弗氏完全佐剂

关于动物免疫，在多抗制备一部分里有一些讲解（点击这里查看），这里只简要讲述一下单抗制备中需要注意的几个问题。在概述部份已经讨论过，用来制备单抗的动物主要有小鼠、大鼠和兔，由于小鼠易饲养、小鼠单抗技术成熟、路线简单，因此是制备单抗使用的主流动物，这里主要以小鼠单抗制备展开讲述。免疫途径和周期：单抗制备中，免疫动物的方式一般第一针采用皮下免疫，后面的加强免疫采用腹腔免疫、腘内免疫、皮下免疫或者脾内直接免疫。首次免疫和加强免疫结束后，在融合前三天一般还要进行一次冲击免疫，以增加脾脏内浆细胞的数量。下面这张表列出了常见的免疫途径和周期：http://img.dxycdn.com/trademd/upload/userfiles/image/2013/11/A1384840870png_small.jpg 说明：FCA，弗氏完全佐剂；FIA，弗氏不完全佐剂；Quickantibody，北京康碧泉公司研制的佐剂。上表中第四种免疫方法产生的抗体大部份都为IgM，存在亲和力弱等缺点，慎用。关于操作的问题，这里只作一下简单的介绍，具体如何进行，需要在有相关经验的实验员指导下进行，也可以在网上找到相关视频进行学习。（1）皮下注射。皮下注射的操作有点像给人接种疫苗，即挑取动物的皮肤，将混好佐剂的抗原直接注射。一般皮下注射每个注射点注射30-50ul左右混有佐剂的抗原，每只小鼠注射6-8个点为宜。（有的资料上称这种方法为皮内免疫，造成这种概念上的混淆可能是由于早期工作者们的翻译过程出了问题），皮下操作一般由两人进行，一个协助固定小鼠，另一个进行免疫操作。（2）腹腔注射。腹腔注射比较简单，只需要一人操作，操作者由左手抓住小鼠尾巴和颈部皮肤，将小鼠翻转过来，腹部向上，将抗原直接注射到腹腔。如果抗原混有弗氏佐剂，建议注射在左侧腹腔，如果采用右侧腹腔注射，则在免疫过程中，很容易导致小鼠脾脏与腹膜粘连的情况，造成后期取出脾脏麻烦。（3）尾静脉注射。个人觉得尾静脉注射是技术要求最高的一种注射方式，操作者需要固定小鼠，然后将抗原注射到小鼠尾部静脉（正中间那根血管）。小鼠尾静脉比较细小，一般新手很难操作成功，需要在其它小鼠身上多次尝试才可以进行免疫操作（站长自己尝试了十多次都未成功）。静脉注射抗原对抗原的要求更高，抗原必须不含去垢剂和其它有毒成份，否则极容易引起动物死亡，而且免疫剂量也不宜过大。（4）脾内注射。脾内注射是效果最好的免疫方式，因为这种方式使得脾细胞直接与抗原接触，所以很容易引起免疫应答反应。但是很多人都认为这种方式操作复杂，而且死亡率高，但是参考了一些文献，加上自已实践操作，站长自己总结出了一套比较好的办法，成功率基本上在百分之百。具体操作方法：先用乙醚或戊巴比妥钠进行麻醉，乙醚麻醉过程比较简单，技术含量低，对于初学者比较适用，推荐。事先准备一块棉花，将少量乙醚倒在棉花上，用一烧杯倒扣住，将小鼠也扣在烧杯下，一般在一分钟内小鼠就可以晕到，此时将小鼠取出，用胶带固定在木板或实验台上（腹部向下，背面向上。无需无菌），用手术剪刀剪开背部左侧皮肤（大至就是脾脏所在的位置，不要剪开内膜），剪开小口后，用手将剪口撕大看到腹膜内脾脏即可将用注射器刺穿腹膜，插入脾脏，直接注射抗原，抽出注射器。然后用胶水（推荐AB胶，五金店有卖的）将剪口周围的毛粘好，胶干后在伤口周围涂上抗生素即可，无需要无菌操作。由于需要用到胶水，所以手术前不要用酒精消毒。（5）小腿肌肉注射。这是康碧泉公司的Quickantibody佐剂独有的免疫方法，具体操作是：先抓紧小鼠，用无名指固定一只后腿，将小腿部分用酒精消毒，将混好佐剂的抗原（根据佐剂说明书抗原与佐剂等体积混合）直接注入到小腿肌肉，稍稍停顿后拔出注射器即可。完成首次免疫和加强免疫后，可以取出少量血清进行效价检测（参见多抗制备中的血清采集与检测），达到足够高的效价后即可进行冲击免疫，冲击免疫完成后，应在96小时内完成细胞融合，否则相应的B细胞数量会下降到未冲击前的水平。在单抗制备过程中，除了通过免疫动物得到可分泌抗体的B细胞外，还可以将未免疫的小鼠脾脏取出，在体外进行免疫，从而大大加快制备周期，其基本方法是：取出未免疫小鼠的脾脏，处理成为单个细胞，然后在完全培养基中培养，同时加入一定浓度的抗原刺激其产生抗体。需要注意的是，这种方法由于不存在完整的免疫应答路径，所以只能产生出亲和力不成熟的IgM型的抗体，大部分实验中基本不能使用这种抗体（除非是专门研究IgM抗体特性）。

