氟担菌宁

【作者】 钟兆健； 傅军； 陈晓颖；【机构】 广东药学院； 广东药学院 广州510224； 广州510224； 广州510224；【摘要】 目的:测定妇炎宁合剂中丹皮酚的含量。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil-C18柱,甲醇-水-醋酸(70∶30∶2)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长274nm,柱温为25℃。结果:丹皮酚在3.08~12.32μg/ml之间与峰面积线性关系良好(r=0.9990),平均回收率为100.7%,RSD=2.4%。结论:本法操作简便,结果准确可靠,可用于妇炎宁合剂中丹皮酚的含量测定。 更多还原【关键词】 妇炎宁合剂； 丹皮酚； 反相高

对广大版友来说，可能从事的都是分析，不知道有没从事研究的版友，这是我看到的一篇论文，感觉有一定用处，特转贴和大家分享！ 五种化学试剂的蛋清凝固效果及其防腐应用价值 姜吉良　吴　斌　邓香群 【摘要】目的:为尸体防腐剂改良研究积累资料。方法:将所选的五种化学试剂各配成几种不同浓度的溶液,加入蛋清作为指示剂,观察其蛋白质的凝固过程及效果。结果:甲醛、乙醇、醋酸、戊二醛、苯酚均能使蛋清凝固 它们的适宜浓度分别是2%~15%、35%~80%、5%~30%、0.8%~4%、1.5%~10% 常用浓度下乙醇凝固蛋清的速度最快,其次是戊二醛,甲醛最慢。结论:蛋清是较好的蛋白质凝固指示剂 甲醛、戊二醛和苯酚对蛋清固定效果较好,乙醇和醋酸对蛋清固定效果较差。 【关键词】化学试剂 蛋清 蛋白质凝固 适宜浓度 指示剂 尸体腐败主要是因各种酶对组织中的大分子物质不断分解,使组织结构逐渐解体所致。导致腐败发生的酶来源有二:机体自身的组织细胞和自然界中无处不在的微生物(特别是细菌),前者引起“自溶”,后者引起“它溶”。众所周知,酶属于蛋白质,具有强大的催化作用,故任何可以使蛋白质变性凝固的化学试剂都可通过抑制酶的生物活性而起到防腐作用。换句话说,保证化学防腐效果的有效途径就是寻找性能优良的蛋白质凝固剂。使蛋白质变性凝固的化学试剂主要有醛类、醇类、酚类、重金属盐类及某些酸。笔者从其中选择五种有代表性、使用较广的化学试剂,并以蛋清为指示剂进行实验,观察它们凝固蛋白质的过程及效果,以期丰富防腐剂改良研究的资料和实验方法。1　材料和方法1.1　材料准备: 实验前准备好的材料包括:蛋清300ml,蒸馏水1500 ml,分析纯甲醛、乙醇、戊二醛、醋酸、苯酚等化学试剂,100 ml和50 ml烧杯各30支,20 ml和50 ml注射器各两支,量筒、滴管、玻璃棒若干。1.2　溶液配制: 以各种试剂的常用浓度为标准配成中浓度溶液 以常用浓度的3/4、1/2配成两种低浓度溶液 以常用浓度的1.5倍、2倍配成两种高浓度溶液。每种浓度的溶液配制量均为50 ml。1.3　指示剂的使用: 为了便于观察蛋白质的凝固过程和效果,选择合适的指示剂是必要的。蛋清的蛋白质含量高,不含脂肪,新鲜时呈无色透明的胶状,不搅拌时不与水混溶,两者之间有明显的分界。实验时,通过注射器向每一杯配制好的溶液中缓慢加入10 ml蛋清。1.4　蛋清凝固过程观察及判断: 实验中,蛋清的蛋白质凝固时使蛋清发生三个方面的明显变化:一是颜色变化 二是透明度减低 三是流动性改变。当溶液中的蛋清表面形成一层完整的变色层,伴有流动性降低时,提示蛋清已发生显效凝固。当溶液中的蛋清团流动性丧失,用玻璃棒触碰无波动现象时,提示蛋清完全凝固。1.5　蛋清凝固效果检查: 蛋清完全凝固后,先记取杯中的溶液总量,然后将杯中的溶液到出并测量其量,用前者减去后者便得出杯中蛋清凝块的体积。取出蛋清凝块,观察其颜色、硬度、弹性、脆性等,然后再将蛋清凝块放入原烧杯中,进行开放气象保存。1.6　补充实验: 在各种试剂的高浓度组中,如最高浓度溶液中的蛋清凝固时间最短,则配制更高浓度的溶液进行补充实验,直至浓度增加不能缩短蛋清的凝固时间 在试剂的低浓度组中,如两周内溶液中的蛋清全部凝固,则配制更低浓度溶液继续实验,直至两周内蛋清只出现显效凝固,不发生完全凝固。2　结果2.1　试剂的适宜浓度: 笔者将适宜浓度定义为化学试剂用来进行防腐处理时的合适浓度范围。在此范围内,既能保证试剂的防腐效果,又能控制其毒性和避免浪费。最短时间内使蛋清全部凝固的最低浓度为最高适宜浓度,在观察期内(两周)只能使蛋清产生显效凝固,不出现全部凝固的最低浓度为最低适宜浓度。根据实验得出:甲醛、乙醇、醋酸、戊二醛、苯酚的适宜浓度分别是2%~15%、35%~80%、5%~30%、0.8~4%、1.5%~10%。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2008/11/200811230941_119910_1643419_3.gif[/img]

SNT 2320-2009 进出口食品中百菌清、苯氟磺胺、甲抑菌灵、克菌灵、灭菌丹、敌菌丹和四溴菊酯残留量的检测方法 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]质谱法

有木有参加10月份辽宁出入境PTC-T140菌落总数能力验证，求交流

凝固酶阳性葡萄球菌浅析炎热的夏天，你是不是经常发现食物不耐放了，早上做的糕点、八宝粥等，到了下午就有异味，而且稍不注意，还会拉肚子。这很可能就是食物受到细菌的污染，食物中的细菌产生了肠毒素，人们食用了这些含有毒素的食物，就会拉肚子，而这些产生肠毒素导致食物中毒的细菌，就包括了凝固酶阳性葡萄球菌。【了解凝固酶阳性葡萄球菌】　　葡萄球菌广泛分布于自然界，在空气、水、土壤、饲料、食品以及人和动物的体表粘膜等均有存在。大部分葡萄球菌是不致病的，也有一些致病的球菌，多数葡萄球菌致病菌株产生凝固酶，使血浆凝固。能产生加速人或兔血浆凝固的血浆凝固酶（游离血浆凝固酶）的葡萄球菌被称为凝固酶阳性葡萄球菌，可分为金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌。

