最近在做壮阳药类非添的项目时,发现其中一个物质,氨基他达那非,存在残留。想向各位请教以下是我的排查过程:1、质谱图离子对确认残留物。保留时间与标准品出峰时间一致。2、残留非仪器自带,只有进标准品后,第二针空白才会有。且连续进空白溶剂,残留含量逐渐下降。说明系统内无稳定的污染源。3、更换过色谱柱,重新进标品再进空白,残留依旧存在。应该可以说明非色谱柱原因4、将进样六通阀短路,用两通直接连接混合器管路及色谱柱,残留依然存在。说明非仪器部件导致残留5、更换流动相无效果。6、尝试第一针接色谱柱进标品,第二针用两通替代色谱柱,进空白,未发现残留峰。7、第一针接两通进标准品,第二针接色谱柱,未发现残留峰。以上是我的排查步骤,结果非常奇怪,非进样器,非色谱柱,非流动相原因。请问各位我是否还有其他遗漏?另外,希望大家分享做壮阳药类的色谱方法,或者相关的案例,是否也有遇到残留的问题。希望大家不吝赐教,谢谢!

  • 生物芯片入门:基因表达谱芯片实验操作

    待检测样品制备生物样品往往是非常复杂的生物分子混合体,除少数特殊样品外,一般不能直接与芯片反应,必须将样品进行生物处理。从血液或活组织中获取的DNA/mRNA样品在标记成为探针以前必须扩增以提高阅读灵敏度,但这一过程操作起来却有一定的难度。比如在一个癌细胞中有成千上万个正常基因的干扰,杂合癌基因的检测和对它的高效、特异地扩增就不是一件容易的事。因为在一般溶液中PCR扩增时,靶片段太少且不易被凝胶分离,故存在其它不同的DNA片段与其竞争引物的情况。美国Mosaic Technology公司发展了一种固相PCR系统。此系统包含两套引物,每套都可以从靶基因两头延伸。当引物和DNA样品及PCR试剂相混时,如果样品包含靶序列,DNA就从引物两头开始合成,并在引物之间形成双链DNA环或“桥”。由于上述反应在固相中产生,因而避免了引物竞争现象,并可减少残留物污染和重复引发。根据样品来源、基因含量、检测方法和分析目的不同,采用的基因分离、扩增及标记方法各异。为了获得基因的杂交信号必须对目的基因进行标记。标记方法有荧光标记法、生物素标记法、同位素标记法等。目前采用的最普遍的荧光标记方法与传统方法如体外转录、PCR、逆转录等原理上并无多大差异,只是采用的荧光素种类更多,这可以满足不同来源样品的平行分析。样品制备的常用试剂:对于检测表达的芯片,样品制备通常涉及mRNA的纯化,cDNA的合成,体外转录或者PCR,标记等步骤。而对于SNP或者突变检测,则往往涉及Genomic DNA纯化和PCR标记等步骤。1. RNA纯化:从样品中分离纯化高质量的RNA是非常重要的第一步。由于RNA样品中的DNA碎片会影响后继的PCR反应,所以要彻底除去样品中的DNA。通常用mRNA纯化的方法可以除去DNA片断,或者用RNase-Free的DNase处理RNA样品。在这里我们介绍一些常用的RNA纯化试剂盒,特别是由Affymetrix公司推荐的QIAGEN RNA纯化系列。* RNeasy Protect Kit:一旦生物样品被收集分离,它的RNA会立刻变得非常不稳定,极易被降解。由于特异及非特异的RNA降解,或者由于应激反应产生新的RNA都会引起RNA状态的改变。对于生物芯片、基因表达矩阵分析(Array Analysis)、定量RT-PCR等实验来说,采样后立即稳定样品里的RNA以保存当时RNA的表达状态,是精确/定量研究基因表达分析的重要前提。为了达到这个目的,往往需要将液氮或者干冰带到采样现场,采样后立即抽提RNA或者运回实验室保存。对于实验者来说非常不方便。著名的QIAGEN公司最近新推出一种RNA抽提试剂:RNeasy Protect Kit,提供一整套RNA保护和分离试剂,从样品的制备到RNA的抽提,只需一个试剂盒即可解决所有问题。保证样品的表达信息不受破坏,确保得到可信的基因表达分析结果。试剂盒里提供一种RNAlater RNA Stabilization Reagent,只要在采样后立即将新鲜样品浸入这种液体试剂,RNA保护剂可以迅速渗透到组织或其他生物样本中,稳定并保护RNA完整而不被降解,确保下游分析得到的数据真实反应样品的表达信息。保存在RNAlater中的样品RNA可以在37度下稳定保存1天,或者在18~25度保存7天,2~8度稳定4周,或者在-20度永久保存。这种技术为在不同温度下采样,运输和保存样品提供了极大的方便,特别适用于各种动物组织、培养细胞、细菌、白细胞,但必须说明的是它不适用于全血或体液中RNA的保存。RNAlater的用法非常简单,只要在采样后立即将样品完全浸入适量(10ul/1mg组织)的RNAlater中即可。取样的动作要尽量快速利索,组织样品的大小以不超过0.5公分厚为宜,对于一些小的组织如小鼠的脾、肾等器官则可以整个取出浸入溶液中,较大的则应切开为厚度小于0.5公分的小块,以确保RNAlater 能迅速扩散渗透入组织块中的所有细胞中。采样的容器应该足够大以容纳10倍于组织重量的溶液,避免组织块挤在一起,同时建议将溶液加满容器以避免在运输过程中组织块露出液面。注意本试剂只适用于新鲜样品,对于冷藏和包埋的样品直接抽提RNA即可。另外对于RNA已经降解的样品,RNAlater只能保护剩下的样品RNA,不能修复已破坏的RNA。保存后的样品可以直接用于RNA或者mRNA的抽提。RNAlater不会影响组织块的结构,可以在室温下切出适量的组织块用于称量和抽提RNA,剩下的部分可用于继续保存样品。-20度冻存的样品可以取出在室温下进行称量等操作而无需干冰。在-20度冻存的样品反复冻融20次RNA依然保持完好无损。RNAlater处理的样品比新鲜组织稍微硬一点,但不会影响匀浆过程。取出适量的样品即可开始加RLT缓冲液进行匀浆化。和传统的RNeasy Kit一样,RNeasy Protect Kits采用QIAGEN著名的硅胶膜纯化柱技术,迅速特异地吸附样品裂解液中的RNA,无需酚氯仿抽提,不用乙醇沉淀或LiCl沉淀,也不用CsCl超离,只要洗脱即可得到纯的RNA。通常情况下RNeasy的纯化技术足以除去绝大部分的DNA,而无需额外进行DNaes处理,但是对于一些对痕量DNA非常敏感的实验,用RNase-Free DNase Set(QIAGEN cat.no. 79254)可以直接在纯化柱上消化DNA残留,在随后的洗涤步骤中除去DNase,最后洗脱得到不含DNA的纯RNA。试剂盒具有以下优点:●迅速稳定并保护RNA,确保基因完整、基因表达信息可靠。   ●由于RNA Stabilization试剂,您可以放心地在室温下操作,方便、安全——无须液氮和干冰。   ●确保RNA不受降解——即使多次冻溶也不受影响。   ●简单、快速和可靠RNA分离——使用于所有下游分析的即用型RNA。货号 品名(规格) 价格(RMB)74124 RNeasy Protect Mini Kit(50) 3181.00  75152 RNeasy Protect Midi Kit(10) 1313.00  75182 RNeasy Protect Maxi Kit(12) 4140.00  76104 RNAlater RNA Stabilizationeagent 682.00http://www.biomart.cn/upload/asset/2008/07/28/1216791379.gif

