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硼沙标准缓冲液

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硼沙标准缓冲液相关的资讯

  • 玩转这5种缓冲液赋形剂让您的实验得心应手!
    话题介绍什么是赋形剂?对于寻找能够稳定早期开发生物制品的缓冲液的预配方研究人员来说,缓冲液的优化不能仅局限于缓冲液的pH值和盐浓度的变化。赋形剂作为缓冲液的添加剂,即使在缓冲液优化的早期预制剂阶段,赋形剂的添加对长期稳定候选生物制剂有很大帮助,因此是制剂评估的关键因素。但每一类赋形剂都以不同的方式协助稳定生物制剂——无论是单克隆抗体还是疫苗抗原。下面跟随小编,一起来了解一些最重要的生物制剂辅料,以及它们如何提高制剂的稳定性。1. 辅助剂辅助剂能够产生更强的免疫反应,对疫苗尤其重要。他们通常是可以增强免疫反应的单独的小分子生物制剂。2. 表面活性剂表面活性剂有助于降低溶液的表面张力,使疏水分子更容易保持溶解状态。聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20是常见的表面活性剂。3. 氨基酸氨基酸是一种特殊的赋形剂,用于帮助稳定蛋白质分子上的自由电荷。它们是一种有助于降低带电分子之间跨蛋白质吸引力的方法,而不会使盐浓度过高。通常用于这项工作的氨基酸有精氨酸、脯氨酸、甘氨酸、组氨酸和蛋氨酸。精氨酸、脯氨酸和甘氨酸也有助于调节最终制剂的粘度。4. 糖类糖类作为是非常实用的构象稳定剂,对抗体尤其有效。它们为冻干产品提供冻干保护,并对生物分子的溶剂化具有有益的作用。蔗糖是添加到缓冲液中最常见的糖之一,但也会使用甘露醇、山梨醇和海藻糖。5. 多元醇多元醇与糖类似,是增强生物制品热稳定性的稳定分子。它们还充当“膨胀剂”以保持蛋白质的整体三维结构,这在冻干过程中尤为重要。甘油是用于增强稳定性的非常常见的多元醇,除此之外也会使用甘露醇和山梨醇。总结如何快速精准的筛选赋形剂? 如您所见,有许多不同类型的赋形剂有助于提高生物制剂的长期稳定性,从而提高其进入临床的机会。需要特别注意的是,您构建的每种治疗药物都会有不同的表现,所以针对每种候选药物,进行多种赋形剂筛选以确定哪种赋形剂能够为您的治疗药物带来最大的稳定性是至关重要的。 那么问题来了,我们到底应该如何精准且快速高效的完成海量的赋形剂筛选呢?作为实验室里必不可少的王牌仪器,拥有PR Panta蛋白稳定性分析仪无疑是非常有助于预配方领域的上游研究人员评估缓冲剂成分,以及研究如何提高其疗法稳定性的核心设备。它可以提供低检测限的多种稳定性参数、高分辨率数据均有助于加快缓冲液优化的过程。PR Panta蛋白稳定性分析仪(点击图片 查看更多)如需了解PR Panta蛋白稳定性分析仪如何协助您的候选生物制剂获得成功,欢迎联系我们获得更多信息。
  • IEC缓冲液的类型
    在离子交换过程中保持pH的恒定是十分重要的,正如前面讨论过的,pH的改变会造成蛋白质带电荷数量和分布状况发生变化,从而直接影响到蛋白质是否能结合在交换剂上以及结合力的强弱。因此,在离子交换色谱中流动相必须使用缓冲液。缓冲液的种类很多,能够起缓冲作用的物质可分为两类:第yi类是由弱酸(或弱碱)及相应的盐构成的系统;第二类是兼性离子化合物。对于第yi类缓冲物质,在进行离子交换时,如果缓冲离子所带的电荷与离子交换剂上的功能基团相反,将参与离子交换过程,并可能对局部pH产生影响,因此应尽可能采用与功能基团带同种电荷的缓冲离子,即:使用阴离子交换剂时选择带正电荷的缓冲离子;使用阳离子交换剂时选择带负电荷的缓冲离子。当然这也并不是jue对的,比如磷酸盐缓冲液也经常在阴离子交换过程中被采用,但在这种情况下应特别注意在上样前充分平衡,确保色谱系统的pH和离子强度与起始缓冲液一致。第二类缓冲物质在阴、阳离子交换中均能采用。表1和表2分别列出了阳离子交换色谱和阴离子交换色谱时常用的缓冲液。在离子交换过程中虽然可以除去很多杂蛋白,起到纯化效果,但目的蛋白的洗脱峰中必然含有大量缓冲物质和盐的成分,这些成分的引入对于目的蛋白来说本身也是一种杂质。特别在色谱后需对洗脱峰进行冷冻干燥,以得到纯蛋白样品时,在冻干后的粉末中往往绝大部分是缓冲物质和盐。如果在冻干前进行脱盐或透析操作,虽然可以基本除去这些杂质,但也有可能造成蛋白活性的回收率下降。此时应优先考虑采用挥发性的缓冲物质,这样在冻干阶段可以将这部分杂质除去,常见的挥发性缓冲物质列于表3。◌ Q /SP/DEAE/CM Tanrose FF快流速琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose HP 高分辨率琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose XL 高载量琼脂糖基架离子交换介质◌ Q/SP Tanrose BB 大颗粒琼脂糖基架离子交换介质◌ DEAE/CM Tandex 葡聚糖基架离子交换介质
  • hplc液相色谱系统准备缓冲液的技巧
    液相色谱是世界各地实验室使用的流行纯化技术。如果系统设置和操作正确,它可以立即从混合物中分离出所需的化合物。学习如何使用和制备缓冲液和溶剂是能提高系统性能的重要技巧之一。准确制备和正确选择缓冲液对于在液相色谱中获得可重复的结果至关重要。 一、了解您的化合物 如果您正在寻找混合物中的特定化合物,您应该使用最能将您的分析物与其他分析物分开的缓冲液/溶剂组合。例如,了解极性和溶解度(极性或非极性)、电离、您正在寻找的紫外吸光度将有助于指导您使用特定的色谱柱和溶剂组。 二、纯度 使用较低等级且成本较低的试剂来制作缓冲液以节省一些钱是很诱人的,但从长远来看,它最终会变得更加昂贵。与含有稀少或不含杂质的 HPLC 级试剂相比,纯度较低的试剂会导致不需要的峰和嘈杂的基线。它们还会对您的系统造成严重破坏,造成阻塞,从而导致系统故障和更昂贵的维护费用。所有试剂和溶剂,包括您使用的水,都应该是高质量的 HPLC 级,以减少缓冲液中不需要的微粒。高级试剂的成本可能比低级试剂略高,但纯度的差异是值得的。HPLC 级试剂还有助于获得更一致的结果并保持系统平稳运行。 即使是使用高纯度实验级别的溶剂,也需要在进入色谱系统前进行过滤,采用恒谱生溶剂过滤器可以有效过滤化学污染等杂质进入系统,通用于流动相或输液泵,配套用于外径1/8英寸或1/16英寸的管子,放置于流动相溶剂瓶中,过滤杂质。过滤后,溶剂应储存在有盖的容器中,以防止被灰尘或其他不需要的材料污染。 四、避免气泡 在与您的系统一起使用之前对缓冲液进行脱气或真空过滤可以大限度地减少流动相中的空气和微粒。如果液相色谱系统中发生流动相脱气,主要会影响泵和检测器。为了解决这个问题,在将新制备的流动相泵入 HPLC 系统之前进行脱气,连同在线脱气器,应彻底脱气以去除所有溶解的气体。最有效的脱气形式是用氦气或其他低溶解度气体鼓泡。如果该方法可用,建议在整个分析过程中以非常低的水平持续对流动相进行脱气。 五、定期检查 细菌几乎可以在任何溶液中适应和生长,甚至是有机溶剂,具体取决于浓度。为防止细菌生长堵塞色谱柱筛板,每次制备新的缓冲液批次时更换缓冲液容器,检查缓冲液瓶/袋是否有细菌生长迹象。摇晃或搅拌时出现浑浊的溶液应丢弃。使用抑菌剂(例如 0.02% 叠氮化钠)处理会延长溶液的储存时间,尽管这些试剂可能会影响您的色谱图。 六、新鲜配置 恒谱生建议稀释缓冲液的有效期为一周。这种做法可确保缓冲液的 pH 值不受长期储存的影响,并且不会出现微生物生长。pH 值变化和微生物生长都会影响您的色谱运行并导致运行之间的不一致。虽然您可以添加稳定剂,例如焦亚硫酸钠,但这些试剂会影响光学和色谱结果。 液相色谱法可能是一项具有挑战性的技术。遵循上述关于如何准备和使用缓冲液进行纯化的提示,将有助于使每次运行的一致性和可重复性。
  • 同行客户通过仪器信息网成功订购远慕缓冲液
    上海远慕生物科技公司是国内elisa试剂盒优质供应商,代理销售不同elisa试剂盒品牌的进口/国产elisa试剂盒,专业供应科研实验所需的培养基,抗体,动物血清血浆,标准品对照品,化学试剂,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,金标检测试剂盒,微生物,蛋白质,ELISA种属涵盖广,凭借多年行业经验,完善的售后服务,高质量的产品。欢迎来电咨询。 同行客户通过仪器信息网成功订购远慕缓冲液,下面是客户跟我们的聊天记录: 我们给这位客户介绍了该产品并报完价格发去产品说明书,客户和我们沟通的非常顺畅,了解我们的产品后,客户对我们非常有信心,当时就下了订单。 常用缓冲溶液的配制: 乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100ml,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9.0,即得。 乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml,即得。 巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4,滤过,即得。 巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml,即得。 巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8,再用水稀释至500ml,即得。 远慕生物,专业供应科研实验所需的培养基,抗体,动物血清血浆,标准品对照品,化学试剂,酶联免疫试剂盒,白介素试剂盒,金标检测试剂盒,微生物,蛋白质,ELISA种属涵盖广,凭借多年行业经验,完善的售后服务,高质量的产品,赢得客户一致好评,欢迎来电咨询与订购!
