微球菌核酸酶

[font=宋体][font=宋体]全能核酸酶（[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]）是一种来自于粘质沙雷氏菌（[/font][font=Calibri]Serratia marcescens[/font][font=宋体]），经基因工程改造的核酸内切酶。可降解双链、单链、线状、环状的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]，完全将核酸降解成[/font][font=Calibri]3~5[/font][font=宋体]个碱基长度的[/font][font=Calibri]5'-[/font][font=宋体]单磷酸寡核苷酸。义翘神州不仅可以提供研究级核酸酶，依托于[/font][font=Calibri]ISO 13485[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]体系，还可提供高效、高质量、应用广的[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级别全能核酸酶。同时我们提供核酸酶残留检测试剂盒，在解决生物制品核酸污染的同时，有效降低酶本身的残留风险。下面通过问答形式向大家详解全能核酸酶：[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 如何处理粘附细胞？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 用[/font][font=Calibri]PBS[/font][font=宋体]洗涤后，向[/font][font=Calibri]100μL RIPA[/font][font=宋体]裂解物（或其他哺乳动物细胞裂解物）中加入[/font][font=Calibri]1-5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶，在室温下孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体]，收集裂解物，离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 如何处理悬浮细胞？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 离心收集悬浮细胞后，将[/font][font=Calibri]100μL RIPA[/font][font=宋体]裂解物（或其他哺乳动物细胞裂解物）加入含有[/font][font=Calibri]1-5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶的离心管中，在室温下孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体]，收集裂解物，离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 如何处组织样本呢？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 研磨[/font][font=Calibri]30[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]100mg[/font][font=宋体]动植物组织后，加入[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]200μL[/font][font=宋体]裂解液和[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶，室温孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体]，收集裂解液并离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 大肠杆菌或其他细菌呢？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 离心收集细菌后，裂解液或研磨破碎后，每[/font][font=Calibri]100μL[/font][font=宋体]加入[/font][font=Calibri]1~5μL[/font][font=宋体]全能核酸酶，室温孵育[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体]，收集裂解液，离心上清液进行下游实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 如何稀释[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 正常推荐稀释比（终浓度）为[/font][font=Calibri]1:1000[/font][font=宋体]～[/font][font=Calibri]1:20000[/font][font=宋体]，其中时间、温度和稀释比是影响反应的积极因素。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 是否用[/font][font=Calibri]PBS[/font][font=宋体]稀释[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 是[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 你能减少剂量吗[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 如果你想减少剂量，可以适当提高反应温度或延长反应时间[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 反应辅因子[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 必须向反应溶液中加入[/font][font=Calibri]2-5mM Mg2+[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 反应缓冲液[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 常用的生物缓冲液，如[/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]MOPS[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]pH6-8[/font][font=宋体]）等[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 稀释后每次使用多少？如何测试梯度？一开始多少钱？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 根据不同的实验要求，添加量可以在[/font][font=Calibri]1/100[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]1/10000[/font][font=宋体]之间。真核细胞所需的量高于原核细胞，因为真核细胞的核酸含量高，并且可以按照[/font][font=Calibri]1/1000[/font][font=宋体]的比例添加真核细胞初始添加量，可以按照[/font][font=Calibri]1/10000[/font][font=宋体]的比例添加原核细胞。由于全能核酸酶活性在室温下较高，因此在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃下消化的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]添加比例高于室温下。普通的[/font][font=Calibri]CoIP[/font][font=宋体]实验、蛋白质表达实验可以适当地略微增加，并且可以按照[/font][font=Calibri]1/100[/font][font=宋体]的比例添加对[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]残基要求高的实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 如何灭活全能核酸酶？如何移除？[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： [/font][font=Calibri]EDTA[/font][font=宋体]螯合金属离子的使用可以可逆地抑制全能核酸酶的活性，极端条件下可以引起不可逆的失活，如[/font][font=Calibri]100mM NaOH[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]70[/font][font=宋体]℃处理[/font][font=Calibri]30min[/font][font=宋体]。可以通过阴离子交换柱或[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱[/color][/url]法从目标产物中分离全能核酸酶。由于这种核酸内切酶的高稳定性，建议不要在最终产物需要排除核酸酶的应用中使用全能核酸内切酶。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 储存条件[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： 储存温度为[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃。储存缓冲液：[/font][font=Calibri]20mM Tris-HCl pH 8.0[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]50mM NaCl[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]2mM MgCl2[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]50%[/font][font=宋体]甘油。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Q[/font][font=宋体]： 全能核酸酶应用[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]A[/font][font=宋体]： [/font][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、蛋白质提取过程中核酸污染的去除：当重组蛋白质纯化或哺乳动物细胞裂解物下游需要低粘度时，全能核酸酶可用于降低样品粘度，以便于操作；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、有效减少储存的外周血单个细胞（[/font][font=Calibri]PBMC[/font][font=宋体]）的聚集；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、有利于不溶性蛋白在复性前的高质量包合体系制备；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、有效去除带负电荷核酸对双向[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]蛋白样品的影响；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、在宽范围的条件下（[/font][font=Calibri]6M[/font][font=宋体]尿素、[/font][font=Calibri]0.1M[/font][font=宋体]盐酸胍、[/font][font=Calibri]0.4%Triton X100[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]0.1%SDS[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]1mM EDTA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]1mM PMSF[/font][font=宋体]），降解所有形式的（双链、单链、线性、环状）[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体]、根据美国食品药品监督管理局的核酸污染去除程序，去除蛋白质产品中的污染；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7[/font][font=宋体]、本品可与多种细胞细菌裂解液配合使用，去除粗提液中的核酸，降低溶液粘度，提高蛋白质产量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供不同级别全能核酸酶，[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级条件下生产的[url=https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit][b]全能核酸酶[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit][b]SuperNuclease[/b][/url][/font][font=宋体]，无动物源性，可高效降解单链、双链、线性、环状、超螺旋等任何形式的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]。超高活性，应用场景广泛且使用量低不易残留，质量、性能、供货能力可靠，并已完成在[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]的药物主文件申报备案（[/font][font=Calibri]DMF Number#:35978[/font][font=宋体]），满足药物申报的规范。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit[/font][/font][font=Calibri] [/font]

