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那法扎琼

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  • 穷人有穷人的过法(不信笑不死你!)

    最近穷疯了,只好吃馒头————想吃饼的时候,把馒头拍扁了当饼吃。想吃面的时候,拿梳子把馒头梳几下当面吃。想吃冰淇淋的时候,把馒头放窗外冻冻再吃。想吃饼干的时候,把馒头烤脆了再吃。想喝奶的时候,把馒头上面拧个揪揪,嘬着吃。想吃方便面的时候,把馒头从下面掏空,再把掏出来的馒头渣放在里面,用水泡着吃。想吃肉的时候,把馒头捏成猪或羊的形状吃。想吃火锅的时候,把馒头切成片,放在开水里,捞这吃。想吃香肠的时候,把馒头搓成条再吃。想吃螃蟹的时候,把馒头从上面掀开再吃。想吃汉堡的时候,把馒头包在纸里,把纸打开再吃。想吃香蕉的时候,把馒头皮剥了再吃。想吃鸡腿的时候,找根筷子穿着馒头吃。想吃包子的时候,把馒头渣抠出来再塞进去吃。想吃洋葱的时候,把馒头放点芥末再吃。想吃麦片的时候,把馒头捏碎,再压扁,再泡水吃。穷有穷的过法....

  • 琼脂糖凝胶电泳常见问题与解决办法

    一、凝胶制备1. 微波炉溶解琼脂糖时,胶液沸腾冲溢出三角锥瓶微波炉加热时胶液可能发生剧烈沸腾,(1)总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量。(2)2%以上胶液设置中火加热。 (3)胶液剧烈沸腾时,停止加热,移开三角锥瓶,请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,然后再次加热,胶液沸腾直至胶液清澈,保证琼脂糖完全溶解。 2. 琼脂糖电泳图像背景模糊不清:琼脂糖没有完全溶解会造成电泳图像背景模糊不清。完全溶解的琼脂糖胶液清澈,三角锥瓶内壁应没有粘附琼脂糖颗粒。 3.加热后水分蒸发,如需要应加入热的蒸馏水,补足到原来的重量,摇匀。 二、电泳1. DNA条带模糊,拖尾。 (1)DNA降解。避免核酸酶污染。 (2)DNA上样量过多。减少凝胶中DNA上样量。 (3)电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液。 (4)电泳条件不合适。电泳时电压不应超过20 V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应<15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。 (5)DNA样含盐过高。泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。 (6)有蛋白污染。电泳前抽提去除蛋白。 (7)DNA变性。电泳前勿加热,用20 mM NaCl缓冲液稀释DNA。[/c

  • 【求助】平板计数琼脂如何进行验证

    我现在碰到了一个难题,CNAS上要求:所有实验室用的培养基及试剂使用之前都要进行验证,但是如何验证呢?平板计数琼脂如何验证呢?北京陆桥的琼脂不稳定,有哪位高手可以告诉我,平板计数琼脂如何验证?那实验室用的其他培养基及试剂如何验证?先谢谢了

  • 69.7 奥扎格雷钠口服溶液人体尿药浓度研究

    69.7 奥扎格雷钠口服溶液人体尿药浓度研究

    【作者中文名】王珍; 金锐; 孙考祥; 杜智敏;【作者英文名】WANG Zhen1; JIN Rui1; SUN Kao-xiang2; DU Zhi-min1(1. Institute of Clinical Pharmacy and Drug; Second Hospital of Harbin Medical University; Harbin 150086; China; 2. Yantai University; Yantai 264005; China);【作者单位】哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所; 烟台大学; 哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所 哈尔滨; 山东烟台;【摘要】目的建立测定人尿中奥扎格雷钠浓度的HPLC方法;通过测定12名健康受试者单次po200mg奥扎格雷钠口服溶液后体内的尿药浓度,考察奥扎格雷钠体内代谢过程。方法采用Diamonsil C18柱(4.6mm×150mm,5μm),磷酸盐缓冲液(pH=3.0)-乙腈(94:6)为流动相,流速为1.5mL.min-1,咖啡因为内标,紫外检测波长为276nm。结果奥扎格雷钠在0.01~10mg.L-1内线性关系良好,r=0.9962;健康受试者服药后12h内有(41.77±15.47)%的奥扎格雷钠从尿中排出。结论此方法灵敏、准确、稳定,可用于奥扎格雷钠体内代谢研究;奥扎格雷钠主要以原型从尿中排出。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271758_386609_2379123_3.jpg

  • 【转帖】北京理工大学实验室昨日下午发生爆炸

    http://www.sina.com.cn 2009年10月24日13:00 北京晚报   本报讯 昨天下午1时10分许,北京理工大学5号教学楼突然传出一阵爆炸声,5名面部流血的伤者随即被送了出来。该楼901实验室刚买不久的实验仪器厌氧培养箱在调试过程中突然发生气体爆炸,造成两名调试人员、一名教师和两名学生被炸碎的箱体玻璃划伤,目前5人均无生命危险。  事发后,约40平方米的实验室内,满地玻璃碎片,其中东侧靠近墙壁桌子上摆放的厌氧培养箱已经损坏,西侧的玻璃门窗也被震坏,实验室里几乎所有玻璃器皿也破碎了。该层其他实验室均已停止实验,并切断了电源。双榆树消防中队赶到现场后确认并没有起火,于是配合120急救人员将5名伤者送出,随即警方也对现场进行了勘查。  据在场的一位同学回忆,事发时,两名仪器厂的调试人员正在调试厌氧箱,老师和一名男同学围在旁边观看,随后又有一名男生围过来询问调试情况时,厌氧箱突然发生了爆炸。为此,这名同学迅速拨打了120急救电话。据他介绍,在事发实验室上课的均是化工与环境学院的研究生,受伤的两名男学生中一人是博士,另一人正在就读研二。  事发后,120急救人员将5名伤者送往北医三院治疗。据急救科医生介绍,5名伤者均是被玻璃碎片不同程度划伤,其中这名老师伤情较重,颈部和眼部均受了伤,此外还有一名男学生眼部受了伤。目前5名伤者中除两人经包扎后已经离院,包括老师在内的3人仍需住院治疗。  事发后,北京理工大学校领导立即赶到现场,配合进行调查工作,目前事故的原因仍在调查中。  叶晓彦 王琼

