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丁基琼脂糖凝胶

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丁基琼脂糖凝胶相关的资讯

  • 浅谈凝胶过滤层析产品选择指南
    北京德泉兴业商贸有限公司作为Cytiva 思拓凡品牌的代理商将继续秉承公司及品牌理念,以客户为中心,为您提供优质的实验室解决方案。凝胶过滤层析 (GF),也称为尺寸排阻层析 (SEC),基本原理是根据样品分子大小和形状进行分离的一种常用的纯化方法,属于非吸附性层析。图1: Cytiva全新一代Increase系列分子筛预装柱,专门为小规格制备纯化及分析而设计根据应用目的的不同,凝胶过滤层析主要可以分为以下三种方法:1分析型凝胶过滤层析:对于分辨率有很高的要求,上样体积一般在柱体积的0.3% - 0.5%;使用柱子的高度一般为30cm。而在快速纯度检测和筛选的实验中,常用的是15cm柱高的柱子,可以在提供足够分辨率的前提下,缩短运行时间,节省样品和缓冲液。2制备级凝胶过滤层析:对于分辨率有较高的要求,上样体积一般在柱体积的0.5% - 4%。同时,运行时流速较低,使用的柱子高度也比较高 (一般≥ 60cm)。经过纯化后的样品将被直接置换到合适的缓冲液条件中,用于后续的实验或储存。3脱盐与缓冲液置换:与上述精细分离不同,脱盐或缓冲液置换属于组分分离,即,将大分子样品与小分子或离子进行分离的过程,因此对于分辨率的要求相对不高。上样体积可达柱体积的30%。SephadexSephadex填料是早期发现的一种填料,按照交联度的不同,用Sephadex G加数字来区别,数字越小交联度越大,形成的孔径越小,对应的分离范围越小。Sephadex G系列填料目前一般主要用于脱盐与缓冲液置换,且有多种分离范围、颗粒大小可以选择。粗颗粒 (Coarse)流速较快,细颗粒 (Fine)流速较慢,分辨率较高。图2.不同上样量对于脱盐实验结果的影响SepharoseSepharose填料是高流速大分子分离。作为琼脂糖基质的填料,具有非特异性吸附低、回收率高等特点,分离范围宽阔,从10kD – 2×104kD,适合分子量大小差异大而对分辨率要求不高的样本。Sepharose和2,3二溴丙醇反应而成的Sepharose CL系列填料,增强了Sepharose的物理和化学稳定性。特别适合含有机溶剂的分离,能承受较强的在位清洗,并可以高温消毒,同时在流速方面也比传统的Sepharose填料有了明显的提升。Sepharose Fast Flow填料为粒径90μm的高度交联的琼脂糖填料,大大加强了机械性能,流速特快,适合工业规模生产。该填料经去电荷处理,非特异性吸附特低,回收率也得到了了提高。极高的化学稳定性,可用多种促溶剂、有机溶剂工作及1-2M NaOH进行在位清洗。SephacrylSephacryl填料是葡聚糖与N,N-亚甲基二乙酰胺交联而成的一种新型葡聚糖填料。目前Cytiva提供5种不同分离范围的Sephacryl填料:Sephacryl S-100 HR、Sephacryl S-200 HR、Sephacryl S-300 HR、Sephacryl S-400 HR、Sephacryl S-500 HR,选择性广阔。排阻极限甚至可以达到108,不仅可以用于分离一般的蛋白,也可以用于分离蛋白多糖、质粒、甚至较大的病毒颗粒。同时经济型HiPrep 16/60、26/60 Sephacryl S-100,200,300,400,500HR预装柱提高了分辨率和重复性,具有较好的分离特性。SuperoseSuperose填料是分离范围广的填料,同时宽广的分离范围配合高分辨率,能一次性分离生物分子大小差异大的混合物。刚性相比传统填料有了极大的提升,在高粘性液体如8M尿素下也能保持流速,适合糖类、核酸、病毒,特别是包涵体蛋白在促溶剂中的纯化。Superose填料的颗粒细小,大小分布集中,允许高流速纯化,所以适合中、高压层析系统使用。图3.用于精细分离的凝胶过滤层析产品的分离范围SuperdexIncrease平台系列预装柱:进一步缩小了填料粒径,提高了填料的耐压性能,提升了分辨率的同时有效缩短了分离纯化所需的时间。
  • 发布蓝绿LED凝胶成像系统新品
    全球独有的技术---蓝光/绿光LED凝胶成像仪专利技术通过创新性地引入波长组合而不使用单一波长,从而产生470nm至520nm的蓝光/绿光光谱,这样能够激发470nm单一波长不能激发的染料,例如溴化乙锭等。并且可以通过染料的累积能量吸收来实现检测。最终实现所有DNA染料的信号强度可达到使用强紫外线仪的强度,但使用的光源却是更安全的。专利技术简介  核酸的检测目前仍然主要是使用溴化乙锭这类核酸染色剂及紫外光照射。然而,紫外线对核酸的降解已有很多文献报道,因此可以认为它本身就是一种核酸破坏剂。此外,紫外线对使用者来说也具有危险性。因此总的来说,目前的这类核酸检测技术会由于DNA分子的破坏,而导致如测序、克隆等多种下游应用的效率大大降低。无害化的可见光已经被用于检测核酸,其主要局限性是只能激发绿色染料。以其开发的全新安全核酸染料MIDORIGreen而闻名的NIPPON Genetics EUROPE公司,针对目前的核酸检测技术开发了一种全新的核酸染料检测方法,它能够激发所有商用核酸染料。紫外灯的危害性DNA能够吸收紫外光谱中的光。其结果是形成嘧啶二聚体;单链DNA和双链DNA断裂,DNA与DNA发生链间交联和DNA与蛋白质发生交联。虽然生物体能够修复这些DNA损伤并承受上述后果,但琼脂糖凝胶中的DNA缺乏这些修复机制。此外,与整个生物体相比,凝胶中的DNA量要少得多。下面是对短期紫外线照射引起的DNA降解的研究结果:电泳后,凝胶暴露在紫外线下长达60秒。PCR产物随后被分离并克隆到一个对照载体中,之前用NdeI和HindIII进行双酶切,然后被克隆并转染到大肠杆菌DH5α(BL21)细胞中。结果如下:暴露在紫外线下的DNA受损严重,克隆效率明显降低。紫外照射60s后,DNA含量比空对照组要少得多。因此,我们确认了紫外线照射引起的DNA降解并且完全破坏DNA。一代技术---蓝色LED2009年,引入了蓝光发光二极管(LED)透射器。LED是能将电转化为光的半导体。其优点是有较为精确的波长,效率极高,平均寿命高达50000小时。它们发射出比紫外线波长更长的470nm波长的光。重复上述实验,并将DNA暴露在蓝色LED灯下相同时间:正如理论所预期的那样,暴露后每板CFU的数量没有任何显著变化。因此,防止DNA损伤大大提高了克隆效率。蓝色LED的问题尽管使用了更为安全的光源,但使用蓝色LED也有一个主要缺点。溴化乙锭是常见的DNA染色法,在蓝光激发下其结果往往比紫外要差很多。溴化乙锭与DNA结合的激发峰在480~525nm之间。如结果所示,溴化乙锭与DNA结合的信号非常微弱,几乎无法使用。绿色DNA染料,如MIDORIGreen染料,通过蓝色LED可以提供更好的信号。技术革新NIPPON Genetics EUROPE公司为解决这个问题提供了检测核酸染料的全新策略:通过创新性地引入波长组合而不使用单一波长,从而产生470nm至520nm的蓝光/绿光光谱,这样能够激发470nm单一波长不能激发的染料,例如溴化乙锭等。并且可以通过染料的累积能量吸收来实现检测。FastGene® 蓝/绿LED透射台(FG-08)产品正是基于这一原理发展而来:所有DNA染料的信号强度最终都有可能达到使用强紫外线透照仪的信号强度,但使用的光源却是更安全的。溴化乙锭和更安全的替代品通过这种独特的技术得到了一个更好的信号,并在下游应用中取得了更好的效果,并创造了一个更安全的实验室环境。NIPPON Genetics EUROPE公司使用这一技术而研发了独立成像系统和照明系统。“我只使用蓝/绿LED成像系统和MIDORIGreen Direct染料,它从来就没有让我失望过!”Jean Emly博士, Geneflow Ltd.公司创始人 , 英国• 混合LED波长可产生最 佳光谱,激发多种染料。• 无DNA/RNA降解• 溴化乙锭产生更强的信号• 也能激发荧光蛋白,如GFP、RFP等成像系统产品-1 ----蓝/绿 LED GelPicBoxFastGene® 蓝/绿LED GelPicBox 将紧凑的占机身与蓝/绿LED技术的优势结合在一起。这可能是世界上小 巧的成像系统。FastGene® 蓝/绿LED GelPicBox配有蓝/绿和白色LED,用于记录核酸、蛋白质凝胶和膜。主要特点• 最小的成像系统• 2.7” LCD显示屏• 16 cm x 11.5 cm 观察区域• 蓝色/绿色 LED透射台• USB 2.0 接口FastGene® 蓝/绿LED GelPicBox 将紧凑的占机身与蓝/绿LED技术的优势结合在一起。这可能是世界上最 小的成像系统。FastGene® 蓝/绿LED GelPicBox配有蓝/绿和白色LED,用于记录核酸、蛋白质凝胶和膜。应用• 红色和绿色 DNA/RNA染料的检测• GFP, eGFP, YFP等荧光蛋白的检测• 蛋白质凝胶记录• 培养皿和膜记录• 琼脂糖凝胶中DNA的切取图像格式• Jpeg• TIFF• BMP照明---蓝色/绿色 LED透射台独 有的激发技术• 能够检测红色和绿色 DNA染料• 成像面积 16 cm x 11 cm• 超均匀透射• 每侧12个LED阵列---白色LED• 蛋白检测• 白色LED置于盖上---白色LED暗室灯• 膜和培养培养皿记录• 两个白色LED阵列照亮成像箱选配---CMOS传感器• 固定焦距• 9 M像素• 图像可以以TIFF、JPEG和BMP格式记录• 外接U盘成像系统产品-2 ----FAS-DigiFastGene® FAS Digi是第 一 个采用蓝/绿LED成像技术的成像系统,并采用了模块化系统设计。它由FastGene® 蓝/绿 LED 透射台(FG-08) 和高端相机组成,拥有我们所有成像系统中超高的分辨率和令人难以置信的16M像素。摄像头支持Wi-Fi,可以使用智能设备进行控制。主要特点• 超 高分辨率 - 16 MPixel LiveMOS 传感器• 3” 可翻转触摸屏• 20 cm x 16 cm 蓝色/绿色 LED 透射台• 兼容白色LED透射台• 可由智能手机和平板电脑控制应用• 红色和绿色 DNA/RNA染料的检测• GFP, eGFP, YFP等荧光蛋白的检测• 蛋白质凝胶记录• 培养皿和膜记录• 琼脂糖凝胶中DNA的切取图像格式• Jpeg• RAW照明---蓝色/绿色 LED透射台独 有的激发技术• 能够检测红色和绿色的DNA染料• 成像面积20 cm x 16 cm• 超均匀透射• 每侧均有6个大型LED阵列选配---LiveMOS传感器• 24 mm - 64 mm 焦距(256 mm 数码变焦)• 16 MPixel• 触摸屏对焦• 图像可以用JPEG和RAW格式记录成像系统产品-3 ----FAS-VFastGene® FAS-V是我们配置先进的成像系统。它是一个独立的成像系统,内置一台电脑和一个10.4英寸的触摸屏。它包含了我们迄今为止超 大的成像区域,用于DNA和蛋白质成像。它可选超灵敏的CCD传感器与高端的齐焦透镜,这种相结合的方式通常只有在高端的显微镜中才能看到。我们在这个易于使用的系统中将独特的激发技术与高端部件相结合以提供最 佳检测结果。主要特点• 超灵敏2MPixel CCD相机 (0.13 Lux)• 10.4” 触摸屏• 26 cm x 21 cm 蓝色/绿色 LED透射台• 26 cm x 21 cm 白色LED 透射台应用• DNA/RNA 染料的检测和记录• GFP, eGFP, YFP等荧光蛋白的检测• 蛋白质凝胶记录• 培养皿和膜记录• 第三方图像编辑图像格式• Jpeg• TIFF• BMP• PNG照明---蓝色/绿色 LED透射台独有的激发技术• 能检测红色和绿色DNA染料• 超大的26 cm x 21 cm 成像区域• 超均匀透射• 每侧12个大型LED阵列---白色LED透射台• 蛋白检测• 超大LED白光板 (26 cm x 21 cm)• 触摸屏直接控制---白色LED暗室灯• 膜及培养皿记录• 两个白色LED阵列照亮成像箱选配---CCD传感器• CCD传感器尺寸1/1.8“• 像素尺寸4.4 μm• 极弱信号(0.13Lux*)检测• 图像可以以 TIFF, JPEG, BMP 和PNG格式保存• 16 GB内部固态硬盘存储或外部USB存储• 曝光时间0.001秒至30秒• 日本制造*正常一天的清晰度在20000到100000Lux之间---超亮齐焦镜头- 无需对焦FastGene® FAS-V的镜头为齐焦镜头(放大或缩小时不必重新调整预先设置的焦距)• f/1.2大孔径• 无级调节光圈• 6倍变焦• 焦距12.5 mm 至75 mm*镜头光圈打开创新点:核酸的检测目前仍然主要是使用溴化乙锭这类核酸染色剂及紫外光照射。然而,紫外线对核酸的降解已有很多文献报道,因此可以认为它本身就是一种核酸破坏剂。此外,紫外线对使用者来说也具有危险性。因此总的来说,目前的这类核酸检测技术会由于DNA分子的破坏,而导致如测序、克隆等多种下游应用的效率大大降低。无害化的可见光已经被用于检测核酸,其主要局限性是只能激发绿色染料 第一代技术-蓝色LED 2009年,引入了蓝光发光二极管(LED)透射器。尽管使用了更为安全的光源,但使用蓝色LED也有一个主要缺点。溴化乙锭,最常见的DNA染色法,在蓝光激发下其结果往往比紫外要差很多。溴化乙锭与DNA结合的激发峰在480~525nm之间溴化乙锭与DNA结合的信号非常微弱,几乎无法使用。绿色DNA染料,如MIDORIGreen染料,通过蓝色LED可以提供更好的信号。 技术革新 NIPPON Genetics EUROPE公司为解决这个问题提供了检测核酸染料的全新策略:通过创新性地引入波长组合而不使用单一波长,从而产生470nm至520nm的蓝光/绿光光谱,这样能够激发470nm单一波长不能激发的染料,例如溴化乙锭等。并且可以通过染料的累积能量吸收来实现检测。 FastGene® 蓝/绿LED透射台(FG-08)产品正是基于这一原理发展而来:所有DNA染料的信号强度最终都有可能达到使用强紫外线透照仪的信号强度,但使用的光源却是更安全的。溴化乙锭和更安全的替代品通过这种独特的技术得到了一个更好的信号,并在下游应用中取得了更好的效果,并创造了一个更安全的实验室环境。 蓝绿LED凝胶成像系统
  • 新品发布|Clinx勤翔一体式凝胶成像仪GenoSense S2 Pro/Ultra全新上市
    GenoSens S2一体式凝胶成像系统又添新成员啦!全新升级GenoSens S2 Pro/Ultra“龙”重发布,新增302nm LED紫外透射台,并可选837万像素高灵敏数字相机,拓展的功能将满足更多实验需求!新产品将延续GenoSens S2精致小巧的设计,10.1英寸大屏触控,自动进出仓,图像自动采集处理,高效便捷。软件操作直观友好,同时可支持安全切胶。“一键点击,成像无忧”,GenoSens S2系列凝胶成像一体机将在分子生物学研究、蛋白质研究和药物研究等领域加速您的科研发现。 升级特点:● 增加了302nm紫外投射成像和采集功能更宽的成像范围,轻松应对EB、Gel Red 等染色核酸胶的成像需求。 ● 830万物理像素科研级别冷CCD相机提供了更高分辨率和更精准的成像质量,捕捉更多精彩细节,为科研用户提供更准确的数据分析和研究结果 ● 拓展的应用满足更多实验需求升级后的功能满足多种实验需求,从SYBR&trade Safe,SYBR&trade Gold,SYBR&trade Green I&II,,Gel Signal&trade Green等生物安全染料标记的琼脂糖核酸胶,到使用EB、Gel Red 等染色的核酸胶,以及考马斯亮蓝染色或银染的蛋白胶的成像、切胶回收及图像分析。图像模式可捕获哪种信号蛋白质预制胶凝胶(例如,考马斯亮蓝染色、银染)核酸凝胶使用EB、Gel Red 等染色的核酸胶,以及SYBR&trade Safe,SYBR&trade Gold,SYBR&trade Green I&II,,Gel Signal&trade Green等生物安全染料标记的琼脂糖核酸胶型号及规格
  • 高性价比!7款中小型实验室用凝胶成像仪介绍
    p    strong 琼脂糖凝胶电泳分离技术 /strong 是分子生物学实验室进行分离、鉴定和提纯DNA片段最常用的方法。通过在制胶时掺入或制胶后染色的方式,使荧光染料结合在DNA分子上,在特定光源的照射下便可确定DNA分子的位置。 /p p   早期,用于DNA琼脂糖凝胶染色的染料多为EB(溴化乙锭),EB可以嵌入到DNA分子碱基对之间,在紫外光的激发下发出强的荧光。EB由于其灵敏度高、稳定,而广受欢迎,但由于EB为强诱变剂,具有高致癌性,后期,EB逐渐被一些EB替代物如GoldView、GelRed、Gelsafe等所替代。 /p p   随着生物技术的发展,各大公司也在不断的改进技术,对产品和技术创新升级,使产品在使用和用户体验上朝着更快、更好、更安全的方向发展。凝胶成像仪种类很多,本篇文章盘点了7款近几年上市的性能优越的凝胶成像仪,罗列其特点和优势以供读者参考。 /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 1. 赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统 /strong /span /p p    /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/da25050c-1734-4306-a844-96104f559fce.jpg" title=" 赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统.jpg" alt=" 赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统.jpg" / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) " 赛默飞 E-Gel Power Snap 凝胶电泳系统 /span br/ /p p   前面说到虽然国内很多分子实验室都将EB替换为低毒的GoldView、GelRed、Gelsafe等分子染料,但大部分仍还是采用紫外光激发,实验操作者在观察凝胶尤其是切胶时还是会暴露在紫外下。 /p p   赛默飞E-Gel sup TM /sup Power Snap电泳系统整合了快速实时的核酸电泳和高分辨率成像功能,为实验者提供无与伦比的便利性。一个小型的台式设备,配备有蓝光透射仪,可以在电泳过程中实时观察条带迁移,相比紫外透射更加安全,可以避免紫外光对DNA的伤害,大大提高下游克隆效率和片段回收率。并且这种整合式设计减少了大量的流程时间,加速科研发现。此外,它还自带琥珀色滤光片,可用于对预染了Invitrogen sup TM /sup SYBRTM Safe 或 SYBR sup TM /sup Gold染料的Invitrogen sup TM /sup E-Gel sup TM /sup 琼脂糖凝胶中的样品进行实时样品追踪。此设备预设多种程序方案,适用于不同类型的E-Gel琼脂糖凝胶。 /p p style=" text-indent: 2em " 产品特点 /p p    strong 1 快速分析 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 从上样到成像,最快仅需15分钟; /p p    strong 2 操作简单 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 大尺寸触摸屏,直观的用户界面和操作系统; /p p    strong 3 安全方便 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 配合使用Invitrogen sup TM /sup E-Gel sup TM /sup 预制胶,将化学品危害降至最低。小巧台式设计,快速电泳、彩色触摸屏,整合了凝胶成像功能等。 /p p    a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C277328.htm" target=" _self" strong 更多详情请点击专场 /strong /a & nbsp /p p style=" text-align: center "    strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 2 伯乐 GelDoc EZ凝胶成像系统 /span /strong /p p style=" text-align: center "    img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/22c28d0c-b8c3-4f76-896a-ff7c61fddd2e.jpg" title=" Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统.jpg" alt=" Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统.jpg" style=" text-align: center " / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) " Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统 /span br/ /p p style=" text-indent: 2em " Bio-Rad GelDoc EZ凝胶成像系统是很结构很紧凑的全自动成像系统,操作灵活性很强。 /p p style=" text-indent: 2em " 产品特点 /p p   strong  1 整合了免染技术 /strong /p p   样品无需通过染色和脱色步骤,电泳结束后2.5分钟即可进行自动成像和结果分析输出。加速您的科研流程 /p p    strong 2 省时高效 /strong 2小时的考马斯亮蓝染色的步骤省略,直接清洗后5分钟内即可得到高质量的图像结果。 /p p    strong 3 兼容后续实验步骤 /strong /p p   使用了Stain-Free技术的凝胶可以满足Western Blot、条带切取、质谱鉴定等后续实验要求。并可在电泳结束后快速鉴定实验结果。 /p p    strong 4 高灵敏度 /strong 考马斯亮蓝相比,灵敏度更高,且由于避免了染色和脱色步骤,定量重复性更高。 /p p    strong 5 绿色环保 /strong /p p   整个过程无污染物产生,所有试剂可直接排放。 /p p    strong 6 方便使用 /strong /p p   不用再考虑如何手工设置滤光片、光圈、聚焦、光源等参数,实验室的任何人员都能得到重复性极高的实验结果,期间避免了人工因素引入的误差。 /p p style=" text-indent: 2em " a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C294278.htm" target=" _self" strong 更多详情请点击专场 /strong /a & nbsp /p p style=" text-align: center "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 3 Azure Biosystems C150凝胶成像系统 /strong /span /p p style=" text-align: center "    img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/62763b0f-c577-4e1e-a053-85b4a9422a7b.jpg" title=" Azure Biosystems C150凝胶成像系统.jpg" alt=" Azure Biosystems C150凝胶成像系统.jpg" style=" text-align: center " / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) " Azure Biosystems C150凝胶成像系统 /span br/ /p p   此款c150凝胶成像仪使用染料/荧光染料时,系统将自动选择光源和滤光片。UV用于EB染色DNA凝胶成像,蓝光用于SYBR& reg Safe 或者类似染料成像,白光光源用于银染或考马斯亮蓝染色蛋白凝胶成像。为基础型凝胶成像系统,推荐为预算有限的实验室准备。 /p p   产品特点 /p p    strong 1 聚焦技术 /strong /p p style=" text-indent: 2em " strong & nbsp /strong 图像采集时,自动选择最佳的焦距和镜头设置,无需手动调节; /p p    strong 2 紫外波长& nbsp /strong /p p style=" text-indent: 2em " 302nm和365nm,兼容多种染料EB、SYBR系列染料、荧光素、RadianRed& reg ,TexasRed& reg ,SYPRO RED和免染胶成像; /p p    strong 3 70nm EPI蓝光& nbsp /strong /p p style=" text-indent: 2em " 所有系统标配蓝光光源,可激发安全染料例如SYBR& reg Safe等染料,让用户使用对样品DNA以及环境伤害更小的安全染料; /p p    strong 4 合一体设计& nbsp /strong /p p style=" text-indent: 2em " 内置平板电脑:10.1英寸触摸屏,可连接网络,具有WiFi和蓝牙功能。 /p p    a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C277806.htm" target=" _self" strong 更多详情请点击专场& nbsp /strong /a /p p style=" text-align: center "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 4 博鹭腾BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统 /strong /span /p p style=" text-align: center "    img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/3d98d8e3-1590-4b64-b436-0822ee91f6cd.jpg" title=" BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统.jpg" alt=" BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统.jpg" style=" text-align: center " / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) " 博鹭腾BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统 /span br/ /p p    span style=" text-indent: 2em " 博鹭腾BLT GV 1500 Pro全自动凝胶成像系统具有全新设计暗箱,且具备专利的广角发射滤光片技术,使二相色镜和宽带通滤光片的完美结合,有效去除杂散光,提高荧光检测的灵敏度。 /span /p p style=" text-indent: 2em " 产品特点 br/ /p p    strong 1 超灵敏CCD& nbsp /strong /p p style=" text-indent: 2em " 140万有效像素CCD,具有极高的灵敏度 /p p    strong 2 紫外和蓝光成像 /strong /p p    strong 3 F1.2/8-48mm变焦镜头 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 自动聚焦,无需人工调整 /p p    strong 4 可自定义紫外灯延时闭合功能 /strong /p p    strong 5 多功能 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 可对各种凝胶电泳、克隆计数、微孔板、抑菌圈、抗生素效价、物体切片等图片进行分析和计算。 /p p    a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C290957.htm" target=" _self" strong 更多详情请点击专场 /strong /a /p p style=" text-align: center "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 5 AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000 /strong /span /p p style=" text-align: center "    img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/a049e4f7-36d0-464b-8b4f-ceabbda70a28.jpg" title=" AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000.jpg" alt=" AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000.jpg" style=" text-align: center " / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) " AXYGEN凝胶成像系统GDBL-1000 /span br/ /p p   Axygen BL凝胶成像系统除具有标准型所有组成外,另外配置了蓝光源,以及Microsoft& reg Windows& reg 平板电脑。蓝光主要用于EtBr替代核酸染料检测,使用此种检测方法,有效防止DNA损伤,回收得到的DNA片段可用于后续分析。 /p p   产品特点 /p p    strong 1 四种光源可选 /strong /p p style=" text-indent: 2em " UV 302、 UV 365、 Epi 白光或者Epi蓝光(仅限于BL系统),另可选配白光转换屏; /p p    strong 2 自动曝光工具 /strong 快速计算最佳曝光时间 /p p    strong 3 ROI工具 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 可以针对感兴趣的区域合理计算曝光时间,有效捕获亮度强或者亮度弱的目的条带; /p p   strong  4 Imaging工具 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 可以裁剪、旋转、缩放、调整图片大小,设置图片明暗对比,色彩饱和度等。Annotation工具用于文本注释和绘图操作。编辑完成的图像可以保存、打印、电邮、导出,进行下一步分析。 /p p    a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C258377.htm" target=" _self" strong 更多详情请点击专场 /strong /a /p p style=" text-align: center "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 6. Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统 /strong /span /p p style=" text-align: center "    img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/2f84a59e-8af2-486a-8d3d-9cac655ee345.jpg" title=" Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统.jpg" alt=" Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统.jpg" style=" text-align: center " / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) " Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统 /span br/ /p p   美国Omega Fluor Plus 蓝光凝胶成像系统,也叫做无损伤蓝光凝胶成像一体机,听名字就知道此款设备采用无损伤蓝光技术,能够大大降低凝胶成像过程的毒害作用。 /p p style=" text-indent: 2em " 产品特点 /p p    strong 1 高分辨率的图像& nbsp /strong & nbsp 500万像素的CCD相机 /p p    strong 2 操作简便 /strong /p p   智能化的镜头成像技术,无需手动或者电动调节镜头,放入样品,即可拍照,内置平板电脑,通过触摸屏控制拍照; /p p    strong 3 使用安全 /strong /p p   470nm的蓝光可以替代紫外光激发无毒性的荧光染料,如SybrGreen,MaestroSafe,GelGreen紫外光开门断电保护; /p p    strong 4 应用广泛 /strong /p p   可用于蓝光凝胶成像,紫外光凝胶成像,考马斯亮蓝和银染蛋白质凝胶成像,菌落计数等等。 /p p    a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C196399.htm" target=" _self" strong 更多详情请点击专场 /strong /a & nbsp /p p style=" text-align: center " strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 8 AlphaImager HP 凝胶成像系统 /span /strong /p p style=" text-align: center "    img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/03449928-4ef1-4116-903d-b38abbd4a266.jpg" title=" Alpha凝胶成像系统 AlphaImager HP.jpg" alt=" Alpha凝胶成像系统 AlphaImager HP.jpg" style=" text-align: center " / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) " AlphaImager HP 凝胶成像系统 /span br/ /p p   该系统是全球最畅销的凝胶成像系统之一,用于荧光、可见光成像,具体支持各种荧光凝胶、蛋白PAGE胶、培养皿、多孔板等样品类型,采用145万(1360*1024)像素科研级CCD;可以通过硬件升级以支持化学发光成像。 /p p style=" text-indent: 2em " 产品特点 br/ /p p    strong 1 荧光、可见光成像 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 具体支持各种荧光凝胶、蛋白PAGE胶、培养皿、多孔板等样品类型,可以通过硬件升级以支持化学发光成像 /p p    strong 2 自动变焦镜头,分辨率高 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 采用科研级别CCD,140万像素 /p p    strong 3 检测动态范围为0 - 3.6 OD /strong /p p    strong 4 光敏度高 /strong & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 采用A/R Coating技术增加透光率,光敏度比同类产品高约30% /p p    strong 5 双波长双强度 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 302、365 nm,以适合不同应用标配推拉式紫外透射光源 /p p    strong 6 具有打开暗箱门时的UV自动关闭功能 /strong /p p style=" text-indent: 2em " 也可切换为在开门时进入切胶模式切胶 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp strong 7 强大的软件分析功能 /strong & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 可同时打开多张图片,对比分析;可以方便添加注释,调节图像对比度;DNA/RNA、蛋白胶自动分析、分子量大小分析、1D泳道分析、光密度值定量分析、微孔板整列分析、克隆及菌落计数、进化树等等。 /p p    a href=" https://www.instrument.com.cn/netshow/C141820.htm" target=" _self" strong 更多详情请点击专场 /strong /a & nbsp /p p style=" text-align: left "   好啦,看了这么多凝胶成像仪是不是眼花缭乱啦,小编想说的是,当科研工作者努力的做科研时,各大公司也在努力适应实验人员科研技术需要开发性能优越的仪器产品,在关注科研前沿发展动态时,也别忘了关注相关领域科研器材的进展,毕竟,他们是我们实验成功的好帮手呀。 /p
