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强啡肽片段

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强啡肽片段相关的论坛

  • 【求助】DNA片段分析,求专家。

    我的一个朋友学生物的,最近正发愁如何对DNA片段进行液相分析。问了下,DNA片段是人工合成的,所以基体并不复杂,目的是通过对目标物的测定,表征之前的生物过程效果(内切什么的),分子量3000左右。由于自己对生物学方面知识薄弱(早已忘记了DNA分子化学结构为何、有何基团),没有提出意见。回来查了一下。首先看到的是Transgenomic公司wave商品名的DNA分离分析系统。看了下介绍,原来所谓的“分子桥”就是离子对色谱法。对于阴离子(磷酸基团PKA1为1-2)的核酸片段,通过加入三乙基胺醋酸盐,与之形成离子对,通过三乙基胺的疏水性与C18作用,形成保留,然后用乙腈洗脱,似乎没什么专利的内容。后来发现,关键在于那根特别的C18链的DNA分析柱,“无孔多苯乙烯-二乙烯基苯 (PS-DVB)共聚物微球(3微米)与C18形成稳定的固相”。疑问1:这种非硅胶基质的C18柱有何神奇之处?硅胶基质的C18为能不能做(估计不能,要不就不是专利了)?(硅胶表面的硅羟基会不会和DNA有什么反应)疑问2:有孔与无孔,对于这种大分子有何不同?孔径方面要选多大的,120A的会堵柱子么?疑问3:wave仪器的柱温为50-80度之间,分别应对非变性,部分和全部变性。这里的变性为何?一般柱温箱和C18的柱子柱温上限为多少?文献方面,看到一些用强阴离子交换(SAX)做的。tris-HCl缓冲系统,pH控制在9。此时DNA片段挂在SAX柱上。然后通过NaCl梯度淋洗(Cl-竞争?),洗脱下DNA分子片断。自己并不懂离子色谱。疑问1:SAX柱怎么使用和维护?需要注意什么?硅胶基质的和聚合物基质相比除了pH耐受性外有何不同?疑问2:为何选用NaCl淋洗?淋洗完后,挂在柱上的季胺上的Cl-怎么办?疑问3:此方法与那个wave相比,优点和缺点为何?其实疑问有很多,就不一一列出了,希望有经验的前辈多多发言,不吝赐教,小生感激涕零。

  • 【讨论】有关DNA片段的分析方法 (求达人)

    我的一个朋友学生物的,最近正发愁如何对DNA片段进行液相分析。问了下,DNA片段是人工合成的,所以基体并不复杂,目的是通过对目标物的测定,表征之前的生物过程效果(内切什么的),分子量3000左右。我问了下他现在怎么做的,回答流动相是三乙胺醋酸盐、乙腈。由于自己对生物学方面知识薄弱(早已忘记了DNA分子化学结构为何、有何基团),没有提出意见。回来查了一下。首先看到的是Transgenomic公司wave商品名的DNA分离分析系统。看了下介绍,原来所谓的“分子桥”就是离子对色谱法。对于阴离子(磷酸基团PKA1为1-2)的核酸片段,通过加入三乙基胺醋酸盐,与之形成离子对,通过三乙基胺的疏水性与C18作用,形成保留,然后用乙腈洗脱,似乎没什么专利的内容。后来发现,关键在于那根特别的C18链的DNA分析柱,“无孔多苯乙烯-二乙烯基苯 (PS-DVB)共聚物微球(3微米)与C18形成稳定的固相”。疑问1:这种非硅胶基质的C18柱有何神奇之处?硅胶基质的C18为能不能做(估计不能,要不就不是专利了)?(硅胶表面的硅羟基会不会和DNA有什么反应)疑问2:有孔与无孔,对于这种大分子有何不同?孔径方面要选多大的,120A的会堵柱子么?疑问3:wave仪器的柱温为50-80度之间,分别应对非变性,部分和全部变性。这里的变性为何?一般柱温箱和C18的柱子柱温上限为多少?(我印象中柱温箱好像就是50度)文献方面,看到一些用强阴离子交换(SAX)做的。tris-HCl缓冲系统,pH控制在9。此时DNA片段挂在SAX柱上。然后通过NaCl梯度淋洗(Cl-竞争阴离子?),洗脱下DNA分子片断。疑问1:SAX柱怎么使用和维护?需要注意什么?硅胶基质的和聚合物基质相比除了pH耐受性外有何不同?疑问2:为何选用NaCl淋洗?淋洗完后,挂在柱上的季胺上的Cl-怎么办?疑问3:此方法与那个wave相比,优点和缺点为何?其实疑问有很多,就不一一列出了,希望有经验的前辈多多发言,不吝赐教,小生感激涕零。

  • 纱条不均种类和产生原因,不同片段长度的不匀对面的影响是怎样的?

