求助五羟基色氨酸的紫外光谱图，急用。多谢各位大虾的帮助，先谢了！
饲料色氨酸水解出来的值比较小，用氢氧化钡和氢氧化锂有区别吗？
大家好，本人一直用AOAC的方法做饲料的色氨酸，但是结果偏低，AOAC的方法是氢氧化钠水解，液相紫外检测器。我看了欧盟和国标，分别用氢氧化钡和氢氧化锂做水解剂，不知道这三种水解剂有什么区别，我的结果偏低是不是跟水解剂有关。各位大神，做过色氨酸的请赐教，谢谢！
【中文名称】色氨酸；β-吲哚基丙氨酸；2-氨基-3-吲哚基丙酸【英文名称】tryptophane;DL-tryptophone【结构或分子式】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/02/201202032015_347713_1855403_3.jpg【相对分子量或原子量】204.23【熔点（℃）】左旋289（分解），右旋281～282【性状】 有三种异构体。消旋体是白色晶体，左旋体是五味片状晶体，右旋体是白色晶体。【溶解情况】 消旋体微溶于水；左旋溶于水和热乙醇，不容遇氯仿；右旋溶于水、热乙醇和氢氧化碱溶液。【用途】 是重要营养剂。医药上用作癞皮病的防治剂。本品可参与动物体内血浆蛋白质的更新，并可促进核黄素发挥作用，还有助于烟酸及血红素的合成，可显著增加怀孕动物胎仔体内抗体，对泌乳期的乳牛核母猪有促进泌乳的作用。当禽畜缺乏色氨酸时。生长停滞，体重下降，脂肪积累降低，种公畜睾丸萎缩。【制备或来源】 可由酪蛋白碱性水解、精制而得，或由β-吲哚醛和马尿酸合成。【其他】 消旋体和左旋体在碱性溶液中稳定。【生产单位】 武汉制药厂；上海生物化学制药厂等
用不同的氨基酸与葡萄糖在高温条件下反应，为什么色氨酸与葡萄糖反应液用水稀释后有絮状物呢？求解
如题，做色氨酸的检测，不知道是我的样品里面色氨酸含量太低，还是前处理有问题，我的样品进样之后没有色氨酸的峰，但是标样进样很正常。我是取鱼粉样品200mg，用5mlLiOH（4mol/L）110度反应22小时，然后冷却后中和反应液，最后用pH4.3缓冲液稀释后进样的。进样时我还发现有很多其他的峰，而且响应值还比较大，是否在碱水解的条件下也能得到一些氨基酸的峰，而且如果减少稀释倍数，其他的峰是否会过载？有战友做过色氨酸检测吗，请指教一下，非常感谢！
求助，各位大虾有谁知道如何测土壤的L-色氨酸的浓度的，请帮忙！[em06]
[color=#444444]有人用HPLC测过L-色氨酸吗？色氨酸产量可能有30-40g/L，目前采用的检测方法如下。[/color][color=#444444]HPLC分析条件：色谱分离柱Agilent C18(5 μm，150 mmx4.6 mm)，流动相V(0．03％KH2P04溶液)：[/color][color=#444444]V(甲醇)=90：10，流量1．0 mL／min，柱温39℃，进样量20μL，检测波长278 nm．[/color][color=#444444]样品处理：取1．0 mL发酵液10 000 r／min离心5 min，取上清液稀释适当倍数使色氨酸浓度介于[/color][color=#444444]测定方法的检测线性范围内，然后用0．22 μm微孔滤膜过滤，所得滤液直接进样测定。[/color]
GB-T 15400-1994 饲料中色氨酸测定方法-分光光度法[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=98271]GB-T 15400-1994 饲料中色氨酸测定方法-分光光度法[/url]
关于欧洲药典色氨酸有关物质检查的流动相问题，调节ph之前溶液总体积已达1700ml,再用2.9g/L磷酸溶液调节ph到2.3结果倒入400ml左右，才勉强能达到2.3，这是否合理？有人做过这个检查吗，有相关的色谱图可供参考吗？
最近用分光光度法检测饲料原料中色氨酸成分，按照国标操作，颜色为黄色而不是国标中所说蓝色，标准曲线也做不出，不知道是什么原因，请问有做过这个的吗？
