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氨基酸甲酯

仪器信息网氨基酸甲酯专题为您提供2024年最新氨基酸甲酯价格报价、厂家品牌的相关信息, 包括氨基酸甲酯参数、型号等,不管是国产,还是进口品牌的氨基酸甲酯您都可以在这里找到。 除此之外,仪器信息网还免费为您整合氨基酸甲酯相关的耗材配件、试剂标物,还有氨基酸甲酯相关的最新资讯、资料,以及氨基酸甲酯相关的解决方案。

氨基酸甲酯相关的论坛

  • 关于氨基酸标样的配制

    大家好!请问英国安玛西亚公司生产的Biochrom31型氨基酸自动分析仪的氨基酸标样怎么配制啊? 谢谢!

  • 水解氨基酸的质量控制怎么做?

    首先想请教大家,目前是否存在哪个单位组织水解氨基酸的能力验证或者测量审核?其次,目前是否有售分装基体氨基酸的标准样品(物质),可以供实验室做17种水解氨基酸的质量控制?最后,除加标回收,重复性检测外,大家实验室怎么做水解氨基酸的质量控制啊?欢迎各位前辈指教

  • 氨基酸标液配制及定量方式,求教

    刚接触饲料中氨基酸的检测,打算用OPA柱前衍生—液相色谱法来做。购买了氨基酸的固体粉末,每一种氨基酸约0.1g。用0.1%的盐酸溶液来配制?但是不知道是稀释到什么程度,看一些资料的氨基酸结果浓度的表示方式都是** %,标准溶液是** pmol/L。因为之前一直都是做食品的,用的单位都是mg/kg或者mg/L。想不明白应该如何配制配液。氨基酸检测一般是用单标定量,还是曲线定量?外标?内标?谢谢!

  • 氨基酸分析仪选哪家?

    -------氨基酸分析仪算是LC的种,所以我把帖子发到这里,如有违规,请版主处理。-------------单位准备进一台氨基酸分析仪,目前有两家提供资料,其中一家的分离柱填料颗粒较小,另一家填料颗粒较大,但这家的氨基酸谱图上cysthi , Hylys两种氨基酸均有分裂峰,按销售的说法是他的分离能力更高(从参数上看,分离度与第一家无明显区别)。按我对LC的理解,填料颗粒小分离能力应该更强,为什么会出现相反的情况?是第二家销售夸大其词吗? 另外 ,这家销售说他的产品用的是陶瓷泵,在氨基酸高碱高脂环境下比第一家的不锈钢泵更有优势,貌似有些道理。请有经验用户给点意见。谢谢大家了!

