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红放线菌素

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  • 【分享】实验室一些常用储存液的制备方法

    1.30%丙烯酰胺溶液  【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。  【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。2.40%丙烯酰胺  【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。  【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。3.放线菌素D溶液  【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。  【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。  药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。

  • 核酸、蛋白技术常用贮存液的配制

    1.30%丙烯酰胺溶液 【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。3.放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃5.10mol/L乙酸酰溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。6.10%过硫酸铵溶液【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。7.BCIP溶液【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃8.2×BES缓冲盐溶液【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。

  • 实验室常用技术参数——常用贮存液的配制

    常用贮存液的配制  1.30%丙烯酰胺溶液  【配制方法】  将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。  【注意】  丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。  一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。  在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。  2.40%丙烯酰胺  【配制方法】  把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。  【注意】  见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。  3.放线菌素D溶液  【配制方法】  把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。  【注意】  放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。  药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。  4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液  【配制方法】  在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃  5.10mol/L乙酸酰溶液  【配制方法】  把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。  6.10%过硫酸铵溶液  【配制方法】  把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。  7.BCIP溶液  【配制方法】  把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃  8.2×BES缓冲盐溶液  【配制方法】  用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。

  • 太实用了!常用溶液配制方法~

    1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。3.放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃5.10mol/L乙酸酰溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。6.10%过硫酸铵溶液【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。7.BCIP溶液【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃8.2×BES缓冲盐溶液【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。9.1mol/L CaCl2溶液【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃。【注意】制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷至0℃。10.2.5mol/L CaCl2溶液【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃。13.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节 溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用。【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。14.溴化乙锭(1

  • 【资料】【转帖】抗生素(Antibiotics)及分类

    抗生素(Antibiotics)及分类指由细菌、霉菌或其它微生物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类物质。自1940年以来,青霉素应用于临床,现抗生素的种类已达几千种。在临床上常用的亦有几百种。其主要是从微生物的培养液中提取的或者用合成、半合成方法制造。其分类有以下几种:   (一)β-内酰胺类青霉素类和头孢菌素类的分子结构中含有β-内酰胺环。近年来又有较大发展,如硫酶素类(thienamycins)、单内酰环类(monobactams),β-内酰酶抑制剂(β-lactamadeinhibitors)、甲氧青霉素类(methoxypeniciuins)等。   (二)氨基糖甙类 包括链霉素、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、核糖霉素、小诺霉素、阿斯霉素等。   (三)四环素类 包括四环素、土霉素、金霉素及强力霉素等。   (四)氯霉素类 包括氯霉素、甲砜霉素等。   (五)大环内脂类 临床常用的有红霉素、白霉素、无味红霉素、乙酰螺旋霉素、麦迪霉素、交沙霉素等。   (六)作用于G+细菌的其它抗生素,如林可霉素、氯林可霉素、万古霉素、杆菌肽等。   (七)作用于G菌的其它抗生素,如多粘菌素、磷霉素、卷霉素、环丝氨酸、利福平等。   (八)抗真菌抗生素 如灰黄霉素。   (九)抗肿瘤抗生素 如丝裂霉素、放线菌素D、博莱霉素、阿霉素等。   (十)具有免疫抑制作用的抗生素如环孢霉素。

  • 【分享】实验室常用贮存液的配制参数

    1.30%丙烯酰胺溶液  【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。    【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。    2.40%丙烯酰胺  【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。    【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。    3.放线菌素D溶液  【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。    【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。  药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。    4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液  【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃    5.10mol/L乙酸酰溶液  【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。    6.10%过硫酸铵溶液  【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。    7.BCIP溶液  【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃    8.2×BES缓冲盐溶液  【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES[N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。    9.1mol/L CaCl2溶液  【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃。    【注意】制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷至0℃。    10.2.5mol/L CaCl2溶液  【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。    11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液  【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。    【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。    12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液  【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]吸取0.05mol/l Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃。    13.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液  【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节 溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用。    【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。    14.溴化乙锭(10mg/ml溶液)  【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温。    【注意】小心:溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩。    15.2×HEPES缓冲盐溶液  【配制方法】用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4?2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节 pH值至7.05,再用蒸馏水定容至100ml。用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃。    16.IPTG溶液  【配制方法】IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。    17.1mol/L乙酸镁溶液  【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌。    18.1mol/L MgCl2溶液  【配制方法】在800ml水中溶解203.4g MgCl2?6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用。    【注意】MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放。    19.β-巯基乙醇(BME)溶液  【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃。    【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。    20.NBT溶液  【配制方法】把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃。

