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甲基叶酸盐

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甲基叶酸盐相关的论坛

  • 3-(N-甲基正戊胺基)丙酸盐酸盐

    各位大哥大姐们 小弟现在在做 3-(N-甲基正戊胺基)丙酸盐酸盐 的有关物质 发现有Na离子干扰 用的柱子是阴离子交换色谱柱 但是在试验过程中发现 当离子强度比较低的时候 两者的分离度可以达到要求 但是主峰不出峰 离子强度高的时候 主峰出的较早 但是二者分离度达不到要求 机器是安捷伦1200 RID 检测器 流动相是 0.5ml甲酸-2000ml水 氨水调PH4.5-5.5 各位以前还有做过类似的情况啊 谢谢

  • 【求助】叶酸的衍生化试剂

    呵呵,我是新手,想请教一下关于叶酸的衍生化试剂都有哪些,现在我查到的资料都是关于柱后衍生化的,我想用柱前衍生化,恳请高手指点一下[em0815]

  • 【原创】求助——测定饲料中的烟酸叶酸

    本人最近做了一个饲料中的烟酸叶酸,方法按照相关国标中测定的。方法很简单,直接提取过滤或者离心就上机,但是回收率为0。重复多次都是这样的结果,多次调整实验中固液比例仍然是此结果。以前也做过饲料中的烟酸叶酸,但是没有遇到过这样的问题。想求助高人解释一下为什么会出现这样的问题

  • 请问测甲醛用的酚试剂到底是3-甲基-2-苯并噻唑酮腙盐酸盐还是其水合物

    98.0%(HPLC)(T) 分子式(M.F.) / 分子量(M.W.) C8H9N3S·HCl / 215.70 CAS编码 4338-98-1 相关CAS编码 149022-15-1,38894-11-0 第一个是别名 (英文)MBTH Hydrochloride Hydrate 别名 (英文)Sawicki's Reagent Hydrate 中文名3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐水合物 中文别名3-甲基-2-苯并噻唑啉腙盐酸盐水合物 第二个是别名 (英文)MBTH Hydrochloride 别名 (英文)Sawicki's Reagent 中文名3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐 中文别名MBTH盐酸盐 中文别名Sawicki's试剂

