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弯抱霉菌素

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  • 霉菌及霉菌素的污染

    霉菌及霉菌毒素污染食品后,引起的危害主要有二个方面:即霉菌引起的食品变质和霉菌产生的毒素引起人类中毒。霉菌污染食品可使食品的食用价值降低,甚至完全不能食用,造成 巨大的经济损失。据统计全世界每年平均有2%的谷物由于霉变不能食用。霉菌毒素引起的中毒大多通过被霉菌污染的粮食,油料作物以及发酵食品等引起,而且霉菌毒素中毒往往表现为明显的地方性和季节性,临床表现较为复杂,有急性中毒、慢性中毒以及致癌、致畸和致 突变等。 霉菌及其产生的毒素对食品的污染以南方多雨地区为多见,目前已知的霉菌素素约有200余种,不同的霉菌其产毒能力不同,毒素的毒性作用也不同,按其化学性质可分为肝脏毒、肾脏毒、神经毒、细胞毒及类似性激素样作用。与食品关系较为密切的霉菌毒素有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、杂色曲霉素、岛青霉素、黄天精、桔青霉素、层青霉素、单端孢霉素类、玉 未赤霉烯酮、丁烯酸内醋等。(一)影响霉菌生长繁殖的条件 影响霉菌生长繁殖及产毒的因素是很多的,与食品关系密切的有水份、温度、基质、通风等条件,为此,控制这些条件,可以对食品中霉菌分布及产毒造成很大的影响。 1、水份 霉菌生长繁殖主要的条件之一是必须保持一定的水份,一般来说,米麦类水份在14%以下,大豆类在11%以下,干菜和干果品在30%以下,微生物是较难生长的。食品中真正能被微生物 利用的那部分水份又称为水份活性(Wateractivity缩写为Aw),Aw越接近于1,微生物最易生长繁殖。食品中的Aw为0.98时。微生物最易生长繁殖,当Aw降为0.93以下时,微生物繁殖受到抑制,但霉菌仍能生长,当Aw在0.7以下时,则霉菌的繁殖受到抑制,可以阻止产毒的 霉菌繁殖。 2、温度 温度对霉菌的繁殖及产毒均有重要的影响,不同种类的霉菌其最适温度是不一样的,大多数霉菌繁殖最适宜的温度为25-30℃,在0℃以下或30℃以上,不能产毒或产毒力减弱。如黄曲 霉的最低繁殖温度范围是6-8℃,最高繁殖温度是44-46℃,最适生长温度37℃左右。但产毒温度则不一样,略低于生长最适温度,如黄曲霉的最适产毒温度为28-32℃。 3、食品基质 与其它微生物生长繁殖的条件一样,不同的食品基质霉菌生长的情况是不同的,一般而言,营养丰富的食品其霉菌生长的可能性就大,天然基质比人工培养基产毒为好。实验证实,同 一霉菌菌株在同样培养条件下,以富于糖类的小麦、米为基质比油料为基质的黄曲霉毒素产毒量高。另外,缓慢通风较快速风干霉菌容易繁殖产毒。 4、霉菌种类 不同种类的霉菌其生长繁殖的速度和产毒的能力是有差异霉菌毒素中毒性最强者有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、黄绿青霉素、红色青霉素及青霉酸。目前已知有五种毒素可引起动物致癌 ,它们是典曲霉毒素(B1、G1、M1)、黄天精、环氯素、杂色曲霉素和展青霉素。

  • 【“仪”起享奥运】食品复配防腐剂--纳他霉素和乳酸链球菌素

    [align=center][/align][font=宋体, SimSun][size=15px]纳他霉素和乳酸链球菌素的复配可以同时抑制真菌和细菌的生长,延长食品的货架期,在食品工业中具有很高的研究价值。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]纳他霉素,简称Natamycin,主要是由纳塔尔链霉菌和褐黄孢链霉菌等链霉菌发酵得到的一种多烯大环内酯类[i][/i]抗菌剂;通常以烯醇式结构存在,是一种无臭无味的结晶粉末。纳他霉素能够有效抑制和杀死酵母菌和霉菌,抑制食品腐败以及真菌毒素给人体带来的损害。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px][back=#0eb0c9][b]纳他霉素的理化性质[/b][/back][/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]纳他霉素是一种两性物质[i][/i],分子中有1个酸性基团和1个碱性基团,几乎不溶于水和大部分有机溶剂,较易溶于冰醋酸[i][/i]和二甲基亚砜等稀酸稀碱溶液。由于环状的分子结构,纳他霉素的稳定性受光照、温度、重金属、PH等因素影响。在使用时应保持PH在4~7范围内,同时避免高温和光照。[/size][/font][font=宋体, SimSun][back=#0eb0c9][b][size=15px]纳他霉素的抑菌机理[/size][/b][/back][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]纳他霉素是一种专一且高效的抗真菌剂,几乎对所有的酵母菌、霉菌都有很好的抑制效果。纳他霉素的抑菌机理是其与细胞膜上的麦角固醇结合,形成复合体从而改变细胞膜结构和渗透性,引起胞内电解质、氨基酸等物质泄漏,进一步使细胞死亡。李东等研究表明,纳他霉素对曲霉菌的最小抑制浓度为0.63mg/kg,对黑曲霉菌的最小抑制浓度为1.80mg/kg,对岛状青霉菌的最小抑制浓度为1.10mg/kg。张旋等研究表明,纳他霉素对真菌具有显著的抑制能力,最小抑菌浓度大致为1mg/L。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]乳酸链球菌素,简称Nisin,是由乳酸链球菌在代谢过程中产生的具有杀菌作用的多肽物质[i][/i],其由34个氨基酸残基组成,是一种高效且无毒副作用的天然防腐剂。乳酸链球菌素的抗菌谱较窄,只能够有效抑制由细菌引起的食品腐败。[/size][/font][font=宋体, SimSun][back=#0eb0c9][b][size=15px]乳酸链球菌素的理化性质[/size][/b][/back][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]乳酸链球菌素在酸性条件下非常稳定,尤其当PH<2.0时可耐受121℃灭菌而不失活;当PH在中性和碱性时,灭菌后乳酸链球菌素活力基本丧失。PH与乳酸链球菌素的溶解度也密切相关,随着PH的下降,其溶解度增加。[/size][/font][font=宋体, SimSun][back=#0eb0c9][b][size=15px]乳酸链球菌素的抑菌机理[/size][/b][/back][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]乳酸链球菌素对大多数革兰氏阳性菌的抑菌效果很好,特别是对金黄色葡萄球菌、芽孢杆菌作用明显。其可以作用于细菌细胞膜,形成孔状结构,打破细胞内外平衡,导致细胞死亡;也可以抑制肽聚糖的合成,使细胞壁合成受阻,从而抑制细胞生长。姜爱丽等研究表明当PH在酸性时,乳酸链球菌素浓度高于10μg/mL,对单增李斯特菌有一定的抑菌效果。[/size][/font][font=宋体, SimSun][back=#0eb0c9][b][size=15px]复合防腐剂在食品工业中的应用[/size][/b][/back][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]易建华等发现乳酸链球菌素和纳他霉素复合防腐剂对低盐酱菜的抑菌能力最佳。乳酸链球菌素与纳他霉素复合防腐剂在3个月内对酱菜酸度和感官影响很小,且抑菌效果非常好。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]顾佳莹等研究发现,将蛋黄馅中添加15g/kg的乳酸链球菌素和100mg/kg的纳他霉素复配溶液可达到内部防腐的目的,且用300mg/kg的纳他霉素溶液喷洒蛋黄月饼表皮能达到外部防腐的目的。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]李清秀等将乳酸链球菌素和纳他霉素复配应用于鸡肉中,很好地抑制了鸡肉中腐败微生物的生长,且对鸡肉的口感无影响。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]丁培峰等通过实验研究了纳他霉素、乳酸链球菌素和茶多酚在酱油防腐中的应用,发现单一的防腐剂不能起到良好的抑菌效果,而3种防腐剂按比例复配,可以使酱油货架期达到1年。[/size][/font][font=宋体, SimSun][size=15px]张玉鑫研究表明乳酸链球菌素与纳他霉素的比例为0.02:0.0065时,其抑菌效果与山梨酸钾相当,可有效地抑制方便面料包中的腐败菌生长。[/size][/font]