    纱条不均种类和产生原因,不同片段长度的不匀对面的影响是怎样的? 种类:长片段不匀,短片段不匀 长片段不匀,主要由清棉和前纺工序造成,若长片段周期性不匀率高,在织物上会出现明显的横条竖纹,对布面影响较大。 短片段不匀,主要由细纱的牵伸机构所造成,短片段不匀周期性不匀率严重时,几个粗节或细节在布面在布面上并列汇聚的概率较多,容易形成阴影或云斑,对布面影响很大。

  • 什么是fab抗体片段?scFv与Fab抗体的区别

    [font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段,又叫做抗原结合片段,是指抗体的抗原结合区域,包含一条完整的轻链和一条重链的可变区和恒定区的[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]结构域。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段可进一步分为两部分:由轻链可变区和重链可变区组成的[/font][font=Calibri]Fv[/font][font=宋体]片段、由轻链恒定区[/font][font=Calibri]CL[/font][font=宋体]和重链恒定区[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]组成的[/font][font=Calibri]Fb[/font][font=宋体]片段。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段含有[/font][font=Calibri]440~450[/font][font=宋体]个氨基酸,其分子量约为[/font][font=Calibri]55kDa[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]与完整的[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]相比,[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体片段缺乏糖基化的[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]恒定区,具有组织渗透强、半衰期短、免疫原性较低和生产成本低等优势,在诊断、临床治疗等领域展现出广阔的应用前景。目前,至少有[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]款治疗性[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体药物获得美国[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]的批准并上市,另外,还有众多[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体处于临床开发和临床前研究阶段。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]作为一家专注于抗体开发领域的公司,义翘神州可提供从免疫原合成、动物免疫、[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体库构建与筛选、鉴定等的一站式抗体服务。另外,我们也提供高效的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体表达纯化服务,以[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]细胞为表达宿主,最终交付高质量的重组[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体片段。更多详情,请咨询我们的技术团队。[/font][/font][font=宋体][b][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体的区别[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段之间的差别是什么?[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]片段由抗体的重链和轻链可变区通过一条短肽([/font][font=Calibri]15-20[/font][font=宋体]个氨基酸)连接而成。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段由完整的轻链以及部分重链结构(可变区和第一个恒定区)组成。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体具有[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]CL[/font][font=宋体]区域,两者通过一个二硫键连接,不需要短肽。而[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]片段缺乏该区域,需要通过短肽将重链可变区([/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体])和轻链可变区([/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体])连接在一起。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][/font][font=宋体][font=宋体]构成:[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CH1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VL[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CL[/font][/font][font=宋体][font=宋体]分子量([/font][font=Calibri]kDa[/font][font=宋体]):[/font][font=Calibri]55[/font][/font][font=宋体]肿瘤渗透性:良好[/font][font=宋体]稳定性:长期储存时稳定性高[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]scFv[/font][/font][font=宋体][font=宋体]构成:[/font][font=Calibri]VH[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]VL[/font][/font][font=宋体][font=宋体]分子量([/font][font=Calibri]kDa[/font][font=宋体]):[/font][font=Calibri]28[/font][/font][font=宋体]肿瘤渗透性:较强[/font][font=宋体]稳定性:存储时间较长时不稳定[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production][b][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体片段制备[/font][/b][/url][/font][font=宋体][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体片段可通过构建噬菌体展示抗体文库筛选获得。[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体库具有多项优势。首先,它可以快速有效地筛选出难以用杂交瘤技术获得的理想抗体。其次,和[/font][font=Calibri]scFv[/font][font=宋体]抗体一样,它可以轻松制备出高亲和力的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]利用自主开发的[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]细胞瞬时转染技术,义翘神州成功完成多个[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段抗体的表达和制备项目。并且这些高质量的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段,可用于抗原[/font][font=Calibri]-Fab[/font][font=宋体]共结晶等应用。与酶解法制备抗体片段相比,利用哺乳动物细胞瞬时转染技术制备的重组[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体的质量更优。如果客户要求,我们也可以在大肠杆菌表达系统进行[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体的表达。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由于很多抗体[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段不能很好地结合蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]、蛋白[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]或蛋白[/font][font=Calibri]L[/font][font=宋体]亲和树脂,我们通常在抗体重链的[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端添加[/font][font=Calibri]poly-histidine[/font][font=宋体]标签,以便于纯化。在设计构建载体时,可在[/font][font=Calibri]His[/font][font=宋体]标签和[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]之间加上蛋白酶识别位点,这样抗体纯化后可通过蛋白酶切去除标签,得到无标签的[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]如果您之前已在义翘神州订购过[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/custom-services-cro][b]CRO[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/custom-services-cro][b]服务[/b][/url]项目,一般情况下,您不需要为抗体制备订单支付预付款。义翘神州会根据抗体制备项目的具体费用进行报价,您在收到纯化抗体和发票后付款即可。但是,对于风险性较大的抗体制备项目,例如,制备恒定区有修饰的抗体,义翘神州需要收取少量的成本费用,用于可行性试验和工艺开发(如需)。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:抗体[/font][font=Calibri]Fab[/font][font=宋体]片段表达与纯化[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/fab-antibody-production[/font][/font]

  • 使用AMDIS对聚合物分子片段进行分析求助

    最近做了两个液体样品的GC/MS数据,得到了一些片段,但帮忙分析的老师只是给了两组样品的处理结果,我们想要获得更多的信息,在网上下载的AMDIS没有数据库可以查看,无从下手,不知道有没有朋友可以帮忙看看我的数据,非常感谢

  • 【分享】原子吸收教学片段

    [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]教学视频片段,不是很清但也能看,是在学校里拍的。

  • 化合物质谱330片段的合理推断

    化合物质谱330片段的合理推断

    [color=#444444]本人有一化合物,分子量为484,质谱打出来的最大片段是330,求大神合理推断,谢谢[/color][color=#444444][img=,468,359]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/05/201905141524089682_8480_1827556_3.jpg!w468x359.jpg[/img][/color]

