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奴氯美酮

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奴氯美酮相关的论坛

  • 有机滤膜对玉米赤霉烯酮的影响;

    有机滤膜对玉米赤霉烯酮的影响;

    有机系的滤膜可以过滤水系配制的溶液,但是有时并不太使用,很多时候实验数据的不准确,线性不好往往出现在滤膜上,所以建议你们所写的sop必须加上对滤膜的考察,否则在比对实验中你很吃亏。将储备液用水稀释得到浓度为 400ng/ml 。分别做以下操作1.过某牌子的有机滤膜2.直接装瓶上机测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604112118_590012_2779413_3.png 红色为直接装瓶,黑色为过了滤膜的 ,过了滤膜响应变低。将储备液用水稀释到80ng/ml,重复上述操作。响应如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604112120_590013_2779413_3.png 红色为直接装瓶,黑色为过了滤膜的 ,过了滤膜的完全没响应。如稀释过程如用乙腈稀释再过有机滤膜,得到的响应和不过滤膜一样。问题:1.该滤膜只对玉米赤霉烯酮有影响? 2.做用水提取的检品直接过有机滤膜会不会把所要的东西吸附了。例如····· 3.有机滤膜不能用来过滤水相的东西?要规定使用。

  • 由华特迪士尼授权佐丹奴生产的迪士尼小飞象童装烫画T恤的增塑剂磷苯二甲酸盐严重超标

    http://finance.qq.com/a/20060907/000213.htm时报讯 (记者 周芳 见习记者 李杉) 尽管佐丹奴已发表声明全球停售“问题T恤”,但记者昨日仍在其官方购物网站上看到小飞象“问题T恤”的踪影。同时,广州多家佐丹奴专卖店内与问题T恤同时生产的另外4款烫画T恤仍有出售,并且该厂生产的同类型新款服装昨日照样上架开卖。 香港发文全球停售 据了解,香港方面日前检查发现,由华特迪士尼授权佐丹奴生产的迪士尼小飞象童装烫画T恤的增塑剂磷苯二甲酸盐浓度达1.4%,而另一款翻版超人特工队T恤则含5.7%的磷苯二甲酸盐,较欧盟指令的0.01%分别超标14和57倍。 对此,佐丹奴香港总部立即发表声明称,已将问题T恤和同时生产的另外4款包括米奇、美妮、白雪公主及怪兽公司烫画T恤全球下架,并将接受顾客退款或更换货品。 佐丹奴公司在声明中指出,该公司已将小飞象T恤样本送交ITS公司化验,预计本周内有结果,而另外四款T恤稍后亦会送交化验。 ................国内尚无强制标准 据了解,磷苯二甲酸盐是制造塑胶材料的化合物,无浓烈气味刺激,欧盟和美国都已出台了对其浓度限量的禁止性规定。不过在我国,还没有磷苯二甲酸盐的强制性国家标准,但磷苯二甲酸盐会通过汗水及皮肤接触,进入儿童身体,引致咳嗽、喉痛、晕眩或昏昏欲睡,甚至可能会出现昏迷。 记者昨日致电佐丹奴广州总部,一位不愿透露姓名的先生告诉记者,他们已经将问题T恤撤下网上商店,若还能买到可能是网络问题。他同时认为,香港是依照欧盟标准检测,中国内地暂无相关强制性国家标准,也没有相关法律制约说不能生产磷苯二甲酸盐含量过高的T恤,因此“在中国内地卖,并不违法。”

