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红根草种素

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  • 杂草种子活性测试 有机肥NY/T 525-2021标准检测

    杂草种子活性测试 有机肥NY/T 525-2021标准检测 附录H试验步骤写的比较简单: 称取有机肥料样品(鲜样)3 000g,记录样品总重m,均匀铺在托盘中,厚度约为20 mm,在30度的光照培养箱(光照强度和湿度适中)中培养21 d。在试验期间,每2d-3d补充水分一次,以保持样品潮湿。每次补水时,观察是否有种子发芽并做记录,21d后统计试验期间发芽种子总株数N。杂草种子活性=N*1000/m 单位: 株/kg想请教,[b]做试验时3000g的有机肥料样品里面加多少杂草种子来观察它的发芽数呢[/b]????谢谢!

  • 【分享】烟草重金属超标:外国无标准不是借口

    国内环境问题严重,国外标准无参考价值 报告中指出,“烟叶中的重金属含量是由其生长的土壤带入,而不是在生产加工过程中人为添加。”中国有关专家也承认,中国的烟草种植很有可能由于土壤造成了香烟重金属成分过高。并且中国肥料和农药的不规范,也会导致烟草的重金属含量过高。而其他种植烟草的国家,没有像中国土壤面临如此严重的重金属超标。因此在这种背景下,其他国家的烟草市场对重金属含量的无标准或低标准对于中国的香烟并没有参考价值。 云南等烟草产地受重金属污染可能性较国外高 由于环境因素的普遍性,如同众多农产品一样,在烟草中发现重金属的踪迹是意料之中的事情。烟草中的重金属是由生产环境中的水、土壤、空气带入的。在同样的环境中生产的蔬菜、水果也会带有铅、砷、镉等重金属,上文也提到,但因为它们是通过消化道进入人体的,而人体的消化道对这些重金属有天然的屏蔽功能,因此危害远不及烟草大。 学者实验结果表明,当土壤中加入不同浓度的铅时(0-2500mg/kg),烟草对土壤中的铅具有较强的吸收性,并可残留在作物的各个部位;当土壤中锰添加浓度为1500mg-2500mg/kg时,烟草植株仍能生长,但烟草叶、茎和根的锰含量逐渐增加,烟草地上部分锰积累量最高达到13.5g/kg;烟草植株中含有高剂量铅、锰等金属,虽然致使植株生长发育受阻,但是促进了镉的吸收。因此,与烟草中部分有机物是植株成分或在生产环节添加不同,铅、镉、锰、砷等无机化学物,更多地来源于环境。这一点得到了云南烟草科学院有关负责人的认同。尤其是在云南,这里因矿产资源丰富,素有有色金属王国之称,土壤中难免含有重金属物质。然而云南却又是中国重要的烟草产地之一。 另外也有研究表明,烟叶中的镉、镍、铅等重金属元素的含量和PH值是负相关的,所以土壤越酸,重金属的含量也就越多。中国大量燃烧含硫煤,酸雨越来越多,土壤酸化造成重金属含量高。 中国土壤重金属普查结果未公布 中国在2006年开始启动土壤重金属污染普查,2009年已经完成,数据并未公布。中国科学院生态环境研究中心副研究员黄益宗参与了上述普查研究。他指出,一些地方开采矿产时,一些重金属污染到农田,使得农作物和经济作物污染加重,特别是在西南、中部、中南某些省份表现明显。“本次普查的一个表现是,土壤污染面积在扩大。而烟草被污染只是一个方面,部分地区稻谷、蔬菜也存在被重金属污染的情况。”他说。环境保护部部长周生贤在2010年7月9日称,随着中国经济社会的快速发展,人口增长、工业化和城镇化的加快推进,涉重金属行业仍保持一定的增长势头,由此带来的重金属污染压力将有增无减。在这样的环境下,烟草种植过程中的污染完全不可避免。 中国烟苗所处空气都可能铅超标 云南省曲靖市烟草专卖局烟叶生产管理部部长毛建书看来,重金属含量过高的罪魁祸首还不仅是土壤,可能是肥料和农药。他在长期行走在烟田,对烟草的种植比较了解。他表示“烟农如果不用烟草公司专门提供的烟叶肥,或者农药有残留物都可能导致这种结果”。另外,来自云南烟叶信息网的资料表明,就连烟苗种植所处的空气,都可能铅超标,还有灌溉水,也可能含有铅、镉、砷、镉等重金属。 中国烟草经营模式风险高 中国一直没有卷烟产品重金属含量的国家标准,甚至行业标准。国家质检总局也没有单独开展这项检测。并且中国实行烟草专卖制度,唯一的国家级烟草质检中心和各省烟草质检站与国家烟草专卖局和各省级烟草专卖局又属于一套人马,属于“自己生产自己检测自己销售”,并没有像其他国家有第三方机构对香烟进行检测和监督,加大了中国香烟出问题的风险。这种特殊的“国情”使得中国的烟草市场不能盲目参考国外的“无标准”,独立制订一份相关的香烟重金属含量标准显得尤为重要。

  • 虫草浓缩液中虫草酸和虫草素测定方法

    虫草浓缩液中虫草酸和虫草素测定方法

    [align=center][b][font=宋体]虫草浓缩液中虫草酸和虫草素测定方法[/font][/b][/align][size=18px][font=宋体]虫草浓缩液由虫草水提物制得,用于化妆品原料。客户想测虫草浓缩液中虫草酸和虫草素,虫草酸又名甘露醇。[/font][font='Times New Roman','serif']1 [/font][font=宋体]试剂:乙腈(色谱级),超纯水,甲醇(分析纯),虫草酸和虫草素均购置北京索莱宝公司。[/font][font='Times New Roman','serif']2 [/font][font=宋体]标准品配制:称取一定量的虫草酸,用纯水溶解,定容,得到浓度为[/font][font='Times New Roman','serif']150 μg/mL[/font][font=宋体],待测;[/font][font=宋体]虫草素,用甲醇溶解,定容,得到浓度为[/font][font='Times New Roman','serif']220 μg/mL[/font][font=宋体],待测;[/font][font='Times New Roman','serif']3 [/font][font=宋体]样品制备:[/font][font='Times New Roman','serif']3.1 [/font][font=宋体]精密量取[/font][font='Times New Roman','serif']0.5 mL[/font][font=宋体]虫草浓缩液,分别用水定容至[/font][font='Times New Roman','serif']10 mL[/font][font=宋体]测定虫草酸,用甲醇定容至[/font][font='Times New Roman','serif']10 mL[/font][font=宋体]测定虫草素,过[/font][font='Times New Roman','serif']0.45 μm[/font][font=宋体]滤膜,待测。[/font][font='Times New Roman','serif']4 [/font][font=宋体]虫草素[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]条件:[/font][font='Times New Roman','serif']LC-20AT[/font][font=宋体]配制紫外检测器,[/font][font=宋体]波长:[/font][font='Times New Roman','serif']260 nm [/font][font=宋体];进样量:[/font][font='Times New Roman','serif']5μL[/font][font=宋体];色谱柱型号:[/font][font='Times New Roman','serif']Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm×250mm, 5 μm)[/font][font=宋体];柱温:[/font][font='Times New Roman','serif']30.0 [/font][font=宋体]℃;流速:[/font][font='Times New Roman','serif']0.8 mL/min[/font][font=宋体];流动相条件如表[/font][font='Times New Roman','serif']1[/font][font=宋体]:[/font][/size][align=center][img=,551,185]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310311641477076_4077_1858223_3.jpg!w551x185.jpg[/img][/align][font='Times New Roman','serif'] [/font][size=18px][font=宋体]虫草酸[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]条件:[/font][font='Times New Roman','serif']Angilent infinit1260[/font][font=宋体]配制示差检测器,进样量:[/font][font='Times New Roman','serif']5[/font][font=宋体]μ[/font][font='Times New Roman','serif']L[/font][font=宋体];色谱柱型号:[/font][font='Times New Roman','serif']Agilent Zorbax SB-C18(4.6 mm[/font][font=宋体]×[/font][font='Times New Roman','serif']250 mm, 5 μm)[/font][font=宋体];[/font][font=宋体]柱温:[/font][font='Times New Roman','serif']30.0 [/font][font=宋体]℃,;流动相条件乙腈:纯水[/font][font='Times New Roman','serif']=80:20[/font][font=宋体];流速:[/font][font='Times New Roman','serif']0.5mL/min[/font][font=宋体]。[/font][/size][align=center][img=,690,265]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310311642440362_8441_1858223_3.jpg!w690x265.jpg[/img][/align][align=center][b][font=宋体]虫草素标准品色谱图[/font][/b][/align][align=center][img=,683,269]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/10/202310311642555977_2623_1858223_3.jpg!w683x269.jpg[/img][/align][align=center][b][font=宋体]虫草浓缩液中虫草素色谱图[/font][/b][/align][b][font=宋体]结果:虫草浓缩液中虫草酸含量([/font]7.65 mg/mL [font=宋体]),虫草素含量([/font]2.65[/b][font='Times New Roman','serif']μg/mL[/font][b][font=宋体])。[/font][font=宋体]小结:测定虫草素的过程中发现流动相梯度洗脱,回到起始梯度是需要平衡时间久一些,虫草素含量较低,虫草酸含量比较高。示差检测器也是进样前需要稳定[/font]2[font=宋体]小时左右,才能保证实验数据稳定性。[/font] [/b]

  • 14.4 HPLC测定地锦草中槲皮素、山柰素的含量

    14.4 HPLC测定地锦草中槲皮素、山柰素的含量

    HPLC测定地锦草中槲皮素、山柰素的含量 雷 鹏 刘 韶 李新中 徐平声 (中南大学湘雅医院药剂科, 长沙410008)摘要 采用高效液相法测定地锦草中槲皮素、山柰素含量, 色谱柱: D iamonsil C18 ( 4. 6 @ 250 mm ); 流动相: 甲醇-01 025%磷酸( 60B40); 流速: 1 m l/m in; 柱温: 35e ; 检测波长: 360 nm。槲皮素在01 147~ 0. 735 Lg范围内线性关系良好, 平均回收率为981 15%; 出柰素在01042~ 0. 210 Lg 范围内线性关系良好, 平均回收率为971 24%。该方法简便可行、重复性好, 可作为地锦草质量评价的方法。关键词 地锦草; 高效液相色谱法; 槲皮素; 山柰素http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207242110_379513_2432394_3.jpg