氨氮絮凝做的时候空白也需要絮凝吗？为什么我做的絮凝空白很大。絮凝的时候调ph，调成12-14是否对结果有影响呢。絮凝的时候氨氮稳定吗，今天做了一个絮凝的质控，做出来偏低。而且第一天用的絮凝做的氨氮和第二天蒸馏做的氨氮差了两倍，会是什么原因呢

不久要过年放假了，实验室的凝胶色谱柱要闲置一段时间为了防止微生物在柱内生长需要在柱内保存抑菌剂，但是一般使用的叠氮化钠太难买了，不知道还有什么可以用于凝胶柱的抑菌剂可以选用，还望各位前辈不吝赐教。我所知道的抑菌剂有DPPA，不知道可不可以用于凝胶柱

提高回弹法检测混凝土抗压强度精确度的探讨回弹法检测混凝土抗压强度在我国使用已达四十余年,因其简便、灵活、准确、可靠、快速、经济等特点而倍受工程检测人员的青睐,是我国目前工程检测中应用最为广泛的检测仪器之一。当对工程结构质量有怀疑时,均可运用回弹法进行检测。但回弹法在使用过程中还是出现了较多的操作不规范、随意性大、计算方法不当等问题,造成了较大的测试误差。如何保证检测精度,使其在监督检验结构工程和混凝土质量中发挥应有的作用,已成为众多工程建设者所关注的话题。要提高回弹法的检测精度,应综合考虑以下几个方面因素。 1 　注意回弹法检测的适用条件 回弹法是通过回弹仪检测混凝土表面硬度从而推算出混凝土强度的方法,当出现标准养护试件数量不足或未按规定制作试件 对构件的混凝土强度有怀疑 或对试件的检验结果有怀疑时,可按《回弹法检测混凝土抗压强度技术规程》(JGJPT2322001) (以下简称《规程》) 进行检测。必须注意回弹法的使用前题是要求被测混凝土的内外质量基本一致,当混凝土表层与内部质量有明显差异,如遭受化学腐蚀、火灾、冻伤,或内部存在缺陷时,不能直接采用回弹法检测混凝土强度。 2 　测试前必须进行回弹仪的率定试验回弹仪的质量及测试性能直接影响混凝土强度推定的准确性,只有性能良好的回弹仪才能保证测试结果的可靠性。回弹仪的标准状态应是在洛氏硬度HRC 为60 ±2 的标准钢砧上,垂直向下弹击三次,其平均率定值应为80 ±2 ,否则回弹仪必须进行调整或校验。在单个构件检测中,一般只需测试前进行率定即可,但在大批量检测时,由于受现场灰粉及回弹仪自身稳定性等因素的影响,随着工作时间的延长,回弹仪的工作状态逐渐低于标准状态。有时一个批量检测项目检测前后回弹仪率定值的差异较大,从而导致测试结果偏低。因此,在大批量检测时,应随身携带标准钢砧,以便随时进行率定检测,适时更换,从而保证检测结果的精确性。 3 　测区选择要正确 检测构件布置测区时,相邻两测区的间距应控制在2 m以内,测区离构件端部或施工缝边缘的距离不宜大于0. 5 m且不宜小于0. 2 m 测区应选在使回弹仪处于水平方向检测混凝土浇筑面,并选在对称的两个可测面上,如果不能满足这一要求时,也可选在一个可测面上,但一定要分布均匀,在构件的重要部位及薄弱部位必须布置测区,并应避开预埋件。当遇到薄壁小构件时,则不宜布置测区,因为薄壁构件在弹击时产生的振动,会造成回弹能量的损失,使检测结果偏低。如果必须检测,则应加以可靠支撑使之有足够的约束力时方可检测。 4 　测试动作要规范,切忌随意操作 回弹法本身是一种科学的操作方法,国家也专门制定了相应的规程,不容许操作人员随意操作。回弹的精度也取决于操作人员用力是否合适和均匀,是否垂直于结构或构件的表面,是否规范操作。但实际检测中却很少有人严格按照标准规定的技术要求进行检测操作,责任心不强,敷衍了事,这样的检测将带来较大的测试误差,无法保证回弹质量,为此,应加强检测人员的职业道德素养,提高检测责任心,也只有如此,才能真正提高回弹法的检测精度。 5 　消除测试面因素的影响 《规程》规定:用于回弹检测的混凝土构件,表面应清洁、平整,不应有疏松层、浮浆、油垢、蜂窝、麻面。我们在检测时经常遇到麻面或有浮浆的构件,回弹前必须有砂轮磨平,否则结果偏低。在测试面达到清洁、平整的前提下,还需注意混凝土表层是否干燥,混凝土的含水率会影响其表面的硬度,混凝土在水泡之后会导致其表面硬度降低。因此,混凝土表面的湿度对回弹法检测影响较大,对于潮湿或浸水的混凝土,须待其表面干燥后再进行测试。建议采用自然干燥的方式。禁止采用热火、电源强制干燥,以防混凝土面层被灼伤,影响检测精度。 6 　注意碳化深度的测试取值 碳化深度值的测量准确与否与回弹值一样,直接影响推定混凝土强度的精度。在碳化深度的测试中,注意其深度值应为垂直距离,而非孔洞中呈现的非垂直距离。孔洞内的粉末和碎屑一定要清除干净之后再测量,否则将难以区分已碳化和未碳化的界线,造成较大的测试误差。测量碳化深度值时最好用专用测量仪器,不能采用目测方法。还有一种情况应特别注意,在检测已用粉刷砂浆覆盖的构件碳化深度时,由于测试面受水泥砂浆的充填渗透影响,其表层含碱量较高,而用于碳化测试的酚酞酒精溶液遇碱即变红,极易使人产生视觉误差,认为其碳化深度值很小。如果认真观察测试孔,可发现外表层颜色较深,而孔内混凝土所变的颜色较浅,这颜色较浅部分的厚度即为混凝土实际的碳化深度。这一点细微的差别,检测人员一定要注意区分。 7 　注意混凝土回弹值的修正 近年来,随着城市泵送混凝土使用的普及,采用回弹法按测区混凝土强度换算值表推定的测区混凝土温度值将明显低于其实际强度值。这是因为泵送混凝土流动性大,粗骨料粒径较小,砂率增加,混凝土的砂浆包裹层偏厚,表面硬度较低所致。因此在运用回弹法检测混凝土强度时,必须要事先了解到施工单位浇注混凝土的方式,并注意修正。另外,当检测时回弹仪为非水平方向且测试面为非混凝土侧面时,一定要先按非水平状态检测时的回弹值进行修正,然后再按角度修正后的回弹值进行不同浇筑面的回弹值进行修正,这种先后修正的顺序不能颠倒,更不能用分别修正后的值直接与原始值相加或相减,否则将造成计算错误,影响对混凝土强度的推定。 8 　测试异常时,需与钻芯法配合使用现行的工程施工中,普遍采用胶合板面的大模板,此种模板密闭性能极好但不透气,振捣过程中产生的气泡聚集在混凝土表面和大模板之间,不易排出,致使拆模后在混凝土表面存在大量的微小气孔,使混凝土表面不是很密实,如果混凝土养护跟不上,混凝土表面将不能有效地进行水化反应,不仅有粉化现象,而且混凝土碳化深度较大,造成混凝土表面强度低。如我市某一框架结构商住楼,在使用回弹仪抽检三层剪力墙混凝土时发现,全部抽检构件混凝土表面强度都比较低,只达到原设计强度等级的67 %。经查施工技术资料,该工程的混凝土配合比以及使用的原材料均不存在问题,施工单位混凝土搅拌后的管理也比较到位,遂用钻芯法取样复检,芯样上观察,混凝土表层10 mm 较疏松。内层较为坚硬,芯样检测结果是实际混凝土抗压强度符合原设计强度等级,从而避免了一次误判。 9 　建立本地区的专用测强曲线 国家标准虽给出了全国通用回弹法检测的测强曲线并由此得到测定混凝土强度值换算表,但全国统一曲线仅综合考虑到全国各地的原材料使用情况,没有把碎、卵石普通混凝土区分开来,而实际上回弹法检测碎、卵石普通混凝土强度是有很大差异的。而地区测强曲线正是充分考虑本地区的混凝土原材料、气候条件和成型养分护工艺,通过试验、校核、修正所建立的曲线,与通用测强曲线相比较,该曲线比通用测强曲线更接近实验数据,能更好的推算本地区混凝土的实际强度。因此,建立本地区的专用测强曲线,能有效地提高回弹法的检测精度。