从人类发明这个技术开始，单抗制备已经有37年的历史了，这37年以来，主流单抗制备的基本主线几乎没有什么改变，也就是下面这个流程： 抗原制备 动物免疫 细胞融合 克隆筛选 克隆化（亚克隆） Large-scale生产、纯化以及鉴定 但是不同的研究人员从不同的角度和细节对整个流程有了独到的视角，这里我简单地总结一下近十年以来的发展和前人的经验，基本都是站长自己道听途说，加上参阅一些文献总结出来的， 十年以前的技术革新择重点简要提一提。 抗原制备进展 抗原，基本上分三类： 蛋白、多肽和小分子化合物。 一般的制备过程没什么好说的了， 主要说多肽和小分子连载体的事。 多肽和小分子因为免疫原性弱，所以必须连接载体才能诱发免疫应答。 最常用的基本上就是KLH, BSA,OVA和GST， 但是觉得近几年以来，用多肽复合抗原肽（MAP）的比较多。其原理是把多肽或小分子连在多聚赖氨酸的骨架上，而多聚赖氨酸因为其结构具有高度重复性，所以不会像KLH等载体一样使动物产生抗体，这样就不会浪废有限的免疫系统资源。 毛病是这种形式的抗原在制备成本上贵许多，我记得一个MAP的制备报价大约在1500元人民币左右。 从获取方式来看，对于蛋白质类抗原，不仅可以重组表达（原核和真核）， 还可以直接从天然组织或细胞中分离。早期的时候人们经常干这种事，那是因为当时没有现在这么普及的分子生物学技术，很难得到重组蛋白。 但是最近20年以来，基本上都用重组蛋白了，重组蛋白生产技术非常成熟，而且生产也简单，容易扩大规模，但是慢慢地很多人意识到重组蛋白和天然的蛋白在结构上有时候有着极大的差异，所以不少人认为确实是天然蛋白免疫得到的抗体是最好的，有兴趣可以看看这篇文章：Generation and Characterization of a Panel of Monoclonal Antibodies Against Distinct Epitopes of Human CD146，一个典型的从天然组织中纯化出蛋白作为抗原制备单抗的例子。 在抗原的形式上，也是各式各样，根据自己的需要有不同的喜好，大部份人都推荐接近天然构象的蛋白，即使是重组蛋白，buffer 也尽量gentle， 另一些人则喜欢跑胶然后切胶打动物，还有的转膜后剪膜免疫动物（这一个通常和从天然组织中纯化的方法联用）。 还有人喜欢用过表达的细胞或转化的细菌作为免疫原（当然也有全细胞或者细胞组份裂解液作为免疫原的，此乃后话）。对于做免疫组化用的单抗制备，则还有更特殊的处理手段。 另一些人则认为，用DNA直接免疫也许更好。其方法是把cDNA连到真核表达载体中，然后直接注射动物，在佐剂的作用下载体就带着cDNA进入动物细胞，然后在动物细胞就有目的蛋白表达出来，这些蛋白从细胞释放出来后就可以引起免疫应答（整个理论还没有建立完整，一切都在YY中）， 这种方法免疫中，现在缺少有效的佐剂，所以免疫效果很难保证，不过在比较低的效价下，很多人也可以得到阳性克隆。 说了这么多，还是很沮丧，虽然看起来选择很多，但是能真正用到工作中的选择并不多，有时候是条件问题，有时候则是成本和精力问题。第一个话题就写这么多吧。 动物免疫 动物免疫故事比较多，简单点说。 实验动物的选择： 做单抗的动物最开始是小鼠，后来又有像epitomics这样的公司用兔子的，还有一些人用大鼠神马的，当然其它的动物的也有，据不完全统计，现在能用传统方法制备单抗的动物已经有二三十种了。 但是最主流的还是小鼠和兔子了。兔子不讨论，epitomics对其有特殊的专利，这个基本上和咱们没关系。小鼠，用得最多的还是Balb/C了，因为大多数骨髓瘤细胞（SP2/0, X63, Ag8.653,FO和NSO）都来自于Balb/C小鼠，为了使hybridomas稳定，所以实验小鼠基本上还是Balb/C。 