  • 【转帖】氨基酸的主要化学反应

    氨基酸的主要化学反应(一)茚三酮反应茚三酮反应(ninhydrin reaction)这是氨基酸的α-NH2所引起的反应。α-氨基酸与水合茚三酮一起在水溶液中加热,可发生反应生成蓝紫色物质。首先是氨基酸被氧化分解,放出氨和二氧化碳,氨基酸生成醛,水合茚三酮则生成还原型茚三酮。在弱酸性溶液中,还原型茚三酮、氨和另一分子茚三酮反应,缩合生成蓝紫色物质。所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽都产生蓝紫色,但脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生黄色物质,因其α-氨基被取代,所以产生不同的衍生物。此反应十分灵敏,根据反应所生成的蓝紫色的深浅,在570nm波长下进行比色就可测定样品中氨基酸的含量。也可在分离氨基酸时作为显色剂定性、定量地测定氨基酸。 (二)氨基酸与2,4-二硝基氟苯的反应 此反应又称桑格反应(Sanger reaction)。在弱碱性(pH 8~9)、暗处、室温或40℃条件下,氨基酸的α-氨基很容易与2,4-二硝基氟苯(缩写为FDNB)反应,生成黄色的2,4-二硝基氨基酸(dinitrophenyl amino acid,简称DNP-氨基酸)。该反应由F. Sanger首先发现。多肽或蛋白质的N-末端氨基酸的α-氨基也能与FDNB反应,生成一种二硝基苯肽(DNP-肽)。由于硝基苯与氨基结合牢固,不易被水解,因此当DNP-多肽被酸水解时,所有肽键均被水解,只有N-末端氨基酸仍连在DNP上,所以产物为黄色的DNP-氨基酸和其它氨基酸的混合液。混合液中只有DNP-氨基酸溶于乙酸乙酯,所以可以用乙酸乙酯抽提并将抽提液进行色谱分析,再以标准的DNP-氨基酸作为对照鉴定出此氨基酸的种类。因此2,4-二硝基氟苯法可用于鉴定多肽或蛋白质的N-末端氨基酸。(三)氨基酸与苯异硫氰酸(PITC)的反应 此反应又称艾德曼反应(Edman reaction)。在弱碱性条件下,氨基酸的α-氨基可与苯异硫氰酸(phenylisothiocyanate, PITG)反应生成相应的苯氨基硫甲酰氨基酸(简称PTC-氨基酸)。在酸性条件下,PTC-氨基酸环化形成在酸中稳定的苯乙内酰硫脲氨基酸(phenylthiohydantoin,简称PTH)。蛋白质多肽链N-末端氨基酸的α-氨基也可有此反应,生成PTC-肽,在酸性溶液中释放出末端的PTH-氨基酸和比原来少一个氨基酸残基的多肽链。PTH-氨基酸在酸性条件下极稳定并可溶于乙酸乙酯,用乙酸乙酯抽提后,经高压液相层析鉴定就可以确定肽链N-末端氨基酸的种类。该法的优点是可连续分析出N端的十几个氨基酸。瑞典科学家P. Edman首先使用该反应测定蛋白质N-末端的氨基酸。氨基酸自动顺序分析仪就是根据该反应原理而设计的。(四)α-羧基的反应 氨基酸的α-羧基和一般的羧基一样,可以和碱作用生成盐,其中重金属盐不溶于水。氨基酸的羧基还能与醇类作用,被酯化生成相应的酯。酯化作用在人工合成多肽中常用来保护氨基酸的α-羧基。例如,氨基酸在无水乙醇中通入干燥氯化氢气体,或加入二氯亚砜,然后回流,生成氨基酸酯的盐酸盐。氨基酸的α-羧基被还原可产生相应的α-氨基醇,例如被氢硼化锂还原的反应。此性质在蛋白质一级结构的测定中是鉴定C-末端氨基酸的一种方法。(五)R基的反应 氨基酸的R侧链含有官能团时也能发生化学反应,例如丝氨酸、苏氨酸和羟脯氨酸均为含有羟基的氨基酸,所以能形成酯。酪氨酸的R侧链含有苯酚基,具有还原性,所以可利用此性质定量地测定蛋白质。另外,苯酚基和组氨酸中的咪唑基具有芳香环或杂环的性质,能与重氮化合物(如对氨基苯磺酸的重氮盐)结合而生成棕红色的化合物,此反应可用于定性、定量测定。此外,半胱氨酸的侧链上的巯基(-SH)的反应性能高,在碱性溶液中容易失去硫原子并且容易被氧化而生成胱氨酸。另外,极微量的某些重金属离子,如Ag+、Hg2+,都能与-SH基反应,生成硫醇盐,从而导致含-SH酶失活。

  • 【求助】如何采用高效液相色谱仪分析氨基酸(买人家的氨基酸分析包)

    我们想用高效液相色谱仪分析饲料中的氨基酸(呵呵,我们也只有一台waters的e2695型液相色谱仪,没有氨基酸分析仪),请问大家都用什么方法啊,我们买了郑州牧专的氨基酸分析包,可是作出来结果老是不准,就是结果偏低。另外之前负责氨基酸分析的女孩突然辞职了,可我只见过她前处理的大致步骤,不知道里面有啥关键点要必须掌握,所以我想问问大家你们有用氨基酸分析包的没啊,请指教一下吧,谢谢了

  • 【求助】氨基酸标准品

    大家好,我一直用安捷伦1120LC做17种氨基酸的含量测定,但是在检测过程发现因检测氨基酸的量很低,买的安捷伦的标准有时会偏低,使测定结果波动很大,想请问各位,买哪里的氨基酸标准比较稳定准确?再者,在检测氨基酸怎样才能提高准确度?

