黑曲霉二糖

本实验主要利用黑曲霉具有多种活力较强酶系的特点，利用淀粉类物质为原料，获得制备淀粉水解糖所需的糖化酶。

葡萄糖酸 gluconic acid，葡萄糖的1位的醛基被羧基置换从而形成的醛糖糖酸（aldonic acid）。D型是通过霉菌黑曲霉（Asp-ergilus niger等）和木醋杆菌、葡糖杆菌（Acetobacterxylinum，Gluconobacter等）的葡糖酸发酵大量产生的。从异青霉（Penicillium notatum）得到的葡糖氧化酶能将β -D-葡糖氧化成δ -葡糖酸内酯。葡萄糖酸又称右旋葡萄糖酸，葡萄糖在弱氧化剂或酶的作用下，分子中的醛基被氧化为羧基而成的一种糖酸。其6-磷酸酯是葡萄糖在生物体内氧化分解(磷酸戊糖途径)的中间物。与钙、锌等金属离子成可溶性盐，作营养剂和药物。

曲霉菌在自然界广泛分布，可感染动物，也可寄生于饲料、粮食中引起动物中毒。常见有烟曲霉、黄曲霉、寄生曲霉、棕曲霉、杂色曲霉、构巢曲霉、白曲霉以及黑曲霉等，其中以烟曲霉感染致病为主，同时也可产生毒素，黄曲霉、寄生曲霉、棕曲霉、杂色曲霉等主要均以所产毒素而致病。

本文主要介绍的是如何把根霉，毛霉，黑曲霉，青霉进行斜面转接培养操作，实验流程和用到的器材，以及后面如何对照结果，如果让霉菌产生孢子都做了相应介绍

肉桂醛又称桂醛，化学名称为笨丙烯醛，是食品工业中常用的香料，同时还有较强的抑菌作用，文献报道肉桂醛在质量分数为0.03%时，对黄曲霉、黑曲霉、橘青霉、串珠镰刀菌、交链孢霉、白地霉、酵母等均有强烈的抑制效果，是一种较好的天然防腐保鲜剂。但肉桂醛易挥发，不能持久，影响其抗菌效果。

随着苹果生长期的延长以及苹果和苹果浓缩汁出口能力的提高，它们摄入污染产品的可能性也随之增加。棒曲霉素是一种真菌霉素，在苹果腐烂过程中产生，本文描述了一种采用安捷伦超高惰性色谱柱检测棒曲霉素的方法，该方法无需样品衍生化。该色谱分析方法可以分离5 - 羟甲级糠醛(HMF) —— 一种由苹果产品中的糖在过度加热时生成的产物。使用聚苯乙烯- 二乙烯苯SPE 柱执行固相萃取，然后在注入GC/MS 系统检测前用乙酸乙酯进行液/液萃取，完成样品制备。

黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 （aspergillus flavus）寄生曲霉 （a.parasiticus）产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。B1 、B2和G1、G2，就是经常经常出现在农产品中的黄曲霉毒素的代表，毒性最强的排行“B1”，B表示蓝色，因为它在紫外光的照射下会发出蓝色荧光。除了亲兄弟B2之外，它还有堂兄弟G1和G2，因为在紫外光下发射黄绿色荧光而得名。

方案一、液相色谱荧光检测法方法简介：黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用Welchrom® 免疫亲和柱净化，HPLC-FLD检测黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，此法适用于谷物、调味品、坚果、茶叶、咖啡、药材等基质。方案二：ELISA检测试剂盒法试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素抗原，样本中黄曲霉毒素和此抗原竞争黄曲霉毒素的抗体，酶标二抗催化TMB底物显色，样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中黄曲霉毒素的含量。

方案一、液相色谱荧光检测法方法简介：黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用Welchrom® 免疫亲和柱净化，HPLC-FLD检测黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，此法适用于谷物、调味品、坚果、茶叶、咖啡、药材等基质。方案二：ELISA检测试剂盒法试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素抗原，样本中黄曲霉毒素和此抗原竞争黄曲霉毒素的抗体，酶标二抗催化TMB底物显色，样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中黄曲霉毒素的含量。

