马脾铁蛋白

近日，《GB 5009.299-2024 食品安全国家标准 食品中乳铁蛋白的测定》国标发布，于2024年8月8日正式实施。标准规定：使用肝素亲和柱富集净化，高效液相色谱法测定。美正生物可提供“国标符合”乳铁蛋白检测解决方案01肝素亲和柱柱容量高柱容量＞2mg，验证回收率≥95%。样本适用性广满足婴幼儿配方食品、巴氏杀菌乳、调制乳、发酵乳、乳饮料等样本的检测需求。准确度高样本及加标回收率在80%-120%之间。富集净化效果好乳铁蛋白标准品色谱图样本上样色谱图精密度高批内批间变异系数均小于10%02牛乳铁蛋白标准品满足国标纯度≥95%铁含量≤35mg/100g的规定。03其他耗材美正还可提供前处理柱操作架、乳铁蛋白基体质控样本、滤膜、水相针头滤器等检测过程中会使用到的小设备及耗材。欢迎咨询！

各有关单位：根据《中国认证认可协会团体标准管理办法》规定，经中国认证认可协会批准立项，青岛海关技术中心等单位已完成《牛乳基婴幼儿配方乳粉中乳铁蛋白含量的测定液相色谱-质谱/质谱法》团体标准的起草工作，形成征求意见稿，现公开征求意见。有关事项通知如下：一、《牛乳基婴幼儿配方乳粉中乳铁蛋白含量的测定液相色谱-质谱/质谱法》团体标准征求意见稿及编制说明等有关材料可从中国认证认可协会网站下载，网址信息如下：http://www.ccaa.org.cn/images/jsbz/stbzgl/2023/03/24/1679628059381007576.rar二、请填写《意见反馈表》(见附件)，并于2023年4月25日前通过电子邮件反馈至标准起草组。联系人：张鸿伟联系电话：18562789917 电子邮箱：light04@126.com附件：意见反馈表中国认证认可协会2023年3月24日

大家好，本周为大家介绍的是一篇发表在Analytical Chemistry上的文章Charting the Proteoform Landscape of Serum Proteins in Individual Donors by High-Resolution Native Mass Spectrometry1，文章通讯作者是来自荷兰乌得勒支大学的Albert J. R. Heck教授。　　血清中大多数蛋白都是糖基化蛋白，这些糖蛋白对疾病诊断有着重要意义，基于质谱的糖链释放后分析和糖肽分析是目前普遍使用的糖蛋白分析方法，但仍存在一些局限，例如可能遗漏同时发生的翻译后修饰、缺乏对O-糖的研究、遗漏某些糖肽覆盖不到的糖基化位点等。高分辨非变性质谱为完整糖蛋白的分析提供了新的思路，本文开发了一种基于离子交换色谱的分离纯化方法，能够从150μL血清中分离和分析20多种血清(糖)蛋白，质量范围在30-190 kDa之间。　　图1为血清糖蛋白的分离和分析方法。150μL血清首先经过亲和柱以快速去除大量的白蛋白、IgG和血清转铁蛋白等，这一步骤使用的是作者内部制造的机器人，可以加快过柱子的速度。接着血清被送入离子交换(IEX)色谱，使用40分钟的梯度时，大多数蛋白在14-27分钟内洗脱，故作者在13-30分钟内每隔0.5分钟收集一次级分，并将每个级分缓冲液换为乙酸铵溶液，最后进行Thermo Exploris Orbitrap质谱仪分析。　　　　图1.血清糖蛋白非变性质谱分析方法　　作者使用该方法分离了大约24种血清蛋白，并在文中详细介绍了其中4种蛋白的分析过程：α-1抗胰蛋白酶、补体C3、血红素结合蛋白、铜蓝蛋白。　　(1)α-1抗胰蛋白酶(A1AT)是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，在呼吸系统的功能中起重要作用，作者使用唾液酸酶和PNGase F确认了蛋白上的糖型，又通过TCEP的还原处理发现大部分血清样品的A1AT都是半胱氨酸化的，也确认了A1AT存在N端截短的特征，综上，作者共统计出了13个A1AT异质体。针对捐献者提供的血清，作者区分出了携带V237A和E400D突变的A1AT蛋白的供体。　　(2)补体C3蛋白在免疫调节过程中发挥作用，在血清中浓度相对较高，分子量为187kDa。与该蛋白共流出的还有两种约137kDa和80kDa的蛋白，在唾液酸酶处理后，只有80kDa的蛋白质量减少很多，证明其存在唾液酸，而C3和137kDa蛋白的糖型上无唾液酸。通过对级分的糖肽分析确定N糖位点在Asn 63和Asn 917。137kDa蛋白鉴定为C3缺失α链后降解而成。　　(3)血红素结合蛋白(HPX)在血清中的主要功能是结合和运输游离的血红素，进行血红素和铁的再循环。非变性质谱显示HPX质量范围在58-63 kDa，而蛋白质主链质量仅50 kDa。本文首次解析了血清HPX的蛋白型谱，证明了4-5个N-糖和1个O-聚糖的存在，共17种独特的糖型。　　(4)铜蓝蛋白(CER)负责在人体内转运大部分的铜，分子量132kDa，每个CER分子可以携带6-7个铜离子。CER在非变性质谱检测后的分子量比理论质量多409±5Da，作者将其归为6个铜离子和1个钙离子的结合所致，并发现了CER完全去糖后失去结合金属离子的能力。　　　　图2.绘制血清糖蛋白组的全貌图。观察到的血清蛋白质量范围为30-190 kDa，浓度范围为0.2-50g/L　　总结：本文开发了一种从少量人血清中分离多种糖蛋白的方法，并通过高分辨非变性质谱表征了蛋白型谱，为蛋白全貌提供完整视图。该方法的优势在于非变性质谱需要的样品处理步骤少，最大程度的还原了蛋白的生理状态，劣势在于目前通过完整质量只解析了20余种蛋白中的8种，后续需要结合自下而上或自上而下的蛋白质组学方法进行辨别。在未来的研究中，作者建议联用分子排阻色谱和离子交换色谱，实现高通量在线血清蛋白分离分析。　　撰稿：英语佳 编辑：李惠琳　　原文：Charting the Proteoform Landscape of Serum Proteins in Individual Donors by High-Resolution Native Mass Spectrometry

近期，《婴幼儿食品和乳品中骨桥蛋白的测定高效液相色谱法》团体标准发布。此次标准是由中国飞鹤联合国家奶业科技创新联盟、中国农业科学院北京牧医所等单位共同完成制定，是国际首个婴幼儿食品和乳品中骨桥蛋白（OPN）检测方法标准，该标准填补了国际上骨桥蛋白检测方法标准的空白，为我国婴配粉科技创新起到了重要的技术支撑作用。众所周知，骨桥蛋白（OPN）是一种与免疫保护密切相关的珍稀活性蛋白，在人乳中含量较高，在婴幼儿的免疫调节、肠道发育、大脑发育等方面发挥重要作用。但50000g生牛乳中仅含有1g OPN活性蛋白，且珍稀于号称“奶黄金”乳铁蛋白的4倍，可见其十分珍贵。近年来，随着对母乳营养成分奥秘的译码，婴幼儿配方食品中活性蛋白OPN的创新成为新热点。但长期以来，行业缺乏准确度高、成本较低的OPN检测方法及相关标准，限制了原料创新和产品创新。为了解决这个问题，飞鹤研究技术团队用两年多的时间持续开展研究，创新性地建立了高效液相色谱测定方法并申请了两项专利，该检测方法不仅解决了不同乳制品及婴配粉处理过程中骨桥蛋白分离和提取的难题，还解决了操作过程繁琐、投入成本高的难题。其中，在此过程中，中国飞鹤研究院解庆刚也解释说“检测方法是原料制备和产品创新的基础和前提，探索原料制备效果必须有检测方法，配方创新与活性营养含量科学性评价也必须有检测方法。没有活性营养检测方法，谈产品创新毫无意义。”这也证实了飞鹤开展创新研究的初衷，进一步为检测方法的成功奠定了基础。创新检测方法只是飞鹤OPN研究的一部分。据解庆刚介绍，飞鹤在活性蛋白OPN制备技术和功能活性营养组合上进行系统研究和技术攻关，创建从鲜奶或乳清中制备OPN技术，探索了OPN与其他活性营养的功能协调活性，申请活性蛋白OPN相关专利10余项，并在国际科学期刊上发表了有关OPN活性功能的SCI论文2篇。目前，相应的研究成果在持续转化，已应用于飞鹤星飞帆系列产品，更好地帮助宝宝构建身体自护力，也受到更多新生代父母的青睐。通过此次创新研究我们可以看出，作为奶粉行业的龙头企业，飞鹤积极发挥引领作用，不断推进新标准、承担新项目，赋能行业共同进步。对于飞鹤的未来，相关负责人表示，飞鹤将围绕“十四五”项目和“鲜萃活性营养，更适合中国宝宝”的新战略，持续加码科研创新，为推动中国奶业高质量发展贡献自己的一份力。

近期，QRB discovery在线发表了中国科学院生物物理研究所研究员章新政课题组题为Low-cooling-rate freezing in biomolecular cryo-electron microscopy for recovery of initial frames的研究论文。研究发现了在冷冻电镜成像过程中导致电子束诱导蛋白质样品快速漂移的新机制，并提出通过降低冷却速率制备无快速漂移的冷冻电镜样品的新方法。该方法可以有效恢复辐照损伤最少，含最多高分辨信号的成像数据质量，提升重构分辨率，实现辐照损伤敏感氨基酸的高分辨重构，高分辨信号的恢复也为冷冻电镜达到原子分辨率奠定了基础。　　1980年代，有科学家把含水样品快速投入到-183℃的液态乙烷中，制备包埋在玻璃态冰中的低温样品来减少生物样品受高能电子束照射产生的损伤。一般认为，降温速率越快越容易产生玻璃态冰，但是玻璃态冰中的蛋白质在电子束照射初期会产生快速漂移，无法矫正，使冷冻电镜前几帧成像模糊而无法有效应用于三维重构。电子束曝光初期的冷冻电镜数据具有最小的辐照损伤，含有最主要的高分辨信号，所以电子束诱导的快速漂移是实现原子分辨率结构解析以及易辐照损伤氨基酸高分辨重构所需要克服的壁垒，有科学家称其为冷冻电镜中的“Key outstanding problem”。　　经过近5年的攻关，研究人员发现快速漂移源自玻璃态冰在急速冻结时产生的应力，该应力和过高的降温速率相关，可以通过降低冷却速率来减少。通过优化冷冻制样技术，降低冷冻过程中样品的降温速率，研究实现了蛋白质快速漂移的消除（如图）。在降低冷却速率制备得到的冷冻样品中，数据分析展示出冷冻电镜前几帧数据被有效恢复，从恢复的电子密度图中可以清晰看到在普通冷冻样品结构中无法得到的辐照损伤敏感的氨基酸侧链信息。　　研究工作得到国家重点研发计划、国家自然科学基金委员会重点项目、中科院战略性先导科技专项（B类）、中科院基础前沿科学研究计划项目的支持。　　论文链接 降低样品冷却速率消除快速漂移示意图。a.通过降低样品冷却速率，冷冻电镜前几帧数据明显恢复。b-c.增加载网与镊子的传热在载网形成的冷却速率梯度和在不同冷却速率下GDH样品前几帧的恢复情况。d-e.提高液态乙烷温度至-110℃时制备的铁蛋白样品，以及在不同温度下铁蛋白前几帧的恢复情况。f.冷冻电镜前几帧恢复后，易受辐照损伤的氨基酸侧链密度图对比

大家好，本周为大家分享一篇发表在Journal of the American Society for Mass Spectrometry上的文章，Comparing Selected-Ion Collision Induced Unfolding with All Ion Unfolding Methods for Comprehensive Protein Conformational Characterization ，文章的通讯作者是美国威斯康星大学的李灵军教授和南开大学的李功玉教授。近年来，离子迁移质谱（Ion mobility−mass spectrometry, IM−MS）不断发展，成为了探究生物分子结构和稳定性的有力工具。IM-MS实验中测量得到的漂移时间可以转换为与分析物的大小或形态相对应的碰撞截面值（CCS）。碰撞诱导去折叠（collision-induced unfolding, CIU）通过将碰撞能量（CE）应用于气相分析物，研究其在去折叠过程中CCS值的变化，从而提供更多的结构细节。尽管电荷分离的CCS分布代表了气相中丰富的结构信息，但预测具有最接近native状态结构的蛋白质离子电荷态仍然存在困难。另一种方法是记录所有蛋白质电荷状态的四极杆无选择全离子去折叠方法(all ion unfolding, AIU)。如图1所示，本文中作者首先比较了四极杆选择对去折叠的影响及其产生的数据质量。然后，作者引入了一种CCS积累方法，用一个新的CCS参数——CCSacc（accumulated CCS）进行去折叠数据解析，该参数对所有观察到的电荷状态的数据进行汇总，以更好地区分气相中蛋白的结构和构象。作者发现，使用这种CCSacc方法生成的去折叠差异图更稳健，对nESI过程中产生的蛋白质电荷状态的变化具有更高的耐受性。此外，作者观察到用于比较的整体信号强度的增加，使去折叠指纹图谱质量得到改善。另外，这种CCSacc方法保留了电荷分离的CIU信息，也可以按需提取。图1.AIU和CIU工作流程比较图2a展示在不同的碰撞电压下，HSA的CCSacc的分布。CCSacc是综合的气相离子特征，以红色表示。通过CCSacc特征可以分析每个离子对结构的贡献，有助于全面了解现有的HSA结构异质性。通过计算HSA的CCSacc数据可以创建一个新的去折叠指纹图谱，将其与HSA的两种主要电荷态进行比较(图2c)发现，如果只分析单个电荷状态数据，而不将收集到的所有信息合并，就会导致信息丢失。CIU50值揭示的构象稳定性信息也显示了累积指纹图谱与单电荷态指纹图谱的差异，进一步强调了考虑所有电荷态结构信息的必要性。（图3）图2.CCSacc结构分析AIU指纹图谱结合CCSacc数据处理可以更全面地阐明蛋白质变体之间的构象差异。为了证明这一点，作者获取了BSA和HSA的AIU数据，然后提取CCSacc数据，用CIUSuite软件进行定量分析。总的来看，基于CIU50的构象稳定性比较和基于RMSD的整体去折叠指纹图谱比较都清楚地表明，AIU和CCS的累积能够提供更全面的结构信息，并对生物相似性蛋白的细微结构差异进行全面表征。图3.利用CCSacc全面比较HSA和BSA结构最后，作者将CCSacc应用于唾液化的糖蛋白bovine transferrin（bTF），快速分析糖基化对蛋白质结构的影响。图4a显示了bTF的非变性质谱图以及相应的漂移时间热图。先前的糖链研究证明，转铁蛋白是一种具有多种糖型的异质性蛋白，作者的非变性质谱数据（图4a）也明确支持多种糖型的存在。接下来，作者在AIU操作模式下追踪bTF的逐步去折叠行为（图4b-e）。图4f展示了通过CCSacc获得的累积去折叠指纹图谱。可以清楚地观察到，四种不同的构象主导了bTF去折叠过程。CCSacc弥补了不同离子种类观察到的结构差异。此外，构象特征CCS分析和相应的基于CIU50的稳定性分析表明，CCSacc主导的数据与传统CIU分析中常用的最丰富的电荷态所得数据不匹配。这些差异应该主要源于离子种类的贡献，而不是最丰富的离子种类，结果突出了在溶液中使用单一电荷态作为整个蛋白质种类的结构特征时存在的潜在偏差和/或结构损失。图4.通过CCSacc探究唾液酸化糖蛋白的结构CCSacc策略可以更好地维持蛋白质的天然构象，并降低由于仪器条件或溶液中蛋白质电荷态变化造成的影响。在提高去折叠指纹图谱的信噪比并丰富拓扑结构信息的情况下，该策略可以得到更广泛的应用。参考文献：Ashley Phetsanthad, Gongyu Li, Chae Kyung Jeon, et al. Comparing Selected-Ion Collision Induced Unfolding with All Ion Unfolding Methods for Comprehensive Protein Conformational Characterization. Journal of the American Society for Mass Spectrometry, 2022.