  • 【分享】搞到一个气相色谱分离过程视频教学片段

    搞到一个[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分离过程视频教学片段给大家分享,不知道有重复没?[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=159836][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分离过程视频教学片段[/url]

  • PCR扩增DNA特异性片段实验方法与步骤

    一、实验目的 本实验目的了解PCR反应用来扩增DNA 特异性片段实验的的基本原理、实验方法和操作步骤,熟练掌握PCR反应基本体系配制和实验条件的设定。 二、实验原理 PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应是1986 年由Kallis Mullis 发现。这项技术已广泛地应用于分子生物学各个领域,它不仅可用于基因分离克隆和核酸序列分析,还可用于突变体和重组体的构建,基因表达调控的研究,基因多态性的分析,遗传病和传染病诊断,肿瘤机制探查,法医鉴定等方面。PCR技术已成为方法学上的一次革命,它必将大大推动分子生物学各学科的研究发展。PCR是一种利用两种与相反链杂交并附着于靶DNA两侧的寡核苷酸引物经酶促合成特异的DNA 片段的体外方法,由高温变性,低温退火和适温延伸等几步反应组成一个循环,然后反复进行,使目的的DNA 得以迅速扩增,主要过程如图6。置待扩增DNA 于高温下解链成为单链DNA 模板;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温条件下分别与目的片段两侧的两条链互补结合;DNA聚合酶在72 ℃将单核苷酸从引物3"端开始掺入,沿模板5"—3"方向延伸,合成DNA 新链。由于每一循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板,所以PCR 产物以指数方式增加,经25—30次周期之后,理论上可增加109倍,实际上可增加107倍。PCR技术具有操作简便、省时、灵敏度高特异性强和对原始材料质量要求低等优点,但由于所用的TaqDNA 聚合酶缺乏5"—3"核酶外切酶活性,不能纠正反应中发生的错误核苷酸掺入,估计每9000个核苷酸会导致一个掺入错误,不过Innis M·A 发现,错误掺入的碱基有终止链延伸的作用倾向,使得错误不会扩大。PCR技术应用广泛,不可能有这样一套条件满足所有的实验,但本实验所介绍的方法可适应于大多数DNA 扩增反应,即使有的不适应,至少也确定了一个共同的起点,在此基础上可以作多种变化。不过下列因素在实验应用时应予以特别注意,以求取得满意结果。1. 模板:单、双链DNA 和RNA都可以作为PCR样品,若起始材料是RNA,须先通过逆转录得取第一条cDNA。虽然PCR 可以仅用极微量的样品,但为了保证反应的特异性,一般宜用ng 量级的克隆DNA,ug 级的染色体DNA,待扩增样品质量要求较低,但不能混合有任何蛋白酶、核酸酶,Taq DNA聚合酶的抑制剂以及能结合DNA 的蛋白质。2. 引物:引物是决定PCR 结果的关键,下列原则有助于引物的合理设计。(1)尽可能选择碱基随机分布,GC 含量类似于被扩增片段的引物,尽量避免具有多聚嘌呤、多聚嘧啶或其它异常序列的引物。(2)避免具有明显二级结构(尤其是在引物3"—末端)的序列。(3)防止引物间的互补,特别要注意避免具有3"末端重叠的序列。(4)引物的长度约为20个碱基,较长引物较好,但成本增加,短引物则特异性降低。(5)引物浓度不宜偏高,过高易形成二聚体,而且扩增微量靶目标或起始材料是粗制品,容易产生非特异产物。3. 缓冲液:PCR缓冲液的变化通常会影响扩增结果,特别是MgCl2,其浓度对专一性和扩增量有重大影响,通常最适浓度为1.5 mM左右(每种dNTP 的浓度为0.2 mM时),浓度过高,使反应特异性降低;浓度过低,使产物产量降低。