谁有核糖核酸酶A的液相分析,急急急急!!!非常感谢!

金黄色葡萄球菌及检验 一、生物学特性　　典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15%NaCl肉汤中生长。可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化明胶。金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。二.流行病学　　金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。因而，食品受其污染的机会很多。近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：　　季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：　　食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。　　肠毒素形成条件：　　存放温度，在37°C内，温度越高，产毒时间越短；　　存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；　　食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。三.致病性　　金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：a.溶血毒素：外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死；b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关；d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F五种血清型。肠毒素可耐受100°C煮沸30分钟而不被破坏。它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。

因需求，需要购买一台多重食源性致病菌核算系统，很急切，有此宝别藏了，来电15867843562，曹

http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201112/2011121813583277.gifTALE第171位Ser删除后的三维构象模型也显现出非常类似的球状结构，图片篇来自Biochemical Journal, 2004, 382: 725-731.2011年6月，位于美国加利福尼亚州卡尔斯巴德市的生命科技公司(Life Technologies)获得美国伊利诺斯州埃文斯顿市双刀片基金会(Two Blades Foundation)和德国哈雷市马丁-路德大学一组植物学家的独占性许可以便对一种新的基因组编辑技术---转录激活子样效应因子(transcription activator like effector, TALE)进行商业化生产。随着生命科技公司新获得的许可，研究人员可能很快能够从几个设计物TALE商业来源中进行选择。而2011年1月，美国明尼苏达大学和爱荷华州立大学开发的类似技术已被许可给法国公司Cellectis，而且该公司已经提供定制的基因特异性的转录激活子样效应因子核酸酶(TALEN)。与此同时，几个研究小组就像学术界之前对ZFN那样正在建立大众都可获取的TALEN来源。当然，现在预测利用只在2007年发现的TALE进行基因组编译的最终影响仍嫌过早。相反，ZFN技术开发了将近15年，并且已经正在人临床试验中进行测试。但是这两种技术的差别是显而易见的。不同于ZFN---该技术的知识产权是由Sangamo生物技术公司和它的商业伙伴Sigma-Aldrich所有，TALE的使用、成本和可获得性则是完全不同的情形。TALEs首先是植物病原菌黄单胞菌(Xanthomonas)上发现的，特异性地结合到DNA，在该病原菌感染过程中对植物基因进行调控。

一、实验目的 掌握PCR检测乳品中金黄色葡萄球菌具体方法及操作步骤。 二、实验原理 聚合酶链反应(polymerase chain reaction )简称PCR，是一种体外酶促合成反应，扩增特定DNA片断的方法。该技术于1985年由美国的KaryMullis等人首创并由美国GETUS公司开发。其原理是：在存在DNA模板、引物、dNTP、适当缓冲液(Mg2+)的反应体系中，在热稳定DNA聚合酶的催化下，对一对寡核苷酸引物所界定的DNA片断进行扩增。这种扩增是通过模板DNA、引物之间的变性、退火(复性)、延伸等三步反应为一个周期，循环进行，使目标DNA片段得以扩增。由于每一周期产生的DNA片断均能成为下一次循环的模板，故PCR产物以指数形式增加，从而实现信号的放大。 本实验以金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶为靶基因进行检测。 三、实验材料 1．菌种：Staphylococcus aureus(金黄色葡萄球菌)－26003-21 2．乳制品：全脂乳、脱脂乳和奶酪均购自当地超市。 3．培养基：营养肉汤培养基 4．化学试剂：10xPCR buffer、dNTPs、TaKaRa Taq、DNA Marker DL2000， 5．引物： 正向引物：GCGATTGATGGTGATACGGTT 反向引物：AGCCAAGCCTTGACGAACTAAAGC 6．实验仪器：PCR仪、DXY-33A型电泳仪、UVIpro凝胶成像系统 四、实验步骤 1.将已人工污染的乳品25ml接入225ml营养肉汤培养基中，37℃振荡培养过夜 2.取1ml培养液于1.5ml离心管中，11000rpm，离心1分钟，弃去上清液 3.用灭菌的纯水洗涤菌体沉淀两次，再用100ul灭菌纯水溶解沉淀物 4.将菌悬液于沸水浴中煮沸10分钟，11000rpm，离心1分钟，取上清液，备用 5.PCR反应体系：总反应体系50ul。包括5ul 10XPCR buffer ，4ul dNTPs混合物，0.5ul 40umol正向引物，0.5ul40umol反向引物，0.25ul（5U/ul）Taq酶，模板2ul，水37.75ul。 6.PCR扩增程序：PCR反应采用冷启动。94℃预变性4分钟，再按94℃1分钟－52℃0.5分钟－72℃1.5分钟进行35个循环，最后72℃延伸3.5分钟。 7.电泳检测：取5ul PCR产物在2％琼脂糖凝胶上进行电泳，利用凝胶成像系统观察结果并成像。