  • 远慕MRS琼脂培养基促销中
    上海远慕生物科技有限公司为了回馈广大科研工作者特此做出培养基促销优惠活动啦,培养基均现货促销!价格绝对出乎你的意外,望有需要的老师赶快联系我们吧! 培养基是远慕公司自主研发的项目之一,产品质量有保证!说明书都会随货发给您!我们我是符合国家标准的,我们也可以按照客户提供的要求给您配制,我们承诺产品有任何质量问题都是免费退换的! 远慕生物严格遵守“质量优先、客户优先、技术优先、服务优先”“四项优先”原则;产品已被广泛应用于化学、化工、生命科学的基础研究和开发应用、制药、疾病诊断与控制、人口与健康、生物技术等诸多领域,并销往全国各地,公司客户遍布国内各大学、研究所、卫生防疫、制药公司、生物公司等单位,得到广大客户的一致好评。我们的宗旨是“为客户提供最优质的产品和服务”。 远慕欢迎您!培养基促销其他产品:结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA) 250g/瓶 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) 250g/瓶 胰蛋白胨大豆琼脂 90mm×10个/包 革兰氏染色液 10ml×4支/盒 氧化酶试纸 10片/瓶 氧化酶试剂 1g/瓶 阪崎肠杆菌显色培养基(DFI琼脂) 1000ml/瓶 鸟氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 赖氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 精氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 氨基酸脱羧酶试验对照 1ml×10支/盒 无菌液体石蜡 2ml×10支/盒 氰化钾(KCN)培养基 1ml×10支/盒 氰化钾(KCN)对照培养基 1ml×10支/盒 D-蔗糖发酵管 1ml×10支/盒 D-山梨醇发酵管 1ml×10支/盒 阿拉伯糖发酵管 1ml×10支/盒 卫矛醇半固体琼脂 1ml×10支/盒 棉子糖发酵管 1ml×10支/盒 产品名称 规格 采样袋/均质袋 100个/袋 SCDLP液体培养基基础 250g/瓶 SCDLP增菌肉汤 10ml×20支/箱 磷酸盐缓冲液(pH7.2) 250g/瓶 磷酸盐缓冲液(pH7.2) 225ml×20瓶/箱 磷酸盐缓冲液(pH7.2) 9ml×20支/箱 生理盐水 225ml×20瓶/箱 生理盐水 9ml×20支/箱 假单胞菌CFC选择性培养基基础 250g/瓶 假单胞菌CFC选择性培养基基础添加剂 1ml×10支/盒 假单胞菌琼脂基础培养基基础/CN琼脂基础 250g/瓶 萘啶酮酸 1.5mg×10支/盒 甘油 1ml×10支/盒 营养琼脂斜面(限供汽运) 10ml×20支/箱 营养琼脂(NA) 250g/瓶 氧化酶试纸 10片/瓶 氧化酶试剂 1g/瓶 革兰氏染色液 10ml×4支/盒 乙酰胺培养基 1ml×10支/盒 葡萄糖酸钾培养基 1ml×10支/盒 精氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 赖氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 氨基酸脱羧酶试验对照 1ml×10支/盒 液体石蜡 2ml×10支/盒 硝酸盐蛋白胨水培养基 250g/瓶 明胶培养基(营养明胶培养基) 250g/瓶 山梨醇麦康凯(SMAC)琼脂 250g/瓶 亚碲酸钾溶液 0.25mg×10支/盒 头孢克肟溶液 0.005mg×10支/盒 改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂 90mm×10个/包 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-MUG(LST-MUG) 1000ml/瓶 含新生霉素的缓冲胰蛋白胨大豆肉汤(BTSB+N)基础 250g/瓶 三糖铁(TSI)琼脂 250g/瓶 三糖铁(TSI)琼脂斜面 4ml×10支/盒 革兰氏染色液 10ml×4支/盒 氧化酶试纸 10片/瓶 半固体琼脂 250g/瓶 半固体琼脂管 1ml×10支/盒 营养琼脂(NA) 250g/瓶 营养琼脂(NA) 90mm×10个/包 蛋白胨水 1ml×10支/盒 Kovacs氏靛基质试剂 10ml×4支/盒 鸟氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 赖氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 氨基酸脱羧酶试验对照 1ml×10支/盒 无菌液体石蜡 2ml×10支/盒 山梨醇发酵管 1ml×10支/盒 棉子糖发酵管 1ml×10支/盒 纤维二糖发酵管 1ml×10支/盒 缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR-VP培养基) 1ml×10支/盒 甲基红试剂 10ml×4支/盒 V-P试剂 10ml×4支/盒 西蒙氏柠檬酸盐琼脂斜面 4ml×10支/盒 大肠杆菌O157:H7套装生化鉴定管(10种)(SN0973) 12支/套×10套 无菌脱纤维绵羊血 100ml/瓶 肝浸液培养基 250g/瓶 胰蛋白胨琼脂培养基 250g/瓶 精氨酸脱羧酶试验 1ml×10支/盒 氨基酸脱羧酶试验对照 1ml×10支/盒 无菌液体石蜡 2ml×10支/盒 3%过氧化氢溶液 2ml×10支/盒 氧化酶试纸 10片/瓶 氧化酶试剂 1g/瓶 阿拉伯糖发酵管 1ml×10支/盒 葡萄糖发酵管 1ml×10支/盒 半乳糖发酵管 1ml×10支/盒 硝酸盐肉汤 250g/瓶 硝酸盐肉汤 5ml×10支盒 硝酸盐还原试剂 10ml×4支/盒
  • 仲恺农业工程学院预算139.54万元采购电动体视荧光显微镜、凝胶成像系统等仪器
    3月26日,仲恺农业工程学院现代种业创新研究院公开招标,购买电动体视荧光显微镜、梯度PCR仪等设备,预算139.54万元。  项目编号:GDJY21111201HG001  项目名称:现代种业创新研究院分子育种平台实验仪器采购项目  采购需求:  合同包1(现代种业创新研究院分子育种平台实验仪器采购项目):品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求1-1设施农业设备电动体视荧光显微镜1(台)详见采购文件1-2设施农业设备倒置荧光显微镜1(台)详见采购文件1-3设施农业设备凝胶成像系统1(台)详见采购文件1-4设施农业设备小型途冷冻离心机2(台)详见采购文件1-5设施农业设备高速多用途冷冻离心机1(台)详见采购文件1-6设施农业设备梯度PCR仪2(台)详见采购文件1-7设施农业设备快速组织破碎仪1(台)详见采购文件1-8设施农业设备恒温金属浴-带热盖1(台)详见采购文件1-9设施农业设备水浴锅2(台)详见采购文件1-10设施农业设备万分之一天平1(台)详见采购文件1-11设施农业设备百人之一天平2(台)详见采购文件1-12设施农业设备灭菌器1(台)详见采购文件1-13设施农业设备电热鼓风干燥箱2(台)详见采购文件1-14设施农业设备台式酸度计1(台)详见采购文件1-15设施农业设备超净工作台2(台)详见采购文件1-16设施农业设备台式摇床1(台)详见采购文件1-17设施农业设备超低温冰箱1(台)详见采购文件1-18设施农业设备全能型植物图像分析仪系统1(台)详见采购文件1-19设施农业设备自动考种分析及千粒重仪1(台)详见采购文件1-20设施农业设备相机1(台)详见采购文件1-21设施农业设备微距镜头1(台)详见采购文件1-22设施农业设备琼脂糖水平电泳槽1(台)详见采购文件1-23设施农业设备电泳仪1(台)详见采购文件  本合同包不接受联合体投标  合同履行期限:本合同在双方盖章后生效,设备使用期终身有效。  开标时间:2021年04月16日 09时30分00秒(北京时间)
  • 远慕总结:质粒DNA的提取方法
    (一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时,共价闭合环状质粒DNA的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,在而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕形成网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。[实验仪器与设备]1.恒温培养箱 2.恒温摇床3.台式离心机(最大转速4000rpm) 4.冷冻高速离心机5.高压灭菌锅 6.超净工作台7.微量移液器 8.eppendorf tupe、tip[实验材料]1.葡萄糖 2.三羟甲基氨基甲/烷(Tris)3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.氢氧/化钠5.十二烷基硫酸钠(SDS) 6.乙酸钾7.冰乙酸 8.氯/仿9.乙醇 10.胰RNA酶11.氨苄青霉素 12.蔗糖13.溴酚蓝 14.酚15.β巯基乙醇 16.盐酸17.含pUC18质粒的大肠杆菌附:试剂的配制1.溶液Ⅰ50mmol/L 葡萄糖5mmol/L 三羟甲基氨基甲/烷(Tris) TrisHCl (pH8.0)10mmol/L 乙2胺四乙酸(EDTA)(pH8.0)2.溶液Ⅱ0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合3.溶液Ⅲ5mmol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 ml4.TE缓冲液10mmol/L TrisHCl1 mmol/L EDTA(pH8.0)5.70%乙醇(放-20℃冰箱中,用后即放回)6.胰RNA酶将RNA酶溶于10mmol/L TrisHCl(pH7.5)、15mmol/L NaCl中,配成10mg/ml的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,保存于-20℃。7.终止液:40%蔗糖、0.25%溴蓝酚8.酚[实验步骤](一) 提取质粒1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中,接入含质粒的大肠杆菌,37℃振荡培养过夜。2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中,4000rpm,离心2min。3.吸去培养液,使细胞沉淀尽可能干燥。4.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中,充分混匀,室温放置10 min。5.加200μl溶液Ⅱ(新鲜配制),混匀内容物,将离心管放冰上5 min。6.加入150μl溶液Ⅲ(冰上预冷),盖紧管口,颠倒数次使混匀。7.1200rpm,离心15 min,将上清转至另一离心管中。8.向上清中加入等体积酚:氯/仿(去蛋白),反复混匀,12000rpm,离心5min,将上清转移到另一离心管中.9.向上清加入2倍体积乙醇,混匀后,室温放置5-10min。12000rpm离心5min。倒去上清液,把离心管倒扣在吸水纸上,吸干液体。10.用1ml70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀,振荡并离心,倒去上清液,真空抽干或空气中干燥。11.加50μl TE缓冲液,其中含有20μg/ml的胰RNA酶,使DNA完全溶解,-20℃保存。(二)琼脂糖凝胶电泳检测DNA[实验原理]琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应,DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极方向移动。不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(ethidum bromide ,EB),在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带,在电场中,pH8.0条件下,凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。琼脂糖凝胶有如下特点:(1) DNA的分子大小 在凝胶基质中其迁移速率与碱基对数目的常用对数值成反比,分子越大迁移得越慢。(2) 琼脂糖浓度 一个特定大小的线形DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率(u)的对数与凝胶浓度(t)成线性关系。(3) 电压 低电压时,线状DNA片段迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加,不同分子量DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长,随着电压的增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大,所加电压不得超过5v/cm。(4) 电泳温度 DNA在琼脂糖凝胶电泳中的电泳行为受电泳时的温度影响不明显,不同大小的DNA片段其相对迁移速率在4℃与30℃之间不发生明显改变,但浓度低于0.5%的凝胶或低熔点凝胶较为脆弱,最好在4℃条件下电泳。(5) 嵌入染料 荧光染料溴化乙锭用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料嵌入到堆积的碱基对间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状迁移率降低15%。(6) 离子强度 电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶,电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化。对于天然的双链,常用的几种电泳缓冲液有TAE、TBE等,一般配制成浓缩母液,室温保存,用时稀释。[实验仪器与设备]1. 恒温培养箱2. 琼脂糖凝胶电泳系统3. 高压灭菌锅 4. 紫外线透射仪[实验材料]1.三羟甲基氨基甲/烷(Tris) 2.硼/酸3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.溴酚蓝5.蔗糖 6.琼脂糖7.溴化乙锭 8.DNA marker9.DNA样品[实验步骤]1.缓冲液的配制① 5×TBE(5倍体积的TBE贮存液)配1000ml 5×TBE:Tris 54g硼/酸 27.5g0.5mol/l EDTA 20mlPh8.0② 凝胶加样缓冲液(6×)溴酚蓝 0.25%蔗糖 40%③溴化乙锭溶液(EB) 0.5μg/ml2.制备琼脂糖凝胶按照被分离DNA的大小,决定凝胶中琼脂糖的百分含量。可参照下表:琼脂糖凝胶浓度 线性DNA的有效分离范围0.3% 5-60 kb0.6% 1-20 kb0.7% 0.8-10 kb0.9% 0.5-7 kb1.2% 0.4-6 kb1.5% 0.2-4 kb2.0% 0.1-3 kb3.胶板的制备(1) 用高压灭菌指示纸带将洗静、干燥的玻璃板的边缘(或电泳装置所皿备的塑料盘的开口)封住,形成一个胶膜(将胶膜放在工作台的水平位置上,用水平仪校正)。(2) 配制足够用于灌满电泳槽和制备凝胶所需的电泳缓冲液(1×TBE)。准确称量的琼脂糖粉。缓冲液不宜超过锥瓶或玻璃瓶的50%容量。 在电泳槽和凝胶中务必使用同一批次的电泳缓冲液,离子强度或pH值的微小差异会在凝胶中形成前沿,从而大大影响DNA片段的迁移率 。(3) 在锥瓶的瓶颈上松松地包上一层厚纸。如用玻璃瓶,瓶盖须拧松。在沸水浴或微波炉中将悬浮加热至琼脂糖溶解。注意:琼脂糖溶液若在微波炉里加热过长时间,溶液将过热并暴沸。应核对溶液的体积在煮沸过程中是否由于蒸发而减少,必要时用缓冲液补充。(4) 使溶液冷却至60℃。加入溴化乙锭(用水配制成10mg/ml的贮存液)到终浓度为0.5ug/ml,充分混匀。(5) 用移液器吸取少量琼脂糖溶液封固胶模边缘,凝固后,在距离底板0.5-10mm的位置上放置梳子,以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。如果梳子距玻璃板太近,则拔出梳子时孔底将有破裂的危险,破裂后会使样品从玻璃板之间渗透。(6)将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶模中。凝胶的厚度在3-5mm之间。检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡。(7)在凝胶完全凝固后(于室温放置30-45分钟) ,小心移去梳子和高压灭菌纸带,将凝胶放入电泳槽中。低熔点琼脂糖凝胶及浓度低于0.5%的琼脂糖凝胶应冷却至4℃,并在冷库中电泳。(8)加入恰好没过胶面约1mm深的足量电泳缓冲液。4.加样DNA样品与所需加样缓冲液混合后,用微量移液器,慢慢将混合物加至样品槽中。此时凝胶已浸没在缓冲液中。 一个加样孔的最大加样量依据DNA的数量及大小而定,一般为20-30μl样品。已知大小的DNA标准,应同时加在凝胶的左凝胶的左侧和右侧孔内。确定未知DNA的大小。测量未知DNA的大小时,要所有样品都用相同的样品缓冲液。5.电泳在低电压条件下,线形DNA片段的迁移速度与电压成比例关系,但是,在电场增加时,不同相对分子质量的DNA片段泳动度的增加是有差别的。因此,随着电压的增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围随之减小。为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率,电场强度不应高于5V/cm。当溴酚蓝指示剂移到到距离胶板下沿约1-2cm处,停止电泳。
  • 超级干货~FFPE试剂国内外横评
