超氧化物歧化酶

大球盖菇过氧化物酶及超氧化物歧化酶的研究 张琪林1,王红2(1运城学院生命科学系,山西运城044000 2运城学院生化实验中心,山西运城044000) 摘　要:采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法测定大球盖菇过氧化物酶和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶活 性,结果表明大球盖菇过氧化物酶有4种同工酶,比移分别是:0.13、0.18、0.25、0.32,其活性大小接近. SOD三种都有,比移分别为0.20、0.21、0.25,以CuZn-SOD活性最大,Mn-SOD活性较小.CuZn-SOD 及Mn-SOD辅因子易于丢失,应用时应予以注意.关键词:大球盖菇 过氧化物酶 超氧化物歧化酶 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳中图分类号:Q935　文献标识码:A大球盖菇(Strophariarugoso-annulate)栽培广 泛,食药两用,深受菇农与消费者青睐,栽培研究颇 多,生理研究也日渐深入.已有液体培养氮碳营养 源[1]、与pH关系[2]、胞外酶特性[3]等研究报道,而 胞内酶研究报道尚未见到.过氧化物酶、超氧化物 歧化酶是机体清除H2O2、超氧离子(O-2)等活性氧 的氧化还原酶.[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903260925_140607_1614854_3.gif[/img]对生物抗氧化、防辐射、抗衰老等方面都有重要作 用,尤其是SOD.本文采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电 用方法鉴定大球盖菇上述两种酶的活性及种类,以 期为大球盖菇的生理生化研究和大球盖菇的应用 提供理论依据.1　材料与方法1.1　材料供试菌株引自河南省清丰县食用菌技术推广 中心.所用化学试剂均为分析纯.1.2　方法1.2.1　菌丝培养　20%土豆浸汁1000mL,蔗糖 20g,蛋白胨2g,磷酸二氢钾2g,硫酸镁1.5g,pH值 自然.分装于300mL锥形瓶,每瓶50mL,高压灭菌.接种后25~28℃恒温摇床培养21天,振荡频 率为120r/min.1.2.2　酶液制备　菌丝冲洗干净后,于-4℃冷冻 12h.按菌丝∶0.1MpH7.4磷酸缓冲液(冷藏)∶石 英砂=1∶2∶0.2比例混合.冰浴磨成匀浆.在 10℃以下环境离心(4000r/min,15min).取上清液 5份与40%蔗糖(冷藏)、0.01%溴酚蓝各1份混 合,置冰箱备用.1.2.3　电泳　方法为聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳. 样品分离胶浓度为7%,pH8.9.浓缩胶浓度为2. 5%,pH6.7.电极缓冲液为Tris-甘氨酸缓冲液, pH8.3.点样量为30μL/管.以溴酚蓝为指示剂.电 流开始为10mA,电泳两分钟后加大至50mA.待溴 酚蓝移至凝胶柱下端附近时停止电泳.电泳环境温 度为10℃,时间1.2h.1.2.4　染色1.2.4.1　过氧化物酶染色　A液:0.4g联苯胺加 入3mL冰醋酸于80℃溶解,加入17mL蒸馏水,随 用随配.B液:4%氯化铵.C液:5%EDTA.D液:0. 3%H2O2.按等体积加8倍水混合,量以淹没胶柱 为度.剥胶后立即放入染液,等到有蓝色谱带出现 后,取出用水冲洗干净,再用7%醋酸脱色漂洗后 观察.1.2.4.2　SOD染色　(1)对照a、在2.45×10-2M 氯化硝基四氮唑蓝(NBT)液中黑暗下浸泡1h,温 度37℃.b、在2.8×10-2M四甲基乙二胺、2.8× 10-5M核黄素和在3.6×10-2MpH7.8磷酸缓冲 液中黑暗下浸泡1h,温度37℃.c、在1×10-4M EDTA,5×10-2MpH7.8磷酸缓冲液中,距40W日 光灯20cm光照20min.(2)添加辅基处理.在(1 中分别添加5mMNa2SO4 FeSO4 MnSO4 CuSO4+ ZnSO4 FeSO4+MnSO4+CuSO4+ZnSO4.(3)添加 抑制剂处理.在酶液中分别添加10mMKCN或 30%氯仿-乙醇,其他同上.2　结果与讨论2.1　过氧化物酶谱及分析[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903260926_140608_1614854_3.gif[/img]结果如图1.从图1可见,大球盖菇菌丝体过 氧化物酶有4条带.比移分别为0.13,0.18,0.25, 0.32.其活性大小接近.2.2　超氧化物歧化酶谱及分析(1)添加SOD辅因子试验结果见图2.从中可 见共有三条带.比移分别为A:0.20,B:0.21,C:0. 25.都有B带,但加铁处理(3、6)的较亮,说明B带 是Fe-SOD,铁离子对该SOD活性有明显的增强作 用.没有加铁的处理(1,2,4,5)SOD也有活性,说 明铁与酶蛋白的结合较牢固,不易丢失.1,2,3,5 无A带,4,6有,说明A带是Mn-SOD.同理,C带为 CuZn-SOD.未加锰、铜、锌盐的没有相应的带,说 明锰、铜、锌与酶蛋白的结合较为松散,易于丢失. 比较三种SOD,以Mn-SOD活力最小,CuZn-SOD 活性最大.(2)添加抑制剂试验结果为:加KCN后,显色 结果无C带 加氯仿-乙醇后,无A带.已知10mM KCN抑制CuZn-SOD,30%氯仿-乙醇抑制Mn- SOD[4].说明2.2.1结论是正确的.综上所述,大球盖菇菌丝体抗氧化酶比较丰 富,过氧化物同工酶有4种 超氧化物歧化酶有3 种,以CuZn-SOD活性较高,Mn-SOD、Fe-SOD活 性较低,但CuZn-SOD、Mn-SOD辅因子易于丢 失,应用时应予以注意.参考文献:[1]张琪林,王红.大球盖菇液体培养碳氮营养源研究[J].食用 菌.2002,24(1):6.[2]王红,张琪林.大球盖菇液体培养与pH值关系研究[J].山西 师范大学学报(自然科学版).2003,17(增1期):108~109. [3]王红,张琪林.大球盖菇液体培养胞外酶特性研究[J].食用 菌.2003,25(2):8~9.[4]李中振,田廷亮.灵芝超氧化物歧化酶同工酶研究[J].中国食 用菌.1997,16(4):32~34.

