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微球菌核酸酶

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}详细信息西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目公开招标公告陕西省-西安市状态:公告更新时间:2022-07-29招标文件:附件1西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目公开招标公告发布时间:2022072915:11:08西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目公开招标公告项目概况西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目招标项目的潜在投标人应在线上获取招标文件,并于2022年08月24日09时30分(北京时间)前递交投标文件。一、项目基本情况项目编号:XBMH2022152项目名称:西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目预算金额:576万元/年采购需求:西安交通大学第二附属医院采购分子组及大明宫院区医用试剂一批。本项目共分24个标段,各标标段具体采购的标的物及预算如下:标段号序号采购标的物名称检测方法采购预算(万元/年)中标家数参数要求招标最小单位第1标段(180万)1乙型肝炎病毒核酸定量检测PCR荧光探针法180万1家每测试2沙眼衣原体核酸检测每测试3淋球菌核酸测定每测试4解脲脲原体核酸检测每测试5单纯疱疹病毒II型核酸测定每测试7人巨细胞病毒核酸定量检测每测试8结核分枝杆菌核酸检测每测试9肺炎支原体核酸检测试剂盒每测试10EB病毒核酸检测每测试11幽门螺旋杆菌核酸检测每测试12肠道病毒71型核酸检测每测试13肠道病毒通用型核酸检测每测试14乙型肝炎病毒基因分型检测每测试15丙型肝炎病毒基因分型检测试剂盒每测试16人感染H7N9禽流感病毒RNA检测每测试17甲型H1N1流感病毒RNA检测每测试18季节性流感病毒H3亚型核酸检测每测试19季节性流感病毒H1亚型核酸检测每测试20Ⅰ群肠道沙门氏菌核酸检测每测试21发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒核酸检测每测试22柯萨奇病毒A16型核酸检测每测试23柯萨奇病毒A6型核酸检测每测试24柯萨奇病毒A10型核酸检测每测试25呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒每测试26登革病毒核酸检测每测试27HIV1核酸测定试剂盒每测试28中东呼吸综合征冠状病毒核酸检测每测试29寨卡病毒核酸检测每测试30B族链球菌核酸检测每测试31人博卡病毒核酸检测每测试32腺病毒核酸检测每测试33人鼻病毒核酸检测每测试34乙型肝炎病毒前C区/BCP区突变检测PCR反向点杂交法每测试35乙型肝炎病毒YMDD基因突变检测每测试36人乳头瘤病毒核酸检测及基因分型(至少标段含20种)PCR反向点杂交法每测试372019nCoV核酸快速检测试剂(标段含采样管及保存液、提取试剂、扩增试剂、八连管等耗材)荧光PCR法(快速扩增)1具备内源性内标;2.防污染系统。3.目的基因不少于双靶标;4检测最低下限小于等于500copy/L5快速核酸释放技术6扩增时间小于50分钟每测试382019nCoV核酸检测试剂(标段含采样管及保存液、提取试剂、扩增试剂、八连管等)荧光PCR法1具备内源性内标;2.防污染系统。3.目的基因不少于双靶标;4检测最低下限≤500copy/mL每测试39诺如病毒RNA荧光PCR法每测试40多瘤病毒(BKV、JCV)每测试41人偏肺病毒(HMPV)每测试42副流感病毒PIV每测试43甲型流感病毒每测试44乙型流感病毒每测试45呼吸道病毒核酸六重联检(甲、乙型流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒1型、副流感病毒2型)每测试46白血病融合基因每测试47细小病毒(B19)胶体金法每测试第2标段(145万)1核酸提取或纯化试剂磁珠法145万1家每测试2丙型肝炎病毒核酸定量检测PCR荧光探针法每测试3丙型肝炎病毒基因分型检测每测试4HBVDNA/HCVRNA/HIVRNA(1+2)型三联检测每测试5乙型肝炎病毒核酸定量检测(高敏)检测下限≤10copies/mL每测试6乙型肝炎病毒基因分型检测每测试7丙型肝炎病毒核酸定量检测(高敏)检测下限≤25copies/mL每测试8丙型肝炎病毒核酸定量检测(超敏)检测下限≤15copies/mL每测试9EB病毒核酸定量检测检测下限≤400copies/mL每测试10人巨细胞病毒核酸定量检测检测下限≤400copies/mL每测试11沙眼衣原体核酸检测、解脲脲原体核酸检测、淋球菌核酸检测检测下限≤400copies/mL每测试12新型冠状病毒2019nCoV核酸检测,最低检测下限≤200copy/L(标段含采样管及保存液、提取试剂、扩增试剂、八连管)荧光PCR法1具备内源性内标;2.防污染系统。3.目的基因不少于双靶标;4最低检测下限≤200copy/mL每测试13高危型人乳头状瘤病毒DNA检测(15种)荧光PCR法(无需杂交)每测试132019nCoV、甲型流感病毒、乙型流感病毒核酸三联检荧光PCR法1具备内源性内标;2.防污染系统。3检测最低下限小于等于500copy/mL14腺病毒核酸检测荧光PCR法每测试第3标段(30万)新冠核酸快检试剂2019nCoV核酸快速检测试剂(标段含采样管及保存液、保存管、提取试剂、扩增试剂、吸头、八连管等)快速核酸检测30万1家1磁珠法提取;2.全检测流程≤80分钟3检测模式:核酸提取、扩增检测均在同一封闭;4独立模块,随来随测,独立检测。5.目的基因不少于双靶标(ORFlab基因、N基因);6检测最低下限小于500copy/mL;7检测通量≥8;每测试第4标段(6万)(MTHFRC677T基因检测+高血压个体化治疗基因检测+HLAB27核酸检测等)MTHFRC677T基因检测(3个位点)PCR熔解曲线法6万1家每测试人类CYP2C19基因分型检测每测试CYP2D6*10、CYP2C9*3、ADRB1(1165GC)、AGTR1(116AC)、ACE(I/D)检测每测试人运动神经元存活基因1(SMN1)检测每测试测序反应通用试剂盒(高血压个体化治疗基因检测)聚合酶链杂交法每测试测序反应通用试剂盒(叶酸)每测试测序反应通用试剂盒(他汀类)每测试测序反应通用试剂盒(氯比格雷)每测试测序反应通用试剂盒(华法林)每测试测序反应通用试剂盒(硝酸甘油)每测试人类HLAB27核酸检测荧光PCR法每测试高血压个体化治疗基因检测试剂(5个位点)每测试人类HLAB*5801基因每测试B族链球菌核酸检测每测试结核分枝杆菌复合群核酸检测恒温扩增荧光法每测试MTHERC677基因检测PCR金磁微粒层析法每测试第5标段(20万)(免费按需提供检测的质控品、校准品、辅助试剂及一次性耗材)恒温扩增相关试剂(20万)结核TBRNA检测恒温扩增法20万1家每测试乙肝HBVRNA检测每测试泌尿生殖道病原体RNA检测(沙眼衣原体、解脲脲原体、淋病奈瑟菌、生殖支原体)每测试第6标段(5万)细菌耐药基因检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因检测荧光PCR法5万1家每测试碳青霉烯耐药基因KPC检测每测试鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素基因(OXA23)检测每测试耐万古霉素肠球菌基因(vanA,vanB)检测每测试第7标段(20万)呼吸道病原菌核酸检测呼吸道病原菌核酸检测(标段括常见细菌、特殊病原体如嗜肺军团菌、结核分枝杆菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、流感嗜血杆菌等)恒温扩增芯片法20万1家每测试第8标段(30万)维生素类检测脂溶维生素(VA,D2,D3,E,K)串联质谱30万1家每测试水溶维生素(维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B9、维生素B12)每测试类固醇激素类类固醇激素18项(二氢睾酮、脱氢表雄酮硫酸酯、脱氢表雄酮、皮质醇(氢化可的松)、雌酮、17α羟孕酮、孕烯醇酮、皮质酮、11去氧皮质醇、脱氧皮质酮、雄烯二酮、17α羟孕烯醇酮、睾酮、醛固酮、雌二醇、雌三醇、可的松(皮质素)、孕酮)1.82.5ng串联质谱每测试原醛激素5项(醛固酮、血管紧张素I,皮质醇,脱氧皮质酮、可的松)每测试四种激素萃取液(醛固酮、皮质醇,脱氧皮质酮、可的松)每测试血儿茶酚胺代谢检测(肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、变肾上腺素、去甲变肾上腺素)每测试尿儿茶8项(DA,E,NE,MN,NMN,3MT,HVA,VMA)每测试高香草酸和香草扁桃酸萃取液每测试人体代谢物浓度胆汁酸谱15项(胆酸、牛磺胆酸、甘氨脱氧胆酸、石胆酸、甘氨胆酸、牛磺熊脱氧胆酸、脱氧胆酸、牛磺石胆酸、甘氨熊脱氧胆酸、熊脱氧胆酸、甘氨石胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、牛磺脱氧胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸)串联质谱每测试药物浓度检测免疫抑制剂(他克莫司、环孢霉素A、西罗莫司)药物浓度检测串联质谱每测试抗癫痫药(卡马西平、卡马西平10,11环氧化物、奥卡西平、10羟基卡马西平、丙戊酸/苯巴比妥、苯妥英钠、拉莫三嗪、托吡酯、左乙拉西坦)药物浓度检测每测试抗菌药(万古霉素、伏立康唑、替考拉宁、利奈唑胺、美洛培南、替加环素、莫西沙星、氟康唑)药物浓度检测每测试抗肿瘤药(甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、多西他赛、多柔比星)每测试镇静催眠药(阿普唑仑、氯硝西泮、咪达唑仑、劳拉西泮、奥沙西泮、唑吡坦、艾司唑仑、替马西泮、溴西泮)药物浓度检测每测试抗抑郁药(米氮平、帕罗西汀、舍曲林、西酞普兰、艾司西酞普兰、文拉法辛、O–去甲文拉法辛、曲唑酮、氟西汀+去甲氟西汀、氟伏沙明、度洛西汀、安非他酮、羟安非他酮)药物浓度检测每测试抗精神病药(氯氮平及去甲氯氮平、氯丙嗪、利培酮+9–羟基利培酮、喹硫平、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑、奥氮平、齐拉西酮、氨磺必利、丙戊酸、舒必利、氟哌啶醇、奋乃静、氟奋乃静)药物浓度检测每测试第9标段(8万)阿司匹林耐药基因检测LTC4S一代测序技术8万1家为临床服用阿司匹林是否存在抵抗提供帮助每测试PTGS1每测试GP1BA高血糖个体化用药基因检测外周血液基因组中的CYP2C9、OCT2、SLCO1B1、PPARy基因多态性性为临床鉴别患者对降糖药物敏感性提供帮助每测试SLCO1B1ApoE检测SLCO1B1检测*1b和*5两个位点;ApoE检测E2和E4两个位点每测试个体化用药指导AGTR1/ACE/ADRB1CY2D6/CYP2C9/CYP3A5/NPPA检测高血压合理用药;总共检测7个基因,10位点每测试CYP2C19氯吡格雷用药每测试CYP2C9VKORC1华法林初始剂量每测试MTHFR检测评判叶酸代谢能力,指导合理补充叶酸每测试ALDH2检测判断硝酸甘油用药无效风险,评估酒精代谢能力每测试细胞因子联合检测试剂细胞因子六联检(IL2\IL4\IL6\IL10\IFNγ\TNFα);流式细胞术(2类注册证)每测试细胞因子七联检(IL2\IL4\IL6\IL10\IL17A\IFNγ\TNFα) 每测试细胞因子八联检(IL2\IL4\IL6\IL10\IL12P70\IL17A\IFNγ、TNFα) 每测试PD1(程序性死亡蛋白1)每测试十二联检(IL1β\IL2\IL4\IL6\IL8\IL10\IL12P70\IL17A\IFNγ\TNFα\IFNα)维生素类检测脂溶维生素(VA,D2,D3,E,K)串联质谱每测试水溶维生素(维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B9、维生素B12)每测试串联质谱检测3多种氨基酸检测试剂盒串联质谱每测试抗生素药物浓度检测试剂盒(阿米卡星、亚胺培南西司他丁、头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、美罗培南、替加环素、利奈唑胺、万古霉素、去甲万古霉素、替考拉宁、氟康唑、伏立康唑、醋酸卡泊芬净)每测试第10标段(5万)1白色念珠菌核酸检测荧光PCR法5万1家每测试2光滑假丝酵母菌核酸检测每测试3热带假丝酵母菌菌核酸检测每测试4金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸检测每测试5沙门氏菌和志贺氏菌核酸检测每测试6单纯疱疹病毒1型(HSV1)核酸检测每测试7单纯疱疹病毒2型(HSV2)核酸检测每测试8人感染H7N9禽流感病毒RNA检测每测试9麻疹病毒和风疹病毒核酸检测每测试10人乳头瘤病毒核酸检测及基因分型(至少标段含20种)荧光PCR定量法(无需杂交)每测试第11标段(大明宫)(60万)肝炎系列+新冠抗体+胃蛋白酶原乙型肝炎病毒表面抗体测定试剂盒磁微粒化学发光法60万1家每测试乙型肝炎病毒表面抗原测定试剂盒每测试乙型肝炎病毒e抗原测定试剂盒每测试乙型肝炎病毒e抗体测定试剂盒每测试乙型肝炎病毒核心抗体测定试剂盒每测试乙型肝炎病毒前S1抗原测定试剂盒每测试戊型肝炎病毒IgM测定试剂盒每测试丙型肝炎病毒抗体测定试剂盒每测试胃蛋白酶原Ⅰ测定试剂盒每测试胃蛋白酶原Ⅱ测定试剂盒每测试新型冠状病毒(2019nCoV)抗体检测试剂盒(磁微粒化学发光法)每测试抗HCV质控品每毫升HBcAb质控品每毫升HBeAb质控品每毫升HBeAg质控品每毫升HBsAb质控品每毫升HBsAg质控品每毫升抗HAVIgM质控每毫升抗HEVIgM质控品每毫升白介素6测定试剂盒(CMIA)每测试降钙素原测定每测试超敏C反应蛋白测定每测试肌酸激酶同工酶测定每测试心肌肌钙蛋白I测定每测试心肌肌钙蛋白T测定每测试肌红蛋白测定每测试心型脂肪酸结合蛋白测定每测试N端脑钠肽前体测定每测试白介素6质控品IL6免费提供胃蛋白酶原I质控品PGI免费提供胃蛋白酶原II质控品PGII免费提供人类免疫缺陷病毒抗原抗体测定试剂盒每测试梅毒螺旋体抗体测定试剂盒每测试甲型肝炎病毒IgM抗体测定试剂盒每测试激发液免费提供预激发液免费提供清洗液免费提供整装反应杯免费提供整装吸头免费提供样本稀释液免费提供FDP+DD纤维蛋白/原降解复合物胶乳免疫比浊法/颗粒增强免疫比浊法每测试D二聚体检测每测试FDP、D二聚体控制品每毫升D二聚体校准品每毫升FDP校准品每毫升生化类超敏C反应蛋白免疫比浊法每测试尿微量白蛋白测定每测试糖化白蛋白每测试糖化血红蛋白高压液相色谱法每测试第12标段(6万)多种心脑血管药物基因核酸样本预处理试剂心血管个性化用药指导11基因检测+核酸质谱法6万1家每测试心血管个性化用药指导21基因检测每测试高血压个性化用药指导9基因检测每测试冠心病个性化用药指导4基因检测每测试氯吡格雷+阿司匹林个性化用药基因检测每测试抗栓个性化用药9基因检测每测试儿童安全用药基因检测(核心板)每测试叶酸及营养每测试精神类药物基因核酸样本预处理试剂抑郁症个性化用药指导10基因检测每测试精神分裂症个性化用药10基因检测每测试癫痫个性化用药12基因检测每测试焦虑个性化用药9基因检测每测试肿瘤基因检测核酸样本预处理试剂化疗用药每测试男性18项高发肿瘤风险基因筛查(含BRCA基因)每测试女性21项高发肿瘤风险基因筛查(含BRCA基因)每测试核酸样本预处理试剂遗传性耳聋基因检测(20位点)每测试第13标段(5万)肝癌检测高尔基体蛋白73磁微粒化学发光免疫分析法5万1家每测试甲胎蛋白异质体比率(AFPL3%)每测试异常凝血酶原每测试感染三项1.全程C反应蛋白(CRP)上转发光免疫分析每测试2.血清淀粉样蛋白(SAA)每测试3.降钙素原(PCT)每测试第14标段(8万)ApoE基因型载脂蛋白EApoE基因型检测基因芯片法8万1家每测试第15标段(4万)SDC2基因甲基化检测人类SDC2基因甲基化检测荧光PCR法4万1家每测试第16标段(3万)S9甲基化Septin9基因甲基化检测荧光探针法3万1家每测试第17标段(25万)一次性加样枪头一次性加样枪头200微升迪肯酶免一体机专用25万1家每个一次性加样枪头1000微升每个核酸检测耗材盒装灭菌无酶吸头10微升核酸检测专用每个盒装灭菌无酶吸头100微升每个盒装灭菌无酶吸头200微升每个盒装灭菌无酶吸头1000微升每个加长型滤芯枪头(200ul)每个加长型滤芯枪头(10ul)每个HPV细胞保存液HPV细胞保存液(标段含采样器和保存管)5mlHPV分型专用每管采样管及保存管鼻拭子采样管、咽拭子采样管RNA检测标本采集每个第18标段(2万)六项呼吸道病毒核酸联合检测六项呼吸道核酸联合检测(甲、乙型流感病毒,呼吸道合胞病毒,腺病毒,肺炎支原体,人鼻病毒)荧光PCR法2万1家1具备内源性内标;2.防污染系统。3检测最低下限小于等于500copy/mL每测试六项呼吸道病原菌核酸检测六项呼吸道病原菌核酸检测(肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、嗜肺军团菌、金黄色葡萄糖菌)荧光PCR法1具备内源性内标;2.防污染系统。3检测最低下限小于等于500copy/mL每测试第19标段(1万)传染病三项血液筛查核酸检测HBV+HCV+HIV血液筛查核酸检测荧光PCR法1万1家每测试第20标段(3万)心脑血管疾病风险预测MTHFRC677T基因检测(3个位点)PCR金磁微粒层析法2万1家每测试ALDH2(Glu504Lys)基因检测每测试氧化型低密度脂蛋白金磁微粒免疫层析法每测试S100β蛋白检测每测试早产早破预测胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)——胶体金与酶免方法1万胎膜早破诊断每测试胎儿纤维连接蛋白(fFN)——早产风险预测每测试第21标段(3万)颗粒酶B及穿孔素联合检测GranzymeB抗体试剂流式细胞计数法2万1家每测试穿孔素(Perforin)抗体试剂每测试CD45检测试剂(APCCy7)每测试CD3检测试剂(PerCP)每测试CD8检测试剂(APC)每测试CD16检测试剂(CD16PECy7)每测试CD56检测试剂(CD16PECy7)每测试HLAB27基因分型HLAB27基因分型检测荧光PCR法1万每测试百日咳杆菌核酸检测百日咳杆菌核酸检测荧光PCR法每测试第22标段(3万)耳聋基因检测遗传性耳聋易感基因检测(至少20种基因位点)PCR反向点杂交2万1家每测试艰难梭菌抗原及毒素快检艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原GDH及毒素A/B酶联免疫层析法1万每测试第23标段(2万)SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测试剂盒荧光PCR法2万1家每测试第24标段(2万)呼吸道病毒6项呼吸道合胞病毒、呼吸道腺病毒、人偏肺病毒、副流感病毒Ⅰ型、副流感病毒Ⅱ型、副流感病毒Ⅲ型荧光PCR法1万最低检测限:1000copies/mL每测试诺如病毒核酸检测诺如病毒RNA检测(粪标本)荧光PCR法0.5万每测试肠道病毒核酸检测试剂可检测肠道病毒,如柯萨奇病毒A组2型、4型、5型、6型、7型、9型、10型、12型、16型;柯萨奇病毒B组1型、2型、3型、4型、5型;肠道病毒C组;肠道病毒71型和埃可病毒。荧光PCR法0.5万(咽拭子)每测试合计共24个标段,总计576万元各供应商可选择参投一个或多个标段,可兼投兼中,但必须对所投标段内全部标的进行投标报价,不得缺项、漏项。本项目(不接受)联合体投标。二、申请人的资格要求:1、基本资格条件:符合《政府采购法》第二十二条规定的供应商条件;1.1、提供在中华人民共和国境内注册的营业执照(或事业单位法人证书,或社会团体法人登记证书,或执业许可证)、组织机构代码证和税务登记证复印件【如已办理了多证合一,则仅需提供合证后的营业执照】,如供应商为自然人的需提供自然人身份证明。1.2、提供2021年度任意一个月的财务报表(至少标段括资产负债表、现金流量表和利润表)或具有财务审计资质的单位出具的2020年度财务会计报告或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明(附开户许可证);2021年以后新成立企业提供成立之日至开标前任意一个月的财务报表(至少标段括资产负债表、现金流量表和利润表)或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明(附开户许可证)。1.3、提供2021年以来至少一个月的纳税证明或完税证明(提供增值税、企业所得税至少一种),纳税证明或完税证明上应有代收机构或税务机关的公章或业务专用章。依法免税的供应商应提供相关文件证明。1.4、提供2021年以来至少一个月的社会保障资金缴存单据或社保机构开具的社会保险参保缴费情况证明。依法不需要缴纳社会保障资金的供应商应提供相关文件证明。1.5、提供履行合同所必需的设备和专业技术能力的书面声明。1.6、提供参加政府采购活动前3年内在经营活动中没有重大违法记录的书面声明。2、落实政府采购政策需满足的资格要求:本项目非专门面向中小企业采购。3、特定资格条件:3.1、供应商应授权合法的人员参加投标全过程,其中法定代表人直接参加投标的,须出具法人身份证,并与营业执照上信息一致;法定代表人授权代表参加投标的,须出具法定代表人授权书及授权代表身份证。3.2、投标产品纳入医疗器械(或药品)管理的,须提供供应商有效的医疗器械(或药品)经营许可证或经营备案凭证。3.3、投标产品纳入医疗器械(或药品)管理的,须提供产品有效的医疗器械(或药品)注册证或备案凭证。3.4、若投标产品为进口,供应商须提供有效的完整授权链的产品授权书(授权期限不足2年的须附能够提供持续供货的声明材料,英文授权须提供中文翻译版;制造商直接参与投标的不提供此项)。若投标产品为国产且纳入医疗器械(或药品)管理的,供应商须提供投标产品制造商有效的营业执照和生产许可证。3.5、供应商未被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)以下情形之一:①记录失信被执行人;②重大税收违法案件当事人名单。同时,在中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)“政府采购严重违法失信行为信息记录”中查询没有处于禁止参加政府采购活动的记录名单。本项目(不接受)联合体投标。三、获取招标文件1、时间:2022年08月01日至2022年08月05日,法定工作日每天上午09:0012:00,法定工作日每天下午14:0017:00(北京时间,法定节假日除外)地点:线上发售方式:(1)根据陕西省人民政府《关于加强新型冠状病毒感染的肺炎防控工作的通告》要求,本次招标文件采用线上发售,供应商在文件发售期以内将单位介绍信(介绍信中必须注明项目名称、项目编号、标段号)、经办人身份证、联系电话及电子邮箱等资料,加盖投标单位公章的彩色扫描件发送至邮箱714884417@qq.com,并及时关注邮箱回复消息。(2)招标文件售价人民币¥7200.00元(本招标项目各标段招标文件之和,每单个标段300元),售后不退。(标书费交纳信息:账户名称:陕西西北民航招标咨询有限公司;开户银行:建行西安高新科技支行;账号:61001925700052502533;转帐事由:项目名称简称、编号、标段号,如以个人名义转入,须备注单位名称。