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聚乙交酯

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聚乙交酯相关的论坛

  • 硅胶有聚四氟乙烯制的吗

    请教专家:骑单车用的纱手套中贴上一块硅胶,是否有可能是100%的聚四氟乙烯制的,如果是,是否属于聚四氯乙烯制的强化过的?

  • 聚氨酯和有机硅胶在防水密封点胶加工中应用

    聚氨酯和有机硅胶在防水密封点胶加工中应用

    [b][font='微软雅黑','sans-serif']聚氨酯[/font][/b][font='微软雅黑','sans-serif']和有机硅胶在[b]防水密封点胶加工[/b]中应用[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]如今防水密封点胶加工应用还是比较广泛的,防水密封点胶加工中所用的材料也是多种不同的防水密封胶,本文就聚氨酯和有机硅胶做一个简单的对比。[/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]防水密封点胶加工用聚氨酯:[/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]优点:聚氨酯灌封胶具有较为优异的耐低温性能,材质稍软,对一般需要灌封的材质都具备很好的粘结性,粘结力在环氧树脂与有机硅之间。具备较好的[b]防水防潮、绝缘性[/b]。[/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]缺点:[b]耐高温[/b]能力差且容易起泡,必须采用真空脱泡;防水密封点胶加工后固化的胶体表面不平滑且韧性较差,[b]抗老化能力、抗震[/b]和紫外线都很弱、胶体容易变色。[/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]应用范围:一般应用于发热量不高的电子元器件的防水密封点胶加工。比如变压器、抗流圈、转换器、电容器、线圈、电感器、变阻器、线形发动机、固定转子、电路板、LED、泵等。[/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]防水密封点胶加工用有机硅橡胶:[/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]优点:有机硅橡胶经防水密封点胶加工固化后材质较软,有固体橡胶与硅凝胶这两种不同的形态,能够消除大多数的机械应力并起到减震保护效果。物理化学性质比较稳定,具备较好的耐高低温性,可在-50~200℃范围区间长期工作。优异的耐候性,在室外长达20年以上仍能起到较好的保护作用,而且不易黄变。具有很好的的电气性能和[b]绝缘[/b]能力,防水密封点胶加工后有效提高内部元件以及线路之间的绝缘,提高电子元器件的使用稳定性。具有的返修能力,可快捷方便地将密封后的元器件取出修理和更换。[/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]缺点:粘结性能稍差。[/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]应用范围:适合防水密封点胶加工各种在恶劣环境下工作以及高端精密/敏感电子器件。如LED、显示屏、光伏材料、二极管、半导体器件、继电器、传感器、汽车安定器HIV、车载电脑ECU等,主要起[b]绝缘、防潮、防尘、减震[/b]作用。[/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=#1A1A1A]从上面可以看出,随着当今电子科技的大跨步式的发展与进步,由于具备有机硅橡胶在防水密封点胶加工上诸多很好的性能,有机硅橡胶将无疑成为防水密封点胶加工中一个很好的的点胶加工材料。[/color][/font][img=,690,380]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/05/202105120939417195_5763_4017671_3.jpg!w690x380.jpg[/img][font='微软雅黑','sans-serif'] [/font]

