连翘酯苷

分离黄芩苷 绿原酸 连翘苷的一些问题液质联用分离黄芩苷 绿原酸 连翘苷 先用的液相色谱摸索流动相及流动相的比例什么的 最后选用乙腈和乙酸胺 但试过之后 发现峰分的不太开 采用梯度洗脱效果也不明显 感觉有两种物质的峰重合了 因为只得到俩峰 柱子是2.1*150 的 流速是0.2μg/min 想请问 如何才可以较好的分离 是流动相的问题么？那应该选什么流动相呢？柱子不能变 只有2.1*150 的

【作者】 李书渊； 施玉旋； 李巨华；【机构】 广东药学院中药系； 广州康和药业公司 广东广州510006； 广东广州510006； 广东广州511440；【摘要】 目的:以HPLC法测定梅翁退热颗粒中连翘苷的含量。方法:采用D iamonsil C18柱(200 cm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-水(30∶70)为流动相,测定波长为277 nm。结果:供试品中连翘苷得到很好的分离与测定,其线性范围为:0.548-2.192μg,其回归方程为:Y=488221X+646456,r=0.9997,平均回收率(n=6)为98.8%(RSD=4.1%)。结论:方法快速、简便、重现性好,可作为梅翁退热颗粒质量控制方法。 更多还原【关键词】 梅翁退热颗粒； 连翘苷； 高效液相色谱法；