  • 玉米赤霉烯酮概述及检测方法

    一、概述玉米赤霉烯酮又称F2毒素,是由镰刀菌、三线镰刀菌、尖孢镰刀菌、黄色镰刀菌、串珠镰刀菌、木贼镰刀菌、燕麦镰刀菌、雪腐镰刀菌等菌种产生的有毒代谢产物,是一种雌激素真菌毒素。主要存在于玉米和小麦中,虫害、冷湿气候、收获时机械损伤和储存不当都可以诱发产生玉米赤霉烯酮。玉米赤霉烯酮类毒素包括玉米赤霉烯酮,立玉米赤霉烯醇、4-酰基玉米赤霉烯酮等。玉米赤霉烯酮的化学名为6-(10-羟基喝;氧基-1-碳烯基)-β雷锁酸一内酯,分子式C18H22O5,相对分子量为318。,玉米赤霉烯酮是白色结晶化合物,溶于碱性水溶液、乙醚、苯、乙醇、二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈、乙酸乙酯,微溶于石油醚,不溶于水、二硫化碳和四氯化碳,在紫外线照射下呈蓝绿色。玉米赤霉烯酮具有较强的生殖毒性和致癌作用,可引起动物发生雌激素中毒症。二、检测方法(一)薄层色谱测定法1.原理试样中的玉米赤霉烯酮经提取、净化、浓缩和硅胶G薄层分离后,玉米赤霉烯酮在254nm紫外线下产生蓝色荧光,根据其在薄层上显示荧光与标准比较定量。2.试剂无水乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、1mol/L氢氧化钠、磷酸、丙酮、硅胶G、无水硫钠。玉米赤霉烯酮标准溶液:精密称取3mg玉米赤霉烯酮标准品,加无水乙醇溶解并转入100mL容量瓶中,加无水乙醇至刻度,此标准溶液含玉米赤霉烯酮0.03g/L。吸取此标准溶液1mL,用无水乙醇稀释至10mL,此标准溶液1mL含玉米赤霉烯酮3μg。将此标准溶液置于4℃冰箱备用。3.仪器小型粉碎机、电动振荡器、紫外线灯、玻璃板(5cm×20cm)、薄层板涂布器、微量注射器。4.分析步骤(1)提取及纯化称取20g粉碎的试样,置于250mL具塞瓶中,加6mL水和100mL乙酸乙酯,振荡lh,用折叠式快速滤纸过滤,量取25mL滤液于75mL蒸发皿中,置水浴上将溶液浓缩至干,再用25mL三氯甲烷分3次溶解残渣,并转移至100mL分液漏斗中,在原蒸发皿中加入10mL1mol/L氢氧化钠溶液,然后用滴管沿分液漏斗管壁离三氯甲烷层1~2cm处加入1mol/L氢氧化钠溶液,并轻轻转5次,防止乳化,静置分层后,将三氯甲烷层转移至第2个100rnL分液漏斗中,再慢慢加入10mL,1mol/L氢氧化钠溶液,轻轻旋转5次,弃去三氯甲烷层,将第2个分液漏斗中的氢氧化钠溶液合并人第一个分液漏斗中,用少许蒸馏水淋洗第2个分液漏斗,洗液倒入第1个分液漏斗中,加入5mL三氯甲烷,轻轻振摇,弃去三氯甲烷层,再用5H止三氯甲烷重复振摇提取一次,弃去三氯甲烷层。在氢氧化钠溶液中加入6mL 1.33mol/L磷酸溶液后,再用0.67mol/L磷酸调节pH至9.5,于分液漏斗中加入15mL三氯甲烷,振摇20~30次,将三氯甲烷层经盛有约5g无水硫酸钠的定量慢速滤纸,滤于75mL蒸发皿中,最后用少量三氯甲烷淋洗滤器,洗液合并于蒸发皿中,将蒸发皿置水浴上通风蒸干。待冷却后在冰浴上准确加入丙酮1mL,充分混合,用滴管将溶液转移至具塞小瓶中,供薄层点样用。(2)薄层色谱①薄层板的制备 称取3g硅胶G,加7~8mL蒸馏水,研磨至糊状后,立即倒人涂布器内,推成5cm×20cm薄层板三块,室温干燥后在105℃活化lh,取出放于燥器中备用。②展开剂 三氯甲烷-甲醇(95:5)15mL.或甲苯一乙酸一甲酸(6:3:1)15mL任选一种。③点样 在距薄层板下端2.5cm的基线上用10μg微量注射器滴加试样液三点:滴1点为标准液10μL,滴2点为试样提取液30μL,滴3点为试样提取液30μL加标准液10μL,滴加时可用吹风机冷风边吹边加,点1滴吹干后再继续滴加。④展开在展开槽中倒入展开剂,将薄层板浸入溶剂中,展至10cm,取出挥干。⑤观察与评定 薄层板置短波紫外线(254nm)下观察,样液点处于标准点相近位置上未出现蓝绿色荧光点,则试样中玉米赤霉烯酮的含量在方法灵敏度50g/kg以下;若出现荧光点的强度与标准点的最低检出量的荧光强度相等,而且此荧光点与加入内标的荧光点重叠,则试样中玉米赤霉烯酮的含量为50μg/kg;若出现荧光点的强度比标准点的最低检出量强,则根据其荧光强度估计减少滴加的体积(μL),或将样液稀释后再滴加不同的体积(μL),直至样液的荧光强度与最低检出量的荧光强度一致为止。

  • Tenupol-5 电解双喷减薄铝合金

    用Tenupol-5 ,7%的高氯酸酒精溶液,减薄铝硅合金时找不到薄区,样品表面也不亮,显微镜下看有很多刻蚀点, 用的500的光度值电子束都透不过去~

  • 土voc,丙酮和二氯甲烷值太高

    在做土VOC时,数据分析处理时发现丙酮,二氯甲烷和二硫化碳值都很大,主要是丙酮和二氯甲烷,有几百万那么大。做土svoc和voc时,是分房间处理的,就算交叉污染也不应该值这么大吧……纯水高我可以理解,没加内标和替代,但实验室空白和样品值那么大,我就无法理解。离子源液洗过了,再做一遍值有几万了,但还是太大。二氯甲烷可能跟我这儿的纯水机有关,我这儿用的不是屈臣氏,但丙酮那么大我就一点头绪都没有了……请问问有没有做土水气voc的大神解答一下,谢谢??![img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907220838277197_6211_3862253_3.png[/img]