  • 活性硅酸聚合中顶置搅拌器的应用

    活性硅酸是制备硅酸助凝剂及新型含金属离子的聚硅酸系无机高分子絮凝剂的重要原料, 活性硅酸的聚合速度受搅拌速度的影响显著。有实验证明采用激光光散射、浊度、黏度等多种表征方法对活性硅酸在聚合过程中的形态变化进行了监测及表征, 结果表明: 搅拌速度越快, 硅酸的聚合速度越快, 但形成的有效粒径反而越小; 选择在静置条件下制备活性硅酸, 有利于形成高分子量、高黏度、高浊度的聚硅酸, 更有利于聚硅酸吸附架桥作用的发挥, 这为制备高效混凝剂提供了实验依据。 众所周知, 在化学实验中经常以搅拌来加速某个化学反应速度, 因为搅拌可以使反应物粒子之间发生更多有效的碰撞从而加速整个反应的进程。然而在硅酸聚合这一复杂过程中, 搅拌所起的作用将不同于一般化学反应过程中所起的作用, 它将起到两方面的作用: 1)破坏单分子硅酸聚合时产生的硅氧烷键, 结果将使硅酸聚合速度显著降低, 从而延长聚硅酸的成冻时间; 2)搅拌将加速单分子硅酸颗粒之间的有效碰撞, 这将加速聚合反应, 缩短聚硅酸的成冻时间。 在活性硅酸聚合实验中,选择一款性能稳定的搅拌器非常重要。目前行业内广泛使用的搅拌器是意大利VELP 生产的顶置式搅拌器。VELP顶置式搅拌器采用防腐蚀材料, 环氧涂层金属结构。VELP顶置式搅拌器搅拌最大粘度可达50000mPa*s。VELP顶置搅拌器有两个清晰、易读的显示器展示当前速度和设定的速度。VELP顶置式搅拌器具备恒速控制,当样品的粘度发生变化,VELP顶置式搅拌器的搅拌速度始终保持恒定。当搅拌器发生错误运行时,系统会阻止操作继续运行,从而确保仪器的安全。

  • 热聚焦,溶剂聚焦、固定相聚焦

    热聚焦、固定相聚焦、容剂聚焦在什么时候可以发生,在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]方法及应用中,溶剂聚焦是指样品在柱头部分或全部冷凝以后,溶剂开始挥发,与溶剂挥发性接近的组分就会浓缩在为挥发的溶剂中,从而产生很窄的初始谱带。热聚焦是指样品在进入柱头冷凝的过程中,由于溶剂先进入色谱柱而导致溶质发生浓缩。看过以后感觉这两个概念好像是一样的,不知道到底有什么区别,请各位老师指点一下。

  • SEM做一高聚物胶体——制样

    该高聚物呈胶体,具有粘性,在制样的过程中用细针挑到导电胶上,由于有粘性,很难定型。然后滴两滴丙酮(溶于丙酮),待丙酮挥发后进行喷金,由于喷金要抽真空,导致样品鼓起,喷金后产生细纹,无法进行SEM本样品需要观察该高聚物不是完全平的,在电镜下观察到凸起,由于喷金产生的细纹干扰导致无法观察,很苦恼求专家给个好的制样方法,还有对喷金时间有什么要求,万分感谢PS:小弟完全新手,感激之情无以言表

  • 单聚焦质谱仪

    通常指质量分析器只有一个扇形磁场的质谱仪,仅对离子进行方向聚焦,带电粒子加速进入磁场后,在洛仑兹力的作用下,运动方向发生偏转,其运动轨迹的曲率半径大小与质荷比有关。根据这个原理,不同质荷比的离子经过磁场因运动曲率半径不同,即可分开,具有相同质荷比和相同初速度的离子,即使以不同的角度进入磁场,经磁场偏转,可以聚焦在一点。也就是说,磁场分析器,对质量有色散作用,对方向有聚焦作用 。这是一种低分辨的仪器。

  • 等电聚焦(最后))