  • 新品发布 | Welbuffer生物缓冲液-1分钟完成试剂配制
    缓冲溶液是指当加入少量强酸、强碱或稍加稀释时,能保持其pH值基本不变的溶液,它对强酸、强碱或稀释有一定的抵抗作用。由于缓冲溶液中同时含有较大量的弱酸(抗碱成分)和共轭碱(抗酸成分),它们通过弱酸解离平衡的移动以达到消耗掉外来的少量强酸、强碱,或对抗稍加稀释的作用,使溶液的H+离子或OH-离子浓度没有明显的变化,因此具有缓冲作用。用传统方法配制时需要计算、称量、混合并使用强酸碱调节pH,操作繁琐费时。月旭科技特推出Welbuffer缓冲速溶颗粒或片剂,能够解放您的双手,无需搅拌,一步加水溶解完全即可完成试剂配制,晃动混匀即可,无需磁力搅拌。即取即用,使用简单、快速。我们本次新品提供免费试用,如果您感兴趣,可以浏览至文末申请试用哦~产品优势1. 运输及存储便捷大多数试剂都是对温度有要求、重量较重、体积较大的,因此在存储、配送方面的费用占比是很大一部分的成本,而颗粒剂与片剂可以有效减缓这些问题。2. 使用方便,提高效率一步加水快速溶解完全即可完成试剂配制。即取即用,使用简单、快速、无需计算、称量及混合,无需使用强酸碱调节pH。3. 稳定可靠高纯度、生物级生产原料,进行广泛测试,包含多项技术指标(重量、pH值、pKa值、电导率以及杂质含量等)。采用制药工艺生产,将大容量试剂配制完成后经过滤纯化,再使用喷雾干燥技术获得均匀颗粒。4. 批次重复性好少量试剂的人工配制往往造成批间差异大的问题。通过大批量的颗粒剂配制,分装成大量三年有效期的小包装。每次一包颗粒剂即加水即用的特点可有效避免批间差的问题。5. 可定制根据用户的需求,可定制不同配方、不同包装及不同剂型的产品。6. 有效期长在室温(2-30℃)避光干燥密封保存及运输的条件下,有效期长达3年。产品用途分类1. 科研诊断用缓冲液(PBS及Tris缓冲液试剂速溶颗粒剂及片剂)2. 蛋白分析检测用缓冲液(PAGE蛋白电泳缓冲液速溶颗粒及片剂)3. 分子生物学实验用缓冲液(DNA/RNA电泳缓冲液速溶颗粒及片剂)产品信息试用申请今天的新品为大家提供了四款产品,可以申请免费试用,分别是:TBST缓冲液速溶颗粒;PBS缓冲液速溶颗粒(pH7.4);TBS缓冲液速溶颗粒;PBST缓冲液速溶颗粒。如果您有需要,可以识别上方二维码,选择您想试用的产品。
  • 上新 | 实验人必看,逗点生物新品磷酸盐缓冲液清新面世~
    PBS新品上市,欢迎关注!在生物实验中,磷酸盐缓冲液(Phosphate-Buffered Sline,PBS)的主要用途是漂洗、稀释或作为基础溶液配置其他溶液,用途非常广泛,属于生物实验室必不可少的一种试剂。逗点生物最 新研发推出新品PBS,产品经0.1μm 过滤除菌,可直接使用,且质量稳定、规格多样、货源充足,有效应对各种细胞培养需求,帮助提供相对稳定的离子环境和pH缓冲能力,为您实验保驾护航。新品上市,实验必购PBS核心优势,持续加固!厂家直销逗点生物具备厂家直销优势,货源稳定,供应充足,配送及时,想要囤货的老师们可放心购买~多种规格新品推出,有1X(即用型)、5X、10X、20等多种规格可供选择,随需定制,满足您多种实验需求~透亮无沉淀通过ISO13485:2016医疗器械质量管理体系认证,无菌车间生产,批次间稳定,液体透亮不含沉淀~PBS数据亮眼,品质保障!表1:无菌情况逗点生物产品无菌情况与某国际知名品牌效果相当 表2:pH、渗透压逗点生物产品数值稳定,与某国际知名品牌效果相当表3:内毒素逗点生物产品内毒素<0.1EU/mL,符合行业水平表4:微粒检测逗点生物产品的不溶性微粒数低于某国际知名品牌作为生物实验室的常用试剂,PBS磷酸盐缓冲液的品质必须有保障。为此,我们选取了国际国内四家知名品牌的同类产品,分别从四个维度进行数据比对。结果显示,逗点生物所研发生产的PBS在无菌情况、pH/渗透压、内毒素、微粒检测等重要指标上均有亮眼表现。PBS认准货号,购买无忧!想要了解更多产品信息请拨打逗点生物客服热线咨询订购电话:400-860-5168转3309
  • 安捷伦科技推出 IQFISH FFPE 缓冲液实现 FFPE 组织样品一小时杂交
    安捷伦科技推出 IQFISH FFPE 缓冲液实现 FFPE 组织样品一小时杂交 2013 年 11 月 13 日,北京 — 安捷伦科技公司(纽约证交所:A)今日宣布推出 IQFISH FFPE 杂交缓冲液,可以实现福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织样品 FISH 处理的一小时杂交。 IQ 技术最早由 Dako 公司开发,以前仅用于解剖病理实验室。而现在,IQFISH FFPE 杂交缓冲液可作为单独产品供应,因此细胞遗传学实验室也可受益于 IQ 技术,从而更快地获得结果。 安捷伦诊断和基因组学业务部门副总裁兼总经理 Jacob Thaysen 说道:“IQFISH FFPE 杂交缓冲液将极大缩短 FFPE 样品的 FISH 处理时间。通过将杂交处理步骤从行业标准的两天减少到仅仅一小时,使我们的客户可以更快地获得结果,且不会影响信号强度。” 有关 Dako IQFISH 杂交缓冲液的更多信息,请访问 www.dako.com。关于 Dako — 安捷伦科技公司旗下子公司 总部位于丹麦的 Dako 公司是组织类癌症诊断的全球领导者。全球的医院和研究实验室都在使用 Dako 的试剂、仪器、软件和专业知识,为癌症病人提供准确的诊断,确定最有效的治疗方案。Dako 公司拥有 1200 名员工,在全球 100 多个国家开展业务。Dako 于 2012 年 6 月归入安捷伦科技旗下。要了解 Dako 的信息,请访问 www.dako.com。关于安捷伦科技公司 安捷伦科技(NYSE 代码:A)是全球领先的测试测量公司,同时也是化学分析、生命科学、诊断、电子和通信领域的技术领导者。公司拥有 20,500 名员工,遍及全球 100 多个国家,为客户提供卓越服务。在 2012 财年,安捷伦的净收入达到 69 亿美元。如欲了解关于安捷伦的详细信息,请访问:www.agilent.com.cn。 更多有关安捷伦科技公司的技术、企业社会责任和行政新闻,请访问安捷伦新闻网站:www.agilent.com.cn/go/news。
  • 标签印刷错误 赛默飞苏州工厂主动召回缓冲液
    p   据江苏省食品药品监督管理局官网7月2日消息,赛默飞世尔(苏州)仪器有限公司报告,由于缓冲液标签印刷错误等原因,赛默飞世尔(苏州)仪器有限公司对其生产的缓冲液(备案号:苏苏械备20160782号)进行主动召回,召回级别为三级。涉及产品的型号、规格及批次等详细信息见《医疗器械召回事件报告表》 /p p style=" text-align: center" img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201707/insimg/e68fd095-4c6a-4d9a-9f90-bbf9d441ceb4.jpg" title=" IMG4ccc6aa7fc9a4490485195.jpg" / /p p br/ /p
  • 缓冲盐的这些“陷阱”你中招了吗?
    在色谱分析过程中常常需要使用缓冲盐来调节流动相的pH值,缓冲盐的不当使用对色谱柱可能造成柱压升高、柱效下降以及使化合物的保留时间发生变化等影响。“柱压升高原因:缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出,堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙,阻碍流动相传质,引起柱压升高;“相同化合物的保留时间发生变化原因:如果没有冲洗干净就进行进样,色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化;“柱效下降原因:1)有些缓冲盐会渗入到键合相的深处,损害硅胶基体,导致色谱柱键合相流失,柱床变松,柱效下降;2)凝结在键合相表面,使C18碳链难以舒展,对物质的保留能力下降,导致柱效下降。因此用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗,水中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。那么如何正确使用缓冲盐呢?使用前的处理:在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的缓冲盐溶液时)流动相进行分析时,如果分析前色谱柱中用于保存色谱柱的流动相中含水的比例相对较小,不先冲洗掉,接下来做样品的时候所用的流动相中如果有机溶剂含量大,而其比例中所含的水又不足以溶解该缓冲盐时,缓冲盐将会在色谱柱柱体上析出,沉积下来,这将可能导致上述对色谱柱的损害。使用后的处理:用与分析时含水比例相同的流动相(与分析用流动相唯一的区别是,用于冲洗的流动相不含缓冲盐)进行冲洗约30min,直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用,要长期保存,则需再加上一步,即用纯的有机溶剂冲洗一遍,直至基线平稳。使用缓冲液要注意几点01避免使用盐酸盐,盐酸盐对钢质有腐蚀作用。02缓冲液是良好的菌类培养液,缓冲液最好要现配现用。03实验后不可用有机溶剂直接过度,有机溶剂会处使盐类析出,造成液路或色谱柱堵塞。04使用缓冲液要及时掌握pH范围,做到胸中有数。05清洗液路和柱子时,有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。06长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出,若有白色盐类析出,可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路(拆下柱子,走30mL,再用5倍水冲洗)可以避免液路的堵塞。07选择缓冲液要用可靠的试剂,避免不纯的盐类造成不必要的麻烦。如果流动相中有机溶剂的比例很高是不能用来冲洗缓冲盐的,是洗不出来的。通常C18柱先用5%~10%的甲醇冲洗,是可以把缓冲盐冲洗出来的,然后用纯的有机溶剂来保护柱子。最好的方法是使用与流动相相同浓度不含盐的流动相进行清洗。但就是速度慢一些。用水是为了快速替换,一般在15分钟以内最好,且用0.8的流速较好。如果用纯水冲,容易造成键合的碳链的流失,最好用5%~10%甲醇水溶液冲。可以用纯水代替流动相中的缓冲液,有机相不变。这样冲洗柱子比较稳妥。小结正确使用缓冲盐很有必要,既可以防止缓冲盐析出,也可以达到提高色谱柱使用寿命的目的。我们不妨用一句话来总结它的使用方法:用前要过滤,用后需冲洗。
  • 缓冲盐使用不当对色谱柱影响很大!该注意什么?如何解决?
    p style=" text-indent: 2em " 柱压升高 /p p style=" text-indent: 2em " 原因:缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出,堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙,阻碍流动相传质,引起柱压升高; /p p /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 相同化合物的保留时间发生变化 /p p style=" text-indent: 2em " 原因:如果没有冲洗干净就进行进样,色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化; /p p /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 柱效下降 /p p style=" text-indent: 2em " 原因: /p p style=" text-indent: 2em " i)有些缓冲盐会渗入到键合相的深处,损害硅胶基体,导致色谱柱键合相流失,柱床变松,柱效下降 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " ii)凝结在键合相表面,使C18碳链难以舒展,对物质的保留能力下降,导致柱效下降。因此用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗,水中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 流动相中缓冲盐的正确使用方法: /p p style=" text-indent: 2em " 1. 使用前的处理:& nbsp 在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱,直至基线平稳。原则上,用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。理由:缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的缓冲盐溶液时)流动相进行分析时,如果分析前色谱柱中用于保存色谱柱的流动相中含水的比例相对较小,不先冲洗掉,接下来做样品的时候所用的流动相中如果有机溶剂含量大,而其比例中所含的水又不足以溶解该缓冲盐时,缓冲盐将会在色谱柱柱体上析出,沉积下来,这将可能导致上述对色谱柱的损害。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 2. 使用后的处理:用与分析时含水比例相同的流动相(与分析用流动相唯一的区别是,用于冲洗的流动相不含缓冲盐)进行冲洗约30min,直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用,要长期保存,则需再加上一步,即用纯的有机溶剂冲洗一遍,直至基线平稳。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 使用缓冲液要注意几点: /p p style=" text-indent: 2em " 1:避免使用盐酸盐,盐酸盐对钢质有腐蚀作用。 br/ /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 2:缓冲液最好要现配现用,往往缓冲液是良好的菌类培养液,隔天或放置长时间实验时会有很多怪现象发生。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 3:实验后不可用有机溶剂直接过度,有机溶剂会处使盐类析出,造成液路或色谱柱堵塞,可用95:5的水甲醇冲洗。