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双氢链霉索

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双氢链霉索相关的论坛

  • 【资料】双缩脲试剂

    双缩脲结构双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成.  双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液;  双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。  双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。  具体方法是:  先将双缩脲试剂A加入组织样液,摇荡均匀(必须营造碱性环境),在加入双缩脲试剂B,摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的化合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。   双缩脲(NH2CONHCONH2)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。   双缩脲试剂本是用来检测双缩脲,因蛋白质中也有-CONH-基也可用于检验蛋白质,与蛋白质接触后的颜色呈紫色。

  • 【资料搜集】霜霉威检测方法

    霜霉威检测方法1.分析目标化合物霜霉威、霜霉威盐酸盐2.仪器设备带碱热离子检测器或高灵敏度氮磷检测器的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]—质谱仪。3.试剂使用附录2所列试剂。4.标准品霜霉威:含霜霉威99%以上,熔点为45℃~55℃。5.试验溶液的制备谷类:将样品粉碎,通过420μm的标准网筛后,称取其20.0g,加入30mL 1mol/L盐酸,放置2小时。水果和蔬菜:准确称取约1 kg样品,必要时定量加入适量水,搅碎混合均匀后,称取相当于20.0g样品的量。加入80 mL丙酮:水(7:3)混合溶液(谷类为50mL),搅拌5分钟后,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物,加入50mL丙酮:水(7:3)混合溶液,搅拌5分钟后,按上述同样操作,合并滤液于减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约40mL。将其移入预先注入50mL乙醚和5g氯化钠的200mL分液漏斗中,振摇混合1分钟后,静置,弃去乙醚层。水层中加入50mL乙醚,按上述同样操作,水层移入200mL分液漏斗中。水层中加入5g无水碳酸钠(谷类为8g)和50mL乙醚,用振荡器激烈振荡5分钟后,静置,乙醚层移入200mL三角瓶中。水层中加入50mL乙醚,按上述同样操作,重复2次,合并乙醚层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠,不时振摇、混合,放置15分钟后,滤入磨口减压浓缩器中。再用10ml乙醚洗涤三角瓶,以此洗液洗涤滤纸上的残留物,重复操作两次。合并两洗液于减压浓缩器中,40℃以下浓缩至约1mL,室温下通空气进一步干燥。残留物中加入乙酸乙酯溶解,准确至1mL,此为试验溶液。6.操作方法a 定性试验按下列操作条件进行试验,试验结果应与标准品的一致。操作条件柱:内径0.25mm、长30m的石英毛细管,涂布0.25μm厚[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]用14%氰丙基苯基—甲基硅酮,老化。柱温:在60℃保持1分钟,此后每分钟升温10℃。到达160℃后保持2分钟,再每分钟升温4℃。到达180℃后每分钟升温20℃,到达260℃后保持5分钟。进样器温度:250℃进样方式:不分流检测器温度:250℃气体流量:以氦气作载气。调节流速使霜霉威约14分钟30秒流出。调节空气和氢气的流量至适当条件。b 定量试验根据与a 定性试验相同试验条件所得的试验结果,峰高法或峰面积法定量。c 确证试验按照与a 定性试验相同的试验条件,用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]—质谱仪测定,试验结果应与标准品的一致。此外,必要时用峰高法或峰面积法进行定量。7.定量限0.01 mg/kg8.注意事项霜霉威的分析值包括霜霉威和霜霉威盐酸盐。9.参考文献无