  • 有木有需要试剂的啊~~~~

    我们长期专注于FERMENTEK公司是全球排名前100名的以色列著名生物科技公司,长期专著于提供真菌毒素/生物毒素/神经生物学和细胞信号传导和医药中间体产品。主要有:毒素/离子通道调节剂//神经营养因子、细胞内Ca2+及磷酸化抑制剂等高纯度信号转导研究用试剂Thapsigargin 肌浆网钙泵抑制剂(TG) Leptomycin B 细霉素BBafilomycin A1 巴佛洛霉素A1 Bafilomycin B1 巴佛洛霉素B1Geldanamycin 苯醌安莎霉索(GDM) Ionomycin, Ca salt 钙离子载体Ionomycin,free acid钙离子载体 A23187, 4-Bromo 钙离子载体 A23187, Mixed Ca/Mg salt A23187 (free acid)   Paclitaxel (taxol) 紫杉醇 Docetaxel(toxotere) 多烯紫衫醇 Equol 雌马酚Thapsigargin肌浆网钙泵抑制剂(TG) Staurosporine星孢菌素Bisindolylmaleimides酪氨酸磷酸化-抑制剂 Phorbol Esters佛波醇酯4α-Phorbol  Phorbol 12,13-Dibutyrate 蛋白激酶 c的激活剂咐噼醇基酯4α-Phorbol 12,13-Dibutyrate  4α-Phorbol 12,13-Didecanoate  Phorbol 12-Myristate 13-Acetate  4α-Phorbol 12-Myristate 13-Acetate  Tyrphostins Calyculin A 花萼海绵诱癌素CA细胞凋亡相关试剂:Brefeldin A 布雷菲尔得菌素 Hypericin金丝桃素Thapsigargin肌浆网钙泵抑制剂(胡萝卜类素) Cerulenin浅蓝菌素 7Amino-Actinomycin D 7氨基放线菌素 Valinomycin缬氨霉素 Parthenolide 小白菊内酯Fumonisin B2 伏马毒素B2 Leptomycin B 细霉素BActinomycin D (dactomycin) 放线菌素D/IV Cyclopiazonic Acid 环丙阿尼酸Ionomycin 钙离子载体 K252A特异性酪氨酸激酶抑制剂 Cyclosporin A环胞霉素A细胞松弛素类试剂:Cytochalasin A 细胞松弛素A Cytochalasin B 细胞松弛素BCytochalasin C 细胞松弛素C Cytochalasin D 细胞松弛素DCytochalasin E 细胞松弛素E各类抑制剂7AAD(7-Amino-Actinomycin D) 7氨基放线菌素17AAG(17-(Allylamino)-18-demethoxy- geldanamycin) 17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素17DMAG(17-dimethylaminoethylamino-18-demethoxy-geldanamycin) Hsp90抑制剂 Cyclopamine环巴胺 A23187, 4-Bromo 钙离子载体A23187, Mixed Calcium / Magnesium salt  A23187 (free acid)  Actinomycin D (Dactinomycin, Dactomycin) 放线菌素D/IVacivicin 细胞毒素/γ-GTP抑制剂 Apicidin 组蛋白脱乙酰酶抑制剂Radicicol Hsp90特异性之阻断剂 Thapsigargin(TG) 肌浆网钙泵抑制剂Thiolutin 硫藤黄素 Triacsin C 脂酰CoA合成抑制剂 Trichostatin A 曲古菌素ATunicamycin N-糖基化抑制剂 Wortmannin(WT) 磷脂酰肌醇4-激酶的特异性抑制剂Bisindolylmaleimide I 蛋白激酶C-PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I,Hydrochloride 蛋白激酶C-PKC抑制剂盐酸盐Bisindolylmaleimide VIII,Acetate salt 酪氨酸磷酸化-抑制剂Bisindolylmaleimide IX,Methanesulfonate salt 酪氨酸磷酸化-抑制剂Bisindolylmaleimide X,Hydrochloride salt 酪氨酸磷酸化-抑制剂Bisindolylmaleimide XI,Hydrochloride salt 酪氨酸磷酸化-抑制剂Tyrphostin AG 1478 酪氨酸磷酸化抑制剂