  • 【分享】食品中叶酸的测定方法

    1.原理叶酸是酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei, L. C, ATCC 7469)生长所必需的营养素。在一定条件下,L.C的生长繁殖与培养基中叶酸含量呈正比关系,细菌增殖的量以光密度值计,通过与标准曲线相比较,计算出样品中叶酸的含量。2.适用范围参考《Methods of Vitamin Assay》,第4版。本方法适用于各类食物中叶酸的测定。检测限为0.1ng。3.仪器与设备(1) 恒温培养箱(2) 离心机(3) 高压消毒锅(4) 震荡器(5) 接种针和接种环(6) 分光光度计4.试剂除特殊说明外,本实验中所有试剂均为分析纯,水为蒸馏水。(1) 菌种:酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei, L.C, ATCC 7469)(2) 磷酸缓冲液(0.05mol/L, pH6.8):称取4.35g Na3PO412H2O,10.39g Na2HPO47H2O溶解于800ml水中。临用前用约5g抗坏血酸调节pH至6.8。(注:叶酸对光、热敏感,易被氧化破坏,抗坏血酸有助于保护叶酸被氧化。)(3) 鸡胰酶溶液: 称取100mg干燥的鸡胰酶(Difco公司)(注:含有叶酸轭合酶,用于水解叶酸多谷氨酸盐), 加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆,3000rpm离心10min,取上清液备用。临用前现配。(4) 蛋白酶-淀粉酶溶液:分别称取200mg蛋白酶(Sigma公司)和淀粉酶(Sigma公司),加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆,离心3000rpm 10min,取上清液备用。临用前配制。(5) 2+8乙醇溶液:量取20ml无水乙醇溶液,加入80ml水混匀。(6) 01mol/L NaOH: 称取0.4g氢氧化钠,加2+8乙醇溶液溶解并稀释至1L。(7) 10mol/L NaOH。称取400g氢氧化钠,加水溶解并稀释至1L。(8) 叶酸标准储备液(200mg/ml):准确称取200mg叶酸标准品(Sigma公司,纯度大于98%),用0.01mol/L NaOH溶解并定容至1L。储存于棕色瓶中。(9) 叶酸标准中间液(200ng/ml):准确吸取1.0ml叶酸标准储备液,用0.01mol/L NaOH 溶解并定容至1L。储存于棕色瓶中。待标定。标定:准确吸取1ml叶酸标准中间液,用0.1mol/L NaOH定容至10ml。以0.1mol/L NaOH调零点,比色杯厚度1cm,波长256nm,测定3次紫外吸光度值,取平均值,按下式计算标准中间液浓度。X1 =A/E×M ×10×10E6 …………………(1) ` 式中:X1 -- 叶酸标准中间液浓度,ng/ml;A -- 标准中间液平均紫外吸光度值;E -- 摩尔消光系数24,500;M -- 叶酸分子量441.42;10-- 测定紫外吸光度值时的稀释倍数;106 -- 由g/L换算成ng/ml的换算系数。(10) 叶酸标准工作液(0.2ng/ml):准确吸取1.0ml叶酸标准中间液,用磷酸缓冲液稀释定容至1L。(11) 2.4mol/L HCl:量取20ml浓盐酸,加水稀释至100ml。(12) 酶解酪蛋白溶液:将8g碳酸氢钠溶解于1L水中,加入60g去维生素酪蛋白(Sigma 公司),用10mol/L NaOH调节pH至 8.0(调pH时应小心,不要过碱后再加酸反复调节,避免酪蛋白结块)。加入300mg胰酶,搅拌20min,使胰酶混匀充分。再加入2.5ml甲苯,置37℃恒温箱酶解48~72h(此步骤是将酪蛋白酶解为L.C可以利用的小分子肽。酶解时间不易超过72h,如时间过长,配成的培养基不利于细菌生长)。将酪蛋白液从恒温箱中取出,121℃高压30min以终止反应并去除甲苯。冷却,加10g硅藻土搅拌,用垫有滤纸的布氏漏斗过滤。向滤液中加入约60ml冰乙酸调节pH至3.7。称取活性炭12g,加入滤液中搅拌10min,用布氏漏斗过滤,重复三次。每次过滤时,布氏漏斗内加有10g硅藻土协助过滤。最后滤液用水稀释至1200ml,4℃冰箱保存1年(活性碳可吸附酪蛋白中的叶酸以减少试剂空白,同时也可吸附肽及氨基酸,应注意控制搅拌时间)。取10ml酶解后的酪蛋白溶液加入已称重的蒸发皿中,沸水浴蒸发至干。将蒸发皿置于100℃恒温烤箱内干燥至恒重,在干燥器中冷却至室温。称量蒸发皿的重量,蒸发皿内固体重量,如固体重量小于400mg,即每毫升酪蛋白溶液中固体含量40mg,则弃除酪蛋白液,重新制备。(13) 黄嘌呤溶液:取0.4g黄嘌呤,加入10ml氨水,加热溶解,用水稀释至100ml。冰箱保存。

  • 亚甲蓝测水中硫化物--对氨基二甲基苯胺盐酸盐怎么配置

    亚甲蓝测水中硫化物--对氨基二甲基苯胺盐酸盐怎么配置

    1. 在用亚甲蓝测水中硫化物的时候,需要配置0.2%的对氨基二甲基苯胺溶液,我查了一下,他的别名也可以叫叫[font=宋体, Arial, Helvetica, sans-serif][size=12px]N,N-二甲基对苯二胺二盐酸盐,应该没买错吧。[/size][/font]2. 他的储存条件不是-20℃吗?这样它里面会不会含有很高的水分?那我称取2 g的 时候,需不需要干燥,还是直接就称取2 g 就好了。3. 还有就是配置好0.2%的对氨基二甲基苯胺溶液后,怎么储存呢?室温?冷藏?冷冻?如有回复,万分感谢!![img=,690,449]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110221239193272_1018_5383916_3.png!w690x449.jpg[/img][img=,690,299]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110221239240158_2694_5383916_3.png!w690x299.jpg[/img]

  • 【原创大赛】补叶酸,补叶酸,补叶酸!

