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细胞松弛素

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细胞松弛素相关的论坛

  • 【原创】钢绞线应力松弛试验机

    【原创】钢绞线应力松弛试验机

    电子式钢绞线应力松弛试验机是专门用于钢绞线或预应力钢丝及金属材料的拉伸应力松弛试验,测定应力松弛速率、松弛应力、松弛率等应力松弛性能参数。试验机机械结构和测控系统与电子式万能试验机基本相同。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/04/201204251512_363318_2290385_3.jpg

  • 【求助】热焓松弛如何消除?

    [color=#6495ED][font=楷体_GB2312][size=4]MDSC做一个环氧固化样品,在155~210C温度段有吸热峰,Tg也偏小8C左右。当时判断该吸热峰为热焓松弛(正常的onset=165C,offset=195C,Tg(I)=180C)。 但是该吸热峰不能被消除,比如对样品进行195C/5min淬火处理后,虽然Tg有恢复,但吸热峰仍然存在。 请问怎么解释?处理的温度不够高?时间不够长?松弛有这么难消除吗?170C/30min退火后Tg不降反增,为什么?[/size][/font][/color]

  • 有木有需要试剂的啊~~~~

    我们长期专注于FERMENTEK公司是全球排名前100名的以色列著名生物科技公司,长期专著于提供真菌毒素/生物毒素/神经生物学和细胞信号传导和医药中间体产品。主要有:毒素/离子通道调节剂//神经营养因子、细胞内Ca2+及磷酸化抑制剂等高纯度信号转导研究用试剂Thapsigargin 肌浆网钙泵抑制剂(TG) Leptomycin B 细霉素BBafilomycin A1 巴佛洛霉素A1 Bafilomycin B1 巴佛洛霉素B1Geldanamycin 苯醌安莎霉索(GDM) Ionomycin, Ca salt 钙离子载体Ionomycin,free acid钙离子载体 A23187, 4-Bromo 钙离子载体 A23187, Mixed Ca/Mg salt A23187 (free acid)   Paclitaxel (taxol) 紫杉醇 Docetaxel(toxotere) 多烯紫衫醇 Equol 雌马酚Thapsigargin肌浆网钙泵抑制剂(TG) Staurosporine星孢菌素Bisindolylmaleimides酪氨酸磷酸化-抑制剂 Phorbol Esters佛波醇酯4α-Phorbol  Phorbol 12,13-Dibutyrate 蛋白激酶 c的激活剂咐噼醇基酯4α-Phorbol 12,13-Dibutyrate  4α-Phorbol 12,13-Didecanoate  Phorbol 12-Myristate 13-Acetate  4α-Phorbol 12-Myristate 13-Acetate  Tyrphostins Calyculin A 花萼海绵诱癌素CA细胞凋亡相关试剂:Brefeldin A 布雷菲尔得菌素 Hypericin金丝桃素Thapsigargin肌浆网钙泵抑制剂(胡萝卜类素) Cerulenin浅蓝菌素 7Amino-Actinomycin D 7氨基放线菌素 Valinomycin缬氨霉素 Parthenolide 小白菊内酯Fumonisin B2 伏马毒素B2 Leptomycin B 细霉素BActinomycin D (dactomycin) 放线菌素D/IV Cyclopiazonic Acid 环丙阿尼酸Ionomycin 钙离子载体 K252A特异性酪氨酸激酶抑制剂 Cyclosporin A环胞霉素A细胞松弛素类试剂:Cytochalasin A 细胞松弛素A Cytochalasin B 细胞松弛素BCytochalasin C 细胞松弛素C Cytochalasin D 细胞松弛素DCytochalasin E 细胞松弛素E各类抑制剂7AAD(7-Amino-Actinomycin D) 7氨基放线菌素17AAG(17-(Allylamino)-18-demethoxy- geldanamycin) 17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素17DMAG(17-dimethylaminoethylamino-18-demethoxy-geldanamycin) Hsp90抑制剂 Cyclopamine环巴胺 A23187, 4-Bromo 钙离子载体A23187, Mixed Calcium / Magnesium salt  A23187 (free acid)  Actinomycin D (Dactinomycin, Dactomycin) 放线菌素D/IVacivicin 细胞毒素/γ-GTP抑制剂 Apicidin 组蛋白脱乙酰酶抑制剂Radicicol Hsp90特异性之阻断剂 Thapsigargin(TG) 肌浆网钙泵抑制剂Thiolutin 硫藤黄素 Triacsin C 脂酰CoA合成抑制剂 Trichostatin A 曲古菌素ATunicamycin N-糖基化抑制剂 Wortmannin(WT) 磷脂酰肌醇4-激酶的特异性抑制剂Bisindolylmaleimide I 蛋白激酶C-PKC抑制剂Bisindolylmaleimide I,Hydrochloride 蛋白激酶C-PKC抑制剂盐酸盐Bisindolylmaleimide VIII,Acetate salt 酪氨酸磷酸化-抑制剂Bisindolylmaleimide IX,Methanesulfonate salt 酪氨酸磷酸化-抑制剂Bisindolylmaleimide X,Hydrochloride salt 酪氨酸磷酸化-抑制剂Bisindolylmaleimide XI,Hydrochloride salt 酪氨酸磷酸化-抑制剂Tyrphostin AG 1478 酪氨酸磷酸化抑制剂

  • 【求助】抗应力松弛性能的检测

    请问各位大虾:在金属材料的抗应力松弛性能检测中用到什么设备?国内哪家企业或研究所或学校可以检测?我的检测时间是1000小时,铜合金,温度是150摄氏度.不甚感激!

  • 圆二色谱分析

    圆二色谱分析

    咨询个问题,分离得到一个个细胞松弛素类结构,做了ECD,只有实验图,没有理论图,有个类似的参考文献,还有旋光能推测绝对构型吗?参考文献中有CD,做了旋光25D =-12.5,参考文献是 +34.2[img=,690,446]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/05/201905061647525435_1078_1701336_3.jpg!w690x446.jpg[/img]

  • TNM模型指前因子A和松弛活化焓ΔH的取值范围

    描述玻璃化转变和松弛的TNM模型中,指前因子A和松弛活化焓ΔH的取值范围以及出处,谢谢!毕业设计做TNM模型动力学参数优化,用matlab计算,除了四个初始参数、升降温速率以及退火时间的影响,还想对这两个参数上限优化,但不知道有没有上限,请各位帮忙!

  • 单细胞凝胶电泳 标准操作规程(

    关键词:单细胞凝胶电泳目的:为便于各室单细胞凝胶电泳试验结果的可比性背景知识:略原理:在细胞核中,DNA是环状附着在核基质上,细胞裂解过程中,核基质被溶解、抽提,DNA的结构则未发生变化。如果DNA链上存在缺口,则使DNA超螺旋变的松弛,DNA环向外展,同时由于暴露了阴电荷,在电场力的作用下,松动的DNA环向阳极迁移,但是由于这种松动的DNA环一端仍附着于核DNA,其迁移距离受到限制,因此尾长并不总是真实反映链缺口的多少。实际应当依靠尾长与尾部的荧光强度同时来进行分析。主体内容:操作步骤见下文主要参考文献:略操作步骤:1. 分离制备单细胞悬液:(1) 体外培养的细胞株:用胰酶消化,吹打成单细胞悬液(2) 体内脏器细胞:处死动物,取出脏器,于Hanks’液中制备成单个细胞悬液。2. 胶板制备:(1) 取20~50μl于56℃水浴中保温的0.5%普通熔点琼脂糖,铺于磨沙载玻片上,形成底胶。(2) 取100~150μl 0.5%普通熔点琼脂糖加在底胶上,再于其上加盖玻片,4℃冷凝10分钟。(3) 取下盖片,取50~100μl于37℃水浴中保温的1.0%的低熔点琼脂糖与50~100μl细胞悬液(105个细胞/ml)混匀,立即铺片,加上盖玻片,4℃冷凝10分钟。(4) 去掉盖玻片,取70~100μl于37℃水浴中保温的0.5%的低熔点琼脂糖铺片,加盖玻片,4℃冷凝。3. 细胞裂解与电泳:(1) 将制备好的胶板去掉盖玻片后,浸于4℃预冷的细胞裂解液中,4℃裂解1小时。(2) 取出胶板,放入电泳槽中,浸泡在电泳液中解旋20分钟。(3) 4℃电泳20分钟(25V,300mA)。4. 中和与染色:(1) 电泳结束,将胶板浸泡于中和液中,每次15分钟,共中和两次,注意更换中和液。(2) 取出胶板,置于染色架上,滴加5μg/ml的PI,暗处染色20分钟。(3) 蒸馏水脱色15分钟。5. 镜检和分析:(1) 在荧光显微镜下观察,绿光激发吸收滤片590nm。必要时照相记录。(2) 记数观察的细胞,记录彗星细胞出现的频率,用目镜测微尺测头长与全长,计算核DNA迁移距离。* * * * *使用两层凝胶法,经裂解、DNA解旋、电泳和中和得到湿琼脂糖凝胶片。将湿琼脂糖凝胶片置于冰冷无水乙醇中脱水10分钟,后置于空气中自发干燥。每人制备2张琼脂糖凝胶片。全部操作在采血后8小时内完成,操作过程中注意避光。脱水干燥的琼脂糖凝胶片装于含有干燥剂的载片盒中运回实验室。使用50μl 30μM的溴乙锭溶液染色、照相。使用单细胞凝胶电泳软件分析所有照片,每人随机测量100个以上细胞的尾长和olive尾矩,以尾长和olive尾矩的算术均数代表个体DNA损伤情况。