财务电话:029883479258013),采购代理机构在收到邮件并确认文件收费到账后,通过邮箱向供应商发售招标文件,请及时查收。四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点提交投标文件截止时间:2022年08月24日09时30分(北京时间)开标时间:2022年08月24日09时30分(北京时间)地点:西安市唐延路3号唐延国际中心AB区8楼开标室五、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜:(1)招标文件售价为每标段300元。(2)本项目接受进口产品投标。(3)采购项目需要落实的政府采购政策:1、《财政部国家发展改革委关于印发〈节能产品政府采购实施意见〉的通知》(财库〔2004〕185号);2、《国务院办公厅关于建立政府强制采购节能产品制度的通知》(国办发〔2007〕51号);3、《财政部环保总局关于环境标志产品政府采购实施的意见》(财库〔2006〕90号);4、《财政部司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知》(财库〔2014〕68号);5、《三部门联合发布关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》(财库〔2017〕141号);6、《财政部发展改革委生态环境部市场监管总局关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》(财库〔2019〕9号);7、《关于运用政府采购政策支持乡村产业振兴的通知》(财库〔2021〕19号);8、《政府采购促进中小企业发展管理办法》(财库〔2020〕46号);9、陕西省财政厅关于印发《陕西省中小企业政府采购信用融资办法》(陕财办采〔2018〕23号)。七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。1.采购人信息名称:西安交通大学第二附属医院地址:西安市西五路157号联系方式:冯老师029876798612.采购代理机构信息名称:陕西西北民航招标咨询有限公司地址:西安市唐延路3号唐延国际中心AB区8楼联系方式:佘冰霞029883479878046/139912653493.项目联系方式项目联系人:佘冰霞电话:029883479878046/13991265349(2022.07.27)重新招标公告分子组及大明宫耗材项目.pdf×扫码打开掌上仪信通App查看联系方式$('.clickModel').click(function(){$('.modelDiv').show()})$('.closeModel').click(function(){$('.modelDiv').hide()})基本信息关键内容:基因测序仪,流式细胞仪,核酸蛋白分析,细胞计数器,核酸提取仪,液相色谱仪,PCR开标时间:2022-08-2409:30预算金额:576.00万元采购单位:西安交通大学第二附属医院采购联系人:点击查看采购联系方式:点击查看招标代理机构:陕西西北民航招标咨询有限公司代理联系人:点击查看代理联系方式:点击查看详细信息西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目公开招标公告陕西省-西安市状态:公告更新时间:2022-07-29招标文件:附件1西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目公开招标公告发布时间:2022072915:11:08西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目公开招标公告项目概况西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目招标项目的潜在投标人应在线上获取招标文件,并于2022年08月24日09时30分(北京时间)前递交投标文件。一、项目基本情况项目编号:XBMH2022152项目名称:西安交通大学第二附属医院分子组及大明宫院区医用试剂采购项目预算金额:576万元/年采购需求:西安交通大学第二附属医院采购分子组及大明宫院区医用试剂一批。本项目共分24个标段,各标标段具体采购的标的物及预算如下:标段号序号采购标的物名称检测方法采购预算(万元/年)中标家数参数要求招标最小单位第1标段(180万)1乙型肝炎病毒核酸定量检测PCR荧光探针法180万1家每测试2沙眼衣原体核酸检测每测试3淋球菌核酸测定每测试4解脲脲原体核酸检测每测试5单纯疱疹病毒II型核酸测定每测试7人巨细胞病毒核酸定量检测每测试8结核分枝杆菌核酸检测每测试9肺炎支原体核酸检测试剂盒每测试10EB病毒核酸检测每测试11幽门螺旋杆菌核酸检测每测试12肠道病毒71型核酸检测每测试13肠道病毒通用型核酸检测每测试14乙型肝炎病毒基因分型检测每测试15丙型肝炎病毒基因分型检测试剂盒每测试16人感染H7N9禽流感病毒RNA检测每测试17甲型H1N1流感病毒RNA检测每测试18季节性流感病毒H3亚型核酸检测每测试19季节性流感病毒H1亚型核酸检测每测试20Ⅰ群肠道沙门氏菌核酸检测每测试21发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒核酸检测每测试22柯萨奇病毒A16型核酸检测每测试23柯萨奇病毒A6型核酸检测每测试24柯萨奇病毒A10型核酸检测每测试25呼吸道合胞病毒核酸检测试剂盒每测试26登革病毒核酸检测每测试27HIV1核酸测定试剂盒每测试28中东呼吸综合征冠状病毒核酸检测每测试29寨卡病毒核酸检测每测试30B族链球菌核酸检测每测试31人博卡病毒核酸检测每测试32腺病毒核酸检测每测试33人鼻病毒核酸检测每测试34乙型肝炎病毒前C区/BCP区突变检测PCR反向点杂交法每测试35乙型肝炎病毒YMDD基因突变检测每测试36人乳头瘤病毒核酸检测及基因分型(至少标段含20种)PCR反向点杂交法每测试372019nCoV核酸快速检测试剂(标段含采样管及保存液、提取试剂、扩增试剂、八连管等耗材)荧光PCR法(快速扩增)1具备内源性内标;2.防污染系统。3.目的基因不少于双靶标;4检测最低下限小于等于500copy/L5快速核酸释放技术6扩增时间小于50分钟每测试382019nCoV核酸检测试剂(标段含采样管及保存液、提取试剂、扩增试剂、八连管等)荧光PCR法1具备内源性内标;2.防污染系统。3.目的基因不少于双靶标;4检测最低下限≤500copy/mL每测试39诺如病毒RNA荧光PCR法每测试40多瘤病毒(BKV、JCV)每测试41人偏肺病毒(HMPV)每测试42副流感病毒PIV每测试43甲型流感病毒每测试44乙型流感病毒每测试45呼吸道病毒核酸六重联检(甲、乙型流感病毒、腺病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒1型、副流感病毒2型)每测试46白血病融合基因每测试47细小病毒(B19)胶体金法每测试第2标段(145万)1核酸提取或纯化试剂磁珠法145万1家每测试2丙型肝炎病毒核酸定量检测PCR荧光探针法每测试3丙型肝炎病毒基因分型检测每测试4HBVDNA/HCVRNA/HIVRNA(1+2)型三联检测每测试5乙型肝炎病毒核酸定量检测(高敏)检测下限≤10copies/mL每测试6乙型肝炎病毒基因分型检测每测试7丙型肝炎病毒核酸定量检测(高敏)检测下限≤25copies/mL每测试8丙型肝炎病毒核酸定量检测(超敏)检测下限≤15copies/mL每测试9EB病毒核酸定量检测检测下限≤400copies/mL每测试10人巨细胞病毒核酸定量检测检测下限≤400copies/mL每测试11沙眼衣原体核酸检测、解脲脲原体核酸检测、淋球菌核酸检测检测下限≤400copies/mL每测试12新型冠状病毒2019nCoV核酸检测,最低检测下限≤200copy/L(标段含采样管及保存液、提取试剂、扩增试剂、八连管)荧光PCR法1具备内源性内标;2.防污染系统。3.目的基因不少于双靶标;4最低检测下限≤200copy/mL每测试13高危型人乳头状瘤病毒DNA检测(15种)荧光PCR法(无需杂交)每测试132019nCoV、甲型流感病毒、乙型流感病毒核酸三联检荧光PCR法1具备内源性内标;2.防污染系统。3检测最低下限小于等于500copy/mL14腺病毒核酸检测荧光PCR法每测试第3标段(30万)新冠核酸快检试剂2019nCoV核酸快速检测试剂(标段含采样管及保存液、保存管、提取试剂、扩增试剂、吸头、八连管等)快速核酸检测30万1家1磁珠法提取;2.全检测流程≤80分钟3检测模式:核酸提取、扩增检测均在同一封闭;4独立模块,随来随测,独立检测。5.目的基因不少于双靶标(ORFlab基因、N基因);6检测最低下限小于500copy/mL;7检测通量≥8;每测试第4标段(6万)(MTHFRC677T基因检测+高血压个体化治疗基因检测+HLAB27核酸检测等)MTHFRC677T基因检测(3个位点)PCR熔解曲线法6万1家每测试人类CYP2C19基因分型检测每测试CYP2D6*10、CYP2C9*3、ADRB1(1165GC)、AGTR1(116AC)、ACE(I/D)检测每测试人运动神经元存活基因1(SMN1)检测每测试测序反应通用试剂盒(高血压个体化治疗基因检测)聚合酶链杂交法每测试测序反应通用试剂盒(叶酸)每测试测序反应通用试剂盒(他汀类)每测试测序反应通用试剂盒(氯比格雷)每测试测序反应通用试剂盒(华法林)每测试测序反应通用试剂盒(硝酸甘油)每测试人类HLAB27核酸检测荧光PCR法每测试高血压个体化治疗基因检测试剂(5个位点)每测试人类HLAB*5801基因每测试B族链球菌核酸检测每测试结核分枝杆菌复合群核酸检测恒温扩增荧光法每测试MTHERC677基因检测PCR金磁微粒层析法每测试第5标段(20万)(免费按需提供检测的质控品、校准品、辅助试剂及一次性耗材)恒温扩增相关试剂(20万)结核TBRNA检测恒温扩增法20万1家每测试乙肝HBVRNA检测每测试泌尿生殖道病原体RNA检测(沙眼衣原体、解脲脲原体、淋病奈瑟菌、生殖支原体)每测试第6标段(5万)细菌耐药基因检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因检测荧光PCR法5万1家每测试碳青霉烯耐药基因KPC检测每测试鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类抗生素基因(OXA23)检测每测试耐万古霉素肠球菌基因(vanA,vanB)检测每测试第7标段(20万)呼吸道病原菌核酸检测呼吸道病原菌核酸检测(标段括常见细菌、特殊病原体如嗜肺军团菌、结核分枝杆菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、流感嗜血杆菌等)恒温扩增芯片法20万1家每测试第8标段(30万)维生素类检测脂溶维生素(VA,D2,D3,E,K)串联质谱30万1家每测试水溶维生素(维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B9、维生素B12)每测试类固醇激素类类固醇激素18项(二氢睾酮、脱氢表雄酮硫酸酯、脱氢表雄酮、皮质醇(氢化可的松)、雌酮、17α羟孕酮、孕烯醇酮、皮质酮、11去氧皮质醇、脱氧皮质酮、雄烯二酮、17α羟孕烯醇酮、睾酮、醛固酮、雌二醇、雌三醇、可的松(皮质素)、孕酮)1.82.5ng串联质谱每测试原醛激素5项(醛固酮、血管紧张素I,皮质醇,脱氧皮质酮、可的松)每测试四种激素萃取液(醛固酮、皮质醇,脱氧皮质酮、可的松)每测试血儿茶酚胺代谢检测(肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺、变肾上腺素、去甲变肾上腺素)每测试尿儿茶8项(DA,E,NE,MN,NMN,3MT,HVA,VMA)每测试高香草酸和香草扁桃酸萃取液每测试人体代谢物浓度胆汁酸谱15项(胆酸、牛磺胆酸、甘氨脱氧胆酸、石胆酸、甘氨胆酸、牛磺熊脱氧胆酸、脱氧胆酸、牛磺石胆酸、甘氨熊脱氧胆酸、熊脱氧胆酸、甘氨石胆酸、牛磺鹅脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、牛磺脱氧胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸)串联质谱每测试药物浓度检测免疫抑制剂(他克莫司、环孢霉素A、西罗莫司)药物浓度检测串联质谱每测试抗癫痫药(卡马西平、卡马西平10,11环氧化物、奥卡西平、10羟基卡马西平、丙戊酸/苯巴比妥、苯妥英钠、拉莫三嗪、托吡酯、左乙拉西坦)药物浓度检测每测试抗菌药(万古霉素、伏立康唑、替考拉宁、利奈唑胺、美洛培南、替加环素、莫西沙星、氟康唑)药物浓度检测每测试抗肿瘤药(甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、多西他赛、多柔比星)每测试镇静催眠药(阿普唑仑、氯硝西泮、咪达唑仑、劳拉西泮、奥沙西泮、唑吡坦、艾司唑仑、替马西泮、溴西泮)药物浓度检测每测试抗抑郁药(米氮平、帕罗西汀、舍曲林、西酞普兰、艾司西酞普兰、文拉法辛、O–去甲文拉法辛、曲唑酮、氟西汀+去甲氟西汀、氟伏沙明、度洛西汀、安非他酮、羟安非他酮)药物浓度检测每测试抗精神病药(氯氮平及去甲氯氮平、氯丙嗪、利培酮+9–羟基利培酮、喹硫平、阿立哌唑、脱氢阿立哌唑、奥氮平、齐拉西酮、氨磺必利、丙戊酸、舒必利、氟哌啶醇、奋乃静、氟奋乃静)药物浓度检测每测试第9标段(8万)阿司匹林耐药基因检测LTC4S一代测序技术8万1家为临床服用阿司匹林是否存在抵抗提供帮助每测试PTGS1每测试GP1BA高血糖个体化用药基因检测外周血液基因组中的CYP2C9、OCT2、SLCO1B1、PPARy基因多态性性为临床鉴别患者对降糖药物敏感性提供帮助每测试SLCO1B1ApoE检测SLCO1B1检测*1b和*5两个位点;ApoE检测E2和E4两个位点每测试个体化用药指导AGTR1/ACE/ADRB1CY2D6/CYP2C9/CYP3A5/NPPA检测高血压合理用药;总共检测7个基因,10位点每测试CYP2C19氯吡格雷用药每测试CYP2C9VKORC1华法林初始剂量每测试MTHFR检测评判叶酸代谢能力,指导合理补充叶酸每测试ALDH2检测判断硝酸甘油用药无效风险,评估酒精代谢能力每测试细胞因子联合检测试剂细胞因子六联检(IL2\IL4\IL6\IL10\IFNγ\TNFα);流式细胞术(2类注册证)每测试细胞因子七联检(IL2\IL4\IL6\IL10\IL17A\IFNγ\TNFα) 每测试细胞因子八联检(IL2\IL4\IL6\IL10\IL12P70\IL17A\IFNγ、TNFα) 每测试PD1(程序性死亡蛋白1)每测试十二联检(IL1β\IL2\IL4\IL6\IL8\IL10\IL12P70\IL17A\IFNγ\TNFα\IFNα)维生素类检测脂溶维生素(VA,D2,D3,E,K)串联质谱每测试水溶维生素(维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B9、维生素B12)每测试串联质谱检测3多种氨基酸检测试剂盒串联质谱每测试抗生素药物浓度检测试剂盒(阿米卡星、亚胺培南西司他丁、头孢哌酮舒巴坦、哌拉西林他唑巴坦、美罗培南、替加环素、利奈唑胺、万古霉素、去甲万古霉素、替考拉宁、氟康唑、伏立康唑、醋酸卡泊芬净)每测试第10标段(5万)1白色念珠菌核酸检测荧光PCR法5万1家每测试2光滑假丝酵母菌核酸检测每测试3热带假丝酵母菌菌核酸检测每测试4金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌核酸检测每测试5沙门氏菌和志贺氏菌核酸检测每测试6单纯疱疹病毒1型(HSV1)核酸检测每测试7单纯疱疹病毒2型(HSV2)核酸检测每测试8人感染H7N9禽流感病毒RNA检测每测试9麻疹病毒和风疹病毒核酸检测每测试10人乳头瘤病毒核酸检测及基因分型(至少标段含20种)荧光PCR定量法(无需杂交)每测试第11标段(大明宫)(60万)肝炎系列+新冠抗体+胃蛋白酶原乙型肝炎病毒表面抗体测定试剂盒磁微粒化学发光法60万1家每测试乙型肝炎病毒表面抗原测定试剂盒每测试乙型肝炎病毒e抗原测定试剂盒每测试乙型肝炎病毒e抗体测定试剂盒每测试乙型肝炎病毒核心抗体测定试剂盒每测试乙型肝炎病毒前S1抗原测定试剂盒每测试戊型肝炎病毒IgM测定试剂盒每测试丙型肝炎病毒抗体测定试剂盒每测试胃蛋白酶原Ⅰ测定试剂盒每测试胃蛋白酶原Ⅱ测定试剂盒每测试新型冠状病毒(2019nCoV)抗体检测试剂盒(磁微粒化学发光法)每测试抗HCV质控品每毫升HBcAb质控品每毫升HBeAb质控品每毫升HBeAg质控品每毫升HBsAb质控品每毫升HBsAg质控品每毫升抗HAVIgM质控每毫升抗HEVIgM质控品每毫升白介素6测定试剂盒(CMIA)每测试降钙素原测定每测试超敏C反应蛋白测定每测试肌酸激酶同工酶测定每测试心肌肌钙蛋白I测定每测试心肌肌钙蛋白T测定每测试肌红蛋白测定每测试心型脂肪酸结合蛋白测定每测试N端脑钠肽前体测定每测试白介素6质控品IL6免费提供胃蛋白酶原I质控品PGI免费提供胃蛋白酶原II质控品PGII免费提供人类免疫缺陷病毒抗原抗体测定试剂盒每测试梅毒螺旋体抗体测定试剂盒每测试甲型肝炎病毒IgM抗体测定试剂盒每测试激发液免费提供预激发液免费提供清洗液免费提供整装反应杯免费提供整装吸头免费提供样本稀释液免费提供FDP+DD纤维蛋白/原降解复合物胶乳免疫比浊法/颗粒增强免疫比浊法每测试D二聚体检测每测试FDP、D二聚体控制品每毫升D二聚体校准品每毫升FDP校准品每毫升生化类超敏C反应蛋白免疫比浊法每测试尿微量白蛋白测定每测试糖化白蛋白每测试糖化血红蛋白高压液相色谱法每测试第12标段(6万)多种心脑血管药物基因核酸样本预处理试剂心血管个性化用药指导11基因检测+核酸质谱法6万1家每测试心血管个性化用药指导21基因检测每测试高血压个性化用药指导9基因检测每测试冠心病个性化用药指导4基因检测每测试氯吡格雷+阿司匹林个性化用药基因检测每测试抗栓个性化用药9基因检测每测试儿童安全用药基因检测(核心板)每测试叶酸及营养每测试精神类药物基因核酸样本预处理试剂抑郁症个性化用药指导10基因检测每测试精神分裂症个性化用药10基因检测每测试癫痫个性化用药12基因检测每测试焦虑个性化用药9基因检测每测试肿瘤基因检测核酸样本预处理试剂化疗用药每测试男性18项高发肿瘤风险基因筛查(含BRCA基因)每测试女性21项高发肿瘤风险基因筛查(含BRCA基因)每测试核酸样本预处理试剂遗传性耳聋基因检测(20位点)每测试第13标段(5万)肝癌检测高尔基体蛋白73磁微粒化学发光免疫分析法5万1家每测试甲胎蛋白异质体比率(AFPL3%)每测试异常凝血酶原每测试感染三项1.全程C反应蛋白(CRP)上转发光免疫分析每测试2.血清淀粉样蛋白(SAA)每测试3.降钙素原(PCT)每测试第14标段(8万)ApoE基因型载脂蛋白EApoE基因型检测基因芯片法8万1家每测试第15标段(4万)SDC2基因甲基化检测人类SDC2基因甲基化检测荧光PCR法4万1家每测试第16标段(3万)S9甲基化Septin9基因甲基化检测荧光探针法3万1家每测试第17标段(25万)一次性加样枪头一次性加样枪头200微升迪肯酶免一体机专用25万1家每个一次性加样枪头1000微升每个核酸检测耗材盒装灭菌无酶吸头10微升核酸检测专用每个盒装灭菌无酶吸头100微升每个盒装灭菌无酶吸头200微升每个盒装灭菌无酶吸头1000微升每个加长型滤芯枪头(200ul)每个加长型滤芯枪头(10ul)每个HPV细胞保存液HPV细胞保存液(标段含采样器和保存管)5mlHPV分型专用每管采样管及保存管鼻拭子采样管、咽拭子采样管RNA检测标本采集每个第18标段(2万)六项呼吸道病毒核酸联合检测六项呼吸道核酸联合检测(甲、乙型流感病毒,呼吸道合胞病毒,腺病毒,肺炎支原体,人鼻病毒)荧光PCR法2万1家1具备内源性内标;2.防污染系统。3检测最低下限小于等于500copy/mL每测试六项呼吸道病原菌核酸检测六项呼吸道病原菌核酸检测(肺炎链球菌、肺炎克雷伯杆菌、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌、嗜肺军团菌、金黄色葡萄糖菌)荧光PCR法1具备内源性内标;2.防污染系统。3检测最低下限小于等于500copy/mL每测试第19标段(1万)传染病三项血液筛查核酸检测HBV+HCV+HIV血液筛查核酸检测荧光PCR法1万1家每测试第20标段(3万)心脑血管疾病风险预测MTHFRC677T基因检测(3个位点)PCR金磁微粒层析法2万1家每测试ALDH2(Glu504Lys)基因检测每测试氧化型低密度脂蛋白金磁微粒免疫层析法每测试S100β蛋白检测每测试早产早破预测胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)——胶体金与酶免方法1万胎膜早破诊断每测试胎儿纤维连接蛋白(fFN)——早产风险预测每测试第21标段(3万)颗粒酶B及穿孔素联合检测GranzymeB抗体试剂流式细胞计数法2万1家每测试穿孔素(Perforin)抗体试剂每测试CD45检测试剂(APCCy7)每测试CD3检测试剂(PerCP)每测试CD8检测试剂(APC)每测试CD16检测试剂(CD16PECy7)每测试CD56检测试剂(CD16PECy7)每测试HLAB27基因分型HLAB27基因分型检测荧光PCR法1万每测试百日咳杆菌核酸检测百日咳杆菌核酸检测荧光PCR法每测试第22标段(3万)耳聋基因检测遗传性耳聋易感基因检测(至少20种基因位点)PCR反向点杂交2万1家每测试艰难梭菌抗原及毒素快检艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原GDH及毒素A/B酶联免疫层析法1万每测试第23标段(2万)SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测试剂盒荧光PCR法2万1家每测试第24标段(2万)呼吸道病毒6项呼吸道合胞病毒、呼吸道腺病毒、人偏肺病毒、副流感病毒Ⅰ型、副流感病毒Ⅱ型、副流感病毒Ⅲ型荧光PCR法1万最低检测限:1000copies/mL每测试诺如病毒核酸检测诺如病毒RNA检测(粪标本)荧光PCR法0.5万每测试肠道病毒核酸检测试剂可检测肠道病毒,如柯萨奇病毒A组2型、4型、5型、6型、7型、9型、10型、12型、16型;柯萨奇病毒B组1型、2型、3型、4型、5型;肠道病毒C组;肠道病毒71型和埃可病毒。荧光PCR法0.5万(咽拭子)每测试合计共24个标段,总计576万元各供应商可选择参投一个或多个标段,可兼投兼中,但必须对所投标段内全部标的进行投标报价,不得缺项、漏项。本项目(不接受)联合体投标。二、申请人的资格要求:1、基本资格条件:符合《政府采购法》第二十二条规定的供应商条件;1.1、提供在中华人民共和国境内注册的营业执照(或事业单位法人证书,或社会团体法人登记证书,或执业许可证)、组织机构代码证和税务登记证复印件【如已办理了多证合一,则仅需提供合证后的营业执照】,如供应商为自然人的需提供自然人身份证明。1.2、提供2021年度任意一个月的财务报表(至少标段括资产负债表、现金流量表和利润表)或具有财务审计资质的单位出具的2020年度财务会计报告或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明(附开户许可证);2021年以后新成立企业提供成立之日至开标前任意一个月的财务报表(至少标段括资产负债表、现金流量表和利润表)或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明(附开户许可证)。