  • 2013年全球生物芯片市场达38亿美元

    BCC研究公司发表的生物芯片市场调查报告称,微阵列(芯片)和Lab-on-a-Chip是生物芯片产品家族的主要成员;2007年,全球生物芯片市场大约为19.379亿美元,2008年将达到21.156美元,2013年这一市场是38亿美元,年增长率高达12.7%。生物芯片有多种,包括DNA芯片(微阵列)、蛋白质微阵列、新型微阵列产品和芯片化验室(Lab-on-a-Chip,LOACs)等。其中,DNA芯片占据的市场份额最大,2007年9.473亿,2008将达9.99亿,2013年升至16.44亿,年增长率10.8%。由于基因表达产品(也属于DNA 芯片)市场的不断成熟,DNA芯片市场的增长率正在放缓,但是,受到DNA芯片的应用不断有新的领域冒出,包括SNP基因分型等,则对该市场产生了推动作用。LOACs是生物芯片市场第二大产品,2008年全球市场有望达6.913亿美元,2013年升至12.454亿美元,年增长率12.5%。今后5年里,DNA芯片和LOACs仍然是生物芯片市场的龙头产品。随着蛋白质组学对基因功能的理解和疾病认识上所具有的促进性影响,蛋白质芯片将成为生物芯片市场上的新生力量。组织芯片也是需要注意的一类新兴产品。

  • Nature:原基因从头进化产生新基因

    6月24日,Nature杂志在线报道了通过遗传进化,从头产生新基因的最新研究进展。新型蛋白质编码基因可以通过重新组织预先存在的基因或以从头产生的方式出现。通过重新组织预先存在的基因,特别是通过基因重复来重新组织产生新的基因的过程,已经被广泛研究过。相比之下,人类对从头产生基因的进化过程仍然知之甚少,主要是因为研究者以往认为所谓的"非基因"序列的翻译将产生微不足道的多肽,而不是具有特定的生物功能的蛋白质。本研究建立了一种基因演化模型,根据这一模型,非基因序列广泛的翻译活动可产生过渡性原基因,而功能基因又可从过渡性原基因进化而来。研究者在酿酒酵母菌基因组范围内检测这个模型。在非基因序列中,研究者发现数百个短的物种特异性的开放阅读框(ORF)的翻译活动。根据它们对选择压力的差异性调节反应和通过自然选择保留的印记来看,这些翻译事件似乎提供了某种适应性潜力。与此模型相对应,研究者发现酿酒酵母的ORF正好处于,从非基因序列进化到新的基因这一连续的过程中承上启下的位置上。研究者在酿酒酵母的ORF中,确定了约1900个候选原基因。从这样一个宝库中从头产生新基因可能会比从零星的基因重复事件中产生更为普遍。该研究表明,进化作用可利用看似可有可无的序列来产生适应性的功能创新。

  • 飞纳电镜的价格不能问么,为什么删我帖子?飞纳是老虎屁股么?

    我前几天在论坛中咨询飞纳电镜的价格,就因为网友回答了些客观想法,居然把我帖子给删了,现在我真的对飞纳刮目相看了,怎么网友们说的不是实话么,你们是真做了违心的事儿了吧?难道你们没有几万美金卖过设备,还是没有报价10几万美元过?还是你们的设备没有出现过问题,还是售后永远及时了,请解释,再删我,就再发,让大家都来看看飞纳到底是个什么公司!

  • 人类抗击新冠肺炎疫情

    类抗击新冠肺炎疫情是指全世界人民抗击新冠肺炎疫情。湖北人民以坚不可摧的大无畏气概,诠释了生命至上、举国同心、舍生忘死、尊重科学、命运与共的伟大抗疫精神。这种精神,不仅写在中国发展奋斗的篇章中,也将永远铭记在人类抗击新冠肺炎疫情的史册上。

  • 【科普】新冠肺炎明星药氯喹能否接棒?