  • 【原创大赛】“双仪器串联法”判断原子荧光中的干扰

    【原创大赛】“双仪器串联法”判断原子荧光中的干扰

    原子荧光中的干扰问题,往往被仪器使用者所忽视。一般情况下很难对干扰进行判断和分析。俺最近查阅国内原子荧光的书籍合文献,书中对原子荧光的干扰问题讲解的相对较少,而且雷同。其中最有价值的就是郭小伟教授所采用的“双发生器法”判别氢化物法中的干扰为液相干扰还是气相干扰。下面我简单介绍一下郭小伟教授的方法,其所用设备见图1,http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111262145_333270_1644065_3.jpg将两个性能基本一致的发生器的出口相连接再引入原子化器中,其实验步骤如下:1、 在A发生器中加入被测元素M及共存元素N,在B发生器中加入空白溶液,测得信号值为A合。2、 A发生器中加入被测元素M,B发生器中加入干扰元素N,测得信号为A分。3、 A发生器中加入被测元素M,B发生器中加入空白溶液,测得信号为A标。根据测量的结果即可判断出干扰属于气相干扰还是液相干扰。判断的准则见表1.http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111251731_332998_1644065_3.jpg以上为郭小伟教授介绍双发生器法的全部,我在两本书上看到的内容几乎一样,一字不差,有点小悲哀。 其实上述内容俺看了很多遍,多了不敢说,五遍肯定是有了,第一遍看完,哦;第二遍看完,没感觉;第三遍看完,原来两本书的内容一样;第四遍看完,开始深入的了解这个问题;第五遍看完,开始思考这个问题,如何去重现一下郭小伟教授的实验过程。这也是我多年来学习的一个方法。也许你看了很多遍,也是如果你自己不亲自实验一下的话,你的体会就没那么深刻。 但是从那里去找如图一的装置呢?这是我遇到的一个难题。本想就此放弃。但最近一段事件,这件事一直在我脑海中萦绕,我一定要把这个问题解决了,天天想,夜夜想,有时候做梦也想。最后,终于让我想到了一个办法,啥办法呢?我想把我们实验室的两台原子荧光串联起来,是否可以重现郭小伟教授的实验呢?俺起了一个名字,叫“双仪器串联法”。 有了想法就赶紧动手吧。首先介绍一下俺实验室的原子荧光,一台是AFS830,见图2http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111251732_333000_1644065_3.jpg一台是AFS933,见图3,(图片都是用手机拍的,不清楚之处请多见谅),http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111251733_333001_1644065_3.jpg找了相应的接头,不知道这接头叫啥,见图4,这种接头两个;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111251734_333003_1644065_3.jpg还有一种接头,见图5,一个,也不知道叫啥;http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111251735_333004_1644065_3.jpg这个知道,叫三通,一个。管线大概一米,见图6。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/11/201111251737_333005_1644065_3.jpg首先看看这两个气液分离器,830的气液分离器见7[

  • 双联铜网怎么制样?

    各位老师,实验室要做磁性样品(~100nm),但是做电镜的老师要求用双联铜网,请问各位老师,这个双联铜网该怎么制样?主要的困惑点在于:1、双联铜网的孔一边大,一边小,样品滴加在哪一边?2、样品的浓度一般多大合适?3、怎么把双联铜网扣到一起?感觉铜网上的碳膜很容易碎。谢谢各位大佬!

  • 【求助】关于双柱塞串联泵的疑问

    什么是双柱塞串联泵?是两个泵串联还是两个柱塞杆串联?一个泵控制一个柱塞杆还是两个柱塞杆?是一个泵对应一个泵头吗?请各位大侠指点。

  • 【原创】初恋就像是一条DNA双链,以后的对象都遵循着半保留复制的原则.

    我从小学三年级就对班里的班长有了好感,一直同班到初中.不知道从什么时候起好感变成了暗恋.皇天不负有心人终于在初三那年通过小纸条我们开始了初恋,就像一条双链DNA彼此连接在一起..不幸的是中考分数就像该死的DNA解链酶..让人不解的是在以后的多个女朋友中都能找到以前初恋女友的身影..难道这就是DNA的半保留复制原则?不知道各位板油也是这样?

  • DNA双链可否用于MALDI-TOF MS分析?

    求问各位大侠,22bp寡核苷酸杂交后经过C18洗脱后发现没有双链,只剩下单链部分,求问是MALDI-TOF只能分析DNA单链还是因为C18洗脱的时候双链解开呢?我是用灭菌水淋洗,然后用ACN:H2O=1:1洗脱的。

  • 榴莲配酒变夺命砒霜,致酒精中毒血压飙升

    最近,有网友在微博里提到,一位小伙子在泰国旅游的时候,吃了很多榴莲,之后又喝了酒,结果引发心脏病猝死,年仅28岁。而且,微博里还提到,泰国有明确规定,使用大量榴莲后,8小时之内是不能饮酒的。  一口榴莲一口酒,不要以为这样很爽,一不小心可能命都丢了。这榴莲加酒,怎么就变成了夺命砒霜了呢?因为榴莲含有硫的化合物,这种物质能够使乙醛脱氢酶的活性降低70%以上,也就是说不能把酒精完全代谢成对人体无害的乙酸。饮酒之后,正是因为人体分泌了乙醛脱氢酶,酒精才能被消化,进而排出体外。可是榴莲却抑制了这种酶的产生,吃完榴莲再喝酒,人就更容易喝醉,甚至引起酒精中毒。当然了,医生也说,这种情况只有在食用大量榴莲,才有可能发生,只要不过量,大伙不必过于担心。但是,也要特别提醒一下糖尿病患者,榴莲加酒,危险更高!糖尿病病人应该吃含糖量不高的水果,但榴莲含糖量非常高,吃了以后血糖明显升高,如果这时候再饮酒,引起血压升高,血糖也升高,对心脑血管产生危害,严重会导致中风心梗。

