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甲基莫诺苷

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  • 干蛇肉样品研磨理化分析——昊诺斯第11期组织研磨和样品处理分享、讨论
    干蛇肉样品研磨理化分析——昊诺斯第11期组织研磨和样品处理分享、讨论昊诺斯组织研磨和样品处理分享、讨论本周强势回归!在经过了几周的休整之后,昊诺斯会在接下来的组织研磨和样品处理分享、讨论中给大家带来更加新鲜、有用的内容,让更多的昊诺斯、鼎昊源用户受益!本周昊诺斯第11期组织研磨和样品处理分享、讨论,我们给大家分享的案例是——干蛇肉样品研磨理化分析。那接下来,就让我们先睹为快,看看这个案例的情况。 实验:蛇肉样品研磨理化分析实验地点:江苏某药厂试验样品:干蛇肉样品 实验步骤:1、取干燥的蛇肉样品用剪刀剪成小段,放入离心管;2、加入研磨珠于每个离心管中,盖好管盖,将离心管装入鼎昊源TL2010S组织研磨仪适配器中;3、研磨干燥的蛇肉样品直接采取干磨的方式;4、安装上机,设置一定的频率和研磨时间。 实验特色:I.该实验干磨的过程有数分钟之久,但依然不必担心机器过热等的现象,并且后续理化分析的实验结果令人满意,鼎昊源TL2010S组织研磨仪在样品前处理方面有着出色的表现。II.该实验过程中使用的是Thermo Fisher Scientific QSP 2ml圆底离心管,较好地避免了一般长时间研磨离心管破裂的问题。 此外,我们的分享嘉宾还跟群内用户进行了激烈的分享、讨论,让我们一同来看看擦出了怎样的火花吧! 昊诺斯嘉宾:大家好,客户是做中药里面微量元素检测的,样品是干蛇肉,还算挺好打的,样品很干很脆。 用户:然后呢? 昊诺斯嘉宾:我用了2颗5毫米的钢珠和2颗6毫米钢珠做了对比试验,发现6毫米的稍好一些,出来的样品是灰白色的粉末。 昊诺斯嘉宾:刚才有老师提到干灵芝,我没有做过,不知道韧性是不是很强?很多样品没有研磨过直接用2毫升离心管研磨不好回答,不过直接用50ml研磨罐研磨肯定是没问题的。 用户:是的,韧性很强,无法磨成粉末。 用户:没用过50ml的研磨罐,什么样的? 用户:液氮处理过也不行? 用户:不行。 用户:先剪碎了再冻也不行? 昊诺斯嘉宾:可以尝试用这种钢制研磨罐再放到液氮里面浸泡一下,然后研磨。用户:看起来很小啊,不知道怎么使用呢。 昊诺斯嘉宾:恩,最大50毫升,样品也就放个最多25左右。如果你的样品量要很多就不适合用组织研磨仪了,直接用粉碎机,组织研磨仪主要还是适用微量多样本的。 用户:微量,多种灵芝。 昊诺斯嘉宾:恩,您一次要处理多少量的干灵芝呢? 用户:蛇肉好研磨吗?研磨过程会不会破坏组织结构啊?研磨的蛇肉有什么用途? 昊诺斯嘉宾:我研磨的样品是干的,还挺好研磨的。客户是药厂可能是检测里面有用的药物吧。 用户:干的样品是不是已经很脆了?不需要提前冷冻处理? 昊诺斯嘉宾:还是要液氮浸泡一下效果更好。其实很多样品都可以先常温研磨试试,效果不好再放入液氮研磨,一般效果会好很多的。 用户:蛇肉里面有什么成分吗? 用户:哦,这个蛇是哪种蛇? 昊诺斯嘉宾:尤其一些塑料和橡胶一些韧性比较强的样品,液氮冻一下就脆很多了。 昊诺斯嘉宾:不好意思具体是什么蛇有什么成分不太清楚,客户没有讲。 最后,让我们共同期待第12期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动吧!下期,我们不见不散! 温馨提示:我们的“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动是在【昊诺斯鼎昊源组织研磨分享】微信群内开展的!如果您也想参与我们的活动,那么就找昊诺斯销售工程师拉您进群,或者回复昊诺斯微信公众号申请进群(申请时要注明所在单位名称+微信号)。 此外,本群的目的是希望可以给大家提供一个样品处理问题的交流平台,有什么相关问题在群里能够分享和提问答疑̷̷另外我们还能通过这个平台连接用户使用人员和工厂研发人员,看看在这些讨论过程中是否会碰撞出火花来,以为实验室手工的样品处理做出更多更好的自动化的辅助工具或替代仪器备来,更可以为完善我们现有产品的设计打开思路提出建议̷̷ 访问http://www.herosbio.com/pro.asp?thebigclassid=14&bpro_id=93可以了解更多产品信息!扫码关注昊诺斯微信公众号
  • 中国生物子公司基因甲基化检测产品获批
    8月8日,国家药监局官网发布医疗器械批准证明文件(准产)待领取信息,文件显示,上海捷诺生物科技有限公司的人ASTN1、DLX1、ITGA4、RXFP3、S0X17、ZNF671基因甲基化检测试剂盒(荧光PCR法)于8月4日获得批准,注册证编号为20223401036。上海捷诺生物科技有限公司(以下简称“捷诺生物”)隶属于中国医药集团有限公司(以下简称“国药集团”)中国生物技术股份有限公司(以下简称“中国生物”),是中国生物旗下专业研发、生产、销售国内外医疗器械和体外诊断试剂的企业。捷诺生物的医学诊断是中国生物规划发展的重点板块之一,也是领衔中国生物混合所有制改革的第一家,旨在以体制机制创新来促进诊断业务的迅速发展。2019年,捷诺生物完成了国药集团内第一个对国外公司股权收并购项目,启动了海外研发中心建设,进一步加快引进国际先进技术,拓宽国际化布局的进程。捷诺生物定位于IVD领域全球领先技术产业化转化平台,产品集中于传染病病原体的多重检测和肿瘤的分子诊断,主要有宫颈癌甲基化检测试剂盒,呼吸道、脑炎/脑膜炎、肠道、中枢神经系统、优生优育生殖道感染单管多重病原体核酸检测试剂盒等,服务于各大临床医院、疾病预防控制中心、检验检疫局等。2020年捷诺生物针对新冠疫情快速响应,迅速投入研究开发,经过设计、优化和试验,成功研制出新型冠状病毒核酸检测试剂盒,第一批取得了国家药品监督管理局颁发的医疗器械注册证,并通过了欧盟CE认证,被列入世界卫生组织(WHO)应急使用采购清单。同时,捷诺与英国牛津大学合作,共同开发的新冠快速核酸检测试剂盒,已获批进入商务部防疫物资出口白名单。
  • 全国饲料工业标准化技术委员会发布国家标准《饲料中新甲基橙皮苷二氢查耳酮的测定 高效液相色谱法》征求意见稿
    国家标准计划《饲料中新甲基橙皮苷二氢查耳酮的测定 高效液相色谱法》由 TC76(全国饲料工业标准化技术委员会)归口 ,主管部门为国家标准化管理委员会。主要起草单位 山东省畜产品质量安全中心 、山东奔月生物科技股份有限公司 。附件:《饲料中新甲基橙皮苷二氢查耳酮的测定 高效液相色谱法》征求意见稿.pdf《饲料中新甲基橙皮苷二氢查耳酮的测定 高效液相色谱法》编制说明.pdf
  • 赛默飞携手格诺生物推动开发新一代肿瘤临床检测产品
    2018年6月22日,上海——科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)与格诺生物科技(中国)有限公司(以下简称:格诺生物)战略合作新闻发布会暨签约仪式近日在上海举行。发布会上,赛默飞全球临床测序和肿瘤业务总裁joydeep goswami,格诺生物总裁、中组部"千人计划"专家何伟博士代表双方签署了战略合作协议。双方承诺将在未来通过强强联合,优势互补,共同开发新一代肿瘤临床检测产品。该合作将进一步结合两家企业各自在"高通量测序技术(ngs)"和"液体活检"领域的独特优势,从而推动双方在肿瘤临床诊断和全周期疾病管理中达到互利共赢,以便更好地应用新技术服务我国医疗产业。"液体活检"与"高通量测序技术(ngs)"是近年来精准医学得以发展的重要支柱,已经在肿瘤的精准诊断和治疗中发挥了重要的作用。"高通量测序技术(ngs)"作为基因组学研究领域里突破性的新技术,已经在肿瘤精准诊疗、遗传病、产前筛查等领域持续发力和并显示出了巨大潜力。赛默飞是基因测序和肿瘤精准治疗全面解决方案的提供者,致力于推动高通量测序技术在中国的发展和创新,本次合作将发挥赛默飞在产品先进性、技术创新性、服务高质量的优势,带动高通量测序与液体活检在肿瘤精准诊疗行业的快速发展。其最新发布的两款基于半导体测序技术的新型高通量测序仪器ion genestudio™ s5 prime和ion genestudio™ s5 plus使得临床医生能够更多、更全面、更精确地了解肿瘤基因突变状况,大大加快了临床医生为肿瘤患者选择合适靶向疗法的决策过程。另一方面,液体活检是一种已经广泛应用于临床的无痛无创、简便的新型肿瘤活检方式。格诺生物作为"液体活检"完整解决方案提供者(total solution provider),借助旗下一系列自主研发的基于ctc、ctdna、外泌体等各类样本的全癌种诊断试剂,已经成为该领域的领军人。这两大新兴技术的强强结合将进一步加速肿瘤临床诊断的效率以及提升疾病管理质量,健全从诊断到预后的全过程的癌症精准医学体系,提升人民健康。图片说明:赛默飞携手格诺生物推动开发新一代肿瘤临床检测产品"我相信本次合作将会是一个强强联手的典范,我们将共同探索癌症精准诊疗的创新应用,为中国的患者带来更先进、更安全、更便捷的医疗服务。" 赛默飞大中华区总裁艾礼德(tony acciarito)表示表示:"未来既始于创新,也立足于脚下,作为科学服务领域的世界领导者,我们将一如既往借助自身在精准医学领域的优势,为中国疾病研究、防治与筛查提供创新的解决方案。"格诺生物总裁何伟博士向与会双方介绍了格诺生物与赛默飞合作协议的相关情况,他在签约仪式中说到:"我们十分珍惜本次合作,此次合作标志了' 液体活检' 领域和' 高通量测序技术(ngs)' 领域的两家领军企业将在肿瘤精准诊断和治疗这一全新的领域开创一个新的时代,同时也为双方未来稳健的合作发展奠定了坚实的基础。" 关于赛默飞世尔科技赛默飞世尔科技(纽约证交所代码:tmo)是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额超过200亿美元,在全球拥有约70,000名员工。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战,促进医疗诊断发展、加速药物上市进程、提高实验室生产力。借助于首要品牌thermo scientific、applied biosystems、invitrogen、fisher scientific和unity lab services,我们领先结合创新技术、便捷采购方案和全方位服务。欲了解更多信息,请浏览公司网站:www.thermofisher.com关于赛默飞世尔科技中国赛默飞世尔科技进入中国发展已超过35年,在中国的总部设于上海,并在北京、广州、香港、成都、沈阳、西安、南京、武汉、昆明等地设立了分公司,员工人数约为4500名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等,提供实验室综合解决方案,为各行各业的客户服务。为了满足中国市场的需求,现有8家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在全国还设立了6个应用开发中心,将世界级的前沿技术和产品带给中国客户,并提供应用开发与培训等多项服务;位于上海的中国创新中心结合中国市场的需求和国外先进技术,研发适合中国的技术和产品;我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队,在全国有超过2400名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息,请登录网站:www.thermofisher.com关于格诺生物格诺生物是“精准医疗”领域里致力于肿瘤诊断技术创新的先行者,专注于打造“液体活检”的完整解决方案,旗下产品包括一系列自主开发的基于ctc、ctdna、外泌体等各类样本的全癌种诊断试剂。格诺cytoplorare试剂盒是唯一通过cfda批准的ctc iii类检测产品。基于最大临床样本量的肺癌数据验证,其灵敏度为80.2%,特异性为88.0%,i期患者检出率为67.2%。格诺genoplorare试剂盒基于arms-plus技术定量检测血浆ctdna的egfr突变,灵敏度可达万分之一,远高于同类产品。格诺oncoplorare试剂盒为基于ngs技术的ctdna多癌种检测产品,兼具高建库效率、高灵敏度、高性价比等多项优势。格诺“液体活检”产品还包括高效ctc富集试剂盒cytoprep、高效cfdna富集试剂盒genoprep、ctc富集芯片cytotron、多基因联合肠癌甲基化检测试剂盒epiplorare等等,以及基于ctc富集后的icc、ihc、if、fish、rnaseq等一系列检测产品。媒体垂询:赛默飞世尔科技 高赫 公共关系经理 电子邮件:sura.gao@thermofisher.com电话:(86-21) 6865 4588-2695公关代理 高赫 艾云飞 电子邮件:levin.ai@edelman.com电话:(86-21) 6193 7536
  • 耐药性与甲基化|naica® 微滴芯片数字PCR系统助力霍乱弧菌耐药性机制分析
    导读自青霉素发现以来,抗生素已经成为人类对抗细菌的最有效武器,挽救了无数人的生命,但随着抗生素使用上的无节制,抗生素耐药性已成为一个重大的全球问题。因此了解微生物对抗生素适应的分子机制成为抗击抗生素耐药性(AMR)的一个重要途径。近日,法国巴斯德研究所的科学家运用转录组测序、naica® 微滴芯片数字PCR等技术证实VchM(霍乱弧菌特有甲基转移酶)参与应对氨基糖苷类抗生素的应激反应,这表明,DNA甲基化在氨基糖苷类抗生素的耐药机制中也发挥着重要作用,该文章刊载于《PLOS GENETICS》。应用亮点:▶ 运用naica® 微滴芯片数字PCR系统分析霍乱弧菌操纵子表达情况。▶ VchM缺失会导致生长缺陷,但却可以使霍乱弧菌对氨基糖苷产生应激。▶ VchM直接调节groES-2(伴侣蛋白编码基因)的胞嘧啶甲基化,从而改变其表达情况,影响霍乱弧菌耐药性。氨基糖苷(AGs,如:妥布霉素、链霉素、卡那霉素、庆大霉素和新霉素)是一类针对细菌核糖体小亚基的抗生素,其破坏翻译保真度,增加细胞中错误折叠蛋白质的水平。而本文的研究主要针对霍乱弧菌对其的耐药性机理。科学家们在之前的研究中发现,特定DNA甲基转移酶基因突变(VchM)的霍乱弧菌相比WT具有更强的耐药性,这表明DNA甲基化可能在霍乱弧菌适应AGs中发挥作用。VchM编码一种Orphan m5C DNA甲基转移酶,导致5‘-RCCGGY-3’基序的胞嘧啶甲基化,虽然VchM的缺失会导致生长缺陷,但霍乱弧菌细胞可以在亚致死浓度和致死浓度的抗生素下对氨基糖苷应激。▲图1:霍乱弧菌ΔVchM对亚致死浓度氨基糖苷的敏感性较低。GAs类,TOB(妥布霉素),0.6 μg/ml、GEN(庆大霉素),0.5 μg/ml、NEO(新霉素),2.0 μg/ml;非Gas类,CAM(氯霉素),0.4 μg/ml和CARB(β -内酰胺类西林),2.5 μg/ml对于ΔVchM霍乱弧菌的转录组测序和遗传分析发现,ΔVchM菌株中有4个直接参与蛋白质折叠的基因被上调。包括groEL-1,groEL-2,groES-1,groES-2。通过naica® 微滴芯片数字PCR系统对基因表达进行验证分析发现,ΔVchM霍乱弧菌中groES-2的表达在不同时期均有较大上调。进一步通过缺失验证表明了groESL-2对ΔVchM的抗生素高耐受性的作用。▲图2:ΔVchM菌株中groESL-2操纵子上调(对数生长期,Exp, OD600 ≈ 0.3;指数生长期,Stat, OD600 ≈ 1.8–2.0)在groESL-2区域观察存在四个VchM甲基化基序存在。进一步对基序分析发现,破坏这些基序会导致groESL-2基因表达增加(如图3)。且基序破环越多,则导致的表达上调更加明显。同时,ΔVchM中的groESL-2基因表达一直高于基序突变,表明还存在其他因素与甲基化协同控制groESL-2表达。这些结果表明,在霍乱杆菌中,一组特定的伴侣蛋白编码基因受DNA胞嘧啶甲基化的控制,将DNA甲基化与伴侣蛋白表达的调节和对抗生素的耐受联系起来。▲图3:在WT中,groESL-2区域的VchM位点突变导致基因表达增加法国巴斯德研究所是世界上最著名的研究所之一,成立130余年来一直走在世界科技前沿,是微生物学、免疫学、传染病学等学科的起源地,曾开发出狂犬病疫苗、天花疫苗、流感疫苗、黄热病疫苗等多个造福人类的疫苗产品,并培养了10名诺贝尔奖生理学或医学奖获得者,实现研究、教育、健康、创新“四位一体”的研究机构。
  • “高校实验室资质认定(国家计量认证)管理骨干培训班”在南京开幕
    12月3日,由教育部科技发展中心、国家计量认证高校评审组主办,东南大学承办的“高校实验室资质认定(国家计量认证)管理骨干培训班”在南京开幕,来自全国46所高校、66个中心(实验室)的246名实验室管理骨干参加了本次培训。   教育科技发展中心李志民主任、国家认监委实验室部李文龙处长、东南大学郑家茂副校长出席了开幕式。开幕式由国家计量认证高校评审组负责人曾艳主持。李志民主任指出:高校计量认证实验室在支撑高校教学、科研、社会服务等方面发挥着越来越积极的作用。实验室资质认定在促进高校实验室管理规范化、提高实验数据可靠性,推动高校大型仪器共享服务社会等方面取得了有目共睹的成绩。他希望各计量认证实验室今后在研究生科研能力培养、论文数据可追朔性认证、产学研合作方面发挥更大的作用。   培训班上,李文龙处长介绍了我国实验室资质认定工作二十多年来的发展取得的成绩、存在的问题和应对的措施。国家认监委资深专家李雨田老师、浙江大学分析测试中心冯建跃主任、东南大学分析测试中心梅建平常务副主任、大连理工大学振动与强度测试中心吴晓媛常务副主任为实验室管理人员授课。培训结束后,204名实验室管理骨干参加了内审员验证考核,考核通过者将取得高校评审组颁发的实验室资质认定内审员证书。