[b][url=http://med.wanfangdata.com.cn/Paper/Detail?id=PeriodicalPaper_gwyx-lxbxcrbxfc201904003&dbid=WF_QK]核酸检测技术应用于淋球菌耐药监测:机遇与挑战[/url][/b]

凝固酶阳性葡萄球菌浅析炎热的夏天，你是不是经常发现食物不耐放了，早上做的糕点、八宝粥等，到了下午就有异味，而且稍不注意，还会拉肚子。这很可能就是食物受到细菌的污染，食物中的细菌产生了肠毒素，人们食用了这些含有毒素的食物，就会拉肚子，而这些产生肠毒素导致食物中毒的细菌，就包括了凝固酶阳性葡萄球菌。【了解凝固酶阳性葡萄球菌】　　葡萄球菌广泛分布于自然界，在空气、水、土壤、饲料、食品以及人和动物的体表粘膜等均有存在。大部分葡萄球菌是不致病的，也有一些致病的球菌，多数葡萄球菌致病菌株产生凝固酶，使血浆凝固。能产生加速人或兔血浆凝固的血浆凝固酶（游离血浆凝固酶）的葡萄球菌被称为凝固酶阳性葡萄球菌，可分为金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌。

乙烯菌核利判定，2763中规定，残留物：乙烯菌核利及其所有含3,5-二氯苯胺部分的代谢产物之和，以乙烯菌核利表示。请问各位，其所有含3,5-二氯苯胺部分的代谢产物是什么？有单独标样吗？检测时得同时走乙烯菌核利和其所有含3,5-二氯苯胺部分的代谢产物两种标样吗？谢谢

细菌DNA的提取2006-10-24 17:19这里提供的是由Marmur于1961年建立，经Dale等人简化和发展，此方法略加修改后可用于其他细菌种类。主要原理是：采用去垢剂破碎细菌细胞，酚－氯仿萃取蛋白，使用核糖核酸酶和蛋白酶K进行进一步的纯化，所提取的DNA无RNA和蛋白质污染，可用于限制性内切酶消化，分子克隆。⑴材料①20倍SSC缓冲液：3mol/l NaCl; 0.3mol/l 醋酸钠；pH 7.0(高压灭菌后，4摄氏度保存可长期使用)②酚/氯仿（1：1）：一般市售的酚需要重蒸处理，市售的酚常含有杂质而呈粉色和淡黄色，需要重蒸二次，收集沸点160℃部分，小瓶分装，瓶内空腔充氮气，－20℃密封保存，以免氧化，用前从冰箱中取出，68℃蒸馏水饱和，加入8—羟基喹啉（100g酚加0.1g），酚变为黄色。8—羟基喹啉是抗氧化剂，并能部分抑制核糖核酸酶，含8—羟基喹啉的酚用等体积1.0mol/L pH 8.0Tris 缓冲液抽提，再用0.1mol/L pH 8.0含0.2％β－巯基乙醇的Tris缓冲液抽提数次，酚溶液的pH应大于7.6。此酚溶液在平衡缓冲液覆盖下4℃可保存一个月，纯化和制备酚溶液都要带手套，以免损伤皮肤。③核糖核酸酶：无DNA酶污染，将胰RNA酶（RNA酶A）溶于10mmol/LTris－Cl(pH 7.5)15mmol/L Nacl 溶液中，浓度为10mg/ml.于100℃加热15分钟，缓慢冷却至室温，分装后于－20℃保存。④蛋白酶K ⑤TES缓冲液：10mmol/L Tris-HCl, pH 8.0; 10mmol/L NaCl;1mmol/l EDTA⑵方法①取单菌落接种于5mlLB培养液中，37℃振荡培养过夜。（使用试管）②将上述菌液接种于200mlLB培养液中，37℃振荡培养过夜。（使用500ml或1000ml三角瓶）③离心，收集沉淀（5000r/m,10分钟）④将沉淀悬浮于20ml 20倍SSC缓冲液中，混匀。⑤加入200mg SDS，室温下振荡过夜，使细菌细胞充分裂解，裂解液呈粘稠状⑥加入等体积的酚/氯仿溶液，温和地混匀，细心地回收上层水相（注意不要触及二相之界面），重复萃取三次⑦加入2倍体积无水乙醇，此时可见到絮状DNA沉淀或用玻璃棒绕取收集⑧将DNA溶于15ml 2倍SSC溶液中，加入核糖核酸酶（最终浓度50ug/ml），37℃保温1小时⑨加入蛋白酶K（50ug/ml）,继续保温1小时⑩加入等体积苯酚萃取一次，在回收的水相中加入2.5倍体积的无水乙醇，－20℃静止过夜25000g，4℃，离心15分钟，收集沉淀，用－20℃无水乙醇洗涤一次；将DNA在真空干燥器中抽干，溶于10mlTES缓冲液中，4℃保存备用。⑶说明①本方法可用于其他种类细菌，但是溶菌条件需略加修改，对革兰氏阳性菌（如葡萄球菌），在SDS处理前需要使用溶菌酶裂解细胞壁，对于另外一些细菌（如分枝杆菌），在加入SDS后，将溶液加温至65℃是可取的。②一些种类的细菌含大量核酸酶，去垢剂不能完全抑制其活性，用TES缓冲液代替SSC缓冲液可通过EDTA的作用抑制核酸酶活性，必须注意的是，TES缓冲液离子强度较低，在加入乙醇之前需用醋酸钠调节DNA溶液的离子强度（醋酸钠的最终浓度为0.3mol/L）③DNA溶液中残留少量酚和氯仿，可在乙醇沉淀之前用水饱和乙醚萃取去除④比较纯净的DNA溶液的Ａ260/A280及A260/A235大于1.7