  • 基因技术可实现链黑菌素类抗生素高效合成

    上海交大一项研究有望降低抗肿瘤良药成本2013年02月26日 来源: 中国科技网 作者: 王春 沈海燕 中国科技网 讯 (沈海燕 记者王春)上海交通大学微生物代谢国家重点实验室林双君研究小组通过对链黑菌素生物合成基因簇进行基因解析,阐明了链黑菌素复杂的生物合成途径。由此得到的链黑菌素类似物不仅抗癌活性高很多,其毒性上也比原始链黑菌素降低了约5倍。该研究成果近日发表在国际权威学术期刊《美国化学会会志》上。 链黑菌素是由一株绒毛链霉菌所产生的抗肿瘤抗生素,具广谱抗肿瘤活性。但在上世纪七八十年代进行二期临床实验时,因其毒性过强而被迫终止。 基因组测序技术为生物合成机制的研究提供了更多信息。林双君研究小组首先克隆了链黑菌素潜在的抗生素基因簇,定位出链黑菌素的生物合成的48个独立基因编码,再通过微生物遗传学、化学及生物化学技术和手段,获得了其中17个基因的突变菌株,从中分离鉴定了12个与链黑菌素生物合成相关化合物的化学结构,提出了链黑菌素生物合成途径的模型。 在这一过程中,还揭示了多个新颖或关键的酶催化反应的分子生物学机制。该项研究为抗生素药物新颖酶催化反应基因的挖掘,并利用合成生物学等前沿生物技术创造新的结构衍生物奠定了基础。林双君称,这是首次在基因水平实现链黑菌素的生物合成途径的解析。 课题组通过基因工程技术获得的一个链黑菌素类似物,在抗癌活性上比目前临床使用的抗癌药物高很多。这个类似物在临床应用方面,对治疗淋巴瘤、白血病、鼻咽癌等疾病将有更大的优势。林双君表示,只要将产量提高到可规模化生产,就可将链黑菌素或类似物转化为一个新型的抗癌药物,不仅有望降低药价,而且减少化疗时产生的毒副作用。 《科技日报》2013-2-26 一版

  • 【原创大赛】伏马菌素测定方法应用研究及对粮食污染情况分析

    摘要:目的 探讨以ELISA法和液相色谱分析法检测粮食、饲料中伏马菌素的可行性以及伏马菌素污染状况调查。方法 采用液相色谱分析法和竞争酶联免疫吸附法联合分析伏马菌素,并对两种方法相互确证实验。结果 ELISA法和液相色谱分析法同时测定12份阴性样品和12份阳性样品,测定结果相符率达100%。对花生、玉米及其制品以及动物内脏样品共288份进行检测,发现花生、玉米及其制品均含有不同程度伏马菌素和霉菌霉素的污染,而动物内脏未能检出。结论 两种方法的测定结果吻合,是目前国内外测定粮食、饲料中伏马菌素的科学而理想的方法。建议日常工作中先用ELISA法快速筛选检测,阳性样品再用液相色谱分析法确证。

  • 【“仪”起享奥运】食品复配防腐剂--乳酸链球菌素与化学防腐剂

    [align=center][/align][font=宋体, SimSun][size=16px]目前在糕点中常用的化学防腐剂对霉菌、酵母的抑制作用较好,而对细菌的抑制作用较弱。生物防腐剂乳酸链球菌素是从乳酸乳球菌发酵产物中提取的、具有抗菌活性的多肽物质,能够抑制许多引起食品腐败变质的革兰氏阳性菌的生长、繁殖,特别对耐热芽孢杆菌、肉毒梭菌等所产生的芽孢有强烈的抑制作用。[/size][/font][size=16px][/size][font=宋体, SimSun][size=16px]张攀先[2]等人在实验中选用乳酸链球菌素与常用化学防腐剂对蒸蛋糕中腐败微生物进行抑制并进行优化复配,结论显示,[b]复配防腐剂(0.2g/kg 乳酸链球菌素+0.25g/kg 脱氢乙酸钠+0.3g/kg 丙酸钠)能够显著的抑制蒸蛋糕中腐败微生物的生长[/b],且抑菌效果要优于化学防腐剂(脱氢乙酸钠和丙酸钠),能够改善产品的品质,延长产品的保质期。且与化学防腐剂(脱氢乙酸钠和丙酸钠)相比,添加了乳酸链球菌素的复配防腐剂不仅增强了对蒸蛋糕中腐败微生物的抑制能力,同时也降低了化学防腐剂的添加量,提高了产品的安全性。[/size][/font]

  • 伊维菌素会转化成阿维菌素吗?