不过有文献提到了用NZB/W小鼠制备高同源性单抗的，原因是NZB/W小鼠是一种容易发生自身免疫疾病的小鼠模型，一般在5个月以下时基本不会发病，但是对自身的蛋白仍然有潜在的排斥反应。 免疫佐剂： 这一个方向在近十几年以来倒是发展得很快。 最开始的时候Sigma的弗氏完全佐剂和不完全佐剂一直是黄金组合（铝盐佐剂也用得比较多），但是后来人们发现CFA/IFA毛病很多，诸如不利于动物健康、刺激免疫应答周期过长等等，于是各种新式佐剂层出不穷，几乎每家试剂公司都有自己独特的佐剂。而且有效成份也多种多样，如脂质体，CpG，细胞因子，分子伴侣，特殊化学药物（如左旋咪唑）， 细菌或病毒的全部组份或部份（如LPS，肽聚糖），甚至还有一些是中草药提取物（如蜂胶、皂甙，当归多糖）…… 在形式上，大部份还是延用了CFA/IFA的油乳性质，但是这两年来免乳化佐剂在国内发展比较快，如我们现在使用的Quickantibody就是，武汉这边还有另一个产品叫赛弗诺的也与其类似，同时这些新型的佐剂对抗原的使用量要求很低，而且免疫周期也短，所以比较受欢迎，毛病是商家对机理保密，用户无法获知其可能潜在缺点。 总之最后就变成了一种根据个人喜好而选择的产品。 当然另外还有人说佐剂不是必须的，不加佐剂也可以免疫得不错，站长自己没尝试过。 免疫部位：这个没什么好说的了，也基本上是根据喜好来的，皮下、腹腔、脾内、肌肉、腋下、脚垫、静脉，各种地方免疫都说得过去，而且大家都能成功，所以这个就没什么好选择的了，不过大部份人还是认为皮下是最有效的，因为皮下含有大量的DC细胞，而DC细胞是重要的APC。 这里需要提出的是有一种叫作RIMMS的免疫方式极少人用到，但是据说效果不错。 RIMMS即多位点重复免疫（repetitive immunizations multiple sites），意思是在相同的地方低剂量短间隔重复免疫，一般是在小鼠背上皮下选择四五个点，每三天左右在这些点进行低剂量免疫，一般十几天就可以完成免疫。 大家可以看这篇文献：Rapid development of affinity matured monoclonal antibodies using RIMMS和这篇：Shorter development of immunoassay for drugs application of the novel RIMMS technique enables rapid production of monoclonal antibodies to ranitidine， 不过成功的实例中，很多人都是取小鼠的淋巴结而非脾脏进行融合的，淋巴结不好取啊。 免疫周期和间隔： 大部份人基本都同意免疫周期和免疫间隔尽量长一点比较好，这样得到的抗体亲和力更高（除了上述的RIMMS外）。 甚至有人打完第一针后，再过九个月才打第二针的，作者说效果很好，这个方法显然不适合大规模免疫，不然动物管理的压力咱们是承受不起的。另外，一些新型的佐剂则强调短周期也可以得到高亲和力的抗体的， 市场上有很多佐剂宣称两周内即可完成免疫并得到高效价的血清的，实在是太快了。另外最近有文献还对白天免疫动物还是晚上免疫动物更好这一问题作出了探讨，比如这篇：The Circadian Clock Controls Toll-like Receptor 9-Mediated Innate and Adaptive Immunity ， 作者认为一些调控免疫的分子也有生物节律性，它们的表达水生是跟随生物钟有规律变化的，在这些调节分子表达水平比较高的时候进行免疫或许可以得到更好的免疫效果。