1.3、提供2021年以来至少一个月的纳税证明或完税证明(提供增值税、企业所得税至少一种),纳税证明或完税证明上应有代收机构或税务机关的公章或业务专用章。依法免税的供应商应提供相关文件证明。1.4、提供2021年以来至少一个月的社会保障资金缴存单据或社保机构开具的社会保险参保缴费情况证明。依法不需要缴纳社会保障资金的供应商应提供相关文件证明。1.5、提供履行合同所必需的设备和专业技术能力的书面声明。1.6、提供参加政府采购活动前3年内在经营活动中没有重大违法记录的书面声明。2、落实政府采购政策需满足的资格要求:本项目非专门面向中小企业采购。3、特定资格条件:3.1、供应商应授权合法的人员参加投标全过程,其中法定代表人直接参加投标的,须出具法人身份证,并与营业执照上信息一致;法定代表人授权代表参加投标的,须出具法定代表人授权书及授权代表身份证。3.2、投标产品纳入医疗器械(或药品)管理的,须提供供应商有效的医疗器械(或药品)经营许可证或经营备案凭证。3.3、投标产品纳入医疗器械(或药品)管理的,须提供产品有效的医疗器械(或药品)注册证或备案凭证。3.4、若投标产品为进口,供应商须提供有效的完整授权链的产品授权书(授权期限不足2年的须附能够提供持续供货的声明材料,英文授权须提供中文翻译版;制造商直接参与投标的不提供此项)。若投标产品为国产且纳入医疗器械(或药品)管理的,供应商须提供投标产品制造商有效的营业执照和生产许可证。3.5、供应商未被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)以下情形之一:①记录失信被执行人;②重大税收违法案件当事人名单。同时,在中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)“政府采购严重违法失信行为信息记录”中查询没有处于禁止参加政府采购活动的记录名单。本项目(不接受)联合体投标。三、获取招标文件1、时间:2022年08月01日至2022年08月05日,法定工作日每天上午09:0012:00,法定工作日每天下午14:0017:00(北京时间,法定节假日除外)地点:线上发售方式:(1)根据陕西省人民政府《关于加强新型冠状病毒感染的肺炎防控工作的通告》要求,本次招标文件采用线上发售,供应商在文件发售期以内将单位介绍信(介绍信中必须注明项目名称、项目编号、标段号)、经办人身份证、联系电话及电子邮箱等资料,加盖投标单位公章的彩色扫描件发送至邮箱714884417@qq.com,并及时关注邮箱回复消息。(2)招标文件售价人民币¥7200.00元(本招标项目各标段招标文件之和,每单个标段300元),售后不退。(标书费交纳信息:账户名称:陕西西北民航招标咨询有限公司;开户银行:建行西安高新科技支行;账号:61001925700052502533;转帐事由:项目名称简称、编号、标段号,如以个人名义转入,须备注单位名称。财务电话:029883479258013),采购代理机构在收到邮件并确认文件收费到账后,通过邮箱向供应商发售招标文件,请及时查收。四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点提交投标文件截止时间:2022年08月24日09时30分(北京时间)开标时间:2022年08月24日09时30分(北京时间)地点:西安市唐延路3号唐延国际中心AB区8楼开标室五、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜:(1)招标文件售价为每标段300元。(2)本项目接受进口产品投标。(3)采购项目需要落实的政府采购政策:1、《财政部国家发展改革委关于印发〈节能产品政府采购实施意见〉的通知》(财库〔2004〕185号);2、《国务院办公厅关于建立政府强制采购节能产品制度的通知》(国办发〔2007〕51号);3、《财政部环保总局关于环境标志产品政府采购实施的意见》(财库〔2006〕90号);4、《财政部司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知》(财库〔2014〕68号);5、《三部门联合发布关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》(财库〔2017〕141号);6、《财政部发展改革委生态环境部市场监管总局关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》(财库〔2019〕9号);7、《关于运用政府采购政策支持乡村产业振兴的通知》(财库〔2021〕19号);8、《政府采购促进中小企业发展管理办法》(财库〔2020〕46号);9、陕西省财政厅关于印发《陕西省中小企业政府采购信用融资办法》(陕财办采〔2018〕23号)。七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。1.采购人信息名称:西安交通大学第二附属医院地址:西安市西五路157号联系方式:冯老师029876798612.采购代理机构信息名称:陕西西北民航招标咨询有限公司地址:西安市唐延路3号唐延国际中心AB区8楼联系方式:佘冰霞029883479878046/139912653493.项目联系方式项目联系人:佘冰霞电话:029883479878046/13991265349(2022.07.27)重新招标公告分子组及大明宫耗材项目.pdf
  • 我国科学家解析结核杆菌核糖体大亚基与抗生素结合的三维结构
    由结核杆菌引起的结核病是全球重要的慢性疾病。据世界卫生组织发布的《2019年全球结核病报告》数据,全球结核潜伏感染人群约17亿,占全人群的1/4左右,结核病仍是全球前10位死因之一。目前结核杆菌耐药性问题日益严重,了解结核杆菌耐药机制并研发新的治疗结核病药物对实现“终止结核病策略”意义重大。  近日,复旦大学和北京大学为主的联合团队在《Emerging Microbes & Infections》杂志上发表了题为“Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis 50S ribosomal subunit bound with clarithromycin reveals dynamic and specific interactions with macrolides”的文章,该研究解析了结核杆菌核糖体大亚基与大环内酯类抗生素克拉霉素(Clarithromycin,CTY)结合的冷冻电镜三维结构。  研究团队发现抗生素CTY结合位点位于结核杆菌核糖体大亚基新生肽链通道靠近rRNA第2062位腺嘌呤(A2062)的位置,与其他大环内酯抗生素的结合位置基本一致。研究团队基于研究获得的密度图,认为结合CTY的结核杆菌大亚基的A2062存在两种构象;与已发表的核糖体与大环内酯结合的结构比较,认为A2062与特定的大环内酯类抗生素结合的动力学可能调节肽基转移酶向翻译阻滞方向发展。该研究对结核杆菌核糖体大亚基A2062与大环内酯类药物的动力学研究结果,可能有助于合理设计下一代抗结核药物,以对抗日益严重的结核杆菌耐药问题。  论文链接:  https://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/22221751.2021.2022439  注:此研究成果摘自《Emerging Microbes & Infections》杂志,文章内容不代表本网站观点和立场,仅供参考。
  • 用于确定真菌核糖体结构的冷冻电镜
    大多数人身上携带真菌白色念珠菌,没有它会引起很多问题。然而,这种真菌的全身感染是危险的并且难以治疗。很少有抗菌剂是有效的,而且它的耐药性正在增加。包括格罗宁根大学副教授 Albert Guskov 在内的一个国际科学家小组已经使用单粒子冷冻电镜来确定真菌核糖体的结构。他们的研究结果近日发表在《科学进展》上,揭示了新药的潜在目标。白色念珠菌通常不会引起任何问题,或者只是容易治疗的皮肤瘙痒感染。然而,在极少数情况下,它可能会导致可能致命的全身感染。现有的抗真菌药物会引起很多副作用并且价格昂贵。此外,白色念珠菌的耐药性越来越强,因此确实需要新的药物靶点。“我们注意到没有抗真菌药物针对蛋白质合成,而一半的抗菌药物会干扰这个系统,”Guskov说。造成这种情况的一个原因是真菌核糖体,即将遗传密码转化为蛋白质的细胞机器,在人类和真菌中非常相似。所以,你需要一种非常有选择性的药物来避免杀死我们自己的细胞。——Albert Guskov,格罗宁根大学副教授原子分辨率因此,Guskov 和他的合作者推断,获得白色念珠菌核糖体的结构对于寻找药物靶点很有价值。经典的方法是从纯化的核糖体中生长晶体,并使用 X 射线晶体学确定它们的结构;然而,这是一项费力的技术。相反,他们使用单粒子冷冻电镜,其中大量单粒子在电子显微镜中在非常低的温度下成像。从不同角度看到的单个粒子的图像随后被组合以产生原子分辨率的结构。突变' 通过这种方式,我们解决了空缺和抑制剂结合的真菌核糖体的结构,并将它们的功能与酵母和兔子的核糖体进行了比较——后者作为人类核糖体的模型——并重复了与不同核糖体结合的核糖体抑制剂,”Guskov 解释道。其中一种抑制剂是抗微生物放线菌酮 (CHX),已知白色念珠菌对其具有抗药性。通过比较这些结构,科学家们注意到在蛋白质合成中起关键作用的 E 位点的单个突变阻止了 CHX 与白色念珠菌核糖体结合。 ' 突变将这个E位点结构中的一个氨基酸从脯氨酸改变为谷氨酰胺。这种替代减少了结合位点的大小,因此抑制剂不能附着,因此无效。另一种抑制剂叶花苷不会被突变阻断。威胁' 通过比较白色念珠菌和人类空缺核糖体中 E 位点的结构以及不同抑制剂与该位点结合方式的信息,我们可以开发出一种特异性抑制剂,它可以阻断真菌核糖体,但不能阻断人类的核糖体。这将成为治疗真菌感染的选择性药物。科学家们目前正在筛选分子库以寻找药物先导物。 “开发针对白色念珠菌的疫苗极具挑战性,就像我们针对冠状病毒所做的那样。因此,我们需要药物来治疗全身感染,”Guskov解释道。 “这种真菌日益增加的耐药性是一个真正的威胁。如果这种情况继续下去,除非开发出新药,否则我们可能会遇到严重的麻烦。Source:University of GroningenJournal reference:Zgadzay, Y., et al. (2022) E-site drug specificity of the human pathogen Candida albicans ribosome. Science Advances. doi.org/10.1126/sciadv.abn1062.
  • Nature | 单密码子分辨率翻译测序新方法—scRibo-seq
    单细胞测序的方法对于不同的生物体、不同组织以及不同细胞种类达到了更为深入的探究。这些工具集中于对单细胞的基因组【1】、表观遗传组【2】以及转录组进行分析【3】。但是现今想要在单个细胞中进行翻译过程的测量并非易事。 2021年9月8日,荷兰皇家艺术和科学学院与乌得勒支大学医学中心Oncode研究所Alexander van Oudenaarden研究组以及Michael VanInsberghe(第一作者)在Nature期刊上发表Single-cell Ribo-seq reveals cell cycle-dependent translational pausing,构建了能够达到单密码子精度的翻译测量测序技术scRibo-seq,并且通过该技术对细胞周期依赖的翻译暂停特点进行了揭示。 近年来,关于单细胞水平、翻译过程的检测的技术有一定的进展,比如在单细胞分辨率上进行的质谱分析技术SCoPE-MS【4】。SCoPE-MS技术可以对小鼠胚胎干细胞分化过程中的一千多种蛋白进行量化。但是,分辨率还不够。由此,scRibo-seq技术应运而生。 scRibo-seq技术是将核酸酶足迹与小RNA文库构建、尺寸富集技术结合起来,以测量单细胞中的翻译动态变化过程(图1)。单个活细胞被分选到含有放线菌酮(Cycloheximide)的裂解缓冲液中,以稳定和停止转录本上的核糖体,随后暴露的RNA被微球菌核酸酶MNase消化,由此产生核糖体保护足迹(Ribosome-protected footprints,RPFs)。这些足迹通过连接包含独特分子标识符(Unique molecular identifier,UMI)和引物位点的适配子,转化为测序库,用于后续的cDNA合成和PCR扩增。最后,对PCR翻译过产物进行尺寸富集,选择符合典型核糖体保护足迹的产物进行测序。 为了验证该方法的有效性,作者们首先对HEK293T细胞以及hTERT RPE-1中scRibo-seq技术的应用效果进行检测。结果证明该方法能够有效的显示蛋白编码转录本的5’UTR、CDS以及3’UTR区域的核糖体分布。先前的研究表明在培养基移除后细胞中的核糖体会在某些关键的密码子上停顿,这一停顿是受到密码子类型影响的【5,6】。为了进一步验证scRibo-seq测量翻译动力学的能力,作者们从HEK 293T培养基中去除精氨酸和亮氨酸的不同时间点后再进行细胞分选和检测,发现核糖体的停顿的确是不同处理依赖性的暂停。比如,精氨酸的缺失会造成CGC以及CGU密码子上足迹的频率升高,而去除培养基中的亮氨酸则不会有此现象。而UAA密码子上核糖体占位的增加则只在亮氨酸饥饿的情况下出现。因此,该结果证明了scRibo-seq技术的准确性和有效性。 随后,作者们想知道细胞周期的状态是否会对细胞响应氨基酸限制具有影响,所以作者们将scRibo-seq技术与FUCCI(Fluorescent ubiquitination-based cell cycle indicators)技术进行联用,对不同细胞周期的细胞进行分选和收集。作者们发现核糖体的活性位点的确受到细胞周期的显著影响。 在体外培养的细胞中证明了scRibo-seq的作用之后,作者们希望对原代小鼠内分泌细胞(Enteroendocrine cells)中的应用进行检测。EECs细胞群在胃肠道细胞中所占的比例极低,数量少于细胞总量的1%,会在营养刺激下产生和分泌不同的激素【7】。通过scRibo-seq检测,作者们根据已经建立的激素细胞标记物基因的翻译特征鉴定发现了8个细胞类型,并对EECs细胞中的密码子特异性核糖体停顿进行了鉴定。因此,该结果说明scRibo-seq可以直接应用于原代细胞样品,并对稀有细胞群的翻译动力学过程进行测量。 总的来说,该工作建立了用于检测单密码子精度的翻译过程的高通量测序方法scRibo-seq,填补了目前单细胞基因组学方法的关键空白。另外,由于scRibo-seq技术不依赖于标记物以及转基因体系,可以直接对核糖体谱进行分析,其灵敏度和分辨率相较于先前的方法都更胜一筹。未来,该技术将会得到进一步广泛的应用,可以用于揭开高度动态系统中罕见细胞群的转录特征。 原文链接:https://doi.org/10.1038/s41586-021-03887-4【参考文献】1. Navin, N. et al. Tumour evolution inferred by single-cell sequencing. Nature 472, 90-94, doi:10.1038/nature09807 (2011).2. Smallwood, S. A. et al. Single-cell genome-wide bisulfite sequencing for assessing epigenetic heterogeneity. Nature methods 11, 817-820, doi:10.1038/nmeth.3035 (2014).3. Tang, F. et al. mRNA-Seq whole-transcriptome analysis of a single cell. Nature methods 6, 377-382, doi:10.1038/nmeth.1315 (2009).4. Budnik, B., Levy, E., Harmange, G. & Slavov, N. SCoPE-MS: mass spectrometry of single mammalian cells quantifies proteome heterogeneity during cell differentiation. Genome biology 19, 161, doi:10.1186/s13059-018-1547-5 (2018).5. Darnell, A. M., Subramaniam, A. R. & O' Shea, E. K. Translational Control through Differential Ribosome Pausing during Amino Acid Limitation in Mammalian Cells. Molecular cell 71, 229-243.e211, doi:10.1016/j.molcel.2018.06.041 (2018).6. Subramaniam, A. R., Pan, T. & Cluzel, P. Environmental perturbations lift the degeneracy of the genetic code to regulate protein levels in bacteria. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 110, 2419-2424, doi:10.1073/pnas.1211077110 (2013).7. Gribble, F. M. & Reimann, F. Enteroendocrine Cells: Chemosensors in the Intestinal Epithelium. Annual review of physiology 78, 277-299, doi:10.1146/annurev-physiol-021115-105439 (2016).
  • Nature | 基因编辑工具箱或再添神器——TnpB核酸内切酶
    转座在生物体基因重塑过程中具有关键性的作用。IS200/IS605 和 IS607 家族的插入序列(insertion sequences, ISs)是最简单的可移动遗传元素之一,仅包含其转座和调节所需的基因。2021年9月9日,张锋团队在Science杂志上发表了一篇题为 The widespread IS200/605 transposon family encodes diverse programmable RNA-guided endonucleases 的文章(详见BioArt报道:Science | 张锋团队再发文:源于IS200/605转座子家族的多种核酸酶或可成为基因编辑新工具)【1】,重建了CRISPR-Cas9系统的进化起源,发现了3种高度丰富但功能未知的转座子编码的可编程RNA引导核酸酶:IscB、IsrB和TnpB,并对IscB的蛋白功能进行了详细探究。该研究还发现TnpB可能是CRISPR-Cas9/Cas12核酸酶的祖先,推测TnpB也具备RNA引导的核酸酶活性。近日,来自立陶宛维尔纽斯大学的Virginijus Siksnys团队(CRISPR开创者之一,通过研究CRISPR-Cas9 生化性质,得出了Cas9酶可以定点切割DNA的结论,特别致敬CRISPR幕后的英雄们——最全的一份CRISPR英雄谱)在Nature杂志上在线发表了题为Transposon-associated TnpB is a programmable RNA-guided DNA endonuclease的研究论文。研究人员通过一系列生化实验证实CRISPR-cas核酸酶的祖先TnpB是可重编程的 RNA 引导的功能性核酸酶。TnpB通过reRNA(right element RNA,长非编码RNA,来源于ISDra2转座子中的RE元件)引导去切割靠近TTGAT转座相关模块(Transposon associated motif, TAM)5’端的DNA,并可以切割人类基因组DNA。如图1所示,IS200/IS605家族的Deinococcus radiodurans ISDra2中包含tnpA和tnpB基因,以及位于两侧的LE(Left element)和RE(Right element)。在纯化TnpB的过程中,作者发现有许多RNA也被一同纯化。对TnpB结合的RNA进行small RNA测序(sRNA-seq)分析,发现它们大多是长度约为150nt的长非编码RNA,来源于ISDra2中的RE序列,作者将这些RNA称为reRNAs(right element RNA)。reRNA 3’端的16nt来源于IS200/IS605转座子的侧翼DNA序列,其余序列与TnpB基因的3’端和RE序列匹配,说明TnpB可以与转座子3’端来源的reRNA形成RNP复合物。图1. D. radiodurans ISDra2位点PAM(protospacer adjacent motif)序列是Cas9或Cas12核酸酶启动DNA切割所必须的,那么TnpB发挥作用可能也需要类似的序列。通过PAM鉴定实验【2】,作者观察到在目标基因5’端上游富集了大量的TTGAT序列,并称之为Transposon Associated Motif (TAM)。体外DNA切割实验证实TnpB具备RNA引导的靶向dsDNA的核酸酶活性。进一步分析发现,将TnpB序列中的RuvC-like活性位点突变后,TnpB失去了切割能力,说明RuvC模块与TnpB的活性相关。研究人员发现实现TnpB的DNA切割功能需要同时满足两个条件:(1)TAM序列;(2)与靶基因匹配的位于reRNA 3’端的序列。随后,作者对切割产物进行了测序分析,结果显示,TnpB采取的是一种交错切割模式,在NTS(non-target strand)的多个位置和 TS (target strand) 的单个位置进行切割,最终产生5’-悬挂端(overhangs)(图2)。图2. TnpB-reRNA复合物切割双链DNA的实验设计及流程最后,作者探究了TnpB在细胞内切割目标dsDNA的能力。首先,在E.coli中进行的质粒干扰实验表明TnpB可以在原核生物体内切割dsDNA。紧接着,作者想知道TnpB是否可以应用于切割人类基因组。将编码TnpB和reRNA的工具质粒转染至HEK293T细胞中,72小时后,提取基因组DNA(gDNA)测序分析目标切割位点中的序列插入和删除(insertions and deletions,indels)情况(图3)。实验结果显示,TnpB在两个测试靶点(AGBL1-2和EMX1-1)中引入突变的频率为10%-20%,这与之前报道过的CRISPR-Cas9和Cas12的效率类似【3-7】。进一步分析发现,切割位点引入的删除突变占主导地位,与Cas12切割谱中观察到的现象类似【5,7】。这些结果说明RNA引导的TnpB核酸酶可以切割真核生物的基因组DNA。图3. 利用TnpB编辑人类基因组综上所述,该研究从ISDra2系统中鉴定了一个新的具有dsDNA切割功能的核酸酶TnpB,其在原核和真核细胞中均能有效切割dsDNA,具有编辑人类基因组的巨大潜力。在进化树上,虽然TnpB与微型 Cas12f核酸酶的关系最为紧密,但作者认为两者之间依旧存在重大区别:(1)TnpB与Cas12f使用的guide RNA不同;(2)TnpB是单体,仅需要一个reRNA;而Cas12f 核酸酶是二聚体,需要结合一个拷贝的crRNA-tracrRNA duplex;(3)TnpB需要TAM序列,Cas12f需要PAM序列,两种序列截然不同。原文链接:https://doi.org/10.1038/s41586-021-04058-1
  • 变异链球菌的菌落特征与使用范围及培养方法!