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 4:使用缓冲液要及时掌握ph范围,做到胸中有数。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 5:清洗液路和柱子时,有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 6:长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出,若有白色盐类析出,可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路(拆下柱子,走30ml,再用5倍水冲洗)可以避免液路的堵塞。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 7:选择缓冲液要用可靠的试剂,避免不纯的盐类造成不必要的麻烦。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 如果流动相中有机溶剂的比例很高是不能用来冲洗缓冲盐的,是洗不出来的。通常C18柱先用5%~10%的甲醇冲洗,是可以把缓冲盐冲洗出来的,然后用纯的有机溶剂来保护柱子。最好的方法是使用与流动相相同浓度不含盐的流动相进行清洗。但就是速度慢一些。用水是为了快速替换,一般在15分钟以内最好,且用0.8的流速较好. 如果用纯水冲,容易造成键合的碳链的流失,最好用5%~10%甲醇水溶液冲。可以用纯水代替流动相中的缓冲液,有机相不变。这样冲洗柱子比较稳妥。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 色谱柱异常及解决办法 /p p style=" text-indent: 2em " 柱压与硅胶基质的形态(如无定形或球形硅胶)、颗粒大小、填料合成条件、装柱条件、所用流动相和分析时的温度有关。不同厂家的色谱柱柱压会有所差别,相同流动相和温度的条件下,不同厂家的新色谱柱有的柱压可能相差4、5个MPa,特别是低端和高端色谱柱之间,这一区别比较明显。这是由色谱柱厂家所选用的硅胶基质及其生产条件决定的,这种差异的存在是正常的。同时需要说明的一点是,柱压与柱效有一定的关系,通常柱效高的色谱柱柱压相对而言会高一点,但柱压高的色谱柱并不一定就具有高柱效。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 在色谱柱的使用过程中柱压通常会出现两种升高的形式: /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 第一种是,随着使用时间的延长色谱柱柱压慢慢上升,这是正常的; /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 第二种是,使用过程中(流动相和温度没有改变的条件下)色谱柱压力突然升高很多。这种压力突然升高的现象,通常是由工作人员操作不当引起的。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 原因: /p p style=" text-indent: 2em " 1)样品太脏,使用前没有过滤,导致柱筛板堵塞; /p p style=" text-indent: 2em " 2)样品含有的杂质在流动相中的溶解性不是很好,与流动相混合后析出,导致柱塞板堵塞;& nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 3)使用缓冲盐,处理错误,缓冲盐在色谱柱中析出,堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 解决办法对于第二种,即柱压突然升高的情况,通常有以下几种解决办法: /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 1)将色谱柱反接,用含水比例较大的流动相进行冲洗。 /p p style=" text-indent: 2em " 2)色谱柱进样一端的筛板取下,分别放在水中和甲醇中超声或更换新的柱筛板。如果柱效没变,但柱压仍然较高,则应考虑进样端填料受污染的问题,因此除了取下进样端筛板超声外,还需要挖掉进样端的部分填料,挖去填料之前先检查一下填料的颜色,如果填料的颜色发生了变化,则应该挖掉直到见到白色的填料为止。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 挖掉后色谱柱将出现一个缺口,填补缺口的填料可以从另一支相同品牌、相同型号的报废色谱柱的出口端获得,填料用有机溶剂如甲醇等调成糊状装入缺口处,压紧刮平,再装上筛板。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 柱子使用经验谈: /p p style=" text-indent: 2em " 色谱柱在使用前,最好进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意:柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外,在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件),只有这样,测得的结果才有可比性。 br/ /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 1、样品的前处理: /p p style=" text-indent: 2em " a、最好使用流动相溶解样品。 /p p style=" text-indent: 2em " b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。& nbsp /p p style=" text-indent: 2em " c、使用0.45µ m的过滤膜过滤除去微粒杂质。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 2、流动相的配制: /p p style=" text-indent: 2em " 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点: /p p style=" text-indent: 2em " a、流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 /p p style=" text-indent: 2em " b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。 /p p style=" text-indent: 2em " c、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。 /p p style=" text-indent: 2em " d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器,最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。 /p p style=" text-indent: 2em " e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。 /p p style=" text-indent: 2em " f、在流动相配制好后,一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 3、流动相流速的选择: /p p style=" text-indent: 2em " 因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱,要追求最佳柱效,最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1ml/min,对于内径为4.0mm柱,流速0.8ml/min为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量)。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 注意: /p p style=" text-indent: 2em " a.由于甲醇廉价,对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。& nbsp /p p style=" text-indent: 2em " b.对于正相柱推荐使用沸程为30-60℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相,没有提纯的己烷不得使用。用水最好使用超纯水(电阻率大于18兆欧),去离子水及双蒸水中含有酚类杂质,有可能影响分析结果。 /p p style=" text-indent: 2em " c.含水流动相最*在实验前配制,尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。最好加入叠氮化钠,防止细菌生长。 /p p style=" text-indent: 2em " d.流动相要求使用0.45 µ m滤膜过滤,除去微粒杂质。 /p p style=" text-indent: 2em " e.使用HPLC级溶剂配制流动相,使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命,提高柱性能。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 冲柱子的目的: /p p style=" text-indent: 2em " 只要是有机溶剂就行,不过黏度不要太大,因为有机溶剂能够防止细菌生长,冲柱子的目的就是为了防止细菌生长堵塞仪器系统和柱子。一般甲醇和乙腈相互冲洗是没有问题的,但乙腈要比甲醇价格贵的 。 /p p /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 保留时间变化的原因: /p p style=" text-indent: 2em " img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202012/uepic/2cd56489-c062-4aa1-be75-7281c5c04309.jpg" title=" 16-47-25-88-510998.png" alt=" 16-47-25-88-510998.png" / br/ & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 柱头塌陷 /p p /p p style=" text-indent: 2em " 在使用过程中,填料下沉,在柱子进口处出现一个小空间,使得分离效果不良。 br/ /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 补救方法:卸开柱头螺丝,找一点同类填料,用甲醇湿润后,添在柱子上,反复几次。然后装上螺丝,用溶剂冲洗1-2小时,使之平衡。 /p p style=" text-indent: 2em " & nbsp /p p style=" text-indent: 2em " 小结 /p p /p p style=" text-indent: 2em " 正确使用缓冲盐很有必要,既可以防止缓冲盐析出,也可以达到提高色谱柱使用寿命的目的。我们不妨用一句话来总结它的使用方法:用前要过滤,用后需冲洗。 /p p br/ /p
  • 北京大学周欢萍团队:淀粉聚离子超分子缓冲层提高钙钛矿太阳能电池疲劳抗性
    【重点摘要:】(1)周欢萍教授团队利用淀粉-聚碘超分子作为缓冲层,显著改善了钙钛矿太阳能电池的疲劳行为和循环稳定性。(2)经修改的钙钛矿太阳能电池在连续42个日夜循环后,发电效率可保持在98%。(3)该研究为如何利用超分子化学调控软晶格材料的元稳定动力学提供了重要见解。【研究背景】由于钙钛矿太阳能电池具有软体和离子晶格结构,它们极易受外部刺激的影响。在循环载荷的实际环境中,电池很容易出现明显的疲劳。由于缺乏对材料降解的基本理解,目前还没有有效的方法来减轻这种循环照明下的电池疲劳。【研究结果】研究人员在钙钛矿材料的界面引入了淀粉-聚碘超分子作为双功能缓冲层,它既可以抑制离子迁移,也可以促进缺陷的自我修复。经修改的钙钛矿太阳能电池在连续42个日夜循环后,原始的光电转换效率可保持在98%。这种电池也达到了24.3%的光电转换效率(认证值为23.9%),并且具有强烈的电致发光,外量子效率高达12%以上。【研究方法】研究人员首先合成了淀粉-聚碘超分子材料,并将其作为缓冲层插入钙钛矿太阳能电池的载流子输运层与光吸收层之间。他们从多个角度分析了缓冲层的影响,包括电化学测量、光致发光谱、小角入射X射线衍射、热重分析等,以确认其双功能机制。然后,他们制备了采用该缓冲层的钙钛矿太阳能电池,并通过42个日夜循环的加速老化试验考察其循环稳定性和发电效能。结果证实,缓冲层明显提高了电池在循环载荷下的稳定性。【结论】本研究通过在钙钛矿太阳能电池的界面引入淀粉-聚碘超分子缓冲层,显著改善了电池的循环稳定性和疲劳行为,为实现钙钛矿太阳能电池的实际应用提供了有效途径。该超分子缓冲层的双功能机制也可应用于其他软晶格材料的界面设计。研究结果对利用超分子化学手段调控软晶格材料的元稳定性具有重要启发意义。a,含不同浓度淀粉-碘Starch-I的w/ Starch-I装置的J-V曲线。b,开路电压和填充因子随Starch-I浓度的依赖性。c,作为LED操作时装置的EL的EQE。d,EQEEL和开路电压随Starch-I浓度的依赖性。含Starch-I的w/ Starch-I装置(a)和参考装置(b)的J-V曲线。外量子效率(EQE)谱及合并的JSC为24.5 mA cm-2 457 的含Starch-I装置。
  • 小奥课堂:pH校准标准操作程序 (SOP)