  • CNS_20.001_琼脂

    [align=center][font='times new roman'][size=24px]2021.0[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]7[/size][/font][font='times new roman'][size=24px].[/size][/font][font='times new roman'][size=24px]29[/size][/font][/align][align=center][/align][align=center][font='黑体'][size=20px]琼脂[/size][/font][/align][align=center][font='times new roman']陈珺宁[/font][/align][align=center][font='times new roman'](厦门大学化学化工学院)[/font][/align][font='times new roman']摘要:[/font][font='times new roman']琼脂是一种从某些海藻萃取的亲水胶体,在人们日常生产生活的各个领域中有广泛的应用。琼脂可以改善食品的质构,提升食品的品质,并且没有任何毒性,成为一种重要的食品添加剂,在食品工业中可以作为增稠剂、凝固剂、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%82%AC%E6%B5%AE%E5%89%82][font='times new roman']悬浮剂[/font][/url][font='times new roman']、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E4%B9%B3%E5%8C%96%E5%89%82][font='times new roman']乳化剂[/font][/url][font='times new roman']、保鲜剂和稳定剂等,被广泛应用。本文将对琼脂的理化性质、提取工艺与深加工、限量、标准、检测、应用等进行逐一介绍,有助于对该食品添加剂的了解。[/font][font='times new roman']关键词:[/font][font='times new roman']食品添加剂,琼脂,性质,提取,限量,[/font][font='times new roman']标准,检测,应用[/font][font='times new roman'][size=18px]0 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]引言[/size][/font][font='times new roman']琼脂([/font][font='times new roman']agar[/font][font='times new roman']),又称琼胶、洋菜、洋粉或冻粉等,根据中华人民共和国药典记载,琼脂系自石花莱[/font][font='times new roman']Gelidium amansii Lamx[/font][font='times new roman']或其他数种红藻类植物中浸出并经脱水干燥的粘[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url];按照美国药典定义,琼脂是一种从[/font][font='times new roman']Rhodophyceae[/font][font='times new roman']类的某些海藻萃取的亲水胶体。琼脂由琼脂糖和琼脂胶组成,是一种由半乳糖和半乳糖衍生物构成的长链形多糖。其中,半乳糖残基上不含硫酸基、甲氧基、丙酮酸基等基团,可发生凝胶化的长链中性多糖是琼脂糖;半乳糖残基上含有这些基团,不发生凝胶化的长链酸性多糖是琼脂胶[/font][font='times new roman']。[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman'][size=13px][1[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]2][/size][/font][font='times new roman'][size=18px]1 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]理化性质[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]溶解性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂在水中的溶解度与温度呈一定的正相关。常温下,高纯度琼脂不溶于水、无机溶剂和有机溶剂,只微溶于乙醇胺和甲酰胺;加热条件下,琼脂可溶于水形成溶液。在[/font][font='times new roman']95~100℃[/font][font='times new roman']并间歇式搅拌条件下,或在[/font][font='times new roman']100~120℃[/font][font='times new roman']高压釜中,易制取[/font][font='times new roman']0~5% [/font][font='times new roman']琼脂溶液和用于铸模的[/font][font='times new roman']8~14% [/font][font='times new roman']琼脂溶液。琼脂也可在沸腾的低浓度乙醇([/font][font='times new roman']30~50%[/font][font='times new roman'])溶液中溶解。其他研究发现,琼脂可以溶解于多种溶剂。常温下,干琼脂可以吸水溶胀,其吸水率达[/font][font='times new roman']20[/font][font='times new roman']倍;加热至[/font][font='times new roman']95℃[/font][font='times new roman']可溶于水,极易分散形成中性溶胶,其中琼脂糖含量比例越大,凝胶强度越高。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]黏度[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂凝固能力强,黏度较低,其中石花莱琼脂具有极强凝固能力、低黏度,工业琼脂因在提取过程中受化学试剂破坏具有较低的黏度。琼脂水溶液(溶胶)的黏度受原料的种类和质量,提取和加工条件,琼脂浓度、温度、加入电解质种类等测量条件影响而不同。当[/font][font='times new roman']pH = 4.5~9[/font][font='times new roman']时[/font][font='times new roman'],黏度相对稳定;当[/font][font='times new roman']pH = 6.0~8.0[/font][font='times new roman']时,黏度受老化或离子强度影响有较小变化。开始凝胶化时,在温度一定的条件下,黏度随凝胶现象持续时间的延长而增大,最终形成凝胶。此外,琼脂溶液在高温、电解质、无机酸或酸性盐类等处理后,黏度明显下降。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]絮凝性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1][/size][/font][font='times new roman']琼脂溶液中加入[/font][font='times new roman']10[/font][font='times new roman']倍体积乙醇、[/font][font='times new roman']2-[/font][font='times new roman']丙醇或丙酮,可以定量从其水溶液中絮凝析出;也可以用饱和硫酸钙、硫酸铵或硫酸镁溶液,使琼脂溶液发生盐析。常温下,絮凝析出的琼脂能溶于水或其他溶剂,电解质浓度越大、絮凝温度越高越难溶解,但除非在体系中加入水,否则琼脂不会[/font][font='times new roman']发生凝胶化形成凝胶。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]凝胶性与滞后性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂具有凝胶性,即使琼脂溶液浓度低至[/font][font='times new roman']0.004%[/font][font='times new roman'],常温下仍能形成凝胶,不需要任何助凝剂。琼脂凝胶有许多物理化学特性:具有热可逆性;其熔化温度受琼脂凝胶浓度和平均分子量影响;凝胶强度受原料种类、化学环境(如浓度、离子强度及[/font][font='times new roman']pH[/font][font='times new roman']等)和提取方法等影响;具有优良的相容性,可与大多数多糖类树胶或蛋白质溶液互溶;放置过程中发生轻微且缓慢的老化。值得注意的是,在多糖类树胶中,只有琼脂的凝胶化温度低于其熔化温度。琼脂溶胶的凝固点在[/font][font='times new roman']32~43℃[/font][font='times new roman']之间,琼脂凝胶的熔点在[/font][font='times new roman']7[/font][font='times new roman']5~90℃[/font][font='times new roman']之间,熔点远高于凝固点被称为[/font][font='times new roman']“[/font][font='times new roman']滞后现象[/font][font='times new roman']”[/font][font='times new roman']。琼脂的许多用途基于其凝胶温度的高滞后性。[/font][font='times new roman']在相同浓度下,琼脂凝胶与其他可凝胶化的物质相比强度最大,其中低浓度凝胶可以保护分散体系、防止扩散作用和改善产品质地,高强度凝胶具有优良的弹性、强度、回复力、可逆性、相对透明性和相对渗透性等特性,均有一定的应用价值和市场前景。此外,琼脂凝胶存在较硬、易脆、粗糙、透明性较差和冷冻后脱水等缺点,但是可以通过与其他材料进行改善,比如与糊精、蔗糖等复合使用可以提高凝胶的强度,与卡拉胶复合使用可以提高弹性和柔软度,与明胶复合使[/font][font='times new roman']用可以提高凝胶的强度、透明度和黏弹性。[/font][font='times new roman'][size=16px]1.5 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]非酸性降解与稳定性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [1~3][/size][/font][font='times new roman']琼脂具有优良的稳定性,常温下很难降解,但大量黏度、衍射和凝胶强度实验与研究证明,在超声波、强[/font][font='times new roman']γ[/font][font='times new roman']射线辐射,及强烈搅拌和高温长时间处理后,琼脂的分子链发生断裂,导致琼脂分子量降低,部分理化性能恶化。此外,琼脂具有很强的抗酶解能力不会在人或动[/font][font='times new roman']物体内被酶解,绝大部分随排泄物排出体外。[/font][font='times new roman'][size=18px]2 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]提取与深加工[/size][/font][font='times new roman'][size=18px][4][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]2.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]琼脂提取工艺[/size][/font][font='times new roman']琼脂生产自石花莱[/font][font='times new roman']Gelidium amansii Lamx[/font][font='times new roman']或其他几种红海藻,在红海藻细胞壁中以碳水化合物(多[/font][font='times new roman']糖)的形式存在。[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']由于琼脂需求量的增加,琼脂提取工艺日益丰富和完善。目前,高温高压法、碱法、酶法辅助提取工艺应用较为广泛。[/font][font='times new roman']2.1.1 [/font][font='times new roman']高温高压法[/font][font='times new roman']高温高压法是琼脂提取的传统方法,主要流程为原料处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']浸泡[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']煮胶[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']过滤[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']冷却[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']脱水[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']干燥[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']粉碎[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']包装。该提取工艺简单,琼脂分子破坏较少,提取率较高,但凝胶强度较低。高温高压法提取琼脂一般适用于硫酸基含量较低的原料,如石花莱。[/font][font='times new roman']2.1.2 [/font][font='times new roman']碱法提取工艺[/font][font='times new roman']碱法工艺常见有低温高碱、中温高碱和高温稀碱3种[/font][font='times new roman'], [/font][font='times new roman']主要流程为原料处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']碱处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂洗[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']酸处理[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂洗[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂白[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']漂洗[/font][font='times new roman']→ [/font][font='times new roman']煮胶[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']过滤[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']冷却[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']脱水[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']干燥[/font][font='times new roman'] → [/font][font='times new roman']粉碎[/font][font='times new roman']→[/font][font='times new roman']包装。中低温高碱法提取温度较低、生产工艺较易控制,但用碱量大、环境负担大、生产成本较高;高温稀碱法碱浓度较低,环境污染较小,但提取温度较高、生产工艺不易控制,且在高温条件下琼脂易被破坏,导致胶质流失、降低产率。目前,许多优化提取工艺条件的研究正在进行,以更好地利用碱法工艺提取琼脂。[/font][font='times new roman']2.1.3 [/font][font='times new roman']酶法辅助提取工艺[/font][font='times new roman']酶法辅助提取工艺是使用酶处理辅助碱法提取工艺,即利用纤维素酶在碱处理前或处理后作[/font][font='times new roman']用于藻体,加速破坏藻体的细胞壁,从而促进胶质溶出。酶法辅助提取工艺是对碱法提取琼脂的优化,可以提高琼脂的得率、凝胶强度,并且有效减少碱液和清洗水的用量,减轻环境负担。[/font][font='times new roman'][size=16px]2.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]琼脂深加工[/size][/font][font='times new roman']琼脂具有分子量大、溶解性差等缺点,对琼脂进行适当处理,可以扩大其应用范围。琼脂深加工主要集中在利用琼脂提取琼脂糖和通过降解琼脂制备琼胶寡糖。[/font][font='times new roman']2.2.1 [/font][font='times new roman']琼脂糖提取[/font][font='times new roman']琼脂糖是琼脂的重要组成成分,提取方法主要有碘化钠法、乙酰化法、聚乙二醇法、十[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']六烷基氯化吡啶法([/font][font='times new roman']CPC[/font][font='times new roman'])、二甲基亚砜法([/font][font='times new roman']DMSO[/font][font='times new roman'])、[/font][font='times new roman']EDTA – Na[/font][font='times new roman'][size=13px]2[/size][/font][font='times new roman']法、[/font][font='times new roman']DEAE - [/font][font='times new roman']纤维素法、硫酸铵法、磷酸钠法、尿素法等,目的都是将琼脂中的硫琼脂和琼脂糖分离,纯化琼脂糖。[/font][font='times new roman']2.2.2 [/font][font='times new roman']琼胶寡糖制备[/font][font='times new roman']琼胶寡糖一般是指[/font][font='times new roman']DP[/font][font='times new roman']([/font][font='times new roman']degree of polymerization[/font][font='times new roman'])为[/font][font='times new roman']2~10[/font][font='times new roman']的低聚糖[/font][font='times new roman'], [/font][font='times new roman']包括胶寡糖和新胶寡糖。琼胶寡糖具有重要的生理功能[/font][font='times new roman'], [/font][font='times new roman']在食品工业、医药工业、日用化工、生物工程等许多方面有广阔应用前景。[/font][font='times new roman'][size=13px][5] [/size][/font][font='times new roman']琼脂寡糖的制备方法主要有化学降解法和酶降解法,缪伏荣[/font][font='times new roman'][size=13px][5] [/size][/font][font='times new roman']和林坤城[/font][font='times new roman'][size=13px][4] [/size][/font][font='times new roman']等人对琼脂降解制备琼胶寡糖作出具体介绍。[/font][font='times new roman'][size=18px]3 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]限量[/size][/font][font='times new roman']根据食品标法查询网的查询结果[/font][font='times new roman'],未查明具体食品中琼脂的最大使用量,结果均为适量使用即可。[/font][font='times new roman'][size=18px]4 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]标准[/size][/font][font='times new roman'][size=18px][6][/size][/font][font='times new roman']根据中华人民共和国卫生部于[/font][font='times new roman']2010[/font][font='times new roman']年[/font][font='times new roman']12[/font][font='times new roman']月[/font][font='times new roman']21[/font][font='times new roman']日发布、于[/font][font='times new roman']2011[/font][font='times new roman']年[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']月[/font][font='times new roman']21[/font][font='times new roman']日实施的《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB 1975—2010[/font][font='times new roman']》的标准,对感官要求、理化指标、产品规格等技术要求作出详细规定。[/font][font='times new roman'][size=16px]4.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]感官要求[/size][/font][font='times new roman']根据《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB 1975—2010[/font][font='times new roman']》规定,琼脂具有类白色或淡黄色的色泽、呈均匀条状或粉状、无异味。[/font][font='times new roman'][size=16px]4.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]理化指标[/size][/font][font='times new roman']根据《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB [/font][font='times new roman']1975—2010[/font][font='times new roman']》规定,琼脂中水分([/font][font='times new roman']w%[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤22%[/font][font='times new roman'],灰分([/font][font='times new roman']w%[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤5%[/font][font='times new roman'],水不溶物([/font][font='times new roman']w%[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤1%[/font][font='times new roman'],重金属(以[/font][font='times new roman']Pb[/font][font='times new roman']计)[/font][font='times new roman']≤20%[/font][font='times new roman'],铅([/font][font='times new roman']Pb[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤5 mg/kg[/font][font='times new roman'],砷([/font][font='times new roman']As[/font][font='times new roman'])[/font][font='times new roman']≤3 mg/kg[/font][font='times new roman']。其中逐一理化指标的检验方法在[/font][font='times new roman']GB[/font][font='times new roman']中均有明确给出。[/font][font='times new roman'][size=16px]4.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]产品规格[/size][/font][font='times new roman']产品规格按凝胶强度不同划分,分为低强度、中强度、高强度、超高强度,即[/font][font='times new roman']20℃[/font][font='times new roman']下在[/font][font='times new roman']1.5%[/font][font='times new roman']琼脂溶液中,凝胶强度在[/font][font='times new roman']150~400 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为低强度,在[/font][font='times new roman']401~800 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为中强度,在[/font][font='times new roman']801~1200 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为高强度,[/font][font='times new roman']1200 g/cm[/font][font='times new roman'][size=13px]3[/size][/font][font='times new roman']为超高强度。