    变异链球菌的菌落特征与使用范围及培养方法! 变异链球菌属于甲型溶血性链球菌类,菌体较小,呈圆形或卵圆形,常成双或以短链状排列,革兰染色呈阳性。它在胰蛋白胨培养基中和含有95%氮气及5%二氧化碳混合气体的环境下生长良好。 一、菌种简介平台编号:Bio-53150规格:冻干物拉丁属名:Streptococcus Mutans菌株名称:变异链球菌其他编号:ATCC700610培养基编号:116或114,5% CO2 or 厌氧培养温度:37培养时间:48 小时用途:对红霉素、利福平、利福霉素AMP、壮观霉素、链霉素敏感。血清型C。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)保藏条件:斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20°C 保存。甘油请置于-80°C。 二、培养基TSA+5%脱纤维蛋白羊血(血琼脂平板) 三、菌落特征变异链球菌在血平板培养基上呈旺溶血,菌落较小,呈灰白色、圆形,表面突起,菌落质地较硬,有嵌入培养基内生长的趋势。 四、菌种的培养1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 五、使用范围(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 六、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支平板);2)经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间; 若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根需要转接培养;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;二次接种量要多,固体斜面培养基水分要少才能让菌体长得比较明显,液体培养要静止培养;3)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;4)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;5)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为2-25 年;6)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系;7)如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理;8)打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛;9)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作;10)甘油管使用:使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
  • 苏州医工所在血液制品细菌污染核酸检测方面取得进展
    目前,核酸筛检系统(Nucleic Acids Testing,NAT)已广泛用于血制品常规病原体(乙肝、丙肝、艾滋、梅毒)的核酸检测,极大降低了相关疾病的输血传播。但是,在输血感染性风险中,血小板的细菌污染及相关败血症性输血反应仍是棘手的问题。将核酸筛检技术用于细菌污染检测还有不少困难,包括:1、细菌污染不像特定病原体,没有统一的标准品 2、缺少合适的内参质控排除假阳性或假阴性结果 3、核酸扩增聚合酶(Taq)大多是细菌来源,带有痕量的细菌核酸成分。  近期,中国科学院苏州生物医学工程技术研究所血液免疫学研究中心提出一种双重荧光定量PCR方法可提高细菌污染检测的可靠性:设计一条人工核酸序列(IRC)作为内参,其特点是IRC与靶基因共用同一对引物进行扩增,分别用不同荧光探针进行检测。通过精确控制IRC分子数达到阳性检出限,以其Ct(i)值作为阈值,只有样本检测的Ct(s)值小于或等于Ct(i)时,检测结果才可认定为阳性。一种双样本混合的t测验(two samples pooled t-test)统计学方法可用于帮助判断两个Ct值的大小。IRC还可以包装成噬菌体,用于监控核酸样本提取过程。  此外,该双重荧光定量PCR方法可通过分别检测细菌的DNA(脱氧核糖核酸)与RNA(核糖核酸),计算不同Ct的比值,能判断细菌是处于生长繁殖期或者已经是死菌,从而帮助判断血制品灭活的效果。该方法不仅能用于血制品细菌污染检测,理论上也能开发成其他外源基因核酸定量检测的有效方法。  图-1、IRC双重荧光定量PCR原理图  图-2、IRC双重荧光定量PCR性能测试
  • 美国修改关于副球菌色素法规
    美国近日发出G/SPS/N/USA/1643/Add.1通报,美食品药物管理局[FDA]公布了一项色素修改的最终法规。允许安全使用副球菌(Paracoccus)色素作为一种三文鱼饲料的色彩添加剂。球菌色素是由一种副球菌(bacterium Paracoccus carotinifaciens)非病原性及非毒性杆菌热杀干细胞组成的,可以含增量的碳酸以调节虾青素的含量。法规规定当虾青素单独或与其它虾青素染色剂联合使用时,成品饲料内副球菌染料中的虾青素的含量不得超过成品饲料的80mg/kg(72克/吨)。   上述法规已获批准。
  • 伟业计量8月20日食品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的测定方法分享研讨会
    伟业计量线上研讨会,老时间,老地方,每周五上午九点半伟业计量官网来相见!2021年8月20日(周五)上午9:30分,由北京北方伟业计量技术研究院主办的“食品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的测定方法分享研讨会”即将开启,欢迎大家锁定伟业计量直播间!直播当天,研讨会讲师、助教将进行在线答疑,您有任何关于课程、研讨会以及伟业计量的问题,都可以在留言区进行提问。另外,我们还为当天参会的观众准备了惊喜活动,让您在兼具趣味性与创意性的视频教学中吸收知识。“食品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的测定方法分享研讨会”课程表讲师简介:罗双群,副教授,中共党员,硕士研究生,食品检验技师,漯河市青年拔尖人才。主要从事食品检测专业教学工作和管理工作。先后任教《食品理化分析》、《食品微生物检验》和《食品感官评定》。发表论文10余篇,获得食品检测类专利4项、漯河市自然科学学术奖一等奖2项、二等奖4项,主持河南省高等学校重点科研项目1项,主持漯河市科研项目1项,参与并完成省级重点科研项目4项,参与河南省教育教改项目1项。本期线上研讨会课程安排详见下图:食品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的测定方法分享研讨会时间课题专家课程简介第1节(09:30-10:20)《食品中金黄色葡萄球菌的测定》罗双群《金黄色葡萄球菌的测定》首先介绍了金黄色葡萄球菌的概述和仪器准备,重点介绍金黄色葡萄球菌的操作步骤及要点。10:20-10:30互动答疑、礼品抽取第2节(10:30-11:20)《食品中沙门氏菌的测定》罗双群《沙门氏菌的测定》分别介绍了沙门氏菌的定义、仪器试剂的准备、沙门氏菌的检验程序以及操作步骤及要点。重点从典型沙门氏菌的预增菌、增菌、平板分离、生化试验、革兰氏染色、血清学鉴定等6个方面介绍了沙门氏菌的操作步骤及要点。11:20-11:30互动答疑、礼品抽取 (关注伟业计量公众号(微信号bzwzcom),免费观看线上研讨会)温馨提示:伟业计量线上研讨会将于每周五上午09:30(节假日除外)定期举办。如果您是食品/环境/微生物等检测相关专业老师,有相关检测类课程想与我们交流分享,欢迎您加入伟业计量讲师团队,共享学术赋能,课酬丰厚,期待您的加入!联系助教:手机微信同号:15637658007
  • 阜阳市人民医院243.11万元采购核酸蛋白分析
    html, body { -webkit-user-select: text } * { padding: 0 margin: 0 } .web-box { width: 100% text-align: center } .wenshang { margin: 0 auto width: 80% text-align: center padding: 20px 10px 0 10px } .wenshang h2 { display: block color: #900 text-align: center padding-bottom: 10px border-bottom: 1px dashed #ccc font-size: 16px } .site a { text-decoration: none } .content-box { text-align: left margin: 0 auto width: 80% margin-top: 25px text-indent: 2em font-size: 14px line-height: 25px } .biaoge { margin: 0 auto /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 25px } .table_content { border-top: 1px solid #e0e0e0 border-left: 1px solid #e0e0e0 font-family: Arial /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 10px margin-left: 15px } .table_content tr td { line-height: 29px } .table_content .bg { background-color: #f6f6f6 } .table_content tr td { border-right: 1px solid #e0e0e0 border-bottom: 1px solid #e0e0e0 } .table-left { text-align: left padding-left: 20px } 详细信息 阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目公开招标公告 安徽省-阜阳市-颍州区 状态:公告 更新时间: 2023-05-23 阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目公开招标公告 项目概况 阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目采购项目的潜在供应商应在阜阳市公共资源交易网(http://jyzx.fy.gov.cn)网站获取采购文件,并于2023年6月15日9点00分(北京时间)前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号:FY2023FS0179 项目名称:阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目 预算金额:2431086元(其中1包:1429506元/年;2包:919980元/年;3包:81600元/年) 最高限价:2431086元(其中1包:1429506元/年;2包:919980元/年;3包:81600元/年) 包别 使用科室 名称 单价(元) 预估数量 预估金额(元) 备注 1 产科 可吸收止血绫 246元/片 5811 1429506 2 产科 免打结缝线 342元/根 2690 9199803 检验科 EB病毒核酸扩增测定试剂盒(PCR荧光法) 20元/人份 1800 36000 人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光法) 20元/人份 1800 36000 解脲脲原体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 20元/人份 120 2400 淋球菌核酸测定试剂盒(PCR-荧光探针法) 20元/人份 120 2400 沙眼衣原体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 20元/人份 120 2400 结核分枝杆菌 20元/人份 120 2400 提取试剂包含在试剂报价内,需要单独报价(痰液标本需特殊提取试剂) 采购需求:阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目,本项目分为3个包段,阜阳市人民医院拟采购每包段一家符合条件的供应商,提供医院内科室使用的耗材配送服务,具体内容详见招标文件第三章采购需求。 合同履行期限:合同签订之日起3年(1+1+1)合同一年一签。中标人第一年服务期满后采购单位会同有关部门将对履约情况进行考核评估,如考核合格、 履约良好,经双方同意,自然转入第二年,采购人认为成交供应商达到服务标准和要求,以此类推至第三年,否则终止合同。 本项目是否接受联合体:否 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求:本项目符合财政部、工业和信息化部制定的《政府采购促进中小企业发展管理办法》第六条第三款之规定:按照本办法规定预留采购份额无法确保充分供应、充分竞争,或者存在可能影响政府采购目标实现的情形。因此,本项目不专门面向中小企业采购。如对此项内容有疑问,可通过电子交易系统在线提出或书面方式向代理机构或采购人提出询问或质疑。 3.本项目的特定资格要求:具有医疗器械生产或医疗器械经营资格; 三、获取招标文件 时间:2023年5月23日至2023年6月15日9时00分(北京时间)(提供期限自本公告发布之日起不得少于5个工作日)。 地点: 阜阳市公共资源交易网或阜阳市公共资源交易系统 方式: 供应商需登录阜阳市公共资源交易网或阜阳市公共资源交易系统下载采购文件 售价: 0元 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 截止时间: 2023年6月15日9点00分(北京时间)(自招标文件开始发出之日起至投标人提交投标文件截止之日止,不得少于20日) 地点:阜阳市公共资源交易中心开标542 室(城南新区三清路666号阜阳市民中心五楼)。 五、公告期限 自本公告发布之日起 5 个工作日。 六、其他补充事宜 1、本项目所属行业为 其他未列明 行业。企业划型标准按照《关于印发中小企业划型标准规定的通知》(工信部联企业【2011】300号)规定。 2、本项目需落实的节能环保、中小微型企业扶持等相关政府采购政策详见招标文件。 3、供应商应合理安排招标文件获取时间,如果因计算机及网络故障造成无法完成招标文件获取,责任自负。 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称:阜阳市人民医院 地址:阜阳市颍州区三清路 501 号 联系方式:王主任、0558-3011286 2.采购代理机构信息 名称:华春建设工程项目管理有限责任公司 地址:阜阳市颍州区淮河路 2236 号印巷南里 6 号楼 3S (吾悦广场 一号门对面 3F) 联系方式:丁工、15655872815 3.项目联系方式 项目联系人:王主任、丁工 电 话:0558-3011286、15655872815 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 $('.clickModel').click(function () { $('.modelDiv').show() }) $('.closeModel').click(function () { $('.modelDiv').hide() }) 基本信息 关键内容:核酸蛋白分析 开标时间:2023-06-15 09:00 预算金额:243.11万元 采购单位:阜阳市人民医院 采购联系人:点击查看 采购联系方式:点击查看 招标代理机构:华春建设工程项目管理有限责任公司 代理联系人:点击查看 代理联系方式:点击查看 详细信息 阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目公开招标公告 安徽省-阜阳市-颍州区 状态:公告 更新时间: 2023-05-23 阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目公开招标公告 项目概况 阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目采购项目的潜在供应商应在阜阳市公共资源交易网(http://jyzx.fy.gov.cn)网站获取采购文件,并于2023年6月15日9点00分(北京时间)前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号:FY2023FS0179 项目名称:阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目 预算金额:2431086元(其中1包:1429506元/年;2包:919980元/年;3包:81600元/年) 最高限价:2431086元(其中1包:1429506元/年;2包:919980元/年;3包:81600元/年) 包别 使用科室 名称 单价(元) 预估数量 预估金额(元) 备注 1 产科 可吸收止血绫 246元/片 5811 1429506 2 产科 免打结缝线 342元/根 2690 919980 3 检验科 EB病毒核酸扩增测定试剂盒(PCR荧光法) 20元/人份 1800 36000 人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光法) 20元/人份 1800 36000 解脲脲原体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 20元/人份 120 2400 淋球菌核酸测定试剂盒(PCR-荧光探针法) 20元/人份 120 2400 沙眼衣原体核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 20元/人份 120 2400 结核分枝杆菌 20元/人份 120 2400 提取试剂包含在试剂报价内,需要单独报价(痰液标本需特殊提取试剂) 采购需求:阜阳市人民医院检验科及产科耗材试剂配送服务项目,本项目分为3个包段,阜阳市人民医院拟采购每包段一家符合条件的供应商,提供医院内科室使用的耗材配送服务,具体内容详见招标文件第三章采购需求。 合同履行期限:合同签订之日起3年(1+1+1)合同一年一签。中标人第一年服务期满后采购单位会同有关部门将对履约情况进行考核评估,如考核合格、 履约良好,经双方同意,自然转入第二年,采购人认为成交供应商达到服务标准和要求,以此类推至第三年,否则终止合同。 本项目是否接受联合体:否 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求:本项目符合财政部、工业和信息化部制定的《政府采购促进中小企业发展管理办法》第六条第三款之规定:按照本办法规定预留采购份额无法确保充分供应、充分竞争,或者存在可能影响政府采购目标实现的情形。因此,本项目不专门面向中小企业采购。如对此项内容有疑问,可通过电子交易系统在线提出或书面方式向代理机构或采购人提出询问或质疑。 3.本项目的特定资格要求:具有医疗器械生产或医疗器械经营资格; 三、获取招标文件 时间:2023年5月23日至2023年6月15日9时00分(北京时间)(提供期限自本公告发布之日起不得少于5个工作日)。 地点: 阜阳市公共资源交易网或阜阳市公共资源交易系统 方式: 供应商需登录阜阳市公共资源交易网或阜阳市公共资源交易系统下载采购文件 售价: 0元 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 截止时间: 2023年6月15日9点00分(北京时间)(自招标文件开始发出之日起至投标人提交投标文件截止之日止,不得少于20日) 地点:阜阳市公共资源交易中心开标542 室(城南新区三清路666号阜阳市民中心五楼)。 五、公告期限 自本公告发布之日起 5 个工作日。 六、其他补充事宜 1、本项目所属行业为 其他未列明 行业。企业划型标准按照《关于印发中小企业划型标准规定的通知》(工信部联企业【2011】300号)规定。 2、本项目需落实的节能环保、中小微型企业扶持等相关政府采购政策详见招标文件。 3、供应商应合理安排招标文件获取时间,如果因计算机及网络故障造成无法完成招标文件获取,责任自负。 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名称:阜阳市人民医院 地址:阜阳市颍州区三清路 501 号 联系方式:王主任、0558-3011286 2.采购代理机构信息 名称:华春建设工程项目管理有限责任公司 地址:阜阳市颍州区淮河路 2236 号印巷南里 6 号楼 3S (吾悦广场 一号门对面 3F) 联系方式:丁工、15655872815 3.项目联系方式 项目联系人:王主任、丁工 电 话:0558-3011286、15655872815
  • 研究揭示新型抗化脓链球菌感染免疫应答机制
    2月3日,中国科学院上海巴斯德研究所刘星课题组在Nature上,发表题为Streptococcal pyrogenic exotoxin B cleaves GSDMA and triggers pyroptosis的研究论文。该研究首次发现并报道化脓链球菌GAS毒力因子SpeB通过切割激活GSDMA触发皮肤上皮细胞焦亡并抑制其系统性感染。  A族链球菌(Group A streptococcus,GAS),又称化脓链球菌(Streptococcus pyogenes),是自然界广泛存在的一种强毒力致病菌,可通过宿主皮肤及呼吸道黏膜感染并引发多种疾病,包括猩红热、丹毒、致命坏死性筋膜炎、中毒性休克及脓毒症等。全球每年约有7亿人受其感染(50多万死于中重度感染)。GAS的皮肤定植及侵袭能力与其分泌的毒力因子密切相关,其中关键毒力因子之一是链球菌热原外毒素B(streptococcal pyrogenic exotoxin B,SpeB)。GAS感染后临床严重程度与其SpeB表达量呈显著负相关,而具体分子机理尚不清晰。  为探究SpeB在GAS侵袭性感染中功能,研究利用GAS小鼠皮肤感染模型,比较野生型及不同毒力因子缺失GAS菌株致病能力。结果显示,相比于野生型及其他毒力因子缺失菌株感染后出现的严重化脓和坏死性病变,SpeB缺失GAS菌株感染后感染部位未观察明显皮肤溃烂且中性粒细胞明显减少;同时,小鼠表现出更严重的系统性感染和死亡。通过原代皮肤角质细胞GAS感染实验发现,相比于其他菌株,GAS SpeB的缺失使其丧失诱导细胞焦亡样细胞死亡的功能,并促进其系统性感染。在此基础上,研究运用CRISPR/Cas9全基因组敲除筛选平台,筛选鉴定出SpeB诱发皮肤上皮细胞焦亡的关键蛋白:GSDMA——炎性细胞死亡(焦亡)关键执行者Gasdermins家族成员之一。进一步,研究从分子层面详细解析了SpeB激活GSDMA机制:SpeB特异性剪切GSDMA(而非Gasdermins家族其他成员),产生约27kDa的N-末端片段并诱导细胞焦亡;Edman测序和质谱分析发现SpeB切割GSDMA第246位氨基酸;胞内导入体外纯化的GSDMA 1-246aa片段可直接诱导细胞焦亡;脂膜试纸条和脂质体结合实验揭示GSDMA 1-246aa能够与细胞膜磷脂以及含有相应磷脂的脂质体结合;脂质体泄漏实验证明GSDMA 1-246aa能够在特定脂质体上成孔;序列比对结果显示该剪切位点在小鼠Gsdma1中保守;SpeB诱导的Gsdma1切割可诱发小鼠上皮细胞焦亡;小鼠GAS感染部位可检测到Gsdma1剪切;相比于野生型小鼠,Gsdma1的敲除使其对GAS感染更加敏感。  该研究首次发现并报道皮肤上皮细胞(KCs,“宝船”)表达的GSDMA分子(“火炮”)既作为外源病原感受器识别化脓链球菌(GAS,“海盗船”)毒力因子SpeB(“钩锁”),同时作为免疫效应器在细胞膜上打孔(“炮筒”),释放炎性因子(“炮火”)引起细胞焦亡及皮肤化脓坏死性病变,以控制病原菌进一步系统性感染。该研究揭示了机体免疫防御应答中的新型机制——单一蛋白(GSDMA)同时作为病原菌感受器和宿主效应因子,并为由如化脓链球菌等致病菌感染引起的相关疾病的临床治疗提供了新靶点和新思路。  论文链接
  • 山东检验检疫局成功研制并转让金黄色葡萄球菌快速检测试剂盒
