软骨素二糖二

软骨素为白色或者淡黄色的非晶型粉末，是市面上常见的减轻关节软骨退化导致的相关疾病的补品。软骨素中含有亚氨基，其他成分中（比如氨基葡萄糖）中也含有氮元素，因此其氮含量可作为软骨素纯度与成分的参考。可做本实验参照《GB5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》使用凯氏定氮法对软骨素粉末中的氮含量进行测定。

软骨素分子量一般为2-5万，白色粉末，具有较强吸水性、易溶于水并成为粘稠溶液，不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂。其化学组成是D-葡萄糖醛酸和乙酰氨基已糖(葡萄糖和半乳糖)通过1,3-b--苷键相连结的高聚物。用途：硫酸软骨素，是一种酸性粘多糖，为临床较常用的药物，用于某些神经性头痛、神经痛、关节痛、偏头痛、动脉硬化症等 也可用于链霉素引起的听觉障碍及肝炎等的辅助治。为了检测软骨素中的铅元素含量，我们选择微波消解对其进行前处理，后续采用石墨炉原子吸收光谱法检测其中的铅含量。

软骨素分子量一般为2-5万，白色粉末，具有较强吸水性、易溶于水并成为粘稠溶液，不溶于乙醇、乙醚、丙酮等有机溶剂。其化学组成是D-葡萄糖醛酸和乙酰氨基已糖(葡萄糖和半乳糖)通过1,3-b--苷键相连结的高聚物。用途：硫酸软骨素，是一种酸性粘多糖，为临床较常用的药物，用于某些神经性头痛、神经痛、关节痛、偏头痛、动脉硬化症等 也可用于链霉素引起的听觉障碍及肝炎等的辅助治。为了检测软骨素中的铅元素含量，我们选择微波消解对其进行前处理，后续采用石墨炉原子吸收光谱法检测其中的铅含量。

软骨素是一种药物，比如最常见的硫酸软骨素，它也是一种常规的保健品，其有营养软骨、减轻关节退变的作用。针对部分中老年骨性关节炎、骨刺的患者来说，长期口服软骨素可以达到减轻关节炎、缓解软骨退变、延缓衰老的作用。为了检测软骨素中的铅元素含量,本实验选择微波消解对其进行前处理，后用石墨炉原子吸收光谱法检测其中的铅元素含量。

硫酸软骨素的排阻色谱分析关键词：硫酸软骨素，SEC，RI检测器，GPC计算程序

利用 正十六烷基氯化吡啶（N-cetylpyridinium chloride）溶液，借助于光度指示，可以测定硫酸软骨素的含量。

采用纳谱分析ChromCore SAX-Chs色谱柱对硫酸软骨素钠进行分离和检测，各峰具有良好的峰形和分离度，该方法操作简单，灵敏度高，重复性好，符合药典要求，可用于硫酸软骨素钠的测定，为该药物的质量保证提供检测依据。

肝素是高度硫酸化的糖胺聚糖，含0-0 个二糖单位不等。自从 年肝素在临床上用作抗凝剂以来，肝素一直是一种主要的抗凝药物。肝素钠中含有杂质主要有硫酸皮肤素、多硫酸软骨素等，目前中国药典、美国药典和欧洲药典均对杂质的限量做出了规定。离子色谱可分别测定肝素钠中的多硫酸软骨素、硫酸皮肤素含量，及水解后的半乳糖胺含量。图-及其分析条件即为00中国药典及美国药典中肝素钠含量测定方法。

本文参考《GB 5009.198-2016 食品安全国家标准 贝类中失忆性贝类毒素的测定 液相色谱-串联质谱法》，使用岛津LCMS-8045三重四极杆液质联用仪，建立了扇贝中软骨藻酸的分析方法。扇贝肉搅碎后以50%甲醇溶液提取，强阴离子固相萃取柱净化后，以0.22 μ m滤膜过滤后进样分析。以保留时间和离子对相对丰度比为定性依据，空白样品处理后，加标制作外标法校准曲线，来定量检测软骨藻酸含量。结果表明：软骨藻酸在样品中的定量限低于0.01 μ g/g，满足标准要求；空白样品处理后添加软骨藻酸，在2.5-1000 ng/mL的线性范围内，加标曲线各标点浓度准确度分别在90.5-113.2%之间，R为0.9991；Carryover考察结果表明ULOQ加标样品进样后无明显系统残留；空白样品添加不同浓度软骨藻酸后进行处理，检测结果满足标准关于定性和定量结果的要求，回收率在89.4-106.6%之间。该方法灵敏度和准确度高，适合贝类中的软骨藻酸检测。