[/font][font='times new roman'][size=18px]5 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]检测[/size][/font][font='times new roman']《食品安全国家标准[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']琼脂(琼胶)[/font][font='times new roman'] GB 1975—2010[/font][font='times new roman']》中规定了琼脂的鉴别试验方法和多种理化指标及凝胶强度的测定方法,本文中简述规定中提到的鉴别试验、淀粉试验、水不溶物以及凝胶强度测定的实验方法[/font][font='times new roman'][size=13px][6] [/size][/font][font='times new roman'],其余理化指标的检测方法在[/font][font='times new roman']GB[/font][font='times new roman']中均有明确给出。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]鉴别试验[/size][/font][font='times new roman']取试样[/font][font='times new roman']1g[/font][font='times new roman'],加水[/font][font='times new roman']65mL[/font][font='times new roman'],煮沸[/font][font='times new roman']10min[/font][font='times new roman'],不断搅拌,用热水补足水分,放冷至[/font][font='times new roman']32℃[/font][font='times new roman']~[/font][font='times new roman']39℃[/font][font='times new roman']即凝结成半透明有弹性的凝胶状物,再加热至[/font][font='times new roman']85℃[/font][font='times new roman']开始熔化;再取适量条状试样的碎片,浸入[/font][font='times new roman']0.01mol/L[/font][font='times new roman']碘溶液中数分钟,染成棕黑色,取出后加水浸泡后[/font][font='times new roman']渐变紫色。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]淀粉试验[/size][/font][font='times new roman']取[/font][font='times new roman']0.5g[/font][font='times new roman']试样,加水[/font][font='times new roman']100mL[/font][font='times new roman'],煮沸溶解后放冷,加[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']滴[/font][font='times new roman']0.05mol/L[/font][font='times new roman']碘溶液,不得显蓝色。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]水不溶物的测定[/size][/font][font='times new roman']称取试样约[/font][font='times new roman'] 1.5g[/font][font='times new roman'](称准至[/font][font='times new roman'] 0.001g[/font][font='times new roman'])于[/font][font='times new roman'] 500mL [/font][font='times new roman']烧杯中,加水至[/font][font='times new roman'] 200mL[/font][font='times new roman'],盖上表面皿,加热煮沸溶解(加热时注意搅动)。趁热用已干燥恒重(前后两次质量之差不大于[/font][font='times new roman'] 0.001g [/font][font='times new roman']为恒重,冷却操作时需严格保持冷却时间的统一)的砂芯坩埚减压过滤,并用热水充分洗涤烧杯和砂芯坩埚,然后将砂芯坩埚于[/font][font='times new roman']105℃±2℃[/font][font='times new roman']电热干燥箱内烘至恒重。[/font][font='times new roman'][size=16px]5.4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]凝胶强度的测定[/size][/font][font='times new roman']5[/font][font='times new roman'].4.1 [/font][font='times new roman']凝胶强度测定的原理[/font][font='times new roman']将试样制成一定浓度和体积的凝胶,用凝胶强度仪测定凝胶在[/font][font='times new roman']15s[/font][font='times new roman']~[/font][font='times new roman']20s[/font][font='times new roman']内的抗破砝码质量,根据温度换算系数,计算样品凝胶强度。[/font][font='times new roman']5.4.2 [/font][font='times new roman']凝胶强度的测定方法[/font][font='times new roman']制备琼脂凝胶试样,将其放在凝胶强度测定仪的试样座中心位置上,按凝胶强度测定仪说明书进行操作,移动手柄使砝码添加装置杆下端与凝胶表面接触,加大力度使凝胶的表面发生破裂(端点进入凝胶约[/font][font='times new roman']4mm[/font][font='times new roman']以上),记录此时凝胶强度值,同时,测量凝胶的温度。[/font][font='times new roman'][size=18px]6 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]应用[/size][/font][font='times new roman']琼脂因其独特的物理化学性质,在食品、医药、微生物学、实验室应用等许多方面具有广泛的应用。[/font][font='times new roman'][size=16px]6.1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]食品[/size][/font][font='times new roman']琼脂具有凝固性和稳定性,在食品工业中可以作为增稠剂、凝固剂、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%82%AC%E6%B5%AE%E5%89%82][font='times new roman']悬浮剂[/font][/url][font='times new roman']、[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E4%B9%B3%E5%8C%96%E5%89%82][font='times new roman']乳化剂[/font][/url][font='times new roman']、保鲜剂和稳定剂等,被广泛用于制造各种糖果、果冻、饮料、冷饮、焙烤制品、速食食品和保健食品、禽类和肉类食品、肉制品、酿造行业等等。[/font][font='times new roman']6.1.1 [/font][font='times new roman']糖果[/font][font='times new roman']在糖果生产中,琼脂作为胶凝剂,主要用于制造软糖。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']琼脂凝胶软糖是大众的产品,深受广大消费者的青睐,如无花果等水果琼脂软糖或果汁软糖,价廉物美、销量可观。[/font][font='times new roman'][size=13px][1][/size][/font][font='times new roman']琼脂主要依靠其凝胶特点制作软糖,具有含水量高、透明、柔软、有弹性、货架期长的特点。[/font][font='times new roman'][size=13px][3] [/size][/font][font='times new roman']根据琼脂的凝胶能力[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']软糖中的琼脂用量一般在[/font][font='times new roman']1[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']~2.5[/font][font='times new roman']%,碳水化合物以蔗糖为主,[/font][font='times new roman']淀粉糖浆为辅,其比例约为[/font][font='times new roman']3[/font][font='宋体']∶[/font][font='times new roman']2[/font][font='times new roman']。用琼脂制造的软糖的透明度、品质及口感均优于其它软糖。琼脂虽然作为传统的凝胶物质在糖果制作中长久应用,但实践表明其口感特性比较单一。近年来也常添加明胶、变性淀粉、果汁[/font][font='times new roman']/[/font][font='times new roman']果泥或瓜果等,有助于糖果配合物料组成的多样性,有利于风味与口感的改进。[/font][font='times new roman'][size=13px][2[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]、[/size][/font][font='times new roman'][size=13px]7][/size][/font][font='times new roman']6.1.2 [/font][font='times new roman']果冻[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']在果冻制造过程中添加琼脂,可为稳定剂和胶凝剂,使颗粒悬浮均匀、不沉淀、不分层。根据琼脂的胶凝能力,一般用量为[/font][font='times new roman'] 0.15[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']~0.3[/font][font='times new roman']%。[/font][font='times new roman'][size=13px][2][/size][/font][font='times new roman']6.1.3 [/font][font='times new roman']饮料[/font][font='times new roman']琼脂用在饮料类产品中可作为助悬剂,使饮料中固型物悬浮均匀、不下沉。其悬浮时间及保质期长,是其它助悬剂无法代替的,产品透明度、流动性会更好、口感爽滑无异味。在果粒饮料中表现出优异的悬浮效果,使用浓度为[/font][font='times new roman']0.001[/font][font='times new roman']%[/font][font='times new roman']~0.005[/font][font='times new roman']%即可使果粒悬浮均匀。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']6.1.4 [/font][font='times new roman']冷饮[/font][font='times new roman']琼脂用于冷饮食品,如冰棒、冰淇淋等各种冷冻制品,可减少冰晶,提高抗热融性,使产品更加爽口。在冰淇淋生产中,琼脂可改善冰淇淋的组织状态,提高冰淇淋的黏度和膨胀率,防止冰晶析出,使制品组织细腻轻滑,使用量为[/font][font='times new roman']0.3[/font][font='times new roman']%左右。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']琼脂与刺槐豆胶、[/font][font='times new roman']明胶相配合,在冷饮食品的质地和香味稳定性方面起到极优异的作用,并能防止脱水收缩和表面结皮。作为稳定剂的最佳浓度是:琼脂[/font][font='times new roman']0.12[/font][font='times new roman']%、刺槐豆胶[/font][font='times new roman']0.07[/font][font='times new roman']%、明胶[/font][font='times new roman']0.20[/font][font='times new roman']%。[/font][font='times new roman'][size=13px] [1][/size][/font][font='times new roman']6.1.5 [/font][font='times new roman']焙烤制品[/font][font='times new roman']琼脂可以作为一种略起粘结作用的添加剂,被广泛地用于多种焙烤食品中[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']如焙烤食品生产厂将琼脂用于曲奇饼、奶油夹心派的外壳、含果仁的果冻、馅饼或派的馅、糕饼甜心表层的酥皮、蛋白酥皮筒等。琼脂也可以作为保湿剂,也成功用于面包和糕饼甜心中防干燥。[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂还可以作为填充剂和膨松剂,可代替淀粉制造麦片糊、无淀粉面包和餐后点[/font][font='times new roman']心,制作为低热能食品,同时对面包和饼干也起到了保湿、保险的作用。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman']在上述这些类型的产品中,琼脂使用的量约在[/font][font='times new roman']0.1[/font][font='times new roman']%~[/font][font='times new roman']1[/font][font='times new roman']%的范围内。[/font][font='times new roman'][size=13px][1][/size][/font][font='times new roman']6.1.6 [/font][font='times new roman']速食食品和保健食品[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂素食食品和保健食品中也有重要应用,例如它可以添加用于谷类食品(如麦片)、肉食代用品(如人造肉、素肉等)和素食者食用的甜食与点心中。[/font][font='times new roman']6.1.7 [/font][font='times new roman']禽类和肉类罐头[/font][font='times new roman']在禽类和肉类罐头中,琼脂作为胶冻剂和赋形剂,其用量可以是罐头中清汤的[/font][font='times new roman']0.5[/font][font='times new roman']%~[/font][font='times new roman']2.0[/font][font='times new roman']%,以消除罐头中食品组织发生脆碎。[/font][font='times new roman']6.1.8 [/font][font='times new roman']肉制品[/font][font='times new roman']琼脂作为肉制品的辅料,具[/font][font='times new roman']有提高肉制品的品质、保护其风味等特性。[/font][font='times new roman'][size=13px][3] [/size][/font][font='times new roman']琼脂用于灌制香肠、熏制或腓制肉制品,可明显保护其胶体以防止其风味散失。烹调的火腿可浇盖含有琼脂和抗坏血酸的溶液,包装以后,琼脂处理过的肉制品比未处理的和只用抗坏血酸单独处理的肉制品更能保持原有的风味。[/font][font='times new roman'][size=13px][2][/size][/font][font='times new roman']6.1.9 [/font][font='times new roman']酿造行业[/font][font='times new roman']琼脂在酿造行业,作为啤酒、酱油和食用醋的澄清剂以加速和改善产品澄清。[/font][font='times new roman'][size=13px][2] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]6.2 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]医药[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂可以广泛地用作轻泻剂,在人体肠中不会被消化,在充分水化的情况下,如同纤维素一样,起到增大排泄物体积和促进肠道蠕动的作用,并且无刺激性和可以达到润肠的效果。在放射科中,琼脂常作为钡餐中硫酸钡的悬浮剂。琼脂常常在缓释胶囊药物栓塞药、外科润滑剂,以及许多乳剂类型的药物中用作为起多种功能的添加剂。在药片中,琼脂用作为赋形剂和崩解剂。[/font][font='times new roman'][size=16px]6.3 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]微生物学[/size][/font][font='times new roman']琼脂在微生物学中获得了最有价值的应用。在低浓度下,琼脂即可阻止氧进入液体介质中,可以用于在暴露于空气中的营养肉汤进行厌氧菌的培养。在液体介质中使用的琼脂浓度通常在[/font][font='times new roman']0.007[/font][font='times new roman']%~[/font][font='times new roman']0.08[/font][font='times new roman']%。[/font][font='times new roman'][size=13px][1] [/size][/font][font='times new roman']在制作微生物的培养基的过程中,可以通过添加琼脂作为凝固剂来将[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E6%B6%B2%E4%BD%93%E5%9F%B9%E5%85%BB%E5%9F%BA/8509492][font='times new roman']液体培养基[/font][/url][font='times new roman']转化为固体培养基或[/font][url=https://baike.baidu.com/item/%E5%8D%8A%E5%9B%BA%E4%BD%93%E5%9F%B9%E5%85%BB%E5%9F%BA/3410252][font='times new roman']半固体培养基[/font][/url][font='times new roman']。[/font][font='times new roman'][size=16px]6.4 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]实验室应用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][1] [/size][/font][font='times new roman']琼脂可以提高颗粒度测量的精确度,可以对包含有固体颗粒的悬浮液的浓度进行测定,亚甲基蓝、甲苯胺蓝、硫堇和频那氰醇等染料可以通过琼脂的作用而发生可逆的聚合。蛋白质可以通过琼脂凝胶作电泳迁移,用于铁蛋白、卵清蛋白、血红蛋白和胃蛋白酶的解析。琼脂钠和琼脂铵、琼脂糖和琼脂糖钠在球蛋白电泳、免疫扩散诊断技术、凝胶过滤和分子大小排阻色谱等技术中是很有应用价值的。琼脂还能稳定胆固醇溶液。[/font][font='times new roman'][size=18px]7 [/size][/font][font='times new roman'][size=18px]总结与展望[/size][/font][font='times new roman']琼脂由琼脂糖和琼脂胶组成,是一种由半乳糖和半乳糖衍生物构成的长链形多糖,具有特殊的理化性质,并因此在食品、医药、微生物、实验室等均有广泛的应用。据不完全统计,目前没有明确规定琼脂的最大使用量,适量使用即可。食品安全国家标准对琼脂的感官要求、理化指标和产品规格等均作出详细规定,并给出了与琼脂相关的检测方法。琼脂产业的发展[/font][font='times new roman']具有重要的经济效益、社会效益和生态效益,同时还直接或间接地成为构建海洋渔业生态链和海洋渔业产业经济链不可或少的纽带。随着琼脂在食品工业的广泛应用,必将具有广阔的市场前景。[/font][font='times new roman'][size=13px][2][/size][/font][font='times new roman']参考文献:[/font][font='times new roman'][[/font][font='times new roman']1] [/font][font='times new roman']琼脂[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']明胶科学与技术[/font][font='times new roman'],2005(03):123-130.[/font][font='times new roman'][2] [/font][font='times new roman']李琴梅[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']戚勃[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼脂的物化特性及其在食品工业中的应用[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']中国食品添加剂[/font][font='times new roman'],2009(06):170-174.[/font][font='times new roman'][3] [/font][font='times new roman']宋雪健[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']王洪江[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']张东杰[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼脂在食品中的应用研究进展[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']现代农业科技[/font][font='times new roman'],2017(12):267-268+272.[/font][font='times new roman'][4] [/font][font='times new roman']林坤城[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼脂提取及深加工研究进展[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']福建农业科技[/font][font='times new roman'],2018(09):56-60.[/font][font='times new roman'][5] [/font][font='times new roman']缪伏荣[/font][font='times new roman'],[/font][font='times new roman']李忠荣[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']琼胶的降解及其产物的开发应用[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']现代农业科技[/font][font='times new roman'],2007(02):125+128.[/font][font='times new roman'][6] GB 1975-2010, [/font][font='times new roman']食品安全国家标准 食品添加剂 琼脂[/font][font='times new roman']([/font][font='times new roman']琼胶[/font][font='times new roman'])[s].[/s][/font][font='times new roman'][7] [/font][font='times new roman']朱肇阳[/font][font='times new roman'].[/font][font='times new roman']凝胶型糖果[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']第五部分[/font][font='times new roman']——[/font][font='times new roman']琼胶及琼胶软糖[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman']食品工业[/font][font='times new roman'],1992(05):2-7.[/font]