  • 【原创大赛】HPLC-DAD分析酸浆中木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙成分

    【原创大赛】HPLC-DAD分析酸浆中木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙成分

    HPLC-DAD分析酸浆中木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙成分酸浆(拉丁文名:Physali alkekengi L.)又名红菇娘、挂金灯、戈力、灯笼草、灯笼果、洛神珠、泡泡草、鬼灯等北方称为菇蔫儿、姑娘儿,以果实供食用。化学成分含酸浆苦素A(Physalin A)、酸浆苦素B、酸浆苦素C、木犀草素(Luteolin)及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙。果实含枸橼酸、草酸、维生素C、酸浆红色素(physalien)、酸浆醇(physanol)A,B。花萼含α胡萝卜素、酸浆黄质(physoxanthin)及叶黄素等,种子油的不皂化物中分得多种4α-甲基甾醇,主要为禾本甾醇(gramisterol)和钝叶醇(obtusifoliol)及4种新甾体。此外尚含多种4-脱甲基甾醇,如胆甾醇和24-乙基胆甾醇等。还含有多种三萜3β-一元醇,其中环木菠萝烷醇(cycloartanol)35%,环木菠萝烯醇(cycloartenol)27%、羊毛脂-8-烯-3β-醇(lanost-8-en-3β-ol)。木犀草素(luteolin)是一种天然黄酮类化合物,存在于多种植物中,具有抗炎、抗肿瘤、抗过敏等方面的作用。化学是如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/08/201608311303_607620_2217446_3.jpg目前,国内传统中药有效成分的提取方法普遍存在提取率低、杂质清除率不高、生产周期过长、能耗高、溶剂用量大等缺点。随着中药现代化进程的不断深入,许多现代高新技术不断地被应用到中药有效成分的提取和分离,使得中药有效成分的提取更高效和简便。超声-微波协同萃取技术直接将超声振动与开放式微波两种作用方式相结合,充分利用超声波振动的空化作用以及微波的高能作用,实现了低温常压条件环境下,对固体样品进行快速、高效、可靠的预处理,与常规提取方法相比,超声-微波协同萃取技术具有快速、节能、节省溶剂、污染小等优点。本实验应用超声-微波协同萃取法提取酸浆中的木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙,采用高效液相-二极管阵列检测法(HPLC-DAD)测定提取物中木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙的含量,药材中二者成分的含量分别为:1.200mg/g 和0.43mg/g,二个峰,木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙峰位置分别为:221nm,270nm,木犀草素峰位置分别为:226nm,276nm,由于木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙比木犀草素多了一个 β-D-吡喃葡萄糖基团,天麻素二个峰位置都发生了蓝移,样品中二个峰的光谱图与标准品二个峰的光谱图相同,可以进一步确定酸浆中含有木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙。主要仪器与试剂主要仪器Agilent1100型四元梯度高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司)Agilent TC-C18(ODS)色谱柱(5μm,4.6×250mm,美国 Agilent 公司)CW-2000 超声-微波协同萃取仪(新拓微波溶样测试技术有限公司)DJ-10A 型倾倒式粉碎机(上海隆拓仪器设备有限公司)RE-52AA 型旋转蒸发仪(河南巩义仪器厂)LXJ-IIB 型低速大容量多管离心机(上海安亭科学仪器厂)试剂木犀草素(中检所,含量98%;)木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙(中检所,含量98%;)酸浆全草(采于黑龙江)除甲醇、乙腈为色谱纯(国药集团化学试剂有限公司),其余试剂除专门提到外,均为分析醇,实验用水为二次蒸馏水。实验方法供试品溶液的制备 精密称取酸浆粉末1.0g,置于超声-微波萃取仪玻璃容器中,加入50mL70%甲醇,开启超声微波,控制在恒温50℃下提取40min,萃取3次,合并提取液,浓缩至近干,残渣加入甲醇溶解,转移至10mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,过0.45μm 的微孔滤膜,取续滤液,即得。提取条件的考察溶剂的选择:精密称取酸浆粉末1.0g,置于超声-微波萃取仪玻璃容器中,分别用水、70%甲醇、70%乙醇溶液超声-微波协同萃取40min(n=3),萃取3次,合并提取液,浓缩至近干,残渣加入甲醇溶解,转移至10mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,过0.45μm的微孔滤膜,取续滤液,HPLC 测定萃取率。溶剂体积分数的选择:分别用体积分数为40%、50%、60%、70%、80%、90%和纯甲醇溶液超声-微波协同萃取30min(n=3),方法同上。溶剂用量的选择:分别用10mL、20mL、50mL、80mL、100mL70%甲醇提取,方法同上。提取时间的选择:分别用70%甲醇超声-微波协同萃取20min、30min、40min、50min、60min(n=3),方法同上。提取温度的选择:分别在40、45、50、55、60℃下用70%甲醇超声-微波协同萃取40min,方法同上。对照品溶液的制备 分别精密称取常温减压干燥12h 的木犀草素及木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙对照品适量,加甲醇配制成木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙为200μg/mL、木犀草素为100μg/mL 的混合对照品溶液,冷藏备用。色谱条件 色谱柱:Agilent TC-C18柱(5μm,4.6×250mm);流动相:A-0.1%乙酸水溶液;B-甲醇,线性梯度洗脱:0~30 min,3%~5% B;30~35 min,5%~20%B;35~40min,20%~20%B;检测波长:270nm;流速:1mL/min;柱温:30℃;进样量:20μL。结果与讨论提取条件的优化结果溶剂的优化结果:分别用水、70%甲醇、70%乙醇溶液超声-微波协同萃取30min(n=3),结果表明70%甲醇提取木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙的量较高,而木犀草素的量差异不明显,因此选择70%甲醇提取。溶剂体积分数的优化结果:分别用体积分数为40%、50%、60%、70%、80%、90%和纯甲醇溶液超声-微波协同萃取30min(n=3),结果表明,在甲醇体积分数70%时,木犀草素-7-β-D-葡萄糖甙和木犀草素的提取率随着甲醇浓度的增加而增加;但当甲醇体积分数在70%以上时,木犀草素葡萄糖甙的提取率呈现下降趋势,木犀草素没有明显的变化。木犀草素葡萄糖甙属于一种苷,分子量小,极性较大,当甲醇体积分数过高时,溶液极性降低,使得极性较强的木犀草素葡萄糖甙不易溶出,而木犀草素极性相对木犀草素葡萄糖甙小,影响不明显,因此实验选择70%甲醇作为提取溶剂。溶剂用量的优化结果:分别用10mL、20mL、50mL、80mL、100mL70%甲醇提取,结果表明溶剂体积在50mL时木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的提取率最高,之后随着溶剂用量的增加,木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的提取率趋于稳定,因此溶剂用量选用50mL 进行提取 。提取时间的优化结果:分别用70%甲醇超声-微波协同萃取20min、30min、40min、50min、60min(n=3),结果表明超声-微波协同萃取时间从20~40min的过程中木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的提取率逐渐增加;而提取时间超过40min之后,提取率反而逐渐下降。超声-微波协同萃取时间太长,植物中大量细胞细胞破碎,使得大量粘性物质等进入提取液,溶剂杂质增多、粘度增大,影响了有效成分的溶出,有效成分含量反而减少,因此选择提取时间为40min。提取温度的优化结果:分别在40、45、50、55、60℃下用70%甲醇超声-微波协同萃取40min,实验表明,提取温度在50~60℃的范围内,木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的提取率没有明显差异,考虑到温度太高容易破坏活性成分,因此选择提取温度为50℃。流动相的考察在实验过程中,流动相首先考察了甲醇-水、乙腈-水等度洗脱对酸浆超声-微波协同萃取样品溶液进行分离,乙腈-水作为流动相时,出峰较快,不能较好地把木犀草素葡萄糖甙和木犀草素与其他杂质成分分离;甲醇-水作为流动相时,出现峰形拖尾现象,分离效果不理想。为改善上述现象,改用0.1%乙酸代替水并采用梯度洗脱,经过反复筛选之后,最终确定流动相组成为 A -0.1%乙酸水溶液, B -甲醇,洗脱程序为0~30 min , 3%~5% B;30~35 min ,5%~20% B ;35~40 min 20%~3% B,木犀草素葡萄糖甙和木犀草素和其他杂质成分能够很好的分离,得到较理想的色谱图。对照品溶液和酸浆萃取样品的HPLC-DAD 分析下图分别显示了在上述的色谱条件下,采用 DAD 进行检测得到的两种混合对照品及酸浆萃取样品的 HPLC 分离色谱图。图1色谱图中木犀草素葡萄糖甙和木犀草素的保留时间分别为18.74min, 26.87min,根据保留时间判断,图2中的 a、b 色谱峰分别初步鉴定为木犀草素葡萄糖甙和木犀草素。图3、4分别显示了混合对照品和酸浆萃取物中保留时间18.74min, 26.87min 的色谱峰进行 DAD 检测后得到的光谱图,木犀草素葡萄糖甙和木犀草素 UV 光谱图形状相似,出现 二个峰,木犀草素葡萄糖甙峰位置分别为:221nm,270nm,木犀草素峰位置分别为:226nm,276nm,由于木犀草素葡萄糖甙比木犀草素多了一个 β-D-吡喃葡萄糖基团,木犀草素葡萄糖甙二个峰位置都发生了蓝移,样品中二个峰的光谱图与

  • 70.8 RP-HPLC测定注射用复方荭草冻干粉针中异荭草素、荭草素的含量

    70.8 RP-HPLC测定注射用复方荭草冻干粉针中异荭草素、荭草素的含量

    【作者】 兰燕宇; 王爱民; 何迅; 李勇军; 刘丽娜; 王永林; 【Author】 LAN Yan-yu, WANG Ai-min, HE Xun, LI Yong-jun, LIU Li-na, WANG Yong-lin(School of Pharmacy, Guiyang Medical College, Guiyang 550004, China) 【机构】 贵阳医学院药学院; 贵阳医学院药学院 贵州 贵阳 550004; 贵州 贵阳 550004; 贵州 贵阳 550004; 【摘要】 目的建立注射用复方荭草冻干粉针中异荭草素、荭草素含量的RP—HPLC测定方法。方法色谱柱:Diamonsil ODS(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(18:82),流速:1 mI·min-1,柱温:40℃;检测波长350 nm。结果被测定峰与其他组分峰可达到基线分离,异荭草素、荭草素线性范围分别为0.049 6~0.794 0μg(r=0.999 9),0.031 6~0.506 0 μg(r= 0.999 9),回收率分别为98.4%,99.9%,RSD分别为2.2%,1.3%(n=9)。结论该法简便、准确、重现性好,适用于该制剂的质量控制。 【关键词】 反相高效液相色谱法; 复方荭草冻干粉针; 异荭草素; 荭草素; http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209022122_388015_1838299_3.jpg

  • 59.6 高效液相色谱法测定冬凌草糖浆中冬凌草甲素含量

    59.6 高效液相色谱法测定冬凌草糖浆中冬凌草甲素含量

    【作者】 蔡俊安(河南百年康鑫药业有限公司)【摘要】 目的建立测定冬凌草糖浆的冬凌草甲素含量的高效液相色谱法。方法采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水(50∶50)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为239 nm。结果冬凌草甲素进样量在0.093~0.746μg范围内与峰面积积分值线性关系良好,回归方程为Y=413 933.35-63 428.66 X,r=0.999 7(n=5);平均加样回收率为99.0%,RSD为1.06%(n=5)。结论该法简便、准确、专属性和重复性好,为冬凌草糖浆中冬凌草甲素的定量分析提供了科学有效的方法。谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208211753_385117_1609970_3.jpg