营养膳食指导2020年初，新型冠状病毒肺炎(COVID-19)成为突发事件，科学合理的营养膳食增强抵抗力也是重中之重。其中国家卫生健康委员会发布的《新型冠状病毒感染的肺炎防治营养膳食指导》明确提出了各类人群的营养膳食指导。作为一般人群，“膳食指导”建议多吃蔬果、奶类、大豆，做到餐餐有蔬菜，天天吃水果。吃各种各样的奶及其制品，相当于每天液态奶300克。因此乳品也变为了众多食品中关注的焦点。乳品营养丰富，含有蛋白质、脂肪、维生素和矿物质等人体必需营养元素。其中乳蛋白中含有人体所必须的氨基酸；乳脂肪多为短链和中链脂肪酸，极易被人体吸收；钾、磷、钙等矿物质配比合理，易于人体吸收。更重要的是乳品中富含活性蛋白：牛奶中约含3.0%的蛋白质，其中β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、牛血清蛋白、免疫球蛋白、乳铁蛋白、乳过氧化物酶等均具有一定的生物活性功能。如乳铁蛋白具有一定钝化病毒侵染能力的作用，主要机理是乳铁蛋白可作用于病毒侵染的早期，防止病毒对宿主细胞的识别和入侵。优质乳工程“国家优质乳工程”是国家农业部授权中国农业科学院北京畜牧兽医研究所奶业创新团队针对中国奶业实现可持续发展的专项研究项目。国家优质乳工程项目通过重点普及以巴氏工艺加工的巴氏鲜奶，还原牛奶特有的天然活性营养消费价值。国家优质乳工程明确了天然活性营养是优质奶的核心标准，巴氏鲜奶是战略发展方向。因为，由活性免疫球蛋白、乳铁蛋白、α-乳白蛋白、生物活性肽、生长因子等数百种物质组成的天然活性营养，能增强人体抵抗力，促进孩子身高、智力、器官的发育，是一杯牛奶能强壮一个民族的核心所在。优质乳工程检测指标优质乳工程要求对乳中的几大指标如乳铁蛋白、免疫球蛋白、乳过氧化物酶以及糠氨酸等进行检测。乳品中活性蛋白对热敏感，高温可以使乳品中活性蛋白含量降低，为实现牛奶天然活性营养的保存，通过检测乳品中活性蛋白含量控制巴氏杀菌温度，最大程度降低活性蛋白损失。糠氨酸是牛奶热加工过程中出现的副产物，加热强度越高，糠氨酸生成数量就越高，牛奶中的活性成分损失就越多，很可能就不是优质牛奶。中国《食品安全国家标准——食品营养强化剂使用标准》将乳铁蛋白列入GB14880-2012，认定为食品营养强化剂，乳铁蛋白也是母乳中含有的特有成分，有提高婴儿免疫力的作用。中国营养保健食品协会推荐乳铁蛋白为防治新冠状病毒感染的营养补充剂。珀金埃尔默助力优质乳工程珀金埃尔默提供从快速检测到确证分析的优质乳指标组合检测方案。液相色谱仪器方法检测珀金埃尔默推出的乳制品中乳铁蛋白的检测方案，方案包括了前处理的肝素亲和柱和液相色谱系统，依据T/TDSTIA 006—2019《奶及奶制品中乳铁蛋白的测定 液相色谱法》团体标准。样品前处理过柱过程无需吹干，全程过柱仅需1h。液相色谱系统大于4400小时的平均故障间隔时间。检测结果回收率在90~105%之间。液相检测方法除了对乳铁蛋白进行检测外，还可对免疫球蛋白等指标进行分析，但需要使用前处理小柱，企业每年在这些检测上投入巨大，检测时间相对于几分钟一个样本的快速检测还是有所差距。红外光谱快速检测珀金埃尔默 LactoScope™ FT-A乳成分分析仪基于傅里叶变换红外光谱技术（FTIR）的Dynascan干涉仪平台，是一款可在实验室中使用的功能强大的红外光谱解决方案，提供优良的可重复性和灵敏度。仪器具备自动清洗功能，灵活分析，高效，节省分析时间及分析成本（仅仅是电能消耗），不产生化学废物。FT-A乳成分快速分析仪除了能够正常测定乳品厂系列产品的脂肪、蛋白、总固等基本指标，还适用于检测优质乳产品的相关活性指标（乳铁蛋白、免疫球蛋白、乳过氧化物酶以及糠氨酸），检测结果准确可靠，完全能够有效监控产品品质并指导生产。#表1 优质乳免疫球蛋白FT-A与液相数据验证结果表一中乳制品中免疫球蛋白FT-A检测值与液相法测定值的差值基本上可以控制在液相法测定对照值的合理误差范围以内，证明FT-A乳成分快速分析仪可以有效的对优质乳中的免疫球蛋白指标进行准确快速的测定。由此可见，在优质乳检测方面，LactoScope FTA乳成分分析仪配合液相色谱使用，在乳品厂可以大大提高检测效率，降低检测成本。更多乳制品检测资料，请扫码下载

未来拼的不仅仅是努力、财力和学历，还有免疫力2020年新型冠状病毒疫情发展牵动着亿万公众，国家卫健委发布的治疗指南明确指出了自身免疫康复的重要性。免疫力免疫力的搜索频率迅速飙升，成了一个热点词汇。什么是免疫力？免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物（病毒、细菌等）、处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。如何增强免疫力呢？锻炼身体，合理膳食，营养搭配都可以起到增强免疫力的效果，而摄入乳品是提高免疫力较为便捷、有效的方法。国家卫健委等部门近日发布《新型冠状病毒感染的肺炎防治营养膳食指导》，指导意见明确提出“尽量每天饮用300g牛奶或奶制品”。乳制品几乎含有人体所需要的所有营养素，可作为人类良好的优质蛋白质来源，还可提供维生素B2、维生素A、钙等多种人体必需的营养素。部分新型冠状病毒感染的肺炎患者在进行营养治疗时，还需使用特殊医学用途配方食品，而特殊医学用途配方食品的主要原料也来源于乳制品。乳铁蛋白这次主要介绍乳制品中含有能调节免疫功能的独特成分——乳铁蛋白。乳铁蛋白广泛分布于哺乳动物乳汁和其他多种组织及其分泌液中，研究表明，乳铁蛋白是动物初乳中的天然蛋白质，是一种多功能蛋白质，具有广谱抗菌，抗病毒感染作用。中国《食品安全国家标准——食品营养强化剂使用标准》将乳铁蛋白列入GB14880-2012，认定为食品营养强化剂，乳铁蛋白也是母乳中含有的特有的成份，有提高婴儿免疫力的作用。中国营养保健食品协会推荐乳铁蛋白为防治新冠状病毒感染的营养补充剂。同时国内外的论文也证明了其具有预防病毒感染的作用。乳铁蛋白的检测正因为乳铁蛋白的特殊功能，目前市场上关于乳铁蛋白出现了许多虚假和夸大宣传，在一些电商平台搜索及实体店，很多标称“乳铁蛋白”的产品配料表里甚至没有乳铁蛋白。为了净化市场，让乳铁蛋白想得到良性、长久的发展，这时非常有必要对乳制品中的乳铁蛋白的含量进行检测。天津市奶业科技创新协会正式发布T/TDSTIA 006—2019《奶及奶制品中乳铁蛋白的测定 液相色谱法》团体标准，让奶及奶制品中乳铁蛋白的检测更规范。珀金埃尔默推出的乳制品中乳铁蛋白的检测方案，方案包括了前处理的肝素亲和柱和液相色谱系统。方案优势前处理过柱过程无需吹干，全程过柱仅需1h；液相色谱系统大于4400小时的平均故障间隔时间；检测结果回收率在90~105%之间。另外针对液态奶，珀金埃尔默还提供快速测定方案，傅立叶中红外乳品分析仪LactoScope FTA快速测定液态奶中的乳铁蛋白含量。扫描下方二维码，即可下载T/TDSTIA 006—2019《奶及奶制品中乳铁蛋白的测定液相色谱法》白皮书和珀金埃尔默乳制品中乳铁蛋白的检测方案相关资料。

巴西圣保罗州立大学的研究人员进行了一项研究，利用基质辅助激光解吸电离（MALDI）质谱成像（MSI）分析了工蜂大脑中蛋白质表达和分布的可能变化，该工蜂曾暴露于亚致死浓度的吡虫啉（LC50/100或1%的LC50）下。 在世界范围内使用杀虫剂进行作物生产已经非常普遍，其中一个相当令人关注的问题是，这些杀虫剂不仅对害虫有害，对于在作物授粉过程中起重要作用的昆虫也是有害的。由于杀虫剂的使用，在蜜蜂中报告了许多亚致死效应，包括对发育、觅食方式、喂养行为、学习表现和神经生理学的影响。所以，评估农药对蜜蜂可能产生的有害影响的毒理学研究很重要，可以帮助制定保护和传粉媒介保持策略。 图片来源于Pixabay研究旨在评估暴露于亚致死浓度吡虫啉（LC50/100: 0.014651 ng 吡虫啉 μL?1 饮食）对蜜蜂的大脑中某些蛋白质分布的影响。研究人员通过MALDI-MSI方法对这些蛋白质进行了鉴定。MALDI-MSI技术通过监测特定脑神经在特定时间发生的生物化学过程的时空动态来实现组织原位蛋白质组学分析。为此，研究人员将觅食蜜蜂暴露在含有亚致死浓度吡虫啉的饮食中8天，然后，在暴露的第8天搜集蜜蜂，并使用蛋白质密度图分析它们的大脑。 图：参与学习和记忆获取的酶的MALDI质谱成像结果。（a）蛋白激酶C；（b）14-3-3 Leonardo蛋白；（c）肌动蛋白-5C；和（d）转铁蛋白。 结果表明，吡虫啉的暴露导致了蜜蜂大脑的一系列生化变化，包括突触调节、凋亡调节和氧化应激的改变，这些变化可能对这些蜂群的生理产生不利影响。 最早的质谱成像技术是MALDI质谱分子成像技术，是由范德堡大学（Vanderbilt University）的Richard Caprioli等在1997年提出的。如今，作为质谱最年轻的应用，质谱成像技术已经在医学研究（如癌症病理）、生物学研究（如上述研究所示）、药物研究（如药物代谢）等诸多领域显示了巨大的价值，并得到飞速发展，成为质谱研究的一大热点。基于新一代宽谱定量飞行时间质谱平台QuanTOF，融智生物于2017年推出了QuanTOF质谱成像系统，该系统拥有强大的5,000Hz长寿命半导体激光器，以及自主开发的数据采集软件。2018年7月，融智生物宣布实现可达500像素/秒的成像速率，提升传统MALDI-TOF MS成像速率达10倍以上，普通样本成像只需几十分钟，使得质谱成像实现了“立等可取”。经过进一步的研发，目前QuanTOF质谱成像系统已经实现高达1000像素/秒的成像速率，在5-10微米的高空间分辨率下仍然保持极灵敏度。QuanTOF质谱成像系统使得质谱成像真正可用于临床病理分析、术中分析等领域，为广大人民造福。

p & nbsp /p p 　　层析纯化技术由于其高选择性、灵活性、易放大性等优点，已经成为蛋白质药物纯化中不可或缺的技术。传统的层析填料为多糖基质，孔径一般在100 nm以下。1970年代出现了大孔和微孔无机材料硅填料，虽然增大了孔道、提高了层析的分辨率和流速，但只能在PH2-7.5范围内稳定，不利于分离纯化在碱性范围内稳定的蛋白质或是需要碱性层析条件的分离，从而限制了其在大规模快速分离蛋白质层析上的应用。多孔聚合物微球由于其高的比表面积、高的机械强度和多样的表面特征，常被用作层析分离纯化的填料。目前已发展出了多种表面基团、基质种类的层析填料，成功用于疫苗、病毒、抗体、酶、细胞因子等的分离纯化。 /p p 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　层析纯化病毒、病毒样颗粒等生物大分子的瓶颈问题 /strong /span /p p 　　随着病毒、病毒样颗粒在疫苗、肿瘤治疗、免疫治疗中的地位越来越重要，这类复杂生物大分子的分离纯化需求也逐渐增加。然而传统填料由于孔径较小，蛋白质只能以扩散方式通过填料，传质速率慢，处理量低，造成分离时间长、容易失活等问题[1]。当蛋白质体积较大时，填料表面在吸附一层蛋白后，由于体积位阻以及静电排斥作用，会阻碍其它的蛋白质进一步进入孔内，造成填料的载量下降。另一个限制是病毒或疫苗，尤其是带有包膜的病毒或疫苗，在狭窄的填料孔径内发生吸附时非常容易发生结构变化，破坏其整体结构。在乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的纯化中发现这种病毒样颗粒在层析时会发生解聚[2]，经过离子交换层析分离后，疫苗的回收率通常不到50%[3, 4]。而抗原的结构发生变化以后，就会对其免疫原性产生影响，所以需要在纯化过程中尽可能维持抗原的结构。 /p p 　　为了解决针对病毒及病毒样颗粒纯化的瓶颈问题，目前已有采用膜色谱、超大孔贯穿孔颗粒填料及整体柱的策略进行纯化的案例，成功纯化了包括人乳头瘤病毒、番茄花叶病毒、流感病毒、腺病毒、慢病毒及各种病毒样颗粒。 /p p span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　　病毒及病毒样颗粒的分离纯化 /strong /span /p p 　　根据文献报道，超大孔填料相比传统层析填料不仅在载量及处理速度上有极大的优势，还更有利于病毒及病毒样颗粒的结构保持。 /p p 　　例如，在重组乙肝病毒表面抗原的分离纯化中，采用具有120nm及280nm超大孔径的离子交换填料DEAE-AP-120 nm和DEAE-AP-280 nm(商品名为中科森辉的Giga系列)具有比传统填料DEAE-FF高7倍以上的动态载量[1]。此外，采用ELISA测定抗原收率，发现采用超大孔填料能够减少重组乙肝病毒表面抗原在层析过程中的裂解，从而显著提高活性抗原的收率。 /p p style=" text-align: center " img width=" 576" height=" 450" title=" 1.jpg" style=" width: 415px height: 282px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/3b67db18-4291-4ab6-9874-209cd57644af.jpg" / 　　 /p p style=" text-align: center " 重组乙肝病毒表面抗原在不同孔径离子交换填料上 /p p style=" text-align: center " 　　的吸附动力学[1] /p p style=" text-align: center " img width=" 497" height=" 345" title=" 2.jpg" style=" width: 387px height: 289px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/07fdf233-77a5-4c30-8d20-faf7f044b54a.jpg" / 　 /p p style=" text-align: center " 　重组乙肝病毒表面抗原从不同孔径的填料上洗脱下来的 /p p style=" text-align: center " 　　ELISA回收率[1] /p p 　　对病毒的分离纯化同样有类似的效果。例如在灭活口蹄疫病毒的纯化中，DEAE-FF导致严重的病毒裂解。而采用具有100nm以上孔径的超大孔填料，不仅载量提高10倍以上，还能显著提高病毒在填料上吸附时的热稳定性，从而减少病毒的裂解，具有更高的收率。最终的分离纯化单步收率达90%以上[5]。 /p p style=" text-align: center " 　　 span style=" font-size: 14px " strong 灭活口蹄疫病毒在传统填料与超大孔填料上的吸附解离过程 /strong /span /p p 　　与商品填料的小孔道填料相比，超大孔结构可能从以下几方面提高对蛋白质构象的稳定性： /p p 　　1)增大孔道(受限空间)：根据蛋白质折叠行为计算显示，蛋白质的折叠速率与空腔大小、形状密切相关，也即当填料孔道与蛋白的相对尺寸超过某一阈值后，蛋白的折叠行为将不受空腔大小影响。与数十纳米中孔结构的传统填料的相比，数百纳米超大孔结构会因孔道增大、与蛋白接触面积减小，从而对某一尺寸下蛋白质的变构行为有所改善。 /p p 　　2)界面曲率：小孔径填料孔道曲率大，填料与蛋白质接触面积大，因此受更大吸附力影响，蛋白质二级结构变化越严重。而曲率更大的超大孔孔道对蛋白二级结构的保护比狭窄孔道更有优势。 /p p style=" text-align: center " 　 span style=" font-size: 14px " strong 　表面曲率变化对蛋白接触面积的影响 /strong /span /p p 　　3)改善配基与蛋白活性区域的接触面积：超大孔微球内部数百纳米孔道在修饰配基后可能会有效改善传统填料狭窄孔道内由于配基拥挤造成的蛋白质失活现象。 /p p 　　4)减少蛋白在孔道内的静电排斥作用：有研究者认为，在离子交换填料上蛋白质起初会在孔道入口处形成一圈静电层，这一静电层会对后来蛋白继续进入孔道产生排斥作用从而使孔道关闭，动态载量下降。如果将超大孔填料修饰为离子交换树脂，由于孔道尺寸显著扩大可能会有效改善蛋白吸附静电层对孔道的封闭作用，从而有效引导蛋白质进入超大孔道，提高回收率。 /p p span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　　快速分离蛋白质及pDNA /strong /span /p p 　　除了应用于病毒及病毒样颗粒的分离纯化的分离纯化，利用超大孔填料传质速度快的优势，将超大孔填料镀上亲水表层，再接上不同配基制成多种形式的层析填料，用于快速高分辨率的纯化蛋白混合物或质粒。超大孔填料制备成的亲和层析、反相层析和离子交换层析填料广泛的应用在蛋白质的分离纯化方向，显示出超大孔填料比传统分离填料高速高分辨率的蛋白质纯化优势。 /p p 　　例如以肌红蛋白、转铁蛋白和牛血清白蛋白的混合溶液为模拟体系，考察不同流速下超大孔聚苯乙烯阴离子交换介质(DEAE-AP，商品名为Giga系列)的分离效果，并与DEAE 4FF介质进行了对比。实验结果(图2)显示，作为对照的DEAE-4FF介质在流速达到361 cm/h时，分离效果已明显降低，而超大孔介质可以在流速高达1084 cm/h的条件下操作，分离效果良好，能够在6 min内实现三种生物大分子的快速分离。 /p p style=" text-align: center " img width=" 588" height=" 170" title=" 3.jpg" style=" width: 473px height: 144px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/65df31ac-bd00-4a08-8a5a-feedfa1aa990.jpg" / /p p 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　超大孔填料应用前景与展望 /strong /span /p p 　　近年来，随着生命科学的发展，生物样品越来越复杂，如人的血样、尿样、组织样品等，对生物分离分析技术提出更高的要求。根据超大孔填料固有的诸多优点，通过合成不同种类的超大孔固定相及在固定相上做不同功能的衍生，超大孔填料已经被广泛应用于生物分离分析中，但也存在一些问题。因此，发展新的制备手段，优化制备条件和过程，探索制备和分离机理，对于开辟新的应用领域以及开展实际样品的分离分析有更大的理论和现实意义。 /p p 　　根据已有的文献报道，我们可以预测今后几年的相关工作仍会集中在以下几个方面： /p p 　　(1)规则的聚合物整体材料内部形态。如获得规则的3D网络骨架，可控的孔径尺寸和分布。 /p p 　　(2)继续在微分离系统中扩展其应用。如在加压电色谱、微流控芯片材料、微流色谱和纳流色谱系统，甚至纳米器件开发等诸多方面大显身手。 /p p 　　(3)表面物理化学性质的调控向功能化、智能化方向发展。如基于分子印迹技术、温度响应以及pH响应的表面智能化的整体材料。 /p p 　　(4)制备规模整体柱的开发及其在生物下游技术中的应用。 /p p 　　目前，已经有一部分整体柱实现了商品化，但种类有限，还无法与种类繁多的颗粒型填充柱相提并论，也远未能满足分离分析的需求。而颗粒型的超大孔填料，由于其制备较困难、批次间重复性较差、价格昂贵等，也没有得到广泛的应用。相对于超大孔填充柱，有机相整体柱存在因流动相变会发生溶胀或收缩、机械强度差、比表面积小、柱容量差以及聚合过程中产生的微孔不利于小分子样品的分析等问题，现有报道大都用于生物大分子的分离。硅骨架整体柱也存在必须预先聚合好装入套管中，制备繁琐，比表面积较小的问题。因此，如何以更简便、有效的方式制备高效新型的超大孔填料并将其应用于实际样品的分离分析仍然是今后工作的重心。在实际工作中所面临的层出不穷的问题也是推动新型超大孔填料制备技术和方法发展的源源不竭的动力，在诸多的尝试中很可能就会出现某些性质优良的超大孔填料，这也预示着将来商品化的超大孔会越来越多。 /p p span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　　部分商品化的超大孔层析介质 /strong /span /p p 　　 strong 超大孔填料因其具有独特的多孔结构，与传统填料相比具有更加优良的渗透性和传质速率，可以在较低的操作压力下实现高效和快速的分离，已成为继多聚糖、交联与涂渍、单分散之后的第四代分离填料。可以预测，随着制备技术的不断提升，超大孔填料在生命科学、医药、环境和化学化工等领域必将大有可为。 /strong /p p 　　参考文献 /p p 　　[1] M.R. Yu, Y. Li, S.P. Zhang, X.N. Li, Y.L. Yang, Y. Chen, G.H. Ma, Z.G. Su, Improving stability of virus-like particles by ion-exchange chromatographic supports with large pore size: Advantages of gigaporous media beyond enhanced binding capacity, Journal of Chromatography A, 1331 (2014) 69-79. /p p 　　[2] P.M. Kramberger P, Boben J, Ravnikar M, ?trancar, A.S.m.c.a.b. in, p.a.f.q.o.t.m. virus., J. Chromatogr. A 1144(1). /p p 　　[3] W. Zhou, J. Bi, J.-C. Janson, A. Dong, Y. Li, Y. Zhang, Y. Huang, Z. Su, Ion-exchange chromatography of hepatitis B virus surface antigen from a recombinant Chinese hamster ovary cell line, Journal of Chromatography A, 1095 (2005) 119-125. /p p 　　[4] W. Zhou, J. Bi, J.C. Janson, Y. Li, Y. Huang, Y. Zhang, Z. Su, Molecular characterization of recombinant Hepatitis B surface antigen from Chinese hamster ovary and Hansenulapolymorpha cells by high-performance size exclusion chromatography and multi-angle laser light scattering, Journal of Chromatography B, 838 (2006) 71-77. /p p 　　[5] S.Q. Liang, Y.L. Yang, L.J. Sun, Q.Z. Zhao, G.H. Ma, S.P. Zhang, Z.G. Su, Denaturation of inactivated FMDV in ion exchange chromatography: Evidence by differential scanning calorimetry analysis, BiochemEng J, 124 (2017) 99-107. /p p /p