蛋白胨水培养基( l )成分 蛋白胨 10g 水 l000ml 氯化钠 5g ( 2 )制法 取上述成分混合，微温使溶解，调pH 值使灭菌后为7.3 士0.1 ，分装于小试管，121 ℃ 灭菌15 分钟。( 3 )用途 用于鉴别细菌能否分解色氨酸而产生靛基质的生化反应。 ① 靛基质试验取可疑菌落或斜面培养物，接种于蛋白胨水培养基中，置35 ℃ 培养24～48 小时，必要时培养4～5 天，沿管壁加人靛基质试液数滴，液面呈玫瑰红色为阳性，呈试剂本色为阴性。 ② 靛基质试液 称取对二甲氨基苯甲醛5g ，加入戊醇（或异戊醇）75ml ，充分振摇，使完全溶解后，再取盐酸25ml 徐徐滴入，边加边振摇，以免骤热导致溶液色泽变深．或称取对二甲氨基苯甲醛1g ，加人95 ％乙醇95ml ，充分振摇，使完全溶解后，再取盐酸20ml 徐徐滴入。
专家您好，我想问一个也许很简单的问题—为什么蛋白质中酪氨酸和色氨酸荧光会有两个激发波长而一个发射波长？
各位专家：最近在做实验遇到一问题：水溶液中存在正辛醇和色氨酸，现在想知道色氨酸和辛醇之间是否存在氢键相互作用（主要想知道色氨酸的羧基和辛醇的羟基之间是否存在氢键），不知拉曼光谱能否解决这一问题？如果可以，拉曼光谱具体实验方法如何实施？谢谢！
有机合成中羧基保护方法简介保护羧基的方法主要是酯化法,但在某些情况下,也可以用形成酰胺或酰肼等方法来进行保护.1.酯化法保护羧基:甲酯和乙酯 甲酯和乙酯作为羧酸的保护基对一系列合成操作十分适用。例如,以酯的形式进行的烷基化反应和各种缩合反应,随后酯基在酸或碱的催化下水解除去,偶尔酯基也可用热解反应消去。但简单的烷基酯作为羧酸的保护基在有些情况下并不适用,其原因往往是由于最后需用皂化反应来除去酯基。因此,实际上在合成中常甲基和乙基的衍生物取而代之。甲基的衍生物主要是苄基类型,可用温和条件下的酸处理或氢解脱除。乙基衍生物主要是β,β,β2三氯乙基等2.酯化法保护羧基:叔丁酯 叔丁酯不能氢解,在常规条件下也不被氨解及碱催化水解,但叔丁基在温和的酸性条件下可以异丁烯的形式裂去。此性质使叔丁基在那些不能进行碱皂化的情况下特别吸引人,例如:用于酮、β2酮酯、α,β不饱和酮和对碱敏感的α2酮醇以及肽的合成。在青霉素的合成中,可选择性地裂开叔丁酯以便形成β2内酰胺 在菌霉素的合成中和在容易还原的酮的制备中,都可用叔丁基来保护羧基。四氢吡喃酸具有和叔丁酯相似的对酸的不稳定性,这一保护基也类似地用于丙二酸酯类型的酮和酮酯的合成中。3. 酯化法保护羧基:苄基、取代苄基及二苯甲基酯类 这类酯保护基的特点在于它们能很快地被氢解除去。在青霉素合成中,苄酯不被温和的酯水解条件破坏,最后需由氢解除去苄酯 在谷酰胺和天门冬酰胺的合成中,以及在L2谷氨酸和L2天门冬氨酸酯的制备中,苄酯的性质都能典型地显示出来。Bowman 和Ames 将苄基酯用在活性酯(有α2活泼氢) 的烷基化或酰基化中,此法曾出色地完成脂肪酸、酮、二酮和α2醇酮的合成。芳环上或次甲基上有取代基的苄基在用酸性试剂脱去时,其敏感性可有大幅度的改变。Stewevr 在酯肽类合成中利用了亚甲苄酯易于催化脱去的优点,用其代替叔丁酯。苄酯和对硝基苄酯也可作为羧基的保护基,一个典型的例子就是其在氨基的酰化衍生物合成中的应用。在苯酯和缩酚酸的合成中,二苯甲酯具有相似的作用,但二苯甲酯在酸存在条件下的溶剂化分解太快,因此在酸性条件下不易作羧基保护基。总之,这类酯是一种有价值的保护基,其制备可用经典的方法及前述的反应制备。4.用酰胺和酰肼来保护羧基 在有限的范围内人们采用酰胺和酰肼的形式保护羧基,从其解脱方式的角度补充了酯类保护作用的不足。酰胺和酰肼对解脱酯类的温和碱性水解条件稳定,但酯类对能有效脱解酰胺的亚硝酯和用于裂解酰肼的氧化剂又均稳定,二者可以互补。制备酰胺和酰肼的经典方法是以酯或酰氯分别与胺或肼作用制备,也可直接从酸制得。酰肼已被用于抗菌素和肽的合成,在肽的合成中它们可被亚硝酸转化为叠氮化物,使得缩合反应容易发生。5. 酯的保护 酯和内酯的保护可视为羧基的间接保护,而且酯须有α2活泼氢,否则反应很复杂。酯在引进保护基后,可在很多条件下保持稳定,如HOAc/ H2O/ THF(25 ℃,1 h) ,KOH/MeOH(25 ℃,12 h) ,LiAlH4/ Et2O(25 ℃,3 h) ,CH3Li/Et2O(25 ℃,2 h) 等。可用汞盐或三氟化硼脱去脂保护基 综上所述,保护羧基的方法虽然不多,但作为保护基的酯的种类却不少,且各有特色。近年来有关羧基保护的研究主要在肽、氨基酸、抗菌素等的合成方面,且应用日见广泛。