  • 【金秋计划】琼脂糖凝胶电泳技术详细操作步骤和详解

    [size=10px][b]一、琼脂糖凝胶电泳原理[/b] 琼脂糖凝胶电泳是一种重要的分子生物学研究方法,?它利用琼脂糖凝胶的网络结构,?通过电场作用使带电颗粒(?如DNA或RNA)?在凝胶中移动,?根据分子大小和电荷性质的不同实现分离。?这种技术不仅操作简单迅速,?而且具有高分辨率,?因此在基因操作中扮演着关键角色,[font='PingFang SC']其[b]原理主要基于DNA分子的两大特性:电荷效应和分子筛效应。[/b][/font] ?琼脂糖是一种天然的长链状聚合分子,它在沸水中溶解,当温度降至45℃时开始凝固并形成多孔刚性立体网状结构,其孔径的大小取决于琼脂糖的浓度。 [b]分子筛效应[/b]指的是琼脂糖凝胶由琼脂糖分子交联形成的网状结构,其孔径大小与琼脂糖浓度成反比。当DNA分子通过凝胶时,会受到凝胶孔径的阻碍。较小的DNA片段可以通过凝胶孔隙,而较大的DNA片段则会被阻挡,导致迁移速率降低。?? [/size][align=center][size=10px] [/size][/align][size=10px][b]电荷效应[/b]指的是DNA分子在碱性条件下(pH7)会电离,带负电荷。当DNA样品置于电场中时,在外加电场的作用下受到电场力的作用,向正极方向移动。DNA分子的迁移速率与其所带的电荷量成正比,而电荷量又与DNA片段的长度成正比。因此,在相同电场条件下,较长的DNA片段迁移速率较慢,而较短的DNA片段迁移速率较快。不同DNA的分子量大小及构型各不相同,因此它们在电泳中的迁移率也会有所不同,从而可分离出不同的区带。[b]为什么核酸条带显示荧光?[/b]主要便于观察,对核酸进行了染色。溴化乙锭EB是一种扁平状分子,在紫外光照射下能发射荧光。当EB与DNA分子形成EB-DNA复合物后,其发射的荧光强度比游离状态的EB提高10倍以上,且荧光强度与DNA的含量呈正比。 [b]二、?琼脂糖凝胶电泳的详细操作步骤(1%琼脂糖凝胶电泳为例) [font='Times New Roman', 'serif']1.安装制胶模具[/font][font='Times New Roman','serif']:[/font][/b]利用电泳托盘,安装制胶模具,水平放置于试验桌上。 [b][font='Times New Roman', 'serif']2.[/font]制备琼脂糖凝胶:[/b]将琼脂糖粉末溶解于缓冲液中,加热煮沸,冷却后凝固成凝胶。(根据电泳所需要的分辨率准备琼脂糖-电泳缓冲液凝胶溶液)[font='Times New Roman','serif'](1)[/font]称取[font='Times New Roman','serif']1g[/font]琼脂糖,放入盛有[font='Times New Roman','serif']100mL 0.5×TBE[/font]缓冲液的[font='Times New Roman','serif']500mL[/font]三角瓶中,摇匀用天平称量其重量,摇匀。在微波炉中,使琼脂糖完全溶解,放回天平上,加入蒸馏水补齐至初始重量。冷却至不烫手([font='Times New Roman','serif']55℃[/font]左右),加入[font='Times New Roman','serif']100μL[/font][font='Times New Roman','serif']0.5mg/mL EB[/font]溶液(终浓度为[font='Times New Roman','serif']0.5 μg/mL[/font]),或加入[font='Times New Roman','serif']5-10μL[/font][font='Times New Roman','serif']StarGreen DNA Dye(GenStar)[/font],摇匀。 [font='Times New Roman','serif'](2) [/font]将凝胶溶液倒入安装好的制胶模具中,凝胶厚度应在[font='Times New Roman','serif']3-5mm[/font]。 [font='Times New Roman','serif'](3) [/font]选择合适的梳子,梳子的插入深度应使齿的底部和板的表面距离在[font='Times New Roman','serif']0.5[/font]到[font='Times New Roman','serif']1.0mm[/font]。要检查梳子齿下方或之间是否有气泡,在室温下冷却凝固。 [font='Times New Roman','serif'](4) [/font]待凝胶充分凝固后,垂直向上小心拔出梳子,以保证点样孔完好。 [font='Times New Roman','serif'](5)[/font]将凝胶置入电泳槽中,加入[font='Times New Roman','serif']0.5×TBE[/font]缓冲液[font='Times New Roman','serif'],以浸没凝胶约1mm为合适。[/font] [/size] [size=10px][b][font='Times New Roman','serif']3[/font][font='Times New Roman','serif'].[/font]制备DNA样品:[/b]将DNA样品与上样缓冲液混合。[/size] [size=10px]把DNA样品和上样缓冲液混合,利用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url]把电泳样品加到没入缓冲液中凝胶槽中,在凝胶的两侧样品槽内加入合适的分子量标准品。[/size] [size=10px]上样量的多少根据样品中DNA片断的多少和大小而定,已知浓度的DNA用于估测样品质粒DNA的浓度。 [b][font='Times New Roman','serif']4.[/font]电泳:[/b]将DNA样品加载到凝胶上的样品孔中,在电场的作用下进行电泳。[/size] [size=10px]盖上电泳槽的盖子,正确连结电泳槽上的导线。电泳电压以正负电极的距离的一到五倍为合适(1到5V/cm)。如果电泳线连接正确,那么在进行电泳时可以看到有气泡从电泳槽内电极导线处产生,同时,在几分钟后,可见溴酚蓝条带从负极向正极移动,从上样槽内移入胶体。[/size] [size=10px][b]5.观察:[/b]当核酸样品移动到距离胶板下沿约1cm处时,停止电泳。电泳结束后,利用紫外灯观察DNA片段的迁移情况。当DNA样品在凝胶内移动到合适的距离时,关闭电源,去除电泳导线和电泳槽盖子。在室温下,用电泳缓冲液或水配制的EB溶液(0.5 μg/ml)对凝胶进行染色[b][font=-apple-system, helvetica, sans-serif]。[/font] 三、琼脂糖凝胶电泳的主要应用[/b] [/size] [size=10px][b]1.DNA片段的鉴定:[/b]通过比较DNA片段的迁移距离,与标准品进行对照,可以判断DNA片段的大小。[/size] [size=10px][b]2.DNA片段的分离:[/b]利用不同大小DNA片段的迁移速率差异,可以将DNA片段进行分离。[/size] [size=10px][b]3.DNA的纯化:[/b]通过电泳将目的DNA片段与其他杂质分离,得到纯化的DNA片段。(割胶回收)[/size] [size=10px][b]四、操作技巧和注意事项[/b][/size] [b][font='Times New Roman','serif'][size=10px]1.EB毒性[/size][/font][/b] [size=10px]EB是一种很强的诱变剂。在接触含有EB溶液时,应该全程戴手套和口罩。[/size] [size=10px]电泳中使用的溴化乙锭(EB)为中度毒性、强致癌性物质,务必小心,勿沾染于衣物、皮肤、眼睛、口鼻等。所有操作均只能在专门电泳区域操作,戴一次性手套,并及时更换。[/size] [b][font='Times New Roman','serif'][size=10px]2. 加热熔化琼脂糖[/size][/font][/b] [size=10px]用微波炉加热熔化琼脂糖时,溶液体积不能超过三角瓶容量的1/3,以免煮沸时溶液溢出。同时,琼脂糖必须完全熔化,否则可能导致电泳图像模糊不清。[/size] [b][font='Times New Roman','serif'][size=10px]3.凝胶厚度[/size][/font][/b] [size=10px]凝胶的厚度一般为4-6nm,若太厚可能会影响检测的灵敏度。待凝胶充分凝固后才能拔出梳子,以保证点样孔形状完好,防止漏样。[b][font='Times New Roman','serif']4.上样[/font][/b][/size] [size=10px]上样时,须先除去点样孔中的气泡,并且加样操作需小心谨慎,以免漏样或损坏胶孔。[/size] [b][font='Times New Roman','serif'][size=10px]5.电泳电压[/size][/font][/b] [size=10px]选择适当的电泳运行条件很重要,包括电压和距离。推荐的电压范围是4-6V/cm,电压太低会降低迁移率,电压太高会降低分辨率。[/size]