    pH校准标准操作程序(SOP)的目的是为常规校准步骤提供一个方法,以保证pH测试的精度。 推荐设备pH计pH电极和温度电极磁力搅拌器和搅拌子50毫升的烧杯和200毫升的废液杯pH 4.01 缓冲液或同等缓冲液pH 7.00缓冲液或同等缓冲液pH 10.01 缓冲液或同等缓冲液表面皿或封口膜去离子水或者超纯水校准频率至少要在使用仪器进行测量前的当天进行校准。在一天测量结束时进行校准后检查,以确定仪器是否偏离校准。 pH校准和测试建议1. 根据样品的pH值选择合适缓冲液标准液,样品的pH值应该在选择的缓冲液值之间。如果样品的pH值未知,则需要三种标准品进行校准:一种接近于7pH值,一种至少低于5 pH值的缓冲液,另一种至少高于9pH值的缓冲液,如果样品的pH值不在选择的校准溶液范围内,那么需要重新选择合适的校准溶液。2. 如果电极是可填充的,请在校准和测量过程中打开填充孔,以确保填充液通大气。电极内部的填充液液位必须比缓冲液或样品液位至少高出两厘米。3. 在校准/测试缓冲液或样品之间,用去离子水冲洗,并用滤纸吸去多余的水。然后再放入下一个缓冲液或样品。不要摩擦或擦拭电极玻璃球泡,减少极化引起的误差。4. 请勿重复使用缓冲溶液,也不要将使用过的缓冲溶液倒回到原来的存储容器中。5. 用磁力搅拌器适度匀速地搅拌缓冲液或者样品。电极的准备根据电极用户指南或说明书中的说明准备pH电极。校准之前,将电极存放在pH电极保存液中。 校准缓冲液准备1.在校准之前,将约30 mL的pH 10.01缓冲液倒入50 mL的烧杯中,并用表面皿或封口膜覆盖烧杯。2.在校准之前,将约30 mL的pH7.00缓冲液倒入50 mL的烧杯中,并用表面皿或封口膜覆盖烧杯。3.在校准之前,将约30 mL的pH 4.01缓冲液倒入50 mL的烧杯中,并用表面皿或封口膜覆盖烧杯。4.再分别将约30 mL的pH 10.01、7.00和4.01缓冲液倒入单独的50 mL烧杯中。在校准过程中,将这三个烧杯中的缓冲液作为润洗液。5.pH读数与温度有关,让所有缓冲液达到并保持在相同的温度。 校准1. pH读数与温度有关,让所有缓冲液放至环境温度。如果缓冲液温度不在25°C,建议进行温度补偿。使用NIST标准温度传感器测量缓冲液的温度,然后将温度手动输入到仪表中,或使用温度传感器将缓冲液的温度自动传输到仪表。2.按照上述“校准缓冲液准备”部分所述准备的pH 10.01缓冲液,pH 7.00缓冲液和pH 4.01缓冲液,取下校准烧杯的表面皿或者封口膜。3.首先用去离子水冲洗pH电极,然后在pH 10.01缓冲液润洗烧杯中润洗电极。请确保在废液杯中用去离子水冲洗电极,以防止缓冲液污染。切勿在用于校准的缓冲液烧杯中润洗电极。4.将电极放入pH 10.01缓冲液校准烧杯中,使电极头和液接界完全浸入缓冲液中,并以适中的速率搅拌缓冲液。5.在仪表上开始校准步骤。6.等待在pH 10.01缓冲液中的读数稳定。如果手动输入了缓冲液的温度或使用了自动温度补偿的温度电极,仪表能自动识别缓冲液,显示温度补偿后的pH值。如果仪表无法自动识别缓冲液,请查看表1输入对应温度的pH缓冲液的值。7.仪表自动识别正确的缓冲液值后,准备下一个校准点。8.首先用去离子水冲洗pH电极,然后在pH 7.00缓冲液润洗烧杯中润洗电极。确保在废液杯中用去离子水冲洗电极,以防止缓冲液污染。切勿在用于校准的缓冲液烧杯中润洗电极。9.将电极放入pH 7.00缓冲液校准烧杯中,使电极头和液接界完全浸入缓冲液中,并以适中的速率搅拌缓冲液。10.等待在pH 7.00缓冲液中的读数稳定。如果手动输入了缓冲液的温度或使用了自动温度补偿的温度电极,仪表应自动识别缓冲液,显示温度补偿后后的pH值。如果仪表无法自动识别缓冲液,请查看表1输入对应温度的pH缓冲液的值。11. 仪表自动识别正确的缓冲液值后,准备下一个校准点。12.首先用去离子水冲洗pH电极,然后在pH 4.01缓冲液润洗烧杯中润洗电极。确保在废液杯中用去离子水冲洗电极,以防止缓冲液污染。切勿在用于校准的缓冲液烧杯中润洗电极。13.将电极放入pH 4.01缓冲液校准烧杯中,使电极头和液接界完全浸入缓冲液中,并以适中的速率搅拌缓冲液。14.等待在pH 4.01缓冲液中的读数稳定。如果手动输入了缓冲液的温度或使用了自动温度补偿的温度电极,仪表应自动识别缓冲液,显示温度补偿后后的pH值。如果仪表无法自动识别缓冲液,请查看表1输入对应温度的pH缓冲液的值。15.仪表自动识别正确的缓冲液值后,操作仪表进行校准结果保存并结束校准。16.用去离子水冲洗pH电极,然后存放好电极。* 注意:至少用两种缓冲溶液每天进行电极斜率测试,斜率应为95%至102%。 校准验证1.使用与校准相同的缓冲液,或按照“校准缓冲液准备”部分中的说明准备新鲜的缓冲液。打开校准验证烧杯。2.首先用去离子水冲洗pH电极,然后在pH 10.01缓冲液润洗烧杯中润洗电极。确保在废液杯中用去离子水冲洗电极,以防止缓冲液污染。切勿在用于校准验证的缓冲液烧杯中润洗电极。3.将电极放入pH 10.01缓冲液校准验证烧杯中,使电极头和液接界完全浸入缓冲液中,并以适中的速率搅拌缓冲液。4.在仪表上按键读数。5.等待读数稳定,然后记录缓冲液的pH和温度。6.用pH 7.00缓冲液重复步骤2至5,然后再用pH 4.01缓冲液进行测试。7.将记录的缓冲液的pH和温度值与表1中列出的值进行比较。8.用去离子水冲洗pH电极,然后将电极存放在pH电极存储溶液中,直到准备好进行测量为止。
  • 中科院大连化物所利用“缓冲”策略开发光稳定荧光探针揭示活细胞内脂滴动态过程
    近日,大连化物所分子探针与荧光成像研究组(1818组)徐兆超研究员团队利用“缓冲”策略,发展了细胞内脂滴动态识别荧光探针LD-FG,该探针具有优异的光稳定性,可在空间超分辨成像的基础上实现高时间分辨率和长时间稳定成像,从而发现了多种新的脂滴动态过程。  脂滴是维持脂质和能量稳态的关键细胞器,由中性脂组成的内核及包裹其外的单层磷脂组成。脂滴表面分布着多种蛋白,以调控脂类的储存、代谢及脂滴运动。越来越多的研究揭示,脂滴具有更多的生理功能,例如抗菌免疫能力、促进药物积累和激活能力、内核膜代谢能力、与其他细胞器相互作用以交换营养分子、作为癌症和衰老大脑神经认知功能障碍的标志物等。尽管对脂滴功能的机制缺乏研究,但已证实这些功能与脂滴生命周期的动态密切相关。揭示脂滴的动态有助于研究脂滴的功能机制和发现新的功能。然而,脂滴的数量、位置、大小和组成在细胞之间甚至在同一细胞内可能会有很大差异,脂滴的生命周期、时间和位置上也通常不可预测且难以观察。此外,这些事件在脂滴生命周期中的发生率仍然未知。这种细胞异质性和不可预测性要求用于探测脂滴动态的成像技术不仅具有对脂滴的识别能力,更需要具有较好的空间和时间分辨率,以及长时间的的稳定成像能力。  超分辨荧光成像可突破衍射极限实现最高可达单分子的空间分辨,但荧光团易光漂白而迅速淬灭的问题使得超分辨荧光成像一直面临着时间分辨率低和成像时间长的挑战。因此提高荧光团的光稳定性是超分辨荧光成像面临的前沿问题。  本工作中,徐兆超团队提出了“缓冲荧光探针”(buffering fluorogenic probe,BFP)的策略来解决脂滴动态成像中光稳定性的问题。“缓冲”策略(buffer strategy)是指在成像过程中,脂滴内部光漂白的荧光探针被外部周围新的和完整的荧光探针有效取代,即荧光探针交换速率大于漂白速率时,即可确保脂滴成像的光稳定性。该策略要求探针在脂滴外部时处于荧光淬灭的状态,并且在脂滴外具有较高的浓度以保证足够的缓冲能力。LD-FG有适中的脂溶性保证了既有足够的分子对脂滴进行荧光染色,同时又有足够比例的分子在脂滴外作为缓冲池。缓冲池不仅可以快速补充脂滴中的光漂白探针,保证了长时间荧光成像的光稳定性,还可以及时染色细胞中的新生脂滴,并接收脂滴减小或消亡中释放到外部的探针。  基于LD-FG优异的光稳定性,团队借助结构光照明显微镜对脂滴的多种动态过程进行了高时空分辨率的成像,首次发现了两种新的脂滴融合模式,包括多个脂滴的同时融合和线粒体介导的融合;揭示了细胞不同区域和不同细胞之间的异质性;提出脂肪细胞分化过程中脂滴成熟的新模型,即首先进行快速脂滴融合,接着是缓慢成熟步骤;首次在细胞中观察到融合过程中的哑铃形中间形态,证明聚结(coalescence)并不像以前知道的那样罕见,而是在细胞中无处不在的。  作为最小的生命单元,细胞是含有细胞器、分子复合物和功能单分子的多体系、跨尺度的复杂系统,不同尺度单元又根据其位置、结构、运动、浓度以及与其他功能单元的动态相互作用,精确、有序和协调地执行复杂多样的细胞功能,这使得细胞具有个体与系统性相统一、异质性、高度动态、不确定性等多种特征。团队期望“缓冲荧光探针(BFP)”的策略可以在未来用于开发针对更多不同细胞内生物靶点的光稳定探针,最终实现细胞内生物分子全景超时空分辨动态成像。  相关成果以“Stable Super-resolution Imaging of Lipid Droplet Dynamics through a Buffer Strategy with a Hydrogen-bond Sensitive Fluorogenic Probe”为题,于近日发表在《德国应用化学》(Angew. Chem. Int. Ed.)上。该工作的第一作者是大连化物所1818组博士研究生陈婕和博士后王超。该工作得到国家自然科学基金、大连化物所创新基金等项目的资助。
  • NCC:天然卤素在气候变化中缓冲对流层臭氧
    本篇论文解读由方雪坤研究团队的杜千娜同学撰写。杜千娜同学:浙江大学环境与资源学院2022级硕士研究生,主要研究方向温室气体HFCs排放反演与清单。第一作者:Fernando Iglesias-Suarez通讯作者:Alfonso Saiz-Lopez通讯单位:1Department of Atmospheric Chemistry and Climate, Institute of Physical Chemistry Rocasolano, CSIC, Madrid, Spain. 文章链接:https://doi.org/10.1038/s41558-019-0675-6论文发表时间:2020年1月研究亮点1.全球综合的、由卤素驱动的对流层O3柱损失在整个21世纪是恒定的(~13%)。2.卤素造成的对流层臭氧损失在目前和本世纪末都显示出明显的半球不对称性。3.预计卤素介导的臭氧损失最大(高达70%)发生在北半球污染地区(美国东部、欧洲和东亚)的地表附近。(注:以上为这位同学的论文解读,非论文原作者意思)研究不足(或未来研究)1.未来经济发展情况预测仍然有多种,目前对未来臭氧损失的估计仍旧依赖于未来经济预测,可能与事实有所偏离。2.未来天然卤素通量和分布的变化将由气候敏感性、未来人为排放和大气化学等因素综合决定。3.未来研究仍需对卤素化学加深了解。(注:以上为这位同学的论文解读,非论文原作者意思)全文概要反应性大气卤素破坏对流层臭氧(O3)。天然卤素的主要来源是海洋浮游植物和藻类的排放,以及海洋和对流层化学的非生物来源,但其通量在气候变暖下将如何变化,以及由此对O3产生的影响目前尚不清楚。本研究使用一个地球系统模型(共同体地球系统模型(CESM))估计发现在当今气候中,天然卤素消耗了大约13%的对流层O3。尽管21世纪天然卤素的含量有所增加,但由于对流层O3损失的半球、区域和垂直异质性的补偿,这一比例保持稳定。这种卤素驱动的O3缓冲预计在污染和人口稠密的地区最大,对空气质量有重要影响。背景介绍对流层臭氧(O3)丰度受原位光化学、平流层内流和地表干沉积之间的平衡控制。O3的光化学破坏发生在整个对流层,主要是通过其光解和随后与水蒸气的反应以及与自由基的反应直接损失。对流层O3也会通过催化循环与活性卤素(Cl, Br, I)发生反应而被破坏,只有将对流层卤素化学考虑在内才能更准确地了解其变化。目前,卤素被估计将使全球对流层臭氧减少约10-20%,对地表臭氧有很大影响。生物源性短寿命卤代烃(VSL),包括CHBr3、CH2Br2、CH3I和CH2ICl,是通过海洋生物如浮游植物、微藻和大型藻类的代谢自然排放出来的。这些卤素化合物的寿命不到6个月,是对流层中活性氯、溴和碘的重要来源。此外由于O3沉积到海洋中,随后海水碘化物氧化为次碘酸(HOI)和分子碘(I2),并释放到大气中,海洋也是无机碘的非生物来源。在对流层中,活性溴和氯实际上是由VSL卤化碳的光氧化产生的。气候变化和社会经济发展已经改变了VSL卤化碳的自然通量(1979-2013增加约7%)和无机碘(1950-2010增加两倍),并可能在21世纪持续。然而,天然卤素变化将如何影响臭氧和对流层化学以及气候仍然未知。结果讨论21世纪的天然卤素排放:在考虑的每种情况下,与目前相比VSL卤代烃排放量在21世纪末都要更大;全球海洋无机碘排放量在RCP 8.5之后增加了约20%,而在RCP 6.0和RCP 2.6期间分别减少了约10%和20%;到2100年,活性卤素浓度将增加约4-10%,在RCP 6.0下,溴驱动了这些变化,但由于碘碳(增加)和无机碘(减少)通量之间的相互作用,碘没有出现显著变化,溴和碘对RCP 8.5反应性卤素负荷变化的贡献相同。在RCP 2.6情景下,活性卤素浓度降低(~5%)。2000-2100年全球天然卤素的年度变化。a)短寿命卤代烃通量,b)无机碘排放,c)对流层天然反应性卤素浓度天然卤素对21世纪对流层臭氧的影响:图2显示了2000-2100年间全球对流层臭氧柱浓度的变化,上面和中间的图分别显示了对流层臭氧柱的绝对变化及其与活性卤素相关的损失。与目前相比,到本世纪中叶,卤素驱动的对流层O3柱损失增加,与RCP 6.0和RCP 8.5期间VSL卤碳排放量不断增加相一致。到2100年,在RCP 8.5条件下,活性卤素对对流层O3的影响保持相对不变,而在RCP 6.0条件下,预计会有较小的消耗。无论排放情景如何(下面的图),预计全球卤素驱动的对流层O3柱损失在整个世纪几乎保持不变(~12.8±0.8%)。2000-2100年全球年度对流层臭氧柱时间序列与卤素化学有关的纬向平均对流层O3损失如图3a、b所示。O3质量的纬向平均损失约为~0.3DU(全球综合为3.9DU),其中溴和碘分别贡献了约16%和80%。卤素介导的臭氧损失显示出明显的半球不对称性(目前在南半球更大)。在南半球温带地区,通过非均相激活进一步增强了平流层O3的消耗。O3相对损失呈现显著梯度,从对流层上层到下层,从北向南增加。RCP 6.0和RCP 8.5由天然卤素驱动的纬向平均对流层O3损失趋势如图3c,d所示。其模式是不均匀的,具有明显的半球和垂直梯度,尽管两种排放情景一致(仅强度不同)。反应性卤素造成的纬向平均对流层O3损失在本世纪,由反应性卤素驱动的臭氧相对损失在对流层中高层减弱(在250hPa时为10-20% 图4a),这一特征在本世纪上半叶和下半叶的南半球高纬度地区被放大。此外,在300至850 hPa之间的热带自由对流层,到本世纪末,卤素造成的未来臭氧损失将减少,这表明该地区臭氧的命运将主要由其他驱动因素控制,包括光解作用以及与水蒸气和羟基自由基的反应(图3c、d和4b)。此外,臭氧损失呈现明显的半球不对称,与“更清洁”的南半球相比,污染更严重的北半球臭氧损失趋势更大。与目前相比,未来卤素介导的O3损失预计将增加10-35%(图4),其中边界层内损失最大。从现在(1990-2009年)到本世纪末(2080-2099年),由活性卤素引起的部分O3柱损失的垂直分辨变化图5显示了从现在到21世纪末近地表臭氧损失变化。在全球范围内,在RCP 6.0情景下,天然卤素引起的2000 - 2100年近地表O3损失变化(15.0±1.1%)大于RCP 8.5情景(3.1±0.7%),但两者共同显示了臭氧损失的增加主要局限于温带地区,在中纬度地区(30°-60°N和30°-60°S)达到峰值(图5b、d)。现在(1990-2009年)到本世纪末(2080-2099年)卤素驱动的近地表臭氧损失变化预计到本世纪末,最大的臭氧损失将发生在受污染的大陆地区,而不是在遥远的海洋环境中,并具有明显的半球不对称性。特别是,在美国东部、欧洲和东亚地区,预计卤素驱动的O3损失大,分别为71.5±12.9%、30.8±4.2%和6.9±10.1%,RCP 6.0和RCP 8.5分别为48.2±12.6%、18.3±3.2%和23.2±10.9%。2000-2100年卤素驱动的近地表O3损失时间序列ReferenceIglesias-Suarez, F. et al. Natural halogens buffer tropospheric ozone in a changing climate. Nature Climate Change 10, 147-154 (2020).