  • 请教双填充柱如何并联

    我们想分析二氧化碳里面的甲烷及非甲烷总烃含量,看到网上有双填充柱并联但检测的仪器。我现在是福立双填充柱双检测器的仪器,只有一个放大版。我怎么改成双填充柱并联但检测器。这个填充柱并联用的是什么接头并联的啊。我在网上没有见过。谁能告诉我在哪里能买到。我是不是还需要个十通阀啊。哎,不知道怎么改。又不舍得花钱请别人

  • 纯镁双喷总是出现筛子孔,怎么回事。。。

    喷了几次了,总是出现筛子孔。孔经常先在样品边缘出现,然后才在中间出现,并且需要等待几十秒才能透光。。。这是怎么回事,求指点!还有就是束流用大的还是用小的?样品时变形态高纯镁(沿挤压方向压缩的纯镁挤压棒),圆片厚度50-60微米双喷液是5.3g氯化锂+11.16g高氯酸镁+100mL乙二醇丁醚+500mL甲醇双喷温度-55℃~-30℃(这个温度段的都试过),电压100v,电流50毫安左右

  • 【转】双酶切连接反应之全攻略

    前一阵子一直在做双酶切质粒重组,失败了 很多次,不过很快改善了 实验方法,用2周重组了 14个质粒。现就自己的体会,结合战友的宝贵经验,谈一下质粒重组的一些个人经验。1、回收PCR产物:在进行PCR扩增时候,给引物两端设计好酶切位点,一般说来,限制酶的 选择非常重要,尽量选择粘端酶切和 那些酶切效率高的限制酶,如BamHI,HindIII,提前看好各公司的双切酶所用公用的BUFFER,以及各酶在公用BUFFER里的效率。选好酶切位点后,在各个酶的两边加上保护碱基双酶切时间及其体系:需要强调的是很多人建议酶切过夜,其实完全没有必要,我一般酶切3个小时,其实1个小时已经足够。应用大体系,如100微升。纯化问题:纯化PCR产物割胶还是柱式,我推荐柱式,因为割胶手法不准,很容易割下大块的胶,影响纯化效率。现在的柱式纯化号称可以祛除引物,既然如此,酶切掉的几个碱基肯定也会被纯化掉了。所以,PCR产物和双酶切产物的纯化均可应用柱式纯化。我用的是TAKARA的纯化柱试剂盒酶量的问题:以TAKARA的为例,其对1单位酶的定义如下:在50 μl 反应液中,30℃温度下反应1小时,将1 μg 的λDNA完全分解的酶量定义为1个活性单位(U)。 而该酶浓度约为15单位/微升,在除外酶降解的 因素外,该酶可分解15μg的DNA,而一般从1-4ml菌液提出的 DNA约为3μg,而PCR纯化后的产物(50体系)约为3μg,所以即便全部加进去,只要纯化的 质量好,酶切完全切得动。2、酶切、回收后的PCR产物与载体的连接摩尔比的计算,很多人凭经验也可以。但对于初学者从头认真计算则 非常有必要。回收的载体片段:回收的PCR产物片段=1:10 ,一般取前者0.03pmol,后者取0.3pmol。pmol为单位的DNA转换为为µg单位的DNA:(X pmoles×长度bp×650)/ 1,000,000 (注:长度bp×650是该双链DNA的分子量)所得数值即为µg,也可以直接用这个公式套.1pmol 1000bp DNA=0.66μg,如载体是5380bp,则0.03pmol为0.03×5.38×0.66=0.106524µg。测DNA浓度可以在专用机子上测,注意OD值,一般约1.8-2.0.另外,如果嫌麻烦,也可用MARKER进行估测,如MARKER2000,5微升的 MARKER每个条带约50ng。连接反应:TAKARA的 连接酶上的 说明写的过夜,而其对连接酶单位的定义为:在20 μl的连接反应体系中,6 μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时,有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。而它的浓度为350 U/μl ,所以完全够用。连接酶容易失活,注意低温操作,最好在冰上。时间3个小时足已。3、转化:a、全量(10 μl)加入至100 μl JM109感受态细胞中,冰中放置30分钟。 b、42℃加热45秒钟后,再在冰中放置1分钟。 c、加入890 μl AMP阴性培养基,37℃振荡培养60分钟。 取100μl铺板。也可离心后余100μl

  • 双人双锁的规定

    请教各位,我们实验室的试剂药品室门上装了两把锁,这样符不符合双人双锁的规定?