  • 69.4 大鼠口服菊花提取物后血浆中木犀草素及芹菜素测定方法的研究

    69.4 大鼠口服菊花提取物后血浆中木犀草素及芹菜素测定方法的研究

    【作者中文名】潘兰英; 李丽萍; 蒋惠娣;【作者英文名】PAN Lan-ying; LI Li-ping; JIANG Hui-di*(Department of Pharmaceutical Analysis and Drug Metabolism; College of Pharmaceutical Sciences; Zhejiang University; Hangzhou 310031; China);【作者单位】浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室; 浙江大学药学院药物分析与药物代谢研究室 杭州;【摘要】目的建立大鼠血浆中木犀草素和芹菜素总浓度的HPLC测定方法,并研究大鼠口服菊花提取物(CME)后其效应成分——木犀草素、芹菜素的药动学参数。方法大鼠血浆在2 mol.L-1盐酸酸性条件下于80℃水浴水解1.5 h,水解液经乙酸乙酯萃取,萃取液减压抽干后溶解,经HPLC分析。采用Diamonsil ODS C18色谱柱,以甲醇-0.2%磷酸(55∶45)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长350 nm,柱温30℃。应用建立的方法测定大鼠口服200 mg.kg-1菊花提取物后血浆中木犀草素及芹菜素质量浓度,并以3P87软件计算其药动学参数。结果本法木犀草素和芹菜素的定量下限(LOQ)分别为0.045 5和0.145 mg.L-1;两者分别在0.045 5~8.09和0.145~25.7 mg.L-1内呈良好线性关系,r分别为0.995 7及0.997 4;两者低、中、高质量浓度的绝对回收率及方法回收率均在89%~107%内。日间及日内精密度RSD均小于11%。大鼠口服CME后木犀草素与芹菜素的Ka分别为1.72和0.237 h;t1/2(Ka)分别为0.440和3.21 h;t1/2α分别为0.77...http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271745_386602_2379123_3.jpg

  • 【转帖】水土保持生态修复的类型及相关技术

    1 自然退化生态系统修复技术根据不同自然因素导致的生态退化,应因地制宜的治理。例如盐碱地可采取以稻治碱、种碱茅、植柽柳、挖沟排涝、施用化学制剂等方法。通过围栏封育,浅翻、深松、挖沟。水资源较好的地方,还可以修建水利工程、引地表水或打井进行节水灌溉。实行全年或季节性禁牧、舍饲或半舍饲等配套措施,形成有利恢复植被的综合环境,划分若干区块进行修复。2 过度垦殖、樵采生态系统修复技术可实行坡地生态脆弱带退耕还林(灌、草)与修筑梯田相结合的技术。按照国家退耕还林(草)有关政策方针,25°以上的坡耕地一律严格退耕发展生态林草;严格限制开垦农田,封山育林育草,保护生态植被,15°以下的坡地,按照近村、近水、近路的原则,实施坡改梯,进行水土保持耕作,保证人均基本农田,以此确保粮食安全与提高水土保持安全意识。可采取少施化肥,增施农家肥料;种植绿肥植物,增加固氮作物品种;实行轮作、套作,间种、混种相结合的种植方法。减少化学防治,增加生物防治对退化耕地进行生态修复。对于因樵采导致退化的林地、草地等生态系统的生态修复,可实行封山育林,封禁时间的长短因生态系统类型、受损程度、气候等因素的不同而不同,一般来说,乔木林为8 年以上、灌木林5年以上、草地生态系统为3 年以上。在封禁的基础上,补种树种、草种,同时改变薪柴能源利用方式与生活能源结构。在农户家庭中大力推广节柴灶,提高能源利用率。对不同的经济发展地区, 可依照自然资源程度和技术程度,鼓励发展沼气、太阳能、风能、地热能等新能源,推广“以沼代薪”“以电代薪”“以气代薪”等新技术。3 沿河生态修复技术生态修复手段最重要的是减轻或解除导致河流生态系统退化的驱动力,让河流休养生息,可人为的创造河流形态多样性,通过恢复河流纵向连续性和横向连通性,尽可能多的保持河流弯曲度。构建主河槽和护堤地在内的复合断面形态,设置必要的马道,有条件的地方,可实行季节性河道。在需要护岸的地段,宜采用鱼巢、生态混凝土等岸坡防护结构,充分利用乱石、木桩、芦苇、柳树、水葱等天然材料与植物护坡。在避免河流岸坡的硬质化的同时,使河流生态环境恢复多样性,还有助于增加水生植物群落和生物群落的种类。可在河流两岸种植生物隔离带,既防治了面源污染,又为河流水生生物增加了营养源。通过工程结构使河流的生态系统冲击最小化,争取对水流的流量、流速、冲淤平衡、环境外观等影响最小,为动物栖息及植物生长创造多样性的生活空间。4 经济林过度开发生态修复技术通过建立立体开发、循环利用经济的方式。实行粮果、林果的立体间套种植,利用山地自然坡度进行开发。实行土地轮作化来提高土地利用率、产出率和物质转化率。模拟生态系统中的食物链结构,建立循环经济型模式, 实行物质和能量的良性循环和多级利用。利用产业链间组合效应,走种、养、加一条龙,贸、工、农一体化的发展路子, 探索建立水土保持型生态村、生态沟、生态小流域建设模式。5 开发建设生态退化修复技术对于开发建设项目与取土取石场已造成生态环境退化的,先停止开挖建设,再利用适应性强的乡土植物(乔、灌、草、藤)进行生态修复,控制水土流失。对弃土弃石区则需加强表面的生物覆盖, 通过恢复植被使项目区的水土流失基本得到控制。矿区生态系统的土壤、植物等组分完全受损,缺乏植物生长所需要的营养元素,对这种严重退化的生态进行生态修复,可采取的方法有:覆盖土壤,对土壤进行物理处理,添加营养物质,去除有害物质,种植适应性强的先锋树种或草种、间种乡土树种或草种。

  • 极草5X冬虫夏草含片未检出虫草素 厂家称不便回复

    极草5X冬虫夏草含片未检出虫草素  厂家称不便回复

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412051620_526021_2206495_3.jpg12月1日,一家检测机构内,打假人王海向记者展示“极草含片”的检测报告显示:未检出虫草素。新京报记者 王嘉宁 摄http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/12/201412051621_526022_2206495_3.jpg打假人王海送检的青海春天药用资源科技有限公司生产的极草5X经典含片。 实习生 彭子洋 摄 极草含片未检出虫草素遭质疑  专家称冬虫夏草可以调节人体免疫力,但“抗癌”效果不明确,此前并未有明确证据显示其含虫草素  新京报讯 (记者侯润芳)极草5X冬虫夏草,一种宣称可以“含着吃”的冬虫夏草,以其价格昂贵为市民所熟知。近日,打假人士王海将一盒青海春天药用资源科技有限公司(以下简称“青海春天公司”)生产的极草5X经典含片送检,结果显示,该品牌冬虫夏草并不含有虫草素。  对此,青海春天公司回应记者称,“不方便回复”。  从事真菌学研究的中科院一研究机构也表示,此前研究中也并未在采集的野外冬虫夏草中检测出虫草素。负责检测的专家表示,冬虫夏草确实可以调节人体免疫力,但是否有抗癌效果并不明确,公众应理性看待冬虫夏草。  11月17日,打假人士王海携带一盒青海春天公司生产的极草5X经典含片到北京某检测中心检测是否含有虫草素,“冬虫夏草宣传的神奇功效让我产生了质疑。”  “冬虫夏草有效成分中,只有虫草素是冬虫夏草独有,其他成分在别的物质上也有。”王海称,“检测虫草素含量就能知道冬虫夏草的真实功效。”  王海介绍,他送检的结果是“未检出虫草素。”但该检测中心工作人员介绍,检测仪器的检出限是5.63μ克/克,“未检测出极草含有虫草素(不等于完全没有),也可能有,但因为极其微量,无法检测出。”  记者现场看到,王海所选择的这家检测中心属中国合格评定国家认可委员会实验室认可中心,具有食品验证机构资质认定证书和资质认定计量认证证书等认证。

  • 【原创大赛】CNW Athena C18-WP色谱柱测定人工蛹虫草中虫草素和腺苷含量

    【原创大赛】CNW Athena C18-WP色谱柱测定人工蛹虫草中虫草素和腺苷含量

    1 前言 蛹虫草也叫北冬虫草,俗名不老草,是虫,菌结合的药用真菌,现代珍稀中草药。北虫草不仅含有丰富的蛋白质和氨基酸,而且含有30多种人体所需的微量元素,是上等的滋补佳品。蛹虫草中富含虫草素和腺苷,对调节人体内分泌和增强免疫功能等显著作用. 腺苷是一种遍布人体细胞的内源性核苷,可直接进入心肌经磷酸化生成腺苷酸,参与心肌能量代谢,同时还参与扩张冠脉血管,增加血流量。腺苷对心血管系统和肌体的许多其它系统及组织均有生理作用。腺苷是用于合成三磷酸腺苷(ATP)、腺嘌呤、腺苷酸、阿糖腺苷的重要中间体。 虫草素是一种天然来源的药物,具有中医医理中冬虫夏草一样的阴阳同补和双向调节人体平衡的功能;它在护肝、保肾、润肺方面由于成分更纯效果更好,而且大补气血,能消除现在不能治愈的痛经、偏头痛、颈椎增生等疾病。从西医医理角度看虫草素具有抗肿瘤、抗衰老、抗菌、抗病毒、免疫调节、改善新陈代谢、清除自由基等多种药理作用,有良好的临床应用前景。 天然虫草资源已日益匮乏,然而蛹虫草更容易人工栽培 , 因此蛹虫草目前被选为冬虫夏草的最佳替代品 , 已进行了规模化的人工栽培和应用现多用人工虫草来满足市场的需求。注:以上部分内容摘自“百度百科”http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410311605_521149_1669358_3.jpg 本文采用CNW Athena C18-WP色谱柱测定人工蛹虫草中的腺苷和虫草素,并对检测方法进行简单优化,该方法具有简单、快速、重复性好等优点,对人工蛹虫草以及该类保健品的质量控制极为重要。2 实验方法2.1 仪器与试剂Waters e2695液相色谱仪(主要包括2998光电二极管矩阵检测器,柱温箱,自动进样器);超声波清洗机实验中乙腈为色谱纯;水为超纯水系统制得, 18MΩ•cm,25 ℃虫草素和腺苷标准品,美国Sigma公司2.2 色谱条件色谱柱:CNW Athena C18-WP(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈:水=10:90;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL检测波长:260nm。2.3 样品预处理 称取粉碎均匀的人工蛹虫草样品0.50g于150mL烧杯中,加入约30mL50℃左右的温水,在50℃下超声提取30min,过滤,收集滤液于100mL容量瓶中。用水将滤纸上的样品小心地转移至烧杯中,再重复提取2次,合并提取液,并用水定容至刻度,冷却至室温。吸取少量提取液,用0.45μm滤膜过滤后进样分析。2.4 标准溶液的配制 分别准确称取10.0mg腺苷和虫草素标准品,用水配制成浓度为100μg/mL的标准储备液。临用前,再吸取一定体积的上述标准储备液,配成相应浓度的混合标准溶液。3 结果和讨论3.1 检测波长的确定 利用2998光电二极管矩阵检测器的3D通道扫描的功能,在200~600nm波长范围内对混合标准溶液进行3D光谱扫描。从图中可以看出,腺苷和虫草素在此波长范围内均有吸收,而且都有两个较强的特征吸收波长。在相应的出峰时间提取光谱,从提取的光谱图中可以看到,腺苷的最大吸收波长为205.3nm,次级吸收波长为259.6nm;虫草素的最大吸收波长为206.5nm,次级吸收波长为259.6nm。对比206nm和260nm吸收波长处的色谱图,当检测波长为206nm时,腺苷和虫草素的响应值最大,然而对样品的检测过程中发现,样品中干扰物质在此波长也有很好的吸收,从而影响腺苷和虫草素的定性和定量分析;当检测波长为260nm时,干扰组分少,定性和定量更为准确,综合考虑,选择260nm为腺苷和虫草素的检测波长。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410311609_521156_1669358_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410311610_521157_1669358_3.jpg3.2 流动相条件的优化 流动相中有机相种类和含量对待测组分的分离以及检测时间具有重要的影响。实验中发现,当流动相中乙腈含量为20%时,腺苷和虫草素的出峰时间较早,且未完全分离,不利于样品的检测;当流动相中乙腈含量为10%时,腺苷和虫草素的出峰时间和分离度都比较合适;当流动相中乙腈含量为5%时,虽然腺苷和虫草素也得到了很好的分离,但是大大延长了样品的检测时间,同时响应值也大幅下降,影响待测物质的检出限。结合对样品的检测,最终选择乙腈和水比例为10:90http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/10/201410311612_521158_1669358_3.jpg3.3标准曲线的测定 吸取适量体积上述混合标准溶液,用水稀释配成浓度为4.0、[/

  • 【求助】-寻求检测方法:检测茶叶中的苄嘧磺隆、禾草丹、阿维菌素

    各位大虾:经我们调查发现,以上三种农药在茶叶、花草中给滥用,现在面对日本肯定列表制度,需要检测茶叶中的苄嘧磺隆(Bensulfuron-methyl)、禾草丹(Thiobencarb)、阿维菌素(Abamectin)。哪位大虾有相应的检验方法,请提供。最好有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]的方法,我们目前只有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url](已经准备购入液相)。另外,禾草丹(Thiobencarb)、阿维菌素(Abamectin)的标准品在哪里可以买到?