    各位大侠好,小弟最近在做阿维菌素荧光测定法的方法开发。用同一个样品进多次样,发现后面的数据伊维菌素的峰编低而阿维菌素变高了,两个含量的和一样,是不是因为伊维菌素变成了阿维菌素?有什么方法可以避免吗?

  • 伊维菌素会转化成阿维菌素吗?

    各位大侠好,小弟最近在做阿维菌素荧光测定法的方法开发。用同一个样品进多次样,发现后面的数据伊维菌素的峰编低而阿维菌素变高了,两个含量的和一样,是不是因为伊维菌素变成了阿维菌素?有什么方法可以避免吗?

  • 【每日一贴】莫能菌素

    【每日一贴】莫能菌素

    【中文名称】莫能星钠;瘤胃素;莫能霉素;莫能菌素;孟宁素;摩能霉素钠【英文名称】monensin sodium;Coban;Rumensin;Romensin【结构或分子式】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203191957_355888_1855403_3.jpg【相对分子量或原子量】692.85【毒性LD50(mg/kg)】 服用本品未发现耐药现象,鸡口服LD50为284mg/kg。对马属动物毒性较大,LD50为2~3mg/kg。严格避免马属动物食入。中毒时厌食、运动失调、间歇多汗以致死亡。【性状】 本品原料为白色或类白色结晶,有特殊臭味。黄褐色粗粉,有特殊异臭味。【用途】 本品对主要的6种鸡球虫都有效,其活性主要是在球虫生活周期最初2天,子孢子或第一代裂殖体都可被抑制。用不同量的莫能星连续喂饲鸡8周,121e-6时无任何不利影响,国内使用量为90~110e-6,蛋鸡禁用。【制备或来源】 本平由肉桂地链霉菌(Streptomyces cinramoensis),发酵产生。【其他】 预混剂为脱脂米糠、玉米粉、稻壳粉或碳酸钙等辅料,含莫能星为标示量的85%~115%。【生产单位】略

  • PriboFast○R 系列多功能净化柱,超值体验霉菌毒素检测新技术

    霉菌毒素是由霉菌或真菌产生的有毒有害物质。在土壤中,在植物上,包括谷物、饲草和青贮饲料均可发现霉菌毒素。霉菌毒素对粮食、饲料的污染已是一个全球性热点问题。目前已知的霉菌毒素高达几百种,而食品、饲料、饮料、药材行业中危害较大的主要是以黄曲霉毒素(Aflatoxin),赭曲霉毒素A(Ochratoxin A),单端孢菌毒素(Trichothecenes),玉米赤霉烯酮(Zearalenone),烟曲霉毒素(Fumonisin)和串珠镰刀菌素(Moniliformin)发生较多,由于霉菌毒素种类繁多、结构复杂多样,这就造成实际生产中,真菌毒素的定量检测成为困扰我们的重要难题之一,对于这些毒素的检测样品的净化处理显得尤为重要。目前霉菌毒素的检测方法包括薄层色谱法、酶联免疫法、免疫亲和柱净化高效液相色谱法。但薄层色谱法操作繁琐、污染大、定量差、耗时长;而酶联免疫法虽操作简单、灵敏度高,但特异性差,假阳性高;免疫亲和柱高效液相色谱法成本太高, 对于高黄曲霉毒素含量的样品偏差较大。迫切需要一种样品处理简便易行、快速准确、灵敏度高、检测限低,检测成本低廉的检测方法和技术。尤其液相色谱分离技术具有分析速度快、样品用量少、灵敏度高、分离和测定一次完成,得到越来越多行业和单位的应用,然而整个过程样品前处理的好坏将直接导致测量结果的准确与否,对样品净化的方法要求更高。Pribolab推出的新一代霉菌毒素净化柱产品,在创新发展了霉菌毒素检测的样品处理技术基础上,可以保证整个检测一开始就具有较高的重现性和可靠性。现代前处理技术在要求净化效果的同时,越来越追求方法的快速及易操作性,PriboFastR系列多功能净化柱采取的方法就是多重机制吸附杂质并快速萃取净化的方法,,它将极性、非极性及离子交换等多类官能基团作为复合吸附填料作为填充剂填充到柱体中,这些填料可以选择性的吸附样品中的如脂类、蛋白类和色素等主要杂质吸附,同时将待测目标物(如中黄曲霉毒素 玉米赤霉烯酮等各种霉菌毒素)留在样液中,从而达到净化和富集的目的。使用PriboFastR 系列多功能净化柱,能够及时快速地对从食品、饲料、饮料、药材中提取的待检液进行净化,过柱净化后的样品可以用于检测黄曲霉毒素、 玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、雪腐镰刀菌烯醇、3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇、15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇等多种霉菌毒素。与一般的固相萃取柱(SPE)和亲和柱相比,多功能净化柱无需活化、上样、洗脱等步骤,能够将食品或饲料提取液中的杂质与真菌毒素进行一步分离,使用快捷、方便,减少萃取步骤,有效保证分析的更加准确可靠,降低检测成本,有效提高检测效率。广告嫌疑的内容部分已经过编辑(弗雷德)