请教下各位大神，怎么检测凝胶糖果中的死菌含量呢？急！！就是像QQ糖那种，要先融化吗？还是直接取样染色镜检？（问题是，融化是不是会把里面可能存在的活菌也灭了，直接染色镜检又不好固定，也不均匀。。。）

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一、实验目的1. 了解凝胶层析的原理及其应用。2. 通过测定蛋白质分子量的训练，初步掌握凝胶层析技术。二、实验原理凝胶层析又称排阻层析，凝胶过滤，渗透层析或分子筛层析等。它广泛地应用于分离、提纯、浓缩生物大分子及脱盐、去热源等，而测定蛋白质的分子量也是它的重要应用之一。凝胶是一种具有立体网状结构且呈多孔的不溶性珠状颗粒物质。用它来分离物质，主要是根据多孔凝胶对不同半径的蛋白质分子（近于球形）具有不同的排阻效应实现的。亦即它是根据分子大小这一物理性质进行分离纯化的。分离原理参见“理论部分的凝胶层析一节”。对于某种型号的凝胶，一些大分子不能进入凝胶颗粒内部而完全被排阻在外，只能沿着颗粒间的缝隙流出柱外；而一些小分子不被排阻，可自由扩散，渗透进入凝胶内部的筛孔，尔后又被流出的洗脱液带走。分子越小，进入凝胶内部越深，所走的路程越多，故小分子最后流出柱外，而大分子先从柱中流出。一些中等大小的分子介于大分子与小分子之间，只能进入一部分凝胶较大的孔隙，亦即部分排阻，因此这些分子从柱中流出的顺序也介于大、小分子之间。这样样品经过凝胶层析后，分子便按照从大到小的顺序依次流出，达到分离的目的。凝胶层析分离原理示意动画。对于任何一种被分离的化合物在凝胶层析柱中被排阻的范围均在0～100%之间，其被排阻的程度可以用有效分配系数Kav（分离化合物在内水和外水体积中的比例关系）表示，Kav值的大小和凝胶柱床的总体积（Vt）、外水体积（V0）以及分离物本身的洗脱体积（Ve）有关：Kav = (Ve－V0)/(Vt－V0) ----------- (1)在限定的层析条件下，Vt和V0都是恒定值，而Ve是随着分离物分子量的变化而改变。分子量大，Ve值小，Kav值也小。反之，分子量小Ve值大，Kav值大。有关凝胶层析柱中凝胶自身（基质）体积（Vg）、外水体积（V0）、内水体积（Vi）及柱床总体积（Vt）的参见示意图。凝胶层析柱中的几种层析峰。有效分配系数Kav是判断分离效果的一个重要参数，同时也是测定蛋白质分子量的一个依据。在相同层析条件下，被分离物质Kav值差异越大，分离效果越好。反之，分离效果差或根本不能分开。在实际的实验中，我们可以实测出Vt、V0及Ve的值，从而计算出Kav的大小。对于某一特定型号的凝胶，在一定的分子量范围内，Kav与logMw (Mw表示物质的分子量) 成线性关系：Kav ＝－b logMw + C --------- (2)其中 b,C为常数。同样可以得到：Ve ＝－b'logMw + C' --------- (3)其中 b', C'为常数。即 Ve 与 logMw 也成线性关系。我们可以通过在一凝胶柱上分离多种已知分子量的蛋白质后，并根据上述的线性关系绘出标准曲线，然后用同一凝胶柱测出其它未知蛋白的分子量。三、器材与试剂（一）器材1. 玻璃层析柱（(20mm×60cm）2. 恒流泵（或下口恒压贮液瓶）3. 自动部分收集器4. 紫外分光光度计5. 100ml试剂瓶6. 1000ml量筒7. 250ml烧杯8. 50ml、100ml烧杯9. 10ml（或5ml）刻度试管（二）试剂1. 标准蛋白（1）牛血清白蛋白：Mw=67,000（上海生化所）（2）鸡卵清清蛋白：Mw=45,000（美国SIGMA公司）（3）胰凝乳蛋白酶原A：Mw=24,000（美国SIGMA公司）（4）溶菌酶：Mw =14,3002. 未知蛋白质样品：由实验室准备3. 0.025M KCl－0.1M HAC(乙酸)（洗脱液1000ml）4. 蓝色葡聚糖－2000