    [font=&]“ 新型冠状病毒(COVID-19)正在迅速传播,科学家正在努力研究可对其进行有效治疗的药物。磷酸氯喹是一种用于治疗疟疾的老药,在中国进行的多种临床试验中显示出对COVID-19相关肺炎的明显疗效和可接受的安全性。在各国抗疫过程中,氯喹已被视为“新冠明星药”。甚至该药物被建议纳入中华人民共和国国家卫生委员会发布的下一版《由COVID-19引起的肺炎的预防、诊断和治疗指南》,以在更大范围内治疗人们对COVID-19的感染。那么,氯喹用于治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)是什么机制?临床使用中又需要注意哪些问题?”[/font][align=center][font=&]01[/font][/align][align=center][font=&]—[/font][/align][align=center][font=&]氯喹简介[/font][/align][font=&]2020年2月17日,国务院召开一条新闻发布会报道磷酸氯喹这种用于治疗疟疾的旧药已经在临床中证明对COVID-19相关性肺炎具有明显的疗效和可接受的安全性。[/font][align=center][font=&] [img]https://img.chemsoc.org.cn/web/2020/04/%E5%9B%BE%E7%89%8722.png[/img][/font][/align][align=center][font=&]氯喹[/font][/align][font=&]氯喹(Chloroquine),分子式:C[sub]18[/sub]H[sub]26[/sub]ClN[sub]3[/sub],氯喹是一种抗疟疾药物,本品主要用于治疗疟疾急性发作,控制疟疾症状。还可用于治疗肝阿米巴病、华支睾吸虫病、肺吸虫病、结缔组织病等。另可用于治疗光敏性疾患,如日晒红斑症。[/font][font=&]作用机制:[/font][font=&]本品与核蛋白有较强的结合力,通过喹啉环上带负电的7-氯基与DNA的鸟嘌呤上的2-氨基接近,使氯喹插入到DNA的双螺旋两股之间。与DNA形成复合物,从而阻止DNA的复制与RNA转录。氯喹还能抑制磷酸掺入疟原虫的DNA与RNA,由于核酸的合成减少,而干扰疟原虫的繁殖。而新型冠状病毒,主要通过与人细胞表面上的血管紧张素转化酶 2(ACE2)受体结合,然后侵入人体细胞。氯喹可一方面通过抑制冠状病毒与人体细胞 ACE2 受体的结合,抑制病毒的侵入,另一方面氯喹是一种碱性化合物,可提高内体 pH 值,能阻断冠状病毒、逆转录病毒等 pH依赖性病毒的复制。此外,氯喹具有免疫调节作用,可减少免疫病理性损伤,可抑制 TNF-α和 IL-6 的产生和释放,氯喹的抗炎作用也可减少免疫病理性损伤。[/font][align=center][font=&]02[/font][/align][align=center][font=&]—[/font][/align][align=center][font=&]相关研究进展与报道[/font][/align][font=&]3月27日,据欧联社报道,尽管法国医学界和一些专家,针对新冠肺炎患者是否可以使用“羟氯喹”药物存在争议,但法国总统马克龙依据医疗科研团队短暂的临床成果和建议,决定批准医生使用羟氯喹治疗新冠肺炎患者。据报道,法国医学家哈乌尔特领导的医疗团队宣布75%的新冠肺炎患者在服用羟氯喹6天后已痊愈。但法国医学界的一些专家表示,羟氯喹主要成分的药性和副作用一直备受质疑,绝不能草率用药。[/font][align=center][font=&][img]https://img.chemsoc.org.cn/web/2020/04/%E5%9B%BE%E7%89%8723.png[/img] [/font][/align][font=&]3月25日,钟南山院士向欧洲专家展示了一份报告:使用氯喹后,在10天到14天的潜伏期内,带有新冠病毒RNA的疑似病人转阴的比例很高。钟南山院士讲解道,在对比治疗数据中,使用氯喹的组RNA转阴的比例是91.4%、95.9%,而对照组是57.4%。[/font][font=&]2月29日,国家卫健委网站公布了《关于调整试用磷酸氯喹治疗新冠肺炎用法用量的通知》。 磷酸氯喹用于新冠肺炎治疗适用于18岁~65岁成人。体重50kg以上者每次500mg、每日2次,疗程7天;体重50kg及以下者第1、2天每次500mg、每日2次,第3~7天每次500mg、每日1次,疗程7天。[/font][align=center][font=&] [img]https://img.chemsoc.org.cn/web/2020/04/%E5%9B%BE%E7%89%8724.png[/img][/font][/align][font=&]2月19日,国家卫健委发布了《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第六版)》(下简称“第六版方案”),此前版本中“目前没有确认有效的抗病毒治疗方法”的说法,在新版本中未再出现。连日来呼声很高的磷酸氯喹、阿比多尔被纳入其中,作为抗病毒治疗的试用药物。[/font][align=center][font=&][img]https://img.chemsoc.org.cn/web/2020/04/%E5%9B%BE%E7%89%8725.png[/img] [/font][/align][font=&]截至2月17日,将近150项针对新冠肺炎的临床药物试验在进行中,试验的药物包括瑞德西韦、磷酸氯喹以及各种中药。2月17日,科技部生物中心副主任孙燕荣表示,疗效专家组经过认真细致的研讨,最后达成一致意见,一致认为磷酸氯喹是一个上市多年的老药,用于广泛人群治疗的安全性是可控的。基于前期临床机构所开展的临床研究,结果可以明确磷酸氯喹治疗新冠肺炎具有疗效。基于当前临床救治的迫切需求,专家一致推荐,应当尽快将磷酸氯喹纳入到新一版的诊疗指南,扩大临床适用范围。[/font][font=&]截至2月15日,正在十多家医院开展临床研究,累计入组患者超过100例。临床结果初步显示,磷酸氯喹对新冠肺炎有一定的治疗效果。[/font][font=&]1月25日,中国科学院武汉病毒研究所与军事科学院军事医学研究院公布的联合研究结果显示:在 Vero E6细胞上,磷酸氯喹的EC50(半数有效浓度)=1.13μM,说明在细胞水平上磷酸氯喹能有效抑制新型冠状病毒(SARS-COV-2)。[/font][align=center][font=&]03[/font][/align][align=center][font=&]—[/font][/align][align=center][font=&]注意事项[/font][/align][align=center][color=#808080][size=14px][font=&]来源:国家卫生健康委办公厅 国家中医药管理局办公室[/font][/size][/color][/align][font=&]1.服药后可有食欲减退、恶心呕吐、腹泻等反应 还可出现皮肤瘙痒、紫癜、脱毛、毛发变白,湿疹和剥脱性皮炎、牛皮癣 头重、头痛、头昏、耳鸣、眩晕、倦怠、睡眠障碍、精神错乱、视野缩小、角膜及视网膜变性等。[/font][font=&]2.长期使用,可产生抗药性(多见于恶性疟)。[/font][font=&]3.本品对角膜和视网膜有损害,因此长期服用本品治疗以前,应先作眼部详细检查,排除原有病变,60岁以上患者宜勤检查,以防视力功能损害。[/font][font=&]4.氯喹还可损害听力,妊娠妇女大量服用可造成小儿先天性耳聋,智力迟钝等。[/font][font=&]5.氯喹偶可引起窦房结的抑制,导致心律失常、休克,严重时可发生阿斯综合征,而导致死亡。[/font][font=&]6.溶血、再障、可逆性粒细胞缺乏症、血小板减少等较为罕见。[/font][font=&][b]7.该药在成人中的致死剂量2-4g,而且是急性致死。[/b][/font][font=&]8.磷酸氯喹用于新冠肺炎治疗适用于18~65岁的患者,并根据患者体重差异化调整磷酸氯喹的用法用量。[/font][font=&]9.明确使用禁忌症和相对禁忌症,包括:处于妊娠期的女性患者;明确对4-氨基喹啉类化合物过敏的患者;患有心律失常(如传导阻滞)、慢性心脏病的患者;患有慢性肝、肾疾病并达到终末期的患者;已知患有视网膜疾病、听力减退或听力丧失的患者;已知患有精神类疾病的患者;皮肤疾病(包括皮疹、皮炎、银屑病);葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症;因原有基础疾病必须使用洋地黄类药物、保泰松、肝素、青霉胺、胺碘酮、卞普地尔、多潘立酮、氟哌利多、氟哌啶醇、阿奇霉素、阿司咪唑、红霉素、克拉霉素、泊沙康唑、美沙酮、普鲁卡因胺、氢氯噻嗪、斯帕沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、西沙比利、吲达帕胺、氯丙嗪、链霉素、青霉胺、氯化铵、昂丹司琼、阿扑吗啡、奥曲肽单胺氧化酶抑制剂、氟羟强的松龙等药物的患者。[/font][font=&]10.使用磷酸氯喹治疗新冠肺炎的患者,用药前必须心电图检查正常,禁止同时使用喹诺酮类、大环内酯类抗生素及其他可能导致QT间期延长的药物。同时,保证患者体内电解质水平(钾、钠、氯)和血糖、肝肾功能正常;应当注意与其他药物的相互作用,不建议同时应用包括磷酸氯喹在内的3种及以上抗病毒药物;密切关注用药后的不良反应,出现不可耐受的毒副作用时应当停止使用;严格按照《药品不良反应报告和监测管理办法》要求,做好不良反应监测和报告工作,切实保证用药安全。[/font][align=center][font=&]04[/font][/align][align=center][font=&]—[/font][/align][align=center][font=&]结论[/font][/align][font=&]COVID-19 是国际关注的突发公共卫生事件。根据最近的报道,氯喹在限制SARS-CoV-2(COVID-19病毒引起)的体外复制方面有效。但是也有报道说目前开展的实验证据与研究项目绝大多数属于小样本量、观察性与非随机性实验,很难得出正确的结论,甚至可能危害大于收益。因此,药物的长期安全性、有效性还需要更多的临床证据去检验,相信实践是检验真理的唯一标准。[/font][font=&]参考文献[/font][font=&]1. A systematic review on the efficacy and safety of chloroquine for the treatment of COVID-19,2020.[/font][font=&]2. Breakthrough: Chloroquine phosphate has shown apparent efficacy in treatment of COVID-19 associated pneumonia in clinical studies,2020.[/font][font=&]3. Drug treatment options for the 2019-new coronavirus (2019-nCoV). Biosci Trends. 2020.[/font][font=&]4. Effects of chloroquine on viral infections: an old drug against today’s diseases? Lancet Infect Dis 2003.[/font][font=&]5. Chloroquine for the 2019 novel coronavirus SARSCoV-2. Int J Antimicrob Agents 2020:105923.[/font][font=&]6. Remdesivir and chloroquine effectively inhibit the recently emerged novel coronavirus (2019-nCoV) in vitro. Cell Res 2020. [/font][align=right][color=#808080]([/color]来源:化学通讯微信公众号 甄文瑶/撰稿[color=#808080])[/color][/align]