  • 农民在草莓种植过程中到底用不用植物激素?市场上销售的草莓检测结果如何?使用植物激素安全吗?会造成儿童早熟吗?

    在一线从事生产研究指导已经15年的中国园艺学会草莓分会常务理事齐长红表示,理论上讲,施用了“膨大剂”氯吡脲确实会生产出个体肥大的草莓,但是稍有常识和经验的种植户基本不会使用,因为这样做会“损人又害己”。试验表明,施用了氯吡脲的草莓不仅颜色和正常草莓不一样,而且很软,果皮变薄,手轻轻触碰就会落上指纹印,很难摘下来。如果超量使用,不但不能促进生长,反而会抑制作物生长甚至出现药害。  根据农业部农产品质量安全环境因子风险评估实验室(北京)2014、2015连续两年草莓监测结果,采自生产基地和市场的253个草莓样本中氯吡脲检出率均为零。农业部农产品质量安全风险评估实验室(杭州)2012-2015年对浙江部分产区草莓进行监测结果显示,2015年仅检出芸苔素内酯,氯吡脲等其他6种植物外源激素均未检出。2012-2014年均未检出氯吡脲等4种植物外源激素,检出的多效唑等3种植物外源激素其平均残留量仅在0.0016-0.0055mg/kg范围内,最高0.08mg/kg,膳食风险也仅在0.001-0.287%范围内,远远小于100%。可见,草莓种植者基本不使用植物激素,即使使用也不会危害消费者健康,完全不必担心,国内外从来没有发生过因为吃了使用植物外源激素的农产品而引起食物中毒的事例。  2015年“乙草胺草莓”的乌龙事件刚刚过去,“空心激素草莓”又以各种版本出现在网络媒体,在各类信息纷繁复杂、充斥网络的今天,每个消费者面对流言时要多一些辨别力,多一些谨慎的求证,相信科学终将拨开迷雾,还原事件真相。

  • 【讨论】如何鉴别激素草莓?

    【讨论】如何鉴别激素草莓?

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103170850_283382_1641058_3.jpg过量使用激素的草莓(左侧两颗)形状不规则,果面凹凸不平,果形不整。 自然生长的草莓(右侧两颗)呈圆锥形或长圆锥形。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103170851_283383_1641058_3.jpg过量使用激素的草莓(左侧两颗)上色不均匀,光泽度差,特别是底部果柄处,颜色发青、发白。 自然生长的草莓(右侧两颗)颜色均匀、红艳,光洁度好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103170852_283384_1641058_3.jpg过量使用激素的草莓(左侧四块)空腔现象比较多、空腔大,果肉颜色发白,上色较差。 自然生长的草莓(右侧四块)果肉饱满,较少出现空腔现象,内部果肉呈鲜红色。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/03/201103100848_281745_1641058_3.jpg 眼下最惹眼的水果莫过于草莓。然而,草莓的个头过大却让部分消费者打了个问号:个头这么大,该不会是打了激素膨胀吧? 网上质疑大个草莓的帖子也铺天盖地,有许多人都说这种激素就叫做膨大剂。带着市民的疑惑,近日,记者采访了我市草莓专家。据专家介绍,其实,按照现在的种植技术和引进的优质草莓品种,完全可以让草莓在正常栽培的条件下长出大个来。  “空心”、“畸形”的不要买  鞍山市农产品监测中心副主任、教授级高级农艺师唐鹏介绍说,膨大剂是一种生长激素,作用不是增加细胞数,而是增加细胞的体积,使用膨大剂种植的草莓,生长快,营养往往会被破坏,切开后里面往往是空心的,吃起来口感没有正常草莓那么结实,储存起来更容易烂掉。

  • 影响中草药成分积累的其它因素

    中草药的采收,受多种因素的制约,除了如耕作制度等社会因素外,对于有效成分的积累尚受一些自然因素的影响,因此在采收中草药时,也应加以考虑。如兴安杜鹃(Rhododendron dauricum L.)在同一时期采收,由于产地不同,挥发油的含量有很大差异,含量可相差3~6倍。  从经纬度来看,中草药中挥发油的含量越向南越高,而蛋白质的含量越向北越高。金鸡纳树皮中的生物碱含量随温度增高而增高,而亚麻中的不饱和酸则气温越低,含量越高。茄科某些植物,当寒潮来到时,其中晶形生物碱会变成非晶形没有疗效的生物碱。  薄荷即使栽培在同一地块,如阳光充沛,挥发油含量高,且油中薄荷脑的含量也高,若阴雨连绵,或久雨初晴2~3日内来收,含油量下降至正常量的3/4。  曼陀罗在碱性土壤中生长,生物碱含量高,薄荷在砂质土壤中生长,挥发油含量高。

  • 目前乳品安全重点环节

    乳制品生产涉及饲草种植、饲草加工、奶牛育种、奶牛饲养、牛奶收购、原奶验收、生产加工、包装、运输和销售。在整个产业链中,每个环节都存在相应的食品安全风险,但是鉴于实际情况,了解下近期各环节存在的重点危害所在有哪些?

  • 15.4 微波辅助萃取-高效液相色谱法测定鱼腥草药材中槲皮素的含量

    15.4 微波辅助萃取-高效液相色谱法测定鱼腥草药材中槲皮素的含量

    微波辅助萃取-高效液相色谱法测定鱼腥草药材中槲皮素的含量陈斌 郁颖佳 归靓 周涛 段更利(复旦大学药学院药物分析教研室上海200032)【摘要】目的 建立微波辅助萃取一高效液相色谱法(MAE—HPLC)分析鱼腥草药材中槲皮素含量的方法。方法采用Diamonsil C18柱(5um,150 mm x 4.6 mm),以甲醇一0.2%三氟乙酸(50:50)为流动相,350 nm处波长检测,流速1.0 mL/min。微波辅助萃取条件的溶剂是10 mL甲醇,提取功率为400 w,提取时间为4 min。结果 槲皮素在0.01nO.2扯g的范围内线性关系关系良好(r=0.999 1),高、中、低3个浓度的平均加样回收率为98.32%~103.22%,RSD为1.21%~2.92%(行=3);样品的天内和天间RSD为0.42%和2.99%。结论 该方法简便、准确,适用于分析测定鱼腥草中槲皮素的含量。【关键词】微波辅助萃取; 高效液相色谱法; 鱼腥草; 槲皮素; 含量测定http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207232320_379309_2355529_3.jpg

  • 【转帖】草莓不为人知的4种特殊功效

    当下正是草莓的上市季节,在尽享草莓美味的同时你是否知道它有很多养生功效。下面为你介绍草莓的一些功效,让你在吃草莓时吃出健康吃出美丽。http://henan.sinaimg.cn/2011/0412/U4980P827DT20110412080819.jpg草莓功效  草莓是蔷薇科草莓属植物的泛称  草莓又叫红莓、杨莓、地莓等,是蔷薇科草莓属植物的泛称,全世界有50多种。草莓原产于欧洲,20世纪传入我国。当今,美国、波兰和俄罗斯是世界上种植草莓最多的国家。我国种植草莓的时间不长,且多栽培在城市郊区,产量较多的有京、津、沈、杭等市。  草莓被人们誉为果中皇后  草莓系多年生草本植物,其果实由花托发育而成为肉质聚合果,这与一般水果由子房发育而来不同。  草莓的外观呈心形,鲜美红嫩,果肉多汁,酸甜可口,香味浓郁,不仅有色彩,而且还有一般水果所没有的宜人的芳香,是水果中难得的色、香、味俱佳者,因此常被人们誉为果中皇后。  草莓营养丰富,含有果糖、蔗糖、柠檬酸、苹果酸、水杨酸、氨基酸以及钙、磷、铁等矿物质。此外,它还含有多种维生素,尤其是维生素C含量非常丰富,每100克草莓中就含有维生素C60毫克。草莓中所含的胡萝卜素是合成维生素A重要物质,具有明目养肝作用。草莓还含有果胶和丰富的膳食纤维,可以帮助消化、通畅大便。草莓的营养成分容易被人体消化、吸收,多吃也不会受凉或上火,是老少皆宜的健康食品。  草莓的吃法很多。若将草莓拌以奶油或鲜奶共食,其味极佳;将洗净的草莓加糖和奶油捣烂成草莓泥,冷冻后是冷甜、香软、可口的夏令食品;草莓酱如做元宵馒头、面饼馅心,更是绝妙的食品。草莓还可加工成果汁、果酱、果酒和罐头等。