0 . 05 ) 。标记后的软骨细胞显示环状红色荧光 ,胞核未着色 。 体外培养和体内培养的软骨细胞 - 支架复合物 , 均可在荧光显微镜下观察到红色荧光表达 。结论 : D i I 荧光染料能够有效标记软骨细胞 ,标记的细胞 - 支架复合物可直接在荧光显微镜下进行观察 ,可作为体外和体内构建组织工程软骨的较好的示踪方法 。

肝素钠的离子色谱法鉴别（本方法符合2010版中国药典1以及美国药典方法2）肝素钠中多硫酸软骨素的测定是这次2010年中国药典中新增的肝素钠测定的内容，主要针对肝素钠以及肝素钠注射液中多硫酸软骨素的鉴别以及含量确定，同时该方法也与美国药典方法相似：

人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)检测试剂盒人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)抗原、生物素化的人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗软骨抗体(anti-cartilage-Ab)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

肝素钠中多硫酸软骨素的测定是这次2010年中国药典中新增的肝素钠测定的内容，主要针对肝素钠以及肝素钠注射液中多硫酸软骨素的鉴别以及含量确定，同时该方法也与美国药典方法相似：

采用本方法可以方便、快捷、准确检测达替肝素钠中的硫酸盐，操作较为简单，方法重现性较好，结果可靠。本实验所使用的色谱柱AS11同时可用于肝素钠其它检测项目如多硫酸软骨素等项目的检测。

南方医科大学2012级硕士学位论文不同强度跑台运动对大鼠软骨下骨结构及成分影晌的研究

人的软骨组织一旦损伤，会因为缺少血管和神经等组成而不具有再生能力。研究表明，MSC来源的外泌体能够传递活性物质到受体细胞，促进软骨修复与再生。研究人员经进一步研究发现，人脐带MSC来源的外泌体能够促进软骨细胞和骨髓干细胞的迁移、增殖和分化，进而实现软骨损伤的修复与再生，而在其中发挥关键作用的是外泌体中所包含的miRNA—miR-23a-3p，它能抑制PTEN水平，提升AKT表达。

通过构建马鹿鹿茸角软骨组织全长cDNA 文库，并进而从文库中克隆分离 IGF2 基因进行生物信息学分析。构建目标材料高质量全长cDNA 文库是本试验的关键。

与传统的2D 细胞培养技术相比，3D 细胞球体提供了更多的仿生微环境， 在许多组织工程应用中已被证明是有价值的。尽管3D 细胞培养具有受益 效应，但目前球体形成方法的可扩展性有限，对球体组织工程的临床翻译 提出了挑战。虽然最近采用的液滴微流体可以提供一个连续的生产过程， 但使用油和表面活性剂，通常低通量，以及额外的生物制造步骤的要求阻 碍了球体培养的临床翻译。在这里，使用清洁(例如，无油和无表面活性 剂) ，超高通量(例如，8.5 mL min-1,10000个球体 s-1) ，单步空气微流控 生物制造球体形成区室化水凝胶。这种新技术可以可靠地生产一维纤维， 二维平面和三维体积划分的水凝胶构造，其中每一个都允许空心球形成隔 室的明显(一)各向同性取向。在喷墨生物打印分区水凝胶中产生的球体在 成软骨行为方面优于2D 细胞培养物。此外，细胞球体可以从划分的水凝 胶中获得，并用于以自下而上的方式构建形状稳定的厘米大小的无生物材 料的活组织。因此，预计在空气中微流体生产的球形分区水凝胶可以促进 生产和使用的细胞球体的各种生物医学应用。