  • MSI1在人小细胞肺癌细胞系中的表达及MSI1低表达

    MSI1在人小细胞肺癌细胞系中的表达及MSI1低表达

    MSI1在人小细胞肺癌细胞系中的表达及MSI1低表达细胞模型的构建实验方法与步骤 细胞的复苏 1.复苏前的准备:打开水浴锅,设置温度37℃;紫外线将超净台消毒30 min;配置完全培养基。 2.将要复苏的H69、H446细胞从液氮取出,用一次性PE手套包裹冻存管,迅速放入水浴锅中震荡,使其快速融化。 3.在15 mL离心管中加入5 mL完全培养基及融化的细胞悬液,900 r/min离心8分钟,弃去上清,得到细胞沉淀。 4.在25 cm2的培养瓶中加入5 mL完全培养基,并用1 mL培养基将沉淀的细胞重悬并加入准备好的培养瓶中,放入CO2恒温培养箱中继续培养。 细胞的传代 1.选取在悬浮培养瓶中生长至90%的H69细胞,用移液枪将细胞悬液移入15 mL离心管中,选取在贴壁培养瓶中生长至90%的H446细胞,用PBS溶液将细胞吹至漂浮,并移入15 mL离心管中,两种细胞均900 r/min离心8分钟,弃掉上清。 2.分别在3个25 cm2培养瓶中加入5 mL完全培养基,在细胞沉淀中加入3 mL培养基并充分吹打混匀,将3 mL细胞悬液平均放入3个培养瓶中并混匀,放入培养箱中继续培养。 MSI1低表达细胞模型的构建1.从-80℃冰箱取出慢病毒载体冰上融化,将慢病毒用空白培养基稀释为滴度2×108,充分混匀,准备好病毒感染增强液。2.将25 cm2悬浮培养瓶中H69细胞移入15 mL离心管中并用移液枪充分吹打混匀,取其中500 μL放入细胞计数仪中计数,取出1.2×106个细胞置入新的离心管中,加入空白培养基至6 mL。3.在12孔板中以MOI=10的病毒滴度进行感染,培养16 h。4.16 h后将细胞悬液离心,换成不加双抗的完全培养基继续培养,72 h后观察荧光。5.待细胞生长至状态良好,加入1 μg/mL嘌呤霉素筛选至90%以上细胞均产生荧光。荧光实时定量PCR(Q-PCR)检测MSI1在mRNA水平的表达 总RNA的提取分别将细胞离心,PBS缓冲液清洗2次,900 r/min离心8 min,得到细胞沉淀。分别加入1 mL Trizol,用移液枪吸打至细胞完全破裂,加入200 μL氯仿,震荡30 s,室温静置10 min,以有效分离无机相和有机相,随后4℃,12,000 g/min离心15 min。将上清移至高压过的1.5 mL离心管中,加入与上清等体积的异丙醇,轻柔颠倒震荡数次,室温静置10 min,随后4℃,12,000 g/min离心10 min。弃去上清,加入75%无水乙醇,4℃,12,000 g/min离心5 min。弃去上清,沉淀置于冰上自然干燥,但不可完全干燥。用30 μL DEPC水溶解总RNA。用NanoDrop One超微量分光光度计进行定量和纯度检测,用1%琼脂糖凝胶电泳进行完整性检测。 cDNA的合成逆转录体系试剂名称使用量模板RNAMonScriptTM 5*RT111 All-in-One MixMonScriptTM dsDNaseNuclease-Free Water1 μg4 μL1 μLup to 20 μL将混合液轻柔吹打混匀,瞬时离心,37℃ 2 min,55℃ 15 min,85℃ 5 min,得到cDNA。 Q-PCR检测MSI1 mRNA的表达GAPDH引物序列:Forward primer:Reverse primer:5’-GGTCGGAGTCAACGGATTTG-3’5’-ATGAGCCCCAGCCTTCTCCAT-3’MSI1引物序列:Forward primer:Reverse primer:5’-GAACCATCCCGTCCTGTATCA-3’5’-GAAACCATGAAGCCCCAACC-3’Q- PCR反应体系:Q-PCR反应体系试剂名称使用量cDNAForward primerReverse primerMonAmpTM Chemhs qPCR MixLow ROXNuclease-Free Water50 ng0.2 μL0.2 μL5 μL0.1μLup to 10 μLQ-PCR反应程序: Q-PCR反应程序反应步骤反应温度反应时间循环次数预变性95℃10 min1变性95℃10 s40退火55-65℃10 s延伸72℃30 s溶解曲线溶解曲线按仪器默认溶解曲线 结果采用t检验,用Graphpad prism5计算MSI1在mRNA水平的表达量。 Western blot检测MSI1在蛋白水平的表达总蛋白的提取将对数生长期的H69-NC、H69-shMSI1细胞移入15 mL离心管中,900 r/min离心8 min,并用PBS溶液洗涤2次,以去除培养基中血清影响。分别加入含PMSF的蛋白裂解液100 μL,与细胞充分混匀。4℃裂解1小时后,4℃,12000 g/min离心15 min,将上清移至新的离心管中,得到细胞总蛋白。 BCA法测定蛋白浓度 将Solution A和Solution B以50:1的体积比配置BCA工作液,充分混匀。将2 mg/mL蛋白标准品等比稀释,最小浓度为125 μg/mL,并分别与配置好的200 μL BCA工作液混匀,铺入96孔板中。37℃孵育30 min,测定波长562 nm处OD(光密度值)值,并绘制蛋白标准曲线。取适量H69-NC、H69-shMSI1细胞总蛋白,20:1稀释后,与200 μL BCA工作液混合均匀。37℃孵育30 min,用酶标仪测定波长562 nm处OD值,根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。Western blot检测MSI1蛋白的表达 分别收集对数生长期的H69-NC、H69-shMSI1细胞总蛋白,加入相应体积4×SDS Loading Buffer,沸水浴煮5 min,分别取40 μg细胞总蛋白,在提前配制的10% SDS-PAGE分离胶电泳。电泳结束后,将蛋白转至PVDF膜上。用含5%脱脂牛奶的封闭液 37℃封闭1.5 h。弃去封闭液,用TBST缓冲液洗3次,每次10 min,加入MSI1兔单克隆抗体(1:1000),并以GAPDH为内参,加入GAPDH鼠单克隆抗体(1:5000);4℃孵育过夜,次日用TBST缓冲液洗膜3次,每次10 min。在敷有MSI1抗体的膜上加入辣根酶标记山羊抗兔IgG(1:5000),在敷有GAPDH抗体的膜上加入辣根酶标记山羊抗鼠IgG(1:5000),37℃敷育1 h,TBST 缓冲液洗膜3次,每次10 min。用增敏化学发光底物试剂检测,暗室曝光显影。在GAPDH表达量相同的情况下比较MSI1的表达情况。多次重复,应用ImageJ计算出各个蛋白条带的灰度对比,结果采用t检验,并应用Graphpad prism5作出柱状图。 MSI1在人小细胞肺癌细胞系中高表达 提取人正常肺上皮细胞BEAS-2B、小细胞肺癌细胞H446、H69的RNA,利用Q-PCR检测MSI1在正常肺上皮及小细胞肺癌细胞系中的表达情况,结果如图2-1显示,MSI1在小细胞肺癌细胞系H446、H69中的表达远远高于正常肺上皮细胞。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201428158_6718_5389809_3.png1 MSI1 mRNA在小细胞肺癌细胞系中的表达(**代表与正常肺上皮细胞相比,小细胞肺癌细胞MSI1表达量增高具有统计学意义,P0.01)。 MSI1低表达细胞模型的构建本实验选取人小细胞肺癌细胞系H69细胞,使用慢病毒感染技术敲低MSI1的表达,同时设置对照组除外病毒本身对细胞产生的影响,待细胞状态良好使用嘌呤霉素筛选,然后在荧光显微镜下观察如图2-2,可见H69-NC、H69-shMSI1细胞均产生绿色荧光,表明人小细胞肺癌H69细胞慢病毒感染成功。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201428036_9359_5389809_3.png MSI1低表达细胞模型的构建。应用shMSI1慢病毒载体感染H69细胞,利用嘌呤霉素筛选,并在荧光显微镜下观察。 荧光实时定量PCR(Q-PCR)检测MSI1的mRNA表达水平提取对数生长期的H69-NC、H69-shMSI1细胞的RNA,并测量RNA浓度及完整性,用1%琼脂糖凝胶电泳检测完整性可见,RNA有三条带,从上到下依次为28S rRNA、18S rRNA和5S rRNA,且28S rRNA的亮度是18S rRNA的两倍。用NanoDrop One超微量分光光度计测定人总RNA的A260/A280的值为2.00左右,A260/A230的值为2.30左右,说明提取的RNA质量和完整性很好,可以用于后续试验。利用Q-PCR技术检测各细胞内MSI1 mRNA相对表达量,结果如图2-3所示,与对照组相比,H69-shMSI1组MSI1 mRNA表达量明显降低(P0.01),抑制率约为75%。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201434330_8277_5389809_3.png MSI1在RNA水平的表达(***代表与对照组相比,H69-shMSI1组MSI1 mRNA表达量下降具有统计学意义,P0.001)。 Western blot检测MSI1蛋白表达水平将BSA标准品(2 mg/mL)进行等比稀释,最低浓度为125 ug/mL,并应用BCA蛋白质浓度测定试剂盒测定在波长562 nm下的OD值,以OD值为纵坐标,对应蛋白质浓度(μg/mL)为横坐标,绘制标准蛋白曲线如图2-4所示。https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201435248_4142_5389809_3.png图2-4 标准蛋白曲线分别提取H69-NC、H69-shMSI1细胞的总蛋白质,利用Western blot技术检测各细胞内MSI1蛋白的表达情况。结果如图2-5所示,与对照组相比,MSI1蛋白表达在H69-shMSI1细胞中明显降低。表明MSI1低表达细胞模型构建成功。ahttps://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201437240_855_5389809_3.pngbhttps://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210102201434999_3303_5389809_3.png图2-5 MSI1蛋白水平表达:(a)MSI1蛋白表达条带;(b)MSI1蛋白的相对表达量。(*表示与对照组相比,H69-shMSI1组MSI1蛋白表达下降具有统计学意义,P0.05)。首先验证MSI1在小细胞肺癌细胞系中的表达情况,利用Q-PCR技术检测在RNA水平,MSI1在肺正常上皮细胞及小细胞肺癌细胞系中的表达,结果显示,MSI1在小细胞肺癌细胞中的表达明显高于正常肺上皮细胞。随后以人经典型小细胞肺癌细胞系H69细胞为研究对象,构建MSI1低表达细胞模型,应用shMSI1慢病毒载体感染H69亲本细胞,同时设置对照组除外病毒本身对细胞产生的影响,利用Q-PCR及Western blot验证MSI1在RNA及蛋白水平的表达,结果显示,H69-shMSI1组MSI1的mRNA及蛋白的表达明显降低。表明MSI1低表达细胞模型构建成功,可以用于后续实验。