  • NanoTemper应用案例分享: 了解勃林格殷格翰如何为其单克隆抗体寻找最佳缓冲条件
    1用户背景介绍勃林格殷格翰(Boehringer-Ingelheim)是一家致力于人类生物制药化学和动物健康产品的医药公司,也是世界上最大的私有制药企业。名列全球前20位,高度研发驱动的领先医药公司,核心业务是包括处方药、 动物保健和生物制药,业务范围遍及全国各主要省市和地区。主要的研究领域包括:免疫及呼吸疾病、心血管及代谢疾病、中枢神经疾病、肿瘤。勃林格殷格翰成为第一家跨国公司在中国建立生物药物的制造企业。2014年,与百济神州签署战略合作协议,为其临床试验提供生物制药的生产。同年底,生物制药中试生产车间在上海张江工厂落成。2020年6月,勃林格殷格翰日前启动跨国药企在华首个外部创新合作中心。该中心采用了跨国药企中首个“三合一”业务模式,即集学术合作、业务拓展及许可、风险投资于一体。此举将整合公司的创新经验和合作伙伴在各自相关领域的独特技术和专业技能,共同开发创新药物和疗法,进而惠及更多患者。2为什么早期发现对蛋白质科研人员至关重要?单克隆抗体(mAb)是当今治疗性生物制剂的主要成分。由于其高度特异性和效力,它们被用于治疗多种疾病-从不同的癌症类型到自身免疫缺陷。新的蛋白质工程方法导致越来越多的治疗性mAb,它们还可以被修饰为双特异性、与其他生物制剂结合或用小分子药物修饰。而单克隆抗体(mAb)等生物药物的数量不断增加,以及mAb 变体之间的丰富异质性,需要一个彻底的开发过程,以最大限度地提高mAb的法规遵从性。因此,在开发过程的早期阶段就需要生物物理分析方法,以指导和简化进一步的抗体处理,并预测抗体的开发能力。抗体的构象和胶体稳定性是预测其稳定性和可开发性的关键参数,因为它们影响长期储存稳定性。开发管道中mAb和mAb变体的数量不断增加,需要使用能够快速评估这些参数的生物物理方法。在开发的早期阶段筛选条件和抗体构建体旨在确定最有希望的候选物,以满足药物批准的监管要求。在本案例中,勃林格殷格翰使用治疗性单克隆IgG1抗体的小规模配方筛选,以验证PR NT.48在确定关键稳定性参数方面的优异能力。通过PR NT.48搭载的nanoDSF技术跟踪色氨酸荧光发射的变化来评估热梯度中mAb构象稳定性。同时,PR NT.48可以检测胶体稳定性的变化和温度引起的聚集,是通过检测两次通过样品的光束的背反射强度实现的(图1)。图1:检测蛋白质聚集的背反射原理示意图(左) 光通过毛细管,被反向反射到检测器,光强度被量化。(右) 粒子散射光,导致入射光的消光和背反射光的反射--蛋白质聚集的直接测量。使用PR NT.48同时进行背向反射和荧光分析提供了几个重要信息:可直接关联热稳定性和胶体稳定性,这意味着可以识别引起聚集的展开事件,更重要的是,可以确定聚集起始温度。可确定抗体的未折叠状态的总体聚集程度,这在不同的配方和抗体类型之间可能有显著差异。应用案例分享: 了解勃林格殷格翰如何为其单克隆抗体寻找最佳缓冲条件_诺坦普科技(北京)有限公司 (instrument.com.cn)
  • SurPASS 3让你保持“蓬松的头发”
    淡黄的长裙,蓬松的头发被一句“淡黄的长裙,蓬松的头发”洗脑,脑海里非常有画面感。不过淡黄色的长裙人人都可以有,但蓬松的头发就不一定了!“蓬松的头发”除自身发质外,还需后期的长期护理,而对于头发容易出油或者细软扁塌发质的人群来说,“蓬松的头发”就是一场梦,选择正确的洗发用品就尤为的重要。好的洗发用品,其作用不仅仅是清洁头发,促进毛发正常的新陈代谢,更应具有滋润毛发和固定发型的作用。因此,洗发用品的选择也是美发过程中至关重要的。对不同头发护理尤其是洗发水及护发素的应用、调节、漂白及染色的理解及控制越来越被重视起来。头发是一种复杂的角蛋白纤维,未处理过的头发在很宽的pH范围内具有高负值的流动电势,这说明自然情况下的头发有一定的疏水性。Zeta电位的大小取决于头发的类型(即种族)和头发的状况,因此,头发经洗涤处理后表面基团发生变化,即会使得Zeta电位发生变化,可以使用SurPASS 3来测试头发表面在洗涤过程中的zeta电位变化,为优化美化产品提供帮助。SurPASS 3实验通过护发产品在真实头发上的吸附和解吸来模拟洗发过程首先,用缓冲液(可能是水或氯化钾溶液)润洗安装在柱状样品槽的头发。可以发现未处理的头发在很宽的pH范围内具有高负值的流动电势,这说明自然情况下的头发有一定的疏水性。洗发水的使用会立即影响流动电势,这主要是香波中的阴离子活性剂在头发上吸附。用缓冲液再次润洗后,可以观察到洗发水完全洗除掉,但速度会比吸附速度慢。接下来加入护发素,迅速被吸附,使得头发表面的电荷发生逆转。在达到护发素在头发纤维上的吸附平衡后,用缓冲液再次润洗头发,流动电势略有降低。继续润洗后,头发纤维仍然带正电荷,这说明护发素仍然吸附在头发上,不会因为润洗而被完全洗掉。美容是人们追求自身的完善和向爱的一种表现,更是人类文明的基础。社会的进步与发展,已使越来越多的人追求美、创造美。如果人们在实施美容之前对自己的皮肤类型、化妆用品、洗沐用品的化学构成、功能有更多的了解;如果美容师在提高技艺的同时研究一些美容用品的化学原理;如果从事化妆品科研的工作者创造臾多健康的、高效的美容精品,人们的生活定会越来越好。安东帕中国总部销售热线:+86 4008202259售后热线:+86 4008203230官网:www.anton-paar.cn在线商城:shop.anton-paar.cn
  • 【百家论坛】直播回顾:新发布36项兽药残留检测标准解读系列(二)
    喹诺酮类药物是一类高效抗生素,zui大的特点是抗菌活性强,广泛用于畜禽疾病的预防和治疗;在动物内脏产品中经常检出,也是国抽中必测的兽残项目。3月3日秦宇老师带大家回顾了喹诺酮类药物检测的一系列标准的特点:1. 喹诺酮类标准(36项发布前);2. GB 31656.3-2021&GB 31658.17-2021;3. 应知应会;同时,秦老师还重点对这些标准和新实施的GB 31656.3和GB 31658.17-2021 的样品前处理,提取溶剂和净化方式、定量方式和检出限做了对比分析。直播间里小伙伴们纷纷提出自己检测过程中遇到的问题:Q1:样品制备时粉样细一点,粉碎时间会长,发热严重的话会对残留量有影响吗?A:会有影响(如四环素类的金霉素),不建议大家粉碎的时间太长,具体参照GB/T 30891-2014 中附录B 的要求制样。Q2:在按照农业部1077号公告-1-2008检测时,喹诺酮的重复性和线性比较差,在操作中有什么特别需要注意的事项吗?A:关注实验过程中pH值的变化。Q3: GB 31658.17 中液质方法的柠檬酸缓冲液的pH要求为5.0±0.2,磷酸盐缓冲液无pH要求,洗脱液为甲醇:乙酸乙酯:氨水=1:1:0.04。实验过程中氮吹时间非常长,50-60min,结果四环素类回收偏低且金霉素回收只有20%-40%。请问有什么解决方法么?A:氮吹时间过长,造成四环素类回收率偏低;注意控制氮吹时间、温度和流速!Q4: GB 31658.17-2021进行样品前处理的提取步骤时,对离心机有什么要求?A:需要配备高速冷冻离心机(-2℃,14000 r/min),以达到高速冷冻离心,除杂的目的。zui后,坛墨质检研发经理张金龙携36项兽药残留配套标准品来到直播间,并给出了直播间特别的优惠折扣,做兽残分析的小伙伴们抓紧下单哦。如果还有疑问的同学可以在本条公众号下留言。感谢大家的参与,持续关注我们,下期再见哟~
  • 血液中常见杀虫剂的液质联用检测方法
    有机磷类和氨基甲酸酯类农药是两类常用的杀虫剂类药物。有机磷类农药具有广谱、高效、作用方式多、使用方便等优点,氨基甲酸酯类农药具有选择性强、高效、广谱、对人畜低毒、易分解和残毒少的特点,两大类农药均在农业、林业和牧业等方面具有广泛的应用。有机磷类农药具有剧毒性,容易对人体或动物造成急性中毒,氨基甲酸酯类农药虽不是剧毒化合物,但具有致癌性,近年来,杀虫剂中毒事件也在日益增多,症状较轻者,会出现头晕、恶心、呕吐、四肢乏力等症状,症状较重者会有生命危险,最好的方法就是去医院洗胃,所以建立一种快速准确的测定血液中的杀虫剂类药物的检测方法尤其重要。珀金埃尔默解决方案来啦!珀金埃尔默一直致力于为用户提供全方位的解决方案,利用QSight LC-MS/MS液质联用系统,参考司法鉴定技术规范SF/Z JD0107005-2016《血液、尿液中238种毒(药)物的检测 液相色谱- 串联质谱法》,建立了血液或尿液中杀虫剂类药物检测的解决方案。 1样品前处理方法 待测样品 取血液或尿液1mL,加入10μL地西泮-d5和SKF525A内标溶液(1μg/mL),加入2mL pH9.2硼酸缓冲液后用3.5mL乙醚提取,混旋,离心。上清液于60°C水浴中挥干,残余物中加入200μL流动相复溶,取10μL进LC-MS/MS分析。空白样品 取空白血液或尿液1mL,按待测样品处理步骤操作。添加样品 取空白血液或尿液1mL,添加待测样品中出现的可疑毒(药)物对照品,按待测样品处理步骤进行操作。2LC-MS/MS仪器方法 珀金埃尔默LX50 UHPLC参数 色谱柱:Quasar C18, 100x2.1mm, 2.6μm柱温:35℃流速:0.35mL/min表1:液相色谱梯度洗脱表 质谱参数 以下参数以珀金埃尔默QSight 210™ 三重四极杆质谱仪为例,目标化合物质谱参数见表2和表3。表2:化合物质谱参数列表(点击查看大图) 表3:质谱离子源参数 图1:7种常见杀虫剂的提取离子叠加谱图(克百威,乐果,马拉硫磷,胺菊酯:1ng/L;毒死蜱,灭多威,氧乐果:10ng/L)(点击查看大图) 图2:7种常见杀虫剂的标准曲线(1倍LOD-3倍LOD)(点击查看大图)本文总结本文采用LX50-QSight220三重四极杆液质联用系统,对血液和尿液中的常见杀虫剂进行了方法的开发与测试,通过以上结果可见,该仪器具有优异的灵敏度,检出限完全满足标准的要求,可以轻松满足检测需求,同时可以得到出色的峰形。珀金埃尔默的QSight系列三重四极杆液质联用系统具有HSID热表面诱导去溶剂的专利技术,使其具有优异的自清洁功能,应对复杂基质分析时,可以起到抗污染免维护的作用,大大节省了仪器的维护成本和人员工作效率的提升。 关注我们
  • 中国区总代理上海甄准生物强力推荐Reagecon物化标液产品!
    中国区总代理上海甄准生物强力推荐Reagecon物化标液产品! 上海甄准生物作为Reagecon中国区总代理商,为中国仪器校准和检测行业、环境分析、制药等企业提供优质服务和产品。 Reagecon 公司成立于1986年, 专注于实验室解决方案,Reagecon技术服务已超过27年。生产2000多种受到认可、有证书、可溯源NIST的标准品、试剂和标准溶液,产品质量符合ISO17025、USP、EP和JP等标准。 以下相关产品:无机标准液AAS, IC, ICP, ICP-MS 乳制品标准液 渗透压标准液 AVLS - 分析滴定标准液 密度标准液 其他饲料分析标准液 糖度/蔗糖折射率标准液 电极维护与保养标准液 农残标准品 缓冲洗脱液 EP欧洲药典标准液 pH缓冲液 清洁标准液 USP美国药典标准液 酚类、多环芳香烃(PAHs) COD-化学需氧量标准液 通用实验室试剂 纸浆和造纸标准液 ASTM、赛波特、铂钴色度标准液 指示剂标准液 血糖/乳酸分析仪 YSI标准液 加德纳比色液 ISA-离子实力调节液 氧化还原标准液 电导率标准液 ISE-离子选择电极标准液 折射率标准液 火焰光度计标准液 凯氏定氮和饲料试剂 土壤测试标准液 TOC/TIC-总有机碳和总无机标准液 熔点标准液 粘度标准液 总酸值和总碱值标准液(TAN/TBN) 浊度标准液 挥发性有机化合物标准液 订购进口标准品,请联系:18918753302上海甄准生物科技有限公司
  • 得利特研发讨论组:PH酸度计的校准方法
    得利特研发讨论组,介于近期对于水质仪器感兴趣的客户比较多,技术研究组对于PH酸度计的校准方法进行了讨论。 酸度计简称PH酸度计,由电极和电计两部分组成。使用中若能够合理维护电极、按要求配制标准缓冲液和正确操作电计,可大大减小pH示值误差,从而提高化学实验、医学检验数据的可靠性。   尽管PH酸度计种类很多,但其校准方法均采用两点校准法,即选择两种标准缓冲液:一种是pH7标准缓冲液,第二种是pH9标准缓冲液或pH4标准缓冲液。先用pH7标准缓冲液对电计进行定位,再根据待测溶液的酸碱性选择第二种标准缓冲液。如果待测溶液呈酸性,则选用pH4标准缓冲液;如果待测溶液呈碱性,则选用pH9标准缓冲液。若是手动调节的pH计,应在两种标准缓冲液之间反复操作几次,直至不需再调节其零点和定位(斜率)旋钮,pH计即可准确显示两种标准缓冲液pH值。则校准过程结束。   此后,在测量过程中零点和定位旋钮就不应再动。若是智能式pH计,则不需反复调节,因为其内部已贮存几种标准缓冲液的pH值可供选择、而且可以自动识别并自动校准。但要注意标准缓冲液选择及其配制的准确性。智能式pH值。其次,在PH酸度计校准前应特别注意待测溶液的温度。以便正确选择标准缓冲液,并调节电计面板上的温度补偿旋钮,使其与待测溶液的温度一致。不同的温度下,标准缓冲溶液的pH值是不一样的。
  • 细胞培养基的质量标准和检测方法