[font=宋体][size=15px]发热是多种疾病急性期的主要病理生理反应之一，体温过高可导致脑组织损伤、免疫反应异常等多种不良后果。连翘为连翘科植物连翘的干燥果实，临床上长期用于治疗感冒或流感引起的发热。连翘是双黄连口服液、清热解毒口服液、连翘口服液、银翘解毒颗粒等中药制剂的主要原料。连翘苷（Phllyrin，Phr）是连翘中的主要有效成分,在体内可代谢为连翘皂苷（Phg）、Phg-磺酸盐（Phg-S）和Phg-葡萄糖醛酸（Phg-G）等,具有解热作用，但Phr及其代谢物的解热作用机制尚不明确。[/size][/font] [size=15px][font=宋体]2024年8月22日，南开大学药学院白钢/姜民团队在Phytomedicine上发表了题为“Phillyrin and its metabolites exert antipyretic effects bytargeting the NAD+ binding domain of GAPDH, MDH2 and IDH2”的文章，[/font][/size][font=宋体][size=15px]发现连翘主要药效学成分Phr有显著的解热作用，且Phr的解热作用与其代谢物Phg靶向甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）、苹果酸脱氢酶2（MDH2）和异柠檬酸脱氢酶2（IDH2）的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）结合域，抑制其酶活性。 [size=15px][b]1、Phr对肺炎发热小鼠模型具有抗炎、解热作用[/b][/size][size=15px][b][/b][/size] [font=宋体]作者首先通过鼻内滴注LPS诱导的小鼠肺炎发热模型中验证了Phr的解热作用。结果显示，LPS诱导的小鼠体温明显升高，而阿司匹林和Phr有效地抑制LPS诱导的体温升高。此外，阿司匹林和Phr显著增强了发热小鼠肝脏温敏探针的荧光强度（荧光强度与温度成反比），表明阿司匹林和Phr减少了发热状态下的肝脏产热。作者还发现Phr和阿司匹林在LPS诱导的肺炎发热模型中显示出较强的抗炎作用，表现为炎症细胞浸润减少，肺损伤评分降低，肺系数和肺W/D重量比增加。这些结果表明Phr在体内具有显著的解热和抗炎作用。[/font] [/size][/font][align=center] [/align] [size=15px][b][font=宋体]2[/font][font=宋体]、Phr的解热作用可能与其主要代谢产物Phg作用于GAPDH、IDH2和MDH2有关[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]作者发现Phr在体内主要代谢为Phg、Phg-s和Phg-g。通过使用线粒体温敏探针分析了Phr及其代谢物对细胞线粒体温度的影响，证实Phr及其代谢产物在一定浓度下有效地抑制了线粒体温度，但是0.1μM Phg仍对线粒体温度有显著的抑制作用，而相同浓度的Phg-s和Phg-g均无抑制作用，提示Phg可能是Phr发挥解热作用的主要活性形式。[/size][/font] [font=宋体][size=15px]为了鉴定Phr体内解热作用的靶蛋白，作者合成了Phr的主要活性解热代谢产物Phg的炔基探针，通过Pulldown+MS初步鉴定出47个蛋白质为Phg的潜在靶点，鉴于能量代谢是体内产热的主要途径之一，进一步对捕获的蛋白质和能量代谢相关基因进行交集，发现其中GAPDH、MDH2、IDH2蛋白与能量代谢相关。通过WB、细胞共定位分析、竞争分析验证了Phg与三个靶蛋白的结合。综上所述，Phg是Phr发挥解热作用的主要活性形式，其解热作用可能与Phg靶向GAPDH、MDH2和IDH2蛋白，进一步调节能量代谢，影响产热有关。[/size][/font] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=宋体]3[/font][font=宋体]、Rossmann折叠被确定为Phg靶向GAPDH, IDH2和MDH2的结合口袋[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]为了确定Phg与GAPDH, IDH2和MDH2的结合机制，作者从蛋白质的结构-功能分析开始，并使用目标蛋白的天然底物和配体干扰目标蛋白被Phg捕获。结果显示，NAD+依赖的GAPDH、MDH2、IDH2酶活性测定表明，Phg竞争性抑制了参与NAD+的GAPDH、MDH2、IDH2酶活性，并通过分子对接分析了结合模式。GAPDH, MDH2和IDH2是核苷酸结合酶，它们的蛋白质结构包含辅酶NAD+结合口袋，称为Rossmann折叠。因此，作者推测Phg可能与NAD+竞争，与这些靶蛋白的Rossmann折叠结合，从而抑制其活性。 [/size][/font] [size=15px][b][font=宋体]4[/font][font=宋体]、Phg非共价结合于GAPDH的Asp35和Asn316残基，并竞争性占据NAD+的Rosmann折叠结构域[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]Rossmann折叠由两个重复的β-α-β-α-β拓扑结构组成，NAD+和Rossmann折叠中的氨基酸残基之间的氢键相互作用诱导GAPDH的构象变化。为了进一步验证Phg与NAD+竞争结合靶蛋白的Rossmann折叠的假设，作者以GAPDH蛋白为例，对比分析了NAD+和Phg与GAPDH蛋白的相互作用。通过圆二色谱实验、FQ实验、SPR分析、分子对接分析、fit实验、蛋白点突变实验证实Phg通过结合GAPDH的rosman折叠中的Asp35和Asn316残基，竞争性地抑制了NAD+与GAPDH的结合，从而抑制了目标蛋白的酶活性。 [/size][/font] [size=15px][b][font=宋体]5[/font][font=宋体]、Phg通过靶向GAPDH、MDH2和IDH2影响细胞能量代谢[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]作者进一步研究了Phg对GAPDH, MDH2和IDH2酶活性的影响，发现Phg抑制了细胞中三种酶的活性。GAPDH、MDH2和IDH2参与了能量代谢途径中TCA过程。因此，作者通过代谢组学检测了phg对TCA代谢的影响，发现相关代谢物显著变化，进一步结合线粒体应激实验证实Phg靶向GAPDH、MDH2和IDH2来抑制TCA和OXPHOS过程，从而减少线粒体的能量和产热。 [/size][/font] [size=15px][b][font=宋体]6[/font][font=宋体]、Phr通过作用于GAPDH、MDH2和IDH2发挥体内解热和抗炎作用[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]作者进一步验证Phr的体内解热抗炎作用是否与GAPDH、MDH2、IDH2的靶向作用有关。酶活性检测显示，肺炎发热模型小鼠血清中GAPDH、MDH2和IDH2的酶活性显著升高，而Phr显著抑制了这三种蛋白酶活性的升高。此外，模型小鼠血清中由这三种蛋白调节的NAD+/NADH比值显著降低，ATP含量显著升高，而Phr有效地逆转了这两项指标的变化。这些结果表明，Phr对肺炎发热模型小鼠的体内解热作用与其主要代谢产物Phg密切相关，Phg靶向作用于GAPDH、MDH2和IDH2，影响能量代谢通路。[/size][/font] [font=宋体][size=15px]作者进一步阐明了Phr在肺炎发热小鼠模型中的抗炎机制。免疫荧光定位分析显示，Phg特异性靶向肺炎热小鼠肺组织中的肺巨噬细胞，提示巨噬细胞可能是其在体内发挥抗炎作用的靶细胞。。除参与能量代谢途径外，作者发现GAPDH还可通过多种途径直接或间接影响TNF-α、il-1β、IL-6等炎症因子的产生，并与其酶活性呈正相关。提示Phr在肺炎小鼠体内的抗炎作用可能与其代谢产物Phg特异性靶向肺巨噬细胞中GAPDH，抑制其酶活性，从而抑制相关炎症因子的产生有关。 [/size][/font] [size=15px][b][font=宋体]7[/font][font=宋体]、Phg和Phg-s是Phr在体内作用于GAPDH、MDH2和IDH2的主要活性形式[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]由于Phg-S和Phg-G也是Phr在体内的主要代谢产物，作者进一步通过体外蛋白-分子相互作用实验验证它们是否也能靶向GAPDH、MDH2和IDH2。通过SPR证实Phr及其代谢产物与3种蛋白的结合顺序为PhgPhg-sPhr,Phg-g未与3种蛋白中的任何一种结合。FTS检测结果显示Phr及其代谢产物提高了GAPDH、MDH2和IDH2的热稳定性，Phg和Phg-s的作用比Phr和Phg更强。体外酶活性检测显示，Phg和Phg-s对GAPDH、MDH2和IDH2的酶活性有明显的抑制作用，而Phr和Phg-g对这3种蛋白的酶活性没有抑制作用。结果表明Phg和Phg-s可能是Phr在体内靶向GAPDH, MDH2和IDH2的主要活性形式。[/size][/font] [align=center] [/align] [size=15px][b][font=宋体]总结[/font][/b][/size][size=15px][b][font=宋体][color=#0070c0][/color][/font][/b][/size] [font=宋体][size=15px]研究阐明了调节能量代谢可通过减少能量供应和调节发热相关炎症因子发挥解热作用，发现连翘主要药效学成分Phr的解热作用与其代谢产物Phg和Phg-s有关，Phg和Phg-s作用于GAPDH、IDH2和MDH2的NAD+结合域，从而抑制酶活性和能量代谢。本研究为改善发热的治疗提供了新的视角。主要内容如下：[/size][/font] [font=宋体][size=15px]Phr在脂多糖诱发的发热小鼠模型中表现出明显的解热和抗炎作用。Phg可逆性靶向甘油醛-3-磷酸脱氢酶 (GAPDH)、苹果酸脱氢酶 2 (MDH2) 和异柠檬酸脱氢酶 2 (IDH2) 的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD+)结合域，抑制其酶活性。对细胞代谢组学和线粒体应激测试的深入分析表明，Phg抑制 GAPDH、MDH2 和 IDH2 酶活性导致糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化信号通路调节的细胞能量供应和产热减少。此外，Phg特异性靶向巨噬细胞，通过下调GAPDH酶活性抑制 LPS 诱导的巨噬细胞活化，从而发挥抗炎作用。体内实验也证实，Phr在LPS诱导的发热模型小鼠中的解热作用与其主要代谢产物Phg和Phg-磺酸盐（Phg-S）有关，它们直接靶向作用于GAPDH、IDH2、MDH2的NAD +结合域，抑制这些酶的活性，从而减少能量供应，调节发热相关的炎症因子。[/size][/font][font=宋体][size=15px]连翘苷(Phr)的解热机制与其主要代谢产物连翘苷(Phlygenin)靶向作用于GAPDH、MDH2和IDH2的NAD+结合域，减少能量供应，调节发热相关炎症因子有关。[/size][/font]