    摘要本次横评使用AllSheng® 和国内外市场主流FFPE组织样本DNA提取试剂盒,进行提取效果的详细对比,主要指标核酸提取效率和片段大小及分布情况,前者通过Fluo-200荧光计定量,后者通过生物分析仪检测。结果显示,奥盛试剂盒在DNA提取率以及产物片段分布与其他品牌试剂盒表现一致,在一些样品上的表现甚至更优于同类产品。此外,我们对比了AllSheng® FFPE组织样本DNA提取试剂盒手动法提取与在Leap-Pure S24上全自动提取上进行自动化提取的差异。结果显示上述两种方法得到的核酸产量及片段完整性均无显著差异。试剂简介FFPE(Formalin fixation and paraffin embedding)样本,即福尔马林固定、石蜡包埋的组织样本,被视为病理科的“瑰宝”,因为它们保存了大量疾病相关信息,为医学研究提供了宝贵的数据来源,是目前长期保存病理样本的主要方法,过去的几十年中,按照该方法,全世界已经存档了大量生物样品。然而,由于技术的限制,FFPE样本在过去的几十年中并未得到充分的利用。随着科技的进步和研究的发展,现在对FFPE样本的应用已经越来越广泛。从最初的免疫组化用于疾病诊断和病理分型,到现在已经应用到各种组学研究中,FFPE样本的价值得到了更全面的发掘。每一个FFPE样本都是珍贵且独一无二的。在样本量有限的情况下,我们应当在尽可能减少损耗的同时释放其所蕴含的生物信息。现阶段在FFPE样本中提取核酸仍存在一定的挑战性。如石蜡样本在制作过程中导致的核酸降解,难以兼容下游qPCR、测序等应用,以及提取操作过程繁琐用时较长,试剂中二甲苯会危害实验员健康,其次二甲苯会影响组织切片质量,若使用不当,容易使组织产生收缩、硬化变脆等变化。因此我们需要在有限的样本中尽可能提取出高质量的核酸,同时实现提取操作自动化,在这里我们展示的是奥盛试剂盒从大鼠石蜡包埋组织样本和人体组织样本中提取基因组DNA的方法,与市面上同类型试剂盒提取效果进行对比,结果显示,DNA提取浓度、完整性等方面与国内外同类型产品表现一致。材料与方法试剂提取效率对比配制三个不同批次的试剂,根据FFPE切片/卷片组织面积的大小,刮取5-10张表面积为25-30mm2的卷片,分别进行手工法提取,等体积(50 μL)洗脱所有样本提取流程如图1所示,将所得纯化的DNA通过Fluo-200荧光计dsDNA高灵敏定量分析试剂盒精准定量提取浓度(dsDNA),并通过琼脂糖凝胶电泳验证DNA完整性,使用GAPDH基因(扩增片段长度分别为322bp和99bp)对DNA产物进行qPCR分析,所有样本的起始体积/量一致。图1 试剂整体操作流程。上图为奥盛试剂盒操作流程。其中手工法提取需要根据步骤按顺序添加试剂。而配合仪器进行自动法提取,只需要直接将样品加入到指定孔中即可,其余试剂均以提前加入其他孔位,操作相对来说更加便利各品牌试剂抽提效果对比奥盛试剂盒和其他国内外三种对标试剂盒分别提取不同人组织FFPE样本,等体积(50 μL)洗脱所有样本,将所得纯化的DNA通过Fluo-200荧光计和dsDNA高灵敏定量分析试剂盒精准定量提取浓度(dsDNA),琼脂糖凝胶电泳验证DNA完整性,以及通过Allsheng® NGS Universal DNA Library Prep Kit for Illumina试剂盒进行不同品牌提取产物的建库产量及峰型图分析对比。与同类产品提取人体石蜡包埋组织样本比较。自动化提取效果验证为确定全自动和手动抽提方法是否可以获得相同的核酸产量和质量,我们使用奥盛试剂盒进行手动抽提以及在Leap-Pure S24上全自动提取连续的FFPE样本。每个样本上样量一致,洗脱体积均为50μL,进行对比测试。结果与分析试剂抽提效率验证对三批提取产物浓度测定分析发现,AllSheng® 与A品牌试剂盒对不同FFPE组织样本的提取效率接近或超出对标试剂(图2-1),片段分布和片段完整性(用不同大小引物对产物进行扩增后,将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,均显示出完整的4条片段)与对标产品一致(图2-2、图2-3),对DNA产物进行GAPDH基因(扩增片段长度分别为322bp和99bp)qPCR分析,发现不同长度扩增片段浓度均无明显差异(图2-4)。图2-1 AllSheng® FFPE组织样本DNA提取试剂盒与对标试剂盒提取产物浓度图2-2 AllSheng® FFPE组织样本DNA提取试剂盒与对标试剂盒提取产物琼脂糖电泳结果图2-3 AllSheng® FFPE组织样本DNA提取试剂盒与对标试剂盒提取产物的片段完整性分析结果图2-4对提取产物进行不同片段的qPCR结果各品牌试剂抽提效果验证通过对不同人组织FFPE样本提取发现,四种试剂盒对不同样本的提取情况一致,奥盛试剂盒和其他国内外三种对标试剂盒对不同的样本提取效率有差异。在C样本提取中,奥盛试剂盒提取效率显著高于三种对标试剂盒(图3-1),三个样本的片段分布和片段完整性与对标产品一致(图3-2),将四种试剂盒提取产物投入相同量进行建库,奥盛试剂盒建库后的文库产量与另外三种试剂盒的文库产量无明显差异。图3-1四种试剂盒提取不同人组织FFPE样本的浓度图3-2 四种试剂盒提取不同人组织FFPE样本提取产物琼脂糖凝胶电泳图及完整性分析图实验组Qubit 浓度文库产量T品牌17.8ng/µ l445ngQ品牌13ng/µ l325ngA品牌17.1ng/µ l427.5ng奥盛17.5ng/µ l437.5ng图3-3 四种试剂盒提取产物建库实验结果自动化提取效果验证在Leap-Pure S24上全自动提取连续的FFPE样本与手工法提取对比。结果显示Leap-Pure S24提取产物浓度均可达到手工的90%以上(图4-2),琼脂糖凝胶电泳效果表明两种方式的提取产物片段分布一致(图4-3),用于下游应用(如使用Agilent Bioanalyzer系统进行DNA分析,以及qPCR和RT-PCR分析)的核酸质量基本一致(图4-4、4-5)。且在操作方式上Leap-Pure S24全自动核酸提取仪均需将样本放入试剂条中即可,手工操作时间较手工提取缩短90%以上。点击图片查看详情图4-1 全自动核酸提取与手工法提取效率对比图4-2 手工与S24提取产物的琼脂糖凝胶电泳结果图4-3 手工法与S24提取产物在安捷伦4150上片段分析结果图4-4 S24与手工的提取产物对不同大小扩增子的qPCR结果总结FFPE组织样本是目前国内外运用最为广泛的组织保存形式。目前,分子靶向治疗逐步成为肿瘤治疗的主流。在临床用药前对患者基因突变状态进行检测,可正确指导临床个体化用药。减轻患者经济负担.提高分子靶向药物治疗效果。因此,从FFPE样本中提取高质量的DNA进行分子靶标检测也逐渐受到关注。从FFPE组织样本中提取到能够有效扩增的DNA不仅适用于回顾性研究,也对疾病的诊断与鉴别、评估疾病预后和探索疾病分子机制具有重要意义。AllSheng® FFPE组织样本DNA提取试剂盒采用高效组织裂解缓冲液和无毒除蜡剂进行一步法脱蜡裂解,利用硅羟基磁珠与核酸分离纯化方法的原理,从石蜡包埋组织切片、石蜡块或福尔马林等固定液组织中快速高效的提取样品中的DNA,在浓度、片段分布与质量(下游实验)方面与对标试剂一致。试剂不含二甲苯等有害物质,并且操作简单,无需多次离心。该试剂盒适用于多种FFPE组织类型,可以进行手工抽提,也可以配套仪器进行全自动化操作。搭配我司Leap-Pure S24全自动核酸提取仪,可实现提取过程全自动化,极大减少了人工操作步骤。
  • 凝胶过滤层析中的葡聚糖凝胶
    葡聚糖凝胶简介月旭科技的交联葡聚糖产品名是Tandex,Tandex不溶于水,但有较强的亲水性,能迅速在水和电解质溶液中吸水膨胀,而且在碱性环境中比较稳定,所以用适当浓度的碱液(一般为0.2mol/L)可除去吸附在凝胶上的污染物。Tandex G是由葡聚糖和3-氯-1,2-环氧丙烷(交联剂)以醚键交联形成的具有三维多孔网状结构的高聚物,其交联度由交联剂的百分比决定。Tandex G的种类主要有:G10、G15、G25。G后面的阿拉伯数字表示每克干胶吸水量(g水/g干胶)的10倍。例如:Tandex G25表示该凝胶在吸水膨胀时每克干胶能吸水2.5g。G反映凝胶的洗水量、排阻极限及分离范围。例如:Tandex G10的网孔结构紧密,孔径小,吸水率低,排阻极限小,只能分离分子量较小的物质;而Tandex G25的孔径大,吸水率高,可分离分子量较大的物质。因强氧化剂和强酸可使Tandex中起交联作用的糖苷键水解断裂,所以在使用时要防止其与强氧化剂和强酸接触。在中性条件下,Tandex悬浮液可进行高温煮沸溶胀和消毒,其性质不受影响。在Tandex G25中加入亲脂性的羟丙基基团,形成烷基化葡聚糖凝胶Tandex LH型。它是一种同时具备吸附性和分子筛功能的独特凝胶介质,型号是Tandex LH-20,适用于有机溶剂洗脱,分离脂溶性物质,具有高处理量,可分离结构非常相近的分子,而且分离效果好。Tandex G系列葡聚糖凝胶产品性能Tandex LH-20产品性能
  • 月旭层析填料选择指南
    《疫苗纯化 -- 病毒类疫苗纯化》凝胶过滤介质Tanrose 4FF或Tanrose 6FF是经典的病毒类疫苗纯化方法,可以去除培养基中的杂蛋白、处理量大、快速的特点。柱高一般40-70cm,上样量一般为10-15%。目前使用此方法生产的疫苗品种有:乙肝、狂犬、出血热、流感等。《纯化 -- 重组蛋白》His标签重组蛋白可以很方便用镍 IDA琼脂糖凝胶FF(Ni Tanrose 6FF IDA)或镍NTA琼脂糖凝胶FF(Ni Tanrose 6FF NTA)分离,填料已经螯合好了镍离子,使用非常方便,有更高的吸附载量,特异性更强,可以选择多种洗脱方式,是纯化这类融合蛋白的zui佳工具。GST融合蛋白可以用GST琼脂糖凝胶FF(GST Tanrose 4FF)分离,然后再用肠激酶或凝血酶等酶解就得到表达的产物。凝血酶可以用肝素琼脂糖凝胶FF(Heparin Tanrose 6FF)或苯甲脒琼脂糖凝胶FF(Benzamidine Tanrose 4FF)分离。《纯化 -- 血浆蛋白》阴离子交换在血浆蛋白的纯化中应用非常广泛,结合低温乙醇法在丙种球蛋白纯化后期用DEAE-琼脂糖凝胶FF(DEAE Tanrose 6FF)吸附二聚体等杂质从而达到提高产品纯度的目的,同样也可以在白蛋白纯化过程中使用阴离子交换吸附PKA、微量的IgG以及聚体,在凝血VIII因子纯化过程中使用大孔径的Q琼脂糖凝胶(Solid Q)可以增加载量和回收率。《纯化 -- 核酸、病毒》核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子,和质粒DNA一样,可用分离大分子的Tanrose 4FF 凝胶过滤介质去除杂蛋白,再配合离子交换 Q琼脂糖凝胶(Q Tanrose 6FF)分离核酸。也可以用DEAE琼脂糖凝胶FF(DEAE Tanrose 6FF)或Q琼脂糖凝胶FF(Q Tanrose 6FF)富集和分离后再上琼脂糖凝胶6B或6FF得到纯的病毒。《去除 -- 蛋白中的核酸》核酸带阴电荷,在初步纯化时利用阳离子交换介质如 SP 或CM Tanrose FF 结合目标蛋白,可除去大量核酸。核酸在高盐下会和蛋白解离,疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白,在纯化蛋白的同时去除核酸。利用核酸酶将核酸切成小片断,用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。《纯化 -- 中草药有效成分》中药的化学成分极其复杂。传统中药多是煎熬后服用,有效成分多较为亲水,包括生物碱、黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸、多糖、肽和蛋白质。灵活及综合性地利用多种层析方法。如离子交换、分子筛、反相层析,更容易分离到单一活性成分。葡聚糖凝胶LH-20(Tandex LH-20)同时具备吸附性层析和分子筛功能,例如:用甲醇分离黄酮甙,三糖甙先被洗下来,二糖甙其次,单糖甙随后,zui后是甙元。葡聚糖凝胶LH-20(Tandex LH-20)可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂,广泛用于各种天然产物的分离,包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。生物碱在酸性缓冲液中带正电,成为盐,SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反,黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中,在Q阴离子交换柱上分离效果良好。《样品净化 -- 脱盐、小分子去除》使用凝胶过滤介质Tandex G10、G15、G25等去除小分子,效率高,处理量可达床体积30%。只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液,就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子,简单直接。由于只是去除小分子,柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分种至半小时完成。月旭Tandex G25系列介质专为蛋白质脱盐而设计。病毒、DNA疫苗或质粒可以用琼脂糖凝胶6B除盐或交换缓冲液,蛋白、抗体等可以用葡聚糖凝胶G25快速去盐和交换缓冲液。
  • 岛津积极参与2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议
    岛津积极参与2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析会议 由国家自然科学基金委、中国化学会联合主办的&ldquo 2010年微纳尺度分离和分析技术学术会议暨第六届全国微全分析学术会议(2010 Symposium on Micro/nano-scale Separation and Analysis & 6th Chinese Conference on Micro Total Analysis System)&rdquo 于2010年10月17&mdash 20日在上海复旦大学隆重召开。本次学术会议由杨芃原等教授倡议,由复旦大学和上海交通大学联合承办。期间,2009年诺贝尔化学奖得主、耶鲁大学Thomas A Steitz教授,国家自然基金委化学部常务副主任梁文平,分析化学学科主任庄乾坤院士、姚守拙院士、陈洪渊院士、张玉奎院士、江桂斌院士给大家带来了精彩的大会报告。本次会议是我国微/纳技术近十年研究成果的一个阶段性总结,也对未来该技术的发展方向以及对其他学科的影响进行了展望。 在这次学术盛会中,岛津公司积极参与,为大会提供了赞助。上海分析中心赵宁伟先生做了题为《MultiNA微芯片毛细管电泳》的报告,就MultiNA的原理,特点和应用进行了具体的介绍,与会者反响强烈。另外,赵宁伟先生的一篇题为《MultiNA毛细管电泳对DNA外显子的定性与定量》也被本次大会收录。 MultiNA微芯片毛细管电泳装置,解决了用户对于琼脂糖凝胶电泳的不满,提供了基因分析的新平台,具有以下主要特长: 全自动分析 可自动分析最多至108个样品。 低运行成本 微芯片的重复使用/使用专用试剂套件,实现了可与琼脂糖凝胶电泳匹敌的低分析成本。 不使用有害物质溴化乙啶的高灵敏度检测 不使用有害的溴化乙啶。使用SYBR色素,能够以约10倍以上的灵敏度进行检测。 维护简便 分析结束后自动进行清洗,可继续下一个样品的分析。即使分析在夜里或周末结束也没有问题。 作为有着135年悠久历史的分析仪器界最大供应商之一,岛津公司一直秉持着&ldquo 为人类做贡献&rdquo 的宗旨,近年来一直致力于生命科学仪器的开发与推广。岛津现有的产品线覆盖了生命科学的很多领域,相信一定会为21世纪生命科学的发展起到巨大的推动作用。
  • 【阿拉丁】溴化乙锭——美丽而危险
    溴化乙锭——美丽而危险 溴化乙锭(Ethidium bromide,EtBr)是一种经典的荧光染料,在分子生物学研究中有着广泛应用。其化学结构为三苯并咪唑,能够通过嵌入DNA或RNA 的碱基对之间进行非共价结合,从而显著增强荧光信号。这种染料最初作为兽医用药被发现,因其具有强效的诱变性和便捷的核酸染色能力,现已广泛应用于核酸检测、电泳分析及多种生物医学实验中。 一、 化学特性与结合机制 溴化乙锭是一种小分子染料,能够嵌入双链DNA和RNA的碱基对之间,显著增强其荧光强度。与双链 RNA 结合时,荧光强度可增强21倍;与双链DNA 结合时,荧光强度可增强25倍。虽然溴化乙锭在结合单链和三链DNA时亲和力较低,但其结合特性仍足以抑制DNA聚合酶的活性。这些特性使其成为研究 DNA复制、修复及转录的重要工具。 二、 溴化乙锭在科研中的应用 核酸检测 溴化乙锭在分子生物学实验中广泛用于核酸检测,特别是在琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳中。通过在凝胶中加入溴化乙锭,研究人员可以在紫外光下观察到清晰的DNA或RNA条带,从而确定核酸的存在和大小。这种方法简便且高效,是实验室常规操作之一。 荧光定量分析 溴化乙锭的荧光特性使其在荧光定量分析中得到了广泛应用。例如,在定量 PCR和定量RT-PCR中,溴化乙锭通过测量荧光强度来定量分析DNA或RNA。溴化乙锭的高荧光增强效应显著提高了这些分析方法的灵敏度和准确性,广泛用于基因表达研究、病毒载量检测等领域。 细胞膜完整性评估 在细胞生物学研究中,溴化乙锭常用于评估细胞膜的完整性。由于溴化乙锭不能穿透完整的细胞膜,因此只有在细胞膜受损时才能进入细胞并与核酸结合发出荧光。这一特性使溴化乙锭成为检测细胞死亡和细胞膜损伤的有力工具,可用于药物筛选和细胞毒性评估。 线粒体 DNA 研究 溴化乙锭在线粒体DNA研究中也发挥着重要作用。线粒体DNA是研究细胞代谢、遗传疾病和衰老过程的重要对象。溴化乙锭能够有效地分离和分析线粒体DNA,为深入研究其功能提供了工具。例如,在研究线粒体DNA复制和突变时,溴化乙锭可用于追踪和定量分析线粒体DNA。 基因组编辑和转基因研究 在基因组编辑和转基因研究中,溴化乙锭也起到了重要作用。在使用 CRISPR-Cas9等基因编辑技术时,研究人员需要精确检测和定量目标基因的编辑效果。溴化乙锭染色结合荧光显微镜观察,可以帮助研究人员评估编辑效率和识别成功编辑的细胞。此外,在转基因生物的筛选过程中,溴化乙锭可用于检测转基因的插入和表达情况。 三、 光谱特性 溴化乙锭具有独特的光谱特性,其紫外/可见光吸收峰位于多个波长处,包括210 nm、285 nm、316 nm 和343 nm。当溶解在不同溶剂中时,这些吸收峰会发生变化。例如,在水中溶解时,吸收峰位于480 nm,而在甲醇中溶解时则位于520 nm。当与核酸结合时,溴化乙锭的吸收峰会发生红移(向更长波长移动)。 荧光特性 溴化乙锭的荧光特性在不同溶剂和环境中有所不同。在水溶液中,溴化乙锭的激发波长为526 nm,发射波长为605 nm。在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中,其激发波长为360 nm,发射波长为590 nm。此外,在10 mM TBE 缓冲液(pH 8.0)中,其激发波长为525 nm,发射波长为600 nm。随着溶剂极性的降低,溴化乙锭的荧光产量增加,使其在各种生物实验中具有广泛应用。 四、 储存和处理 溴化乙锭应在避光、干燥的条件下储存,以确保其稳定性。在室温下储存时,溴化乙锭粉末可保持稳定至少两年。处理溴化乙锭时应采取适当的安全措施,因为它是一种已知的诱变剂和潜在的致癌物。废弃的溶液和材料应按照规定的生物危害废弃物处理程序进行处理。 五、 配制溶液 在室温下,溴化乙锭在水中以10 mg/mL 的浓度溶解,形成红色溶液。它在水中最多可溶解到20 mg/mL,在乙醇中可溶解到2 mg/mL。水或PBS中的储备溶液在避光条件下至少可稳定两年。 六、 电泳染色步骤 在电泳实验中,溴化乙锭通常以0.5mg/mL 的浓度添加到凝胶和电泳缓冲液中。电泳后,可以将凝胶浸入含有溴化乙锭的缓冲液或水中染色30-45分钟。在某些情况下,可以通过将染色后的凝胶浸泡在水或1 mM MgSO4中进行脱色,以减少背景荧光,从而提高DNA的检测灵敏度。 七、 安全注意事项 由于溴化乙锭具有诱变和致癌风险,处理时应佩戴防护手套和护目镜,并在通风良好的地方进行操作。所有含有溴化乙锭的废弃物应按生物危害废弃物处理,确保对环境和人体的安全。 溴化乙锭作为一种重要的分子生物学研究工具,其独特的荧光特性和广泛的应用领域使其在核酸检测和分析中发挥着关键作用。通过对其特性的深入了解和正确的使用方法,可以更好地应用溴化乙锭进行科学研究。