  • 【资料】氨基酸与肽

    1.1概述1.1.1氨基酸基本的理化性质 一、基本物理学性质 包括基本组成和结构、溶解性、酸碱性质、立体化学、熔点、沸点、光学行为、旋光性、疏水性等。 (一)溶解性质根据氨基酸侧链与水相互作用的程度可将氨基酸分作几类。含有脂肪族和芳香族侧链的氨基酸,如Ala、Ile、Leu、Met、Pro、Val及Phe、Tyr,由于侧链的疏水性,这些氨基酸在水中的溶解度均较小;侧链带有电荷或极性集团的氨基酸,如Arg、Asp、Glu、His、Lys和Ser、Thr、Asn在水中均有比较大的溶解度;但根据电荷及极性分析也有一些例外,如脯氨酸属于带疏水基团的氨基酸,但在水中却有异常高的溶解度。 (二)氨基酸的疏水性 氨基酸的疏水性,是影响氨基酸溶解行为的重要因素,也是影响蛋白质和肽的物理化学性质(如结构、溶解度、结合脂肪的能力等)的重要因素。 按照物理化学的原理,疏水性可被定义为:在相同的条件下,一种溶于水中的溶质的自由能与溶于有机溶剂的相同溶质的自由能相比所超过的数值。估计氨基酸侧链的相对疏水性的最直接、最简单的方法就是实验测定氨基酸溶于水和溶于一种有机溶剂的自由能变化。 一般用水和乙醇之间自由能变化表示氨基酸侧链的疏水性,将此变化值标作△G′。 不同氨基酸的△G′值如下表所示。当氨基酸的△G′值为正时,其侧链具有疏水性,倾向于处在蛋白分子的内部; △G′为负时,其侧链是亲水的,倾向于处在蛋白分子的表面。需要注意的是,赖氨酸通常是蛋白质分子中亲水性的氨基酸残基,但它的△G′是正值,这是由于它的侧链含有优先选择有机环境的4个-CH2-基。 (三)氨基酸的光学性质 氨基酸中的苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸分子中由于有共轭体系,因此可以吸收近紫外光。它们的最大吸收波长(λmax)分别为260nm、275nm、278nm;在吸收最大波长光线的时候还会发出荧光。

  • 【求助】请专家指点--氨基酸分析仪采购,急!

    [size=4]小可的单位近期计划采购一台氨基酸分析仪,目前正在选型阶段,碰到了一些问题请高手指点下。1.目前我们联系到的氨基酸分析仪厂家有2家,分别是日立和德国的塞卡姆。请问市面上比较好的氨基酸分析仪品牌都有哪些?2.就日立和塞卡姆的氨基酸分析仪相比较来说,哪个技术更成熟,口碑更好一些?3.在对比氨基酸分析仪优劣方面,我们应该主要看哪些指标?4.一台氨基酸分析仪的价位大概在多少钱?是不是必须要配浓缩仪?最后请给位给我们推荐一款氨基酸分析仪的牌子吧。更适合质检领域应用。因为为两家销售各执一词,我们对此也很困惑。快要决定了,比较着急,请各位不吝赐教。谢谢![/size]

  • 请教氨基酸测定前对样品进行脱脂的原因。

    请教各位专家。氨基酸测定的国标中,对样品脂肪含量都进行了要求。即样品的脂肪含量必须低于4-5%才能进行水解,否则要先脱脂。想请教一下脱脂的目的是什么,脂肪的存在对氨基酸的测定有哪些不利影响?谢谢。

  • 【求助】请教各位氨基酸与异硫氰酸苯酯反应方程式

    在做氨基酸测定时,用异硫氰酸苯酯做衍生试剂,多余的衍生试剂要除去,现请教各位氨基酸与异硫氰酸苯酯反应方程式是什么样的,在衍生1umol/ml氨基酸单标时应用的100mmol/l异硫氰酸苯酯衍生试剂的量是多少?三乙胺在反应中起什么作用,在反应中应用的1mol/l的三乙胺的量是多少?另外在反应中用正己烷进行萃取,那么加入正己烷的量又是多少呢?