    细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境,是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。培养液或培养基的含义几乎相同,英文都是medium。当它是粉剂时,倾向性地称为培养基,而将粉剂配成液体后,多称为培养液。培养液中常常补加血清、抗生素等成分。培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和无血清细胞培养基等。细胞培养基的质量标准和检测方法澄清度水是细胞培养基的溶剂。细胞培养基中的营养成分只有完全溶解于水才能被细胞吸收摄取,细胞才能生长增殖,因此细胞培养基是否溶解以及培养液是否透明澄清直接影响培养基使用。该项目是通过对水溶解后的细胞培养基的澄清度检查,判断细胞培养基的澄清度。 按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅸ B进行。pH 值哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度,pH过高或者过低都会导致细胞死亡。pH值的测定也可以检查细胞培养基的批间差。清大天一标准规定取规定量供试品,用注射用水(水温20℃-30℃)溶解至1L,加入规定量碳酸氢钠到上述溶液中,用与细胞培养基溶液pH值相近的两点标准缓冲液校准后的酸度计进行测定。按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅵ H进行;加入规定量的碳酸氢钠到上述溶液中,按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅵ H进行干燥减量的质量分数细胞培养基具有吸湿性,在空气中放置水分会很快升高,干燥减量的质量分数表示产品中含湿量。细胞培养基是有菌制剂,其丰富的营养成分有利于微生物生长,控制细胞培养基中的水分可以防止微生物的繁殖,保持细胞培养基的养分。按中华人民共和国药典2005 年版二部附录Ⅷ L 干燥失重测定法进行。渗透压溶剂通过半透膜由低浓度向高浓度溶液扩散的现象称为渗透,阻止渗透所需施加的压力,称为渗透压。细胞必须生活在等渗环境中,动物细胞借助K+、Na+维持渗透平衡。大多数细胞对渗透压有一定的耐受性。但是培养液渗透压过高容易使细胞脱水wei缩,培养液渗透压过低容易使细胞膨胀破裂,因此要控制培养基的渗透压范围。按中华人民共和国药典2005 年版二部附录Ⅸ G 渗透压摩尔浓度测定法进行。细菌内毒素细菌内毒素是许多病原性细菌所产生的毒素。它的特殊性在于不是细菌或细菌的代谢产物,而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有生物活性的物质。培养基细菌内毒素过高,对生物制品疫苗(如狂犬、乙肝疫苗)、基因工程药品等注射用的药品都需要检查细菌内毒素。 因此本项目的检验符合生物制品质量控制要求。常规细胞培养基的细菌内毒素标准定为<10 EU/ml。称取本品规定量(见表4-12)的1/100,加入细菌内毒素检查用水10 mL溶解,吸取该溶液0.1 mL加细菌内毒素检查用水3.9 mL,混匀即得试样。按中华人民共和国药典2005 年版二部附录Ⅺ E 细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。微生物限度细胞培养基不是无菌产品,其中的微生物在一定条件下会吸收细胞培养基中的营养物质滋生繁殖,导致细胞培养基变质失效。控制细胞培养基中细菌和霉菌,是延长细胞培养基有效期的方法之一。清大天一在参考《中华人民共和国药典》2005版二部附录第100页的口服给药制剂的微生物限度标准,并严于该标准,规定细胞培养基产品的细菌数每1g不得超过200个,霉菌数每1g不得超过50个。称取样品1 g,加入无菌纯化水10 mL溶解,混匀即得试样。按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅺ J 微生物限度检查法进行,检查项目为细菌数、霉菌数。检查法采用平皿法。细胞生长试验这是一个性能特性表述的要求。细胞培养基的功能就是培养哺乳类动物细胞,因此经过细胞培养效果的检验是产品质量优劣的直观表述,这也是很多生物制药用户要求的一项指标。目前国内尚无细胞培养和计数的法定方法,可参考《体外培养的原理与技术》中细胞计数fa论述的内容给出。按产品说明书配制培养液进行细胞培养,前四天用含10%小牛血清的培养液培养,观察细胞形态并计数,检查细胞培养基是否有促生长的能力。后三天用不含小牛血清的培养液维持培养,观察细胞形态并计数,检查细胞培养基中是否有不利细胞生长的毒素。本试验用细胞为VERO细胞。细胞培养液的储存,细胞培养液的储存条件一般为2-8℃、密闭、避光保存,但要注意如下几点:1) 过滤后的完全培养液,即添加了血清、谷氨酰胺、抗生素等的培养液要尽快使用,一般在2-3周内使用完。培养液中的L-谷氨酰胺是不稳定的,不同温度L-谷氨酰胺的降解。2) 灭菌后的未加L-谷氨酰胺等添加剂的培养基溶液,一般可在4℃保存6~9个月,也可冷冻保存,用时解冻3) 高压除菌后的培养基应置4℃保存,不能因为其可耐受高温而忽略储存温度。4) 添加某些生长因子、激素等添加物,可能会改变培养液的储存条件,比如温度、时间等方面的要求
  • 【难点解析】丨多兽残标准GB 31658.17-2021
    2021年11月,由农业农村部、国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局联合发布的36项兽药残留检测标准,将于2022年2月1日正式实施。 其中,多兽残检测标准GB 31658.17-2021《动物性食品中四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物多残留量的测定》,采用同一方法,可在9分钟内完成4种四环素、19种磺胺、13种喹诺酮,共计36个目标物的检测。快速高效,推动了多兽残检测标准的进展,可谓是36个新标准中的一大亮点。今天小编就和大家一起来解读这个标准,并对其技术关键点进行说明。 标准品配置▶ 四环素类、磺胺类药物采用甲醇配置,喹诺酮类药物由于部分种类溶解度较差,采用NaOH溶液配置。▶ 标准中给出了标准溶液的保存温度和有效期,请按照标准进行标准物质期间核查。因四环素类药物稳定性较差,需要特别关注。▶ 采用空白基质配标准曲线。 前处理过程▶ 提取液采用Mcllvaine-Na2EDTA。众所周知,此缓冲液是提取四环素类兽残的常用试剂,极性较大,在磺胺类和喹诺酮类的前处理中并不常见。由此可以推论,该标准中所涉及的磺胺类、喹诺酮类药物的极性也偏大,否则提取效果不理想。▶ 离心速率较一些老标准有大幅提高,GB 31658.17-2021的离心转速在10000r/min以上,离心效果明显提升。▶ 采用HLB固相萃取柱净化。 仪器分析条件▶ 有机流动相采用——甲醇:乙腈(2:8,含0.1%甲酸,v/v)溶液,此处甲醇的加入,可对部分磺胺类药物的分离起到一定贡献。▶ 从离子对信息来看,存在多个同分异构体,母离子与子离子均相同,需要特别注意保留时间的差别,避免误判。●四环素—多西环素●恶喹酸—氟甲喹●磺胺二甲异嘧啶—磺胺二甲嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶—磺胺甲氧哒嗪—磺胺对甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶—磺胺间二甲氧嘧啶 关键技术点就基本介绍完了,为了能让大家更轻松地应对标准,接下来介绍岛津的应用方案。 猪肉中喹诺酮类、磺胺类和四环素类兽药残留的测定岛津LCMS-8000系列三重四极杆液质联用仪 ▶ 色谱柱:Shim-pack GIST C18(100×2.1 mm,2 μm ;P/N:227-30001-04);▶ 固相萃取小柱:SHIMSEN Styra HLB 200 mg/6mL (P/N:5010-81976)▶ 前处理步骤与标准相同▶ 质谱条件 雾化气:氮气3L/min加热气:氮气10L/min干燥气:氮气10L/min接口温度:300℃DL温度:250℃ 图1 目标物的MRM色谱图(10 μg/L) 表1 部分目标物回收率和RSD结果 本文内容非商业广告,仅供专业人士参考。
  • 快速、批量、自动完成液体分装丨BP 100 自动快速分液仪新品上市
    BP 100 自动快速分液仪 快速、批量、自动完成液体分装在微生物检测中,各种缓冲液、无菌生理盐水、液体培养基等溶液的分装工作重复而且繁琐,占用了实验人员的大量时间。睿科BP 100自动快速分液仪,采用三轴机械臂配合高精度蠕动泵,能高效的完成以上各种溶液的分装工作,且适配试管、三角瓶、离心管等各种容器。解放微生物实验人员双手,减少重复繁琐工作。控制终端内置7寸彩色触摸屏,无需外接电脑操作简单,自动化程度高 使用灵活度高分区管理,可放置不同规格容器、设置不同分液体积,灵活度高兼容容器可达到250mm可根据不同容器定制样品通量高18mm×180mm试管,可达320个易于清洁灭菌与液体接触部件均易于拆卸,可高温高压灭菌多种校准模式可选自动校准、手动校准、自定义校准三种模式可选,满足不同状态的校准需求,保证分液准确性应用标准举例GB 4789.1-2016食品安全国家标准 食品微生物学检验 总则 GB 4789.2-2016食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标 GB/T 7918.2-1987 化妆品微生物标准检验方法 细菌总数测定 GB/T 7918.3-1987 化妆品微生物标准检验方法 粪大肠菌群 《中华人民共和国药典》2020年版四部 通则1105 非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法 《中华人民共和国药典》2020年版四部 通则1106 非无菌产品微生物限度检查:控制菌检查法 GB/T 13091-2018饲料中沙门氏菌的测定… …
  • 解决方案丨猪肉中四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物多残留量的测定
    猪肉中四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物多残留量的测定四环素类药物 (TCs)、磺胺类药物 (SAs)和喹诺酮类药物 (QNs)是畜牧养殖中常用到的三类药物,常用来治疗或预防鸡的细菌、支原体和球虫感染,但若使用不当会导致其在动物源性食品中的残留超标, 影响人类健康, 并且会使细菌的耐药性增强。2022年2月1日,GB 31658.17-2021《食品安全国家标准 动物性食品中四环素类、磺胺类和喹诺酮类多残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》正式实施,本文参考上述标准,试样中残留的四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物,用Mcllvaine-Na2EDTA缓冲液提取,使用HLB柱经睿科Fotector Plus全自动固相萃取仪净化,洗脱液经睿科 EVA 80全自动氮吹仪浓缩,液相色谱-串联质谱法测定,外标法定量。✦1仪器和耗材● 仪器Fotector Plus全自动固相萃取仪EVA 80 高通量全自动平行浓缩仪Agilent 1290Ⅱ/6470高效液相色谱-串联质谱仪Fotector Plus全自动固相萃取仪EVA 80 高通量全自动平行浓缩仪● 耗材HLB固相萃取柱(RayCure,200 mg/6 mL)● 试剂甲醇(优级纯)乙腈(优级纯)正己烷(优级纯)超纯水0.05 mol/L 磷酸二氢钠溶液:取磷酸二氢钠7.8 g,用水溶解并稀释至1000 mL。0.05 mol/L 磷酸氢二钠溶液:取磷酸氢二钠17.9 g,用水溶解并稀释至1000 mL。磷酸盐缓冲液:取0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液190 mL,用0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液稀释至1000 mL。1 mol/L氢氧化钠溶液:取氢氧化钠4 g,用水溶解并稀释至100 mL。0.03 mol/L氢氧化钠溶液:取1 mol/L氢氧化钠溶液3 mL,用水稀释至100 mL。Mcllvaine-Na2EDTA缓冲液:取柠檬酸12.9 g、磷酸氢二钠10.9 g、乙二胺四乙酸二钠39.2 g,加水900 mL,用1 mol/L的氢氧化钠溶液调pH值至5.0±0.2,用水稀释至1000 mL。洗脱液:取甲醇150 mL,加乙酸乙酯150 mL、浓氨水6 mL,混匀。复溶液:取水40 mL,加甲醇5 mL、乙腈5 mL、甲酸0.05 mL,混匀。2样品制备取试样1 g(准确至±0.01 g)于50 mL离心管,加入Mcllvaine-Na2EDTA缓冲液8 mL,涡旋1 min,超声20 min,高速冷冻离心5 min,收集上清液。下层残渣中加磷酸盐缓冲液8 mL,重复提取一次,合并两次提取液,混匀,备用。● 净化将HLB固相萃取柱安装在Fotector Plus全自动固相萃取仪上,依次用甲醇5 mL、水5 mL活化,取备用液过柱,依次用5 mL水和20%甲醇水溶液5 mL淋洗,吹干,用洗脱液10 mL洗脱。收集洗脱液于EVA-80全自动平行浓缩仪中45 ℃水浴氮气吹干。加入复溶液1.0 mL,涡旋1 min溶解残余物,微孔滤膜过滤,液相色谱-串联质谱测定。具体的固相萃取方法见图3。●固相萃取净化条件Fotector Plus固相萃取方法3液质检测条件● 液相条件● 液相梯度洗脱条件● 质朴仪器参数● MRM参数● 色谱图四环素类、磺胺类和喹诺酮类药物标准溶液总离子流图(20μg/L)4结果与讨论为了验证该方法的回收率,本实验在空白猪肉样品中加入四环素类、喹诺酮类和磺胺类标准品进行加标回收验证(n=3),并采用基质标准曲线定量,数据结果如表-2所示。加标回收率在62.4%~105.6%之间,RSD值控制在15%以内,满足标准要求,说明该方法能够很好地运用于动物性食品中四环素类、喹诺酮类和磺胺类多残留量的检测。表-2.猪肉样品加标回收率及RSD值5总结● 在超声提取步骤时使用冰水浴来进行20 min的超声,可减少由于长时间超声引起的温度升高,而造成目标物的损失。● 应避免样品在浓缩过程中长时间氮吹、过分浓缩干燥,否则可能会造成回收率损失。● 本方法使用睿科Fotector Plus高通量全自动固相萃取仪可实现净化过程的自动化,从活化到上样、洗脱一步到位;最多一天能够处理180个样品,高效便捷地完成固相萃取过程。同时搭配睿科Auto EVA 80高通量全自动平行浓缩仪进行浓缩,二者的样品架可兼容使用,无需进行样品转移,操作连贯简便,避免样品的损失。
  • 如何用离心机进行两虫的检测?