[color=#444444]请问[/color][color=#444444]SOD[/color][color=#444444]超氧化物歧化酶是否可以用于普通食品中呢？依据是什么呢？[/color]

您好 ？ 请问有没有用高效液相色谱仪来检测 超氧化物歧化酶(SOD)的方法和步骤。望告之为幸！我公司想购买该方面的检测仪器。

您好？谢谢您昨天的答复！昨天我问“有没有用高效液相色谱仪来检测 超氧化物歧化酶(SOD)的方法和步骤”。您告之“有用高效液相色谱仪来检测 超氧化物歧化酶(SOD)的方法,有一些文献讨论HPLC分析SOD,如:生物化学杂志,Vol.11,No.1,1995: 76-79” 但我现在怎样才能找到1995年《生物化学杂志〉76-79呢？ 热切盼回复！！！！

您好 我所在城市的图书馆资料仅保存有最近3年的！用高效液相色谱仪来检测 “超氧化物歧化酶(SOD)的方法和步骤”除了1995年《生物化学杂志〉76-79 上面可以找到外，还有没有其他的途径？望告之！若方便请直接告诉我为幸！

一、原理 超氧物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）普遍存在于动、植物体内，是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生O2，可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除O2，从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。 二、材料、仪器设备及试剂 （一）材料；水稻或小麦叶片 （二）仪器设备：1.高速台式离心机；2.分光光度计；3.微量进样器；4.荧光灯（反应试管处照度为4000Lx）；5.试管或指形管数支。 （三）试剂　1. 0.05mol/L 磷酸缓冲液（pH7.8）；2. 130mmol/L 甲硫氨酸（Met）溶液：称1.9399gMet用磷酸缓冲液定容至100ml；3.750μmol/L 氮蓝四唑溶液：称取0.06133gNBT用磷酸缓冲液定容至100ml，避光保存；4. 100μmol/L EDTA－Na2溶液：称取0.03721gEDTA－Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml；5. 20μmol/L 核黄素溶液：称取0.0753g核黄素用蒸馏水定容至1000ml避光保存。三、实验步骤 1. 酶液提取　取一定部位的植物叶片（视需要定，去叶脉）0.5g于预冷的研钵中，1ml预冷的磷酸缓冲液在冰浴上研磨成浆，加缓冲液使终体积为5ml。取1.5～2ml于1000rpm下离心20min，上清液即为SOD粗提液。2. 显色反应　取5ml指形管（要求透明度好）4支，2支为测定管，另2支为对照管，按下列加入各溶液：试剂（酶）用量（ml）终浓度（比色时）0.05mol/L 磷酸缓冲液1.5130mmol/L Met溶液0.313mmol/L 750μmol/L NBT溶液0.375μmol/L 100μmol/L EDTA－Na2液0.310μmol/L 20μmol/L 核黄素0.320μmol/L 酶液0.052支对照管以缓冲液代替酶液蒸馏水0.25总体积3.0混匀后将1支对照管置暗处，其它各管于4000Lx日光下反应20min（要求各管受光情况一致，温度高时间缩短，低时延长）。 3. SOD活性测定与计算　至反应结束后，以不照光的对照管做空白，分别测定其它各管的吸光度。四、结果计算 已知SOD活性单位以抑制NBT光化还原的50％为一个酶活性单位表示，按下式计算SOD活性。SOD总活性＝(Ack－AE)×V/(Ack×0.5×W×Vt) 上式中，SOD比活力＝SOD总活性蛋白质含量式中SOD总活性以每克鲜重酶单位表示；比活力单位以酶单位／mg蛋白表示Ack照光对照管的吸光度AE样品管的吸光度V样品液总体积（ml）Vt测定时样品用量（ml）W样鲜重（g）蛋白质含量单位为：mg蛋白／g鲜重。

【序号】：1【作者】：曹淑华, 查向东【题名】：超氧化物歧化酶(SOD)研究综述【期刊】：安徽农业科学【年、卷、期、起止页码】：2003年 第31卷 第04期 【全文链接】： http://scholar.ilib.cn/A-ahnykx200304040.html【序号】：2【作者】：陈鸿鹏, 谭晓风【题名】：超氧化物歧化酶(SOD)研究综述【期刊】：经济林研究【年、卷、期、起止页码】：2007年 第25卷 第01期 【全文链接】： http://www.ilib2.com/A-ISSN~1003-8981%282007%2901-0059-07.html【序号】：3【作者】：盛良全, 郑晓云, 闫向阳, 肖厚荣, 厦炳乐, 刘少民, 【题名】：生命体中的超氧化物歧化酶(综述)【期刊】：安徽卫生职业技术学院学报【年、卷、期、起止页码】：2002年 第1卷 第02期 【全文链接】： http://www.ilib2.com/A-ISSN~1671-8054%282002%2902-0048-06.html【序号】：4【作者】：章慧慧, 励建荣, 【题名】：超氧化物歧化酶的研究和应用现状【期刊】：农产品加工学刊【年、卷、期、起止页码】：2007年 第08期 【全文链接】： http://www.ilib2.com/A-ISSN~1671-9646%282007%2908-0028-04.html

请问有没有歧化酶测试的相关标准？

纳米二氧化钛在光催化作用下使细菌分解而达到抗菌效果的。由于纳米二氧化钛的电子结构特点为一个满 TiO2的价带和一个空的导带，在水和空气的体系中，纳米二氧化钛在阳光尤其是在紫外线的照射下，当电子能量达到或超过其带隙能时。电子就可从价带激发到导带，同时在价带产生相应的空穴，即生成电子、空穴对，在电场的作用下，电子与空穴发生分离，迁移到粒子表面的不同位置，发生一系列反应，吸附溶解在 TiO2 表面的氧俘获电子形成O2 ·，生成的超氧化物阴离子自由基与多数有机物反应(氧化) 。同时能与细菌内的有机物反应，生成 CO2和 H2O；而空穴则将吸附在TiO2表面的 OH和H2O氧化成·OH,·OH有很强的氧化能力，攻击有机物的不饱和键或抽取H原子产生新自由基，激发链式反应，最终致使细菌分解。TiO2 的杀菌作用在于它的量子尺寸效应，虽然钛白粉(普通 TiO2)也有光催化作用，也能够产生电子、空穴对，但其到达材料表面的时间在微秒级以上，极易发生复合，很难发挥抗菌效果，而达到纳米级分散程度的TiO2，受光激发的电子、空穴从体内迁移到表面。只需纳秒、皮秒、甚至飞秒的时间，光生电子与空穴的复合则在纳秒量级，能很快迁移到表面，攻击细菌有机体，起到相应的抗菌作用。在紫外线作用下，以0.1mg/cm3浓度的超细TiO2可彻底地杀死恶性海拉细胞，而且随着超氧化物歧化酶（SOD）添加量的增多，TiO2光催化杀死癌细胞的效率也提高；用TiO2光催化氧化深度处理自来水，可大大减少水中的细菌数，饮用后无致突变作用，达到安全饮用水的标准。在涂料中添加纳米二氧化钛可以制造出杀菌、防污、除臭、自洁的抗菌防污涂料，可应用于医院病房、手术室及家庭卫生间等细菌密集、易繁殖的场所，可有效杀死大肠杆菌、黄色葡萄糖菌等有害细菌，防止感染。因此，纳米纳米二氧化钛能净化空气，具有除臭功能。 纳米二氧化钛抗菌特点：对人体安全无毒，对皮肤无刺激性；抗菌能力强，抗菌范围广；无臭味、怪味，气味小；耐水洗，储存期长；热稳定性好，高温下不变色，不分解，不挥发，不变质；即时性好，纳米二氧化钛抗菌剂仅需1h就能发挥效果，而其他银系抗菌剂效果则需约24h；纳米二氧化钛是一种永久性维持抗菌效果的抗菌剂；具有很好的安全性，科用于食品添加剂等，与皮肤接触无不良影响。