各位师兄师姐以及专家们你们好！小妹有一个问题想请教一下。我们知道L-半胱氨酸与11-巯基十一烷酸里面都既有巯基又有羧基，他们中的巯基可以和纳米金自组装，羧基可以乙酰胆碱酯酶里面的羟基结合，但首先与哪个结合？具体怎样结合？哪位大侠只要做过其中之一的连接，给我指点一下。小妹在此感激不尽......
各位老师同学，有个问题请教一下，希望大家帮忙解答。Boc保护的甘氨酸在氯仿中，加入DCC，反应有白色沉淀生成，是什么物质呢？我要用dcc活化甘氨酸上的羧基，然后甘氨酸与长碳链结合，如果有做相关研究的老师同学，请帮忙指点一二。谢谢！
前段时间开了一个讨论帖，推断缬氨酸（V）、亮氨酸（L）、异亮氨酸（I）、苏氨酸（T）、赖氨酸（K）、苯丙氨酸（F）、色氨酸（W）的出峰顺序。原帖链接如下：节后第一讨论贴--已知解离常数预测出峰顺序！http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20130219/4574102/帖子的点击率说明还是有不少网友关注的，在此先谢过大家的捧场。该贴到目前为止共有两位网友参与讨论，并都给出了各自不同的答案。我的答案跟他们的相差比较大，特此摆出来跟大家分享讨论。说的不一定对，只是抛砖引玉，希望大家畅所欲言。以下讨论全部以CZE为前提，且GBE只有缓冲溶液，没有任何其他添加剂（如有机溶剂）。要预测出峰顺序，首先得弄清楚这个物质的酸碱性。如果是弱酸性物质，在羧基完全解离的情况下，物质带负电荷，则荷质比越大出峰时间越晚。如果是弱碱性物质，完全电离时物质带正电荷，出峰顺序正好反过来，即荷质比越大，出峰时间越短。另外酸性物质，pKapH时，羧基解离；碱性物质，pKa9.0 ，其他均9.0 赖氨酸第一个出来；分子量由大到小（其倒数由小到大顺序）为：色W: 204.23苯F: 165.19赖K: 146.19亮L: 131.17＝异亮I: 131.17苏T: 119.12 缬V: 117.15我先猜一下顺序（不对莫怪）：赖氨酸Lys色氨酸try苯丙Phe异亮氨酸iso亮氨酸leu苏氨酸thr缬氨酸valflysky97
最近老师要求让我买根氰基色谱柱，不知道是否适合分离生物样品？
如果用L-半胱氨酸，理论上它的羧基与乙酰胆碱酯酶的羟基结合，巯基与纳米金粒子结合，但具体先与哪个基团结合？怎样保护另一个基团不被破坏？具体操作？有谁知道请指点一下!谢谢！
1、农业 主要作为家禽、畜禽特别是宠物等食用的饲料增加氨基酸的添加剂与引诱剂。用作水解蛋白添加剂，作为水解蛋白的增效剂； 在农药生产上用于合成拟除虫菊酯杀虫剂的中间体甘氨酸乙酯盐酸盐，也可合成杀菌剂异菌脲和除草剂固体草甘膦。 2、工业 电镀液添加剂； 用于制药工业、生化试验及有机合成； 用作头孢菌素的原料，甲砜霉素中间体，合成咪唑乙酸中间体等等； 用作化妆品原料。 3、试剂 用于多肽合成，用作氨基酸保护单体； 用于组织培养基的制备，铜、金和银的检验； 因甘氨酸为具有氨基和羧基的两性离子，故有很强的缓冲性，常用作配制缓冲液； 络合滴定指示剂，溶剂。
先简单 介绍——————做氨基酸 检测想了解详细资料，请自己到迪马科技官网自行下载http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09510.gifPITC柱前衍生法18种天然氨基酸分析(异硫氰酸苯酯柱前衍生法)——序列号: D0241 适用范围 该方法适用于氨基酸注射液、动植物性食品和饲料中 Asp(天冬氨酸)、Glu(谷氨酸)、Ser(丝氨酸)、Gly(甘氨酸)、His(组氨酸)、Arg(精氨酸)、Thr(苏氨酸)、Ala(丙氨酸)、Pro(脯氨酸)、Tyr(酪氨酸)、Val(缬氨酸)、Met(蛋氨酸)、Cys(胱氨酸)、Ile(异亮氨酸)、Leu(亮氨酸)、Phe(苯丙氨酸)、Trp(色氨酸)、 Lys(赖氨酸)等 18种天然氨基酸的检测http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203131711_354396_2019107_3.jpg2 溶液配制 氨基酸储备液： 称取一定量氨基酸标准品，用 0.1 mol/L HCl水溶液溶解，胱氨酸为0.01 mol/L，酪氨酸为0.02 mol/L，其他氨基酸为 0.05 mol/L 氨基酸使用液： 将储备液用0.1 mol/L HCl水溶液稀释，得到浓度为 0.002 mol/L 的氨基酸单标和混标 内标液： 以正亮氨酸作为内标物。