硫酸妥布霉素

【中文名称】硫酸多粘霉素E；硫酸抗敌素；硫酸粘菌素；硫酸粘杆霉素【英文名称】colistin sulfate;colimycin;polymyxine Multimycine【结构或分子式】 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203161918_355269_1855403_3.jpg【毒性LD50(mg/kg)】 饲料添加时常用粗制品，它对大鼠和小鼠的口服LD50均大于12g/kg。【性状】 白色粉末，有吸湿性。【溶解情况】 易溶于水。【用途】 硫酸多粘菌素E对革兰氏阴性菌有强大的抑菌作用。它可治疗志贺氏痢疾杆菌、大肠杆菌、绿浓杆菌、沙门氏杆菌和普通变形杆菌引起的感染。在动物体内不会产生耐药菌株，与其他抗生素不产生交叉耐药。一般都制成预混剂使用。【制备或来源】 本品系1950年小山康夫在日本福岛县分离出的多粘芽孢杆菌变种粘菌素(Bacilluspolmyxa var. cotistinus)，在其培养液中提取的多粘菌素E，通常制成硫酸盐使用，它是由A、B、C三组分组成的。【生产单位】略

检测对象：硫酸新霉素，结构式如下[align=left][img=,319,223]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712191628_6456_3237657_3.jpg!w319x223.jpg[/img]检测方法：UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS检测样品：生物组织（肌肉、皮脂、肝脏和肾脏）提取液：10mM的磷酸二氢钾溶液（1mL）+10%三氯乙酸（含0.4mM的EDTA）（5mL）上样液：过固相萃取柱的样品溶液 [b]遇到的问题：[/b]1、文献报道这个药物的PKa=8.8，如果在水溶液中要将该药物调成非离子状态，pH该怎么调？2、用水溶解硫酸新霉素对照品，并稀释成500ppb，过HLB萃取柱，回收率达90%以上；将标准品+提取液混合后，过HLB萃取柱，不调pH时回收率能达90%以上，但按文献报道的调pH6.0~8.0，回收率只有20%左右。将标准品加入至空白组织，混匀后再加相同的提取液，不调pH过HLB萃取柱，回收率在20%多，但上样液调pH至6.0后回收率能达到50%左右。完全相反的两种状态，这是什么原因？3、将标准品加入至空白组织，混匀后再加提取液，上样液调pH至6.0，过HLB萃取柱，回收率达50%。将空白组织加相同体积的提取液，上样液调pH至6.0，再加标准溶液混合，过HLB萃取柱，回收率只有8%左右。这个结果能说明什么问题？HLB不合适吗？还是上样液的pH调的不合适？4、将标准品加入至空白组织，混匀后再加提取液，上样液调系列pH（从2.0-10.0），不同pH值的上样液过HLB萃取柱，比较回收率差异，结果显示数值几乎没有变化。上样液的pH值不影响药物在HLB上的回收？5、大多数文献报道，这个药物用WCX或者MCX萃取柱净化，但实验结果表明，我用的Waters Oasis 的HLB跟MCX的提取回收率几乎一致，都在50%左右。用WCX提取效果更差。不知道原因何在，请赐教！谢谢！[/align]

博来霉素(bleomycin)是由10余种组分组成的混合物, 根据纸色谱Rf值不同分为A、B两族,目前临床使用的博来霉素主要成分为博来霉素A2,和博来霉素B2,USP29中规定:按峰面积归一法A2的含量应在55%到70%之间,B2的含量应在25%到32%之间,B4的含量不超过1%,A2和B2的联合百分含量不少于90%.现在我们公司从东北一家企业购买了一批货,但是厂家出示的色谱图中A2的峰为两个,如下所示(使用的为USP29标准方法)结果国外客户提出质疑:说以前他们购入的博来霉素A2色谱图上均为一个峰,这次A2为两个峰(他们自己用HPLC测定的结果也是两个峰),希望我们拿出证据证明这两个峰均为A2.我们打电话给厂家,厂家只说明这两个峰肯定都是A2,分子量都是一样的,但是拿不出质谱图等证明.现在我们猜测这张图上的两个峰可能是同分异构体(如果不是两种物质的话),想做一个[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]来证明我们的推断.请教各位大侠,这样的思路是否可行?是否有更好的办法证明这两个峰均为A2呢?[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/02/200902050001_131324_1645124_3.jpg[/img]