本人最近在用P/ACE MDQ（用的是未修饰过的毛细管柱）做超氧化物歧化酶（CU/ZnSOD)的含量测定，但是标准品的浓度达到1000ppm峰还是很小，用的缓冲液是pH5.36的磷酸缓冲液，内加SDS,有人做过SOD吗？请提供点意见！！！

SOD蜜一种含有SOD成分的一种皮肤保养品 　　SOD（超氧化物歧化酶）是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充 SOD具有抗衰老的特殊效果。 　　超氧物歧化酶(Superoxide dismutase简称SOD)是一种新型酶制剂,它在生物界的分布极广,几乎从人到细胞,从动物到植物,都有它的存在。原来从牛血中制取,现多从猪血中提取,商品名为Orgotdin。它对于治疗因超氧离子(O_2~(u-))引起的各种疾病均有一定的疗效,尤其治疗类风湿关节炎、红斑痕疮,皮肌炎等均有明显效果。此外,在防辐射,防衰老,抗肿瘤等方面也已进入临床。问题：SOD那么贵重，到底在化妆品中有没有？？？

一、在护肤美容用品中的应用 　　各种护肤美容用品是由油脂、水与表面活性剂组成的油包水或水包油的分散体系。有膏、霜、奶、乳、液等多种形式。对皮肤有着保湿、清洁、美容、润肤等多种作用，目前经常在化妆品中加入诸如维生素、氨基酸、激素、酶等营养剂，对皮肤进行滋润营养保健，有时也加入防晒剂，保护皮肤免受过量紫外线的侵害。在护肤美容用品中，使用的微胶囊主要有以下几种形式：1.酶微胶囊 　　加在护肤化妆品中能对皮肤起着营养、保健作用的酶主要有以下几种： 　　⑴木瓜蛋白酶：是一种从热带水果番木瓜中提炼出来的植物性肽链水解酶，它对皮肤有增加柔软、弹性和滋润作用。 　　⑵胃蛋白酶：是存在于胃液中的肽链水解酶，对皮肤有美容保健作用。 　　⑶凝乳酶：是从动物胃液中分离制得的一种蛋白酶。它可以改进人体肌肉的韧性，加强皮肤的柔软及光滑感，是一种很好的皮肤柔软剂。 　　⑷溶菌酶：是从鸡蛋清中分离制取的。加在化妆品中有很好的清疮、抗炎、杀菌作用。也可以作化妆品的防腐剂。 　　⑸超氧化物歧化酶(SOD)：这种酶一般是从动物血细胞中分离纯化而制得。具有很强的抗氧化能力，是活性氧自由基的有效清除剂。而活性氧自由基在体内引起多种有害的反应，将它及时清除有益于人体健康。超氧化物歧化酶具有抗辐射污染和消炎作用，且极易透过皮肤被吸收，它对酪氨酸酶诱发的黑色素有重要的抑制作用，因此，对老年斑和雀斑、面部黄褐斑等皮肤色素沉淀症有显著疗效。超氧化物歧化酶是目前化妆品行业中研究最多、应用最广的一种生物酶。 　　⑹蛋白水解酶：它能使皮肤表面的细胞蛋白质分子肽键断裂水解，有利于除去皮肤表面老化的组织。如与解脂酶合用，其作用则更强烈、快速。蛋白水解酶有利于消除由于风吹、日晒、体力劳动或其它因素所造成的皮肤伤害。 　　⑺谷光甘肽过氧化酶(GSH-Px)：它可在不同条件下防止脂质量过氧化物产生。硒元素是谷光甘肽过氧化酶中活性组分，含有这种酶的化妆品，在治疗脂质过氧化物引起的皮肤炎症及抗皮肤衰老方面有着重要作用。 　　⑻鞘磷脂酶：它存在于配糖鞘磷脂中，是一种能平衡皮肤保湿性能的酶。如将其包敷在脂质体微胶囊中，则能渗透到皮肤的深层，有很好的滋润作用。 　　⑼脂肪酶：它能促使脂肪水解。在化妆品中添加脂肪酶，有益于粉刺等含脂肪物质的消除。 　　⑽胶原酶：是一种对防止皮肤疤痕生成有特殊作用的酶。 　　另外，在化妆品中使用的酶，还有α-淀粉酶、胰脂肪酶、胰蛋白酶、尿素酶、尿酸酶、α-糜蛋白酶等。它们对皮肤的抗炎、清疮都有一定功效。 　　由于酶这种生物催化剂的活性很易受到外界环境的影响，利用微胶囊技术把酶保护起来就可以保持其活性。应指出的是，近年来用脂质体做皮肤化妆品中各种酶的包覆材料的研究正在不断深入，实践证明做成脂质体微胶囊形式，更有利于酶在皮肤上的吸收利用，有利于更好发挥酶的护肤保健功能。2.药物微胶囊(略)3.功能性颜料微胶囊4.香料微胶囊