称取一定量正亮氨酸，溶于 0.1 mol/L HCl水溶液，得到 0.02 mol/L 的正亮氨酸内标液 异硫氰酸苯酯溶液： 将 250 μl 异硫氰酸苯酯用乙腈乙腈定容至 10 ml，得到0.2 mol/L 异硫氰酸苯酯溶液 三乙胺溶液： 将1.4 ml三乙胺用乙腈定容至 10 ml，得到1.0 mol/L 三乙胺溶液 标准溶液衍生化 量取 200 µl氨基酸混合标准溶液(每种组分浓度均为 0.002 mol/L)，置于 1.5 ml塑料离心管中，准确加入20 μl正亮氨酸内标溶液、100 µl 1 mol/L三乙胺乙腈溶液和100 µl 0.2 mol/L 异硫氰酸苯酯乙腈溶液，混匀，室温反应 1 小时，然后加入正己烷 400 µl，旋紧盖子后剧烈振荡5~10 s，静置分层，取 200 µl下层溶液与 800 µl水混合，0.22 µm 针式过滤器过滤，待分析。注： 通过控制原始样品质量或稀释等方法，使样品溶液中的氨基酸总量不超过0.04 mol/L 或3.0 g/L(两者中取最小值) 只有采用内标法分析时，才需要加入正亮氨酸作为内标物 衍生得到的样品溶液中含有50%的乙腈，这与流动相溶剂体系存在较大差距，因而需要加水稀释，否则会引起峰前沿或分叉迪马科技AAA氨基酸柱子 洗脱条件 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646181_2019107_3.gifhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104221943_290383_2019107_3.gif
现在在纳米金上修饰了一个羧基，要活化这个羧基，怎样活化？请求高手或大侠能指点一下，小弟感激不尽！
需要用HLCP分析糖类物质，但组里是C18柱，不好用来分析糖类，所以请教以下几种柱子大概的价格，看看老板能不能给买，谢谢各位！sugar SH1011(shodx，srnmDx300mm）氨基色谱柱还有这个是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]用的柱子：AminoPac PA10
现在在纳米金上修饰了一个羧基，要活化这个羧基，怎样活化？请求高手或大侠能指点一下，小弟感激不尽！
现在在纳米金上修饰了一个羧基，要活化这个羧基，怎样活化？请求高手或大侠能指点一下，小弟感激不尽！
[b]NF V03-615*NF EN ISO 11214:1996改性淀粉.氧化淀粉羧基含量的测定[/b]
我的化合物含羧基，但是氢谱上9－13的地方并没有发现有峰，做质谱分子量又确实是我要的化合物，请问是什么原因，羧基有可能不出峰吗？
[font=宋体]蛋白质是生物体赖以生存的物质，而蛋白质又是由氨基酸所组成除含有组成蛋白质的各种氨基酸外，还有游离存在的各种氨基酸。氨基酸含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。是组成蛋白质的基本单位，氨基酸种类分为：蛋白氨基酸、蛋白质稀有氨基酸、非蛋白质氨基酸。随着对蛋白质及多肽研究的日趋重视，氨基酸分析技术也得到了飞速发展。[/font][font=宋体]蛋白质氨基酸分为：中性氨基酸（一氨基一羧基酸）、碱性氨基酸[/font]([font=宋体]二氨基一羧基酸[/font])[font=宋体]、酸性氨基酸（一氨基二羧基酸）和杂环氨基酸四类；中性氨基酸：甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、胱氨酸（二氨基二羧基酸）；酸性氨基酸：天门冬氨酸、谷氨酸、天冬酰胺、谷酰胺；碱性氨基酸：赖氨酸、精氨酸；杂环氨基酸：脯氨酸、组氨酸等二十种。其中缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、色氨酸和赖氨酸是八种人体必需氨基酸，不能自身合成，必须由食物供给；当食物缺少这些氨基酸时，正常生长发育就受到抑制。