  • 【转帖】房奴的日子

    我是一个房奴,一个有房的房奴,一个住着比很多人房子都要大的房子的房奴,一个住着带着花园和车库,能够享受乡村美景的三层楼房的房奴。 我本是不想成为房奴的,我也没有想到我会成为房奴,因为我是一个没有必要成为房奴的房奴。也许是没有主见,也许是利益驱使,也许过早的考虑了为子孙后代造福,总之我始终未能免俗,不能逃脱成为房奴的噩运。 朋友和同事说,现在有钱存银行利息不高,股市现在很牛但是就怕突然雪崩难以逃脱,去做生意怕生意不好赔本,只有置点产业是最保险的,毕竟现在房市现在也很火而且房子也不容易贬值;老爸老妈说,我们还是再买套房子吧,以后你结婚要买新房,现在买比以后买划算,我们看中了一套位置很好,户型不错,环境优美,以后肯定有升值空间的房子。于是乎,老爸老妈把全部积蓄拿出来了,我也把上班几年来攒下来的辛苦钱拿了出来,亲戚朋友和同事也慷慨解囊予以赞助,终于我们家买下了第一套房子。 不久后,老爸单位建房,只收成本价,水电、煤气、电话、暖气入户不要钱,其他费用也有一定额度的减免。老爸说,买不买?我说,随便。老妈和同事朋友说,肯定要买,这么便宜的房子不买不是白痴吗?于是乎,老爸把公积金取了出来,交了首付,和银行签订的不平等条约也开始生效了。从此,我成为了一个不折不扣的房奴。 成为房奴以前,我是自由的,我是无忧无虑的,我是享受生活的,我是不会计较什么鸡毛蒜皮的小事的,我是不会为考虑抽什么烟、买什么衣服、出入什么场所而左思右想该不该、值不值得的。 成为房奴前,我的夜生活是丰富的,按摩、泡脚、泡吧、上网、打牌……,经常是过了零点以后老爸打了几个电话后才回家;成为房奴前,每天和朋友同事在一起,在家陪父母的时间很少;成为房奴前,节假日我很少在家,业余生活很丰富,也很充实;成为房奴前,我很少花时间看书,以至于很多东西都忘记了,甚至于一些初中生都知道的单词我却不知道怎么发音,是什么意思。 成为房奴后,我是束缚的,我的心情是压抑的,我不得不精打细算,我不得不为了很多事情而犹豫不决。 成为房奴后,我不得不乘坐慢慢悠悠、拥挤不堪、鱼龙混杂、除了喇叭不响哪儿都响的公交车;我不得不为了省点车费而步行,并自我解嘲的为自己找个借口:锻炼身体和体验生活;我不得不放弃享受类似专车待遇、冬天不会冻着、夏天不会热着、招手即停、舒适快捷的出租车。 成为房奴后,我不得不打消一年一次或者一年几次饱览祖国秀丽山河景色的计划,整个5.1长假,我在家里睡了三天半,其他三天半除开吃饭就是发呆。7天里,业务不断,我总是找借口推脱了。朋友说,出来泡泡脚、按按摩,放松放松,我说,没钱。同事说,来打牌,我说,怕输。表哥说,来我家钓鱼,我说,路途太远,路费太贵,车费要几十块。大学同学说,怎么这么久不和我联系了,我说,电话费现在每月限额,没有多余的钱煲电话粥。高中同学说,到茶馆聊天,我说,来我家吧,正好别人送了点好茶叶。初中同学说,晚上泡吧,我说,没兴趣。小学同学说,同学聚会就你没来了,我说,你开车来接我吧,现在的士涨价了。 成为房奴后,抽的烟档次一降再降,而且还必须控制在一天半包,现在抽好烟已经不习惯了,烟抽多了就不舒服;成为房奴后,家里伙食的质量似乎也有所降低,但似乎更符合营养标准了;成为房奴后,每天在家吃早餐,不用担心在外面吃不卫生了;成为房奴后,除开工作需要没有办法,出去喝酒少了,再也没有喝醉了;成为房奴后,每天回家按时了,生活变得有规律了;成为房奴后,也不会去高级理发店了,反正我的形象也还不赖,找个女朋友还是没有问题的;成为房奴后,很少买衣服了,其实衣柜里的衣服也够穿了;成为房奴后,不会没事就开着电脑听歌,整夜不关电脑,家里电费明显少了,父母睡眠质量似乎也好了很多;成为房奴后,玩得少了,看书时间多了,以前丢掉的知识好像又慢慢补回来了。 成为房奴前,我认为成为房奴不好,现在成为了房奴,我自己也不知道好不好;成为房奴前,我从不情愿成为房奴变成甘愿成为房奴,现在来看,我也不知道我是不是心 [ 转自铁血社区 ]

  • 玉米赤霉烯酮这么毒,怎么办?

    玉米赤霉烯酮(Zearalenone)又称F-2毒素,它首先从有赤霉病的玉米中分离得到。玉米赤霉烯酮其产毒菌主要是镰刀菌属(Fusarium)的菌侏,如禾谷镰刀菌(F.graminearum)和三线镰刀菌(F.tricinctum)。玉米赤霉烯酮主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物。其中玉米的阳性检出率为45%,最高含毒量可达到2909mg/kg;小麦的检出率为20%,含毒量为0.364~11.05mg/kg。玉米赤霉烯酮的耐热性较强,110℃下处理1h才被完全破坏。  玉米赤霉烯酮具有雌激素样作用,能造成动物急慢性中毒,引起动物繁殖机能异常甚至死亡,可给畜牧场造成巨大经济损失。玉米赤霉烯酮是玉米赤霉菌的代谢产物。1980年李季伦教授发现植物体内也存在玉米赤霉烯酮。 这么毒的玉米赤霉烯酮怎么办?有一种方法可以快速的检测出猪的玉米赤霉烯酮,那就是快速金边检测卡,本卡检测快速、直观准确、操作简便,非常适合各级兽医站、动物门诊和养猪场的疾病监测和区域性疾病普查。

  • 美大学证实用中国儿童做转基因大米试验

    核心提示:近期,由绿和组织揭发的一起美科研机构利用中国儿童进行转基因大米试验的事件引发关注。日前,美国塔夫茨大学承认进行了该项试验,称该试验是为解决发展中国家民众的健康问题,还强调实验获得了中美两国的批准,并得到了涉事儿童家长的同意。