  • 【原创大赛】食品中阿维菌素残留的测定

    【原创大赛】食品中阿维菌素残留的测定

    阿维菌素,是一种不错的杀菌、杀虫剂。之所以说它不错,因为它的来源,是从天然的阿维链霉菌发酵制得。虽然作为农药使用,但是在环境和土壤中,很容易被微生物分解,因此无累积作用。再好的东西,也要适量使用。阿维菌素使用过量时,会引起人畜的眼睛刺激、重者昏迷,对于蜜蜂、鱼类、蚕而言,属于高毒。下面看看月旭科技参照国标,采用苹果、菠菜为样品,进行阿维菌素检测的实验过程。1、[b]适用范围[/b]食品中水果及蔬菜中阿维菌素检测测定方法(本实验采用苹果,菠菜)前处理方法参考《GB 29696-2013 牛奶中阿维菌素类药物多残留的测定》《GB 23200.19-2016 食品安全国家标准 水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定 液相色谱法》2、[b]溶液的配置[/b]阿维菌素标准储备液:精密称取0.010g(精确至±0.0005g)阿维菌素标准品于10mL容量瓶中,用乙腈溶解并定容至刻度线配置成浓度为1000μg/mL的标准储备液。阿维菌素工作液:移取0.5mL阿维菌素标准储备液于50ml容量瓶中,用乙腈稀释成10μg/mL。洗涤液:乙腈-水-三乙胺(30mL:70mL:20μL)3、[b]提取步骤[/b]样品经组织捣碎机捣碎,称取样品5g±0.05g于50mL离心管中,加入8mL乙腈,涡旋1min,离心10min(4000r/min),吸取上清液于另一50mL离心管中;残渣中加入8mL乙腈,重复提取一次,合并两次上清液,加水20mL,三乙胺50μL,混匀,待净化。4、[b]SPE净化步骤[/b]SPE柱:月旭Welchrom C18E规格:500 mg/6mL。活化:5mL乙腈,5mL洗涤液上样:待净化液全部上样,自然流干,抽干5min淋洗:3mL异辛烷,抽干5min洗脱:5mL乙腈,收集于15mL试管中氮吹至近干,用乙腈定容至1mL,过0.22μm滤膜,上HPLC检测。5、[b]注意事项[/b]1)若上样时流速过慢,可适当加压,使其能滴落;2)氮吹时注意不能过快,近干即可3)流动相和样品提取溶剂选用乙腈,乙腈提取效果好且乙腈为流动相时目标物灵敏度高4)三乙胺对阿维菌素在小柱的保留及回收率影响较大6、[b]色谱条件[/b]色谱柱:月旭Ultimate XB-C18,4.6*150mm,5μm流动相:水:乙腈(10:90)柱温:40℃进样量:20μL检测波长:245nm流速:1.0mL/min7、[b]色谱图或者加标回收率结果[/b][align=center][img=,600,336]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081311418041_5481_932_3.png!w690x387.jpg[/img][/align][align=center][b]图1.阿维菌素对照0.1mg/L[/b][/align][align=center][img=,600,336]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081312008871_1611_932_3.png!w690x387.jpg[/img][/align][align=center][b]图2.阿维菌素对照5mg/L[/b][/align][align=center][img=,600,336]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081312148673_7209_932_3.png!w690x387.jpg[/img][/align][align=center][b]图3.苹果样品图谱[/b][/align][align=center][b][/b][/align][align=center][img=,600,336]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081312304771_2173_932_3.png!w690x387.jpg[/img][/align][align=center][b]图4.菠菜样品图谱[/b][/align][align=center][img=,600,336]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081313014530_3128_932_3.png!w690x387.jpg[/img][/align][align=center][b]图5.苹果样加标0.2mg/kg[/b][/align][align=center][img=,600,336]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081313180901_4314_932_3.jpg!w690x387.jpg[/img][/align][align=center][b]图6.菠菜样加标0.2mg/kg[/b][/align][align=center][img=,600,336]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081313460964_3442_932_3.png!w690x387.jpg[/img][/align][align=center][b]图7.苹果样加标1mg/kg[/b][/align][align=center][img=,600,336]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081314009742_1936_932_3.jpg!w690x387.jpg[/img][/align][align=center][b]图8.菠菜样加标1mg/kg[/b][/align][align=center][img=,600,133]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081314269091_947_932_3.png!w690x154.jpg[/img][/align][align=center][b]表1:加标回收率测定结果[/b][/align][align=center][img=,600,408]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/10/201910081314496641_1527_932_3.jpg!w575x391.jpg[/img][/align]8、[b]相关产品信息[/b]

  • 阿维菌素的离子对及电压值是多少?

    阿维菌素的离子对及电压值是多少?用的是GB23200.121方法做前处理,就是Q包法。用甲醇、芹菜基质来配阿维菌素标液0.2ug/mL,出峰很不好,甚至不出峰,请问它的离子对及电压值是多少?[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用仪[/color][/url]AB4500,流动相是纯水加0.02%甲酸加1mM甲酸铵,有机相是纯甲醇。