[/font][font=宋体]蛋白质稀有氨基酸：一些特殊类型的蛋白质水解液中分离出来的少数其他氨基酸，是正常氨基酸的衍生物，数量不会很多。如胶原蛋白的水解液中[/font]4-[font=宋体]羟脯氨酸，就是脯氨酸的衍生物。[/font][font=宋体]非蛋白质氨基酸：存在于各种细胞或组织中，游离状态或者是结合状态，但并不存在于蛋白质中，如γ[/font]-[font=宋体]氨基丁酸、鸟氨酸等大约[/font]150[font=宋体]余种。[/font][font=宋体]因此氨基酸分析技术是生命科学研究中重要的技术之一。[/font][b][font=宋体]氨基酸自动分析仪[/font][/b] [font=宋体]主要应用在农业（种子、饲料）、食品、水产、医药、生化、医学等领域。如日立全自动氨基酸分析仪[/font]L-8900[font=宋体]、英国[/font]Biochrom 30+[font=宋体]、德国赛卡姆（[/font]sykam[font=宋体]）全自动氨基酸分析仪[/font]S433D[font=宋体]等。适合蛋白质含量为常量的，大批量样品的分析测试。[/font][font=宋体]氨基酸自动分析仪原理：柱后衍生法，采用离子交换树脂（强酸性阳离子交换树脂[/font]Na+[font=宋体]型[/font][font=宋体]）分离，茚三酮醋酸溶液柱后衍生。不同氨基酸对树脂的亲和力如下：碱性氨基酸[/font][font=宋体]芳香族氨基酸[/font][font=宋体]中性氨基酸[/font][font=宋体]酸性氨基酸及羟基氨基酸，即氨基酸分析仪出风顺序如下：天冬门氨酸（[/font]Asp[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]苏氨酸（[/font]Thr[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]丝氨酸（[/font]Ser[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]谷氨酸（[/font]Glu[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]脯氨酸（[/font]Pro[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]甘氨酸（[/font]Gly[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]丙氨酸（[/font]Ala[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]胱氨酸（[/font]Cys[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]缬氨酸（[/font]Val[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]蛋氨酸（[/font]Met[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]异亮氨酸（[/font]Ileu[font=宋体]）亮氨酸（[/font]Leu[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]酪氨酸（[/font]Tyr[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]苯丙氨酸（[/font]Phe[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]赖氨酸（[/font]Lys[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]氨（[/font]NH3[font=宋体]）组氨酸（[/font]His[font=宋体]）[/font]----[font=宋体]精氨酸（[/font]Arg[font=宋体]）。[/font][font=宋体]此方法优点是衍生自动完成，检出限在[/font]0.5 umol/L-2 umol/L[font=宋体]以下，衍生生成物稳定。