  • 【资料】不同氨基酸自动分析仪氨基酸分析结果之比较

    近几年来由于饲料工业迅猛发展,对饲料产品的品质控制已经从常规的营养分析转到了微量分析,对饲料品质的评价已经从粗蛋白含量的高低,改为观测各种氨基酸含量是否符合要求,所以准确测定氨基酸含量就成了关键一环。本实验验证不同品牌的氨基酸分析仪在不同的实验室测定氨基酸含量是否有差别。

  • 【资料】(氨基酸分析仪)GBT 18246-2000 饲料中氨基酸的测定

    本标 准 是 根据FAO/WHO(联合国粮食及农业组织和世界卫生组织)植物蛋白评价组专家联席会的推荐,在GB/T 15399-1994(饲料中含硫氨基酸测定方法离子交换色谱法》,GB/T 15400--1994《饲料中色氨酸测定方法分光光度法》国家标准和NY/T 56-1987(原GB 7649-1987)《谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法》行业标准的基础上,充分吸纳国内外有关研究的最新成果和两次参加国际大型氨基酸实验室间联合试验研究的经验与结果制定的。

  • 氨基酸前处理的脱脂

    食品中氨基酸测定的国标中,对样品脂肪含量都进行了要求。即样品的脂肪含量必须低于4-5%才能进行水解,否则要先脱脂。想请教一下脱脂的方法是什么,只称50mg的乳粉,也需要脱脂吗?在各种文献上找,都说需要脱脂,并没有看到具体的做法那,打扰各位专家了!非常感谢!

  • 氨基酸前处理脱脂方法

    视频中氨基酸测定的国标中,对样品脂肪含量都进行了要求。即样品的脂肪含量必须低于4-5%才能进行水解,否则要先脱脂。想请教一下脱脂的方法是什么,只称50mg的乳粉,也需要脱脂吗?在各种文献上找,都说需要脱脂,并没有看到具体的做法那,打扰各位专家了!非常感谢!

  • 【求助】氨基酸分析中碰见不常见的氨基酸

    最近忙氨基酸分析,用柱前衍生。发现样品有一个峰很高,尤其是水解之后更高。它不是17中氨基酸标准品中的一个,不知道是什么。。。。。。。。这样的话我怎么得知它是什么氨基酸呢?我算总量的时候可不可以用峰面积估算出这个峰代表的氨基酸的含量? 可不可以用质谱做?但是样品比较复杂。。。。。。。。。。。。。要怎么办呢?大侠们出手试试

  • 【求助】氨基酸自动分析仪

    大家好! 我是一名新手,有很多地方都不懂.我使用的biochrom30型氨基酸自动分析仪最近测定的谷物氨基酸含量都很高,甚至比凯氏定氮测出的粗蛋白含量还高.我一直查不出是什么原因.请大家帮帮我! 还有前处理中,封管抽真空时,会有很多泡沫一直向上跑,该怎么办? 谢谢大家!

  • 氨基酸有吸收吗?

    如题,氨基酸有吸收吗?大家一般用什么方法,柱子,检测器等来分析氨基酸啊?

  • 氨基酸液质测定求解

    看到一个测定氨基酸样品前处理的配方,说是要加还原剂,这个所谓的还原剂应该就是酸水解吧?但天冬氨酸、色氨酸和谷氨酰胺怎么测定,它们三个不能用酸水解的呀?

  • 【求助】急!异硫氰酸苯酯(PITC)衍生测18氨基酸方法求助

    急!最近在做18氨基酸查了一些资料,最后选择了异硫氰酸苯酯(PITC)衍生测18氨基酸但遇到不少问题,希望得到大家帮助!主要体现在丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、精氨酸。。。。到脯氨酸不能很好的分离开,且峰形不好看理论板数不高,后面9个氨基酸又能很好的分离峰形好不知道是那里出了问题?流动相还是衍生过程?不知道你们能否提供一份成熟的方法,我好做下对比找到问题所在在此感谢!可发邮箱:liujian132008@yahoo.com.cn也可以提供意见!大家一起讨论讨论。

  • 氨基酸分析仪大家都在用哪家的?质量性能如何?