  • 粗枝大叶整理了下新检验检测机构评审准则与CNAS-CL01的对照表,凑合着看吧

    猫手忙脚乱、粗枝大叶、整理了下新检验检测机构评审准则与CNAS-CL01的对照表,凑合着看吧因为最近太忙了,老板不会让我出去培训,但是质量手册这种文件又得马上改,无奈之下,猫只好自己试着把新版本与cl01对照了一下,水平有限大家见谅,里面会有些错误,大家一起来修订它! 检验检测机构资质认定评审准则CNAS-CL014.14.14.1.14.1.14.1.24.1.14.1.34.1.5d4.1.44.1.5e4.1.54.1.44.1.64.1.5h4.24.2.14.1.5a、4.1.5k、5.2.14.2.24.1.5f4.2.34.1.5b4.2.44.1.5g、5.2.1、5.2.2、5.2.34.2.55.2.1、5.2.54.2.64.1.5a、4.1.5f、5.2.54.2.75.2.44.2.85.2.44.2.94.2.2、4.2.3、4.1.6、4.2.4、4.2.74.2.104.1.5h、5.2.1、4.1.5i、4.1.5j4.2.115.2.14.2.125.2.14.34.3.14.1.34.3.25.3.14.3.35.3.24.3.45.3.3、5.3.4、5.3.54.44.4.15.5.64.4.25.5.1、5.5.24.4.35.5.3、5.5.44.4.45.5.54.4.55.5.74.4.65.5.8、5.5.94.4.75.5.10、5.5.11、5.5.124.4.85.6.1、5.6.2.2.24.4.95.6.3.1、5.6.3.2、5.6.3.3、5.6.3.44.54.5.14.2.14.5.24.2.24.5.34.1.5d、4.1.5c4.5.44.3.1、4.3.2.14.5.54.4.1、4.4.44.5.64.5.1、4.5.24.5.74.6.1、4.6.44.5.84.74.5.94.84.5.104.9.14.5.114.114.5.124.124.5.134.104.5.144.134.5.154.144.5.164.154.5.175.4.1、4.5.17.15.4.14.5.17.25.4.24.5.17.35.4.3、5.4.44.5.17.45.4.2、5.4.44.5.17.55.4.54.5.185.4.6、5.4.7.1、5.4.7.24.5.195.74.5.205.84.5.215.94.5.224.5.235.10.1、5.10.24.5.245.10.3.14.5.255.10.3.24.5.265.10.54.5.275.10.64.5.285.10.7、5.10.84.5.295.10.94.5.304.13.2.14.5.314.5.324.5.334.6

  • 解读 |《新污染物治理行动方案》, 六大举措六大影响抢先看!