    等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点 一、实验目的 了解等电聚焦的原理。通过蛋白质等电点的测定,掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直管式等电聚焦电泳技术。二、实验原理 等电聚焦(Isoelectric focusing,简称IEF)是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展,已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术已可以分辨等电点(pI)只差0.001pH单位的生物分子。由于其分辨力高,重复性好,样品容量大,操作简便迅速,在生物化学、分子生物学及临床医学研究中得到广泛的应用。 蛋白质分子是典型的两性电解质分子。它在大于其等电点的pH环境中解离成带负电荷的阴离子,向电场的正极泳动,在小于其等电点的pH环境中解离成带正由荷的阳离子,向电场的负极泳动。这种泳动只有在等于其等电点的pH环境中,即蛋白质所带的净电荷为零时才能停止。如果在一个有pH梯度的环境中,对各种不同等电点的蛋白质混合样品进行电泳,则在电场作用下,不管这些蛋白质分子的原始分布如何,各种蛋白质分子将按照它们各自的等电点大小在pH梯度中相对应的位置处进行聚焦,经过一定时间的电泳以后,不同等电点的蛋白质分子便分别聚焦于不同的位置 。这种按等电点的大小,生物分子在pH梯度的某一相应位置上进行聚焦的行为就称为“等电聚焦”。等电聚焦的特点就在于它利用了一种称为两性电解质载体的物质在电场中构成连续的pH梯度,使蛋白质或其他具有两性电解质性质的样品进行聚焦,从而达到分离、测定和鉴定的目的。 两性电解质载体,实际上是许多异构和同系物的混合物,它们是一系列多羧基多氨基脂肪族化合物,分子量在300~1000之间。常用的进口两性电解质为瑞典Pharmacia-LKB公司生产的Ampholine 和Pharmalyte,价格昂贵。国产的有中国军事医学科学院放射医学研究所和上海生化所生产的两性电解质,价格便宜,质量尚佳。两性电解质在直流电场的作用下,能形成一个从正极到负极的pH值逐渐升高的平滑连续的pH梯度。若不同的pH值的两性电解质的含量与pI值的分布越均匀,则pH梯度的线性就越好。对Ampholine两性电解质的要求是缓冲能力强,有良好的导电性,分子量要小,不干扰被分析的样品等。 在聚焦过程中和聚焦结束取消了外加电场后,如保持pH梯度的稳定是极为重要的。为了防止扩散,稳定pH梯度,就必须加入一种抗对流和扩散的支持介质,最常用的这种支持介质就是聚丙烯酰胺凝胶。当进行聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳时,凝胶柱内即产生pH梯度,当蛋白质样品电泳到凝胶柱内某一部位,而此部位的pH值正好等于该蛋白质的等电点时,该蛋白质即聚焦形成一条区带,只要测出此区带所处部位的pH值,即为其等电点。电泳时间越长,蛋白质聚焦的区带就越集中,越狭窄,因而提高了分辨率。这是等电聚焦的一大优点,不像一般的其他电泳,电泳时间过长则区带扩散。所以等电聚焦电泳法不仅可以测定等电点,而且能将不同等电点的混合的生物大分子进行分离和鉴定。 早期的等电聚焦电泳是垂直管式的,其特点是体系是封闭的,不与空气接触,可防止样品氧化。近年来,又发展了超薄层水平板式等电聚焦电泳。此法的优点是加样数量多,节省两性电解质,电泳后固定、染色、干燥都十分迅速简便,其最大优点是防止了电极液的电渗作用而引起正负两极pH梯度的漂变。 测定pH梯度的方法有四种: 1. 将胶条切成小块,用水浸泡后,用精密pH试纸或进口的细长pH复合电极测定pH值,然后作图。 2. 用表面pH微电极直接测定胶条各部分的pH值,然后作图。3. 用一套已知不同的pI值的蛋白质作为

  • 【求助】求聚氨脂胶粘剂的标准

    最近要用个聚氨脂胶粘剂的标准,中国目前没有专门的胶水标准,化工部有个聚脂聚氨脂胶水的通则,但是用处不大,不知道大家有没有相关的标准,国外的标准,各地的标准,企业标准都可以.谢谢了