  • 【抗生素与抗菌药、各类抗菌药物简介】

    抗生素是否等于抗菌药?是抗生素包含抗菌药,还是抗菌药包含抗生素?许多行业内人士也说不清楚,那么,到底二者是怎么回事呢?  抗生素和抗菌药都是指一类抑制或杀灭微生物或细菌的药物,在日常生活和临床使用中,这两个名词常被混用,但人严格的专业角度讲,这两个名词是有明显区别的。  抗生素(an-tibiotics)原意是指这样的一种化学物质,它由某种有机体(一般来说是某种微生物)所产生,,在稀释状态下,对别种微生物有抑制或杀灭作用。抗生素依据它们的作用对象以及功能的不同,可分为抗细菌作用、抗病毒作用、抗真菌作用等。比如由青霉菌属所产生的青霉素,以及头孢菌素、链霉素等是抗细菌的抗生素;治疗单纯性疱疹的阿糖腺苷是抗病毒的抗生素药;两性霉素B既有抗原生动物感染的抗生素。  抗菌药(antibacte-rials)是指一类对细菌有抑制或杀灭作用的药物,除部分抗生素外,还包括合成的抗菌素,比如磺胺类、喹诺酮类等。青霉素、链霉素等抗细菌作用的抗生素也是抗菌药。  抗生素和抗菌药都是化疗药品,同属于抗微生物类药(an-timicrobial drugs)或抗感染药(anti-infective drugs)。  抗生素是抗菌药不太恰当的旧称。  虽是如此,国内外都有人认为,如此将抗生素和抗菌药进行严格区分已无多大意义,因为原来来源于微生物的抗生素现在大都来源于人工合成或半合成,因此主张凡是抑制细菌生长繁殖或杀灭细菌的药物都可称之为抗生素或抗菌药,比如不列颠百科辞典就把喹诺酮类列为抗生素(antibiotics)。但早期抗菌药磺胺类一般按习惯仍称为抗菌药,而不称抗生素。  也有人主张,只要母体结构与自然抗生素相近,不论天然、合成还是半合成抗微生物药,都可称为抗生素,否则为非抗生素。 “抗菌药(antibacte-rials)是指一类对细菌有抑制或杀灭作用的药物,除部分抗生素外,还包括合成的抗菌素,比如磺胺类、喹诺酮类等。青霉素、链霉素等抗细菌作用的抗生素也是抗菌药。”请问:除了青霉素和链霉素,哪些抗生素也可以叫作抗菌药抗生素(Antibiotics)及分类 指由细菌、霉菌或其它微生物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其它活性的一类物质。自1940年以来,青霉素应用于临床,现抗生素的种类已达几千种。在临床上常用的亦有几百种。其主要是从微生物的培养液中提取的或者用合成、半合成方法制造。其分类有以下几种: (一)β-内酰胺类青霉素类和头孢菌素类的分子结构中含有β-内酰胺环。近年来又有较大发展,如硫酶素类(thienamycins)、单内酰环类(monobactams),β-内酰酶抑制剂(β-lactamadeinhibitors)、甲氧青霉素类(methoxypeniciuins)等。 (二)氨基糖甙类 包括链霉素、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、核糖霉素、小诺霉素、阿斯霉素等。 (三)四环素类 包括四环素、土霉素、金霉素及强力霉素等。 (四)氯霉素类 包括氯霉素、甲砜霉素等。 (五)大环内脂类 临床常用的有红霉素、白霉素、无味红霉素、乙酰螺旋霉素、麦迪霉素、交沙霉素等。 (六)作用于G+细菌的其它抗生素,如林可霉素、氯林可霉素、万古霉素、杆菌肽等。 (七)作用于G菌的其它抗生素,如多粘菌素、磷霉素、卷霉素、环丝氨酸、利福平等。 (八)抗真菌抗生素 如灰黄霉素。 (九)抗肿瘤抗生素 如丝裂霉素、放线菌素D、博莱霉素、阿霉素等。 (十)具有免疫抑制作用的抗生素如环孢霉素。