    国务院办公厅印发《新污染物治理行动方案》, 这无疑是化工行业的一个重磅炸弹。行动方案提出有毒有害化学物质的生产和使用是新污染物的主要来源,所以要完善有毒有害化学物质环境风险管理法规制度体系,并明显提升新污染物治理能力。 《新污染物治理行动方案》会产生哪些深远影响, 企业有即将面临怎样的挑战呢?总体目标到2025年,我国要完成高关注、高产(用)量的化学物质环境风险筛查,完成一批化学物质环境风险评估;动态发布重点管控新污染物清单;对重点管控新污染物实施禁止、限制、限排等环境风险管控措施。有毒有害化学物质环境风险管理法规制度体系和管理机制逐步建立健全,新污染物治理能力明显增强。六大举措一.加强法律法规制度和技术标准体系建设[list][*]研究制定有毒有害化学物质环境风险管理条例。建立健全化学物质环境信息调查、环境调查监测、环境风险评估、环境风险管控和新化学物质环境管理登记、有毒化学品进出口环境管理等制度。[*]建立化学物质环境风险评估与管控技术标准体系,制定修订化学物质环境风险评估、经济社会影响分析、危害特性测试方法等标准。[/list]长期以来我国的化学品环境管理都是围绕新化学物质和限制进出口有毒化学品展开的,正在制定的《有毒有害化学物质环境风险管理条例》将弥补现有化学物质监管上的不足。二.开展调查监测,评估新污染物环境风险状况[list][*]2022年年底前,印发第一批化学物质环境风险优先评估计划;[*]2022年发布首批重点管控新污染物清单;[*]2023年年底前,完成首轮化学物质基本信息调查和首批环境风险优先评估化学物质详细信息调查。[*]2025年年底前,初步建立新污染物环境调查监测体系;[/list]企业需要密切关注列入第一批化学物质环境风险优先评估计划的物质清单,以及重点管控新污染物清单,并同时准备应对2023年前的首轮化学物质基本信息[align=center][img]https://p6.itc.cn/images01/20220527/22f762a289d948f1b09b957940b4b939.jpeg[/img][/align]三.严格源头管控,防范新污染物产生[list][*]加强新化学物质环境管理登记监督,建立健全新化学物质登记测试数据质量监管机制,将新化学物质环境管理事项纳入环境执法年度工作计划,加大对违法企业的处罚力度。[*]严格实施淘汰或限用措施。对重点管控新污染物、《产业结构调整指导目录》内淘汰类的化学品等以及《中国严格限制的有毒化学品名录》上化学品采取淘汰或限制措施。[*]加强产品中重点管控新污染物含量控制。对采取含量控制的重点管控新污染物,将含量控制要求纳入玩具、学生用品等相关产品的强制性国家标准并严格监督落实,减少产品消费过程中造成的新污染物环境排放。将重点管控新污染物限值和禁用要求纳入环境标志产品和绿色产品标准、认证、标识体系。在重要消费品环境标志认证中,对重点管控新污染物进行标识或提示。[/list]重点管控新污染物上的物质将如过街老鼠,人人喊打,其淘汰和限制将成为必然。新化学物质的监管也必然上一个新台阶。四.强化过程控制,减少新污染物排放[list][*] 对使用有毒有害化学物质进行生产或者在生产过程中排放有毒有害化学物质的企业依法实施强制性清洁生产审核,全面推进清洁生产改造;企业应采取便于公众知晓的方式公布使用有毒有害原料的情况以及排放有毒有害化学物质的名称、浓度和数量等相关信息。[*]规范抗生素类药品使用管理。研究抗菌药物环境危害性评估制度,在兽用抗菌药注册登记环节对新品种开展抗菌药物环境危害性评估。[*]健全农药登记后环境风险监测和再评价机制。严格管控具有环境持久性、生物累积性等特性的高毒高风险农药及助剂。2025年年底前,完成一批高毒高风险农药品种再评价。持续开展农药减量增效行动,鼓励发展高效低风险农药,稳步推进高毒高风险农药淘汰和替代。鼓励使用便于回收的大容量包装物,加强农药包装废弃物回收处理。[/list]新的行动方案不仅涵盖了工业化学品,也将抗生素药品及农药纳入了范围。五.深化末端治理,加强新污染物多环境介质协同治理[list][*]加强有毒有害大气污染物、水污染物环境治理,制定相关污染控制技术规范。排放重点管控新污染物的企事业单位应采取污染控制措施,达到相关污染物排放标准及环境质量目标要求。[*]严格落实废药品、废农药以及抗生素生产过程中产生的废母液、废反应基和废培养基等废物的收集利用处置要求。[*]在长江、黄河等流域和重点饮用水区域和部分产业开展新污染物治理试点工程[/list][align=center][img]https://p4.itc.cn/images01/20220527/1bb37c4720944c52b227bf35294d7116.jpeg[/img][/align]六.加大科技支撑力度和基础能力建设。[list][*]加强新污染物治理科技攻关,开展有毒有害化学物质环境风险评估与管控关键技术研究;加强新污染物相关新理论和新技术等研究,提升创新能力;加强抗生素、微塑料等生态环境危害机理研究。[*]加强国家和地方新污染物治理的监督、执法和监测能力建设。加强国家和区域(流域、海域)化学物质环境风险评估和新污染物环境监测技术支撑保障能力。建设国家化学物质环境风险管理信息系统,构建化学物质计算毒理与暴露预测平台。培育一批符合良好实验室规范的化学物质危害测试实验室。[/list]专家点评说了这么多,这个行动方案将对企业在未来产生哪些实质性的影响呢? 瑞旭集团的专家根据多年的化学品管理经验,总结了该方案的六大主要影响:1. 重点行业的企业需要提供生产使用的化学物质的品种、数量、用途等信息,如果产品列入环境风险优先评估计划,需要提供危害特性,环境排放数量等信息,如果缺乏特定的危害特性数据,可能需要补充数据。2. 企业的产品如果列入优先控制化学品名录或重点管控新污染物名录,将面临一品一策的管控措施,可能面临被禁止、限制、限排等风险管控措施。3. 将对新化学物质加强登记监督,如果企业的产品属于或含有新化学物质没有及时登记,处罚力度将加强。4. 通过修订《产业结构调整指导目录》,来禁止和限制重点管控新污染物的生产,加工使用和进出口,如果属于淘汰类的产品,未按期淘汰,直接停止产品登记或生产许可核发;通过进(出)口货物目录来管控禁止进出口的化学品;通过《中国严格限制的有毒化学品名录》来管控严格限制用途的化学品。5. 重点管控新污染物限值和禁用要求纳入消费品环境标志产品标准,认证和标识,对玩具,学生用品中的重点管控新污染物采取限值控制。这就意味着消费品行业也纳入了管控。6. PBT、vPvB类农药及助剂将面临逐步被淘汰和替代,鼓励发展高效低风险农药。企业应及时跟踪相关名录,指南和新法规的进展,根据实际情况,对重点管控新污染物进行重点管理,最终逐步淘汰这类产品。

  • DNA-生物芯片

    传统的硅基芯片是建立在微纳米加工技术基础之上的,现在让我们看看DNA芯片是怎样的技术模式。本附件是英文原文,我希望大家能够认真的看看,科普一下![img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=21075]DNA芯片技术[/url]

  • 纳米生物:创新在起跑线

    ——国家863计划纳米生物技术主题专家张阳德教授访谈录编者按:岁末年初,我国纳米生物领域出现了几件大事:2007年12月31日,中国医药生物技术协会纳米生物技术分会在深圳宣告成立。工程院院士何继善、科学院院士姚开泰等全国近百名专家参加。2008年2月,中国纳米生物技术分会在北京举行第一届委员大会,卫生部纳米生物技术重点实验室主任、卫生部肝胆肠外科研究中心主任、中南大学生物医学工程研究院院长张阳德教授,选举为首届主任委员。大会选举了中国工程院陈志南院士、中国科学院曾益新、魏于全、姚开泰院士、江雷教授5位专家为副主任委员。郭应禄院士等35名业内专家为常务委员。这个汇集我国纳米生物领域的医学、化学、微电子、精密机械加工的专家组成的强大团队,将整合科技界、产业界纳米生物技术的资源,开展国家“863计划”纳米生物技术研究的攻关和实施。为此,我们邀请张阳德教授阐述了我国开发纳米生物技术尤其是在医学应用的战略和关键问题。先发制人,后发制于人记者:科学的交叉与融合,产生了一些新兴的领域。其中纳米生物技术与医用材料,就属于这样的领域。作为国家863计划纳米生物技术的主题专家,你如何看待当今纳米生物技术的发展现状?张阳德:即使你比刘翔跑得还要快,你也得与对手站在同一条起跑线上。我们在现代科技与产业的一些方面,落后于西方发达国家,这并不是我们跑得不够快,而是因为没能站在同一个起点。纳米生物技术是纳米科技与当代生物医学多学科结合的产物,是当代生物技术的前沿和热点。尤其在医药卫生领域有着广泛的应用和巨大的产业化前景。当今国际,由纳米药物载体,纳米生物传感器,纳米生物临床检测诊疗手段引发的新技术革命方兴未艾。据预测,到2010年,纳米生物技术对美国GDP的贡献将达到万亿美元,在日本的市场规模也将达到30万亿日元。在中国这样的人口大国,市场前景更加不可限量。纳米生物技术在医学临床应用,将成为我国重要的战略高技术领域,直接影响着国民经济和社会发展,关系到国家安全和人民健康。记者:目前这一领域中各国的竞争趋势如何?张阳德:先发制人,后发制于人。抢占战略制高点,向来是发达国家发展战略高技术的一个原则。从2000年开始的美国国家纳米技术行动计划,将纳米生物医疗列为突破重点。美国国家卫生研究院(NIH)2001年专门组织了“纳米科技与生物医学”的研讨会,提出了“纳米科技将导致新的生物学和生物工程”的结论。美国NIH在2002年度科研项目计划中,超过50%%的经费是针对生物反恐怖的,其中多数项目的完成希望借助纳米科学技术。美国国家癌症研究所(NIC)的计划是希望借助纳米科学技术,主要包括纳米颗粒材料技术以及纳米传感器技术,形成一些新的、针对恶性肿瘤的早期诊断与治疗技术。欧盟2002年正式推出了第6框架计划(2002~2006年),旨在将科学发展的成果转化为产业界的实际竞争优势。纳米生物技术的研究重点包括先进的药物传递方式、具有生物实体的纳米电子学、生物实体的界面、生物实体的电子探测、生物分子或复合物的处理操纵和探测。

  • 【分享】纳米技术居首的25大环境污染!