    茂默科学以客户为本、合作共赢的理念,致力于帮忙客户提供整体实验方案。力求解决行业内客户对科学仪器选型难、维护难的处境。通过不断优化公司运作和提升服务质量,目前已赢得业内人士和广大客户广泛认可,拥有广泛而稳固的合作伙伴和客户群体。现介绍如何用离心机进行两虫检测,欲购买高性价进口离心机,或者快速两虫检测系统,欢迎咨询~贾第鞭毛虫与隐孢子虫(简称“两虫”)是两种严重危害饮用水水质安全的病原微生物。“两虫”具有个体微小,致病量低、感染途径和方式简单,流行分布广泛的特点。2006年我国《生活饮用水卫生标准》增加了“两虫”检测,规定每10L小于1个孢囊或卵囊。今天小编为大家介绍如何用蜀科两虫检测专用离心机来进行两虫的检测。首先要进行接种和样品的淘洗和浓缩,然后开始离心。a. 蜀科两虫检测专用离心机应放在牢固的工作台或地板上,尽量减少晃动。 b. 平衡对称的离心管,和适配器、离心桶一起平衡,重量差别不超过0.5g, 尽量减少摆动。注意:如果离心管不被平衡则会产生额外的震动,影响到目标物的沉淀。 c. 设置离心机参数2000g,15min。样品在离心机中自然惯性停止,不可使用刹车系统急停。 d.用真空泵或蠕动泵吸取离心管中的上清液,在进口处装一个移液器以减少进口的真空力度。终留取5-8ml(可预先在管上做好标记)。流速控制在200±20ml/min。注意把移液管放到液面中心,接近液面处上吸取上清液,以减少沉淀的损失。 e. 将离心管中的剩余的浓缩液在涡旋混合器上混匀20秒。 f. 用缓冲液润洗移液器将所有液体转移至L型试管中。(注意:移液器需要用缓冲液润洗下,是为了避免移液管壁因干燥而将两虫挂壁。) g. 使用纯水清洗两次移液管(如剩余体积为7ml,则每次1.5ml),并将清洗 液移入同一个L型试管中,每次冲洗后都要停留20秒再移出液体。两虫检测专用离心机离心和移液结束后,再进行两虫的捕获和染色,后分析免疫荧光检验的结果就可以判断两虫的情况了。
  • 流动分析技术在《生活饮用水标准检验方法》中的应用
    流动分析技术是20世纪50年代开发的一种湿化学分析技术,该技术自动化程度高,可批量检测样品,解放了劳动力,提高了工作效率,且具有检出限低、重现性好、分析速度快等特点,已广泛应用于环保、水质、烟草、质检及医学检验等行业,测试项目包括总氰化物、氰化物、挥发酚、阴离子表面活性剂、磷酸盐、总磷、总氮、氨氮、硫化物、六价铬、硝酸盐、亚硝酸盐、COD(Mn)、尿素等。目前主流的流动分析技术有两种,即连续流动分析技术(CFA)和流动注射分析技术(FIA)。2023年10月即将实施的生活饮用水标准检验方法GB/T 5750.4-2023中把感官性状和物理指标中的挥发酚类、阴离子合成洗涤剂指标规定了连续流动分析法和流动注射分析法;GB/T 5750.5-2023中无机非金属指标中的氰化物和氨(以N计)规定了连续流动和流动注射分析法。下面小编整理了生活饮用水标准检验方法中涉及到流动分析技术的标准,供大家参考。GB/T 5750.4-2023挥发酚-流动注射法原理:样品通过流动注射分析仪被带入连续流动的载液流中,与磷酸混合后进行在线蒸馏;含有挥发酚类的蒸馏液与连续流动的4-氨基安替比林及铁氰化钾混合,挥发酚类被铁氰化物氧化生成醌物质,在与4-氨基安替比林反应生成红色物质,于波长500nm处进行比色实验。仪器设备:流动注射分析仪:挥发酚反应单元和模块、500nm比色检测器、自动进样器、多通道蠕动泵、数据处理系统。仪器参考条件:自动进样器蠕动泵加热蒸馏装置流路系统数据处理系统初始化正常转速设为35r/min,转动平稳加热温度稳定于150℃±1℃无泄漏、试剂流动平稳基线平直GB/T 5750.4-2023挥发酚-连续流动法原理:连续流动分析仪是利用连续流,通过蠕动泵将样品和试剂泵入分析模块中混合、反应,并泵入气泡将流体分割成片段,使反应达到完全的稳态,然后进入流通检测池进行分析测定。在酸化条件下,样品通过在线蒸馏,释放出酚在有碱性铁氰化钾氧化剂存在的溶液中,与4-氨基安替比林反应,生成红色的络合物,然后进入50mm流通池中在505nm处进行比色实验。 仪器设备:连续流动分析仪:自动进样器、多通道蠕动泵、挥发酚反应单元和蒸馏模块、比色检测器、数据处理系统。仪器参考条件:进样速率进样:清洗比加热蒸馏装置流路系统数据处理系统30个样品/h2:1加热温度稳定于145℃±2℃无泄漏,气泡规则,试剂流动平稳基线平直GB/T 5750.4-2023挥发酚-连续流动法原理:连续流动分析仪是利用连续流,通过蠕动泵将样品和试剂泵入分析模块中混合、反应,并泵入气泡将流体分割成片段,使反应达到完全的稳态,然后进入流通检测池进行分析测定。在酸化条件下,样品通过在线蒸馏,释放出酚在有碱性铁氰化钾氧化剂存在的溶液中,与4-氨基安替比林反应,生成红色的络合物,然后进入50mm流通池中在505nm处进行比色实验。仪器设备:连续流动分析仪:自动进样器、多通道蠕动泵、挥发酚反应单元和蒸馏模块、比色检测器、数据处理系统。仪器参考条件:进样速率进样:清洗比加热蒸馏装置流路系统数据处理系统30个样品/h2:1加热温度稳定于145℃±2℃无泄漏,气泡规则,试剂流动平稳基线平直GB/T 5750.4-2023阴离子洗涤剂-流动注射法原理:通过注人阀将样品注人到一个连续流动载流、无空气间隔的封闭反应模块中,载流携带样品中的阴离子合成洗涤剂与碱性亚甲基蓝溶液混合反应成离子络合物,该离子络合物可被三氯甲烷萃取,通过萃取模块分离有机相和水相。包含离子络合物的三氯甲烷再与酸性亚甲基蓝溶液混合,反萃取洗涤三氯甲烷,再次通过萃取模块分离有机相和水相。于波长 650 m 处对包含离子络合物的三氯甲烷进行比色分析,有机相的蓝色强度与阴离子合成洗涤剂的质量浓度成正比。仪器设备:流动注射分析仪:阴离子合成洗涤剂反应单元和模块、10mm比色池、650nm滤光片、自动进样器、多通道蠕动泵、数据处理系统。仪器参考测试参数:周期时间洗针时间注射时间进样时间出峰时间进载时间到阀时间峰宽200s50s50s80s100s80s80s180s注:不同品牌或型号仪器的测试参数有所不同,可根据实际情况进行调整。GB/T 5750.4-2023阴离子洗涤剂-连续流动法原理:在水溶液中,阴离子合成洗涤剂和亚甲基蓝反应生成蓝色络合物,统称为亚甲基蓝活性物质,该化合物被取到三氯甲烷中并由相分离器分离,三氯甲烷相被酸性亚甲基蓝洗涤以除去干扰物质并在第二个相分离器中被再次分离。其色度与浓度成正比,在650/660 nm处用 10 mm比色池测量其信号值。仪器设备:连续流动分析仪:自动进样器、阴离子合成洗涤剂分析单元(即化学反应模块,由相分离器、多道蠕动泵、歧管、泵管、混合反应圈等组成)、检测单元(检测单元可配备 10 mm 比色池、阴离子合成涤剂检测配备 650/660 nm 滤光片)数据处单元及相应附件。GB/T 5750.5-2023氰化物-流动注射法原理: 在pH为4左右的弱酸条件下,水中氰化物经流动注射分析仪进行在线蒸馏,通过膜分离器分离,然后用连续流动的氢氧化钠溶液吸收;含有乙酸锌的酒石酸作为蒸馏试剂,使氰化铁沉淀,去除铁氰化物或亚铁氰化物的干扰,非化合态的氰在pH数据处理系统初始化正常转速设为35r/min,转动平稳蒸馏部分稳定于120℃±1℃显色部分稳定于60℃±1℃无泄漏、试剂流动平稳基线平直GB/T 5750.5-2023氰化物-连续流动法原理:连续流动分析仪是利用连续流,通过蠕动泵将样品和试剂泵入分析模块中混合、反应,并泵入气泡将流体分割成片段,使反应达到完全的稳态,然后进入流通检测池进行分析测定。在酸性条件下,样品通过在线蒸馏,释放出的氰化氢被碱性缓冲液吸收变成氰离子,然后与氯胺-T反应转化成氯化氰,再与异烟酸-吡唑啉酮反应生成蓝色络合物,最后进入比色池于630 nm波长下比色测定。仪器设备:连续流动分析仪:自动进样器、多通道蠕动泵、氰化物反应单元和蒸馏模块、比色检测器、数据处理系统。仪器参考条件:进样速率进样:清洗比加热蒸馏装置流路系统数据处理系统30个样品/h2:1加热温度稳定于125℃±2℃无泄漏,气泡规则,试剂流动平稳基线平直GB/T 5750.5-2023氨(以N计)-流动注射法原理:在碱性介质中,水样中的氨、铵离子与二氯异氰尿酸钠溶液释放出的次氯酸根反应,生成氯胺。在50℃~60℃的条件下,以亚硝基铁氰化钠作为催化剂,氯胺与水杨酸钠反应形成蓝绿色络合物,在660 nm波长下比色测定。仪器设备:流动注射分析仪:氨反应单元和模块、660nm比色检测器、自动进样器、多通道蠕动泵、数据处理系统、在线蒸馏模块(选配)。仪器参考条件:调整流路系统,载流、缓冲溶液、水杨酸钠溶液、亚硝基铁氰化钠溶液及二氯异氰尿酸钠溶液分别在蠕动泵的推动下进入仪器,流路系统中的试剂流动平稳,无泄漏现象。GB/T 5750.5-2023氨(以N计)-连续流动法原理:在碱性介质中,水样中的氨、铵离子与二氯异氰尿酸钠溶液释放出的次氯酸根反应,生成氯胺。在37℃~40℃的条件下,以亚硝基铁氰化钠作为催化剂,氯胺与水杨酸钠反应形成蓝绿色络合物,在660 nm波长下比色测定。仪器设备:连续流动分析仪:氨反应单元和模块、660nm比色检测器、自动进样器、多通道蠕动泵、数据处理系统、在线蒸馏模块(选配)。仪器参考条件:调整流路系统,载流、缓冲溶液、水杨酸钠溶液、亚硝基铁氰化钠溶液及二氯异氰尿酸钠溶液分别在蠕动泵的推动下进入仪器,流路系统中的试剂流动平稳,无泄漏现象。
  • 学完这个!“门外汉”也可以使用PH计了
    PH计是测量和反应溶液酸碱度的重要工具,PH计的型号和产品多种多样,显示方式也有指针显示和数字显示两种可选,但是无论PH计的类型如何变化,它的工作原理都是相同的,其主体是一个精密的电位计。1.一个参比电极;2.一个玻璃电极,其电位取决于周围溶液的pH;3.一个电流计,该电流计能在电阻极大的电路中测量出微小的电位差。以下是分别说明各部件的主要功能:参比电极的基本功能是维持一个恒定的电位,作为测量各种偏离电位的对照。银-氧化银电极是目前pH中最常用的参比电极。玻璃电极的功能是建立一个对所测量溶液的氢离子活度发生变化作出反应的电位差。把对pH敏感的电极和参比电极放在同一溶液中,就组成一个原电池,该电池的电位是玻璃电极和参比电极电位的代数和。E电池=E参比+E玻璃,如果温度恒定,这个电池的电位随待测溶液的pH变化而变化,而测量pH计中的电池产生的电位是困难的,因其电动势非常小,且电路的阻抗又非常大1-100MΩ;因此,必须把信号放大,使其足以推动标准毫伏表或毫安表。电流计的功能就是将原电池的电位放大若干倍,放大了的信号通过电表显示出,电表指针偏转的程度表示其推动的信号的强度,为了使用上的需要,pH电流表的表盘刻有相应的pH数值;而数字式pH计则直接以数字显出pH值。ph计的工作原理PH计是以电位测定法来测量溶液PH值的,因此PH计的工作方式,除了能测量溶液的PH值以外,还可以测量电池的电动势。PH在拉丁文中,是Pondus hydrogenii的缩写,是物质中氢离子的活度,PH值则是氢离子浓度的对数的负数。PH计的主要测量部件是玻璃电极和参比电极,玻璃电极对PH敏感,而参比电极的电位稳定。将PH计的这两个电极一起放入同一溶液中,就构成了一个原电池,而这个原电池的电位,就是这玻璃电极和参比电极电位的代数和。PH计的参比电极电位稳定,那么在温度保持稳定的情况下,溶液和电极所组成的原电池的电位变化,只和玻璃电极的电位有关,而玻璃电极的电位取决于待测溶液的PH值,因此通过对电位的变化测量,就可以得出PH溶液的PH值。误差校正理论上,0~7~14pH的发生电位差在25℃时为+414mV~0~-414mV左右。在能斯特方程式中,电位差大约会变化-59mV,但实际上1pH的变化大约会变化-58mV,此外对于强酸性与强碱性由于玻璃膜的材质以及液体的种类不同,会产生误差。pH计的电位差pH计的校正使用符合JIS标准的pH标准液。pH标准液包括草酸盐(1.68pH)、酞酸盐(4.01pH)、中性磷酸盐(6.86pH)、磷酸盐(7.41pH)、硼酸盐(9.18pH)、碳酸盐(10.01pH)。ph计的使用方法(步骤)ph计使用前的准备工作1.使用PH计之前先用三蒸水清洗电极,注意玻璃电极不要碰碎。2.准备在平台PH计的旁边放至调节用的NAOH液和HCL液。3.在冰箱中拿出定PH液(PH=7.0),放与平台上。4.打开PH计,调定PH值,按︿﹀键选择PH和CAL选项,选择其中的CAL项,调节插入到PH液(PH=7.0)中,按《》键选择数据值到7.0处,出现小八叉即可。5.将玻璃电极插入到待测的溶液中,再放入另一电极,适当的搅动液面(注意:不要碰碎玻璃电极)。6.PH计的电子单元使用必须注意电路的保护,在不进行PH值测量时,要将PH计的输入短路,以避免PH计的损坏。7.PH计的玻璃电极插座必须保持干净、清洁和干燥,不能接触盐雾和酸雾等有害气体,同时严禁玻璃电极插座上沾有任何的水溶液,以避免PH计高输入阻抗。8.未到你需要的PH值时要小心的加如NAOH液和HCL液,(据调节范围不同可以选择不同浓度的调节液,浓度小时可以快加,浓度大时要加慢)。9.加液时小心不要超过所需的定容量。ph计怎么使用步骤1.后盖打开,装入电池一块。2.装上复合玻璃电极注意:(1)复合电极下端是易碎玻璃泡,使用和存放时千万要注意,防止与其它物品相碰。(2)复合电极内有KCl饱和溶液作为传导介质,如干涸结果测定不准必须随时观察有无液体,发现剩余很少量时到化验室灌注。(3)复合电极仪器接口决不允许有污染,包括有水珠。(4)复合电极连线不能强制性拉动,防止线路接头断裂。3.打开电源开关后,再打到PH测量档。