左亚叶酸钙

哪位高手做过关于用微生物法检测叶酸的呀？最近在做叶酸检测时标准曲线怎么都做不好，我是按照GB/T 5009.211-2008做的，都做了好久了，每次做出来差距都很大，而且都很不好；还有一个问题是，在做标准曲线时，标准上是按不接种的不含叶酸的管调零，但是标准系列管的0管即不含叶酸但加了菌种的吸光度就不会为0了，但是我看了几篇文献也是按国标做的，其标准曲线都经过了原点，我不知道自己做的问题出在了哪里。希望做过这方面实验的高手能够指点一二，感激不尽~~

[font=宋体][color=#333333][back=white] 叶酸是一种水溶性维生素，也叫维生素[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]B9[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。最初从菠菜中发现了这种生物因子，因此命名为叶酸，叶酸富含于新鲜的水果、蔬菜、肉类食品中，尤以酵母、肝及绿叶蔬菜中含量比较多，但天然叶酸极不稳定，易受阳光、加热的影响而发生氧化，所以人体真正能从食物中获得的叶酸并不多。合成的叶酸在数月或数年内可保持稳定，容易吸收且人体利用度高。[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white] 人体缺少叶酸可导致红血球的异常，未成熟细胞的增加，贫血以及白血球减少。孕妇缺乏叶酸有可能导致胎儿出生时出现低体重、唇腭裂、心脏缺陷等。因此，怀孕前[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]个月就要开始吃[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333]叶酸[back=white]，每天[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]0.4mg[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]，即一粒[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333]叶酸，[back=white]可以降低胎儿神经管畸形率至[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]85%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。服用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]5 mg[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的叶酸则用来治疗女性贫血，消费者可根据不同情况进行选择。[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white] 叶酸测定试剂盒是以化学发光免疫分析法为原理定量测定人血清中叶酸含量的试剂盒，对贫血的临床诊断和治疗起辅助作用，最重要的是判断后期孕妇需不需要继续补充叶酸。叶酸的测定检查一般是在怀孕[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3-4[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]个月进行，判断后期孕妇需不需要继续补充叶酸，检测结果主要有三种：低风险，代表对叶酸的吸收和代谢能力是正常的或者接近正常，可以正常补充叶酸。中度风险，代表对叶酸的吸收和代谢能力存在障碍，可能会出现叶酸缺乏导致胎儿异常。高度风险，出现叶酸缺乏可能性就会非常高，女性需要在整个孕期补充叶酸。[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white] 叶酸测定试剂盒的检测效果至关重要，直接关系到优生优育。相关检测机构一般会按照以下要求对该试剂盒进行检测：[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]1.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]外观：试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]2.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]溯源性：生产企业应根据有关规定提供所用叶酸校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]准确度：[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]a)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]相对偏差[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]使用可用于评价常规方法的有证参考物质[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white](CRM)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]进行测定，实测值与标示值的相对偏差应在士[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]15%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]范围内[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white] b)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]回收试验[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]回收率应在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]85%-115%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]范围内。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white] [/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]4.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]检出限：应不大于[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]1.0ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]5.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]线性：在不窄于[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]15-200ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]区间内，相关系数[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]r≥0.99[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]6.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]重复性[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]利用同一批试剂盒对浓度在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]15-60ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]11-19ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的样本各重复检测[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]10[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]次，其变异系数[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white](CV)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]应不大于[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]10%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]7.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]批间差[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]个批号试剂盒检测浓度在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]11-19ng/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的同一份样本，则[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]个批号试剂盒之间的批间变异系数[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white](CV) 15%[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]8.[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]稳定性[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]: a)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]效期稳定性试验生产企业应规定试剂盒的有效期。取效期末的试剂盒检测其试剂准确度、检出限线性和重复性，应符合[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3~6[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的要求；[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]b)[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]热稳定性试验[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]:[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]取有效期内的试剂盒根据生产企业所声称的热稳定性条件，检测其试剂准确度检出限线性和重复性，应符合[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=#333333][back=white]3~6[/back][/color][/font][font=宋体][color=#333333][back=white]的要求。[/back][/color][/font]