  • 甲基化成肿瘤检测新靶标?五种新型DNA甲基化酶检测技术进展揭秘
    DNA甲基化是哺乳动物基因组中最常见的表观遗传事件之一,即DNA中核苷酸与甲基基团的共价修饰[2]。DNA甲基化与人的生命进程有着密不可分的关系。细胞的增殖与分化、染色体完整性的维护或者X染色体的活性等等都离不开DNA甲基化的控制,DNA甲基化流程在胚胎发育中是无处不在的[1]。如果DNA甲基化进程出现异常,会导致生物体出现各种各样的疾病以及身体的生长缺陷或生理紊乱。DNA与蛋白质之间的相互作用如果出现异常,会影响基因的表达,从而引起人体内肿瘤的发生或者肿瘤的转移,这一切的源头都是DNA甲基化进程出现异常的结果[3]。DNA甲基化酶是肿瘤治疗靶点DNA甲基化酶是一种修饰酶,经常与限制性内切酶一同出现。在真核生物基因组以及原核生物基因组中,普遍存在DNA甲基化酶维持以及催化DNA甲基化过程的现象。DNA甲基化酶被广泛认为是一种治疗靶点以及预测生物甲基化过程的标志物,在单细胞水平上准确灵敏地检测DNA甲基化酶对于肿瘤医学上的临床诊断以及临床治疗甚至是生物学研究有着至关重要的作用。根据甲基化的核苷酸和位置被分为三组,即腺嘌呤的甲基化、胞嘧啶的4-N甲基化和胞嘧啶的5-C甲基化。所有已知的DNA甲基化酶在其甲基化过程中以s-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体。最常见的DNA甲基化不仅发生在胞嘧啶嘧啶环5-C位置的CpG位点上,还发生在对称四核苷酸5’-G-A-T-C-3’ 中腺嘌呤环的6-N位置[4,5]。传统DNA甲基化酶检测方法有局限 DNA甲基化酶活性的高灵敏度检测在基因调控、表观遗传修饰、临床诊断和治疗等方面具有重要意义。传统用于检测DNA甲基化酶活性的方法包括高效液相色谱法(HPLC)[6], 聚合酶链反应(PCR)[7],凝胶电泳[8],高效毛细管电泳(HPCE)[9],以及使用同位素标记的s-腺苷甲硫氨酸甲基化检测[10,11]。尽管这些技术在实验室实践中被证明是有用的,但它们具有局限性。例如,大多数技术不仅使用笨重昂贵的设备,而且需要复杂的样品制备和数据分析所需的大量时间。同位素标记等技术是有效的,但它们往往需要费力的样品制备、同位素标记、复杂的设备和大量的DNA,使得它们不适合在医护点使用。所以,DNA甲基化酶活性检测迫切需要简单、便携、高灵敏度和低成本的检测方法。在最近的技术进步中,许多替代的DNA甲基化酶活性测定方法,如放射法、比色法、荧光法、电化学法等已被提出。此外,其中许多与纳米材料或酶结合,以显著提高它们的敏感性。放射法、蛋白质纳米孔等新型检测技术兴起 放射法:同位素标记作为最早检测DNA甲基化酶活性的方法之一,早期广泛应用于检测DNA甲基化酶和DNA甲基化的活性[12,13]。在由DNA甲基化酶催化的甲基化过程中,同位素标记的甲基部分转移到DNA上,从而赋予甲基化的DNA放射性。这种放射性可以很方便地用闪烁计数器或放射自显像仪来检测。可惜的是,放射性试剂的介入是限制这种试验在中央实验室进行的最大缺点。对无辐射DNA甲基化酶活性检测的研究导致了甲基化特异性PCR[14]、HPCE[9]和HPLC等替代品的发展[7,14],而甲基化特异性PCR被认为是较好的方法。尽管非放射性,上述DNA甲基化酶活性检测需要庞大且通常昂贵的设备,冗长且耗时的样品制备和数据分析,以及繁琐的检测方案,这在临床实践中也比较难以实现全覆盖。比色法:比色法用于DNA甲基化酶活性检测依赖于颜色变化的目视观察或与DNA甲基化酶相关的吸收光谱的光谱测量。它们具有成本低、简单、可移植性和在某些情况下无需仪器的优点。虽然紫外-可见光谱法可以量化DNA,但甲基化和未甲基化DNA在紫外-可见吸收特性上的低灵敏度和不显著差异基本否定了紫外-可见光谱法直接检测DNA甲基化酶活性[15~17]。金纳米粒子:金纳米粒子(AuNPs)由于其表面的等离子体共振吸收的高消光系数且强依赖于粒子间距离,在DNA甲基化酶活性检测的比色法研究中引起了广泛关注。如图1 所示,金纳米粒子表面包覆有双链DNA (ds-DNA),其中一条链包含DNA甲基化酶识别序列和5’-硫醇末端。在DNA甲基化酶存在的情况下,如图1 B 所示,DNA甲基化酶被共价标记在ds-DNA中碱基环的6-C位置,因为在5-N位置缺乏一个质子阻止了β-消除,甲基化的DNA不能被核酸外切酶 ExoⅠ剪切,因此金纳米粒子仍然均匀地分散在溶液中 [18]。从而实现DNA甲基化酶活性的检测。结果表明,在526 nm处,金纳米粒子聚集物的吸光度与DNA甲基化酶的活性呈2 ~ 32 U / mL的线性关系,检出限为0.5 U/ mL。图1. (A)基于ABP的比色生物传感器的示意图(B) DNA甲基化酶的检测机制 荧光法:荧光指吸收激发荧光团的光,以促进电子从基态到激发态,电子迅速地回到激发态的最低能级,然后当电子最终返回基态时,发出波长较长的光。与其他DNA甲基化酶活性测定法相比,荧光法检测DNA甲基化酶活性的优点是检测过程简单,灵敏度高,但其复杂的光学性能限制了其在集中实验室的应用[19~20]。图2. 基于外切酶的靶循环的DNA甲基化酶活性检测原理图电化学法:电化学生物分析技术的发展一直是现代分析化学研究的热点之一。电化学法用于DNA甲基化酶分析包括测量电流、电压、电荷和电阻等电量,以反映DNA甲基化酶的活性。与许多其他类型的DNA甲基化酶活性的检测相比,它们具有低成本、高灵敏度、执行现场监测的能力以及非常适合微型化和集成微制造技术的优点[22~23]。Zhi-Qiang Gao等人在2014年报道了一种简单、高灵敏度的DNA甲基化酶电化学活性测定方法。该方法采用电催化氧化抗坏血酸(AA)的信号放大手段,通过一个螺纹插层N,N -2(3-丙基咪唑)-1,4,5,8-萘二酰亚胺(PIND)电催化氧化还原Os(bpy)2Cl+ (PIND-Os),包含5’-CCGG-3’ 对称序列的ds-DNA首先固定在金电极上。然后用DNA甲基化酶孵育电极,经过酶催化特定CpG二核苷酸的甲基化,然后用识别5’-CCGG-3’ 序列的限制性内切酶 Hpa II 剪切酶处理电极,从而实现DNA甲基化酶活性检测的目的[24]。图3. DNA甲基化酶活性的检测原理示意图蛋白质纳米孔:蛋白质纳米孔检测技术是在单分子水平上以低成本、无标签和高通量的方式研究生物分子的检测技术。近年来,纳米孔技术正从生物传感的角度进行研究[25]。应用于核酸特征鉴定、化学反应过程的测量、蛋白质分析、疾病相关蛋白状态的检测以及酶动力学的研究等[26]。α-溶血7素是一种蛋白质纳米孔,它自发地插入到脂质双层膜中,形成一个纳米孔[27]。当一个带电分子在外加电势下通过蛋白质纳米孔时,它会引起离子电流的瞬态变化,电流变化事件被记录下来。被分析物可以通过当前电流发生的频率进行量化,特征电流信号则可以揭示被分析物的各种特征[28~30]。该检测方法不需要对DNA探针进行任何化学修饰,既方便又节约成本,减少了样品消耗。 图4. 用于分析DNA甲基化酶活性的纳米孔试验的示意图 在过去的十几年中,DNA甲基化酶活性的检测取得了重大进展。有几种方法有希望可在临床检测,使得该方法在用于癌症诊断、预后和治疗方面显示出了希望。比色法依赖于颜色变化的目视观察或与DNA甲基化酶相关的吸收光谱的光谱测量,具有成本低、简单、可移植性和在某些情况下无需仪器的优点,但是检出限相对较高。荧光法检测DNA甲基化酶活性的检测过程简单,检出限相对理想,但其复杂的光学性能以及昂贵的仪器设备限制了其在生活中的应用。电化学法由于需要构建较复杂的反应电极材料而使得其在临床上受到了一定的限制。蛋白质纳米孔的检测方法不需要对DNA探针进行任何化学修饰,既方便又节约成本,减少了样品消耗,检出限相对较为理想,并且已经成功应用于人类血清样本。这类检测可能最终为常规DNA甲基化酶活性的检测和分子诊断打开大门,为疾病的管理和诊断带来新的前景。 作者:王家海、骆 乐 作者简介:王家海,博士,教授,硕士生导师/博士生导师,广州大学化学化工学院;分析化学专业;主要研究领域为“基于核算纳米结构为信号传导载体的纳米孔传感器”;在核酸探针和仿生纳米孔两方面开展了一系列分子识别的工作,也为将来进一步开展分析化学研究打下了坚实的基础,期间积累了多种前沿分析方法和技术:仿生纳米孔制备和检测;微纳米加工技术;核酸探针人工合成技术。参 考 文 献 [1] 陈晓娟,闫少春,邵国,等.人DNA甲基化转移酶的分类及其功能[J].包头医学院学报,2014,30(04):136-138.[2] Das PM, et al. DNA methylation and cancer[J]. Clin. Oncol. 2004 22: 4632-4642.[3] Jurkowska RZ, et al. Structure and function of mammalian DNA methyltransferases[J]. ChemBioChem 2011 12: 206-222.[4] Lee GE, et al. DNA methyltransferase 1-associated protein (dmap1) is a co-repressor that stimulates DNA methylation globally and locally at sites of double strand break repair[J]. Biol. Chem. 2010 285: 37630-37640.[5] Liu SN, et al. Assay Methods of DNA Methylation and Their Applications in Cancer Diagnosis and Therapy[J]. Chinese J.Anal. Chem. 2011 39: 1451-1458.[6] Boye E, et al. Quantification of dam methyltransferase in Escherichia coli[J]. Bacteriol. 1992 174: 1682-1685.[7] Eads CA, et al. CpG island hypermethylation in human colorectal tumors is not associated with DNA methyltransferase overexpression[J]. Cancer Res. 1999 59: 2302-2306.[8] Bergerat A, et al. Allosteric and catalytic binding of s-adenosylmethionine to escherichia coli DNA adenine methyltransferase monitored by 3H NMR[J]. Proc. Natl. 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  • 汗诺制冷型干式恒温器厂家直销
    上海汗诺仪器有限公司专业生产恒温金属浴,制冷型金属浴现货供应厂家直销,欢迎选购 www.hanuo.cn 18621653239 薄利明 产品简介 HNDTC-100 干式恒温器(制冷型) 价格:7200元 是采用微电脑控制和半导体制冷技术制造的一款恒温金属浴产品,仪器可配置多种模块,可广泛应用于样品的保存、各种酶的保存和反应、核酸和蛋白质的变性处理、PCR 反应、电泳的预变性和血清凝固等。 产品特点 1.即时温度显示、时间递减显示; 2.强大的可编程功能实行多点温度点的控制,最多达5个温度点的温度和恒温时间的设置及连续运行 3.自动故障检测及蜂鸣器报警功能; 4.温度偏差校准功能; 5.便捷的模块更换,便于清洁与消毒; 6.内置超温保护装置; 7.液晶屏显示,按键开关。 性能指标 1.控温范围:-10℃~100℃; 2.升温时间:&le 15Din (从20℃升至100℃); 3.降温时间:&le 20Din室温-25℃,(环境温度为30℃下检测); &le 30Din (室温-30℃),(环境温度为25℃下检测); 4.温度稳定性@100℃:&le ± 0.5℃; 5.模块最大温差@40℃:0.3℃; 6.模块温度均匀性:&le ± 0.3℃; 7.显示精度:0.1℃; 8.时间设置最长:99h59Din; 9.最高温度:100℃; 10.模块型号选择:参见DTC-100系列可更换模块。 1.最大功率150W; 2.外形尺寸:270x190x170 DD; 3.净重:2.2Kg。 HNDTC-100系列可更换模块 型号 孔径及试管数 最高温度 备注 A 96× 0.2Ml标准板 100℃ B 54× 0.5Ml离心管 100℃ C 35× 1.5Ml离心管 100℃ D 35× 2.0Ml离心管 100℃ E 15× 0.5Ml+20× 1.5Ml离心管 100℃ F 24× 直径&le &phi 12DD试管 100℃ G 32× 0.2Ml+25× 1.5Ml离心管 100℃ H 32× 0.2Ml+10× 0.5Ml+15× 1.5Ml离心管 100℃ I 103× 67× 30 (方槽模块) 100℃ J 96× 0.2Ml酶标板 (平底) 100℃ K 可订做 100℃
  • 赛默飞发布测定清漆中六亚甲基二异氰酸酯单体(HDI)的解决方案
    2015年7月28日,北京——科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)近日发布了使用GC-FID法测定清漆中六亚甲基二异氰酸酯单体(HDI)的解决方案。六亚甲基二异氰酸酯是全球应用发展十分迅速的一种新型聚氨酯原料。HDI 及 HDI 缩二脲、三聚体是生产聚氨酯涂料及聚氨酯弹性体的重要原料,广泛用于航空、汽车、建筑、木器、塑料皮革等行业和领域。HDI吸入有毒,会强烈腐蚀皮肤,引起红肿、胀痛、感染和皮疹。本品蒸气会刺激眼睛粘膜和呼吸道,引起流泪和咳嗽,可能会引起永久性眼部疾病。接触皮肤或吸入其蒸气可能会引起过敏。目前六亚甲基二异氰酸酯单体检测的检测方法有《GB/T 18446-2009 色漆和清漆用漆基 异氰酸酯树脂中二异氰酸酯单体的测定》,但是方法老旧,单点校正不准确,恒温分析会导致峰型较差,油漆残留在色谱柱内等缺点,因此需要改进。此次赛默飞发布的解决方案基于《GBT18446-2009 色漆和清漆用漆基 异氰酸酯树脂中二异氰酸酯单体的测定》,采用Thermo ScientificTM TRACE 1310气相色谱仪,搭配FID检测器,通过优化子内标物和HDI的浓度比,并将原来的130℃恒温模式分析改为程序升温模式分析(在高温度下运行几分钟,降低色谱柱污染,延迟使用寿命),对相应的气相色谱条件进行了优化;色谱柱由15m毛细管柱改为通用型的 30m 毛细管柱;同时采用多点校正的方式,使得内标物和待测组分的分离度更高、峰型更好,定量更加准确。产品链接:TRACE 1310 气相色谱仪www.thermoscientific.cn/product/trace-1310-gas-chromatograph.html解决方案下载:www.thermoscientific.cn/content/dam/tfs/Country%20Specific%20Assets/zh-ch/CMD/Chrom/petrochemical/documents/Measurement-of-HDI-in-varnish.pdf-------------------------------------------------------关于赛默飞世尔科技 赛默飞世尔科技(纽约证交所代码:TMO)是科学服务领域的世界领导者。公司年销售额170亿美元,在50个国家拥有约50,000名员工。我们的使命是帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。我们的产品和服务帮助客户加速生命科学领域的研究、解决在分析领域所遇到的复杂问题与挑战,促进医疗诊断发展、提高实验室生产力。借助于首要品牌Thermo Scientific、Applied Biosystems、Invitrogen、Fisher Scientific和Unity Lab Services,我们将创新技术、便捷采购方案和实验室运营管理的整体解决方案相结合,为客户、股东和员工创造价值。欲了解更多信息,请浏览公司网站:www.thermofisher.com赛默飞世尔科技中国 赛默飞世尔科技进入中国发展已有30多年,在中国的总部设于上海,并在北京、广州、香港、台湾、成都、沈阳、西安、南京、武汉等地设立了分公司,员工人数约3700名。我们的产品主要包括分析仪器、实验室设备、试剂、耗材和软件等,提供实验室综合解决方案,为各行各业的客户服务。为了满足中国市场的需求,现有8家工厂分别在上海、北京和苏州运营。我们在全国共设立了6个应用开发中心,将世界级的前沿技术和产品带给国内客户,并提供应用开发与培训等多项服务;位于上海的中国创新中心结合国内市场的需求和国外先进技术,研发适合中国的技术和产品;我们拥有遍布全国的维修服务网点和特别成立的中国技术培训团队,在全国有超过2000名专业人员直接为客户提供服务。我们致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。欲了解更多信息,请登录网站:www.thermofisher.cn
  • TF-SPME萃取法帮你分析,你的橄榄油品质是否过关?
