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正颉氨酸

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  • 【求助】请问怎么溶解酪氨酸?

    [size=3][b]酪氨酸溶解方法[/b][/size]我要用酪氨酸加入到植物组织培养基中,培养基pH不宜太小,约为6左右,请问怎么溶解酪氨酸?谢谢

  • 【分享】高同型半胱氨酸血症致胰岛素抵抗机理研究取得创新进展

    [center]高同型半胱氨酸血症致胰岛素抵抗机理研究取得创新进展[/center]胰岛素抵抗是糖尿病前期症状,广泛危害人类健康,但其机制尚未完全阐明。北京大学医学部生理与病理生理学系王宪教授领导的研究室从脂肪细胞因子的角度,就抵抗素在致炎因素高同型半胱氨酸血症促进脂肪组织胰岛素抵抗发病机制中的作用,进行了系列研究并取得创新进展。研究成果论文最近已发表在本领域国际顶级杂志《糖尿病》(《Diabetes》)上。 研究结果显示,在小鼠饮水中补充同型半胱氨酸造成高同型半胱氨酸血症模型4周后,可以观察到任意血糖的明显升高和胰岛素敏感性的显著下降;同型半胱氨酸处理的脂肪细胞,对胰岛素刺激下的葡萄糖摄取能力亦明显降低。高同型半胱氨酸血症小鼠附睾白色脂肪组织中抵抗素基因及蛋白表达显著上调,血中的抵抗素水平显著增高;给予原代培养的大鼠附睾脂肪细胞同型半胱氨酸刺激,结果发现同型半胱氨酸可以呈时间、剂量依赖性上调脂肪细胞中抵抗素的表达。抵抗素是脂肪组织特异性分泌的脂肪细胞因子,具有强烈的致胰岛素抵抗作用,与2型糖尿病的发生密切相关。以上结果证实,致炎因素高同型半胱氨酸血症的致胰岛素抵抗作用是通过抵抗素来实现的,从而为阐明高同型半胱氨酸血症致胰岛素抵抗发生的机制提供了新证据。 据该研究室李茵博士介绍,同型半胱氨酸是体内蛋氨酸脱甲基生成的一种含巯基的氨基酸,如果与同型半胱氨酸代谢有关的酶或辅助因子(如叶酸和维生素B12等)缺乏,则会使同型半胱氨酸代谢受阻,导致高同型半胱氨酸血症。亚洲人可能因遗传和环境因素的不同,高同型半胱氨酸血症的发病率明显高于欧洲人。我国现阶段由于精细食品的过度加工,造成大量B族维生素流失,同型半胱氨酸代谢受阻,高同型半胱氨酸血症的发病率显著增加。因此,该研究成果将有助于阐明胰岛素抵抗的发生和发展中致炎因素高同型半胱氨酸的作用和地位,为早期预防与缓解胰岛素抵抗的发生、发展和今后筛选干预胰岛素敏感性的药物提供新途径。信息来源:中国医药报

  • 【分享】美国FDA证实L-茶氨酸为安全可靠产品

    美国食品药品管理局(FDA)日前已经证实,食品和饮料中使用的蓝色加州(Blue California)生产的L-TeaActive 品牌L-茶氨酸成分为安全可靠产品(GenerallyRecognized as Safe,GRAS)。氨基酸L-茶氨酸(c-glutamylethylamide) 几乎仅被发现在茶树中存在。该化合物仅以自由形态存在,是茶叶中主要的游离氨基酸,大约占所有游离氨基酸的一半。包括放松、神经保护作用和提高注意力在内的各种对健康的不同效果都和L-茶氨酸相关。休息时,L-茶氨酸能增加脑电(EEG)模型中α 的活动,这表明可以使人更加放松。同时,氨基酸能引起α 活动的变化,这表明在处理需要注意力的工作时,能集中注意力来处理问题。根据由俄勒冈GRAS Associates 拟就和提交GRAS 申请,“提议的食品用途是食品成分,作为茶氨酸的饮食来源,在果汁和饮料、非草药茶、运动饮料、有特殊功能的瓶装水、巧克力条和口嚼片、硬糖和薄荷糖以及口香糖中使用。”GRAS 申请中提到,“L-茶氨酸(98%)的预期用途将使得1284毫克的日摄取量预计在第90 百分位数(“百分位数”为统计学术语——译者注)。从茶中摄入L-茶氨酸的第90 百分位数估计为825 毫克/天。估计的日摄入量与美国目前最喜欢饮茶者所摄入的L-茶氨酸水平相似。”蓝色加州称该公司的这种食品成分来自绿茶叶和其他天然成分,使用有专利权的生产工艺,最终产品是含98%的L-茶氨酸的标准化产品。蓝色加州的副总裁塞西莉亚·麦科勒姆(Cecilia McCollum)说:“我们非常高兴美国食品药品管理局对我们的产品的确认。我们的目标就是为源自绿茶的天然的L-茶氨酸的纯净度设立新的标准,我们已经做到了。”L- TeaActive 成分是依照良好生产规范(GMP)和美国国家卫生基金会(NSF)的ISO-9001:2000 质量认证进行生产的,并且蓝色加州是经Kosher 认证(一种犹太食品认证)的公司。