作　　者：傅军 李焕丹 高晓霞 梁从庆 潘志青 FU Jun, LI Huandan, GAO Xiaoxia, LIANG Congqing, PAN Zhiqing （Guangdong College of Pharmacy, Guangzhou 510006 ）摘　　要：目的 建立保和口服液中连翘苷的含量测定方法.方法 采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18柱,流动相：乙腈-水（29：71）,流速为1.0 mL·min-1,检测波长277 nm,柱温为室温.结果 连翘苷在0.068～0.340μg范围内线性关系良好,相关系数r=0.9996;平均回收率为99.7%（RSD=2.1%）.结论 该方法简便,快速,准确,重复性好,可作为保和口服液的质控指标之一. Objective To establish a method for the determination offorsythin in Baohe Oral Liquid by HPLC. Methods The determination was carried out on a Diamonsil C18 column, with mobile phase of acetonitrile-water（29：71） at room temperature. The flow rate was 1.0mL·min^-1 and the detective wavelength at 277 nm. Results The calibration curves was linear in the range of 0.068-0.340μg （r=0.9996） . The average recovery rate of tested sample was 99.7 % （RSD=2.1%）. Conclusion The method was specific, accurate and precise. It can be used for the quality control of Baohe Oral Liquid. 关 键 词：保和口服液 高效液相色谱法 连翘苷 含量测定 Baohe Oral Liquid Forsythin HPLC Content determination