  • 鼠尾草提取物及其活性成分木犀草素靶向破坏p16-CDK6互作延缓衰老

    [size=16px][size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]1、HK可延长小鼠的健康寿命和寿命,改善多种组织中的衰老表型[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]作者首先探究HK对小鼠寿命的影响,发现饲喂HK显著改善小鼠的毛发、骨骼、握力以及肾脏功能等,且HK小鼠存活率的提高并不是由于对照动物存活率低、饮食或居住条件的差异造成的。为了更好地描述HK对治疗小鼠健康寿命的影响,开发了一个多参数评分,包括在体内评估实验小鼠的皮毛状态,后凸,眼白内障和可触摸肿瘤的存在,结果显示HK增加了小鼠的健康寿命和寿命,并且没有观察到毒性。此外,在老年小鼠中,HK治疗可以减轻一些与年龄相关的体内表型,如毛发脱落,肌肉骨骼脆弱和肾纤维化[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]2、HK 对衰老相关分子通路的影响[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]为了评估HK通过影响细胞功能来延长体内寿命的机制,对治疗小鼠的腓肠肌进行RNA-seq。首先在老年和年轻动物的肌肉特异性转录组之间进行了差异表达分析,以获得衰老特征,随后用这一衰老特征研究了HK处理小鼠肌肉中发生的转录扰动,发现在HK处理的小鼠中,这些上调的基因在衰老小鼠中表达下调,反之则表达下调。此外,衰老过程中上调的基因簇在与炎症、免疫激活和衰老或SASP相关的通路标签中过度表达,且与未处理的小鼠相比,HK处理显著降低了小鼠的衰老特征。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]3、HK治疗抑制衰老[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]作者通过对肌肉样本进行RT-qPCR,证实了研究结果,HK处理降低了Cdkn1a和Tp53的mRNA表达。鉴于HK下调了肌肉中的衰老相关基因和基因集,探索了HK处理可改善其他器官衰老的特征。通过免疫组化分析发现不同衰老标志物p16, p27,γH2AX,发现这些标记物在衰老过程中上调,而HK处理逆转了这一表型。在肾脏(另一个受衰老影响的组织)中,衰老标记物p16, p27和53BP1在衰老过程中显著上调,而被HK处理减弱。此外,由于SH在体外已显示出对肺成纤维细胞的衰老抑制作用,作者发现hk处理减弱小鼠肺中p27的表达。综上所述,这些结果表明HK处理降低了体内不同组织中由衰老驱动的几种衰老标志物的水平[/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]4、HK 可预防阿霉素引起的衰老和心脏毒性[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]Doxo诱导的心脏组织衰老之前已被描述为doxo诱导的心功能障碍的关键病理机制。作者使用亚致死浓度的Doxo处理心肌细胞(iCM)诱导衰老。SA-β-Gal染色显示HK显著阻止iCM衰老,并降低p21 mRNA水平,与未处理细胞相当。此外,HK处理几乎完全恢复了doxo处理的衰老iCM中的QT间期(QTcB)的延长,且单独的HK并不影响对照iCM的电生理特性[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]5、HK活性成分木犀草素可防止应激诱导的衰老[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]由于HK是一种含有多种植物成分的植物提取物,作者利用UPLC-QTOF-MS对其主成分进行了鉴定,提取物中的三个主要的分子类别是酚/木脂素,黄酮类和萜烯。作者重点评估了黄酮类化合物—在许多植物性食物中发现的天然化合物,已被证明通过调节细胞衰老和氧化应激具有抗衰老特性。[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]首先作者检测了六种最具代表的黄酮类化合物(异槲皮素,山奈酚,川陈皮素,异鼠李素,木犀草素和木犀草素-7-o-葡萄糖醛酸)和两种酚酸(3,4-二咖啡酰奎宁酸和迷香酸),SA-β-Gal染色发现只有木犀草素(Lut)、木犀草素-7-o-葡萄糖醛酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸显著减弱UV-B辐射诱导的IMR90成纤维细胞衰老,达到与HK处理相似的水平。因此,作者进一步探索Lut及其衍生物的影响,发现Lut处理以剂量依赖性方式阻止辐射和doxo诱导的衰老,并且在某种程度上类似于HK。综上所述,木犀草素是HK植物复合体中的一种有效成分,改善不同类型的细胞中由不同外部应激源诱导的SA-β-Gal的阳性表达。药代动力学数据证实了Lut在体内的存在。最后在体内细胞衰老的急性模型中同样发现Lut对衰老特征的改善作用[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]6、木犀草素破坏 p16–CDK6 复合物[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]鉴于Lut 能够抑制细胞衰老,作者希望描述这种影响背后的分子机制。通过分子对接发现木犀草素可以与CDK6结合,具有很强的亲和力。CDK6调控细胞周期由G1期向S期进展。在损伤细胞条件下和衰老过程中,CDK6的活性被p16的相互作用阻止。鉴于HK提取物及其成分木犀草素延缓衰老的发生,作者推测它与CDK6的结合可能会阻碍CDK6与p16的相互作用。首先,作者生成了一个包含CDK6, p16和木犀草素的复合体的计算机三维模型,预测木犀草素与两种蛋白的界面结合,提示木犀草素与CDK6的存在可能会破坏与p16的相互作用。然后,通过SPR和PLA实验证实木犀草素的存在显著破坏了CDK6与p16的相互作用。总之,这些数据表明木犀草素可以在衰老诱导条件下改变 p16 和 CDK6 之间的相互作用,从而可能改变衰老表型的发展[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]图片[/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px] [/size] [size=14px]总结[/size] [size=14px] [/size] [size=14px]该研究发现HK可显著延长寿命,改善与年龄相关的组织功能障碍,并调节衰老表型。此外, HK 富含木犀草素,木犀草素通过破坏 p16–CDK6 相互作用从而起到延缓衰老的作用。这些数据为未来研究和开发 HK 作为医疗食品或治疗与年龄相关疾病的药物提供了良好的基础。[/size] [/size]