  • 广州科学家破解细胞“返老还童”障碍 维生素C打开多能干细胞治病之门

    近70年来,服用维生素C成为人们补充营养最普遍的做法。这种吃上去酸酸的药片似乎是万能的:女士用它美容养颜,男士用它保持精力,医生们用它来帮助患者缓解感冒症状、增强抵抗力,国外研究甚至发现它还可以改善心情。然而,维生素C的作用还远不止于此,日前,它的又一项功效被揭示。 12月2日,中国科学院广州生物医药与健康研究院院长裴端卿等科学家的一篇论文,以封面文章形式发表在国际权威学术期刊《细胞·干细胞》上。研究发现维生素C能够促进体细胞"变身"为诱导多能干细胞(IPS),从而扫除体细胞"变身"为诱导多能干细胞的分子障碍。 维生素C成为诱导多能干细胞这门最新科研领域的一把新钥匙。 ◎多能干细胞技术能够将任何一个阶段的细胞,恢复到只有受精卵胞才具备的多潜能阶段。这就好比让已经成熟的体细胞"变身",让衰老的细胞重新活一次 ◎在适当的诱导条件下,体细胞能变成具有胚胎干细胞一样分化潜能的多能干细胞,可以神奇地分化成特定组织的细胞,具有再生各种组织器官的潜在功能 ◎诱导多能干细胞技术这扇门并不是一推就开,原来其诱导有效率仅有万分之一,维生素C通过一种特殊酶降低分子障碍影响,提升细胞"变身"效率100倍

  • 【分享】细胞生长受什么因素影响?影响细胞生长的因素

    细胞在体外进行培养,失去了机体的调节和控制。因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境尽量接近活体的环境。外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长。 一、温度 一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃。温度过高或过低都会影响到细胞的生长。细胞耐受低温的能力比抗热的能力强,在低温下,细胞的代谢活力及核分裂降低。温度不低于0℃时,虽影响细胞代谢,但并无伤害作用;把细胞置于25~35℃时,细胞仍能生存和生长,但速度减缓;放在40℃数小时后,再置回37℃培养细胞仍能继续生长。但如果在40℃下暴露时间太长,对细胞生长不利,甚至变圆脱落于瓶壁。若温度过低,在降到冰点以下时,细胞因胞外水和胞质结冰而受损死亡。但若向培养液中加入甘油或二甲亚砜等保护剂,封入安瓿中后,置于液氮中,可起保护作用,此时细胞可耐受-70℃以下温度,能长期储存,解冻后细胞复苏,仍能继续生长增殖,细胞生物性状不受任何影响。此为保存细胞的主要手段。 高温对细胞培养不利。细胞在39~40℃培养1小时,能受到一定损伤,但仍有可能恢复,但不能忍受温度再升高2℃,持续数小时,即在41~42℃中培养1小时,细胞损伤严重,温度至43℃以上时细胞多数被杀死。高温主要引起酶的灭活、类脂质破坏,核分裂的破坏,产生凝固酶使细胞发生凝固,另外使蛋白质变性。因此,体外培养细胞时一定要避免高温。 二、渗透压 细胞在高渗溶液或低渗溶液中,可以立即发生皱缩或肿胀、破裂。所以,渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。哺乳动物和其他动物组织细胞体外培养的渗透压的维持主要与NaCl有关,但不能忽视其他电介质渗透压的关系。渗透压与单位体积溶媒内溶质的分子数和离子数成正比。为此,按一定比例控制培养液中离子平衡,维持正常渗透压是很重要的。这不仅是为了维持细胞张力,而且是为了调节细胞的代谢。因为细胞外离子输送和离子浓度改变着其他营养物质的输送(如氨基酸、蔗糖等),直接影响细胞基本合成系统。 理想的渗透压因细胞的类型及种族而异,人血浆渗透压为290mmol/L,被视为是体外培养人类细胞的理想渗透压。哺乳类动物细胞的渗透压一般为290~300mmol/L。人胚肺成纤维细胞为250~325mmol/L,鼠则为310mmol/L左右。在实际应用中,260~320mmol/L的渗透压可适于大多数细胞。

  • 流式细胞仪检测细胞增殖方法有哪些?

    [font=宋体][font=宋体]在生物学和医学研究中,细胞增殖是一个关键过程,对于理解生命活动的基本规律以及疾病的发病机理具有重要意义。随着科技的发展,流式细胞仪作为一种高效、灵敏的分析工具,广泛应用于细胞增殖的检测。流式细胞仪通过快速分析单个细胞,可以对细胞周期、细胞增殖活性、细胞凋亡等多个方面进行研究。本文将探讨流式细胞仪在检测细胞增殖方面的主要方法,包括但不限于溴脱氧尿苷([/font][font=Calibri]BrdU[/font][font=宋体])掺入法、细胞周期蛋白检测法以及细胞大小分析法等,以期为读者提供全面的技术应用概览。流式细胞仪检测细胞增殖方法:[/font][/font][b][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]3H[/font][font=宋体](氚离子)掺入法[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]原理:是在细胞[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成时,用[/font][font=Calibri]3H[/font][font=宋体]脱氧胸腺嘧啶核苷代替普通的脱氧胸腺嘧啶核苷掺入新合成的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]中,增殖的细胞因为掺入[/font][font=Calibri]3H[/font][font=宋体]而具有放射性,通过定量检测样品细胞的放射性大小而反映细胞的增值活性[/font][/font][font=宋体][font=宋体]缺点:[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体])使用的是具有放射性的同位素,操作较为复杂,同时需要采取放射性保护措施 [/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体])低比例高活跃增殖和高比例低活跃增殖可能得到的是相同的结果,用此方法无法进行鉴别 [/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体])此方法无法进一步得到具有活性的增值细胞用于下一步的研究 [/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]) 此方法时间较短,无法检测加入前细胞的增殖情况,而且检测到放射性只能说明细胞[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成,而不能提供合成[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的细胞是否进入增殖阶段的信息[/font][/font][b][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、相对计数法[/font][/font][/b][font=宋体]原理:将对照组和各实验组控制在相同条件下直接计数然后比较计数结果得到增殖结论[/font][font=宋体]注意点:[/font][font=宋体][font=宋体]对照组与实验组每种细胞所加浓度必须相同,每组至少设置[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个复孔,这样每个孔可以得到[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]个细胞数,将[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个复孔取平均值后就是这个组的结果。如果同时需要得到每孔目标细胞增殖后的绝对参数,在每孔细胞中加入[/font][font=Calibri]1*105PE[/font][font=宋体]标记的人工微球作为内参[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]收集各组的细胞于[/font][font=Calibri]EP[/font][font=宋体]管中,注意必须尽量将各组的所有细胞都收集起来。标记需要计数细胞的标志表型的荧光素偶联抗体,[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃静置[/font][font=Calibri]30min[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]PBS[/font][font=宋体]洗涤一次,洗去游离的抗体[/font][/font][b][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、示踪染料标记法[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]示踪染料与细胞结合的方式:[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体])能够与细胞内的蛋白质上的氨基发生非特异性的共价结合 [/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体])能够非特异性地嵌入细胞膜的脂质双分子层中与细胞发生非共价性结合[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]原理:示踪染料的荧光信号都很强,当细胞分裂时,母细胞内的染料会被平均分配到子细胞中,细胞荧光信号会被减弱一半,所以通过检测减弱的、发射示踪染料荧光信号的细胞比例就可以判断细胞增殖的强弱。当荧光强度减弱到标记时的[/font][font=Calibri]1/2[/font][font=宋体]以及以下的细胞都是增殖后的细胞,这些细胞所占比例越高则代表细胞增殖越活跃[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]标记方法:[/font][font=宋体][font=宋体]①纯化增殖反应的目标细胞,将细胞的浓度调整为[/font][font=Calibri]1*106/ml[/font][font=宋体],加入[/font][font=Calibri]CFSE[/font][font=宋体],其标记浓度为[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]微摩尔[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]升。置于[/font][font=Calibri]37[/font][font=宋体]℃水浴中标记[/font][font=Calibri]15min[/font][font=宋体],在标记过程中每隔一段时间混匀细胞一次[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②加入预冷、含有血清的培养基终止标记,在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃冰箱中静置[/font][font=Calibri]5min[/font][font=宋体],离心沉淀[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③用培养基再洗涤一次,尽量洗净未结合的游离的[/font][font=Calibri]CFSE[/font][font=宋体],然后将目标细胞静置在增殖体系中[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]BrdU[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]EdU[/font][font=宋体]掺入法[/font][/font][/b][font=宋体][font=Calibri]BrdU[/font][font=宋体]:[/font][font=Calibri]5-[/font][font=宋体]溴脱氧尿嘧啶核苷是胸腺嘧啶核苷的类似物,其特点是胸腺嘧啶环上[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]位[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]连接的甲基被溴取代,在细胞增殖[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成时可以与内源性的胸腺嘧啶核苷竞争掺入到新合成的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]中,而[/font][font=Calibri]BrdU[/font][font=宋体]抗体可以特异性的识别[/font][font=Calibri]BrdU[/font][font=宋体],不与胸腺嘧啶核苷结合,所以可以用于检测细胞增殖[/font][/font][font=宋体][font=宋体]适用范围:适用于体内检测目标细胞的增殖,一般将[/font][font=Calibri]BrdU[/font][font=宋体]掺入小鼠的应用水中或经腹腔注射,经过一段时间后,取出目标细胞制成单细胞悬液然后用多聚甲醛固定细胞,后用打孔剂皂苷在细胞膜上打孔,最后标记荧光素偶联抗[/font][font=Calibri]BrdU[/font][font=宋体]抗体,目标细胞的[/font][font=Calibri]BrdU[/font][font=宋体]阳性细胞就是增殖的细胞,阳性比例越高,增殖越活跃。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、其他方法[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]细胞周期法检测细胞增殖:流式细胞术能够检测细胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的含量,所以可以检测细胞周期。处于[/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期的细胞,[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的量处于二倍体和四倍体之间[/font][font=Calibri] [/font][font=宋体]处于[/font][font=Calibri]G2/M[/font][font=宋体]期时,[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]量为四倍体。处于[/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期和[/font][font=Calibri]G2/M[/font][font=宋体]期的细胞比例越高说明细胞增殖越活跃[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]PCNA[/font][font=宋体]检测细胞增殖:[/font][font=Calibri]PCNA[/font][font=宋体](增殖细胞核抗原),在细胞核合成且只存在于细胞核内,是[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]聚合酶的辅助蛋白,所以与细胞[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的合成关系密切,是反映细胞增殖状态的良好指标[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Ki-67[/font][font=宋体]检测细胞增殖:是一种与细胞增殖特异相关的核抗原[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]CD71[/font][font=宋体]检测细胞增殖:是转铁蛋白受体,表达于细胞的表面,该受体广泛表达于各种恶性肿瘤细胞表面,正常细胞表达较少,与肿瘤细胞的增殖密切相关[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service][b]流式细胞检测技术服务[/b][/url],更多关于流式细胞仪检测细胞增殖详情欢迎咨询,详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 应力松弛 产生的原因