完达山：新西兰进口乳铁蛋白硝酸盐含量异常 　　据国家质检总局网站消息，中国完达山乳业股份有限公司落实食品安全主体责任，从新西兰仅次于恒天然的第二大乳企Westland公司的乳铁蛋白中检出硝酸盐含量异常。 　　国家质检总局已就此与新西兰初级产业部通报信息，核实受影响产品的情况。国家质检总局已要求相关检验检疫机构封存了问题产品，同时决定暂停进口新西兰Westland公司生产的乳铁蛋白，要求所有来自新西兰其他企业的乳铁蛋白及Westland公司的其他乳制品进口时提供硝酸盐检测报告。 　　国家质检总局要求新西兰政府全面检查输华产品生产企业管理体系和产品，确保安全。 　　经核查确认，涉及的新西兰产品中共有390公斤输往中国用做乳品生产原料，均未进入流通、消费环节。 　　有关食品安全专家介绍说，乳铁蛋白是一种营养强化剂。根据食品安全国家标准《食品营养强化剂使用标准》规定，该营养强化剂可以用于调制乳、风味发酵乳、含乳饮料及婴幼儿配方乳粉，乳铁蛋白中硝酸盐含量高于标准规定，不一定必然造成乳制品中硝酸盐含量不符合标准。 　　专家同时指出，因婴幼儿配方乳粉的其他原料中也可能含有硝酸盐，多种原料同时含有硝酸盐，可能最终使婴幼儿配方乳粉等食品中硝酸盐含量超过标准规定。因此，生产企业为了保证终产品的硝酸盐含量符合食品安全国家标准规定，应当对所有原料进行检测。 　　Westland发声明 透露最高超标13.65倍 　　Westland Milk在今天发布的声明中表示，少量出口中国的乳铁蛋白粉硝酸盐含量过高。目前，这些乳铁蛋白粉的去向已经查明，并已经封存。该公司强调，硝酸盐的含量水平不会造成食品安全威胁。 　　Westland Milk首席执行官Rod Quin表示，公司已经就此向新西兰初级产业部(MPI)报告此事。本次污染共涉及两批总重量390公斤的乳铁蛋白粉，其硝酸盐含量分别是百万分之610和2198。根据新西兰的规定，硝酸盐含量不得超过百万分之150。据此计算，两批产品分别超标3倍和13.65倍。 　　Quin说，根据目前的调查情况，这是一起独立的事件。造成污染的原因，是在生产新一批产品前，Hokitika工厂没有完全冲洗掉清洁制剂的残留。而在清洁制剂中，含有硝酸盐成分。而在出口之前公司的日常监测中，这批乳铁蛋白并未被查出问题。 　　目前，该公司已经暂时封存仓库内的所有乳铁蛋白粉，并着手对所有批次的产品进行重新检查。迄今为止，所有收到的报告均显示硝酸盐含量没有超过新西兰标准。此外，Westland Milk的其他产品并未受到影响。 　　政府紧急撤销相关产品出口许可 　　新西兰初级产业部(MPI)周一发布公告，表示在得知情况后，已经撤销四批Westland Milk乳制品的出口许可。 　　MPI透露，其中一批受污染乳铁蛋白直接运往中国，用于制造其他乳制品。另一批则是供给新西兰国内的 Tatua Cooperative乳业，产品同样运往中国。&ldquo 目前几乎所有相关产品已经被封存。&rdquo MPI强调，受影响的乳铁蛋白产品并没有在新西兰市场销售。 　　目前，MPI的技术专家正密切关注事件。&ldquo 相信对中国消费者造成的食品安全威胁几乎可以忽略，&rdquo MPI署理总干事Scott Gallacher说，&ldquo 因为乳清蛋白在相关产品中的含量非常少，这意味着，相关产品的硝酸盐含量很容易就会处于可接受范围内。&rdquo 接下来，MPI、外交贸易部和相关公司将会继续与中方监管部门合作，关注此事进展。

抗击疫情，全力出击之“提高免疫力”篇 一场疫情让我们明白未来，拼的不是学历不是财力，不是权利拼的是免疫力 2020年新型冠状病毒疫情发展牵动着亿万公众，国家卫健委发布的治疗指南明确指出了自身免疫康复的重要性。免疫力是人体自身的防御机制，是人体识别和消灭外来侵入的任何异物（病毒、细菌等）、处理衰老、损伤、死亡、变性的自身细胞以及识别和处理体内突变细胞和病毒感染细胞的能力。现代免疫学认为，提高免疫力是人体识别和排除“异己”的生理反应。人体内执行这一功能的是免疫系统，有多种方法 可以增强免疫力理，多食用有益食品，特别是小孩，需多注意免疫力的增强。近期，国家卫生健康委员会网站发布了《新型冠状病毒感染的肺炎防治营养膳食指导》，其中建议： 乳制品几乎含有人体所需要的所有营养素，可作为人类良好的优质蛋白质来源，还可提供维生素B2、维生素A、钙等多种人体必需的营养素。部分新型冠状病毒感染的肺炎患者在进行营养治疗时，还需使用特殊医学用途配方食品，而特殊医学用途配方食品的主要原料也来源于乳制品。乳铁蛋白这次主要介绍乳制品中含有能调节免疫功能的独特成分——乳铁蛋白。乳铁蛋白广泛分布于哺乳动物乳汁和其他多种组织及其分泌液中，研究表明，乳铁蛋白是动物初乳中的天然蛋白质，是一种多功能蛋白质，具有广谱抗菌，抗病毒感染作用。中国营养保健食品协会推荐乳铁蛋白为防治新冠状病毒感染的营养补充剂。乳铁蛋白的检测正因为乳铁蛋白的特殊功能，目前市场上关于乳铁蛋白出现了许多虚假和夸大宣传，在一些电商平台搜索及实体店，很多标称“乳铁蛋白”的产品配料表里甚至没有乳铁蛋白。为了净化市场，让乳铁蛋白想得到良性、长久的发展，这时非常有必要对乳制品中的乳铁蛋白的含量进行检测。今天，我们就来看一下中国《食品安全国家标准——食品营养强化剂乳铁蛋白》GB1903.17-2016中的检测标准。乳铁蛋白占总蛋白质量百分比的测定称取试样和乳铁蛋白对照品各0.1g,分别加入一级水(或氯化钠溶液)10mL使其溶解后, 通过0.45μm滤膜,得到试样溶液和对照溶液。分别量取上述两种溶液50μL注入高效液相色谱仪,在280nm处进行测定，使试样溶液主峰的保留时间和对照溶液主峰的保留时间相一致(约为10min)。主峰作为乳铁蛋白峰,在主峰保留时间2倍范围内测定所有溶出的峰面积, 主峰面积与所有峰面积的比值即为总蛋白中乳铁蛋白的含量。 在实验室检测过程中，小编为大家推荐——杰出性能，超高性价比 Pioneer® PX系列精密天平PX电子天平不仅具备称重功能，且性能优异，提供实验室、工业和教育领域中各种应用的精准需求；PX天平价格实惠、显示屏清晰直观，第二行增加了中文操作提示，标配USB和RS232通讯接口，通讯便利。 产品特点PX系列电子天平广泛应用于实验室、工业和教育领域，不仅满足您精准称量、高性能的需求，且价格实惠。铝压铸金属基座，不锈钢秤盘，打造出坚固耐用的通用型天平。显示屏双行显示，第二行可显示天平中文操作提示，用户无需参照说明书即可操作天平；称量室上方自带红色ESR静电消除条，独特的除静电设计，确保天平称量准确；天平配备的标准USB和RS232接口，数据通讯更便捷。 如果您想了解奥豪斯电子天平的详情，请拨打电话奥豪斯销售服务专线「400-891-5989」或者进入「访客留言」，留下您的信息，我们的专业工程师将竭诚为您服务！

p 　　随着电子检测和图像处理技术的突破，近年来，电子冷冻显微镜(cryo-EM)已实现了对蛋白质结构更高精细度的图像分析。但是目前想获得蛋白质中高分辨率的单原子冷冻电镜图像还很困难。5月底英国剑桥医学研究委员会分子生物学实验室和德国马克斯· 普朗克生物物理化学研究所两个实验室分别在预印本网站bioRxiv发表论文报告了冷冻电镜产生了迄今为止最清晰的图像，并且首次识别出了蛋白质中的单个原子，巩固了冷冻电镜作为绘制蛋白质3D形状的主要工具的地位。 /p p 　　为了让冷冻电镜达到原子分辨率，两个团队研究了一种名为去铁蛋白的蛋白质。由于其稳定性，这种蛋白质已经成为冷冻电镜的试验台：该蛋白质结构之前的纪录分辨率为1.54× 10 sup -10 /sup 米。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202006/uepic/3bb0bc38-c960-48db-bcb5-b9b02f3a8c37.jpg" title=" 铁蛋白Pic.jpg" alt=" 铁蛋白Pic.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 去铁蛋白相关电镜图片 /strong /p p style=" text-align: right " span style=" font-size: 14px " strong 图片来源：论文 /strong span style=" background-color: rgb(255, 255, 255) color: rgb(19, 19, 19) font-family: " gill=" " sans=" " letter-spacing:=" " Single-particle cryo-EM at atomic resolution /span /span /p p 　　随后，研究小组通过技术改进，拍摄到了更清晰的去铁蛋白照片。领导了德国该项目研究的生物化学家和电子显微镜学家Stark研究小组得到了这种蛋白质的1.25× 10 sup -10 /sup 米结构，提高了所得图像的分辨率。英国团队获得的1.2× 10 sup -10 /sup 米结构非常完整，领导了该项目的结构生物学家Scheres说，他们可以分辨出蛋白质和周围水分子中的单个氢原子。 /p p 　　Scheres和同事Aricescu还测试了对一种名为GABAA受体的蛋白质的简化形式的改进。这种蛋白质位于神经元膜，是全身麻醉剂、焦虑药物和许多其他药物的靶标。去年，Aricescu团队使用冷冻电镜将该蛋白质定位到2.5× 10 sup -10 /sup 米。但使用新的试剂盒，研究人员获得了1.7× 10 sup -10 /sup 米分辨率。Aricescu说：“这就像在你的眼睛上剥去一层模糊的东西。在这个分辨率下，每0.5× 10 sup -10 /sup 米就打开了一个完整的宇宙。” /p p 　　原子分辨率图足够精确，可以在约为1.2× 10-10米的分辨率下清楚地分辨出蛋白质中单个原子的位置。这些结构对于理解酶是如何工作的，以及利用这些见解来识别能够阻止其活性的药物特别有用。 /p p 　　Scheres说，这些突破可能会巩固冷冻电镜作为大多数结构研究首选工具的地位。但Stark认为，X射线晶体学仍保留一些吸引力。如果一种蛋白质可以结晶，那么它就能在很短时间内相对高效地生成与数千种潜在药物相结合的结构，不过仍然需要数小时到数天的时间，才能为极高分辨率的低温电磁结构生成足够的数据。 /p p br/ /p p 　　相关论文： /p p span style=" background-color: rgb(255, 255, 255) color: rgb(19, 19, 19) font-family: " gill=" " sans=" " font-size:=" " letter-spacing:=" " /span /p p 　　 a href=" https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.05.22.110189v1.full-text" target=" _blank" Single-particle cryo-EM at atomic resolution /a /p p 　　 a href=" https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.05.21.106740v1.full-text" target=" _blank" Breaking the next Cryo-EM resolution barrier – Atomic resolution determination of proteins! /a /p

一、项目基本情况项目编号：HNWY-2023307项目名称：中南大学湘雅医院检验科一批试剂入围遴选项目预算金额：2274.130000 万元（人民币）采购需求：包号目录号试剂名称产地预算单价限价（元/人份）使用科室入围数量11解脲脲原体（UU）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）国产16.15检验科2家2沙眼衣原体（CT）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）国产16.153淋球菌（NG）核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）国产16.1521EB病毒核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针法）国产15.22家2人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针法）国产15.231BK病毒核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针）国产14.252家2JC病毒核酸定量检测试剂盒（PCR-荧光探针）国产14.2541人MTHFR基因多态性检测试剂盒（PCR-荧光探针法）国产1522家51人CYP2C9与VKORCI基因多态性检测试剂盒国产1802家2人CYP2C19基因分型检测试剂盒（PCR-荧光探针法）国产18061人乳头状瘤病毒（HPV）检测试剂盒（PCR荧光法）进口106.42家2人乳头状瘤病毒（HPV）检测试剂盒（PCR荧光法）进口106.43沙眼衣原体/淋球菌/解脲脲原体核酸检测试剂盒进口7571septin9基因甲基化检测试剂盒国产2852家81葡萄糖6磷酸脱氢酶基因突变检测试剂盒（基因芯片法）国产4202家91新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（快检）国产3.51家2新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒（快检）国产3.5101新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试剂盒国产3.331家2核酸提取试剂盒（磁珠法）及附件国产0.95111人类SLC01B1和ApoE基因检测试剂盒国产2102家121苯丙氨酸羟化酶基因突变检测试剂盒（基因芯片法）国产3202家131CYP3A5基因检测国产2102家141血细胞分析用溶血剂进口0.351家2血细胞分析用溶血剂进口0.883血细胞分析用WNR染色液进口1.484血细胞分析用WDF染色液进口1.335血细胞分析用血红蛋白溶血剂进口0.366血细胞分析用稀释液国产0.587血细胞分析仪用清洗液进口11.4/ml8血液分析仪用质控品进口171/ml9血液分析仪用质控品进口171/ml10血液分析仪用质控品进口171/ml11血细胞分析用染色液&网织红染色液进口7.9212血细胞分析用稀释液进口1.33151流式管进口0.82/根1家2流式细胞仪质控品进口87.53/ml3细胞质控品进口43.764流式细胞分析用溶血剂进口6.565HLA-B27 FITC/HLA-B7-PE检测试剂盒进口36.48161血细胞分析用染色液试剂盒进口3.661家2血液分析仪用质控品进口101.79/ml3库尔特血细胞分析系统专用试剂-DxH清洗液进口0.074库尔特白细胞五分类试剂包进口0.965血细胞分析用溶血剂进口1.096血细胞分析用稀释液国产1.44171尿液干化学分析质控物（阴性）&阴性质控液国产3.68/ml1家2尿液干化学分析质控物（阳性）&阳性质控液国产3.68/ml3尿液分析试纸条国产1.18181瑞氏-姬姆萨染色液-B液国产0.081家2瑞氏-姬姆萨染色液-A液国产0.293瑞氏-姬姆萨染色液国产0.25191精子采样管&精子质量分析仪测量仓进口221家201大便隐血检测试剂盒（胶体金法）国产31家2粪便分析系统专用试剂包国产0.683粪便分析系统专用试剂包&粪便专用采集管国产2.66211大便隐血检测试剂盒（胶体金法）国产2.472家221便隐血检测试纸（胶体金免疫层析法）&便隐血试纸国产2.472家2310139群霍乱弧菌检测试剂盒（胶体金法）国产11.972家201群霍乱弧菌检测试剂盒（胶体金法）国产12.54241尿沉渣计数板进口7.131家2尿液分析试纸条（干化学法）进口1.62251C反应蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）进口5.021家2IMMAGE免疫化学系统专用试剂-清洗液进口0.04/ml3κ轻链检测试剂盒（免疫比浊法）进口8.214λ轻链检测试剂盒（免疫比浊法）进口8.215补体C3检测试剂盒（免疫比浊法）进口3.196补体C4检测试剂盒（免疫比浊法）进口3.197缓冲液（BUF3）国产1.05/ml8缓冲液（BUFI）国产0.73/ml9抗链球菌溶血素O检测试剂盒（免疫比浊法）进口5.9310缓冲液（BUF2）进口1.96/ml11类风湿因子检测试剂盒（免疫比浊法）进口5.4712免疫球蛋白A检测试剂盒（免疫比浊法）进口4.113免疫球蛋白G检测试剂盒（免疫比浊法）进口4.114免疫球蛋白M检测试剂盒（免疫比浊法）进口4.115尿免疫球蛋白G检测试剂盒进口6.3816铜蓝蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）进口11.0817微量白蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）进口6.6518样本稀释液进口0.73/ml19转铁蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）进口2.7420尿转铁蛋白检测试剂盒（免疫比浊法）进口5.47261C反应蛋白测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）国产3.81家2κ-轻链检测试剂盒（免疫比浊法）国产8.123λ-轻链检测试剂盒（免疫比浊法）国产8.124补体C3测定试剂盒（免疫比浊法）国产2.895补体C4测定试剂盒（免疫比浊法）国产2.896抗链球菌溶血素O测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）国产4.757类风湿因子测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）