    [font=宋体][color=#333333][back=white] 叶酸是一种水溶性维生素,也叫维生素[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]B9[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。最初从菠菜中发现了这种生物因子,因此命名为叶酸,叶酸富含于新鲜的水果、蔬菜、肉类食品中,尤以酵母、肝及绿叶蔬菜中含量比较多,但天然叶酸极不稳定,易受阳光、加热的影响而发生氧化,所以人体真正能从食物中获得的叶酸并不多。合成的叶酸在数月或数年内可保持稳定,容易吸收且人体利用度高。[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white] 人体缺少叶酸可导致红血球的异常,未成熟细胞的增加,贫血以及白血球减少。孕妇缺乏叶酸有可能导致胎儿出生时出现低体重、唇腭裂、心脏缺陷等。因此,怀孕前[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]个月就要开始吃[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333]叶酸[back=white],每天[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]0.4mg[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white],即一粒[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333]叶酸,[back=white]可以降低胎儿神经管畸形率至[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]85%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。服用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]5 mg[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的叶酸则用来治疗女性贫血,消费者可根据不同情况进行选择。[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white] 叶酸测定试剂盒是以化学发光免疫分析法为原理定量测定人血清中叶酸含量的试剂盒,对贫血的临床诊断和治疗起辅助作用,最重要的是判断后期孕妇需不需要继续补充叶酸。叶酸的测定检查一般是在怀孕[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3-4[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]个月进行,判断后期孕妇需不需要继续补充叶酸,检测结果主要有三种:低风险,代表对叶酸的吸收和代谢能力是正常的或者接近正常,可以正常补充叶酸。中度风险,代表对叶酸的吸收和代谢能力存在障碍,可能会出现叶酸缺乏导致胎儿异常。高度风险,出现叶酸缺乏可能性就会非常高,女性需要在整个孕期补充叶酸。[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white] 叶酸测定试剂盒的检测效果至关重要,直接关系到优生优育。相关检测机构一般会按照以下要求对该试剂盒进行检测:[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]1.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]外观:试剂盒各组分应齐全、完整,液体无渗漏。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]2.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]溯源性:生产企业应根据有关规定提供所用叶酸校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]准确度:[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]a)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]相对偏差[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]使用可用于评价常规方法的有证参考物质[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white](CRM)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]进行测定,实测值与标示值的相对偏差应在士[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]15%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]范围内[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white] b)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]回收试验[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]回收率应在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]85%-115%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]范围内。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white] [/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]4.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]检出限:应不大于[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]1.0ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]5.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]线性:在不窄于[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]15-200ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]区间内,相关系数[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]r≥0.99[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]6.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]重复性[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]利用同一批试剂盒对浓度在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]15-60ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]11-19ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的样本各重复检测[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]10[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]次,其变异系数[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white](CV)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]应不大于[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]10%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]7.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]批间差[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]个批号试剂盒检测浓度在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]11-19ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的同一份样本,则[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]个批号试剂盒之间的批间变异系数[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white](CV) 15%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]8.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]稳定性[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]: a)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]效期稳定性试验生产企业应规定试剂盒的有效期。取效期末的试剂盒检测其试剂准确度、检出限线性和重复性,应符合[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3~6[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的要求;[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]b)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]热稳定性试验[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]取有效期内的试剂盒根据生产企业所声称的热稳定性条件,检测其试剂准确度检出限线性和重复性,应符合[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3~6[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的要求。[/back][/color][/font]