  • 食品中阿维菌素残留的测定

    食品中阿维菌素残留的测定

    [align=center][img=,690,439]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808091048522538_6416_932_3.jpg!w690x439.jpg[/img][/align]阿维菌素,是一种不错的杀菌、杀虫剂。之所以说它不错,因为它的来源,是从天然的阿维链霉菌发酵制得。虽然作为农药使用,但是在环境和土壤中,很容易被微生物分解,因此无累积作用。再好的东西,也要适量使用。阿维菌素使用过量时,会引起人畜的眼睛刺激、重者昏迷,对于蜜蜂、鱼类、蚕而言,属于高毒。下面看看月旭科技参照国标,采用苹果、菠菜为样品,进行阿维菌素检测的实验过程。1 [b]适用范围[/b]食品中水果及蔬菜中阿维菌素检测测定方法(本实验采用苹果,菠菜)前处理方法参考《GB 29696-2013 牛奶中阿维菌素类药物多残留的测定》《GB 23200.19-2016 食品安全国家标准 水果和蔬菜中阿维菌素残留量的测定 液相色谱法》2 [b]溶液的配置[/b]阿维菌素标准储备液:精密称取0.010g(精确至±0.0005g)阿维菌素标准品于10mL容量瓶中,用乙腈溶解并定容至刻度线配置成浓度为1000μg/mL的标准储备液。阿维菌素工作液:移取0.5mL阿维菌素标准储备液于50ml容量瓶中,用乙腈稀释成10μg/mL。洗涤液:乙腈-水-三乙胺(30mL:70mL:20μL)3 [b]提取步骤[/b]样品经组织捣碎机捣碎,称取样品5g±0.05g于50mL离心管中,加入8mL乙腈,涡旋1min,离心10min(4000r/min),吸取上清液于另一50mL离心管中;残渣中加入8mL乙腈,重复提取一次,合并两次上清液,加水20mL,三乙胺50μL,混匀,待净化。4 [b]SPE净化步骤[/b]SPE柱:月旭Welchrom C18E规格:500 mg/6mL。活化:5mL乙腈,5mL洗涤液上样:待净化液全部上样,自然流干,抽干5min淋洗:3mL异辛烷,抽干5min洗脱:5mL乙腈,收集于15mL试管中氮吹至近干,用乙腈定容至1mL,过0.22μm滤膜,上HPLC检测。5 [b]注意事项[/b]1)若上样时流速过慢,可适当加压,使其能滴落;2)氮吹时注意不能过快,近干即可3)流动相和样品提取溶剂选用乙腈,乙腈提取效果好且乙腈为流动相时目标物灵敏度高4)三乙胺对阿维菌素在小柱的保留及回收率影响较大6 [b]色谱条件[/b]色谱柱:月旭Ultimate XB-C18,4.6*150mm,5μm流动相:水:乙腈(10:90)柱温:40℃进样量:20μL检测波长:245nm流速:1.0mL/min7 [b]色谱图或者加标回收率结果[/b][align=center][img=,643,366]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808091104096899_9383_932_3.jpg!w643x366.jpg[/img][/align][align=center][b]图1.阿维菌素对照0.1mg/L[/b][/align][align=center][img=,657,377]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808091100371261_5045_932_3.jpg!w657x377.jpg[/img][/align][align=center][b]图2.阿维菌素对照5mg/L[/b][/align][align=center][/align][align=center][img=,653,371]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808091100482202_1067_932_3.jpg!w653x371.jpg[/img][/align][align=center][b]图3.苹果样品图谱[/b][/align][align=center][img=,647,374]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808091100575832_5106_932_3.jpg!w647x374.jpg[/img][/align][align=center][b]图4.菠菜样品图谱[/b][/align][align=center][b][/b][/align][align=center][img=,658,384]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808091101063370_2995_932_3.jpg!w658x384.jpg[/img][/align][align=center][b]图5.苹果样加标0.2mg/kg[/b][/align][align=center][b][/b][/align][align=center][img=,652,385]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808091101145779_8220_932_3.jpg!w652x385.jpg[/img][/align][align=center][b]图6.菠菜样加标0.2mg/kg[/b][/align][align=center][/align][align=center][img=,655,373]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808091101226167_5231_932_3.jpg!w655x373.jpg[/img][/align][align=center][b]图7.苹果样加标1mg/kg[/b][/align][align=center][img=,656,369]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808091101321362_2694_932_3.jpg!w656x369.jpg[/img][/align][align=center][b]图8.菠菜样加标1mg/kg[/b][/align][align=center][b][/b][/align][align=center][img=,645,141]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808161619406225_8237_932_3.jpg!w645x141.jpg[/img][/align][align=center][b]表1:加标回收率测定结果[/b][/align][align=center][b][/b][/align]8 [b]相关产品信息[/b][align=center][img=,579,389]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808161619499385_6877_932_3.jpg!w579x389.jpg[/img][/align]