[b]问题：[b][b][/b]鱼肉中妥布霉素的测定使用的色谱柱货号是？[/b]答案：99506=======================================================================【活动内容】1、每个工作日上午10：00左右发布一个关于应用数据库的应用问答题，版友根据题目给出自己理解的答案。2、每个工作日下午15：10公布参考答案。【活动奖励】幸运奖：抽奖软件，当天随机抽取3个或5个回答正确的版友ID号（最后一个ID号，截止至下午15：00），每人奖励[color=#ff0000]2钻石币[/color]（抽奖人数≤10，抽取3个版友；抽奖人数＞10，抽取5个版友）；中奖名单：lijing320323(注册ID：lijing320323）荷花仙子（注册ID：v2975525）sixingxing（注册ID：v2889187）dahua1981（注册ID：dahua1981）yy_0324（注册ID：yy_0324）[img=,690,388]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807311501507981_2026_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img][img=,690,388]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807311501485160_4408_1610895_3.png!w690x388.jpg[/img]积分奖励：所有回答正确的版友奖励[color=#ff0000]10个积分[/color]（幸运奖获得者除外）。【注意事项】同样的答案，每人只能发一次[/b][align=left][color=#ff0000][b]PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=left][color=#ff0000][b] 下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。[/b][/color][/align][align=center]=======================================================================[/align]方法：SPE-UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法基质：鱼肉应用编号：102404化合物：妥布霉素SPE柱：[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-2279.html]ProElut PXC 60mg / 3mL 50/pk[/url]色谱柱：[url=http://www.dikma.com.cn/product/details-850.html]Platisil CN 5μm 150 x 4.6mm[/url]样品前处理：[b]1.标准品配制[/b](1)单标储备液1000 ug/mL，准确称取妥布霉素，用水配制成1000 ug/mL的储备液。(2)中间液10.0 ug/mL，吸取适量单标储备液1000 ug/mL，用水配制成10 ug/mL的中间液。[b]2.提取[/b](1) 称取样品（鱼肉）5.0g（精确至0.05g），置于50mL离心管中。加入20 mL三氯乙酸水（25 g/L）和2 mL二氯甲烷，涡旋分散，振荡5 min，8000 r/min离心2min，收集上清液；(2) 在上清液中加入5mL乙腈混匀，8000 r/min离心2min，待净化（离心为了去除乙腈水溶解时产生的气泡）。[b]3.净化[/b]ProElut PXC 60mg/3mL（Cat.#68203）[table][tr][td](1)活 化：[/td][td]依次加入3mL甲醇，3 mL水，流出液弃去；[/td][/tr][tr][td](2)上 样：[/td][td]将上样液加入柱中，流出液弃去；[/td][/tr][tr][td](3)淋 洗：(4)洗 脱：[/td][td]依次用5mL水、3 mL甲醇淋洗，流出液弃去；3 mL20%氨水甲醇洗脱，收集洗脱液；[/td][/tr][tr][td](5)定 容：[/td][td]将洗脱液在40℃水浴下通入氮气吹至0.2mL，然后用流动相重新定容至0.5 mL，上机分析。[/td][/tr][/table]同方法制备基质匹配标准溶液。色谱条件：[b]UPLC 条件：[/b]色谱柱：Platisil CN，150×4.6 mm，5 μm 流 速：0.5 mL/min 进样量：5 μL 柱 温：35 ℃流动相： A：3%甲酸水 B：3%甲酸乙腈 A：B=9:1[b]质谱条件：[/b]电离模式：ESI 扫描方式：正离子扫描检测方式：多反应监测 电喷雾电压：5500 V雾化气压力：60 psi 辅助气压力：60 psi气帘气压力：25 psi 离子源温度：550 ℃[img]http://www.dikma.com.cn/UploadImage/edit/images/3(10).png[/img]文章出处：天津应用实验室关键字：鱼肉、妥布霉素、SPE-UP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS法、ProElut PXC、Platisil CN摘要：目前有关妥布霉素检测的文献和标准较少，主要参考标准《GB/T 21323-2007 动物组织中氨基糖苷类药物残留量的测定 高效液相色谱-质谱质谱法》；高效液相色谱-串联质谱(HP[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS)具有高灵敏度和高特异性，适用于基质复杂、样品组分含量很低的兽药残留的确证分析。 迪马科技开发的《鱼肉中妥布霉素的检测》，采用三氯乙酸水提取、ProElut PXC固相萃取柱净化和超高效液相色谱-质谱法检测。本方案具有：前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；定量限是20 μg /kg，与国标方法一致；用氰基柱进行分析，峰形和保留时间符合要求；过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低；图谱：[img]http://www.dikma.com.cn/UploadImage/edit/images/2(24).png[/img][img]http://www.dikma.com.cn/UploadImage/edit/images/1(43).png[/img]