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[color=#3e3e3e]柠檬泡水一定要淡。如果用柠檬水代替白开水来解渴，则泡水时一定要淡。一大片带皮柠檬泡1升水，能倒3~4小杯，一般冲泡2~3次，没有柠檬味道时换片新的即可。这样泡出来的柠檬水不酸不涩，比较清香，不加糖或蜂蜜即可饮用。[/color]

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一：美白的功效与原理 柠檬属于冬季果实，味酸微甘，性微寒。柠檬耐久易保存，是一种富含维生素的营养水果，因此是美容的佳品。 皮肤上的黑斑雀斑以及小皱纹等，都是由于麦拉宁色素作怪而引起的，而只有维他命C才能分解这种色素。而柠檬含有丰富的维生素C，所以柠檬不仅能防止牙龈红肿出血，减少黑斑、雀斑发生的概率，还可以促进血液循环，对防止血管老化有一定作用。 柠檬中含有高达百分之四的有机酸，丰富的糖类和微量元素钙、磷、铁、及维生素B1、B2、维生素C、烟酸等多种营养成分，具有防止和消除皮肤色素沉着的作用能与皮肤表面的碱性物质中和，能防止和清除皮肤色素沉淀，去除油脂污垢。柠檬中所含的维他命C和果酸，具有抗菌、软化及清洁皮肤的作用，可深层清洁及增加脸部弹性，软化角质层，去除死皮，促进皮肤新陈代谢，可以预防皮肤老化、使人的皮肤柔嫩。二：美白方法 1.在洗净的脸上抹上几层柠檬黄瓜汁，保持40至50分钟，然后用清水洗去，再涂上护肤霜，连续涂抹20天就可收到效果。另外，油性或中性皮肤者定期用牛奶加柠檬汁混合液擦脸，也有增白皮肤的效果。 2.每晚临睡前用一片柠檬把脸擦一遍(不必太用力)，擦脸后不要立即洗脸，留待翌日起床后才用温水清洗。用柠檬洗脸，皮肤会有轻微的刺痛感觉，这属于正常现象，无须担心。 3.用蛋白(清)加入柠檬汁，拌匀，涂在脸上，待蛋液快干透时用温水洗净。此法可在工作劳累、皮肤缺乏生气时使用。 4.洗脸后，把沾上爽肤水的化妆棉，加上几滴柠檬汁混和，轻拍于脸上，有助脸部美白、软化角质及收细毛孔之效。 5.脸上若生了暗疮或痤疮，可将柠檬皮的油分挤出来抹在患处，每日1~2次，这样不但能治愈暗疮、痤疮，而且愈后不会留下痕迹。 6.常喝柠檬茶：将柠檬切片放入密闭的容器中，放入蜂蜜，加入凉水使得淹没柠檬片，盖好容器，放入冰箱。转天拿出两片即可泡水了，一个柠檬能喝一个星期左右。柠檬片泡水喝的最直接的功效就是美容，我们可以每天早晨喝一杯热柠水的，柠檬汁的份量以半只柠檬为宜。这会使眼睛更有神、皮肤更红润。常饮柠檬汁，可以白嫩皮肤，防止皮肤血管老化，消除面部色素斑，防治动脉硬化。

一、培养基明细： 名称 3%氯化钠碱性蛋白胨水（APW） 硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂（TCBS）3%氯化钠三糖铁琼脂（TSI） 嗜盐性试验用培养基 3%氯化钠甘露醇试验用培养基 3%氯化钠赖氨酸脱羧酶试验培养基 3%氯化钠MR-VP培养基 我妻氏血琼脂基础 氧化酶试剂 革兰氏染色液 ONPG V-P试剂盒 弧菌显色培养基

灭菌是指杀灭物体中所有微生物的繁殖体和芽孢的过程。消毒是指用物理、化学或生物的方法杀死病原微生物的过程。 灭菌的原理就是使蛋白质和核酸等生物大分子发生变性，从而达到灭菌的作用，实验室中最常用的就是干热灭菌和湿热灭菌。 干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度高（160～170℃），时间长 （1～2h）。但干热灭菌温度不能超过 180℃。否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。 高压蒸气灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸气。待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸气不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于 100℃的温度。导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大。其原因有三：一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低，二是湿热的穿透力比干热大，三是湿热的蒸气有潜热存在。这种潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度，从而增加灭菌效力培养基

[align=center][font=宋体, SimSun][b][color=#3f3f3f]茶多酚复合抑菌剂[/color][/b][/font][/align][align=center][font=宋体, SimSun][b][color=#3f3f3f]对冷鲜猪肉储藏期品质变化的影响[/color][/b][/font][/align][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#3f3f3f]由于消费者对化学防腐剂的恐惧，学者们将冷鲜肉保鲜材料的目光投向了天然保鲜剂；天然保鲜剂以其广谱、高效、安全的特点深受学者们的青睐。目前为止，冷鲜肉中常用的天然保鲜剂有：茶多酚、乳酸链球菌素、壳聚糖、天然香辛料、柠檬酸、乳酸、溶菌酶等。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#3f3f3f]在天然保鲜剂研究初期，众多学者大多研究单一天然保鲜剂的抑菌谱和对肉及肉制品中优势腐败菌的影响。但随着单一抑菌剂对肉制品品质的影响效果有限，人们逐渐将[b]研究方向由单因素转变为多因素协同作用[/b]，对抑菌剂的使用也倾向于多种抑菌剂的复合使用，以达到协同抑菌效果。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#3f3f3f]骆佳[/color][/size][size=10px][color=#3f3f3f][4][/color][/size][size=15px][color=#3f3f3f]等人以国内生猪屠宰企业的冷鲜肉为原料，用天然防腐剂茶多酚、乳酸链球菌素和乳酸钠的复合剂溶液，研究不同浓度组合下对冷鲜猪肉的新鲜程度的影响，结果显示，在单因素试验中茶多酚、乳酸钠、乳酸链球菌素各浓度的溶液能够明显的延长冷鲜肉的保质期。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#3f3f3f]由正交试验的结果可知，三种天然保鲜剂对冷鲜肉品质的影响依次为：茶多酚乳酸钠乳酸链球菌素。并最终确定了茶多酚与乳酸钠、[b]乳酸链球菌素的复配溶液的最佳配比为：茶多酚0.02%、乳酸钠0.25%、乳酸链球菌素0.04%[/b]，可将冷鲜肉保质期延长至9天。[/color][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][color=#3f3f3f]随着人们物质生活水平的提升，人们对食物的需求量越来越大，这就使得部分食物需要经过长时间的存储以及运输之后才能被食用，因此对食物进行防腐就成为必然措施。不同类型的防腐剂对不同种类的微生物能够起到较好的抑制作用，因此作为生产企业需要充分了解防腐剂的特性，并通过复配的形式提升防腐效果。[/color][/size][/font]