[font=SimSun, STSong][size=16px]薄层色谱法检测[/size][/font] [font=SimSun, STSong][size=16px]分别取1号连翘、2号连翘粉末1g，各加石油醚（30～60℃）20ml，密塞，超声处理15分钟，滤过，弃去石油醚液，残渣挥干石油醚，加甲醇20ml，密塞，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取连翘对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取连翘苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述四种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（8：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。[/size][/font] 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法检测 [font=SimSun, STSong][size=16px]色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（25：75）为流动相；检测波长为277nm。[/size][/font] [font=SimSun, STSong][size=16px]对照品溶液的制备 取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.27mg的溶液，即得。[/size][/font] [font=SimSun, STSong][size=16px]供试品溶液的制备 分别取1号连翘、2号连翘细粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，称定重量，浸渍过夜，超声处理（功率250W，频率40kHz）25分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，蒸至近干，加中性氧化铝0.5g拌匀，加在中性氧化铝柱（100～120目，1g，内径为1～1.5cm）上，用70%乙醇80ml冼脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。[/size][/font] [font=SimSun, STSong][size=16px] [/size][/font] [font=微软雅黑, &][size=12px][back=#f5f5f5][/back][/size][/font]

银翘解毒颗粒按《中国药典》２００５年版检验，对照品及供试品在荧光下出现紫色的暗色斑点和桔黄色的荧光斑点，偶尔情况下橘黄色的荧光斑点会不出现，请问药典所指的“显相同颜色的荧光斑点”是指紫色的暗色斑点还是橘黄色的荧光斑点？另外，按这个方法做的结果很难观察，经常连对照品都难显点，如果改成按ＶＣ银翘片的连翘鉴别的方法做，显点就很清晰，不知道这个鉴别操作有什么关键的地方，请各位大侠指点一下。

作者：金智利; 袁文婧;哈药集团三精制药股份有限公司;摘要：目的:建立高效液相色谱法测定金银花连翘提取物中绿原酸、咖啡酸的的含量。方法:采用迪马(钻石)C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水-冰乙酸(20:80:1),流速1.0ml/min,检测波长:324nm。结果:金银花连翘提取物中绿原酸、咖啡酸能达到有效分离,绿原酸在9.44μg/ml~141.60μg/ml范围内,浓度同峰面积呈良好的线形关系,仪器精密度RSD为0.03%,方法的重复性RSD=0.24%。咖啡酸在5.36μg/ml~80.40μg/ml范围内,咖啡酸峰面积值与浓度有良好的线性关系,仪器精密度RSD为0.03%,方法的重复性RSD=0.33%。结论:该方法简便、准确、可行。可用于金银花连翘提取物的质量控制。