有用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]或液相做奶粉中叶酸含量测定的吗？怎么前处理的? 我参照药典，用水提取样品，不能得到澄清溶液，混悬液，该怎么解决才能澄清上机呢？

请问用什么填料的色谱柱分离叶酸和叶酸络合物较好？

叶酸检测是否有其他的方法检测？微生物法实在是做不出来，望老师不吝赐教

急用水果中叶酸的测定方法！请各位高手赐教！万分感谢！

求助：有哪位测过叶酸，用什么溶剂溶解的呢？我试过甲醇、乙腈和水，都不溶？谢谢

本人最近做了一个饲料中的烟酸叶酸，方法按照相关国标中测定的。方法很简单，直接提取过滤或者离心就上机，但是回收率为0。重复多次都是这样的结果，多次调整实验中固液比例仍然是此结果。以前也做过饲料中的烟酸叶酸，但是没有遇到过这样的问题。想求助高人解释一下为什么会出现这样的问题

[align=center][font=DengXian]维生素[/font]B11([font=DengXian]叶酸[/font])[/align][font=DengXian]绿色蔬菜和动物肝脏中富含叶酸，乳中含量较低。蔬菜中的叶酸呈结合型，而肝中的叶酸呈游离态。人体肠道中可合成部分叶酸。[/font][font=DengXian]分子结构中含有蝶啶、对氨基苯甲酸和[/font]L-[font=DengXian]谷氨酸三部分。[/font][font=DengXian]叶酸缺乏时，脱氧胸苷酸，嘌呤核苷酸的形式及氨基酸的互变受阻，细胞内[/font]DNA[font=DengXian]合成减少，细胞的分裂成熟发生障碍，引起巨幼红细胞性贫血。[/font] [font=DengXian]小肠疾病能干扰食物叶酸的吸收和经肝肠循环的再循环过程，故叶酸缺乏是小肠疾病常见的一种并发症。[/font]