一、在护肤美容用品中的应用　　各种护肤美容用品是由油脂、水与表面活性剂组成的油包水或水包油的分散体系。有膏、霜、奶、乳、液等多种形式。对皮肤有着保湿、清洁、美容、润肤等多种作用，目前经常在化妆品中加入诸如维生素、氨基酸、激素、酶等营养剂，对皮肤进行滋润营养保健，有时也加入防晒剂，保护皮肤免受过量紫外线的侵害。在护肤美容用品中，使用的微胶囊主要有以下几种形式：1.酶微胶囊　　加在护肤化妆品中能对皮肤起着营养、保健作用的酶主要有以下几种：　　⑴木瓜蛋白酶：是一种从热带水果番木瓜中提炼出来的植物性肽链水解酶，它对皮肤有增加柔软、弹性和滋润作用。　　⑵胃蛋白酶：是存在于胃液中的肽链水解酶，对皮肤有美容保健作用。　　⑶凝乳酶：是从动物胃液中分离制得的一种蛋白酶。它可以改进人体肌肉的韧性，加强皮肤的柔软及光滑感，是一种很好的皮肤柔软剂。　　⑷溶菌酶：是从鸡蛋清中分离制取的。加在化妆品中有很好的清疮、抗炎、杀菌作用。也可以作化妆品的防腐剂。　　⑸超氧化物歧化酶(SOD)：这种酶一般是从动物血细胞中分离纯化而制得。具有很强的抗氧化能力，是活性氧自由基的有效清除剂。而活性氧自由基在体内引起多种有害的反应，将它及时清除有益于人体健康。超氧化物歧化酶具有抗辐射污染和消炎作用，且极易透过皮肤被吸收，它对酪氨酸酶诱发的黑色素有重要的抑制作用，因此，对老年斑和雀斑、面部黄褐斑等皮肤色素沉淀症有显著疗效。超氧化物歧化酶是目前化妆品行业中研究最多、应用最广的一种生物酶。　　⑹蛋白水解酶：它能使皮肤表面的细胞蛋白质分子肽键断裂水解，有利于除去皮肤表面老化的组织。如与解脂酶合用，其作用则更强烈、快速。蛋白水解酶有利于消除由于风吹、日晒、体力劳动或其它因素所造成的皮肤伤害。　　⑺谷光甘肽过氧化酶(GSH-Px)：它可在不同条件下防止脂质量过氧化物产生。硒元素是谷光甘肽过氧化酶中活性组分，含有这种酶的化妆品，在治疗脂质过氧化物引起的皮肤炎症及抗皮肤衰老方面有着重要作用。　　⑻鞘磷脂酶：它存在于配糖鞘磷脂中，是一种能平衡皮肤保湿性能的酶。如将其包敷在脂质体微胶囊中，则能渗透到皮肤的深层，有很好的滋润作用。　　⑼脂肪酶：它能促使脂肪水解。在化妆品中添加脂肪酶，有益于粉刺等含脂肪物质的消除。　　⑽胶原酶：是一种对防止皮肤疤痕生成有特殊作用的酶。　　另外，在化妆品中使用的酶，还有α-淀粉酶、胰脂肪酶、胰蛋白酶、尿素酶、尿酸酶、α-糜蛋白酶等。它们对皮肤的抗炎、清疮都有一定功效。　　由于酶这种生物催化剂的活性很易受到外界环境的影响，利用微胶囊技术把酶保护起来就可以保持其活性。应指出的是，近年来用脂质体做皮肤化妆品中各种酶的包覆材料的研究正在不断深入，实践证明做成脂质体微胶囊形式，更有利于酶在皮肤上的吸收利用，有利于更好发挥酶的护肤保健功能。

腊八蒜的功效和作用　　开胃、防癌、抗癌　　酸甜可口、香而不辣的腊八蒜能去油解腻、开胃助消化。此外，大蒜能阻断亚硝胺类致癌物在体内的合成，起到防癌的作用，其抗癌作用已被医学所证实。　　杀菌、抗病毒　　大蒜素是一种天然的杀菌物质，而腊八蒜还含有一种叫硫化丙烯的辣素，其杀菌能力可以达到青霉素的1/10，对病原菌和寄生虫都有良好的杀灭作用。　 防止心血管疾病　　大蒜素能促进新陈代谢，降低胆固醇和血液浓度、抑制血小板的聚集、增加血管的通透性，从而抑制血栓形成以及防止动脉硬化。　　降低血糖　　大蒜经过“腊八蒜”的加工，不仅优化了风味，而且功能活性也得到优化。大蒜能够促进胰岛素的分泌，迅速降低体内血糖水平，从而有效预防糖尿病。 护肝、抗衰老　　大蒜中含有丰富的微量元素硒，能清除毒素，减轻肝脏负担，从而起到护肝的作用。此外，大蒜中所富含的超氧化物歧化酶也有抗氧化作用，能有效延缓衰老

请教氮氧化物盲样值有0.545左右的没？急等结果？

氧化物的干扰是较常见的质谱干扰之一，大家是通过优化仪器的工作条件来满足测定要求呢，还是通过编辑干扰校正方程来扣除氧化物的干扰，编辑干扰校正方程有点麻烦，优化仪器的工作条件更简单些，对下面这句话：通过优化仪器的工作参数，使CeO/Ce＜1.2%，可消除氧化物干扰对稀土元素的测定（如135Ba16O对151Eu，141Pr16O对157Gd的干扰）为什么“通过优化仪器的工作参数，使CeO/Ce＜1.2%，可消除氧化物干扰”感觉有点笼统

超氧物岐化酶（Snoeroxibe　Dismutase），简称"SOD"，为一类氧自由基的主要清除剂，因而在防御氧自由基对细胞膜伤害起着重要作用，目前SOD已在临床上应用，对消除炎症、特别是类风湿性关节炎以及放射治疗后引起的皮肤炎症；对某些自身免疫功能缺陷所引起的疾病如红斑狼疮、皮肤炎、肺气肿引起的氧中毒等具有显著的效果。更值得一提的是SOD在防止癌细胞扩散和作为抗衰老的药物已广泛引起医药界人士极大的兴趣，目前国内外已有不少添加SOD的抗衰老保健用品，但所用的SOD均为从人血和动物血液提取。如果从植物、特别人们日常经常食用的蔬菜、瓜果及粮食提取SOD，其使用安全就非常高，避免可能发生的交叉感染。本技术是利用全新的技术生产植物的SOD，该产品具有优良抗衰作用。甘油制剂是专提供化妆品之用，而冻干粉则除用于化妆品外还用于保健食品和药物（纯化后）。