  • 紧急采购:90余类仪器、试剂耗材批量采购
    湖南某单位是一家俄语区国家实验室耗材、成套设备及通风系统的配套商,现需采购一批仪器设备及试剂,需要国内优质的生产企业对接,满足要求的生产厂商可与之联系。同时该单位将于2022年4月25日下午的“后疫情时代国产仪器的出海机会”网络研讨会上进行线上的采购交流会,届时会现场讲解采购需求及注意事项,满足要求的国内生产厂商也可点击报名参与下。采购产品清单如下(联系方式见文末):Маркер гидрофобный ImmEdge Pen 免疫组化笔RNA Cleanup Kit (10 μg)трис(гидроксиметил)аминометан/Tris base, 99% 三羟甲基氨基甲烷Агароза 高纯度低电渗琼脂糖1-е антитела第一抗体Ligation Sequencing Kit (Q20+) 连接测序试剂盒 (Q20+)MinION Flow Cell (R10.4) 测序芯片Ultra-Long DNA Sequencing Kit超长DNA测序试剂盒Spermine tetrahydrochloride精胺四盐酸盐Short Read Eliminator Kit XL短读消除试剂盒 XLShort Read Eliminator Kit 短读消除试剂盒Gentra Puregene Tissue Kit组织试剂盒NEBNext RNA Depletion Core Reagent Set RNA 去除核心试剂套装NEBNext Small RNA Library Prep Set 1 小 RNA 文库制备套装 1Monarch HMW gDNA Tissue Lysis Buffer Monarch HMW gDNA 组织裂解缓冲液Monarch Protein Separation Solution Monarch 蛋白分离Monarch gDNA Wash Buffer RIPA裂解液Monarch gDNA Elution Buffer II gDNA 洗脱缓冲液 IIMonarch DNA Capture BeadsMonarch Bead RetainersMiSeq Reagent Kit v2 (50 cycle) 基因测序试剂盒v2 (50循环)Glycerin (glycerol), 50% (v/v) Aqueous Solution 甘油(甘油),50% (v/v) 水溶液Ethanol, Pure (200 Proof, anhydrous) 乙醇,纯(200 证明,无水)Вода UltraPure, не содержащая ДНКаз / РНКаз 不含 DNase/RNase 的超纯水Картридж BluePippin 2% агароза, без крас.,100-600 п.о., 层析柱 BluePippin 2% 琼脂糖,无染料,bp 100-600,Картридж BluePippin 3% агароза, без крас.,100-200 п.о., 层析柱BluePippin 3% 琼脂糖,无染料,bp 100-200,1-Bromo-3-chloropropane 1-溴-3-氯丙烷c dna synthesis kitc DNA合成试剂盒Reliance Select cDNA Synthesis cDNA 合成试剂盒N,N-Dimethylformamide N,N-二甲基甲酰胺MiSeq Reagent Kit v3 MiSeq 试剂盒 v3SP6 RNA Polymerase (20 U/µL) SP6 RNA 聚合酶(20 U/µL)dUTP Solution (100 mM) dUTP 溶液(100 mM)Epredia™ Neg-50™ Frozen Section Medium Epredia™ Neg-50™ 冷冻切片培养基Обратная транскриптаза Mint 逆转录酶Эмбриональная бычья сыворотка (FBS, происхождение Южная Америка), 500 мл (-20°) 胎牛血清(FBS,原产南美),500 毫升(-20°)Agarose, low gelling temperature Type VII-A, 琼脂糖,低胶凝温度 VII-A 型,Dulbecco′s Phosphate Buffered Saline, Dulbecco 的磷酸盐缓冲液Sony Sorting Chip-70um for SH800 and MA900 (box of 40) 适用于 SH800 和 MA900 的Sony Sorting Chip-70um(40 盒)GM 6001 伊洛马司他 基质蛋白酶抑制剂Aphidicolin 艾菲地可宁Glutaraldehyde solution 戊二醛溶液Click-iT™ EdU Cell Proliferation Kit for Imaging, Alexa Fluor™ 488 dyeGreen features 细胞增殖检测试剂盒Grid-Stick Glue (For recoating Grid-Stick)HEPES 4-羟乙基哌嗪乙磺酸High SensitivityDNA Kit高灵敏度 DNA 试剂盒RNA 6000 Pico Kit RNA 6000 Pico 试剂盒RNA 6000 Nano Kit RNA 6000 纳米试剂盒Goat anti-Rat IgG (H+L) Cross-Adsorbed Secondary Antibody, Alexa Fluor™ 546 山羊抗大鼠 IgG (H+L) 交叉吸附二抗,Alexa Fluor™ 5465ml tips 吸头Axygen TF-1000Axygen T-300Стекла предметные Superfrost plus с углами 90° со шлифованной кромкой с зоной для маркировки белого цвета Superfrost plus 带有 90° 角的幻灯片和带有白色标记区域的磨边шт Планшет для 25 предметных тонких стекол, прозрачная крышка, ПЭ, 用于 25 个薄载玻片的板、透明盖、PE、Планшет на 50 ст. тонких предм. стекол, ПЭ, прозрачная крышка, белый, 用于 50个薄载玻片的板、白色、透明玻璃Grid-Stick KitGrid-Stick, uncoated 无涂层Staining Pipettes with 2 plugs 带 2 个塞子的染色移液器Filter Tips 10μl, 50 racks 带滤芯吸头Filter Tips 200μl, 50 racks 带滤芯吸头Filter Tips 1000μl, 50 racks 带滤芯吸头Дозатор 0,5-10 мкл, 8 каналов, biohit proline plus 8通道移液器Дозатор 10-100 мкл, 8 каналов, biohit proline plus8通道移液器Дозатор 30-300 мкл, 8 каналов, biohit proline plus8通道移液器Охлаждающий ПЦР-штатив, 0,2мл 低温PCR架 有机玻璃Охлаждающий ПЦР-штатив, 2мл 低温PCR架 有机玻璃Система обратного осмоса Angstra R-5C 实验室反渗透纯水机Редуктор давления 隔膜式减压阀 DRVN 1.5-6 barМанометр 压力表Картридж B150 Миди 滤芯椰壳活性炭 140X330Мешок 20л储水袋Комплект промывки 反渗透及管路清洗组件УФ лампа 双波长紫外灯Картридж умягчителя软化柱картридж сверхчистой воды 超纯化柱Патрон предварительной обработки预处理柱2 модуля обратного осмоса (RO модуля)反渗透柱SterilePlus (стерильный фильтр, Sartopore® 2 150)Galileo 1214 Mini Gel Unit 水平电泳迷你凝胶系统 Pbs без кальция и магния Dulbecco′s Phosphate Buffered Saline D5652-10L杜氏磷酸盐缓冲盐水 PBS 不含钙和镁Пробирки с оптически-прозрачной плоской крышкой объемом 0,2 мл 带光学透明平盖的试管,0.2 mlСуспензия магнитных частиц CleanMag DNA - 5 мл (пробирка 1 мл - 5 шт) BC35S 磁性粒子悬浮液 CleanMag DNA - 5 ml(管 1 ml - 5 pcs)пробирка 1 мл 悬浮液管1mlШтатив RA-20002 Компания Хеликон Артикул RA-20002 pcr变色冷冻盒Магнитный штатив для пробирок объемом 1.5-2.0 мл pcr PCR冷冻盒Суспензия магнитных частиц CleanMag DNA - 5 мл (пробирка 1 мл - 5 шт) BC35S磁力冷冻盒Штатив RA-20002 Компания Хеликон Артикул RA-20002 离心管托盘VWR (Amresco) Агароза (Biotechology Grade) Am-O710-0.5 500г VWR(Amresco)琼脂糖(生物技术级)Am-O710-0.5 500gEncyclo полимераза PK002L 0X смесь полимераз Encyclo, 5 x 100 мкл10X Encyclo буфер, 5 x 600 мкл 1000 р-ций объемом 25 мкл环聚合酶 PK002L 0X 环聚合酶混合物,5 x 100 µl10X Encyclo 缓冲液,5 x 600 µl 1000 25 µl p-tions 采购单位:湖南中星科技有限公司联系人:樊先生(总经理)联系电话:15388055177邮箱:282794290@qq.com还需要其他的试剂,请优质生产厂家直接发英文目录至邮箱,或添加微信(同手机号)。
  • 赛分科技推出填料新品-MabPurix亲和层析填料
    近日,赛分科技成功开发了首款亲和层析填料——MabPurix™ Protein A,该填料以琼脂糖凝胶为基质,表面键合配体Protein A,主要应用于生物制药领域——抗体的纯化。作为全球色谱产品最为完善的企业之一以及生物分离色谱的领航者,赛分科技十分重视新产品研发,目前的色谱分离填料已涵盖反相、正相、离子交换、手性、体积排阻、亲和、HILIC、离子排斥、配体交换等十几种类型,产品品种齐全,性能优越。其中,色谱填料产品包括硅胶基质和聚合物基质两大类,几十小类,可根据客户实际需要分别应用于不同的领域中。本次所开发的MabPurix™ Protein A填料是赛分科技推出的首款亲和层析填料,也是首次推出的以琼脂糖凝胶为基质的填料,此前,赛分科技的填料基质包括球形硅胶、不定形硅胶、聚甲基丙烯酸酯、PS/DVB等。与其它基质相比,琼脂糖基质填料具有更好的生物相容性。MabPurix™ Protein A的加入使得赛分科技的产品品种更加齐全,尤其对于生物分离色谱产品家族里,MabPurix™ Protein A的成功推出具有里程碑的意义。 赛分科技的聚合物基质填料家族 MabPurix™ 亲和层析填料 MabPurix™ 亲和层析填料专为大规模抗体纯化而设计,是由高纯度Protein A与高交联度琼脂糖偶联后的产物,用于从血清、腹水、细胞培养上清和细胞提取物中分离和纯化多种哺乳动物不同亚型的抗体或包含抗体Fc片段的基因工程重组蛋白。Protein A是金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白,单链,它通过与免疫球蛋白的Fc区相互作用,可结合大多数哺乳动物的IgG,尤其对人IgG1、IgG2、IgG4,小鼠IgG 2a和IgG 2b具有高亲和力。MabPurix™ Protein A亲和层析填料具有高稳定性、高选择性、高效率的特点,是抗体纯化的优选。 ● 可根据用户的需要提供各种规格的预装柱;● 强化基质保证了高流速、低背压;● 特殊设计的定向键合技术保证了高的载量;● 可耐受苛刻的在线清洗条件;● 可以很容易的由小规模的实验室制备向大规模的工业化生产进行线性放大。 更多信息请登录:http://www.sepax-tech.com.cn/products/gytl/juhe/infinity/99.html 关于赛分科技 赛分科技有限公司(Sepax Technologies, Inc)总部位于美国特拉华州高新技术开发区,致力于开发和生产药物与生物大分子分离和纯化领域的技术和产品。赛分科技是集研发、生产和全球销售为一体的实业型企业。公司主要产品为液相色谱柱及耗材、固相萃取柱(SPE)及耗材、液相色谱填料以及分离纯化仪器设备。在液相色谱领域里,赛分科技已开发出了100多种不同型号的液相色谱材料,涵盖了反相、正相、超临界(SFC)、手性(Chiral)、离子交换、体积排阻、亲和、HILIC等各种类别,为世界范围内液相色谱产品最为完善的企业之一。 赛分科技的创新技术使之生产出具有最高分辨率及最高效的生物分离产品,包括体积排阻、离子交换、抗体分离、和糖类化合物分离色谱填料和色谱柱,可广泛地应用于单克隆抗体、各种蛋白、DNA、RNA、多肽、多糖和疫苗等生物样品的分析、分离和纯化。赛分科技先进的技术和完善的产品线已使赛分成为全球生物分离的领航者。 公司网站:www.sepax-tech.com.cn www.sepax-tech.com
  • 华大智造推出磁珠新品
    核酸的高电荷磷酸骨架要比其他生物大分子如蛋白、多糖、脂肪等更具有亲水性,所以利用强亲水性表面的硅羟基磁珠可以有效捕获核酸,实现核酸与其他生物大分子的分离。硅羟基磁珠表面的硅羟基能够与溶液中的核酸通过氢键和静电作用发生特异性结合,在高盐条件下与核酸结合,在低盐条件下被洗脱,从而实现核酸分子的快速分离。华大智造最新推出的硅羟基磁珠NEOH3000 Ⅰ是一款专门用于核酸提取和纯化的磁珠,属于多分散磁珠,表面修饰有大量的硅羟基基团,具有亲水性好、捕获效率高、容易在粘稠样本中分散等特点,尤其适用于从血液、唾液等样本中提取大量的gDNA。产品亮点● 磁响应性快,满足自动化提取需求;● 磁珠不规则结构,易于分散和重悬,特别适用于血液、唾液等粘稠样本的提取;● 氧化硅层包裹完整,性能稳定性好。性能表现1采用以硅羟基磁珠NEOH3000 Ⅰ为关键原料的血液基因组DNA提取试剂盒对冻存多年的白膜层细胞进行提取后,提取产物经1%琼脂糖凝胶电泳分析,表明本试剂盒可以高效从冻存多年的白膜层样本中提取gDNA。图1,从冻存多年的白膜层样本中提取的gDNA上样于1%琼脂糖凝胶电泳图。A1-A4是冻存5年的白膜层样本,C1-C6是冻存4年的白膜层样本;M1和M2分别是λ-Hind Ⅲ digest DNA Marker和50bp DNA Ladder Marker。性能表现2采用以硅羟基磁珠NEOH3000 Ⅰ为关键原料的血液基因组DNA提取试剂盒对冻存的全血、新鲜唾液等样本进行提取,提取的产物分别进行产量和纯度的计算,结果见表1。结果表明:本试剂盒可以从血液、唾液样本中提取高纯度、高产量的gDNA。表1:提取结果样本类型A260/A280A260/A230产量(µg)冻存的抗凝全血1.831.9410.2冻存的抗凝全血1.831.939.1冻存的抗凝全血1.821.937.3冻存的抗凝全血1.842.0212.6新鲜的唾液1.771.579.94新鲜的唾液1.801.6413.64新鲜的唾液1.911.526.3新鲜的唾液1.841.7314.24新品有试用活动,可导华大智造官方公众号了解详情。
  • 荧光定量PCR之RNA提取及质量评估
    分子生物学研究对提取RNA要求较高,纯度高、完整性好、含量高的RNA是获得实验成功的关键和前提。小编给各位小伙伴总结了以下RNA提取常见问题及RNA质量的评估方法:常见的RNA提取方法有异硫氰酸胍-苯酚法(Trizol法)、离心柱法和磁珠法。Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取最常用的方法。Trizol法裂解能力较强,尤其适合小样本及特别难提取的组织,如皮肤,动物结缔组织等总RNA的提取;另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂,还可以用于植物组织、细菌、真菌等组织的提取。离心柱法是一种十分稳定的RNA提取方法,电泳条带较为均一,但分子量较小的RNA会被过滤掉。磁珠法是使RNA与纳米磁珠结合,在磁场作用下,磁珠-核酸复合物与液体分离,再把核酸从磁珠上洗脱下来。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还可以使用CTAB法进行总RNA的提取。那么在RNA提取过程中如何防止RNA降解,保证RNA质量?如何避免RNA降解?1.避免RNA酶的产生:A 、避免内源性RNAase:内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因。收集样本时,内源性RNA酶释放,降解RNA,降解速度与酶含量和温度有关,所以收集样本时必须马上进行内源RNA酶的失活。内源性RNAase失活方法:①迅速研磨破碎后加入裂解液中保存;②立即切成小块投入液氮中保存;③使用RNAlater保护剂等。B、避免外源性RNAase:使用无RNase的塑料制品和枪头,玻璃器皿要消毒避免交叉污染,注意:戴帽子、戴口罩、橡胶无菌手套,在清洁灰尘少的试验台提取。2.提高RNA提取效率:A 、组织RNA提取:选用新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好;如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,待组织解冻后,用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,进行匀浆处理。注意:速度不要太快,要有间隙,否则由于摩擦产热,RNA遇热会加速降解。如果一次做多个标本的RNA提取,也要这样做,更不能急。后面的步骤和细胞RNA提取一样。B、培养细胞的RNA提取:贴壁细胞,需要先用胰酶消化后,然后收集到离心管中,离心,去上清然后用PBS多洗2-3次,以去除多余的胰酶。悬浮细胞,直接用吸管或者加样枪吹打,以使细胞基本可以被吹下来。然后离心去上清,不需要用PBS洗。如何确认RNA质量的好坏?1. RNA溶液纯度的检测:RNA溶液在280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景(溶液浑浊度)、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般我们通过OD260/OD280的值来判断RNA纯度:OD260/280的值在1.9-2.1之间,认为RNA纯度较好;OD260/280的值小于1.8时,表明蛋白质杂质较多;OD260/280的值大于2.2时,表明RNA已经降解;注意:如果用TE溶液洗脱RNA,会使OD260/280的值偏大。2. RNA完整性的检测:1)通过琼脂糖凝胶电泳检测28s和18s条带,28s条带宽度为18s条带的两倍;2)通过色谱方法检测,RIN值:28s/18s为1.8-2.0,表明RNA完整性较好,基本无降解发生。RNA电泳带型的特征:☑RNA应该呈现出3条rRNA带。分别是5、18、28SrRNA条带。☑28s亮度是18s亮度的一倍,其他比例关系均提示RNA有一定程度的破坏。☑不能有多的带出现,出现多的带有两个可能:一是DNA污染带 二是rRNA破坏断裂带。☑rRNA之间可以看到很淡的、雾蒙蒙的mRNA拖带。☑ 琼脂糖凝胶被RNAase处理后电泳带基本消失,没有明显的、边缘清晰的带残留(如果有残留就是明显的DNA污染,而且是很大量的 DNA污染。参考文献:[1]Vermeulen J, De Preter K, Lefever S. Measurable impact of RNA quality on gene expression results from quantitative PCR[J]. Nucleic Acids Res 39 2011 :e63.Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司,配备高品质温度模块,采用光纤和CMOS的检测系统,高能LED的激发,提供高灵敏和可靠的数据。▲ Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统