【序号】：4【作者】： 卢毅飞邓君王竞【题名】：乳酸乳球菌温敏水凝胶对糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响及其机制【期刊】：中华烧伤杂志. 【年、卷、期、起止页码】：2020,36(12)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CJFD&dbname=CJFDZHYX&filename=ZHSA202012044&uniplatform=NZKPT&v=qyaaPKggepGp2i48QFbRV6y-8E8KHCZskOCUhbnUh7PMDkFUs0xFyMEv-SpofRuG

欢迎[url=https://www.instrument.com.cn/bbs/user.asp?username=ning-meng]ning-meng[/url]担任质谱-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]（GCMS）版主！我们希望有更多的热心用户能加入到版主队伍中来，也希望在职的版主能在版面中发现有能力的热心用户推荐给我们。论坛正在招募版主，有兴趣的用户请参见这个帖子：[url=https://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20071101/1042199/]https://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20071101/1042199/[/url]

[align=center][img]http://www.oocat.net/Attachments/News/2009/8/200982417256802.JPG[/img][/align][b] 柠檬美白又防早衰[/b]　　柠檬所含的维生素C是苹果的5倍。　　研究发现，适量服用新鲜柠檬汁有助于身体对钙、铁的吸收，还能防止和消除皮肤色素沉淀、使肌肤光洁柔嫩，具有特殊的美容和防早衰作用。　　柠檬汁还能降低血脂，并可促进胃酸和胃蛋白酶的分泌，增加胃肠蠕动，有助消化吸收，此外还有很强的杀菌作用和抑制子宫收缩的功能。　[b]　推荐食用法：柠檬蜜膏[/b]　　原料：新鲜柠檬500克，蜂蜜300毫升。　　制法：先将柠檬连皮洗净榨汁；加入蜂蜜，用文火煎熬浓缩，至黏稠时停火，待冷装瓶随时适量取食。　　作用：止咳化痰、生津健脾，促进血循环，保持肌肤弹性延缓老化，降低胆固醇，还能中和胃肠中的毒素；常吃对预防癌症、糖尿病、高血压、动脉粥样硬化症、骨质疏松等疾病有一定作用。

在不少人眼中，溏心蛋鲜嫩美味，营养成分损失少。但其实，半熟的鸡蛋健康风险很大。鸡蛋是一种比较容易受到细菌污染的食品，其中最常见的致病菌是沙门氏菌。被污染的鸡蛋无色无味，肉眼无法分辨，一旦被感染后，通常在8到72小时之间，人会出现腹泻、腹痛、发烧等症状，免疫力比较弱的人有可能死亡。2010年10月份，美国爆发了一起鸡蛋被沙门氏菌污染的事件，被召回的鸡蛋总数多达5亿只。虽然不见得所有的鸡蛋都被致病菌污染，但这种可能性始终是存在的。消费者自我保护最有效的手段就是把鸡蛋充分煮熟。美国农业部的推荐是，鸡蛋制品加热到71℃以上。在这个温度下，沙门氏菌基本上被剿灭，蛋黄也凝固了。日常生活中，可以把“蛋黄完全凝固”当成鸡蛋“熟透”的标志。但如果蛋黄还处于“溏心”状态，甚至表面的蛋白都还没有凝固（鸡蛋的凝固温度大概在62℃），就不会实现有效灭菌，从而增加了被致病菌感染的风险。

猪链球菌2型病平板凝集试验操作规程,2005年最新行标[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=13572]猪链球菌2型病平板凝集试验操作规程[/url]

新华社沈阳12月10日电（记者 孙仁斌）记者10日从辽宁省环保厅获悉，《辽宁省环境空气质量考核暂行办法》公布以来，辽宁省首次给8个城市开出“雾霾罚单”，罚缴总计5420万元。据介绍，罚缴资金将全部用于蓝天工程治理环境空气质量。这样的罚款是否能解决问题？