[font=宋体][font=宋体]随着生物医药领域的发展，生物制品（治疗性抗体药物、疫苗等）需求日益庞大。生物制品和生物技术药物在生产过程中通常使用到工程细胞（菌），可能会造成外源性核酸残留（如宿主的），存在致瘤、感染、干扰代谢等潜在安全风险。我国参照[/font][font=Calibri]WHO[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]和欧盟标准，在药典中对生物制品的核酸残留量有明确规定。生物制品的核酸残留主要集中在重组蛋白、抗体及疫苗的大规模纯化及生产过程。药典规定要求酵母、大肠杆菌表达的生物制品中[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]残留量不超过[/font][font=Calibri]10ng/[/font][font=宋体]剂，[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Vero[/font][font=宋体]细胞表达的狂犬疫苗、[/font][font=Calibri]EPO[/font][font=宋体]、乙肝疫苗等不超过[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]10pg/[/font][font=宋体]剂。因此控制这些产品中外源性核酸的残留就显得极为重要。而外源性核酸残留的控制，会对生产工艺、规模放大、生产效率等产生一定程度的制约，那么如何能够二者兼得呢？全能核酸酶在生物制品宿主核酸残留方面具有一定的优势。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit][b]全能核酸酶[/b][/url]（[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]）是一种来自于粘质沙雷氏菌（[/font][font=Calibri]Serratia marcescens[/font][font=宋体]），经基因工程改造的核酸内切酶。可降解双链、单链、线状、环状的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]，完全将核酸降解成[/font][font=Calibri]3~5[/font][font=宋体]个碱基长度的[/font][font=Calibri]5'-[/font][font=宋体]单磷酸寡核苷酸。义翘神州不仅可以提供研究级核酸酶，依托于[/font][font=Calibri]ISO 13485[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]体系，还可提供高效、高质量、应用广的[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级别全能核酸酶。同时我们提供核酸酶残留检测试剂盒，在解决生物制品核酸污染的同时，有效降低酶本身的残留风险。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供不同级别全能核酸酶[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]GMP[/font][font=宋体]级条件下生产的全能核酸酶[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]，无动物源性，可高效降解单链、双链、线性、环状、超螺旋等任何形式的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]。超高活性，应用场景广泛且使用量低不易残留，质量、性能、供货能力可靠，并已完成在[/font][font=Calibri]FDA[/font][font=宋体]的药物主文件申报备案（[/font][font=Calibri]DMF Number#:35978[/font][font=宋体]），满足药物申报的规范。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]应用场景：[/font][font=宋体]①去除疫苗、重组蛋白等生物制品中的外源性核酸。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②降低大分子样本制备过程中因核酸引起的粘度问题。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③去除病毒等颗粒表面的核酸，利于病毒颗粒的纯化。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④用于预防细胞结团。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]核酸高效清除解决方案常见问题[/font][font=Calibri]FAQ[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①哪些因素会影响[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]的消化效果？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]酶的添加量，反应条件（例如：时间、温度、[/font][font=Calibri]pH[/font][font=宋体]值），缓冲环境（例如：是否存在酶的抑制剂）等。不同样本的最佳使用量，需要经过实验摸索。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②哪些条件会抑制[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]的活性？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]可在较宽条件下保持活性，二价阳离子（[/font][font=Calibri]Mg2+[/font][font=宋体]）对其活性至关重要。当在含有以下物质的体系中， [/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]的活性会受到抑制：[/font][font=Calibri] 300 mM[/font][font=宋体]一价阳离子，[/font][font=Calibri] 100 mM[/font][font=宋体]磷酸盐，[/font][font=Calibri] 100 mM[/font][font=宋体]盐酸胍， [/font][font=Calibri] 100 mM[/font][font=宋体]硫酸铵等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③如何去除[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]使用常规色谱法，如亲和色谱法和离子交换色谱法，可以很容易地去除[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]。其他方便的纯化方法，如切向流过滤（[/font][font=Calibri]TFF[/font][font=宋体]）也适用于从生物制品中去[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]④如何灭活[/font][font=Calibri]SuperNuclease[/font][font=宋体]？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]采用[/font][font=Calibri]EDTA[/font][font=宋体]螯合金属离子会可逆地抑制全能核酸酶活性，极端条件会造成不可逆失活，例如[/font][font=Calibri]100 mM NaOH[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]70[/font][font=宋体]℃处理[/font][font=Calibri]30[/font][font=宋体]分钟等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]⑤[/font][font=Calibri]KIT-SSNP01[/font][font=宋体]是否可以用于其他品牌全能核酸酶残留检测？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]实验数据显示[/font][font=Calibri]KIT-SSNP01[/font][font=宋体]可检测主流进口品牌全能核酸酶产品。但由于各个公司的全能核酸酶可能在序列及工艺方面存在差异，建议进行实验验证确认后再使用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情就可以参看：[/font][font=Calibri]http[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]s[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]://cn.sinobiological.com/category/supernuclease-kit[/font][/font][font=Calibri] [/font]