  • 【原创】全球再禁十氯酮等9种有毒化学品

    来自全球160多个国家的政府部长及官员于2009年5月4日~8日齐聚瑞士日内瓦,参加《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》(POPs公约)第四次缔约方大会,商讨如何推进全球消除这些世界上人类制造、最为有害的化学品的行动。  禁用物质新增9种  联合国环境规划署(UNEP)5月9日发表声明说,与会代表当天在日内瓦达成共识,同意减少并最终禁止使用9种严重危害人类健康与自然环境的有毒化学物质。  声明说,十氯酮等9种持久性有机污染物(POPs)在杀虫剂和阻燃剂等物品中广泛使用,与会代表因此决定,将它们列入POPs公约,这也使公约禁止生产和使用的化学物质增至21种。  联合国副秘书长、UNEP执行主任阿齐姆• 施泰纳指出,修改公约的禁用名单表明了国际社会已认识到这9种POPs的危害性,各国政府应该高度重视,减少并最终禁止使用这些有毒化学物质。  这是针对POPs公约的第一次修改,POPs公约从此打开新篇章。许多这类有毒化学物质仍然被作为杀虫剂、阻燃剂并在诸多其他商业用途广泛使用。  据悉,这9种有机污染物分别是:α-六氯环己烷 β-六氯环己烷 六溴联苯醚和七溴联苯醚 四溴联苯醚和五溴联苯醚 十氯酮 六溴联苯 林丹 五氯苯 全氟辛烷磺酸、全氟辛烷磺酸盐和全氟辛基磺酰氟。  三个公约开展协作  本次大会取得的另一个突破是,缔约方一致同意在POPs公约与其他两个有关危险化学品和危险废物的姊妹公约——鹿特丹公约和巴塞尔公约之间开展协作。这一活动将在2010年2月召开的UNEP理事会特别会议暨全球环境部长论坛期间进行,届时还将召开一次特别缔约方大会。而在以后的缔约方大会中,扩大的工作组将首次由来自这3个公约的人员组成。  本次大会还做出了一个具有里程碑意义的决定,即启动滴滴涕(DDT)全球伙伴关系。虽然POPs公约的目标是最终淘汰DDT,但公约也承认一些国家将继续使用这种杀虫剂来保护其公民免受疟疾和其他疾病的侵害。  多氯联苯(PCB)淘汰网络也获准建立。通过这个平台,各国将以环境友好的管理和处置方式来逐步淘汰PCB。这一网络将收集关键数据和评估PCB的使用是否真的减少,在淘汰PCB方面将发挥重要作用。  本次大会传递的信息是清晰的。如果没有“迎接一个没有POPs的未来的挑战”这一目标,这些有毒化学物质带来的“化学足迹”将留存,使其对人类健康和环境造成的影响最小化的全球努力也将失败。通过召开这次大会,世界各国政府将在POPs公约的旗帜下联合起来,把推动消除有毒化学品问题作为全球环保问题的首要问题来抓,以此消除有害物质对人类的危害。  人类面临四大挑战  直到本次缔约方大会开幕前,POPs公约仍然针对的是人们熟知的“肮脏一打”,即几种有毒物质。  这12种有毒有害杀虫剂和工业化学品对人类的神经和免疫系统都有伤害,同时可引发癌症及生殖系统紊乱,对于婴儿和儿童成长更是具有毁灭性的威胁。  专家认为,这些化学品所隐含的风险十分明显,这些有毒物质在全球留下了化学足迹。农民、怀孕的妇女、青年以及那些偏远社区,例如北极,都尤其脆弱。  如何面对尽量减少人类和全球受持久性污染物危害,最终应对无POPs的未来的挑战?这对于暴露在污染中的脆弱人群尤为重要。UNEP指出,人类面临四大挑战:  ——消除POPs在产品中的使用,转向更加安全的替代物,达到消除无意识生产POPs产品的目标   ——寻找新的对于人类健康和环境健康有危害的POPs   ——保证每个国家都有充足的技术和资金来支持他们在公约下应做出的行动   ——继续保证公约的保护人类和环境健康免受POPs危害的目标。  各国努力探寻DDT替代物  联合国环境规划署(UN-EP)、世界卫生组织(WHO)和全球环境基金(GEF)5月6日共同宣布将实施一系列充满活力的国际性措施,以期在不断减少综合性杀虫剂DDT使用的情况下消除疟疾。  作为全球性项目“展示与收集病媒管理中DDT可持续性替代物”的一部分,大约有40个国家将会参与这些新项目。据了解,这些新项目的目标是,到2014年实现削减全世界DDT使用量30%,最早到2020年逐步淘汰DDT,同时实现由世界卫生组织设置的疟疾控制目标。项目将获得GEF提供的近4000万美元资助。我国将从5月17日起禁止生产、流通、使用和进出口滴滴涕、氯丹、灭蚁灵及六氯苯四种物质。2004年11月11日,由世界各国共同签署的一项国际环境公约《关于持久性有机污染物的斯德哥尔摩公约》在我国正式生效,这意味着我国将限制直至停止使用公约列出的12种对人类健康和自然环境最具危害的有机污染物,这12种物质中就包括滴滴涕、氯丹、灭蚁灵和六氯苯。