[align=center]板栗叶水浸液对商洛丹参幼苗酶活性的影响[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]食品事业部：魏娜[/align][b]摘要：[/b]本实验以商洛丹参种子为材料，以板栗叶为供体，研究不用浓度板栗叶水浸液对商洛丹参幼苗酶活性的影响。采用生物测定法测定丹参幼苗酶活性的状况。关键词：丹参，板栗叶水浸液，酶活性植物化感作用(Allelopathy)是指植物(含微生物)向环境释放特殊的化学物质而对其他植物或微生物产生直接或间接的有害或有益的作用,这些特殊的化学物质叫做化感物质。化感物质一方面通过植物体释放产生,另一方面通过植物地上和地下部分的残体分解产生。化感作用广泛存在于自然界中,它涵盖了各种植物之间、包括微生物间的相生相克关系,对解释植物个体及种间的相互作用机制和构建可持续的植物群落都起着重要的作用,并对农、林业生产有重要的影响,如农作物的连作障碍、森林更新失败以及生物入侵等现象都与化感作用密切相关。 化感物质进入土壤后,植物根际微生态系统将发生复杂的变化。化感物质对土壤微生物区系及酶活性的研究,包括根系分泌物数量和成分的变化与土壤微生物类群的关系、土壤酶活性与土壤微生物种类及数量的关系等,这为研究化感作用对土壤根际微生态系统的影响,特别是为根际微生物区系的变化提供了有益的参考。目前,有关植物某一部位水浸液以及纯化感物质对土壤酶活性、土壤养分和微生物数量影响的相关研究相对较少,已有研究主要包括:黄益宗等研究发现化感物质阿魏酸对土壤硝化反应的抑制作用最强,其次是对叔丁基苯甲酸 吕可等通过用花椒叶水浸液浇灌盆栽花椒幼苗研究水浸液对土壤酶和微生物的影响,结果表明:花椒叶水浸液使根际土中的细菌、真菌和放线菌数量以及微生物总数均有不同程度的减少,使根际土蛋白酶、蔗糖酶和酸性磷酸酶活性明显低于非根际土相应的酶活性,而过氧化氢酶和多酚氧化酶活性则显著升高 印楝种子壳的酒精水浸液显著抑制了土壤中放线菌的数量,显著增加了土壤中自由固氮细菌的数量,显著抑制了土壤中反硝化细菌的数量,土壤脱氢酶活性未受到影响,而磷酸酶活性受到了严重的抑制 2,4二叔丁基苯甲酸(PEDT)和香草酸两种化感物质均在低浓度下提高而在高浓度下抑制了微生物生物量及其活力。板栗（Castanea mollissima Blume）,有较高的药用价值，有健脾胃、益气、补肾、强心的功用。其中所含的丰富的不饱和脂肪酸和维生素，能防治高血压病、冠心病和动脉硬化等疾病。板栗在商洛地区大面积种植,是商洛主要经济林品种之一、五大商药之一、也是商洛的主要经济作物之一。丹参(Salvia miltiorrhiza Bge. )为唇形科鼠尾草属多年生草本植物,具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功能。 其根及根茎是常用的重要中药[sup][color=#3366cc][/color][/sup]，有活血化瘀、消肿止痛、养血安神的功能[sup][color=#3366cc][/color][/sup]。丹参根中含有丹参素、丹参酮等生物活性物质[sup][color=#3366cc][/color][/sup]，对治疗冠心病、心绞痛和脑血管疾病有很好的疗效，同时还具有抗菌消炎、保肝和改善肾功能的作用[sup][color=#3366cc][/color][/sup]。研究不同浓度板栗叶水浸液对商洛丹参幼苗酶活性的影响，对科学构建林药复合系统，合理选择林下中药材品种，提高土地利用率，增加农民收入，促进地方经济发展，不仅具有理论指导作用，还具有非常重要的现实意义。化感作用的研究对农林（林药）复合系统中物种的配置、耕作制度和栽培措施的优化，农田病虫害的控制、复合系统的经营管理，以及保持生物多样性和农业可持续发展有重要意义。在农林（林药）复合系统中，林木会通过淋溶、挥发、残体分解和根系分泌向林下植物释放有益或有害的化学物质，促进或抑制植物的生长和生产，那么合理选择林下作物品种直接影响整个复合系统的总产量和农民的经济收入。研究板栗和丹参之间的化感作用，对林药复合生态系统的构建、管理、经营有着十分重要的意义。[b]1．材料与方法1.1 实验材料[/b]1.1.1实验材料[b] [/b] 供体材料为板栗叶，采自商州区。受体种子为商洛地道中药材丹参。1.1.2实验仪器 人工气候培养箱、分光光度计、水浴锅、冷冻离心机、制冰机、天枰、真空干燥器1.1.3实验试剂[b] 1.2 实验方法1.2.1 板栗叶水浸液的制备[/b]。取风干的板栗叶样品，剪成1cm长的小段，按30g/600mL的比例用蒸馏水浸泡，在振荡器上震荡48h（25℃），过滤后即得浓度为0.05g/mL的水浸液(母液)，用蒸馏水将水浸液分别稀释至0.01、0.02、0.03、0.04、0.05mol/L，置于4℃冰箱备用。 表 1 制作不同浓度的板栗叶水浸液[table][tr][td] 板栗叶水的浓度（mol/L）[/td][td] 母液(mL)[/td][td=1,6]分别用蒸馏水定容至500mL。[/td][/tr][tr][td] 0.01[/td][td] 10[/td][/tr][tr][td] 0.02[/td][td] 20[/td][/tr][tr][td] 0.03[/td][td] 30[/td][/tr][tr][td] 0.04[/td][td] 40[/td][/tr][tr][td] 0.05[/td][td] 50[/td][/tr][/table][b]1.2.2 丹参种子萌发及幼苗培养。 [/b]取丹参种子先用0.1%HgCL[sub]2 [/sub]消毒10min，浸泡24h。蒸馏水冲洗数次，滤干后均匀排列放至培养皿中，于人工气候培养箱（温度25℃，湿度62°）中培养。从培养的第二天起及时补充等量水浸液和蒸馏水，使滤纸始终保持湿润。[b]1.2.3 [/b]超氧化物歧化酶活性的测定 取丹参种子0.20g，加5ml的mmol/L的磷酸缓冲液，研磨成匀浆，匀浆液以5000r/min离心15min，按谁谁的比色法（愈创木酚法），测定各组丹参幼苗SOD酶活性，最后以OD470/ming表示超氧化物歧化酶的活性[align=center][b]实验一 氮蓝四唑（NBT）法测定超氧化物歧化酶（SOD）活力[][/b][/align]一、原理 超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）普遍存在于动、植物体内，是一种清除超氧阴离子自由基的酶。本实验依据超氧化物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有氧化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生超氧阴离子自由基，超氧阴离子自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲腙，后者在560nm处有最大吸收。而SOD可清除超氧阴离子自由基，从而抑制了甲腙的形成。于是光还原反应后，反应液蓝色愈深，说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。二、材料、仪器设备及试剂（一）材料：植物叶片。（二）仪器设备：高速台式离心机，分光光度计，微量进样器，荧光灯（反应试管处照度为4000lx），试管或指形管数支，黑色硬纸套。（三）试剂（1）0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）。A母液：0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液：取Na[sub]2[/sub]HPO[sub]4[/sub]12H[sub]2[/sub]O （分子量358.14） 71.7gB母液: 0.2mol/L 磷酸二氢钠溶液：取NaH[sub]2 [/sub]PO[sub]4[/sub]2H[sub]2[/sub]O （ 分子量156.01） 31.2g分别用蒸馏水定容至1000mL；0.05mol/L磷酸缓冲液（pH7.8）的配制：分别取A母液（Na[sub]2[/sub]HPO[sub]4[/sub]）228.75mL,B母液（NaH[sub]2 [/sub]PO[sub]4[/sub]）21.25mL，用蒸馏水定容至1000mL。（2）130mmol/L甲硫氨酸（Met）溶液：称1.9399gMet用磷酸缓冲液定容至100ml。（3）750μmol/L氮蓝四唑溶液（NBT）：称取0.06133gNBT用磷酸缓冲液定容至100ml，避光保存。（4）100μmol/L EDTA-Na[sub]2[/sub]溶液：称取0.03721g EDTA-Na[sub]2[/sub]，用磷酸缓冲液定容至1000ml。（5）20 μmol/L核黄素溶液：称取0.0753g核黄素用蒸馏水定容至1000ml，避光保存。三、实验步骤1.酶液提取 取丹参幼苗0.5g于研钵中研磨成粉末，加2ml预冷的提取介质在冰浴上研磨成浆，加入提取介质冲洗研钵，提取介质终体积为5ml。取1.5-2ml于4℃下10000r/min下离心20min，上清液即为SOD粗提液。2.显色反应 取5ml指形管或试管（要求透明度好）4支，2支为测定管，另2支为对照管，按下表加入各种溶液： 表2 制作[table][tr][td][align=center]试剂名称[/align][/td][td][align=center]用量（mL）[/align][/td][td][align=center]终浓度（比色时）[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]0.05mol/L磷酸缓冲液[/align][/td][td][align=center]1.5[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]130mmol/L Met溶液[/align][/td][td][align=center]0.3[/align][/td][td][align=center]13mmol/L[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]750μmol/L NBT溶液[/align][/td][td][align=center]0.3[/align][/td][td][align=center]75μmol/L[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]100μmol/L EDTA-Na[sub]2[/sub]溶液[/align][/td][td][align=center]0.3[/align][/td][td][align=center]10μmol/L[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]20 μmol/L核黄素溶液[/align][/td][td][align=center]0.3[/align][/td][td][align=center]2.0μmol/L[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]酶液[/align][/td][td][align=center]0.05[/align][/td][td][align=center]2支对照管以缓冲液代替酶液[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]蒸馏水[/align][/td][td][align=center]0.25[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][tr][td][align=center]总体积[/align][/td][td][align=center]3.0[/align][/td][td][align=center] [/align][/td][/tr][/table]混匀后将1支对照管罩上比试管稍长的双层黑色硬纸套遮光或置暗处，其他各管于4000lx日光下反应20min 至反应结束后，用黑布罩盖上试管，以不照光的对照管作空白，分别测定其他各管在560nm下的吸光度。