简介多年以来，商品肉鸡频繁发生的肌胃腺胃炎发生的根源集中指向了霉菌毒素。如果是由于饲料污染或鸡舍环境污染尚可解决，但越来越多雏鸡出壳后就已经感染导致各种症状的出现且没有好的治疗策略，需要孵化场从根本上采取措施。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180416/c03d0343b8bb4c23bc4a29c91d947d5e.jpeg[/img][/align]孵化场孵化场是种蛋经21天的孵化变成1日龄雏鸡的重要场所，能够完成这一系列变化的孵化条件也是细菌和霉菌生长繁殖的最理想的条件。在孵化器内，温度大约为99.700F(一36.50c)，这一温度对于微生物的生长非常有利。孵化器内有加热(通过水或电)和冷却(通过空气或水)系统，当利用水进行冷却时，会发生冷凝现象，这会加剧刺激细菌的繁殖。为保持孵化器内有最佳的氧气，二氧化碳比例，还配备了通风系统。在出雏器内，大量的微生物存在于已出壳雏鸡周围的空气内。雏鸡出壳时，出雏器内还会产生更多的微生物、绒毛及雏鸡粪便。孵化厅内最重要的一点是要尽量减少种蛋及雏鸡与有害细菌和霉菌的接触，因此高效的卫生清洁措施是非常必要的。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180416/cfcc2ea54af843c9ac9e12e735860bd5.jpeg[/img][/align]孵化场霉菌污染关于霉菌本身的话，其实是真菌的一种，由于能产生孢子所以相当顽固，如果只是处理菌体本身，可能很快又会长起来。种蛋产出后往往容易受到环境和空气中细菌的污染，不仅影响其自身的孵化，而且污染孵化设备，传播各种疾病。种蛋的表皮外壳上不同程度的带有病菌(如沙门氏菌、巴氏杆菌、大肠杆菌、亚利桑那菌等)，虽然从蛋壳结构上看，种蛋有胶质层，蛋壳和内膜等几道自然屏障，但这些屏障对病菌的阻止能力有限。随着时间的推移，蛋面被污染，蛋面温度高，湿度大时，这些细菌(特别是霉菌)在壳上很容易繁殖，突破其阻止侵入蛋内，有些病菌会直接导致胚胎死亡，臭烂腐败；有些病菌则在雏禽孵出后发病死亡，并传染给没死亡雏禽的后代。严重影响种蛋的质量、对孵化极为不利，据测定，刚产下来的蛋表面有100-300个细菌，经1小时后可繁殖到 4000-5000个以上。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180416/4b0d5c29c1004a09a1343cf96036bb9d.jpeg[/img][/align]种蛋霉菌污染危害种蛋产出后往往容易受到环境霉菌的污染，如果种蛋入孵前不进行消毒，随着时间的延长，霉菌不断繁殖增多，这些霉菌附着在蛋体表面并且大量繁殖并侵人蛋内，不仅影响孵化效果,更严重的是污染孵化器和用具，传染各种疾病，并可能将疾病传播给雏鸡。尤其是雏鸡白痢病，危害很大。因此，给种蛋进行消毒，可以消除蛋壳上的病原微生物，减少胚胎死亡，而且还能提高鸡苗的成活率，因此种蛋的消毒非常重要。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180416/0b482a9c0c15443a95ff241204c2d77d.jpeg[/img][/align]种蛋消毒剂的选择随着规模化养鸡场及孵化场的发展，人们已经逐步懂得了消毒的重要性。在生产中使用消毒剂消毒，已经成为种蛋消毒的主要方式。但在实践生产中，实际情况比较复杂，对消毒剂的要求很高。单一消毒剂都存在着一些固有的缺陷，穿透有机物能力弱，受环境温度影响大，使用浓度高。消毒剂应选用无色、无味、无毒、无残留、无腐蚀性、无刺激性、对人体没有伤害；能迅速溶解于水并能快速释放出杀菌有效成分；对各种天然水中所含的各种类型的致病微生物都有强烈的杀灭作用；不与水中的无机物和有机物起反应或产生有毒的化合物；并且作用时操作简单方便。而奥克泰士D10型的出现，屏蔽了传统消毒剂的缺陷，提高了现代孵化场的效率，是种蛋消毒最理想选择。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180416/d323a26b817045f29f7a01e9698b3f71.jpeg[/img][/align]奥克泰士D10奥克泰士D10是德国原装进口产品，主要成分为食品级过氧化氢银离子。无毒、无色、无味、无残留、无腐蚀性，具有润湿、乳化、分散、渗透、去污、消毒和杀菌等功能。易溶于水，性能稳定，高效广谱等效用。作为新一代的生态型灭菌、消毒剂，以其独有的生产技术，基于“银离子”以及“食品级过氧化氢”，成为领先全球的产品。 产品达到ISO 9001和ISO 14001标准，IFS国际食品标准认证、欧盟EMAS检测认证、德国莱茵TUV认证等。经过了欧盟及众多国外研究机构组织检测，在被欧洲大多数国家广泛应用的同时，在澳大利亚、北美也被作为最新一代的杀菌、消毒剂而被认可。奥克泰士D10拥有强效的广谱杀菌效果，在杀灭病原体细菌，生物膜，藻类，酵母，真菌和病毒等物质时效果显著，产品功效是经过近200种细菌学，生物学，病毒学和毒物学的测试和验证过的。能穿透和破坏微生物的细胞壁和细胞膜，进入细胞内部使其关键性功能成分（例如：DNA和酶）坏死，从而导致细胞死亡。（食品级）过氧化氢是一种强氧化剂，释放的氧分子（初生态氧）将微生物的酶系统氧化。银离子妨碍细菌(酶)的基本的新陈代谢功能或影响他们的隔膜结构(微量活动)。 这两种成份都针对同一个目标，共同提高其性能(潜在的共同协作) 。无论是食品级过氧化氢还是银离子，对病原菌细胞内所有成分的破坏都是不可逆转的，这就保证了杀菌的彻底性，同时更重要的是，由于这种独特的机理也保证了病原菌不会产生耐药性。不仅如此，产品中银离子的加入更是起到了画龙点睛的作用，银离子对过氧化氢还能起到稳定剂和催化剂的作用，去除了过氧化氢的缺点（不稳定、在接近碱性环境下几乎没有杀菌能力等），强化了它的优点，产生了1＋1＞2的效应，使奥克泰士D10的杀菌效力更快速、更持久。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180416/3a772d83306e480d814b01bd856150e4.jpeg[/img][/align]奥克泰士D10产品特点1、完全环保，完全生物可分解，对人体无害，无腐蚀性，无残留，无抗药性。2、无色，无气味，无味道，不起沫，完全溶于水，使用安全，从而也保证了种蛋消毒过程中的灭菌率。3、杀灭细菌、真菌、病毒、阿米巴原虫等各种类型致病微生物。4、防治微生物重复污染种蛋。5、见效快，作用时间长，效果明显，能完全杀死有害菌。6、应用弹性大：在低浓度时，依然有显著效果，在高达95摄氏度时仍然能起作用。7、奥克泰士D10是世界公认的具有广谱、高效的消毒技术，直接作用于细菌的细胞膜，使其损伤，导致新陈代谢障碍直至死亡；直接破坏病毒的核糖核酸或脱氧核糖核酸直至杀灭。8、奥克泰士杀菌消毒彻底无死角，无残留，环保高效无二次污染。9、奥克泰士杀菌能力强，其杀菌能力是紫外线灯的1.5-5倍，比氯高1倍，在水中的杀菌速度比氯快600-3000倍。[align=center][img]http://5b0988e595225.cdn.sohucs.com/images/20180416/1a195379b94e4a66af4f1ebb3cc5be9b.jpeg[/img][/align]