    氨基酸分析有很多种方法,虽然氨基酸分析仪不是最灵敏的,但却简单方便,各位童鞋用的氨基酸分析仪都是哪个品牌?国产品牌里有比较出色的么?哪种检测方法综合比较,更为实用?请大家都来各抒己见吧!

  • 氨基酸分析技术的特点与内涵

    氨基酸分析技术的特点与内涵文章来源:国家产品质量安全与法信息中心网 添加时间:2009-7-19 3:13:19 点击:1510摘要:在传统蛋白质分析技术基础上,结合现代分析仪器技术发展优势,针对氨基酸分析技术难点及存在问题,概括比较分析评价当前氨基酸分析技术特点。关键词:蛋白质 氨基酸 分析技术 研究进展1 前言迄今为止,自然界中已发现180多种氨基酸,其中参与蛋白质合成的氨基酸只有20多种,称为基本氨基酸。氨基酸主要有两种存在形式,一种是以游离态存在于生理体液(血浆、尿)、食品(酒、饮料)中;另一种是以结合态存在于肽和蛋白质中。蛋白质在乳中含量为3.0%~3.5%,是乳的主要成分,对乳品的理化特性和营养价值有重要的影响。由于国标法对蛋白的检测是通过检测样品含氮量而得到的,实际上是将样品消化分解,经蒸馏碱吸收后,测定的挥发性“氨基氮”,因而部分不法商贩用添加外源动植物蛋白粉或脲等含氮化合物(虚“氮”)来增加原料乳的氮含量,钻传统检测方法表征“虚氮”的漏洞,以蒙混过关。这些掺入水解动物蛋白或者含氮化合物的乳粉因其氨基酸的组成不合理,根本不能代表动、植物蛋白,不易消化,所以营养价值低下,导致人体吸收利用率降低,严重地影响到婴幼儿的生长发育和智力水平。因此,对氨基酸分析方法的研究与改进逐渐得到各国家、全社会的高度重视。在一般情况下,质量监督检验单位在市场上抽到产品进行检验所得的数据中,蛋白质含量实际上是用总氮含量表示的,所以在加工企业常规检验时、含氮化合物、水解动物蛋白等杂蛋白是测不出来的,因此需要建立快速分析、测定乳制品中蛋白质、氨基酸的检测方法,保障乳制品的质量与安全。,1958年,Spackman等首先提出了用阳离子交换色谱与柱后茚三酮衍生结合的方法分析蛋白质中的氨基酸,实现了氨基酸分析的自动化。其后,人们不断地发展新的氨基酸分析方法,柱前衍生反相高效液相色谱法、高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法、毛细管电泳法、蛋白质芯片技术等相继应用于氨基酸分析。现已是多种氨基酸分析方法并存、互补。本文就目前应用于氨基酸分析的主要方法作一比较分析。,,2 氨基酸分析技术的光谱分析优势及特点利用光谱探针方法定量分析蛋白质的研究在国际上十分活跃,其中,对有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法和金属离子-有机染料(包括显色剂和荧光染料)结合分光光度法的研究倍受重视。 2.1 有机染料结合分光光度技术因为有机染料结合分光光度法测定蛋白质操作简便,比较灵敏,又不需特别的仪器,方法应用比较广泛。现在研究较多的可作为探针的染料分子中,大部分都含有带正电荷的亲水性基团如羟基、磺酸基、酚羟基及不带电荷的疏水性基团,如苯环。这类方法的基础是在溶液pH小于等电点时,蛋白质的肽键亚胺和N端氨基质子化成阳离子,若有阴离子染料存在时,由于电荷作用,蛋白质便与染料结合沉淀或改变结合染料的光吸收特性,借染料颜色的减褪或变化的程度测定蛋白质的含量。已经应用的染料有酸性橙红、考马斯亮蓝G-250、溴甲酚绿、溴甲酚紫、埃铬青R和溴酚蓝。