缺点是检测用时偏长，每个样品检测时间通常为[/font]60[font=宋体]分钟。[/font][b][font=宋体]反相[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]邻苯二甲醛（[font=Arial, 微软雅黑 !important]OPA[/font]）柱前衍生荧光法[/font][/b][font=宋体]主要适用蛋白质含量为超微量、微含量样品（海水、沉积物、味精、食盐等）。[/font][font=宋体]邻苯二甲醛（[/font]OPA[font=宋体]）柱前衍生荧光法原理：采用样品通过衍生剂（[/font]125 mg OPA[font=宋体]溶解在[/font]5 ml[font=宋体]甲醇中，加入[/font]100 ul[font=宋体]β[/font]-[font=宋体]巯基乙醇，用[/font]pH=10.5[font=宋体]硼酸溶液定容[/font]25 ml[font=宋体]）衍生，进入反相[/font]C18[font=宋体]色谱柱分离，荧光检测器（λ[/font]ex=334 nm[font=宋体]，λ[/font]em=425 nm[font=宋体]）检测。[/font][font=宋体]此方法优点在于其超高的灵敏度，检出限在[/font]100 fmol/L-1 pmol/L[font=宋体]以下，衍生反应瞬间即可完成，检测用时短，一般[/font]35[font=宋体]分钟可检测完成一个样品。缺点就是衍生反应强度受气温、光强限制，衍生反应后[/font]1[font=宋体]分钟之内立刻进样，衍生反应时间超过二十分钟，氨基酸就会衰减很快，脯氨酸不能和[/font]OPA[font=宋体]生成衍生物。[/font][img]http://www.qdio.ac.cn/ggjs/jlhz/202110/W020211021379701035423.png[/img][b][font=宋体]反相[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]异硫氰酸苯酯（[font=Arial, 微软雅黑 !important]PITC[/font]）柱前衍生紫外法[/font][/b][font=宋体]主要适用蛋白质含量为半常量、微量（沉积物、生理体液、植物等）；本法采用样品[/font]200 ul[font=宋体]先加入[/font]100 ul[font=宋体]三乙胺乙腈溶液，再加入异硫氰酸苯酯乙腈溶液[/font]100 ul[font=宋体]，混均室温反应[/font]60[font=宋体]分钟，加[/font]400 ul[font=宋体]正己烷终止反应，取下层溶液过滤，进反相[/font]C18[font=宋体]色谱柱，紫外检测器[/font]254 nm[font=宋体]检测。[/font][font=宋体]此方法相对其他柱前衍生测定氨基酸的方法而言[/font],[font=宋体]在可操作上和低成本等方面具有明显优势，检出限在[/font]200 nmol/L-800 nmol/L[font=宋体]以下，相比柱前衍生[/font]OPA[font=宋体]法和柱后衍生茚三酮法检测样品的范围更加广泛，而且衍生方法简便，不受气温和光强的限制，衍生物单一、稳定[/font]-20[font=宋体]℃可储存数月，[/font]4[font=宋体]℃冷藏可放一周。缺点就是衍生时间太长，灵敏度不高。[/font][img]http://www.qdio.ac.cn/ggjs/jlhz/202110/W020211021379701034546.png[/img]