  • 《AM》清华大学刘凯研究员、张洪杰院士实现高纯稀土产品主动生物合成
    稀土材料在生物医学和高科技领域发挥着不可替代的作用。然而,典型的稀土元素开采和提取方法往往因涉及危险化学品而导致严重的环境问题和资源浪费。尽管生物采矿展示了优雅的替代方案,但由于提取金属的微生物和清除稀土的大分子工具不足,可持续地分离和回收自然界中的稀土仍然面临巨大挑战。为了直接从稀土矿石中获得高性能的稀土材料,需要开发新一代生物合成策略来高效地制备稀土元素(REEs)。在此, 清华大学刘凯研究员、张洪杰院士团队建立了一种微生物合成体系实现了高纯稀土产品的主动生物合成。此外,通过与结构工程蛋白生物偶联的亲和柱,获得了良好的Eu/Lu和Dy/La分离,纯度分别为99.9%(Eu)、97.1%(La)和92.7%(Dy)。更重要的是,原位一锅法合成的稀土依赖的甲醇脱氢酶得到了很好的治理,并独占地吸附了稀土尾矿中的La、Ce、Pr和Nd,具有先进的生物催化作用,具有高附加值的应用前景。因此,开发的新型生物合成平台提供了一个有洞察力的路线图,以扩大生物铸造方面的底盘工程范围,并生产与稀土相关的有价值的生物制品。该研究以题为“The Construction of Microbial Synthesis System for Rare Earth Enrichment and Material Applications”的论文发表在《Advanced Materials》上。在这里,成功地筛选和收集了126株新型稀土吸附菌株,作为轻、中、重稀土的微生物合成系统,实现了高纯度稀土生物产品的制备。新型稀土亲和生物材料通过结构蛋白DLanM的生物偶联,实现了Eu/Lu和Dy/La的良好分离,分别得到99.9%的Eu、97.1%的La和92.7%的Dy。最重要的是,生物工程MDHs可以作为La、Ce、Pr和Nd的选择性吸附剂,显示出在稀土产品中的先进应用。因此,这些生物合成策略为稀土研究建立了一个新的范式,并将促进稀土的高价值应用。图1. 稀土微生物分离筛选及稀土生物材料高值化利用 有效吸附和生物合成稀土的菌株筛选 为了获得能特异吸附稀土进行生物合成的微生物,从所有采集的样品中通过富集培养和鉴定方法分离出126株细菌(命名为清华稀土微生物,TR-1至TR-126)。将获得的菌株的16S rRNA序列与GenBank上的已知序列进行比较分析。结果表明,稀土尾矿场及原矿伴生区中假单胞菌为优势种。假单胞菌属,如铜绿假单胞菌、恶臭假单胞菌、荧光假单胞菌和斯图策尔假单胞菌都能在其微环境中合成无机纳米颗粒。因此,选择收集的菌株(即TR-21、TR-22、TR-27和TR-54)来测试它们对稀土的吸附能力。电感耦合等离子体发射光谱分析结果表明,TR-21对14种稀土元素的吸附能力最强。TR-21对Sm(Ⅲ)、Eu(Ⅲ)和Tb(Ⅲ)具有较高的吸附容量,但对La(Ⅲ)的吸附能力最弱。用Tb(III)、Dy(III)和Ho(III)在细胞外矿化的稀土盐都是细小的线性形状,长度约为100 nm,并在细胞外使用Er(III)、Tm(III)、Yb(III)和Lu(III)形成层状或水凝胶状的生物合成。在HRTEM下没有观察到该生物合成的明显晶格结构。用高分辨电子能谱对所有从TR-21矿化的纳米线、细丝和片状/水凝胶稀土矿物进行了元素分析,结果表明,矿化产物区含有稀土元素(Ⅲ)、磷、氧和碳。这进一步表明,稀土(III)与PO43−结合后,以矿物相的形式与细菌表面的PO43−共存,即合成的稀土盐为REEPO4。此外,该菌株不仅可以通过表面吸附回收稀土元素,还可以在细胞表面以一锅法原位合成稀土磷酸盐。与这些配合物的化学合成方法相比,微生物原位合成稀土磷酸盐不仅可以减少对环境的污染,而且具有较高的成本效益。稀土磷酸盐具有良好的化学稳定性和热稳定性,被广泛应用于发光材料的制备。当稀土离子浓度较低时,稀土元素主要与细菌细胞壁上的磷酸基团结合。随着时间的推移,生物矿化晶体的数量增加,使稀土以纳米线或片状晶体的形式沉积在细胞表面。当TR-21不与稀土元素相互作用时,细菌细胞呈椭圆形,表面光滑。TR-21对稀土的生物合成发生在细菌细胞的外部。微生物合成稀土磷酸盐后,可通过三种方法回收稀土盐。首先,稀土氧化物可以通过燃烧回收。其次,微生物细胞可以通过细胞超声裂解,稀土磷酸盐可以通过离心法回收。第三,稀土磷酸盐可以通过加入海藻糖降解胞外多糖来回收,从而使稀土磷酸盐解离,然后通过离心法回收。图2.有效吸附和生物合成稀土的菌株筛选 熔融DLanM器件的吸附容量和选择性测试 受LanM的启发,设计了一种新型的含有两个拷贝的LanM的新型嵌合蛋白DLanM。由于DLanM有8个EF-Hand,它不仅可以结合更多的稀土元素,而且对稀土具有高选择性,超快的吸附速度,稳定的吸附能力,对非稀土阳离子没有吸附能力。这使得DLanM成为一种很有前途的回收和分离稀土的生物分子。上述优点使其成为高稀土亲和力功能材料的理想候选者。为了促进转化为具有流动形式的稀土回收能力的产品,我们使用氨基的点击化学将DLanM偶联到修饰的琼脂糖凝胶微球上。在25℃下反应16 h后,DLanM的负载率约为83.3%,蛋白密度为0.678±0.004 μmolDLanM/mL琼脂糖凝胶。DLanM偶联材料具有显著的稀土亲和力。特别是,生物共轭色谱柱可以重复使用几十次,对稀土元素的回收表现出很好的性能。用混合溶液测试了DLanM基柱对稀土元素和其他金属元素的选择性。Eu和Dy可以通过DLanM柱和两步解吸的单一吸附过程从Lu和La中分离出来,从而证明了稀土之间分离的可能性。总之,固定化DLanM材料从广泛的金属离子杂质中选择性地富集稀土的功效,甚至到在稀土中分离特定的离子对。这种改进的选择性代表了现有生物吸附方法的替代使用胶囊细胞或聚合物纳米凝胶。图3.熔融DLanM器件的吸附容量和选择性测试 生物合成工具对稀土尾矿的高效利用 TR-21对稀土具有吸附和生物合成作用,对稀土尾矿中的稀土具有浸出和溶解作用。稀土尾矿中金属元素的形态和含量分析表明,稀土含量较低,使其难以恢复和分离。用离子交换法从低浓度尾矿中提取稀土成本高,而用氯化钠、硫酸铵、氯化铵、硫酸镁作浸出剂,对环境有害。相比之下,TR-21的生物浸出过程相对简单,不会产生二次污染。该方法具有环境友好、经济高效等优点,可作为尾矿中稀土有效浸出回收的一种新方法。甲醇脱氢酶(MDH)是AM1菌株甲醇代谢的关键和必需的酶。最近的研究表明,AM1菌株具有以稀土为辅因子的XoxF型MDH。XoxF型MDH的催化机理除依赖于其辅因子外,还与稀土元素的结合有关。AM1菌株不仅能从稀土尾矿中浸出稀土离子,还能从稀土尾矿中提取稀土离子,也可利用尾矿中的部分稀土进行生物合成,XoxF型MDH可以作为稀土的选择性吸附剂来提纯和分离稀土。图4.生物合成工具对稀土尾矿的高效利用【小结】该研究提出了一种新型的生物合成材料体系,以实现稀土元素的高效制造和先进利用。从稀土尾矿中筛选出的昆明菌株可以通过原位合成的方法从细胞外收集稀土生物产品。将新设计的DLanM蛋白与琼脂糖凝胶进行固定化,制备了一系列高亲和力的稀土生物吸附柱。Eu/Lu和La/Dy对的分离效率分别达到99.9%(Eu)、97.1%(La)和92.7%(Dy)。此外,生物吸附柱可重复使用长达19个周期,显示出良好的稀土回收性能。最重要的是,M.extorquens中的工程MDH不仅可以作为La、Ce、Pr和Nd的选择性吸附剂用于稀土的提纯和分离,还可以作为功能稀土-配体组合用于先进的生物合成。与化学提纯方法相比,这些生物合成策略实现了稀土的一锅法高价值利用。该生物制造系统作为新一代灵活的生物铸造,在稀土微生物底盘工程中显示出巨大的前景,特别是当与先进的编辑工具集成时,如CRISPR或同源定向修复,用于先进的生物修复和有价值的稀土生物制品制造。原文链接:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/adma.202303457
  • 岛津参加第二届全国生命分析化学学术报告与研讨会
    由国家自然科学基金委员会化学科学部主办并由清华大学、中国科学院化学研究所、北京大学承办的第二届全国生命分析化学学术报告与研讨会,于2008年3月29日~30日在北京西郊宾馆隆重举行。 随着生命科学研究的迅猛发展,各学科与生命科学的交叉已成为科学研究发展的趋势。以方法和手段为研究要素的分析化学在很早的时候就已与生命科学研究交叉。岛津公司是分析仪器的著名生产厂家,多年来致力于生命科学领域的新产品与方法的开发。岛津公司新产品MCE-202 MultiNA 微芯片电泳系统在本次会议上首次亮相,立刻受到各位专家的关注。这也是本产品在国内的首次亮相。本产品是替代琼脂糖电泳,可全自动、低成本地测定DNA/RNA Size的全新的微芯片电泳装置。 screen.width-300)this.width=screen.width-300" 业界专家关注岛津新产品MCE-202 MultiNA 在本次大会上岛津公司分析专家Yuki Hashi先生做了题为《在线前处理LCMS系统直接测定血桨血清中十溴联苯醚(DBDE)及分析时残留问题解决》的报告,受到各位专家的好评。多溴联苯醚(PBDEs)是广泛使用的一种阻燃剂,其在食品链和人体中会聚集,因此是一个潜在的环境健康问题。在这类多溴联苯醚阻燃剂中,DBDE其阻燃效果好及毒性小,是唯一允许使用在几乎所有塑料材质中的阻燃添加剂。研究发现DBDE在环境样品和生物样品中的含量持续上升。因而,目前对血样中残留的DBDE分析备受瞩目。 本次大会势必为我国生命分析化学的研究起到积极的推动作用。 screen.width-300)this.width=screen.width-300" 岛津员工向专家介绍岛津产品 Microchip Electrophoresis MCE-202 MultiNA 微芯片电泳系统 ——用于DNA/RNA快速分析 MultiNA—是通过将岛津公司先进的微芯片技术和自动化分析技术完美结合,缔造出的全新的DNA/RNA快速分析系统,与传统的琼脂糖电泳技术相比,费用更低、速度更快、灵敏度更高!简单易用的MultiNA,提供更加卓越的分析精度,使电泳分析进入新境界。 MultiNA!为生命科学实验室带来突破性变革的新一代微芯片电泳系统。  分析成本极低 采用精湛工艺制作的可重复利用的微芯片使消耗品费用在为减少,与琼脂糖凝胶电泳相比,运行成本更低。  分析速度快 高速自动化分析,分析顺序表中一次最多可设定120个分析循环,可承载4枚微芯片平行样品前处理,顺序电泳分析,最快分析循环仅75秒。  高灵敏度检测 采用LED激发的荧光检测器,达到比溴化乙锭染色法高出10倍以上的分析灵敏度。  分辨率高,重现性好 根据样品的类型选择相应的分离缓冲液,样品与内标一起电泳,实现和保证了分析结果的可靠性和重现性。  使用简单方便 控制和数据处理软件提供直观的图形界面,操作和掌控极为简单。三步操作即可完成从设置到启动的全过程。 screen.width-300)this.width=screen.width-300"
  • 如何确认RNA的质量
    实时荧光定量PCR技术是通过测定RNA的转录水平来评估基因的活力。RNA样本提取的质量直接影响基因表达分析。影响RNA品质的因素有以下三种:RNA浓度、RNA纯度和RNA完整性。检测RNA浓度、纯度和完整性的方式主要有以下几种:紫外分光光度计法:测量260nm吸收值计算RNA浓度,测量260nm/280nm吸收值的比值,用于评估RNA纯度。需要注意的是:在检测核酸物质时应该在固定的PH溶液中进行。260nm/280nm的比值范围在 1.9~2.1 之间。<1.9,说明有蛋白质残留;>2.1,说明RNA可能发生降解。琼脂糖凝胶电泳:完整的RNA通常有三条带,最亮的是28S条带,其次是18S条带,最淡的是5S条带(部分试剂盒提取时会过滤掉5S条带)。通过琼脂糖凝胶电泳可以检测28S和18S的比值。该方法主要用于检测RNA的纯度和完整性。如果28S和18S条带明亮、清晰、条带锐利,28S的亮度在18S条带的两倍以上,我们认为RNA的质量最好。若RNA条带出现弥散,原因可能:RNA被核酸酶降解、电压或电流过大、上样量过高或过低等。上述两种方法在实验室比较常用,此外还有几种检测方式供大家选择。荧光染料检测:通过荧光染料和RNA结合,荧光活性增强。此方法的灵敏度较高,主要用于检测RNA的浓度。微毛细管电泳:可使用软件的RIN(RNA Integrity Number)分数评估,10为RNA完整性最好,0为最差。此方法的灵敏度和分辨率较高,可用于检测RNA浓度、纯度和完整性。3’-5’完整性检测:是在一个RNA样本中检测GAPDH mRNA的完整性来代表所有RNA的完整性,主要用于检测RNA的完整性。得到高品质RNA的小建议:1、尽量避免RNA酶污染,使用无RNA酶的耗材和试剂,建议将扩增前后的场所分开。2、尽量减少采样时间,样品处理后快速冷冻,可以加入RNA保护剂。3、RNA提取过程中可以使用RNA酶抑制剂。4、存储过程中避免反复冻融。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司,可为您提供3/6检测通道,根据实验需求灵活配置。这款产品采用了高能LED作为光源系统,可保证光源强度高,光源一致性好;高品质的帕尔贴温度模块作为温控系统,升降温速率快,可设置12列跨度30°C的温度梯度;卓越的CMOS拍照+光纤信号传输作为检测系统,CMOS检测灵敏度高,光纤传输速度快,无光损失和噪音干扰,无需ROX校准。Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统可为您的科学研究提供高精准度、高灵敏度和高可靠性的实验结果。
  • 上海比朗BLUV07-II紫外交联仪 新品上市
    上海比朗仪器有限公司生产产品有:小型喷雾干燥机、无菌均质器、光化学反应仪、超声波细胞粉碎机、紫外交联仪、分子杂交仪、分液漏斗振荡器、氙灯光源、 超声波清洗机、索氏提取器、制冰机、低温冷却液循环泵、高速组织捣碎机、低温恒温循环器、高低温循环器、高温循环器、电热恒温鼓风干燥箱、电热恒温水槽、 水浴恒温振荡器、恒温金属浴、恒温器、回旋振荡器等等。   BLUV07-II紫外交联仪是一种多用途的254mm紫外辐射系统,主要用于将核酸交联于膜上。还可用于琼脂糖凝胶中DNA的切割、RecA突变筛选、嘧啶二聚体产生的部分限制性内切酶消化、UA灭菌消除PCR污染等。在紫外灭菌、聚合物紫外处理等方面也有应用价值。 BLUV07-II紫外交联仪   紫外交联仪参数及应用,现在紫外交联仪分为3种波长的:254nm 312(302)nm 365nm 一长寿命滤光片,312 nm和365 nm下可终身使用,254 nm下,寿命为3000小时。对于312nm波长的紫外交联仪,312nm紫外光是目前EB/DNA复合凝胶电泳荧光显色的最佳光源,因为它灵敏度高且能产生了最大的荧光量。   与254nm波长紫外线相比,312nm能把光损伤,光切割及光二聚体作用的程度降至最低,应用如:克隆和染色体作图。另外,312nm波长紫外线过于暴晒而老化,从而保护UV传输装置的原有性能。   紫外交联:为使核甘酸固定在膜上,传统方法是将膜置于真空烘箱中在80℃下烘2小时,而在紫外光下照射几秒即可 信号强度的提高,紫外照射可使杂交信号比传统烘烤法提高5~10倍   紫外用途:琼脂糖凝胶中DNA的切割,RecA突变筛选,胸腺二聚体产生的部分限制性内切酶消化,UV 灭菌消除PCR污染。   紫外交联仪操作方法:将紫外交联仪设备水平放在工作台上。确保有足够的空间,在前面开门。插入电源线的母头到交联剂。插头插入正确接地的电源插座中。(交联剂的正确的工作电压是产品信息的标签上找到。注:对于230V型号,或那些需要特殊的电源线连接器,确保男性的连接器或插头已经正确的配置已正确连接电源线。)打开ON / OFF开关到ON的位置。(注:当交联剂的默认转向上次使用的紫外线曝光设置)。最后的紫外线照射的设置将显示在LED上。其中最后一个函数设置将会在发光显示面板上的红点(S)上指出。将您的样品进入会议厅的要求曝光。
  • 百灵威与SERVA Electrophoresis
    SERVA 于1953年建立于德g海德堡(德g生命科学的中心),以其生产的胶原酶、电泳试剂、生化试剂等闻名于世界,拥有ISO9001:2000 证书。 SERVA不仅是世界上胶原酶z大的生产厂家,还是蛋白质电泳方面的专家,30多年来,在两性电解质和预制胶方面处于世界l先水平,目前还在继续研发和生产更多的蛋白质研究和蛋白组学方面的产品,为全球各地的用户生产和提供高pz的产品与专业化服务。 2006年百灵威与SERVA正式签署战略合作协议,由百灵威负责SERVA在中g市场的产品销售、技术应用与支持等各项业务。百灵威始终秉承&ldquo 资源共享,共同发展&rdquo 之理念,y如既往地为中g化学行业广大科研和生产用户提供卓越的产品与服务! SERVA产品系列 电泳试剂 电泳产品 其他类产品(染色剂、标准品) 常用产品(DNA琼脂,琼脂糖、丙烯酰胺) 电泳仪器 仪器(供电器、凝胶) 生物分离 生物分离试剂(溶剂) 生物分离介质(离子交换试剂) 生命科学 分子生物学(分子生物试剂) 微生物学(琼脂,蛋白胨,酵母提取物) 细胞生物学(胶原酶) 生物化学 蛋白质(白蛋白) 酶学(酶) 燃料(四唑盐) 试剂(表面活性剂 网址:www.serva.de
  • BioCon 2020圆满落幕,月旭科技精彩瞬间,不容错过