  • 木犀草素纳米混悬剂的制备及其体外肠吸收研究

    木犀草素(luteolin),别称草木犀、黄示灵等,大多以糖苷的形式广泛存在于多种中药材、天然药用植物[1]及蔬菜[2]中的一种黄酮类化合物,是一种天然色素成分,可以作为食用色素添加于食品中。木犀草素的化学名为3′,4′,5,7-四羟基黄酮(3′,4′,5,7-tetrahydroxyflavone),物理状态为淡黄色结晶状粉末,熔点为330 ℃,包含4个酚羟基,具有弱酸性,可溶于碱性溶液中,因脂溶性高而难溶于水,从而阻碍了其在体内的吸收与利用[3]。木犀草素具有抗炎和抗菌[4-5]、抗氧化[6]、抗肿瘤[7]、神经保护[8]、抑制肺纤维化[9]及肺癌[10-11]和心血管疾病[12]等多种药理作用。由于水溶性差(仅为6.0 mg/L)、生物利用度率低等原因限制了其成药性和临床应用。针对这一问题,近年来许多学者开展了增加木犀草素溶解度的研究,如微球[13]、纳米胶束[14]、金属配合物[15]、自微乳[16]、脂质体[17]等,并明显提高了其生物利用度,这表明木犀草素的肠道渗透性不是限制其生物利用度的关键因素,其属于生物药剂学系统II类药物。因此,采用制剂技术提高木犀草素的溶解性是可以改善其成药性和生物利用度的,将有利于推广其临床应用。然而上述开发的剂型仍存在诸多的缺点,如工艺复杂、载药量低、生物安全性差、成本高等,难以大范围推广应用。近年来,逐步发展成熟的纳米混悬剂[18]作为一种新剂型,与传统纳米制剂相比,它具有载药量高、溶出度高、添加剂用量少、易于放大生产等优点。因此,本实验尝试将难溶性木犀草素制备成纳米混悬剂以提高其水溶性和生物利用度,改善其成药性和临床优势。 为此,本实验首先采用微沉淀-高压匀质法制备口服木犀草素纳米混悬剂(luteolin nano-suspension,LNS),并以纳米粒的粒径、稳定性、多分散性指数(polydispersity index,PDI)、ζ电位等为考察指标,采用单因素考察法筛选LNS的稳定剂和最优药物-稳定剂比;接着,对LNS的理化性质进行考察,并分析其物理状态和体外溶出行为;最后通过大鼠外翻肠模型考察药物在肠道不同部位的吸收转运情况,探索药物在肠道内的吸收速率和最佳部位,预测纳米混悬剂可能存在的体内吸收行为,既可以用于木犀草素口服给药的潜在剂型,也为其进一步加工成其他剂型研究提供基础。 1 仪器与材料 1.1 仪器 ZNCL-BS180型恒温磁力搅拌器,北京市永光明医疗仪器有限公司;AL104-1C型精密分析天平,上海鼎科科学仪器有限公司;NS1001L型高压匀质机,意大利GEA [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/1p][color=#3333ff]NIR[/color][/url]o Soavi公司;Nanotrac wave II型激光粒度仪型激光粒度仪,美国麦奇克有限公司;LC3100型高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url],安徽皖仪科技股份有限公司;ZWY-103D型恒温振荡仪,上海智诚分析仪器制造有限公司;H1650-W型医用离心机,湖南湘仪实验室仪器开发公司;DZF-6030型真空干燥箱,上海精宏实验设备有限公司。JEOL 2010型透射电子显微镜(TEM),日本JEOL公司。 1.2 试剂 木犀草素原料药,批号JZ19021403,质量分数97.0%,南京狄格尔医药科技有限公司;木犀草素对照品,批号ps1032-0025,HPLC质量分数≥98%,成都普思生物科技有限公司;十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfonate,SDS),医药级,河南圣拓实业有限公司;泊洛沙姆188(Poloxamer 188,Pluronic,F68),医药级,西安天正药用辅料有限公司;维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(D-α-tocopherol polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS),医药级,上海惠诚生物科技有限公司;二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO),分析纯,天津市德恩试剂有限公司。 1.3 动物 SD大鼠购买于河南省实验动物中心,体质量(200±20)g,合格证号:SCXK(豫)2017-0001。所有动物实验均经过河南大学动物伦理委员会审核批准(HUSOM2019-216)。 2 方法与结果 2.1 LNS的制备 2.1.1 LNS中稳定剂的选择 将40 mg木犀草素原料药超声溶解于1 mL的DMSO中作为有机相,再取等量的稳定剂(SDS、F68、TPGS)溶解于纯水中(作为水相,或称反溶剂相);在室温下,将有机相通过注射器快速注入转速为1 800 r/min的反溶剂相中,继续搅拌10 min,得到预混悬剂;将预混悬剂转移至高压匀质机中,分别以20.0、50.0、80.0 MPa的压力循环匀质5、5、25次,得到LNS。 利用动态光散射仪分别考察LNS的粒径、多分散系数(polydispersity index,PDI)、表面电荷(ζ电位)和稳定性。本实验以不同稳定剂(SDS、F68、TPGS)制备的LNS粒径大小、PDI、ζ电位结果如表1所示。3种稳定剂所制备的粒径均在100~500 nm。以SDS为稳定剂制备的纳米混悬剂粒径最大,以F68为稳定剂制备的纳米混悬剂PDI最大,以TPGS为稳定剂制备的纳米混悬剂ζ电位最大,但是3者没有较大的差异,因此对于预测稳定性来说,上述结果难以判断哪个稳定剂制备的LNS会有良好的贮存稳定性。 因此,本实验又对各种条件的贮存稳定性进行了研究,结果见图1。以SDS、F68为稳定剂制备的纳米混悬剂在1周内粒径呈现持续增长的趋势,而以TPGS为稳定剂制备的LNS粒径未出现明显变动,由此可知,本实验中以TPGS为稳定剂制备的LNS具有较好的物理稳定性。 2.1.2 LNS中药物-稳定剂质量比的筛选 将40 mg的木犀草素原料药超声溶解于1 mL的DMSO中作为有机相,再分别按照木犀草素与TPGS的质量比为1∶2、1∶1、2∶1称取TPGS,溶解于水中,得到反溶剂相;再按上述工艺制备LNS,得到不同药物-稳定剂质量比的LNS。利用动态光散射仪分别考察纳米混悬剂的粒径、分布、ζ电位和稳定性。不同药物-稳定剂比制备的LNS的理化性质研究结果见表2和图2。如表2所示,3种不同药物-稳定剂比制备的LNS的粒径分别为(289.3±6.6)、(210.7±2.0)、(34.6±3.7)nm,3种LNS的PDI接近,1∶2时ζ电位最大,2∶1时ζ电位没测到。虽然药物与稳定剂的质量比为2∶1时,其粒径与1∶2、1∶1时相差较大,但是粒径难以反映稳定性情况。因此,接下来考察了1∶2、1∶1、2∶1 3种不同比例下制备的LNS的稳定性,结果如图2所示。当药物-稳定剂比为2∶1和1∶2时,在2周内粒径变化幅度都较为明显,说明其稳定性表现均极差;而当药物-稳定剂比为1∶1时,制备的纳米混悬剂的粒径基本保持稳定,表明其稳定性较好。因此,本实验最终选用药物-稳定剂比为1∶1。 2.1.3 最优制备处方和方法的确定 依照LNS的稳定剂及药物-稳定剂比的筛选结果,初步确定LNS的最优制备处方与方法如下:将精密称取40 mg的木犀草素原料药超声溶解于1 mL的DMSO中作为有机相;将40 mg TPGS搅动溶解于40 mL纯水中作为水相,将有机相快速注入转速为1 800 r/min的水相中,搅动10 min,得到预混悬剂;将制备的预混悬剂倒入高压匀质机的导入槽中,分别以20.0、50.0、80.0 MPa的压力,分别循环匀质5、5、25次,得到LNS。重复制备3批,以粒径、PDI和ζ电位考察制剂处方和制备工艺的稳定性。 2.2 LNS的表征 2.2.1 粒径、ζ电位及形态分析 将最优处方制备的3批LNS分别通过激光粒度分析仪测定其粒径、PDI、ζ电位,结果LNS的粒径为(209.00±3.24)nm(n=3),PDI都低于0.228±0.013(n=3),粒径分布图见图3;ζ电位值为(?16.80±0.27)mV (n=3),较小的PDI和绝对值较大的ζ电位,意味着LNS可能具有较好的长期稳定性[19]。 再取适量的LNS加蒸馏水稀释到适当倍数后,滴在覆有支持膜的铜网上,自然环境下干燥后,通过TEM观察其形态特征及大小,并成像,结果见图4。LNS呈现均匀分散的球形或椭圆形颗粒,粒径约为180 nm,比动态光散射测定结果较小,这可能是由于TEM样品为干燥品,导致粒子外层亲水部分失水而收缩[20]。 2.2.2 储存稳定性 将制备的LNS分别放在4 ℃和室温环境中,在预定的时间点取样,通过激光粒度分析仪测定其粒径和PDI,连续考察14 d,每个样品平行操作3份,结果见表3。LNS在4 ℃和室温下储存2周后,粒径和PDI稍有增加,但变化范围都较小,说明该LNS的储存稳定性较好。 2.2.3 体外胃肠环境中的稳定性 以pH 1.2和pH 6.8的缓冲溶液模拟胃液和肠液,将制备的LNS分别以1∶1与上述2种缓冲溶液混合,并于37 ℃水浴中放置,在预定的时间点0、2、4、6、8、12、24 h时取样,通过激光粒度分析仪测定其粒径,连续考察24 h,每个样品平行操作3份,结果见表4。在2种37 ℃的缓冲溶液中孵育24 h内,LNS的粒径和PDI几乎无变化,表明LNS在2种环境中能保持稳定,这表示LNS口服给药后,在经胃肠道给药时能保持良好的稳定性,这有利于木犀草素到达肠道后仍以纳米晶存在,从而有利于木犀草素的快速释放而获得较高的生物利用度。 2.2.4 纳米混悬剂的物理状态研究 本实验选用DSC来确定LNS中的木犀草素晶型是否发生了改变,测试样品有木犀草素、TPGS、木犀草素与TPGS的物理混合物和LNS。以空铝盘作为空白对照,分别精密称取3~5 mg的木犀草素、TPGS、物理混合物(木犀草素+TPGS)、LNS干粉放于差式扫描量热分析(differential scanning calorimetry,DSC)仪中,N2流(40 mL/min)保护下,以10 ℃/min升温速度持续升温,升温范围设置为40~600 ℃,记录差式扫描量热分析图谱,所有测试样品重复分析3批,结果见图5。木犀草素和LNS、物理混合物均是结晶,其熔融温度为339.38 ℃,稳定剂对木犀草素的熔融温度基本无影响。这表明LNS中的木犀草素仍处于结晶状态,稳定剂的存在不会改变木犀草素的晶型。在木犀草素和LNS中,在50~150 ℃出现了1个宽峰,这可能是由于药物吸收了水分造成的。 再分别称取适量的木犀草素、TPGS、物理混合物(木犀草素+TPGS)、LNS置于X射线粉末衍射(X-ray powder diffraction,XRPD)仪中,以步进测定方式,散射角扫描范围设为5°~60°,电压设为40 kV,电流为30 mA,结果见图6。由图6可知,木犀草素在19.12、23.20、26.32 ℃有3个衍射峰,衍射峰的峰形较为尖锐,峰值较高,表明木犀草素的晶型为结晶型。稳定剂TPGS在15.72、17.48、22.86、25.60、29.26 ℃有衍射特征峰。制备成纳米混悬剂后,虽然LNS图谱中木犀草素的特征峰有所减弱,但与木犀草素相比,在相应位置特征峰均存在,进一步证实制备成LNS后木犀草素并未显著改变晶型,说明稳定剂的加入不会影响木犀草素的晶型,这与DSC分析的结果一致。 2.3 平衡溶解度与过饱和溶出度测试 为了测定木犀草素的平衡溶解度与木犀草素纳米混悬剂的过饱和溶出度,本实验参考文献方法[21]建立了HPLC法。 2.3.1色谱条件 色谱柱为Sino Chrom ODS-BP色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-0.3%磷酸水溶液(60∶40);柱温30 ℃;检测波长350 nm;体积流量1 mL/min;进样量10 μL。 2.3.2对照品溶液的配制 精密称取木犀草素对照品2.50 mg,放入100 mL棕色量瓶中,以适量色谱甲醇使之完全溶解,并定容至刻度线,摇匀得到质量浓度为25 μg/mL的木犀草素对照品储备液。 2.3.3 线性关系考察 采用色谱甲醇稀释成质量浓度分别为0.5、1.0、2.0、5.0、7.0、10.0 μg/mL系列的木犀草素对照品溶液,按“2.3.1”项下色谱条件进行分析,以对照品质量浓度为横坐标(X)、峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归,得线性回归方程为Y=44 670 X-2 498.3,R2=0.999 8,结果表明木犀草素在0.5~10.0 μg/mL线性关系良好。 2.3.4 专属性、精密度和准确度考察 在建立的HPLC色谱条件下,木犀草素色谱峰不会受pH 1.2和pH 6.8的溶出介质、稳定剂TPGS、Tyrode液以及肠吸收液中所有成分的干扰(图7),表明本实验所建立的含量测定方法具有较好的专属性,能够满足体外溶出和肠吸收试验中木犀草素的含量测定要求。另外,其精密度实验的RSD为1.2%,高、中、低3个质量浓度的样品加样回收率在99.67%~101.47%,RSD均小2%,符合《中国药典》2020年版的规定。 2.3.5 平衡溶解度的测定 为了测定木犀草素在pH值为1.2、6.8缓冲溶液中的平衡溶解度,取5 mL 2种缓冲溶液各3份于西林瓶中,加入过量的木犀草素,将西林瓶置于恒温振荡箱中,在温度为37℃,转速为75 r/min条件下振荡24 h。取出各样品,3 000 r/min下离心10 min后取上清液,然后用0.2 μm滤膜滤过,取续滤液于进样瓶中,按照“2.3.1”项下色谱条件进样测定,并计算木犀草素的平衡溶解度,结果可知,木犀草素在pH值为1.2、6.8的缓冲溶液中的平衡溶解度分别为(3.83±0.23)、(7.81±0.13)μg/mL。 2.3.6 过饱和溶出度的测定 为了考察LNS体外溶出行为,参照《中国药典》2020年版中桨法进行。具体操作如下:在智能溶出仪中,以500 mL模拟胃液为溶出介质,温度为37℃,桨旋转速度为75 r/min,将30 mL LNS加入溶出介质中,以相同质量浓度的木犀草素乙醇溶液作为对照,二者均平行操作3份。以药物刚接触溶出介质开始计时,分别于5、15、30、60、120、130、150、180、240、360、480 min时取样4 mL,取完样后立即补充4 mL相应的新鲜溶出介质。另外,于120 min取样后,每个溶出杯中分别加入适量的Na3PO4溶液,调节pH值为6.8,以模拟肠液。将所取样品溶液经0.2 μm微孔滤膜滤过,取续滤液置于进样瓶中,照“2.3.1”项下色谱条件测定,计算累积溶出度,结果见图8。为了测定过饱和溶出水平,在整个实验过程中,介质中药物的质量浓度都应保持远远大于药物的饱和溶解度[22]。结果如图8所示,在pH 1.2和pH 6.8时,木犀草素-原料药的过饱和溶出始终低于对应的平衡溶解度,LNS的过饱和溶出始终高于对应的平衡溶解度,说明制剂的过饱和度高;在溶出介质的pH值调为6.8后,过饱和溶出水平明显下降,在150 min后过饱和溶出水平逐渐稳定,说明LNS能维持较高的过饱和溶出水平。 结果表明,LNS较木犀草素原料药具有明显优势,其饱和溶出度约是木犀草素原料药的15倍,过饱和度高并能维持较长时间,可以延缓药物在体内因析出晶体而沉淀的过程,从而使稳定剂在较小用量下也能保证药物分子成溶解态,提高了原料药的溶解度,有利于增加其生物利用度[23]。 2.4 小肠吸收实验 为了探索LNS对木犀草素在胃肠道的吸收部位和吸收速率的影响,采用外翻肠囊法[24]研究LNS在肠道不同肠段的吸收特征,以探究药物在肠道内的最佳吸收部位。 2.4.1 对照品溶液的制备 精密量取“2.3.1”项下相应体积的储备液,置于50 mL棕色量瓶中,用Tyrode液定容至刻度,摇匀,配制出质量浓度为1、2、4、8、16、32、40 μg/mL木犀草素对照品溶液。 2.4.2 线性关系考察 按照“2.3.1”项下色谱条件测定,以木犀草素对照品质量浓度为横坐标(X),峰面积为纵坐标(Y)进行线性回归,得到回归方程为Y=45 475 X-19 575,R2=0.999 6,结果表明木犀草素在1~40 μg/mL线性关系良好。 2.4.3 供试品溶液的制备 大鼠按实验质量浓度随机分为3组,每组4只,实验前12 h禁食,自由饮水。颈椎脱臼处死,打开腹腔,小心分离出小肠,分别截取十二指肠、空肠、回肠、结肠相应肠段各10 cm,用生理盐水冲洗至无内容物流出。将肠段放入37 ℃ Tyrode液中,冲洗,在不损伤肠管的情况下,小心剥离肠表面的脂肪及血管,取出,用滤纸吸干表面水分。 将肠管一端结扎,用光滑的玻璃棒外翻,用Tyrode液冲洗过后,向不同肠段中注入3 mL的空白Tyrode液后将另一端也进行结扎形成囊状的肠管。将肠管放入盛有Tyrode液的烧杯中,实验中始终保持37 ℃的恒温,并不断通入95% O2/5% CO2的混合气体。平衡5 min后,将烧杯中的液体倒出,分别加入不同质量浓度(0.15、0.30、0.60 mg/mL)的木犀草素及LNS药液。以肠囊和药液接触时开始计时,取样时间点分别为15、30、45、60、75、90、105、120 min,每个时间点从肠囊内取样500 μL,同时补充同温同体积的空白Tyrode液。待试验结束后,将各段肠囊置于空白Tyrode液中孵育1 h,以清除掉肠囊及肠组织中残留的药物;随后将上述用于木犀草素和LNS吸收实验的各肠段互换,再按上述操作同法重复试验,以进行自身对照交叉试验的后段实验。取上述肠吸收液,加入甲醇500 μL,超声混匀,15 898×g离心(离心半径6.32 cm)2次,每次15 min,取上清液用0.2 μm滤膜滤过,取续滤液适量即得。 按照“2.3.1”项下色谱条件测定,并计算药物在各时间点的累积吸收量(Q,μg)和药物吸收速率常数[Ka,μg/(mincm2)],结果见图9。 由公式计算不同质量浓度下木犀草素在各个时间点的累积吸收量(Q)。 Q是每个时间点木犀草素的累积吸收量,Ci是每个时间点的实际检测质量浓度,V1是加入肠囊内的空白Tyrode液,V2是每次取样的体积 由图9可知,通过对比2种制剂在各肠段中不同质量浓度的药物吸收情况,可以发现药物的同一时间点的吸收量表现出质量浓度相关性。相同质量浓度下,在各肠段中2制剂组吸收量相比,LNS组的药物累积吸收量显著大于木犀草素溶液组,表明LNS相比于木犀草素溶液能够促进药物在肠道的吸收。 根据小肠内(4个肠段)的Q值,通过线性拟合,由公式Ka=L(斜率)/A(肠管平铺面积)求得吸收速率常数(Ka)和相关系数(R2),结果见表5。2种制剂中木犀草素在肠道的不同部位中的吸收速率大小顺序均为十二指肠>空肠>回肠>结肠,这可能归因于十二指肠和空肠肠段的吸收面积较大;这一结果还表明LNS并没有改变木犀草素在肠道内的主要吸收部位和机制。对比相同质量浓度、相同肠段中2种制剂的吸收情况可以发现,LNS中木犀草素的吸收速率显著高于木犀草素溶液的情况,尤其是十二指肠和空肠中LNS和木犀草素溶液的木犀草素吸收速率差异更加明显,这表明LNS可以增加木犀草素的肠吸收,且十二指肠和空肠是主要吸收部位。 另外,还可以发现2种制剂在每一肠段中的吸收速率都存在显著的质量浓度相关性(P<0.01),但是2种制剂在同一肠段中的吸收速率随质量浓度增加而提高的程度有明显差异,即木犀草素溶液随质量浓度的增加,各肠段中吸收速率增幅增大,而LNS随质量浓度的增加,各肠段中吸收速率增幅减小,这些结果表明2种制剂在各肠段中的吸收均有质量浓度相关性,但其吸收速率与质量浓度之间均存在非线性关系,且仅在Ka<0.052时,木犀草素的肠吸收过程可能只受木犀草素溶解度限制,而不受吸收速度限制。然而,木犀草素的实际口服吸收情况是否符合上述规律以及其具体吸收机制如何,将有待于后期开展体内外吸收途径探索和体内药动学研究来进一步证实。 3 讨论 3.1 稳定剂的选择及药物-稳定剂比的确定 由于不同的稳定剂中化学基团的差异,导致稳定剂与药物微粒之间的分子间作用力以及胶粒间的作用力都有明显差异,所以稳定剂种类会影响到纳米混悬剂的稳定性[25]。因此,本实验首先以粒径和稳定性为考察指标,通过单因素筛选法优化了LNS的稳定剂种类,并确定了以TPGS作为稳定剂能达到较好的预期效果;考虑到稳定剂用量对稳定效果的影响[26],随后本实验又考察了药物-稳定剂比对纳米混悬剂的粒径、稳定性、PDI、ζ电位的影响,最终确定最佳药物-稳定剂比为1∶1。 3.2 LNS体外分析方法的建立及研究 3.2.1 波长的选择 木犀草素对照品与稳定剂TPGS在紫外波长200~800 nm扫描,结果显示木犀草素在207、254、350 nm 3处波长处有强吸收;而TPGS在219、286 nm显示出强吸收,350 nm处没有显示出强吸收。为了排除稳定剂TPGS对木犀草素测定的干扰,选用350 nm作为木犀草素的测定波长。 3.2.2 Tyrode溶液的配制 在木犀草素的肠吸收情况研究中,虽有文献报道了外翻肠囊模型和在体单向肠灌流模型[27-29],但关于木犀草素及其制剂在大鼠不同肠段中的吸收情况鲜有报道,且大多数文献对其吸收情况所提甚少。 本实验采用离体外翻肠囊法,可操作性强、重复性好;能够保留较为完整的肠道组织和黏膜特性,其实验结果与机体药物吸收水平比较接近,具有说服力;但肠外翻肠囊法也存在缺点,如长时间暴露在体外,肠管没有血管和神经的控制,肠黏膜功能和形态会失去作用。因此,本研究为解决这一问题,利用Tyrode培养液改善肠管的存在环境,具体配制方法如下:将NaCl(8.0 g/L)、KCl(0.2 g/L)、CaCl2(0.2 g/L)、NaHCO3(1 g/L)、NaH2PO4(0.05 g/L)、MgCl2(0.1 g/L)、葡萄糖(1.0 g/L),用蒸馏水定容至1 000 mL,稀盐酸调pH值为7.2~7.4,由于CaCl2不好溶解,应在其他无机盐溶解完全后再加入,葡萄糖于临用前再加入。并且在实验过程中连续通入95% O2/5% CO2,保证了在实验期间肠管上肠黏膜的活性。实验证明用该模型了解药物的离体吸收,其结果可靠。 3.3 LNS的过饱和溶出 药物在纳米混悬剂中所处的物理状态关系着其粒径和溶出稳定性,通常无定形药物微粒具有较高的饱和溶出度,但其属于热力学不稳定状态,因此物理稳定性差,容易引起纳米混悬剂粒径分布发生变化,同时溶出速率和溶出度下降;而结晶型药物具有较好的热力学稳定性,随着其粒径的减小,其饱和溶出度会明显提高[30]。根据本实验对LNS中木犀草素物理状态的研究结果可知,本实验制备的LNS中木犀草素以结晶形式存在,这表明LNS可能存在稳定的粒径和溶出度。 在过饱和溶出实验中发现,相比于木犀草素原料药,LNS具有显著的长期高过饱和溶出水平,这可归因于LNS中药物以粒径远小于原料药的状态存在,正如开尔文定律所描述的小粒径药物具有高溶解度一样[31]。药物的长期高过饱和溶出水平将有助于避免或减少口服给药后因胃肠道pH变化而引起的析晶沉淀现象,从而增加药物的吸收速度和时间,提高药物的口服生物利用度。 综上所述,本实验制备的LNS,分散性和储存稳定性良好,方法也简单易行,本实验建立的木犀草素体外分析方法,经方法学验证可知,该方法快速、可靠、准确度高,适合LNS的体外溶出和外翻肠囊吸收实验研究。 同时,外翻肠实验表面,LNS能促进药物在肠道的吸收,可作为木犀草素口服给药的潜在剂型,也为其进一步加工成其他剂型研究提供坚实基础。同时,在木犀草素肠道吸收的具体机制方面还有很大的研究空间。