氨基葡萄糖的全称是D-氨基葡萄糖，是单糖成份，可以刺激软骨细胞产生正常多聚体结构的蛋白多糖，提高软骨细胞的修复能力，抑制损伤软骨的酶，促进软骨基质的修复和重建[1-3]。目前，商品化的氨糖主要有3种：盐酸氨基葡萄糖、硫酸氨基葡萄糖、硫酸氨基葡萄糖复盐。临床上主要用于治疗和预防全身各种关节的骨性关节炎，可缓解和消除骨性关节炎的疼痛、肿胀等症状，改善关节活动功能，提高关节和机体的免疫力，因此，被誉为关节腔内的“清道夫”。 其治疗骨关节炎的主要成分是氨基葡萄糖，通过检测Cl-和SO42-的含量可以判断生产过程中是否添加了其他物质，过量的添加物会对身体产生副作用。因此，我们有必要对其中的非主要成分氯离子和硫酸根离子 进行质量控制。 本文建立了离子色谱法测定氨基葡萄糖中氯离子和硫酸根离子，方法简便、快捷、准确。

氨基葡萄糖的全称是D-氨基葡萄糖，是单糖成份，可以刺激软骨细胞产生正常多聚体结构的蛋白多糖，提高软骨细胞的修复能力，抑制损伤软骨的酶，促进软骨基质的修复和重建[1-3]。目前，商品化的氨糖主要有3种：盐酸氨基葡萄糖、硫酸氨基葡萄糖、硫酸氨基葡萄糖复盐。临床上主要用于治疗和预防全身各种关节的骨性关节炎，可缓解和消除骨性关节炎的疼痛、肿胀等症状，改善关节活动功能，提高关节和机体的免疫力，因此，被誉为关节腔内的“清道夫”。 其治疗骨关节炎的主要成分是氨基葡萄糖，通过检测Cl-和SO42-的含量可以判断生产过程中是否添加了其他物质，过量的添加物会对身体产生副作用。因此，我们有必要对其中的非主要成分氯离子和硫酸根离子 进行质量控制。 本文建立了离子色谱法测定氨基葡萄糖中氯离子和硫酸根离子，方法简便、快捷、准确。

氨基葡萄糖是关节软骨中蛋白多糖的组成成分，具有改善骨关节炎症状，促进关节软骨代谢等作用，对于修复关节软骨十分有效。常用的氨基葡萄糖类药品有硫酸氨基葡萄糖、盐酸氨基葡萄糖、N-乙酰氨基葡萄糖以及它们与其它组分的复合物。离子色谱法配合脉冲安培检测器提供了测定此类药物的高分离度和高灵敏度解决方案，常见可能共存的蔗糖和乳糖不干扰测定。图-为氨基葡萄糖与葡萄糖、蔗糖、乳糖等的分离谱图。

焦糖色素亦称“焦糖”，是一种天然着色剂。焦糖色素是以蔗糖、木糖母液等为原料，采用亚硫酸铵法、氨法制成的天然人造色素，广泛应用于食品、医药、调味品、饮料等行业。由于食品中的二氧化硫对人体危害很大，如果食用的二氧化硫超标，过量的二氧化硫容易使人产生恶心、呕吐等胃肠道反应，此外，还可影响钙吸收，促进机体钙流失。为了我们的健康，测试食品中的二氧化硫含量是很有意义的。本文采用二氧化硫残留量测定仪检测焦糖中二氧化硫的含量，操作步骤简单，节省了大量蒸馏时间，提高了工作效率。

多维类软糖是一种柔软、有弹性和韧性的功能性糖果，以明胶、糖浆等原料为主，因含丰富的维生素，满足儿童健康成长需求，深受家长和孩子们的喜爱。在糖品的制作过程中，硫磺作为加工助剂产生二氧化硫可用于澄清和脱色，制糖原料及其他加工助剂中含有硫也是导致糖品中存在二氧化硫残留的原因。由于食品中的二氧化硫对人体危害很大，如果食用的二氧化硫超标，过量的二氧化硫容易使人产生恶心、呕吐等胃肠道反应，此外，还可影响钙吸收，促进机体钙流失。为了我们的健康，测试食品中的二氧化硫含量是很有意义的。本文采用二氧化硫残留量测定仪检测多维类软糖的二氧化硫的含量，操作步骤简单，节省了大量蒸馏时间，提高了工作效率。