2.2金属离子-有机染料结合分光光度技术近几年发展了利用金属离子和有机染料特别是荧光染料形成配合物体系结合光光度法来测定蛋白质含量。金属离子与含有-OH或C=O的有机染料相遇时,氧原子中的孤对电子可顺利进人杂化轨道,形成稳定的配合体系,在酸性条件下,该体系遇到结构不对称的蛋白质分子时,互相极化产生静电作用而结合成新的大分子团,改变了原体系的光谱性能,从而能定量测定蛋白质的含量。该方法具有灵敏度高、线性范围广、干扰离子少、操作简单、快速及适用于常规应用等特点。2.3 荧光光度分析技术荧光法是定量测定蛋白质的另一种常用方法通常比分光光度法更灵敏。常用的方法有内源荧光法、荧光探针法、荧光偏振、时间分辨荧光法及激光诱导时间分辨免疫分析法。2.3.1 内源荧光分析技术蛋白质中存在着Tyr、Trp、phe残基,能够吸收270~300 nm的紫外光而发出紫外荧光。当测定体系中加入小分子配体(SM)时,SM与蛋白质发生相互作用,会导致蛋白质荧光的猝灭,利用SM对蛋白质内源荧光的猝灭这一现象可以确定蛋白质与SM的作用类型及其结合部位等。2.3.2 外源荧光分析技术对于蛋白质的研究仅利用其内源荧光是不够的,需要通过外源荧光性质的研究才能获得更多关于蛋白质分子的各种信息,这就使得荧光探针对蛋白质分析有着极其重要的意义,这已成为蛋白质微量检测及溶液的构相分析中不可缺少的手段之一。在外源荧光法中,又可分为有机荧光探针法和稀土荧光探针法。作为一个好的荧光探针应满足以下条件:探针分子与蛋白质分子的某一微区必需有特异性的结合,并且结合比较牢固;探针的荧光必须对环境条件敏感;蛋白质分子与探针结合后不影响其原来的结构和特性。在满足这些条件的基础上可进行蛋白质的测定和与金属离子结合的计量化学等。与光度法类似,蛋白质在和某些具有荧光特性的染料结合后,能引起荧光强度的变化,并且在一定浓度范围内与蛋白质浓度成正比,因此可用于蛋白质的测定。利用这些化合物在不同蛋白质分子中量子产率、峰位及谱带的变化,就可探测蛋白质分子结合区的极性、疏水性的大小,从而推论构象的稳定情况及变化等。2.3.3 荧光偏振分析技术利用荧光体在转动扩散速度上的差异而导致偏振荧光的差别,建立了荧光偏振测定法。利用荧光偏振还可以研究:酶与荧光底物的结合程度;蛋白质聚合与解离;蛋白质从螺旋到无规卷曲的研究。,3 氨基酸分析技术的色谱分析优势及特点3.1 柱后衍生高效阳离子交换色谱分析技术高效阳离子交换色谱(HPCEC)-柱后茚三酮衍生光度检测分离测定氨基酸是一种经典的氨基酸分析方法。此方法是利用氨基酸在酸性条件下形成阳离子而在阳离子交换柱中分离,分离后的氨基酸用茚三酮衍生、紫外可见光检测器检测。该方法以阳离子交换树脂为固定相、酸性缓冲液流动相,在柱后流出液中加入茚三酮使氨基酸生成具有可见光吸收的衍生物进行检测,具有重现性好、仪器稳定、结果可靠、适合于大量常规样品分析等优点。另外,由于衍生化反应发生在氨基酸与其物质分离之后,因而避免了其他物质的干扰,适合复杂样品中氨基酸的分析。其缺点是仪器复杂、体积大、费用高。此外,由于脯氨酸的测定波长在440nm,而其他氨基酸的测定波长为570nm,因脯氨酸不能和其他氨基酸同时测定。氨基酸分析自动仪就是基于阳离子交换色谱分离、柱后茚三酮衍生光度检测技术设计的。商品化的自动氨基酸分析仪是在20世纪60年代初问世,目前的自动氨基酸分析仪已实现了程控自动化和数据处理电脑化,分析时间已缩短至1 h以内。