1.原理叶酸是酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L. C, ATCC 7469）生长所必需的营养素。在一定条件下，L.C的生长繁殖与培养基中叶酸含量呈正比关系，细菌增殖的量以光密度值计，通过与标准曲线相比较，计算出样品中叶酸的含量。2.适用范围参考《Methods of Vitamin Assay》，第4版。本方法适用于各类食物中叶酸的测定。检测限为0.1ng。3.仪器与设备（1） 恒温培养箱（2） 离心机（3） 高压消毒锅（4） 震荡器（5） 接种针和接种环（6） 分光光度计4.试剂除特殊说明外，本实验中所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水。（1） 菌种：酪乳酸杆菌（Lactobacillus casei, L.C, ATCC 7469）（2） 磷酸缓冲液(0.05mol/L, pH6.8):称取4.35g Na3PO412H2O,10.39g Na2HPO47H2O溶解于800ml水中。临用前用约5g抗坏血酸调节pH至6.8。（注：叶酸对光、热敏感，易被氧化破坏，抗坏血酸有助于保护叶酸被氧化。）（3） 鸡胰酶溶液： 称取100mg干燥的鸡胰酶（Difco公司）（注：含有叶酸轭合酶，用于水解叶酸多谷氨酸盐）， 加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，3000rpm离心10min,取上清液备用。临用前现配。（4） 蛋白酶-淀粉酶溶液：分别称取200mg蛋白酶（Sigma公司）和淀粉酶（Sigma公司），加入20ml磷酸缓冲液制成匀浆，离心3000rpm 10min,取上清液备用。临用前配制。（5） 2+8乙醇溶液：量取20ml无水乙醇溶液，加入80ml水混匀。（6） 01mol/L NaOH: 称取0.4g氢氧化钠，加2+8乙醇溶液溶解并稀释至1L。（7） 10mol/L NaOH。称取400g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1L。（8） 叶酸标准储备液（200mg/ml）：准确称取200mg叶酸标准品（Sigma公司，纯度大于98%），用0.01mol/L NaOH溶解并定容至1L。储存于棕色瓶中。（9） 叶酸标准中间液（200ng/ml）：准确吸取1.0ml叶酸标准储备液，用0.01mol/L NaOH 溶解并定容至1L。储存于棕色瓶中。待标定。标定：准确吸取1ml叶酸标准中间液，用0.1mol/L NaOH定容至10ml。以0.1mol/L NaOH调零点，比色杯厚度1cm，波长256nm，测定3次紫外吸光度值，取平均值，按下式计算标准中间液浓度。X1 =A/E×M ×10×10E6 …………………(1) ` 式中：X1 -- 叶酸标准中间液浓度，ng/ml；A -- 标准中间液平均紫外吸光度值；E -- 摩尔消光系数24,500；M -- 叶酸分子量441.42；10-- 测定紫外吸光度值时的稀释倍数；106 -- 由g/L换算成ng/ml的换算系数。（10） 叶酸标准工作液（0.2ng/ml）:准确吸取1.0ml叶酸标准中间液，用磷酸缓冲液稀释定容至1L。（11） 2.4mol/L HCl：量取20ml浓盐酸，加水稀释至100ml。（12） 酶解酪蛋白溶液：将8g碳酸氢钠溶解于1L水中，加入60g去维生素酪蛋白（Sigma 公司），用10mol/L NaOH调节pH至 8.0（调pH时应小心，不要过碱后再加酸反复调节，避免酪蛋白结块）。加入300mg胰酶，搅拌20min，使胰酶混匀充分。再加入2.5ml甲苯，置37℃恒温箱酶解48～72h（此步骤是将酪蛋白酶解为L.C可以利用的小分子肽。酶解时间不易超过72h，如时间过长，配成的培养基不利于细菌生长）。将酪蛋白液从恒温箱中取出，121℃高压30min以终止反应并去除甲苯。冷却，加10g硅藻土搅拌，用垫有滤纸的布氏漏斗过滤。向滤液中加入约60ml冰乙酸调节pH至3.7。称取活性炭12g，加入滤液中搅拌10min，用布氏漏斗过滤，重复三次。每次过滤时，布氏漏斗内加有10g硅藻土协助过滤。最后滤液用水稀释至1200ml，4℃冰箱保存1年（活性碳可吸附酪蛋白中的叶酸以减少试剂空白，同时也可吸附肽及氨基酸，应注意控制搅拌时间）。取10ml酶解后的酪蛋白溶液加入已称重的蒸发皿中，沸水浴蒸发至干。将蒸发皿置于100℃恒温烤箱内干燥至恒重，在干燥器中冷却至室温。称量蒸发皿的重量，蒸发皿内固体重量，如固体重量小于400mg，即每毫升酪蛋白溶液中固体含量40mg，则弃除酪蛋白液，重新制备。（13） 黄嘌呤溶液：取0.4g黄嘌呤，加入10ml氨水，加热溶解，用水稀释至100ml。冰箱保存。

我们在检测婴幼儿乳粉的叶酸时，一直连曲线都做不好，求助高手帮忙！！！！

[font=宋体]求助，奶粉中检测项目：亚油酸、烟酸、叶酸、泛酸、生物素、胆碱、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱是属于添加剂还是营养强化剂啊[/font]

请问哪位老师做过乳粉中叶酸的检测，用液相色谱或液质的方法，希望可以分享一下。

我的样品及对照品的谱图中，除了内标峰，还有一个5min左右的小峰，还有一个面积较大的峰，其保留时间一直在推后，第二天进同一个样品溶液时，这个峰就不见了，这个峰是什么原因产生的呢？是叶酸的峰吗？5min的小峰是什么峰呢？不是溶剂峰。在样品溶液没有变化的情况下，加入了叶酸样品，5min的峰变大，可以由此断定此峰就是叶酸峰吗？请大家指教！！拜谢！！