  • 聚四氟乙烯砝码 胶囊脆碎度砝码 聚四氟乙烯砝码 胶囊脆碎度砝

    聚四氟乙烯砝码 胶囊脆碎度砝码 聚四氟乙烯砝码 胶囊脆碎度砝

    聚四氟乙烯 Polytetrafluoroethylene(英文缩写为Teflon或)被称“塑料王”,氟树脂之父罗伊·普朗克特1936 年在美国杜邦公司开始研究氟利昂的代用品,他们收集了部分四氟乙烯储存于钢瓶中,准备第二天进行下一步的实验,可是当第二天打开钢瓶减压阀后,却没有气体溢出,他们以为是漏气,可是将钢瓶称量时,发现钢瓶并没有减重。他们锯开了钢瓶,发现了大量的白色粉末,这是聚四氟乙烯。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205111057_366187_2484303_3.jpg一 产品简介  聚四氟乙烯砝码是一种由聚四氟乙烯材质经过机加工而制成的一种类似称量使用的砝码一样的产品,由国家药典规定其质量,大小,与玻璃管和镊子配合,用来测量药用空心胶囊的脆碎度。二 产品参数  聚四氟乙烯砝码——空心胶囊药典中专用 规格:20g,误差:±0.1g,直径:22mm。   材质:实验级高纯聚四氟乙烯,耐腐蚀,耐高低温,绝缘性,表面不粘。由PTFE挤出材料机加工而成三 产品应用  应用:《中国药典》中,“空心胶囊”产品使用规定。(该装置由一个聚四氟乙烯砝码和一个玻璃管组成,将样品空心胶囊放到玻璃管底部,上部用砝码自由落体砸向空心胶囊,查看其空心胶囊破裂程度)四 使用注意  应使用质量精度及直径符合要求的砝码(规格:20g,误差:±0.1g,直径:22mm),砝码头部需制成与普通称量砝码一样的头,便于操作时镊子对其的夹取。玻璃管应使用20cm玻璃管(定制砝码即可),镊子要求最好是塑料镊子,夹合与砝码头部配合使用五 检测实例  明胶空心胶囊易脆度的检测:  取本品50粒,置表面皿中,移入盛有硝酸镁饱和溶液的干燥器内,置25±1℃恒温24小时,取出,立即分别逐粒放入直立在木板(厚度2cm)上的玻璃管(内径为24mm,长为200mm)内,将圆柱形砝码(材质为聚四氟乙烯,直径为22mm,重20±0.1g)从玻璃管口处自由落下,视胶囊是否破裂,如有破裂,不得超过5粒土豆:资料分享很好,广告就不好了。

  • 【代问】会聚角的计算

    师弟的课题和模拟介孔分子筛有关,说中间需要一个拍摄条件下的会聚角,而介孔分子筛拍摄条件的欠焦值一般在-500~-1000nm,这个和平时的高分辨的欠焦值相差太远,所以他就去一个英文论坛上问了一下,有人说需要拍在拍摄条件下(欠焦值较大)的灯丝像(LaB6的十字像),从而能计算出当时的会聚角。可是即使我是新换的灯丝,得到灯丝像调节时有很大的参数调变,而且这个调变并没有很严格的量可以遵循,请问这种用灯丝像来推断会聚角的说法合理吗?

  • 胶黏剂-丙烯酸酯聚合物标准

    根据GBT--13553-1996 胶黏剂分类,丙烯酸酯聚合物的编号是531,分在大类5 合成热塑性材料/小类 5.3丙烯酸酯聚合物类/组别 丙烯酸酯聚合物,是否有这一类产品的相关标准?国标/行标等?谢谢

  • 领导让买台等电聚焦仪器

    领导让买台等电聚焦仪器,价格要求控制在两万以内,性能也别太差了。一直没做过这个项目,不了解都有什么牌子的,是否有国产的?望了解的不啻教导,谢谢了!!!!!

  • 蛋白等电聚焦凝胶电泳技术

    1.原理等电聚焦凝胶电泳是依据蛋白质分子的静电荷或等电点进行分离的技术,等电聚焦中,蛋白质分子在含有载体两性电解质形成的一个连续而稳定的线性pH梯度中电泳。载体两性电解质是脂肪族多氨基多羧酸,在电场中形成正极为酸性,负极为碱性的连续的pH梯度。蛋白质分子在偏离其等电点的pH条件下带有电荷,因此可以在电场中移动;当蛋白质迁移至其等电点位置时,其静电荷数为零,在电场中不再移动,据此将蛋白质分离。 等电聚焦中,只有在凝胶两端给以高电压时,才能获得较好的蛋白质条带分辨率,这就需要非常有效的凝胶冷却系统(否则会导致烧胶),即凝胶同期周围液体之间的热传递效率要高。由于平板胶热传递能力高,并可方便的同时比较多种蛋白质样品,所以平板胶用在等电聚焦上的居多。由于等电聚焦对蛋白质的电荷差异非常敏感,若要好的重复性,制备蛋白样品时一定要小心,要避免任何对蛋白质化学组成和结构的修饰。另外,蛋白质-脂类、蛋白质-蛋白质相互作用可引起电荷改变,进而导致等电点迁移或纹理现象。除非特殊需要研究蛋白质-蛋白质相互作用或者必须保持蛋白质的生物学功能,等电聚焦通常在含有尿素的变性凝胶系统中进行。使用非离子去垢剂也可以提高分辨率。 2.主要仪器、试剂仪器:微型电泳系统、电源、注射器、固定和染色用容器 试剂:丙稀酰胺、双-丙稀酰胺、载体两性电解质、尿素、过硫酸胺、TEMED、TritonX-100、2-巯基乙醇、溴酚蓝、磷酸、氢氧化钠、氯化钾、三氯乙酸、考马斯亮蓝、甲醇、乙酸。 储存液:1)30%(w/v)丙稀酰胺,1%(w/v)双-丙稀酰胺;2)20%Triton X100;3)10%三氯乙酸;4)1%三氯乙酸;5)1%溴酚蓝;6)考马斯亮蓝染色液;7)考马斯亮蓝脱色液;