四种dNTP 浓度通常每种都是0.05 mM—0.2 mM。过高的浓度会导致错误掺入,浓度过低,则影响反应产物的产量。四种dNTP浓度应大体相同,其中一种若偏高,会诱发错误掺入,降低合成速度,过早终止延伸反应。另外dNTP 能与Mg2+结合,使游离Mg2+浓度降低,所以如果dNTP 的浓度有很大改变,MgCl2浓度也要改变。Taq聚合酶是一种耐高温聚合酶,用量通常是1—4 单位/100 ul,浓度过高,产生过多的非特异片段。4. 循环参数:PCR 循环是把起始材料加热到90—95 ℃,保持短时间使双链DNA 解链;然后冷却至37—55 ℃,使引物与模板退火;再升温至70—75 ℃,在TaqDNA聚合酶的作用下掺入单核苷酸,使引物沿模板延伸。解链不完全是导致PCR 失败的最主要原因。用DNA扩增仪时,94 ℃保持1 分钟可使模板的起始物完全变性。若用低于94 ℃的条件,则应适当延长时间。引物与模板退火温度由引物的长度及G+C含量决定。适时间退火(1—2)分钟有利于产物的特异性。引物延伸在70—75 ℃保温的时间可根据扩增DNA片段的长短来调节。正常情况下,每分钟可延伸1 Kb 的长度,常规PCR 一般为25—40个循环,若循环加长,则由于酶活性降低,聚合时间延长,引物及单核苷酸减少等原因,反应后期容易产生错误掺入,所以在满足产物得率前提下,应尽量减少周期次数。三、材料(一)仪器与器皿PRC 扩增仪(PE2400),琼脂糖凝胶电泳设备,微量取样器,一次性指形管,凝胶成像仪 玻片(二)试剂与材料1. 琼脂糖凝胶电泳试剂1)电泳缓冲液:Tris—乙酸0.04 mol/L PH8.0 0.002 mol/L EDTA2)加样缓冲液:0.25%溴酚兰40% w/v蔗糖3)溴化乙锭溶液:0.05 mg/ml溴化乙锭/水4)琼脂糖2. TaqDNA 多聚酶3. 5′反应缓冲液:125 mmol/L Tris-HCl pH8.2;10 mmol/L MgCl2;0.5 mg/ml gelatin;125 mmol/L(NH4)2SO4; Formamide 25%4. 混合dNTP 液(dATP dGTP dTTP dCTP各2 mmol/L)5. DNA 模板(每2 ml 中含有10 fg 待扩增DNA)6. 引物 1 (25 pmol/L),5’加入EcoRI 粘性末端碱基7. 引物 2 (25 pmol/L),5’加入HindIII 粘性末端碱基8. 无菌水四、实验步骤1. 按顺序在200 ml 指形管中加入以下试剂与样品:(因购入的试剂批次不同,加样时有 所差别,以预实验结果为准。)1) ddH2O 74 ml2) 10′Buffer 10 ml3) MgCl2 6 ml(10′Buffer 如已加入MgCl2,则不必加)4) dNTP 2 ml5) 引物1 2 ml6) 引物2 2 ml7) 模板 2 ml8) Taq DNA聚合酶2 ml总体积共100 ml(也可以配成40 ml 的反应体系)2. 在PCR 扩增仪上按以下反应条件编入程序:(以下为参考值,因扩增的DNA片段不同,各类PCR 扩增仪程序设定各不相同,编程过程视扩增的DNA 片段的要求及仪器而定参数,见示范。)预变性 94 ℃ 2 分种循环条件(30 次)变性 94 ℃ 40 秒复性 55 ℃ 35 秒延伸 72 ℃ 2 分10 秒延长延伸 72 ℃ 7 分钟编完反应程序,置反应管于PCR扩增仪的反应孔中,开动机器,扩增循环反应开始。3. PCR 扩增完毕,配2%琼脂糖凝胶,取15 ml 反应液及相适应的PCR mark 分别点样, 加样缓冲液应为40%W/V 蔗糖,电泳观察结果。4. 凝胶成像仪或紫外灯下观察实验结果,是否已扩增到实验设计的DNA 片段。注意事项: 要想得到预期的实验结果,PCR的反应条件和很多参数有着密切的关系,都应引起注意。在实验设计中我们要考虑到模板浓度的大小,设计引物时也要主要引物长度适当以及恰当的GC含量,在PCR体系中引物浓度,dNTPs浓度相对要均衡,选取的taq enzyme,缓冲液的离子含量也是影响产物的结果,另外就是要根据产物大小设定适当的变性时间,退火温度及时间,延伸的时间。