  • 大家注意到了吗?:和屠呦呦同时获2015年诺贝尔生理学或医学奖的两名科学家分别发现了阿维菌素、伊维菌素

    2015年10月5日,瑞典皇家卡洛琳学院宣布,中国女药学家屠呦呦及另外两名科学家威廉·坎贝尔和大村智,因在寄生虫疾病治疗研究方面取得的成就获得2015年诺贝尔生理学或医学奖。屠呦呦和青蒿素一夜之间成为国内万众瞩目的焦点,而同时获奖的两名科学家所发现的阿维菌素、伊维菌素虽在国内所受的关注度小很多,但其贡献也不容小觑。阿维菌素,是目前全球用量最大、使用技术最成熟的生物农药,其市场前景被农药行业普遍看好。自诞生以来,阿维菌素就备受生产企业关注,不断更新生产工艺,开发新剂型,其原药和制剂产能正在以惊人的速度增长,我国也已成为全球最大的阿维菌素供应国。作为农药行业最成功的生物农药,阿维菌素(Avermectin)成名于防治寄生虫。它是一种大环内酯类化合物,早期主要是农用杀虫剂和兽用驱虫药。今天我们用于治疗线虫病的核心药物伊维菌素(Ivermectin),人兽两用,就是在它的基础上衍生而来。上世纪70年代中期,默沙东公司的研究人员与世界各地的研究机构合作,收集了大量的土壤样品,从中培养、筛选和寻找新型的抗微生物活性物质。他们收集到4万多个土壤样品,在其中一个样品的培养和筛选过程中,一类全新的抗寄生虫的化合物被发现了。通过对该培养液里的菌种的分离和纯化,默沙东的研究人员找到了这些化学物质,将它们命名为阿维菌素(Avermectin)(发现者即威廉·C·坎贝尔,他于1957—1990年在默沙东工作,他的获奖工业也都在默沙东的实验室完成)。这个唯一的土壤样品由日本东京的北里研究所提供,来自东京郊外的一家高尔夫球俱乐部,其发现者就是今年获得诺贝尔奖的大村智。阿维菌素是通过发酵放线菌后提取菌丝得到的混合物,有4大类主要结构,其中B1类的活性最好。在随后的深入研究中,研究人员把阿维菌素家族的一员,阿维菌素-B1(Avermectin-B1)的一个不饱和碳碳双键(C22=C23)通过氢化还原,做出了一个集中阿维菌素家族不同成员优点的新化合物,不但化学稳定性很好,而且生物利用度也有提高,它就是伊维菌素。   多年来只有默沙东制药拥有能产生艾维菌素的唯一菌种,最初的菌种经发酵后每立升培养液只能产生大约9微克阿维菌素,经过工艺部门的不断筛选和优化,新菌种发酵后阿维菌素的产量提高了5~6个数量级。直到1999年,意大利的一家实验室才又发现了第二个能产生阿维菌素的菌种,结束了默沙东制药对艾维菌素的垄断!使得阿维菌素和伊维菌素的生产更容易。其实,寄生虫病在欧美发达国家人群里已经很少见了,但在欧美的畜牧业和宠物业,每年因为牲畜得寄生虫病而造成的商业损失不下40亿美元。兽用的伊维菌素上市之后,很快成为家畜和宠物抗寄生虫病的理想用药,年销售额接近10亿美元。自1991年害极灭(Abamectin)进入我国农药市场后,阿维菌素农药在我国的害虫防治体系中开始占据较为重要的地位。最初阿维菌素生产的问题是收率太低,且杂质太多。最早的时候,阿维菌素中B1含量≥92%,且主要有效成分B1a比例只要占到其中的80%就符合国标。经过中国企业不断的努力,国产阿维菌素的质量得到明显提高。现在,阿维菌素产品的B1含量基本达到95%以上,B1a含量一般都在97%。高质量原药合成出来的伊维菌素副作用更小,疗效更好。按照业内估计,中国的阿维菌素产能已经占到全世界的80%以上,产量也接近全球供应量的70%。据统计,2015年1~7月,我国生产阿维菌素约2400吨,销售约2300吨,行业有100多吨库存。受部分违规生产企业无证非法生产阿维菌素影响,近期阿维菌素价格快速跌入低谷,当前国内大型生产企业主流报价在每吨66万元左右,预计受冬季淡储、气温降低、企业检修、国际采购商开始询价等因素影响,后期阿维菌素原药价格会有所上涨。截至2015年10月12日,国内阿维菌素制剂登记数为985个,其中单剂447个,复配制剂538个。从登记剂型来看,高含量、环保剂型登记数量增加,复配制剂登记数量超过单剂数量。这可以看出,农药企业为了延续阿维菌素产品的生命周期,在使用环节做出了巨大努力。

  • 【转帖】工业微生物产生菌的分离筛选(四)