  • 电子束汇聚角

    请教一下大家,透射电镜的会聚角α一般都会有几个档,那么这每一个档都对应一个确定的会聚角值还是对应一定的范围?通过brightness聚光散光会不会改变电子束的会聚角?都觉得α-1到3对应的都只是一个范围,聚光散光也会对会聚角产生影响?不然怎么叫做会聚电子束打菊池花样,平行电子束获得衍射花样呢?

  • 【资料】-聚焦微波消解

    [b]聚焦微波消解[/b]密封增压微波消解的优点是明.显的。但是,高压消解带来的是复杂的防爆安全装置和可能存在的安全隐患。高压消解的另一个缺点就是取样量不能太大,一般在0.5g以内。针对这些同题,产生了聚焦微波消解技术。该技术将微波聚焦直接瞄准样品进行高效辐射.在常压下对样品进行消解,对安全没有后顾之忧,而且可以一次消解处理多达l0g的有机质样品。专业聚焦微波消解在设计上是通过回流系统来解决在消解过程中元素的挥发损失的。可以选用高沸点的酸来提高消解能力。 从应用上比较,聚焦微波稍解系统相对于密封式微波消解系统有如下优点: ①安全。聚焦微波消解系统在整个操作过程中都不涉及密封式微波消解系统中的压力问题,因此避免了由于压力造成的许多安全隐患。 ⑧非脉冲聚焦微波。各个样品槽通过闭环阀门或门式控制微波的输出,避免了密封式微波消解系统中为解决微波场不均匀的各种措施。非脉冲聚焦。其特征是微波输出功率变化均为持续输出,无脉冲刺激。这更易于控制微波辅助反应,提高消解反应的稳定性和安全性,且有机萃取反应回收率和稳定性也得到改善。 ③白动化操作。密封微波消解中,手工操作试剂较多,当处理不同样品时,同一批次中密封消解只能采用一种方法,会造成样品条件的不一致。而聚焦微波技术实现自动化操作,可以同时实现多达六个样品四种试剂的白动计量添加、自动冷凝回收、自动蒸发浓缩,还可以实现,一机同时多种样品独立程序控制,同时使用六个不同的程序,处理六个不同的样品。 ④石英材料反应容器。密封式微波消解系统中由于采用受温度限制的聚合物材料容器,对不同的溶剂有不间的限制温度,一般不能高于300℃,而聚焦微彼系统采用无高温限制的石英材料反应容器,温度可达450℃ 。因此可根据传统方法选用各种试剂。 ⑤时间。密封式微波消解系统的消解时间略短于聚焦微波系统,但考虑到人工的酸试剂操作时间等因素,加上密封式微波消解系统中的冷却时间,聚焦微波系统整个工作效率并不亚于密封式微波消解系统。另外,聚焦微波系统还有能够随时观察反应情况、冷却快等一系列优点。 聚焦微波消解系统完全自动化的操作,免去了反应前的试剂添加和反应后的蒸发、浓缩、定容步骤。从整体上提高了反应效率,降低了劳动量。聚焦微波消解系统在使用上更安全、灵活,具有广泛的应用前景。当然:在消解极难溶物质时,密封微波系统比聚焦微波系统更胜一筹,其作用是不可能完全被聚焦微波系统所取代的。