想知道银的氧化物的性质，包括一价银氧化物、二价银氧化物和三价银氧化物，谢谢~一价银氧化物的性质比较好找，关键是二价和三价银氧化物的性质很难查得到~希望得到高手的帮助~

专家：你好 我现在想分析煤液化油中的氧化物的种类及总氧，请问用什么方法好？

关于发布《火电厂氮氧化物防治技术政策》的通知　　各省、自治区、直辖市环境保护厅（局），新疆生产建设兵团环境保护局，计划单列市环境保护局：　　为贯彻《中华人民共和国大气污染防治法》，控制和减少火电厂氮氧化物排放，推动火电厂氮氧化物防治技术进步，改善大气环境质量，保护人体健康，现发布《火电厂氮氧化物防治技术政策》，请参照执行。 　　附件：火电厂氮氧化物防治技术政策　　二○一○年一月二十七日　　主题词：环保 氮氧化物 技术政策 通知抄送：发展改革委，科技部，工业和信息化部。 附件：火电厂氮氧化物防治技术政策　　1总则　　1.1为贯彻《中华人民共和国大气污染防治法》，防治火电厂氮氧化物排放造成的污染，改善大气环境质量，保护生态环境，促进火电行业可持续发展和氮氧化物减排及控制技术进步，制定本技术政策。　　1.2本技术政策适用于燃煤发电和热电联产机组氮氧化物排放控制。燃用其他燃料的发电和热电联产机组的氮氧化物排放控制，可参照本技术政策执行。　　1.3本技术政策控制重点是全国范围内200MW及以上燃煤发电机组和热电联产机组以及大气污染重点控制区域内的所有燃煤发电机组和热电联产机组。　　1.4加强电源结构调整力度，加速淘汰100MW及以下燃煤凝汽机组，继续实施“上大压小”政策，积极发展大容量、高参数的大型燃煤机组和以热定电的热电联产项目，以提高能源利用率。　　2防治技术路线　　2.1倡导合理使用燃料与污染控制技术相结合、燃烧控制技术和烟气脱硝技术相结合的综合防治措施，以减少燃煤电厂氮氧化物的排放。　　2.2燃煤电厂氮氧化物控制技术的选择应因地制宜、因煤制宜、因炉制宜，依据技术上成熟、经济上合理及便于操作来确定。　　2.3低氮燃烧技术应作为燃煤电厂氮氧化物控制的首选技术。当采用低氮燃烧技术后，氮氧化物排放浓度不达标或不满足总量控制要求时，应建设烟气脱硝设施。　　3低氮燃烧技术　　3.1发电锅炉制造厂及其他单位在设计、生产发电锅炉时，应配置高效的低氮燃烧技术和装置，以减少氮氧化物的产生和排放。　　3.2新建、改建、扩建的燃煤电厂，应选用装配有高效低氮燃烧技术和装置的发电锅炉。　　3.3在役燃煤机组氮氧化物排放浓度不达标或不满足总量控制要求的电厂，应进行低氮燃烧技术改造。　　4烟气脱硝技术　　4.1位于大气污染重点控制区域内的新建、改建、扩建的燃煤发电机组和热电联产机组应配置烟气脱硝设施，并与主机同时设计、施工和投运。非重点控制区域内的新建、改建、扩建的燃煤发电机组和热电联产机组应根据排放标准、总量指标及建设项目环境影响报告书批复要求建设烟气脱硝装置。　　4.2对在役燃煤机组进行低氮燃烧技术改造后，其氮氧化物排放浓度仍不达标或不满足总量控制要求时，应配置烟气脱硝设施。　　4.3烟气脱硝技术主要有：选择性催化还原技术（SCR）、选择性非催化还原技术（SNCR）、选择性非催化还原与选择性催化还原联合技术（SNCR－SCR）及其他烟气脱硝技术。　　4.3.1新建、改建、扩建的燃煤机组，宜选用SCR；小于等于600MW时，也可选用SNCR－SCR。　　4.3.2燃用无烟煤或贫煤且投运时间不足20年的在役机组，宜选用SCR或SNCR－SCR。　　4.3.3燃用烟煤或褐煤且投运时间不足20年的在役机组，宜选用SNCR或其他烟气脱硝技术。　　4.4烟气脱硝还原剂的选择　　4.4.1还原剂的选择应综合考虑安全、环保、经济等多方面因素。　　4.4.2选用液氨作为还原剂时，应符合《重大危险源辨识》（GB18218）及《建筑设计防火规范》（GB50016）中的有关规定。　　4.4.3位于人口稠密区的烟气脱硝设施，宜选用尿素作为还原剂。　　4.5烟气脱硝二次污染控制　　4.5.1SCR和SNCR－SCR氨逃逸控制在2.5mg/m3（干基，标准状态）以下；SNCR氨逃逸控制在8 mg/m3（干基，标准状态）以下。　　4.5.2失效催化剂应优先进行再生处理，无法再生的应进行无害化处理。　　5新技术开发　　5.1鼓励高效低氮燃烧技术及适合国情的循环流化床锅炉的开发和应用。　　5.2鼓励具有自主知识产权的烟气脱硝技术、脱硫脱硝协同控制技术以及氮氧化物资源化利用技术的研发和应用。　　5.3鼓励低成本高性能催化剂原料、新型催化剂和失效催化剂的再生与安全处置技术的开发和应用。　　5.4鼓励开发具有自主知识产权的在线连续监测装置。　　5.5鼓励适合于烟气脱硝的工业尿素的研究和开发。　　6运行管理　　6.1燃煤电厂应采用低氮燃烧优化运行技术，以充分发挥低氮燃烧装置的功能。　　6.2烟气脱硝设施应与发电主设备纳入同步管理，并设置专人维护管理，并对相关人员进行定期培训。　　6.3建立、健全烟气脱硝设施的运行检修规程和台账等日常管理制度，并根据工艺要求定期对各类设备、电气、自控仪表等进行检修维护，确保设施稳定可靠地运行。　　6.4燃煤电厂应按照《火电厂烟气排放连续监测技术规范》（HJ/T75）装配氮氧化物在线连续监测装置，采取必要的质量保证措施，确保监测数据的完整和准确，并与环保行政主管部门的管理信息系统联网，对运行数据、记录等相关资料至少保存3年。　　6.5采用液氨作为还原剂时，应根据《危险化学品安全管理条例》的规定编制本单位事故应急救援预案，配备应急救援人员和必要的应急救援器材、设备，并定期组织演练。　　6.6电厂对失效且不可再生的催化剂应严格按照国家危险废物处理处置的相关规定进行管理。　　7监督管理　　7.1烟气脱硝设施不得随意停止运行。由于紧急事故或故障造成脱硝设施停运，电厂应立即向当地环境保护行政主管部门报告。　　7.2各级环境保护行政主管部门应加强对氮氧化物减排设施运行和日常管理制度执行情况的定期检查和监督，电厂应提供烟气脱硝设施的运行和管理情况，包括监测仪器的运行和校验情况等资料。　　7.3电厂所在地的环境保护行政主管部门应定期对烟气脱硝设施的排放和投运情况进行监测和监管。