  • 【分享】《实验室录像片段-1.rar 》

    [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?sel=admin_name&keywords=zjzxwwl2a][b]《实验室录像片段-1.rar》[/b][/url]

  • 【资料】《实验室录像片段-2.rar》

    [img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/download/search.asp?sel=admin_name&keywords=zjzxwwl2a][b]《实验室录像片段-2.rar》[/b][/url]

  • 【求购】问购:能分离100bp到500bp的DNA 片段的色谱柱

    请教一下:谁能告诉我,有什么型号的色谱柱可用于分离大小在100bp到500bp的DNA 片段?我有30多个组分要分离。有公司向我推荐 Amersham公司凝胶过滤预装柱 ,但是价格都近两万,有朋友向我推荐岛津,等公司的c18柱子(ODS柱),便宜,不知道效果会不会差一些呢?如果可以,有没有国产的也能解决问题呢?有那些型号的可有用?请高手指点,谢谢!

  • 基因组片断分析时间缩短到3分钟

    中国科技网讯 据物理学家组织网8月29日(北京时间)报道,美国能源部劳伦斯·利弗莫尔国家实验室(LLNL)研究人员最近开发出一种核酸(DNA和RNA)快速扩增技术,使聚合酶链式反应(PCR)的速度大大加快,可在3分钟内将基因组片段扩增10亿倍,迅速识别出病原菌。疾病快速诊断有望很快成为现实。相关论文发表在最近出版的《分析师》杂志上。 PCR技术能让研究人员把一段DNA或RNA复制上百万副本,然后用于基因组测序、基因分析、遗传病诊断、亲子鉴定、法庭鉴定、确定疾病感染等。该过程一般需要1小时到几天时间。然而,快速诊断、应急反应或传染病监控往往要求PCR技术缩短到几分钟。 领导这项研究的工程师雷金纳德·比尔和同事克服酶动力学和热动力学方面的限制,用多孔材料和绝热薄膜制造出一种设备,实现了极速热循环,能每秒钟加热或制冷45℃,一次热循环不超过2.5秒。比尔特别指出:“这种设备的独特之处还在于,它制冷的速度和加热一样快。” 开发出这种设备后,比尔和同事从10种商用酶中选出了2种,这2种酶的链式反应速度非常快,将一些参数略作调整,就能使反应更快。 他们用一种肠杆菌属的细菌测试了新的PCR设备迅速扩增DNA片段的能力,然后用一段严重急性呼吸道综合征(SARS)DNA片段演示了设备处理威胁公共健康病毒方面的效果。该设备完成对目标DNA30个周期(10亿倍)的PCR扩增,用时仅为2分18秒。 目前,研究小组正在开发一种实时探测设备。按照他们的设想,将来一台PCR仪器就能完成整个测试,从样本到结果只需10分钟。市场对这种设备的需求将是巨大的,除传统的公共卫生和医疗研究领域,一台简单实用的实时PCR设备在养殖、农业以及食品加工行业都非常有用,可用来保障食品安全。(记者 常丽君) 总编辑圈点 随着人类基因组逐渐被破译,一张生命之图将被绘就,我们对人类自身的了解也会迈上新的台阶,很多疾病的病因将被揭开,药物就会设计得更好,治疗方案也能“对因下药”,生活起居、饮食习惯有可能根据基因情况进行调整,人类的整体健康状况将会提高。然而,病来如山倒,为了尽快找到病因,疾病的快速诊断就显得异常重要。而文中提到的技术,可在三分钟内识别病原菌,无疑为很多急症患者的生存争取了宝贵的时间。 《科技日报》(2012-8-30 一版)

  • 视频片段怎么制作成gif动态图片

    视频片段怎么制作成gif动态图片

    人们的生活的质量和速度都是在不断的提高的,不仅仅是物质上的体现,精神生活也是如此。每到宝贵的黄金休息时间,各大卫视的综艺节目也是在互相的追逐着收视率,期间难免会有些让人哄堂大笑的片段啊,如果能将这些精彩的瞬间制作成gif的动态图片和表情包的话,就别有一番滋味了,最出名的就是王境泽动图了,自己要是想要制作的话,哪些视频片段怎么制作成gif动态图片呢?1、制作GIF动图并不难,有简单的方法自然是要用到的啊,首先就是要在电脑上安装[color=#ff0000]迅捷gif制作工具[/color],电脑端的操作总是比手机上操作的更便捷和顺当。[align=center][img=,650,350]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903251721304957_3884_3876043_3.png!w650x350.jpg[/img][/align]2、打开软件后,我们会发现有两个选项。这里以点击主界面中的启动屏幕录制为例,打开GIF动态图片录制功能。[align=center][img=,900,460]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903251721404192_7330_3876043_3.png!w900x460.jpg[/img][/align]3、接下来我们可以自定义设置GIF动图的录制区域的大小、录制位置,然后就可以开始录制屏幕中的内容,并制作成GIF动图。[align=center][img=,900,524]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903251721520028_3541_3876043_3.png!w900x524.jpg[/img][/align]4、录制完成,点击GIF动图录制窗口中的停止,就可以停止GIF动图录制;然后就会弹出GIF动图编辑工具,这时候我们就可以对录制屏幕内容得到的GIF动态图片进行编辑。我们可以插入文字、图片、水印、删除裁剪画面。[align=center][img=,900,488]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903251722029899_2144_3876043_3.png!w900x488.jpg[/img][/align]5、GIF动态图片编辑好之后,我们就可以点击界面右上角的导出GIF,将GIF动态图片导出到电脑中,就能在保存的位置找到了。[align=center][img=,900,488]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/03/201903251722172468_719_3876043_3.png!w900x488.jpg[/img][/align]迅捷gif制作工具https://www.xunjieshipin.com/download-gifmaker看完上面的方法是不是感觉挺简单的,不用保存视频就能在线的录制最后还是gif的格式,有没有自己也想有个专属标签的冲动啊,上面的介绍就是这么多了,希望能对你是有用的。

  • 【原创】独家报道年会精彩片段兼感想

    虽然最近非常忙,但还是要赶在今天写这个帖子,怕等到过了8月就记不起来了。这是我参加的第一个年会,前两届没有去成,甚憾!在大巴里坐在月版的旁边,小于让每个斑竹做介绍,我摆手势说自己不说话了。满眼的未谋面的斑竹,北没见到老虎老米老皮,南没见到老谢happy红狐王子,心里真是有说不出的滋味。好象热闹都是人家的,我在坐满人的大巴里还是感到刻骨的孤独。(跑题了)好在有几个精彩片段让我难忘,不虚此行。1 calfstone 小于让他用话筒,他就是不用,说:“我不习惯用话筒,我喜欢用真实的声音面对大家!”是个有个性的老师。2 怪侠一枝梅 他笑的时候让我想到老谢了,感到眉眼之间有那么几分神似。他居然成为仪器网的官方人员之一了,打个不恰当的比喻,4077好象是agilent,怪侠只能是varian了!我非常满意他对我的几句评价,他说,看我的帖子以为我是个男的,因为很大气,但是有时候又觉得是个女的写的,因为很细腻,得意啊!我自以为确实是个粗中有细的人,而且性格里有男儿的豪爽大气,心胸宽广,谁叫我出生在海边呢?3 李小侠?李小霞? 在大巴上小于让大家做游戏,他报一个斑竹名字,让大家辨别是男是女,结果,李小侠两次被认为是女的,看来取名不光要看文字,也要讲究读音,未来的父母们要注意!其实想到的还有很多,但一向是个喜欢精简的人。明天要考试,搁笔了!祝仪器论坛官方民方一派和谐,其乐融融!又及:看到环保的儿子康复状况很好,甚慰!