  • 双酶切连接反应之全攻略

    前一阵子一直在做双酶切质粒重组,失败了 很多次,不过很快改善了 实验方法,用2周重组了 14个质粒。现就自己的体会,结合丁香园战友的宝贵经验,谈一下质粒重组的一些个人经验。1. 回收PCR产物 在进行PCR扩增时候,给引物两端设计好酶切位点,一般说来,限制酶的 选择非常重要,尽量选择粘端酶切和 那些酶切效率高的限制酶,如BamHI、HindIII,提前看好各公司的双切酶所用公用的BUFFER,以及各酶在公用BUFFER里的效率。选好酶切位点后,在各个酶的两边加上保护碱基,其原则可参照:http://img.dxy.cn/upload/2006/08/13/31219184.pdf。双酶切时间及其体系:需要强调的是很多人建议酶切过夜,其实完全没有必要,我一般酶切3个小时,其实1个小时已经足够。应用大体系,如100微升。纯化问题:纯化PCR产物割胶还是柱式,我推荐柱式,因为割胶手法不准,很容易割下大块的胶,影响纯化效率。现在的柱式纯化号称可以祛除引物,既然如此,酶切掉的几个碱基肯定也会被纯化掉了。所以,PCR产物和双酶切产物的纯化均可应用柱式纯化。我用的是TAKARA的纯化柱试剂盒。酶量的问题:以TAKARA的为例,其对1单位酶的定义如下:在50 μl 反应液中,30℃温度下反应1小时,将1 μg 的λDNA完全分解的酶量定义为1个活性单位(U)。 而该酶浓度约为15单位/微升,在除外酶降解的 因素外,该酶可分解15 μg的DNA,而一般从1-4 ml菌液提出的 DNA约为3 μg,而PCR纯化后的产物(50体系)约为3 μg,所以即便全部加进去,只要纯化的 质量好,酶切完全切得动。2. 酶切、回收后的PCR产物与载体的连接摩尔比的计算,很多人凭经验也可以。但对于初学者从头认真计算则 非常有必要。回收的载体片段:回收的PCR产物片段=1:10 ,一般取前者0.03 pmol,后者取0.3 pmol。pmol为单位的DNA转换为为μg单位的DNA:(X pmoles×长度bp×650)/ 1,000,000 (注:长度bp×650是该双链DNA的分子量)所得数值即为μg,也可以直接用这个公式套.1 pmol 1000 bp DNA=0.66 μg,如载体是5380 bp,则0.03 pmol为0.03×5.38×0.66=0.106524 μg。测DNA浓度可以在专用机子上测,注意OD值,一般约1.8-2.0,另外,如果嫌麻烦,也可用MARKER进行估测,如MARKER2000,5微升的 MARKER每个条带约50 ng。连接反应:TAKARA的 连接酶上的 说明写的过夜,而其对连接酶单位的定义为:在20 μl的连接反应体系中,6 μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时,有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。而它的浓度为350 U/μl ,所以完全够用。连接酶容易失活,注意低温操作,最好在冰上。时间3个小时足已。3. 转化a. 全量(10 μl)加入至100 μl JM109感受态细胞中,冰中放置30分钟。b. 42℃加热45秒钟后,再在冰中放置1分钟。c. 加入890 μl AMP阴性培养基,37℃振荡培养60分钟。取100 μl铺板。也可离心后余100 μl。几个非常重要的问题1. 做转化的时候,进行酶连接反应时,注意保持低温状态,因为LIGASE酶很容易降解,为保险起见,一般连接3小时,16度。2. 对含有AMP-RESISTENCE的质粒铺板时,注意加AMP时的温度,温度过高,会使克隆株无法筛选出来.我的方法是培基高温消毒后放在烤箱里,烤箱一般温度为55-60度,然后做的时候拿出来,这样好掌握温度。铺板前后注意用吹风机吹干。3. 对照的设立:为验证双酶切是否成功,可做如下对照:A 酶切反应时加各单酶分别切,两管,用同一种BUFFER,跑胶,看单切的两管是否成线性,如两管均成线性可初步判断双酶切成功。做转化时也要进行对照。设4个:A. 即拿双酶切的质粒产物也进行连接反应,这个对照可进一步看双酶切是否成功,如果长出克隆,说明很有可能只进行了单酶切,如没长出克隆,则证明双酶切成功,当然要保证感受态,培养基、连接酶都'正常'的情况下。B. 酶切过的未进行连接反应的双酶切产物,进行转化,这一步可以证明是否有残留的未被任何酶切的原始质粒。C. 设原始质粒为对照,意为检测整个操作过程中是否有误。D.AMP阴性板上用同一批感受态细胞铺板20微升足够,检测感受态状况。4. 所有的试剂切记低温保存 一步一个脚印,不要偷懒,图省事最后却更费事,注意设立对照。经PCR鉴定,克隆90%-100%的阳性率,所以在后面的 挑克隆中,我只挑选4个就足够了。然后双酶切鉴定,测序。