    盛夏的七月里,伴随着淅淅沥沥的小雨,BioCon China 2020第七届国际生物药大会暨生物技术仪器设备与试剂展览会今日于上海圆满落幕。月旭科技携众多明星产品亮相展会,并为展会现场的参观者提供了专业的技术支持服务,为今年的展会打下了良好的开端。是怎样的产品在现场受到了大家的一致好评和青睐呢?快跟随我们的一起回顾一下吧。本次展会,除了月旭科技高柱效、稳定的重现性和长寿命的色谱柱精彩亮相之外,更有强度高,流速快,非特异性吸附小的蛋白纯化填料和简单快捷的手动重力预装柱强势出席,为您带来更加丰富的产品选择。明星产品 强势亮相1 蛋白纯化层析填料月旭科技专注于蛋白质纯化分离,为客户带来琼脂糖系列(Tanrose)、葡聚糖系列(Tandex)、琼葡糖系列(SuperTandex)、高刚性琼脂糖系列(Solid)填料的多种选择,并可根据客户需求,定做不同颗粒大小及孔径的特殊介质。2 蛋白纯化层析预装柱月旭科技可提供凝胶过滤预装柱、离子交换预装柱、疏水层析预装柱、亲和层析柱预装柱等适用于蛋白纯化设备的各型号预装柱,可用于生物大分子纯化的条件筛选、工艺优化和规模化制备。热门产品 精彩亮相3 液相色谱柱月旭科技自成立以来,一直致力于高效液相色谱柱的研发,为客户提供重现性最好、分离效果最佳的色谱柱。其五大系列色谱柱产品Ultimate® 、Xtimate® 、Topsil® 、Welchrom® 和Zapchrom® 以高选择性、高柱效等优势收获了客户的一致好评!现场沟通 清晰高效4 与众多客户线下沟通本次展会是我们今年的首场线下展会,也迎来了久违的与客户面对面沟通交流的机会。诸多客户与我们针对产品的相关问题进行了深入的探讨与沟通,也对我们此次重点推出的蛋白纯化层析系列产品有了更进一步的了解。对我们今后产品的改进和开发,以及为客户持续提供高质量的服务都十分重要。本次展会已于今日正式落幕,而在为客户提供更专业的色谱分离分析技术、产品和整体解决方案的道路上,我们不会停歇。我们将为每一位客户带去更专业的产品和更优质的服务,也期待下一次能与你在展会相见。
  • 【用户案例】基于微尺度3D打印技术制造适用于微重力环境的微孔板
    来自德国法兰克福大学(Goethe University Frankfurt)布赫曼分子生命科学研究所(Buchmann Institute for Molecular Life Sciences)的研究人员使用摩方精密 (BMF)的微尺度3D打印机microArch® S140制造了一种微型培养皿——水凝胶微孔板(hydrowells)的模具,该微孔板可在微重力环境下用于培养3D多细胞球体。此项研究是太空多细胞球体聚集与生存实验(Spheroid Aggregation and Viability in Space, SHAPE)的一部分,该实验由德国航空航天中心(DLR)支持并将在近地轨道上的国际空间站(ISS)上进行。多细胞球体和培养细胞的水凝胶微孔板这种定制的水凝胶微孔板(hydrowells)由琼脂糖(一种多糖)制成,用于替代塑料或玻璃培养皿在微重力环境下培养多细胞球体。多细胞球体是三维的组织模型,特别适合再生医学和癌症等研究。微孔板的孔与孔之间互不连通,可助力简单扩散实现物质交换且可为细胞提供生物相容的环境。细胞悬浮在单独的微孔中生长,逐层堆叠形成多细胞球体。微孔板则可很好地规避多细胞球体生长到不可控尺寸的风险。布赫曼分子生命科学研究所参与的太空多细胞球体聚集与生存实验要求微孔板具有特殊的设计:漏斗形的入口、圆柱形的横截面以及U形/锥形或截去顶部锥形的底部。这些底部的特殊形状有利于多细胞球体的形成和长时间的细胞培养。微孔板是通过阳膜,即具有凸形的模具翻铸而成。微尺度3D打印可以实现超高光学精度、生成光滑表面、可使用高性能材料以及支持快速研发,因此,此研究中被用来制备凸模。漏斗形顶部的微孔板模具圆柱形截面的微孔板模具U形底部的微孔板模具微尺度3D打印设备和材料摩方精密微尺度3D打印机microArch® S140具有10μm的超高光学精度,所制造的零件顶部表面光洁度Ra可以达到0.4~0.9μm,侧面可以达到1.5~2.5μm。microArch® S140基于面投影微立体光刻技术(PμSL),可以实现高的表面光洁度和精度,优于光学精度约为25~50μm的SLA立体光固化3D打印机。microArch® S140 支持多种高性能3D打印材料,同时也支持工程级的405nm波段光固化树脂。用于制造微孔板模具的材料是摩方精密的HT200树脂材料,这种材料可承受温度高达200°C,同时兼具高强度和耐用性。这些优异的性能使模具可以进行高温高压蒸汽灭菌,使微孔板免受细菌污染。经过高压蒸汽灭菌后,模具并未出现翘曲或分层。这种具有优异热学性能和机械性能的3D打印材料确保了最终产品出色的整体性。microArch® S140 微尺度3D打印机摩方精密HT200树脂材料使用HT200材料制造的微孔板模具微孔板模具的特写模具的精度,表面光洁度和高压蒸汽灭菌法兰克福大学布赫曼分子生命科学研究所的终身科学家、首席研究员——Francesco Pampaloni博士测试了用来生产微孔板的3D打印模具,他评价摩方精密微尺度3D打印的模具具有高的精度和表面光洁度,使用这种模具生产的微孔板可以培养出尺寸一致的多细胞球体。Pampaloni博士还补充道,用于制造模具的3D打印材料完全可以承受121℃和2.1bar的高压蒸汽灭菌条件,确保了微孔板的无菌环境。水凝胶微孔板有多细胞球体和没有多细胞球体的微孔板点击底部“阅读原文”了解更多有关microArch® S140和PμSL(面投影微立体光刻技术)
  • 【干货】数字PCR实验小课堂——模板制备篇
    数字PCR是第三代PCR技术,和qPCR技术相比具有灵敏度高、精准度高、对抑制剂耐受性更强等优势,不依赖于标准品和标准曲线,并可直接对起始核酸进行绝对定量,尤其适用于对低丰度样品的检测。目前,数字PCR在医学、制药、环境、食品检测等多个领域展现出了良好的应用前景。集多重优势于一体的数字PCR实验该如何实施呢?今天呢,我们就一起来看一下数字PCR实验的第一步:模板的制备。图源:gene-π数字PCR学习网站模板制备是数字PCR实验成功的关键一步。模板提取、质量控制、避免污染和保存都是模板制备过程中的重要因素。1、清除环境污染大多数Taq聚合酶的敏感性都比较高,一旦存在污染可能会发生外源DNA扩增并影响整个实验。而外界环境中存在多种污染源,因此必须遵守严格的实验规程并做好清除污染措施。为了避免DNA污染,应遵循以下常规PCR建议:☑ 定期使用3%漂白剂溶液和水/乙醇清洁实验室工作台和设备,或根据应用情况使用DNase/RNase;☑ 尽可能将管盖好;☑ 涡旋后进行离心;☑ 设置无模板对照。2、模板提取数字PCR的DNA和RNA模板提取方法与实验室中各种提取方法是兼容的,包括苯酚氯仿法,各种试剂盒提取方法。☑ 在提取过程中,尽量简化步骤,缩短提取时间;☑ 减少化学因素对核酸的降解;☑ 减少物理因素对核酸的降解,如机械剪切力和高温;☑ 防止核酸的生物降解。3、质量控制模板提取之后,我们需要对模板的纯度和质量进行检测,以保证得到最佳的实验效果。例如分光光度法可以验证提取的DNA溶液的良好吸光度(A260/280)的比例。常用的方法还有PicoGreen荧光染料定量检测、琼脂糖凝胶电泳、毛细管凝胶电泳和3' :5' 分析等,尽量避免污染物和潜在抑制剂的存在。4、保存提取的DNA模板的存储也是一个重要的监控因素。保存时需要避免核酸降解,如胞嘧啶脱氨和8-Oxo-2' -脱氧鸟苷的形成,因为氧化损伤可能导致在PCR扩增过程中的碱基转位。缓冲液和温度条件对样品的质量也有影响,一般提取的DNA模板用TE溶解并-20℃保存。除了上述这些,样本本身固有的其他参数也可能会对数字PCR实验产生影响:A 、富含GC的模板因为GC键非常稳定,如果模板包含富含GC的区域可能导致模板不能完全扩增。因此,为了使模板获得更好的变性,可以尝试在PCR混合物中添加DMSO或甜菜碱。B、高分子量DNA与qPCR一样,模板的复杂性可能会影响检测性能,例如质粒和长片段基因组DNA。对DNA片段进行限制性酶切可以平衡模板差异,并防止对目标分子的低估。但要保证扩增子序列中不能有酶切位点,对已经片段化的DNA(例如来自福尔马林固定、石蜡包埋组织或细胞游离的DNA)进行酶切可能导致信号丢失。通常高分子量的DNA或质粒作为模板可能会影响阴阳性微滴分区,建议在进行数字PCR之前使用化学或酶切方法进行DNA剪切,而且剪切步骤可以直接在PCR mix中进行。C、DNA拷贝数的转换在数字PCR实验中,需要对模板浓度进行检测,以避免浓度过高造成检测结果饱和(全部都是阳性微滴)。当浓度足够高时,常用的方法如荧光法和分光光度法,可用于定量核酸,从而初步预估使用数字PCR的适合测量浓度。值得注意的是,这种方法测量的是组成核酸碱基单位体积的质量。因此,使用测量质量的方法来确定基因组拷贝数,需要进行相应的换算。当以质量为基础的核酸定量与dPCR结果进行比较时,或从任何用于计算分子拷贝数的方法中得出的结果时,必须包括用于计算基因组分子量的清晰描述,以及用于计算该值的方法。在数字PCR中,DNA拷贝数的计算只需要知道被研究基因组的质量,然后应用以下公式即可:反应体积中拷贝数=反应体积DNA质量(ng)/研究基因组质量(ng) 。这里还有在线网站供大家参考:http://cels.uri.edu/gsc/cndna.html详情可参考深蓝云公众号的推文:技术小站 | 浓度到拷贝数的换算。D、逆转录酶在逆转录酶数字PCR (RT-dPCR)中,RNA转录本需通过一步法或者两步法转化为互补DNA (cDNA)进行使用。在一步法中,逆转录和PCR均在同一分区中按顺序排列。即使每个RNA分子产生多个cDNA拷贝,结果也不会被高估。在两步法中,先进行批量转录,然后对cDNA进行微滴分区,在单独的反应中进行dPCR。逆转录酶的步骤可能是一个主要的错误来源,应在实验设计中考虑。通过上述的介绍,大家是不是发现数字PCR的模板制备并没有那么复杂呀,感兴趣的小伙伴可以先把模板制备好,然后联系我们,赶紧来体验一下数字PCR的魅力吧。快速学习网址:足不出户,网页自动翻译让您轻松快速掌握Gene π数字PCR学堂。参考文献:1 Cai, Y., Li, X., Lv, R., Yang, J., Li, J., He, Y., & Pan, L. Quantitative Analysis of Pork and Chicken Products by Droplet Digital PCR. BioMed Research International, 2014, 810209. http://doi.org/10.1155/2014/810209. PMID: 252431842 Pérez-Barrios, C., Nieto-Alcolado, I., Torrente, M., Jiménez-Sánchez, C., Calvo, V., Gutierrez-Sanz, L., Palka, M., Donoso-Navarro, E., Provencio, M., Romero, A. Comparison of methods for circulating cell-free DNA isolation using blood from cancer patients: impact on biomarker testing. Transl Lung Cancer Res. 2016 Dec 5(6):665-672. doi: 10.21037/tlcr.2016.12.03. PMID: 281497603 Demeke, T., Malabanan, J., Holigroski, M., Eng, M. Effect of Source of DNA on the Quantitative Analysis of Genetically Engineered Traits Using Digital PCR and Real-Time PCR. J AOAC Int. 2017 Mar 1 100(2):492-498. doi: 10.5740/jaoacint.16-0284. Epub 2016 Dec 22. PMID: 281181374 Holmberg, R.C., Gindlesperger, A., Stokes, T., Lopez, D., Hyman, L., Freed, M., Belgrader, P., Harvey, J., Li, Z. Akonni TruTip® and Qiagen® Methods for Extraction of Fetal Circulating DNA-Evaluation by Real-Time and Digital PCR. PLoS One. 2013 Aug 6 8(8):e73068. doi: 10.1371/journal.pone.0073068. Print 2013. PMID: 23936545.5 Rajasekaran, N., Oh, M. R., Kim, S.-S., Kim, S. E., Kim, Y. D., Choi, H.-J., Byum, B., Shin, Y. K. Employing Digital Droplet PCR to Detect BRAF V600E Mutations in Formalin-fixed Paraffin-embedded Reference Standard Cell Lines. Journal of Visualized Experiments : JoVE, 2015, (104), 53190. Advance online publication. http://doi.org/10.3791/53190. PMID: 26484710.6 Devonshire, A. S., Whale, A. S., Gutteridge, A., Jones, G., Cowen, S., Foy, C. A., & Huggett, J. F. Towards standardisation of cell-free DNA measurement in plasma: controls for extraction efficiency, fragment size bias and quantification. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2014, 406(26), 6499–6512. http://doi.org/10.1007/s00216-014-7835-3. PMID: 24853859.7 Group T D , Huggett J F . The Digital MIQE Guidelines Update: Minimum Information for Publication of Quantitative Digital PCR Experiments for 2020[J]. Clinical Chemistry(8):8.
  • 疑似甲型H1N1确诊方法(国家流感中心实验室)
    疑似甲型H1N1确诊须过四关 2009-05-05 03:17:24 来源: 新京报(北京) 对于疑似甲型H1N1流感患者,通过何种手段才能最终确诊其感染了甲型H1N1流感病毒? 昨日下午,北京市宣武区迎新街100号,记者实地探访了中国疾控中心病毒病所国家流感中心实验室,工作人员再现了如何从疑似患者呼吸道内获取标本并分离出病毒的基本片段,再通过特殊仪器下读出病毒的基因序列,最终与甲型H1N1流感病毒的基因序列图进行比照,从而得出患者是否染疫的全过程。 (昨日,中国疾控中心病毒病所国家流感中心实验室,工作人员正使用LABCONCO生物安全柜进行病毒标本中核酸液的提取。) 1运送 4℃恒温运送病毒标本 (地点:医院至流感网络实验室 ) 用于追索病毒的标本来自疑似患者的呼吸道,一般是液体,即喉液或鼻液。每份液体标本需求量为200微克以上。 据国家流感实验室工作人员李晓丹介绍,只有足够的标本量,才能保证分离到足够的活病毒和用于核酸检测的病毒基因片段。 为了保证病毒的活性,每份标本从患者的鼻部或咽部取出后,必须立即装进防漏、防爆、防雨的特殊密闭容器中。 李晓丹说,容器内,要保证4摄氏度的恒温,&ldquo 就像冰箱冷藏室&rdquo ,一直从医院坚持到实验室。之后,经专人送进重重机关的P3实验室(生物防护三级实验室)。 2提取 提取病毒分装基因片段 (地点:生物防护三级实验室) P3实验室曾经不止一次在抗击SARS和禽流感的战斗中崭露头角。防控流感大流行,及时发现甲型H1N1流感病毒的踪迹,P3实验室内的工作,仍是基础和关键。 只有取得特定资格的工作人员,才能打开密码锁,进入P3实验室。 工作人员需依次穿过一更衣室、二更衣室、缓冲间和准备间4个房间,最终从头武装到脚。在装戴好头套、连衣裤的隔离服,口罩和脚套后,才能进入实验室开始工作。 随着深入,气压也一层层降了下来,实验室里的气压就只有50-60帕左右(比正常气压低很多)。只有这样,才能保证里面的风不会往外吹,里面的微生物和病毒,不会跑到实验室外。 据李晓丹介绍,检测甲型H1N1流感病毒的工作,将从两方面同时开展:标本的一部分用于提取活病毒,留待培养研究。另一部分,则用于分离出病毒中的核酸液,也就是&ldquo 饱含基因代码的片段&rdquo ,需要50微克以上,分装入试管后,以备进一步的检测。 3检测 扩展基因代码方便对比 (地点:生物防护二级实验室(PCR实验室) ) 试管中的基因片段随后将送进PCR实验室。 李晓丹说,PCR仪是核酸检测病毒的关键设备。最近几天,他们针对甲型H1N1流感开发的检测试剂盒,就将在这个环节发挥主要作用。 实验人员将试管内的一组基因片段放入检测试剂配置的反应液中,再置于PCR仪下,大概两个半小时左右,每个基因片段都被放大,生成了大小不一的核酸扩展物CDNA(基因片段扩展物)。 同时,另一部分通过反应液,被分装在PCR小试管内的核酸RNA(核糖核酸),则可以在特制模板中,通过与目标病毒基因片段的定时定量比对,由实验人员读出结果:是否为甲型H1N1流感病毒。 李晓丹说,为了确保检测结果的准确无误差,这个定时定量PCR检测结果,只作为整个甲型H1N1流感病毒追索结论的一个参考。 4确诊 电泳胶内筛显病毒&ldquo 原形&rdquo (地点:生物防护一级实验室(综合实验室) ) 装有不同基因片段扩展物的微小试管被送进综合实验室,这里的关键设备是盛满了琼脂糖凝胶、两头插着正负电极的矩形电泳检测仪。 利用移液器,实验人员将试管中微量的无色透明液体染色后,再放入充了电的胶&ldquo 池&rdquo 。 在电压牵引推动下,胶池的表面开始密集冒起小气泡,&ldquo 那是病毒的基因扩展物在向另一个方向走,个头大的产物走得慢,越是个头小的产物走得越快。&rdquo 李晓丹说,琼脂糖凝胶电泳仪就像一面筛子,把病毒中每个基因片段都以特定的&ldquo 大&rdquo 、&ldquo 小&rdquo 影像显现出来。 当然,上述景象人的肉眼无法看到。实验人员让&ldquo 胶池&rdquo 充电40分钟,确保所有的扩展物都&ldquo 运动&rdquo 起来后,将&ldquo 胶池&rdquo 放进另一个特制的方形&ldquo 铁柜&rdquo 中,这其实是一部紫外线下工作的&ldquo 照相机&rdquo &mdash &mdash &mdash 凝胶成像仪。 成像仪内,紫外线灯发光,照射在凝胶上,然后对胶中染色发光的扩展物自动拍照,并输出在连接的电脑屏幕上。 李晓丹介绍,电脑中还能同时调出甲型H1N1流感病毒基因序列图,在同一个位置上,受检病毒的数个基因片段扩展物大小与参照物完全相合,就能够最终判断,标本送检患者感染了甲型H1N1流感病毒。 反之,排除感染可能。 李晓丹说,从病毒标本送至实验室到最终检测出结果,约需4&mdash 6小时。 (工作人员正在分析病毒标本。) 甲型H1N1病毒检测程序 医生对疑似患者的鼻液或喉液取样 送入流感网络实验室 提取多个基因片段,对逐个基因片段进行扩展(放大) 扩展物入胶染色,在紫外线灯下发光成像 与电脑中储存的目标病毒基因片段对比,同一位置上,大小是否完全一致 若一致则能够最终判断,标本送检患者感染了甲型H1N1流感病毒 (本组稿件采写/本报记者 魏铭言 本组稿件摄影/本报记者 王申) epaper.thebeijingnews.com/xjb/html/2009-05/05/content_353965.htm