  • 注射用水溶性维生素的分析(2)——叶酸,生物素

    注射用水溶性维生素的分析(2)——叶酸,生物素

    [align=center][b]注射用水溶性维生素的分析(2)[/b][/align][align=center][b]——叶酸,生物素[/b][/align]客户提供了注射用水溶性维生素粉针剂及对照品(叶酸,生物素),要求本实验室依据客户所提供方选择合适色谱柱,满足方法中对叶酸,生物素及其前后相邻杂质的分离要求,进而达到准确定量的目的。首先,依据客户提供的色谱条件我们尝试了使用中等极性色谱柱CAPCELL PAK C18 MGII S5 4.6 mm i.d. × 150 mm(A4AB 07251),分析对照品溶液与供试品溶液,结果如图1所示,对照品溶液中叶酸及生物素得到了良好的分离结果;在分析供试品溶液时,叶酸与其后杂质峰能够得到分离度为1.83的良好分离结果。[align=center][img=,673,421]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801110920_3890_2222981_3.jpg!w673x421.jpg[/img][/align][align=center]图1 CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] MGII(150 mm)分析对照品及供试品溶液结果[/align]注*峰上所标数字为分离度,下同。[img=,673,298]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801110920_2922_2222981_3.jpg!w673x298.jpg[/img]为提高分离能力,使叶酸峰与其后杂质峰分的更远,我们尝试将色谱柱长度由150 mm换为250 mm,再一次分析供试品及对照品溶液,结果发现叶酸和生物素保留时间均明显延长,叶酸峰由16.97 min延长到29.03 min,此时叶酸峰与其后相邻杂质峰能够得到更好的分离,分离度为4.23,但同时也发现生物素峰被包于杂质峰中(如图2)。[align=center][img=,690,437]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801111011_6191_2222981_3.jpg!w690x437.jpg[/img][/align][align=center]图2 CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] MGII(250 mm)分析对照品及供试品溶液结果[/align][align=left][img=,668,303]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801111011_2127_2222981_3.jpg!w668x303.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left]为使客户有更多色谱柱选择,本实验室也尝试了高碳载量的SUPERIOREX ODS色谱柱对对照品溶液及供试品溶液进行分析,同样能够得到待测组分与前后杂质峰的良好分离,分离度均在2.0以上;同时,我们也发现在分析供试品时,由于供试品中复杂基质的影响,叶酸峰会出现一定的拖尾现象(如图3)。[/align][align=left][/align][align=center][img=,619,394]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801111012_1478_2222981_3.jpg!w619x394.jpg[/img][/align][align=center] 图3 SUPERIOREX ODS分析对照品及供试品溶液结果[/align][align=center][/align][align=left][img=,687,297]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801111012_3462_2222981_3.jpg!w687x297.jpg[/img][/align][align=center][/align][align=left]我们也尝试使用可以在100%水系流动相下使用的高极性AQ色谱柱分析供试品溶液及对照品溶液,发现由于整体保留时间过长而使得生物素峰被包于杂质峰中,因此,我们尝试缩短整体保留时间,在药典规定范围内,提高流动相中有机相比例,将流动相比例由磷酸二氢钾缓冲溶液-乙腈(93:7)调整为(91:9),最终发现供试品中叶酸和生物素也能够与其相邻杂质峰取得良好分离结果,且分离度更佳(见图4)。[/align][align=left][/align][align=center][img=,655,416]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801111020_155_2222981_3.jpg!w655x416.jpg[/img][/align][align=center]图4 CAPCELL PAK C[sub]18 [/sub]AQ S3分析对照品及供试品溶液结果[/align][align=left][img=,661,296]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/01/201801111021_778_2222981_3.jpg!w661x296.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left]综上实验结果,使用中等极性的[b]CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] MGII S5[/b] 4.6mm i.d. × 150 mm(A4AB 07251)和高碳载量的[b]SUPERIOREX ODS S5[/b] 4.6 mm i.d. × 150 mm(AZAB 12684)色谱柱,在客户原条件下,均能够实现叶酸、生物素及其相邻杂质间的良好分离;[/align][align=left]使用高极性[b]CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] AQ S3[/b] 4.6 mmi.d. × 150 mm(A7AB 02100)色谱柱,在药典规定流动相可调整范围内,将流动相中磷酸盐缓冲液和乙腈比例调整为91 / 9(原条件为93 / 7),也可实现注射用水溶性维生素中叶酸和生物素及相邻杂质的良好分离。[/align]