  • 细菌生化反应三铁琼脂

    三糖铁琼脂培养基( l )成分 蛋白胨 20g 硫酸亚铁 0.2g 牛肉浸出粉 5g 硫代硫酸钠 0.2g 乳糖 10g 002%酚磺酞指示液 12.5ml 蔗糖 10g 琼脂 12~15g 葡萄糖 1g 水 1000ml 氯化钠 5g ( 2 )制法 除乳糖、蔗糖、葡萄糖、指示液、琼脂外,取上述成分,混合,加热使溶解,调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ,加入琼脂,加热溶胀后,再加入其余成分,摇匀,分装,121 ℃ 灭菌15 分钟,制成高底层(2 ~3cm ) 短斜面。( 3 )用途 用于初步鉴别肠杆菌科细菌对糖类的发酵反应和产生硫化氢试验。 方法和结果观察:取可疑菌落或斜面培养物,做高层穿刺和斜面划线接种,置35 ℃ 培养24~ 48 小时,观察结果。培养基底层变黄色为葡萄糖发酵阳性,斜面层变黄色为乳糖、蔗糖发酵阳性;底层或整个培养基呈黑色表示产生硫化氢。

  • KF链球菌琼脂培养基的灭菌

    KF链球菌琼脂培养基[img]http://img.foodmate.net/bbs/static/image/smiley/default/cry.gif[/img] 称取本品71.5g加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸溶解,勿高压灭菌,冷至50度左右,倾注无菌培养皿.那么请教各位大侠那这个培养基如何灭菌,是否可以直接将过滤好的滤膜放入培养基中培养.

  • 70.1 高效液相色谱法测定人肝微粒体中帕洛诺司琼的浓度

    70.1  高效液相色谱法测定人肝微粒体中帕洛诺司琼的浓度

    【作者】:赵娜萍, 余露山, 姚彤炜, 曾苏【摘要】:目的研究帕洛诺司琼的体外代谢,建立人肝微粒体中帕洛诺司琼的反相高效液相色谱测定法。方法帕洛诺司琼与人肝微粒体共孵育之后用乙醚提取,采用地非三唑为内标,以DiamonsilC18柱(4.6mm×200mm,5μm)为分析柱,0.01μmol.L-1KH2PO4(pH3.0)-甲醇(30∶70)为流动相,流速1.0mL.min-1,紫外检测波长为241nm。结果帕洛诺司琼在1~100μmol.L-1内线性关系良好(r=0.9999,n=5),检测限为0.05μmol.L-1(S/N≥3),定量限为(0.21±0.04)μmol.L-1(n=5)。方法提取回收率和方法回收率平均分别为89.7%和100.0%,日内,日间RSD均10%(n=5)。结论此法简便,准确,可用于研究帕洛诺司琼在人肝微粒体中的代谢。 【作者单位】:浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室; 浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室 杭州310058; 杭州310058;【关键词】:帕洛诺司琼; 高效液相色谱法;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209022110_388001_1838299_3.jpg

  • 【求助】营养琼脂培养基灭菌有部分后长菌?

    上周五灭菌的营养琼脂培养基一周天后一瓶长菌了?咋回事?请教高手帮忙。 我按照厂家说明书上要求配置和灭菌,115℃灭菌30分钟,灭菌完后等待冷凝了,放在4℃的冰箱中,每次微波炉加热熔化后使用都废弃,这几次实验时,偶尔出现异常现象,查找污染原因,稀释剂没问题,最后拿剩下的两瓶未使用的培养基直接培养,其中一瓶长菌了,我真不晓得咋回事? 配制培养基那一周做过菌液配制,但是所有的玻璃容器都灭菌的,除了装营养琼脂培养基的瓶子,觉得只是倒培养基,应该不会被菌种污染,所以没有灭菌。一直配营养琼脂培养基的锥形瓶都是这几个瓶子。一直以来我们都是我按照厂家说明书上要求配置和灭菌,115℃灭菌30分钟,灭菌完后等待冷凝了,放在4℃的冰箱中,都没有发生过培养基长菌。

  • 【分享】琼脂糖凝胶电泳技术

    电泳基本原理 迁移率(或泳动度)是指带电颗粒在单位电场强度下泳动的速度,可用下列公式计算: U =υ/E =(d/t)/(V/l) =dl/Vt U为迁移率(cm2•V-1•min-1);υ为颗粒泳动速度(cm•s-1);E 为电场强度( V•cm-1);d为颗粒泳动的距离(cm);l为滤纸有效长度(cm);V为实际电压(V);t为通电时间(s或min)。通过测量d, l, V, t, 即可计算出被分离物质的迁移率。 1迁移率单位= 10-5 cm2•V-1•min-1在确定的条件下,某物质的迁移率为常数,是该物质的化学特征常数。 颗粒带净电荷多,直径小而接近于球形,则在电场中泳动速度快,反之则泳动速度慢。 迁移率还与分子的形状,介质粘度,颗粒所带电荷有关,迁移率与颗表面电荷成正比,与介质粘度及颗粒半径成反比。 影响琼脂糖电泳迁移的主要因素 电场强度 溶液的pH值 溶液的离子强度 电渗现象 温度的影响 支持物的影响 按分离原理分类: 1.区带电泳 2.移界电泳 3.等速电泳 4.聚焦电泳 按有无固体支持物分类 1. 纸上电泳 2. 醋酸纤维素膜电泳 3. 薄层电泳 4. 非凝胶性支持物区带电泳(支持物有:淀粉、纤维素粉、玻璃粉、硅胶) 5. 凝胶支持区带电泳(淀粉凝胶、聚丙稀酰胺凝胶、琼脂糖凝胶) 影响琼脂糖电泳迁移的主要因素 DNA的大小 DNA的构象 琼脂糖浓度 缓冲液 不同构像质粒 缓冲液 TAE:乙酸盐缓冲液 TBE:硼酸盐缓冲液 TPE:磷酸盐缓冲液 实验操作 1. 用胶带将洗净、干燥的水平板的边缘封住,形成一个胶模并水平放置。 2. 按水平板的长×宽×0.5cm胶厚,量取0.5×TBE,并按0.7%的浓度称取agarose琼脂糖,在微波炉或电炉上加热至全熔(清澈透明)。 3. 等凝胶温度降至大约50-60以下时,加入1 mg/L溴化乙锭(EB)至终浓度为0.5ug/mL ;摇匀并轻快地倒入水平板中,除掉气泡,插入梳子。 4. 凝固后,将梳子轻轻拔出。 5.去掉胶带,将水平板放入加有0.5×TBE电泳缓冲液的电泳槽中,并且使电泳缓冲液高出凝胶约1mm。 6.在parafilm膜上依次加: ddH2O 6ul,上样Buffer 2ul ,DNA 4ul 分别混匀后点样,记录点样次序。 7. 在水平板两边的点样孔中分别加入6 μ l的λΔΝΑ/EcoRI+HindIII marker。 8. 盖好电泳槽盖子,选择适当的电泳电压(≤5V/cm)及电泳方向(DNA阴极阳极),开始电泳。 9. 当色素接近胶的先端,停止电泳,样品在紫外灯下观察、成像℃