    特级初榨橄榄油EVOO是在果实处于*成熟阶段时通过机械和其他物理方法从橄榄中获得的,无需任何进一 步提炼即可食用。橄榄油富含但不饱和脂肪酸,对心脑血管健康有一定作用,定期食用 EVOO 对健康有益。西班牙的橄榄油产量占全球的45%,被西班牙人誉为“黄金液体”。 由于其挥发性化合物,EVOO 还是一种具有极佳感官香气的植物油,香气是食品的主要质量指标之一。同时EVOO的特征挥发化合物会受气候、土壤、地理来源、橄榄品种、果实成熟度或其储存条件等因素影响。EVOO 香气由大量挥发性化合物构成,如醇类、酯类、醛类、酮类、呋喃类、碳氢化合物等。挥发性化合物的主要前体是脂肪酸,因为在榨油过程中, 内源性酶的作用通过降解多不饱和脂肪酸形成这些挥发性化合物。在以下实验中,我们采用两种不同技术进行对比:HSSE-PDMS和TF-SPME。对比实验过程01 样品制备:5g橄榄油,放置在20mL顶空瓶中,分别使用TF-SPME固相微萃取薄膜和磁力搅拌吸附萃取搅拌子顶空式萃取,37℃恒温水浴萃取60min;02 涂层:薄膜固相微萃取 (TF-SPME),采用两种不同的涂层,二乙烯基苯/聚二甲基硅氧烷涂层 (DVR/PDMS) 或羧烯/聚二甲基硅氧烷 (CAR/PDMS) 作为萃取相,PDMS Twister® 长度为10 mm,涂层为24µ L EG/S Twister® 长度为10 mm,涂层为32µ L TF-SPME装置为20 × 4.8 mm碳网片,浸渍有涂层相。分析使用了Agilent 6890气相色谱系统和Agilent 5975惰性四极杆质谱仪(Agilent, Santa Clara, CA, US),配备了Gerstel热解吸系统(TDS2)和CIS-4PTV进样口冷却系统。03 解吸温度程序如下:温度保持在 35℃ 0.1 分钟,然后以 60℃/min 的速度升温至 220℃并保持 5 分钟; 色谱柱:50 m × 0.25 mm×0.20 µ m J&W CPWax-57CB 载气:He; 流速:1ml /min; 气相色谱升温程序如下: 35℃保持 4分钟,然后以2.5℃/min升至220℃(保持15分钟) ; 四极杆、离子源和传输线温度分别维持在150℃、230℃和280℃。实验结果在70 eV的全扫描模式下记录了电子电离质谱,电子能量在29 ~ 300 m/z之间。在Picual品种EVOO中,用2TF-SPME和hsse - pdms分别测定了49个和43个化合物)。在Hojiblanca品种EVOO中,HSSE-PDMS提取的化合物数量(34)与2TF-SPME(32)相似。然而,在这两种情况下,使用2TF-SPME方法获得的总面积值最高(如图1所示)。 图1:通过 HSSE-PDMS 和 2TF-SPME 获得的 EVOO Picual 和 Hojiblanca 品种的总峰面积值(除以 107)和挥发性化合物的数量。误差条显示标准偏差 (SD) 值在 Picual 橄榄油的醛和内酯采样技术与 Hojiblanca 的萜烯采样技术之间观察到了统计学上的显着差异。在所有情况下,均使用 2TF-SPME 方法达到最高值(如图 2所示)。2TF-SPME装置是检测以下8种挥发性化合物的*方法:丙酸、1-丙醇、2-甲基-2-戊烯醛、5-羟甲基糠醛、4-己烯-1-醇乙酸、2-环戊烯- 1,3 -二酮和对花癸烯。 图2:通过HSSE-PDMS和2TF-SPME获得的EVOO Picual和Hojiblanca品种主要化学基团的总峰面积值的百分比总结两种提取方法均可根据橄榄品种对EVOO样品进行分离和区分。然而,考虑到线性和获得的峰面积值,以及测定的挥发性化合物的数量,2TF-SPME方法更适合于最好地表征这些类型的EVOO。薄膜固相微萃取 薄膜固相微萃取,简称TF-SPME或ThinFilm SPME,是把吸附相涂在碳网片上的固相微萃取新技术,由加拿大皇家科学院院士以及滑铁卢大学的JanuszPawliszyn教授发明,德祥科技旗下品牌INNOTEG英诺德和JanuszPawliszyn教授一起合作研发,用于分析痕量的VOSs和SVOCs等挥发性有机物。TF-SPME通过增加萃取相体积和表面积,不牺牲分析时间的同时,大大提高了灵敏度,解决了传统固相微萃取过程中所存在的吸收速率和吸收能力限制的问题,是一种应用广泛的提取浓缩新技术,与GC/MS联用,特别适用于食品、香料、饮料和环境监测等行业。固相微萃取 固相微萃取(SPME)由手柄和萃取头或纤维头 (fiber)构成。萃取头是一根1cm/2cm长的熔融石英纤维头,涂有不同的固定相和吸附剂,是一种集采样,萃取,浓缩和进样于一体的无溶剂萃取技术。操作更简单,携带更方便,操作费用也更加低廉;另外克服了传统样品前处理所存在的 回收率低、吸附剂孔道易堵塞的缺点。 可以与气相、气相-质谱联用,广泛应用于环保及水质处理、食品香精、公安法检分析、临床 药理、制药、化工等领域。应用范围产品涂层应用范围TF-SPMEPDMS适用于非极性化合物SVOCs分析PDMS/DVB适用于非极性化合物VOCs和SVOCs分析PDMS/HLB (1um)对极性和非极性化合物具有平衡亲和力,适用于极性和非极性VVOCs,VOCs,SVOCs分析PDMS/HLB (5um)对极性和非极性化合物具有平衡亲和力,适用于极性和非极性VVOCs,VOCs,SVOCs分析SPME94um聚二甲基硅氧烷(PDMS)挥发性物质,胺类,硝基芳香类化合物44um聚二甲基硅氧烷(PDMS)非极性半挥发性、挥发性物质空针(无涂层,可定制) _德祥科技德祥集团成立于1992年,总部位于香港特别行政区。作为卓越的科学仪器供应商和服务商,德祥服务于大中华区和亚太地区,每年都为数以千计的客户提供全套解决方案。公司业务包含仪器代理,维修售后,实验室咨询与规划,CRO冻干工艺开发服务以及自主产品研发、生产、销售、售后。作为深耕科学仪器行业的供应商与服务商,德祥现已服务于政府、高校、科研、制药、检测、食品、医疗、工业、环保、石化以及商业实验室等众多领域。公司目前在亚太地区设有13个办事处和销售网点,3个维修中心和1个样机实验室。2009至2021年间,德祥先后荣获了“最具影响力经销商”、“年度*代理商“、”年度最高销售奖“等殊荣。我们始终秉承诚信经营的理念,致力于成为*的科学仪器供应商,为此我们从未停止前进的脚步。我们始终相信,每*都在使这个世界变得更美好!INNOTEG英诺德INNOTEG英诺德是德祥科技旗下一家专业从事科学仪器设备研发生产的高科技企业,是集实验室设备研发生产、方法开发、实验室仪器销售和技术服务为一体的专业厂家。公司十分重视技术的研究和储备,一直保持高比例研发投入,创建了一支由博士、硕士和行业专家等构成的经验丰富,技术精湛的研发团队,在仪器分析技术领域开展了卓有成效的研究开发工作。此外,INNOTEG英诺德还与各大科研院所、高校合作,积极推进科技成果项目的产业化。INNOTEG英诺德凭借强大的研发能力,注重前瞻性技术研发,已推出多款科学仪器设备及实验室耗材产品。
  • 博奥生物程京院士等14位科学家获中国生命科学“诺贝尔奖”
    11月26日上午,有我国生命科学“诺贝尔奖”之誉的2016年度第九届“谈家桢生命科学奖”颁奖典礼在武汉大学隆重举行,共14位科学家荣获该奖,颁奖典礼由奖励委员会主任、中科院院士饶子和主持。详细名单如下:  “谈家桢生命科学奖”是为纪念国际知名遗传学家、我国现代遗传学奠基人之一谈家桢先生而设立,是我国生命科学领域的最高奖项。  生命科学成就奖得主:中国工程院院士、中国科学院大学药学院院长、上海药物研究所学术委员会主任丁健(下图左) 中国工程院院士、生物芯片北京国家工程研究中心主任程京(下图右)。  丁健院士主要贡献在于领导建立了符合国际规范的抗肿瘤药物筛选和药效学评价体系,为我国抗肿瘤创新药物的自主研发提供了重要的技术支撑和能力保障,在分子靶向抗肿瘤药物的研究中取得了重要进展,是我国新药研究领域具有影响力的领军人物之一。  程京院士长期从事基础医学和临床医学相关生物技术研究,在生物芯片的研究中有重要建树和创新,他站在国际生物芯片研究前沿并结合国情,主持建立了国内急需的疾病预防、诊断和预后分子分型芯片技术体系,领导研制了基因、蛋白和细胞分析所需的多种生物芯片,实现了生物芯片所需全线配套仪器的国产化并实现了国产生物芯片类产品向欧美等发达国家的批量出口。  生命科学临床医学奖得主:中国工程院院士、浙江大学教授、博士生导师李兰娟(下图左) 复旦大学附属中山医院院长、上海市肝病研究所所长樊嘉(下图右)教授。  浙大医学院李兰娟院士从事传染病学医疗、教学和研究工作30余年,创建独特有效的人工肝支持系统治疗重型肝炎(ALSS)获重大突破。主持制定ALSS技术规范作为全国标准,积极推广至全国 获国家科技进步二等奖。建立我国第一个永生化人源性肝细胞系 创建四步灌流分离肝细胞新方法 构建新型混合型人工肝等。此外,她还担任传染病诊治国家重点实验室主任,近年来在H7N9亚型禽流感病毒方面也取得了多项重要成果,还领衔研制了针对H7N9禽流感病毒的疫苗。  樊嘉教授长期致力于提高肝癌临床治疗疗效与转移复发机制研究,在肝癌门静脉癌栓及肝癌肝移植术后转移复发的临床防治上有重大突破、在转移复发机制研究方面有重要创新,是我国肝癌领域中青年专家的领军人物。  生命科学产业化奖得主:江南大学食品学院院长、国家功能食品工程技术研究中心主任陈卫教授。  陈卫 博士,1966年5月出生,江南大学食品学院食品生物技术研究中心教授、博士生导师,长江学者特聘教授,江苏特聘教授。目前担任江南大学食品学院院长、国家功能食品工程技术研究中心主任。1988年和1995年在无锡轻工大学分别获食品科学学士和硕士学位,毕业后留校任教 1998-2003年在江南大学在职攻读博士学位,2007年和2014年分别在美国Wake Forest University 医学院和美国University of California,Davis大学做访问研究。2011年获国家杰出青年科学基金,2012年入选国家特殊人才支持计划(“万人计划”)首批科技创新领军人才 同时还先后荣获新世纪“百千万人才”工程国家级人选、国务院特殊津贴、全国“五一”劳动奖章、全国优秀科技工作者、全国先进工作者等 2012年入选教育部长江学者奖励计划创新团队(负责人)、科技部重点科技领域创新团队(负责人)。陈卫教授主要从事食品微生物学的教学和研究工作,近年来围绕乳酸菌的资源发掘与整理,益生菌生理代谢与功能机制的解析和优化,益生菌与环境及宿主的互作,益生菌对宿主的健康效应,肠道微生物与人体健康等开展了一系列的研究。主持完成国家“十一五”863计划、国家科技支撑计划、国家自然科学基金项目等10余项,成果先后获国家与省部级奖励10余项,其中“功能性益生乳酸菌高效筛选及应用关键技术”获2009年国家科技进步二等奖 发表科研论文300余篇,其中SCI论文110余篇 申请国家发明专利72项,其中国际专利8项,已获授权专利28项 出版著作及教材5本 “食品学科创新实践链式教育人才培养模式研究与实践” 2014年获国家教学成果一等奖。  生命科学创新奖获得主(9名):中科院生物物理研究所王艳丽研究员,北大生科院汤富酬教授,中科院上海生化细胞所许琛琦研究员,清华大学生科院杨茂君教授,中科院动物所陈大华研究员,中科大学生科院周荣斌教授,浙江大学医学院胡海岚教授,复旦大学蓝斐教授,北京大学生物动态光学成像中心魏文胜研究员(依次如下图所示)。  生命科学创新奖获奖者简介:  王艳丽,2004年博士毕业于中国科学技术大学,中国科学院生物物理研究所 “百人计划”研究员(2010-),主要从事于CRISPR/Cas系统的作用机理和小分子介导的基因沉默的结构生物学研究。近期成果包括成功解析了分辨率为3埃的E.coli Cascade复合物结构,揭示了由11个Cas蛋白以及一个61核苷酸的crRNA共同组成的分子量为405kDa的Cascade复合物的精确的组装方式,揭示了CRISPR作用的分子机理,同时也为进一步了解靶标的识别机制提供了新的见解(Zhao et al.,Nature,2014) 解析了Cas1-Cas2与多种类型DNA的复合物的晶体结构,发现了Cas1-Cas2识别外源入侵DNA分子机制,揭示了外源核酸片段的长度是如何确定的,同时也解释了该阶段中的核心蛋白Cas1和Cas2各自的功能,该成果为揭示原核生物这一新的抵御病毒及遗传物质的入侵的机制奠定了重要的理论基础(Wang et al.,Cell,2015) 解析了嗜热菌Argonaute(TtAgo)和5磷酸化引导DNA(gDNA)和一系列靶点DNA三元复合物的晶体结构,在结构生物学水平阐明了细菌的Agos蛋白指导导向DNA双链切割靶标DNA双链的机制,这一发现在分子生物学水平也证明了细菌通过Argonaute蛋白介导的DNA干扰机制来对抗转座子和可移动的遗传原件(Sheng et al.,PNAS,2014) 解析了AcrF3以及AcrF3-Cas3复合物的结构,阐述了AcrF3在对抗CRISPR/Cas系统发挥的作用,揭示了病毒与细菌在长期进化中形成的相互拮抗的作用机制(Wang et al.,Cell Research,2016)。曾获得第十三届“中国青年女科学家奖”等奖励和荣誉。  汤富酬,现为北京大学生命科学学院BIOPIC中心研究员。1994 - 1998 , 本科毕业于北京大学,1998 - 2003 在北大获得细胞生物学博士学位,2004 - 2010,英国剑桥大学Gurdon研究所,博士后, 2010年回国在北京大学组建实验室,2015 - 现在 ,北大-清华生命科学联合中心PI。主要从事人类早期胚胎发育的单细胞功能基因组学研究。在国际上率先系统发展了单细胞功能基因组学研究体系,并利用这一技术体系对人类早期胚胎发育进行了深入、系统的研究,揭示了人类早期胚胎DNA去甲基化过程的异质性以及其他关键特征,发现了人类早期胚胎中基因表达网络的重要表观遗传学调控机理,为人们提供了一个全面分析人类早期胚胎DNA甲基化调控网络的研究框架,加深了对人类原始生殖细胞的发育以及表观遗传重编程过程的认识。现已发表论文40多篇,被同行引用3000多次。其中20多篇论文是以通讯(或者共同通讯)作者身份发表在Cell,Nature,Science,Cell Stem Cell,Cell Research,Genome Research,Genome Biology等期刊上。其中两项工作获评2014年度中国科学十大进展,2015年度中国科学十大进展,以及2015年度生命科学领域十大进展。  许琛琦,1977年12月生,中科院上海生命科学院生物化学与细胞生物学研究所研究员,所长助理。长期从事分子免疫学研究,揭示了脂质分子对免疫应答的调控机制,并且发展了基于脂代谢调控的肿瘤免疫治疗方法。发现细胞质膜中的酸性磷脂通过静电相互作用屏蔽关键受体的功能位点,从而维持T细胞的静息态 而钙离子可以直接与酸性磷脂结合并中和其负电荷,引起受体活化,从而调控T细胞的活化态。这种脂质分子的调控机制也适用于B细胞和肺癌细胞。近年来开创性地开展了脂质代谢与肿瘤免疫的交叉研究,发现了肿瘤免疫治疗的新靶点-胆固醇酯化酶ACAT1,并且证明了ACAT1抑制剂的抗肿瘤功能。以第一作者或通讯作者在Cell、Nature、Nature Review Immunology、J Exp Med和Nature Communication等国际知名杂志发表多篇学术论文。获得中科院百人计划(2010)、国家杰出青年基金(2014)、国家万人计划“青年拔尖人才”(2015)、全国优秀科技工作者、上海市优秀学术带头人、中科院青年科学家奖、上海市科学技术进步奖、上海青年科技英才、邹承鲁奖励基金杰出研究论文奖、明治生命科学杰出奖等人才项目和荣誉。  杨茂君,1975年出生于山东,2003年获中国协和医科大学博士学位(师从王琳芳院士,2001年10月进入清华大学饶子和院士实验室从事SARS蛋白酶晶体结构方面的研究),之后于美国西南医学中心从事博士后研究。清华大学首批tenure系列终身教授(2013-),清华-北大生命科学联合中心研究员(2011-)。2008年回国以来,杨茂君教授一直致力于综合运用结构生物学、生化与分子生物学等方法,研究与人类健康密切相关的重大疾病的发病机理及特异性抑制剂的筛选与设计,在细胞感应外界信号以及物质跨膜转运、蛋白质翻译后修饰调控等领域取得了一系列重大研究成果,以通讯作者身份在Nature(2012,2015,2016),Mol Cell(2010),Genes Dev (2014),PNAS(2012,2015)等国际知名期刊发表论文20余篇。曾获得霍英东基础研究奖励(2009)、教育部新世纪优秀人才支持计划(2010)、茅以升北京青年科技奖(2013)、药明康德生命化学研究奖(2013)、谈家桢生命科学创新奖(2016)和国家杰出青年基金(2016)等多项荣誉与奖励。人才培养方面,到目前为止实验室培养的所有博士研究生(5人)毕业时全部获得了清华大学或清华-北大生命联合中心优秀毕业生。其中第一个博士生冯越毕业后被直接特聘为北京化工大学副教授 三人次获得北京市优秀毕业生称号 两人获得清华大学优秀毕业生。  陈大华,博士,研究员,博士生导师 中国科学院动物研究所干细胞与生殖生物学国家重点实验室副主任,模式动物与干细胞生物学研究组组长。2005年中国科学院“百人计划”引进海外杰出人才,2008年国家基金委杰出青年获得者,科技部国家重大科学研究计划“原始生殖细胞发生和性腺发育的机制研究”首席科学家,现任干细胞与生殖生物学国家重点实验室副主任。1991年毕业于安徽农业大学,1999年毕业于中国科学院植物研究所获博士学位。1999年至2003年分别在美国肯塔基大学和德克萨斯大学西南医学中心从事博士后研究,2003年至2005年在西南医学中心分子生物系任Research Instructor。2005年回国后,实验室主要以果蝇和小鼠等模式动物为模型,开展干细胞不对称分裂的遗传和分子机制以及真核生物转录和翻译调控机制等方面的研究。目前主要研究干细胞与微环境信号相互作用的机制,TGF-beta/BMP和Hh等信号转导途径在生殖细胞发育过程中的作用,以及泛素介导的蛋白降解等途径在生殖干细胞命运调控中的作用。近年来实验室分别在Cell、 Developmental Cell、PLoS Biology、Nature Communications、Development、Human Molecular Genetics和PLoS Genetics等遗传和发育主流杂志上发表一系列文章。目前实验室承担科技部生殖发育重大计划、973、干细胞先导专项、国家基金委重点和杰青等项目。近年来最杰出的工作是在果蝇中鉴定到了DNA上m6A甲基化修饰的去甲基化酶,这一工作发表在2015年Cell。  周荣斌, 1980年5月生(生命科学领域目前唯一一名80后“杰青”),中国科学技术大学教授。