  • 食品叶酸检测分析

    食品叶酸检测分析

    [align=center][b]食品叶酸检测分析[/b][/align][align=left][b]实验背景:[/b][font=宋体]检验过程中发现经过考察后,食品中叶酸检验结果有增长趋势,[/font][font=宋体]。[/font][font=宋体][b]对数据进行原因分析,结论为实验室之间检测误差导致。[/b][font=宋体]检验方法[/font][font=宋体]1.1仪器与用具:电热鼓风干燥箱、电子天平、旋涡混合仪、立式压力蒸汽灭菌器、紫外可见分光光度计、生物安全柜、生化培养箱、离心管、容量瓶、量筒、试管、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url]。[/font][font=宋体][font=宋体]注:所用玻璃器皿使用前用盐酸浸泡液或月桂基磺酸钠洗涤剂清洗干净后,[/font][font=宋体]250℃干热1h~2h。[/font][/font][font=宋体]1.2试剂:20%乙醇溶液(2+8)、氢氧化钠乙醇溶液(0.01mol/L)、氢氧化钠溶液(1mol/L)。[/font][font=宋体]1.3培养基:琼脂培养基,叶酸测定培养基。[/font][font=宋体]1.4 标准品:叶酸标准品。[/font][font=宋体]1.5菌种的制备与保存:[/font][font=宋体]菌种:鼠李糖乳杆菌或等效菌株。[/font][font=宋体][font=宋体]储备菌种的制备:将菌种鼠李糖乳杆菌转接至菌种储备用琼脂培养基中,在[/font][font=宋体]36℃±1℃恒温培养箱中培养20h~24h,连续转种2代~3代。取出后放入2℃~4℃冰箱作为储备菌株保存。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]实验前将储备菌株接种至菌种储备用琼脂培养基中,在[/font][font=宋体]36℃±1℃恒温培养箱中培养20h~24h以活化菌株,用于接种液的制备。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]注:保存[/font][font=宋体]2周以上的储备菌种,不能立即用作接种液制备,实验前宜连续传种2代~3代以保证细菌活力。[/font][/font][font=宋体]1.6接种液的制备:实验前一天,取2mL叶酸标准工作液与4mL叶酸测定用培养基混匀,分装至2支试管中,于121℃(0.10MPa~0.12MPa)高压灭菌15min(或根据培养基标签标识进行灭菌)后即为种子培养液。冷却后用接种环将活化的菌株转种至2支种子培养液中,于36℃±1℃恒温培养箱中培养20h~24h。取出后将种子培养液混悬,无菌操作下吸取0.5mL转种至5mL不加叶酸标准工作液的无菌叶酸测定培养基中,于36℃±1℃再培养6h,以消耗种子培养液中残存在菌株中的多余叶酸,制成接种液。[/font][font=宋体]1.7分析步骤(所有操作均需避光进行)[/font][font=宋体][font=宋体]试样提取:准确称取液体试样[/font][font=宋体]0.5mL~2mL,精确至0.001g,转入锥形瓶中,加入80mL氢氧化钠乙醇溶液,具塞,超声振荡0.5h~4h至试样完全溶解或分散,转入100mL容量瓶中,用水定容至刻度。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]稀释:根据试样中叶酸含量用水对试样提取液进行适当稀释,使试样稀释液中叶酸含量在[/font][font=宋体]0.2ng/mL~0.3ng/mL范围内。[/font][/font][font=宋体]1.8试样测定[/font][font=宋体][font=宋体]试样系列管:取[/font][font=宋体]3支试管,分别加入1.0mL、2.0mL、3.0mL试样稀释液(Vx),补水至5.0mL,混匀。每个梯度做2个平行。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]标准系列管:取试管分别加入叶酸标准工作溶液[/font][font=宋体]0.00mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL,补水至5.00mL,相当于标准系列管中叶酸含量为0.00ng、0.05ng、0.10ng、0.20ng、0.30ng、0.40ng、0.50ng、0.60ng、0.80ng和1.00ng,混匀。制备2套~3套标准系列管,绘制标准曲线时,以每个标准点平均值计算。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]灭菌:将所有测定系列管、叶酸测定培养基于[/font][font=宋体]121℃(0.10MPa~0.12MPa)高压灭菌15min(或根据培养基要求进行灭菌)。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]接种和培养:待测定系列管冷却至室温后,在无菌操作条件下,每[/font][font=宋体]10mL叶酸测定培养基加入接种液40μL,混匀,每支测定管中加入接种后的叶酸测定培养基5mL,混匀。置于36℃±1℃恒温培养箱中培养20h~40h,获最大混浊度时终止培养。另准备一支标准0管(含0.00ng叶酸)不接种作为0对照管。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]测定:将培养好的标准系列管、试样系列管用旋涡混合仪混匀。用[/font][font=宋体]1cm比色杯,于540nm处,以未接种0对照管调节透光率为100%(或吸光度值为0),依次测定标准系列管、试样系列管的透光率(或吸光度值)。如果0对照管出现浑浊,说明可能有杂菌污染,需重做实验。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]注:适宜的测定光谱范围为[/font][font=宋体]540nm~610nm。[/font][/font][font=宋体]1.9分析结果表述:[/font][font=宋体] [font=宋体]标准曲线:以标准系列管叶酸含量为横坐标,每个标准点透光率(或吸光度值)均值为纵坐标,绘制标准曲线。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]试样结果计算:从标准曲线计算试样系列管中叶酸的相应含量([/font][font=宋体]cx),如果3支试样系列管中有2支叶酸含量在0.10ng~0.80ng范围内,且各管之间折合为每毫升试样提取液中叶酸含量的偏差小于10%,则可继续按式进行结果计算,否则需重新取样测定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]2.检验结果[/font][font=宋体]分析的数据,叶酸含量没有降解趋势,结果符合[/font][font=宋体]GB 29922-2013[/font][font=宋体][font=宋体]的规定,结果如表[/font][font=宋体]1:[/font][/font][img=,620,229]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/07/202307011003010672_7959_2227357_3.png!w620x229.jpg[/img][b]3.[font=宋体]原因分析[/font][/b][font=宋体]GB 5009.211-2014《[/font][font=宋体][font=宋体]食品安全国家标准[/font] [/font][font=宋体]食品中叶酸的测定[/font][font=宋体][font=宋体]》方法为微生物法,实验过程需要将鼠李糖乳杆菌接种至含有样品的培养液中,培养后测定其吸光值,根据含量与透光率的关系,绘制标准曲线并计算出试样中的叶酸含量,整个实验过程人员、所处的环境、菌液的生长差异、吸光值测定时设备台间差,都直接影响检验结果。考察期叶酸含量稳定没有增长[/font][font=宋体]/降解趋势;综合分析[/font][/font][font=宋体]叶酸检验结果有增长趋势,系实验室之间检测误差导致。[/font]实验也是解决问题的过程,持续改进方法,不断增强技术。[font=宋体][font=宋体][/font][/font][/font][/align]