[size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]连翘（F. suspensa）是中医临床常用的传统中药，因其解热和抗炎作用而在中医中用于治疗传染病，有清热、解毒、排脓、散肿等功效。最近的研究表明，F. suspensa水提取物（WFS）对抗破骨细胞异常分化和雌激素缺乏引起的骨质流失有益，且WFS的植物化学特征表明丰富的生物碱、木脂素、萜烯类、黄酮类和类固醇成分可能具有抗骨质疏松活性。在这些成分中，连翘脂素（Phi）是尚未在骨代谢中报道的成分之一。2024年2月15日，上海交通大学医学院附属瑞金医院/上海市创伤骨科研究所江敏、徐醒、奚小冰团队在Phytother Res（IF=7.2）上发表题为“Phillygenin prevents osteoclast differentiation and bone loss by targeting RhoA”的文章，发现连翘叶中富含的一种化合物连翘脂素（Phi）在体内外具有抗破骨细胞生成特性。机制上，Phi与RhoA结合可通过NF-κB/NFATc1/c-fos通路和RhoA/ROCK1/Cofilin通路在体外抑制RANKL诱导的破骨细胞生成和骨吸收，研究可能为Phi和F. suspensa在功能性食品中开辟新的应用领域。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1、连翘脂素减轻体内LPS诱导的小鼠颅骨骨溶解作者通过脂多糖（LPS）诱导的小鼠颅骨骨溶解模型来说明Phi在体内的保护作用，发现Phi显著逆转LPS诱导的骨质破坏。此外，组织切片TRAP染色显示LPS显著增加破骨细胞（OC），而Phi则减少OC的形成，表明Phi抑制OC的形成，从而抑制体内骨质破坏。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、Phi 可预防卵巢切除术（OVX）引起的体内骨质流失作者接着评估了Phi在OVX诱导的骨质疏松症小鼠模型中的作用，发现OVX小鼠表现出广泛的骨质疏松，而Phi使其得到改善。此外，对股骨切片也进行了TRAP和HE染色，结果显示OVX组的OCs数量增加，而Phi组的OCs数量减少。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、Phi 抑制小鼠BMMs破骨细胞生成作者接着体外评估了Phi的作用，细胞增殖和细胞毒性实验显示Phi不干扰BMMs的增殖，且无细胞毒性，TRAP染色结果表明Phi以剂量依赖性方式抑制成熟OC的形成。随后以Phi干预OCs分化，发现Phi在早期、中期、晚期均不同程度抑制破骨细胞形成。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、Phi通过OC分化和骨吸收相关基因表达损害骨吸收接下来，作者利用RNA-seq阐明 Phi 抑制OC分化的潜在分子机制，KEGG发现差异基因主要参与破骨细胞分化途径和肌动蛋白细胞骨架途径的调控等，GO显示骨吸收和骨重建的调控等骨重建过程，肌动蛋白细胞骨架组织过程显著富集。转录组结果和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]验证均显示Phi处理后与破骨细胞分化相关的基因下调。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、Phi与RhoA结合并抑制RhoA激活剂诱导的RhoA活性接着作者采用了Pulldown+MS的方法识别Phi的直接靶点。首先合成生物素化的探针，发现生物素标签不会影响Phi的活性，进一步开展pulldown+MS鉴定到155种蛋白质，PPI显示与细胞骨架相关的簇及RhoA蛋白的存在。已有报道表明RhoA对破骨细胞的生长、运动和骨吸收至关重要。作者采用免疫沉淀法进一步证实了Phi与RhoA的结合，分子对接预测了结合位点，进一步酶活实验发现Phi能够以剂量依赖性的方式抑制RhoA活性。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]6、Phi通过RhoA/ROCK1/NFATc1通路发挥抑制作用NFATc1/c-fos已被证实是破骨细胞生成中最重要的转录因子，作者发现Phi抑制 NFATc1/c-fos 的mRNA和蛋白表达。TRAP染色结果显示C3（RhoA抑制剂）减少OC的形成，降低NFATc1的mRNA表达和蛋白表达，在破骨细胞生成中发挥了与Phi类似的作用。此外，敲低RhoA导致成熟OC数量减少，NFATc1蛋白表达也受到抑制。RhoA通过磷酸化ROCK1下游底物激活ROCK1，从而发挥重塑细胞骨架等作用，作者发现Phi通过RhoA/ROCK1/NFATc1通路发挥其抗破骨细胞生成作用。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]7、Phi靶向RhoA/ROCK1减弱RANKL诱导的NF-κb磷酸化NF-κb信号通路是参与OC分化和吸收的关键信号通路，作者发现Phi显著抑制RANKL诱导的p65磷酸化和IκBα磷酸化。此外，C3（RhoA抑制）和Y-27632（ROCK1抑制剂）显著抑制NF-κB信号通路，与 Phi 的抑制作用一致。结果表明Phi显著抑制NF-κB信号通路，并且RhoA/ROCK1信号通路也可能参与其中。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]8、Phi通过RhoA/ROCK1信号通路抑制OCs F-actin的形成破骨细胞中的关键骨骼蛋白F-actin聚合后形成F-肌动蛋白环，这对破骨细胞介导的骨吸收至关重要。RNA-seq结果也显示Phi抑制了肌动蛋白形成过程。作者使用TRITC鬼笔环肽染色发现Phi、C3和Y27632抑制了F-肌动蛋白环的形成，表明Phi和RhoA/ROCK参与了F-肌动蛋白环的形成。之前有报道称RhoA是Rho家族中调节ROCK1/cofilin通路以实现肌动蛋白丝分布的关键成员，WB结果显示在用Phi、C3或Y-27632处理后，ROCK1和p-cofilin/cofilin表达也降低。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]总结该研究发现Phi与RhoA结合可通过NF-κB/NFATc1/c-fos通路和RhoA/ROCK1/Cofilin通路在体外抑制RANKL诱导的破骨细胞生成和骨吸收。此外，Phi显著降低LPS诱导的颅骨骨吸收，预防和缓解OVX诱导的体内骨质疏松症。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size][size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size]