    高分子材料在加工、贮存和使用过程中,由于受内外因素的综合作用,其性能逐渐变坏,以致最后丧失使用价值,这种现象就是老化。老化是一种不可逆的变化,它是高分子材料的通病。担是人们可以通过对高分子老化过程的研究,采取适当的防老化措施,提高材料的耐老化的性能,延缓老化的速率,以达到延长使用寿命的目的。(1)发和老化的原因主要是由于结构或组分内部具有易引起老化的弱点,如具有不饱和双键、支链、羰基、末端上的羟基,等等。外界或环境因素主要是阳光、氧气、臭氧、热、水、机械应力、高能辐射、电、工业气体(如、、、等)、海水、盐雾、霉菌、细菌、昆虫,等等。从结构上的原因来说,聚乙烯比聚四氟乙烯容易老化,因为C—F键的键能比C—H键的键能大,它起着保护碳链的作用。聚丙烯不如聚乙烯耐老化,这是因为聚丙烯的碳链上有甲基,甲基碳原子上的氢原子比较容易脱去。由于聚酰胺链上有羧基,聚酯纤维中的酯键容易水解,因此也容易老化。又如二烯烃聚合的橡胶中含C=C双键,容易发生热氧老化、光氧老化、臭氧老化。由于橡胶常在应力条件下使用,比较容易发生臭氧龟裂,因此臭氧老化是橡胶老化的主要原因。氯丁橡胶由于含有吸电子基的氯原子,因而较耐老化。聚合物由于结构上的弱点而在一定外界条件下发生的各种老化现象如前所述。有的聚合物没有上述情况也会发生老化,如受到辐射特别是高能辐射时,化学键就会发生断裂,即使是近紫外光辐射也能足够打开一般的单键(C—H、O—H那样的强键除外)。(2)防止老化的措施从发生老化的原因来看,一个主要原因是在高分子结构本身。因此,改善高分子的结构以提高老化的能力是很重要的。例如,橡胶在硫化以后,依然存在着不饱和双键,而橡胶制品在使用时又难于避免日光、氧气、臭氧等的侵蚀,所以人们研究合成新的品种就应避免或大大减少橡胶的高分子链上的双键。当纳塔①等人用络合催化剂定向聚合了聚乙烯以后,他们就预测可以用乙烯和丙烯两种单体经共聚制成弹性体,后来,果然合成了二元乙两橡胶,乙丙橡胶区别于其他合成橡胶在结构上的一大特点就是主链中不含双键,完全饱和,使它成为最耐臭氧、耐化学品、耐高温的耐老化橡胶。但是,乙丙橡胶也带来聚二烯橡胶所没有的缺点,如硫化速率慢,不易跟金属粘合等。于是人们又研究在乙丙橡胶上接上易硫化的第三单体,以提高硫化速率。目前,乙丙橡胶已成为合成橡胶中有发展前途的一个品种。高分子科学和生产工艺的发展,将不断地改进高聚物的性能,使它们延缓老化并延长使用寿命。其次是在合成材料加工过程中添加防老剂。如添加防止氧气或臭氧引起老化的抗氧剂,添加紫外光稳定剂、热稳定剂、防霉剂,等等。再次,还可以用物理防护的方法,如涂漆、镀金属、浸涂防老剂溶液等。总之,对聚合物的老化和防老化的研究是高分子科学和技术的一个重大问题。在选择单体、改进加工聚合方法、添加防老剂、保护制品表面等方面,虽已取得显著成果,但仍需进行深入的研究。我们在使用高分子材料制品时,也要注意保护,以延缓其老化。例如,湿的聚酯纤维衣服不宜在日光下曝晒,塑料雨伞、雨衣在使用后要擦干以防止因霉菌侵蚀而发霉,等等。但是,有些制品是难于避免这些外界因素的,如塑料地膜、塑料大棚上的薄膜、汽车轮胎、室外电缆包皮等都不能避免日晒雨淋以及氧气等的侵蚀。这就要依靠从高分子结构、加工等方面来提高质量以加强聚合物内部防老化的能力。

  • 什么是稳定细胞株?稳定细胞株常见问题解析

    [font=宋体][font=宋体]稳定细胞,又被称为静止细胞,是那些在生理状态下增殖不明显,处于细胞增殖周期静止阶段的细胞([/font][font=Calibri]G0[/font][font=宋体]期)。然而,当它们受到组织损伤的刺激时,这些稳定细胞会迅速反应,进入[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成前期([/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期),展现出强大的再生能力。它们是维持组织和器官稳态的关键因素。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]稳定表达细胞株,也被称为稳定转染细胞株,是一种特殊的细胞株。这些细胞能够持续、稳定地表达特定的基因或干扰特定基因的表达。在生物学和医学研究中,稳定表达细胞株被广泛应用于基因功能研究、药物筛选和疾病模型建立等领域。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]稳定细胞株平台的常见问题解答[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]①若想做稳定细胞株,需提供哪些信息?[/font][font=宋体][font=宋体]客户仅需提供目标蛋白的序列信息和希望表达的目标蛋白的区段,义翘神州技术人员会根据客户要求进行表达风险评估和制定表达纯化策略。常见蛋白序列信息来源包括[/font][font=Calibri]UniProt[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]NCBI[/font][font=宋体]等数据库。客户也可直接提供编码目标蛋白的核苷酸序列。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②稳定株细胞如何交付?[/font][font=宋体]采用干冰运输,尽可能减少温度波动对细胞造成的影响。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③单克隆和[/font][font=Calibri]pool[/font][font=宋体]怎么选择?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]成药蛋白需要单克隆,以便溯源。如只需拿到蛋白[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]抗体的话,[/font][font=Calibri]pool[/font][font=宋体]即可满足。需要提醒的是,通常情况下,[/font][font=Calibri]pool[/font][font=宋体]产量较单克隆低。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④稳定细胞株做重组蛋白,能否根据蛋白活性进行克隆筛选?[/font][font=宋体][font=宋体]是可以的,只要客户有完整的活性检测方法,我们可以提供[/font][font=Calibri]minipool[/font][font=宋体]供客户进行活性检测(或由义翘进行活性检测)。符合客户对活性的要求后再进行后续的实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤为什么要构建稳定细胞株?[/font][font=宋体]稳定株一个很大的优势是减小重组表达蛋白的批间差异,并且表达量通常比瞬转高。对于成药性抗体来说,构建稳定细胞株是十分必要的。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥为什么稳定细胞株构建周期较长?[/font][font=宋体]稳定株的构建周期长,很大程度是由于要筛选出阳性克隆,并需要对细胞株的稳定性进行检测。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑦制备稳定株表达蛋白的周期大致如何?[/font][font=宋体][font=宋体]如只需要[/font][font=Calibri]pool[/font][font=宋体]即可,从基因合成到得到纯化后的蛋白,周期一般在[/font][font=Calibri]7[/font][font=宋体]周左右。如需引入多步纯化方案,标签切除,以及额外检测服务则周期会根据具体项目情况有所延长。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][b]稳定细胞系构建服务[/b][/url],同时提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/stable-cell-line-development][b]稳定细胞株构建平台[/b][/url],详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/stable-cell-line-development[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 维生素C可以杀死一类顽固癌细胞