近日，国家食品药品监督管理总局（下称“食药监”）在全国范围内组织对黄柏、延胡索等中药材及中药饮片进行了专项监督抽检，分别从药品生产、经营和使用环节进行了抽样，共检出9批不合格产品含有非食用物质金胺O，上市公司国药控股下属广西中药饮片有限公司被涉及。抽检不合格中药产品信息如下：重庆市食品药品检验检测研究院检验，发现标示为安国市万联中药饮片有限公司、安徽易元堂中药饮片科技有限公司、安徽沪昆中药饮片有限公司、亳州市长生中药饮片有限公司、亳州市贡药饮片厂、国药控股广西中药饮片有限公司6家药品生产企业生产的7批黄柏检出金胺O 经广州市药品检验所检验，发现标示为安国市辉发中药饮片加工有限公司生产的1批延胡索、运城市风陵渡开发区华昌药业有限公司售出的1批延胡索检出金胺O。据了解，金胺O是一种化学染色剂，曾发现被用于劣质黄柏、蒲黄、延胡索等中药材、中药饮片的非法染色，他对人体具有一定毒性作用，长期过量食用易损伤肝肾，国际癌症研究所(IARC)甚至将其列为人类致癌化合物。上海圻明生物科技有限公司提供相关检测试剂盒人电压门控钾通道自身抗体(VGKC Ab)ELISA试剂盒人三磷酸腺苷(ATP)ELISA试剂盒人白喉棒状杆菌抗体IgM(C.diphtheriae IgM)ELISA试剂盒人炭疽杆菌抗原(Anthracis Ag)ELISA试剂盒人庚肝抗体(HGV-Ab)ELISA试剂盒人风疹病毒抗体IgM(RV IgM)ELISA试剂盒人乙型流感IgG抗体(FLU-B IgG)ELISA试剂盒人单纯疱疹1病毒抗体IgM(HSV-1 IgM)ELISA试剂盒人单纯疱疹2病毒抗体IgM(HSV-2 IgM)ELISA试剂盒人S100钙结合蛋白A8/A9复合物(S100A8/A9)ELISA试剂盒人免疫缺陷病毒抗原(HIV-1 P24)ELISA试剂盒人血管性血友病因子胰多肽(VWFpp)ELISA试剂盒人抗胰岛素抗体(AIAb)ELISA试剂盒人尾加压素Ⅱ(UⅡ)ELISA试剂盒人X-盒结合蛋白1(XBP-1)ELISA试剂盒人乙酰辅酶A脱氢酶(ACADs)ELISA试剂盒人Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)ELISA试剂盒人单纯疱疹病毒抗原(HSV-Ag)ELISA试剂盒人脑膜炎发奈瑟氏菌IgM抗体(N. meningitides IgM)ELISA试剂盒人肺吸虫抗体IgM(Paragonimus-IgM)ELISA试剂盒人铁卟啉(Iron porphyrin)ELISA试剂盒人巨细胞病毒IgM(CMV-IgM)ELISA试剂盒人巨细胞病毒IgG(CMV IgG)ELISA试剂盒人颗粒蛋白酶A抗体(PPA Ab)ELISA试剂盒人巨细胞病毒抗原(CMV-Ag)ELISA试剂盒人诺如病毒抗原(NV Ag)ELISA试剂盒人粘膜地址素细胞粘附因子(MAdCAM-1)ELISA试剂盒人T淋巴细胞病毒Ⅱ型(HTLV-Ⅱ)ELISA试剂盒人神经迁移蛋白(Slit2)ELISA试剂盒人乳铁蛋白(LT/LTF)ELISA试剂盒人细胞色素C(Cytc)ELISA试剂盒

导语世界卫生组织曾作出估算，全球约有40至50亿人铁元素缺乏，占75%~84%。缺铁是全球最常见的营养不良之一。根据年龄、健康状况和体重不同，人体大约含有2至4克铁。人体的大部分铁与血红蛋白结合，形成一种能够与红细胞中的氧气相结合的蛋白质复合物。铁还能与其他蛋白质如含铁血黄素、肌红蛋白、转铁蛋白和铁蛋白结合，将铁储存并在需要时释放到特定机体位置。造成缺铁的原因有以下：由饮食不均衡、营养不良或肠道吸收不良而导致的缺铁因怀孕、哺乳或儿童和青少年的成长需要造成的缺铁急性或慢性失血引起的缺铁补铁的常见形式：改变饮食口服补铁静脉补铁由于铁不能直接注射到血液中，所以静脉注射的铁制剂含有铁碳水复合物。这些复合物在血液中释放铁，被细胞吸收传递给铁蛋白和转铁蛋白，在体内使用。由于高分子量的铁静脉注射常常引起并发症，因此低分子量的铁制剂如蔗糖铁、羧麦芽糖铁或葡萄糖酸铁钠现已成为静脉注射的首选。这些制剂是胶体分散体，颗粒在较低的纳米范围内，颗粒由稳定的碳水化合物外壳和铁核组成。为了满足制药产品的严格要求，在进入市场之前，必须对铁质输液制剂进行全面、系统的表征。利用DLS和ELS(动态和电泳光散射)和SAXS(小角度x射线散射)这三种技术，通过尺寸、形状和zeta电位表征了两种不同的铁纳米颗粒，再次突出三种表征技术的互补性。01 实验铁制剂：羧酸铁麦芽糖是一种三价氢氧化铁复合物，其外面包裹着一层糖类蔗糖铁是最常用的铁配方之一。该复合物由氢氧化铁内核和碳水化合物外壳组成。粒径和Zeta电位测量、SAXS测量使用Litesizer 500测量两种铁制剂的粒度和zeta电位。将未经处理的样品原样加入到SAXSpoint 5.0的tubecell中，并在整个实验过程中保持真空。样品可以放置在任意样品-检测器(SDD)位置来优化实验。Litesizer 500SAXSpoint 5.0每个样品用经过滤的超纯水稀释至最终浓度为0.4 mg Fe/mL。粒度测量的输入参数如表1所示ELS测量中参数输入如表2所示SAXS测量的实验设置如表3所示02 实验分析粒径测量粒度测量结果证实，两种铁制剂的粒度分布均较窄，如图1和图2所示，结果见表4。SAXS测量图3显示了两种含铁的纳米颗粒样品的2D q-maps，背景测量采用MilliQ纯水。2D图像中的白色条是抹除的光束阻挡器。右侧为1D曲线的360°积分。所有曲线均进行归一化拟合。图4为三羧酸铁麦芽糖的结果，从图4a可以看出，所拟合的曲线与实验曲线吻合较好。这也反映在p(r)-函数(即PDDF对距离分布函数)的叠加图上(图4b)，图上只有细微的差异。数据显示，三羧酸麦芽糖为球形，dmax为14 - 15nm(图4b和c)， dmax为此样品的粒径。通过查阅文献，得到的三羧酸铁麦芽糖的三维结构模型(6)，与测量结果吻合较好。图5为蔗糖铁的测量结果，测试使用的数据分析软件包与三羧酸麦芽糖样品相同。测试的近似曲线与实验数据非常吻合(图5a)。图5b和c显示蔗糖铁为棒状颗粒，长度约为14 nm，宽度约为3 nm。以蔗糖铁样品为例，dmax为细长颗粒的长度，而p(r)-函数最大值后的拐点为宽度。图5d显示了非均一圆柱(实线)和均一圆柱(虚线)的p(r)函数。通过对比图5b和d可以看出，测量的波动由圆柱轴的不均匀性造成。pH值和Zeta电位结果显示，麦芽糖铁的pH值为5.2，测得的zeta电位为6.8 mV(表5为连续三次测量的平均值)。图6为羧酸铁麦芽糖的zeta势分布。蔗糖铁的zeta电位(29.5 mV)很高，表明该制剂具有良好的胶体稳定性。相比之下，铁羧麦芽糖的zeta电位(6.8 mV)较低，表明该制剂更容易沉积或聚集，因此其货架期比较短。03 结论DLS和SAXS的测量结果相辅相成。DLS测得的样品粒径包括水合层尺寸，而SAXS可以测得颗粒的真实粒径(Rg)，以及颗粒的形状。这使得用户能够区分颗粒的真实尺寸与水合层尺寸。此外，ELS还提供了有关纳米氧化铁制剂胶体稳定性的信息。实验数据突出了Litesizer 500和SAXSpoint 5.0的互补性，Litesizer 500可以对液体悬浮液进行DLS和ELS测试，而SAXSpoint 5.0可以进一步对颗粒形貌进行分析。安东帕中国总部销售热线：+86 4008202259售后热线：+86 4008203230官网：www.anton-paar.cn在线商城：shop.anton-paar.cn

真正的打折，真正的实惠，疯狂双11大促销，利用ELISA进行临床检验常见的样本一般包括血液（指血，静脉血），尿，粪便，脑脊液，胸腹水，前列腺液，精液，阴道分泌物等，这些样本收集的时间、方法和保存都有一定的要求。Elisa试剂盒报价，Elisa试剂盒价格，Elisa试剂盒说明书，Elisa试剂盒技术，Elisa试剂盒售后，Elisa试剂盒免费代测详情咨询：人β干扰素(IFN-β/IFNB)Elisa试剂盒人可溶性CD38(sCD38)Elisa试剂盒人可溶性CD21(CR2/sCD21)Elisa试剂盒人可溶性瘦素受体(sLR)Elisa试剂盒人Toll样受体9(TLR-9/CD289)Elisa试剂盒人转化生长因子β2(TGFβ2)Elisa试剂盒人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)Elisa试剂盒人白三烯D4(LTD4)Elisa试剂盒人N钙黏蛋白/神经钙黏蛋白(N-Cad)Elisa试剂盒人肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)Elisa试剂盒人红细胞刺激因子(ESF)Elisa试剂盒人肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)Elisa试剂盒人生长激素释放因子(GH-RF)Elisa试剂盒人巨噬细胞趋化因子(MCF)Elisa试剂盒人α/β干扰素受体(IFN-α/βR)Elisa试剂盒人B细胞生长因子(BCGF)Elisa试剂盒人B细胞分化因子(BCDF)Elisa试剂盒人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)Elisa试剂盒人可溶性粘附分子(Sam)Elisa试剂盒人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)Elisa试剂盒人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)Elisa试剂盒人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)Elisa试剂盒人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)Elisa试剂盒人多效生长因子(PTN)Elisa试剂盒人可溶性CD28(sCD28)Elisa试剂盒人淋巴细胞因子Elisa试剂盒人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)Elisa试剂盒人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)Elisa试剂盒人神经保护因子(CVNPF)Elisa试剂盒人可溶性肿瘤坏死因子α受体(sTNFαR)Elisa试剂盒人可溶性细胞因子受体(sCKR)Elisa试剂盒人可溶性凋亡相关因子配体(sFASL)Elisa试剂盒人细胞凋亡抑制因子(IAP)Elisa试剂盒人集落刺激因子(CSF)Elisa试剂盒人γ干扰素诱导单核细胞因子(MIGF/CXCL9)Elisa试剂盒人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)Elisa试剂盒人CD14分子(CDl4)Elisa试剂盒人凋亡诱导因子(AIF)Elisa试剂盒人白细胞共同抗原(LCA/CD45)Elisa试剂盒人CD4分子(CD4)Elisa试剂盒人P钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白(P-cad)Elisa试剂盒人角化细胞生长因子(KGF)Elisa试剂盒人血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)Elisa试剂盒人CXC趋化因子配体16(CXCL16)Elisa试剂盒人CXC趋化因子受体3(CXCR3)Elisa试剂盒人γ干扰素诱导蛋白16/p16(IFI16/p16)Elisa试剂盒人基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)Elisa试剂盒人淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)Elisa试剂盒人α干扰素(IFN-α)Elisa试剂盒人可溶性CD86(B7-2/sCD86)Elisa试剂盒人白介素27(IL-27)Elisa试剂盒人白介素23(IL-23)Elisa试剂盒人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)Elisa试剂盒人组织因子途径抑制物(TFPI)Elisa试剂盒人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)Elisa试剂盒人白介素1(IL-1)Elisa试剂盒人白介素17(IL-17)Elisa试剂盒人白介素1β (IL-1β)Elisa试剂盒人表皮生长因子(EGF)Elisa试剂盒人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)Elisa试剂盒人巨噬细胞炎性蛋白5(MIP-5)Elisa试剂盒人可溶性E选择素(sE-selectin)Elisa试剂盒人可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)Elisa试剂盒人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)Elisa试剂盒人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)Elisa试剂盒人结缔组织生长因子(CTGF)Elisa试剂盒人白介素18(IL-18)Elisa试剂盒人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)Elisa试剂盒人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)Elisa试剂盒人B细胞活化因子受体(BAFF-R)Elisa试剂盒人血管内皮细胞生长因子受体3(VEGFR-3/Flt-4)Elisa试剂盒人血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1/Flt1)Elisa试剂盒人血管内皮细胞生长因子D(VEGF-D)Elisa试剂盒人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)Elisa试剂盒人血管内皮细胞生长因子A(VEGF-A)Elisa试剂盒人血管内皮细胞生长因子C(VEGF-C)Elisa试剂盒人血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)Elisa试剂盒人血管内皮细胞生长因子(VEGF)Elisa试剂盒人血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)Elisa试剂盒人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(sTRAIL)Elisa试剂盒人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)Elisa试剂盒人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体3(TRAIL-R3)Elisa试剂盒人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)Elisa试剂盒人肿瘤坏死因子β(TNF-β)Elisa试剂盒人肿瘤坏死因子α(TNF-α)Elisa试剂盒人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)Elisa试剂盒人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)Elisa试剂盒人转化生长因子β1(TGF-β1)Elisa试剂盒人转化生长因子α(TGF-α)Elisa试剂盒人基质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)Elisa试剂盒人干细胞因子受体(SCFR)Elisa试剂盒人干细胞因子/肥大细胞生长因子(SCF/MGF)Elisa试剂盒人可溶性CD40配体(sCD40L)Elisa试剂盒人可溶性CD30配体(sCD30L)Elisa试剂盒人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)Elisa试剂盒人P选择素(P-Selectin/CD62P/GMP140)Elisa试剂盒人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)Elisa试剂盒人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)Elisa试剂盒人神经营养因子4(NT-4)Elisa试剂盒人神经营养因子3(NT-3)Elisa试剂盒人的神经生长因子(NGF)Elisa试剂盒人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)Elisa试剂盒人巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)Elisa试剂盒人巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)Elisa试剂盒人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)Elisa试剂盒人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)Elisa试剂盒人巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)Elisa试剂盒人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)Elisa试剂盒人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)Elisa试剂盒人单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)Elisa试剂盒人单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)Elisa试剂盒人L选择素(L-Selectin/CD62L)Elisa试剂盒人白介素9(IL-9)Elisa试剂盒人白介素8(IL-8/CXCL8)Elisa试剂盒人白介素6(IL-6)Elisa试剂盒人白介素-5(IL-5)Elisa试剂盒人白介素4(IL-4)Elisa试剂盒人白介素3(IL-3)Elisa试剂盒人白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ )Elisa试剂盒人白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)Elisa试剂盒人白介素2(IL-2)Elisa试剂盒人白介素1α(IL-1α )Elisa试剂盒人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)Elisa试剂盒人白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)Elisa试剂盒人白介素16(IL-16)Elisa试剂盒人白介素13(IL-13)Elisa试剂盒人白介素12(IL-12/P70)Elisa试剂盒人白介素12(IL-12/P40)Elisa试剂盒人白介素11(IL-11)Elisa试剂盒人白介素10(IL-10)Elisa试剂盒人胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)Elisa试剂盒人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)Elisa试剂盒人胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)Elisa试剂盒人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)Elisa试剂盒人胰岛素样生长因子2(IGF-2)Elisa试剂盒人胰岛素样生长因子1(IGF-1)Elisa试剂盒人γ干扰素(IFN-γ)Elisa试剂盒人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)Elisa试剂盒人肝细胞生长因子(HGF)Elisa试剂盒人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)Elisa试剂盒人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)Elisa试剂盒人粒细胞集落刺激因子(G-CSF)Elisa试剂盒人中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)Elisa试剂盒人趋化因子(fractalkine/CX3CL1) （TCA3）Elisa试剂盒人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)Elisa试剂盒人碱性成纤维细胞生长因子6(bFGF-6)Elisa试剂盒人碱性成纤维细胞生长因子4(bFGF-4)Elisa试剂盒人酸性成纤维细胞生长因子1(aFGF-1)Elisa试剂盒人凋亡相关因子配体(FASL)Elisa试剂盒人凋亡相关因子(FAS/CD95)Elisa试剂盒人E选择素(E-Selectin/CD62E)Elisa试剂盒人嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)Elisa试剂盒人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)Elisa试剂盒人内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)Elisa试剂盒人睫状神经营养因子(CNTF)Elisa试剂盒人CD30分子(CD30)Elisa试剂盒人CXC趋化因子受体1(CXCR1)Elisa试剂盒人XC趋化因子受体1(XCR1)Elisa试剂盒人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)Elisa试剂盒人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)Elisa试剂盒人脑源性神经营养因子(BDNF)Elisa试剂盒人白细胞活化黏附因子(ALCAM)Elisa试剂盒人活化素A(ACV-A)Elisa试剂盒人神经调节蛋白1(NRG-1)Elisa试剂盒人心钠肽(ANP)Elisa试剂盒人多巴胺D2受体(D2R)Elisa试剂盒人内吗啡肽-2(EM-2)Elisa试剂盒人α-内吗啡肽(α-EP)Elisa试剂盒人抑制素(INH)Elisa试剂盒人神经元凋亡抑制蛋白(NAIP)Elisa试剂盒人食欲素/阿立新B(OX-B)Elisa试剂盒人促睡眠肽(DSIP)Elisa试剂盒人6-羟多巴胺(6-OHDA)Elisa试剂盒人心纳素(ANF)Elisa试剂盒人神经髓鞘蛋白(p2)Elisa试剂盒人精氨酸加压素(AVP)Elisa试剂盒人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)Elisa试剂盒人微管相关蛋白2(MAP-2)Elisa试剂盒人神经丝蛋白(NF)Elisa试剂盒人利钾尿肽(KP)Elisa试剂盒人神经降压素(NT)Elisa试剂盒人神经激肽B(NKB)Elisa试剂盒人强啡肽(Dyn)Elisa试剂盒人脑啡肽(ENK)Elisa试剂盒人γ肽(Pγ)Elisa试剂盒人C型钠尿肽(CNP)Elisa试剂盒人阿立新A(Orexin A)Elisa试剂盒人神经肽Y(NP-Y)Elisa试剂盒人脑肠肽(BGP/Gehrelin)Elisa试剂盒人乙酰胆碱(ACH)Elisa试剂盒人脑钠素/脑钠尿肽(BNP)Elisa试剂盒人细胞角蛋白20(CK20)Elisa试剂盒人β内啡肽(β-EP)Elisa试剂盒人N端前脑钠素(NT-proBNP)Elisa试剂盒人前心钠肽(Pro-ANP)Elisa试剂盒人细胞角蛋白13(CK-13)Elisa试剂盒人细胞角蛋白17(CK17)Elisa试剂盒人制瘤素M受体(OSMR)Elisa试剂盒人B细胞淋巴瘤因子3(Bcl3)Elisa试剂盒人癌蛋白诱导转录物3(OIT3)Elisa试剂盒人P27蛋白(P27)Elisa试剂盒人P糖蛋白/渗透性糖蛋白(P-gp)Elisa试剂盒人大肠癌专一抗原3(CCSA-3)Elisa试剂盒人大肠癌专一抗原2(CCSA-2)Elisa试剂盒人大肠癌专一抗原4(CCSA-4)Elisa试剂盒人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)Elisa试剂盒人肠三叶因子(ITF)Elisa试剂盒人Dickkopf 1(DKK1)Elisa试剂盒人激肽释放酶11(KLK 11)Elisa试剂盒人生长调节致癌基因γ/黑素瘤生长刺激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)Elisa试剂盒人生长调节致癌基因β/黑素瘤生长刺激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)Elisa试剂盒人美丽线虫凋亡基因(CED-3)Elisa试剂盒人胸腺白血病抗原(TLa)Elisa试剂盒人肿瘤特异性移植抗原(TSTA)Elisa试剂盒人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)Elisa试剂盒人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)Elisa试剂盒人T细胞急性淋巴母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)Elisa试剂盒人核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)Elisa试剂盒人硫氧化还原蛋白(Trx)Elisa试剂盒人窖蛋白(Cav-1)Elisa试剂盒人普通急性淋巴细胞白血病抗原(CALLA)Elisa试剂盒人黑色素细胞刺激素(MSH)Elisa试剂盒人表皮角蛋白(EK)Elisa试剂盒人细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)Elisa试剂盒人糖缺失性转铁蛋白(CDT)Elisa试剂盒人桥粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)Elisa试剂盒人肿瘤标志物(CA724)Elisa试剂盒人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)Elisa试剂盒人非小细胞肺癌抗原(LTA)Elisa试剂盒人肺癌标志物DR-70(DR-70TM)Elisa试剂盒人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)Elisa试剂盒人本周蛋白(BJP) Elisa试剂盒人癌胚铁蛋白(CEF) Elisa试剂盒人鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)Elisa试剂盒人肿瘤特异性抗原(TSA) Elisa试剂盒人黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)Elisa试剂盒人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)Elisa试剂盒人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)Elisa试剂盒人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)Elisa试剂盒人Bcl-2相关X蛋白(BAX)Elisa试剂盒人转移因子(TF)Elisa试剂盒人结肠癌抗原(CCA)Elisa试剂盒人H-ras Elisa试剂盒人c-sis Elisa试剂盒人c-jun Elisa试剂盒人c-fos Elisa试剂盒人c-myc癌基因产物(c-myc)Elisa试剂盒人Smad1 Elisa试剂盒人Smad7 Elisa试剂盒人肿瘤相关抗原(TAA)Elisa试剂盒人TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)Elisa试剂盒人肿瘤血管生长因子(TAF)Elisa试剂盒人细胞角蛋白20(CK-20)Elisa试剂盒人细胞角蛋白19(CK-19)Elisa试剂盒人细胞角蛋白18(CK-18)Elisa试剂盒人嗜铬蛋白A(CgA)Elisa试剂盒人视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRB)Elisa试剂盒人生长调节致癌基因α/黑素瘤生长刺激因子(GROα/CXCL1/MGSA)Elisa试剂盒人成熟促进因子(MPF)Elisa试剂盒人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)Elisa试剂盒人可溶性转铁蛋白受体(sTfR)Elisa试剂盒人金属硫蛋白(MT)Elisa试剂盒人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)Elisa试剂盒人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2(AFP-L2)Elisa试剂盒人小扁豆素结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1(AFP-L1)Elisa试剂盒人黑色素瘤标记物(MART/Melan-A)Elisa试剂盒人高分子量细胞角蛋白(CK-HMW)Elisa试剂盒人肝癌抗原(PHC)Elisa试剂盒人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)Elisa试剂盒人鼻咽癌(NPC)Elisa试剂盒人膀胱癌抗原(UBC)Elisa试剂盒人广谱细胞角蛋白(P-CK)Elisa试剂盒人癌基因蛋白质p190/bcr-abl Elisa试剂盒人膀胱肿瘤抗原(BTA)Elisa试剂盒人中期因子(MK)Elisa试剂盒人BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)Elisa试剂盒人B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)Elisa试剂盒人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)Elisa试剂盒人色素上皮衍生因子(PEDF)Elisa试剂盒人克拉拉细胞蛋白(CC16) Elisa试剂盒人低氧诱导因子1α(HIF-1α)Elisa试剂盒人黑色素细胞抗体(MC Ab)Elisa试剂盒人转铁蛋白受体(TFR/CD71)Elisa试剂盒人P53(P53)Elisa试剂盒人细胞周期素D3(Cyclin-D3)Elisa试剂盒人细胞周期素D2(Cyclin-D2)Elisa 人细胞周期素D1(Cyclin-D1)Elisa试剂盒人内皮抑素(ES)Elisa试剂盒人铁蛋白(FE)Elisa试剂盒人微量转铁蛋白(MTF)Elisa试剂盒人基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)Elisa试剂盒人髓鞘碱性蛋白抗体(MBP)Elisa试剂盒人组织多肽抗原(TPA)Elisa试剂盒人肺癌标志物Elisa试剂盒人胃癌标志物Elisa试剂盒