    各种微生物对营养要求和培养条件是不同的,在分离筛选时若在这两个方面加以调节控制,就能获得更好的分离效果。1. 培养基的营养成分各种微生物对碳源、氮源要求各异,有的对营养还有特殊的要求,事先了解被分离微生物的营养要求,从而设计一个合理快速的分离培养基,能够收到事半功倍的效果。放线菌是生产抗生素和酶制剂的重要来源。在选择分离放线菌时,通常采用改良的HV琼脂培养基、土豆-胡萝卜水汁液培养基和淀粉琼脂培养基能取得较好的效果。但不同菌种对营养要求差别很大,如奴卡氏菌在有氧条件下用普通培养基即可分离到,而以色列放线菌则在有CO2存在且有适宜培养基的情况下才能正常生长繁殖。筛选水解酶产生菌时,通常利用以底物为惟一碳、氮源的平板进行分离,如以淀粉为碳源的培养基可鉴定菌落能否产生淀粉酶;一种含纤维素粉为碳源的分离培养基,可以鉴别纤维素酶产生菌;用含有酪蛋白为有机氮源的平板培养基,可以鉴别蛋白酶的产生菌。纯种分离时,把以上琼脂平板置于适宜的温度培养一定的时间,如具有产生水解酶能力的菌株,便在菌落四周形成水解圈或呈色圈,根据圈的大小可初步判断酶活力强弱。测定水解圈直径与菌落直径之比,把比例大的菌落移入斜面保藏,供进一步筛选。2. 培养基的pH细菌、放线菌的生长繁殖对pH一般要求偏碱,霉菌和酵母菌要求偏酸。因此,分离培养基的pH应该调节到被分离微生物要求范围。这不仅有利于自身生长,也可排除一部分不需要的菌类。例如,分离柠檬酸产生菌的黑曲霉,就是利用调节培养基的酸碱度获得成功的。其分离方法是:取红芋粉醪20%、柠檬酸10%~20%配成培养液,调节pH2.0~2.5,以一定量的培养基和土样均匀混合,用毛细吸管点种在平皿内事先覆盖的无菌滤纸上(2~3层),于30℃培养,这样可以分离到产生柠檬酸的黑曲霉。分离碱性蛋白酶和碱性脂肪酶产生菌时,可以把培养基调到pH9~11,在此范围内不宜生长的微生物被抑制,这对分离本身起到浓缩作用。大多数水解酶的生长最适pH基本相近,而酶的作用pH未必与产酶pH相同。培养基的pH要结合营养成分和培养条件来考虑。因为微生物在生长繁殖过程中,由于代谢作用会产生酸性或碱性产物,pH发生变化,微生物生长受到抑制。一般培养基中碳氮比(C/N)高者,培养后倾向于酸性,反之则倾向于碱性。无机盐的性质也会影响pH变化,(NH4)2SO4是生理酸性无机氮源,其中NH4+被菌体利用,留下SO42-,培养液变成酸性。而NaNO3是生理碱性氮源,其中NO3-被菌体分解利用后,剩余Na+,使培养液变成碱性。如发酵过程缺氧,则代谢向有机酸合成方向进行,pH下降。为了维持培养基的PH,一般要加磷酸盐,如K2HPO4、KH2PO4,使培养基具有一定的缓冲能力。如果培养液中的酸碱变化很大,磷酸盐的缓冲容量不足以调节pH变化,则可适当加入碳酸钙,以不断中和菌体代谢过程中产生的酸类,使培养基的pH能保持在恒定的范围内。此外,在分离霉菌时,加几滴乳酸不仅可以维持一定酸碱度,而且可以抑制细菌的生长。3. 排除不需要的菌类采取调节pH的方法来抑制非目的微生物的生长,虽然能起到一定的作用,但并不是对所有的菌类都有效。有些细菌和放线菌同样可以在酸性环境下生长,而个别的霉菌,也同样可以在中性或偏碱的培养基中生长。为了更有效地抑制非目的微生物的生长,要加入一些专一性的抑制剂。(1)分离细菌时,在培养基中加入浓度为50U/ml制霉菌素,可以抑制霉菌和酵母菌的生长。(2)分离放线菌时,在样品中加入0.05%十二烷基磺酸钠(SDS)不仅可以抑制细菌的生长,还能激活放线菌孢子的萌发。加入氟哌酸(5mg/L)+ 制霉菌素(50mg/L)+ 青霉素(0.8mg/L)也可以有效地抑制细菌和真菌,而不影响放线菌的生长。(3)分离霉菌和酵母菌时,在培养基中加入青霉素、链霉素和四环素各30U/ml,可以抑制细菌和放线菌生长。(4)分离根霉和毛霉时,由于这些微生物的菌丝易蔓延成片,难以得到纯化的菌落,通常在培养基中添加0.1%去氧胆酸钠或山梨醇防止菌丝蔓延,使菌落长得小而紧密。一般用于分离单一目的微生物的培养基中均含有抑制其他微生物的抑制剂,这些专用的抑制剂在小型实验室配制较麻烦,现已有成品供应,只要直接加入基础培养基即可。如氨苄西林,主要用于分离亲水气单孢菌。4. 控制培养温度控制培养温度,也是一种获得目的微生物的有效措施。各类微生物生长温度不同,从大范围来看,可分三大类:一类是高温微生物,最适温度在50~60℃。如果要分离这类菌可将分离培养基置于50~60℃温度下培养,能抑制一些嗜冷、中性微生物生长,可以有效地分离到高温菌类。第二类是中温微生物,它们的最适生长温度是20~40℃,超过50℃,就停止生长。这类微生物最为常见,、数量都占首位。工业发酵微生物绝大多数都属于此类。其中不同类群微生物对温度又有所差别,一般细菌、放线菌最适温度为25~37℃,霉菌和酵母最适温度为20~28℃。第三类为低温微生物,它们的最适温度为15℃或更低。当从样品中分离各种菌类时,分别置于自身最适温度下培养也可大体上抑制另一些微生物的生长。当分离某些特殊产物的微生物时,对温度的选择还需考虑某些内在的关系,如在筛选不饱和脂肪酸产生菌时,由于细胞膜中所含的不饱和脂肪酸含量越高,其凝固点越低,即细胞在较低温度下仍能表现出活力,因此在低于正常温度10℃下分离效果最好。