  • 经常运动刺激大脑分泌的内啡肽

    经常运动刺激大脑分泌的内啡肽,可以引起良好的情绪和状态反应,有助于缓解焦虑与抑郁情绪,促进心理健康,也有助于某些慢性疾病的预后和康复。

  • 【讨论】关于质谱对DNA片断长度识别的问题,欢迎讨论

    有这么几个问题想和大家讨论,1,质谱对DNA测定的浓度范围是多少?低于多少的浓度是不可测的。pg/ul ng/ul或者单分子是不是就没有可能了?2,对DNA长度的限制? 多数文献都是测定小片断,100base以上都很少。3,据说maldi-tof对大分子比esi好,不知道是不是老皇历了。4,我这里试过一次maldi,设备旧了些ABI的Voyager-4379, 337纳米的激光激发。测很低浓度的138b的没有测出来,1ug/ul的10 bp ladder只有10 bp的峰在,后续的峰都很弱。怀疑matrix和样品准备有问题。 用HPA : 醋酸氨 :样品= 1:1:1 样品1ug/ul的10 bp ladder (10, 20 -330) 其他条件在文件里。实际想测的比这个浓度低百万倍吧。对质谱不了解,不知道有没有可能测了。欢迎介绍好的文献过来。

  • 【分享】某君的爆笑日记片段

    6月7日 我知道我不算帅哥,但曾经有人看我满月的照片时,也说过我左边的鼻孔很偶像派。 8月30日 独守空房,让人只能浪费;妻妾成群,让人懂得节俭。可是我现在,却在终日浪费中向往节俭。 9月18日 和女朋友分手之后,我终于明白,幸福要掌握在自己的手中,而不是在别人的嘴里! 10月9日 今天看书,看到康熙皇帝在二十三岁的时候已经贵为一国之君,绩伟功丰,我很沮丧;但又看到同治皇帝在二十三岁时已经死了四年了,我很欣慰   11月11日 孤单的我在饭馆吃面,听到收音机里的点歌节目说:“有一位先生给所有恋人们点歌来表达他的祝福,下面请听《无言的结局》。”……我觉得很不好,人可以无爱,但不能无耻,于是我也打电话点播了一首歌——梁静茹的《分手快乐》。

  • 问:液态废物的污染防治,是否适用于新《固废法》?

    答:液态废物的污染防治,适用于本法;但是,排入水体的废水的污染防治适用有关法律不适用本法。(其中,根据《关于建立完善船舶水污染物转移处置联合监管制度的指导意见》,船舶含油污水按照废水实施管理)本法第一百二十四条第一项已经明确,本法调整的固体废物,包括固态、半固态和置于容器中的气态的物品、物质以及法律、行政法规规定纳人固体废物管理的物品、物质。换言之,本法虽然使用了“固体废物”的概念,但并非只有“固态”的废物,才属于法律定义范围的“固体废物”。除了“固态”废物外,半固态和置于容器中的气态物品等,也属于本法调整的“固体废物”的范畴。根据本条规定,液态废物的污染防治,原则上也适用本法。以危险废物为例,根据《国家危险废物名录》,有相当一部分液态废物,是作为危险废物进行管理的。比如,废矿物油属于液态废物,同时也是危险废物的一大种类。又如基础化学原料制造行业中,硝基苯生产苯胺的过程中产生的废液,也属于液态废物,同时也是危险废物的一种。因此,判断某种物品是否属于本法调整的“固体废物”范畴,不能简单地以是否属于“固态”来判断。液态废物的污染防治,也适用本法。

  • 问:液态废物的污染防治,是否适用于新《固废法》?

    答:液态废物的污染防治,适用于本法;但是,排入水体的废水的污染防治适用有关法律不适用本法。(其中,根据《关于建立完善船舶水污染物转移处置联合监管制度的指导意见》,船舶含油污水按照废水实施管理)本法第一百二十四条第一项已经明确,本法调整的固体废物,包括固态、半固态和置于容器中的气态的物品、物质以及法律、行政法规规定纳人固体废物管理的物品、物质。换言之,本法虽然使用了“固体废物”的概念,但并非只有“固态”的废物,才属于法律定义范围的“固体废物”。除了“固态”废物外,半固态和置于容器中的气态物品等,也属于本法调整的“固体废物”的范畴。根据本条规定,液态废物的污染防治,原则上也适用本法。以危险废物为例,根据《国家危险废物名录》,有相当一部分液态废物,是作为危险废物进行管理的。比如,废矿物油属于液态废物,同时也是危险废物的一大种类。又如基础化学原料制造行业中,硝基苯生产苯胺的过程中产生的废液,也属于液态废物,同时也是危险废物的一种。因此,判断某种物品是否属于本法调整的“固体废物”范畴,不能简单地以是否属于“固态”来判断。液态废物的污染防治,也适用本法。

  • 液态废物的污染防治,是否使用于新《固废法》?