胰蛋白酶消化，质谱法轻松鉴定蛋白质，已经是非常成熟的工作流程。即使是刚接触MS的使用者也可以很快掌握。在质谱法鉴定蛋白的工作流程中，蛋白质鉴定是通过使用搜索引擎，例如 Mascot或Matrix Science进行简单的数据库搜索来实现的。然而，对于数据库中未列出的蛋白质鉴定需求，或需要进行蛋白质末端序列分析的这两种情况，通常采用更昂贵的高端仪器和更复杂的工作流程，需要熟练的操作员。此外，蛋白质测序仪也通常用作蛋白质末端序列分析的方法，但遇到 N 端封闭的蛋白质，去封闭是必要的。作为样品序列分析前的预处理，预处理效果取决于蛋白质类型，可能效果不佳，对操作人员有一定要求，需要一定程度的技能和经验，这些可能会限制其使用。 近年来，利用MALDI-TOF离子源（ISD：In-Source Decay）中发生的蛋白质碎裂离子，可以分析N末端被封闭或未在数据库中登记的蛋白质序列MS图谱。此外，ISD理论上不受每个样品质量的限制，因此无需胰蛋白酶消化即可直接对高质量蛋白质进行测序。结合电泳胶提取蛋白和岛津台式机MALDI-8020，通过N端封闭蛋白的分子量测定和序列分析的例子，让我们来了解下大蛋白分子直接测序技术MALDI-ISD。 将模型样品N 端被乙酰化的牛碳酸酐酶 (Sigma-Aldrich)溶解在缓冲溶液中进行电泳， 95 °C 下加热 5 分钟，然后在聚丙烯酰胺凝胶（ATTO 12.5 %，预制 e-PAGEL）上进行电泳。所得聚丙烯酰胺凝胶用考马斯亮蓝染色以检测蛋白质斑点。使用含有表面活性剂的提取缓冲溶液，我们从凝胶分离的碳酸酐酶的条带中提取蛋白质。使用氯仿/甲醇在提取缓冲溶液中沉淀蛋白质以去除表面活性剂和盐，并使用 MALDI-TOF 质谱仪进行测量。芥子酸用作 MALDI 基质用于蛋白质分子量测量，1,5-二氨基萘 (DAN) 用于 ISD 的序列分析。 图1、碳酸酐酶电泳图图2、从凝胶中提取的碳酸酐酶MS图（基质芥子酸） 接下来，从25 pmol凝胶蛋白条带中提取碳酸酐酶，与基质DAN混合，MALDI-8020线性模式进一步分析。结果如图3所示，主要检测到c离子（从蛋白质N段产生的片段）质量一致的峰。通过使用免费软件Mass++ TM和蛋白质氨基酸序列比对工具Basic Local Alignment Search Tool (BLAST)，我们对从检测到的峰中获得的氨基酸序列进行了同源性搜索。 图3、MALDI-ISD鉴定结果 鉴定结果显示匹配结果最高的是碳酸酐酶。通过检测到的c离子片段质量和数据库中已有的碳酸酐酶氨基酸序列，我们可以推断出N段序列是SHHWGYGKH...，并且是N-乙酰化的。 MALDI-8020线性模式MALDI-ISD技术，无需复杂的工作流程，无需胰蛋白酶消化即可直接对高质量蛋白质（如本文所述m/z 29030示例）进行N端测序。 该方法在岛津应用专家与美国佛罗里达州立大学、日本爱媛大学高级研究支持中心生物医学分析部、利物浦大学生化与系统生物学系等共同发表的一篇文献中也有应用到。PEPPI-MS基于聚丙烯酰胺凝胶的预分馏，实现质谱法鉴定完整蛋白或蛋白复合物。凝胶分离回收14种人血清蛋白，提取后，用MALDI-8020的MALDI-ISD产生的产物离子鉴定人血清白蛋白N端氨基酸序列。 MALDI-8020是岛津MALDI家族一款体积小巧，性能卓越的特色产品。荣获2018 IBO工业设计大奖银奖。 主要特点：● 线性台式MALDI-TOF● 200Hz固态激光器，355nm波长● 进样速度快● TrueClean™ 自动源清洁功能。配备大口径离子光学系统，使仪器长期使用中源的污染风险降到最低。配备基于紫外激光器的源清洁功能，可自动快速实现源自清洁。● 静音（参考文献：岛津应用新闻 No.B83J. Proteome Res. 2020, 19, 3779−3791

近日，Structure在线发表了中国科学院生物物理研究所章新政课题组完成的研究论文(Addressing Compressive Deformation of Proteins Embedded in Crystalline Ice)。该研究发现了晶态冰包埋的冷冻电镜样品会产生收缩形变，且形变随降温速率的增加而减少，并从晶态冰形成的降温速率出发发展了新型的无收缩形变的立方晶系晶态冰样品制备方法。 　　该工作发现结构无损的立方晶系晶态冰样品不仅消除了电子束诱导的快速漂移现象，而且显示出明显优于普通冷冻电镜玻璃态冰样品的数据质量，进一步为冷冻电镜实现原子分辨率奠定了基础。 　　大量实验数据证明，低降温速率制备的冷冻电镜样品有助于恢复数据采集时样品的束诱导漂移，但降温速率过低经常导致晶态冰的形成。传统认为晶态冰在生物样品冷冻过程中会对其结构造成破坏，故在冷冻电镜样品制备过程中一直避免使用。晶态冰的形成具体对蛋白质产生了什么破坏尚不清楚。 　　课题组系统性地将蛋白质在不同条件下包埋在晶态冰中，并通过冷冻电镜技术解析了晶态冰中的蛋白质三维结构。研究发现，在低降温速率形成的晶态冰中，蛋白质结构会产生收缩形变(图a)，且收缩量和蛋白质本身性质相关，越为刚性的蛋白质收缩量越小。另外，在一些蛋白质柔性区域，低降温速率晶态冰中的蛋白质存在密度畸变的问题(图a)。同时，二者随着晶态冰降温速率的增加显著变小，甚至无法探测(图b)。基于上述发现，研究发展了结构无损的立方晶系晶态冰样品的制备方法。通过该方法制备得到的晶态冰样品，其三维重构和玻璃态冰样品一致，不会对蛋白质结构造成可检测的破坏，且成像质量显著提高，不仅没有束诱导漂移(图c)，而且显著提高蛋白样品的分辨率。同样条件下，B-因子反映了样品的信噪比(图d)，人源去铁-铁蛋白晶态冰样品的B因子显著好于玻璃态冰样品。此外，在醛缩酶和谷氨酸脱氢酶上B因子也获得显著提升。 　　研究工作得到国家自然科学基金、国家重点研发计划、中科院战略性先导科技专项(B类)和中科院前沿科学重点研究计划的支持。冷冻电镜晶态冰样品性质。a、与玻璃态病毒样颗粒(VLP)样品(粉色)相比晶态冰样品(绿色)产生收缩形变，且严重形变时密度图出现断裂。b、提高降温速率，晶态冰样品的收缩形变减弱。c、在人源去铁-铁蛋白，醛缩酶和谷氨酸脱氢酶上，晶态冰样品恢复束诱导的快速漂移，前几帧样品分辨率明显恢复。d、B因子曲线斜率越大代表数据质量越好。与玻璃态冰样品(蓝色)相比，人源去铁-铁蛋白晶态冰样品(红色)有更好的B因子，展现出更高的数据质量。

贾伟 沃特世科技（上海）有限公司实验中心 对蛋白药的分子量进行测定，可以在完整蛋白水平，对其进行宏观表征，以初步确定蛋白的表达是否正确。BiopharmaLynxTM软件中，专门设计了对蛋白整体分子量测定及表征的多种功能，它具有以下特点。 ■ 通过原始质谱数据，计算出蛋白分子量。 ■ 自动标注蛋白的各种不同修饰形态。 ■ 以直观方式，比较样品与标品间差异。 ■ 自动计算蛋白质的各种修饰形式间的峰强度比例。 ■ 界面友好、直观，操作简单。 通过原始质谱数据，计算分子质量，是蛋白分子量测定的基本功能。图1中左上为免疫球蛋白IgG的原始质谱数据，右下为软件分析后，得出的IgG分子质量信息。通过BiopharmaLynx软件的自动计算功能，复杂的质谱数据成为了直观的分子量形式。图1中，绿底色图为标准品蛋白的分子质量分布数据，蓝底色图为样品蛋白的分子质量分布图。在BiopharmaLynx给出的结果中，IgG的具有多个分子质量形式，这是由于其含有多种糖基化修饰的原因。 图1. BiopharmaLynx软件的完整蛋白质量分析界面。 图中的紫色线条直观地显示出了样品蛋白与标品的质量分布差异差异。观察紫色线条形态可以发现，样品IgG具有更多的大分子量糖基化修饰形式，而标品蛋白中的小分子量糖型修饰较多。当将鼠标指针放置于峰尖时，将自动出现此处蛋白名称、修饰种类、峰强度、色谱保留时间等信息。通过以上两种信息，可以简单、直观地找到两者的差异之处了。 BiopharmaLynx软件可根据用户设置，对蛋白的不同修饰情况，自动标注。除内置的90种修饰外，用户还可根据需要自行创建修饰方式。特别是，考虑到生物蛋白药的一些具体情况，BiopharmaLynx内置了一些蛋白表达药品常见的蛋白改变修饰，如蛋白C端的Lysine缺失等（图2红色箭头指向）。这些细节设计，会帮助使用者极大地提高工作效率，节省精力。 图2. 使用BiopharmaLynx软件的修饰设置界面。 BiopharmaLynx软件对蛋白各种修饰间的比例也可以直观地给出初步分析结果（图3）。 作为一家在液相与质谱技术都占有领先优势的企业，沃特世更提供了全面的蛋白分子量分析方案，包括色谱柱、色谱梯度方法、质谱条件等一系列已优化完成的实验操作流程(图4)。使用此整体解决方案，仅仅使用0.5微克的IgG蛋白，在4分钟内，就可完成液质数据采集全过程。此方案也包括对还原后IgG的分析方法(图4右上)。 图4. 完整及还原后IgG质量测定解决方案示意图。 参考文献 (1) Rapid Profiling of Monoclonal Intact Antibodies by LC/ESI-TOF MS. Waters Application Note, 2007, 720002393 EN (2) Rapid Screening of Reduced Monoclonal Antibodies by LC/ESITOF MS. Waters Application Note, 2007, 720002394 EN (3) Characterization of an IgG1 Monoclonal Antibody and Related Sub-Structures by LC/ESI-TOF MS, 2007, 720002107 EN (4) Assessing the Quality and Precision of T herapeutic Antibody LC/MS Data Acquired and Processed using Automated Workflows. Poster presented at the ASMS meeting. 2008, 720002687 EN (5) Efficiently Comparing Batc hes of an Intact Monoclonal Antibody using t he Biop harma Lynx Software Package. Waters Application Note, 2008, 720002820 EN 联系方式： 叶晓晨 沃特世科技（上海）有限公司 市场服务部 xiao_chen_ye@waters.com 周瑞琳(GraceChow) 泰信策略(PMC) 020-83569288 13602845427 grace.chow@pmc.com.cn