  • 【转帖】富人与穷人

    转自http://bar.sina.com.cn/thread.php?tid=2149153962&bid=12330标题:富人和穷人之间十二大经典差异 顶楼 2007-11-30 22:10 作者:219.148.146.* (1)自我认知 穷人:很少想到如何去赚钱和如何才能赚到钱,认为自己一辈子就该是这样,不相信会有什么改变了。 富人:骨子里就深信自己生下来不是要做穷人,而是要做富人,他有强烈的赚钱意识,这也是他血液里的东西,他会想尽一切办法使自己致富。(2)休闲穷人:在家看电视,为肥皂剧的剧情感动得痛苦流涕,还要仿照电视里的时尚来武装自己。富人:在外跑市场,即使打高耳夫球也不忘带者项目合同。(3)交际圈子穷人:喜欢走穷亲戚,穷人的圈子大多是穷人,也排斥与富人交往,久而久之,心态成了穷人的心态,思维成了穷人的思维,做出来的是也就是穷人的模式。大家每天谈论着打折商品,交流着节约技巧,虽然有利于训练生存能利,但你的眼界也就渐渐囿于这样的琐事,而将雄心壮志消磨掉了。富人:最喜欢交那种对自己有帮助,能提升自己各种能力的朋友。不纯粹放任自己仅以个人喜好交朋友。 (4)学习穷人:学手艺;富人:学管理。(5)时间穷人:一个享受充裕时间的人不可能赚大钱,要想悠闲轻松就会失去更多赚钱的机会。穷人的时间是不值钱的,有时甚至多余,不知道怎么打发,怎么混起来不烦。如果你可以因为买一斤白菜多花了一分钱而气恼不已,却不为虚度一天而心痛,这就是典型的穷人思维。 富人:一个人无论以何种方式赚钱,也无论钱挣得是多还是少,都必须经过时间的积淀。富人的玩也是一种工作方式,是有目的的。富人的闲,闲在身体,修身养性,以利再战,脑袋一刻也没有闲着;穷人的闲,闲在思想,他手脚都在忙,忙着去麻将桌上多摸几把。(6)归属感穷人:是颗螺丝钉。穷人以为出身卑微,缺少安全感,就迫切地希望自己从属于并依赖于一个团体,于是他们以这个团体的标准为自己的标准,让自己的一切合乎规范,为团体的利益而工作,奔波,甚至迁徙。对于穷人来说,在一个著名的企业里稳定的工作几十年,由实习生一直干到高级主管,那简直是美得不能在美的理想。 富人:那些团体的领导者通常都是富人,他们总是一方面向穷人灌输:团结就是力量,如果你不从属于自己的团体,你就什么都不是,一名不文。但另一方面,他们却从来没有停止过招兵买马,培养新人,以便随时可以把你替换掉(7)投资及对待财富穷人:经济观点就是少用等于多赚,比如开一家面馆。收益率是100%,投入2万,一年就净赚2万,对于穷人来说很不错了。穷人即使有钱,也舍不得拿出来,即使终于下定决心投资,也不愿意冒风险,最终还是走不出那一步。穷人最津津乐道的就是鸡生蛋,蛋生鸡,一本万利……但是建筑在一只母鸡身上的希望,毕竟是那样的脆弱。 富人:富人的出发点是万本万利。同样的开面馆,富人们会想,一家面馆承载的资本只有2万,如果有一亿资金,岂不是要开5000家面馆?要一个一个管理好,大老板得操多少心,累白多少根头发呀?还不如投资宾馆,一个宾馆就足以消化全部的资本,哪怕收益率只有20%,一年下来也有2000万利润啊。(8)激情。能不能干成事,首先要看有没有激情。穷人:没有激情。他总是按部就班,很难出大错,也绝对不会做到最好。没有激情就无法兴奋,就不可能全心全意投入工作。大部分的穷人不能说没有激情,看他的激情总是消耗在太具体的事情上:上司表扬了,他会激动;商店打折,他会激动;电视里破镜重圆了,他的眼泪一传一串往下流,穷人有的只是一种情绪。 富人:“燕雀安知鸿鹄之志?““王侯将相,宁有种乎?“有这样的激情,穷人终将不是穷人!激情是一种天性,是生命力的象征,有了激情才有了灵感的火花,才有了鲜明的个性,才有了人际关系中的强烈感染力,也才有了解决问题的魄力和方法。(9)自信穷人:穷人的自信要通过武装到牙齿,要通过一身高级名牌的穿戴和豪华的配置才能给他们带来更多的自信,穷人的自信往往不是发自内心和自然天成的。富人:李嘉成在谈到他的经营秘诀时说:“其实也没什么特别的,光景好时,决不过分乐观;光景不好时,也不过度悲观。其实就是一种富人特有的自信。自信才能不被外力所左右,自信才可能有正确的决定。(10)习惯穷人:有个故事,一个富人送给穷人一头牛。穷人满怀希望开始奋斗。可牛要吃草,人要吃饭,日子难过。穷人于是把牛卖了,买了几只羊,吃了一只,剩下来的用来生小羊。可小羊迟迟没有生出来,日子有艰难了。穷人把羊卖了,买成了鸡,想让鸡生蛋赚钱为生,但是日子并没有改变,最后穷人把鸡也杀了,穷人的理想彻底崩溃了,这就是穷人的习惯。富人:根据一个投资专家说,富人成功的秘诀就是:没钱时,不管多困难,也不要动用投资和储蓄,压力会使你找到赚钱的新方法,帮你还清帐单。这是个好习惯。性格决定了习惯,习惯决定了成功。(11)上网穷人:去网上聊天,穷人的嘴天生就不能闲着。富人讲究荣辱不惊,温柔敦厚,那叫涵养,有涵养才能数大根深。穷人就顾不了那么多,成天受着别人的白眼,浑身沾满了鸡毛蒜皮,多少窝囊气啊,说说都不行?聊天有理!富人:上网找投资机会。富人上网,更多的是利用网络的低成本高效率,寻找更多的投资机会和项目,把便利运用到自己的生意中来。(12)消费花钱穷人:买名牌是为了体验满足感,最喜欢试验刚出来的流行时尚产品,相信贵的必然是好的。富人:买名牌是为了节省挑选细节的时间,与消费品的售价相比,他们更在乎产品的质量,比如会买15元的纯棉t恤,也不会买昂贵的莱卡制品。

  • 免疫沉淀反应(二)——琼脂扩散实验

    琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时,便出现可见的白色沉淀线。这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时,便依各自扩散速度的差异,在适当部位形成独立的沉淀线,因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散实验可根据抗原抗体反应的方式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、单向及双向火箭电泳实验。一、单向琼脂扩散实验1. 材料(1)诊断血清(抗体:抗人IgG或IgA免疫血清)(2)待检血清(抗原):人血清http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1361084631_small.jpg (3)参考血清:全国统一人血清免疫球蛋白参考血清(批号不同,免疫球蛋白含量不同)。(4)其它:生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。2. 方法(1)将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。(2)在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5 cm)打孔,见图1。(3)向孔内滴加1:2,1:4,1:8,1:16,1:32稀释的参考血清及1:10稀释的待检血清,每孔10 μl,此时加入的抗原液面应与琼脂板一平,不得外溢。(4)已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。(5)测定各孔形成的沉淀环直径(mm),用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线,再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。二、双向琼脂扩散实验1. 材料(1)诊断血清:兔抗人血清(2)待测血清:人血清(3)阴性对照血清(4)其它:生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等。2. 方法(1)取一清洁载玻片,倾注3.5~4.0 ml 加热熔化的1%食盐琼脂制成琼脂板。(2)凝固后,用直径3 mm 打孔器,孔间距为5 mm。孔的排列方式如图2所示。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084537_small.jpg(3)用微量进样器于中央孔加抗体,于周围孔加各种抗原。加样时勿使样品外溢或在边缘残存小气泡,以免影响扩散结果。(4)加样后的琼脂板收入湿盒内置37℃温箱中扩散24~48小时。(5)结果观察:若凝胶中抗原抗体是特异性的,则形成抗原—抗体复合物,在两孔之间出现一清晰致密白色的沉淀线,为阳性反应。若在72小时仍未出现沉淀线则为阴性反应。实验时至少要做一阳性对照。出现阳性对照与被检样品的沉淀线发生融合,才能确定待检样品为真正阳性。(6)结果分析:琼脂扩散结果受许多因素影响。①抗原特异性与沉淀线形状的关系:在相邻两完全相同的抗原与抗体反应时,则可出现两单沉淀线的融合。反之,如相邻抗原完全不同时,则出现沉淀线之交叉;两种抗原部分相同时,则出现沉淀线的部分融合。见图3。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084538_small.jpg②抗原浓度与沉淀先导形状的关系:两相邻抗原浓度相同,形成对称相融合的沉淀线;如果两抗原浓度不同,则沉淀线不对称,移向低浓度的一边。见图4。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084539_small.jpg③温度对沉淀线的影响:在一定范围内,温度扩散快。通常反应在0~37℃下进行。在双向扩散时,为了减少沉淀线变形并保持其清晰度,可在37℃下形成沉淀线,然后置于室温或冰箱(4℃)中为佳。④琼脂浓度对沉淀线形成速度的影响:一般来说,琼脂浓度越大,沉淀线出现越慢。⑤参加扩散的抗原与抗体间的距离对沉淀线形成的影响:抗原、抗体相距越远,沉淀线形成的越慢,所以在微量玻片法时,孔间距离以0.25~0.5 cm 为好,距离远影响反应速度。当然孔距过远,沉淀线的密度过大,容易发生融合,有碍对沉淀线数目的确定。⑥时间对沉淀线的影响:沉淀线形成一般在1~3天出现,14~21天出现的数目最多。玻片法可在1~2小时出现,一般观察72小时,放量过久可出现沉淀线重合消失。

  • 【资料】卫生部关于《食品添加剂琼脂(琼胶)》等97项食品安全国家标准的公告(2010年 第19号)