  • 【每日一贴】胱氨酸

    【中文名称】胱氨酸;双巯丙氨酸-二硫代双丙氨酸【英文名称】cystine【结构或分子式】 【相对分子量或原子量】240.30【密度】1.677【熔点(℃)】260(分解)【性状】 白色六角形板状晶体或结晶粉末,无味。【溶解情况】 难溶于水,不溶于乙醇、苯、乙醚、氯仿,溶于烯酸和碱。【用途】 供生物化学和营养研究用。医药上,有促进机体细胞氧化和还原机能,增加白血球和阻止病原菌发育作用。主要用于各种脱发症。也用于痢疾、伤寒、流感等急性传染病、气喘、神经痛、湿疹以及各种中毒疾患等。并有维持蛋白质构型作用。 用作含硫氨基酸加到饲料种,可增加禽畜发育,增加体重化肝肾机能,提高毛皮质量,同时可减轻家禽啄癖症。【制备或来源】 广泛存在于毛、发、骨、角中,可由蛋白质(如人发)水解、精制而得,或由半胱氨酸在碱性水溶液中氧化而成。【其他】 有三种异构体:左旋体、右旋体、消旋体。【生产单位】 济南历城生物化工厂;平乐县制药厂;武汉大学九一生化微生物工厂;胶县氨基酸厂等

  • 【每日一贴】蛋氨酸

    【中文名称】蛋氨酸;甲硫基丁氨酸;甲硫氨酸;α-氨基-γ-甲巯基丁酸;2-氨基-4-甲巯基丁酸;DL-蛋氨酸;DL-2-氨基-4-甲硫基丁酸【英文名称】methionine;2-amino-4-methylmercaptobutyricacid;Met;DL-methionine【结构或分子式】 【相对分子量或原子量】149.21【密度】1.340(消旋体)【熔点(℃)】280~281(分解)(L体);281(消旋体)【性状】 白色片状晶体或结晶性粉末。【溶解情况】 (L体):溶于水和湿稀乙醇,不溶于无水乙醇、乙醚、石油醚、苯、丙酮。(消旋体):溶于水、烯酸和稀碱溶液,易溶于95%乙醇,不溶于乙醚。【用途】 能维持机体生长发育和氮平衡。适用于防治肝脏疾病和砷或苯等中毒。也可用于治疗痢疾和慢性传染病后因蛋白质不足而引起的营养不良症。可作饲料营养强化剂,在动物代谢过程中对肾上腺素合成胆碱和肝脂肪的磷脂起一定作用,蛋氨酸在体内可形成胱氨酸,本品与甘氨酸有拮抗作用,禽兽缺乏蛋氨酸会引起发育不良、体重减轻、肝肾机能减弱、肌肉萎缩、皮毛变质等。饲料中添加1kg蛋氨酸,相当于鱼粉50kg的营养价值,在饲料中添加量一般为0.05%~0.2%。【制备或来源】 可用酪蛋白经水解、精制而得。也可由甲硫醇与丙烯醛经斯特雷克合成反应制备。【包装及贮运】【生产单位】 天津河北制药厂;天津化工厂;吉林龙井制药厂;广东何济公制药厂;南宁第二制药厂;四川西南制药厂;吉林和龙县制药厂;江苏镇江制药厂;河北张家口东风制药厂等

  • 【分享】谷氨酸发酵液除菌体提取谷氨酸研究进展

    谷氨酸发酵液除菌体提取谷氨酸研究进展作者:佚名 文章来源:本站原创点击数: 222 更新时间:2010-4-14 13:19:04 file:///C:/Users/%E9%83%AD%E9%9B%B7/AppData/Local/Temp/msohtml1/01/clip_image001.gif我国味精生产,从发酵液中提取谷氨酸大多采用带菌体冷冻等电加离交法,由于发酵液中存在大量的菌体蛋白、悬浮物及其它杂质,给谷氨酸提取操作、提取收率、谷氨酸质量带来显著影响,且废水含高C0D、高B0D等严重污染环境的物质,又给废水治理带来重重困难。 近几年来,国内一些味精生产企业、研究所,对谷氨酸发酵液除菌体及提取谷氨酸进行了大量研究,除菌体工艺有高速离心机分离,絮凝剂分离、膜分离等,都取得了明显成果。按除菌体不同工艺、除菌体率分别达到70%~96%,以膜分离法除菌率最高达95%以上,得到的发酵液澄清,0D低,谷氨酸提取操作方便,由于除去了影响谷氨酸结晶的大量杂质,因而谷氨酸结晶颗粒大,纯度高、质量好,易于沉降分离,提取收率明显提高。高纯度谷氨酸有利于味精精制,味精中和脱色过滤可降低活性碳或树脂用量,提高味精结晶质量,大大降低味精生产成本。除菌体后的发酵液及等电提取后的废液中C0D、BOD大大减少,减轻了环境污染,降低了废水治理负荷与难度。得到的菌体经干燥后可以综合利用,作高蛋白质饲料或作核苷酸的生产原料。 谷氨酸发酵液除菌体及多种新工艺提取谷氨酸的研究,是对我国味精工业清洁生产的有益探索。随着研究的不断深化,许多先进工艺技术将会被应用,味精生产终将进入一个新水平。 1 高速离心分离除菌体,浓缩等电提取 沈阳味精厂从瑞典引进4台ALFA—LAVA公司的FESX5l2S一3lC型蝶片式高速喷咀离心机,转速4650I1) 分,功率45kw,对玉米淀糖为碳源,尿素作氨源、玉米浆为生物素的T一6l3菌发酵液进行了工业性除菌体,进料量20m ,喷咀直径1.0mm,菌体分离率达70%以上,轻流占75% ,重流占25%左右,除菌体后发酵液中谷氨酸略增,还原糖下降,0D值明显降低,工业规模运转证明,该设备对分离谷氨酸发酵液性能可靠,比较适宜。 发酵液除菌体后采用浓缩等电点提取法。 除菌体后的发酵液,经减压蒸发到含谷氨酸12%~15% ,后与重液经水解浓缩制成的二次蒸发液进行等电中和(60℃、40l1)m搅拌),然后冷却、沉淀、离心分离,提取达83.14%~85.03%,比带菌体浓缩等电点提取收率77.24%显著增加。且谷氨酸含量高达96%(干),用于制造味精时脱色液过滤快,透光率高,味精质量好。 2 凝聚剂除菌体一次等电或浓缩等电提取 使用安全性高的壳聚糖作絮凝剂,其阳离子性能与发酵液中菌体(带负电荷)与蛋白凝聚使其沉淀而进行分离。壳聚糖对金属离子、蛋白质、氨基酸、核酸均有很强的吸附能力,特别对胶体微粒有甚大的絮凝作用,其官能基团主要是氨基。在最佳pH、搅拌速度、用量、温度条件下,菌体去除率可达9O%左右。 壳聚糖不易溶于水,而溶解于酸性溶液中。配成一定浓度后,于发酵液中慢慢加人,搅拌速度也以慢为好。过快易将凝絮物打碎,难过滤。菌体凝聚沉降后,抽取上清液,沉降物可加硅藻土或珍珠岩作助滤剂,尤以硅藻土作助滤剂好,不吸附谷氨酸。中试规模过滤可用板框压滤,小试规模实验室中,采用高速离心机分离。应用国产高速离心机分离除菌体凝絮物(包括菌体)至今未见报导,这也是用凝絮法除菌体不能很快推广的一个较大问题。凝聚法去除菌体后的谷氨酸发酵液的提取方法有: 2.1一次等电点法 谷氨酸发酵液经絮凝处理后,采用一次等电点法,(即用酸逐步调到pH3-2法)提取收率可达76.18% ,比对照收率71.3%提高6.2% ,谷氨酸结晶的透光率52.25% ,比对照l1.25%提高了4倍;谷氨酸提取后的母液,可减少谷氨酸0.06%~0.11%。这是提高谷氨酸收率的一个重要原因,即去除了干扰谷氨酸结晶因素。 2.2 浓缩等电点法 将除菌体经过滤的发酵液,真空浓缩一倍,用加热快速调pH的方法,一次性直接调到pH3.2。搅拌到常温,再搅拌2h~3h时,沉淀3h,离心分离谷氨酸,谷氨酸一次收率平均可达85%左右,纯度可达95%左右,且调节pH的酸用量比普通谷氨酸等电点法用量要少。 2.3 先等电提取后浓缩再提取法 谷氨酸发酵液除菌体后,先用一次等电点法(常温或冷冻)提取出谷氨酸的60%~75%,残母液中含1.2%~1.5%左右的残谷氨酸,再加以浓缩(通过多效蒸发器)3倍,再提出剩余谷氨酸,总收率可达85%以上。母液浓缩成浆状可作肥料,再根据当地的土质情况,适当添加磷、钾等肥效成分。这条工艺路线是既提高了谷氨酸的提取收率,又产生综合效益。从发酵液分离出