    [font=仿宋_GB2312][size=21px]答:液态废物的污染防治,适用于本法;但是,排入水体的废水的污染防治适用有关法律不适用本法。(其中,根据《关于建立完善船舶水污染物转移处置联合监管制度的指导意见》,船舶含油污水按照废水实施管理)[/size][/font][font=仿宋_GB2312][size=21px]本法第一百二十四条第一项已经明确,本法调整的固体废物,包括固态、半固态和置于容器中的气态的物品、物质以及法律、行政法规规定纳人固体废物管理的物品、物质。换言之,本法虽然使用了“固体废物”的概念,但并非只有“固态”的废物,才属于法律定义范围的“固体废物”。除了“固态”废物外,半固态和置于容器中的气态物品等,也属于本法调整的“固体废物”的范畴。[/size][/font][font=仿宋_GB2312][size=21px]根据本条规定,液态废物的污染防治,原则上也适用本法。以危险废物为例,根据《国家危险废物名录》,有相当一部分液态废物,是作为危险废物进行管理的。比如,废矿物油属于液态废物,同时也是危险废物的一大种类。又如基础化学原料制造行业中,硝基苯生产苯胺的过程中产生的废液,也属于液态废物,同时也是危险废物的一种。因此,判断某种物品是否属于本法调整的“固体废物”范畴,不能简单地以是否属于“固态”来判断。液态废物的污染防治,也适用本法。[/size][/font]

  • 多肽合成方法

    多肽合成方法

    多肽合成方法分类多肽的合成主要分为两条途径:化学合成多肽和生物合成多肽。化学合成主要是以氨基酸与氨基酸之间缩合的形式来进行。在合成含有特定顺序的多肽时,由于多肽合成原料中含有官能度大于2的氨基酸单体,多肽合成时应将不需要反应的基团暂时保护起来,方可进行成肽反应,这样保证了多肽合成目标产物的定向性。多肽的化学合成又分为液相合成和固相合成。【合肥国肽生物】多肽液相合成主要分为逐步合成和片段组合两种策略。逐步合成简洁迅速,可用于各种生物活性多肽片段的合成。片段组合法主要包括天然化学连接和施陶丁格连接。近年,多肽液相片段合成法发展迅速,在多肽和蛋白质合成领域已取得了重大突破。在多肽片段合成法中,根据多肽片段的化学特定性或化学选择性,多肽片段能够自发进行连接,得到目标多肽。因为多肽片段含有的氨基酸残基相对较少,所以纯度较高,且易于纯化。多肽的生物合成方法主要包括发酵法、酶解法,随着生物工程技术的发展,以DNA重组技术为主导的基因工程法也被应用于多肽的合成。多肽的固相合成多肽的合成是氨基酸重复添加的过程,通常从C端向N端(氨基端)进行合成。多肽固相合成的原理是将目的肽的第一个氨基酸C端通过共价键与固相载体连接,再以该氨基酸N端为合成起点,经过脱去氨基保护基和过量的已活化的第二个氨基酸进行反应,接长肽链,重复操作,达到理想的合成肽链长度,最后将肽链从树脂上裂解下来,分离纯化,获得目标多肽。1、Boc多肽合成法Boc方法是经典的多肽固相合成法,以Boc作为氨基酸α-氨基的保护基,苄醇类作为侧链保护基,Boc的脱除通常采用三氟乙酸(TFA)进行。多肽合成时将已用Boc保护好的N-α-氨基酸共价交联到树脂上,TFA切除Boc保护基,N端用弱碱中和。肽链的延长通过二环己基碳二亚胺(DCC)活化、偶联进行,最终采用强酸氢氟酸(HF)法或三氟甲磺酸(TFMSA)将合成的目标多肽从树脂上解离。在Boc多肽合成法中,为了便于下一步的多肽合成,反复用酸进行脱保护,一些副反应被带入实验中,例如多肽容易从树脂上切除下来,氨基酸侧链在酸性条件不稳定等。2、Fmoc多肽合成法Carpino和Han以Boc多肽合成法为基础发展起来一种多肽固相合成的新方法——Fmoc多肽合成法。Fmoc多肽合成法以Fmoc作为氨基酸α-氨基的保护基。其优势为在酸性条件下是稳定的,不受TFA等试剂的影响,应用温和的碱处理可脱保护,所以侧链可用易于酸脱除的Boc保护基进行保护。肽段的最后切除可采用TFA/二氯甲烷(DCM)从树脂上定量完成,避免了采用强酸。同时,与Boc法相比,Fmoc法反应条件温和,副反应少,产率高,并且Fmoc基团本身具有特征性紫外吸收,易于监测控制反应的进行。Fmoc法在多肽固相合成领域应用越来越广泛。多肽液相分段合成随着多肽合成的发展,多肽液相分段合成(即多肽片段在溶液中依据其化学专一性或化学选择性,自发连接成长肽的合成方法)在多肽合成领域中的作用越来越突出。其特点在于可以用于长肽的合成,并且纯度高,易于纯化。多肽液相分段合成主要分为天然化学连接和施陶丁格连接。天然化学连接是多肽分段合成的基础方法,局限在于所合成的多肽必须含半光氨酸(Cys)残基,因而限定了天然化学连接方法的应用范围。天然化学连接方法的延伸包括化学区域选择连接、可除去辅助基连接、光敏感辅助基连接。施陶丁格连接方法是另一种基础的片段连接方法,其为多肽片段连接途径开拓了更广阔的思路。正交化学连接方法是施陶丁格连接方法的延伸,通过简化膦硫酯辅助基来提高片段间的缩合率。其他多肽合成方法1、氨基酸的羧内酸酐法(NCA)氨基酸的羧内酸酐的氨基保护基也可活化羧基。NCA的原理:在碱性条件下,氨基酸阴离子与NCA形成一个更稳定的氨基甲酸酯类离子,在酸化时该离子失去二氧化碳,生成二肽。生成的二肽又与其他的NCA结合,反复进行。NCA适用于短链肽片段的多肽合成,其周期短、操作简单、成本低、得到产物分子量高,在目前多肽合成中所占比例较大,技术也较为通用。2、组合化学法20世纪80年代,以固相多肽合成为基础提出了组合化学法,即氨基酸的构建单元通过组合的方式进行连接,合成出含有大量化合物的化学库,并从中筛选出具有某种理化性质或药理活性化合物的一套多肽合成策略和筛选方案。组合化学法的多肽合成策略主要包括:混合-均分法、迭代法、光控定位组合库法、茶叶袋法等。组合化学法的最大优点在于可同时合成多种化合物,并且能最大限度地筛选各种新化合物及其异构体。3、酶解法酶解法是用生物酶降解植物蛋白质和动物蛋白质,获得小分子多肽。酶解法因其多肽产量低、投资大、周期长、污染严重,未能实现工业化生产。酶解法获得的多肽能够保留蛋白质原有的营养价值,并且可以获得比原蛋白质更多的功能,更加绿色,更加健康。4、基因工程法基因工程法主要以DNA重组技术为基础,通过合适的DNA模板来控制多肽的序列合成。有研究者通过基因工程法获得了准弹性蛋白-聚缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸-缬氨酸-甘氨酸肽(VPGVG)。利用基因工程技术生产的活性多肽还有肽类抗生素、干扰素类、白介素类、生长因子类、肿瘤坏死因子、人生长激素,血液中凝血因子、促红细胞生成素,组织非蛋白纤溶酶原等。基因工程法合成多肽具有表达定向性强,安全卫生,原料来源广泛和成本低等优点,但因存在高效表达,不易分离,产率低的问题,难以实现规模化生产。5、发酵法发酵法是从微生物代谢产物中获得多肽的方法。虽然发酵法的成本低,但其应用范围较窄,因为现在微生物能够独立合成的聚氨基酸只有ε-聚赖氨酸(ε-PL)、γ-聚谷氨酸(γ-PGA)和蓝细菌肽。[img=,457,333]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904221507346400_2482_3531468_3.jpg!w457x333.jpg[/img]我们主要提供:多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线:17718122172;17718122684;17730030476;17718122397