  • 【分享】分子生物学常用溶液配制

    [size=3][b][font=楷体_GB2312][/font][/b][/size][align=left]分子生物学常用溶液配制[/align][size=3][b][font=楷体_GB2312]一、分子生物学常用贮存液的配制[/font][/b][/size][size=3][b][font=Times New Roman]1[/font][font=楷体_GB2312].[/font][font=Times New Roman]30%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】将[/font][font=Times New Roman]29g[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺和[/font][font=Times New Roman]1g N[/font][font=楷体_GB2312],[/font][font=Times New Roman]N’-[/font][font=楷体_GB2312]亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为[/font][font=Times New Roman]60ml[/font][font=楷体_GB2312]的水中。加热至[/font][font=Times New Roman]37[/font][font=宋体]℃[/font][font=楷体_GB2312]溶解之,补加水至终体积为[/font][font=Times New Roman]100ml[/font][font=楷体_GB2312]。用滤器([/font][font=Times New Roman]0.45μm[/font][font=楷体_GB2312]孔径)过滤除菌,查证该溶液的[/font][font=Times New Roman]pH[/font][font=楷体_GB2312]值应不大于[/font][font=Times New Roman]7.0[/font][font=楷体_GB2312],置棕色瓶中保存于室温。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约[/font][font=Times New Roman]0.2[/font][font=楷体_GB2312]体积的单床混合树脂([/font][font=Times New Roman]MB-1Mallinckrodt[/font][font=楷体_GB2312]),搅拌过夜,然后用[/font][font=Times New Roman]Whatman 1[/font][font=楷体_GB2312]号滤纸过滤以纯化之。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]2[/font][font=楷体_GB2312].[/font][font=Times New Roman]40%[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】把[/font][font=Times New Roman]380g[/font][font=楷体_GB2312]丙烯酰胺([/font][font=Times New Roman]DNA[/font][font=楷体_GB2312]测序级)和[/font][font=Times New Roman]20g N[/font][font=楷体_GB2312],[/font][font=Times New Roman]N’-[/font][font=楷体_GB2312]亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为[/font][font=Times New 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New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312](分子量为[/font][font=Times New Roman]1255[/font][font=楷体_GB2312])纯品在水溶液中的摩尔消化系数为[/font][font=Times New Roman]21[/font][font=楷体_GB2312],[/font][font=Times New Roman]900[/font][font=楷体_GB2312],故而[/font][font=Times New Roman]1mg/ml[/font][font=楷体_GB2312]的放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]溶液在[/font][font=Times New Roman]440nm[/font][font=楷体_GB2312]处的吸光值为[/font][font=Times New Roman]0.182[/font][font=楷体_GB2312],放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于[/font][font=Times New Roman]-20[/font][font=宋体]℃[/font][font=楷体_GB2312]。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【注意】放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]是致畸剂和致癌剂[/font][font=Times New Roman],[/font][font=楷体_GB2312]配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作[/font][font=Times New Roman],[/font][font=楷体_GB2312]而不能在开放在实验桌面上进行[/font][font=Times New Roman],[/font][font=楷体_GB2312]谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。[/font][/size][size=3][font=楷体_GB2312]药厂提供的作治疗用途的放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在[/font][font=Times New Roman]440nm[/font][font=楷体_GB2312]波长处的光吸收确定放线菌素[/font][font=Times New Roman]D[/font][font=楷体_GB2312]的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。[/font][/size][size=3][b][font=Times New Roman]4[/font][font=楷体_GB2312].[/font][font=Times New Roman]0.1mol/L[/font][font=楷体_GB2312]腺苷三磷酸([/font][font=Times New Roman]ATP[/font][font=楷体_GB2312])溶液[/font][/b][/size][size=3][font=楷体_GB2312]【配制方法】在[/font][font=Times New Roman]0.8ml[/font][font=楷体_GB2312]水中溶解[/font][font=Times New Roman]60mg ATP,[/font][font=楷体_GB2312]用[/font][font=Times New Roman]0.1mol/L NaOH[/font][font=楷体_GB2312]调至[/font][font=Times New Roman]pH[/font][font=楷体_GB2312]值至[/font][font=Times New Roman]7.0[/font][font=楷体_GB2312],用蒸馏水定容[/font][font=Times New Roman]1ml[/font][font=楷体_GB2312],分装成小份保存于[/font][font=Times New 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  • 常用酸、碱、盐溶液配制方法大全,太实用啦

    常用酸、碱、盐溶液配制方法大全,太实用啦

    几种常用溶液浓度的表示法(1)质量百分比浓度:用溶质的质量占全部溶液质量的百分比来表示的浓度。简称百分浓度。(2)体积百分比浓度:用溶质的质量占溶剂体积的百分比来表示的浓度。在工农业生产中常用这种浓度。(3)体积比浓度:液体试剂相互混和或液体试剂用水稀释时常用此法。例如,1∶3酒精溶液指的是1体积的酒精和3体积的蒸馏水混和而成的酒精水溶液,1∶3中的前一个数字指的是溶质的体积数,后一个数字指的是溶剂的体积数。(4)物质的量浓度:用1升溶液里含有溶质的量来表示的溶液浓度。目前习惯称摩尔浓度,用M表示。(5)当量浓度:用每升溶液里所含溶质的克当量数表示的浓度。通常用N表示。常用酸、碱、盐溶液的配制1.酸溶液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511061840_572639_1253919_3.jpg2.碱溶液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511061839_572638_1253919_3.jpg3.盐溶液http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/11/201511061840_572640_1253919_3.jpg常用溶液配制方法1.30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。3.放线菌素D溶液【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存液,用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182,放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中,保存于-20℃。【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂,配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作,而不能在开放在实验桌面上进行,谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度,这类制品便可用于抑制自身引导作用。4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0,用蒸馏水定容1ml,分装成小份保存于-70℃5.10mol/L乙酸酰溶液【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后过滤除菌。6.10%过硫酸铵溶液【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中,该溶液可在4℃保存数周。7.BCIP溶液【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃8.2×BES缓冲盐溶液【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室温下用HCl调节 该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成小份,保存于-20℃。9.1mol/L CaCl2溶液【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml小份贮存于-20℃。【注意】制备感受态细胞时,取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml,用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,然后骤冷至0℃。10.2.5mol/L CaCl2溶液【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl2?6H2O,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT,过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度,然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分装成小份贮存于-70℃。13.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O),在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节 溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L,分装后高压灭菌备用。【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。14.溴化乙锭(10mg/ml溶液)  【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于室温。  【注意】小心:溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩。15.2×HEPES缓冲盐溶液  【配制方法】用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4?2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES,用0.5mol/l NaOH调节 pH值至7.05,再用蒸馏水定容至100ml。用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃。16.IPTG溶液  【配制方法】IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后,用蒸馏水定容至10ml,用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。17.1mol/L乙酸镁溶液  【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁,用水定容至1L过滤除菌。18.1mol/L MgCl2溶液  【配制方法】在800ml水中溶解203.4g MgCl2?6H2O,用水定容至1L,分装成小份并高压灭菌备用。  【注意】MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放。19.β-巯基乙醇(BME)溶液  【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液,应装在棕色瓶中保存于4℃。  【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。20.NBT溶液  【配制方法】把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃。21.酚/氯仿溶液  【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6)液层,保存于4℃。  【注