  • 【原创大赛】畜禽肉中盐霉素、莫能菌素残留分析方法

    【原创大赛】畜禽肉中盐霉素、莫能菌素残留分析方法

    一、背景1.1莫能菌素﹝Monensin﹞是聚醚类离子载体抗生素,是一种[url=http://baike.baidu.com/subview/138504/138504.htm][color=windowtext]反刍动物[/color][/url]中运用较广泛的饲料添加剂;原为[url=http://baike.baidu.com/subview/150635/150635.htm][color=windowtext]链霉菌[/color][/url]所分泌的一种物质,具有控制[url=http://baike.baidu.com/subview/39929/39929.htm][color=windowtext]瘤胃[/color][/url]中[url=http://baike.baidu.com/subview/3852509/3852509.htm][color=windowtext]挥发性脂肪酸[/color][/url]比例,减少瘤胃中蛋白质的降解,降低饲料干物质消耗,改善营养物质利用率和提高动物能量利用率等作用。1.2莫能菌素为百盛客户对肉类原料中兽药残留的监控项目,为了应对客户要求,满足实验室检测要求,对莫能菌素进行新项目技术开发。盐霉素为原有分析项目,此次技术开发对盐霉素前处理及仪器分析条件重新优化,与莫能菌素合并同为聚醚类抗生素检测检测方法。[img=,490,100]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141014_01_3081717_3.png[/img]二、前处理流程2.1提取称取(2.00±0.02)g样品,加入10mL乙腈混匀,再加入3.00g无水硫酸钠,震荡混匀,超声提取10min;离心取上清液于50mL离心管中,残渣加入5mL乙腈重复提取,合并两次上清液,定容至20mL,加入5mL乙腈饱和正己烷,震荡离心。2.2净化取下层(乙腈层)5mL于圆底烧瓶中,旋转蒸发至1mL,氮气吹干。普通肉类基质:圆底烧瓶中加入1mL乙腈超声溶解。内脏类基质:圆底烧瓶中加入3mL甲醇+水(1+1)超声溶解,过Waters HLB柱(waters oasis HLB 6cc/200mg依次用5mL甲醇 5mL水活化),用5mL水淋洗,5mL甲醇洗脱于100mL圆底烧瓶中,40℃减压蒸干,加入1mL乙腈超声溶解。三、仪器分析条件([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]MS8050)3.1质谱参数:离子源ESI源 Nebulizing Gas Flow: 3 L/min HeatingGas Flow: 10 L/min Interface Temperature 300 ℃;DLTemperature 250 ℃;Heating Block Temperature 400℃ Drying Gas Flow: 10 L/min [table=595][tr][td=1,2]化合物名称[/td][td=1,2]Precursor m/z[/td][td]Product[/td][td]Dwell Time[/td][td]Q1 Pre[/td][td=1,2]CE[/td][td]Q3 Pre[/td][/tr][tr][td]m/z[/td][td](msec)[/td][td]Bias(V)[/td][td]Bias(V) 1[/td][/tr][tr][td=1,3]莫能菌素[/td][td]688.6[/td][td]635.50*[/td][td]100[/td][td]-26[/td][td]-18[/td][td]-28[/td][/tr][tr][td]688.6[/td][td]461.35[/td][td]100[/td][td]-26[/td][td]-26[/td][td]-30[/td][/tr][tr][td]688.6[/td][td]617.5[/td][td]100[/td][td]-26[/td][td]-24[/td][td]-28[/td][/tr][tr][td=1,3]盐霉素[/td][td]773.1[/td][td]431.20*[/td][td]100[/td][td]-28[/td][td]-53[/td][td]-28[/td][/tr][tr][td]773.1[/td][td]531.35[/td][td]100[/td][td]-28[/td][td]-46[/td][td]-36[/td][/tr][tr][td]773.1[/td][td]413.2[/td][td]100[/td][td]-28[/td][td]-53[/td][td]-27[/td][/tr][/table]3.2液相参数: 流动相组成:A: 0.1%甲酸 B: 乙腈;流速:0.35Ml/min;A -10% B -90%恒流分析;进样量:2uL;色谱柱型号:ODS-III 1.6μm四、实验结果及分析4.1线性配制盐霉素、莫能菌素混标(稀释溶剂:乙腈),0.1ug/kg、1ug/kg、5ug/kg、10ug/kg、20ug/kg五个浓度点,仪器分析线性如下:[img=,490,157]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141016_02_3081717_3.png[/img][img=,490,173]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141017_01_3081717_3.png[/img]以上实验中,盐霉素、莫能菌素标准曲线R[sup]2[/sup]均大于0.99,各浓度点精密度良好;仪器分析标准品线性、稳定性符合实验要求。4.2选择性选取牛肉样品进行空白、添加回收实验,实验谱图如下:[img=,490,173]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141019_01_3081717_3.png[/img][img=,490,173]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141019_02_3081717_3.png[/img]4.3真度对空白牛肉进行前处理,采用空白样品萃取液与溶剂稀释统一标准品标准品,同一浓度下两者峰面积比值的百分比作为真度评价参数,实验结果及谱图如下: [table=386][tr][td]基质类型[/td][td]化合物名称[/td][td]基质稀释标准品[/td][td]溶剂稀释标准品[/td][td]真度(%)[/td][/tr][tr][td=1,2]牛肉[/td][td]盐霉素[/td][td]116,440[/td][td]107,537[/td][td]106.4%[/td][/tr][tr][td]莫能菌素[/td][td]9,845[/td][td]13,312[/td][td]74.0%[/td][/tr][/table]以上实验中牛肉基质对盐霉素无明显基质效应,对莫能菌素产生一定的基质效应,基质效应在70%左右,在可接受范围之内,日常分析准确定量可以做spiked校正。6实验总结本次试验,从前处理、仪器分析、实验分析的真度、精密度、准确度等多项参数验证了此方法的适用性及准确性,可初步满足试验要求,后续继续多基体验证。

  • 正确认识霉菌毒素

    霉菌毒素是霉菌在谷物(大豆、玉米、麸皮)中繁殖过程中或者储存过程中产生的有毒代谢产物。正确认识这些毒素,可以帮助我们更好地预防并选择有针对性的脱霉剂。 霉菌毒素常见以下几种: 黄曲霉毒素 这是一种最为常见的毒素,主要是由黄曲霉和寄生曲霉产生的有毒代谢产物。黄曲霉毒素被动物采食后,迅速被胃肠道吸收,它在肝脏中的浓度最高,所以肝脏的受害最严重。肝为机体重要的免疫器官和代谢器官,一旦受损会导致全身性出血、消化机能障碍和神经症状。 玉米赤霉烯酮 又称F-2毒素,主要是禾谷镰刀菌的一种代谢产物,属于镰刀菌毒素类,它主要影响动物的生殖系统。玉米赤霉烯酮可促进子宫DNA、RNA和蛋白质的合成,使动物发生雌激素亢进症,所以又被称为类动情毒素。该毒素可使母猪外阴持续性红肿,这种红肿症状常被误认为是母猪发情,但出现症状的母猪却不接受公猪爬跨配种。其对公猪的影响也很显著,可导致性欲低下、精液量减少、密度降低,精子萎缩、变形,或畸形率增加等。 T-2毒素 它是三线镰刀菌、拟技孢镰刀菌、梨孢镰刀菌等的有毒代谢产物,属于镰刀菌毒素类。T-2毒素有较强的细胞毒性,可破坏组织黏膜的完整性,使免疫细胞的功能下降,引起贫血、出血。由于T-2毒素能刺激肠道黏膜,因此还会引起猪的呕吐和腹泻。 赭曲霉毒素 与黄曲霉毒素有些相似,主要侵害肝脏和肾脏。它可使肠道相关淋巴组织坏死,降低吞噬细胞的吞噬作用,影响细胞免疫和体液免疫。母猪长期过量饲喂赭曲霉毒素污染的饲料,有可能影响后代的免疫机能。 烟曲霉毒素 该毒素常出现于玉米产区,它对机体呼吸道的损伤比较严重。有的猪场呼吸道问题总是反复难以治愈,可考虑是不是烟曲霉毒素在其中作怪。另外该毒素中毒后猪的生产性能和繁殖性能也遭到破坏,明显的症状是胚胎发育受损,免疫机能降低。 呕吐毒素 在早期阶段中,呕吐毒素能导致皮肤刺激,缺乏食欲,呕吐;在后期,则会引起出血、消化道的坏疽、中枢神经系统问题、免疫系统的破坏、骨髓造血功能的衰退以及生殖功能衰

  • 【求助】养猪业中阿维菌素和伊维菌素的实际用药情况?