多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序一般从C端（羧基端）向 N端（氨基端）合成。固相合成法，大大的减轻了每步产品提纯的难度。为了防止副反应的发生，参加反应的氨基酸的侧链都是保护的。羧基端是游离的，并且在反应之前必须活化。固相合成方法有两种，即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多优势，现在大多采用Fmoc法合成。【详情请咨询合肥国肽生物】（1）具体合成由下列几个循环组成：1. 去保护：Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂（piperidine）去 除氨基的保护基团。2. 激活和交联：下一个氨基酸的羧基被一种活化剂所活化。活化的单体与游离的氨基反应交联，形成肽键。在此步骤使用大量的超浓度试剂驱使反应完成。循环：这两步反应反复循环直到合成完成。3. 洗脱和脱保护：多肽从柱上洗脱下来，其保护基团被一种脱保护剂（TFA） 洗脱和脱保护。（2）树脂的选择及氨基酸的固定将固相合成与其他技术分开来的最主要的特征是固相载体，能用于多肽合成的固相载体必须满足如下要求：必须包含反应位点（或反应基团），以使肽链连在这些位点上，并在以后除去；必须对合成过程中的物理和化学条件稳定；载体必须允许在不断增长的肽链和试剂之间快速的、不受阻碍的接触；另外，载体必须允许提供足够的连接点，以使每单位体积的载体给出有用产量的肽，并且必须尽量减少被载体束缚的肽链之间的相互作用。用于固相法合成多肽的高分子载体主要有三类：聚苯乙烯-苯二乙烯交联树脂、聚丙烯酰胺、聚乙烯-乙二醇类树脂及衍生物，这些树脂只有导入反应基团，才能直接连上（第一个）氨基酸。根据所导入反应基团的不同，又把这些树脂及树脂衍生物分为氯甲基树脂、羧基树脂、氨基树脂或酰肼型树脂。BOC合成法通常选择氯甲基树脂，如Merrifield树脂；FMOC合成法通常选择羧基树脂如王氏树脂。氨基酸的固定主要是通过保护氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成的共价键来实现的，形成共价键的方法有多种：氯甲基树脂，通常先制得保护氨基酸的四甲铵盐或钠盐、钾盐、铯盐，然后在适当温度下，直接同树脂反应或在合适的有机溶剂如二氧六环、DMF或DMSO中反应；羧基树脂，则通常加入适当的缩合剂如DCC或羧基二咪唑，使被保护氨基酸与树脂形成共酯以完成氨基酸的固定；氨基树脂或酰肼型树脂，却是加入适当的缩合剂如DCC后，通过保护氨基酸与树脂之间形成的酰胺键来完成氨基酸的固定。（3）氨基、羧基、侧链的保护及脱除要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽，需要对暂不参与形成酰胺键的氨基和羧基加以保护，同时对氨基酸侧链上的活性基因也要保护，反应完成后再将保护基因除去。同液相合成一样，固相合成中多采用烷氧羰基类型作为α氨基的保护基，因为这样不易发生消旋。最早是用苄氧羰基，由于它需要较强的酸解条件才能脱除，所以后来改为叔丁氧羰基（BOC）保护，用TFA（三氟乙酸）脱保护，但不适用含有色氨酸等对酸不稳定的肽类的合成。chang Meienlofer和Atherton等人采用Carpino报道的Fmoc(9-芴甲氧羰基)作为α氨基保护基，Fmoc基对酸很稳定，但能用哌啶-CH2CL2或哌啶-DMF脱去，近年来，Fmoc合成法得到了广泛的应用。羧基通常用形成酯基的方法进行保护。甲酯和乙酯是逐步合成中保护羧基的常用方法，可通过皂化除去或转变为肼以便用于片断组合；叔丁酯在酸性条件下除去；苄酯常用催化氢化除去。对于合成含有半胱氨酸、组氨酸、精氨酸等带侧链功能基的氨基酸的肽来说，为了避免由于侧链功能团所带来的副反应，一般也需要用适当的保护基将侧链基团暂时保护起来。保护基的选择既要保证侧链基团不参与形成酰胺的反应，又要保证在肽合成过程中不受破坏，同时又要保证在最后肽链裂解时能被除去。如用三苯甲基保护半胱氨酸的S-，用酸或银盐、汞盐除去；组氨酸的咪唑环用2,2,2-三氟-1-苄氧羰基和2,2,2-三氟-1-叔丁氧羰基乙基保护，可通过催化氢化或冷的三氟乙酸脱去。精氨酸用金刚烷氧羰基（Adoc）保护，用冷的三氟乙酸脱去。我们主要提供：多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网：http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线：0551-62626599
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