  • 硝酸盐氮 总氮 的测定

    参考哈希的方法中,有一个测硝酸盐的方法是硝酸盐离子与2,6-二甲基苯酚反应,形成4-硝基-2,6-二甲基苯酚,试验结果在345nm条件下量取。 我在硝酸盐标液中直接加入2,6-二甲基苯酚溶液,没有变化,不知道少了什么条件,求大神指导!

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  • 微生物法检测叶酸的问题

    哪位高手做过关于用微生物法检测叶酸的呀?最近在做叶酸检测时标准曲线怎么都做不好,我是按照GB/T 5009.211-2008做的,都做了好久了,每次做出来差距都很大,而且都很不好;还有一个问题是,在做标准曲线时,标准上是按不接种的不含叶酸的管调零,但是标准系列管的0管即不含叶酸但加了菌种的吸光度就不会为0了,但是我看了几篇文献也是按国标做的,其标准曲线都经过了原点,我不知道自己做的问题出在了哪里。希望做过这方面实验的高手能够指点一二,感激不尽~~

  • CATO独家 | 叶酸杂质标准品

    CATO独家 | 叶酸杂质标准品

    [font=宋体]◇叶酸杂质[/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][font=Segoe UI] 叶酸杂质通常是指在叶酸的生产或保存过程中产生的非目标化合物。这些杂质可能会影响叶酸的纯度和效果,因此在叶酸的生产和质量控制过程中需要严格控制其含量。叶酸杂质有多种类型,每一种都具有不同的化学特性,如[/font]CAS号、分子式、分子量等。例如,有一种叶酸杂质CAS号为82778-08-3,分子式为C7H7ClN6HCl,分子量为247.08。另一种叶酸杂质G的CAS号为6810-75-9,英文名称为Folinic Acid Impurity G。此外,叶酸杂质5的CAS号为873397-19-4,纯度为98% HPLC。[/color][/font][font=宋体][font=Calibri] CATO[/font][font=宋体]标准品提供的叶酸全套的杂质[/font][/font][font=宋体],[/font][font=宋体]这些杂质对于药物的纯度和稳定性研究至关重要,也是药物研发过程中不可或缺的一部分[/font][font=宋体]。[img=,602,513]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402182015587706_5356_6381607_3.png!w602x513.jpg[/img][/font][font=宋体][color=#05073b][back=#fdfdfe] 广州[/back][/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][back=#fdfdfe]佳途科技[/back][/color][/font][font=宋体][color=#05073b][back=#fdfdfe]股份有限公司[/back][/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][back=#fdfdfe]深知药物研发与质量控制的重要性[/back][/color][/font][font=宋体][font=宋体],[/font][font=Calibri]CATO[/font][font=宋体]标准品厂家,提供叶酸全套[/font][/font][font=宋体]的[/font][font=宋体]杂质,为客户提供更加精准、可靠的分析标准品,助力药物研发事业的快速发展[/font][font=宋体],[/font][font=宋体]以满足客户在药物研发和质量控制方面的需求。[/font]