    各位版友们:大家好!阿维菌素是我的毕业课题,我想搜集一点实际的数据作为科学的理论支持以保证论文的严谨性,还请大家帮忙,谢了。在养猪业中,在个体养殖、企业养殖中,无论规模大小,常用什么药来防治猪寄生虫病? 是阿维菌素和伊维菌素吗? 有具体的数据最好。我国有没有做过这方面的用药实际情况调查呢?如果有,可以给我上传一份吗? 谢谢~~~~~

  •  霉菌毒素的危害及对策

    霉菌毒素的危害及对策近几年来,霉菌毒素中毒给畜牧业带来的危害越来越大。据联合国粮农组织调查,全世界贸易供应的谷物中,有25%受到霉菌毒素的污染。在高温高湿地区这种污染更加严重。我国是霉菌污染比较严重的国家,陈必芳等在1996年从全国28个省市采集104个饲料加工厂和养殖场饲料及饲料原料样品627份,检测结果显示配合饲料霉菌污染率100%,饲料原料污染率99%。另调查结果显示,我国配合饲料饲料和原料污染霉菌毒素超标的比例高达60 %~70 %以上。 霉菌毒素对动物除中毒和致死外,更重要的是不易被发现机体免疫机能下降、生长受阻、生产性能和抗病力降低,故饲料中霉菌毒素有“隐形杀手”之称。其对动物生产性能和人类健康的负面影响是非常大的。因此,饲料霉变问题是饲料工业和畜牧业生产中不可忽视的问题,霉菌毒素污染问题应引起世界的广泛关注。 1. 霉菌毒素及其污染现状 霉菌毒素是某些霉菌在谷物或饲料上生长繁殖过程中产生的有毒二次代谢产物,毒素在谷物的生长过程、饲料的制造、贮存及运输过程中皆可产生。对畜禽造成很大危害的便是由霉菌产生的霉菌毒素。一般而言,霉菌毒素主要是由四种霉菌属所产生:曲霉菌属(主要分泌黄曲霉毒素、赭曲霉毒素等);青霉菌属(主要分泌桔霉素等);麦角菌属(主要分泌麦角毒素);梭菌属(主要分泌呕吐毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素、串珠镰孢菌毒素等)。迄今为止已经有超过300种霉菌毒素被分离和鉴定出来,上述的几种毒素即为现今普遍认识的8种主要毒素。

  • 霉菌毒素产生的条件

    总体上说,霉菌毒素产生的条件取决于多方面,经常需要关注的主要包括以下五个方面因素:1、原料生物性因素:即大部分植物原料的生物学属性改变,或品系改良天然抗病力的下降,导致霉菌毒素的产生和污染。例如玉米、小麦、燕麦、大麦、花生等最易滋生9-10种霉菌毒素;大米、高粱易滋生4-5种霉菌毒素;大豆、棉花等易滋生1-2种霉菌毒素。目前我国主要种植的各种玉米尚无抗霉菌毒素品系。2、原料种植过程中的因素:多大数谷物在田间种植期间如果遇到干旱、洪涝的恶劣气候均会产生霉菌毒素。例如玉米在生长过程中要经历播种、分叶、拔节、抽雄、灌浆、乳熟、结实等不同阶段,尤其在后三个阶段期间非常容易因天气变化导致在田间发生霉变。这也就是为什么人们根据毒素污染的阶段将霉菌毒素分为田间毒素和仓储毒素两类。3、原料收获过程中的因素:谷物未完全成熟、机械磨损,昆虫鼠害损伤等均易造成霉菌毒素污染。4、饲料及原料生产储存过程中的因素:值得注意的是,霉菌的孢子总是常规存在于饲料及原料之中,等待适宜温度和湿度,进而萌发并代谢出霉菌毒素。因此在饲料及原料的生产加工和储存过程中对温度、湿度的控制尤其关键。通常玉米的水分含量超过14%,饼粕类水分超过12%即非常容易产生霉菌毒素。另外一个常知的因素温度也会让我们产生误解而犯下错误,大部分霉菌繁殖最佳温度是 25 -- 35ºC,但是人们忽略的是低温0--10 ºC同样会有霉菌的繁殖,例如黄曲霉毒素在潮热的环境下容易产生,而像呕吐毒素在0 ºC就可以产生,玉米赤霉烯酮在10 ºC时就可以产生。因此产自于北方的谷物原料中一样经常含有霉菌毒素的污染,只是霉菌毒素的种类不同于来自南方的原料。5、饲料销售及使用过程中的因素:饲料厂产品库内堆积、运输到养殖场的装载环、养殖场的场内存放、畜舍饲喂系统的再污染等因素造成了霉菌毒素的二次污染问题,这也需要饲料生产企业和养殖企业共同重视。