    有研究说足够浓度的维生素C可以杀死一类顽固癌细胞,对治疗胰腺癌、结肠癌和卵巢癌有疗效。所以多吃富含维生素C的蔬菜对健康很有帮助。

  • 【资料】乳中的细胞成分-体细胞

    [size=4][font=宋体]乳中所含细胞成分是白血球和一些上皮细胞,也有一些红血球。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=宋体]牛乳中的细胞数(体细胞)是乳房健康状况的一种指标。牛乳细胞数可作为衡量牛乳卫生品质的指标之一。一般正常牛乳细胞数不超过[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]50[/font][/size][size=4][font=宋体]万个[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]/[/font][/size][size=4][font=宋体]毫升。[/font][/size][size=4][/size][size=4][font=宋体]乳房炎的诊断标准[/font][/size][size=4][/size][table=660][tr][td=1,2,180][align=center][size=4][font=宋体]细胞数[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]/[/font][/size][size=4][font=宋体]万个[/font][/size][size=4][font=Times New Roman].mL[sup]-1[/sup][/font][/size][/align][/td][td=2,1,480][align=center][size=4][font=宋体]乳房中有害葡萄球菌与链球菌的检查结果[/font][/size][size=4][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,228][align=center][size=4][font=宋体]未检出[/font][/size][size=4][/size][/align][/td][td=1,1,252][align=center][size=4][font=宋体]检出[/font][/size][size=4][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,180][align=center][size=4][font=宋体]小于[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]50[/font][/size][/align][/td][td=1,1,228][align=center][size=4][font=宋体]正常[/font][/size][size=4][/size][/align][/td][td=1,1,252][align=center][size=4][font=宋体]潜在性乳房炎[/font][/size][size=4][/size][/align][/td][/tr][tr][td=1,1,180][align=center][size=4][font=宋体]大于[/font][/size][size=4][font=Times New Roman]50[/font][/size][/align][/td][td=1,1,228][align=center][size=4][font=宋体]分泌障碍[/font][/size][size=4][/size][/align][/td][td=1,1,252][align=center][size=4][font=宋体]乳房炎[/font][/size][size=4][/size][/align][/td][/tr][/table][size=4][font=Times New Roman] [/font][/size]

  • 【金秋计划】Nodakenin通过调节成骨细胞和破骨细胞的发生来减轻卵巢切除术所致的骨质疏松症

    [size=15px][color=#595959]骨质疏松[/color][/size][size=15px][color=#595959]症(OP)是一种以骨量减少和骨微结构损伤为特征的全身性骨代谢性疾病,它增加了骨脆性和骨折风险,与人口老龄化密切相关,患病率一直很高,正在成为全球关注的问题。此外,由于绝经后性激素水平急剧下降,女性的患病率远高于男性。目前临床治疗骨质疏松的药物包括特立帕肽、雌激素、降钙素、双膦酸盐等,主要目的是促进骨合成和防止骨吸收。这些药物在长期使用中经常会引起不良反应。因此,寻找一种安全有效的治疗方法尤为必要。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]紫花前胡苷(Nodakenin,NK)是从中药独活(RAB)中分离得到的一种呋喃香豆素类化合物。NK已被证明具有抗炎、抗菌、抗氧化和抗血小板聚集作用,并能改善认知功能。最近,研究发现NK通过调节线粒体改善软骨退变和炎症反应,提高软骨下骨体积,从而缓解骨[/color][/size][size=15px][color=#595959]关节炎[/color][/size][size=15px][color=#595959]。然而,NK对OP影响的相关研究尚未见报道。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]评价NK对OVX小鼠的抗骨质疏松作用,探讨NK对体外成骨细胞和破骨细胞形成的调控机制。[/color][/size] [size=15px][color=#595959]采用网络药理学、分子对接和分子动力学模拟技术来确定NK在[/color][/size][size=15px][color=#595959]骨质疏松症[/color][/size][size=15px][color=#595959]中的潜在靶点和通路。6-8周龄雌性C57BL/6J小鼠行卵巢切除术,术后8周给予不同剂量NK (5 mg/kg或20 mg/kg)灌胃治疗,连续6周。从4周龄C57BL/6J小鼠骨髓腔中分离并获得BMSCs和BMMs,进行药效观察及机制验证。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]通过测定碱性磷酸酶活性和各种成骨标志物的表达,发现NK处理显著促进骨髓间充质[/color][/size][size=15px][color=#595959]干细胞[/color][/size][size=15px][color=#595959]成骨分化,同时激活PI3K/AKT/mTOR信号通路。相比之下,PI3K[/color][/size][size=15px][color=#595959]抑制剂[/color][/size][size=15px][color=#595959]LY294002逆转了这些变化,抑制了NK的成骨分化作用。同时,通过下调c-Src和TRAF6抑制Akt和NFκB信号通路,从而有效抑制RANKL诱导的破骨细胞生成。此外,口服NK可显著提高小鼠骨量,改善卵巢切除(OVX)介导的骨微结构紊乱。[/color][/size] [align=center] [/align] [size=15px][color=#595959]这些数据表明NK通过促进骨生成和抑制破骨细胞生成来减轻OVX诱导的骨丢失。该研究可能为骨质疏松症提供潜在的治疗策略。[/color][/size]

  • CA 对 细胞状态的影响

    CA 对  细胞状态的影响

    [b][font='Times New Roman',serif]CA[/font]对[font='Times New Roman',serif]A549[/font]细胞状态的影响[/b][font=宋体]首先探究了 [/font]CA [font=宋体]对细胞生长状态的影响。以 [/font]A549 [font=宋体]细胞为例,设置了终浓度为[/font]0[font=宋体]、[/font]300 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]浓度梯度,并观察其在不同时间([/font]3[font=宋体]、[/font]9[font=宋体]、[/font]18 h[font=宋体])的细胞状态。如图 [/font]3-1 [font=宋体]所示,加入 [/font]CA [font=宋体]后细胞的状态发生了显著的变化,在 [/font]3 h [font=宋体]时就已经出现细胞形态的改变;当 [/font]18 h [font=宋体]时,细胞已经有死亡的迹象。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][align=center] [/align][font='Times New Roman',serif][/font][img=,523,261]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211171003382232_7794_3237657_3.png!w690x311.jpg[/img][font=宋体]图 [/font] CA [font=宋体]刺激 [/font]A549 [font=宋体]细胞,终浓度为 [/font]0 μM[font=宋体]、[/font]300 μM[font=宋体],不同时间细胞状态图[/font][b][font='Times New Roman',serif]CA[/font]对 [font='Times New Roman',serif]A549[/font]细胞活力的影响[/b][font=宋体]本文设置了终浓度为 [/font]0[font=宋体]、[/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300[font=宋体]、[/font]500[font=宋体]、[/font]1000[font=宋体]、[/font]1500[font=宋体]、[/font]2000[font=宋体]、[/font]3000 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]浓度梯度,细胞在 [/font]5% CO[sub]2[/sub][font=宋体]、[/font]37 ℃[font=宋体]的培养箱中无血清培养[/font]6 h[font=宋体],最终得出了浓度依赖型[/font][font=宋体]的曲线。如图 [/font]3-2 [font=宋体]所示,加入 [/font]600 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]对细胞的抑制率可达到 [/font]50%[font=宋体]左右;当 [/font]CA [font=宋体]加入浓度为 [/font]2.5 mM [font=宋体]时,细胞的存活率只有 [/font]20%[font=宋体];当 [/font]CA [font=宋体]的加入浓度为 [/font]3 mM [font=宋体]时,细胞[/font][font=宋体]已经死亡。[/font] [table][tr][td][img=文本框:,475,307]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211171003523300_7297_3237657_3.png!w690x370.jpg[/img][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][align=center]32[/align][font='Times New Roman',serif][/font][font=宋体]图 [/font] [font=宋体]不同浓度梯度([/font]0[font=宋体]、[/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300[font=宋体]、[/font]500[font=宋体]、[/font]1000[font=宋体]、[/font]1500[font=宋体]、[/font]2000[font=宋体]、[/font]3000 μM[font=宋体])[/font]CA [font=宋体]刺激 [/font]A549[align=center][font=宋体]细胞测的细胞活力曲线图[/font][/align])[b]蛋白免疫印迹分析[/b] [table][tr][td] [table=100%][tr][td][img=,553,349]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211171004059904_8264_3237657_3.png!w690x378.jpg[/img] [/td][/tr][/table] [/td][/tr][/table][font=宋体]以 [/font]A549 [font=宋体]为例,本文选用不同浓度([/font]0[font=宋体]、[/font]20[font=宋体]、[/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300[font=宋体]、[/font]500 μM[font=宋体])的 [/font]CA [font=宋体]处理[/font]1 h [font=宋体]后的细胞裂解液与生物素孵育,进一步进行免疫印迹分析。如图 [/font] [font=宋体]所示, [/font]Westerningblotting [font=宋体]分析表明,随着 [/font]CA [font=宋体]浓度增加,曝光后的条带逐渐加深,这进一步证明了 [/font]CA [font=宋体]已成功结合到蛋白上,从而在蛋白上引入可被酰肼生物素标记的醛基,同时也可进一步证明酰肼化学法能够实现[/font]CA [font=宋体]靶蛋白的标记。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]图 [/font] [font=宋体]一定浓度梯度([/font]0[font=宋体]、[/font]20[font=宋体]、[/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300[font=宋体]、[/font]500 μM[font=宋体])[/font]CA [font=宋体]刺激 [/font]A549 [font=宋体]细胞的免疫印迹结果和[/font][align=center][font=宋体]考马斯染色结果[/font][/align][font='Times New Roman',serif][/font][b][font='Times New Roman',serif]CA[/font]修饰肽段分析[/b][font=宋体]选用 [/font]50[font=宋体]、[/font]100[font=宋体]、[/font]300μM[font=宋体]的 [/font]CA[font=宋体]处理 [/font]A549[font=宋体]、[/font]K562[font=宋体]细胞,每个样品各做三次生物学重复并进行分析。如图 [/font]3-4[font=宋体]所示,在浓度 [/font]50μM[font=宋体]的 [/font]CA[font=宋体]刺激下,可从 [/font]A549[font=宋体]细胞鉴定到 [/font]16[font=宋体]个高可信度的 [/font]CA[font=宋体]修饰位点,从 [/font]K562[font=宋体]细胞鉴定到了[/font]32 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点;在 [/font]100 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]刺激下,可从 [/font]A549 [font=宋体]细胞中鉴定到 [/font]43 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点,从 [/font]K562 [font=宋体]细胞中鉴定到了 [/font]100 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点;在 [/font]300 μM [font=宋体]的 [/font]CA [font=宋体]刺激下,可从 [/font]A549 [font=宋体]细胞中鉴定到 [/font]264 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点,从 [/font]K562 [font=宋体]细胞中鉴定到了 [/font]355 [font=宋体]个高可信度的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点。[/font][font=宋体] [/font] [table][tr][td][img=,551,179]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/11/202211171004226161_3885_3237657_3.png!w690x461.jpg[/img][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体]图 [/font]CA [font=宋体]刺激 [/font]A549 [font=宋体]和 [/font]K562 [font=宋体]细胞,终浓度为 [/font]50 μM[font=宋体]、[/font]100 μM [font=宋体]和 [/font]300 μM [font=宋体]三次生物学重复鉴定[/font][font=宋体]到的 [/font]CA [font=宋体]修饰位点的韦恩图[/font]