有没有遇到？甲基对硫磷与乙烯菌核利在-5MS柱子上保留时间重合！

细菌的实验室检测方法进展——金黄色葡萄球菌的鉴定方法摘要：金黄色葡萄球菌广泛分布于自然界，多存在于人和动物的鼻腔、咽喉、皮肤及与外界相通的腔道。能引起人和动物机体局部、脏器的化脓性感染，重者可引起败血症、脓毒血症等全身感染。金黄色葡萄球菌也是国内外最常见的细菌性食物中毒病原菌之一，在我国由金黄色葡萄球肠毒素引起的食物中毒占细菌性食物中毒事件的前几位。典型的金黄色葡萄球菌为球型，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌肠毒素被分为7 个血清型，A、B、C（C1、C2、C3）、D、E。目前实验室对金黄色葡萄球菌的检验有传统培养法，金黄色葡萄球菌肠毒素的检测方法，脉冲场凝胶电泳检测分型方法和聚合酶链式反应（PCR）技术对金黄色葡萄球菌的检测方法。

1.各位大虾，鄙人试图将乙烯菌核利与（10种有机氯+5种菊酯）进行多残留检测，但是乙烯菌核利和β-BHC总是分不开，峰呈M型，温度条件也变换多次，该怎么做呢？2.还有，假如A和B两种药可以同时检测，在配A/B的混标时，是不是还要考虑A和B原来标样的介质（如甲醇和石油醚等）的互溶情况？？为了进行混合，可不可以改变原来的各自的介质？？

求硫丹、乙烯菌核利的检测方法！原来一直用761的方法检测这两种农药（ECD），现在业务部要求我们用20769来检测（LCMSMS），求指教！

（1）限制性核酸内切酶 一种内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA，俗称“分子手术刀”。内切酶是重组DNA技术和基因诊断中重要的一类工具酶。 （2）DNA连接酶 DNA酶能利用ATP或NAD+水解提供的能量催化DNA链的5'-磷酸末端与另一DNA链的3'-OH生成3',5'-磷酸二酯键，从而把两个DNA链连接起来。常见实验室常用的DNA连接酶，包括T4 DNA连接酶和Taq DNA连接酶等。 （3）DNA聚合酶 DNA聚合酶主要是催化脱氧核苷酸之间的聚合反应，连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起到关键作用。 DNA聚合酶与DNA连接酶的区别：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3'末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。 此外，DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，因此，DNA连接酶不需要模板。 （4）RNA聚合酶 RNA聚合酶以完整的双链DNA为模板，转录时DNA的双链结构部分解开，转录后DNA仍然保持双链的结构。常见RNA聚合酶：rRNA、mRNA、tRNA和其它小分子RNA，在RNA复制和转录中起作用。 （5）逆转录酶 逆转录酶具有三种酶活性，即RNA指导的DNA聚合酶、RNA酶、DNA指导的DNA聚合酶。在分子生物学实验中，广泛用于建立基因文库、获得目的基因等工作。 （6）解旋酶 解旋酶是一类解开氢键的酶，通过水解ATP供能，并识别复制叉的单链结构，因此，大部分解旋酶都具有ATP酶的活性。解旋酶大部分移动方向是5'→3'。 （7）核酸酶 核酸酶是指能降解核酸的酶，与聚合酶的功能相反，通过水解或打开在多核苷酸链中的相邻核苷酸的磷酸二酯键内的酯键发挥作用。核酸酶分为内切核酸酶和外切核酸酶，内切核酸酶能水解多核苷酸链中的内部键，而外切核酸酶则必须从末端开始水解反应。 （8）蛋白酶K 蛋白酶K是一种从白色念珠菌分离出来的蛋白溶解酶，具有很高活性，用于质粒或基因组DNA、RNA的分离和抽提。 （9）UNG酶 UNG酶可以选择性水解断裂含有dUTP的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，破坏形成的有缺失碱基的DNA链，从而降低非特异性扩增。