  • 阿维菌素

    液相色谱测定阿维菌素加标 怎么做回收率能达要求

  • 大家注意到了吗?:和屠呦呦同时获2015年诺贝尔生理学或医学奖的两名科学家分别发现了阿维菌素、伊维菌素

    2015年10月5日,瑞典皇家卡洛琳学院宣布,中国女药学家屠呦呦及另外两名科学家威廉·坎贝尔和大村智,因在寄生虫疾病治疗研究方面取得的成就获得2015年诺贝尔生理学或医学奖。屠呦呦和青蒿素一夜之间成为国内万众瞩目的焦点,而同时获奖的两名科学家所发现的阿维菌素、伊维菌素虽在国内所受的关注度小很多,但其贡献也不容小觑。阿维菌素,是目前全球用量最大、使用技术最成熟的生物农药,其市场前景被农药行业普遍看好。自诞生以来,阿维菌素就备受生产企业关注,不断更新生产工艺,开发新剂型,其原药和制剂产能正在以惊人的速度增长,我国也已成为全球最大的阿维菌素供应国。作为农药行业最成功的生物农药,阿维菌素(Avermectin)成名于防治寄生虫。它是一种大环内酯类化合物,早期主要是农用杀虫剂和兽用驱虫药。今天我们用于治疗线虫病的核心药物伊维菌素(Ivermectin),人兽两用,就是在它的基础上衍生而来。上世纪70年代中期,默沙东公司的研究人员与世界各地的研究机构合作,收集了大量的土壤样品,从中培养、筛选和寻找新型的抗微生物活性物质。他们收集到4万多个土壤样品,在其中一个样品的培养和筛选过程中,一类全新的抗寄生虫的化合物被发现了。通过对该培养液里的菌种的分离和纯化,默沙东的研究人员找到了这些化学物质,将它们命名为阿维菌素(Avermectin)(发现者即威廉·C·坎贝尔,他于1957—1990年在默沙东工作,他的获奖工业也都在默沙东的实验室完成)。这个唯一的土壤样品由日本东京的北里研究所提供,来自东京郊外的一家高尔夫球俱乐部,其发现者就是今年获得诺贝尔奖的大村智。阿维菌素是通过发酵放线菌后提取菌丝得到的混合物,有4大类主要结构,其中B1类的活性最好。在随后的深入研究中,研究人员把阿维菌素家族的一员,阿维菌素-B1(Avermectin-B1)的一个不饱和碳碳双键(C22=C23)通过氢化还原,做出了一个集中阿维菌素家族不同成员优点的新化合物,不但化学稳定性很好,而且生物利用度也有提高,它就是伊维菌素。   多年来只有默沙东制药拥有能产生艾维菌素的唯一菌种,最初的菌种经发酵后每立升培养液只能产生大约9微克阿维菌素,经过工艺部门的不断筛选和优化,新菌种发酵后阿维菌素的产量提高了5~6个数量级。直到1999年,意大利的一家实验室才又发现了第二个能产生阿维菌素的菌种,结束了默沙东制药对艾维菌素的垄断!使得阿维菌素和伊维菌素的生产更容易。其实,寄生虫病在欧美发达国家人群里已经很少见了,但在欧美的畜牧业和宠物业,每年因为牲畜得寄生虫病而造成的商业损失不下40亿美元。兽用的伊维菌素上市之后,很快成为家畜和宠物抗寄生虫病的理想用药,年销售额接近10亿美元。自1991年害极灭(Abamectin)进入我国农药市场后,阿维菌素农药在我国的害虫防治体系中开始占据较为重要的地位。最初阿维菌素生产的问题是收率太低,且杂质太多。最早的时候,阿维菌素中B1含量≥92%,且主要有效成分B1a比例只要占到其中的80%就符合国标。经过中国企业不断的努力,国产阿维菌素的质量得到明显提高。现在,阿维菌素产品的B1含量基本达到95%以上,B1a含量一般都在97%。高质量原药合成出来的伊维菌素副作用更小,疗效更好。按照业内估计,中国的阿维菌素产能已经占到全世界的80%以上,产量也接近全球供应量的70%。据统计,2015年1~7月,我国生产阿维菌素约2400吨,销售约2300吨,行业有100多吨库存。受部分违规生产企业无证非法生产阿维菌素影响,近期阿维菌素价格快速跌入低谷,当前国内大型生产企业主流报价在每吨66万元左右,预计受冬季淡储、气温降低、企业检修、国际采购商开始询价等因素影响,后期阿维菌素原药价格会有所上涨。截至2015年10月12日,国内阿维菌素制剂登记数为985个,其中单剂447个,复配制剂538个。从登记剂型来看,高含量、环保剂型登记数量增加,复配制剂登记数量超过单剂数量。这可以看出,农药企业为了延续阿维菌素产品的生命周期,在使用环节做出了巨大努力。

  • 面包长霉菌

    各位老师大家早上好。请问一批含馅面包中,只有其中一个长了霉菌是什么问题?有什么解决方法?其他会不会也长了肉眼没看到

  • 【讨论】肉类加标阿维菌素回收咋这么差呢?

    我做的是猪肉,是这:样除脂的在提取的上清液中,加入乙腈饱和的正己烷振荡,静置,弃去上层液。每次加入10ml正己烷,进行两次。结果加标的20ppb,只检测到0.2多点。差距为什么这么大?!有哪些可能的原因?我在想:1、氮吹定容后液体很清澈,会不会在除杂质的同时,也把待测物也大量除去了呢?还有,氮吹后管壁上附有白色不溶物,几乎每次都有,这是什么?蛋白质?阿维菌素?还是其它不明物?你们做的时候有这种现象吗?2、会不会是阿维菌素溶入到正己烷中,然后被除去了呢?3、我这样除水的:加2g无水硫酸钠,振荡混匀,后高速离心(8000rpm)。会不会是无水硫酸钠对阿维菌素有吸附作用然后就被除去了呢?大家说说看这是咋回事?

  • 细胞培养箱中出现霉菌如何消除

    细胞培养箱中的水盘里出现霉菌,虽然没有污染到细胞,而且也在水盘里加入新洁尔灭,但还是不放心,并且培养箱中现有很多细胞,请问有没有一种方法可以在不移除细胞的情况下能够消灭培养箱中的霉菌?已经长出霉菌,建议把所有细胞移出到其他培养箱。将这个培养箱全面消毒,喷酒精,紫外灭菌至少1个小时。因为我们组细胞染过菌,一旦培养箱不洁净,会导致所有培养细胞都要染菌的,爆发以后很可怕。培养箱出现霉菌很可能是水槽的水不够洁净,一定要用超净水超纯水来填充水槽,避免霉菌生长。要定期更换水槽中的纯水。一个月左右换一次。一个季度到半年要培养箱彻底灭菌一次。

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