  • T细胞培养的原理及方法:探索细胞因子在免疫反应中的关键作用

    [font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/research/car-t-therapy/car-t-cell-culture][b]T[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/research/car-t-therapy/car-t-cell-culture][b]细胞培养[/b][/url]是指在体外模拟体内环境,使[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞能够生存、生长和繁殖的一种技术。在[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞培养中,细胞被置于无菌、适宜温度、酸碱度和一定营养条件的环境中,以保持其活力和功能。[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞培养被广泛应用于免疫学、生物医学和药物研发等领域,是研究[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞功能、探索免疫反应机制的重要手段。通过[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞培养,科学家可以观察和分析[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞的增殖、分化、凋亡以及细胞因子分泌等过程,了解其在免疫应答中的作用。同时,[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞培养也为疾病治疗和预防提供了新的思路和手段,如免疫疗法、疫苗研发和细胞治疗等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞培养的原理[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]是通过复合抗体孵育标记脾脏细胞中除[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞以外的其他细胞,再用磁珠结合抗体,然后用磁极吸附磁珠,那剩下的就是没有结合磁珠的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞了。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]t[/font][font=宋体]细胞培养方法包括以下步骤:[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]①抗体包被培养板:用无菌[/font][font=Calibri]PBS[/font][font=宋体]制备[/font][font=Calibri]5~10 μg/mL[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]CD3[/font][font=宋体]抗体,然后在[/font][font=Calibri]96[/font][font=宋体]孔板的条件孔中,每孔加入[/font][font=Calibri]50 μL[/font][font=宋体]抗体溶液。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]②接种细胞:在抗体包被的培养板中接种[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞,然后将培养板置于[/font][font=Calibri]37[/font][font=宋体]℃培养箱中[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]小时或者提前一天准备培养板,置于[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃过夜。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]③洗涤和消化:在接种细胞之前,用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url]将培养孔中的[/font][font=Calibri]50 μL[/font][font=宋体]抗体吸出,然后用[/font][font=Calibri]200 μL PBS[/font][font=宋体]洗涤培养孔并弃去[/font][font=Calibri]PBS[/font][font=宋体]。重复此步骤以去除所有未交联的抗体。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]④细胞消化:将细胞培养瓶竖立放置,吸走培养基,如果培养基中的脱落细胞较多,说明细胞现在很容易脱落,只要加入[/font][font=Calibri]1ml[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]PBS+EDTA[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]0.02%[/font][font=宋体]),来回轻微晃动培养瓶直到细胞完全脱落,加入[/font][font=Calibri]10mlMEM[/font][font=宋体],混匀,不能吹打,分装[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]瓶。如果细胞没长满就脱落,则只需加入[/font][font=Calibri]5mlMEM[/font][font=宋体],不分装。如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固,培养基上清没有细胞脱落碎片,且细胞长满达到[/font][font=Calibri]80[/font][font=宋体]%以上,吸走培养基,加入[/font][font=Calibri]5ml[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]PBS+EDTA[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]0.02%[/font][font=宋体]),迅速轻微晃动,竖立培养瓶,吸走,加入[/font][font=Calibri]1ml0.05%[/font][font=宋体]胰酶,[/font][font=Calibri]37[/font][font=宋体]度消化不超过[/font][font=Calibri]3min[/font][font=宋体],细胞完全消化脱壁,取出加入[/font][font=Calibri]10ml[/font][font=宋体]培养基轻微吸打混匀,分装[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]瓶。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]⑤培养:将分装的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞接种到新培养瓶中,通常[/font][font=Calibri]T25[/font][font=宋体]加[/font][font=Calibri]10~12ml[/font][font=宋体]培养基培养,[/font][font=Calibri]2~3[/font][font=宋体]天左右换液一次,若培养基变黄及时换液,以维持一个相对稳定的培养条件,有利于细胞活正常生长。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]不管是我们实验室中常规的细胞培养,还是临床上的[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞治疗等,提高[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞的增殖和持久性,以及增强细胞再免疫抑制性[/font][font=Calibri]TME[/font][font=宋体]中的功能,都离不开细胞因子。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞因子是由免疫细胞(如单核、巨噬细胞、[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞、[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞、[/font][font=Calibri]NK[/font][font=宋体]细胞等)和某些非免疫细胞(内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等)经刺激而合成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质。具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长、[/font][font=Calibri]APSC[/font][font=宋体]多能细胞以及损伤组织修复等多种功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞因子可被分为白细胞介素[/font][font=Calibri](IL)[/font][font=宋体]、干扰素[/font][font=Calibri](IFN)[/font][font=宋体]、肿瘤坏死因子[/font][font=Calibri](TNF)[/font][font=宋体]、集落刺激因子[/font][font=Calibri](CSF)[/font][font=宋体]、趋化因子、生长因子[/font][font=Calibri](GF)[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞因子[/font][font=宋体]γ链共受体家族包括[/font][font=Calibri]IL-2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-7[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-9[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-15[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IL-21[/font][font=宋体],它们在[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞分化、增殖和内环境稳定中起着关键作用。他们受体包括共同的γ链(γ[/font][font=Calibri]c[/font][font=宋体])和一个各自单独的受体链,下游信号激活[/font][font=Calibri]STAT[/font][font=宋体]信号通路。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/featured-review/t-cell-culture-cytokines-treatment][b]细胞因子[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/featured-review/t-cell-culture-cytokines-treatment[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

  • 慢病毒构建稳转细胞系:原理、步骤与优势解析

    [font=宋体]慢病毒构建稳转细胞系的原理主要是利用慢病毒载体将外源基因导入宿主细胞,并实现外源基因的稳定表达。具体来说,构建稳转细胞系的核心是将慢病毒矢量载体导入宿主细胞中,慢病毒载体通常包含病毒的复制和包装组件,以及外源基因的表达调控序列。当慢病毒载体被导入宿主细胞后,它可以利用细胞的复制和转录机制将外源基因插入宿主细胞的染色体中,从而实现外源基因的稳定表达。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]构建稳定的慢病毒转染细胞系是在细胞中稳定表达外源基因的一种有效方法。下面是一般慢病毒构建稳定转染细胞系的步骤:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、选择慢病毒载体: 选择适当的慢病毒载体,通常是一个包含[/font][font=Calibri]LTR[/font][font=宋体]、包装信号、引导[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]序列和多功能质粒载体的质粒。这个载体应该包含要表达的外源基因。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、转染慢病毒包装细胞: 使用慢病毒包装细胞系,例如[/font][font=Calibri]293T[/font][font=宋体]或其他适合的细胞系。这些细胞通常被选择因为它们能够支持慢病毒复制和包装。将慢病毒载体与包装蛋白的表达质粒一同转染进这些细胞中。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、病毒产生和收集: 慢病毒包装细胞会开始产生慢病毒颗粒,这些颗粒包含了慢病毒载体和外源基因。培养一定时间后,收集细胞培养上清液,这是富含病毒的液体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、测定病毒滴度: 对采集的上清液进行病毒滴度的测定,通常可以通过转染一定数量的目标细胞,然后测定这些细胞的感染率来确定病毒的滴度。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、转染目标细胞: 将上一步获得的病毒用于转染目标细胞。这些目标细胞可以是要建立稳定转染细胞系的细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体]、筛选稳定细胞系: 添加适当的筛选物质,例如抗生素,以选择表达了外源基因的细胞。这可以通过在培养基中添加抗生素,使得只有表达了外源基因的细胞能够存活下来。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7[/font][font=宋体]、单克隆分离: 对稳定表达细胞群进行单克隆分离,以确保每个克隆都来自单一细胞。这有助于保持表达的一致性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8[/font][font=宋体]、验证表达: 对所得的单克隆细胞系进行验证,确认外源基因的表达水平和稳定性。这可以通过[/font][font=Calibri][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Western blotting[/font][font=宋体]等分子生物学技术来实现。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]通过这些步骤,可以建立一个稳定表达外源基因的慢病毒转染细胞系,为后续的实验和研究提供了有力的工具。这种方法常用于基因功能研究、药物筛选和基因治疗等领域。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]慢病毒构建稳转细胞系的优点:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]与常用的转染方法相比,慢病毒构建稳转细胞系有以下几个优点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①高效性:慢病毒能够将外源基因整合到宿主细胞基因组中,实现稳定的外源基因表达。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②特异性:由于慢病毒的感染和复制比较特异,只会影响一定类型的细胞,因此可以实现对具体细胞的选择性转染。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③安全性:慢病毒的基因转移速度较缓慢,对宿主细胞和人体的损伤较小,因此具有较高的安全性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][b]稳转细胞株构建服务[/b][/url],包含过表达细胞系构建服务和[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]稳定细胞株开发服务,详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service[/font][/font]