主要从事炎症及炎症性疾病的发病机制和干预策略研究,近年来在NLRP3炎症小体的致病、活化和调控及靶向NLRP3炎症小体的疾病干预机制研究方面取得了多项研究成果:1)率先发现NLRP3炎症小体在2型糖尿病(T2D)中的致病作用并证明靶向NLRP3炎症小体干预T2D的可行性 2)揭示NLRP3炎症小体的关键内源性调控机制,发现神经递质多巴胺能通过其受体DRD1及下游信号通路抑制NLRP3炎症小体并改善神经炎症和外周炎症 3)揭示线粒体损伤是NLRP3炎症小体活化的关键因素,发现RNA病毒可通过RIP1-RIP3复合物诱发线粒体损伤及NLRP3炎症小体活化。以第一作者或通讯作者论文在Nature、Cell、Nat Immunol、Immunity、J Exp Med、PNAS等国际知名杂志发表多篇学术论文。 获得国家杰出青年基金、科技部中青年科技创新领军人才、中组部青年拔尖人才支持计划、中国青年科技人才奖、第十四届中国青年科技奖、第二届树兰医学青年奖、2015年度药明康德生命化学奖等人才项目和荣誉。  胡海岚,博士、教授、博士生导师、浙江大学求是特聘教授、浙江大学神经科学研究中心执行主任 2015年长江学者特聘教授获得者,第十二届中国青年女科学家奖获得者,国家杰出青年基金获得者,中科院百人计划获得者及赛诺菲优秀学者奖获得者等等 担任国际神经科学学会SFN程序委员会委员,中国神经科学学会理事,浙江省神经科学学会理事,中国动物学会动物行为学专业委员会特邀理事,中国国家自然科学基金评委,Neuron及Science杂志特邀审稿人。胡海岚教授于1996年获得北京大学学士学位 1996-1997年,于加州大学旧金山分校,担任研究助理 2002年,于加州大学伯克利分校获得神经生物学博士学位 2003-2008年,先后在美国弗吉尼亚大学、冷泉港实验室/加州大学圣地亚哥分校做博士后研究 2008-2015年,于中科院神经科学研究所任研究员 2015年至今,受聘于浙江大学求是高等研究院/医学院神经科学研究。胡海岚教授在情绪和社会行为的神经生物学基础这一脑科学前沿方向取得了一系列令人瞩目的成果:首次揭示内侧前额叶的神经活动在社会等级行为中的重要作用 阐明情绪因素如何影响学习和记忆的分子和细胞学机制 在抑郁症神经环路和病理机制的研究方向上也取得了关键的进展。  蓝斐,教授,博士生导师。1999年于上海复旦大学生物化学系获学士学位, 2002年获得复旦大学分子肿瘤学硕士学位,2008年获得美国哈佛大学细胞发育博士学位。博士期间在表观遗传甲基化可逆调控方向做出大量突出贡献,多篇论文发表在顶级期刊上,毕业时获得哈佛医学院院长提名嘉奖。博士毕业后,作为首位创始员工,受邀加入全球首批表观遗传制药公司(美)Constellation Pharmaceuticals,主要目标定位于将表观遗传学的科研成果转化成为有药用价值的产品,特别是在肿瘤和免疫疾病方面。在该公司,作为核心技术员工,参与大量公司组建工作并主导了多个药物研发项目,对表观遗传靶向性治疗的进展和前景有着极强的把握力。2012年11月辞去美国的职位,全职受聘于复旦大学,入选中组部第四批“青年千人计划”(2012年11月),并同月荣获上海高校特聘教授(“东方学者”2012)称号。回国后,蓝斐教授的主要科研方向将拓宽到新兴的非组蛋白表观遗传修饰的生物学意义及其调控机理,并揭示表观遗传异常在肿瘤及其它疾病发生过程中的作用,为抗肿瘤药物靶标的发现以及最终成药提供理论和实验依据。 蓝斐教授作为蛋白去甲基化领域的主要开辟者主导并参与发现了已知的21类去甲基化酶中的16类,包括第一个去甲基化酶LSD1,以及之后的4大类JMJC去甲基化酶家族的发现和功能研究。此外,他还首次发现了未甲基化赖氨酸的识别机理。这些开创性的工作不仅为表观遗传学甲基化标记的动态调控提供了大量的实验证据,并大大完善了甲基化生物学调控的理论体系。为了更好的理解疾病表观遗传学并获得转化医学的宝贵经验,蓝斐教授在博士毕业后接受了美国Constellation Pharmaceuticals的邀请,做为首位员工加盟并创建公司研发团队以及制定研发方向,在公司中多项临床前项目中做出重要贡献。现在该公司是业界公认的最具创新性的表观遗传公司。蓝斐教授发表SCI论文20余篇,作为第一和共同第一作者发表过3篇Nature和Cell文章,他的科研和创新成果还用于3项国际专利申请。  魏文胜,北京大学生命科学学院研究员(2007-),北京大学生物医学集成创新研究所(BIOPIC) 研究员(2014-),北大-清华生命科学联合中心(CLS)研究员(2015-),北京未来基因诊断高精尖创新中心(ICG)研究员(2016-)。长期致力于发展基因组编辑技术与高通量功能基因组学,以及在此基础上研究癌症、感染等重大疾病的分子机制。近期成果包括:首次发现艰难梭菌毒素受体 完成对TALE蛋白识别非修饰及修饰DNA碱基的完全解码 开发了基于CRISPR/Cas9系统的基因敲除文库及高通量功能性筛选平台 完成多种病毒侵染人源宿主重要靶位点的筛选和功能鉴定 建立了基因组大片段删除技术用于高通量筛选研究长片段非编码RNA(lncRNA)等。以第一作者或通讯作者在Cell、Nature、Nat Biotechnology、PNAS、Cell Research、Elife等国际知名杂志发表多篇学术论文。获得北京大学生命科学学院最受欢迎教师奖(2010)、北京大学东宝奖教金(2012)、The Roche Chinese Young Investigator Award(2014)、Bayer Investigator Award(2014)、北京大学郑昌学教学优秀奖(2015)、科学中国人年度人物(2016)、谈家桢生命科学创新奖(2016)等多个奖项和荣誉。  附:“谈家桢生命科学奖”简介  一、设立背景  为了促进我国生命科学、医学、药学及相关领域的科技进步和产业发展,促使生物技术产业的领军人物不断涌现,由国家科技部批准、联合基因集团出资设立、上海复星医药(集团)有限公司赞助,上海市生物医药行业协会承办的“谈家桢生命科学奖”正式启动。  设立单位联合基因集团1997年发源于复旦大学,由毛裕民教授、谢毅教授带领复旦大学生命科学学院的一批教师和博士、硕士研究生发起组建。由100万起步,迄今已经形成资产超过60亿、拥有30多家企业(两家为香港主板上市)的以基因技术为主的高科技产业集团。该奖是在生命科学领域由企业设立的第一个奖项,也是联合基因集团在树立生物技术领域的品牌后,回馈社会的一种方式。  赞助单位上海复星医药(集团)股份有限公司成立于1994年,1998年8月在上海证券交易所挂牌上市,是在中国医药行业处于领先地位的上市公司。复星医药专注现代生物医药健康产业,在研发创新、市场营销、并购整合、人才建设等方面形成竞争优势的大型专业医药健康产业集团。复星医药奉行可持续发展的原则,始终怀着感恩的心态,将履行社会责任纳入到企业发展的长期战略。  二、设奖宗旨  2008年,谈家桢先生迎来他的百年诞辰。谈先生是我国现代遗传学奠基人之一,是中国现代杰出的科学家和教育家。他将毕生献给了遗传学事业,为遗传学研究培养了大批优秀人才,建立了中国第一个遗传学专业,创建了第一个遗传学研究所,组建了第一个生命科学院。  该奖的设立旨在秉承谈先生对生命科学事业的奉献精神,促进生命科学研究成果产业化,激励我国生命科学工作者不断创新。  三、承办单位  谈家桢生命科学奖由上海市生物医药行业协会承办。上海市生物医药行业协会成立于2002年12月,是由上海市生物医药企业和相关大学、科研院所等单位自愿结成的社会团体。协会会员涵盖现代生物技术和医药领域从研发、生产到流通等整个产业链,现有会员单位205家,会员产业规模已超过2700亿,行业覆盖率达75%以上,具有较强的行业代表性。协会是中国社会组织首批最高荣誉获得者,2004年被中国民政部授予“全国先进民间组织” 其后被评为“中国社会组织评估等级五A”、“五星级社会组织党组织”和“工人先锋号”。  四、评选机构:  奖项评选机构由奖励委员会和评审专家委员会组成。奖励委员会由生物技术领域具有高尚道德情操、精深学术造诣、热心科技奖励事业的国内科技权威和著名学者组成。奖励委员会聘请的评审专家经过奖励委员会批准、颁发聘任书后,独立行使职能、负责评选工作。  五、奖励对象:  在中华人民共和国境内从事生命科学事业做出成就的科学家、教授,以及取得创新研究成果的青年学者 对生命科学科技成果产业化过程有突出贡献的人士。  六、奖项设置:  “谈家桢生命科学奖”下设“谈家桢生命科学成就奖”、 “谈家桢生命科学产业化奖” 和“谈家桢生命科学创新奖”三个奖项,每年奖励费用为人民币110万元:其中奖励“谈家桢生命科学成就奖”2名,各奖励人民币25万元 “谈家桢生命科学产业化奖”2名,各奖励人民币10万元 “谈家桢生命科学创新奖”8名,各奖励人民币5万元。  七、评选程序  谈家桢生命科学奖每年评奖一次,参照国际惯例,遵循“公平、公开、公正”的原则,按提名推荐、资格认定、初评、终评、颁奖的程序进行。  经奖励委员会核准的国内外高校、研究院所和企业、国内相关学科领域的著名专家、学术权威、主管领导和学科带头人为推荐人。奖励委员会委员每人每年可提出两名被推荐人,其他推荐人每人每年可提出一名被推荐人,向奖励委员会推荐。也欢迎有突出成就的个人通过自荐方式参加评选。  推荐材料经谈家桢生命科学奖管理办公室进行形式审查认定后,由评审专家进行初评(函评),对各位申请人打分并对申请人给出评价,申请人函评分数高于该奖项所有申请人函评平均分(含)以上者,进入谈家桢生命科学奖评审专家委员会评审。  谈家桢生命科学奖评审专家委员会举行全体会议进行评审,逐一审核进入复评申请人材料并进行评议,以记名方式进行评分,去除一个最高分和一个最低分后,按平均得分高低顺序排位,“谈家桢生命科学成就奖”取得分前二位,“谈家桢生命科学产业化奖”取得分前二位(如果产业化奖空缺,将把名额递补给创新奖),“谈家桢生命科学创新奖”取得分前八位,分别产生“谈家桢生命科学成就奖”、 “谈家桢生命科学产业化奖”和“谈家桢生命科学创新奖”候选人。 评审专家委员会评审后产生的“谈家桢生命科学成就奖”、 “谈家桢生命科学产业化奖”和“谈家桢生命科学创新奖”候选人名单,经相关网站和媒体公示十五天无异议者,方可提交奖励委员会进行终评。  谈家桢生命科学奖奖励委员会召开终评会议,会议须有谈家桢生命科学奖奖励委员会半数以上委员参加方能举行。并逐一审核每位候选人材料并进行评议,以记名投票方式确定获奖者,提名的谈家桢生命科学奖候选人须获得在场的奖励委员会委员三分之二以上票数同意,方可批准为本年度“谈家桢生命科学成新奖”、 “谈家桢生命科学产业化奖” 和“谈家桢生命科学创新奖”获得者。  八、评审原则  谈家桢生命科学奖的申报、评审和授奖,遵循“公开、公平、公正”的原则,不受任何组织或个人的非法干涉。
  • 赛默飞发布食品诺如病毒快速检测方案
    赛默飞世尔科技近日发布食品中诺如病毒快速检测方案。   食源性病原微生物的检测对食源性疾病的预防和控制至关重要,可靠准确的食品及环境中病毒检测方案是保证食品安全的强大保护伞。到目前为止还没有一种通用的从食物中富集与检测诺如病毒的方法,传统根据病原体的形态学特征、生态学特征、生理生化反应特征以及血清学反应等,再通过观察和鉴定实验来确定最终病原体的种属,都存在耗时长,操作繁杂,准确度低等局限性,不能对病原体及时准确的鉴定,且实验手工操作多,易受操作人员熟练度影响,这些使得RT-PCR成为一种检测的最佳方法。因此急需一种在疫情暴发时能从各种可疑食物监测诺如病毒的方法。   据了解,在诺如病毒的提取纯化、快速检测及鉴定分型上,赛默飞拥有灵活的组合方案,满足不同层次的应用需求。针对食物中诺如病毒的检测包括:完全自的样品制备系统Pathatrix 仪, QuantStudioTM7全功能实时荧光定量PCR平台,TaqMan 探针试剂和微流体芯片。可实现快速的提取样本,同时检测包括诺如病毒在内的19种引起腹泻的肠道病原体。   传统的样品处理方法需要洗提与纯化步骤,昂贵, 不灵敏,不准确,而通过Pathatrix 系统可以制备出经过捕获、浓缩和清洁的样品,有助于对所选的检测方法获得更为可靠、精确的结果。由于Pathatrix 系统的浓缩效应,获得结果所需的时间也大为缩短。   Pathatrix 完全兼容一系列检测技术,足够灵活适用于各种类型的食物,不需要额外的分析步骤,以较少的试剂处理更多的检测样品。   另一个荧光定量RT-PCR产品,是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度,具有灵敏度高、操作简单快捷、不易污染等特点,近年在诺如病毒检测中得到较快的发展。QuantStudioTM7 Flex实时荧光定量PCR体统一如既往地提供了ViiATM 7系统所具备的可靠性能、灵敏度和准确性,适用于中等至高通量实时荧光定量PCR,有助于提升实验室的多功能性。只需一台仪器即可在96孔、快速96孔和384孔形式或TaqMan Array微流体芯片之间更换。利用不同的染料、形式和自动化应用潜能,使不同应用之间的切换变得更为简单。   据赛默飞科技项目负责人告诉科技日报记者,RT-PCR一步病毒检测即用试剂盒90分钟出结果,可大大降低实验间的差异。CeeramToolsTM一体化、即用型RT-PCR一步法试剂盒,可提供检测和鉴定试剂,快速检测诺如病毒(GI型和GII型)、甲型肝炎HAV、戊型肝炎HEV等。这些功能强大的试剂盒对于高达100%病毒特异性和低至5个基因组拷贝的样本都能在一次反应中灵敏检测到,这种即用型产品还意味着最少的手工操作时间。
  • Alpha助力DNA甲基化表型调控新发现
    DNA甲基化(DNA methylation)是指在DNA甲基化转移酶的作用下,在基因组CpG二核苷酸的胞嘧啶5' 碳位共价键结合一个甲基基团。为DNA化学修饰的一种形式,能够在不改变DNA序列的前提下,改变遗传表现。DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。Nature上一项新的研究揭示了一种跨染色质调节途径,即NSD1(一种组蛋白甲基转移酶)介导的H3K36me2是在基因间区域招募DNMT3A和维持DNA甲基化所必需的,并将异常的基因间CpG甲基化与人类肿瘤生长和过度发育相关联在一起。作者发现了一个有趣的现象:塔顿布朗拉赫曼综合征(Tatton–Brown–Rahman syndrome, TBRS)是一种儿童过度生长障碍,是由生殖系统DNMT3A(DNA甲基转移酶3A)突变导致的。儿童期巨脑畸形综合征(Sotos syndrome)是由NSD1(组蛋白甲基转移酶)的单倍剂量不足引起的。这两种疾病具有相同的临床特征,这就非常有意思了:这预示着组蛋白修饰和DNA甲基化修饰可能存在机制上的关联性。首先,研究人员通过全基因组分析和ChIP-seq分析方法发现,组蛋白甲基化修饰H3K36me2和H3K36me3的富集区域非常类似,且明显区别于其他组蛋白甲基化修饰如H3K9me3和H3K27me3所划分的区域。而且H3K36me2和H3K36me3水平与CpG甲基化呈正相关,这与之前报道的H3K36me3介导靶向DNMT3B的活性一致。然而,由于这种相互作用仅限于基因小体,染色质水平上的调控机制并不清楚。在进一步的检测和比较全基因组分析,发现H3K36me3在基因体中表现出特征性的富集,而H3K36me2则表现出更为弥散的分布,包括基因区和基因间区。与H3K36me3相比,DNMT3A选择性富集在H3K36me2高水平区域。接下来,就是我们的独家法宝Alpha技术大显身手的时候了。研究人员采用体外高灵敏度、匀相免疫AlphaLISA技术来阐明H3K36me2介导的DNMT3A募集特异性背后的机制。首先GST标记DNMT3A,纯化后将GST-DNMT3A与生物素化的核小体(不同甲基化的H3K36)置于384孔板。依次加入谷胱甘肽受体微珠,链霉亲和素供体微珠。避光反应60min后置于Envision多模式读板仪中对信号进行检测。通过亲和曲线分析可得知,DNMT3A与H3K36me2修饰的核小体的亲和力最高,其次是H3K36me3,但不与其他价态结合。这些结果表明DNMT3A可以识别H3K36两种甲基化状态,但对H3K36me2的亲和力更强。同时,作者也在体外NSD1突变细胞和临床Sotos综合症病人的血样本中验证组蛋白H3K36甲基化与DNA甲基化修饰的相关性,揭示DNMT3A优先选择H3K36二甲基化区域,促进基因间区的DNA甲基化。这一机制在疾病发生过程中有潜在的生物学意义。珀金埃尔默公司一如既往的为用户提供客制化Alpha Assay检测试剂和高品质的检测设备:EnVision多标记微孔板读板仪EnSight多标记微孔板读板仪Victor Nivo多标记微孔板读板仪参考文献Weinberg D N, Papillon-Cavanagh S, Chen H, et al. The histone mark H3K36me2 recruits DNMT3A and shapes the intergenic DNA methylation landscape[J]. Nature, 2019, 573(7773): 281-286.Dor Y, Cedar H. Principles of DNA methylation and their implications for biology and medicine[J]. Lancet. 2018
  • 岛津推出牛奶中喹诺酮类抗生素残留的三重四极杆质谱法检测方案