  • 磷酸盐进质谱

    各位老师们好,我目前需要进行一个磷酸盐孵育实验,使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]检测孵育产物的浓度。但是因为磷酸盐对质谱伤害较大,故前处理方法我想使用甲基叔丁基醚进行液液萃取,想请教一下各位老师磷酸盐会在萃取的时候进入 MTBE 中吗,该前处理方法是否会对仪器有影响呢,谢谢各位老师。

  • 对氨基二甲基苯胺溶液的颜色会不会影响显色的颜色深浅

    对氨基二甲基苯胺溶液的颜色会不会影响显色的颜色深浅

    用亚甲基蓝测硫化物的时候,总发现空白偏高,0.06-0.08之间。多次排查觉得可能是对氨基二甲基苯胺盐酸盐的原因,下图是照片,品牌是adamas,外观为黑色,且大多结块。(我看网上都是说是白色至黄色至灰色,如果是黑色说明变质了问了售后,他们说这批对氨基二甲基苯胺盐酸盐就是黑色的,成品颜色跟工艺有关,还给了检测核磁和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LCMS[/color][/url]的鉴定结果数据(但我看不懂,放在附件了),说这批药的结构是合格的。我现在的疑问是,即便这批药的结构是合格的,但是不同生产工艺造成的成品颜色是否会影响空白样的显色呢?[img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110261016565152_2614_5383916_3.jpg!w690x920.jpg[/img]这个是对氨基二甲基苯胺盐酸盐的外观[img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110261017246679_49_5383916_3.jpg!w690x920.jpg[/img]这个是配置好的对氨基二甲基苯胺溶液的颜色(是不是有点 深?)

  • 【我们不一YOUNG】维生素B11(叶酸)

    [align=center][font=DengXian]维生素[/font]B11([font=DengXian]叶酸[/font])[/align][font=DengXian]绿色蔬菜和动物肝脏中富含叶酸,乳中含量较低。蔬菜中的叶酸呈结合型,而肝中的叶酸呈游离态。人体肠道中可合成部分叶酸。[/font][font=DengXian]分子结构中含有蝶啶、对氨基苯甲酸和[/font]L-[font=DengXian]谷氨酸三部分。[/font][font=DengXian]叶酸缺乏时,脱氧胸苷酸,嘌呤核苷酸的形式及氨基酸的互变受阻,细胞内[/font]DNA[font=DengXian]合成减少,细胞的分裂成熟发生障碍,引起巨幼红细胞性贫血。[/font] [font=DengXian]小肠疾病能干扰食物叶酸的吸收和经肝肠循环的再循环过程,故叶酸缺乏是小肠疾病常见的一种并发症。[/font]

  • 溴酸盐的快速检测方法

    臭氧对矿泉水消毒的过程中,会将水体中自然存在的溴化物氧化为对人体有害的溴酸盐,溴酸盐是被国际癌症研究机构定为2b级潜在致癌物;国家标准GB 8537-2008规定瓶装水中的溴酸盐含量不得高于10μg/L,并且要求瓶装水的包装上必须标注溴酸盐的含量。网上找了个方法 有谁试过,结果如何?:默克密理博饮用水溴酸盐检测解决方案 碘化钾GR(1.05043.0250) 3,3二甲基萘啶(1.03122.0001) 乙酸100%GR(1.03122.0001) 高氯酸70-72%GR(1.00519.1000) 高纯水GR(1.16754.9010) 50mm方形比色皿(1.14944.0001) 0.45μm滤膜(测试浑浊样品时用) 所需测量仪器: Spectroquant?NOVA-Photometer(NOVA60/60A) Spectroquant?PharoSpectrophotometer(Pharo100/300) 测试试剂配置方法: 试剂1: 将1g的碘化钾溶于100ml的高纯水中,将此溶液避光室温密闭保存,有效期1年左右。 试剂2: 将0.125g3,3二甲基萘啶溶于25ml加热后的乙酸(温度不能超过50°C),直至二甲基萘啶完全溶解。该溶液避光密闭保存可长期使用,放在冰箱里保存可以延长使用寿命。建议尽量使用新配制的试剂,以保证分析质量。http://info.edu.hc360.com/2011/12/091516495507-2.shtml