我先说明下 我在小选厂化验室搞化验，学的也不是分析化验这个专业，所以理论方面不太懂，只能根据师傅教的以及分析过程中的现象来一步一步做。我想问的主要有两方面。 1..是做的银的测定，用的火试金富集测定金银的方法，主要想问是在熔融时如果炉膛高度过低时会不会出现供氧不足反应不完全的情况导致分析结果不准确呢？ 另外为了增加马弗炉的使用寿命，在做银时马弗炉的门在熔融过程中是否可以不完全关闭，留个缝隙。 2..关于选厂中矿粉烘干时的温度选择。选厂一般选的都是银矿粉或者铅锌铜金这些，要制样时的矿粉水分比较大，我一般都是在电炉上先加热，快干时再拿到烘干箱中用100度来烘，但是这样依然很慢，我想问下烘干这些矿粉时烘干箱的温度可以设置到最高多时多高为宜。 3..知识是无价的，但本人初来此地，积分不足，还望大家见谅。

求助各位大牛，在几个峰没有完全分开的情况下，做标线的时候该怎么积分才合理呢？比如附图中的峰2，3，4。 发现机器的自动积分对这种状况处理的很差，而手动积分的话又不知道到底该如何积分？请问有没有可能把这样的峰在积分的时候完全分开呢？如果有，该如何操作呢？我用的是安捷伦的7890-5975的机器

做尼龙6 TG时(40-400度) 因为料太多溢了出来 导致盛放样品的容器都是粘结的固体用过酒精 丙酮 超声波清洗 均不能完全清除附着物 寻求一种有机溶剂 能够完全除去附着物 .[em06]

管理评审输入材料是需要实验室完全覆盖CL01 中要求的13个要素？而不是只提及几个方面就行？

高碳铬铁用碳粉加混合熔剂在马弗炉中能完全破坏SI，MN,P,TI吗？急！！！请高人指点！！！！

各位大侠：最近做氰戊菊酯农残检验，做回收试验时发现很不稳定，第一次回收率达到93%，第二、三次完全回收不到。分阶段测试，把焦点集中在层析上。按无水硫酸钠、弗罗里硅土、活性炭、无水硫酸钠的顺序制成层析柱，以10毫升石油醚淋洗，加标准样进去，末了加30毫升石油醚洗柱，浓缩上机后，竟然不出峰。后查阅资料，发现弗罗里硅土会使活性农药丢失。这是不是根本原因？既然弗罗里硅土有这个缺陷，为什么许多方法上还是选用它作脱色剂？有没有其它脱色剂可选择？我用国产弗罗里硅土，经650度灼烧4小时活化。跟弗罗里硅土的品质有关吗？是否要选用进口的。无水硫酸钠用国产分析纯的。

误区一：耳机接听电话能防止手机辐射？ 　　天线是手机重要的辐射源，有些手机的耳机线可以当天线用，或者耳机插口离内置天线很近。还有一些手机虽然设有专门的天线，但内置收音机却必须以耳机当天线才能收听。对这些手机而言，用耳机接听电话反而辐射更大！所以他建议，如果需要戴上耳机接听，最好使用不当天线且带有屏蔽线的手机专用耳机。 　　误区二：信号格数越少手机辐射越小？ 　　许多人往往把手机里的信号格数直接看成是辐射量的多寡。“其实，这是一个错误的看法。事实上，恰恰相反。”某通讯公司的一位工程师表示，一些手机厂商为了在信号较差的地方仍能获得较好的通话质量，在手机设计时，往往会加大手机的电磁波发射强度，以保证通话需要。当信号只有一格时，手机信号的发射强度要比手机信号满格时大1000倍。通话时如果信号不好，可将手机天线的方向来回调整一下，使信号格数尽量多一些，也可以把天线拔出来。如果信号仍不好，就不要长时间用手机通话，或改用座机、或换个地方、或改个时间通话。 　　误区三：穿防辐射服可完全阻挡辐射？ 　　不少准妈妈从怀孕开始就穿上了防辐射孕妇服保护腹中的小宝宝，但这些孕妇服是否就真的能阻挡所有辐射呢？中国疾控中心辐射防护与核安全医学所研究员朱昌寿教授表示，不能一概而论。目前市面上出售的许多孕妇服其实都难以达到完全隔离。而如果手机被放在辐射服里面，待机的手机会拼命搜索信号，反而会释放出更多电磁波。