本文描述了一种采用安捷伦超高惰性色谱柱检测棒曲霉素的方法，该方法无需样品衍生化。该色谱分析方法可以分离 5 - 羟甲级糠醛 （HMF） —— 一种由苹果产品中的糖在过度加热时生成的产物。使用聚苯乙烯 - 二乙烯苯 SPE 柱执行固相萃取，然后在注入 GC/MS 系统检测前用 乙酸乙酯进行液/液萃取，完成样品制备。将 Agilent 7890A GC 与配备有惰性 EI 350 ° C 无涂层离子源的 Agilent 5975C 质谱仪联用。Agilent J&W DB-35ms UI 色谱柱安 装在多模式进样口 （MMI） 上，采用冷-不分流模式以获取上佳样 品传输。棒

方案一、液相色谱荧光检测法方法简介：黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用Welchrom® 免疫亲和柱净化，HPLC-FLD检测黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，此法适用于谷物、调味品、坚果、茶叶、咖啡、药材等基质。方案二：ELISA检测试剂盒法试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素抗原，样本中黄曲霉毒素和此抗原竞争黄曲霉毒素的抗体，酶标二抗催化TMB底物显色，样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中黄曲霉毒素的含量。

污染食品的真菌毒素 (霉菌毒素) 中，虽有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇 / 雪腐镰刀菌烯醇、棒曲霉毒素等多种，但黄曲霉毒素为肝脏毒素，被称为最强的天然致癌物质。自然界中可产生黄曲霉毒素 B1、B2、G1、G2 等，其中 B1 的致癌性强。现已知黄曲霉毒素 B1 在生物体内经代谢可部分转化为黄曲霉毒素 M1。因此，牛食用被黄曲霉毒素 B1 污染的饲料后，其乳汁中可能含有黄曲霉毒素 M1。 在美国和中国，已将乳和乳制品中黄曲霉毒素 M1 的测定方法确立为国家标准。另一方面，日本也有将其列入官方分析方法的动向，日本的霉菌毒素测定方法评估委员会正在推动相关课题的研讨。 此次，我们参考中华人民共和国国家标准《GB 5413.37-2010 乳和乳制品中黄曲霉毒素 M1 的测定方法》的第二法 HPLC-荧光检测法，进行了黄曲霉毒素M1的测定。

使用三氟醋酸（TFA）对黄曲霉毒素进行衍生化处理后，使用荧光检测器进行分析，不进行衍生化处理而直接进行荧光检测。

方案一、液相色谱荧光检测法方法简介：黄曲霉毒素是由黄曲霉、寄生曲霉产生的一类高毒性代谢物，它们生长在土壤中并通过直接接触转移到天然产品中。自黄曲霉毒素被认定为是一种强致癌物质起，欧盟就规定了最大限量。本方法是采用Welchrom® 免疫亲和柱净化，HPLC-FLD检测黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2，此法适用于谷物、调味品、坚果、茶叶、咖啡、药材等基质。方案二：ELISA检测试剂盒法试验原理本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被黄曲霉毒素抗原，样本中黄曲霉毒素和此抗原竞争黄曲霉毒素的抗体，酶标二抗催化TMB底物显色，样本吸光值与其含有的黄曲霉毒素成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中黄曲霉毒素的含量。

摘 要： 用能脱除DBT的烟曲霉经再驯化后同时代谢多种复杂有机硫化合物,尤其是4,6-二甲基二苯并噻吩。烟曲霉对低含硫量的油品脱硫效果显著,48 h脱硫率98%以上 对0#柴油的循环脱硫效果显著,96 h脱硫率90.43%。脱硫烟曲霉环境耐受能力强,可直接应用于脱除石油及其产品中的有机硫。关键词：烟曲霉 硫化合物 油品

本文参考《GB5009.24-2016食品中黄曲霉毒素M族的测定》第二法，采用免疫亲和柱净化，高效液相色谱检测，建立了奶粉中黄曲霉毒素M1高灵敏度的前处理和分析方法，得到黄曲霉毒素M1的加标回收率在88%-95%之间，RSD值小于5%。