  • 【转帖】NusA技术:显著增强大肠杆菌表达可溶、活性蛋白

    70kDa)中的七个得到了可溶性表达,而其它的融合标签(GST,MBP和hexahistidine)系统则只得到了四个可溶性表达的蛋白。表1. 用大量的目标蛋白评估NusA标签对提高融合蛋白可溶性的作用参考文献a目的蛋白数目目的插入序列种属目标蛋白大小范围NusA融合蛋白可溶性比例Shih等(2002)40酵母,哺乳动物,植物,昆虫9-10060Korf等(2005)75人6-12760bKohl等(2008)96人1-11844ca. Korf等和Kohl等的研究中包含了六组氨酸标签。b. 可溶性蛋白量大于等于10%即认为该融合蛋白可溶。c. 纯化后的融合蛋白如果在SDS-PAGE后考染在合适位置出现条带即认为可溶。Korf等的还发现对于定位于真核细胞细胞器,质膜或者骨架的蛋白,相对于其它标签系统来讲,NusA标签是最好的可溶性表达的选择。Kohl等(2008)也发现只要在20-25℃诱导表达,NusA标签能够大大提高难表达的蛋白比如膜蛋白的可溶性。与Korf等的研究结果一致,Kohl等也发现25℃诱导表达比30℃或37℃诱导表达可以纯化得到更多的NusA融合蛋白。切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白表2总结了16个采用NusA标签成功获得可溶性蛋白,在切除标签后这些蛋白仍有正确折叠结构和活性。大部分这种研究是是关于分子量小于或接近20kDa的目标蛋白。纯化后的目标蛋白产量范围在1.5-100mg/L。趋化因子和细胞因子可以得到高达30-100mg/L的产量。其它关于这些蛋白表达和纯化的有参考价值信息包括:■ 植物磷酸烯醇式丙酮酸—羧化酶激酶(Ermolova 2003)——目标蛋白切除标签后用BDA(蓝色葡聚糖)亲和层析树脂纯化。纯化后蛋白的催化活性比未切除标签的融合蛋白高50倍。■ Xklp3a,Tep3Ag和E8R(De Marco 2004)——用蛋白酶切割后,His-融合的TEV和NusA被Ni2+离子亲和色谱选择性去除。与Ni2+亲和结合的标签被紧密地结合在树脂上,在流出液中则可以得到纯化的目的蛋白。所有这三种蛋白在纯化后都正确折叠且均一分散在溶液中。纯化的膜结合蛋白E8R牛痘病毒蛋白在Tris缓冲液中除去NusA后出现了沉淀,然而加入0.02%的月桂酰基麦芽糖苷和150mM的氯化钠后,蛋白又重新变得可溶。■ 环麦芽糖糊精酶(Turner 2005)——这个蛋白属于α-淀粉酶家族。这个家族的蛋白通常在大肠杆菌中很难以活性形式表达出来。将其与肠激酶混合孵育24小时以上会使其活性逐渐增强,直到达到未经肠激酶处理过的融合蛋白的2倍以上,这也说明标签的存在降低了该酶的活性。可以用固化了Cu2+的亲和层析柱去除切除的融合标签。■ 八种人趋化因子(Magis-trelli 2005)——所有的蛋白都在OrigamiTM B菌株中表达提高它们在胞质中的二硫键形成率。在趋化因子编码序列的C端引入了AviTMTag(亲和素)生物素化序列。切割后的细胞趋化因子可以用单体的亲和素树脂亲和层析与切割下的NusA标签和蛋白酶混合物分离开。所有切割纯化后的蛋白在细胞趋化实验中都显示了活性,而没有一个融合蛋白有这样的活性。■ 蚯蚓血红蛋白(Karlsen 2005)——酶切后,用分子筛分离纯化蚯蚓血红蛋白,纯化后的蛋白通过圆二色谱检测得到的α-螺旋结构与模型预期结果一致,且纯化后的蛋白可以以单体的形式稳定保存。■ 人白介素-29(Li 2006)——用S-蛋白亲和层析比Ni2+亲和层析可以得到更纯的目的蛋白。将融合蛋白N端的NusA/His•Tag®/S•Tag™标签切掉后,用链亲和素琼脂去除生物素标记的凝血酶。用水疱性口膜炎病毒(VSV)处理固定的人羊膜上皮细胞(WISH 细胞)后,通过检测纯化的IL-29对细胞的保护效应来检测其抗病毒活性。■ 人干扰素-λ2(Li 2007)——酶切后,用Novagen提供的EKaptureTM琼脂除去重组的肠激酶。先用纯化后的干扰素-λ2处理WISH细胞,24小时后加入VSV病毒,可以观察到干扰素-λ2可以有效地保护细胞免于病毒介导的病变。表2. 切除NusA标签获得后保持活性且正确折叠的蛋白参考文献目的蛋白目的蛋白分子量(kDa)切割用蛋白酶融合蛋白亲和层析固定介质纯化后目的蛋白产量(mg/L)Ermolova等(2003)植物磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶激酶32凝血酶Ni2+1.5De Marco等(2004)Xklp3ATep3AgE8R15NRa32bTEV酶TEV酶TEV酶Ni2+5.02.54.0Turner等(2005)环麦芽糖糊精酶69肠激酶Cu2+1.6Magistrelli等(2005)八种人趋化因子8-21Xa因子Ni2+30-100Karlsen等(2005)蚯蚓血红蛋白15TEV酶Ni2+NRaLi和He(2006)人白介素-2920凝血酶S-蛋白60Li和Huang(2007)人干扰素-λ220肠激酶Ni2+65a. 未报道b. 根据NCBI报道预测的全长蛋白分子量与NusA标签融合且具有活性的蛋白 与这些切除NusA标签后保持活性且正确折叠的蛋白不同,还有很多报道指出目的蛋白在“NusA-目的蛋白”的融合形式时具有很好的活性。比如单链(ScFv)催化活性抗体14D9(Zheng 2003),来自Aequorea victoria的绿色荧光蛋白(Nallamsetty 2006),人二氢叶酸还原酶(Nallamsetty 2006),来自Ensis directus蛏子的精氨酸酶激酶(Compaan 2003),来自B. thuringiensis的修饰δ-内毒素(Kumar 2005),人BCMA跨膜受体(Guan 2006),植物α-双加氧酶1(Liu 2006),以及来自Plasmodium falciparum的b-ketoacyl-acyl载体蛋白合成酶(Lack 2006)等,反映了各种不同背景的蛋白都显示出了与NusA标签融合后的活性。NusA标签提高蛋白可溶性的可能机制 Houry(1999)等揭示NusA蛋白是分子伴侣GroEL在体内的必须底物。而GroEL与其共作用因子GroES是大肠杆菌唯一的在所有生长条件下必需的分子伴侣系统。Douette等(2005)研究了融合蛋白NusA-UCP1(uncoupling protein 1)的可溶产量。UCP1是一种线粒体膜蛋白。这些作者发现16℃培养时,当GroEL共过表达的情况下,融合蛋白的可溶性有更大的提高。这个结果也表明NusA与分子伴侣途径相作用,从而阻止参与蛋白的聚集。总结 已有充分的证据证明NusA标签系统能显著提高多种不同来源蛋白的可溶性表达,而这些蛋白在单独表达时往往形成不可溶的包涵体。在一些研究报告中,用蛋白酶切除NusA标签能使目的蛋白仍保持正确折叠和生物学活性;相反,在另外许多报道中也指出当目的蛋白与NusA融合而非切除时,融合蛋白也同样具有活性。NusA标签系统的成功至少部分地是由于其与大肠杆菌分子伴侣系统相互作用的结果。