  • 【求助】(ok)文献双甲基丙烯酸二缩三乙二醇酯的合成及其强迫增容作用

    标题:出处:安徽大学学报:自然科学版 1999年23卷3期作者:聂康明[1] 李蕤[2] [1]安徽大学化学系 [2]合肥联合大学化工系 摘要:以甲基丙烯酸和二缩三乙二醇为原料,合成用于制备PP/PnBA IPN共混材料的交联剂--双内烯酸二缩三乙二醇酯,应用傅里叶红谚氢核磁共振谱(H-NMR)表征了产物的化学结构,分析表明,填充互穿聚合物组合组分的相容性交联剂的化学结构有关,长链柔顺性罗好的双人烯酸二缩三乙二醇酯使填充IPN共混体系双组分的Tg值内移程度较大,表现出较好的强迫增容效果。

  • 串连双柱塞泵和并联双柱塞泵的优劣势

    串连双柱塞泵和并联双柱塞泵的优劣势

    [font='Microsoft YaHei',Arial,Helvetica][size=14px][color=#000000]大神们,液相色谱的用的高压泵就是柱塞泵,我看是两个柱塞杆串联组成一个泵头,其中一个柱塞杆有单向阀,另一个没有单向阀,来保持液体的连续性。后来我发现也有双柱塞杆并联的组成一个泵头也可以实现液体的连续性,下面这张图片很好的说明了串连和并联的原理,但是不懂他们的优缺点,查阅资料说的是并联脉冲小,噪音小,但是实验室waters用的还是串连方法,能帮我解答下他们的优缺点和应用场合吗,谢谢[img=,690,348]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/08/202008250931106108_6999_4215224_3.jpg!w690x348.jpg[/img][/color][/size][/font]