做连翘饮片的连翘酯苷A含量时，系统适应性总不达标，对照品连翘酯苷A的峰面积波动比较大，连续五针的Rsd在2%以上。比较苦恼，求助大神…

求吡喹酮、氯氰菊酯、扑草净、马拉硫磷、栀子、大黄、连翘、白芍、牡丹皮、人参、黄芪、甘草、黄连、黄芩、黄柏、木香等的液相色谱图！！！！！！！！！！！

成分:金银花、连翘、荆芥、淡豆鼓、淡竹叶、牛蒡子、芦根、桔梗、甘草、马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚、维生素C、薄荷油。辅料为：淀粉、蔗糖、滑石粉。用法用量:口服，一次2片，一日3次。禁忌:严重肝肾功能不全者禁用。注意事项:1.忌烟、酒及辛辣、生冷、油腻食物。 2.不宜在服药期间同时服用滋补性中成药。 3.不适用于风寒感冒，表现为恶寒明显，无汗，头痛身酸，鼻塞流清涕。4.本品含马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚、维生素C。服用本品期间不得饮酒或含有酒精的饮料；不能同时服用与本品成份相似的其他抗感冒药；肝、肾功能不全者慎用；膀胱颈梗阻、甲状腺功能亢进、青光眼、高血压和前列腺肥大者慎用；孕妇及哺乳期妇女慎用；服药期间不得驾驶机、车、船、从事高空作业、机械作业及操作精密仪器。 5.心脏病、糖尿病等慢性病严重者应在医师指导下服用。 6.儿童、年老体弱者应在医师指导下服用。 7.服药3天后症状无改善，或症状加重，或出现新的严重症状如胸闷、心悸等应立即停药，并去医院就诊。 8.对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用。 9.本品性状发生改变时禁止使用。儿童必须在成人监护下使用。 10.请将本品放在儿童不能接触的地方。 11.如正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或药师。不良反应:可见困倦、嗜睡、口渴、虚弱感；偶见皮疹、荨麻疹、药热及粒细胞减少；长期大量用药会导致肝肾功能异常。相互作用:1.与其他解热镇痛药并用，有增加肾毒性的危险。 2.如与其他药物同时使用可能会发生药物相互作用，详情请咨询医师或药师。

今天买了连翘酯苷B和金石蚕苷对照品（4支7000RMB），说明书上写着易吸湿，一次使用完，连翘酯苷B含量按92.5%计，金石蚕苷含量按93%计！！！第一个问题：我可以不一次性使用完吗？要怎么保存呢？？毕竟太贵了，即使配高浓度的然后稀释也有点划不来，况且这个对照品也怕不稳定，万一不稳定下次用就不准确了。。。。第二个问题，它含量写着92.5%、93%，那我计算的时候是不是也要乘以百分数去算？？？以前我都没怎么注意，不过大部分都是99.5%以上的！！

任务号文献名称发布时间任务领取人完成情况任务三一一金边瑞香滴鼻剂中瑞香素含量测定的研究　　v2679780　金银花药材中抗呼吸道病毒感染的黄酮类成分的定量研究九节菖蒲总皂苷、齐墩果酸及腺苷的含量测定聚甲酚磺醛溶液中4种有关物质的HPLC测定聚氧肟酸酯的制备及其pH敏感性释药性能研究决明降脂片质量标准研究决明子发酵前后5种蒽醌类成分变化研究卡托普利延迟起释型缓释片的研制、质量控制及其在Beagle犬内药代动力学研究抗球虫中药复方TF-103指纹图谱的建立抗纤丸的质量标准研究任务三一二克拉霉素分散片溶出度测定方法研究　　v2679780　克拉霉素血药浓度HPLC测定方法和生物等效性研究口腔炎喷雾剂中咖啡酸的含量测定口炎清颗粒指纹图谱研究枯草芽孢杆菌JA脂肽类及挥发性物质抑菌效应的研究苦参素凝胶骨架缓释片的Beagle犬药动学研究辣椒碱提取及其非离子表面活性剂泡囊的研制兰索拉唑肠溶微丸胶囊人体生物等效性研究兰索拉唑及其代谢产物的生物等效性离子对反相高效液相色谱法测定兔血浆中氧化苦参碱含量任务三一三离子对高效液相色谱法测定奥替溴铵含量及有关物质　　v2679780　离子对高效液相色谱法测定人血清中盐酸二甲双胍浓度离子液体的阴离子三氟乙酸根、硫氰酸根、四氟硼酸根和三氟甲磺酸根的离子对色谱-直接电导检测法分析连翘不同部位中连翘酯苷和连翘苷的含量分析莲芝消炎胶囊质量标准的研究联合应用抗菌药物对兰索拉唑体内外代谢的影响两个品系桑枝化学成分的动态变化研究两性霉素B冻干脂质体的制备及体内外药剂学行为研究两性霉素B阴道泡腾片有关物质液相色谱方法的建立两种格列吡嗪胶囊的人体生物等效性研究任务三一四两种鬼臼毒素制剂中鬼臼毒素含量的测定　　fengmo4668　两种缓释制剂的人体药物动力学研究两种新型喹诺酮衍生物的临床前药代动力学研究辽细辛非挥发性化学成分、质量控制和抗菌活性研究磷酸川芎嗪对硝苯地平药动学的影响及机制探讨硫酸阿米卡星注射液及有关物质的HPLC法分析硫酸多粘菌素E脂质体的制备及含量和包封率的测定硫酸沙丁胺醇脉冲片含量及有关物质的高效液相色谱法芦笋水解氨基酸的测定泸州纳溪GAP基地栀子中4种主要活