  • 【转帖】记者暗访卖血部落:数百血奴服禁药催血卖钱

    第一部分 血奴爆料 在广州救助站被血头盯上失业教师沦为“血奴” 专题撰文 时报记者 何华高 专题摄影 时报记者 黄立科 3月9日上午,线人F揣着一叠材料来到时报,向记者讲述了他终生难忘的“血奴”经历。“我经过了激烈的思想斗争,才有勇气向你们反映这个情况。”F说,“我看了信息时报3月7日关于‘血头救助站招人卖血’的报道。与揭阳相比,这个事实只能算冰山一角。揭阳堪称职业卖血人的大本营,那里有五六百名职业卖血人,被数个帮派的十多个血头控制。每个帮派里面都有一个血霸,血霸下面则有好几个血头 。” 9个月卖血50余次 F,44岁,曾在湖南衡阳一所中学当过教师,由于种种因素南下广州。因一场变故,去年5月初,他辞掉了原来的工作。半个多月过去了,新工作没有着落,身上的钱也没剩多少了。F决定回老家一趟,并到广州市救助站申请路费。就在这里,一名血头把他带到了揭阳。 在揭阳,F被安排到一名血头家住了下来。当时,这名血头家中已经住了十多人,都是卖血的。混了个把月,F感到十分惊讶:这些人把卖血职业化了,不少人已经卖了四五年,有的卖了十五六年,成了“血奴”。F说,听到这些情况,起先他感觉十分害怕,血头似乎也看出了他的疑虑和不安,不停地“劝说”。考虑到要填饱肚子养家糊口,在没有其他出路的情况下,F听从了血头的安排。 与记者聊了近一个小时后,F出示了他带来的材料,12张纸上记载了他2006年5月17日~2007年2月14日的卖血次数、所得收入及血头抽水的金额,同时还记载了期间他所使用的生活用品及为了产血服用的药品。记者粗略数了数发现,他9个月卖血多达50余次。 “几乎每个月都要卖五六次。”F苦笑道,“如果血头安排你去卖血而你不去,血头当即就会变脸。” 服用禁药催血卖钱 在F提供的这份卖血日志上,记者发现,F卖血最多的月份是2006年6月、2006年12月和2007年1月,这3个月每个月均卖血7次。但F说,他并不是卖血最多的人,“有些‘血友’每个月卖血十五六次,我还不及他们的一半。”记者看到,在2006年6月4日、6月5日、6月6日、6月8日,F密集地接连卖了4次血。综观其他月份,每个月也都有五六次,其中还包括2006年8月和2007年1月的3次机采(所谓机采,即采集血小板后将隔离出来的血浆重新回输给卖血者。F说,机采一次可以获利315元)。 F说,2006年5月11日,也就是到达揭阳的第七天,他便开始“工作”了。第一次是去梅州兴宁市一家血站卖了400CC血,交给血头80元,F获得120元钱。5月18日,即F第一次卖血的第二天,他在血头的要求下买了两瓶药,都是补血用的。在“血友”的示范下,F开始了以药养血。“吃药为的就是能多产血,多卖钱!”F说,不少血友都在超量服用药品。为了达到目的,血头还会要求卖血人服用对人体有很大毒副作用的药品。 辗转粤东卖完即走 除了在揭阳血液中心血站卖血外,F还去了潮州、汕尾、梅州(五华)、河源(龙川)、蕉岭,几乎把粤东跑了个遍。9个月后,到了农历年关,F明显感到自己的身体大不如从前,走路感觉劳累和乏力,连提一捅水的力气都不够。随着春节的来临,思乡心切的他2007年2月14日在揭阳中心血站卖了最后一次血,向血头交纳了吃住费用后,悄然离开了揭阳。