  • 迪马AAA氨基酸柱 这样测半胱氨酸 可以吗??

    迪马AAA氨基酸柱 这样测半胱氨酸 可以吗??

    先简单 介绍——————做氨基酸 检测想了解详细资料,请自己到迪马科技官网自行下载http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09510.gifPITC柱前衍生法18种天然氨基酸分析(异硫氰酸苯酯柱前衍生法)——序列号: D0241 适用范围 该方法适用于氨基酸注射液、动植物性食品和饲料中 Asp(天冬氨酸)、Glu(谷氨酸)、Ser(丝氨酸)、Gly(甘氨酸)、His(组氨酸)、Arg(精氨酸)、Thr(苏氨酸)、Ala(丙氨酸)、Pro(脯氨酸)、Tyr(酪氨酸)、Val(缬氨酸)、Met(蛋氨酸)、Cys(胱氨酸)、Ile(异亮氨酸)、Leu(亮氨酸)、Phe(苯丙氨酸)、Trp(色氨酸)、 Lys(赖氨酸)等 18种天然氨基酸的检测http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203131711_354396_2019107_3.jpg2 溶液配制 氨基酸储备液: 称取一定量氨基酸标准品,用 0.1 mol/L HCl水溶液溶解,胱氨酸为0.01 mol/L,酪氨酸为0.02 mol/L,其他氨基酸为 0.05 mol/L 氨基酸使用液: 将储备液用0.1 mol/L HCl水溶液稀释,得到浓度为 0.002 mol/L 的氨基酸单标和混标 内标液: 以正亮氨酸作为内标物。称取一定量正亮氨酸,溶于 0.1 mol/L HCl水溶液,得到 0.02 mol/L 的正亮氨酸内标液 异硫氰酸苯酯溶液: 将 250 μl 异硫氰酸苯酯用乙腈乙腈定容至 10 ml,得到0.2 mol/L 异硫氰酸苯酯溶液 三乙胺溶液: 将1.4 ml三乙胺用乙腈定容至 10 ml,得到1.0 mol/L 三乙胺溶液 标准溶液衍生化 量取 200 µl氨基酸混合标准溶液(每种组分浓度均为 0.002 mol/L),置于 1.5 ml塑料离心管中,准确加入20 μl正亮氨酸内标溶液、100 µl 1 mol/L三乙胺乙腈溶液和100 µl 0.2 mol/L 异硫氰酸苯酯乙腈溶液,混匀,室温反应 1 小时,然后加入正己烷 400 µl,旋紧盖子后剧烈振荡5~10 s,静置分层,取 200 µl下层溶液与 800 µl水混合,0.22 µm 针式过滤器过滤,待分析。注: 通过控制原始样品质量或稀释等方法,使样品溶液中的氨基酸总量不超过0.04 mol/L 或3.0 g/L(两者中取最小值) 只有采用内标法分析时,才需要加入正亮氨酸作为内标物 衍生得到的样品溶液中含有50%的乙腈,这与流动相溶剂体系存在较大差距,因而需要加水稀释,否则会引起峰前沿或分叉迪马科技AAA氨基酸柱子 洗脱条件 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646181_2019107_3.gifhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104221943_290383_2019107_3.gif