氨基酸自动分析仪实际上属专门用来分析氨基酸的高效液相色谱仪,其优点是高压、快速、灵敏,试剂和样品用量少、重现性好、分析结果稳定。广泛用于食品、医学、农业以及微生物等领域。3.2 柱前衍生反相高效液相色谱分析技术近20年来,柱前衍生反相高效液相色谱法(RP-HPLC)分析氨基酸得到了迅速发展,逐渐取代柱后衍生高效阳离子交换色谱(HPCEC)在许多领域中的应用。RP-HPLC分析方法更加快速灵敏。与专业氨基酸分析的自动分析仪不同,HPLC仪适用性更广、更灵活。RP-HPLC要求将氨基酸在柱前转化为适于反相色谱分离并能被灵敏检测的衍生物,柱前衍生的关键在于衍生试剂的选择。选择衍生试剂的标准是能与各氨基酸定量反应,每种氨基酸只生成一种化合物且产物有一定的稳定性,不产生或易于排除干扰物,操作简单,色谱分离分辨率高、检测灵敏度高,分析时间短,便于实现自动化和使产物能在不同型号的高效液相色谱仪上测定。目前比较常用的柱前衍生试剂有邻苯二甲醛(OPA)、异硫氰酸苯酯(PITC)、氯甲酸芴甲酯(FMOC-Cl)及丹酰氯(Dansyl-Cl)。衍生后的氨基酸一般键合在C18柱上,利用液液分配原理进行分离。流动相多以乙酸盐或磷酸盐缓冲液为主,以乙腈、甲醇或四氢氟喃为调节剂。由于氨基酸衍生物仍保留着两性化合物的特点,除改变调节剂之外,还可通过调节缓冲液pH值、离子强度、柱温等使之达到理想的分离。当然,不同衍生物所选用的柱型、流动相以及氨基酸的洗脱时间和顺序不尽相同。柱前衍生反相高效液相色谱法可用于分析蛋白质水解液、生理体液和食品等样品中的氨基酸。当与质谱技术结合时,采用电离喷雾质谱(ESI-MS)或电离喷雾串联质谱(ESI-MS/MS)联用技术方式,借助计算机的联机检索,可以实现高通量筛选和鉴定蛋白质混合体系。目前,,蛋白质组研究的高效液相色谱-质谱联用的方式有一维色谱-质谱联用技术、多维色谱-质谱联用技术以及亲和色谱-质谱联用技术等。一维色谱-质谱技术仅能分析一些不太复杂的蛋白质体系,而对复杂的多肽混合物常不能满足分离的要求。多维色谱分离的方法在某种程度上满足了对复杂蛋白质混合分离鉴定的要求。,,,3.3 两种氨基酸直接分析技术大多数氨基酸不具备生色团,因此无法利用分光光度法直接检测,故需采用化学衍生技术,使之生成可在紫外或可见光区有吸收的化合物,或者采用荧光法检测。但对于分析工作者来讲,尤其是在新化合物研制的过程中,面对多种未知的降解物,如采

  • 【转帖】用打油诗记住所有氨基酸

    用打油诗记住所有氨基酸六伴穷光蛋,酸谷天出门,死猪肝色脸,只携一两钱。一本落色书,拣来精读之。芳香老本色,不抢甘肃来。六伴穷光蛋:硫、半、光、蛋→半胱、光、蛋(甲硫)氨酸→含硫氨基酸酸谷天出门:酸、谷、天→谷氨酸、天门冬氨酸→酸性氨基酸死猪肝色脸:丝、组、甘、色→丝、组、甘、色氨酸→一碳单位来源的氨基酸只携一两钱:支、缬、异亮、亮→缬、异亮、亮氨酸→支链氨基酸一本落色书:异、苯、酪、色、苏→异亮、苯丙、酪、色、苏氨酸→生糖兼生酮拣来精读之:碱、赖、精、组→赖氨酸、精氨酸、组氨酸→碱性氨基酸芳香老本色:芳香、酪、苯、色→酪、苯丙、色氨酸→芳香族氨基酸不抢甘肃来:脯、羟、甘、苏、赖→脯、羟脯、甘、苏、赖氨酸→不参与转氨基的氨基酸

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