摘要* 布鲁克使用 AmberGen 的 HiPLEX-IHC 肽编码抗体探针，结合全覆盖脂质组学、糖组学和代谢组学成像技术，为 timsTOF fleX 推出新型 MALDI HiPLEX-IHC 组织成像解决方案。* 新的 Canopy CellScape™ 单细胞、高度定量的空间蛋白质组学 ChipCytometry™ 平台具有全自动迭代染色功能，使用开源抗体对 TME 和转移研究的整个组织切片进行几乎无限的免疫肿瘤标记分析。* 对于癌细胞系和生物活检样本的蛋白质组学研究，在 timsTOF 4D 平台上采用 dia-PASEF® 可以鉴定高达 13,000 种蛋白质（控制1% FDR）；采用库检索方式，在 35 分钟内可鉴定和定量 8000 多种蛋白质；使用新的 TIMScore 算法磷酸化肽段鉴定增加了 25% 以上。* 新型 timsTOF SCP 平台支持无偏单细胞蛋白质组学研究，是空间生物学癌症研究中 sc-RNA-seq 的重要补充。* 独特的高通量 timsTOF Pro 2 平台可以使液体活检生物标记物研究能够通过各种无偏的深层血浆蛋白质组学和 PTM 方法进行。2022年4月11日美国路易斯安那州新奥尔良——在2022年AACR年会上，布鲁克（纳斯达克股票代码：BRKR）推出并展示了针对空间多组学、单细胞蛋白质组学以及细胞系、组织和血浆蛋白质组学癌症的独特而新颖的研究。继最近对AmberGen公司的战略投资之后，布鲁克宣布建立合作伙伴关系，将Ambergen Miralys™ 肽标签抗体试剂盒应用于布鲁克timsTOF fleX新型MALDI HiPLEX-IHC工作流程，用于组织中的靶向蛋白质表达谱分析。通过将用于蛋白质识别的系列肽标签报告特征抗体探针与布鲁克灵活的MALDI成像工作流程相结合，研究人员可以在标准载玻片的组织切片中生成靶蛋白的高度多重图像。布鲁克timsTOF fleX平台将MALDI HiPLEX-IHC蛋白质图像与来自同一组织切片的小分子全谱成像（脂质、聚糖、代谢物、外源性物质）相结合，这是一种新颖独特的多组学分析能力，可用于新鲜冷冻或福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）切片的癌细胞系、组织和肿瘤微环境（TME）成像研究。布鲁克生命科学质谱成像业务总监Michael L. Easterling博士评论说：“空间蛋白表达图谱可以阐明免疫肿瘤学以及TME和癌转移研究中的过程。基于AmberGen肽标签抗体组合的MALDI HiPLEX-IHC工作流程提供了靶向蛋白质定位，并增加了在同一组织切片上绘制重要脂质、聚糖和代谢物分子图像的能力。此外，布鲁克还展示了新的CellScape™ 高精度靶向空间蛋白质组学仪器，该仪器最近由Canopy生物科学部门推出。Canopy生物科学的CellScape是新一代的Chipcytometry™ 仪器，它能够以单细胞和亚细胞分辨率对多种样本类型中的蛋白质生物标记物进行高倍数空间成像和量化。CellScape进一步提高了空间分辨率，提供高达 8 倍的通量和无人值守自动化。CellScape在定量生物学方面是独特的，它具有 8 个量级的极高动态范围（HDR）成像，可以定量同一样本中的低表达和高表达蛋白质，解决了高复合物成像固有的一个关键挑战。在癌症生物学中的应用非常丰富，包括肿瘤微环境（TME）中各种肿瘤和免疫细胞类型的空间表型。Canopy还推出了用于芯片细胞仪平台的空间免疫分析试剂盒。空间免疫谱 试剂盒是一种用于FFPE组织的定量、多重检测，旨在为芯片细胞研究人员（例如免疫肿瘤学）提供即用型预验证抗体试剂。这些试剂盒使研究人员能够跳过检测开发，直接进行转化和临床研究检测。

随着国家经济实力的提升，民众对于医疗行业服务质量的关注度越来越高，这给整个制药行业带来广阔的发展空间。据国家统计局数据，2022 年我国医药制造业规模以上工业企业实现营收2.9万亿元，较2020年增17.11%，医药制造业规模以上工业企业营业收入和利润总额的增速显著高于全国规模以上工业企业的增速。医药行业快速发展背景下，科学仪器及分析检测技术在制药行业中扮演着越来越重要的角色，不断为新药研发、质量检测及药物治疗等制药环节提供着先进可靠的技术支持。为助力制药行业健康快速发展，仪器信息网携手日立科学仪器（北京）有限公司于8月22日特别举办“观于细微之处，测于精准之道”医药行业主题网络研讨会，邀请医药行业研究专家及检测技术专家，以线上报告分享形式，共同探讨医药行业仪器检测技术的最新进展。“观于细微之处，测于精准之道”医药行业主题网络研讨会《电子显微镜在神经系统疾病诊断中的应用》西湖大学显微成像平台电镜专业资深顾问、原北京市神经外科研究所超微病理研究室主任孙异临研究员1932年，德国科学家Ernst Ruska研制成功了第一台电子显微镜，这使得普通病理学进入了超微病理学领域，对疾病的认识有了更深入的了解，并通过细胞器的变化对疾病能进行精确诊断。孙异临以自身超微病理医生的经历和过去多年经验讲起，认为一名合格的超微病理医生作为电镜观察者，必需具备相关医学专业知识并熟悉电镜技术，在当代精准医学的指导下，才能实现精准诊断和精准医疗；在诊断病人病例时，首先应要有整体观念，对临床病例患者的症状、体征、影像学特点、取材部位、光镜病理和免疫组织化学等检查结果要全方位综合考虑，必须强调局部和整体结合、静态与动态结合、结构与功能结合的原则等；随后，介绍了其基于日立H-7650型透射电子显微镜在神经系统疾病诊断中的应用，电镜对脑肿瘤的诊断和鉴别诊断很有帮助，可以依据肿瘤细胞超微结构特点进行亚细胞水平分析，还可以评估某些肿瘤的分化程度及判断患者预后，也可以鉴定某些肿瘤的组织发生学及转移性脑肿瘤原发病灶的细胞来源，可用于癫痫、脑血管病、AD、PD等疾病的诊断和研究，并进行实际案例的分析。最后，孙异临认为电镜技术在医学诊断和科研工作中起到了不可估量的作用，显微成像技术对于促进神经科学领域的蓬勃发展将起到积极作用。《日立120kv透射电镜在医药领域的最新技术进展》日立科学仪器电镜市场部王勐王勐首先在报告中介绍了日立新一代全数字化120kV透射电子显微镜HT7800的最新技术。据介绍，HT7800使用高速高灵敏度的CMOS荧光屏相机取代了传统的荧光屏观察窗，将 TEM 操作统一于显示器上，实现了透射电镜操作的全数字化，还可以在明亮的室内进行观察。HT7800标配高灵敏度、高速度的CMOS荧光屏相机，无图像拖影现象，可快速寻找拍摄区域，对于疾病诊断具有重要意义。此外，HT7800还采用日立全新设计的第二代双隙物镜，可以在20-120kV之间调节加速电压，实现高衬度HC模式和高分辨HR双模式于一体。虽然低电压透射电镜的分辨率较低，但可以提供更强的明暗反差，保护样品不被电子束损伤，因此被应用在生命科学、医学、高分子材料、纳米材料等领域。之后，王勐视频演示了日立120kV 透射电子显微镜的做样流程。整个流程包括了更换样品、寻找视野、观察、分析和数据处理。HT7800为用户提供了自动光阑切换系统、退样真空保护、自动预辐照功能、自动飘逸校正功能、自动抓&拍拼图功能、自动颗粒搜索、3D电子层析、空心暗场像等智能自动功能。《液相色谱在口服固体制剂有关物质测定中的应用及本课题组仪器使用心得体会》沈阳药科大学无涯创新学院 孙英华2020年版药典较2015年版药典对通则0512高效液相色谱法又进行了修订，对仪器的一般要求和色谱条件调整内容，增加了色谱参数调整。2015年版药典只规定流动相组分比例的调整范围。2020年版要点对色谱参数允许调整范围列了一个非常详细的表格，对10项参数做了详细的规定。在报告中，孙英华介绍了实验室30多台液相色谱的配置情况，并以头孢地尼胶囊有关物质分析、头孢缓释片有关物质分析、示差折光器的应用分享了自己的心得体会。孙英华认为，经过多年的迅速发展，高效液相色谱法在基本理论上不断完善，仪器装置和色谱柱等方面的研究也趋于成熟。《守护消费者健康：奶及奶制品相关检测技术解析》农业农村部奶及奶制品质量监督检验测试中心（北京）检测室副主任 叶巧燕叶巧燕在报告中介绍了乳铁蛋白检测以及α-乳白蛋白、β-乳球蛋白检测方法。牛乃至乳铁蛋白占乳清蛋白的2.9%，目前广泛应用于奶制品和婴幼儿配方食品生产中，热加工会降低牛奶中乳铁蛋白的活性和含量，因此乳铁蛋白的检测至关重要。α-乳白蛋白、β-乳球蛋白是乳清蛋白中占比最高的两种活性成分，被广泛应用于奶制品和婴幼儿配方食品生产中，自2016年起，叶巧燕团队开展检测方法研究，先后形成团体标准3项，在行业中应用广泛。《日立HPLC在制药行业的应用及ChromAssist数据库版色谱软件介绍》分析仪器应用部应用工程师陈会丹日立科学仪器应用工程师陈会丹对日立HPLC在制药行业的应用及ChromAssist数据库版色谱软件做了详细介绍。在制药行业，陈会丹介绍了日立HPLC的一些应用案例，《中国药典》2020版一部的中药，相关项包括特征图谱、含量测定、检查等，日立针对具体的测定样品推出了不同的解决方案（如大叶紫珠的测定、真菌毒素的测定、莲子中黄曲霉毒素的测定、栀子配方颗粒的测定）；此外，《中国药典》2020版二部的化药、《中国药典》2020版三部的生物制品、《中国药典》2020版三部的药用辅料等均涉及HPLC相关项，日立也相应推出了不同的解决方案。日立ChromAssist数据库版色谱软件具有支持数据完整性、内置数据库进行数据管理、支持单机版和网络版等特点，为使用日立HPLC的客户提供原始数据完整性解决方案，陈会丹对ChromAssist数据库版色谱软件的用户管理、权限分级管理、项目管理、审计追踪、数据管理、文件修改管理、电子签名、USB设备管理、安全策略、锁屏保护等功能做了介绍。点击下方链接，查看“观于细微之处，测于精准之道”医药行业主题网络研讨会回放视频：1、《电子显微镜在神经系统疾病诊断中的应用》2、《液相色谱在口服固体制剂有关物质测定中的应用 及本课题组仪器使用心得体会》3、《守护消费者健康：奶及奶制品相关检测技术解析》4、《日立HPLC在制药行业的应用 及ChromAssist数据库版色谱软件介绍》

集举国之力与新型冠状病毒已鏖战月余，胜利曙光已然出现。长风破浪会有时，直挂云帆济沧海！在全国范围内全面复工之际，如何做好安全而科学的守护，是保证战胜疫情，恢复生产，取得最终胜利的重要环节！珀金埃尔默凭借在医疗诊断、生命科学和科学仪器等领域上全面而雄厚的实力，在复工体检、安全检测、科学探索和营养品控等方面为您提供全面、有效的复工安全保障方案。复工体检企业复工通知已经发出，人员从各地汇集过来即将到位，而企业所在地对复工人员的健康检查要求十分严格，想尽早开工，怎么办？实施新型冠状病毒COVID-19 核酸检查，可以及早排除感染隐患，降低传播风险，帮助尽早实现企业开工。第三方检测机构珀金埃尔默旗下医学检验所（安智）准备启动“新型冠状病毒COVID-19 核酸检测服务”活动，帮助企业做好复工筛查，共造健康防护盾。适用人群：近14天无明显发热及呼吸道症状的返城复工人员检测方法：荧光RT-PCR检测样本：口咽拭子报告时间：24小时以内服务流程复工人员多，样品量大，而在样本处理的过程中，手工操作不仅使得核酸提取流程耗时长，操作相对繁琐，更重要的是医务人员在频繁接触样本过程中会增加病毒感染风险，这些问题如何解决？珀金埃尔默推出实验室自动化机器人整合系统，包括了自动化样品处理、样品管开盖、核酸提取、PCR 反应体系构建，以及在线QPCR 扩增检测等自动化单元。大大减少人工操作，优化样本检测流程，提高检测通量，还同时满足了医务人员在病毒核酸提取过程中对安全防控性的要求。 珀金埃尔默实验室自动化机器人整合系统免疫守护乳铁蛋白是动物初乳中的一种天然多功能蛋白质，具有广谱抗菌，抗病毒感染，提高免疫力的作用。中国营养保健食品协会推荐乳铁蛋白为防治新冠状病毒感染的营养补充剂。珀金埃尔默推出《高效液相色谱检测乳制品中的乳铁蛋白》方案，使用肝素亲和柱处理样品，无需吹干，全程仅需1h，加标回收率在90~105%之间。方法便捷准确，有效实现乳制品中乳铁蛋白的质控。珀金埃尔默旗下北京美正生物推出的肝素亲和柱，一直是业内乳铁蛋白检测的得力伙伴。近期，产品再次升级—优化前处理方法，使操作更便捷，结果更准确。Flexar HPLC / UHPLC 拥有高达18,000 psi 的输液泵压力；进样体积范围大，重现性好；“一键式”导航，便捷操作；外部线路内嵌，避免杂乱。Flexar HPLC / UHPLC安全检测口罩，是保护复工人员健康的第一道也是最重要的防线。口罩生产最常用消毒剂环氧乙烷及其代谢物会对人体产生严重危害。珀金埃尔默提供《医用防护用品环氧乙烷残留分析解决方案》，使用顶空进样方式，无需使用浸提法处理样品，直接进行口罩、医用防护服等医疗防护用品中的环氧乙烷残留的气相色谱法测定！5分钟内出结果，检出限 ≤ 0.1μg/g，定量准确，重现性好。珀金埃尔默顶空自动进样技术专利 —— 压力平衡时间进样技术，整个进样过程仅有进样针在移动，彻底解决样品吸附问题，防止交叉污染！Clarus 690 GC + TurboMatrix HS-40 全自动顶空进样器中医治疗，在2020年1月22日被国家卫健委首次纳入《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》（试行第三版）；2月14日，第三支国家中医医疗队正式整体接管武汉江宁方舱医院，全面以中医治疗为主。彰显出中医在新冠病毒肺炎治疗中越来越重要的作用！而符合《中国药典》要求的中药材和饮片才能保证治疗的安全性和有效性。珀金埃尔默提供《中药安全解决方案——重金属和有害元素检测、农药残留检测、红外光谱应用》，保障中药用药安全有效。NexION 系列ICP-MS，拥有LumiCoil RF 线圈、三锥接口、四极杆离子偏转器和三模式通用池等全方位的扰消除技术平台，使得中药中重金属及有害元素的测定准确可靠。NexION 系列 ICP-MSQSight LC-MS/MS， 拥有能同时工作的ESI 和APCI 双离子源，更换方便，独特的自清洁功能，获得业界卓越的耐脏口碑，轻松实现中药中农药残留和真菌毒素的检测。QSight 三重四级杆液质联用仪Spectrum 2 红外光谱仪，实时自动清除因H2O 和CO2 而导致的光谱干扰；不需氮气，在室温和潮湿环境中保持正常运行；可电池供电，防震，适合实验室/现场检测。珀金埃尔默中药红外分析解决方案，涵盖药材饮片指标成分定性与定量，真伪鉴别，产地识别，不同生长条件、不同炮制方法的中药材鉴别，不同厂家产品的识别，中药配方颗粒质量鉴定及辅料含量定量，中药注射剂质量鉴定等。在高效率的基础上保证实现分析结果的准确、可靠。珀金埃尔默红外光谱仪 Spectrum 2科学探索冠状病毒是一个大型病毒家族，已知如中东呼吸综合征(MERS)和严重急性呼吸综合征(SARS)。这次造成全球感染扩散的新型冠状病毒COVID-19 是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株。随着全球监测和研究工作的深入，可能会发现更多种类的冠状病毒。通过高通量NGS 测序可以协助病毒溯源，监控病毒变异，掌握病毒的发展方向，也可以为抗病毒药物研发提供科学依据。《珀金埃尔默高通量测序技术整体解决方案》，实现从样品收集、提取、高通量测序技术建库及文库质控的全流程，助力新冠病毒的测序研究。珀金埃尔默EnSight™ 多模式检测系统，快速高效判断病毒活性，提高病毒空斑检测通量，提升计数准确性。空斑实验是病毒滴定，筛选病毒突变株，检测病毒抗体和抗病毒药物研究的常规手段。区别于传统的只检测病毒颗粒的PCR 和免疫荧光方法，病毒空斑实验检测有活性的感染性病毒颗粒，即空斑形成数(PFU)。目前，病毒空斑实验主要还是通过人工计数的方式在6孔，12孔或24孔板里实现。这样的操作速度慢，主观因素大，出错率高；尤其当病毒活性比较高时，很难准确统计出空斑数。相比之下，利用成像配合自动计数的方法可以提高病毒空斑的检测通量，提升计数的准确性。珀金埃尔默EnSight™ 多模式检测系统扫描下方二维码，即可下载珀金埃尔默复工安全解决方案