  • 伊维菌素会转化成阿维菌素吗?

    各位大侠好,小弟最近在做阿维菌素荧光测定法的方法开发。用同一个样品进多次样,发现后面的数据伊维菌素的峰编低而阿维菌素变高了,两个含量的和一样,是不是因为伊维菌素变成了阿维菌素?有什么方法可以避免吗?

  • 伊维菌素会转化成阿维菌素吗?

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  • 【求助】养猪业中阿维菌素和伊维菌素的实际用药情况?

    各位版友们:大家好!阿维菌素是我的毕业课题,我想搜集一点实际的数据作为科学的理论支持以保证论文的严谨性,还请大家帮忙,谢了。在养猪业中,在个体养殖、企业养殖中,无论规模大小,常用什么药来防治猪寄生虫病? 是阿维菌素和伊维菌素吗? 有具体的数据最好。我国有没有做过这方面的用药实际情况调查呢?如果有,可以给我上传一份吗? 谢谢~~~~~

  • 阿维菌素

    液相色谱测定阿维菌素加标 怎么做回收率能达要求

  • 微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数

    一、实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使其成单个细胞存在,否则一个菌落就不只是代表一个细胞,再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。此记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些产品检定,如根瘤菌剂等产品检定,生物制品检验,土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。自然条件下,微生物常以群落状态存在,这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物,必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养,这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。在自然界中,土壤是微生物生活的良好环境,其中生活的微生物数量和种类都是极其丰富的,因此土壤是人类开发利用微生物资源的重要基地。土壤中的微生物数量、种类与土壤肥力有关,肥沃的土壤中多,贫瘠土壤中少。其生理类群则与土壤的其它理化性质,如通气、pH有关,例如在通气良好的菜园土中,好气性微生物占有绝对优势。本实验以菜园土为材料分离土壤中的好气性细菌,并进行数量测定。分离微生物时,一般是根据该微生物对营养、pH、氧气等要求的不同,供给它们适宜的生活条件,或加入某种抑制剂造成只利于该菌种生长,不利于其它菌种生长的环境,从而淘汰不需要的菌种。分离微生物常用的方法有稀释平板分离法和划线分离法,根据不同的材料,可以采用不同方法,其最终目的是要在培养基上出现欲分离微生物的单个菌落,必要时再对单个菌落进一步分离纯化。在用稀释平板分离微生物时,还可以同时测定待分离的微生物的数量。放线菌与细菌同属原核微生物,是重要的抗生素产生菌,在土壤中的数量仅次于细菌,尤其是在有机质丰富、透气性好的中性到微碱性土壤中的数量较多。本实验采用高氏一号琼脂培养基分离和计数菜园土中的放线菌。真菌在土壤中的数量次于细菌和放线菌,主要在有机质丰富、透气性好的偏酸性土壤中较多。分离土壤中的真菌并不难,但由于其菌落大,容易扩展,计数准确性较低。本实验采用加有氯霉素或庆大霉素和孟加拉红的马丁氏培养基分离及计数菜园土中的真菌。按一般资料介绍为链霉素,但此种抗生素要先配成一定浓度的溶液,且应于倒平板前才加入培养基中。在此培养基上,放线菌和细菌被氯霉素或庆大霉素和孟加拉红所抑制,但大多数真菌能够生存,且其菌落受孟加拉红的抑制而较小,从而避免了某些真菌的扩散蔓延而带来的数量上的误差。

  • 阿维菌素的测定时标准品的问题

    阿维菌素测定时,标准品要求阿维菌素B1a大于87%,那在配制储备液时,需不需要折算纯度?还有的标准只要求阿维菌素纯度大于99%,没有折算。但疑惑的是阿维菌素的残留物是阿维菌素B1a,而测定结果是阿维菌素。应该不是同一物质吧。