[color=#444444][color=#444444]分离黄芩苷 绿原酸 连翘苷的一些问题[/color][color=#444444][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]分离黄芩苷 绿原酸 连翘苷 先用的液相色谱摸索流动相及流动相的比例什么的 最后选用乙腈和乙酸胺 但试过之后 发现峰分的不太开 采用梯度洗脱效果也不明显 感觉有两种物质的峰重合了 因为只得到俩峰 柱子是2.1*150 的 流速是0.2μg/min 想请问 如何才可以较好的分离 是流动相的问题么？那应该选什么流动相呢？柱子不能变 只有2.1*150 的[/color][/color]

双黄连口服液是由金银花、黄芩、连翘组成的纯中药口服液。中药口服液是近十多年来开发的新剂型。它是以中药汤剂与合剂为基础，提取中药材中有效成分，加入赋形剂，参照糖浆剂、注射剂的生产工艺，合剂的指控标准等，制成灭菌或半无菌口服液体制剂。多以10mL•g-1定为每次服量，因此有“一次性糖浆之称”。特点是服用剂量小，口感好，易为病人所接受，而且仍为液体制剂，吸收快，疗效好，服用方便，利于治疗急性病，质量较稳定，携带方便，易保存，应用于临床治疗，受到广大患者的欢迎，并促进了医药事业的发展 。双黄连口服液是一种抗菌、抗病毒中药制剂，它由金银花、连翘和黄芩精制而成，3种中药均有清热解毒作用，金银花含有环己六醇、黄酮素、肌醇、皂甙、鞣质等；叶含黄醇素、鞣质；茎含有皂甙等，它主要用于外感病的表面热症；连翘含三萜皂甙，果皮含甾醇及酚性成分、生物碱、皂甙，齐墩果酸、香豆类，还有丰富的维生素P及少量的挥发油，它对发热、咽喉肿痛有效；黄芩含黄芩甙元、黄芩甙、汉黄芩素、汉黄芩甙、黄芩新素，苯甲酸、β-谷甾醇等，它用于肺热咳嗽。现代研究表明：银花皂素还能调节体温中枢，有降温作用；连翘含有连翘酚及维生素P，有广谱抗菌作用；黄芩有广谱抗菌、抗病毒作用，三者并能诱发机体的免疫功能及抗病能力，因此，双黄连口服液有显著抗病毒、抗菌作用，有效率达94％，作用迅速，对一般上呼吸道疗效明显，且无明显副作用。给药途径为口服，无创伤性，用药简便，患者容易接受，而且经济。使用双黄连口服液往往有利于缩短治疗时间，减少病情变化，特别对细菌病类的混合感染更为合适。1.1 双黄连口服液的药效作用关澍男等报道指出双黄连口服液是由金银花、黄芩、连翘组成的纯中药制剂，具有辛凉解表、清热解毒之功效。现代药理学研究表明双黄连制剂能抗多种病原微生物，具有广谱的杀菌作用；并能降低毛细血管的通透性、减少渗出，具有抗炎、抗过敏作用；还可增强机体产生α-干扰素能力，可显著地增强细胞免疫和体液免疫作用，对病毒也具有较强的抑制作用，并能中和细菌产生的内毒素，同时具有抗感染及免疫调节双重作用。临床主要用于细菌和病毒感染引起的感冒、流感以及肺炎、气管炎、扁桃体炎等症，其疗效确切、安全、有效。蒋楠等报道认为其中金银花和连翘合用能产生抗菌范围互补，与青霉素合用金银花能加强青霉素对耐药金葡菌的抗菌作用。连翘抗菌谱广，对G+和G-菌，亚洲甲型流感病毒、鼻病毒-17等有抑制作用。岳朝辉等报道指出金银花和黄芩还能作用机体提高巨噬细胞吞噬功能，并促进淋巴细胞转化，从而达到清除病毒，中止感染目的。双黄连口服液具有的广谱抗菌性使原发性疱疹性口炎患者无需加用抗生素就能有效防止感染。2.2 分析方法的建立2.2.1 紫外分光光度计定量分析2.2.1.1 波长的选择吸取黄芩苷对照品溶液在200nm~400nm作光谱扫描，确定最大吸收波长。2.2.1.2 标准曲线的绘制精密称取干燥至恒重的黄芩苷对照品粉末20mg，溶于25mL棕色量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，作为对照品原液。再分别精密量取黄芩苷对照品原液用蒸馏水配制成最终浓度为0.016mg/mL、0.02mg/mL﹑0.032mg/mL、0.04mg/mL、0.08mg/mL的标准溶液，在波长为276nm下测吸光度，以黄芩苷浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。2.2.1.3 黄芩苷含量检测采用紫外分光光度法分别对过滤后的提取液、醇沉后过滤的产品，黄芩的重复性试验，精密度试验，在波长为276nm下测定黄芩苷吸光度，以黄芩苷作为指标来衡量提取、纯化分离工艺的优劣。2.2.1.4 精密度试验取0.04mg/mL黄芩苷对照品溶液连续用紫外分光光度计在276nm波长下测其吸光度。2.2.1.5 供试品的稳定性试验取双黄连口服液1.0mL，按样品含量测定项下的方法操作的供试品溶液于0、1、2、4、8h测吸光度值。2.2.1.6.回收率试验采用加样回收率试验，精密量取已测定含量（含量为0.0163mg）的双黄连口服液1.0mL共五份，精密加入黄芩苷对照品溶液1.0mL五份，其质量分别为0.016mg、0.02 mg、0.032mg、0.04mg、0.08mg，按含量测定项的方法制备供试液，测回收率。