两个疑问 1 最近微波消解做合成材料，一直有白色物质消不干净，有时沉积在底部，有时悬浊液，加HF也没效果。这种情况算不算消解不完全？ 2 如果就这样定容，用什么滤器过滤损失会少一点呢？普通滤纸是不是会吸附比较大？澄清的样品平时我们都不过滤了- -直接赶酸定容。

[font=宋体]在生物医学领域，[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-development][b]多克隆抗体[/b][/url]是一种非常重要的工具。多克隆抗体是由免疫动物产生的一类具有识别多种抗原表位的抗体，具有广泛的应用价值。制备多克隆抗体的方法有多种，其中最常用的是免疫接种和杂交瘤技术。本文将介绍多克隆抗体的制备方法及流程。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]多克隆抗体的制备方法[/font][/b][font=宋体]主要是通过动物免疫，刺激宿主产生大量抗体。通常选用兔子和山羊作为免疫动物，因为动物反应良好，能提供足够数量的血清。用于免疫的动物应适龄、健壮、无感染性疾病、最好为雄性，此外还要注意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。一般采用皮下或背部多点皮内注射免疫原，多次免疫之后，激发动物机体免疫系统产生抗体，最后获取动物高免血清获得抗体；进一步通过纯化及验证后才可以使用。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]利用兔子制备多克隆抗体涉及[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]个关键步骤，具体概述如下[/font][/font][/b][font=宋体]：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [font=宋体]步骤[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]：抗原制备[/font][/font][font=宋体][font=宋体]蛋白抗原或多肽抗原合成是多抗制备的第一步。目标抗原的纯度对于抗体来说很关键，直接影响最终多克隆抗体的质量。抗原中的杂质（＜[/font][font=Calibri]1%[/font][font=宋体]）也可能具有免疫原性（例如许多细菌抗原），可能导致抗体识别杂质，而不是目标抗原。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州拥有重组蛋白表达平台，在[/font][font=Calibri]CHO[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]HEK293[/font][font=宋体]和大肠杆菌中有着丰富的重组蛋白表达经验，可提供专业高效的抗原制备服务。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [font=宋体]步骤[/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体]：动物免疫[/font][/font][font=宋体][font=宋体]多克隆抗体制备时，如何选择动物取决于这[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]个方面：所需抗血清的数量、抗原物种与免疫动物之间的亲缘关系以及免疫原制备的经验。兔子通常是多抗制备的首选，体积大，每次可抽取多达[/font][font=Calibri]25mL[/font][font=宋体]的血清，对兔子本身无显著的不良影响。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫佐剂是多抗制备时用于增强机体免疫应答的辅助物质。弗氏佐剂是一种最常用的免疫佐剂，分为完全弗氏佐剂和不完全弗氏佐剂。在佐剂存在的情况下，将蛋白抗原通过肌肉注射、皮内注射或皮下注射的方式注入选定种类的动物体内。初次免疫的[/font][font=Calibri]4~8[/font][font=宋体]周后，开始进行加强免疫，并每隔[/font][font=Calibri]2~3[/font][font=宋体]周进行[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]次。初次免疫和每次加强免疫之后，都需要进行动物采血并测定抗体效价。当抗体效价达到预期水平时，即可放血制备抗血清。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [font=宋体]步骤[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]：抗体纯化[/font][/font][font=宋体]对于多克隆抗体的制备，亲和纯化是一种高效的纯化方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]蛋白[/font][font=Calibri]A/G[/font][font=宋体]亲和纯化可从抗血清富集免疫球蛋白[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]），并且除去大量不需要的蛋白。但产品仍然有大量非特异性[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]的存在，可能导致在各种[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、免疫组织化学和蛋白质免疫印迹等免疫检测中背景偏高。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]为了从抗血清中分离出特异性多克隆抗体，通常使用抗原特异性亲和纯化。抗原亲和纯化可除去大量非特异性[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]组分，并且富集与目标抗原发生特异性反应的免疫球蛋白组分。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [font=宋体]步骤[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]：质量控制[/font][/font][font=宋体][font=宋体]纯化后，抗体需要经过一系列[/font][font=Calibri]QC[/font][font=宋体]检测，以确保多克隆抗体的质量。抗体浓度测定是在[/font][font=Calibri]280nm[/font][font=宋体]（[/font][font=Calibri]A280[/font][font=宋体]）测定其[/font][font=Calibri]OD[/font][font=宋体]值。使用[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]电泳用于检测多抗的纯度。[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]法可用于测定多克隆抗体的效价。根据下游检测需求，可对抗体进行标记，用于[/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]等实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]关于更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-production][b]多克隆抗体制备[/b][/url]详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/pab-production[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