  • 叶酸(维生素BC,维生素M)-----多关心一下自己的身体

    水溶性;   维生素B族中的一种,亦称为维生素BC或维生素M;   计量单位是微克(mcg);   是制造红血球不可缺少的物质;   帮助蛋白质的代谢。   成人的建议每日摄取量是180~200mcg,孕妇加倍,哺乳期的妇女在头6个月需要280mcg,之后的6个月则需260mcg;   在制造核酸(核糖核酸、脱氧核糖核酸)上扮演重要的角色;   是细胞增殖不可少的物质;   人体在利用糖分和氨基酸时的必要物质;   在室温中长时间无遮护的贮存时将被破坏。   效用   促进乳汁的分泌;   防治肠内的寄生虫和食物中毒;   增进皮肤的健康;   有镇痛剂的作用;   与泛酸及对氨基苯甲酸一起服用时,可防止白发;   在身体衰弱(健康状态不良)时,可增进食欲;   防止口腔粘膜溃疡;   预防贫血。   缺乏症   巨红血球性贫血   富含叶酸的食物   深绿叶蔬菜、胡萝卜、动物肝脏、蛋黄、美国甜瓜、杏、南瓜、鳄梨、豆类、全麦、黑裸麦面粉。   营养补品   一般是400mcg的制剂。如果有医生的处方,可以买到lmg(1000mcg)剂量的叶酸。   有的复合维生素B制剂中含有400mcg的叶酸,但大多数复合维生素B制剂中只含有100mcg(请查看标签)。   一般的每日摄取量是400mcg~500mcg。   营养补品   并未发现有副作用。有些人服用后会引起过敏性皮肤炎。   叶酸之敌   水、磺胺药剂、阳光、雌激素、食品加工(特别是煮沸)、高温。   建议   如果您是常喝酒的人,多摄取叶酸为好;   大量的维生素C会加速叶酸的排出,所以,摄取维生素C在2g以上的人必须增加叶酸的量;   正使用苯妥英(抗癫痫药),或是服用雌激素、磺胺类药物、苯巴比妥(安眠药与镇定剂)、阿司匹林时,应该增加叶酸的摄取量;   我曾经发现,有许多人在短期间内每天摄取1~5mg的叶酸,结果皮肤上的斑点消失了。如果您有这方面的烦恼,可以去请教营养医师;   如果您感觉到似乎要生病,或者是已经生病了,必须要摄取抗紧张感的营养补品,切记要先查看其中是否含有充分的叶酸。叶酸不足时,抗体会减少,抵抗力将减弱;   大量摄取叶酸会使服食二苯乙内酰脲的癫痫症患者产生痉挛现象。

  • 【原创大赛】Polar-RP和叶酸的亲密接触

    【原创大赛】Polar-RP和叶酸的亲密接触

    继续我的原料入厂检验之旅。这次说的是叶酸的入厂检验。叶酸,Folic acid,维生素B复合体之一,相当于蝶酰谷氨酸(pteroylglutamic acid,PGA),是米切尔(H.K.Mitchell,1941)从菠菜叶中提取纯化的,故而命名为叶酸。有促进骨髓中幼细胞成熟的作用,人类如缺乏叶酸可引起巨红细胞性贫血以及白细胞减少症,对孕妇尤其重要。说到白细胞,可能大家更清楚,旧称白血球,血液中的一类细胞。白细胞也通常被称为免疫细胞。再说到免疫细胞,就不用多说了吧,呵呵。所以说,叶酸是一种非常重要的维生素,特别是对病人来说。对于叶酸的检验,《中国药典》2010年版有收录。本检验也是按照药典要求来进行。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311231857_478956_1609327_3.jpg色谱柱信息为:月旭Ultimate® Polar-RP,4.6mm*250mm,5μm。Ser NO.:661201507,Part NO:00215-31043。对照品溶液的制备:精密称取叶酸对照品(中检所购买)约10mg,置50ml量瓶中,加0.5%的氨溶液30ml溶解后,用水稀释至刻度,摇匀。即为对照品溶液。供试品溶液:精密称取本品约10mg,照对照品溶液同法操作,即为对照液溶液。测定法:精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,记录色谱图。按外标法以峰面积计算含量,即得。对照液色谱图为:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311231905_478957_1609327_3.jpg供试品溶液色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311231905_478958_1609327_3.jpg结论:1.月旭Ultimate® Polar—RP来检测叶酸,峰形漂亮,柱效好。2. 从色谱图上,很干净。而叶酸峰的保留时间在12.5min左右。是不是可以通过调整流动相,让出峰时间更早一些呢?我感觉,理论上是可以的。

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