    山东检验检疫局食品农产品中心青年专家高宏伟博士设计发明的“金黄色葡萄球菌快速检测试剂盒的制备和使用方法”近日以不菲的市场价格成功转让给青岛市高新区某企业。这标志着该项研究成果在获得领域内同行高度认可的同时,也在竞争激烈的生物技术市场赢得了一席之地。   2011年年末,一场“细菌门”的风波席卷冬日里的速冻食品行业,继思念、三全速冻食品后,湾仔码头也在南京市工商局公布的一份检测报告中被检出了金黄色葡萄球菌。当人们再一次为食品安全的问题焦虑纷扰的同时,一个直径只有0.5-1微米、平日里只闻其名、未见其“形”的小家伙——金黄色葡萄球菌迅速走进了普通百姓的视野。   小家伙制造大问题   据报道,全世界每年发生的食源性疾病近数十亿例,其中约有170万名15岁以下儿童因为食源性微生物污染引起腹泻而死亡。金黄色葡萄球菌是引起细菌性食物中毒的重要病原菌之一,在美国,每年超过18.5万人发生金黄色葡萄球菌食物中毒,占细菌性食物中毒的33%,每年损失约15亿美元 在日本,平均32.5%的食品存在金黄色葡萄球菌的污染 在加拿大,金黄色葡萄球菌中毒的发生率更高,占细菌性食物中毒的45%。近年来,在我国由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒约占细菌性食物中毒事件的25%。金黄色葡萄球菌属于葡萄球菌属,在污染食品后,可以产生大量肠毒素,刺激食用者交感神经、双侧迷走神经的内脏的分支和脊髓,引起剧烈呕吐腹泻。由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒已成为世界性的公共卫生问题。   新问题引出新课题   山东是我国食品农产品进出口第一大省,进出口总量占全国口岸四分之一至三分之一,已连续11年进出口食品农产品总量位居全国第一。每年,来自于世界各地的海量食品农产品在源源不断为当地经济注入活力的同时,也带来了巨大的食品安全风险。食品微生物污染一直是进出口食品安全的主要隐患,而其中金黄色葡萄球菌是最为重要的检测项目之一。仅2011年山东局技术中心微生物实验室完成了金黄色葡萄球菌3000余批次样品、上万项目次的检测工作、2012年截止到6月已完成金黄色葡萄球菌检测近8000项目次,同比增长30%。如此巨大的工作量以及还在继续快速增长的检测压力,向传统的检测技术提出了挑战,如何打破现状、创新技术体系成为一个检测人员绕不开的问题。   为了提升检测效率、缩短检测周期,针对国内外食品中金黄色葡萄球菌污染日趋严重的形势,该局食品农产品中心高宏伟博士等研究人员向国家质检总局申报了关于食源性致病菌新型高通量检测技术的研究课题。提出以更为快捷、简便、可视化的新型环介导等温扩增技术(LAMP)取代现有检测技术,全面提高金黄色葡萄球菌的检测灵敏度和精确度。   新发明攻克五个难关   金黄色葡萄球菌快速检测试剂盒的研制成功,在获得国家发明专利授权的同时,一举攻破了五个技术难关。   准确关。该发明针对金黄色葡萄球菌mecA基因的基本保守区的6个序列设计了两个特异性内引物和两个特异性外引物,是一种多位点多靶标的检测技术,与PCR技术的单区域双引物相比,在体系扩增过程中,具有更高的准确性和可靠性。该mecA基因的保守序列为金黄色葡萄球菌各不同血清型和菌株型所共有,保证了该种技术从种的水平上检测不同来源的金黄色葡萄球菌株的可靠性。   周期关。多引物的特性使其在具有高度链置换活性的DNA聚合酶作用下,具备更高的扩增效率。应用该种技术实施金黄色葡萄球菌检测,恒温下放置几十分钟即可完成检测,整个流程累计耗时1个小时左右,与传统检测方法动辄3、4天相比,缩短检测周期95%以上。   成本关。作为一种恒温扩增技术,该发明无须昂贵的PCR仪及配套电泳成像设备,只需水浴锅或其他简单温度加热装置即可,在仪器配置费用上可节省大笔购置费用。   环保关。由于可视化的特点,该种技术的检测结果无须使用特定光学呈相设备分析,只用肉眼直接目测观察即可对最终结果进行判定。在精简了分析流程的同时,也避免了具有强烈致癌的毒性凝胶染料的使用,省去了后续无害化处理步骤,解决了有毒有害的分子生物学试剂对环境安全的威胁问题。   场所关。目前,主流细菌鉴定方法包含了分离培养、免疫检测、PCR方法等,虽然原理各异,但对于环境及硬件设施条件都有特定要求,需要培养箱、微生物鉴定仪及PCR仪等必备仪器。而金黄色葡萄球菌LAMP快速检测试剂盒的问世解决了这一难题,一套试剂盒和一个简易温度控制设备即可组成一套便携式的现场检测装置,它可以走出实验室,摆脱时空限制,将检测关口前移,在任何需要的地方随时出现对可疑样品实施现场检测。   新专利产生四种效益   市场效益。与其他检测方法相比,具备完全自主知识产权的金黄色葡萄球菌试剂盒兼具了快速、精准化、便捷化、可视化及低成本化等五大优势,是山东检验检疫系统首个实现商业化成功转让的国家发明专利。该专利具有广阔的应用前景和领域,适合于有实际检测需求的各类企事业单位、机构和部门,能够在医疗、食品、卫生及环保等多个行业领域进行推广应用,一旦转化为商业化试剂盒将显现显著的市场效益。   生态效益。由于采用可视化的肉眼观察对结果进行直接判定,使得大量的后续的无害化处理措施得以省略,在节省成本的同时排除了传统的PCR检测凝胶电泳所使用的大量有毒有害试剂的使用,将其可能造成的生态环境安全风险降到最低。   生产效益。据统计,2011年食品安全在我国国民最关注热点问题排行榜高居第二位,类似于发生在湾仔码头等著名食品品牌的金黄色葡萄球菌污染事件,在给企业带来了公众信任危机的同时,给企业生产经营效益造成了重创。充分利用金黄色葡萄球菌LAMP快速检测试剂盒灵活机动不受时空限制的特点,打造食品产品的现场初筛和实验室系统性检测的多级检测网络,对于企业加强自检,实施源头管理,把好质量关、避免质量问题可能造成的巨大损失将起到关键性的作用。   社会效益。由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒也已成为世界性的公共卫生问题,该专利的问世及下一步的市场化、产业化对于解决食品中金黄色葡萄球菌关键控制和检测技术的难题,保证国内及进出口食品安全,保障人民生命健康安全将产生积极的基础性推动作用。
  • 达元发布DY-7100 恒温荧光检测仪(非洲猪瘟检测仪)新品
    恒温荧光检测仪是一款集恒温扩增、实时荧光检测、智能数据判读一身的恒温荧光检测仪,具有操作简单、速度快、准确性高、数据可溯源的优点。 广泛用于肉类动物源性成分检测、非洲猪瘟检测,、食源性致病菌检测、转基因检测、动物病害等检测。性能特点:1.检测速度快。2.操作简单:搭配达元冻干分子检测试剂,省去可复杂的配置体系操作过程,仪器检测信息输入简单。3.检测项目齐全:覆盖常见的动物源性成分检测和食源性致病菌等检测项目,其他产品陆续上市。4.可溯源:检测数据可通过有线网络、无线wifi、3G或4G网络,及时上传到食品安全监管信息系统。5.智能判读:检测结果非常直观,非专业人员也可轻松完成判读。6.检测效率高:仪器可同时检测不同样品和项目。7.内置打印机:检测结果可现场打印。8.实时监测:可实时查看荧光曲线。9.兼容市场上常见的恒温扩增检测试剂(包括LAMP法、RPA法、RAA法等)图1 检测曲线图 检测范围:肉及肉制品动物源性成分检测;乳品及乳制品、饮用水等食品致病菌检测;鱼虾等水产品动物病害检测;动物饲料及农产品转基因检测。可选试剂:金黄色葡萄球菌核酸检测盒沙门氏菌核酸检测盒大肠杆菌O157核酸检测盒单增李斯特氏菌核酸检测盒副溶血性弧菌核酸检测盒志贺氏菌核酸检测盒阪崎肠杆菌核酸检测盒霍乱弧菌核酸检测盒铜绿假单胞菌核酸检测盒溶血性链球菌核酸检测盒非洲猪瘟病毒LAMP检测试剂盒应用领域:恒温荧光检测仪可广泛应用食品药品监督、海关出入境、疾控中心、水产渔政、农业、肉类批发、食品企业等多个行业。创新点:针对非洲猪瘟改良创新出的解决方案
  • Luminex ARIES A族链球菌检测试剂获FDA许可证
    p   Luminex今天表示,美国食品和药物管理局已经为其ARIES sup & reg /sup A族链球菌检测试剂授予了510(k)许可证,这是中等复杂度的样品测试,用于从喉咙直接检测化脓链球菌擦拭标本。 /p p   该公司指出,这是FDA在过去24个月内已经在其ARIES系统上许可的第六种检测方法。 /p p   Luminex总裁兼首席执行官Homi Shamir在一份声明中表示,该公司的广泛呼吸系统提供了既有目标的检测方法,例如ARIES& reg A族链球菌检测试和可定制的疾病状态面板。通过我们广泛的呼吸测试方案,临床医生可以进入测试快速适应患者不同临床需要的灵活性。“ /p p   ARIES& reg A族链球菌实时PCR测试是Luminex呼吸测试菜单的一部分,还包括ARIES Bordetella测定,白血病流感A / B和RSV测定,NxTAG呼吸道病原体面板和Verigene呼吸道病原体Flex测试。 /p p   对A组链球菌感染的快速准确诊断对于确保及时开始适当的抗生素治疗至关重要,Luminex说,此外,侵袭性感染病例每年在美国造成多达1600例死亡。 /p p & nbsp /p
  • 呼和浩特市疾病预防控制中心249.00万元采购核酸提取仪,超低温冰箱,PCR
    html, body { -webkit-user-select: text } * { padding: 0 margin: 0 } .web-box { width: 100% text-align: center } .wenshang { margin: 0 auto width: 80% text-align: center padding: 20px 10px 0 10px } .wenshang h2 { display: block color: #900 text-align: center padding-bottom: 10px border-bottom: 1px dashed #ccc font-size: 16px } .site a { text-decoration: none } .content-box { text-align: left margin: 0 auto width: 80% margin-top: 25px text-indent: 2em font-size: 14px line-height: 25px } .biaoge { margin: 0 auto /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 25px } .table_content { border-top: 1px solid #e0e0e0 border-left: 1px solid #e0e0e0 font-family: Arial /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 10px margin-left: 15px } .table_content tr td { line-height: 29px } .table_content .bg { background-color: #f6f6f6 } .table_content tr td { border-right: 1px solid #e0e0e0 border-bottom: 1px solid #e0e0e0 } .table-left { text-align: left padding-left: 20px } 基本信息 关键内容: 核酸提取仪,超低温冰箱,PCR 开标时间: null 采购金额: 249.00万元 采购单位: 呼和浩特市疾病预防控制中心 采购联系人: 秦永伟 采购联系方式: 立即查看 招标代理机构: 内蒙古茂森工程项目管理有限责任公司 代理联系人: 张羽飞 代理联系方式: 立即查看 详细信息 呼和浩特市疾病预防控制中心致病菌识别网的细菌性传染病检测试剂耗材等采购项目竞争性磋商公告 内蒙古自治区-呼和浩特市-赛罕区 状态:公告 更新时间: 2021-07-31 招标文件: 附件1 呼和浩特市疾病预防控制中心致病菌识别网的细菌性传染病检测试剂耗材等采购项目竞争性磋商公告 项目概况 致病菌识别网的细菌性传染病检测试剂耗材等采购项目采购项目的潜在供应商应在内蒙古自治区政府采购网获取采购文件,并于2021年08月11日 09时30分(北京时间)前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号:150101-NMGMS-CS-20210001 项目名称:致病菌识别网的细菌性传染病检测试剂耗材等采购项目 采购方式:竞争性磋商 预算金额:2,490,000.00元 采购需求: 合同包1(ZBJ-1): 合同包预算金额:920,780.00元 品目号 品目名称 采购标的 数量(单位) 技术规格、参数及要求 品目预算(元) 最高限价(元) 1-1 生物试剂盒 MGIEasy 通用DNA文库制备试剂套装 6(套) 详见采购文件 22,500.00 22,500.00 1-2 生物试剂盒 MGIEasy酶切DNA文库制备试剂套装 6(套)详见采购文件 24,900.00 24,900.00 1-3 生物试剂盒 MGIEasy RNA文库制备试剂套装 6(套) 详见采购文件 37,200.00 37,200.00 1-4 生物试剂盒 ATOPlex 新冠RNA多重PCR建库套装 2(套) 详见采购文件 56,000.00 56,000.00 1-5 生物试剂盒 MGISEQ-2000RS 高通量快速测序试剂套装(FCS PE100) 6(套) 详见采购文件 58,800.00 58,800.00 1-6 生物试剂盒 0.5ml冻存管 PCR级 10(包) 详见采购文件 6,500.00 6,500.00 1-7 生物试剂盒 Break-Away紫色框 可掰开96孔板PCR管 10(包) 详见采购文件 11,700.00 11,700.00 1-8 生物试剂盒 透明平盖8联排盖 150(包) 详见采购文件 16,500.00 16,500.00 1-9 生物试剂盒 自动PCR仪器封膜胶垫 10(包) 详见采购文件 29,900.00 29,900.00 1-10 生物试剂盒 250μL带滤芯自动化吸头 10(包) 详见采购文件 5,080.005,080.00 1-11 生物试剂盒 1.3ml圆形孔U型底深孔板 10(包) 详见采购文件 450.00 450.00 1-12 生物试剂盒 硬框薄壁全裙边96孔PCR板 10(包) 详见采购文件 8,000.00 8,000.00 1-13 生物试剂盒 2ml冻存管 PCR级 10(包) 详见采购文件 5,200.00 5,200.00 1-14 生物试剂盒 96孔 PCR板贴膜 10(盒) 详见采购文件 2,100.00 2,100.00 1-15 生物试剂盒 100% Tween20 2(瓶) 详见采购文件 140.00 140.00 1-16 生物试剂盒 5M NaCl溶液 2(瓶) 详见采购文件 170.00 170.00 1-17 生物试剂盒 2M NaOH溶液 2(瓶) 详见采购文件 156.00 156.00 1-18 生物试剂盒 无水乙醇 2(瓶) 详见采购文件 70.00 70.00 1-19 生物试剂盒 阔口吸头(200ul) 10(盒) 详见采购文件 2,800.00 2,800.00 1-20 生物试剂盒 磁力架 2(个) 详见采购文件 2,000.00 2,000.00 1-21 生物试剂盒 样本管架 5(个) 详见采购文件 150.00 150.00 1-22 生物试剂盒 冰盒(台式低温保存盒-20°C) 2(个) 详见采购文件 5,200.00 5,200.00 1-23 生物试剂盒 quibt分析管 1(包) 详见采购文件 1,500.00 1,500.00 1-24 生物试剂盒 quibt空气罐 3(个) 详见采购文件 14,400.00 14,400.00 1-25 生物试剂盒 肠道菌药敏试剂盒 13(盒) 详见采购文件 11,050.00 11,050.00 1-26 生物试剂盒 革兰氏染色阴性药敏板(简化板) 13(盒) 详见采购文件 11,050.00 11,050.00 1-27 生物试剂盒 配套药敏板加样头 26(包) 详见采购文件 2,080.00 2,080.00 1-28 生物试剂盒 样本稀释液(单加) 2(盒) 详见采购文件 160.00 160.00 1-29 生物试剂盒 XbaI酶 5(套) 详见采购文件 1,550.00 1,550.00 1-30 生物试剂盒 NotI酶 2(套) 详见采购文件 3,400.00 3,400.00 1-31 生物试剂盒 AscI酶 3(套) 详见采购文件 9,750.00 9,750.00 1-32 生物试剂盒 BlnI(AVrⅡ)酶 5(套) 详见采购文件 1,700.00 1,700.00 1-33 生物试剂盒 SpeI酶 3(套) 详见采购文件 783.00 783.00 1-34 生物试剂盒 蛋白酶K 3(瓶) 详见采购文件 840.00 840.00 1-35 生物试剂盒 无菌聚酯管接头 5(盒) 详见采购文件 2,000.00 2,000.00 1-36 生物试剂盒 5*TBE缓冲液 8(瓶) 详见采购文件 800.00 800.00 1-37 生物试剂盒 gelred染液 3(支) 详见采购文件 2,100.00 2,100.00 1-38 生物试剂盒 溶葡萄球菌酶 1(支) 详见采购文件 2,115.00 2,115.00 1-39 生物试剂盒 溶菌酶 1(支) 详见采购文件 740.00 740.00 1-40 生物试剂盒 0.5MEDTA(PH8.0) 2(瓶) 详见采购文件 120.00 120.001-41 生物试剂盒 血平板 8(包) 详见采购文件 640.00 640.00 1-42 生物试剂盒 一次性无菌吸管 1,000(支) 详见采购文件 200.00 200.00 1-43 生物试剂盒 1M Tris-Hcl缓冲液(PH8.0) 2(瓶) 详见采购文件 160.00 160.00 1-44 生物试剂盒 五种致病弯曲菌核酸多重实时荧光PCR检测试剂盒 1(盒) 详见采购文件 18,000.00 18,000.00 1-45 生物试剂盒 细菌基因组DNA提取试剂盒 12(盒) 详见采购文件 27,600.00 27,600.001-46 生物试剂盒 沙门氏菌多价血清OA-S 2(瓶) 详见采购文件 996.00 996.00 1-47 生物试剂盒 沙门氏菌多价血清OA-i 1(瓶) 详见采购文件 498.00 498.00 1-48 生物试剂盒 沙门氏菌诊断血清套装60种 1(盒) 详见采购文件 15,000.00 15,000.00 1-49 生物试剂盒 志贺氏菌诊断血清(22种) 1(盒) 详见采购文件 2,450.00 2,450.00 1-50 生物试剂盒 肠道致病性大肠埃希氏菌诊断血清15种 1(套) 详见采购文件 1,695.00 1,695.00 1-51 生物试剂盒 侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清11种 1(套) 详见采购文件 900.00 900.00 1-52 生物试剂盒 产毒性大肠埃希氏菌诊断血清10种 1(套) 详见采购文件 900.00 900.00 1-53 生物试剂盒 出血性大肠埃希氏菌O157诊断血清 1(套) 详见采购文件 100.00 100.00 1-54 生物试剂盒 大肠埃希氏菌H7诊断血清 1(套) 详见采购文件 100.00 100.001-55 生物试剂盒 沙门氏菌核酸检测试剂盒 3(盒) 详见采购文件 19,710.00 19,710.00 1-56 生物试剂盒 十四种食源性致病菌多重PCR检测试剂盒 2(盒) 详见采购文件 16,000.00 16,000.00 1-57 生物试剂盒 小肠结肠炎毒力因子实时荧光pcr检测试剂盒 3(盒) 详见采购文件 15,000.00 15,000.00 1-58 生物试剂盒 无菌无酶带滤芯1ml枪头 1(箱) 详见采购文件 3,250.00 3,250.00 1-59 生物试剂盒 无菌无酶带滤芯200ul枪头 1(箱) 详见采购文件 3,250.00 3,250.00 1-60 生物试剂盒 无菌无酶带滤芯100ul枪头 1(箱) 详见采购文件 3,250.00 3,250.00 1-61 生物试剂盒 无菌无酶带滤芯10ul枪头 1(箱) 详见采购文件 3,250.00 3,250.00 1-62 生物试剂盒 无菌无酶带滤芯10u长枪头 1(箱) 详见采购文件 3,250.00 3,250.00 1-63 生物试剂盒 0.1 mLfast八连管 1(盒) 详见采购文件 648.00 648.00 1-64 生物试剂盒 八连管盖 1(盒) 详见采购文件 748.00 748.00 1-65 生物试剂盒 fast pcr板 2(包) 详见采购文件 2,870.00 2,870.00 1-66 生物试剂盒 fast pcr板膜 2(包) 详见采购文件 2,370.00 2,370.00 1-67 生物试剂盒 五种致泻大肠核酸多重实时荧光PCR检测试剂盒 15(盒) 详见采购文件 223,200.00 223,200.00 1-68 生物试剂盒 耶尔森氏菌核酸实时荧光PCR检测试剂盒 2(盒) 详见采购文件 6,000.00 6,000.00 1-69 生物试剂盒 炭疽PCR 检测试剂 3(盒) 详见采购文件 4,200.00 4,200.00 1-70 生物试剂盒 炭疽噬菌体 3(支) 详见采购文件 360.00 360.00 1-71 生物试剂盒 青霉素试纸片 2(瓶) 详见采购文件 120.00 120.00 1-72生物试剂盒 O1群、O139霍乱弧菌多价血清 1(瓶) 详见采购文件 100.00 100.00 1-73 生物试剂盒 霍乱弧菌小川型抗血清 1(瓶) 详见采购文件 498.00 498.00 1-74 生物试剂盒 霍乱弧菌稻叶型抗血清 1(瓶) 详见采购文件 498.00 498.00 1-75 生物试剂盒 碱性蛋白胨水 5(盒) 详见采购文件 650.00 650.00 1-76 生物试剂盒 脑膜炎耐瑟菌(A、B、C)血清群核酸三重实时荧光PCR检测试剂盒 1(盒) 详见采购文件 8,900.00 8,900.00 1-77 生物试剂盒 脑膜炎奈瑟菌多价A-D群诊断血清 1(套) 详见采购文件 5,150.00 5,150.00 1-78 生物试剂盒 常规生化复合校准品 2(支) 详见采购文件 306.00 306.00 1-79 生物试剂盒 生化复合定值质控品 4(支) 详见采购文件 1,044.00 1,044.00 1-80 生物试剂盒 TP总蛋白测定试剂盒 2(盒) 详见采购文件 230.00 230.00 1-81 生物试剂盒 ?-GGT谷氨酸转移酶测定试剂盒 2(盒) 详见采购文件 1,676.00 1,676.00 1-82 生物试剂盒 丙氨酸氨基转移酶ALT测定试剂盒 2(盒) 详见采购文件 686.00 686.00 1-83 生物试剂盒 天门冬氨酸氨基转移酶AST测定试剂盒 2(盒) 详见采购文件 638.00 638.00 1-84 生物试剂盒 碱性磷酸酶ALP测定试剂盒 2(盒) 详见采购文件 928.00 928.00 1-85 生物试剂盒 总胆红素T-Bil测定试剂盒 2(盒) 详见采购文件 694.00 694.00 1-86 生物试剂盒 直接胆红素D-Bil测定试剂盒 2(盒) 详见采购文件 694.00 694.00 1-87 生物试剂盒 CD80生化分析仪用清洗液 5(盒) 详见采购文件 1,910.00 1,910.00 1-88 生物试剂盒 52LH溶血剂 5(盒) 详见采购文件 1,355.00 1,355.00 1-89 生物试剂盒 520DIFF溶血剂 5(盒) 详见采购文件 4,715.00 4,715.00 1-90 生物试剂盒 五分类M-5D稀释液 4(桶) 详见采购文件 1,316.00 1,316.00 1-91 生物试剂盒 血细胞仪探头清洗液 5(支) 详见采购文件 535.00 535.00 1-92 生物试剂盒 血细胞仪复合质控品 4(支) 详见采购文件 2,228.00 2,228.00 1-93 生物试剂盒 尿试纸条 11(盒) 详见采购文件 1,320.00 1,320.00 1-94 生物试剂盒 尿质控液 4(盒) 详见采购文件 460.00 460.00 1-95 生物试剂盒 血沉采血管(黑盖)含针 11(板) 详见采购文件 935.00 935.00 1-96 生物试剂盒 生化采血管(红盖)含针 19(板) 详见采购文件 2,280.00 2,280.00 1-97 生物试剂盒 血常规采血管(紫盖)含针 11(板) 详见采购文件 880.00 880.00 1-98 生物试剂盒 布鲁氏菌抗体检测试剂(虎红平板凝集法) 20(瓶)详见采购文件 9,200.00 9,200.00 1-99 生物试剂盒 布鲁氏菌抗体检测试剂(试管凝集法) 160(瓶) 详见采购文件 48,000.00 48,000.00 1-100 生物试剂盒 生理盐水 225(瓶) 详见采购文件 675.00 675.00 1-101 生物试剂盒 血清凝集透明玻璃试管 5,000(支) 详见采购文件 35,000.00 35,000.00 1-102 生物试剂盒 人布病抗体IgMElisa试剂盒 4(板) 详见采购文件 16,080.00 16,080.00 1-103 生物试剂盒 人布病抗体IgGElisa试剂盒 4(板) 详见采购文件 16,080.00 16,080.00 1-104 生物试剂盒 载玻片 100(盒) 详见采购文件 600.00 600.00 1-105 生物试剂盒 木牙签 10(支) 详见采购文件 110.00 110.00 1-106 生物试剂盒 200ul枪头 10(盒) 详见采购文件 3,160.00 3,160.00 1-107生物试剂盒 1000微升枪头 10(包) 详见采购文件 1,950.00 1,950.00 1-108 生物试剂盒 5000ul枪头 10(包) 详见采购文件 1,700.00 1,700.00 1-109 生物试剂盒 医用护目镜 15(副) 详见采购文件 375.00 375.00 1-110 生物试剂盒 一次性医用帽子(无纺布) 100(包) 详见采购文件 1,000.00 1,000.00 1-111 生物试剂盒 一次性棉签 100(包) 详见采购文件 50.00 50.00 1-112 生物试剂盒 一次性止血带 4(盒) 详见采购文件 80.00 80.00 1-113 生物试剂盒 一次性采血垫巾 10(包) 详见采购文件 300.00 300.00 1-114 生物试剂盒 75%酒精 10(瓶) 