做溶剂残留样品是不是一定得完全溶解？如果不能完全溶解，能不能使用超声使其充分混匀在过滤或者离心取上清夜？

新建实验室年底前想拿下CMA认证，项目500多个，实验室主管不懂完全懂技术，实验室主管该怎么做

最近用GPC做一公司合成的高分子材料，该材料不溶于水，考虑用THF溶，一开始好像溶了，结果进样没有谱图，溶剂峰也没有，进标样很正常。分析该材料没有真正溶解，只是分散了，因为后面发现在样品瓶壁上有颗粒物。后面加热样品溶液，进样后出峰了，就是响应值很低，有溶剂峰，考虑是不是之前没有溶解完全。请教一下，能不能加什么表面活性剂使之溶解啊？至于高分子材料的结构，我们暂时不知道。

目前CNAS校准实验室完全按照A025进行评审的，大家说说开出哪些不符合？哪些苛刻条款需要提前纠正或预防？比如温湿度记录仪连续记录？比如现场计量项目给取消，按照附录要求？比如软件不满足025要求？比如技术负责人不满足？比如授权签字人不满足？比如每个领域必须有一个二级或三年以上？比如技术方法控制清单内容？比如实验室活动范围描述？比如新项目评审？培训教师资格？比如扩项规范未覆盖全部设备？全部项目？比如…………

[align=center]热原试验中，热原仪可以完全取代手持体温计吗？[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]安评中心：程静[/align] 热原试验是指将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。而整个试验的关键点除了给药过程中保证所有的器具无菌外，另外一个关键点就是兔子体温的测量了。目前阶段最常用的测兔子肛温的方法就是用手持温度计测量或者就是用热原仪测量了，这两种测量肛温的方式实践下来，觉得各有利弊，换句话说，热原仪并没有宣传的那么完美，目前阶段来说，热原仪并不能完全取代手持式体温计。 首先说一下热原仪的优点，优点很明显：1热原仪实现了大批量做热原的可能，配备的温度探头越多，一次可以做的批次越多，大大的提高了热原试验的效率。2热原仪可以实现所有时间点的实时记录，并且有温度曲线，一目了然。3热原仪的数据更可靠，相比较与传统方法，客户更愿意相信电脑上的数据，具有很高的可追溯性。 同时，并没有一个仪器是完美的，热原仪使用过程中遇到的问题也很多：1 探头很难完全固定住，经常掉出来，导致曲线波动很大。在测温点掉出来更会影响实验数据的采集。2 探头容易在兔子挣扎过程中被损坏，影响使用。3 仪器软件等容易出现问题，维修时间过长，影响实验进行。4 热原仪价格昂贵，如果不是经常有大批量热原实验需要做的话，热原仪成本还是很高的。 综上所述，热原仪的出现确实大大的提高了热原试验的效率，但同时也存在一些问题等着解决，最好的解决办法就是，在使用热原仪的同时，也要准备一个手持体温计，这样可以合理安排实验，达到最好的实验效果。

求助：准备采购一台卡氏水分测定仪，检测奶酪中的含水率。做样的时候发现我们的产品很难完全溶解于普通的有机溶剂中。由于溶解过程中如果采用搅拌机搅拌则会产生热量，会产生误差。请各位老师能否给我出个主意，用什么方法可以解决溶样的问题。我们的样品脂肪和蛋白质含量较高。