    喹诺酮类(Quinolones)是一类含有4-喹诺酮母核的化学合成抗菌药,它的抗菌谱广、抗菌活性强,广泛应用于畜牧、水产等养殖业中。然而,喹诺酮类药物有潜在的致癌性和遗传毒性,同时还容易使病菌产生耐药性。因此,喹诺酮类药物残留问题越来越引起人们的关注。美国FDA已于2005年宣布禁止用于治疗家禽细菌感染的抗菌药物恩诺沙星的销售和使用。联合国粮农组织/世界卫生组织食品添加剂专家联席委员会、欧盟都已制定了多种喹诺酮类药物在动物组织中的最高残留限量。 高效液相色谱-串联质谱联用技术是近些年来发展很快的分析技术,具有很高的选择性和灵敏度,对复杂基质中的抗生素类残留具有很强的定性能力,准确度高,是目前超痕量残留分析的首选方法。 岛津公司建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪和三重四极杆质谱仪联用测定动物源性食品中14种喹诺酮类抗生素的方法。样品经处理后,用超高效液相色谱LC-30A在7 min内实现快速分离,三重四极杆质谱仪LCMS-8040进行定量分析。使用外标法内绘制14种喹诺酮类抗生素的校准曲线,线性良好,相关系数为0.999以上;对不同浓度的标准溶液进行精密度实验,连续6次进样保留时间和峰面积的相对标准偏差分别在0.437 %和4.937%以下,表明仪器精密度良好。 了解详情,请点击&ldquo 超高效液相色谱三重四极杆质谱联用法测定牛奶中的喹诺酮类抗生素残留&rdquo 。 关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所为扩大中国事业的规模,于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司。 目前,岛津企业管理(中国)有限公司在中国全境拥有13个分公司,事业规模正在不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳及成都5个分析中心;覆盖全国30个省的销售代理商网络;60多个技术服务站,构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。 岛津作为全球化的生产基地,已构筑起了不仅面向中国客户,同时也面向全世界的产品生产、供应体系,并力图构建起一个符合中国市场要求的产品生产体制。 以&ldquo 为了人类和地球的健康&rdquo 为目标,岛津人将始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn。
  • 会议进行时新诺仪器受邀2023年全国粉末冶金学术会议 10.26-28日 新诺敬请期待您的光临
    新诺仪器集团有限公司受邀参加2023年全国粉末冶金学术盛会,助力科研,新诺可是认真的,为培养人才和解决国外“卡脖子”问题作出贡献,欢迎各位老师和同学们莅临参观指导。会议时间2023年10月26-28日会议地点山东烟台主办单位粉末冶金产业技术创新战略联盟中国机械工程学会粉末冶金分会中国有色金属学会粉末冶金及金属陶瓷学术委员会中国金属学会粉末冶金分会中国机械通用零部件工业协会粉末冶金分会中国钢结构协会粉末冶金分会6中国有色金属加工工业协会粉末冶金分会中国材料研究学会粉末冶金分会承办单位粉末冶金产业技术创新战略联盟协办单位新之联伊丽斯(上海)展览有限公司金属粉体材料概念验证平台会议日程10月27日(星期五)全天(一)领导致辞及讲话1. 山东省科协主席、中国工程院院士凌文2. 国家新材料产业发展专家咨询委员会主任、中国工程院院士干勇3. 烟台市人民政府领导4. 相关主管部门领导(二)主会场大会报告(上午)1. 新时期结构材料发展战略——中国工程院院士、国家新材料产业发展专家咨询委员会主任、中国工程院原副院长 干勇2. 智能制造的数字化转型与质量控制——中国工程院院士、山东省科协主席 凌文3. 质量基础支撑全产业链高质量发展——中国工程院院士、 国际钢铁工业分析委员会终身荣誉主席、CSTM标委会主任委员 王海舟4. 粉末冶金增材制造在先进核反应堆应用的研究——中国科学院院士、北京科技大学 葛昌纯5.中国粉末冶金产业发展现状与展望——联盟理事长、中国钢研科技集团有限公司董事长 张少明6. 粉末冶金流变成形技术及其在惰性阳极制造中的应用研究——联盟副理事长、中南大学原副校长 周科朝大会报告(下午)7. 碳纳米相增强铜基粉体材料的界面结构与性能调控——昆明理工大学副校长 易健宏8. 复合粉体与高性能涂层——中国钢研科技集团有限公司副总经理 于月光9. 粉末冶金制品抗疲劳制造技术与应用——北京科技大学教授 曲选辉10. 异构钛基金属-金属复合材料的设计及强化机理——中南大学教授 刘咏11. 中国粉末冶金零件产业发展面临的挑战——东睦新材料股份有限公司副总经理 曹阳12. 面向聚变堆应用的W/Cu材料连接技术及研究进展——合肥工业大学教授 程继贵13. 增材制造钛合金的超声滚压表面强化技术的研究——华南理工大学教授 肖志瑜14. 3D打印现状与趋势——浙大城市学院教授 汤慧萍10月28日(星期六)全天(三)平行分会场1、分会场1召集人:曹阳、王林山、张德金地点:烟台金海岸希尔顿酒店2层多功能厅领域:A铁、铜基粉末冶金材料及制品2、分会场2召集人:王铁军、严彪、刘一波地点:烟台金海岸希尔顿酒店2层1号会议室领域:A难熔金属及硬质合金、B磁性材料和电工材料3、分会场3召集人:曲选辉、宗贵升、陈宏霞地点:烟台金海岸希尔顿酒店2层3号会议室领域:A 金属增材制造 (3D 打印) 技术、B 粉末注射成形技术、C 粉末冶金表面技术4、分会场4召集人:程继贵、熊翔、肖志瑜地点:烟台金海岸希尔顿酒店2层2号会议室领域:A 粉末制备、成形及烧结、B 有色及稀有金属粉末冶金、高温合金、C 摩擦及减磨材料、多孔材料、D 新材料、新技术、新产品、新装备助力科研,新诺相伴!新诺仪器新款波段加压自动压片机和新一代波段升温双平板热压机将在此次会议亮相展示,新诺仪器作为仪器行业的供应商,将始终秉承助力科研领域的发展,一如既往的支持广大科研人员的创新研究,为广大用户提供更加优质的服务!新诺仪器自动压片机-智能自动,液晶显示屏,波段加压-波段保压-自动补压-定时泄压,模具压强自动换算,带油缸超位开关,带防护罩,可根据用户需求定制特殊规格压片机。新诺仪器手动热压机,新一代程序波段升温-双平板加热,300℃/500℃,一体式结构,上加热板固定,测试稳定性好,采用进口隔热板。
  • 专访Illumina: 百元基因组时代,承诺了就会努力实现
    p   CMEF2017春季博览会上,Illumina的NovaSeq系列再次吸引了人们的目光。有了“百元基因组”、“高通量”等标签,NovaSeq系列备受市场青睐。距离NovaSeq发布日期已过了5个月,NovaSeq系列的订单也已经在全球蔓延,不少国家完成了装机测试。在CMEF2017春季博览会现场,记者有幸采访到了Illumina大中华区市场总监倪涛先生。他表示,“未来NovaSeq的市场一定是远远大于我们的想象。” /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201705/insimg/5e0316fb-e59c-45bc-a2e1-c5e0848c92a1.jpg" title=" 201705171701021509_副本.jpg" / /p p    strong “充分利用”决定市场前景,未来远大于想象 /strong /p p   今年1月份,Illumina在JP摩根大会上发布了NovaSeq系列,这也是Illumina有史以来推出的最强大的测序仪,它将为对通量有更高要求的各种基因检测开启更高性能的全新市场。 /p p   如今,Illumina的这款“史上最强”测序仪已经打开市场。倪涛向生物探索介绍到,“NovaSeq最大的市场优势在于它是一个全新的平台。对于这款仪器的研发,Illumina花了多年,汇集了几十项专利和技术创新。在硬件、化学以及软件处理上,它有着多项创新。NovaSeq能够给市场带来的最大好处在于它的快速、高通量和应用的可扩展性。就通量而言,原来市场上通量最高的HiSeq X 10,单机一个run,能够产出1.8T的数据,而根据发布的参数,如果NovaSeq系列S4,一个Run可以产出6T的数据。” /p p   NovaSeq从本季度(第二季度)开始规模出货,根据Illumina 2017年Q1财报,在本年度第一季度,Illumina共收到了135个NovaSeq测序仪的订单。倪涛说,“目前NovaSeq市场供不应求,很多客户都在等着发货,目前国内也有少量装机。”近期,国内外到货NovaSeq系列的企业也纷纷发布了测序数据和质量报告。“无论是国际还是国内,用户反馈的结果都要优于NovaSeq发布时公布的参数,包括数据产出率和质量。” /p p   对于NovaSeq未来的销售量,倪涛认为,“我们现在对基因的了解还处在刚起步的阶段。NovaSeq未来的销售量如何,关键在于大家有没有把它用起来,这可能要依靠整个行业,包括我们的合作伙伴、临床以及科研机构有没有充分地把它的临床意义和科研意义发挥出来。未来NovaSeq的市场一定是远远大于我们的想象。” /p p    strong NovaSeq与HiSeq X 10两两互补,带来双赢 /strong /p p   众所周知,HiSeq X 10目前在市场上拥有很大的用户群体。NovaSeq系列的推出,是否会给HiSeq X 10的用户带来影响?这也是NovaSeq系列发布以来争议比较大的话题。尤其是当看到NovaSeq成本比HiSeq X10低,通量是HiSeq X Ten的3倍,并且可以单独购买,很多人会疑惑购买HiSeq X 10的用户是不是亏了。对于这个问题,倪涛表示,“NovaSeq和HiSeq X 10是一个互补的关系。HiSeq X 10聚焦于全基因组序列测序,目前的市场成本仍然是最好的。NovaSeq除了全基因组测序之外,在其他应用上还拥有独特的优势,并且具有更加广阔的应用,尤其是在外显子测序、靶向基因测序、全转录组测序、甲基化测序等方面的应用。” /p p   为了消除HiSeq X 10用户的顾虑,Illumina与各家用户进行了深入的讨论和交流。“通过良好的沟通和双方配合,原来的HiSeq X 10用户对于NovaSeq有了更深的理解,并积极做好了包括技术迁移和技术平台发展的规划。我们相信这对于现有用户来说带来了双赢的局面。” /p p    strong 百元基因组时代,承诺了就会努力实现 /strong /p p   谈及百元基因组时代时,倪涛觉得,“几年前,在没有实现1000美元基因组的年代,Illumina承诺说要实现这个目标,即使是设备还未问世,大家也都积极地推动这个进程,把需求市场准备起来。一旦1000美元产品成熟,人们就已经可以充分地用好它。百元基因组时代也是这样,虽然目前技术上还不能达到,但是Illumina给出了承诺就会去努力实现。” /p p   2014年Illumina推出HiSeq X 10系列之后,把基因组测序成本降到了1000美元,这对整个行业的推动作用非常大,给科研和临床带来了深远的影响。倪涛表示,“现在我们提出将基因组测序成本未来降低至100美元的愿景,对整个市场也会有非常大的推动作用。当全基因组成本下降至100美金,原来很多不能做的事情,都可以考虑做了。我们相信有很多的科研和临床工作者已经往这个方向考虑了。” /p p   100美元,有时候就是一顿饭的钱。倪涛乐观地看到,“一旦技术成熟,大家都会去利用百元基因组的力量来做更多今天没有想到的事情。我觉得这件事情一定会发生,我也相信它会对了解人类疾病的发生和发展有巨大的推动作用,而且中国在这中间会扮演很重要的角色。” /p p    strong 结语 /strong /p p   长期以来,Illumina产品发布都处在快节奏中,从HiSeq X 10到NovaSeq,也不过是短短的3年时间。在采访的最后,倪涛告诉生物探索,“Illumina从上到下都有一种强烈的使命感——要真正做到解放基因组的力量,造福人类健康。这种使命感让我们充满信心,朝着对人类健康最有利的那个方向走下去。” /p
  • 纳锘仪器荣获岛津代理商进步奖
    2012年1月8日,岛津公司第二十三届代理商会议在美丽的深圳大梅沙召开。会议由岛津企业管理(中国)有限公司的吴劲松经理主持。 上海纳锘仪器有限公司的孙孝森总经理和吴汉锋经理参加了此次会议,在此次会议的分析仪器事业部表彰环节中,因上海纳锘仪器有限公司在2011年经过全体员工的团结努力,圆满完成了岛津产品销售的2011年下半期任务,在2012年1月的岛津代理商全体会议上,岛津董事长古泽宏二先生给与&ldquo 岛津苏州产品代理商进步奖&rdquo 的表彰。这给与了纳锘仪器很大的鼓励与信心,在接下来的时间里,纳锘仪器全体员工将继续努力再创佳绩! --------------------------------------------------------------------------- 上海纳锘仪器有限公司 地址:上海市莲花南路1388弄8号楼碧恒广场1503室[201108] 电话:021-60900829,60900830,61131031,61131051 传真:021-61131052 E-Mail:info@nano-instru.com ---------------------------------------------------------------------------- 浙江办事处 地址:浙江杭州莫干山路425号瑞祺大厦814室[204888] 电话:0571-81954578 传真:0571-81954579 E-Mail:info@nano-instru.com ---------------------------------------------------------------------------- 江苏办事处 地 址:江苏省苏州市金门路158号协和大厦2107室[215004] 电话:0512-87772272,0512-87772271 传真:0512-87772270 E-Mail:info@nano-instru.com 纳锘仪器--提供给您纳米级的专业细致服务!
  • 普洱咖啡协会立项《咖啡豆中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》团体标准
    各有关单位:根据《普洱咖啡协会团体标准制定程序》的相关规定,经我会标准化技术委员会研讨、审查,批准《咖啡豆中草甘膦及其代谢物氨甲基膦酸残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法》团体标准进行立项,我会将牵头开展团体标准的制订工作。如有单位或个人对该标准项目存在异议,请在公告之日起五个工作日内将意见反馈至我会秘书处。同时欢迎与该团体标准有关的高等院校、科研机构、相关企事业单位、社会组织、专家学者等加入标准的研制工作,有意参与该团体标准研制工作者请与我会秘书处联系。联系人、手机:许祐慈(13987941464)电子邮箱:987604287@qq.com地址:云南省普洱市思茅区康平大道6号普洱咖啡协会二〇二三年七月十八日 团体立项的通知.pdf
  • 永诺生物&达健生物达成战略合作|​推进基于数字PCR技术早期癌症精准诊断
    为积极响应“健康中国2030”国家战略,推动数字PCR技术在精准医疗及肿瘤早诊早治等场景的落地,2022年8月3日,永诺生物与达健生物达成全方位合作,双方将发挥各自技术优势,联合推动癌症早期检测的全国布局,全面建立基于MicroDrop数字PCR全生命周期的癌症早期检测及复发监控新模式。永诺生物董事长赖炳权与达健生物首席科学家邵建永等双方管理层人员出席签约仪式。双方签署合作协议(左:达健生物 右:永诺生物)永诺生物与达健生物的合作愿景一致,彼此将利用自身资源和行业优势为对方提供全方位的支持,联合探索创新的院端业务合作模式,深化合作空间。此次签约,双方明确了合作方向、合作目标、合作原则和合作内容,在接下来的市场推广中全力合作,重点布局临床端的准入以及商业化落地,共同助力提高我国医疗机构的宝贵资源,为中国用户提供更便捷,更优质的健康服务,助力健康中国战略落地。双方管理层人员出席签约仪式作为癌症高发国家,癌症防治是国家健康战略关注的焦点之一。《健康中国行动(2019—2030年)》将癌症防治行动列为这一时期重大行动之一,确保到2022年,高发地区重点癌种早诊率达到55%以上。伴随我国人口老龄化的持续深化,近几年我国癌症发病率及死亡率呈现持续上升的趋势,癌症防控形势严峻。癌症是影响我国国民健康的重大公共卫生问题之一。数据显示,虽然近十年来我国癌症患者5年总体生存率已有效提升,从30.9%上升到40.5%,但这一水平与发达国家仍有很大差距。本次永诺生物与达健生物携手合作,将助力癌症的早期发现、早期诊断及早期治疗等工作的落地。永诺董事长赖炳权致辞“目前行业已有初步共识,数字PCR的绝对定量能力及灵敏性在ctDNA甲基化检测、病原体定量、MRD检测等方面相对于其他平台在性能上有明显优势。永诺生物推出的MicroDrop系列数字PCR平台,我们持开放合作的态度,希望与合作伙伴共同开发能够解决临床问题的应用试剂,共建数字PCR生态,推动数字PCR这一创新的分子诊断平台在临床的真正普及。永诺生物专注于微滴式数字PCR技术的研发和应用,达健生物是癌症早筛领域的优秀企业代表,此次合作,即能推动肿瘤早筛早诊试剂盒的开发报证及市场化进度,也是数字PCR应用于癌症防控的重要里程碑事件之一,将助力永诺数字PCR在临床的普及。”达健首席科学家邵建永致辞邵建永教授表示:“中国是癌症大国,无论是发病率还是死亡率均高于全球平均水平。如何能更早地对于癌症患者早发现、早诊断、早治疗,是中国抗癌事业成败与否的关键领域之一。利用现代化的分子诊断技术对中国常见癌症进行早检早诊,将能提高早诊率,显著提高癌症患者的五年生存率,实现最好的卫生经济费效比。达健生物一直专注于癌症诊断领域,希望为广大群众提供关于癌症的早诊早检、液体活检和预后监测领域最完整的解决方案。这次的合作,希望能借助永诺生物的数字PCR平台,助力达健更好地布局中国常见癌症单癌种、多癌种乃至泛癌种早诊早检产品的研发,为癌症精准诊疗产品市场化助力。”战略合作签约仪式现场关于 广州永诺生物科技有限公司广州永诺生物科技有限公司是一家专注于单分子第三代数字聚合酶链式反应分析系统产业化的高新技术企业,自主研发的MicroDrop系列数字PCR系统打破了国外技术垄断,成为国内首款具有自主知识产权的高通量微滴式数字PCR系统,基于这一自主平台开发的一系列肿瘤早筛和病原体定量试剂盒也正引领着分子诊断的新未来。永诺生物参与制订中华人民共和国医药行业标准《YY/T 1824-2021 EB病毒核酸检测试剂盒(荧光PCR法)》,《国家药品标准物质(SARS-CoV-2核酸检测试剂国家标准品)》的标定。永诺生物致力于让基因分析更精准,推动基因分析进入绝对定量时代。关于 广州达健生物科技有限公司广州达健生物科技有限公司自2009年成立以来,一直专注于癌症早诊和精准诊断产品研发和生产,致力于癌症诊疗全流程应用场景的单癌种、多癌种乃至泛癌种早诊早检产品的研发。目前已完成基于脱落细胞和外周血游离DNA甲基化的辅助诊断产品的研发,包括膀胱癌、肠癌、甲状腺癌等中国常见的10余癌症,产品技术包括荧光定量PCR,数字PCR和液体活检等高灵敏技术。产品正在进行已经进入临床试验中期阶段,部分产品已经完成临床试验并进入审评阶段。公司及其全资子公司安徽达健分别在广州和安徽芜湖建立2个GMP标准厂房,广州联合易检检验实验室医学检验所和芜湖达健医学检验所实验室等两个第三方医学检验所,能提供包括荧光定量PCR、数字PCR、一代测序、二代测序(NGS)等分子诊断平台全方位的分子检测服务。广州达健始终秉承着“达仁济世,健康中国”的理念,希望在癌症的早诊早检、液体活检和预后监测等领域提供最完整的解决方案,保障人民健康。
  • 千呼万唤始出来,测定N-二甲基亚硝胺的新标准终于上线啦!