任务号文献名称发布时间任务领取人完成情况任务三二一少腹逐瘀汤中7种有效成分的HPLC-PDA分析与评价　　v2679780　沈阳红药气雾剂的质量标准生脉饮质量评价方法研究生晒参红参林下参中7种人参皂苷含量的比较湿热片质量标准的研究食品添加剂及农药残留的高效液相色谱分析食品中对苯二酸、间苯二酸和双酚A类内分泌干扰物的检测方法研究食用菌中多菌灵和噻菌灵残留分析方法研究食用植物油中胆固醇含量的快速测定手性荧光衍生化反相高效液相法分离DL-异丙肾上腺素任务三二二手性荧光衍生化反相高效液相色谱法分离肾上腺素对映体　　v2679780　手性荧光衍生化反相高效液相色谱法分析多巴胺寿胎丸指纹图谱研究兽用尼美舒利注射的制备与初步评价舒胆胶囊质量控制方法与药物动力学研究舒芬太尼在体外人肝微粒体中代谢速率的测定舒肤软膏中苦参碱的含量测定双苯氟嗪在大鼠体内的生物转化及代谢产物的定量研究双黄连制剂中连翘苷含量与退热作用相关性研究双黄连注射液对大鼠CYP的影响任务三二三双氯芬酸胆碱分析方法研究　　v2679780　双氯芬酸钠栓中有关物质检查方法的研究水稻基因组DNA总甲基化水平测定方法水红花子黄酮类成分的HPLC指纹图谱研究水解蛋白注射液中游离氨基酸含量的测定及分析水杨酸血药浓度的RP-HPLC测定及其应用四个主要产地广藿香HPLC指纹图谱比较分析四块瓦类中草药的品种整理与武当山地区白四块瓦的鉴定松香药材中松香酸的含量测定方法羧甲司坦及其制剂有关物质的HPLC测定任务三二四锁阳固精丸质量标准研究　　jncxyy2012　泰妥拉唑的质量控制方法及在犬体内的药物动力学研究檀桂胃宁颗粒的质量标准桃儿七HPLC指纹图谱研究藤茶HPLC指纹图谱梯度洗脱法测定消炎片中黄芩苷的含量梯度洗脱法同时测定不同配比金银花连翘药对中绿原酸、连翘脂素替米沙坦片体外分析方法及其药动学研究天胡荽类药材及其混淆品HPLC指纹图谱鉴别研究天麻中天麻素RP-HPLC测定及提取工艺研究任务三二五[