黄曲霉毒素(aflatoxin，简称为AF)是到目前为止所发现的毒性最大的真菌毒素，它们具有很强的致癌性，主要存在于谷物、坚果、棉籽以及一些和人类血液，动物饲料相关的产品中。黄曲霉毒素的的基本结构为二呋喃环和香豆素，B1 是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，目前已分离鉴定出12 种，其中M1 和M2 主要存在于牛奶中，B1 为毒性及致癌性最强的物质。近年来，国家制定了多个检测黄曲霉毒素的方法标准，并同时出台食品及饲料中黄曲霉毒素的限量要求。

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉（aspergillus flavus）寄生曲霉（a.parasiticus）产生的次生代谢产物，是目前粮油中毒性最大、波及面最广的霉菌毒素之一。B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物。即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。前者为基本毒性结构，后者与致癌有关。M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物，与致癌性有关。黄曲霉毒素的主要分子型式含B1、B2、G1、G2、M1、M2等。

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉（aspergillus flavus）寄生曲霉（a.parasiticus）产生的次生代谢产物，是目前粮油中毒性最大、波及面最广的霉菌毒素之一。B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物。即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。前者为基本毒性结构，后者与致癌有关。M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物，与致癌性有关。黄曲霉毒素的主要分子型式含B1、B2、G1、G2、M1、M2等。

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉（aspergillus flavus）寄生曲霉（a.parasiticus）产生的次生代谢产物，是目前粮油中毒性最大、波及面最广的霉菌毒素之一。B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物。即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。前者为基本毒性结构，后者与致癌有关。M1是黄曲霉毒素B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物，与致癌性有关。黄曲霉毒素的主要分子型式含B1、B2、G1、G2、M1、M2等。

杂色曲霉（Aspergillus versicolor）是一种常见的霉菌，广泛存在于自然界中。由于其具有丰富的代谢产物，如酶类、抗生素和其他生物活性物质，因此在生物技术、医药和农业等领域具有广泛的应用潜力。为了深入研究杂色曲霉的生长特性和代谢产物的产生，科研人员经常需要在实验室环境中进行大规模的培养。本文将介绍一种利用霉菌培养箱进行杂色曲霉培养的实验方法，旨在为相关领域的研究提供参考。

黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1简写为AFB1）是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种，对包括人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。 黄曲霉毒素B1存在于土壤，动植物各种坚果，特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般以热带和亚热带等南方高温、高湿地区受污染最为严重，食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。黄曲霉毒素耐热，280℃才可裂解，故一般烹调加工温度下难以破坏。国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。 本文参考《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》提供的粮谷中黄曲霉毒素B族检测的方法，使用LabTech SPE1000全自动固相萃取系统进行玉米中黄曲霉毒素B族的净化，并用液相荧光检测器进行检测，黄曲霉毒素B1和B2的回收率分别为81.1%~85.1%和88.5%~93.2%，RSD 分别为2.7%和2.2%。通过SPE1000全自动固相萃取系统建立的方法回收率及平行性良好，适合粮谷中黄曲霉毒素B族的检测。

黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1简写为AFB1）是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素）。黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种，对包括人和若干动物具有强烈的毒性，其毒性作用主要是对肝脏的损害。黄曲霉毒素B1存在于土壤，动植物各种坚果，特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般以热带和亚热带等南方高温、高湿地区受污染最为严重，食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。黄曲霉毒素耐热，280℃才可裂解，故一般烹调加工温度下难以破坏。国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。本文参考《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》提供的粮谷中黄曲霉毒素B族检测的方法，使用LabTech SPE1000全自动固相萃取系统进行玉米中黄曲霉毒素B族的净化，并用液相荧光检测器进行检测，黄曲霉毒素B1和B2的回收率分别为81.1%~85.1%和88.5%~93.2%，RSD 分别为2.7%和2.2%。通过SPE1000全自动固相萃取系统建立的方法回收率及平行性良好，适合粮谷中黄曲霉毒素B族的检测。

食品中赭曲霉毒素A的检测，有两个标准方法：GB5009.96-2016《食品中赭曲霉毒素检测》和SNT4675.10-2016《出口葡萄酒中赭曲霉毒素A的测定液相色谱-质谱/质谱法》。二种方法均需要使用免疫亲和柱或净化柱对样品进行纯化，再用仪器进行检测。青岛普瑞邦生物工程有限公司专门研发了针对咖啡和红酒复杂基质的专用免疫亲和柱。该产品原理是抗原抗体反应，赭曲霉毒素A抗体固定于柱内凝胶上，样品中的赭曲霉毒素A经过提取，过滤，稀释，然后将样品提取液缓慢的通过赭曲霉毒素A免疫亲和层析柱，在柱内赭曲霉毒素A与抗体结合，之后洗涤免疫亲和柱，除去未结合的其他物质。用乙酸甲醇洗脱赭曲霉毒素A，注入到分析仪器中进行检测。