我在用液相分析叶酸时，做到一个样品含量很低，实在不容易检测，请问各位大虾有没有什么办法进行净化、富集？

大家在做总银杏叶酸时，如何称取对照品A和B的，图谱里有几个峰呢？多长时间出？用的什么色谱柱呢？问题有点多，希望有兴趣的来讨论下

呵呵,我是新手,想请教一下关于叶酸的衍生化试剂都有哪些,现在我查到的资料都是关于柱后衍生化的,我想用柱前衍生化,恳请高手指点一下[em0815]

[color=#444444]用微生物法检测维生素B12，生物素，叶酸，德国拜发的试剂盒，那个方法确认怎么做[/color]

叶酸生物素有色谱方法检测吗？望老师不吝赐教

关于食品中叶酸的测定新国标的一些问题1.在6.4.2.1微孔板法中，试样系列管要求加入100、200、300 μL，补水至500 μL，相当于试管法缩小了10倍；而6.4.2.2标准管则要求按比例缩减至1mL，请问这里的1mL是指加入培养基后的总体积为1mL还是补水至1mL，即缩小十倍还是五倍。

四氢叶酸液相检测方法哪位有，分享下，谢谢！

各位达人，现在需要做面粉中的叶酸和维生素B12的检测，据说国标中有，我想按照国标来做检测，所以跪求这一国标，谢谢！

GB 5009.211-2014微生物法测定叶酸标准3.5.1叶酸标准储备液20.5ug/mL的配制：精确称取20.mg叶酸标准品，用氢氧化钠乙醇溶液定容至1000mL，然后在256nm处进行了标定，得到浓度为c1。然后3.5.2配制叶酸标准中间液（0.200ug/mL）时，是吸取1mL上述储备液定容至100mL，但没有用到标定浓度c1啊，这不符合试剂配制原理吧，还是说有什么特殊情况？6.7测定 部分，测定时采用的是540nm，但是标定时采用的254nm，为什么不一样呢？问题1：标准储备液标定的作用是什么？问题2：标定和检测时的波长为什么不一致？

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[color=#444444]各位大神，我用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]0.1%甲酸：甲醇10:90，或者0.5%乙酸：甲醇=50:50等比例跑流动相，配的叶酸标准溶液连总离子流图都没有出峰。请问这是为何啊？[/color]

摘 要 目的：本文采用反相高效液相色谱法建立测定果冻类食品叶酸（folic acid）含量的分析的方法。方法：使用C18柱作为分析柱，磷酸缓冲液和甲醇作为流动相，紫外检测器作为检测器，叶酸（Pteroylmonoglutamic acid）作为对照品，果冻食品作为样品。结论：该法在50ng/mL-1000ng/mL之间呈良好的线性，重现性好RSD＜2%，回收率在107±2%，稳定性良好，最小检测限20ng/mL。样品测试结果与微生物检测结果相符。本法可以作为测定食品中叶酸含量的一个方法。 关键词：叶酸，HPLC， 果冻样品 Abstracts Aim: A simple method for the determination of folic acid in gel sample by high-performance liquid chromatography with UV-detection is reported. Methods: The method was simple by using RP-column (C18) with phosphorate –methanol as mobile phase and UV as a detector. Conclusion: The calibration graph was linear from 50 to 1000ng/mL for folic acid with a correlation coefficient of 0.999(n=5). The detection limit is 20ng/mL. The method was successfully applied for determination of folic acid in the gel sample. The recovery was 107±1.5% and the reletive standard deviation was no more than 2%. Compared with microbiology method, the results of the samples are same. This method can be used for content determination of the folic acid in gel sample. Key Words: folic acid, HPLC, gel sample