  • 聚谷氨酸做肥料缓释剂的研发方案

    据说聚谷氨酸对肥料有缓释作用,领导要求我做一个实验方案.我大概整了一个如下,请大家指点.尤其是聚谷氨酸的缓释原理一块,有研究的版友务必给点指导哦.聚谷氨酸用作肥料缓释剂试验方案背景资料:聚谷氨酸是一种水溶的高分子化合物,具有高吸水性、生物降解性。在农业应用中,聚谷氨酸的作用有三方面:1,保水剂;2,病害抑制剂,3,肥料增效剂/缓释剂。其中做病害抑制及、肥料增效剂的报道较多,做肥料缓释剂的报道很少。聚谷氨酸作为肥料增效剂使用,据报道在肥料用量减少20%的情况下,产量与对照持平,还有报道聚谷氨酸可以抑制黄瓜病害,增加黄瓜生物量。还有资料称聚谷氨酸对肥料具有缓释作用,但是对缓释原理缺乏详细清晰的阐述。对于聚谷氨酸对药物的缓释原理,有文献是这样解释的:聚谷氨酸分子链上具有大量活性较高的侧链羧酸(-COOH),易于和一些药物结合生成稳定的复合物。这个原理或许可以借用来解释聚谷氨酸对肥料的缓释作用,这样的缓释机理与腐殖酸类物质有相似之处。据专利200710052667聚γ谷氨酸增效肥料,“实验证明,将聚γ谷氨酸或其盐与熔融尿素混匀造粒,成粒率提高2-3%,粉状产品减少,借助尿素和聚γ谷氨酸分子间化学键的结合作用,使尿素在土壤中缓慢释放,释放时间由原来的50天提高到200天左右,肥料利用率提高20%以上,在达到同样效果的前提下,可节约肥料20%以上,显著提高作物硝酸还原酶和过氧化酶的活性以及植物根系活力,效果明显优于添加其它脲酶抑制剂的尿素产品”。聚谷氨酸也有制作包膜肥料的先例。据VEDAN公司的资料,用聚谷氨酸浓度为0.05%、0.075%、0.1%浓度的溶液对尿素进行包膜,用紫外分光光度计测定尿素完全释放时间延长到300分钟(未包膜尿素的释放时间为75分钟)。达不到GB/T23348-2009缓释肥料标准的要求。根据上述背景资料,认为聚谷氨酸做包膜肥料产品效果并不理想。如果聚谷氨酸有缓释作用,添加聚谷氨酸的肥料产品缓释机理与包膜肥料、脲醛肥料、稳定性肥料都不同。测定聚谷氨酸添加肥料的缓释性能的试验方法也应与之不同。拟采用间隙淋洗法测定含有聚谷氨酸的尿素在土壤中的存留时间。 试验方案:试验原理:将待测肥料加入土壤,并加适量水,培养至一定时间后,用100.00ml 0.02mol/L的CaCl2溶液,分两次淋洗,收集淋洗液,加碱,蒸馏。馏出组分用硼酸吸收,最后用硫酸滴定,并计算出铵的含量。根据各阶段淋洗液中铵态氮的含量,判断聚谷氨酸对铵态氮肥的保蓄作用。土壤与肥料样品的选择:为了先找到合适的试验方法,简化操作,计划使用硫酸铵为肥料样品,取用广东酸性土为供试土壤,这样氮肥在土壤中的转化可以降至最低,最后可以通过检测淋出液中的铵态氮含量,来判断聚谷氨酸对肥料的保蓄作用。确定试验方法可用后,再扩展到其他形态 氮肥、磷、钾肥。所需仪器、试剂:直径6cm,长10cm的锥底硝化管(拟用100毫升注射器代替,试验前在底部垫一小块棉花,以防止土壤颗粒堵塞小孔),半透膜,蒸馏装置,滴定装置,紫外可见分光光度计,火焰光度计、其他实验室常用装置。蒸馏水、0.02mol/LCaCl2溶液、硼酸吸收液、浓氢氧化钠溶液、硫酸滴定液。一、准备肥料样品根据博尔日公司产品宣传资料,聚谷氨酸在造粒肥料中的添加量可达到千分之一或千分之三左右。取硫酸铵100g,聚谷氨酸1g,将两者研磨均匀,得到聚谷氨酸添加量为千分之十的肥料样品A;取样品A 50g,加硫酸铵50g,研磨均匀,得到聚谷氨酸添加量为千分之五的肥料样品B;取样品B40g,加硫酸铵60g,研磨均匀,得到聚谷氨酸添加量为千分之二的肥料样品C。二、准备土壤样品取广东酸性土壤,风干、粉碎、过筛备用。三、试验步骤1, 取硝化管8支,塞入一小团棉花(或者玻璃毛),先加土壤至距管口5cm处,再分别取粉末状硫酸铵、上述肥料样品A、B[font=宋