药典中已经确定LC-MS/MS分析方法为黄曲霉毒素的仲裁检测方法。珀金埃尔默公司采用QSightLC-MS/MS液质联用系统，建立了药材及饮片中黄曲霉毒素残留分析的整体解决方案。

作为真菌毒素重要代表的黄曲霉毒素，是至今为止发现的毒性最大的真菌毒素，也是世界公认的 3 大强致癌物质之一，对肝脏具有很强的破坏性，甚至会导致人和动物的死亡。本文采用 HPMS-TQ 仪器，按照 2020 版中国药典 2351 通则黄曲霉毒素测定法第二法（液相色谱 - 串联质谱法），以薏苡仁为基质，建立了完整的黄曲霉毒素测定方案。该方法具有灵敏度满足要求，结果准确，重复性好等特点。

针对近日来国家质检总局公布了的蒙牛乳业（眉山）和福建长富纯牛奶抽查的产品被检出黄曲霉毒素M1超标的问题。蒙牛乳业对此向民众进行了致歉申明，反应了民族企业的责任心和对食品安全的重视。对于黄曲霉毒素M1的限量，在之前的相关食品卫生标准中有明确规定，其中：鲜乳及其乳制品（折算为鲜乳汁）不得超过0.5ug/kg 婴儿代乳食品不得检出黄曲霉毒素b1。（GB 2761-2005国家标准—食品中真菌毒素限量 GB 9676-2003国家标准—乳及乳制品中黄曲霉毒素M1限量！

随着毒奶粉、“结石娃娃”、牛奶安全等社会问题的出现，传统婴幼儿食品的安全问题受到全社会的质疑。在乳类制品食品安全问题甚嚣尘上的今天，缺乏关注的婴幼儿辅食类食品的安全性更令人堪忧。近期国家质检总局公布的婴幼儿米粉产品质量显示合格率仅为58.3%！而家长们所迷信的洋品牌的安全“金身”也已告破，近日雀巢等9家欧洲知名品牌的婴儿辅食食品也被发现存在重金属超标等严重危害婴幼儿健康的食品安全问题。婴幼儿时期是人生长发育最重要的时期，也是最脆弱的时期。婴幼儿食品的安全容不得半点马虎。从婴幼儿6个月开始，要逐渐给婴儿加一些除了母乳之外的食物，这些食物就是婴幼儿的辅助食品，简称婴幼儿辅食。辅食的材料大多是米，面为主，蔬果次之，如常见的婴幼儿营养蛋奶米麸、营养米粉等。在如今食品行业困扰于黄曲霉毒素超标的今天，这些产品也必须引起社会和企业的重点关注，企业和国家质检部门有必要加强对婴幼儿辅食中霉菌毒素的检测与监管，保障婴幼儿食品的安全。

黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液，动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在，因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光，G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2)，还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M，其中毒性最高的M的代谢物为4－羟基化的产物Bs.黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。其危害巨大，人类日常消费食品中如牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时，可导致肝癌甚至死亡。毒性是砒霜的100倍其实主要是指黄曲霉毒素比砒霜毒。

本文使用Essentia黄曲霉毒素分析系统，参考国标GB 23200.112-2018《GB 5009.22-2016 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定》柱后碘衍生法，对辣椒中黄曲霉毒素进行方法建立和测定。以外标法定量，4种黄曲霉毒素在各自浓度范围内标准曲线线性良好，相关系数r均大于0.999，准确度在93.1~109.9%之间。对标准溶液连续进样5次，重复性结果（RSD%表示）显示，4种黄曲霉毒素的保留时间RSD%在0.17~0.22%之间，峰面积的RSD%在3.31~4.64%之间，加标回收率在72.3 ~84.3%之间。上述结果表明，该方法准确度高，重复性好，可为辣椒中黄曲霉毒素的测定提供参考。