  • 毛细管等电聚焦

    最近实验室有人做毛细管等电聚焦,有些问题不解。毛细管等电聚焦中使用的毛细管填充两性电解质,两端插入不同的pH的磷酸和NaOH中,过程是否类似于等速电泳pH梯度形成的过程?在毛细管两端是否需要添加封堵剂?毛细管等电聚焦的过程分为:进样、聚焦和分离三个步骤。不知道大家在进样的时候目标蛋白是如何进样的:是混在两性电解质中进样还是单独气压进样?聚焦过程中marker与样品分别移动到等电点的位置,这个聚焦的程度是如何把握的?还有最后观察到的结果——推出的过程是电压推出还是气压推出的,这个过程有什么不同?

  • 共聚焦激光扫描显微镜的研制

    [b][font='Microsoft YaHei', 宋体, sans-serif]【序号】:1[/font]【作者】:[/b][font=&][size=12px][color=#1c1d1e][b]周一览[/b][/color][/size][/font][font='Microsoft YaHei', 宋体, sans-serif][b][b][/b][/b][/font][font=&]【题名】:[/font][b][b][color=#333333][b][font=&][color=#032d2c][b]共聚焦激光扫描显微镜的研制[/b][/color][/font][/b][/color][/b][/b][font=&]【期刊】:[/font][font=Arial][font=&][size=12px]CNKI[/size][/font][/font][font='Microsoft YaHei', 宋体, sans-serif][color=#545454][b]【链接】:[url=https://link.springer.com/book/10.1007/978-0-387-45524-2]共聚焦激光扫描显微镜的研制 - 中国知网 (cnki.net)[/url][/b][/color][/font]

  • 聚乙烯吡咯烷酮/壳聚糖水凝胶的制备与表征

    【序号】:8【作者】: 陈欣1卢小菊1,2孟鸳1【题名】:聚乙烯吡咯烷酮/壳聚糖水凝胶的制备与表征【期刊】:湖北理工学院学报. 【年、卷、期、起止页码】:2016,32(04)【全文链接】:[url]https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDLAST2016&filename=HSGD201604007&uniplatform=NZKPT&v=Ur3uQPHp3CF41AAdzeLXFbOBIluj4tRQZqNKITVAm6QqBA6_xZS8rXbC1tFdRSdn[/url]

  • 【原创】酵母葡聚糖

    β-葡聚糖的活性结构是由葡萄糖单位组成的多聚糖,它们大多数通过β-1,3结合,这是葡萄糖链连接的方式。它能够活化巨噬细胞、嗜中性白血球等,因此能提高白细胞素、细胞分裂素和特殊抗体的含量,全面刺激机体的免疫系统。那么,机体就有更多的准备去抵抗微生物引起的疾病。β-葡聚糖能使受伤机体的淋巴细胞产生细胞因子(IL-1)的能力迅速恢复正常,有效调节机体免疫机能。大量实验表明,β-葡聚糖可促进体内IgM抗体的产生,以提高体液的免疫能力。这种葡聚糖活化的细胞会激发宿主非专一性防御机制,故应用在肿瘤、感染病和治疗创伤方面深受瞩目。经特殊步骤萃取且不含内毒素的β-1,3-葡聚糖在美国FDA已认定是一种安全的物质,可添加在一般食品,许多报导显示老鼠口服酵母β-1,3-葡聚糖,可增加强腹膜细胞抗菌之吞噬作用。酵母葡聚糖是存在于酵母细胞壁中的一种具有增强免疫力活性的多糖——β-葡聚糖。β-葡聚糖广泛存在于各种真菌和植物,如香菇、灵芝、燕麦中,是它们发挥保健作用的主要功效物质。而酵母葡聚糖的免疫增强活性更强,并具有改善血脂、抗辐射、改善肠道功能的作用。