  • 【求购】阿维菌素系列农药简介

    [em0802]Avermectin是一种新型抗生素类,具有结构新颖、农畜两用的特点。随着人们生活水平的提高以及对绿色食品的呼唤,生物农药在当前农药市场中倍受青睐,权威人士预测21世纪将是生物农药的世纪。据报道欧洲生物农药将从1997年1亿美元的销售额上升到2004年1.69亿美元。阿维菌素是当前生物农药市场中最受欢迎和具有激烈竞争性的新产品。。自从1991年害极灭(阿维菌素)进入我国农药市场以后,阿维菌素农药在我国的害虫防治体系中占有较重要地位。目前市售的阿维菌素系列农药、兽药有阿维菌素、伊维菌素、甲胺基阿维菌素苯甲酸盐和乙酰氨基阿维菌素。

  • 【讨论】阿维菌素类检测

    大家好,我们在用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS检测阿维菌素类农药时,可能离子对选择的不是很好,有的灵敏度不是很高,大家能不能说说以下几种你们选的离子对:伊维菌素;依普菌素;多拉菌素;阿维菌素;甲氨基阿维菌素苯甲酸盐。 谢谢了!

  • 【求助】阿维菌素的检测

    各位大侠:我们做阿维菌素含量总是超百,不知是何原因?流动相为:甲醇+水+乙腈=45+17+38、波长245纳米、流速1.5mL/min、称量:0.05克到100mL瓶中甲醇定容。我们怀疑是阿维菌素标样分解了,就重新购买了标准品,可做样还是不行.难道新购的标准品也分解了?还是有其它方面的原因?

  • 急急急!做过阿维菌素乳油的进来!

    本人最近在做阿维菌素·哒螨灵乳油,哒螨灵分析没有问题,主要是阿维菌素分析困难。之前做过10%的阿维菌素乳油,用的是国标的方法,谱图效果很好,分析结果没有问题。但阿维菌素·哒螨灵复配剂中,阿维菌素的含量是0.2%,还是用国标的分析方法,但杂峰很多,分离效果不好,而且阿维菌素是出两个峰,其中一个峰很小,基本上看不出来。所以想请教各位,有谁做过这个农药的分析,有没有什么好的方法介绍下,不胜感激!(曾想过可能是阿维菌素是0.2%的含量太低,就试过在样品中加入标准品的方法,但分析出的结果跟理论值差好多)

  • 基因技术可实现链黑菌素类抗生素高效合成

    上海交大一项研究有望降低抗肿瘤良药成本2013年02月26日 来源: 中国科技网 作者: 王春 沈海燕 中国科技网 讯 (沈海燕 记者王春)上海交通大学微生物代谢国家重点实验室林双君研究小组通过对链黑菌素生物合成基因簇进行基因解析,阐明了链黑菌素复杂的生物合成途径。由此得到的链黑菌素类似物不仅抗癌活性高很多,其毒性上也比原始链黑菌素降低了约5倍。该研究成果近日发表在国际权威学术期刊《美国化学会会志》上。 链黑菌素是由一株绒毛链霉菌所产生的抗肿瘤抗生素,具广谱抗肿瘤活性。但在上世纪七八十年代进行二期临床实验时,因其毒性过强而被迫终止。 基因组测序技术为生物合成机制的研究提供了更多信息。林双君研究小组首先克隆了链黑菌素潜在的抗生素基因簇,定位出链黑菌素的生物合成的48个独立基因编码,再通过微生物遗传学、化学及生物化学技术和手段,获得了其中17个基因的突变菌株,从中分离鉴定了12个与链黑菌素生物合成相关化合物的化学结构,提出了链黑菌素生物合成途径的模型。 在这一过程中,还揭示了多个新颖或关键的酶催化反应的分子生物学机制。该项研究为抗生素药物新颖酶催化反应基因的挖掘,并利用合成生物学等前沿生物技术创造新的结构衍生物奠定了基础。林双君称,这是首次在基因水平实现链黑菌素的生物合成途径的解析。 课题组通过基因工程技术获得的一个链黑菌素类似物,在抗癌活性上比目前临床使用的抗癌药物高很多。这个类似物在临床应用方面,对治疗淋巴瘤、白血病、鼻咽癌等疾病将有更大的优势。林双君表示,只要将产量提高到可规模化生产,就可将链黑菌素或类似物转化为一个新型的抗癌药物,不仅有望降低药价,而且减少化疗时产生的毒副作用。 《科技日报》2013-2-26 一版

  • 粘菌素酶联检测试剂盒

    1.概述REAGEN™粘菌素类药物的原理是竞争ELISA方法,用于检测肉类(牛、猪和鸡肉)和鸡蛋中粘菌素类药物的残留量。这个试剂盒有以下特点:Ø 高回收率75-115%.,高效益提取法Ø 高灵敏度 (0.5 ng/g or ppb)Ø 高重复性。Ø 快速检测,酶联检测过程只需要不到2小时。2.试剂盒原理REAGEN™粘菌素类药物试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被偶联抗原,样本中残留的粘菌素类药物与微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗粘菌素类药物的抗体,加入酶标二抗后,用TMB底物显色,样本吸光值与残留物粘菌素类药物的含量成负相关。

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