    测定N-二甲基亚硝胺的新标准!本次标准更新,新增了QuEChERS法测定,Detelogy带你一起解读!亚硝酸盐广泛存在于食品之中,很容易与胺化合,生成亚硝胺。亚硝胺与苯并(α)芘、黄曲霉素是世界公认的三大强致癌物质。N-二甲基亚硝胺是N-亚硝胺类化合物的一种,食品中天然存在的N-亚硝胺类化合物含量极微,但其前体物质亚硝酸盐和胺类广泛存在于自然界中,在适宜的条件下可以形成N-亚硝胺类化合物。N-二甲基亚硝胺是国际公认的毒性较大的污染物,具有肝毒性和致癌性。N-二甲基亚硝胺在啤酒、肉制品及鱼类腌制品等食品和环境中广泛存在。肉制品加工过程中会使用亚硝酸盐添加剂,使其产生理想的粉红色,增加风味,且还具有抗氧化的效果。但是,亚硝酸盐在腌肉中可以转化为亚硝酸,极易反应生成致癌性物质:N-亚硝胺类化合物;水产品腌制过程中使用的粗盐通常含有硝酸盐、亚硝酸盐,加上微生物能将硝酸盐还原成亚硝酸盐,从而蓄积亚硝酸盐。在适宜的条件下,亚硝酸盐与胺类发生亚硝基化作用,最终生成N-二甲基亚硝胺。2023年9月25日,国家卫生健康委员会发布了85项食品安全国家标准和3项修改单(卫健委2023年第6号公告),其中就有GB 5009.26-2023《食品中N-亚硝胺类化合物的测定》。此次更新,大家的目光都聚焦在新增的第二法:QuEChERS-气相色谱-质谱/质谱法上,相比起其他实验方法,不仅精简了实验设备,在一定程度上也加快了实验的效率。下面一起来看看!实 验 步 骤 提 取 干制品称取5g于50mL离心管,加入5mL水,振荡混匀(鲜样品称取10g置于50 mL离心管中),加入N-二甲基亚硝胺内标中间液(1μg/mL)50μL,向其准确加入10mL乙腈,MultiVortex多样品涡旋混合器调节3000rpm,涡旋振荡2min后置于-20℃冰箱冷冻20min,取出后加入陶瓷研磨珠1粒以及4g硫酸镁和1g氯化钠,放入MGS-24高通量智能动植物研磨均质仪振荡2min,置于冷冻离心机中,转速9000r/min,10℃离心5min,上清液待净化。 净 化 称取150mgPLS-A粉末(或1g增强型脂质去除EMR-Lipid萃取粉剂或同级品)于15mL离心管中,加入5mL水于MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋振荡,立即加入5mL待净化上清液涡旋振荡1min,置于冷冻离心机,9000r/min,10℃离心5min,待除水。 除 水 称取1.6g硫酸镁和0.4g氯化钠于另一15mL离心管,加入上述待除水净化液于MultiVortex多样品涡旋混合器涡旋振荡2min,置于冷冻离心机中,转速9000r/min,10℃离心5min。取上层有机相经0.22μm微孔滤膜过滤后。上机测定。“PreferenceDetelogy优选仪器
  • 脂溶性聚合物环氧树脂及甲基硅油分子量分布测定
    脂溶性聚合物环氧树脂及甲基硅油分子量分布测定刘兴国 熊亮 曹建明 金燕美丽而寒冷的冬天又到了,室外大雪纷飞,喜欢运动的小伙伴们由户外转战室内,场馆内羽毛球、乒乓球、篮球大战相继上演,运动的身姿和蓝绿色地面、明亮的篮板构成了一道道靓丽的风景线。你可知道这漂亮的场地和器材是用什么材料制造的吗?学化学的你可能回答:“有机材料。”其实这些都是聚合物材料,绿色和蓝色的防滑地面材料为环氧树脂,有机玻璃的篮板材料为聚甲基丙烯酸甲酯。这些均为脂溶性聚合物材料的产品,它们已渗透到日常生活和高端科技的方方面面,从每天要用到的塑料袋到航天材料都可看见它们的身影。 今天,飞飞给大家重点介绍两种脂溶性聚合物。一种是低分子型环氧树脂,是由双酚A和环氧丙烷在氢氧化钠作用下缩聚而成,室温下为黄色液体或半固体,耐热、耐化学药品、电气绝缘性好,广泛用于绝缘材料、玻璃钢、涂料等领域,是常用的基础化工材料。另外一种为甲基硅油,它具有突出的耐高低温性、极低的玻璃化温度、很低的溶解度参数和介电常数等,在织物整理剂、皮革涂饰剂、化妆品、涂料和光敏材料等领域广泛应用。 分子量分布是表征聚合物的重要指标,对聚合物材料的物理机械性能和成型加工性能影响显著。常用测定方法有:粘度法、激光光散射法、质谱法和体积排阻色谱法 (SEC法),其中凝胶渗透色谱法(GPC法)作为体积排阻色谱法的一类,方便快捷、设备普及,具有广泛适用性。通过本文,飞飞给大家介绍以聚苯乙烯为标样,GPC法测定低分子量环氧树脂以及甲基硅油分子量的方法,通过对分子量分布的准确控制可以很好地保证产品的质量。变色龙软件GPC扩展包可以非常方便地将采集的GPC数据进行处理,快速地得到分子量分布的信息,而且该扩展包完全免费。 本实验仪器配置如下:仪器:赛默飞 U3000高效液相色谱仪泵:ISO3100 Pump自动进样器:WPS 3000SL Autosampler柱温箱:TCC3000 Column Compartment检测器:ERC 521示差检测器变色龙色谱管理软件 Chromeleon CDS 7.2 1. 环氧树脂分子量测定双酚A型环氧树脂基本结构及以它为材料制造的体育馆环氧地坪见图1:图1 双酚A型环氧树脂基本结构及体育馆环氧地坪色谱条件如下:分析柱:TSKgel G2500HXL 300*7.8mm,P/N:0016135(适用分子量范围100-20000);TSKgel G3000HXL 300*7.8mm,P/N:0016136(适用分子量范围500-60000);TSKgel G5000HXL 300*7.8mm,P/N:0016138(适用分子量范围1000-4000000);三根色谱柱串联分析。柱温:25℃RI检测器:过滤常数:2s,温度:35℃流动相:四氢呋喃,流速1.0mL/min进样量:15µL 对照品为聚苯乙烯,分子量分别为162,370,580,935,1250,1890,3050和4910;称取适量对照品用四氢呋喃超声溶解,浓度0.02mg/mL。样品用四氢呋喃溶解,浓度0.1mg/mL,测定谱图见图2。 图2不同分子量聚苯乙烯对照品测定谱图注:580和370两个对照品出厂报告上polydispersity多分散系数分别为1.13和1.15,分子量集中度差,所以峰形呈现为多簇小峰。其余对照品多分散系数均小于1.05,峰形呈对称单峰。 校正曲线及相关系数如下: 图3 校正曲线校正曲线方程y=-0.0006x3+0.0502x2-1.5496x+20.4439,相关系数R=0.9998。不同厂家不同批次环氧树脂样品测定结果如下: 表1 环氧树脂样品测定结果样品名称 重均分子量Mw样品-1 387样品-2 401样品-3 396 2. 甲基硅油分子量测定测试甲基硅油的分子量及其分布,常用的GPC方法是采用甲苯或四氢呋喃作为流动相,但是由于甲苯属于管制类试剂,不易购买,因此飞飞采用四氢呋喃(THF)作为流动相来测定硅油的分子量及其分布,结果显示分离与色谱峰形均较好。对照品为聚苯乙烯,分子量分别为1210,2880,6540,22800,56600和129000;称取适量对照品用四氢呋喃超声溶解,浓度约1.0mg/mL。样品用四氢呋喃溶解,浓度1mg/mL。色谱条件如下:分析柱:Shodex KF-805L 8.0*300mm(适用分子量范围300-2000000);柱温:30℃RI检测器温度:31℃流动相:四氢呋喃,流速0.8mL/min进样量:100µL 对照品测定谱图及校正曲线如下:图4 对照品测定谱图及校正曲线 校正曲线方程y=-0.0182x3+0.5987x2-7.1522x+34.6655,相关系数R=0.9996。甲基硅油样品测定结果数均分子量为20727,重均分子量为36273,Z均分子量为59280,Z+1均分子量为91320。总结到这里,飞飞给大家介绍了采用U3000液相结合变色龙软件采集和处理数据,分析低分子量环氧树脂和甲基硅油分子量的方法,由于两者分子量范围差异较大,实验采用了两组不同分子量的聚苯乙烯标准品作为对照品。对于环氧树脂由于需要测定的是低分子量聚合物且对照品分子量接近,所以采用了三根截留分子量不同的凝胶柱串联进行测定,结果更为准确。变色龙GPC分子量计算扩展包功能强大,导入和使用方便,为广大变色龙工作站用户扩展使用GPC功能带来便利。本文介绍的为脂溶性聚合物的分子量测定,对于水溶性聚合物的分子量分布测定,飞飞这里有较多应用文章供大家参考,感兴趣的朋友可联系我索取,这里给大家提供一篇最常用的,右旋糖酐40的分子量分布测定,扫描以下二维码既可查阅。
  • 解密“N-二甲基亚硝胺”,浅谈基因毒性杂质
    2018年中旬,长春长生的疫苗案还未彻底了结,缬沙坦原料药事件让N-二甲基亚硝胺(NDMA)又一次上了热搜。 时至今日,风波犹存,欧盟范围内对所有沙坦类药物进行审查。之后EMA通报,分别在印度药企Hetero Labs和Aurobindo Pharma生产的氯沙坦及厄贝沙坦原料药中,同样发现了含量极低的亚硝胺类化合物。美国FDA 仍在继续评估含缬沙坦的药物,并将获得的新信息持续更新「召回范围内的药物清单」和「不在召回范围内的药物清单」。 “治病”?“致病”!众所周知,药品是特殊的商品,它可以预防、治疗、诊断人的疾病。近年来,多种新药例如PD1/PD-L1免疫抑制剂的问世,让攻克癌症不再是梦想。 同时,药品的副作用及其安全性很大程度上决定其使用效果,有时不仅不能“治病”,还可能“致病”,甚至危及生命安全,所以药品生产商和监管部门对药品追溯和管理承担着不可或缺的责任。 揭开“基因毒性杂质”真面目NDMA是亚硝胺化合物的一种,而亚硝胺化合物、甲基磺酸酯、烷基-氧化偶氮等又均为常见的基因毒性杂质。基因毒性杂质(或遗传毒性杂质, Genotoxic Impurity, GTI)一般指能直接或间接损伤细胞DNA,产生致突变和致癌作用的物质,具有致癌可能或者倾向。 基因毒性杂质向来受到了严格的监控,2006年爆发甲磺酸奈非那非(维拉赛特锭)事件后,欧洲药品管理局( EMA)随即颁布了《基因毒性杂质限度指南》,人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH)与美国食品与药品监督管理局( FDA)出台了相应的法规,中国国家食品药品监督管理总局也密切跟踪国际药品质量控制技术要求,不断完善现有药典收载技术指南,包括方法学验证、药品稳定性评价指导原则以及药品基因毒性杂质评价技术指南等。 药物合成、纯化和储存运输(与包装物接触)等过程中,多个环节均有产生或有可能产生基因毒性杂质。在工艺研究中采用“避免-控制-清除(ACP)”的策略能够最大限度减少基因毒性杂质对原料药物的影响,从而快速灵敏的监测分析手段变得尤为重要。 这时候,飞飞在此!今天赛默飞借助全新一代LC-QQQ技术,让我们一起助力“解密N-二甲基亚硝胺”。 赛默飞针对药品中基因毒性杂质液质检测解决方案 飞飞芳基磺酸酯类基因毒性解决方案Thermo Scientific™ 全新液相色谱三重四极杆质谱TSQ Fortis™ 平台建立了检测8种磺酸酯类的方法(苯磺酸酯类3个、对甲苯磺酸酯类3个、1,5-戊二醇单苯磺酸酯、 1,5-戊二醇二苯磺酸酯)。本方法灵敏度高、专属性强、稳定性好,可以满足各药企对此类基因毒性杂质的检测要求,可为基因毒性杂质风险监控提供有效的技术支持。结果如下:图1. 8种芳基磺酸酯提取离子流图(点击查看大图) 图2. 部分化合物标准曲线图(点击查看大图) 可以看出实验建立了三重四极杆液质联用仪(TSQ Fortis)分析8种芳基磺酸酯类的检测方法。实验结果表明,基于Thermo Scientific™ TSQ Fortis™ 建立的检测方法不仅具有优异的灵敏度和线性范围,同时具备良好的重现性。本方法可用于芳基磺酸酯类基因毒性化合物的日常分析检测。 飞飞N-亚硝基类基因毒性解决方案Thermo Scientific™ TSQ Fortis™ 针对基因毒性物质10个N-亚硝基化合物建立了稳定灵敏的分析方法。该方法在电喷雾离子化(ESI)条件下即可进行有效检测分析,试验结果优异,该方法稳定,快速,满足日常微量基因毒性物质N-亚硝胺类化合物的分析要求。图3. 10个N-亚硝基化合物的色谱图(5ng/mL)(点击查看大图) 图4. 部分化合物标准曲线图(点击查看大图) 从上图中可以看出建立的方法灵敏,快速和稳定性,色谱峰形良好,同时具备优异的重现性,可以满足药品中日常分析N-亚硝基类基因毒性杂质的检测要求。 飞飞总结语此次的应用案例就分享到这里了,不过难道只有这些?不!后续赛默飞更会带来应对基因毒性杂质的多平台解决方案,令“NDMA们” 无所遁形,敬请期待!扫描下方二维码即可获取赛默飞全行业解决方案,或关注“赛默飞色谱与质谱中国”公众号,了解更多资讯
  • 北京友谊丹诺新品发布日立Z-3000石墨管
    日立公司提供的最新 Z-3000型双孔进样石墨管,其优点是增加双倍进样量高达80微升,蒸干的速度加快,缩短了烘干时间。由于增大了进样量,对含量极低的元素的测定成为可能,欢迎有此仪器的用户咨询购买。 010-62233866 北京友谊丹诺科技有限公司 2014.06
  • 沃特世为分析饮料中的2-甲基咪唑和4-甲基咪唑含量提供解决方案
    沃特世ACQUITY UPLC H-CLASS-PDA系统和ACQUITY UPLC/Xevo TQ MS系统分析饮料中的2-甲基咪唑和4-甲基咪唑含量 赵嘉胤.蔡麒.孙庆龙 引言 焦糖色素是一种允许使用的着色剂,我国对焦糖色使用量的规定除个别产品外均为按生产需要适量使用,其中规定仅有亚硫酸铵法生产地焦糖色允许使用在碳酸饮料中。而以加氨或其铵盐制成的焦糖(Ⅲ类氨法焦糖和Ⅳ类亚硫酸铵法焦糖)会产生4-甲基咪唑,并且4-甲基咪唑是一种能够诱发肿瘤的高水平的化学物质。 焦糖色素被广泛用于食品以及饮料中,所以4-甲基咪唑的含量监控也是必须被重视的,由于4-甲基咪唑分子极性很大,含量很低,所以如何快速、准确地检测出其含量,就成为人们现阶段研究的重点。目前我国国家标准中只有《焦糖色中的4-甲基咪唑的测定-高效液相色谱法》,而对于饮料中的4-甲基咪唑则没有相关检测方法。 沃特世(Waters® )公司所提供的整体解决方案,同时来监控饮料中的4-甲基咪唑以及2-甲基咪唑。使用沃特世SPE的固相萃取策略来对于复杂的样品基质进行净化,完成对于4-甲基咪唑以及2-甲基咪唑的提取浓缩,而沃特世HILIC模式的色谱保留,对于极性分子的色谱分离提供完美的效果,最后通过UPLC® H-CLASS PDA以及UPLC/Xevo® TQ MS的分析,完成出色的定性定量工作。 实验条件 样品前处理方案 固相萃取SPE解决方案&mdash &mdash Oasis® MCX (3cc/60mg) 小柱净化取3g饮料样品,超声5分钟,后待净化。 ACQUITY UPLC H-CLASS PDA超高效液相色谱分离条件: 色谱柱: ACQUITY UPLC® BEH HILIC Column 2.1x100 mm,1.7&mu m 流动相 A: 乙腈 流动相 B: 5mM甲酸铵 柱温: 35˚ C 检测波长: 215nm 进样量: 5&mu L 运行时间: 3min 梯度表: Time (min) Flow (mL/min) %A Curve 0.00 0.5 80 6 3.00 0.5 80 6 ACQUITY UPLC Xevo TQ MS超高效液相色谱-串联质谱分析条件: 色谱柱: ACQUITY UPLC BEH HILIC Column 2.1x100 mm,1.7&mu m 流动相 A: 乙腈 流动相 B: 5mM 甲酸铵 柱温: 35˚ C 进样量: 2&mu L 运行时间: 3min 梯度表: Time (min) Flow (mL/min) %A Curve 0.00 0.5 80 6 3.00 0.5 80 6 实验结果及讨论 1、ACQUITY UPLC H-CLASS PDA分析 混合标准品色谱图 饮料空白样品图 基质添加回收色谱图 2、ACQUITY UPLC/Xevo TQ MS分析 混合标准品TIC 3.2.3 茶饮料样品加标与空白对比分析 3.2.4 可乐样品加标与空白对比分析 通过分析结果可以看出,4-甲基咪唑和2-甲基咪唑分子极性很大,一般反相很难保留,多用离子对试剂来增加保留,但由于离子对色谱方式平衡时间很长,增加整体分析周期,同时对于色谱柱以及仪器的损耗很大,最关键是无法进行有效的质谱方法分析。而沃特世公司HILIC模式的极性分析方案可以非常好的进行极性分子的保留,流动相简单,优异兼容质谱条件,使4-甲基咪唑和2-甲基咪唑有非常好的分离效果以及灵敏度。 同时由于目标化合物极性很大,对于前处理的要求非常高,分离提取是个难点,而沃特世公司的固相萃取方案能使样品达到非常好的净化效果,通过Oasis MCX进行保留分离,同时能够减少样品杂质对于色谱柱以及整个仪器系统的损害。由沃特世ACQUITY UPLC H-CLASS-PDA和ACQUITY UPLC / Xevo TQ MS所提供的超高效性能以及灵敏度,使得4-甲基咪唑和2-甲基咪唑的分析达到理想效果。 结论 1.采用ACQUITY UPLC H-CLASS-PDA和ACQUITY UPLC / Xevo TQ MS可以快速高效地对4-甲基咪唑和2-甲基咪唑的含量进行测定,ACQUITY UPLC H-CLASS-PDA灵敏度可以达到1mg/kg,ACQUITY UPLC / Xevo TQ MS灵敏度可以达到1&mu g/kg。 2.应用沃特世固相萃取SPE解决方案配合HILIC模式色谱保留,对于大极性的小分子有很好的保留以及分离提取的作用,达到理想净化效果以及色谱分离效果。 3.从样品前处理到样品色谱质谱分析的整体解决方案,给客户提供一体化的服务解决样品分析过程中可能遇到的所有问题,帮助客户成功! 关于沃特世公司 (www.waters.com) 50多年来,沃特世公司(NYSE:WAT)通过提供实用和可持续的创新,使医疗服务、环境管理、食品安全和全球水质监测领域有了显著进步,从而为实验室相关机构创造了业务优势。 作为一系列分离科学、实验室信息管理、质谱分析和热分析技术的开创者,沃特世技术的重大突破和实验室解决方案为客户的成功创造了持久的平台。 2011年沃特世公司拥有18.5亿美元的收入,它将继续带领全世界的客户探索科学并取得卓越成就。 联系方式: 叶晓晨 沃特世科技(上海)有限公司 市场服务部 xiao_chen_ye@waters.com 周瑞琳(GraceChow) 泰信策略(PMC) 020-83569288 13602845427 grace.chow@pmc.com.cn