  • 【求助】细胞色素c循环伏安中出现的问题

    我以ITO导电玻璃作为电极,其表面经过3-氨丙基三乙氧基硅烷进行了修饰,然后浸在细胞色素c的磷酸盐缓冲溶液(pH=7)中经过一段时间的吸附。然后以此修饰了的ITO作为工作电极,铂为对电极,参比电极为甘汞电极,电解液为磷酸盐缓冲溶液(pH=7),做出的循环伏安曲线很漂亮。但是我发现随着扫描速的增加,其氧化还原电位差越来越大,也就是说两个峰都随着扫描速度的增加往两端移动,不知道是什么原因。理论上,其峰电位应该是不变的,希望各位大侠们不吝赐教,谢谢!!我用的是CHI660a。

  • 细胞因子及其受体的分类有哪些?

    [font=宋体]细胞因子一般是通过与细胞表面相应的细胞因子受体结合而发挥生物学作用。细胞因子与其受体结合后,会启动复杂的细胞内分子相互作用,最终引起细胞基因转录的变化。[/font][font=宋体]已知的细胞因子受体绝大多数是[url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/transmembrane-proteins][b]跨膜蛋白[/b][/url],由胞外、跨膜和胞质区组成。胞外膜区是识别结合细胞因子的部位,胞质区在受体激活后启动信号转导。下面为大家介绍下细胞因子及其受体的分类有哪些?[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]一、细胞因子的分类[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]([/font][font=宋体]一[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]根据细胞种类不同分类[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体])淋巴因子[/font][font=Calibri](lymphokine) [/font][font=宋体]主要由淋巴细胞产生,包括[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]淋巴细胞、[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞和[/font][font=Calibri]NK[/font][font=宋体]细胞等。重要的淋巴因子有[/font][font=Calibri]IL-2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-5[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-6[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-9[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-10[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-12[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-13[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-14[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IFN-[/font][font=宋体]γ、[/font][font=Calibri]TNF-[/font][font=宋体]β、[/font][font=Calibri]GM-CSF[/font][font=宋体]和神经白细胞素等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体])单核因子[/font][font=Calibri](monokine) [/font][font=宋体]主要由单核细胞或巨噬细胞产生,如[/font][font=Calibri]IL-1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-6[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-8[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]TNF-[/font][font=宋体]α、[/font][font=Calibri]G-CSF[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]M-CSF[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体])非淋巴细胞、非单核[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]巨噬细胞产生的细胞因子 主要由骨髓和胸腺中的基质细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞等细胞产生,如[/font][font=Calibri]EPO[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-7[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IL-11[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SCF[/font][font=宋体]、内皮细胞源性[/font][font=Calibri]IL-8[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]IFN-[/font][font=宋体]β等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]([/font][font=宋体]二[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]根据主要功能的不同分类[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体])白细胞介素[/font][font=Calibri](interleukin, IL) 1979[/font][font=宋体]年开始命名。由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子,在细胞间相互作用、免疫调节、造血以及炎症过程中起重要调节作用,凡命名的白细胞介素的[/font][font=Calibri]cDNA[/font][font=宋体]基因克隆和表达均已成功,已报道有三十余种[/font][font=Calibri](IL-1[/font][font=宋体]―[/font][font=Calibri]IL-38)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体])集落刺激因子[/font][font=Calibri](colony stimulating factor, CSF) [/font][font=宋体]根据不同细胞因子刺激造血干细胞或分化不同阶段的造血细胞在半固体培养基中形成不同的细胞集落,分别命名为[/font][font=Calibri]G([/font][font=宋体]粒细胞[/font][font=Calibri])-CSF[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]M([/font][font=宋体]巨噬细胞[/font][font=Calibri])-CSF[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]GM([/font][font=宋体]粒细胞、巨噬细胞[/font][font=Calibri])-CSF[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Multi([/font][font=宋体]多重[/font][font=Calibri])-CSF(IL-3)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SCF[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]EPO[/font][font=宋体]等。不同[/font][font=Calibri]CSF[/font][font=宋体]不仅可刺激不同发育阶段的造血干细胞和祖细胞增殖的分化,还可促进成熟细胞的功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体])干扰素[/font][font=Calibri](interferon, IFN) 1957[/font][font=宋体]年发现的细胞因子,最初发现某一种病毒感染的细胞能产生一种物质可干扰另一种病毒的感染和复制,因此而得名。根据干扰素产生的来源和结构不同,可分为[/font][font=Calibri]IFN-[/font][font=宋体]α、[/font][font=Calibri]IFN-[/font][font=宋体]β和[/font][font=Calibri]IFN-[/font][font=宋体]γ,他们分别由白细胞、成纤维细胞和活化[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞所产生。各种不同的[/font][font=Calibri]IFN[/font][font=宋体]生物学活性基本相同,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体])肿瘤坏死因子[/font][font=Calibri](tumor necrosis factor, TNF) [/font][font=宋体]最初发现这种物质能造成肿瘤组织坏死而得名。根据其产生来源和结构不同,可分为[/font][font=Calibri]TNF-[/font][font=宋体]α和[/font][font=Calibri]TNF-[/font][font=宋体]β两类,前者由单核[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]巨噬细胞产生,后者由活化[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞产生,又名淋巴毒素[/font][font=Calibri](lymphotoxin, LT)[/font][font=宋体]。两类[/font][font=Calibri]TNF[/font][font=宋体]基本的生物学活性相似,除具有杀伤肿瘤细胞外,还有免疫调节、参与发热和炎症的发生。大剂量[/font][font=Calibri]TNF-[/font][font=宋体]α可引起恶[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url],因而[/font][font=Calibri]TNF-[/font][font=宋体]α又称恶[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]素[/font][font=Calibri](cachectin)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体])转化生长因子[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]β家族[/font][font=Calibri](transforming growth factor-[/font][font=宋体]β [/font][font=Calibri]family, TGF-[/font][font=宋体]β [/font][font=Calibri]family) [/font][font=宋体]由多种细胞产生,主要包括[/font][font=Calibri]TGF-[/font][font=宋体]β[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]TGF-[/font][font=宋体]β[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]TGF-[/font][font=宋体]β[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]TGF[/font][font=宋体]β[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]β[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]以及骨形成蛋白[/font][font=Calibri](BMP)[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体])生长因子[/font][font=Calibri](growth factor,GF)[/font][font=宋体]如表皮生长因子[/font][font=Calibri](EGF)[/font][font=宋体]、血小板衍生的生长因子[/font][font=Calibri](PDGF)[/font][font=宋体]、成纤维细胞生长因子[/font][font=Calibri](FGF)[/font][font=宋体]、肝细胞生长因子[/font][font=Calibri](HGF)[/font][font=宋体]、胰岛素样生长因子[/font][font=Calibri]-I(IGF-1)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]IGF-[/font][font=宋体]Ⅱ、白血病抑制因子[/font][font=Calibri](LIF)[/font][font=宋体]、神经生长因子[/font][font=Calibri](NGF)[/font][font=宋体]、抑瘤素[/font][font=Calibri]M(OSM)[/font][font=宋体]、血小板衍生的内皮细胞生长因子[/font][font=Calibri](PDECGF)[/font][font=宋体]、转化生长因子[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]α[/font][font=Calibri](TGF-[/font][font=宋体]α[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、血管内皮细胞生长因子[/font][font=Calibri](VEGF)[/font][font=宋体]等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7[/font][font=宋体])趋化因子家族[/font][font=Calibri](chemokinefamily) [/font][font=宋体]包括四个亚族[/font][font=Calibri]:(1)C-X-C/[/font][font=宋体]α亚族,主要趋化中性粒细胞,主要的成员有[/font][font=Calibri]IL-8[/font][font=宋体]、黑素瘤细胞生长刺激活性[/font][font=Calibri](GRO/MGSA)[/font][font=宋体]、血小板因子[/font][font=Calibri]-4(PF-4)[/font][font=宋体]、血小板碱性蛋白、蛋白水解来源的产物[/font][font=Calibri]CTAP-[/font][font=宋体]Ⅲ和β[/font][font=Calibri]-thromboglobulin[/font][font=宋体]、炎症蛋白[/font][font=Calibri]10(IP-10)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ENA-78 (2)C-C/[/font][font=宋体]β亚族,主要趋化单核细胞,这个亚族的成员包括巨噬细胞炎症蛋白[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]α[/font][font=Calibri](MIP-1[/font][font=宋体]α[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MIP-1[/font][font=宋体]β、[/font][font=Calibri]RANTES[/font][font=宋体]、单核细胞趋化蛋白[/font][font=Calibri]-1(MCP-1/MCAF)[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MCP-2[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MCP-3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]I-309[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri](3)C[/font][font=宋体]型亚家族的代表有淋巴细胞趋化蛋白。[/font][font=Calibri](4)CX3C[/font][font=宋体]亚家族,[/font][font=Calibri]Fractalkine[/font][font=宋体]是[/font][font=Calibri]CX3C[/font][font=宋体]型趋化因子,对单核[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]巨噬细胞、[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞及[/font][font=Calibri]NK[/font][font=宋体]细胞有趋化作用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]细胞因子检测是判断机体免疫功能的一个重要指标!已被广泛用于疾病的诊断、病程观察、疗效判断及细胞因子治疗监测等。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体] [/font][/b][font=宋体]二、[/font][b][font=宋体]细胞因子受体分类[/font][font=宋体] [/font][/b][font=宋体][font=宋体]根据细胞因子受体的结构,可分为不同的家族或超家族,包括免疫球蛋白([/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体])超家族、[/font][font=Calibri]I[/font][font=宋体]型细胞因子受体、[/font][font=Calibri]II[/font][font=宋体]型细胞因子受体、肿瘤坏死因子受体[/font][font=Calibri](TNFR)[/font][font=宋体]超家族和趋化因子受体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①免疫球蛋白([/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体])超家族[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫球蛋白超家族([/font][font=Calibri]IgSF[/font][font=宋体])是指分子结构中具有与免疫球蛋白相似域的分子超家族。[/font][font=Calibri]IgSF[/font][font=宋体]的所有成员都含有[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]7[/font][font=宋体]个[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]样结构域,每个[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]样结构域含有约[/font][font=Calibri]70[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]110[/font][font=宋体]个氨基酸残基。它的二级结构是由两条反平行β[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]折叠状链形成的反平行β[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]片状平面,每条反平行β[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]片状链含有[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]个反平行β[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]折叠。每条反平行β片链由[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]个氨基酸残基组成。β片内侧的疏水氨基酸可稳定[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]的折叠。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]大多数[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]域有一个二硫键垂直连接两个β片,构成二硫键的两个半胱氨酸约含[/font][font=Calibri]55[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]75[/font][font=宋体]个氨基酸。少数[/font][font=Calibri]Ig[/font][font=宋体]域,如[/font][font=Calibri]CD2[/font][font=宋体]的第一域、[/font][font=Calibri]LFA-3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]PDGFR[/font][font=宋体]的第四域、[/font][font=Calibri]CD4[/font][font=宋体]的第三域等,均缺乏二硫键。这种多肽链的球形结构的折叠称为免疫球蛋白折叠([/font][font=Calibri]Ig fold[/font][font=宋体])。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]I[/font][font=宋体]型细胞因子受体[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]I[/font][font=宋体]型细胞因子受体又称造血素受体,是表达在细胞表面的跨膜受体,能识别细胞因子并对其作出反应,具有[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]条α[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]螺旋链。这些受体具有某些保守的胞外域,缺乏内在的蛋白酪氨酸激酶活性。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]保守的胞外域有大约[/font][font=Calibri]200[/font][font=宋体]个氨基酸的长度,其中在氨基末端区域含有四个位置保守的半胱氨酸残基和一个位于跨膜域近端的保守氨基酸基团([/font][font=Calibri]WSXWS[/font][font=宋体])。这四个半胱氨酸是维持受体结构和功能完整性的关键。[/font][font=Calibri]WSXWS[/font][font=宋体]共识序列是细胞因子受体功能性蛋白与蛋白相互作用的识别位点。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③[/font][font=Calibri]II[/font][font=宋体]型细胞因子受体[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]II[/font][font=宋体]型细胞因子受体又称[/font][font=Calibri]IFN[/font][font=宋体]受体,是表达在某些细胞表面的跨膜蛋白,它与一组选定的细胞因子结合并作出反应。通常Ⅱ型细胞因子受体是具有高亲和力和低亲和力成分的异二聚体或多聚体。这些受体一般由两条肽链组成,胞外区由[/font][font=Calibri]200[/font][font=宋体]个氨基酸残基组成,并含有[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]个不连续的半胱氨酸。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][font=Calibri]TNFR[/font][font=宋体]超级家族[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]肿瘤坏死因子受体([/font][font=Calibri]TNFR[/font][font=宋体])超家族成员是细胞因子受体的一个蛋白质超家族,共享一个半胱氨酸丰富域([/font][font=Calibri]CRD[/font][font=宋体]),由三个二硫键围绕[/font][font=Calibri]CXXCXXC[/font][font=宋体]的核心基团形成一个拉长的分子。目前[/font][font=Calibri]TNFR[/font][font=宋体]家族有[/font][font=Calibri]12[/font][font=宋体]个成员,包括[/font][font=Calibri]55kDa[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]75kDa[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]TNFR[/font][font=宋体],低亲和力的[/font][font=Calibri]NGFR[/font][font=宋体],人[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞抗原([/font][font=Calibri]CD40[/font][font=宋体])和[/font][font=Calibri]Fas[/font][font=宋体]抗原。该家族的共同特点是其胞外区有[/font][font=Calibri]Cys[/font][font=宋体]([/font][font=Calibri]4-6[/font][font=宋体])丰富的假重复基团,每个基团含有[/font][font=Calibri]40[/font][font=宋体]个氨基酸残基。细胞内域较短,由[/font][font=Calibri]44[/font][font=宋体]~[/font][font=Calibri]221[/font][font=宋体]个氨基酸残基组成,无同源序列。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤趋化因子受体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]趋化因子受体是在某些细胞表面发现并与趋化因子相互作用的细胞因子受体。人类已发现[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]种不同趋化因子受体,为[/font][font=Calibri]7[/font][font=宋体]次跨膜的[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]蛋白偶联受体,并在细胞内与[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]蛋白偶联进行信号转导,是[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]蛋白偶联受体家族成员之一。趋化因子受体与相应的配体结合后,引发细胞内钙([/font][font=Calibri]Ca2+[/font][font=宋体])离子通量(钙信号传导)。既而引起细胞反应,包括趋化作用过程开始,将细胞运送到生物体内的理想位置。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多细胞因子详情可以查看义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/category/cytokine-protein][b]细胞因子蛋白[/b][/url]:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/cytokine-protein[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font]