  • 全能核酸酶SuperNucleaseFAQ详解:解开核酸酶的神秘面纱

    [font=宋体][font=宋体]全能核酸酶([/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体])是一种来自于粘质沙雷氏菌([/font][font=Calibri]Serratia marcescens[/font][font=宋体]),经基因工程改造的核酸内切酶。可降解双链、单链、线状、环状的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体],完全将核酸降解成[/font][font=Calibri]3~5[/font][font=宋体]个碱基长度的[/font][font=Calibri]5'-[/font][font=宋体]单磷酸寡核苷酸。义翘神州不仅可以提供研究级核酸酶,依托于[/font][font=Calibri]ISO 13485[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]体系,还可提供高效、高质量、应用广的[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级别全能核酸酶。同时我们提供核酸酶残留检测试剂盒,在解决生物制品核酸污染的同时,有效降低酶本身的残留风险。下面通过问答形式向大家详解全能核酸酶:[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何处理粘附细胞?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 用[/font][font=Calibri]PBS[/font][font=宋体]洗涤后,向[/font][font=Calibri]100μL RIPA[/font][font=宋体]裂解物(或其他哺乳动物细胞裂解物)中加入[/font][font=Calibri]1-5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶,在室温下孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体],收集裂解物,离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何处理悬浮细胞?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 离心收集悬浮细胞后,将[/font][font=Calibri]100μL RIPA[/font][font=宋体]裂解物(或其他哺乳动物细胞裂解物)加入含有[/font][font=Calibri]1-5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶的离心管中,在室温下孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体],收集裂解物,离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何处组织样本呢?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 研磨[/font][font=Calibri]30[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]100mg[/font][font=宋体]动植物组织后,加入[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]200μL[/font][font=宋体]裂解液和[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶,室温孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体],收集裂解液并离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 大肠杆菌或其他细菌呢?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 离心收集细菌后,裂解液或研磨破碎后,每[/font][font=Calibri]100μL[/font][font=宋体]加入[/font][font=Calibri]1~5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶,室温孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体],收集裂解液,离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何稀释[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 正常推荐稀释比(终浓度)为[/font][font=Calibri]1:1000[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]1:20000[/font][font=宋体],其中时间、温度和稀释比是影响反应的积极因素。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 是否用[/font][font=Calibri]PBS[/font][font=宋体]稀释[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 是[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 你能减少剂量吗[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 如果你想减少剂量,可以适当提高反应温度或延长反应时间[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 反应辅因子[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 必须向反应溶液中加入[/font][font=Calibri]2-5mM Mg2+[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 反应缓冲液[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 常用的生物缓冲液,如[/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MOPS[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]pH6-8[/font][font=宋体])等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 稀释后每次使用多少?如何测试梯度?一开始多少钱?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 根据不同的实验要求,添加量可以在[/font][font=Calibri]1/100[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]1/10000[/font][font=宋体]之间。真核细胞所需的量高于原核细胞,因为真核细胞的核酸含量高,并且可以按照[/font][font=Calibri]1/1000[/font][font=宋体]的比例添加真核细胞初始添加量,可以按照[/font][font=Calibri]1/10000[/font][font=宋体]的比例添加原核细胞。由于全能核酸酶活性在室温下较高,因此在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃下消化的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]添加比例高于室温下。普通的[/font][font=Calibri]CoIP[/font][font=宋体]实验、蛋白质表达实验可以适当地略微增加,并且可以按照[/font][font=Calibri]1/100[/font][font=宋体]的比例添加对[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]残基要求高的实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 如何灭活全能核酸酶?如何移除?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: [/font][font=Calibri]EDTA[/font][font=宋体]螯合金属离子的使用可以可逆地抑制全能核酸酶的活性,极端条件下可以引起不可逆的失活,如[/font][font=Calibri]100mM NaOH[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]70[/font][font=宋体]℃处理[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体]。可以通过阴离子交换柱或[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法从目标产物中分离全能核酸酶。由于这种核酸内切酶的高稳定性,建议不要在最终产物需要排除核酸酶的应用中使用全能核酸内切酶。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 储存条件[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: 储存温度为[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃。储存缓冲液:[/font][font=Calibri]20mM Tris-HCl pH 8.0[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]50mM NaCl[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]2mM MgCl2[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]50%[/font][font=宋体]甘油。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]: 全能核酸酶应用[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]: [/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、蛋白质提取过程中核酸污染的去除:当重组蛋白质纯化或哺乳动物细胞裂解物下游需要低粘度时,全能核酸酶可用于降低样品粘度,以便于操作;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、有效减少储存的外周血单个细胞([/font][font=Calibri]PBMC[/font][font=宋体])的聚集;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、有利于不溶性蛋白在复性前的高质量包合体系制备;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、有效去除带负电荷核酸对双向[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]蛋白样品的影响;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、在宽范围的条件下([/font][font=Calibri]6M[/font][font=宋体]尿素、[/font][font=Calibri]0.1M[/font][font=宋体]盐酸胍、[/font][font=Calibri]0.4%Triton X100[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]0.1%SDS[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]1mM EDTA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]1mM PMSF[/font][font=宋体]),降解所有形式的(双链、单链、线性、环状)[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体];[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体]、根据美国食品药品监督管理局的核酸污染去除程序,去除蛋白质产品中的污染;[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7[/font][font=宋体]、本品可与多种细胞细菌裂解液配合使用,去除粗提液中的核酸,降低溶液粘度,提高蛋白质产量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供不同级别全能核酸酶,[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级条件下生产的[url=https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit][b]全能核酸酶[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit][b]SuperNuclease[/b][/url][/font][font=宋体],无动物源性,可高效降解单链、双链、线性、环状、超螺旋等任何形式的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]。超高活性,应用场景广泛且使用量低不易残留,质量、性能、供货能力可靠,并已完成在[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]的药物主文件申报备案([/font][font=Calibri]DMF Number#:35978[/font][font=宋体]),满足药物申报的规范。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit[/font][/font][font=Calibri] [/font]