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    【原创大赛】38期草根比对-4种金属元素

    1准备工作1.1玻璃器皿准备。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131322_609453_1604573_3.jpg准备充足的玻璃器皿,本次实验是做金属元素,所以需要用15%的硝酸浸泡器皿过夜,捞出来用自来水冲洗干净,再用超纯水润洗后晾干备用。1.2标准溶液准备。检查实验室是否有充足的标准溶液以及标准物质。1.3仪器状态核验。检查原子吸收乙炔气和高纯氩气是否够用。开机做一做相关元素的实验。2样品确认2.1检查包裹是否有破损,检查样品玻璃瓶是否破损漏液。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131322_609450_1604573_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131322_609451_1604573_3.jpg2.2核对样品瓶编号与作业指导书编号。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131322_609454_1604573_3.jpg3预实验与正式实验3.1熟悉作业指导书,制定实验计划。根据大致浓度范围,和标准方法,设计好标准曲线的浓度范围以及确定样品的稀释倍数。3.2预实验。配制好标准溶液以及样品之后,上机操作得到结果。再判断是否需加大稀释倍数,并确定如何做加标回收实验。3.2正式实验。3.2.1仪器 热电原子吸收S4(战斗13年的老兵了)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131322_609457_1604573_3.jpg3.2.2试剂 各种元素标准溶液(浓度均是1000mg/L,下同)、Fisher级硝酸、超纯水3.2.3溶液配制3.2.3.1标准系列。分别取原液一定体积配制成混合主标(铜、锌、铅、镉浓度分别是20、20、40、10),然后分别取一定体积制成标准系列,铜(0.2、0.5、1.0、2.0)、锌(0.2、0.5、1.0、2.0)、铅(0.4、1.0、2.0、4.0)、镉(0.1、0.25、0.50、1.0)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131322_609452_1604573_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131322_609455_1604573_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609131322_609456_1604573_3.jpg3.2.3.2样品。按照作业指导书稀释。由预实验的结果提示,做铜、锌、铅要稀释后的样品再做50倍稀释,做镉要再100倍稀释。3.2.4精密度和准确度。开机预热,编制好序列之后开始上机进样。多次进样取平均值,同时做加标回收实验。各元素回收率89.3%-92.6%,镉元素超出了标准曲线最高值,所以回收率没有计算,小小的遗憾。4报告的填写与提交4.1按照稀释倍数做好计算工作,不同的元素稀释倍数不一样,不能算错4.2按照作业指导书要求提交到指定邮箱我们是草根,我们不怕比对。没有考核压力之下的能力验证,可以放下包袱去做实验,但是又不能让精神太过于放松。我们的目的是做好实验,不断完善自己丰富自己的经验。

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    该技术以我国大量栽培的紫花苜蓿为原料,通过动物营养学、药理学和植物化学等研究,明确了紫花苜蓿中促进畜禽生长及增强免疫的活性成分,研制出具有自主知识产权的无公害饲料添加剂产品—“苜草素”,并组织了规模化生产。该项研究所形成的产品“苜草素”,能够有效克服同类产品的功能不确切、效果不显著、质量不稳定等弊端,为饲料添加剂更新换代和生产技术升级改造奠定了基础,有效解决了畜产品的药物残留问题,在促进畜牧业向健康、安全、高效、环保的方向发展上,具有非常重要的作用。该技术建立的热水浸提“苜草素”生产工艺,具有简便易行、安全和高效等特点,对苜蓿中的多糖、黄酮、皂苷等主要有效成分不造成破坏,可以确保产品质量的稳定性。“苜草素”具有增强动物免疫机能的作用。