新华网社华盛顿4月22日电(记者任海军)美国研究人员22日公布研究报告称，一种致命隐球菌菌株正在美国西北地区以及加拿大不列颠哥伦比亚省扩散。　　研究人员表示，隐球菌通常只感染器官移植者、艾滋病患者等免疫力低下人群，但在北美传播的这种新菌株与之不同。领导这项研究的杜克大学学者埃德蒙伯恩斯表示，这种菌株令人不安，因为它似乎对其他健康人也构成威胁。　　据研究人员介绍，这种菌株致死率非常高，在他们研究的20多例病例中，死亡率约为25%。1999年至2003年，这种菌株仅局限于加拿大温哥华岛，但2003年至2006年，该菌株开始向加拿大不列颠哥伦比亚省大陆地区扩散，2005年至2009年扩散至美国华盛顿州和俄勒冈州，目前还可能进一步扩散至美国加利福尼亚州北部以及更远的地方。　　研究人员表示，目前感染者除人类外，还包括猫、狗、羊驼以及绵羊等动物，人畜感染这种菌株后可在两周后出现诸如持续数周的咳嗽、胸部剧痛、呼吸短促、头疼、发烧、盗汗及体重下降等症状。冷冻可以杀死这种菌株，但气候变化可促其传播。　　相关研究成果已发表在美国《公共科学图书馆病原体》杂志上。

金黄色葡萄球菌血浆凝固酶的增菌液选用BP平板的菌落还是血平板的菌落啊？我们实验室做了一个样品，选BP平板的菌落的增菌液做血浆凝固酶试验，凝集；选血平板的菌落的增菌液做血浆凝固酶试验，不凝集。这是为什么？结果判定为金黄色葡萄球菌阳性还是阴性呢？

"金黄色葡萄球菌（以下简称"金葡菌"）是一种常见细菌，吃了污染少量金葡菌的食品会闹肚子，但对人体的影响比较轻，也不用听到金黄色葡萄球菌就害怕。"中国农业大学生物学院教授、博士生导师王贺祥日前表示。 近期，思念、三全等速冻水饺相继被检出含有金葡菌，不少地方的超市相继将其产品下架，一时间消费者谈之色变。 金葡菌不可怕 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所研究员、国际食品微生物标准委员会（ICMSF）委员、中国食品科学技术学会副理事长刘秀梅介绍说，金葡菌广泛存在于自然环境中，如空气、土壤，是一种常见的微生物。人和动物是主要的病菌携带者，大约50%以上健康个体的鼻腔、咽喉、头发和表皮中都带有这种菌。中国科学院微生物研究所副所长、博士生导师东秀珠也表示，金葡菌哪里都有，人的脸上长疖子了也会有。 王贺祥说："西餐中未煎熟的牛排和生鱼片中也含有金葡菌，在生产加工过程中，金葡菌分子会吸附在食品上，这个很难避免。而且如果生鱼片保存不当，金葡菌还会滋生。" 刘秀梅表示，金葡菌主要的致病因素是由金葡菌产生的葡萄球菌肠毒素，毒素的产生和菌量的多少有关，国际公认产生葡萄球菌肠毒素的菌量浓度在100000个/g以上。金葡菌肠毒素中毒可使人产生剧烈的恶心、呕吐，同时伴有上腹部绞痛、腹泻。严重者可导致虚脱、肠痉挛和严重失水。但病程较短，1-2天内可恢复，预后一般良好。 据王贺祥介绍，金葡菌的营养细胞壁非常薄，在80℃的开水中煮5到10分钟就死了。一般煮熟了的冷冻食品中，金葡菌肯定死了，根本不用担心。