氨基葡萄糖盐酸盐是由天然的甲壳质提取的，是一种海洋生物制剂，能促进人体粘多糖的合成，提高关节滑液的粘性，能改善关节软骨的代谢。本实验通过旋光法对氨基葡萄糖盐酸盐的标准品（纯度100%）来建立标准曲线，进而来测定氨基葡萄糖盐酸盐试样的含量。

本文利用岛津GCMS-QP2020 NX气质联用仪，建立了止咳糖浆多元醇类药用辅料中乙二醇、二甘醇类物质含量的检测方法。在5.0 ~ 100 μg/mL浓度范围内，各化合物标准曲线相关系数均大于0.999，线性关系良好，取浓度为5.0 μg/mL标准品溶液连续进样6针，各化合物峰面积RSD小于3.56%。对止咳糖浆基质进行了低、中、高（5.0、20和40 mg/kg）三水平的加标回收实验，回收率分布在87.27-107.72%之间。该方法操作简单，可用于止咳糖浆中乙二醇、二甘醇类物质含量测定。

本文利用岛津Nexis GC-2030气相色谱仪，建立了麦芽糖醇中乙二醇和二甘醇含量的检测方法。本方法采用外标法定量，在5.0-200 μg/mL浓度范围内，乙二醇和二甘醇线性相关系数R均大于0.999，线性关系良好。取浓度为5.0 µg/mL对照品溶液连续进样6针，乙二醇峰面积RSD%为2.59、二甘醇峰面积RSD%为2.56。加标实验中，低、中、高三个加标浓度为15、50和100 μg/g，乙二醇回收率在82.0%~96.7%之间、二甘醇回收率在93.7%~103.8%之间。该方法操作简单，结果准确，分析时间短，可用于麦芽糖醇中乙二醇和二甘醇含量检测。

硫酸氨基葡萄糖，为天然的氨基单糖，是人体关节软骨基质中合成蛋白聚糖所必需的重要成分。用于预防和治疗各种类型的骨性关节炎，如膝关节、髋关节、脊柱、肩、手、手腕和踝关节等部位的及全身性的骨性关节炎。本方法采用电位滴定的方法测定硫酸氨基葡萄糖含量，重复性良好、突跃明显，能够准确地测出其含量，药品质量检测提供参考依据。

木二糖与其他杂质峰分离度好，保留时间稳定，不受基质干扰；PMP 法在 0.002~1.0 mg/mL 内线性相关系数为 0.9992，2-AB 衍生- 荧光检测法在 0.002~2.0 μ g/mL 内线性相关系数为 0.9999，2-AB 衍生-紫外检测法在 5~200μ g/mL 内线性相关系数为 0.9998。以 S/N=3 为检测限，S/N=10 为定量限，测定木二糖的检测限和定量限，检测限为 0.4 ng/mL，定量限为 1.0 ng/mL，满足了低浓度定量检测需求。

骨形态发生蛋白质（BMP），指从脊椎动物骨骼基质 中分离提纯的蛋白质。具有内肽酶（含锌离子）活 性、表皮生长因子模体，同源二聚体之间以二硫键相 连，属于转化生长因子-β 家族，能诱导骨与软骨形成。 本试验采用AKF-IS2020C卡氏加热进样测定骨蛋白中的水分含量。

骨形态发生蛋白质（BMP），指从脊椎动物骨骼基质中分离提纯的蛋白质。具有内肽酶（含锌离子）活性、表皮生长因子模体，同源二聚体之间以二硫键相连，属于转化生长因子-β 家族，能诱导骨与软骨形成。本试验采用AKF-3N卡氏加热进样测定骨蛋白中的水分含量。