    卫生部关于《食品添加剂琼脂(琼胶)》等97项食品安全国家标准的公告(2010年 第19号) 根据《中华人民共和国食品安全法》和《食品安全国家标准管理办法》的规定,经食品安全国家标准审评委员会审查,现发布《食品添加剂琼脂(琼胶)》(GB1975-2010)等97项食品安全国家标准。其编号和名称如下:GB 1975-2010食品添加剂 琼脂(琼胶)GB 1900-2010食品添加剂 二丁基羟基甲苯(BHT)GB 3150-2010食品添加剂 硫磺GB 4479.1-2010食品添加剂 苋菜红GB 4481.1-2010食品添加剂 柠檬黄GB 4481.2-2010食品添加剂 柠檬黄铝色淀GB 6227.1-2010食品添加剂 日落黄GB 7912-2010食品添加剂 栀子黄GB 8820-2010食品添加剂 葡萄糖酸锌GB 8821-2010食品添加剂 β-胡萝卜素GB 12487-2010食品添加剂 乙基麦芽酚GB 12489-2010食品添加剂 吗啉脂肪酸盐果蜡GB 13481-2010食品添加剂 山梨醇酐单硬脂酸酯(司盘60)GB 13482-2010食品添加剂 山梨醇酐单油酸酯(司盘80)GB 14750-2010食品添加剂 维生素AGB 14751-2010食品添加剂 维生素B1(盐酸硫胺)GB 14752-2010食品添加剂 维生素B2(核黄素)GB 14753-2010食品添加剂 维生素B6(盐酸吡哆醇)GB 14754-2010食品添加剂 维生素C(抗坏血酸)GB 14755-2010食品添加剂 维生素D2(麦角钙化醇)GB 14756-2010食品添加剂 维生素E(dl-α-醋酸生育酚)GB 14757-2010食品添加剂 烟酸GB 14758-2010食品添加剂 咖啡因GB 14759-2010食品添加剂 牛磺酸GB 14888.1-2010食品添加剂 新红GB 14888.2-2010食品添加剂 新红铝色淀GB 15570-2010食品添加剂 叶酸GB 15571-2010食品添加剂 葡萄糖酸钙GB 17512.1-2010食品添加剂 赤藓红GB 17512.2-2010食品添加剂 赤藓红铝色淀GB 17779-2010食品添加剂 L-苏糖酸钙GB 25531-2010食品添加剂 三氯蔗糖GB 25532-2010食品添加剂 纳他霉素GB 25533-2010食品添加剂 果胶GB 25534-2010食品添加剂 红米红GB 25535-2010食品添加剂 结冷胶GB 25536-2010[td=1,1,30

  • 【求助】琼脂糖凝胶用途

    [em09511]请问各位,琼脂糖凝胶在什么地方运用比较多啊?我们公司自主研发了琼脂糖系列凝胶。有谁需要试用的吗?我可以提供样品。

  • 菌落琼脂的问题

    菌落培养平板计数琼脂灭菌后,为什么是深红色,跟以前不一样颜色?琼脂也没有过期,灭菌是121℃,20分钟。问题出在哪里,这样的琼脂还能用吗?

  • 【求助】琼脂的质量

    [size=5]亚硫酸铋琼脂和胆硫乳琼脂倒入平板凝固后,总是有很多杂志,是不是琼脂出现了问题还是本身就是这样。谢谢[/size]

  • 向你介绍琼瑶浆葡萄

    琼瑶浆果皮呈诱人的粉红色,其名字中“Gewurz”一词在德语中是香料的意思,果然葡萄如其名,琼瑶浆正是一个拥有馥郁芳香的品种,其精致的玫瑰花香、浓郁的荔枝风味以及甜美的香料气息让人印象深刻。阿尔萨斯是世界上最适合种植琼瑶浆的产区之一。这里出产的琼瑶浆酒体饱满,尤其是使用产自阿尔萨斯特级葡萄园级(Alsace Grand Cru)的葡萄所酿造的琼瑶浆,更是被视作最具代表性的琼瑶浆。阿尔萨斯的琼瑶浆覆盖了包括干型、近乎干型、晚采收和粒选贵腐葡萄酒在内的各种类型。风味描述:所酿葡萄酒具有非常浓郁的荔枝和玫瑰花瓣的香气。代表产地:法国,阿尔萨斯。

  • 16.9 盐酸雷莫司琼中有关物质测定方法的建立

    16.9 盐酸雷莫司琼中有关物质测定方法的建立

    盐酸雷莫司琼中有关物质测定方法的建立上官盈盈1,施菁1,胡秀爱2(1.浙江医学高等专科学校,杭州310053;2.杭州德生医药技术开发有限公司,杭州310014)摘要:目的建立使用HPLC测定盐酸雷莫司琼原料中有关物质和右旋体的检测和控制方法。方法采用Diamonsil C18。色谱柱(4.6 nnn×250 mm,5斗m),以乙腈一O.05 tool·L“磷酸盐缓冲液(pH 5.2)(30:70)为流动相,流速为1.0 mL·min~,检测波长为210舢,测定盐酸雷莫司琼原料中有关物质;采用CHIRAL NEA.R(4.6 lnnl×250 mm,5斗m)手性柱,以乙腈_0.05mol·L“磷酸二氢钾溶液(pH 5.2)(50:50)为流动相,流速为1.0 mL·rain~,检测波长为306 nin,检查样品中右旋体的含量。结果盐酸雷莫司琼与合成反应中的4个重要中间体,能够得到有效分离,控制总杂质不超过1.O%。舅(+)和R一(一)盐酸雷莫司琼的保留时间分别为lO.2和8.9 rain,分离度大于2.5。结论上述方法准确、简便、专属,适用于盐酸雷莫司琼中有关物质及右旋体检查。关键词:高效液相色谱法;盐酸雷莫司琼;有关物质;手性;异构体http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207241330_379373_2355529_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207241330_379374_2355529_3.jpg

  • 【分享】关于对琼菜系列地方标准征求意见的函

    各有关单位: 为了保持和发展琼菜菜系的传统品质,规范琼菜菜肴的选材和制作,挖掘整理海南源远流长的餐饮文化,提高海南特色名产的美誉度,我局根据海南省商务厅、海南省琼菜研究中心提出的地方标准制定项目建议,于今年4月下达了《琼菜 白切文昌鸡》、《琼菜 白切嘉积鸭》、《琼菜 白汁东山羊》、《琼菜 烤临高乳猪》4项地方标准制定工作计划,目前,省烹饪协会、省琼菜研究中心等单位已完成了地方标准的调研、起草、讨论、修改等前期工作。按照《海南省地方标准制定工作程序》的要求,该地方标准进入征求意见阶段。现将上述4项琼菜系列地方标准的征求意见稿和《海南省琼菜系列地方标准征求意见表》(见附件)一并印发给你们,希望能组织人员进行讨论和提出修改意见,请在2010年10月15日前将《海南省琼菜系列地方标准征求意见表》邮寄或传真到海南省烹饪协会(以单位名义反馈意见请在表格下方加盖公章,个人反馈意见请亲笔签名),逾期没有反馈意见的单位或个人,将视为无意见。海南省烹饪协会联系人:林俊春、唐人志,联系电话和传真:65371654,通讯地址:海口市海府路6号608室,邮政编码:570203。附件:1.地方标准《琼菜 白切文昌鸡》(征求意见稿) 2.地方标准《琼菜 白切嘉积鸭》(征求意见稿) 3.地方标准《琼菜 白汁东山羊》(征求意见稿) 4.地方标准《琼菜 烤临高乳猪》(征求意见稿) 5. 海南省琼菜系列地方标准征求意见表 二〇一〇年九月九日[b]附件:[img]http://down.foodmate.net/u/info_img/2010-09/29/attach.gif[/img][/b] [url=http://qtsb.hainan.gov.cn/v2/download.php?id=650&hash=ec9fd604e2eef1d67e0c9f579537d4ab6794aa64][color=#2c4c78]海南省质量技术监督局关于对琼菜系列地方标准征求意见的函.doc[/color][/url][color=#2c4c78][img]http://down.foodmate.net/u/info_img/2010-09/29/attach.gif[/img][/color] [url=http://qtsb.hainan.gov.cn/v2/download.php?id=651&hash=5e490dba7007e0fbe06c9d79eb2900ebaa5458b7][color=#2c4c78]琼菜_文昌鸡.pdf[/color][/url][color=#2c4c78][img]http://down.foodmate.net/u/info_img/2010-09/29/attach.gif[/img][/color] [url=http://qtsb.hainan.gov.cn/v2/download.php?id=652&hash=61b350d621e867020b33c26d1f26c48ea6a228b2][color=#2c4c78]琼菜_嘉积鸭.pdf[/color][/url][color=#2c4c78][img]http://down.foodmate.net/u/info_img/2010-09/29/attach.gif[/img][/color] [url=http://qtsb.hainan.gov.cn/v2/download.php?id=653&hash=0d6124a102ed1531d53539c010278112a2195a82][color=#2c4c78]琼菜_东山羊.pdf[/color][/url][color=#2c4c78][img]http://down.foodmate.net/u/info_img/2010-09/29/attach.gif[/img][/color] [url=http://qtsb.hainan.gov.cn/v2/download.php?id=654&hash=030b645accfa45de2551610a18561051af1ab6ec][color=#2c4c78]琼菜_临高乳猪.pdf[/color][/url]