  • 夜行片段

    快走四十分钟从南京西路江宁路到愚园路镇宁路。去年经过的一处废墟已经重建,富春小笼隔壁的隔壁的隔壁新开了一家饭店,刘记饺子馆的态度一如既往的冷淡。一路走一路忆起去年在老大房买蟹粉,在小店买睡裙的情形,甚至当时反复回忆的Diamond & Rust。--我爱这人间烟火!I'm quite sure I'll be happy when I'm old, coz I've given myself so many beautiful memories when I'm young...驻足街边灯箱前,细读愚园路历史。原来始建于清宣统年间,后以沪上名园愚园命名,多个历史文化名人曾在此停留。短短2.7公里满是风情。在E公司时去上海情报研究所办事,立刻被那里的老房子吸引,终于在去年夏天耗时两个半小时边走边拍以偿心愿。如今夜色下的老房子又是一番别样的风情!坐在街边长椅上闲看车来车往,很奇怪愚园路如何把喧嚣和宁静结合得如此完美。附近小区的居民在旁边坐着聊天,我有一搭没一搭地听着。隐隐丹桂飘香,悠悠闲话家常。很高兴在这样的年纪,为一点小事既能像三岁小孩得糖吃一样开心,也能像八十岁老人晒太阳一样安祥。我爱三十岁!闲逛愚园路小店,买了放在衣柜里的香草。lily给Lily,cherry给Cherry,rose garden给花大姐。我自己留的是jasmine和magnolia。http://img.t.sinajs.cn/t35/style/images/common/face/ext/normal/eb/smile.gif饭后散步2h,到家了!穿行于闹市,心却平和愉悦。像游魂穿越旷野后回到自己的小茅屋,既留恋在旷野行走的不羁,又享受躲进小楼自成一统的温馨。路上买了个大红桶,今后任凭窗外风吹雨打雷声隆,我自岿然不动泡脚中!http://img.t.sinajs.cn/t35/style/images/common/face/ext/normal/6a/laugh.gif睡前泡脚,胜吃补药。老爸看上去比实际年龄年轻很多,原因之一就是泡脚。人老先老脚,要想延缓衰老就要从年轻时开始泡。42℃~45℃热水浸泡小腿30分钟左右,至身体微微出汗为宜。中医理论:春天洗脚,升阳固脱;夏天洗脚,暑热可却;秋天洗脚,肺润肠濡;冬天洗脚,丹田温灼。

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