一、生物学性状　　根据最新分类原则，粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原，根据兰氏（Lancefield）血清学分类，可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠球菌和非肠球菌两类。前者包括粪链球菌（S.faecalis）、屎链球菌（S.faecium）和坚忍链球菌（S.durans）,后者有牛链球菌（S.bovis）和马肠链球菌(S.equinus)。　　粪链球菌菌形圆或椭圆，可顺链的方向延长,直径0.5-1.0微米,大多数成双或短链状排列,通常不运动。在丰富培养基上菌落大而光滑，直径1-2mm，全缘，罕见色素。其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10℃或45℃ pH 9.6或含6.5%NaCl肉汤培养基中生长，并能耐65℃ 30分钟。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。　　　近年来，DNA-DNA杂交结果显示，肠球菌与链球菌属同源程度低，故有学者建议另立肠球菌属，与人类有关者为粪肠球菌（E.faecalis）和屎肠球菌（E.faecium）。二、致病性　　　粪链球菌引起的感染有尿路感染、化脓性腹部感染、败血症、心内膜炎和腹泻发烧等。其中败血症最常继发于生殖泌尿性感染，皮肤、胆道、肠道等感染也可作为原发病灶。从天然乳清培养物中分离的菌株，能产生一种细菌素，叫肠球菌素（Enterocin），对单增李斯特氏菌有杀灭作用。三、流行病学　　粪链球菌为条件致病菌，它来源于人和温血动物的粪便，偶尔出现于感染的尿道及急性心内膜炎。它能够通过食品对人类造成感染，因而常见于许多食品，如火腿肠、炸肉丸、布丁及经过巴氏消毒的牛奶等，粪链球菌进入食物链的主要原因是不卫生的加工条件所致的，一般与直接的粪便感染无关。粪链球菌引起的感染大多是由于它的侵袭所造成，感染剂量较高，一般大于107个细菌。人、禽感染率最高，亦见于猪、牛、马、山羊、绵羊及兔。四、检验与控制1、检验：　　样品制备 取25g或25mL样品，放入225mL灭菌生理盐水中，充分混匀，制成1：10样品稀释液。根据样品的污染程度，制成适当的10倍递增稀释液。　　a.多管法：　　用适当的稀释液接种一套叠氮化钠葡萄糖肉汤管。接种量为1mL或以下的，使用10mL单料管；接种量为10mL，使用10mL双料管。35℃培养24-48h，并检查记录各管的混浊情况。用接种环将浑浊管中的培养物划线于PSE平板上，倒置平板于36℃培养24h。平板上出现的带棕色环的黑色菌落，确证为粪链球菌。根据接种的样品量和确证为是粪链球菌的管数，查MPN表，报告每克样品中的粪链球菌MPN值。　　b.滤膜法：　　倾注融化的4-5mL的KF琼脂于平板上，若平板表面有气泡，可用火焰灼除。根据样品的污染程度，使用样液的量为100，10，1.0，0.1或0.01mL。使用灭菌滤膜过滤样液，以能在滤膜上生长出20-100个菌落为宜。将滤过样液的滤膜紧贴在KF琼脂培养基表面上，避免出现气泡。倒置平板于36℃培养48h。粪链球菌在KF平板滤膜上形成暗红色至粉红色菌落。将典型菌落接种于脑心浸液斜面上，36℃培养48h。用其培养物做过氧化氢试验，过氧化氢浓度为3%，阳性反应者为非粪链球菌群细菌。将阴性反应者接种于脑心浸液肉汤，置45.5℃培养48h；同样方式接种一管胆盐肉汤，置36℃培养3天。在上述两种情况下生长者为粪链球菌。选择生长20-100个菌落的滤膜，根据所使用的样品量，计算出样品每克（毫升）中的粪链球菌数。　　c.平板计数法：　　 取1mL适当稀释液加入培养皿内，倾入12-15mL的KF或PSE培养基，转动平板充分混合。凝固后置36℃培养，KF平板培养48h，PSE平板培养24h。粪链球菌在KF平板上形成暗红色至粉红色菌落，边缘整齐，琼脂表面下菌落呈椭圆或晶体状；在PSE平板上形成带棕色环的棕黑色菌落。选择有30-300个菌落的平板进行记数。按粪链球菌数/g(mL)报告结果。2、控制　　由于粪链球菌可通过食物对人类造成感染，所以应从以下几个方面加以控制：　　加强生产区域的卫生管理，由于粪链球菌主要来源于人畜粪便，所以厕所要合理布局，避免粪便直接污染；生产人员要严格执行个人卫生制度。　　在加工过程中，严格注意每个关键点的控制，掌握好诸如温度、水源卫生等要素。　　对摆放时间过长的食物，如熟食制品、牛奶或奶制品等，要彻底加热再食用，春夏季尤其要注意。

2011年10月19日名牌水饺查出金黄色葡萄球菌可引发肺炎甚至败血病 带菌思念水饺被下架本报讯 (记者 孙宇) 在市食品办公布的新一期下架名单中，知名品牌思念三鲜水饺被检出可引起肺炎的金黄色葡萄球菌，现该批次水饺已经被全市停止销售。金黄色葡萄球菌在食品安全检查中为不得检出物质，该菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶。记者了解到，北京市工商局在近期对本市食品流通领域抽检中共发现不合格食品18个，除思念水饺被检出金黄色葡萄球菌外，甜蜜素过度和二氧化硫仍是食品抽检不合格的主因。北京市工商局提醒，凡已购买上述不合格食品的消费者可凭购物小票和食品外包装向销售单位要求退货。全市下架食品名单样品名称 商标 生产批次 标注生产单位名称 不合格项目 当事人姓名或名称泡菜 南大堡 2011.2.15 永年南大堡顺发酱菜厂 山梨酸 北京采育晨圆超市特级杏肉 津辉 2011.2.25 天津市家发商贸有限公司 二氧化硫 北京采育益廉美超市素牛肉丸 鄉俚人 2011.2.18 浏阳市乡里人食品有限公司 甜蜜素 北京采育益廉美超市红薯沙拉(糕点) 猫耳王 2011.3.18 郏县尔康食品厂 糖精钠 北京晶泽世纪百货商店蓝梅条 华夏开创 2011.3.5 天津市福美商贸有限公司 甜蜜素 北京黄村兴瑞红顶屋食品商店特级杏肉 津辉 2011.5.2 天津市家发商贸有限公司 二氧化硫 北京黄村兴瑞红顶屋食品商店满口福(调味面制食品) 标杰 2011.3.1 郑州市二七区裕和食品厂 甜蜜素 北京康庄联民超市多福源辣子棒(调味面制食品)标杰 2011.2.23 郑州市二七区裕和食品厂 甜蜜素 北京康庄联民超市三鲜水饺 思念 20110628106A郑州思念食品有限公司 金黄色葡萄球菌 北京物美京西便利超市有限责任公司物美河滩店豆油皮 晓帆 2011.2.20 内黄县黄豆制品厂 甲醛次硫酸氢钠苏州雨润发综合超市有限公司北京分公司辣哈哈(调味面制品) / 2011.4.22 菏泽市牡丹区周林食品厂 甜蜜素 北京清水永盛自选商店话梅肉 千峰 2011.5.15 甘肃省镇原县新千年食品 二氧化硫 北京陈天雨商店山楂大华系列 大华 2011.3.20 兴隆县大华食品有限公司 苯甲酸 北京陈天雨商店久味王(铁板烧) 久味赢 2011.4.16 望城县黄金乡久味王食品厂 甜蜜素苯甲酸 北京清水永盛自选商店桂味柠檬 银创 2011.5.1 汕头市果情食品有限公司 甜蜜素 北京陈天雨商店多味豆笋 味之天 2011.3.11 长沙市雨花区光大食品厂 苯甲酸 北京陈天雨商店腐竹 金龙顺昌 2011.4.1 北京金龙顺昌商贸有限公司吊白块 北京三家店振萍超市第一分公司中国红高级红酒 威亚 2010.12.18 青州市长城葡萄酒有限公司 糖精钠 北京三家店振萍超市