烟气比对，氮氧化物以NO2计，以上各参数区间划分以参比方法测量结果为准。那这个在线的数据氮氧化物是与手工监测的哪个数据进行比对，是二氧化氮还是氮氧化物

华中师范大学生命科学学院教授杨旭等人，最近通过动物实验，从分子生物学水平研究上证实了室内甲醛污染对人体的遗传毒性和致癌作用、神经和生殖毒性作用，对细胞的氧化损伤、眼部和气道的刺激作用及免疫系统的毒性反应。　作为国家“十五”科技攻关课题“室内空气重点污染物健康危害评价技术研究”的子课题，杨旭等研究人员采用仿真染毒技术，依据室内甲醛一般污染水平，分别以2.24毫克／立方米和4.81毫克／立方米气态甲醛灌流小鼠，通过分子生物标志物观察到气道（鼻腔和支气管）出现神经元性水肿和炎症。当甲醛暴露水平增高时，受试志愿者眨眼频率相应增高，提示甲醛浓度越高对眼的刺激越强烈。　用3毫克／立方米浓度的甲醛气体对小鼠暴露7天，每天6小时，研究人员发现小鼠脑、心、肝、肺、肾、睾丸等脏器中具有抗氧化作用的谷胱甘肽水平及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶的活力都有所下降，说明甲醛除造成呼吸道损伤外也能引起其他脏器或系统的氧化损伤，是一种全身性毒物。实验证实，气态甲醛的刺激污染还可导致细胞染色体断裂，致使DNA分子直接氧化损伤，抑制SOD酶活性，使自由基清除不利，间接引起DNA分子的氧化损伤，并具有潜在的致癌效应。脑组织抗氧化酶活力降低导致自由基清除速度变慢、大量积累，从而造成神经元损伤、神经行为改变。在对小鼠的水迷宫测试中，甲醛暴露组小鼠的学习和记忆力，与对照组相比明显降低。　此外，甲醛暴露能引起幼鼠睾丸损伤，对生殖细胞也有破坏作用，还可使甲醛特异性抗体水平增高，免疫力降低，使得被暴露对象成为“获得性过敏体质”。

氮氧化物指的是只由氮、氧两种元素组成的化合物。常见的氮氧化物有一氧化氮（NO，无色）、二氧化氮（NO2，红棕色）、笑气（N2O）、五氧化二氮（N2O5）等，其中除五氧化二氮常态下呈固体外，其他氮氧化物常态下都呈气态。作为空气污染物的氮氧化物（NOx）常指NO和NO2。 氮氧化物(NOX)种类很多，包括一氧化二氮(N2O)、一氧化氮(NO)、二氧化氮 (NO2)、三氧化二氮(N2O3)、四氧化二氮(N2O4)和五氧化二氮(N2O5)等多种化合物，但主要是NO和NO2，它们是常见的大气污染物。天然排放的NOX,主要来自土壤和海洋中有机物的分解，属于自然界的氮循环过程。 人为活动排放的NO，大部分来自化石燃料的燃烧过程，如汽车、飞机、内燃机及工业窑炉的燃烧过程；也来自生产、使用硝酸的过程，如氮肥厂、有机中间体厂、有色及黑色金属冶炼厂等。据80年代初估计，全世界每年由于人类活动向大气排放的NOX约5300万吨。NOX对环境的损害作用极大，它既是形成酸雨的主要物质之一，也是形成大气中光化学烟雾的重要物质和消耗O3的一个重要因子。 在高温燃烧条件下，NOX主要以NO的形式存在，最初排放的NOX中NO约占95%。 但是，NO在大气中极易与空气中的氧发生反应，生成NO2，故大气中NOX普遍以NO2的形式存在。空气中的NO和NO2通过光化学反应，相互转化而达到平衡。在温度较大或有云雾存在时，NO2进一步与水分子作用形成酸雨中的第二重要酸分——硝酸(HNO3）。在有催化剂存在时，如加上合适的气象条件，N02转变成硝酸的速度加快。特别是当NO2与SO2同时存在时，可以相互催化，形成硝酸的速度更快。 此外，NOX还可以因飞行器在平流层中排放废气，逐渐积累，而使其浓度增大。NOX再与平流层内的O3发生反应生成NO与O2，N0与O进一步反应生成NO2和O2，从而打破O3平衡，使O3浓度降低，导致O3层的耗损。【求助】新标准环境空气氮氧化物标准曲线的制作 【求助】氮氧化物检测中对氨基苯磺酸溶液的配制 【求助】环境空气 氮氧化物 盲样考核 【求助】氮氧化物标准曲线为什么斜率难达到现在标准方法的要求 【求助】急问，专家请进：关于氮氧化物的测定【求助】分光法氮氧化物的测定讨论 【求助】环境空气监测中二氧化氮和氮氧化物计算公式有什么区别 【求助】NOx做曲线的疑惑【分享】HJ 479-2009 环境空气 氮氧化物的测定 盐酸萘乙二胺分光光度法