尽管舆论用&ldquo 反腐风暴刮向科研&rdquo 来形容院士李宁的这次被调查，但在事件尚未明朗前，难有定论。李宁，这个被誉为学界翘楚的中国工程院院士，被怎样一些利益模糊的公司所裹挟。巨额的科研经费，关系密切的合作公司，一套人马、两块牌子的左右手公司，再到若干的产业化实体，院士李宁，抓着的是一手怎样的牌? 　　学生：转基因克隆有很多重复性的工作，李宁觉得如果都是学生来做，不利于创新性研究，需要一个专门的公司来做。 　　中国工程院：我们和媒体一样在观察这个事情，因为还没有一个结论。 　　合伙人：李宁说，你来参股，将来有成果了，大家一起分享。 　　岳父：如果真的有犯罪，该怎么处理就怎么处理。但一个人功是功，过是过，功不能掩盖过，过不能抹杀功。 　　国家规定：项目负责人不得借协作科研之名，将科研经费挪作他用，或转入与项目负责人有直接经济利益关系的关联单位。 　　&ldquo 神内&rdquo 大楼位于中国农业大学西校区，是一栋不起眼的建筑。很多个清晨，生物学院教授李宁都会从数百米外的家里步行到这个国家动物基因研究中心，带领团队攻关国际上最前沿的科研项目：动物转基因。但是从2014年6月20日开始，他的学生就再也没见过他。 　　记者从多个信源证实，李宁当天是被吉林省检察院带走的，其涉嫌将一笔科研经费转移到自己公司账户，具体金额不详。在此之前，他的一名负责公司运营的学生已被司法机关控制。目前李宁被关押在长春市的一家看守所，家人已经请了律师。 　　52岁的李宁曾是中国最炙手可热的中青年科学家之一，头顶许多科研工作者终其一生都无法企及的光环：中国工程院最年轻的院士，中国克隆技术的领军人物，获得过国家最顶级的科技奖项和政治表彰&hellip &hellip 　　这个荣誉等身的人同时又极富争议。他因为在许多重大科研项目中评审和申报人的双重身份，被竞争者举报既当运动员又当裁判员 他作为动物转基因的学术带头人，力推转基因作物产业化，又被反转人士说成是&ldquo 美帝的走狗&rdquo 。但这次，问题不同以往。 　　已经两个月了，院士的&ldquo 消失&rdquo 仍没有任何官方说明，他的头像仍挂在生物学院的官网网页上，中国农大校办的工作人员婉拒了记者的问询。而中国工程院一位领导告诉记者，&ldquo 我们和媒体一样在观察这个事情，因为还没有一个结论。农大有什么新的情况会告诉我们，但是现在还没有收到反馈。&rdquo 　　消失的经费去哪了 　　李宁被带走之际，正为即将召开的第34届国际动物遗传学大会忙碌，这是该会议首次在中国举办，&ldquo 为了能把这个顶级大会引到中国，他付出了很多年的努力。&rdquo 李宁的一位朋友说。 　　据悉，李宁曾向办案机关提出能否忙完这次大会之后再配合调查，但遭拒，到了7月，组委会见其未归，不得不临时换人操办，但仍旧保留了他执行主席的身份。 　　动物遗传是李宁科研的核心，二十多年来，他参与的大部分国家科研项目均与此有关。记者根据公开资料搜索，李宁仅从国家自然科学基金、973(国家重点基础研究发展计划)、863(国家高技术研究发展计划)等三大科研计划获得的项目就至少22项，其他参与的大小项目更是难以计数。 　　其中，国家自然科学基金的项目最多，但经费不大，最大的一笔是2007年启动的&ldquo 畜禽基因组学与分子数量遗传学研究&rdquo ，经费450万元，为期两年。相比之下，973、863的项目因为课题庞杂，经费相对较多。据中国青年报报道，2006年，李宁领衔的&ldquo 猪、鸡重要经济性状遗传的分子机制&rdquo 课题专项经费为1581万元，由中国农大和多所院校合作，周期三年。 　　这些科研项目大多以中国农业大学的名义申请，按照国家科研经费专款专用的规定，经费由中国农大统一管理。&ldquo 不可能走现金，报销都得有正规发票，自己很难支配。&rdquo 李宁的一位学生不太相信科研经费转移的说法。 　　但是记者调查发现，在李宁申请的课题中，有一个合作公司的身影时隐时现：北京济普霖生物技术有限公司(下文简称济普霖)。多个消息源均指向，济普霖或是李宁将科研经费转移的公司之一。 　　根据公开资料检索发现，从2006年到2011年，中国农大和济普霖合作的项目至少有21个，其中国家转基因生物新品种培育重大专项最多，有5项，这由国务院在2008年7月的常务会议上审议通过的科研项目，总投入逾200亿，跨度12年。李宁是该重大专项的副总工程师。 　　工商资料显示，济普霖成立于2005年4月，是一家中外合资企业，注册资本3333万人民币。最初的股东有两个，分别是李宁和香港商人黄中石。李宁入股的并非现金，而是一项估值1833万的非专利技术：人乳铁蛋白基因全序列及其调控元件。 　　香港商人黄中石出资1500万，同时出任公司法定代表人和董事长。他对记者称，自己是在一个朋友的引荐下认识李宁的，&ldquo 李宁说，你来参股，将来有成果了，大家分享。&rdquo 　　据其描述，后来李宁又对他说，这个事情也关系到学校，最好给学校一部分。2006年9月，济普霖董事会决定修改公司章程，李宁和黄中石各拿出3%注册资本，无偿转让给新股东北京中农大地科技发展公司。资料显示，这是一家中国农大的全资控股公司。 　　在中国农大的官网上，济普霖和中农大地一样都出现在校办企业的名单中。但是实际上，记者获悉，中国农大和黄中石并不参与公司的任何经营管理，负责公司运营的是李宁带的一个名叫张磊的博士生。多个消息源指出，那个被带走调查的公司主管正是张磊。 　　李宁的一位亲友做出了解释， &ldquo 他一心扑在科研上，对公司经营管理并不在行，所以都交给学生打理。&rdquo 　　或在延伸审计时被查出问题 　　就是这家济普霖公司，在李宁参与的众多科研项目中，一直扮演着合作公司的角色。 　　李宁的学生刘雨告诉记者，科研项目都是以中国农业大学的名义申请，李宁领导下的该校农业生物技术国家重点实验室负责具体科研，而济普霖承担协助工作。至于中国农大和济普霖之间如何分工，经费如何分配，都有合同规定，并在申报科研项目时上报给项目主管单位。 　　一家公司以合作单位的身份参与国家科研项目，在中国产学研的大背景下一直是被允许的操作规则。在农大，这也是一个普遍现象。 　　浙江大学一位主持过863项目的教授告诉记者，一般对于合作公司没有什么资质限制，也不会要求公司资产规模有多大，只要科技部组织专家评审通过就可以。经费在预算的时候就已经分配好大学和公司各占多少，这个没有固定比例，都根据具体情况，科技部审核后，就没法调整了。 　　中国农大一位教授也称，按照规定，找合作单位应该招投标，但现实中一般都是给自己熟悉的公司操作，对于是否要避嫌不跟自己投资的公司合作，国家并无明确的规定。&ldquo 李宁的转基因研究属于国家前沿科技，不是随便哪个公司可以胜任，济普霖虽然是他自己的公司，但是业务比较熟悉，效率肯定会比找外边的公司要高。&rdquo 　　&ldquo 转基因克隆有很多重复性的工作，李宁觉得如果都是学生来做，不利于创新性研究，需要一个专门的公司来做。&rdquo 刘雨说。&ldquo 这是李宁成立济普霖的原因之一。&rdquo 　　不过，无论是以合作公司的名义，还是体制内报销的名义，科研经费都必须专款专用。如果将科研经费直接或变换形式转移到公司名下，用于其他用途，都涉嫌违法。根据教育部和财政部2005年发布的一份跟高校科研经费有关的规定，&ldquo 项目负责人不得借协作科研之名，将科研经费挪作他用，或转入与项目负责人有直接经济利益关系的关联单位。违反规定者，一经发现，必须严肃处理。&rdquo 　　中国农业大学的一位博士举例说，一个课题年初申请到了，年底钱才给你，第二年就审计，不可能钱到了再做，那样就没时间了，只有从其他课题拿钱来做，要不然，怎么申请下一个? 　　现实的确如此，记者接触过的多位科研界人士坦承，将科研经费截留或转移到公司名下，在现实中非常普遍。根据规定，科研项目有零余额制：项目截止的时候一分钱不能剩下，不然会被国家收走。&ldquo 因为科研经费都是竞争性分配，中一个项目很难。好不容易中了一个，就会把经费极大化，没花完的钱也可能会想办法存下。&rdquo 华中农业大学一位教授告诉记者。 　　一位接近中国农大的人士透露，李宁可能是项目主管机构在延伸审计时查出的。所谓延伸审计指的是，先对课题的承担单位中国农大进行审计，发现某项目的经费转到另一个单位后，对这个转入单位再审计。而具体的案情，至今仍未有任何披露。李宁身边的一位朋友也说，李宁个人有没有贪污，他也不清楚。 　　但李宁家人坚称，家里账户上没有查到一分钱。 　　&ldquo 如果真的有犯罪，该怎么处理就怎么处理。银行账目都可以查的嘛!买房子呢，还是买车呢，总要有根据!&rdquo 李宁的岳父吴常信对记者说，但一个人功是功，过是过，功不能掩盖过，过不能抹杀功。吴常信是中国科学院院士，是中国动物遗传学界的泰斗，还是李宁的学术启蒙老师。 没有了李宁这个学术带头人，&ldquo 神内&rdquo 大楼不知是否还能继续创造神话产业化梦想 　　和大多数年少成名的科学家一样，李宁的履历也可以用光鲜来形容。他16岁考进江西农业大学，29岁获得中国农业大学博士，45岁当选中国工程院院士。在熟悉他的老师和同学眼中，他也几乎具备了作为一个科学家的所有优秀特质：刻苦、敢于创新、领导力不错。 　　&ldquo 他常说，做科研要有用，要能做出产品，而不是为了发两篇论文。&rdquo 陈小青回忆。陈是李宁的博士生，跟了李宁八年，动物转基因产业化一直李宁的梦想。&ldquo 在中国，他(李宁)是这个领域的权威，认为应该冲在前边。&rdquo 　　所有产业化项目里，李宁最为看重的是转基因猪和奶牛，此后他投资、入股的诸多公司也均与此有关。 　　&ldquo 实验室不可能跟大公司谈合作，如果有一个公司的身份将有助于做这样的推广。&rdquo 陈小青说，李宁缺的，就是这样的一个推广公司。 　　2004年对李宁而言，是他产业化梦想的元年，但尝试并不成功。这年8月，北京嘉捷康宁生物技术公司成立。资料显示，在2000万注册资本中，李宁虽然出资100万，但他既是法定代表人，又是执行董事。这一年，李宁在学术圈的地位又上了一个新台阶：成为&ldquo 863&rdquo 重大专项总体专家组组长。 　　只是不到一年，公司就突然注销了。当时公司董事会的解释是：公司原计划和中国农大一起承担的863项目人乳化牛奶工作，由于自身发展遇到困难，科研及资金条件无法继续胜任该项科研工作。&ldquo 说白了就是大股东觉得风险太大，没钱景，撤资了。&rdquo 陈小青回忆，动物转基因成果转化相当漫长，短期收益几乎为零，鲜有企业家愿意冒这么大的风险。 　　反转基因人士柴卫东告诉记者，在欧美，动物转基因因为涉及伦理等一系列争议而被命令禁止产业化。这跟农作物转基因有很大不同。在中国，同样面临类似困境：动物转基因批准研究，但批准上市很难。 　　嘉捷康宁的倒闭让李宁一度陷入困境，但香港商人黄中石的出现，让李宁再次看到了曙光。正如上文所述，他们在2005年的4月注册成立了济普霖。 　　这次李宁没有出现金，而是以非专利技术入股。中国农业大学一位教授告诉记者，李宁负责技术推广成果转化，在学校允许的情况下创办转化学校或课题组科技成果的高新技术企业。&ldquo 这是合法的，这个公司学校也有参股。&rdquo 　　看上去，济普霖像是一个自食其力的高科技公司，但实际上，它与李宁和中国农大之间关系密切。济普霖在网上这样介绍：在国家十一五成就展中，济普霖和中国农大研发的成果排在展览第二位(第一位是航天技术)，中央政治局常委都认真参观了展览。公司承担和参加了国家863、动物新品种重大专项等国家攻关课题多项，为国家高技术发展做出了突出贡献，获得了国家和省部级奖励多项。 　　在中国农大的官网上，济普霖同样在宣传李宁的科研成就时被多次提及。 　　接近济普霖的人士元军告诉记者，济普霖除了承接课题之外，帮李宁对外界推广转基因技术是另一项重要工作。&ldquo 要说服主管部门，也要说服公众，用研究数据告诉他们转基因是安全的，前景是广阔的。也要说服大企业，合作探索产业化的可能。&rdquo 　　有了济普霖作为推广助手，李宁的科研成果开始在2005年之后遍地开花：跟河南花花牛集团合作，培育出第一批转入人&alpha &mdash 乳清蛋白基因扩繁小牛100头 和天津梦得牧业合作，成功繁育42头&ldquo 人乳化&rdquo 转基因奶牛 和北京利润维德公司合作，诞生一头转人CD20抗体基因的转基因奶牛&hellip &hellip 　　这些合作都属于李宁申请到的&ldquo 863&rdquo 课题&mdash &mdash &ldquo 高效表达人乳铁蛋白等药用、保健蛋白的奶牛乳腺生物反应器&rdquo 。但是这些合作的喜悦仅仅停留在当时转基因奶牛诞生的那一刻，再无下文。 　　&ldquo 他们愿意花一点代价跟济普霖一起完成课题是可以的，但是没有谁愿意冒险产业化。&rdquo 元军说，对这些公司的好处不言自明。他们可以跟济普霖学到东西，另外，他们会对外宣传承担了国家课题，以提高公司知名度。而在此过程中，合作公司是否对李宁进行了利益输送，亦不得而知。 　　专利合伙生意 　　在合作四处碰壁之后，李宁决定自己组建合资公司搞产业化。在短短五年内，李宁已搭建了一个轮廓日渐清晰的产业框架。 　　2009年1月，济普霖跟北京三元种业科技股份有限公司合资成立了一家合资公司，负责转基因牛的产业化测试，公司取名为北京三元济普霖生物技术有限公司。工商资料显示，在1000万的注册资本中，济普霖以510万占据控股位置。法定代表人和董事长均由李宁担任，李宁的多位学生和同事担任董事和监事。 　　这应该是在校方支持下进行的。记者查阅到一份该公司一期工程招标显示，公司建在位于河北的中国农业大学涿州农业科技园区内。接近该公司的人士告诉记者，这个尝试并不顺利，公司一直处于亏本运营状态。 　　2009年年底，另一家名叫济福霖的公司也在北京海淀开始营业。工商资料显示，这家公司依然由港商黄中石担任法定代表人，有所不同的是，这家公司完全由李宁控股。在注册资本1000万中，李宁出资900万，包括400万现金和500万的知识产权。 　　工商资料上的济福霖办公地位于北京海淀区知春路附近的一栋大楼，记者踏访之后发现，济福霖并不在这里办公，这里是一家名叫&ldquo 瑞企创业&rdquo 的企业注册公司。前台工作人员说，当初是他们帮济福霖注册的，现在济福霖跟济普霖其实在同一个地方办公。济普霖的会计告诉记者，这两家公司其实是两块牌子、一套人马，都是李宁的学生在负责。 　　公开资料显示，济福霖跟济普霖的业务并无本质不同，但实际上，济福霖却很少像济普霖一样跟李宁的实验室参与国家科研项目。济福霖的主要任务是负责研究成果的转让。 　　记者根据公开材料检索发现，从2010年11月开始，在李宁以济普霖名义申请的12项专利中，至少5项移到了济福霖名下，均跟李宁承接的国家课题相似，其中包括《一种动物体细胞克隆方法》、《一种从转基因牛乳中纯化重组人&alpha -乳清白蛋白的方法》等。 　　这五项中又有三项都转给了其他公司。其中，《一种动物体细胞克隆办法》，转让给了位于河北涿州的保定温氏种猪育种股份有限公司。资料显示，该公司成立于2011年10月，注册资本5431万，总投资3.2亿，李宁是总经理，与上述的北京三元济普霖生物技术有限公司一样，均位于中国农大涿州农业科技园区。 　　上述从济普霖转到济福霖的专利中，另外有两个关于奶牛的专利，在2011年先后转给了一家公司，即&ldquo 无锡科捷诺生物科技有限责任公司&rdquo 。工商资料显示，该公司成立于2010年，注册资本2.75亿，李宁是法定代表人兼董事长。接近科捷诺的人士说，济普霖全部用专利入的股。 　　这位接近科捷诺的人士对记者回忆，当时无锡市想做一个生物农业方面的科技项目，当地政府不是很懂，就去北京咨询专家，原本找了中国农科院的一位院士，但是当时这位院士临时有事，没见到。无锡官员在中国农大的熟人朋友推荐了李宁，那次双方聊得很投缘。无锡市决定邀请李宁先到无锡做一个演讲，李宁在跟当地领导见面时提到了人乳蛋白产业化的项目，问对方可不可以在无锡产业化。双方一拍即合。无锡政府方面还为科捷诺在当地找到了投资。 　　这项合作，很快就被提到了地方产业转型的战略高度。2011年7月，时任无锡市委书记的毛小平在接见李宁时说，无锡正在大力推进经济结构调整和城市转型发展，李宁把潜心多年的动物生物反应器及人乳铁蛋白产业化项目带给无锡科捷诺，完美地实现了一、二产业的融合，实现了现代生物农业与生物医药的结合，为无锡破解现代生物农业发展的难题树立了典范。 　　因为是无锡市政府支持的项目，科捷诺的建设很快走上轨道，买了厂房，建了国内最好的奶牛示范基地，两个有关人乳铁蛋白的试验还获得了江苏省和农业部的资助。科捷诺官网称，2012年，国家领导人参观中国农大，李宁还特地介绍了这个项目。该领导人说，他十分期待人乳铁蛋白第一批产品的上市。 　　在科捷诺的官网首页上有一个巨大的广告，李宁穿着红色的polo衫，戴着无框眼镜，双手交叉看着远方，左上方列着一行字：&ldquo 科捷诺，一个科学家的创新创业故事，一个科学家的中国梦。&rdquo 　　而直到被检方带走前一刻，李宁也还没能看到人乳铁蛋白产品的问世。而他的学生陈小青担忧：&ldquo 如果李宁真被判刑了，估计以后就没有人敢做动物转基因产业化了。&rdquo 　　(应受访者要求，文中刘雨、元军、陈小青均为化名 记者陈中小路、鲍小东、于冬对此文亦有贡献)

1、Identification of novel umami peptides from myosin via homology modeling and molecular docking基于同源建模和分子对接的新型肌球蛋白鲜味肽的鉴定 渤海大学 Food Chemistry 344 (2021) 1287282、Enrichment of the umami‐taste‐active amino acids and peptides from crab sauce using ethanol precipitation and anion‐exchange resin利用乙醇沉淀和阴离子交换树脂从蟹酱中富集鲜味活性氨基酸和多肽 广西大学 J Food Process Preserv. 2021 00:e153903、In silico identification of novel small molecule umami peptide from ovotransferrin卵转铁蛋白新鲜味小分子肽的硅胶鉴定 4、Proline-glucose Amadori compounds: Aqueous preparation, characterization and saltiness enhancement脯氨酸-葡萄糖Amadori化合物:水相制备、表征和盐度增强 江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室 Food Research International Volume 144, June 2021, 110319