请教一下：溶血性链球菌和β型溶血性链球菌是一样的吗？只是叫法不同？还是说溶血性链球菌范围比较大吧？包括β型溶血性链球菌其他型号？

粪链球菌及检验 一、生物学性状　　根据最新分类原则，粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原，根据兰氏（Lancefield）血清学分类，可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠球菌和非肠球菌两类。前者包括粪链球菌（S.faecalis）、屎链球菌（S.faecium）和坚忍链球菌（S.durans）,后者有牛链球菌（S.bovis）和马肠链球菌(S.equinus)。　　粪链球菌菌形圆或椭圆，可顺链的方向延长,直径0.5-1.0微米,大多数成双或短链状排列,通常不运动。在丰富培养基上菌落大而光滑，直径1-2mm，全缘，罕见色素。其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10℃或45℃ pH 9.6或含6.5%NaCl肉汤培养基中生长，并能耐65℃ 30分钟。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。　　　近年来，DNA-DNA杂交结果显示，肠球菌与链球菌属同源程度低，故有学者建议另立肠球菌属，与人类有关者为粪肠球菌（E.faecalis）和屎肠球菌（E.faecium）。二、致病性　　　粪链球菌引起的感染有尿路感染、化脓性腹部感染、败血症、心内膜炎和腹泻发烧等。其中败血症最常继发于生殖泌尿性感染，皮肤、胆道、肠道等感染也可作为原发病灶。从天然乳清培养物中分离的菌株，能产生一种细菌素，叫肠球菌素（Enterocin），对单增李斯特氏菌有杀灭作用。三、流行病学　　粪链球菌为条件致病菌，它来源于人和温血动物的粪便，偶尔出现于感染的尿道及急性心内膜炎。它能够通过食品对人类造成感染，因而常见于许多食品，如火腿肠、炸肉丸、布丁及经过巴氏消毒的牛奶等，粪链球菌进入食物链的主要原因是不卫生的加工条件所致的，一般与直接的粪便感染无关。粪链球菌引起的感染大多是由于它的侵袭所造成，感染剂量较高，一般大于107个细菌。人、禽感染率最高，亦见于猪、牛、马、山羊、绵羊及兔。

【关键词】中检所对照品目录 药检所标准物质 标准物质网站 中华标准物质网 内容摘要：双链DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合，并激活临近的核酸酶。DNA双链中的一条单链逐步降解，同时另一条单链逐步进入细胞。 一、革兰氏阳性细菌，转化过程的几个阶段： 1.细菌感受态的形成 由于分泌一种称为感受态因子的小蛋白而导致细菌感受态的形成。 2.转化因子的吸收 双链DNA片段与感受态受体菌的细胞表面特定位点结合，并激活临近的核酸酶。DNA双链中的一条单链逐步降解，同时另一条单链逐步进入细胞。 3.整合复合物前体的形成 一种特殊蛋白与单链DNA结合，有效保护单链DNA免遭核酸酶的降解，并将其引导至受体菌染色体DNA处。 4.单链DNA转化因子的整合 转化DNA单链可以通过同源重组，置换受体细胞染色体DNA的同源区，形成异源杂合双链DNA结构。 5.转化子的形成 受体菌染色体组进行复制，杂合区段亦半保留复制，当细胞分裂后，此染色体发生分离，于是新形成一个转化子。 二、影响转化的因素 1.DNA能否进入细胞； 2.DNA进入细胞后的稳定性； 3.质粒DNA的大小，大质粒的转化效率低于小质粒，到目前，大于30kb的质粒，转化效率仍很低； 4.DNA的浓度、纯度和形状； 5.诱导感受态细菌所用的离子的种类和浓度； 6.热休克时间的长短及平板培养条件等。 本文参考了 国家标准物质网

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疑似的溶血性链球菌，进行了链激酶试验，在24小时内如何看是否完全溶解