作者：牛红军（山西医科大学）摘要： 目的：初步研究光合细菌生物转化槲寄生的转化机理,并且对光合细菌生物转化槲寄生培养液中具有细胞毒活性的蛋白质和总三萜类物质进行研究。 方法： 实验一：(1)采用pH计测定光合细菌转化槲寄生过程中培养液pH的变化趋势；(2)聚丙烯酰胺凝胶电泳法获得光合细菌(PSB)蛋白质、酯酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶的电泳图谱；(3)槲寄生提取液中添加吲哚,以PSB进行生物转化,通过HPLC法测定靛蓝的生成量来反映PSB加氧酶活性。 实验二：将光合细菌转化槲寄生培养液(PSBT)离心,得到PSBT上清液和菌体沉淀。菌体沉淀用超声波辅助冻融法破碎,离心,上清液即为PSBT菌体沉淀提取液。取PSBT上清液及PSBT菌体沉淀提取液,进行硫酸铵沉淀和透析,分别得PSBT上清液总蛋白提取液和菌体沉淀总蛋白提取液。取不同浓度的总蛋白质提取液,用MTT法测定细胞毒活性。 利用AKTA purifier 10层析系统,Hitrap Desalting和CM Fast Flow等层析柱,采用不同缓冲液体系对PSBT上清液总蛋白提取液进行蛋白质纯化。 实验三：采用紫外分光光度法对槲寄生提取物和PSBT中三萜类化合物进行比较研究；分别采用薄层色谱法和高效液相色谱法(HPLC)对齐墩果酸进行定性分析和含量测定,HPLC色谱条件：色谱柱为Diamonsil C18 (200mm×4.6mm, i.d.5μm),流动相为甲醇-0.18%的磷酸水(86：14),检测波长210nm,柱温25℃,流速1ml/min。结果： 实验一：(1)接种PSB后,纯PSB培养液pH缓慢上升,PSBT的pH迅速下降；(2)PSBT中菌体蛋白质、酯酶、过氧化物酶及超氧化物歧化酶的电泳图谱与纯PSB培养液中菌体的电泳图谱不同；(3)未得到PSBT和纯PSB培养液中菌体的超氧化物歧化酶(SOD)电泳图谱；(4)加入吲哚后,PSBT中有靛蓝类物质生成,而纯PSB培养液中无靛蓝产生。 实验二：各蛋白质样品的细胞毒活性： (1)上清液总蛋白对HO-8910细胞的半数抑制浓度(IC50,mg/mL,按照槲寄生提取液中原药材含量计算,下同)：①IC50200mg/mL:沼泽红假单胞菌转化槲寄生水浸提培养液(浸沼,JZ)是0.18,槲寄生水浸提培养基(浸对,JD)是20,球形红细菌转化槲寄生水浸提培养液(浸球,JQ)是60：②200mg/mLIC502000mg/mL:槲寄生水提培养基(水对,SD)、沼泽红假单胞菌转化槲寄生水提培养液(水沼,SZ)和球形红细菌转化槲寄生水提培养液(水球,SQ);③IC502000mg/mL:球形红细菌转化槲寄生醇提培养液(醇球,CQ)、沼泽红假单胞菌转化槲寄生醇提培养液(醇沼,CZ)和槲寄生醇提培养基(醇对,CD)。 (2)上清液总蛋白对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50. mg/mL):①IC50 200mg/mL:JD是8,JZ是20,JQ是78,CQ是150；②200mg/mLIC502000mg/mL:SQ。 (3)菌体沉淀总蛋白对HO-8910细胞的半数抑制浓度(IC50. mg/mL):①IC50 200mg/mL:SZ是84,CZ是122；②200mg/mLIC502000mg/mL:JQ和JZ；③IC502000mg/mL:纯球形红细菌培养液(球,Q)、纯沼泽红假单胞菌培养液(沼,Z)、SQ和CQ。 (4)菌体沉淀总蛋白对SGC-7901细胞的半数抑制浓度(IC50. mg/mL):①IC50 200mg/mL:JZ是14,JQ是18；②200mg/mLIC502000mg/mL:CZ、CQ和SZ。 (5)其它蛋白样品对肿瘤细胞几乎没有抑制作用。 SZ上清液总蛋白、SQ上清液总蛋白和SD总蛋白在CM Fast Flow层析柱的各种层析条件下都至少得到一个穿透峰和一个洗脱峰,另外,SQ上清液总蛋白在pH5.0的缓冲液体系中还额外分离得到的一个洗脱峰；SZ上清液总蛋白和SQ上清液总蛋白都在pH6.5的缓冲液体系中多分离得到一个小穿透峰。 实验三：CQ和CZ的总三萜含量与CD相比分别增加36%、14.7%；CQ和CZ的齐墩果酸含量与CD相比分别增加925%、281%；SQ、SZ及SD的总三萜和齐墩果酸含量均很低。 结论： (1)培养液中加入槲寄生后,光合细菌参与槲寄生的生物转化反应的某些酶被抑制或激活；(2)各种蛋白质提取液中,PSB转化槲寄生水浸提培养液上清液总蛋白的抑瘤活性最大。各种浓度JZ上清液总蛋白、JQ上清液总蛋白和JD总蛋白的细胞毒活性随作用时间变化的规律不同,但都具有时间-剂量依赖性。由此可知：PSB生物转化后,蛋白质的抑瘤活性规律发生了变化,抑瘤活性的蛋白质组分发生了改变。(3)PSBT中有新的蛋白质组分生成,说明光合细菌可以转化槲寄生成分生成新的蛋白质；(4)槲寄生醇提培养基经过光合细菌生物转化后,总三萜和齐墩果酸含量均增加,球形红细菌转化生成总三萜和齐墩果酸的能力比沼泽红假单胞菌强。三萜类化合物含量的增加可能是PSBT抗肿瘤作用增强的部分物质基础。

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