  • S.S琼脂

    S.S琼脂,属()培养基。 A、营养 B、鉴别 C、选择 D、基础

  • 出口琼胶微生物超标原因分析及生产车间空间环境消毒方案

    琼胶是由石花菜及其他数种红藻类植物中浸出并经脱水干燥的黏[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url],又名琼脂。由于其十分稳定的特性,在食品行业及组织培养中作为增稠剂、安定剂而得到了广泛应用。琼胶的制造原料来源于天然藻类,在国际市场上倍受青睐。在高速发展的同时也出现了问题,在出口琼胶中分离到一株短芽胞杆菌,经研究,证实该菌来源于车间空气中,是出口琼胶细菌超标的主要污染菌。该菌在琼胶中表现出较强的耐热性,采用增大杀菌强度的方法不能有效鳃决污染问题,而改进车间卫生则是一项简便有效的控制技术。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180326/21f9fadc687c4df38f768da6aec8ebc9.jpeg[/img][/align]近年来,随着人们对食品卫生质量的重视,国际上对琼胶的质量的卫生质量也提出了十分严格的要求,以欧美发达国家的要求为例,较之国家标准Cm975---19SO(食品添加剂琼胶》,就新增了多项微生物学指标,即:菌落总数≤1000个/g,大肠杆菌lg中不得检出,沙门氏菌25g中不得检出,霉菌和酵母菌≤300个/g。目前我国琼胶存在的主要卫生质量问题是细菌污染超标,一般产品中的细菌数通常在1×l01个/g以上,即使是出口加工厂也很难控制在1000个/g以内,由于细菌污染问题一直未能得到研究解决,我国琼胶的出口市场一直局限在日、韩等国,很难进一步拓展。在对琼胶生产流程进行取样检测的基础上,济南辰宇环保科技有限公司研究出引起琼胶细菌超标的原因,分析了琼胶卫生质量控制的关键点,通过改进生产工艺,提高了产品的卫生质量,并使之符合出口要求。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180326/ba51c82497d447b18d36560c25fc007b.jpeg[/img][/align]在生产流程细菌污染的检测可以看出,琼胶中细菌总数的有一定的变化规律。先是在晾干过程中,细菌总数有个突增高峰,过程首尾相差46倍,经烘干后,菌数减少了90%以上,再经过粉碎后,细菌数进一步下降,但是在过筛包装后,细菌数又突然大幅上升,达6.6×103远远超过国际上的卫生要求。琼胶经过泡碱、蒸胶等工艺处理后,其中的营养物质极少,细菌不可能利用它在数个小时内达到数个世代的增殖量,因此琼胶中的细菌污染显然是以外界的沾染为主。从菌相分析结果来看,琼胶中的主要污染菌与车间空气中的优势菌群是一致的,车间空气中的细菌总数远远超过了国家标准规定的室内空气的卫生要求即45cfu/皿,甚至已达到了轻污染的程度,因此可以判定琼胶的细菌污染主要来自于车间空气。由此将车间空气和烘干程序确定为琼胶卫生质量控制的关键点。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180326/e121b500d0ae4dad813d9a7467656ee5.jpeg[/img][/align]在原有生产环境条件下,无论是采用105℃保温60min还是采用105℃保温120min的烘干程序,最后成品的细菌数均超过1000个/g,不能满足出口要求。而当采用121℃保温60min的工艺时,虽然琼胶的卫生质量能达到要求,但其凝胶强度和色泽却又达不到等级。因此不宜通过改变烘于程序来达到有效控制污染的目的,而当用奥克泰士消毒剂进行消毒这一环节后,发现车间空气已完全达到清洁空气标准(29cfu/皿),琼胶各项指标均达到出口要求。可见环境卫生质量对产品的品质和卫生质量都起着十分重要的作用。采用奥克泰士消毒在相对密封的环境下,扩散均匀,包容性、通透性好,克服了紫外线杀菌存在的消毒死角的问题,达到全方位、快速、高效的消毒杀菌目的。另外,由于它的灭菌广谱性,既可以杀灭细菌繁殖体、芽胞、病毒、真菌和原虫孢体等多种微生物,还可以破坏肉毒杆菌和毒素及立克次氏体等,同时还具有很强的除霉、腥、臭等异味的功能。因而更能有效杀灭芽胞菌,从而使车间卫生状况更好,产品的卫生质量更可靠,因此本文把奥克泰士当作最终选取的控制污染的技术条件。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180326/185d96aac7454ac3b0528edd446c3f61.jpeg[/img][/align]BUDICH国际有限公司总部位于德国,1882年成立,创建至今已拥有130多年的传承,专业从事空间环境消毒事业,具备卓越的设计研发能力和世界领先的生产制造工艺,经过多年研发,研制出奥克泰士。该杀菌溶液的名称是oxytech杀菌溶液,是一款食品级高浓缩型杀菌消毒产品,在欧盟已注册商标,并获得多个国际权威机构的认证。如ISO9001、ISO14001管理体系认证,IFS食品检测认证,欧盟EMAS检测认证德国莱茵TUV检测认证等。奥克泰士是目前国际上公认的高效、广谱、快速、安全、无残留、不污染环境的杀菌消毒剂。它对人无害,无致癌、致畸、致突变性,是一种安全可靠的消毒剂。产品的主要成分是过氧化氢银离子,是一款高效广谱的生产车间空间专用消毒杀菌剂,能够高效杀灭空气环境中的细菌孢子、真菌孢子、放射菌、分支杆菌、酵母菌、霉菌、病毒在内的所有类型的微生物,彻底解决因生产车间空间环境微生物污染所面临的困扰。所采用的氧化剂为过氧化物,它与稳定剂结合形成复合溶液。作为催化剂添加的痕量银离子可以保持长久的效用。银离子的杀菌作用是基于单价银离子通过共价键和配位键来与细菌蛋白质牢固结合,从而使细菌钝化或沉淀。奥克泰士是过氧化氢银离子的复合物,在生产中的优势逐渐凸显,相对普通消毒清洗剂,克服了后者不稳定、对光和热敏感易分解、保存期短的缺点,奥克泰士采用了食品级的过氧化氢、银离子两种普通的消毒剂成分通过科学配比和特殊工艺混合在一起,产生协同作用后,效果是各自单独使用时杀菌效果的50~100倍,在生产车间空间环境消毒中与细菌、病毒等微生物发生反应后的产物是水和氧气,不产生有害残留,安全环保。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180326/7be902c6d3ee4cc1911cdd52d61c989d.jpeg[/img][/align]解决细菌污染的常用手段是加大杀菌强度,在琼胶车间环境条件较差的情况下,即使延长105℃的保温杀菌时间,也不能控制细菌超标问题,而采用121~C的高温烘干程序,虽然能保证细菌不超标,但却降低了产品的其他指标,失去应有的商业价值。所以最有效最简便的方法还是改进车间的环境卫生,这也是HACCP体系和GNP规程中的一项基本要求。通过奥克泰士空间微生物的控制技术,琼胶的卫生质量和品质质量均超过了出口要求,最终取得了进入欧美发达国家的通行证。招商合作:济南辰宇环保科技有限公司诚招全国各行业合作商!德国130年精工企业专注环保杀菌消毒剂的生产与研发,解决各行业生产企业有害物生物困扰,提供具体行业使用方案。诚邀各行业领袖,科研机构,企业单位参与方案制定与产品研发。期待您的来电。

  • 大家还是用营养琼脂吗??

    菌落总数测定中,GB4789.1-2010版本中的平板计数琼脂培养基和过去2003版中的营养琼脂对菌落计数有什么区别?营养琼脂还能用吗?虽然我做过对比,感觉差异不大,但是还需要大家讨论的结果哦!

  • 免疫沉淀反应(二)——琼脂扩散实验

    琼脂扩散是抗原抗体在凝胶中所呈现的一种沉淀反应。抗体在含有电解质的琼脂凝胶中相遇时,便出现可见的白色沉淀线。这种沉淀线是一组抗原抗体的特异性复合物。如果凝胶中有多种不同抗原抗体存在时,便依各自扩散速度的差异,在适当部位形成独立的沉淀线,因此广泛地用于抗原成分的分析。琼脂扩散实验可根据抗原抗体反应的方式和特性分为单向免疫扩散、双向免疫扩散、免疫电泳、对流免疫电泳、单向及双向火箭电泳实验。一、单向琼脂扩散实验1. 材料(1)诊断血清(抗体:抗人IgG或IgA免疫血清)(2)待检血清(抗原):人血清http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/B1361084631_small.jpg (3)参考血清:全国统一人血清免疫球蛋白参考血清(批号不同,免疫球蛋白含量不同)。(4)其它:生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。2. 方法(1)将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。(2)在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5 cm)打孔,见图1。(3)向孔内滴加1:2,1:4,1:8,1:16,1:32稀释的参考血清及1:10稀释的待检血清,每孔10 μl,此时加入的抗原液面应与琼脂板一平,不得外溢。(4)已经加样的免疫琼脂板置湿盒中37℃温箱扩散24小时。(5)测定各孔形成的沉淀环直径(mm),用参考血清各稀释度测定值绘出标准曲线,再由标准曲线查出被检血清中免疫球蛋白的含量。二、双向琼脂扩散实验1. 材料(1)诊断血清:兔抗人血清(2)待测血清:人血清(3)阴性对照血清(4)其它:生理盐水、琼脂粉、载玻片、打孔器、微量进样器等。2. 方法(1)取一清洁载玻片,倾注3.5~4.0 ml 加热熔化的1%食盐琼脂制成琼脂板。(2)凝固后,用直径3 mm 打孔器,孔间距为5 mm。孔的排列方式如图2所示。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084537_small.jpg(3)用微量进样器于中央孔加抗体,于周围孔加各种抗原。加样时勿使样品外溢或在边缘残存小气泡,以免影响扩散结果。(4)加样后的琼脂板收入湿盒内置37℃温箱中扩散24~48小时。(5)结果观察:若凝胶中抗原抗体是特异性的,则形成抗原—抗体复合物,在两孔之间出现一清晰致密白色的沉淀线,为阳性反应。若在72小时仍未出现沉淀线则为阴性反应。实验时至少要做一阳性对照。出现阳性对照与被检样品的沉淀线发生融合,才能确定待检样品为真正阳性。(6)结果分析:琼脂扩散结果受许多因素影响。①抗原特异性与沉淀线形状的关系:在相邻两完全相同的抗原与抗体反应时,则可出现两单沉淀线的融合。反之,如相邻抗原完全不同时,则出现沉淀线之交叉;两种抗原部分相同时,则出现沉淀线的部分融合。见图3。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084538_small.jpg②抗原浓度与沉淀先导形状的关系:两相邻抗原浓度相同,形成对称相融合的沉淀线;如果两抗原浓度不同,则沉淀线不对称,移向低浓度的一边。见图4。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/02/A1361084539_small.jpg③温度对沉淀线的影响:在一定范围内,温度扩散快。通常反应在0~37℃下进行。在双向扩散时,为了减少沉淀线变形并保持其清晰度,可在37℃下形成沉淀线,然后置于室温或冰箱(4℃)中为佳。④琼脂浓度对沉淀线形成速度的影响:一般来说,琼脂浓度越大,沉淀线出现越慢。⑤参加扩散的抗原与抗体间的距离对沉淀线形成的影响:抗原、抗体相距越远,沉淀线形成的越慢,所以在微量玻片法时,孔间距离以0.25~0.5 cm 为好,距离远影响反应速度。当然孔距过远,沉淀线的密度过大,容易发生融合,有碍对沉淀线数目的确定。⑥时间对沉淀线的影响:沉淀线形成一般在1~3天出现,14~21天出现的数目最多。玻片法可在1~2小时出现,一般观察72小时,放量过久可出现沉淀线重合消失。

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