纳米金壳偶联转铁蛋白分子携带药物靶向至肿瘤，光热疗与化疗结合杀死肿瘤细胞 　　实现恶性肿瘤安全有效治疗是目前生物医学界的重大挑战之一。中国科学院理化技术研究所纳米材料可控制备与应用研究室在唐芳琼研究员的带领下，近年来一直致力于设计发展新型纳米载体及其生物医学应用。 　　具有新结构和新性能的多功能纳米金壳是该团队一直致力发展的新型抗肿瘤纳米材料之一。该材料内层以结构独特的中空介孔夹心二氧化硅为核(Adv. Mater. 2009, 21, 3804-3807)，其表面包覆金壳，纳米金壳以其物理化学性质——等离子体共振性质为基础，经近红外激光照射，可将近红外激光光能转化为热能，并配以夹心二氧化硅对多种化疗药物的装载控制缓释技术，高效低毒杀死肿瘤细胞。该成果于2011年初发表在国际化学界顶级刊物《德国应用化学》(Angew. Chem. Int. Ed. 2011, 50, 891–895)上。 　　为更好地提高该材料对恶性肿瘤的抑制率，同时针对目前近红外光热治疗癌症技术中照射时间长，照射强度大，需重复多次照射等问题，该研究室进一步发展了纳米金壳偶联主动靶向配体分子转铁蛋白新技术。纳米金壳经偶联靶向分子后，可在减少照射时间与频率、降低照射强度的条件下实现恶性肿瘤的有效抑制。荷乳腺癌裸鼠肿瘤模型注射该材料后，经单次近红外激光照射即可消除肿瘤。在这新的研究进展中，她们还首次系统对比研究了该新型多功能纳米金壳偶联主动靶向配体分子前后生物体内安全性和代谢情况，结果表明该材料生物相容性良好，并可从体内代谢。 　　近日，这一最新研究进展在国际材料界顶级刊物《先进材料》(Adv. Mater. DOI: 10.1002/adma.201103343)上发表。审稿人认为，“多功能金壳包覆夹心二氧化硅，能够将主动靶向、被动靶向、光热治疗与化疗结合协同治疗癌症，临床应用前景令人期待。” 　　该研究获得国家科技部“863”项目和国家自然科学基金项目的大力支持。

简介血红蛋白病（Hemoglobinopathy）是由于血红蛋白分子结构或表达异常所引起的遗传性血液病，包括异常血红蛋白病和地中海贫血。常造成患者血红蛋白携氧功能异常和红细胞破坏，引起溶血性贫血、组织缺氧等。该类疾病分布广泛，全球有超过1亿人携带血红蛋白病的致病基因 [1]。在我国，该病流行于重庆、广西、广东、海南等省份，给社会和家庭造成严重的经济负担，已成为重要的公共卫生问题 [2]。 目前，通过新生儿筛查、产前筛查及遗传咨询，早期发现和及时预防是对该病进行防控的主要措施。然而，血红蛋白病仍缺乏系统、高效的筛查手段 [3]。目前，临床上通过结合血常规、 电泳和基因检测进行血红蛋白病的诊断。血常规的特异性不足，不能直接用于疾病的分型。血红蛋白电泳的分辨率低、流程复杂、成本高等因素，限制了其规模化应用 [4]。基因检测可用于血红蛋白病的分型和确诊，但作为筛查手段，还存在价格高、操作复杂、数据分析难度大等问题 [5]。因此，迫切需要系统高效且简便经济的血红蛋白病筛查技术。以常见的血红蛋白病地中海贫血为例，比较几种检测方法： 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）将软电离技术和飞行时间质量分析结合，尤其适用于生物大分子（蛋白、多肽和脂质等）的分析检测。本应用介绍了基于 MALDI-TOF MS（QuanTOF）技术，进行血红蛋白组分分析，进而建立血红蛋白病的表型筛查系统。血红蛋白分子在激光照射和基质的辅助下，四聚体解聚成珠蛋白链单体并带电，离子化的珠蛋白链因分子量差异导致飞行时间不同而被分离检测。区别于其他血红蛋白检测技术，MALDI检测的是珠蛋白链分子。通过QuanHGB血红蛋白软件分析珠蛋白链的分子量和相对含量，实现血红蛋白病的筛查。 15种异常血红蛋白的检测结果比对分析流程样本收集：全血样本 2uL全自动前处理：自动进行样本稀释、混匀、点样等操作质谱检测：加载靶板后，自动完成检测，~30s/ 样本结果输出：QuanHGB血红蛋白软件完成结果判读，标示异常样本结论MALDI-TOF质谱技术通过对血红蛋白组分的定性和定量分析，实现血红蛋白病（地中海贫血、异常血红蛋白病）的筛查，具有检测效率高、成本低、样本用量少、灵敏度高等特点，适用于血红蛋白病的大规模人群筛查。结果基于MALDI-TOF MS的血红蛋白病表型筛查系统，可实现对 β- 地中海贫血（图 1）和近100种异常血红蛋白的检测（图 2, 3） 图1. β-地中海贫血的判读结果 图2. 异常血红蛋白（α-珠蛋白变异）的判读结果 图3. 异常血红蛋白（β-珠蛋白变异）的判读结果参考文献[1] Modell B, Darlison M. Global epidemiology of haemoglobin disorders and derived service indicators[J]. Bulletin of the World Health Organization, 2008, 86(6):480-487.[2] 王燕燕, 李晓辉，徐酉华. 地中海贫血诊治进展与我国现状[J]. 中国实用儿科杂志， 2013, 28(6): 473-476.[3] Risoluti R, Materazzi S, Sorrentino F, et al. Update on thalassemia diagnosis: new insights and methods[J]. Talanta, 2018, 183:216- 222.[4] Srivorakun H, Fucharoen G, Changtrakul Y, et al. Thalassemia and hemoglobinopathies in Southeast Asian newborns: diagnostic assessment using capillary electrophoresis system[J]. Clinical Biochemistry, 2011, 44(5-6):406-411.[5] Shang X, Peng Z, Ye Y, et al. Rapid Targeted Next-Generation Sequencing Platform for Molecular Screening and Clinical Genotyping in Subjects with Hemoglobinopathies[J]. EBioMedicine, 2017, 23:150-159.

岛津制作所(SSI)近日发布了ATHAP-MALDI基质方法工具包，用于改进对包含跨膜疏水蛋白和多肽的分析能力。传统的LC-MS/MS和MALDI-TOF 很难分析包含疏水基团的膜蛋白。烷基化三羟基苯乙酮(ATHAP)新基质在此方法中发挥了特殊的作用。　　许多疾病的生物标志物是包含疏水基团的膜蛋白。之前用液质和MALDI-TOF的检测效果都不理想，这类蛋白和多肽一般不被目标分析物列表所包含。由于疏水多肽的低溶解性，其难于在液相质谱中得到检测。采用如α -氰基-4-羟基肉桂酸 (CHCA)、芥子酸(SA)、二羟基苯甲酸(DHB)等传统基质的MALDI法离子化效率较低，从而导致用MALDI-TOF检测这些物质灵敏度很差。　　“疏水性是将横跨膜片段整合到脂质双分子层的主要动力。这些新的基质工具包为科学家分析这些重要物质的生物和物理化学性质提供了前所未有的可能性。”岛津公司Scott Kuzdzal博士说。“这些工具包可以提高分析灵敏度，开拓对从抗菌肽到癌症蛋白标志物等关键疏水性分子结构和功能的研究。”　　ATHAP基质由广岛大学和田中耕一尖端科技实验室联合开发，并授权给岛津制作所。本研究得到日本学术振兴会(JSPS) “世界领先创新科技研发资助项目 (FIRST Program) ”的赞助支持。编译：郭浩楠

p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201704/noimg/934abd35-8b09-4a0f-ad3e-63227c614184.jpg" title=" 未标题-1.jpg" / /p p 　　近日，由中国农业科学院饲料研究所研究员王建华领衔的创新团队成功创制新型抗生素替代品——新型抗菌抗内毒素双效肽，其安全性高、抗菌性更强，并可解内毒素，具有很好的新药临床化开发优势。相关研究成果于近日在《科学报道(Scientific Reports)》上在线发表。 br/ /p p 　　抗生素耐药性、药物残留及近年出现的“超级细菌”为抗生素类药物的使用敲响警钟，治疗过程中又存在副作用——革兰氏阴性病原菌内毒素脂多糖(LPS)释放，直接威胁机体健康，因此开发新型抗生素替代品迫在眉睫。目前，在食品医药及饲料兽药行业具有广泛应用潜力的抗生素替代品牛乳铁蛋白衍生肽，虽具有广谱杀菌性，但存在溶血性较高、生物安全性低的问题。 /p p 　　王建华团队利用多氨基酸组合定点突变技术，从核心抗菌序列入手，对牛乳铁蛋白衍生肽3个关键位点进行替换，筛选出的2条突变体比母体肽具更强的抗金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、沙门氏菌活性，且溶血性更低。研究还发现突变体抑制病原菌脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)和蛋白质合成的能力更强。动物实验显示，染菌小鼠注射10~15 mg/kg可在10小时内显著降低体内病原菌量。此外，突变体可结合细菌内毒素，通过降低小鼠血清促炎因子水平抑制炎症产生，减少内毒素对小鼠肺部的诱导损伤，显著提高因内毒素引发毒血症的小鼠存活率。 /p p br/ /p

Ying Qing Yu与Martin Gilar 美国马萨诸塞州米尔福德沃特世公司 简介 本应用纪要中，我们介绍了沃特世专利RapiGest&trade SF试剂的物理化学性质及其应用领域。2002年，我们首次推出RapiGest SF，这一创新产品是帮助酶消解的有利工具，可促进溶液中蛋白的消解，它能够改善样品制备过程中蛋白的溶解度。 RapiGest SF提高酶解速率与完全程度的机理详见图1。温和的蛋白变性可打开蛋白结构并暴露酶切位点，以供酶切。在RapiGest SF溶液中，酶对变性的耐受性优于普通蛋白，并能保持活性。在加入酶之前高温加热RapiGest SF溶液可使球蛋白更为完全变性，之后需将酶与样品一起进行37 ° C的孵育。 图1 蛋白底物在RapiGest SF溶液中变性􀉼 之后对蛋白酶切更为敏感 超过200多家行业内杂志引用了使用RapiGest SF进行样品溶解的案例，大部分为蛋白组学的应用。最近，许多制药实验室使用RapiGest SF用于蛋白药物的确证。因为酶消化的速度的提高并在LC、MS分析前极易清除，RapiGest SF已被多个应用领域广泛接受，其中包括高级序列研究的LC/UV/MS蛋白药物的肽图分析。 讨论 什么是RapiGest SF? RapiGest SF是酸性不稳定表面活性剂，在酸性条件下极易水解。1这种独特的性质，在需要的时候，可用于从溶液中清除表面活性剂。RapiGest SF的结构及其水解副产物见图2。酸性不稳定的性质可在pH2条件下，45分钟内达到完全降解。 该表面活性剂可降解为两个产物：dodeca-2-one和3-（2,3-二羟基丙基）丙磺酸钠。前者与水不能互溶，可通过离心清除。后者在水溶液中溶解度很高，而在反相LC模式下不保留。酶消解后的水溶液可直接进行HPLC、LC/MS或MALDI-TOF MS进行分析。 消解后的清除 样品分析前无需额外去清除表面活性剂（如透析）。在分析前，酶消解后通常经过酸（如甲酸、三氟乙酸（TFA）或盐酸（HCl））的酸化，降解RapiGest SF。建议降解条件pH &le 2。 胰蛋白酶消解的兼容性 胰蛋白酶是最常见的蛋白水解酶，可用于肽图分析和蛋白组学的应用。我们研究了在添加RapiGest SF的情况下胰蛋白酶的活性作用，并与文献中最常见的变性剂的作用做了对比。本检测基于胰蛋白酶诱导N-&alpha -苯甲酰-L-精氨酸乙基乙酯（BAEE）在50 mM重碳酸胺（pH 7.9）中的室温水解。胰蛋白酶活性的变化通过UV 253 nm下测量BAEE水解率进行计算。在选择的变性溶液中，胰蛋白酶活性与对照样品进行对比（非变性剂）。结果见于表1。 表1中的数据说明低浓度下（0.1%） RapiGest SF不抑制胰蛋白酶的活性。这与结构上类似的表面活性剂SDS不同，SDS是很强的变性剂，可会使胰蛋白酶失活。尿素、乙腈或盐酸胍也是胰蛋白酶消化的变性剂。但是乙腈是强洗脱剂会干扰消解样品进行反相LC分析。正如我们所知，尿素可使蛋白共价修饰，盐酸胍也和SDS一样可以使酶失活。 本实验说明蛋白酶的活性受到蛋白溶液中所用变性剂的影响。RapiGest SF在从低到高的浓度下均不改变酶活性，因此，最佳的蛋白消解条件是无需过量酶即可达到酶解的结果。 快速蛋白消解 对蛋白酶解存在抗性的蛋白使用RapiGest SF试剂，可在数分钟内消解完全。完全消解球蛋白、马肌红蛋白只需要5分钟内即可完成。该试剂辅助的消解结果与对照见图3。由于肌红蛋白是球蛋白，众所周知，若没有表面活性剂将难以消解。在对照反应中，与胰蛋白酶孵育9小时后只有少量的蛋白可以消化。使用了RapiGest SF试剂，总体的消解的效率显著提升。 在蛋白药物肽图中的序列覆盖范围更大 RapiGest SF在蛋白组学的样品前处理中广泛使用，是有效的蛋白溶解变性剂。最近越来越多的生物制药实验室在肽图分析中采用了RapiGest SF。一些发表的论文记录了使用RapiGest SF进行蛋白药物消解的优势。4,5经报导的RapiGest SF浓度范围为0.05 -1%，取决于蛋白疏水性与浓度。 我们发现浓度范围为0.05 -1%的RapiGest SF足以使各种大小的蛋白变性，高浓度RapiGest SF适合全细胞蛋白提取的实验。 单抗（mAbs）肽图分析一直以来都因为难以消解这些大疏水蛋白而难以实现。肽图分析的目的是确认蛋白序列并发现所有存在后翻译修饰（PTMs）的蛋白。图4举例说明了RapiGest SF辅助的人单抗消解的实例。样品制备与分析的参数以UPLC® 和四级杆Tof质谱分析的参数已列表作为指导。 图4显示实验中总序列覆盖率为98%。数据分析通过BiopharmaLynx&trade v.1.2软件得到。高序列覆盖率（98%）说明单抗完全消解。LC/MS分析中没有发现错误酶切的多肽或完整未被酶切的蛋白。剩下的2%未确认的序列为少数二个氨基酸的肽或单个氨基酸（R或K），而无法在反相柱上保留。 样品制备 人单抗样品（10 &mu L, 21 mg/mL）在含有0.1% （w/v） RapiGest SF 的50 &mu L 50 mM重碳酸铵中溶解。将2 &mu L 0.1 M的二流苏糖醇（DTT）加入样品，样品在50 ° C加热30分钟，加入4 &mu L 0.1 M的碘代乙酰胺，在样品冷却至室温后样品在黑暗中静至40分钟。 样品中加入8 &mu g胰蛋白酶（胰蛋白酶浓度= 1 &mu g/&mu L），样品在37 ° C孵育过夜。消解样品与1%甲酸与10%乙腈混合（1：1，v：v）。用Milli-Q水（Millipore）稀释至5 pmol/&mu L后进行LC/MS分析。 LC 条件 LC 系统 沃特世 ACQUITY UPLC® 系统 色谱柱 ACQUITY UPLC BEH 300 C18 肽分离专用柱, 2.1 x 100mm （P/N = 186003686） 柱温 40 ° C样品进样 2 &mu L （10 pmol） 溶液A 0.1% 甲酸水溶液 溶液B 0.1% 甲酸乙腈溶液 流速 200 &mu L/min 梯度 0-2分钟:2%B 2 &ndash 92分钟：2 -35% B 92 -102分钟：35 - 50% B 102.1 -105 分钟：90% B 105.1-110分钟：2% B MS条件 MS系统 沃特世SYNAPT&trade MS （V型） 毛细管电压 3.2 kV 源温度 120 ° C 去溶剂温度 350 ° C 去溶剂气 700 L/hr MS 扫描速率 1 秒/次 锁定质量通道 100 fmol/&mu L Glu-Fib多肽（m/z 785.8426, z = 2），流速20 &mu L/min 与其他的蛋白酶合用 我们测试了RapiGest SF与多种蛋白酶的适配性，如Asp-N, Lys-C与Glu-C。在酶解前使用RapiGest SF变性蛋白获得了有效的消解结果。 蛋白去糖基化的用途 RapiGest SF也用于测试其它酶，如PNGase F，该酶用于酶切糖蛋白N-连接的糖基。2图6说明了去糖基化鸡蛋卵清蛋白。在RapiGest SF介质中PNGase F消解2小时后观察到了完全的去糖基化反应。 结论  RapiGest SF促进了蛋白酶解的速度与完全程度，能够得到蛋白药物序列覆盖率很高的肽图分析。  RapiGest SF是适用于蛋白组学、糖蛋白与生物制药应用的领域  几乎无需消解后样品处理，简单样品酸化，足以从溶液中去除RapiGest SF。多种情况下LC/MS分析前只需简单稀释。  RapiGest SF简化了样品制备方法，可提高分析通量；使用该方法提高实验室工作效率并提高数据质量。 参考文献 1. Yu YQ, Gilar M, Lee PJ, Bouvier ES, Gebler JC. Enzyme-friendly, mass spectrom- etry-compatible surfactant for in-solution enzymatic digestion of proteins. Anal. Chem. 2003 75: 6023-6028. 2. Yu YQ, Gilar M, Lee PJ, Bouvier ES, Gebler JC, A complete peptide mapping of membrane proteins: a novel surfactant aiding the enzymatic digestion of bacteriorhodopsin. Rapid Commun.Mass Spectrom. 2004 18: 711-715. 3. Yu YQ, Gilar M, Kaska J, Gebler JC. A rapid sample preparation method for mass spectrometry characterization of N-linked glycans. Rapid Commun. Mass Spectrom. 2005 19: 2331-2336. 4. Bailey MJ, Hooker AD, Adams CS, Zhang S, James DC. A platform for high- throughtput molecular characterization of recombinant monoclonal antibodies, J. Chrom. B. 2005 826: 177-187. 5. Huang HZ, NicholsA, Liu DJ. Direct identification and quantification of aspartyl succinimide in an IgG2 mAb by RapiGest SF assisted digestion. Anal. Chem. 2009 81 (4): 1686-1692.