  • 味精中谷氨酸单钠含量的旋光法测定

    一、实验目的掌握旋光法测定谷氨酸单钠的原理,熟悉旋光法测定谷氨酸单钠含量的方法。二、实验原理谷氨酸单钠分子结构中含有一个不对称碳原子,具有光学活性,能使偏振光面旋转一定角度,所以,可用旋光仪测定其旋光度,并根据旋光度换算成谷氨酸单钠的含量。三、仪器与试材1.仪器与器材旋光仪(精度±0.010),带有钠光谱D线589.3nm的钠光灯。2.试剂除特别说明外,实验中所用试剂均为分析纯,水为去离子水或蒸馏水。常规试剂:HCl。3.实验材料2~3种味精(纯度大于99%),各50g。四、实验步骤1.样品处理(1)称取样品10.0000g,加少量水溶解并全部移入100mL容量瓶中。(2)加20mILHCl,混匀,冷却至20℃后,补加水至刻度,摇匀。2.测定在20℃恒温室中,先用标准旋光角校正仪器。然后,将上述试液置于旋光管中(注意不能产生气泡),观测其旋光度,同时记录旋光管中溶液的温度。3.计算样品中谷氨酸单钠的含量按下式计算:a/LcX=─────────×10025.16+0.047×(20-t)式中,X为样品中谷氨酸钠的含量,%;a为实测试液的旋光度;L为旋光管的长度(即液层厚度),·dm;c为1mL试液中含谷氨酸钠的质量,g/mL;25.16为谷氨酸钠的比旋光度苫;t为溶液的温度,℃;0.047为温度校正系数。

  • 【原创大赛】VIII因子氨基酸含量测定之:组氨酸与甘氨酸快快分开!

    本人在8月发表的一篇原创中提及”甘氨酸与组氨酸无法分离“的问题,在经过10多天的准备,已有不小的收获,现在分享。摘要 目的: 建立用高效液相色谱法测定人凝血因子VIII中氨基酸含量。方法: 采用6 - 氨基喹啉- N - 羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯( AQC) 为衍生剂,与氨基酸柱前衍生后,用Agilent 1200 高效液相色谱仪,AccQ·Tag C18柱( waters 150 mm ×3. 9 mm,4 μm) ,以水Eluent( 醋酸盐- 磷酸盐缓冲液) 稀释液和乙腈进行梯度洗脱,检测波长为248 nm,柱温37 ℃,进样量10μL。结果: 各氨基酸在32 min 内测定完毕,回收率为98.7% ~ 101.5%。RSD 均小于1. 5%。结论: 本法分离度好,快速、简便,可作为产品的质量控制方法。关键词: 6 - 氨基喹啉- N - 羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯; 人凝血因子VIII; 甘氨酸; 衍生物; 梯度洗脱; 高效液相色谱法;氨基酸; 含量测定人凝血因子VIII,本品对缺乏人凝血因子礓所致的凝血机能障碍具有纠正作用,主要用于防治甲型血友病和获得性凝血因子Ⅷ缺乏而致的出血症状及这类病人的手术出血治疗。该药物制备过程中使用了氨基酸( 精氨酸、丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、盐酸赖氨酸、脯氨酸 等) 做稳定剂,为了保证药品质量和用药安全,应对其中氨基酸的含量进行控制。该法依据过量的6 - 氨基喹啉基- N - 羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯( AQC) 在一定条件和氨基酸形成稳定的衍生产物( 柱前衍生) ,用高效液相色谱法测定衍生产物,根据衍生产物的含量计算人凝血因子中各氨基酸的含量。1 仪器和试药1200 高效液相色谱系统( 美国Agilent 公司) ,配置低压四元梯度泵、1314B 紫外吸收检测器、自动进样器、柱温箱、Chemistations 化学工作站; Sartorius CP225D 电子微量天平( 德国Sartorius 公司) ; SartoriusPB - 21 型pH 计( 德国Sartorius 公司) ; LDZ5 -2 低速自动平衡离心机( 上海医用离心机厂) 等。各标准品均来自于中国食品药品检定研究院2 色谱条件及系统适用性试验色谱柱: Waters AccQ·Tag C18色谱柱( 3. 9 mm ×150 mm) ; 流动相: 水为溶剂D,Eluent( 醋酸盐- 磷酸盐缓冲液) 稀释液( A) - 乙腈( B) - 水( D) ,柱温:37 ℃; 检测波长: 248 nm。精密量取对照品溶液与供试品溶液10 μL,分别注入液相色谱仪,记录色谱图32 min。3 溶液制备3. 1 Eluent( 醋酸盐- 磷酸盐缓冲液) 稀释液称取三水乙酸钠190. 4 g,加注射用水1000 mL,搅拌,溶解,用稀磷酸将pH 调至5. 2,加入乙二胺四乙酸二钠溶液( 称取乙二胺四乙酸二钠100 mg,加注射用水100 mL,摇匀使其溶解) 10 mL,加入叠氮化钠0. 1 g 及三乙胺23. 7 mL( 17. 2 g) ,用稀磷酸滴定至pH 4. 95,用0. 45 μm 的滤膜过滤,于4 ℃储存,备用( 此条件下可保存6 个月) 。量取该溶液100 mL,加注射用水稀释至1000 mL,混匀,即得Eluent( 醋酸盐- 磷酸盐缓冲液) 稀释液。3. 2 对照品储备液混合对照品储备液精密称取各氨基酸对照品适量,置同一100 mL量瓶中,以注射用水溶解并定容至刻度。制成含氨基酸含量均含5. 0 mg·mL - 1 的混合对照品溶液,即得。单个对照品储备液: 精密称取各含氨基酸的各对照品适量,分别置100mL 量瓶中,用注射用水溶解并定容至刻度。制成分别含各氨基酸的单个对照品溶液,即得。3. 3 供试品储备液3. 3. 1 加样回收率试验溶液精密称取各氨基酸各0. 3200,0. 4000,0. 4800 g 和辅料适量,加人凝血因子VIII原液7. 5 mL,肝素钠适量,用1. 0 mol·L - 1 盐酸调pH 至6. 9,加0. 01 mol·L - 1枸橼酸三钠溶液溶解并定容于20 mL。分别制备成16. 0, 20. 0, 24. 0 mg·mL - 1溶液。3. 3. 2 空白溶液 按公司处方,加入辅料的混合物,用注射用水制备各空白溶液3. 4 内标溶液精密称取α - 氨基丁酸( AABA)0. 4 g,加注射用水定容至100 mL。4 氨基酸衍生方法4. 1 精密量取供试品储备液、样品及对照品储备液各1. 0 mL,加1. 5%磺基水杨酸9. 0 mL,混匀静置2 h以上, 3000 r·min - 1离心10 min,留取上清液。4. 2 精密量取“4. 1”项下上清液1. 0 mL( 其中对照品储备液对应上清液分别精密量取0. 06, 0. 4,0. 8,1. 0, 1. 2, 1. 6 mL) ,分别置10 mL 量瓶中,用注射用水定容。制备成供试品溶液、样品溶液及浓度分别为1. 5, 10. 0, 20. 0, 25. 0, 30. 0,40. 0 mg·mL - 1 的对照品溶液。4. 3 精密量取“4. 2”项下溶液各100 μL,分别加注射用水0. 4 mL 及内标溶液20 μL,混匀备用。4. 4 精密量取“4. 3”项下溶液30 μL 放入衍生管中,加硼酸缓冲液( pH 8 ~ 10) 210 μL 涡旋混合,并加入AQC 衍生剂60 μL 涡旋混合15 s,即为各供试品溶液,待用。