    据美国《新科学家》杂志报道,以英国剑桥大学动物学家威廉萨瑟兰为主的30名科学家列举了未来25大环境威胁,值得关注。其中最危险的隐患包括:人造生命和生物模拟仿生机器人,它们可能成为未来新的入侵物种,影响生态系统;对生物燃料和食物需求的增加,可能造成动物栖息地减少;气候变迁、海平面上升、火灾和极端天气事件频繁爆发等因素,将导致野生动植物灭绝;海洋“施肥(加入铁屑)”以及部署阳光防护镜的实验等因素以及有毒的纳米材料也存在环境隐患。萨瑟兰表示,他们集体行动是为了让研究人员在这些因素成为政治和社会问题之前,能有机会来评估环境威胁。参与这项研究的马特沃克表示,此项研究的目的在于提高警惕。他们的论文发表在最新出版的英国生态学学会的《应用生态学杂志》(Jouranl of Applied Ecology)上。科学先于政策这项研究最初的灵感来源于对转基因农作物和生物燃料的争论。科学家们认为,生物燃料会增加食物价格,危及食物安全,欧盟因为草率地支持生物燃料而备受批评。萨瑟兰表示,未来生物燃料的供应正在成为一个政治问题,因为彻底的环境评估还得实行。有些威胁可能更加不可预测,比如仿生机器人和人造微生物。如果这些人工智能释放到野外,将是未来新的入侵物种。海岸和沿海发电站的大量增加,或许是解决能源危机的一个办法,但萨瑟兰小组表示,这可能影响海洋生态系统。他们还呼吁对“人造病毒对环境的潜在威胁”进行研究。在澳大利亚,研究人员已经开发出一种控制红狐入侵的新方法:用病毒感染并杀死它们,目前这种病毒还没有释放到野外狐群中。萨瑟兰说:“如果病毒在目标之外的生物身上传播怎么办?它会否也会杀死其它的狐狸?这种病毒能互相结合,感染其它物种吗?”萨瑟兰的研究主要集中在英国,且时间为未来45年,但他的结论同样适用于世界其它地区。他正在召集2008年9月举行的类似研讨会,以讨论全球问题。以下是萨瑟兰小组指明的未来25大环境威胁:1.纳米技术2.可能成为未来新入侵物种的人造生命和仿生机器人3. 由现代生物技术方法开发的病原体所导致的非故意后果4. 新奇病原体所产生的直接后果5. 控制新奇病原体所造成的影响6. 由气候变化促成非本土物种的繁衍7. 大规模的野生动植物及其栖息地的恢复工作8. 应对气候变化所导致的物种种类变化9. 频繁发生的极端气候事件10.以减轻气候变化的影响而对地球所进行的地理工程技术改造11. 所采纳的生态系统的生物多样性的含意12. 增加的火灾威胁13. 对生物燃料和生物量的加大需求14. 食物需求的步步变化引发耕地不够的紧迫感15. 海洋酸化16.大陆架冷水海洋栖息地的减少17. 海岸和沿海发电站的大量增加18. 极端高水位海岸事件19. 海平面上升导致海岸和潮间带栖息地的丧失20. 淡水流的戏剧性变化21. 自然保护政策和行动不能与环境变化同步22. 网络和新的电子技术将人和环境信息连接起来23. 与环境作战的能力下降24. 保护政策制定时所采纳的货币价值是关键因素25. 因察觉到人类健康威胁而导致公众对抗野生动物作者:元元 来源:搜狐科学

  • CNAS认可的检测能力表是否可以认可作废标准呢?

    各位专家,最近碰到一个棘手的问题,我发现在一些已被CNAS认可的实验室中所罗列的检测能力附件中"竟然"有被废止的标准,难道废止的标准还有必要去申请认可,如出具该检测项目的带有CNAS标识检测报告跑到国外,那不是被人家笑掉大牙吗? 特别典型的还被CNAS认可的"已废止"包括: 大类:纺织品检测领域 小项:有机锡检测 废止标准名称:DIN 38407-13:2001 气相色谱法测定部分有机锡 德国对水、废水和淤泥的统一标准检验法.共同可测定物质 (F组).第13部分:气相色谱法测定所选有机化合物 废止时间:2005年 查新:我在DIN的官方网站上去查新,DIN根本就没有这个标准,这个标准已经被废止了,且无新替代标准, 目前行业采用ISO 17353:2004 水质-选定的有机锡化合物的测定-气相色谱法 疑问:CNAS难道还可以认可已经“作废”的标准吗?因为实验室客户的需要,CNAS也认可? 真是个大大的疑问,还请各位专家、学者、从业人员欢迎讨论和拍砖!谢谢!

  • 【分享】美国食品药品管理局(FDA)公布新的食品法典

    P***测试了解到,2009年11月9日,美国食品药品管理局(FDA)公布了新的食品法典(2009 FDA Food Code)。这为监管零售商和食品行业等服务领域提供了一个科学合理的技术和法律基础,同时也是美国总统为保证食品供应安全而制定的关于全面关注公众健康的食品安全框架的关键组成部分。新法典的实施将为各级政府提供实用、科学的指导和管理,其强制性条款有助于缓减食源性疾病的风险。新食品法典的重大变化包括: 新食品法典将每个条款指定为“优先内容”、“优先基金内容”或“核心内容”而取代之前版本的“关键内容”和“非关键内容”的说法,以协助业界优先实施食品安全干预措施和开展检查; 削减食品法典中纳入的需要时间和温度控制的绿叶蔬菜; 增补提高食品行业工人在食品服务和零售环境下的食品过敏源问题的要求条款; 儿童菜单选项中不允许出现未经煮熟的肉碎; 在新法典中增补了动物产品间断性烹饪的定义和标准条款,以提高上述烹饪方法的安全性; 加强或澄清了一些有关设备以及表面清洁和消毒的要求。P***测试建议广大食品企业对新的法案进行学习,以便使产品符合相关规定,同时可以通过学习美国先进的食品安全管理思路,使本企业的质量安全更上一层楼。

  • 新换的抑制器,基线噪音大

    仪器型号ics5000.新换的抑制器,基线噪音大。抑制器来回更换好久了,这次从赛默飞总部发的售后。新的,走出来效果还是不太好。平时用hj84-2016。方法等度。90ma电流。36mmol淋洗液浓度。是不是因为电流或者淋洗液浓度导致基线噪音大。一般各位做的是啥配置。想解决问题?[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112261029125144_820_3952323_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112261029123679_7289_3952323_3.png[/img]

  • 问:液态废物的污染防治,是否适用于新《固废法》?

    答:液态废物的污染防治,适用于本法;但是,排入水体的废水的污染防治适用有关法律不适用本法。(其中,根据《关于建立完善船舶水污染物转移处置联合监管制度的指导意见》,船舶含油污水按照废水实施管理)本法第一百二十四条第一项已经明确,本法调整的固体废物,包括固态、半固态和置于容器中的气态的物品、物质以及法律、行政法规规定纳人固体废物管理的物品、物质。换言之,本法虽然使用了“固体废物”的概念,但并非只有“固态”的废物,才属于法律定义范围的“固体废物”。除了“固态”废物外,半固态和置于容器中的气态物品等,也属于本法调整的“固体废物”的范畴。根据本条规定,液态废物的污染防治,原则上也适用本法。以危险废物为例,根据《国家危险废物名录》,有相当一部分液态废物,是作为危险废物进行管理的。比如,废矿物油属于液态废物,同时也是危险废物的一大种类。又如基础化学原料制造行业中,硝基苯生产苯胺的过程中产生的废液,也属于液态废物,同时也是危险废物的一种。因此,判断某种物品是否属于本法调整的“固体废物”范畴,不能简单地以是否属于“固态”来判断。液态废物的污染防治,也适用本法。