详见采购文件 80.00 80.00 1-115 生物试剂盒 碘伏 40(瓶) 详见采购文件 80.00 80.00 1-116生物试剂盒 医用脱脂棉球(大号球) 5(袋) 详见采购文件 95.00 95.00 1-117 生物试剂盒 甲酚皂液 3(箱) 详见采购文件 330.00 330.00 1-118 生物试剂盒 84消毒片 10(瓶) 详见采购文件 200.00 200.00 1-119 生物试剂盒 医用利器盒 80(个) 详见采购文件 240.00 240.00 1-120 生物试剂盒 医用利器盒 200(个) 详见采购文件 600.00 600.00 1-121 生物试剂盒 医疗垃圾袋 10(卷) 详见采购文件 400.00 400.00 1-122 生物试剂盒 热敏打印纸 50(卷) 详见采购文件 3,000.00 3,000.00 1-123 生物试剂盒 热敏打印纸 50(卷) 详见采购文件 2,400.00 2,400.00 本合同包不接受联合体投标 合同履行期限:合同所约定的全部义务履行完毕之日止合同包2(ZBJ-2): 合同包预算金额:814,579.00元 品目号 品目名称 采购标的 数量(单位) 技术规格、参数及要求 品目预算(元) 最高限价(元) 2-1 生物试剂盒 MGIEasy 通用DNA文库制备试剂套装 6(套) 详见采购文件 22,500.00 22,500.00 2-2 生物试剂盒 MGIEasy 酶切DNA文库制备试剂套装 6(套) 详见采购文件 24,900.00 24,900.00 2-3 生物试剂盒 MGIEasy RNA文库制备试剂套装 6(套) 详见采购文件 37,200.00 37,200.00 2-4 生物试剂盒 ATOPlex 新冠RNA多重PCR建库套装 2(套) 详见采购文件 56,000.00 56,000.00 2-5 生物试剂盒 MGISEQ-2000RS 高通量快速测序试剂套装(FCS PE100) 6(套) 详见采购文件 58,800.00 58,800.00 2-6 生物试剂盒 0.5ml冻存管 PCR级 10(包) 详见采购文件 6,500.00 6,500.00 2-7 生物试剂盒Break-Away 紫色框,可掰开96孔板PCR管 10(包) 详见采购文件 11,700.00 11,700.00 2-8 生物试剂盒 透明平盖8联排盖 150(包) 详见采购文件 16,500.00 16,500.00 2-9 生物试剂盒 自动PCR仪器封膜胶垫 10(包) 详见采购文件 29,900.00 29,900.00 2-10 生物试剂盒 250 μL带滤芯自动化吸头 10(包) 详见采购文件 5,080.00 5,080.00 2-11 生物试剂盒 1.3ml 圆形孔U型底深孔板 10(包) 详见采购文件 450.00 450.00 2-12 生物试剂盒 硬框薄壁全裙边96孔PCR板 10(包) 详见采购文件 8,000.00 8,000.00 2-13 生物试剂盒 2ml冻存管,PCR级 10(包) 详见采购文件 5,200.00 5,200.00 2-14 生物试剂盒 96孔 PCR板 贴膜 10(盒) 详见采购文件 2,100.00 2,100.00 2-15 生物试剂盒 100% Tween20 2(瓶) 详见采购文件 140.00 140.002-16 生物试剂盒 5M NaCl溶液 2(瓶) 详见采购文件 170.00 170.00 2-17 生物试剂盒 2M NaOH溶液 2(瓶) 详见采购文件 156.00 156.00 2-18 生物试剂盒 无水乙醇 2(瓶) 详见采购文件 70.00 70.00 2-19 生物试剂盒 阔口吸头(200ul) 10(盒) 详见采购文件 2,800.00 2,800.00 2-20 生物试剂盒 磁力架 2(个) 详见采购文件 2,000.00 2,000.00 2-21 生物试剂盒 样本管架 5(个) 详见采购文件 150.00 150.00 2-22 生物试剂盒 quibt分析管 1(包) 详见采购文件 1,500.00 1,500.00 2-23 生物试剂盒 quibt空气罐 3(个) 详见采购文件 14,400.00 14,400.00 2-24 生物试剂盒 肠道菌药敏试剂盒 3(盒) 详见采购文件 2,550.00 2,550.00
  • 高分辨质谱平台实现mRNA mapping流程化
    在之前的一篇微信稿中,咱们介绍了mRNA疫苗的质谱表征方法,“Orbitrap 高分辨质谱助力mRNA疫苗表征”,今天小编继续为大家详细拓展mRNA mapping的质谱表征应用。作为一种新的药物形式,mRNA在多个疾病领域具有显着的治疗潜力。进入细胞后,mRNA药物使用内源性细胞机制来表达预编程的蛋白质。这种表达的蛋白质可以实现多种目的,从促进特定的免疫反应到调节或恢复各种代谢过程等[1]。据WHO官网统计,全球目前正在临床试验阶段的mRNA药物已有几十种,应用方向覆盖传染性疾病、罕见病、肿瘤免疫学等。与大多数生物治疗药物一样,序列分析也是mRNA药物的一个关键质量属性(CQA)。经典的检测方法如Sanger测序和二代测序 (NGS)等已被用于核酸链高通量及大规模的测序。然而在生物制品的表征分析中,往往需要正交方法以获取更全面的信息。对于核酸分析,LC-MS 作为Sanger和NGS的正交方法,与传统测序技术相比具有独特的优势:可直接对核酸样品进行分析(无需扩增等处理步骤);更高的检测灵敏度(直接检测低水平的序列变异体或修饰杂质(由于核酸样品与蛋白样品的较大差异,其测序流程的前处理及LC/MS方法也大不相同。核酸仅有4个特定碱基,在组合形式上远小于蛋白序列,因此会有多个重复序列片段,需要酶解成较长的片段(通常大于15nt)以得到可用于序列覆盖的特征片段。此外核酸样品极不稳定,非常容易降解。基于此需求,我们在前处理上需要选择特异性较强的酶,并且减少酶解时间,得到具有漏切位点的较长片段。下图显示了优化后的核酸mapping分析流程,从前处理到液相分离、质谱检测、数据分析的一套完整方案。点击查看大图 No.01# 前 处 理Nuclease T1是一种真菌核酸内切酶,可切割鸟嘌呤残基后的单链RNA,具有较强的特异性,常用于核酸测序应用。但由于核酸内切酶效率很高,酶解时间较难控制,且传统的溶液酶解方法会使核酸酶残留在分析柱上造成污染。基于以上需求,赛默飞推出了一款前处理磁珠RNase T1 Mag Bulk Kit,将Nuclease T1酶固定在磁珠上,通过简单快速的磁铁吸附及可有效控制酶解时间,并去除溶液里的T1酶,该方式可以有效提高实验的重现性并降低酶的干扰(如下图)。有离线及在线两种方式可供选择:a) 将样品配成200 μL体积放于eppendorf管中(如下图a所示),置于酶解仪中震荡孵育(37-50℃, 2000 rmp)5min ,通过磁铁吸附的方式将酶解上清与磁珠分离,再加入1%甲酸终止反应;图a:手动前处理示意图(点击查看大图)b) 采用全自动磁珠纯化仪,反应、分离及纯化均可根据设置好的程序进行自动操作,适用于高通量前处理需求(图b)。图b: 全自动化在线前处理示意图(点击查看大图)反应条件的优化:a. 反应时间:酶解时间控制在5min 内,随着反应时间的增加(30min, 1h, 4h, overnight),序列覆盖度明显降低。对于修饰mRNA(如甲基化修饰),需要增加反应时间至30min.b. 反应温度:37℃与50℃的结果类似No.02# 色 谱 柱色谱分离采用一款专用于核酸分析的色谱柱,Thermo Scientific™ DNAPac™ RP,该色谱柱由球形宽孔径 4 µm 聚合树脂构成,可耐受极端 pH (0-14) 和温度 (5-110°C) 条件,在HPLC 和UHPLC仪器上均可使用,针对寡核苷酸可实现高分辨率和高通量,较小和极大的核酸链均可分辨(如下图A)。图A(点击查看大图)图B显示DNAPac™ RP色谱柱的各类型号,mRNA mapping建议选用2.1*100 mm型号。图B(点击查看大图)
  • 乳品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌快速检测的新体系
    食源性致病菌污染是乳制品安全问题的重要隐患之一。乳品中常见的食源性致病菌有金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌等。目前乳品致病菌检测以培养法为主,但此类方法操作较为繁琐并耗时长,不能满足检测时效的需求。在本期的推送中,探索了荧光定量PCR技术在乳品中金黄色葡萄球菌和沙门氏菌快速检测方面的应用,并进行了大量验证试验、实际检测,形成乳品中致病菌快速检测创新体系,该创新体系可以实现金黄色葡萄菌和沙门氏菌24h内完成增菌和检测。缩短了整体检测时间,并降低了检测成本,为进一步改良乳品中致病菌快速检测提供了可参考的数据。珀金埃尔默旗下的良润生物研发出创新检测体系,优化了样品前处理过程,并引入了荧光定量PCR分子检测技术,可以实现金黄色葡萄菌和沙门氏菌在24h内完成增菌和检测。扫描下方二维码,即可下载珀金埃尔旗下良润生物《乳品中致病菌快速检测解决方案》及《微生物快速检测产品信息》另外为更好的了解乳制品企业致病菌的检测需求,精准的提供致病菌检测解决方案,珀金埃尔默旗下良润生物展开线上有奖问卷调查。点击下方链接,即可访问调研页面。https://mp.weixin.qq.com/s/Pu5LRwaQSfCxsOp7ZNbbbg
  • 中科院化学所汪铭研究员解析2020年诺贝尔化学奖
    p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 瑞典皇家科学院2020年10月7日宣布今年的诺贝尔化学奖授予美国加州大学教授詹妮弗· 杜德纳(Jennifer Doudna)和现在德国工作的法国科学家埃曼纽尔· 卡彭蒂耶(Emmanuelle Charpentier), 以表彰她们在基因编辑领域做出的突出贡献。两位科学家合作发展了新型CRISPR/Cas9基因编辑方法, 并精准地应用于改变动物、植物、微生物的DNA。这项技术对生命科学产生了革命性影响, 有望催生创新性癌症治疗策略, 并可能让治愈遗传性疾病这一人类梦想成真。(“This technology has had a revolutionary impacton the life sciences, is contributing to new cancer therapies and may make the dream of curing inherited diseases come true.”)。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202010/uepic/6fdcbf32-a434-465d-92ab-a0210b6eae57.jpg" title=" 1.jpg" alt=" 1.jpg" / /p p style=" text-align: center " span style=" text-align: justify text-indent: 2em " CRISPR/Cas9基因编辑技术示意图& nbsp (图片来源:www.nobelprize.org) /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 随着生物技术的不断发展, 对活细胞DNA进行精准操作, 实现碱基或DNA片段的插入、删除、替换等, 即基因编辑成为可能。同时, 运用基因编辑技术可以改变基因的序列和功能, 从而调控细胞的命运和生物特征, 为遗传性疾病的治疗提供新方法。CRISPR/Cas9基因编辑技术是继“锌指核酸酶(ZFN)”、“类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)”之后出现的新一代基因组定点编辑技术。与前两代技术相比, CRISPR/Cas9具有操作简单、快捷高效等优势, 自发现之后迅速发展成为当今最主流的基因编辑方法。CRISPR是Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats(成簇规律间隔短回文重复序列)的首字母缩写。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " CRISPR序列是由日本分子生物学家石野良纯(Yoshizumi Ishino)1987年在大肠杆菌中偶然发现的, 西班牙微生物学家弗朗西斯科· 莫伊卡(Francisco Mojica)2003年进一步发现CRISPR中独特的非重复的序列与各种病毒的遗传密码相匹配。随着研究的不断深入, 研究人员确定了CRISPR是一种源自细菌的适应性免疫系统。CRISPR能够识别(通过crRNA)入侵细菌的病毒, 并通过一种特殊的核酸酶(Cas9蛋白)降解入侵病毒的DNA序列, 从而保护古细菌免受病毒侵害。Emmanuelle Charpentier在研究化脓性链球菌(Streptococcus pyogenes)的调控性RNA过程中发现化脓性链球菌中存在一些新型小RNA分子, 其遗传密码与CRISPR序列存在部分匹配。进一步她们发现这些未知的RNA分子(后来被称为反式激活的CRISPR RNA, tracrRNA)可以帮助基因组中的CRISPR序列转录产生的长RNA分子加工为成熟的, 具有活性的RNA(crRNA), 对CRISPR作用及细菌的免疫系统具有决定性意义。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 然而, 第一次全面解析CRISPR/Cas9基因编辑的原理则来自于Emmanuelle Charpentier和美国分子生物学家Jennifer Doudna的合作。 span style=" text-indent: 2em " 她们发现使用重组Cas9蛋白(来自在大肠杆菌里表达的化脓性链球菌[S. pyogenes]的基因)和体外转录的crRNA及tracrRNA可以在体外切割纯化的DNA, 并成功编辑了大肠杆菌基因。此外, 她们证明crRNA和tracrRNA对Cas9发挥作用都是必需的, 两种RNA在被融合为单一的导向RNA(single guide RNA, sgRNA)时也可以在体外发挥作用, 并提到“利用这一系统来进行可设计的基因组编辑的潜力”。这一结果发表半年之后, 研究人员首次报道可以将CRISPR/Cas9基因编辑技术应用于哺乳动物和人类细胞的基因编辑, 从而促进了这一技术的爆发性发展。此前, 改变细胞基因是一项非常耗时, 甚至是难以完成的工作。使用CRISPR基因编辑方法, 研究人员理论上可以通过设计不同的sgRNA引导Cas9核酸酶在他们想要的任何基因位点进行基因编辑。由于这一方法的简单、廉价和高效, CRISPR迅速发展成为最主流的基因编辑技术, 应用于高效、精确地改变、编辑或替换植物、动物甚至是人类基因, 被称为编辑基因的“魔剪”。 /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " CRISPR/Cas9基因编辑技术改变了我们在不同物种活细胞中操纵基因表达的能力, 短短十几年间便从CRISPR机制研究发展到临床试验应用。与ZFN和TALEN等基因编辑技术相比, CRISPR/Cas9在基因编辑和基因治疗等方面具有非常明显的优势:设计极其简单, 只需要设计一段几十个碱基构成的gRNA序列即可实现靶标基因编辑, 而传统方法多需要复杂的分子生物工程设计蛋白质识别基因组;基因编辑效率高, 可以通过设计多个sgRNA实现多个基因位点的同时基因编辑;多功能化, 随着CRISPR/Cas9的不断发展, 这一技术不仅可以实现对特定基因组位点的删除、修复、替换等功能, 还进一步被应用于基因组成像、表观遗传修饰、核酸检测及疾病诊断(如新冠病毒检测)等方面。2020年诺贝尔化学奖颁发给两位从事基因编辑研究的科学家, 不仅仅是对她们个人成就的表彰, 更是对整个研究领域成果的肯定。当前, CRISPR/Cas9基因编辑技术已经显示出巨大的生物医学应用价值, 但其在生物安全性、基因编辑脱靶效应以及临床应用等方面仍面临很多函待解决的问题。如人体可能对细菌来源的基因编辑核酸酶Cas9产生免疫反应;高效、安全地将CRISPR/Cas9基因编辑系统导入活细胞甚至活体层次至关重要。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em line-height: 1.75em " 病毒载体在人类基因治疗中获得了广泛应用, 但是其装载容量有限, 而常规的Cas9蛋白过大, 对利用病毒载体实现CRISPR/Cas9递送提出了挑战。因此, 发展新型CRISPR/Cas9递送系统对在体基因编辑及其临床转化应用尤为重要;在降低脱靶效应方面, 通过对Cas9蛋白进行定点突变或者发展新型基因编辑技术(如碱基编辑等)则有望实现突破。这些研究虽然仍面临众多挑战, 但也是未来基因编辑技术发展和其生物医学应用的机遇和突破口。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 300px height: 399px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202010/uepic/9c41b08e-4372-4f94-a6e2-604f574bf3e4.jpg" title=" 2.jpg" alt=" 2.jpg" width=" 300" height=" 399" border=" 0" vspace=" 0" / /p p style=" text-align: center line-height: 1.75em "   中科院化学所研究员 汪铭 /p p style=" line-height: 1.75em "   研究方向主要包括:1)蛋白质化学修饰及其活体功能调控 2)CRISPR/Cas9基因编辑递送及其化学生物学应用 3)金属配位导向的蛋白质组装及其生物医学应用。 /p p style=" line-height: 1.75em "   课题组主页: a href=" http://mingwang.iccas.ac.cn/home" target=" _blank" http://mingwang.iccas.ac.cn/home /a /p p br/ /p
  • 核酸降解知多少
    导语在实验过程中,最心累的莫过于好不容易提取的核酸却降解了。那么核酸为什么会发生降解呢,我们又该如何预防呢?关于核酸降解,你了解多少呢?让我们一起对核酸降解一探究竟吧。 什么是核酸 核酸是一种高分子化合物,核苷酸是构成核酸的基本单位。核酸水解后得到许多核苷酸,核苷酸是组成核酸的基本单位,即组成核酸分子的单体。一个核苷酸分子是由一分子含氮的碱基、一分子五碳糖和一分子磷酸组成的。根据五碳糖的不同可以将核苷酸分为脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸。如果5-碳糖是核糖,则形成的聚合物是RNA;如果5-碳糖是脱氧核糖,则形成的聚合物是DNA。 核酸降解本质 核酸降解是DNA/RNA分子中的碱基和戊糖间的氮糖苷键,或磷酸二酯键在物理因素、化学因素和生物因素等作用下发生水解,使DNA/RNA链发生断裂。核苷磷酸化酶:能分解核苷生成含氨碱基和戊糖的磷酸酯酶。广泛存在于生物体内,催化的反应可逆。可在核苷水解酶作用下继续分解核苷成嘌呤碱、嘧啶碱和戊糖。核苷水解酶:主要存在于植物和微生物体内,只水解核糖核苷。 核酸降解原因 DNA降解的因素很多,主要分为物理因素,化学因素和生物因素。一、物理因素:温度,机械剪切力、核酸的反复冻融、高温煮沸及辐射等。二、化学因素:PH值,水解反应,氧化反应等。三、生物因素:酶解及微生物侵染等作用。一、物理因素的影响★ 温度:高温条件下,RNA不稳定,易加速磷酸二酯键的水解,使核酸降解;★ 机械剪切力:包括剧烈震荡、搅拌、细胞突然至于低渗溶液中,以及让溶液快速通过狭长的孔道;★ 核酸的反复冻融、高温煮沸及辐射等,均会导致核酸的降解。二、化学因素影响水解★ PH值:氢离子参与催化磷酸二酯键、糖苷键的水解,但糖苷键比磷酸二酯键更易被酸水解。过高或过低的PH值都易破坏复键。核酸(特别是RNA)在碱性溶液中十分容易降解;★ 氧化反应:会氧化碱基中的含氨杂环,使其变性,从而改变一级与二级的核酸构象;★ 苯酚在空气中被氧化生成醌,它能够产生自由基,直接用于DNA的分离,会使磷酸酯键断裂,造成DNA的降解。三、生物因素影响★ 酶解:核酸酶可以催化水解多聚核苷酸链中的磷酸二酯键,直接破坏核酸的一级结构,使其降解。1.核酸酶(磷酸二酯酶)核酸内切酶:在环境或生物体内具有识别双链DNA分子中特定核苷酸序列,并由此切割DNA双链的核酸内切酶统称为限制性核酸内切酶。作用方式从多聚核苷酸链中间开始,在某一个位点切断磷酸二酯键。如DNase,RNase等。核酸外切酶:核酸外切酶的作用方式是从多聚核苷酸链的一端(3' -端或5' -端)开始,逐个水解切除核苷酸。如蛇毒磷酸二酯酶,牛脾磷酸二酯酶等。2.核苷酸酶(磷酸单酯酶)专一性的磷酸单酯酶:3' -核苷酸酶,5' -核苷酸酶非专一性磷酸单酯酶。★ 微生物侵染:微生物会将DNA作为营养物质或是其分泌的化学物质含酶。 预防降解的方法 预防RNA降解的方法:★ 去除环境中RNase酶的污染或强有力地抑制其活性。★ 获取样品后最好立即提取RNA,若无条件立即实验,应于-80℃液氮中保存样品,提取时取出样品后立即在低温下研磨裂解细胞,以防RNA降解。★ 在总RNA提取分离的最初阶段,联合使用Rnase的特异抑制剂,尽可能的灭活胞内的Rnase的活性。★ 避免样品的反复冻融。★ 保证裂解液的质量,裂解液的用量不足,也会导致RNA降解。★ RNA提取后,放入-80℃保存,防止降解。预防DNA降解的方法:★ 简化操作步骤,缩短提取过程,以减少各种有害因素对核酸的破坏;★ 减少化学物质对DNA的降解,为避免过酸、过碱对DNA双链中磷酸二酯键的破坏;★ 防止基因组DNA的生物降解,主要是DNase降解基因组DNA,Dnase需要二价金属阳离子Mg2+等的激活,可用EDTA等金属离子整合剂整合Mg2+以抑制Dnase的活性;★ 减少物理因素对DNA的降解,物理降解因素主要包括机械剪切力(如剧烈震荡、搅拌等);★ 避免样品的反复冻融,可将DNA分装保存于缓存液中;★ 所有试剂应用无菌水配制,耗材经高温灭菌;★ 避免DNA的过高温处理等。
  • 上海速创GBS恒温扩增芯片法试剂盒正式获批三类医械证
    继上海速创诊断全自动恒温核酸扩增分析仪获国家药监局三类医疗器械注册证(注册证号:国械注准20213220473号)之后,近日,公司B族链球菌核酸检测试剂盒(恒温扩增芯片法)又获批三类医疗器械注册证(注册证号:国械注准20223401433号)。产品规格48测试/盒、96测试/盒适用仪器上海速创诊断 全自动恒温核酸扩增分析仪(型号:MA3000)产品优势:易操作样本进-结果出 速度快全程检测≤1小时无污染提纯-扩增全封闭 结果准确临床阳性符合率≥97.40%阴性符合率≥98.20%适用人群01 妊娠35-37周进行GBS筛查02 本次妊娠有GBS菌尿03 既往新生儿GBS感染史04 在妊娠37周之前分娩 05 羊膜破裂超过18小时06 分娩体温超过38.0℃07 筛查距离分娩大于5周该试剂盒完全变革了现在PCR检测或培养镜检的范式,可在1小时內全自动地实现“样本进-结果出”的功能,为临床B族链球菌的诊断提供了更高效、更快速、更准确的检测手段。未来,速创诊断将继续秉承“科技为本、人才为先、追求卓越、创芯一流!”的理念,为打造微流控分子诊断领域第一品牌而不懈努力!
  • 宁夏化学分析测试协会批准发布《一次性使用卫生用品中金黄色葡萄球菌检验 实时荧光PCR法》等4项团体标准
    各有关单位:根据国家《团体标准管理规定》和《宁夏化学分析测试协会团体标准管理办法》,我协会对《一次性使用卫生用品中金黄色葡萄球菌检验 实时荧光PCR法》等4项团体标准进行了评审,已经通过了专家审查,现予以发布,自2024年5月30日起正式实施,特此公告。 序号标准号标准名称发布日期实施日期1T/NAIA0288-2024一次性使用卫生用品中金黄色葡萄球菌检验 实时荧光PCR法2024-05-172024-05-302T/NAIA0289-2024一次性使用卫生用品中绿脓杆菌检验 实时荧光PCR法2024-05-172024-05-303T/NAIA0290-2024一次性使用卫生用品中溶血性链球菌检验 实时荧光PCR法2024-05-172024-05-304T/NAIA0291-2024一次性使用卫生用品中环氧乙烷残留量的测定 气相色谱-质谱法2024-05-172024-05-30 2024协会团体标准公告-5.17.pdf
  • 宁夏化学分析测试协会发布《一次性使用卫生用品中金黄色葡萄球菌检验 实时荧光 PCR 法》等2项团体标准征求意见稿
    各相关单位:按照宁夏化学分析测试协会团体标准工作程序,标准起草组已完成《一次性使用卫生用品中金黄色葡萄球菌检验 实时荧光 PCR 法》和《一次性使用卫生用品中环氧乙烷残留量的测定 气相色谱-质谱法》 2项团体标准征求意见稿的编制工作。现按照我协会《团体标准制修订程序》要求,公开征求意见。请有关单位及专家提出宝贵意见,并将征求意见表(附件)于2024年2月30日前反馈给秘书处。联系人:张小飞 电 话:13995098931邮箱:1904691657@qq.com 宁夏化学分析测试协会2024年1月30日 关于团标征求意见函 -1.30.pdf团标表格7-专家意见表.doc团体标准 一次使用卫生用品中金黄色葡萄球菌检验 实时荧光PCR法 征求意见稿.pdf团体标准-一次性使用卫生用品中环氧乙烷残留量 征求意见稿.pdf
  • FIDA分子互作仪:带你复现Nature青睐蛋白质与核酸互作50分顶级发文思路,还不快学起来!