  • 岛津应用:新一代测序仪(NGS)在文库质量控制(QC)中的应用
    随着新一代测序仪(NGS)的技术发展,其使用范围已扩展到de novo测序、变异、外显子组和基因表达分析等领域。因为可以对应高要求的分析处理能力,所以得以迅速普及。为了得到良好的测序结果,需要掌握NGS文库的大小分布和浓度,因此,在使用NGS 系统时质控文库的以上信息非常重要。 到目前为止,为了确认NGS文库的大小分布,使用琼脂糖凝胶电泳作为主要手段。为了确认浓度,还需要配备实时荧光定量PCR仪和荧光分光光度计。从文库制备到质量控制的操作是一系列复杂的手工作业,需要使用快速、简便且价格低廉的控制方法。而且,随着使用Index标签序列可同时对多个样品进行测序技术的成熟,进行质量控制的文库数量有所增加,需求会变得更多。 为解决上述需求,本文将向您介绍使用岛津全自动电泳仪MCE-202 MultiNA 在NGS文库的质量控制应用中,对小鼠的RNA序列进行分析的示例。 NGS流程和MultiNA文库质量控制的应用范围 了解详情,敬请点击《新一代测序仪(NGS)在文库质量控制(QC)中的应用》 关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。 更多信息请关注岛津公司网站www.shimadzu.com.cn/an/ 。 岛津官方微博地址http://weibo.com/chinashimadzu。 岛津微信平台
  • 某经销商帮河北客户采购151种仪器设备
    某经销商投标河北一单位,批量采购151种仪器设备,要求国产,能做的厂商联系,具体清单、参数要求见附件。序号设备名称数量1超净工作台12干热箱13梯度PCR仪14通用多用途电泳仪25琼脂糖凝胶电泳槽268道移液器37生化培养箱28精密PH仪19移液器1210超微量分光光度计1国产设备清单.xlsx国产设备参数要求.docx联系方式:为避免过度打扰,请添加仪器信息网工作人员微信获取采购方联系方式:
  • 盘点:近五年中成药补充检验方法
    中药质量控制一直是中药研究与生产的难点和热点,也是实现中药现代化的重要基础和关键。在药品抽检的不合格产品中,中成药和中药饮片占比较高,以次充好、染色增重、掺杂使假、违法加工等问题层出不穷。随着科技的发展,一些不法商贩制备“高科技”假药的手段也越来越高级。在此背景下,国家规定的中成药补充检验方法作为打击中药掺伪染色,非法添加的重要依据,对中药的质量安全监督具有重要意义。截止到2021年01月13日,2015年以来国家药监部门发布了55个中成药补充检验方法。涉及51种中成药,5类检验方法。其中,中成药包括妇科调经片、驴胶补血颗粒、通宣理肺丸、九味羌活丸、小败毒膏、珍宝丸、小儿咽扁颗粒、小活络丸(大蜜丸)、参三七伤药胶囊(片)、风湿二十五味丸、金鸡颗粒、金鸡片、金鸡丸、妇科止带片、心可宁胶囊、心宁片、心可舒胶囊、银柴颗粒、女金丸、洁白胶囊(丸)、归脾丸(浓缩丸)、胆香鼻炎片、阿胶颗粒、阿胶黄芪口服液、绿袍散、舒妇丸、沉香化滞丸、礞石滚痰丸、小儿化毒散(胶囊)、少腹逐瘀丸、小金丸(胶囊、片)、腰痛片、接骨七厘散(丸)、沉香化气丸、胃康灵胶囊、珍黄胶囊、银杏叶软胶囊、银杏叶滴丸、牛黄清心丸、朱砂安神丸、精制冠心片、跌打丸、藿香正气丸(加味藿香正气丸)、阿胶补血膏、阿胶补血口服液、宫炎康颗粒、银杏叶片、银杏叶胶囊、舒血宁注射液、银杏达莫注射液、银杏叶滴剂。检验方法涉及薄层色谱法、高效液相色谱法、液相-质谱鉴定法、显微鉴别法、电泳法。 薄层色谱法和高效液相色谱法薄层色谱法(TLC)作为初筛的方法,在鉴别中成药非法添加中起到重要作用,其特点是简单、经济、易行。但由于中成药成分复杂,斑点较多,相互干扰严重,易导致假阳性,因而对每种被可疑添加的中成药一般都需要反复摸索展开条件,以达到较好的分类。经过初筛的阳性样品,需要进一步用高效液相色谱法(HPLC)进行确证,比较样品和对照品色谱峰的保留时间和紫外吸光度。若出现保留时间一致的色谱峰,应该进一步比较该色谱峰与对照品峰的紫外光谱图是否一致。TLC和HPLC为中成药补充检验方法中的常用方法,共涉及38项检测,详见下表,具体实验步骤见附件。序号名称方法1小儿咽扁颗粒中灰毡毛忍冬皂苷乙检查项补充检验方法(BJY 202007)薄层色谱法、高效液相色谱法2金鸡颗粒中毛两面针素检查项补充检验方法(BJY 202003)薄层色谱法、高效液相色谱法3金鸡片中毛两面针素检查项补充检验方法(BJY 202002)薄层色谱法、高效液相色谱法4金鸡丸中毛两面针素检查项补充检验方法(BJY 202001)薄层色谱法、高效液相色谱法5洁白胶囊(丸)中松香酸检查项补充检验方法(BJY 201909)薄层色谱法、高效液相色谱法6女金丸中苋菜红、日落黄和亮蓝检查项补充检验方法(BJY 201907)薄层色谱法、高效液相色谱法7宫炎康颗粒中金胺O检查项补充检验方法(BJY 201801)薄层色谱法、高效液相色谱法8接骨七厘散(丸)中苏丹红IV与松香酸检查项补充检验方法(BJY 201711)薄层色谱法、高效液相色谱法9牛黄清心丸(局方)中808猩红检查项补充检验方法薄层色谱法、高效液相色谱法10朱砂安神丸中808猩红检查项补充检验方法薄层色谱法、高效液相色谱法序号名称方法11妇科调经片中金胺O检查高效液相色谱法12珍宝丸中松香酸检查项补充检验方法(BJY 202008)高效液相色谱法13参三七伤药胶囊(片)中松香酸与苏丹红IV检查项补充检验方法(BJY 202005)高效液相色谱法14风湿二十五味丸中松香酸检查项补充检验方法(BJY 202004)高效液相色谱法15绿袍散中金胺O检查项补充检验方法(BJY 201922)高效液相色谱法16沉香化滞丸中松香酸检查项补充检验方法(BJY 201919)高效液相色谱法17女金丸中松香酸检查项补充检验方法(BJY 201908)高效液相色谱法18银柴颗粒中灰毡毛忍冬皂苷乙检查项补充检验方法(BJY 201904)高效液相色谱法19妇科止带片中金胺O检查项补充检验方法(BJY 201902)高效液相色谱法20心可宁胶囊中酸性红73检查项补充检验方法(BJY 201901)高效液相色谱法21礞石滚痰丸中松香酸检查项补充检验方法(BJY 201716)高效液相色谱法22小儿化毒散(胶囊)中松香酸检查项补充检验方法(BJY 201715)高效液相色谱法23少腹逐瘀丸中松香酸与金胺O检查项补充检验方法(BJY 201714)高效液相色谱法24腰痛片中松香酸检查项补充检验方法(BJY 201713)高效液相色谱法25小金丸(胶囊、片)中松香酸检查项补充检验方法(BJY 201712)高效液相色谱法26沉香化气丸中松香酸检查项补充检验方法(BJY 201710)高效液相色谱法27跌打丸中808猩红检查项补充检验方法(BJY 201708)高效液相色谱法28精制冠心片中金橙Ⅱ检查项补充检验方法(BJY201707)高效液相色谱法29胃康灵胶囊中金胺O检查项补充检验方法(BJY 201702)高效液相色谱法30银杏叶滴丸中槐角苷检查项补充检验方法高效液相色谱法31银杏叶软胶囊中槐角苷检查项补充检验方法高效液相色谱法32银杏叶提取物、银杏叶片及银杏叶胶囊中槐角苷检查项补充检验方法高效液相色谱法33银杏叶滴剂中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法34银杏达莫注射液中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法35舒血宁注射液、银杏叶提取物注射液中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法36银杏叶滴丸中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法37银杏叶软胶囊中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法38银杏叶提取物、银杏叶片、银杏叶胶囊中游离槲皮素、山柰素、异鼠李素检查项补充检验方法高效液相色谱法 液相-质谱鉴定法在经过高效液相色谱的初步确认,样品色谱峰与对照品峰的紫外光谱图一致的情况下,液相色谱-质谱法(LC-MS)可对非法添加化学药物进行结构确证,保证检测结果的准确无误。其基本原理是将样品中各组分经高效液相色谱仪分离后先后经适用的接口导入质谱仪中,被离子源电离成具有一定质荷比的碎片离子,由质量分析器分离而被检测,最后由计算机处理得到碎片离子组成的单一组分的质谱图,再由质谱图鉴定出该组分的结构组成,得到测定结果。共涉及10项检测,详见下表,具体实验步骤见附件。序号名称方法39驴胶补血颗粒中牛皮源成分检查液相-质谱鉴定法40小败毒膏中莨菪碱类生物碱检查项补充检验方(BJY 202009)液相-质谱鉴定法41妇舒丸中牛皮源成分检查项补充检验方法(BJY 201921)液相-质谱鉴定法42妇科止带片中牛皮源成分检查项补充检验方法(BJY 201914)液相-质谱鉴定法43阿胶黄芪口服液中牛皮源成分检查项补充检验方法(BJY 201913)液相-质谱鉴定法44阿胶颗粒中牛皮源成分检查项补充检验方法(BJY 201912)液相-质谱鉴定法45女金丸中牛皮源成分检查项补充检验方法(BJY 201906)液相-质谱鉴定法46心可舒胶囊中人参皂苷Rb3检查项补充检验方法(BJY 201905)液相-质谱鉴定法47阿胶补血口服液中牛皮源成分检查项补充检验方法(BJY 201805)液相-质谱鉴定法48阿胶补血膏中牛皮源成分检查项补充检验方法(BJY 201804)液相-质谱鉴定法 显微鉴别法显微鉴别法是指用显微镜对药材(饮片)切片、粉末、解离组织或表面制片及含饮片粉末的制剂中饮片的组织、细胞或内含物等特征进行鉴别的一种方法。显微镜检验,共涉及6项检测,详见下表,具体实验步骤见附件。序号名称方法49小活络丸(大蜜丸)中异性有机物补充检验方法(BJY 202006)显微鉴别法50胆香鼻炎片中苍耳子、金银花及甘草植物组织检查项补充检验方法(BJY 201911)显微鉴别法51归脾丸(浓缩丸)中酸枣仁植物组织检查项补充检验方法(BJY 201910)显微鉴别法52心宁片中赤芍、三七茎叶植物组织检查项补充检验方法(BJY 201903)显微鉴别法53藿香正气丸(加味藿香正气丸)中大腹皮植物组织检查项补充检验方法(BJY 201802)显微鉴别法54珍黄胶囊中黄芩植物组织检查项补充检验方法显微鉴别法 电泳法琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法,可用于分离和纯化DNA片段。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速率向正极方向移动。电泳法用于检测丸剂中的水稻源性成分,详见下表,具体实验步骤见附件。序号名称方法55通宣理肺丸(水蜜丸)、九味羌活丸(水丸)中水稻源性成分检查电泳法 近年来,虽然中成药补充检验方法的研究,多是以应对案件中的中成药质量检测和突发事件中的应急检验为目的,导致其适用范围有一定的局限性。但其仍在市场监管中发挥了积极作用,是保证人民用药安全的重要手段。 薄层色谱法、高效液相色谱法(10项检测方法).docx 高效液相色谱法(28项检测方法).docx 液相-质谱鉴定法(10项检测方法).docx 显微鉴定法(6项检测方法).docx 通宣理肺丸(水蜜丸)、九味羌活丸(水丸)中水稻源性成分检查项补充检验方法.doc
  • 去内毒素亲和填料的常见问题解答
    内毒素亲和填料 内毒素是一种常见的蛋白污染物,它的存在使得蛋白的活性研究变得十分复杂,并且内毒素是一种对人类有害的化学物质,它能引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等一系列不良症状,因此,检测和去除蛋白中的内毒素有着十分重要的意义。 月旭Endotoxin rem Tanrose 4FF 内毒素亲和填料以自制的琼脂糖凝胶为基质、多占菌素B为配基,用于去除生物源蛋白类产品(包括多肽、抗体、多糖等)中的内毒素,但多占菌素B只对部分内毒素有抑制作用,而不能抑制所有内毒素。 技术参数 常见问题解决方案 #01 内毒素去除效率低,应当怎么做? ①可能原因:样品pH值不在内毒素结合范围。解决方法:用0.1M NaOH或0.1M HCl调节pH至7-8。 ②可能原因:样品与填料接触时间短。解决方法:降低流速,增加样品接触时间。 ③可能原因:检测系统被内毒素污染。解决方法:确保所有试验用品均为无热源产品。 ④可能原因:内毒素与目的蛋白结合较强解决方法:优化样品pH,使样品能够与内毒素分离。 #02 样品被污染,应当怎么做? ①可能原因:该填料纯化过其他样品。解决方法:增加接触时间;不要用使用过的填料来去除不同样品的内毒素。 #03 样品回收率低,应当怎么做? ①可能原因:样品非特异性吸附在填料上。解决方法:增加样品和平衡液中的NaCl浓度。 ②可能原因:目的蛋白与内毒素结合一起被去除。解决方法:优化样品pH,使样品与内毒素分离。 订购信息
  • 老酸奶被指添加工业明胶不能吃:或用旧皮鞋熬制
    4月9日消息,央视记者微博今日爆料:不要吃老酸奶和果冻。央视主持人赵普(微博) 称:“来自调查记者短信:不要吃老酸奶(固体形态)和果冻,内幕很可怕”。而朱朱文强(微博)微博称:“央视一哥们说,以后别吃果冻和酸奶,问为啥,他比喻说,哪天你扔了双破皮鞋,转眼就进你们肚子了。这哥们说,这才是今年315晚会重头,可惜没播”。媒体人微博网名”落魄书生周筱赟(微博)“对此称:”不用这么神秘兮兮啦。所谓老酸奶,就是更加浓稠,其实是大量添加工业明胶。工业明胶,就是用垃圾里面回收的破烂皮革之类做出来的。果冻更是如此。这本该是常识。“   网友评论:   一财网在以上微博评论中看到,有网友猜测:”跟头发做酱油、臭皮熬阿胶一个道理吧 ?或者是塑化剂 ? “   网友:”我是学食品营养与检测的,也经常会与食品添加剂打交道,像目前国内的果饮基本都是用添加剂调制而成,比如营养快线,只需少量的牛奶,按顺序正确加入添加剂,就能马上调制而出。还有一块小小的面包,按照最新国标(GB2760-2011)最多可添加二十种的添加剂。“   网友:”看到评论里有人说是用廉价的工业明胶代替食用明胶。百度了一下,发现使用明胶的食物多如牛毛,不过查了下工业明胶和食用明胶的价格差距并不大,差价利润绝对不值得大企业冒险,估计还有内幕。“   究竟何为老酸奶?   不知道什么时候开始,各超市的酸奶柜台突然被铺天盖地的“老酸奶”所占据。几个月以来,许多朋友都问我:老酸奶是不是最天然的酸奶?是不是营养价值比其他酸奶高?是不是有特殊保健作用?是不是比其他酸奶安全?是不是不含添加剂特别适合孩子吃?   真正的老酸奶是怎么制作的?   其实,所谓的“老酸奶”,是一个传统制作酸奶产品的概念,但已经变味了。各地都有自己的 “老酸奶”,也就是过去传统制作的凝固型酸奶。这种酸奶不是黏稠的液态,而是基本上呈现固态。这种固态不是加了任何凝固剂,而是牛奶蛋白质的一种特殊凝胶状态。把消过毒的牛奶、糖和菌种加到干净的容器当中,保温发酵几个小时,牛奶就会变成固态,每个自制酸奶的人都知道。这种蛋白质凝胶状态很脆弱,只要用力搅拌,就能让看似坚实的凝胶重新变成液态的奶。能伸展到脚踝处,那么你需要更多相关锻炼。   普通酸奶是老酸奶加了增稠剂等   在我们小时候,各地的酸奶都是这种固态的产品,但随着奶制品产量的增大,这种产品慢慢地退出了市场。这是因为凝固型的酸奶在运输中容易因为摇晃、震荡等机械力量影响口感,消费者看到的是破碎的冻,甚至是变成液态的酸奶,肯定会不满意。   同时,因为在固态酸奶没法加入果汁、果粒之类配料,为了便于运输和销售,人们就加入一些增稠剂,把大罐发酵好的酸奶凝冻慢慢搅碎,让它变成黏稠的半流体。这就是市面上占优势的酸奶产品状态。   如果少加增稠剂,酸奶产品往往会呈现液态,只不过比牛奶略浓一些,有些消费者以为酸奶“内容不够”而产生嫌弃心情,其实这是很正常的状态。能伸展到脚踝处,那么你需要更多相关锻炼。   如今的“老酸奶”添加了凝胶剂   但是,喝惯了这种黏稠的酸奶,人们也有点腻了。这时候,新产品“老酸奶”让人们眼前一亮。它以传统产品的面目出现,但为了避免运输中变稀的麻烦,添加了凝胶剂,这样,无论怎么震荡都不会变成液态,运输和销售非常方便。   普通的牛奶原料,加明胶、琼脂、卡拉胶等等植物胶,就可以制成这种凝冻状态。我的实验室里就曾经做过类似的冻,而且口感效果比某些市售产品还理想,只不过没有把这种配方变成产品。   所以,严格来说,市面上所谓的“老酸奶”产品,应当叫做“酸奶冻”比较确切。能伸展到脚踝处,那么你需要更多相关锻炼。   巨额的暴利驱使企业铤而走险 非法生产食用明胶   据北青网消息,中国明胶协会理事长王敬忠向记者算了一笔账:1吨正规食用明胶的原材料,价格高达2000~3000元,而一般的皮革下脚料,1吨仅需要 100~200元。但是,进入市场后,1吨食用明胶的收购价都在2万~3万元左右。“目前,国内生产食用明胶的不法小厂家有100多家,然而取得生产许可证的只有20多家。不仅仅是在山东,河北、江浙一带都是这些假冒食用明胶的根据地。”   王敬忠说,在当地工厂,工人们都会将这些皮革废料叫做“蓝皮”、“白皮”。这些皮子全是从皮鞋、皮衣或制鼓的皮革上削下来的废料,拉回工厂时,大都是成碎末的皮子,还搀和着大量的泥块。“但是制成后的明胶,透明无味。消费者根本无法将正规的食用明胶和废皮革做成的明胶区分开来。”   中国农业大学教授陈敏称,制革厂在鞣制皮革时,要使用一些含有金属元素铬的化学制剂。鞣制、整理后才舍弃一些碎皮,这些碎皮就含有对人体有害的金属铬。金属铬会破坏人体骨骼以及造血干细胞,长期食用会导致骨质疏松,严重的会患上癌症。铬对人体健康的这种危害是一个缓慢的过程,一般在2年以上才会显现出来。   专家曾表示:只要不超标都可以   早在2011年6月间,有网友微博爆料说,以粘稠见称的“老酸奶”是很多人的最爱。但所谓“老酸奶”其实是由一种“凝胶剂”制成,虽然价格是普通酸奶(乳酪)的一倍还多,但并没有更多营养,而且多食无益。为此,该网友调侃道:哥喝的不是“老酸奶”,是凝胶剂!   对此当时中国西部乳业发展协会秘书长魏荣禄接受媒体指出,果胶、明胶都属于稳定剂,是国家允许添加在奶制品中的,只要不超过标准都是正常的。   “搬运过程中的震动可能会使老酸奶产生乳清分离,影响其品质和口感。所以老酸奶中加入了适量的稳定剂”。魏荣禄说,过去的老酸奶在发酵后很短时间内就被饮用,因而只用添加食糖,不需要添加稳定剂。   “老酸奶并不是越浓越好,”魏荣禄表示,过于浓稠的老酸奶中可能加入了琼脂等增稠剂,营养价值并不会随着浓稠程度的提高而增加。
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