本实验讲义是在接受了去年实验的成功经验和失败的教训的基础上编写的。实验的名字叫“分子生物学技术综合实验”，原来是想把它设计成一个彼此连贯、前后呼应的系列实验。但由于经费和条件的限制，还是放弃了这个念头。 实验分成两个部分：前一部分是DNA的操作，主要是DNA片段的亚克隆的方法；后一部分是蛋白的操作，主要是凝胶电泳和免疫杂交。两个部分的分量大致相当，但后一部分做起来对学生的收获可能更大些，因为很少有本科生能一个人原原本本地亲手做一做免疫印迹实验的。它的操作虽然并不复杂，但成本却很高，特别如果使用的是从公司购买的抗体的话。 实验讲义在文字上，主要参考了魏群主编的《分子生物学实验指导》，而在实质内容上，DNA操作部分更多的是参考了萨姆布鲁克等人的《基因克隆》第二版的中译本，蛋白质部分主要是根据自己平日工作的积累。 希望同学们能够珍惜这次机会，认真地做实验，真正地掌握些实实在在的实验操作技能，为今后的学习和工作打下基础。千万不要忽视实验技能的培养和提高，生物学的成就毕竟主要是通过实验干出来的。转化后细菌菌落的快速裂解及质粒大小的检查 一般情况下，可以根据质粒的大小来确定它是否带有插入片段。以下方法足以产生在琼脂糖凝胶的单个泳道上加样所需的DNA量。操作方法如下： 1. 使转化得到的细菌在含有氨卞青霉素的琼脂培养基(LB)上生长至菌落直径达1mm左右。 2. 用灭菌的牙签挑取单菌落的一小部分，在含氨卞青霉素的LB琼脂平板上划线。至少挑选20个左右的菌落照此划线，平板于37℃培养过夜，然后保存于4℃，直到相应菌落的回收。 3. L 灭菌的10mmo1／Lm在划线培养的同时，将每一菌落的剩余部分用牙签一一转移并洗脱到事先加有50 EDTA(pH8.0)的1.5mL离心管中。L配制的0.2mo1／Lm 4. 每管加50 NaOH、0.5％SDS、20％蔗糖溶液，振荡30秒。 5. 于70℃温育5分钟，然后冷却到室温。L 2mol／Lm 6.加3 KCl、0.2％溴酚蓝的溶液，振荡30秒。 7. 冰浴5分钟。 8. 用微量离心机于4℃以12000g离心3分钟，使细菌碎片的沉淀。 9. L上清液加入样品槽内(5×2.5mm，长×宽)。m制备1％的琼脂糖凝胶(5mm厚)，将50 10. 染料迁移到凝胶全长的2／3—3／4时，于室温将凝胶放入溴化乙锭溶液(0.5ug／mL水溶液)中，浸泡20—30分钟。 11. 紫外灯下观察、拍照。 通过与同时点样的载体质粒的比较，不难发现重组子：比载体质粒迁移慢的很可能是含有插入片段的重组DNA。可从保存于4℃的重新划线的平板上挑出相应的菌落，接种于2mL含抗菌素的LB培养液中培养过夜，然后提取质粒，用做重组时相同的限制酶做酶切鉴定。重组子应该可以切下预期大小的插入片段。