    研究背景Nature:清北团队合作发现CRISPR免疫增效子,建立Cas9核酸酶生长进化模型CRISPR-Cas系统是一种强大的基因编辑工具,但Cas9核酸酶活性仍需提高。现有的方法存在着种种局限性,例如优化序列可能破坏结构、改变表达方式可能导致副作用、使用辅助蛋白会增加复杂性等。因此,开发新的方法来增强Cas9核酸酶的活性仍是CRISPR-Cas系统研究中的一个重要课题。2024年5月29日,来自清华大学和北京大学的研究团队在Nature上合作发表了题为:Pro-CRISPR PcrIIC1-associated Cas9 system for enhanced bacterial immunity的研究论文研究团队通过生物信息学分析、结构生长轨迹分析、生化实验、冷冻电镜解析和大肠杆菌抗噬菌体实验等手段,发现了一类新型CRISPR免疫增效子PcrIIC1,可以显著增强Cas9核酸酶的活性。研究团队还建立了Cas9核酸酶生长进化模型,揭示了Cas9蛋白结构和功能的演变规律,并阐明了PcrIIC1增强Cas9活性的分子机制。这项研究为我们进一步理解CRISPR系统的进化历程,以及开发基于CRISPR免疫增效子的高效基因编辑工具奠定了基础。研究思路通过生物信息学分析,研究团队观察到一类新型关联基因(Novel-associated genes, NAGs),显著富集存在于较大蛋白体积的II-C型Cas9的基因簇中,并推测这些NAGs可能参与到Cas9介导的细菌免疫过程。图1. 结构生长轨迹分析方法(左)和II-C型Cas9的生长轨迹图(右)通过生化实验和冷冻电镜解析复合体结构表明,来自金黄色细菌属(Chryseobacterium sp.)的CbCas9生长出了一个全新的增强Cas9活性的β-REC2结构域,以及一个全新的能够与其关联基因PcrIIC1互作的CTH结构域。通过蛋白间相互作用,2个CbCas9蛋白和2个PcrIIC1蛋白能够形成异源四聚体复合物。图2. 冷冻电镜分析CbCas9和PcrIIC1结合的三个阶段蛋白质与核酸的分子互作实验表明,与单独的CbCas9相比,CbCas9-PcrIC1复合物表现出增强的DNA结合进而体现出切割活性,对原间隔区相邻基序序列的兼容性更广,对错配的耐受性更强,抗噬菌体免疫性增强。研究利用溶液中标记的分子互作方式获得亲和力,得出与单独的CbCas9相比,CbCas9-PcrIC1复合物表现出增强的DNA结合(图3a)进而体现出切割活性,对原间隔区相邻基序序列的兼容性更广,对错配的耐受性更强,抗噬菌体免疫性增强。图3. PcrIIC1增强CbCas9的DNA结合(a)、切割(b)、PAM兼容性(c)、DNA解旋 (d) 和错配容忍 (e) 能力最后,为了检验CRISPR免疫增效子PcrIIC1对CbCas9抗噬菌体免疫能力的影响,研究人员在大肠杆菌中进行了抗噬菌体实验。以上结果说明CbCas9-PcrIIC1复合体的形成对整个CRISPR-Cas系统的免疫增强至关重要。图4. PcrIIC1显著增强了CbCas9系统的细菌免疫活性FIDA如何更好复现Nature蛋白与核酸互作发文思路流体动力分散技术(FIDA)通过第一性物理原理直接获取分子的绝对流体动力学半径(Rh),通过追踪分子微妙的变化来表征生物分子的行为、特征以及功能。Fida Neo分子互作仪涵盖亲和力表征、亲和动力学表征、分子质量表征三大功能,一次实验即可获得互作与分子质控的数据,让互作的数据有“法”可依。FIDA技术无需固定、无需加热,甚至无需标记,可兼容所有缓冲液,是对现有分子互作技术是一次不一样的升级。FIDA技术可用于CbCas9-PcrIIC1复合物冷冻电镜前样品质控,CbCas9-PcrIC1复合物与DNA的亲和力实验以及动力学实验,以及CRISPR- cas以及核酸复合物的大小和定量表征等方面,具体如下:FIDA多维蛋白复合体表征,快速无稀释优化冷冻电镜样品,丰富您的蛋白质表征数据。FIDA所获得的Rh为绝对的粒径大小,可以直接与后期的电镜数据做比较。此外FIDA内置的 PDB 关联程序,可以将实际获得的 Rh 与数据库中的结构信息进行比较,有助于结构的精细解析。FIDA技术单次运行只需要40 nL 蛋白质在 4 分钟内获得的完整蛋白质 QC 图,包括冷冻电镜样品QC的关键参数表征,例如多分散性指数(PDI),聚集(Agg),粘度(Viscosity),粘附性(Stickiness),完整性(Rh)等指标,FIDA是一种非常有效的支持所有生物物理学和结构生物学的基本工具。图5. FIDA单次测试的得到8个蛋白表征数据冷冻电镜应用:FIDA:4分钟给您无稀释的冷冻电镜样品优化解决方案FIDA和本篇研究中应用的分子互作技术都是一种在溶液状态下通过荧光分子标记表征分子互作的技术。对于蛋白可能需要形成多聚体,在溶液环境下,更能有效的体现蛋白与蛋白或蛋白与核酸互作的真实情况。FIDA 可以使用含盐和洗涤剂的缓冲液条件,具有不同环境中(类体内环境)进行测试的灵活性。这使得研究者能够分析不受缓冲液成分限制的核苷酸,以确保其数据的准确性和可靠性。FIDA 这种在溶液内检测分子互作技术,是理想的结合能力检测,因为它不依赖于潜在的阻碍性表面固定,不受结合域空间方向影响的表征。图6. FIDA实验原理示意图FIDA不仅可以表征互作亲和力,也同时无标记检测CRISPR核酸酶与gDNA相互作用的热力学、亲和力、和结合动力学,全面表征蛋白与核酸互作。FIDA不仅可以完成本研究中得到的CbCas9-PcrIC1复合物表现出增强的DNA结合亲和力,还可在无标记下表征蛋白与核酸的热力学参数与结合动力学,甚至表征结合时蛋白构象变化与获得有关基因编辑过程的分子细节的定量表征。FIDA技术可以处理带负电荷分析物和带正电荷配体,使利用FIDA能够深入了解CRISPR- cas组分之间的结合相互作用,并以更高的准确性和效率表征和优化CRISPR系统。FIDA是一种序列无关的技术-不需要事先了解序列。FIDA的序列独立性质可对未知或未表征的基因组区域进行研究,同时简化工作流程。图7.(A) FIDA实验示意图。ReporterRNA用于识别RNP的大小和饱和点(上),用其报告RNP结构作为竞争分析的起点(下) (B)正向结合(上)和反向滴定(下)期间获得的原始FIDA数据 本研究在分子层面直观的揭示了免疫增效子PcrIIC1的作用。首次发现了一类新型的CRISPR免疫增效子可以通过二聚化Cas9效应器提升Cas9活性,这些结果不仅有助于我们进一步理解CRISPR系统的进化历程,还为未来基于CRISPR免疫增效子的高效基因编辑工具的开发奠定了基础。FIDA对于蛋白质复合体的多维表征和对蛋白与核酸互作亲和力与动力学的的检测,不依赖于分子量变化,样本用量少(仅需40nL),是一种在溶液状态下且不受缓冲液成分影响的多维表征技术。对于在本研究中相似的蛋白可能需要形成多聚体,在溶液环境下,更能有效的体现互作的真实情况。
  • The Scientist:2015四大技术突破(成像、光遗传学、单细胞分析、CRISIPR)
    p   12月24日,The Scientist评选出了“Top Technical Advances 2015”,成像、光遗传学、单细胞分析以及基因编辑技术CRISIPR入选。那么,我们就一起看看这四大技术在过去的一年中都取得了哪些进展吧。 /p p    strong 成像 /strong /p p   今年, a title=" " style=" color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline " href=" http://www.instrument.com.cn/application/SampleFilter-S01-T000-1-1-1.html" target=" _self" span style=" color: rgb(255, 0, 0) " 生命科学 /span /a 的成像领域打破了过去的壁垒,科学家们通过显微镜学方法越来越深入的观察到了生命组织。 /p p   Spectrometer-free vibrational imaging by retrieving stimulated Raman signal from highly scattered photons. Science Advances. /p p style=" text-align: center " img width=" 500" height=" 281" title=" 1.jpg" style=" width: 500px height: 281px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201512/noimg/550d29a2-5d13-4f9b-80da-ed1514392728.jpg" border=" 0" vspace=" 0" hspace=" 0" / & nbsp /p p   在过去的十年里,一种称作为体内振动光谱成像(vibrational spectroscopicimaging)的技术一直被用来捕捉一些活体组织中蛋白质、脂类、核酸和其他分子的活动。尽管这一技术可在无需荧光标记的条件下显影组织,但它仍然太慢而无法适用于大多数的研究和 a title=" " style=" color: rgb(255, 0, 0) text-decoration: underline " href=" http://www.instrument.com.cn/application/SampleFilter-S01-T000-1-1-1.html" target=" _self" span style=" color: rgb(255, 0, 0) " 临床应用 /span /a 。 /p p   10月30日,Purdue大学的科学家们报告称,他们利用体内振动光谱成像技术大大提高了收集图片的速度(从分到秒)。新技术最关键的改进是不再需要收集分子振动信号的光谱仪。取而代之的是,这一改进的技术在光子进入组织前会对其进行颜色编码。 /p p   该研究的通讯作者 Ji-Xin Cheng 说:“我们的想法是在将光子发送到组织前,用不同的兆赫频率进行颜色编码。通过这样的方式,我们能够在几十微妙内收集漫射光子,并通过编码频率和光颜色之间的一一对应检索光谱。” /p p   Whole-animal functional and developmental imaging with isotropic spatial resolution. Nature Methods. /p p style=" text-align: center " img width=" 500" height=" 281" title=" 2.jpg" style=" width: 500px height: 281px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201512/noimg/b0bb94ab-9898-4818-9de9-d2b62801551e.jpg" border=" 0" vspace=" 0" hspace=" 0" / /p p   同一个月,发表在《Nature Methods》上的一项研究中,霍华德休斯医学研究所Philipp Keller领导的研究小组发明的一款新型显微镜让科学家们能够更加清晰、全面的观察活体动物的生物过程。 /p p   这款显微镜能够产生完整的、不透明生物体的图像,包括斑马鱼或果蝇的胚胎,在三个维度都有足够的分辨率,每个细胞都能展现出明显的结构。更重要的是,它能够观察到胚胎发育过程中细胞的移动,还能够监测大脑活动。研究人员用它记录了果蝇神经系统发育的过程,最终共有10,000个细胞。 /p p    strong 光遗传学 /strong /p p   All-Optical Interrogation of Neural Circuits. Journal of Neuroscience . /p p style=" text-align: center " img width=" 500" height=" 281" title=" 3.jpg" style=" width: 500px height: 281px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201512/noimg/f53a88eb-91d0-4b20-b9af-9dabdc4fbcc1.jpg" border=" 0" vspace=" 0" hspace=" 0" / /p p   今年11月,MIT的Edward Boyden和斯坦福大学的Karl Deisseroth因他们在光遗传学领域的工作获得了表彰。光遗传学技术是指通过光线来操控神经元,科学家们一直在不断的改进这一技术。 /p p   本月前,在芝加哥举行的神经科学学会会议上,Deisseroth等人提出了全光电生理学(all-optical electrophysiology)的升级版。哈佛大学Adam Cohen和他的团队开发出了一种reporter,当引入到细胞中去时,在电压发生改变的情况下会发出红外线。Cohen与Boyden一起,将电压指示器与一种响应蓝光的膜通道一起导入到了细胞中,这使得研究人员能够用蓝光开启细胞,用红外线记录它们的活动。 /p p   Natural light-gated anion channels: A family of microbial rhodopsins for advanced optogenetics. Science. /p p   今年6月,发表在《科学》杂志上的一项研究中,研究人员在海藻中发现了一种紫红质通道蛋白(channelrhodopsin),与先前开发的工程通道相比,它能够更快地抑制神经元活动。科学家们还开发出了一种对在光遗传学控制下神经元作出即时反馈的方法,维持它们的活性在一个理想的状态。这一“神经恒温器”(neuro thermostat)可在24小时内控制细胞的firing rate常数。 /p p    strong 单细胞分析 /strong /p p   Droplet Barcoding for Single-Cell Transcriptomics Applied to Embryonic Stem Cells. Cell /p p   Highly Parallel Genome-wide Expression Profiling of Individual Cells Using Nanoliter Droplets. Cell /p p style=" text-align: center " img width=" 400" height=" 400" title=" 4.jpg" style=" width: 400px height: 400px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201512/noimg/21d86143-27bf-4226-8414-b90e7a49c325.jpg" border=" 0" vspace=" 0" hspace=" 0" / /p p   近年来,单细胞分析蓬勃发展,研究成果不断涌出,技术也越来越精准。今年,通过单细胞分析,科学家们鉴定出了一个新的细菌们,检测了小鼠肠道内最珍贵的细胞类型。5月,发表在《细胞》杂志上的两项研究使单细胞转录组学有了一个相当大的飞跃,并行检测的细胞数量从约100增加到了几千。 /p p   哈佛大学的Marc Kirschner和Steve McCarrol实验室开发出了一些高通量技术,能够在样本进入到搅拌器中去之前,快速、轻松、廉价地赋予每个细胞独特的遗传条形码。研究小组希望他们的技术将能够帮助生物学家们更深入地发现和分类机体中的细胞类型,绘制出大脑一类复杂组织中的细胞多样性图谱,更好地了解干细胞分化,以及获得更多有关疾病遗传学的认识。 /p p   两个研究小组各自开发了一些方法利用微珠将大量不同的DNA条形码同时传送到几十万纳米大小的液滴中。两种方法都利用了微流体装置来将细胞和微珠一起装入这些液滴中。这些液滴是在一个小型装配线上生成,沿着一根头发宽的槽道流动。微珠条形码附着到每个细胞的一些基因上,因此科学家们可以一批次测序所有的基因,追踪每个基因的来源细胞。 /p p    strong CRISPR /strong /p p   我们熟知的基因编辑工具CRISPR不断带来新的研究成果,在许多研究人员利用CRISPR的同时,其他一些人则专注于改进这一技术。 /p p   Photoactivatable CRISPR-Cas9 for optogenetic genome editing. Nature Biotechnology. /p p style=" text-align: center " img title=" 5.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201512/noimg/153730c1-5f84-484b-a957-9d99a4d6fd77.jpg" / /p p   6月15日,发表在《Nature Biotechnology》上的一项研究中,科学家们结合CRISPR与光遗传学构建出了一种系统:一种光激活的新型Cas9核酸酶使得研究人员能够在空间和时间上更好地控制RNA引导的核酸酶的活性。 /p p   研究人员通过首先将Cas9蛋白分成两个失活的片段构建出了paCas9。随后他们让每个片段连接一个光控开关蛋白Magnet。当受到蓝光照射时,两个Magnet蛋白结合到一起,分开的Cas9片段随之结合重建出了RNA引导的Cas9核酸酶活性。重要的是,这一过程是可逆的:当切断光线时,paCas9核酸酶会再度分裂,核酸酶活性终止。 /p p   Rationally engineered Cas9 nucleases with improved specificity. Science. /p p   Cas9酶是基因编辑系统中一个非常关键的组成部分,而脱靶效应一直是CRISPR技术需要克服的重大技术问题。11月30日,发表在《科学》杂志上的一项研究中,麻省理工学院-哈佛医学院Broad研究所CRISPR大神张锋的研究小组又取得了一项突破性的成果。研究人员通过创建了3个新版本的Cas9酶大大降低了CRISPR/Cas9系统的脱靶效应 有效改善了这一技术的最大局限性之一。 /p p   In vivo genome editing using Staphylococcus aureus Cas9.Nature. /p p style=" text-align: center " img width=" 450" height=" 281" title=" 6.jpg" style=" width: 450px height: 281px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201512/noimg/48e6fc4c-b79f-4a44-bdb7-88bcca74d8dc.jpg" border=" 0" vspace=" 0" hspace=" 0" / /p p   4月1日,发表在《自然》杂志上的一项研究中,张锋研究小组还鉴别出了一种更小的Cas9核酸酶版本。最常使用的Cas9酶源自化脓性链球菌(SpCas9),因太大而无法装入到腺病毒载体中。这项研究中介绍了一种来自金黄色葡萄球菌的Cas9核酸酶(saCas9),它比SpCas9小25%,从而为腺病毒的包装问题提供了一个解决方案。并未参与这项研究的杜克大学的 Charles Gersbach 说:“真正让人兴奋的是saCas9在体内真的能发挥作用。” /p p   Epigenome editing by a CRISPR-Cas9-based acetyltransferase activates genes from promoters and enhancers. Nature Biotechnology. /p p   同月6日,Gersbach和同事们也在《Nature Biotechnology》发表了他们的研究成果。研究人员结合一种组蛋白乙酰转移酶与Cas9构建出了一种表观遗传编辑器。他们破坏了Cas9切割DNA的能力,转而利用它作为一种自动引导装置到达基因组中的正确位点,并通过组蛋白乙酰化来启动基因。 /p p    span style=" font-size: 14px " 备注:本文部分内容参考自生物通网站。 /span /p
  • 重磅│“提高呼吸道病原体核酸检测率”医疗质量改进目标,结核病刻不容缓
    为进一步加强医疗质量安全管理,持续提升医疗质量安全管理科学化、精细化水平,构建优质高效的医疗质量管理与控制体系,国家卫生健康委制定并发布了10项《2021年国家医疗质量安全改进目标》。在此基础上,医政医管局组织各专业国家级质控中心围绕本专业医疗质量安全的薄弱环节和关键点,提出了2021年质控工作改进目标(共33项)。其中,在感染性疾病专业提出了“提高呼吸道病原核酸检测率”的目标。 肺结核:经呼吸道传播的乙类传染病结核病是由结核分枝杆菌感染人体后引起的慢性传染病,人体除头发和指甲外都可以发生结核病。其中,肺脏是最常被侵犯的器官,如被侵犯就叫肺结核。肺结核是我国法定报告的乙类传染病,其主要通过呼吸道传播,1名传染性肺结核患者若不加以治疗,1年平均可感染10-15名健康人。根据世界卫生组织2020年10月14日发布的最新全球结核病年度报告,我国2019年新发结核病患者数约83万例,位居全球第三位;利福平耐药结核病患者数约6.5万例,占全球利福平耐药肺结核患者的14%,位居全球第二位,是全球结核感染负担最重的国家之一。 结核病的早期快速诊断是预防和控制结核病蔓延的关键《“十三五”全国结核病防治规划》要求:到2020年全国结核病患者病原学诊断率达到50%以上,东中部地区和西部地区分别有80%和70%的县(市、区)具备开展结核病分子生物学诊断的能力。为进一步遏制结核病流行,推进健康中国建设,2019年5月国家卫生健康委、国家发展改革委、教育部、科技部、民政部、财政部、国务院扶贫办和国家医保局联合制定了《遏制结核病行动计划(2019—2022 年)》,并指出:结核病的早期快速诊断是预防和控制结核病蔓延的关键。 结核分枝杆菌核酸检测阳性为确诊病例2017年11月,新的《肺结核诊断》行业标准正式发布,明确将结核分枝杆菌核酸检测阳性列为确诊病例,该标准的发布为结核病的确诊提供了新的手段。2020年全球结核病报告数据显示,2019年我国结核病病原学阳性率为47%,在原有的传统痰涂片和痰培养确诊病例的基础上有了大幅提升。 迪澳恒温核酸检测系统优选方案该系统是“十二五”国家科技重大专项成果转化产品,主要通过bst聚合酶及特异性引物在恒温条件下(63℃)对标本中结核分枝杆菌复合群核酸片段进行特异性扩增,扩增产物(dna)与核酸染料结合后发出荧光信号,通过恒温扩增荧光检测仪实时读取荧光信号,根据仪器给出的扩增曲线和出峰时间判断结果,可以快速对人痰标本中的结核分枝杆菌复合群dna进行定性检测。其优势在于:l 结果准确敏感性高,病原学阳性率为64%,远高于痰涂片和痰培养,优于传统pcr;特异性高(96.26%),与痰培养相当。l 安全性高专用收集管全封闭提取痰液样本,无病原体暴露,降低感染风险。l 操作简便,结果快速痰液样本无需特殊处理;耗时短,70min即可获得检测结果。l 通量高、便携检测通量:1-48个,最多可一次性检测46个样本;仪器轻巧,携带方便,移动后无需进行荧光校准,直接检测。l 智能化自动上传数据,无缝接入医院lis、his系统;自动实时监控、判读、出报告。 小结:此次医政医管局提出“提高呼吸道病原核酸检测率”的目标,重点指出:提高呼吸道病原核酸检测率,助力快速明确病因,合理使用抗菌药物,实现呼吸道传染病的早发现、早隔离、早报告和早治疗。结核病作为常见的呼吸道传染病,其早期快速诊断是防控的关键。迪澳恒温核酸检测系统是国家“十二五”重大传染病专项课题成果,因其“安全、准确、快速、便携、联网”,被纳入国家结核病参比实验室的推荐检测方法,已经服务于全国多个省市的结核病防控工作,并在疫情应急防控中也得到了很好的应用,可有效助力提高呼吸道病原核酸检测率。
  • 中国食品科学技术学会发布《葡萄球菌肠毒素测定ELISA试剂盒法(征求意见稿)》
    各有关单位:   根据《中国食品科学技术学会团体标准工作管理办法》等规定,我学会组织起草了《葡萄球菌肠毒素测定 ELISA试剂盒法(征求意见稿)》团体标准。现公开征求意见,请于2023年8月11日前将相关意见反馈学会秘书处。   邮箱:zhanxiaoqingok@163.com    附件:    1.标准文本及编制说明.zip    2.意见反馈表.docx  中国食品科学技术学会   2023年7月10日
  • 20 分钟检测新冠!诺奖得主开发核酸检测新技术,基于 CRISPR 实现快速诊断
