高效液相色谱法检测蜜饯中甜蜜素实验方法
一、实验目的1.检测蜜饯中的甜蜜素含量2.验证并重现文献中关于甜蜜素检测的方法,并有针对性的作出改进。二、实验原理在酸性的介质中,甜蜜素经次氯酸钠溶液衍生,正己烷反相萃取衍生物N,N-二氯环己胺,在314nm波长下有最大吸收。三、实验材料、试剂耗材及仪器设备1.实验材料某品牌珍珠梅2.试剂耗材2.1甜蜜素标准品乙腈(国药色谱纯);超纯水(自制);硫酸(优级纯);次氯酸钠(有效氯含量超过5%);正己烷(色谱纯);针式过滤器(有机系和无机系)2.2 工作液2.2.1甜蜜素母液:精确称取1.0000g甜蜜素标准品,置于100ml容量瓶中加水定容,配制成10.00mg/ml的母液2.2.2 硫酸溶液(1:1):取10ml超纯水于50ml烧杯中,另量取10ml浓硫酸小心加入到水中,边加边搅拌,待温度降至室温后使用。2.2.3 甜蜜素工作液:取甜蜜素母液,分别用水稀释成0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00mg/ml的标准工作溶液。3.仪器设备安徽皖仪LC3100梯度系统高效液相色谱仪(可变波长紫外检测器);超纯水机(安徽皖仪);高速离心机;超声波清洗器;漩涡混合器