  • 请教有关苯丙氨酸

    要做一个苯丙氨酸样品GC含量测定,对方提供方法DB-WAX柱190度恒温,FID:250度,没提供用什么试剂溶解,我查了一下苯丙氨酸物理性质溶于热水,不溶于乙醇甲醇乙醚,溶于甲酸,在烯酸或氢氧化钠试剂中易溶,但是DB-WAX不适合进水样啊,请问高手该怎么处理样品呢?可以用甲酸溶解进DB-WAX柱吗?

  • 酪氨酸如何进质谱

    现在想进一针酪氨酸,但是不溶于水,需要用盐酸溶解,请问进质谱怎么解决溶解性问题

  • 基因工程构建菌种生产L-苏氨酸

    摘要 文章主要介绍以基因工程构建菌种E. coli (pTH08+prh-T04)/VT418发酵生产L-苏氨酸,在10M3发酵罐中发酵产酸8.5-9.0%;转化率39-41%;周期48-52小时。文章强调在苏氨酸发酵过程中pH值以及溶氧的控制非常重要关键词:基因工程、发酵、苏氨酸一、前言L-苏氨酸是一种必需氨基酸,按世界粮农组织的标准计算,一克食品蛋白质中含苏氨酸40mg,占全部氨基酸的11%。欧美型食品中缺少苏氨酸,补充苏氨酸就能提高食品的营养价值。配合饲料也需要苏氨酸,因此近十年来,苏氨酸生产增长了5.3倍。具统计,1990年全世界苏氨酸产量为700吨/年,1996年增加到4000吨/年,2002年则猛增至35000吨。资料显示,使用植物型饲料,成畜必需添加赖氨酸和苏氨酸,比例为10:1,而幼畜为3:1。按10:1计算,目前全世界苏氨酸的需求量不应低于5万吨/年,缺口为较大。苏氨酸的生物合成途径及代谢调控机理来看,苏氨酸和赖氨酸一样,同属天冬氨酸族氨基酸。是葡萄糖经糖酵解途径生成丙酮酸,再经三羧酸循环CO2固定反应生成四碳二羧酸,后经氨基化反应生成天冬氨酸。国内外通常用传统育种和基因工程方法来获得苏氨酸的高产菌种,传统育种目前最高产酸为2-3%。在基因工程菌方面,木柱等将解除AKⅠ和HDⅡ反馈抑制的突变株HNr59的Etr-1基因导入产苏氨酸25g/L的T-693菌株,选育出具有6种调节变异组合的转导子T-1026,相同条件下可产苏氨酸40g/L。据日本味之素公司报道,用E.coliK12菌株(AHVr+Ile-+Met-+pro-)含苏氨酸合成酶操纵子基因的质粒转化E.coliK12(Thr-),积累苏氨酸13.4g/L(转化率40%),小罐发酵产酸65g/L,转化率48%。前苏联全苏工业微生物遗传育种研究所的Debabov等构建了大肠杆菌基因工程菌E.coli BKIIMB-3996 工程菌,重组质粒Pvic40中含苏氨酸操纵子的三个基因thr A, thrB, thrC,遗传标记为Sac+(能以蔗糖为碳源), thr r (抗苏氨酸)和Hser(抗高丝氨酸),在蔗糖为碳源的流加补料方式,最高产量为85.0 g/L。综上所述,国内外用传统育种方法的菌种产酸水平在30-40g/L;用基因工程方法的菌种产酸水平在80-90g/L。二、材料与方法1. 菌种:E. coli (pTH08+prh-T04)/VT418 (上海新立公司构建)2. 培养基配方2.1 斜面培养基(g/l)葡萄糖 2.0 NH4Cl 1.0 KH2PO4 1.5 Na2HPO4 3.5 MgSO4·7H2O 0.1琼脂 20.0 加蒸馏水溶解,调pH7.0-7.2,定容1000ml,0.8Kg/cm2灭均30分钟,冷却至50℃左右加入氨苄青霉素溶液,最终浓度为50γ/ml。2.2 摇瓶种子培养基(g/l)葡萄糖 40.0 KH2PO4 1.0 MgSO4·7H2O 0.5 (NH4)2SO4 10.0 玉米浆2.0 CaCO3 15 氨苄青霉素 50γ/ml 加自来水溶解,调pH7.0-7.2,定容1000ml,分装至500ml摇瓶,0.8Kg/cm2 灭菌30分钟,接种前加入CaCO3(121℃,60分钟灭菌,烘干)和氨苄青霉素。2.3摇瓶发酵培养基(g/l)葡萄糖 80.0 (NH4)2SO4 25.0 KH2PO4 2.0 MgSO4·7H2O 1.0MnSO4·5H2O 0.5 FeSO4·7H2O 0.5 CaCO3 30.0 加自来水溶解,调pH7.0-7.2,定容1000ml,分装至500ml摇瓶,0.8Kg/cm2 灭菌30分钟,接种前加入CaCO3(121℃,60分钟灭菌,烘干)2.4 种子罐培养基葡萄糖4% (NH4)2SO4 1% KH2PO4 0.1% MgSO4·7H2O 0.05% 玉米浆 0.2% 泡敌0.01%。加水溶解pH自然,121℃灭菌20分钟,消后定容400L。接种前加入无菌氨苄青霉素50ug/L。2.5 发酵罐培养基葡萄糖8% (NH4)2SO4 2.5% KH2PO4 0.2% MgSO4·7H2O 0.1%FeSO4·5H2O 0.05% MnSO4·5H2O 0.05% 泡敌 0.01%。加自来水溶解pH自然,121℃灭菌20分钟,消后定容5.1M3。1.0Kg/cm2灭菌20分钟。