    当前,COVID-19 在世界范围内大流行,已造成超过两亿人次的感染和四百多万人次的累计死亡,基于 qRT-PCR(定量逆转录酶-聚合酶链反应)的检测是当前诊断 COVID-19 的金标准。尽管说这种方法具有很高的敏感性,但其操作仍然过于复杂,检测时间长达数小时,无法实现快速的即时检测。因此,开发比 qRT-PCR 更快速、更容易实施的诊断检测策略显得尤为重要。  CRISPR/Cas 系统是用于基因编辑的分子生物学工具,有准确识别和切割特定 DNA 和 RNA 序列的能力。2020 年的诺贝尔化学奖也颁给了 CRISPR 基因编辑技术。随后,多项 CRISPR-Cas9 基因编辑临床实验开启并获得突破性结果,并已成功应用于人类疾病的治疗。  与 Cas9 蛋白不同,Cas13 蛋白特异靶向 RNA 序列,能够在切割靶 RNA 之后仍保持活性,而且可能表现出不加区别的切割活性。这一特性使其不能被用于基因编辑,但对诊断来说却是个独特的优势,例如通过切割降解已标记的核酸来产生荧光信号,具有被应用于核酸检测的潜力。  2021 年 8 月 5 日,加州大学伯克利分校 Jennifer Doudna(2020 年的诺贝尔化学奖得主之一)、David Savage 和 Patrick Hsu 三位科学家领导的研究团队在 Nature Chemical Biology 杂志上在线发表了题为 Accelerated RNA detection using tandem CRISPR nucleases 的文章。  研究人员结合了两种不同的 CRISPR 酶,创造了一种能在一小时内检测到少量病毒 RNA 的方法,这种被称之为快速串联集成核酸酶检测(Fast Integrated Nuclease Detection In Tandem, FIND-IT)的无扩增技术,可以为许多传染病及当前流行的 COVID-19 提供快速且廉价的诊断策略。  主要研究内容  LbuCas13a 结合嗜热栖热菌 Csm6(TtCsm6)可用于快速 RNA 检测  Csm6 是一种 III 型 CRISPR-Cas 系统的 RNA 内切酶,可被激活以切割细胞中的各种 RNA 分子,基于其信号放大的内源性功能,有可能提高 RNA 检测的敏感性。  通过筛选,研究人员发现寡核苷酸 A4-U6 可结合并刺激 TtCsm6 对报告蛋白的切割,并释放出荧光分子。此外,不同浓度的 A4-U6 激活 TtCsm6 后,在 20-30 分钟内出现荧光增长,随后达到一个平台值,最终荧光水平与 Csm6 激活剂的数量成正比。  在荧光已经趋于平稳的 LbuCas13a-TtCsm6 反应中加入 A4-U6 激活剂可以迅速增加 TtCsm6 对靶序列的切割,而添加更多的靶 RNA 或 TtCsm6 则没有影响。这些数据表明 Csm6 的 A4P 配体会随着时间的推移而耗尽,从而使其 RNA 切割活性失活,而这种失活则限制了其产生荧光信号的数量。  Csm6 激活剂的化学修饰  为了解决 Csm6 激活剂失活的难题,他们想到了位点选择性化学修饰的方法,实验结果发现,这种策略不仅可以防止激活 Csm6 的寡核苷酸的降解,同时还能保持 Csm6 的高水平激活状态,使其可以反复切割和释放与 RNA 相关的荧光分子。灵敏度比未修饰的 A4-U6 激活剂提高了 100 倍。  RNA 检测的可编程性  为了使 TtCsm6 及其修饰的激活剂能够用于提高 RNA 检测的灵敏度和检测速度,必须保留用于串联检测的 CRISPR 核酸酶的可编程特性。  为此,他们将 TtCsm6 及其激活剂添加到一个 LbuCas13a 蛋白中,该蛋白具有不同的 crRNA 序列,可以靶向 COVID-19 病原体 SARS-CoV-2 的 RNA 序列。采用不同的 crRNA 序列进行检测,发现其具有相似的灵敏度和动力学,这表明,这种「一步法」可以对不同的 crRNA 序列进行编程,因此可能适用于几乎任何 RNA 序列的检测。  为了确定添加 TtCsm6 是否能加快检测时间,他们在反应 20 分钟后比较了这两种检测策略的结果,发现同时含有 LbuCas13a 和 TtCsm6 的试剂盒在 20 分钟内即可完成对每微升 31 个拷贝的样品检测。  综上这些结果表明,通过优化 LbuCas13a 的 crRNA 和化学修饰的 TtCsm6 激活剂,串联 CRISPR 核酸酶检测能够实现对传染性病原体 RNA 序列的无扩增检测,在加速检测病原体的同时兼具高灵敏度,他们称这种策略为快速串联集成核酸酶检测(Fast Integrated Nuclease Detection In Tandem, FIND-IT)。  集合检测器实现 FIND-IT 即时检测病毒 RNA  最后,为了证明将上述 FIND-IT 纳入即时测试流程的可行性,他们开发了一种便捷检测器,该检测器由一个带有反应室的微流控芯片、一个将反应维持在 37℃ 的加热模块和一个荧光成像系统组成。  将含有靶标 RNA(SARS-CoV-2 RNA)或水(无靶标 RNA)的 LbuCas13a-TtCsm6 加入反应室内,1 小时后发现,当 SARS-CoV-2 RNA 每微升含有 400 拷贝时,反应信号呈非线性增加,1 h 内增加约 4.7 倍 而不含靶 RNA 的阴性对照则出现约 1.7 倍的变化。  此外,与背景对照相比,每微升反应 400 拷贝的荧光量增加了 270%,而两个阴性对照的荧光量则同时增加了 3%。鉴于阳性和阴性样品之间荧光信号的巨大差异,这表明 LbuCas13a-TtCsm6 反应可在一个紧凑的检测器中实现,并可以用于即时诊断检测。  结语  综上所述,在这项研究中,该团队证明了 LbuCas13a 与 TtCsm6 联合可用于快速 RNA 检测,对其激活剂进行化学修饰后可使其敏感性提高约 100 倍。同时,将 TtCsm6 与含有不同 crRNA 的 LbuCas13a 效应体相结合,也可使提取的病毒 RNA 检测低至每微升 31 个拷贝,60 分钟检测准确率更是达到 100%。最后,他们还将这种分析策略应用于集成检测设备,保证了其便捷性。  因此,这种「一键式」检测策略具有高灵敏性和快速的反应能力,未来可广泛应用于检测 SARS-CoV-2 RNA 以及其他病毒或细胞 RNA 序列或环境样本中的植物、真菌或微生物 RNA。  不过,使用 FIND-IT 实现完整的即时检测还需要进一步开发合适的样本收集和处理程序,以及强大的数据分析流程,将来仍需要进行更多人类样本的测试,以验证其在临床样本检测中的稳定性和准确性。  本研究第一作者 Tina Y. Liu 表示:「这种串联核酸酶方法——Cas13 联合 Csm6,在 37℃ 的单一温度下发生反应,并不需要其他诊断技术所需的高温加热,这为更快更简便的测试提供了可能,同时这些测试的灵敏度当前已经可以达到与其他检测技术相当的水平,并且可能在未来做到更加灵敏。」  研究团队在接受采访时说到:「虽然我们确实是为了 COVID-19 而启动了这个项目,但我们认为这种特殊的技术不仅仅适用于此次疫情,因为 CRISPR 是可编程的,因此可以将针对流感病毒、HIV 病毒或任何类型的 RNA 病毒序列整合到 CRISPR 酶中,该系统均可用相同的方式工作。这一研究证明了这种生物化学方法是一种更简单的检测 RNA 的方法,并且快速敏感,这可能被应用于未来的即时诊断中。」
  • 97.8万!南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购
    项目概况南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购(第二批) 采购项目的潜在供应商应在政采云平台(https://www.zcygov.cn/)获取(下载)获取采购文件,并于2021年12月22日 09点30分(北京时间)前提交响应文件。一、项目基本情况项目编号:NNZC2021-J1-991969-YZLZ(采购计划文号:NNZC[2021]7871号-003......具体内容详见附件招标公告项目名称:南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购(第二批)采购方式:竞争性谈判预算金额:97.7921000 万元(人民币)采购需求:预算金额:合计97.7921万元。A 分标 53.3652万元; B 分标 28.9772万元;C 分标15.4497万元;采购需求:A分标:项号采购标的单位数量简要技术需求或者货物要求1单通道病毒核酸检测类试剂盒(国产)(肠道病毒等)盒9具体详见采购文件《第二章 采购需求》2双通道病毒核酸检测类试剂盒(国产)(包括流感病毒、肠道病毒等)盒343新型冠状病毒2019-nCOV核酸定值质控品支354病毒DNA/RNA提取试剂盒(预封装)盒1085无RNase10µl带滤芯长吸头盒106无RNase250µl长吸头(带滤芯)箱870.1ml八连排定量管(带盖)箱28封口袋(透明)包1009封口袋(透明)包10010G1型消毒剂浓度试纸盒101196孔透明PCR板(适用于ABI)箱41296孔PCR板封口膜箱313N95防护口罩只120014VITEK细菌鉴定卡(ANC)盒115VITEK细菌鉴定卡(BCL)盒316API生化鉴定条(链球菌)盒117弯曲菌培养检测试剂(双孔滤膜法)盒418Karmali选择性平板盒419甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板瓶1020Baird-Parker琼脂平板瓶1021PALCAM琼脂基础瓶622PALCAM琼脂冻干配套试剂盒2023CIN-1培养基基础瓶224CIN-1培养基配套试剂盒825改良Y琼脂瓶226含铁牛奶琼脂瓶227甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础MYP瓶428查氏琼脂培养基瓶129改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤基础(MLST)瓶430万古霉素(改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤配套试剂)盒431改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm肉汤)盒232脑心浸萃琼脂培养基瓶133脑-心浸萃液态培养基(BHI)瓶234改良克氏双糖铁琼脂瓶235KF链球菌琼脂培养基瓶236胆汁液态培养基瓶237改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基(mPDA)瓶238PCFA培养基基础瓶239PCFA培养基配套试剂盒440改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基配套试剂盒441葡萄糖肉浸液肉汤瓶142尿素盒343氰化钾对照管(KCN)盒244改良CCD琼脂基础(mCCD)瓶245改良CCD琼脂添加剂盒1046改良Skirrow氏琼脂基础瓶247改良Skirrow琼脂添加剂盒1048L-shaped Cell Spreader(一次性L棒)盒1049152唐菖蒲伯克霍尔德氏菌核酸快速检测试剂盒盒1氯化镁孔雀绿肉汤(MM)瓶609带盖离心管
  • 曾令文:核酸生物传感器在重金属离子检测中的应用
    仪器信息网讯 2015年6月17日,&ldquo 第四届中国食品与农产品质量安全检测技术国际论坛暨展览会&rdquo 在北京国家会议中心开幕。此次会议特别设置了&ldquo 食品与农产品中重金属元素和其他有害物质检测&rdquo 、&ldquo 食品与农产品安全微生物检测&rdquo 、&ldquo 饮用水安全检测&rdquo 等九个专题。大会第二天,来自中国科学院广州生物医药与健康研究院曾令文研究员在&ldquo 食品与农产品中重金属元素和其他有害物质检测&rdquo 专题中做了题为&ldquo 核酸生物传感器在重金属离子检测中的应用&rdquo 的报告。 专题现场 中国科学院广州生物医药与健康研究院 曾令文研究员   在报告中,曾令文首先介绍了重金属污染的危害、污染源和污染特点。他说,随着工农业生产的迅速发展,食品污染问题越来越严重,重金属是最主要的污染物质之一,会通过食物链的富集最终残留在人体内,对人体的组织器官构成了严重威胁。重金属污染源主要有工业污染、农业污染、生活污染和环境事故污染等。具有不可逆转性、生物积累性、难以降解、生物催化以后毒性会转变等特点。   同时曾令文提到,与其他国家相比,我国重金属污染相对比较严重。大气、土壤、水体都存在重金属污染的现象,污染一旦产生,面积会不断扩大。   其次,曾令文在报告中详细介绍了目前重金属的检测方法。据他介绍,传统重金属检测方法主要有光谱法、电化学法和基于显色螯合剂的方法等。光谱法主要包括原子吸收光谱法、原子发射光谱法、原子荧光光谱法和分光光度法等方法。光谱法和电化学法需要借助相关的仪器进行检测,具有灵敏度高、特异性好等优点。但是样品处理繁琐、检测成本和技术要求较高,不利于基层单位使用。而基于显色螯合剂的方法具有简便快速、成本低等优点,但是灵敏度不足、其他离子会干扰检测的特异性。   为了解决传统方法在检测重金属污染中面临的问题,在曾令文的带领下,课题组研制了两种新型生物传感器,基于核酸酶(DNAzyme)的传感器和基于荧光铜纳米颗粒的荧光传感器,并进行了大量实验验证方法的可行性和灵敏度。据他介绍,两种方法具有以下优点:简单、快速、检测成本较低 降低对仪器的依赖,肉眼即可观察结果 适合在基层实验室或野外使用等。   在介绍基于核酸酶(DNAzyme)的传感器在重金属检测中的应用时,曾令文说,该方法在检测重金属离子时主要有两种方法,试纸条法和荧光法。   试纸条法中主要制备了Pb2+和Cu2+特异性的DNAzyme检测试纸条,并进行相关实验进行检验。对于Pb2+来说,该方法检测限可以达到10pM,线性范围为10pM-100nM,特异性非常好,不受其他离子干扰,用湖水做回收率分析实验,结果可达88%-106%。对于Cu2+来说,该方法检测限可以达到10nM,特异性分析实验中,铜离子为0.3&mu M,其他离子为3&mu M。   荧光法中,主要制备了铜离子检测的荧光传感器和基于比色法检测铜离子的传感器,铜离子检测的荧光传感器的灵敏度可达12.8pM,线性范围是20pM-1&mu M,特异性分析实验中,铜离子为1&mu M,其他离子为10&mu M。基于比色法检测铜离子的传感器,灵敏度可达240nM,线性范围是0.4&mu M-100&mu M,特异性分析实验中,铜离子为10&mu M,其他离子为100&mu M。   在介绍基于荧光铜纳米颗粒的荧光传感器在重金属检测中的应用时,曾令文谈道,用该方法检测铅离子,灵敏度为5nM,线性范围为5-100nM,选择性分析实验中,铅离子为0.3&mu M,其他各离子为3&mu M。   最后,曾令文总结了基于核酸酶(DNAzyme)的传感器和基于荧光铜纳米颗粒的荧光传感器在进行重金属检测中的优点,并展望了两种方法在未来重金属检测中的应用前景。   编辑:张葳
  • Nature Medicine盘点2016年生命科学领域8大突破性进展
    (一)基因治疗领域  越来越精准(Keeping it precise)  精准的基因编辑使得我们对一系列难治性且容易产生抗性的疾病进行治疗,来自哈佛医学院研究人员的研究(Nature 528, 490-495,2016)开发出一个新版本的Cas9酶或能够强有力的解决困扰CRISPR/Cas9系统的障碍,使脱靶效应降低到无法检测的水平,让我们离高度特异性的核酸酶更近了一步。  酿脓链球菌Cas9酶(SpCas9)可以和短链向导RNA(sgRNAs)一起进行基因组编辑,后者通过与靶标互补配对从而引导核酸酶结合DNA。由于sgRNAs不具有特异性,因此可能切割与靶序列相似的DNA序列,从而造成脱靶效应。这项研究中,研究人员认为非特异性剪切可能是由于核酸酶与非特异性DNA序列结合紧密导致,因此他们合成了一种与非特异性序列结合力更弱的突变核酸酶(SpCas9-HF1),在人体细胞实验中他们发现这个核酸酶可以将超过85%的靶序列切割,但是却检测不到非特异性切割。  这种方法或使得基因编辑能够进行更安全的治疗,也为研究人员提供了一种优化核酸酶的策略。  (二)免疫疗法领域  合乎常理的生物制品(Logical biologicals)  T细胞在一些临床试验中展现出了惊人的潜力,例如:通过基因工程编辑T细胞内源性受体或者添加外源性嵌合抗原受体(CAR),使之可以识别癌细胞表面的抗原,但由于这些抗原大多数也会在正常细胞中表达,因此这种疗法经常带来严重副作用。  今年Wendell Lim实验室报道了一种有可能改善CAR治疗的方法,这种方法依赖于一种进化上的传统信号通路,在这条信号通路中,Notch受体与细胞外信号一起控制基因转录,从而控制细胞行为。  利用这个特点,研究人员建立了一种新的调控机制:T细胞先通过一种合成的Notch受体(SynNotch)识别癌细胞的一种抗原,以此激活对另一种肿瘤抗原特异性的CARs的转录翻译(Cell 164, 780-791, 2016 Cell 164, 770-779, 2016)。这种组合可以限制T细胞杀伤只表达这两种抗原的细胞。因此这种方法可以提高选择性、更好控制以减小治疗时产生的副作用。在荷瘤小鼠身上,SynNotch T细胞特异性地清除了同时表达两种抗原的细胞,而对只表达一种抗原的细胞无影响。  在相同课题组随后的一篇文章中,他们表明SynNotch T细胞可以分化为需要的各种效应细胞或者选择性产生细胞毒性分子、抗体、细胞因子及佐剂,同时这些反应仅仅需要通过合成的通路就可以控制,与内源性的T细胞信号通路无关。  事实上,SynNotch T细胞可以用于对抗病毒感染、过度活化或其他功能紊乱的细胞,这大大拓宽了它的应用领域,但是还需要优化进而将之转化为临床应用。  (三)传染病领域  设计HIV抗体(Blueprints for HIV antibodies)  全世界有超过3600万的HIV感染患者,2015年新发感染病例超过200万,因此开发可以预防HIV感染的疫苗是全球公共卫生的首要目标。但是由于HIV病毒可以很快躲过免疫系统的监视,因此传统的疫苗对之无效。  近年来,从部分感染患者身上找到可以中和一系列HIV病毒的广谱性中和抗体(bNAbs)促使研究人员尝试通过人工抗原去产生这种抗体。但是,由于这些bNAbs的前体蛋白并不与HIV结合,这个过程就变得异常复杂。  采用一种工程化手段,Amelia Escolano及其同事发现通过不断修饰针对HIV包膜蛋白(Env)的抗原,并逐步免疫小鼠,这些小鼠成功产生了针对难中和二级抗体的HIV特异性bNAbs(Cell 166, 1445-1458, 2016),而反复注射针对Env的单一抗原则不会产生bNAbs。  尽管一些HIV阳性的感染者激发了HIV bNAbs,但是这项研究是人类首次采用免疫的方法成功产生HIV bNAbs。尽管这种方法太复杂以至于很难直接进行临床转化,但是它为合成HIV人工抗原并通过特殊方法激发HIV抗体带来了曙光。  (四)癌症领域  1)致命的逃逸(A deadly escape)  在癌症转移的过程中,癌细胞必须先突破血管周围的内皮细胞障碍,从而进入循环系统并到达新的组织。  而一项新研究表明:癌细胞可以通过诱导内皮细胞死亡而通过血管壁进入血管(Nature 536,215-218,2016)。  来自马克斯-普朗克心肺研究所(Max Planck Institute for Heart and Lung Research)的研究人员首次发现:癌细胞与内皮细胞共培养时会通过癌细胞表面的淀粉样前体蛋白激活内皮细胞表面的死亡受体6(DR6),从而诱导内皮细胞死亡。这个效应对小鼠体内肿瘤转移至关重要:抑制癌细胞诱导的内皮细胞死亡可以抑制血管中的癌细胞在肺部形成转移灶。  当然,该研究还需要进一步深入以阐明:内皮细胞死亡如何促进癌细胞穿过血管以及整个过程如何促进人体内肿瘤转移。  2)突变受体(Going after receptor mutants)  内皮生长因子受体(EGFR)突变的非小细胞肺癌病人往往因此受益,但是这些受体往往又会再次突变导致肿瘤产生抗药性。  抗表皮生长因子受体(EGFR)耐药性突变肺癌的新型异位抑制剂(第四代新药)EAI045的研发成功,是国际上第一个可以克服T790M/C797S耐药突变的抑制剂,具有广谱的EGFR抑制效果。  这个由美国科学家和工业界合作发现的变构EGFR抑制剂对一系列EGFR突变型都具有较强的抑制效果(Nature 534, 129-132, 2016)。  通过对250万个化合物的筛选,研究人员发现了这个特别的抑制剂,它可以结合突变受体的一个变构点,使受体保持一种失活的构象,同时不影响它结合ATP的功能,也不会影响正常EGFR受体的功能。与西妥昔单抗(cetuximab)联合使用时,这个抑制剂可以让耐受目前所有疗法的肿瘤缩小。  (五)再生医学领域  细胞介导修复晶状体(A lens on cell-mediated repair)  使用内源性干细胞(endogenous stem cells)进行组织修复是再生医学的一个主要目标,这可有效避免免疫排斥及外源性干细胞引入导致的肿瘤形成。  眼部疾病修复就是再生医学的一个重要领域,由于此前已经发现了晶状体内皮前体细胞(LECs),而促进LECs的增生是治疗白内障的有效方法。  一项由中美科学家合作完成的新研究(Nature 531,323-328,2016)找到了一种新的侵入程度低的手术方法,未来有可能用于治疗先天性白内障的婴儿,同时并发症发生概率极低。研究人员通过在晶状体边缘以远小于此前的创口在健康兔子和猕猴眼内进行了手术,这在最大程度上保留了LEC,并保持了晶状体的自然恢复时间。  这种方法如果成功转化到临床,将显着降低术后并发症及再次手术的概率。  目前通过在12例儿童白内障患者身上进行实验,他们发现这项技术可以和常规手术一样提高视力,但是并发症发生率由常规的92%降低到了17%。  不过由于年龄相关的白内障患者体内LECs数量降低,这个方法是否对老年白内障也有效还需要进一步验证。  (六)自身免疫疾病领域  迈向抗原特异性治疗(Toward antigen-specific therapy)  尽管被批准的自身免疫疾病治疗药物非常少,但两项最新研究提供了一种概念性的自身免疫病治疗新方法:通过特殊手段特异性清除攻击病人自身组织的淋巴细胞而不影响免疫系统的其它部分。  慢性天疱疮是一种由于抗体结合皮肤蛋白桥粒芯蛋白3(Dsg3)导致的罕见起疱疾病,受到肿瘤免疫治疗的启发,来自宾夕法尼亚大学的研究人员(Science 353,179-184,2016)设计了一种工程化T淋巴细胞(将嵌合抗原受体更换为了Dsg3),可特异性攻击产生自身抗体的B淋巴细胞,从而抑制了自身抗体的产生。  而来自加拿大的卡尔加里大学(University of Calgary)研究人员(Nature 530,434-440,2016)采用了另一种方法,他们通过增强调节性T细胞的功能来治疗疾病,而非杀死B细胞。  他们通过在纳米颗粒上修饰抗原肽-主要组织相容性复合物(MHC),可以促使T细胞转变为调节性T细胞,系统注射这样的纳米颗粒后,1型糖尿病小鼠体内产生了大量的调节性T细胞,从而维持了血糖的正常水平。  据悉,一旦临床试验成功,这种Navacims纳米候选药物或有望帮助治疗类风湿性关节炎、多发性硬化症等一系列疾病。  (七)神经生物学领域  解析突触的剪切(Parsing synaptic pruning)  经典的补体级联放大信号通路已经被证明会影响中枢神经系统中神经回路的发育和重塑,但是否补体系统也会促进神经疾病发生还不清楚。而今年发表的3项研究则揭示了补体介导的突出清除对神经精神病学疾病及神经退行性疾病的影响。  Broad研究所的Stanley精神中心、哈佛医学院和波士顿儿童医院的研究人员根据近6万5千人的遗传分析,揭示了如果一个人继承的“突触修剪”相关的基因(消除神经元之间的连接),他们的精神分裂症的风险会增加。研究人员发现:补体4基因(C4)突变导致的结构变化与精神分裂症相关(Nature 530,177-183,2016),其中精神分裂症患者脑部C4A的含量升高,C4存在于神经元中的突触部位,而清除C4则会降低突出剪切的比例。这表明引起C4表达上调的基因突变也许导致了过量的突触剪切,从而导致了精神分裂症。  第二项研究是由Stanley Center的研究人员发现:补体信号和吞噬性小神经胶质细胞与阿尔兹海默症早期的突触缺失相关(Science 352,712-716,2016),他们发现补体C1q的上调会激活吞噬性小神经胶质细胞,最终导致突触被清除。  第三项来自加尼福利亚大学旧金山分校的研究(Cell 165, 921–935, 2016)表明在神经退行性疾病额颞叶痴呆小鼠模型中,C1qa会促进小神经胶质细胞依赖的突触清除。  这些研究共同表明了补体介导的突触清除在一系列神经退行性疾病及精神紊乱中发挥重要作用。
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