  • 【资料】国家发展和改革委员会公告2007年 第 45 号

    国家发展改革委批准《牧草种子清选机 技术条件》等127项行业标准(标准编号、名称及起始实施日期见附件),其中机械行业标准88项、石化行业标准26项、稀土行业标准12项、制药装备行业标准1项,现予公布。 以上机械行业标准由机械工业出版社出版、石化行业标准由中国石化出版社出版、稀土行业标准由中国标准出版社出版、制药装备行业标准由中国计划出版社出版。 中华人民共和国国家发展和改革委员会二○○七年八月一日 附件:127项机械、石化、稀土、制药装备行业标准编号、名称及起始实施日期序号 标准编号 标准名称 代替标准 采标情况 实施日期 机械行业       1 JB/T 5157-2007 牧草种子清选机技术条件 JB/T 5157-1991 2008-01-01 2 JB/T 5158-2007 牧草种子除芒机技术条件 JB/T 5158-1991 2008-01-01 3 JB/T 5159-2007 牧草播种机 JB/T 5159-1991JB/T 5168-1991JB/T 7765-1995 2008-01-01 4 JB/T 5162-2007 横向搂草机搂齿 JB/T 5162-1991 2008-01-01 5 JB/T 5163-2007 电围栏脉冲器 JB/T 5163-1991JB/T 5164-1991 2008-01-01 6 JB/T 5167-2007 压捆机用聚丙烯捆绳和钢丝 JB/T 5167-1991 2008-01-01 7 JB/T 5172-2007 鲜奶速检器 JB/T 5172-1991 2008-01-01 8 JB/T 6942-2007 半棚式塑料暖棚 JB/T 6942-1993 2008-01-01 9 JB/T 6945-2007 牧草种子窝眼滚筒精选机 JB/T 6945.1-1993JB/T 6945.2-1993 2008-01-01 10 JB/T 7135-2007 羊草地潜松耕犁 JB/T 7135.1-1993JB/T 7135.2-1993 2008-01-01 11 JB/T 7136-2007 秸秆化学处理机 JB/T 7136.1-1993JB/T 7136.2-1993 2008-01-01 12 JB/T 7137-2007 镀锌钢丝围栏网基本参数 JB/T 7137-1993 2008-01-01 13 JB/T 7141-2007 颗粒饲料分级筛试验方法 JB/T 7141-1993 2008-01-01 14 JB/T 7142-2007 螺旋推挤式颗粒饲料压制机 JB/T 7142.1-1993JB/T 7142.2-1993 2008-01-01 15 JB/T 7144-2007 青饲料切碎机 JB/T 7144.1-1993JB/T 7144.2-1993 2008-01-01 16 JB/T 7287-2007 刷种机技术条件 JB/T 7287-1994 2008-01-01 17 JB/T 7290-2007 牧草种子悬浮速度测定方法 JB/T 7290-1994 2008-01-01 18 JB/T 7291-2007 种子螺旋分离机试验方法 JB/T 7291-1994 2008-01-01 19 JB/T 7324-2007 搂草机术语 JB/T 7324-1994 2008-01-01 20 JB/T 7767-2007 牛奶分离机 JB/T 7767.1-1995JB/T 7767.2-1995 2008-01-01 21 JB/T 5674-2007 茶树修剪机 JB/T 5674-1991JB/T 5675-1991 2008-01-01 22 JB/T 5676-2007 茶叶抖筛机 JB/T 5676-1991JB/T 5677-1991 2008-01-01 23 JB/T 5688.1-2007 花生剥壳机技术条件 JB/T 5688.1-1991 2008-01-01 24 JB/T 5688.2-2007 花生剥壳机试验方法 JB/T 5688.2-1991 2008-01-01 25 JB/T 6272-2007 中耕机土壤工作部件 JB/T 6272-1992 2008-01-01 26 JB/T 6274.2-2007 谷物播种机双圆盘开沟器 JB/T 6274.2-1992 2008-01-01 27 JB/T 6279-2007 圆盘耙 JB/T 6279.1-1992JB/T 6279.2-1992JB/T 6279.3-1992 2008-01-01 28 JB/T 6281-2007 采茶机 JB/T 6281.1-1992JB/T 6281.2-1992 2008-01-01 29 JB/T 6283-2007 小型拖拉机配套铧式犁 JB/T 6283-1992 2008-01-01 30 JB/T 6284-2007 可调式清洗机 JB/T 6284.1-1992JB/T 6284.2-1992 2008-01-01 31 JB/T 6670-2007 切茶机 JB/T 6670-1993JB/T 6671-1993 2008-01-01 32 JB/T 6674-2007 茶叶烘干机 JB/T 6674-1993JB/T 6675-1993JB/T 5678-1991JB/T 5679-1991 2008-01-01 33 JB/T 7321-2007 茶叶风选机 JB/T 7321-1994JB/T 7322-1994 2008-01-01 34 JB/T 8575-2007 茶叶炒干机 JB/T 8575-1997 2008-01-01 35 JB/T 9810-2007 转子式茶叶揉切机 JB/T 9810-1999 2008-01-01 36 JB/T 9811-2007 茶叶平面圆筛机 JB/T 9811.1-1999JB/T 9811.2-1999 2008-01-01 37 JB/T 9812-2007 茶叶滚筒杀青机 JB/T 9812.1-1999JB/T 9812.2-1999 2008-01-01 38 JB/T 9813-2007 阶梯式茶叶拣梗机 JB/T 9813.1-1999JB/T 9813.2-1999 2008-01-01 39 JB/T 9814-2007 茶叶揉捻机 JB/T 9814.1-1999JB/T 9814.2-1999JB/T 9814.3-1999 2008-01-01 40 JB/T 10748-2007 扁形茶炒制机   2008-01-01 41 JB/T 10749-2007 玉米脱粒机   2008-01-01 42 JB/T 10752-2007 电动气力超低量喷雾器   2008-01-01 43 JB/T 10753-2007 常温烟雾机   2008-01-01 44 JB/T 2391-2007 500kg~10000kg平衡重式叉车技术条件 JB/T 2391-1994 2008-01-01 45 JB/T 10750-2007 内燃牵引车   2008-01-01 46 JB/T 10751-2007 蓄电池牵引车   2008-01-01 47 JB/T 5957-2007 综合养护车术语 JB/T 5957-1991 2008-01-01 48 JB/T 5961-2007 推土机角刀片孔的尺寸及布置 JB/T 5961-1991 2008-01-01 49 JB/T 6033-2007 履带式推土机热平衡性能试验方法 JB/T 6033-1992 2008-01-01 50 JB/T 6034-2007 沥青混凝土摊铺机机械延伸熨平板宽度系列 JB/T 6034-1992 2008-01-01

  • 草酸是形成含钙结石的重要因素之一

    草酸是形成含钙结石的重要因素之一。一般来说,有点涩味的蔬菜草酸含量相对较高,比如菠菜、苋菜、茭白、竹笋、芦笋、马齿苋等,吃前用沸水焯一下,有助于去除大部分草酸。

  • 制订抗生素有关物质标准的指导原则(草 案)

    制订抗生素有关物质标准的指导原则(草 案)  □蒋煜 译  编者按  目前市场上的抗生素活性物质是通过化学合成、发酵或发酵后一次或多次合成步骤(半合成物质)等方式制造的。与合成工艺相比,发酵工艺中可变性更大,可控性更低。因此与纯合成产品相比,在生产中含有发酵工艺的活性物质的杂质谱可能更复杂及难以预测。由于上述原因,发酵产品和半合成产品未包括在ICH(人用药品注册技术规范国际协调会)Q3和VICH(兽用药品注册技术规范国际协调会)10/11(关于杂质的)指导原则之内,这些指导原则就化学合成活性物质中引入的杂质的鉴定、报告和控制限度制订了质量标准。  欧洲药物管理局(EMA)近期发布的《制订抗生素有关物质标准的指导原则(草案)》旨在为未包括在上述(V)ICH指导原则中的内容提供指导,即如何规范发酵产品或源于发酵产品的半合成物质的抗生素中的有关物质。本报特刊登了药审中心专家对此草案的整理翻译,望能给相关制药企业及研发人士以参考和借鉴。  介绍(背景)  目前市场上大部分抗生素是通过化学合成或发酵方式得到。在某些情况下,通过发酵所得到的抗生素,其化学结构可通过多步合成工艺进一步修饰之后,在制剂生产中做为活性物质使用(半合成物质)。  和纯化学反应相比,发酵工艺涉及到生物系统,预测性差,可控性低,且更为复杂。因此发酵产品的波动性比化学合成产品更大。所以,发酵产品的杂质谱比合成产品更为复杂和难以预料。  为此,发酵产品以及由此得到的半合成物质并未包含在ICH Q3和VICH 10/11指导原则中,这些指导原则制订了化学合成活性物质中有关物质的鉴定、报告和控制限度。指导原则中对限度的定义是,如果超出了该限度,该杂质即应该被鉴定、报告或控制,该限度同样适用于欧洲药典总论“药用物质”。发酵产品及其半合成衍生物不在该总论范围内。  在没有其他指导原则的情况下,这些产品中的有关物质曾经根据一对一(case-by-case)的方式进行评估,这导致了相同抗生素或同类抗生素中的不同化合物(如头孢菌素)可能存在不同的杂质限度。因此,在批准新抗生素时能有连贯一致的措施来制定杂质限度是十分必要的。  所以需要基于常规操作和经验的基础制定指导原则,为规范含发酵工艺抗生素的杂质限度提供建议。该指导原则中对此都有所提及。  即便如此,如有必要,根据原料药/制剂的使用和暴露情况,在某些情况下更高的限度要求是合理和可行的。  范围  本文件的规范对象为申请上市许可,为发酵所得或发酵后半合成所得的抗生素(即抗细菌物质)中的有关物质制定标准。未来可能将把范围扩大到其他抗生素(如抗真菌物质)。文件为活性物质和药物制剂中的有关物质的范围和标准提供指导。该指导原则不适用于用于临床试验的研究性药物制剂中的新活性物质。本指导原则中提供了有关物质的报告,鉴定和控制限度。对于由几种密切相关的化合物混合组成的抗生素活性物质,这些基本要求可能很难适用。提供了常规原则,就如何制定具体限度、标准以及如何确定杂质谱限度进行了规定。此原则中的限度适于一系列基本要求,可根据特定物质或产品的不同情况进行调整。如有必要,可以引入更多的要求,例如安全性原因。  本指导原则不包括发酵工艺中产生的残渣,如来自微生物发生器、培养基、基板和产物母体的残渣。该部分内容包含在欧洲药典总论“发酵产品”中。(该论著适用于发酵生产的物质,不适用于半合成物质)。  本指导原则适用于上市许可新申请和新厂商变更。本指导原则不具有追溯效力的应用,但将作为建立最佳实践以及修正相关欧洲药典的激励原则。对于新申请者,应该将本指导原则的应用与任何现有欧洲药典活性物质的内容相结合。  法律依据  本指导原则必须与如下内容相结合:介绍、通则(4)以及作为指导原则2001/82和2001/83增补的附录I第1部分。  基本要求

  • 检测海草和海藻中存在藻红蛋白

    蓝、红和紫色色素沉淀总是发生在一些陆生植物,如:凤梨科植物、食虫植物和浆果类植物上。同样,一些海草也含有色素:齿叶海神草中的红褐色色素和喜盐草属中的淡紫色。Abal等人也报告了在摩顿湾(Moreton Bay)的摩羯大叶藻(Zostera capricorni)和卵叶盐藻中发现了类似花青素的成份。

  • 组织卤素测试的草根比对

    看到有很多人要求组织卤素测试的草根比对,不知道大家有没有愿意合作的?我这可以帮你们做样品,但是由于我们没有IC,所以需要有人帮忙验证一下。然后发给大家做比对,当然样品是免费提供的,只不过是要到付快递费。

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