  • 【求助】焦谷氨酸在反相柱的保留问题

    各位大侠,最近在用超高效液相色谱做焦谷氨酸,目前只有c18反相柱,焦谷氨酸在柱子上很快就跟溶剂差不多出来了,请问在不换柱子的前提下(没有正相柱),有没有在流动相做手脚,我用甲醇-乙酸铵做流动性,也已经调PH值至3.4,可没有多大效果,是否可以加入离子对?请帮忙!

  • 【每日一贴】赖氨酸络合铜

    【中文名称】赖氨酸络合铜【英文名称】copper lysine complex【性状】 浅蓝色粉末,无臭。【溶解情况】 微溶于水,不溶于乙醇、乙醚、氯仿。【用途】 营养性添加剂,可用于食品、医药、饲料等行业。【制备或来源】 以赖氨酸和无机铜盐为主要原料,通过络合反应制得。【生产单位】 略

  • 【每日一贴】甘氨酸络合铁

    【中文名称】甘氨酸络合铁【英文名称】ferric glycine complexes【性状】 土红色粉末。无臭。【溶解情况】 微溶于水,不溶于乙醇、乙醚、氯仿。【用途】 营养性添加剂,可用于食品、医药及饲料等行业。【制备或来源】 以甘氨酸及无机铁盐为主要原料,通过络合反应制得。【生产单位】 略

  • 【每日一贴】蛋氨酸络合锌

    【中文名称】蛋氨酸络合锌【英文名称】zinc methhionine complex【性状】 白色或类白色分粉末,无臭。【溶解情况】 在水、乙醇、乙醚、氯仿中不溶。【用途】 营养性添加剂,可用于食品、饲料、医药等行业。【制备或来源】 以蛋氨酸和无机锌盐为主要原料,通过络合反应制得。【生产单位】 略

  • 【每日一贴】蛋氨酸络合锰

    【中文名称】蛋氨酸络合锰【英文名称】manganese methiionine complex【性状】 浅灰褐色粉末。无臭。【溶解情况】 在水、乙醇、乙醚、氯仿中不溶。【用途】 营养性添加剂,可用于食品、医药、饲料等行业。【制备或来源】 以蛋氨酸和无机锰盐为主要原料,通过络合反应制得。【生产单位】 略

  • ε-聚赖氨酸

    ε-聚赖氨酸是一种具有抑菌功效的多肽,是目前天然防腐剂中具有优良防腐性能的微生物类食品防腐剂。它由25~35赖氨酸残基聚合而成,是一种营养型防腐剂,安全性高于其他防腐剂。ε-多聚赖氨酸产品特点1) 抑菌谱广 ε-聚赖氨酸对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、酵母菌、霉菌均有很好的抑菌效果,并且对一些耐热性芽孢杆菌和病毒也有一定抑制作用。 2) 安全性能高 当人体食用后,可降解为L-赖氨酸这一人体必需氨基酸,无任何毒性,并于2003年通过了美国食品和医药管理(FDA)的许可。3) 热稳定性好 ε-聚赖氨酸在高温条件下很稳定,80℃ 60min及120℃ 40min加热,均保持其抑菌能力,它能承受一般食品加工过程的热处理,可随原料一同进行灭菌处理。 4) 水溶性极强 ε-聚赖氨酸的水溶性好,有利于在食品中的添加使用。  多聚赖氨酸作为抑菌剂在食品中使用时,通常与其他物质配合使用,以达到增效和经济的目的。常用的配合物质可分为五类:1.酒精,使用量为30%~70%,主要应用于各种蛋制品;2.有机酸,常常使用的有机酸一般有醋酸、苹果酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸等,使用量在0.5%~50%之间,主要应用于米饭、饮料、色拉、酱类等食品;3.甘油酯,甘油酯多为低级脂肪酸酯,用量在0.01%~5%之间,主要用于动物性蛋白、乳蛋白较多的食品;4.甘氨酸,用量为0.01%~10%,主要应用于牛奶防腐;5.其他天然抑菌剂,如鱼精蛋白、茶多酚等。

  • 【每日一贴】赖氨酸络合钴

    【中文名称】赖氨酸络合钴【英文名称】cobalt lysine complex【性状】 紫红色粉末,无臭。【溶解情况】 微溶于水,不溶于乙醇、乙醚、氯仿。【用途】 营养性添加剂,用于食品、医药、饲料等行业。【制备或来源】 以赖氨酸和无机钴盐为主要原料,通过络合反应制得【生产单位】 略