  • 细胞培养实验室常用的基本仪器设备-离心机

    [b][font=宋体]细胞培养实验室组建的基本要求[/font]:[/b]1[font=宋体]、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。[/font]2[font=宋体]、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。[/font]3[font=宋体]、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,为[/font]10[font=宋体]万级洁净环境的洁净室。而洗刷消毒工作设在洁净室外,避免物品污染洁净室内环境。细胞洁净室需要一个空调系统并对外界保持一定的正压。[/font]4[font=宋体]、解剖实验室主要用于对器官组织的分离,需要有无菌操作台、解剖显微镜、各种手术器材等。[/font] [align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/shiyanshilixinji/2018-10-12/301.html][img=实验室离心机]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2019-05-14/4b60dacaa256bcc4fe665e2eb3536c0a.jpg[/img][/url][/align][align=center][b]智能台式高速冷冻实验室离心机 3H24RI[/b][/align][font=宋体]组织细胞培养室除一般实验室的普通常规设备外,尚有一些特殊需要的设备。基本可分为两大类:[/font][font=宋体]第一类为常用的基本设备;[/font][font=宋体]第二类为较高级的特殊设备。[/font][b]1. [font=宋体]细胞培养实验室常用的基本仪器设备[/font]1.[font=宋体]显微镜:[/font][/b][font=宋体]倒置显微镜——是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。[/font][b]2.[font=宋体]培养箱:[/font][/b][font=宋体]体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多数情况下,最适温度是[/font]37[font=宋体]℃,温差变化一般不应超过±[/font]0.5[font=宋体]℃,细胞在温度升高[/font]2[font=宋体]℃[/font] [font=宋体]时,持续数小时即不能耐受,[/font]40[font=宋体]℃以上将很快死亡。因此需要有能控制温度的培养箱,如具有较高灵敏度的恒温培养箱及[/font]CO2[font=宋体]培养箱。[/font][b]3.[font=宋体]干燥箱:[/font][/b][font=宋体]用于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。[/font][b]4.[font=宋体]水纯化装置:[/font][/b][font=宋体]细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水:即使是用于玻璃器皿的冲洗,也应使用二次以上蒸馏水。[/font][b]5.[font=宋体]冰箱:[/font][/b][font=宋体]细胞培养室必须配备。[/font]a[font=宋体]、普通冰箱或冷藏柜——储存培养液、生理盐水等培养用的物品及短期保存组织标本。[/font]b[font=宋体]、低温冰箱([/font]-20[font=宋体]℃)——用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂,如酶、血清等。[/font][b]6.[font=宋体]细胞冷冻储存器:[/font][/b][font=宋体]储存器常用的是液氮容器。根据使用需要分为不同的类型及多种规格。选择购置液氮容器时要综合考虑容积大小,取放使用方便及液氮挥发量(经济)三种因素。[/font][b]7.[/b][font=宋体][url=http://www.hexiyiqi.com/][b]离心机[/b][/url][b]:[/b]进行细胞培养时,常规需要进行制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤、收集细胞等工作,通常需要使用[url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/shiyanshilixinji/]实验室离心机[/url]。一般可常规配置[/font]4000rpm[font=宋体]的国产台式离心机,例如细胞沉降,使用[url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/]低速离心机[/url]即可,离心力过大有时可能引起细胞的损伤。[/font][align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/69.html][img=低速离心机]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/taishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/0e080cd46b2ee061b55caabaaee8cbf2.jpg[/img][/url][/align][align=center][b]台式低速离心机TD5A[/b][/align][b]8.[font=宋体]天平:[/font][/b][font=宋体]常用的有扭力天平、精密天平及各种电子天平。[/font][b]9.[font=宋体]消毒器:[/font][/b][font=宋体]一般为高压蒸汽灭菌锅,直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。[/font][b]10.[font=宋体]滤器:[/font][/b][font=宋体]目前细胞培养工作中采用的培养用液,包括人工合成培养液、血清、消化用胰酶等常含有维生素、蛋白、多肽、生长因子等物质,这些物质在高温或射线照射下易发生变性或失去功能,因而上述液体多采用滤过消毒以除去细菌。目前常使用的滤器有玻璃滤器和微孔滤器,各种滤器有其使用原理和特点。[/font][b][font=宋体]常用的培养器皿:[/font][font=宋体]培养用器皿[/font][/b][font=宋体]是[/font][font=宋体]供细胞接种、生长等用的器皿,可由透明度好、无毒的中性硬质玻璃或无毒而透明光滑的特制塑料制成。[/font][font=宋体]细胞培养中需要的各种耗材[/font],[font=宋体]各类细胞培养板,细胞培养瓶,平皿移液管等。[/font][b][font=宋体]培养瓶[/font][/b][font=宋体]:由玻璃或塑料制成。主要用于培养、繁殖细胞。进行培养时培养瓶瓶口加盖螺旋瓶盖或胶塞,胶塞多用于密封培养。国产培养瓶的规格以容量([/font]ml[font=宋体])表示,如[/font]250ml[font=宋体]、[/font]100ml[font=宋体]、[/font]25ml[font=宋体]等;进口培养瓶则多以底面积([/font]cm2[font=宋体])表示。[/font][b][font=宋体]培养皿:[/font][/b][font=宋体]由玻璃或塑料制成,供盛取、分离、处理组织或做细胞毒性、集落形成、单细胞分离、同位素掺入、细胞繁殖等实验使用。常用的培养皿规格有[/font] 10cm[font=宋体]、[/font]9cm[font=宋体]、[/font]6cm[font=宋体]、[/font]3.5cm[font=宋体]等。[/font][font=宋体]多孔培养板:为塑料制品。可供细胞克隆及细胞毒性等各种检测实验使用。其优点是节约样本及试剂,可同时测试大量样本,易于进行无菌操作。培养板分为各种规格,常用的规格有:[/font]96[font=宋体]孔、[/font]24[font=宋体]孔、[/font]12[font=宋体]孔、[/font]6[font=宋体]孔、[/font]4[font=宋体]孔等。[/font][b][font=宋体]培养操作有关的器皿[/font][font=宋体]贮液瓶:[/font][/b][font=宋体]常见的为蓝盖瓶,主要用于存放或配制各种培养用液体如培养液、血清及试剂等。贮液瓶分为各种不同规格,如[/font]1000ml[font=宋体]、[/font]500ml[font=宋体]、[/font]250ml[font=宋体]、[/font] 100ml[font=宋体]、[/font]50ml[font=宋体]、[/font]5ml[font=宋体]等。[/font][b][font=宋体]吸管:[/font][/b][font=宋体]主要分为刻度吸管、无刻度吸管。刻度吸管主要用于吸取、转移液体,常用的有[/font]1ml[font=宋体]、[/font]2ml[font=宋体]、[/font]5ml[font=宋体]、[/font]10ml[font=宋体]等规格。无刻度吸管分为直头吸管及弯头吸管,除可以作吸取、转移液体外,弯头尖吸管还常用于吹打、混匀及传代细胞。[/font][b][font=宋体]加样器([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url])[/font][/b][font=宋体]:分为微量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]电动[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]。用于吸取、移动液体或滴加样本。可根据需要调节量的大小,吸量准确、方便。可保证实验样品(或试剂)含量精确,重复性良好。[/font][b][font=宋体]其他用品:[/font][/b][font=宋体]尚有收集细胞用的离心管,放置试剂或临时插置吸管用的试管,装放吸管以便消毒的玻璃或不锈钢容器,用于存放小件培养物品便于高压消毒的铝制饭盒或贮槽,套于吸管顶部的橡胶吸头,封闭各种瓶、管的胶塞、盖子、冻存细胞用的安瓿或冻存管、不同规格的注射器、烧杯和量筒以及漏斗,超净工作台使用的酒精灯,供实验人员操作前清洁消毒手使用的盛有酒精或其他消毒液的微型喷壶等。[/font][b][font=宋体]器械[/font][/b][font=宋体]主要用于解剖、取材、剪切组织及操作时持取物件。常用的有:手术刀或解剖刀、手术剪或解剖剪(弯剪及直剪),用于解剖动物、分离及切剪组织,制备原代培养的材料;眼科虹膜小剪(弯剪或直剪),用于将组织材料剪成小块;血管钳及组织镊、眼科镊(弯、直),用于持取无菌物品(如小盖玻片)夹持组织等;口腔科探针或代用品,用以放置原代培养之组织小块。[/font][b]2[font=宋体]、细胞培养实验室特殊设备[/font][/b][font=宋体]细胞培养实验室除了应配备上述的常用基本设备以外,如有条件,可添置一些特殊或先进的设备仪器,以便更有效、更精确、更深入地进行实验室工作。例如:[/font][font=宋体]([/font]1[font=宋体])酶联免疫检测仪——可用于进行免疫学测定及细胞毒性、药物敏感性检测等。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])[/font] [font=宋体]超低温冰箱([/font]-80[font=宋体]℃)——便于储存某些试剂及标本。[/font][font=宋体]([/font]3[font=宋体])旋转培养器——用于某些特殊细胞或需要收获大量细胞的培养。[/font][font=宋体]([/font]4[font=宋体])[/font] [font=宋体]荧光显微镜——进行荧光染色样本的观察。[/font][font=宋体]([/font]5[font=宋体])[/font] [font=宋体]流式细胞仪——可更精确及快速检测细胞。[/font][font=宋体]([/font]6[font=宋体])用于检测细胞培养条件的各种仪器,例如专门为快速分析细胞培养基中主要或关键营养成分、代谢产物及气体含量设计的多功能细胞培养分析仪、手提式[/font]CO2[font=宋体]浓度测定仪等。[/font][b][font=宋体]其余仪器[/font][/b][font=宋体]对于细胞实验还可能需要振荡器及磁力搅拌器用于混匀液体;还有一些沾满细胞的难清洗的不锈钢类或玻璃类器皿,则需要超声波清洗机的帮助;如果涉及免疫实验,肯定需要冰浴,碎冰的需求量大的话,则需要购买制冰机;另外破碎细胞可能会需要超声波细胞破碎仪;[/font]

  • 细胞免疫和体液免疫的区别和联系

    [font=宋体][font=宋体]细胞免疫和体液免疫,作为人体免疫系统的两大核心组成部分,各自承担着不同的功能,但同时又紧密相连,共同维护着人体的健康。细胞免疫主要通过[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]淋巴细胞来识别和清除被感染的细胞或癌细胞,而体液免疫则通过[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]淋巴细胞产生抗体来中和病毒或细菌。尽管它们在机制和功能上有所区别,但两者在免疫反应中相互协作,共同应对外来的病原体。了解它们之间的区别和联系,有助于我们更好地理解免疫系统的运作机制,并为疾病的预防和治疗提供新的思路。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]一、体液免疫和细胞免疫的作用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]体液免疫:用于产生抗体来达到保护目的的。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]细胞免疫:用于清除细胞内寄生微生物和排斥同种移植物或肿瘤抗原。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]二、体液免疫和细胞免疫的联系[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]体液免疫和细胞免疫各自有独特的作用,又相互配合,共同发挥免疫作用。对于细胞内寄生物,体液免疫首先起作用,阻止寄生物的传播感染,当寄生物进入细胞后,细胞免疫将抗原从细胞释放出来,再由体液免疫最后清除。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]三、体液免疫和细胞免疫的区别[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、起主要作用的细胞不同[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]体液免疫:起主要作用的细胞是[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞免疫:起主要作用的细胞是[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、作用对象不同[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]体液免疫:侵入内环境中的抗原。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]细胞免疫:被抗原入侵的细胞、自身的异常细胞和异体组织器官。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、作用方式不同[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]体液免疫:浆细胞(效应[/font][font=Calibri]B[/font][font=宋体]细胞)产生的抗体与相应病原体的抗原特异性结合,并使之发生进一步的变化(如形成沉淀)而被吞噬细胞吞噬,从而抑制病原体的繁殖或对人体细胞的黏附。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]细胞免疫:效应[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞与靶细胞密切接触,并释放穿孔素使靶细胞裂解。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services][b]多重荧光免疫组化([/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services][b]mIHC[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services][b])服务[/b][/url],更多详情可以查看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

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