做咖啡样品，用饱和正己烷去除油脂，以及c18或者弗罗里硅土，都无法完全去除油脂，这是为什么？如果不用gpc，还有其他方法吗？是做农残分析。

我做的样品是钛白粉，氧化铁黄，滑石粉这些物质，美诚微波消解仪，称取0.2g样品，加5ml硝酸，2ml氢氟酸，1ml高氯酸，最高温190度45分钟，开罐后可见固体样品已消解完全，再加水赶酸的过程，这些固体物质又会析出，导致最后赶酸很不方便，容易底下干。大家有这种情况吗？这种物质用什么标准物质作为检测标准比较准，目前我用的是灌木枝叶，准备换一种。消解不完全的定容后再过滤，不知测出的数值准不准。

样品的图谱与对照图谱在指纹区一定会完全一致吗？如果不一致该如何判定是否符合规定？急呀！！！！！

请教一下，石墨炉做完全血Cd、Pb（标准加入法，线性很好）之后，做水溶液的线性不好，条件（升温程序）跟之前做水溶液的一样，之前的线性非常好，就是做完血样之后，线性怎么做都不好，水溶液的不行，加入NH4H2PO4的也不行，仪器是自动稀释的，不存在配制的问题。是否做完血样之后，需要清洗什么，石墨管更换了也是一样。各位大侠，求指点

我用岛津的HPLC做防腐剂标准，相同的条件，两天的峰形完全不同，第二天的胖了矮了很多，但保留时间相同，峰面积也一样，为什么？

在做核苷酸分离实验，流动相是离子对缓冲盐溶液（四丁基硫酸氢铵+磷酸氢二钾）:甲醇=1000：40，预混后的流动相pH值为3.43。 第一次用汉邦的C18柱做，分离效果很好。第二次做重复试验时，条件完全相同，柱子也相同，结果却完全分不开了。 后来又换了根德国某品牌的C18柱做，也是第一次做效果很好，第二次做，同样的条件同样的柱子，又完全分不开了。 每次用完后，都是先用5%的甲醇冲洗1小时后，梯度升到100%甲醇再冲洗至少两小时。 请教前辈，是什么原因导致实验无法重复？用离子对试剂做流动相时有什么要注意的吗？[em09512]

相对于湿法消解，如电热板，石墨炉，耗时，耗试剂，耗人工时间，马弗炉有一定优势，而相对于微波消解的省试剂，消解完全，节省人工，马弗炉的缺点也暴露无遗，本实验室就有台马弗炉，买来一直静悄悄的躺在那，一次没做过，一般我们也用不上，最近领导发话，该仪器设备也要至少使用一次，马弗炉做塑胶重金属消解，大家都是使用过吗？需要注意哪些事项？有做过不同设备的比对吗？

吹扫捕集对于完全溶于水的挥发性有机物 比如 水中的甲醇 乙醇 丙酮 乙酸 DMF 这类的可以做吧？

在做电泳时，样品不能够完全溶解于缓冲溶液中，可以再缓冲溶液中加入少量的有机溶剂呢？

检测油中的重金属时，称取几克样品　湿法消解才能消解完全？

2月28日，国家质检总局副局长魏传忠在国务院新闻办举办的新闻发布会上回答记者提问时表示，中国高度重视食品安全问题，中国的食品安全也是完全有保障的，中国政府希望通过密切的合作机制，妥善地同各国一道解决食品安全问题。 当有记者问到中国输日食品和日本输华食品的合格率情况时，魏传忠回答，中国政府历来高度重视食品安全，有一整套严格的管理措施，中国出口食品始终保持了很高的合格率。2007年7月20日，日本厚生劳动省公布，自中国进口的食品2006年的合格率达到了99.42%，是日本进口食品当中合格率最高的之一。而日本对中国的食品抽检率也最高，达到了15.7%。2007年，根据有关统计，中国输日食品合格率达到了99.81%，而日本输华食品的合格率是99.37%。这些数据充分说明，中国的食品安全是完全有保障的，他希望媒体朋友们能够客观、真实地反映中国食品安全的状况。

每隔一年就必须做期间核查，不过觉得仪器状态不好的时候也应该做期间核查，不知道大家今年有没有要做期间核查的呢，是不是完全按照jjg700-1999来做气相期间核查，如果不是你们都是做哪几个方面的核查呢，比如柱温、一般性检查、基线噪声及漂移、检测限和定量重复性。

最近做湿法消解，农产品，消解剩余1毫升时总是有些渣，但加水后就没有，请问这样消解是否完全？