  • COTO标准品|达拉非杂质研究

    他达拉非杂质是一种化学物质,它是他达拉非的同分异构体或相关化合物。他达拉非是一种磷酸酯酶抑制剂,用于治疗男性勃起功能障碍。COTO标准品是一种高纯度的标准物质,用于测定他达拉非及其杂质的纯度、含量和化学性质。通过与COTO标准品进行对比和分析,可以确定他达拉非及其杂质的结构、组成和含量,从而保证他达拉非的质量和安全性。在药物研发和生产过程中,COTO标准品的使用非常重要。它可以提供可靠的参照物,用于质量控制、药物分析和化学计量学研究。通过使用COTO标准品,可以确保他达拉非及其杂质的准确性和可靠性,为药物的安全性和有效性提供保障。总的来说,COTO标准品在他达拉非杂质的研究和控制中具有重要作用。通过使用COTO标准品,可以更好地了解他达拉非及其杂质的性质和含量,从而确保药物的安全和有效性。同时,也需要加强生产过程中的管理和监督,加强质量标准和监管措施的执行力度,确保药物质量和安全。

  • 【分享】08年最令人惊奇十大新物种

    【分享】08年最令人惊奇十大新物种

    中新网5月24日电科学家从国际物种探测协会08年记录的1.85万种新物种中,编选出最令人惊奇的10大物种,包括体积有如豌豆的海马和世界上最长的昆虫。  据香港《文汇报》报道,科学家每年都发现大批不知名新物种。科学家估计,地球上的生物多达1千万种,正式命名的只有180万种。  新名单上还有一种不含咖啡因的咖啡植物和一种可蜷缩成硬币那么小的迷你蛇。日本科学家在喷发剂内,发现一种学名叫“Microbacteriumhatanonis”的不常见嗜极菌。   马来西亚发现的新品种有世界上最长的竹节虫,其总长度为56.7厘米,外形像一枝竹棍;科学家又在大马发现一种蜗牛,它的壳围着4个轴心扭曲,生长在石灰岩山上。  08年最令人惊奇十大新物种  微型海马(学名Hippocampus satomiae):在印尼被潜水员发现,长1.4厘米,高1.14厘米  巨型棕榈树(学名Tahina spectablilis):在马达加斯加发现,这种棕榈树在开花结果后会倒下  无咖啡因的咖啡植物(学名Coffeacharrieriana):在喀麦隆被一名著名的咖啡培植专家发现,植物用了他的名字命名  喷发剂细菌(学名Microbacterium hatanonis)  全球最长的竹节虫(学名Phobaeticus chani):在马来西亚发现,体长36.6厘米,总长56.7厘米  全球最小蛇(学名Leptotyphlops carlae):在中美洲巴巴多斯发现,长10.4厘米  幽灵蛞蝓(又称鼻涕虫,学名Selenochlamys ysbryda):在英国加的夫人口稠密的地区发现,令科学家惊讶  曲壳蜗牛(学名Opisthostoma vermiculum)  3.8亿年前的鱼(学名Materpiscisattenboroughi):在澳洲西澳省发现,有化石显示母鱼产子(而非产卵)  小热带鱼(学名Chromis abyssus):在太平洋岛屿离岸的深海珊瑚礁下发现 [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/05/200905251104_151716_1607864_3.jpg[/img]

  • miRNA缺失或能有效抵抗肥胖

    来自美国弗吉尼亚理工大学和德州大学西南医学中心的研究人员发现,微小的RNA链(microRNA, miRNA)影响我们的细胞如何燃烧脂肪和糖。这一发现为生物学家们开始寻找治疗肥胖症和相关的健康问题打下基础。根据这周发表在PNAS期刊上的一项研究,当两种miRNA从小鼠的遗传物质中缺失时,依赖高脂肪饮食的小鼠抵抗肥胖。这项发现提示着靶向这两种特异性的miRNA的治疗方法可能有助于抑制肥胖流行症。一度被认为是垃圾DNA,研究人员如今知道miRNA在基因如何影响人类健康和行为方面发挥着重要作用。它们已知与心脏病、糖尿病、丙型肝炎、淋巴瘤和乳腺癌相关联。尽管之前已知miRNA与肥胖者相关联,但是这些新的发现是第一次确定miRNA和细胞代谢之间存在关联。德州大学西南医学中心研究人员对小鼠进行基因改造而不能产生miR-378和它的表亲miR-378*,从而导致相对苗条的动物也能够快速地将细胞食物转化为能量。

  • 【分享】带你走进神秘的长链非编码RNA

    长链非编码RNA(lncRNA)是一类转录本长度超过200nt的RNA分子,它们并不编码蛋白,而是以RNA的形式在多种层面上(表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等)调控基因的表达水平。lncRNA起初被认为是基因组转录的“噪音”,是RNA聚合酶II转录的副产物,不具有生物学功能。然而,近年来的研究表明,lncRNA参与了X染色体沉默,基因组印记以及染色质修饰,转录激活,转录干扰,核内运输等多种重要的调控过程,lncRNA的这些调控作用也开始引起人们广泛的关注。哺乳动物基因组序列中4%~9%的序列产生的转录本是lncRNA(相应的蛋白编码RNA的比例是1%),虽然近年来关于lncRNA的研究进展迅猛,但是绝大部分的lncRNA的功能仍然是不清楚的。生物学功能许多lncRNA都具有保守的二级结构,剪切形式以及亚细胞定位,这种保守性和特异性表明它们是具有功能的。但lncRNA的功能相对于microRNA和蛋白质的功能来说更加难以确定,因为目前并不能仅根据序列或者结构来推测它们的功能。根据它们在基因组上相对于蛋白编码基因的位置,可以将其分为(1) sense, (2) antisense, (3) bidirectional,(4) intronic, (5) intergenic这5种类型。这种位置关系对于推测lncRNA的功能有很大帮助。[/si

  • 问:液态废物的污染防治,是否适用于新《固废法》?

    答:液态废物的污染防治,适用于本法;但是,排入水体的废水的污染防治适用有关法律不适用本法。(其中,根据《关于建立完善船舶水污染物转移处置联合监管制度的指导意见》,船舶含油污水按照废水实施管理)本法第一百二十四条第一项已经明确,本法调整的固体废物,包括固态、半固态和置于容器中的气态的物品、物质以及法律、行政法规规定纳人固体废物管理的物品、物质。换言之,本法虽然使用了“固体废物”的概念,但并非只有“固态”的废物,才属于法律定义范围的“固体废物”。除了“固态”废物外,半固态和置于容器中的气态物品等,也属于本法调整的“固体废物”的范畴。根据本条规定,液态废物的污染防治,原则上也适用本法。以危险废物为例,根据《国家危险废物名录》,有相当一部分液态废物,是作为危险废物进行管理的。比如,废矿物油属于液态废物,同时也是危险废物的一大种类。又如基础化学原料制造行业中,硝基苯生产苯胺的过程中产生的废液,也属于液态废物,同时也是危险废物的一种。因此,判断某种物品是否属于本法调整的“固体废物”范畴,不能简单地以是否属于“固态”来判断。液态废物的污染防治,也适用本法。

  • 新酒客更爱大清香 新消费助力大清香

    “新酒客更爱大清香,新消费助力大清香。”日前,著名酒业咨询专家、北京卓鹏战略咨询机构董事长田卓鹏在对新一代消费者群体进行调研后提出这样一个观点:随着消费升级和健康养生意识的增强,新酒客饮酒呈现低度化、潮饮化、时尚化、国际化的趋势,因此对不上头、醒酒快、口感偏润的大清香白酒比较偏爱。

  • 什么是大肥、小肥?

    在肥料行业常常听见行家说“大肥”、“小肥”,我的理解是大肥是常规包装的,比如50kg/包、25kg/包,小肥是小袋包装的,不知道这种理解对不对?呼唤高手解答。

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