  • 应用丨N-二甲基亚硝胺检测前处理解决方案
    亚硝酸盐在腌肉中转化为亚硝酸,极易生成致癌性物质:N-亚硝胺类化合物。在适宜的条件下,亚硝酸盐与胺类发生亚硝基化作用,最终生成N-二甲基亚硝胺。N-二甲基亚硝胺广泛存在于啤酒、肉制品及鱼类腌制品等食品和环境中,可溶于水、乙醇、乙醚、二氯甲烷,用于制造二甲基肼,是国际公认的毒性较大的污染物,具有肝毒性和致癌性。2023年9月25日,国家卫生健康委员会发布了85项食品安全国家标准和3项修改单(卫健委2023年第6号公告),其中就有GB5009.26-2023《食品中N-亚硝胺类化合物的测定》。此次增加QuEChERS-气相色谱-质谱/质谱法(第二法),QuEChERS方法相较于其他前处理方法操作更简单,更容易实现批量前处理,试剂使用量更少,更环保。 样品前处理步骤提取 干制品称取5g于50mL离心管(RC-50004M,50mL尖底) 加入5mL水,振荡混匀(鲜样品称取10g置于50mL离心管中) 加入N-二甲基亚硝胺内标中间液(1μg/mL)50μL,向其准确加入10mL乙腈 MTV3000多管涡旋混合仪2500rpm,涡旋振荡2min,置于-20℃冰箱冷冻20min 取出后加入1颗陶瓷均质子(RC-5003C)以及提取盐包(RC-50106M,内含4g硫酸镁和1g氯化钠) 置于V20垂直振荡器,1300rpm振荡2min 置于冷冻离心机中,转速9000r/min,10℃离心5min 上清液待净化净化 量取5mL水加入15mL净化管(RC-15164M含有150mgHLB-2粉末或RC-15165M,含有1gHolipid) 置于MTV 3000多管涡旋混合仪,2500rpm 涡旋混匀,立即加入5mL待净化上清液涡旋振荡1min 取出置于冷冻离心机,9000r/min,10℃离心5min 待除水除水 取上述待除水净化液加入15mL除水净化管中(RC-15166M,含有1.6g硫酸镁和0.4g氯化钠) 置于MTV3000多管涡旋混合仪,2500rpm涡旋振荡2min 置于冷冻离心机中,转速9000r/min,10℃离心5min 取上层有机相经0.22μm微孔滤膜过滤后 上机测定前处理仪器及耗材推荐Raykol V20垂直振荡器 振荡方式:垂直振荡 振荡速度:500-1800rpm 振幅:32mm样品数量:50mL*20,15mL*38,100mL*10,2mL*52等,96孔板*6,可定制 7寸彩色触摸屏,实时显示速度、工作时间及倒计时等 预约启动,预约时间0-840minRaykol MTV3000多管涡旋混合仪 振荡方式:偏芯振荡 振荡速度:最高速度3000rpm 操作简单,适配各种管架 7寸彩色触摸屏,实时显示速度、工作时间及倒计时等耗材RC-50004M50mL螺口尖底管,PP材质,25支/包,2包RC-50106M萃取盐包:4g MgSO4+1g NaCl,50/盒RC-5003C陶瓷均质子,用于50mL萃取管,100个/瓶RC-15164M15mL净化管:150mg HLB-2,25支/盒RC-15165M15mL净化管:1g Holipid,25支/盒RC-15166M15mL净化管:400mg NaCl+1600mg MgS04, 50支/盒
  • 李灵军合作成果:mNeuCode支持精氨酸二甲基化的靶向蛋白质组分析
    大家好,本周为大家分享一篇发表在Analytical Chemistry上的文章,mNeuCode Empowers Targeted Proteome Analysis of Arginine Dimethylation1,文章的通讯作者是威斯康星大学麦迪逊分校的李灵军教授和国家蛋白质科学中心的常乘、贾辰熙教授。  蛋白质精氨酸甲基化是一种广泛存在于真核生物中且相对保守的翻译后修饰,参与包括RNA加工、DNA修复、染色体组织、蛋白质折叠和基因表达在内的多种生物学过程。蛋白质精氨酸二甲基化在生物过程和人类疾病中发挥着重要作用,但与此同时,精氨酸二甲基化的相对丰度和化学计量通常很低,并且表现出较宽的动态变化范围,这些问题都给分析带来了巨大的挑战。在这篇文章中,作者设计了一种用于二甲基精氨酸代谢标记的mNeuCode标签,并开发了一个名为NeuCodeFinder的软件工具,用于在MS全扫描中筛选NeuCode信号,从而能够在蛋白质组范围内对蛋白质二甲基化进行靶向LC-MS/MS分析。作者将该方法应用到HeLa细胞精氨酸二甲基化的全蛋白质组分析中,证实了该方法的有效性:在70种蛋白质上鉴定到176个精氨酸二甲基化位点,其中38%是新位点。  图1 用于细胞培养代谢标记的mNeuCode的化学设计。含有由稳定同位素标记的甲硫氨酸和精氨酸的不同组合的mNeuCode-I(红色)和mNeuCode-II(蓝色)分别用于两组细胞培养。同位素标记的甲硫氨酸经过代谢转化为甲基供体S-腺苷甲硫氨酸(AdoMet ),随后由蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT)催化转移到精氨酸侧链的甲基上。细胞裂解后,将两种样品混合并制备用于高分辨率LC-MS分析。含有二甲基精氨酸的肽的NeuCode同源物被解析后,将显示出43 mDa的质量差异并作为诊断峰。  图2 基于mNeuCode的精氨酸二甲基化靶向蛋白质组分析。(A)NeuCodeFinder从高分辨率质谱数据中筛选NeuCode同位素峰对的工作流程。从原始数据文件中提取全扫描质谱。单峰被配对以形成NeuCode等值线簇。最终的NeuCode对列表与提取的离子色谱(XIC)值一起导出。(B)靶向LC-MS/MS分析的工作流程,包括样品制备、富集以及MS1和MS2分析。  在mNeuCode-I标记组中,使用含有正常L-精氨酸和同位素标记L-蛋氨酸[D3]的培养基 在mNeuCode-Ⅱ标记组中,则使用同位素标记的L-精氨酸[15N4]和L-甲硫氨酸[13C]进行培养(图1)。收集两组全细胞蛋白提取物并等量混合,蛋白经还原烷基化与酶切后,得到的肽段通过StageTip分级分离和HILIC tip富集,以提高样品肽段的识别率。处理的样品先进行LC-MS全扫描,通过作者的自制软件NeuCodeFinder生成包含列表,此包含列表用于辅助进一步的平行反应监测(PRM)模式分析(图2)。    图3 已鉴定的精氨酸甲基化位点的生物信息学分析。(A)鉴定的精氨酸二甲基化位点和(B)精氨酸二甲基化蛋白质。橙色柱表示未报道的精氨酸二甲基化位点或蛋白质。绿色柱表示只有单甲基化是已知的,但是二甲基化还没有报道。(C)韦恩图显示,通过使用胰蛋白酶和镜像胰蛋白酶作为消化试剂,从两组实验中鉴定的精氨酸二甲基化位点。(D)蛋白质上位点数目的分布。每个蛋白质上精氨酸二甲基化位点的数量显示在饼图周围,蛋白质的数量列在饼图中。鉴定的精氨酸-二甲基化蛋白质的(E) GO富集和(F)KEGG途径分析。(G)使用STRING数据库将二甲基化蛋白质映射到蛋白质相互作用网络上。综合得分 0.4。(H)已鉴定的精氨酸二甲基化位点中-6和+6氨基酸残基的序列标志。  通过对数据结果的分析,最终共鉴定到70种蛋白质上的176个精氨酸二甲基化位点,其中37-38%的精氨酸二甲基化位点是新的修饰位点,29%的精氨酸二甲基化蛋白没有被报道过,这证明了mNeuCode方法的有效性。与常规的鸟枪法蛋白质组学策略所获得的数据相比,mNeuCode方法在鉴定低丰度精氨酸二甲基化肽方面具有独特的优势,并且能够补充许多传统鸟枪法蛋白质组学所无法鉴定到的精氨酸二甲基化位点。对mNeuCode方法鉴定到的精氨酸二甲基化蛋白进行生物信息学分析后,发现这些蛋白质主要与RNA的加工、剪接和稳定性相关,参与了RNA的代谢过程。  图4 FAM98A上精氨酸二甲基化位点的突变抑制了细胞迁移。(A)通过蛋白质印迹检测FAM98A在HeLa细胞中敲除和重建的效果。用siFAM98A-1和siFAM98-2沉默HeLa细胞,然后用Flag标记的WT或突变的FAM98A质粒重建。Anti-FAM98A显示内源性FAM98A的干扰。Anti-Flag显示外源FAM98A的重建。(B)图像和(C)柱状图显示了HeLa细胞的细胞迁移。  FAM98A是一种微管相关蛋白,与结直肠癌和非小细胞肺癌的增殖有关。有研究者发现FAM98A是PRMT1的底物,但未能确定确切的甲基化位点。而在作者的研究结果中,成功鉴定到FAM98A上五个新的精氨酸二甲基化位点。为了验证这些二甲基化位点是否参与细胞迁移的调节,作者使用FAM98A敲除和FAM98A WT或突变重建细胞系进行了伤口愈合试验。将HeLa细胞的FAM98A基因敲除后,分别用WT或突变的flag-FAM98A重建FAM98A沉默细胞,其中突变的flag-FAM98A将二甲基化位点R351、R360、R363、R371和R375突变为赖氨酸以抑制甲基化。实验结果显示,当FAM98A基因被敲除时,细胞的迁移能力受到抑制,WT FAM98A的重建挽救了FAM98A敲除导致的细胞迁移缺陷,但是突变型FAM98A的重建却不能挽救。该结果证实了FAM98A上的二甲基化位点在细胞迁移中起到的作用。  总之,在这篇文章中作者发明了一种mNeuCode方法,并开发了NeuCodeFinder软件,使得能够以全蛋白质组的方式进行精氨酸二甲基化的靶向MS/MS分析。实验结果证明了mNeuCode技术对于精氨酸二甲基化的靶向蛋白质组分析的能力和有效性,并证实HeLa细胞FAM98A上新的精氨酸二甲基化位点在细胞迁移调节中的功能,有助于更好地理解癌症发展的潜在机制,为蛋白质组分析的方法学提供了新的思路。  撰稿:梁梓欣  编辑:李惠琳  文章引用:mNeuCode Empowers Targeted Proteome Analysis of Arginine Dimethylation  李惠琳课题组网址www.x-mol.com/groups/li_huilin  参考文献  Wang, Q., Yan, X., Fu, B., Xu, Y., Li, L., Chang, C., & Jia, C. (2023). mNeuCode Empowers Targeted Proteome Analysis of Arginine Dimethylation. Analytical chemistry
  • 月旭科技推出饮料中4-甲基咪唑的整体解决方案
    近日,一份源自美国监督机构环境健康中心的报告,再次将百事可乐推至焦糖色素风波中。该报告指出,在百事可乐的焦糖色素中再次检测出了含有可能致癌的4-甲基咪唑(简称4-MEI)。焦糖色素是一种允许使用的着色剂,但是,我国现行的食品质量标准中,可乐中焦糖色素没有限量标准,只规定&ldquo 按生产需要适量使用&rdquo 。 可乐中的4-甲基咪唑是在以亚硫酸铵为原料生产焦糖色素时产生的,焦糖色素能使可乐饮料变成棕褐色。4-甲基咪唑能导致动物长肿瘤,有可能给人体带来致癌风险。目前,我国国标中只有《焦糖色中的4-甲基咪唑的测定-高效液相色谱法》,而对于饮料中的4-甲基咪唑则没有相关检测方法。 针对此次事件,月旭科技迅速建立了饮料中4-甲基咪唑的前处理和检测方法。本方法使用月旭Welchrom® P-SCX (60mg/3mL)富集饮料中4-甲基咪唑,所建立的固相萃取方法能够极大程度排除饮料中杂质的干扰,保证检测结果的准确性。 1. 仪器及材料 材料:饮料;超纯水;4-甲基咪唑标准品;月旭Welchrom® SCX 固相萃取小柱(60mg/3mL);玻璃移液管;洗耳球;烧杯,固相萃取装置等。 2. 实验步骤 2.1 SPE净化 SPE柱:Welchrom® SCX(60mg/3mL) 1)活化:3mL甲醇,3mL水; 2)上样:3mL 饮料样品溶液,弃去上样液 3)淋洗:3mL 100%甲醇,弃去淋洗液; 4)洗脱:3mL 10%氨化甲醇;收集洗脱液。挥干定容至0.5mL,进液相分析。 2.2 液相色谱测定 色谱柱:月旭Ultimate® XB-C18(4.6× 250mm, 5µ m) 流动相:缓冲液/甲醇=80/20 缓冲液的配置方法:将6.8g KH2PO4和1g庚烷磺酸钠至900mL,用H3PO4调pH为3.5,再定容至1000mL,即得。 检测波长:210nm 流速:1.0mL/min 进样量:20µ L 图1:4-甲基咪唑标准色谱图 3. 添加回收率试验结果 表1: 10µ g/mL添加回收实验结果(n=5) 次数 1 2 3 4 5 回收率98.2% 92.2% 95.1% 96.4% 93.6%
  • 液体活检有望应用肝癌诊断,临床产业化为时尚早
    p style=" text-align: center " img title=" 0.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201710/insimg/2968e5e3-c797-4ffd-afcc-f2175fb2e23d.jpg" / /p p   “已着手试剂盒产业化生产,预计10月中旬开始在我院防癌体检中心临床使用,重点检测对象是肝癌高危人群。” /p p    strong 资本、企业、科研界“垂涎”已久的液体活检,在肝癌早期诊断上小试牛刀。 /strong /p p   10月10日,国际学术顶尖杂志《自然材料》发表了肝癌早期诊断及疗效、预后预测的新方法——通过检测少量血液中循环肿瘤DNA(又称ctDNA)特定位点的甲基化水平,将肝癌的漏诊率降低一半以上,帮助医生发现更多早期肝癌患者。 /p p   这一技术属于液体活检,由中山大学肿瘤防治中心主任、中山大学附属肿瘤医院院长徐瑞华,与美国加州大学圣地亚哥分校教授张康共同带领的中美科学家团队历时5年完成。 /p p   徐瑞华表示:“我们已经着手肝癌甲基化试剂盒的产业化生产,预计10月中旬开始在我院防癌体检中心临床使用。重点检测对象是肝癌高危人群,如既往有肝炎肝硬化病史、肝癌家族史、罹患肝癌接受了手术等治疗的人群,进一步推广到常规防癌体检人群。” /p p   除了肝癌,液体活检在过去数年里吸引了大大小小的资本、企业关注。各家企业或从海外引入技术,或自主研发,涉及的癌症种类繁多,发布的平台各式各样,已出现细分领域的龙头企业,但尚未形成明显的市场格局。 /p p   同时,作为新生事物,国内外获批的液体活检产品寥寥无几,在全球还没有统一的标准,产业整体处于科研探索、验证阶段。更关键的是,它随时可能被叫停,就像三年前基因检测临床应用突然被叫停一样。 /p p strong   早期发现新方法 /strong /p p   “肿瘤液体活检技术将迎来一个全新时代。”《自然材料》的审稿专家如此总结此次科研成果。 /p p   裕策生物CEO高志博告诉21世纪经济报道记者:“目前,液体活检的主要商业应用在产前医学领域。近年来随着技术进步,液体活检在肿瘤早筛、靶向用药指导和复发监控等方面的应用越来越多,甚至针对肿瘤免疫治疗的ctDNA-TMB检测也逐步兴起。” /p p   液体活检是体外诊断的一个分支。按照检测样本不同,肿瘤分子诊断分为传统的组织活检和新型的液体活检。 /p p   相比之下,组织活检需要通过手术或者穿刺,获取肿瘤最有代表性部位的组织作为检测样本,这种获取组织样本的方法给患者带来很大痛苦,而且有些患者的病情并不适合组织活检,因为有些肿瘤在受到手术扰动后,存在加速转移风险。该技术取样不易,也导致不能多次取样进行动态检测。 /p p   液体活检的出现让患者看到了曙光。其通过血液或尿液等对癌症做出诊断,优势在于能通过非侵入性取样,降低活检危害,甚至能有效延长患者生存期。目前液体活检的主要检测物包括血液中游离的循环肿瘤细胞(CTCs),ctDNA碎片,循环RNA和外泌体。 /p p   其中,肿瘤细胞凋亡、坏死后释放到血液中的游离DNA片段称为ctDNA。由于其携带与原发肿瘤一致的甲基化改变,理论上可以利用ctDNA的甲基化谱对肿瘤进行诊断。 /p p   但是,ctDNA在血液中的含量极微,每毫升血液中仅有约20ng,相当于一滴水的一亿分之一,并且混杂在大量正常游离DNA中。如何在这么微量的ctDNA中检测单个碱基的甲基化水平,一直是困扰科研界的难题。 /p p   徐瑞华总结了科研取得突破的关键性实验技术:从少量外周血中稳定提取微量ctDNA的手段,提高甲基化检测必需的重亚硫酸盐的转化效率,甲基化探针设计使得高通量扩增和测序成为可能等。 /p p   另外,中山大学肿瘤防治中心具有丰富的肝癌病例来源。张康表示:“这个项目对1983例临床样本进行研究,是迄今为止最大的临床样本量用于肝癌甲基化模型的研究。” /p p   该研发成果应用于临床后,或许能降低肝癌早期诊断的误诊、漏诊率。 /p p   据了解,传统的AFP(甲胎蛋白检测)早期诊断肝癌的敏感性在60%左右,这意味着单纯依靠AFP检测只能发现60%左右真正的肝癌患者,漏诊率为40% 此外,AFP对肝癌的诊断特异性在80%左右,这意味着有20%左右的非肝癌患者会由于其他原因,如妊娠、慢性肝炎肝硬化、胚胎源性肿瘤、转移性肝癌等引起AFP升高,即对肝癌的误诊率为20%。 /p p   “甲基化标志物对肝癌的诊断敏感性为84.9%, & nbsp 特异性为93.1%,这意味着漏诊率降至15%左右,误诊率更是降至7%左右,”徐瑞华指出,“我们的甲基化诊断模型还与患者的肿瘤负荷、治疗反应和复发密切相关,有利于医生及时调整治疗方案。” /p p   在此次研究基础上,徐瑞华和张康所在的团队已开始收集临床上接受靶向治疗的肝癌患者标本,希望通过统计学分析发现具有疗效预测价值的甲基化位点,预测患者对靶向药物的疗效。同时,继续研究ctDNA甲基化标志物在结直肠癌、胃癌、肺癌、乳腺癌等其他常见肿瘤中的应用。 /p p strong   大规模应用仍需时日 /strong /p p   虽然研发取得突破,但“准生证”还在路上。 /p p   徐瑞华向21世纪经济报道记者透露,目前该肝癌甲基化试剂盒已经获得3个国家医疗器械备案证,另外一个正在申报中。其团队的研究合作方也在广州科学城建立了符合GMP标准的试剂盒生产车间,并完成了中试生产,预计今年12月大规模生产,届时年供应试剂盒100万人份。 /p p   产品刚刚取得科研突破、走在申报的路上、还需要积累大量的临床应用数据,这是液体活检从业者的常态。 /p p   四年前,液体活检伴随着基因测序技术的突飞猛进进入一个全新时代。国外有Guardant Health、Foundation & nbsp Medicine、Pathway & nbsp Genomics、Grail投身其中,中国有华大基因、吉因加、泛生子、燃石、海普洛斯等公司纷纷涉足。2015年,液体活检被《麻省理工科技评论》评选为“十大突破技术”。 /p p   高志博坦言:“液体活检在不同方向上的成熟度不同,靶向用药指导较为成熟,也是基因检测公司争夺的热点。在资本的大力推动下,众多公司迅速推广检测产品抢占市场,竞争十分激烈,企业获得临床监管许可证之后,竞争优势会更加明显。” /p p   参与者众多,但正式获批的产品只有6个,包括FDA批准的三款液态活检相关的产品:杨森诊断公司的CellSearch、Epigenomics公司的EpiproColon技术和罗氏的cobas & nbsp EGFR突变检测试剂盒v2 CFDA批准的三款:杨森诊断公司的CellSearch,格诺思博公司的叶酸受体阳性CTC检测试剂盒、友芝友公司的循环肿瘤细胞快速染色液。 /p p   “液体活检技术本身面临一些困难,实现产业化之前先要解决基础研究和技术上的一些问题,像是假阳性率、ctDNA的来源鉴别、不同方法检测结果一致性、如何确定拥有临床意义的‘阈值问题’等。另外,检测标准和监管也是很大挑战。”高志博说。 /p p   高特佳投资集团执行合伙人王海蛟则认为:“产业化难题主要是产品本身的标准和临床对产品的认可,是否可以进入临床路径和指南中。临床应用现在处于各个医疗机构的个性化应用阶段,没有形成共识。” /p p   另外,产业链上游也面临技术壁垒。液体活检产业链分为上游的捕获、基因扩增、试剂以及仪器市场,中游是检测服务市场,下游数据市场。根据动脉网统计,目前国内涉足上游捕获市场的企业有13家,基因扩增相关企业6家,中游环节布局企业37家。 /p p   高志博告诉记者:“相比上游市场被国内外巨头企业垄断之外,中下游应用是个新兴市场,细分方向也很多。除特有的技术和数据之外,最重要的是做好终端服务。” /p p   即便是攻克了技术关卡获批,临床应用的挑战也不小。根据2015年中国卫计委批准的第一批肿瘤诊断与治疗项目高通量基因测序技术临床试点单位,国内有临床应用资质的企业只有五家,其余皆为公立医院。 /p p   广州市第一人民医院检验科主任技师雷秀霞指出,液体活检的应用不仅面临技术考验,价格也是一大影响因素。“很多项目因为成本原因无法开展,而且富集技术还需要临床研究积累,纳米技术、肿瘤细胞标记技术也还不完善。” /p p   即便如此,广阔的市场想象空间还是让资本、企业趋之若鹜,投资额也屡刷新高。证券公司Piper & nbsp Jaffray测算,预计2026年液体活检市场容量将达到326亿美元,其中癌症领域286亿美元,未来10年的复合增长率约保持在21.7%。 /p p   “行业还处于初创、早期阶段,没有明显的行业龙头。因为是热点,现在标的估值很高。”王海蛟说。 /p p & nbsp /p p & nbsp /p
  • 《粉状婴幼儿配方食品生产环境中克罗诺杆菌属的监控指南》团体标准征求意见
    中国营养保健食品协会团体标准  征求意见通知  各相关单位:  根据《中国营养保健食品协会团体标准管理办法》,东北农业大学等单位起草了《粉状婴幼儿配方食品生产环境中克罗诺杆菌属的监控指南》团体标准,根据工作计划,现面向相关单位公开征求意见,请于2023年6月12日前将意见反馈至TB@cnhfa.org.cn。  感谢您对协会工作的支持!附件1-粉状婴幼儿配方食品生产环境中克罗诺杆菌属的监控指南-征求意见稿附件2-粉状婴幼儿配方食品生产环境中克罗诺杆菌属的监控指南-编制说明附件3-意见反馈表中国营养保健食品协会2023年5月12日[230512]附件1-粉状婴幼儿配方食品生产环境中克罗诺杆菌属的监控指南-征求意见稿.pdf.pdf[230512]附件2-粉状婴幼儿配方食品生产环境中克罗诺杆菌属的监控指南-编制说明.pdf.pdf[230512]附件3-意见反馈表.doc.doc.doc
  • J.P.摩根大会——诺华、辉瑞、吉利德、默沙东分享并购交易态度和2019发展战略
    p   2019年1月,J.P.摩根医疗大会如期在旧金山召开。在这个被称为“生物医药的超级碗”的大会上,数额巨大的生物医药技术交易在觥筹交错和数次握手交谈间就能达成。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201901/uepic/4bd7d575-7836-4e8e-8f08-16a90efda7b5.jpg" title=" 1.jpg" alt=" 1.jpg" width=" 522" height=" 312" style=" width: 522px height: 312px " / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) " 图片源于网络 /span /p p   BMS和Lily先后公布的两起重大交易使得会议氛围高涨。在会议举行的第一天,除了刚刚宣布被并购的新基药业,诺华、辉瑞、吉利德、默沙东等巨头药企的高层们分享了他们对并购交易的态度和2019发展战略。 /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 18px color: rgb(227, 108, 9) " strong BMS收购新基的三个理由 /strong /span /p p   BMS对新基药业的收购点燃了JP摩根的第一枚炸弹,这场交易金额高达740亿美元。 /p p   BMS为什么要收购新基药业?总所周知,BMS未来盈利增长的主要增长点主要依赖单一药物相关 Opdivo。BMS一直是肿瘤免疫治疗的领导者,但这个领域也不乏默沙东等有力的竞争者。 /p p   事实上,Opdivo在2018年3个季度的销售额为49亿美元,约占该公司总收入的30%。这个比例在未来几年内预计还将上升。此外,Opdivo本身近年来在临床试验中遭遇多次失败,分析师已经降低了对药物的高峰销售预测。该公司需要实现多样化,但他们目前只有TKY2和NKTR-214等几种化合物可选择。 /p p   再看Celgene,其轰动一时的血癌药物Revlimid表现不错,2018年销售额估计超过90亿美元,分析人士认为2022 年销售额将超过150亿美元。不过,届时Revlimid将失去专利权。 /p p   除了Revlimid,Pomalyst的年销售额也达到了20亿美元的药物。更重要的是,Celgene的晚期产品的研发管道非常有竞争力,比如免疫治疗和炎症治疗产品ozanimod,以及血液学产品中的luspatercept、liso-cel(JCAR017、bb2121和fedratinib。该公司预计其新药的潜在销售峰值将超过150亿美元。 /p p   当然,更重要的内容在于前景光明的CAR-T疗法。2018年新基以90亿美元收购了CAR-T疗法领先企业Juno Therapeutics。CAR-T细胞疗法比其他癌症疗法具有更高的疗效,在未来几年内可能成为一个巨大的市场,并且在得到监管机构的批准后,BMS将通过bb2121获得市场准入权。 /p p   总的来说,新基药业将帮助BMS在Opdivo和 Eliquis之外获得更多的组合。合并后的实体将拥有9种年销售各超过10亿美元的药物,其管道未来销售额最多可能达到150亿美元。 /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 18px " strong span style=" color: rgb(227, 108, 9) " 相比逐利,诺华更愿意追逐疗效 /span /strong /span /p p   Novartis CEO Vas Narasimhan在接受外媒采访时称,他们正在将业务重心调整到新一代的疗法和具有潜力的治疗方案中。 /p p   Narasimhan此前是诺华的首席医学官,他曾表示,人们最终衡量一家公司是否有价值的标准会是这家公司是否能够最终生产出真正有治疗效果的产品,而非慢性治疗或者缓解产品。 /p p   他在JP摩根大会上表示,诺华或许必须开始从盈利性药物的路线中转移。这些药物的确有利可图,它们偏慢病管理类而非彻底治愈这些疾病,使用频次高。在目前的药物研发逻辑中,慢病用药往往是(商业上)成功的。 /p p   Narasimhan还在2018年2月的一次采访中透露,诺华正在着手准备基因疗法和细胞疗法,他们将寻求正在能够治愈患者的解决方案。“我相信这些技术可以解决很多问题。”他如是说道,“这是社会所希望的。”这令人想到了诺华的CAR-T产品,但目前支付是一个大的挑战。“我们相信我们能找到支付方法,最终这些挑战是可以解决的。”他对此表示。 /p p   总部位于瑞士的诺华市值高达2160亿美元,他们一直在进行组合投资,出售非核心资产,如仿制药业务。据悉,仿制药业务板块即将成为其子公司Alcon,主要关注眼科疾病。 /p p   诺华最近的一次收购发生在2018年的10月,他们以21亿美元收购了专注于开发治疗癌症的靶向药物公司Endocyte 。而另一次癌症治疗相关的重要交易发生在2017年,诺华以39亿美元收购法国放射药物领军企业Advanced Accelerator Applications(以下简称AAA)。 /p p   “这些收购都旨在技术平台。”Narasimhan指出。诺华正在向细胞治疗、基因治疗业务转移。收购AAA后,诺华又获得了一个新的技术平台,叫做放射性配体治疗。相比之下,Endocyte看起来比较普通。但Narasimhan表示:“对诺华来讲,他们的经验很难在实践中复制。” /p p   “我们希望能够研发一款真正颠覆性的药物,将其与放射性粒子联合起来。这种放射性粒子受到严格的控制,我们把它带到肿瘤的位置,然后将肿瘤消灭掉。”Narasimhan:“我认为他对许多实体瘤都有效果。”这种方法对神经内分泌肿瘤非常有效,诺华认为还可以用来治疗前列腺肿瘤。 /p p   礼来通过收购成功跻身肿瘤圈,但Narasimhan仍非常有信心。他表示放射性配体解决方案的获得并不容易:“需要核材料和复杂的供应链,这些都需要长时间的经营。通过两次收购,我们获得了这种能力。” /p p   诺华在第三季财报上提到,管理层提高了全年的销售预测,并强调了该公司的银屑病药物Cosentyx及其心力衰竭药物Entersto的强劲表现。 /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 18px " strong span style=" color: rgb(227, 108, 9) " 辉瑞:会做交易,但不会分散注意力 /span /strong /span /p p   2018年,辉瑞经历了一次换帅,原CEO Ian Read卸任,将接力棒交给了公司内部富有经验的高管Albert Bourla,后者被认为继承了多年来最强大的制药公司。辉瑞拥有15个具有重磅炸弹潜力的品种,它也面临着挑战,特别是已经或将失去排他性的药物的持续负面影响。 /p p   Bourla在JP摩根大会上表示,2010年Ian Read接任时,辉瑞正面临业界史上最大规模的挑战和失去排他性危机。2010年辉瑞收入为620亿美元,5年后这个数字下降到了500亿美元。于此同时,研究部门在千禧年的第一个十年生产力都不是那么强大,使得其效益并不足以抵消负面。因此,辉瑞的年复合增长率大幅下跌。 /p p   而在2018年Bourla接手时,情况则恰恰相反。Bourla称他们将面临最后一次失去排他性危机。在接下来的6个月内,将是Lyrica的排他性危机时期。 /p p   “Lyrica会影响辉瑞今年的销售增长。因为与2018年相比,Lyrica会有半年的时间失去独占权 同样的影响会出现在2020年。”Bourla指出。 /p p   但他也强调,在千禧年的第二个十年里,辉瑞在研发方面有了非常好的生产力,目前辉瑞的研发管线堪比史上最佳形态。他认为两者的结合能够使得辉瑞成为强大的顶级成长型公司。 /p p   “我并不低估整个行业所面临的价格压力等逆境挑战。但我认为,在价格压力较大的新环境中,能够提供突破性药物的公司仍将蓬勃发展。”他如是说道。 /p p   考虑到这一年,辉瑞未来几年的战略将是顶线增长。他强调,在这个具有资本回报率的行业中,顶线增长只能意味着底线的增长,即杠杆作用。 /p p   辉瑞在过去几年一直在积极的参与业务发展,这期间展开了几次大笔交易,包括Hospira和Medivation的收购。2016年,在美国财政部消除交易的税收优惠后,辉瑞还试图吞并Allergan。 /p p   不过,在过去的两年中,公司尚未公布任何重大收购消息。Bourla表示,辉瑞将继续关注投资机会。“我们确实有能力,因为我们的资产负债表几乎可以完成这个行业中任何人们可以想到的交易。”Bourla在会议上说。 /p p   然而,他补充说,他不想分心。相反,辉瑞将专注于将II期和III期临床产品纳入其管道,目标是公司目前关注的治疗领域。 /p p   吉利德:专注于并购,生物技术公司是目标 /p p   在经历艰难的一年后,吉利德2019年提出了大计划。他们的HIV产品Biktarvy首次亮相,新的商业主管Laura Hamill 称之为史上“最成功的”艾滋病治疗产品。当然,公司仍然对丙型肝炎产品寄予厚望,尽管公司在这一市场遭受了财富重创。 /p p   2017年吉利德收购了CAR-T药物领先公司Kite Pharma,他们一跃成为细胞治疗的行业领军者。但由于支付体系尚未完善,Yescarta的销量并没有达到预期。但吉利德依然打算通过投资的方式继续加码细胞疗法。 /p p   “我们专注于并购,”吉利德CEO Robin L.Washington在JP摩根大会上表示。Washington指出,该公司还可以偿还部分债务并权衡股票回购,但生物技术公司将成为焦点。 /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 18px " strong span style=" color: rgb(227, 108, 9) " 默沙东:正试图寻找标的 /span /strong /span /p p   2018年默沙东收获颇丰,他们在肿瘤、动物健康、医院端、疫苗领域都取得了相当不错的成绩。 /p p   默沙东CEO Ken Frazier指出,从医疗环境的发展变来看,拥有差异化的产品越来越重要。他们相信,现有的产品组合和管线,使得默沙东正处于最佳发展时期。 /p p   Keytruda是默克有史以来最成功的商业产品。从第三季度来看,该产品销售利润中40%来自美国以外的市场。 /p p   2018年9月,欧盟批准了默沙东的189试验。在那不久前,407试验也在日本得到了批准。默沙东看到了美国以外的巨大市场。仅仅189试验,就让他们在欧盟地区的市场容量翻了3倍。2019年默沙东开始进军中国的黑色素瘤市场,市场也相当可观。 /p p   海外市场的市场准入和实质商业增长存在滞后,即便Keytruda也不能例外。Frazier认为这是必须经历的程序。“在德国这些国家会必将快,但有的国家会久一点,12个月16个月、甚至18个月。这一切都取决于市场。”他表示,“但我们的数据是非常漂亮的,所以我们也希望能够简化程序。” /p p   大药企的收购和兼并是常态,默沙东亦不例外。Frazier表示默沙东在试图完成一些交易,但目前还没有找到合适的卖家,资产竞争比较激烈:“我认为随着估值的下降可能会带来更多可能性。” /p
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