分离亲水气单胞菌外毒素的 功能高分子凝胶色谱填料 摘要 由丙烯 酰胺 和甲叉丙烯 酰胺 在水 油悬 液中共 聚得 到聚丙烯 酰胺凝胶 Z S P， 并用 I R、 溶 剂吸收 实验等对合成 的 Z S P的结构进 行了确证 。以商 品葡聚糖凝 胶色谱 S e p h a d d e x — G1 0 0为对 照 ， 研究 了 ZS P 一 1 0对 中华鳖致 病的亲水气单 胞菌外毒素蛋 白的分 离性能 ， 结果 表明经 S e p h a d e x — G1 0 0和 Z S P一 1 0提纯的外毒素蛋白均保留了生物活 ( 毒) 性 ， 纯度高 。 从 S DS — P AGE分析结果 ， 可以 认为经提纯的毒素蛋 白是分 子量 为 3 2 KDa的纯品。与 S e p h a d e x — G1 0 0凝胶相 比， 聚丙 烯酰胺凝胶 色谱填料 Z S P一 1 0对 蛋 白质 的回收率更 高， 且成本低廉 ， 不易染菌 ， 是具有 良好 的应 用前景 的蛋 白 质分离色谱填料。 关键词 ： 亲水气 单胞菌外毒素 聚丙烯酰胺凝胶 1 前言 在生物技术制取蛋 白质 的多级纯化过程中， 液相色谱被指定为一个必须步骤 ， 这表明操作条件温和、 又具有分子水平分离能力的液相色谱为开创现代生物大分子化学树立了一个里程碑。在液相色谱 中， 无论是哪一种层析方法 ， 分离介质 的性能都是分离效果 的首要决定 因素。目前所使用的多糖类蛋白色谱分离存在的普遍存在易染菌、 回收率低 、 成本高等问题 。开发高效的蛋 白分离介质受到国内外学者的广泛关注。蛋白分离层析介质 的发展趋势可以认为是对以天然大分子为母体 的层析介质不断地进行合成工艺改进 ， 提高性能 ， 使老产品更新换代； 同时大力开发以合成高聚物为骨架 的具有优异性能的新一代产品。 亲水气单胞菌在 自然界尤其在水体环境中分布甚广， 属弧菌科， 能引起人和动物的多种疾病n ， 特别是水生动物暴发性传染病 ， 此病在我 国东南各地广泛流行 ， 尤 以水温较高的夏秋季为剧， 导致水生养殖鱼类大量死亡， 给渔业生产造成重大经济损失 矗 。 亲水气单胞菌在习惯上被认为是条件致病菌 ， 随着细菌本身的研究的深入 ， 这一认识正在被修正 。已有报道该菌的 O抗原、 菌毛及一些表 面的非特异性粘附因子与该菌的致病性有关“ 。 然而， 更多的报道指出致病侏能产生细胞外毒素 ， 而毒素与致病关系密切 ~ 7 。 但是关于毒素的种类和性质诸说不一 ， 未有定论。 我们用自制的凝胶色谱介质对 中华鳖致病的亲水气单胞菌素进行了分离。 2 实验部分 2 ． 1 菌种 亲水气单胞菌菌株从广东省东莞市某养殖场患病的中华鳖中分离鉴定， 取材选取濒死新 2 ． 2 细菌培养 亲水气单胞菌菌株接种合成培养基 中， 摇床培养 3 5 ℃， 1 0 0 r ／ mi n， 2 4 h。 培养物经 4_ C， 1 O 0 0 0 r ／ mi n离心 3 0 mi n ， 取上清液。 将此上清液对小 白鼠( 体重 1 8 ~2 2 g ) 腹腔进行注射( 剂量为 0 ． 4 ml ／ 只) ， 确证其生物活性 。 2 ． 3 聚丙烯酰胺凝胶色谱填料 Z S P的合成在 甲 苯 和 三 氯 甲烷 溶 剂 中加 入 少 量Twe e n 一 8 0和 1 9 ／ 6 聚乙烯醇 ， 滴加丙烯酰胺和甲又丙烯酰胺水溶液 ， 5 0 V水浴恒温 ， 滴加完毕待分散均匀后加入适量过硫酸铵， 待反应完成后 ， 撤去水浴 ， 体系 自然冷却至室温， 减压抽滤 ， 真空干燥 ， 筛选出 2 0 0 ~3 0 0目产物备用。 2 ． 4 红外分析： 采用布鲁克 EQUI NOX 5 5傅里叶变换红外光谱仪 ， 波数范 围为 4 0 0 ~4 0 0 0 c m～， 样品采用 KB r压片法进行测试。 2 ． 5 溶剂吸收实验 将干燥至恒重 的 0 ． 1 ～0 ． 2 g Z S P聚合物凝胶置于一特制的底部带有多孔玻璃砂板的试管中， 在室温下置于溶剂 ( 水) 中浸泡 2 4 h。试管用橡胶盖密封 ， 放到一离心管内， 用 2 0 0 0 ~4 0 0 0 r ／ mi n离心 1 5 mi n除去过量的溶剂 ， 将带 有溶胀剂的树脂的试管迅速转移到密闭的烧瓶中称重。溶剂吸收量用 1 g干树脂 吸收的溶剂重 量来表 示 。 2 ． 6 毒素的提纯 2 ． 6 ． 1 硫酸铵盐析 用 Na OH调节细菌培养物上清液至 p H 6 ， 再加入硫酸铵至 7 O 的饱和度 ， 4 ℃静置 4 h， 1 0 0 0 0 r ／ mi n， 4 ℃离心 3 0 mi n， 去上清液， 沉淀溶于洗脱缓冲液 中， 对相同缓冲液透析过夜 ， 将透析后的样品用 P EG2 0 0 0 0进行浓缩 ， 即为粗提毒素。 2 ． 6 ． 2 S e p h a d e x G一 1 O 0凝胶过滤 将粗提 毒素 于 4 ℃装 S e p h a d e x G1 0 0柱( P h a ma c i a产品， 1 ． 6×5 0 c m， 平均液及洗脱液均为 5 0 mmo l ／ L Tr i s — HC1 ， p H 7 ． 8 ) ， 流速为 1 2 ml ／ h， 每管收集 4 ml ， 用紫外检测仪 2 8 0 n m进 行检测， 合并生物活性部分 ， 冻干浓缩。 2 ． 6 ． 3 Z S P 一 1 0凝胶过滤 将 粗 提 毒 素 于 4 n C装 交 联 度 为 1 O 9 ／ 5 的Z S P 一 1 0 柱 ( 自制 ， 1 ． 6 ×5 0 c m， 平衡液及洗脱液 均 为 0 ． 2 mo l ／ I Na Ac — HAc ， p H5 ． O ) ， 流速为1 2 ml ／· h， 每管收集 4 ml ， 用紫外检测以 2 8 0 n m进行检测 ， 合并生物活性部分， 冻干浓缩 。 2 ． 7 SDS— PAGE采 用 La e mml i 不 连续 S DS — P AGE系统 ， 按常规方法在小型蛋白电泳仪上进行 1 0 0 V恒压电泳约 3 h。 所用分离胶浓度为 1 2 9 ／ 6 ， 浓缩胶浓度为 4 9 ／ 6 ， 用考马斯兰法染色。 2 ． 8 小 白鼠毒性试验小 白鼠体重 1 8 ～2 2 g， 每组 2只， 分别腹腔注射 0 ． 4 ml 毒素样品。 3 结果与讨论 3 ． 1 I R分析 图 1 聚丙烯酰胺凝胶填料的 I R谱图 图 1是 聚 丙烯 酰胺 凝 胶 渗 透色 谱填 料 而引起的。 3 1 8 8 c m 处的强峰是 N— H伸缩振动Z S P 一 1 0的红外谱图。3 3 9 4 c m 处宽而强的峰是 吸收峰。 2 9 3 2 c m 和 2 7 8 1 c m 处的强峰是 CH 一OH伸缩振动的谱带 ， 由样 品中残留水分存在 基团中不对称和对 称 C— H伸缩振动峰。1 4 0 0 c m～， 1 3 0 0 c m～， l l 0 0 c m 和 1 0 0 0 c m。附 近的峰 是 C— N伸缩振动和一 NH变形振动引起的。6 2 7 c m 处的峰是 N— H面外变形吸收峰。 3 ． 2 Z S P树脂的吸水率 图 2是 Z S P树脂吸水率一交联度曲线。 很明显， 在交联度为 5 ～2 0 的范围内树脂 的吸水率与交联度成正 比。 由此可推测， 在所合成 的聚合物中交联点的分布是 比较均匀的。 O0 5 ．o o％ I o． 00 ％ l 5 ． O0 ％ 2 0． o( 2 5 |t ) 儡 空娃度 图 2 Z S P树脂吸水率一 交联度 曲线 3 ． 3 毒素的纯化 粗提毒素经 S e p h a d e x- -Gl O 0凝胶色谱柱 纯化后 回收率为 1 8 ． 8 3 ， 经交联度为 1 0 的聚 丙 烯 酰 胺 Z S P 一 1 0柱 纯 化 后 回 收 率 为 6 8 ． 0 5 ， 洗脱液蛋峰分别为图 3和图 4 。 毒素的 S e p h a d e x — G 1 0 0层析 3 ． 4 SDS— PAGE 经 S e p h a d e x—G 1 0 0和聚丙 烯酰胺 Z S P一 1 0柱纯化后的毒素进行 S DS — P AGE， 考马斯兰 图 5 S e p h a d e x纯化 S DS — P AGE 行 M： 分子量标准 ， 行 A： 粗提毒素 ． 行 B： 提纯毒素 1 0天左右即会滋生霉菌， 不能再重复使用。而 Z S P 一 1 0 在 同样的条件下可保存半年。 提纯毒素 经浓缩后注射小 白鼠， 2 4 h后小 白鼠死 亡， 可 以认为两种凝胶色谱柱均保留了外毒素蛋白质 的生物 活性 。 图 6 ZS P 一 1 0纯化 S DS — PAGE 行 M： 分子量标准， 行 A； 粗提毒素 ， 行 B ： 提纯毒素 结论 1