  • 西门庆亲切会见木子美

    乱弹社七月初七电:艳阳高照,菊花绽放,七月的西门府一派生机勃勃景象。上午九时,身着红色长袍的西门庆在府前广场迎接木子美——汽车徐徐开来,停住,车门打开,人未露面,一双玉腿先探了出来,搜索地面,脚踏实地后,长发披肩、一袭红色旗袍的木子美从车厢里抽出来。她高高的,瘦瘦的,婀婀娜娜地往前走。等候多时的男孩A和女孩B上前敬献了鲜花。在数十架照相机的咔嚓声中,西门庆和木子美亲切握手,相互问好。  木子美率领的相亲团是应西门庆之邀来访的。陪同木子美前来相亲的有网络名人流氓燕、芙蓉姐姐等;西门府参加接见的有西门府办公厅主任、西门庆之妻月娘,二房李娇儿、三房孟玉楼、四房孙雪蛾、五房潘金莲等。西门庆和木子美登上观景台,西门府前燃放鞭炮,乐队高奏歌曲《好日子》。  欢迎仪式结束后,宾主双方在西门府会客大厅进行了交谈。  西门庆说,我在网上看到木子美的征婚启事后,就立即发去了电子邮件,详细介绍了我的基本情况,并用附件发去了六幅照片,表达想和木子美结交的强烈愿望。西门庆认为,双方若能相识、相爱,结为连理,符合双方的共同利益,能够达到双赢的目的。在谈到男女关系时,西门庆强调,我一贯主张,每个人都有根据自身生理和感情需求选择一个或多个性伙伴的自由,也有选择异性性伙伴或同性性伙伴的自由,更有终生不选择性伙伴的自由,外人无权干涉。那种把自己的性取向强加于别人的做法,是荒唐的,可笑的,令人生厌的。  西门庆说,我和我成群的妻妾共同邀请木子美来访,表明我方非常愿意和木子美能成为一家人。看了木子美所说的“我不愿再重复没有结果的恋情”,我深感心疼,今天我保证,只要木子美愿意,马上我们就可以去民政部门登记结婚;木子美要求“那男人要开明,有主见,经济独立,不能以出名为目的,但也不能怕出名”,这几条我完全符合。希望木子美加紧对我考察、了解、切磋,早日成就一段继我和潘金莲后又一风流佳话。  木子美对西门庆的观点表示完全赞同。她在会谈时说,我之所以从几千应征者中选择与西门庆见面,就是看中了他的爱情观和道德观;就是看中他敢爱敢恨的勇气,敢于横刀夺爱的风采;就的看中了他会关心、会疼爱女人。所以我不介意他是一个经历复杂的人,我也是一个经历复杂的人,他会更懂得我的心态。  木子美在展望未来时说,我相信,西门庆和我今后会进一步加强互访,充分挖掘两人在各个领域,尤其是身体领域的合作交流,本着互通有无、互惠互利的原则发展恋爱关系,进而走入婚姻殿堂。结婚后,我和月娘、李娇儿、孟玉楼、孙雪娥、潘金莲,团结在以西门庆为中心的西门府,一定会其乐融融,和谐相处。  木子美相亲团一行的访问为期三天。当晚,西门庆在自己的双人床上招待了木子美。

  • 双缩脲法测定蛋白质浓度

    目的]掌握双缩脲法测定蛋白质浓度的原理和标准曲线的绘制。[align=center]原理][/align][align=center]双缩脲(NH2CONHCONH2)在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色化合物,称为双缩脲[/align][align=center]反应,蛋白质分子中含有许多肽键(-CONH-)在碱性溶液中也能与Cu2+反应产生紫红色化合物。在一定范围内,其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比。因此,可以利用比色法测定蛋白质浓度。[/align][align=center]双缩脲法是测定蛋白质浓度的常用方法之一。操作简便、迅速、受蛋白质种类性质的影响较小,但灵敏度较差,而且特异性不高。除-CONH-有此反应外,-CONH2、-CH2NH2、-CS-NH2等基团也有此反应。[/align][align=center]操作][/align][align=center](一) 绘制标准曲线[/align][align=center](二) 未知样品蛋白质浓度的测定 [/align][align=center] 1.取12支试管[/align][align=center]6支分别加入0,0.4,0.8,1.2,1.6,2.0毫升的标准[/align][align=center]   6支分别加入1毫升不同稀释浓度的待测液(两两相同)。[/align][align=center] 2.分别加水补足到2毫升。[/align][align=center] 3.分别加入4毫升双缩脲试剂在室温/37℃下放置30分钟。[/align][align=center][

  • 【资料】斐林试剂和双缩脲试剂有什么区别

    斐林试剂和双缩脲试剂有什么区别斐林试剂用来检验还原性糖。 双缩脲试剂用来检验蛋白质。 不同: (1)溶液浓度不同 斐林试剂中溶液称为斐林试剂甲,其浓度为溶液称为斐林试剂乙,其浓度为;双缩脲试剂中溶液(双缩脲试剂A)的浓度为,溶液(双缩脲试剂B)的浓度为。 (2)使用原理不同 斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲()结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应,可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。 (3)使用方法不同 斐林试剂使用时,先反溶液和溶液混合(将滴溶液滴入溶液中),而后立即使用:双缩脲试剂使用时,先加入溶液(2mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴溶液,振荡摇匀后观察现象。

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    【中秋/国庆我这么度过】+星月传情双节祝福, ——-献给双节仍在工作的朋友们!仲秋节月儿圆,望眼欲穿思乡还 ;两地间天地远,身距千里心相连。 入时节天已寒,举首望月把情传,父母健家庭暖,祝福安康报平安。路长漫工作繁,上下求索任劳怨;月高悬星眨眼,披星戴月一线战。同苦甘共寒暄,互帮互助心里暖;双节日不孤单,你我相伴在论坛。 ————祝双节工作第一线的朋友们论坛的版友们节日愉快,工作顺利!http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509260402_567958_2960432_3.png

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