  • 药监局称美瞳风险较高建议暂停生产

    特别说明  彩色隐形眼镜统称为“美瞳”  “美瞳”是强生公司专为亚洲市场设计的美容镜片系列的名称。由于强生较早进入我国美容镜片市场,并迅速取得领先地位,且“美瞳”这个名字又非常形象地突出了“美容镜片”的特点,因此随着美瞳的推广使用,现在美瞳已经成为彩色隐形眼镜的统称。

  • 滤膜,滤筒中重金属检测过程中的质量控制

    我是新人一枚,最近开始做滤膜滤筒中的重金属检测,其中在质量控制方面有些疑惑。目前我是对消解液作加标然后计算加标回收率,但是总觉得这样做并不是很合适。各位大神有没有好的建议,或者说,对消解液加标也是可以的呢?(目前,我对样品消解是直接把整张滤膜或整个滤筒剪碎消解)。

  • 草莓酱中玉米赤霉烯酮的测定

    草莓酱中玉米赤霉烯酮的测定

    [align=center][b][img=,600,395]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121415252031_7719_932_3.jpg!w690x455.jpg[/img][/b][/align][b]适用范围[/b]适用于草莓酱中玉米赤霉烯酮的检测。参考标准:《GB 5009.209-2016 食品安全国家标准 食品中玉米赤霉烯酮的测定》。[b]SPE净化步骤[/b]SPE柱:月旭Welchrom玉米赤霉烯酮免疫亲和柱,规格:3mL。上样:准确移取4mL待净化液,注入免疫亲和柱中,调节速度使溶液以1滴/S-2滴/S的流速缓慢通过免疫亲和柱,直至有部分空气进入亲和柱中。淋洗:依次使用10mLPBS清洗缓冲液和10mL水淋洗免疫亲和柱,流速为1滴/S-2滴/S,直至空气进入免疫亲和小柱中,弃去全部流出液。洗脱:准确加入2.0mL甲醇洗脱,流速为1滴/S。收集洗脱液,于40℃下氮吹至近干后,用50%乙腈定容至1mL,供液相色谱测定。[b]色谱条件[/b]色谱柱:月旭Ultimate XB-C18,4.6×150mm,5μm。流动相:乙腈:水:甲醇(46:46:8);流速:1.000mL/min;柱温:30℃;进样量:20μL;检测波长:激发波长274nm,发射波长440nm。[b]色谱图或者加标回收率结果[/b][align=center][b][b][img=,600,231]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121415301441_5410_932_3.jpg!w690x266.jpg[/img][/b][/b][/align][align=center][color=#333333]图1.玉米赤霉烯酮10μg/L标准图谱[/color][/align][align=center][color=#333333][/color][/align][align=center][color=#333333][b][img=,600,231]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121415358863_9817_932_3.jpg!w690x266.jpg[/img][/b][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333]图2.草莓酱样过柱图谱[/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][b][img=,600,231]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121415400781_7403_932_3.jpg!w690x266.jpg[/img][/b][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333]图3. 草莓酱样加标50μg/kg过柱图谱[/color][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][b][img=,600,117]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121415478333_963_932_3.png!w499x98.jpg[/img][/b][/color][/color][/color][/align][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333]表1.加标回收表[/color][/color][/color][/align][color=#333333][color=#333333][color=#333333][/color][/color][/color][color=#333333][color=#333333][color=#333333][b]相关产品信息[/b][/color][/color][/color][align=center][color=#333333][color=#333333][color=#333333][b][b][img=,600,339]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121415524511_3867_932_3.jpg!w690x390.jpg[/img][/b][/b][/color][/color][/color][/align]

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    我司目前的童车产品为中低档类,只能销往南亚,中东和南美。我欲打开欧美市场。请问:在产品原料,品质方面及其它方面要做哪些提升?

  • 铝合金中镁的测定

    大家好,今天我做了个实验,是测定铝合金中镁的含量,我前两年做过一两次,觉得实验很简单,但是今天做试验却出现了一个重要问题!分析步骤是这样的,称取250mg的试样,1+2的盐酸溶解,然后稀释到200,取5ml 加三乙醇胺,加PH为10.9的缓冲溶液,再加铬变酸2R,最后加入丙酮,比色就行了!问题来了,原来做试验的时候根本没注意配置的铬变酸2R溶液的时是什么颜色的,今天配完后是红色的,然后加入到上述步骤后,溶液最终也是红的,根本看不出来铬变酸2R与镁的显色反应啊,我今天还做了一遍对比试验,就是取两分试样,一份镁的含量为4.89、一分为2.90的,同时溶样后加入铬变酸2R后,溶液的颜色基本一样,测出来的吸光度也都一样,这不用我说大家都知道了吧,根本没有反应,我上网找过,网上说铬变酸2R水溶液是红的,那加入含镁的溶液后呢?也是红的?不可能吧!请大家帮帮忙,这是怎么回事啊,以前我做过这个试样的,但由于时间太长了,忘了原来什么现象了,反正今天的不对,请大家分析一下啊,我猜是不是铬变酸2R过期了啊,大家说呢?

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