  • 【每日一贴】蛋氨酸络合钴

    【中文名称】蛋氨酸络合钴【英文名称】cobalt methionine complex 【性状】 粉红色粉末。无臭。【溶解情况】 在水、乙醇、乙醚、氯仿中不溶【用途】 营养性添加剂,可用于食品、医药、饲料等行业。【制备或来源】 以蛋氨酸和无机钴盐为主要原料,通过络合反应制得。【生产单位】 略

  • 【每日一贴】赖氨酸络合铁

    【中文名称】赖氨酸络合铁【英文名称】ferric lysine complex【性状】 黑褐色粉末。无臭。【溶解情况】 微溶于水,不溶于乙醇、乙醚、氯仿。【用途】 营养性添加剂,可用于食品、医药、饲料等行业。【制备或来源】 以赖氨酸和无机铁盐为主要原料,通过络合反应制得。【生产单位】 略

  • 【每日一贴】蛋氨酸络合铁

    【中文名称】蛋氨酸络合铁【英文名称】ferric methionine complex【性状】 棕红色粉末,无臭。【溶解情况】 不溶于水、乙醇、乙醚、氯仿。【用途】 营养性添加剂,可用于食品、医药、饲料等行业。【制备或来源】 以蛋氨酸和无机铁盐为主要原料,通过络核反应制得。【生产单位】 略

  • 【每日一贴】苏氨酸

    【每日一贴】苏氨酸

    【中文名称】苏氨酸;α-氨基-β-羟基丁酸;2-氨基-3-羟基丁酸;丁羟氨酸【英文名称】threonine;α-amino-β-hydroxybutyric acid【结构或分子式】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202041952_347776_1855403_3.jpg【相对分子量或原子量】119.12【熔点(℃)】左旋体255~257(分解)【性状】 无色晶体或结晶性粉末。【溶解情况】 易溶于水,不溶于无水乙醇、乙醚、氯仿。【用途】 用作营养剂和生物化学试剂。苏氨酸是必须的氨基酸,它在高等动物的体内不能合成,必须由体外供给。苏氨酸是重要的医药原料,主要用于氨基酸输液与制剂;是重要的食品添加剂,用于强化谷物、糕点、牛奶等;也是重要的饲料添加剂,用于猪等动物饲料:仔猪用量为0.85%,生长育肥猪0.68%。【制备或来源】 可由蛋白质(如酪蛋白)经水解、精制而得,或由丙烯酸衍生物中甲醇和乙酸汞合成。 采用葡萄糖核淀粉为原料,利用短杆菌、棒状菌类为菌种经过发酵后在提取得。【其他】 消旋体熔点229~230℃。【生产单位】 江西省鹰潭市生物化学制品厂;武汉化工学院

  • 关于谷氨酸和焦谷氨酸

    最近在做一个课题,夏天测谷氨酸的标线还是好好的,这俩天就不行了,我想问下谷氨酸的液相测定方法是如何测定的,我用的流动相是磷酸水溶液,因为谷氨酸是微溶于水的,所以配的浓度最高是25 mmoL/L,想问下大神们液相测定谷氨酸和焦谷氨酸的方法~ 谢谢~

  • 【分享】L-胱氨酸试剂纯度的测定

    L-胱氨酸试剂纯度的测定一.实验原理:在溴酸钾的标准溶液中,加入过量的溴化钾,将溶液酸化,发生反应生成溴。在有过量溴存在的强酸性溶液中(盐酸浓度1mol/L),胱氨酸和溴1:5发生反应,剩余的溴用碘化钾还原,析出的碘可用硫代硫酸钠标准溶液滴定。二.实验内容和实验步骤:1.硫代硫酸钠标准溶液的配制:称取约3.1-3.2g的带5个结晶水的硫代硫酸钠,用新鲜蒸馏水溶解,加入少量碳酸钠,稀释到约500ml,贮在棕色瓶子里。2.准确称取0.1740-0.1744g溴酸钾基准物质和2g溴化钾,溶解后定量转入250ml容量瓶,移取25.00ml该溶液,加25ml水,10ml(1+1)盐酸,放5-8分钟,然后加入20ml10%的碘化钾,再放5-8分钟,用硫代硫酸钠滴定到淡黄色,加2ml淀粉溶液,继续滴定到蓝色消失,记下消耗硫代硫酸钠的体积。3.溴酸钾标准溶液的配制:准确称取1.3360g干燥的溴酸钾,溶解并转移到100ml容量瓶中,移取25.00ml进入100ml容量瓶再稀释到刻度。4.从稀释后的溴酸钾标准溶液中移25.00ml到锥形瓶中,加过量溴化钾固体和25ml 2mol/L的盐酸。放在冰浴中并盖上表面皿,放30分钟。5.准确称取0.21-0.22gL-胱氨酸试剂,用稀盐酸溶解后装入100ml容量瓶中,移取25.00ml加入步骤4中的溶液里,适当摇动反应5-10分钟。6.加入22-25ml 2mol/L的氢氧化钠溶液,再加入0.2mol/ L的碘化钾溶液20ml,立即用硫代硫酸钠滴定到淡黄色,加入淀粉指示剂,继续滴定到蓝色刚好消失,记下消耗的硫代硫酸钠体积。三.L-胱氨酸试剂纯度的计算过程:标定硫代硫酸钠标准溶液的浓度为C,滴定时消耗体积V,L-胱氨酸试剂质量为m,则L-胱氨酸试剂的纯度=(0.0012-2VC/5)*240.3/m*100%。来源:生命经纬

  • 谷氨酸钠99.0%的味精

    某标明为含谷氨酸钠99.0%的味精,挑选出其园粒状的结晶溶于水后,加入硝酸银溶液,有白色沉淀产生,证明该味精()。 A、纯度较高 B、掺有明矾 C、掺有白砂糖 D、掺有食盐

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