  • 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点

    一、实验目的了解等电聚焦的原理。通过蛋白质等电点的测定,掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直管式等电聚焦电泳技术。二、实验原理等电聚焦(Isoelectric focusing,简称IEF)是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展,已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术已可以分辨等电点(pI)只差0.001pH单位的生物分子。由于其分辨力高,重复性好,样品容量大,操作简便迅速,在生物化学、分子生物学及临床医学研究中得到广泛的应用。蛋白质分子是典型的两性电解质分子。它在大于其等电点的pH环境中解离成带负电荷的阴离子,向电场的正极泳动,在小于其等电点的pH环境中解离成带正由荷的阳离子,向电场的负极泳动。这种泳动只有在等于其等电点的pH环境中,即蛋白质所带的净电荷为零时才能停止。如果在一个有pH梯度的环境中,对各种不同等电点的蛋白质混合样品进行电泳,则在电场作用下,不管这些蛋白质分子的原始分布如何,各种蛋白质分子将按照它们各自的等电点大小在pH梯度中相对应的位置处进行聚焦,经过一定时间的电泳以后,不同等电点的蛋白质分子便分别聚焦于不同的位置 。这种按等电点的大小,生物分子在pH梯度的某一相应位置上进行聚焦的行为就称为“等电聚焦”。等电聚焦的特点就在于它利用了一种称为两性电解质载体的物质在电场中构成连续的pH梯度,使蛋白质或其他具有两性电解质性质的样品进行聚焦,从而达到分离、测定和鉴定的目的。两性电解质载体,实际上是许多异构和同系物的混合物,它们是一系列多羧基多氨基脂肪族化合物,分子量在300~1000之间。常用的进口两性电解质为瑞典Pharmacia-LKB公司生产的Ampholine 和Pharmalyte,价格昂贵。国产的有中国军事医学科学院放射医学研究所和上海生化所生产的两性电解质,价格便宜,质量尚佳。两性电解质在直流电场的作用下,能形成一个从正极到负极的pH值逐渐升高的平滑连续的pH梯度。若不同的pH值的两性电解质的含量与pI值的分布越均匀,则pH梯度的线性就越好。对Ampholine两性电解质的要求是缓冲能力强,有良好的导电性,分子量要小,不干扰被分析的样品等。在聚焦过程中和聚焦结束取消了外加电场后,如保持pH梯度的稳定是极为重要的。为了防止扩散,稳定pH梯度,就必须加入一种抗对流和扩散的支持介质,最常用的这种支持介质就是聚丙烯酰胺凝胶。当进行聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳时,凝胶柱内即产生pH梯度,当蛋白质样品电泳到凝胶柱内某一部位,而此部位的pH值正好等于该蛋白质的等电点时,该蛋白质即聚焦形成一条区带,只要测出此区带所处部位的pH值,即为其等电点。电泳时间越长,蛋白质聚焦的区带就越集中,越狭窄,因而提高了分辨率。这是等电聚焦的一大优点,不像一般的其他电泳,电泳时间过长则区带扩散。所以等电聚焦电泳法不仅可以测定等电点,而且能将不同等电点的混合的生物大分子进行分离和鉴定。早期的等电聚焦电泳是垂直管式的,其特点是体系是封闭的,不与空气接触,可防止样品氧化。近年来,又发展了超薄层水平板式等电聚焦电泳。此法的优点是加样数量多,节省两性电解质,电泳后固定、染色、干燥都十分迅速简便,其最大优点是防止了电极液的电渗作用而引起正负两极pH梯度的漂变。测定pH梯度的方法有四种:1.将胶条切成小块,用水浸泡后,用精密pH试纸或进口的细长pH复合电极测定pH值,然后作图。2.用表面pH微电极直接测定胶条各部分的pH值,然后作图。3.用一套已知不同的pI值的蛋白质作为标准,测定pH梯度的标准曲线。4.将胶条于-70℃冰冻后切成1mm的薄片,加入0.5ml 0.01M KCl,用微电极测其pH。三、仪器和用具1.电泳仪2.垂直管式园盘电泳槽一套3.注射器与针头4.移液管:10ml、5ml、2ml、1ml、0.1ml5.小烧杯若干6.培养皿一套7.直尺8.小刀9.精密pH试纸和带细长复合pH电极的pH计10.塑料薄膜和橡皮筋

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