4.用温度计测量PH6.86标准液的温度,然后将PH计温度补偿旋钮调到所测的温度值下。5.将复合电极用去离子水冲洗干净,并用滤纸擦干。6.将PH6.86标准溶液2~5ml倒入已用水洗净并擦干的塑料烧杯中,洗涤烧杯和复合电极后倒掉,再加入20mlPH6.86标准溶液于塑料烧杯中,将复合电极插入于溶液中,用仪器定位旋钮,调至读数6.86,直到稳定。 应该注意以下两点:(1)必须用PH6.86标准调定位。(2)调完后,决不能再动定位旋钮。7.将复合电极用去离子水洗净,用滤纸擦干,用温度计测量PH4.00溶液的温度,并将仪器温度补偿旋钮调到所测的温度值下。8.将PH4.00标准溶液2~5ml倒入另一个塑料烧杯中,洗涤烧杯和复合电极后倒掉,再加入20mlPH4.00标准溶液,将复合电极插入溶液中,读数稳定后,用斜率旋钮调至PH4.00。应该注意斜率钮调完后,决不能再动。9.用温度计测定待测液温度,并将仪器温度补偿调至所测温度。10.将复合电极插入待测溶液中,读取PH值,即为待测液PH值。 应该注意以下两点:(1)测定时温度不能过高,如超过40℃测定结果不准,需用烧杯取出稍冷。(2)复合电极避免和有机物接触,一旦接触或沾污要用无水乙醇清洗干净。11.注意事项: 仪器在使用前必须进行校准,即以上4~8款操作。如果仪器不关机,可以连续测定,一旦关机就要校准。但12小时即使不关机也必须校准一次。ph计使用注意事项1.一般情况下,ph计仪器在连续使用时,每天要标定一次;一般在24小时内仪器不需再标定。2.使用前要拉下ph计电极上端的橡皮套使其露出上端小孔。3.标定的缓冲溶液一般第一次用pH=6.86的溶液,第二次用接近被测溶液pH值的缓冲液,如被测溶液为酸性时,缓冲液应选pH=4.00;如被测溶液为碱性时则选pH=9.18的缓冲液。4.测量时,电极的引入导线应保持静止,否则会引起测量不稳定。5.电极切忌浸泡在蒸馏水中。PH计所使用的电极如为新电极或长期未使用过的电极,则在使用前必须用蒸馏水进行数小时的浸泡,这样PH计电极的不对称电位可以被降低到稳定水平,从而降低电极的内阻。6.PH计在进行PH值测量时,要保证电极的球泡完全进入到被测量介质内,这样才能获得更加准确的测量结果。7.PH计使用时,要去除参比电极点解液加液口的橡皮塞,这样参比电解液就能够在重力的。pH计的保养1.pH计玻璃电极的贮存pH计短期内不用时,可充分浸泡在饱和氯化钾溶液中。但若长期不用,应将其干放,切忌用洗涤液或其他吸水性试剂浸洗。2.pH玻璃电极的清洗玻璃电极球泡受污染可能使电极响应时间加长。可用CCl4或皂液揩去污物,然后浸入蒸馏水一昼夜后继续使用。污染严重时,可用5%HF溶液浸10~20分钟,立即用水冲洗干净,然后,浸入0.1N HCl溶液一昼夜后继续使用。3.玻璃电极老化的处理玻璃电极的老化与胶层结构渐进变化有关。旧电极响应迟缓,膜电阻高,斜率低。用氢氟酸浸蚀掉外层胶层,经常能改善电极性能。若能用此法定期清除内外层胶层,则电极的寿命几乎是无限的。4.参比电极的贮存银-氯化银电极最好的贮存液是饱和氯化钾溶液,高浓度氯化钾溶液可以防止氯化银在液接界处沉淀,并维持液接界处于工作状态。此方法也适用于复合电极的贮存。常见问题及解决方案1.同一样品,两次测量的 pH值不一样?温度变化或样品本身发生了化学反应,都会引起 pH值的变化。所以,应尽量保持温度一致,并且避免化学反应。2.同一样品,同时在两台 pH计上测量,读数不一致?由于两台 pH计的校正条件不一样(如,不同时间做的校正),造成测量值有差异。所以要用同一缓冲液在同一时间里对 pH计进行校正,然后再同时测定。3.为什么缓冲液在有效期内已经变质不能使用了?缓冲液的有效期是指未开封使用状态下的保存期。一旦开封使用后,由于空气中各种霉菌的作用,缓冲液较易变质。注意:已使用过的缓冲液,千万不能倒回原装瓶中! 4.电极需多久校准一次?电极的校准频率取决于电极的使用、保养、样品性质以及测量精度等具体情况。建议每天校准一次,最长不要超过每周一次校准。 更换电极以及长时间不使用,在使用前必须先校准。5.如何保养 pH电极?电极使用一段时间后,若发现斜率变低、响应速度变慢等情况,可尝试下列方法:①若测量样品中含有蛋白质,可用胃蛋白酶 /盐酸洗液清洗电极膜。②若测量样品为油性/有机液体,可用丙酮或乙醇冲洗。③若发现电极液络部变脏变黑,可用硫醇清洗液清洗液络部。④活化电极膜,活化方法:电极再生液浸泡 30秒,再用 3mol/LKCl溶液浸泡 5小时。6.样品温度为 10℃,此时仪表显示的是 10℃还是25℃下的 pH值?酸度计显示的是溶液在当前温度下的 pH值,若在 10℃测量,仪表显示的是溶液 10℃的值,如果需要得到 25℃的 pH,必须把溶液温度升/降温至 25℃,再进行测量。酸度计的温度补偿指的是补偿温度对 pH电极的影响,但不能将任何温度下的 pH值补偿到 25℃。7.为什么电极放在 pH7.00的缓冲液中校正后,显示为 7.02?此时缓冲液温度在 20℃左右。由于缓冲液的 pH值会随温度变化有小量变化,7.00只是缓冲液在25℃下的值,而缓冲液在 20℃时的值应为 7.02。pH计能自动补偿温度对缓冲液的影响以保证测量精度。  8.pH电极寿命有多长?pH电极的寿命与测量样品的性质、样品温度及使用的频率、保养情况有关。在正常使用、正确保养的情况下,pH电极寿命为 1至 2年。9.检测pH计准不准?测pH计准不准?唯一可靠和最简单的方法就是以pH标准缓冲溶液来进行检定。取三个pH标准缓冲溶液:pH6.86、pH4.00、pH9.18(最好是新鲜配制并且温度相同),以pH6.86进行定位校准,以pH4.00进行斜率校准,然后测试pH9.18看pH计是否准确,是否合格立见分晓。如果精度不合格,还可以进一步判断是pH计有问题还是pH电极有问题。10.pH计数字不稳定现象原因总结:①检查电极是否已损坏;②应该是电极使用的时间太长了,先校准看一下是否有效;③可试下用2.5mmoL/L的KCL溶液浸泡探头;④清洗一下玻璃球,是不是时间长了,上面附着了一些有机物,导致反应不灵敏;⑤在水中存在着一个化学平CO2+H2O→H++HCO3-,由于一般的纯水或地表水都显弱碱性导致该平衡向正反应方向移动故pH会一直上升;⑥在被测水样中加入中性盐(如,KCl)作为离子强度调节剂,改变溶液中的离子总强度,增加导电性,使测量快速稳定。此方法国家标准GB/T6P04.3-93中规定:“测量水样时为了减少液接电位的影响和快速达到稳定,每50mL水样中加入一滴中性0.1moL/L KCl溶液。”虽然此方法改变了水样中的离子强度,在一定程度上引起了其pH值得变化,但经实验证明此变化在数值上只改变了0.01pH左右,是完全可以接受的。但采用这种方法时,一定要注意所加的KCL溶液不应含任何碱性或酸性的杂质。因此,KCl试剂要采用高纯度的,所配溶液的水质也要高纯度的中性水质。
  • 《生物制品批签发实验室建设标准》,奥豪斯推荐这11款仪器
    《生物制品(疫苗)批签发实验室建设标准》是根据住房和城乡建设部、国家发展改革委《关于下达 2022 年建设标准编制项目计划的通知》,由国家药品监督管理局作为主编部门,具体由国家药品监督管理局综合和规划财务司和中国食品药品检定研究院等 12 个单位(部门)组成编制组共同编写。奥豪斯特推荐11款更高性价比仪器,涵盖分析天平、精密天平、水分测定仪、酸度计、电导率仪、离心机&冷冻离心机、磁力搅拌器、涡旋混匀仪、均质器、浊度计、金属浴,以满足大家需求。EX系列天平- 最高十万分位精度- 分体式独立彩色触屏含4个无线感应器- 4级权限管理,15种称量模式AX系列天平- 彩色触屏- 3级权限管理,9种称量模式- 独特风罩设计节省空间MB120水分测定仪- 1mg/0.01%精度- 支持4种加热模式- 100种测试程序存储空间酸度计- 提供从0.1-0.001pH多种精度的主机选择- 按键设计和触摸屏设计注重客户的个性化体验- 不同样品提供对应适配电极,注重实践电导率仪- 便携和手持满足不同应用场景需要- 多个电导电极覆盖范围广泛- 标配电导缓冲液小包装,拿到即用离心机- 提供单管容量从0.2ml到750ml范围的实验需求- 冷冻和非冷冻离心机,保护温度敏感型样品- 提供生物气密性解决方案,保护你的安全磁力搅拌器- 提供数显、模拟多种系列加热磁力搅拌器,提供多种选型- 控温准确,磁场强大,提供三种升降速选择,应对不同实验需求- 双重安全设计涡旋混匀仪- 提供多个系列的混匀仪,支持非脱手和脱手的多种实验需求- 标配选配件拿到即用,同时还提供多种选件适配不同容量- 数显、模拟、定速等多种选择,提供点动、定时、连续、脉冲等的工作方式均质器- 灵活处理多个样品和样品管组合- 内置5个预设程序便于快速实验- 高通量样品处理提高效率浊度计- 专业光路结构设计,提供大到1000NTU的两种型号选择- 试剂和样品消耗低,支持5000条数据存储并支持导出- 操作简易、便携小巧金属浴- 提供单模块、双模块、四模块和六模块的以及数显模拟多个型号- 多种模块应对复杂的实验需求- 注重温度稳定性和一致性奥豪斯集团成立于1907年,拥有遍布各地的营销、研发和生产基地。通过不断为各地用户提供优质的称量产品与完善的应用方案,奥豪斯产品已遍及环保、疾控、食药、教学科研、食品、新能源和制药工业等各种应用领域,赢得了广泛的认可与青睐。我们致力于提供符合各国安全、环境及质量体系的产品,涵盖电子天平、台秤、平台秤、案秤、摇床、台式离心机、加热磁力搅拌器、涡旋振荡器、干式金属浴、实验室升降台和电化学产品等。
  • 睿科集团:做实验如烹小鲜 精心备菜效率高
    我们可以把实验室理解成厨房。做样品准备像是备菜,实验检测就像炒菜、煮饭。通常我们要花更多时间备菜,就像检测前要花功夫做好样品一样。睿科集团扎根厦门火炬高新区已有12年了,2018年,成立集团后,睿科集团的发展进入了快车道,营业收入增速每年都保持在20%-30%。如今,他们已经成为专注于检验检测行业效能提升的国内知名自动化、智能化实验室整体解决方案供应商。研发自动样品制备仪器全方位解放实验员双手正如备菜做得好,烹饪将会事半功倍一样。睿科集团致力研究的高效自动化样品前处理技术,推动各类检测技术迅速发展。他们研发的很多样品制备设备都可以实现全自动无人值守。均质是检测中经常要运用的一项技术。物料在挤压、冲击的作用下,使之细化,从而能更均匀地相互混合。过去,检测人员常常需要手动均质,既消耗体力,又占用大量时间。在睿科集团的展厅,记者看到一台他们研发的全自动均质器。一键式启动,就能轻松处理各种样品。食品中的肉类、鱼虾、水果、蔬菜;医药领域的中药原料、中成药;化妆品门类的面霜、润肤乳… … 都可以放入这款均质器中进行样品准备。它能取代手动均质,让实验室人员解放出来做更多有意义的工作。同时,这款均质器一次能处理30个以上的样品。操作也很简单,普通人不用培训就能上手。 在微生物检测中,各种缓冲液、无菌生理盐水、液体培养基都需要进行分装。工作重复又繁琐,也会占用实验人员大量时间。睿科集团研发的自动快速分液仪,通过三轴机器臂的设计,再配合高精度的蠕动泵,能够自动完成各类型的分液工作。更贴心的是,它能够适配试管、三角瓶、离心管等各种容器。展厅中的另一台多功能样品制备工作站,实验员把样品装进其中,就可以实现自动化操作,大大减少样品制备过程中对身体的危害,同时减少实验室的人力成本。创新研发科学仪器适用不同应用场景睿科集团的实验仪器还可以使用在不同的应用场景里。如今,查酒驾已经成为常态。如何精确高效地测量驾驶员血液中的酒精含量,困扰着一线检测人员。睿科集团推出的一款全自动样品处理工作站,可以对采血管进行扫码、混匀、钳盖、密封等一系列自动化操作。在实验室样品分析时,很多项目都要用到浓酸。但是传统的加酸方式不仅效率低,还会危害实验人员的健康,有时还会污染实验环境。睿科集团研发的全自动加酸仪通过高精度的蠕动泵,实现自动连续加酸。设备共有8个试剂通道,可以自由切换各种腐蚀性试剂。林志杰介绍,睿科集团联合国内多所高校、科研院所的专家成立了技术研究院,专门围绕国产科学仪器产业链部署创新链。很多创新的仪器设备就是这个研究院的成果。
  • 液相色谱,你问我答(十五)
    反相填料的水解稳定性问有的厂家说他们的柱子的使用pH可以到9或10,而另外的则建议不要大于8。我zui近有根反相柱要用到pH9,因为只有这个条件下我的样品才能完全分离。这超出厂家所说的适用范围,但是柱子的寿命还可以接受。现在我想知道我们应该怎样看待厂家所推荐的pH适用范围。实验已经做出了zui好的回答:如果柱子寿命可以接受那么就可以在推荐的pH范围之外使用。但是我想知道用不同品牌的柱子做的结果是否一样。如果确实一样的话,那么这样用就没什么问题了。填料的pH稳定性是一个比较复杂的问题,很难用一个简单的规则来说明。为了更好的理解我从一些细节上来解释一下。碱性pH中,OH-会攻击并分解硅胶。分解的速度与流动相中的OH-浓度,OH-到填料表面的通道及分解后的硅胶在流动相中的溶解性有关。如你所见,流动相中的pH浓度只是其中一个因素。另外上面所有的过程都与温度有关。在室温下可能工作良好,但是到60℃柱子寿命可能就会明显降低。OH-到填料的通道在填料的稳定性中扮演着重要的角色,填料表面覆盖了致密的C18或C8可以很好的改善稳定性。另外末端封尾也是很重要的。填料表面覆盖的疏水基团可以保护填料免受OH-攻击,其密度是衡量保护能力的尺标。所以我们可以说表面覆盖率高的填料比表面覆盖率低的填料稳定,另外末端封尾的质量也非常重要。在酸性pH中,硅胶自己会分解。因此,键合物的特性只起次要的作用。在相同的键合水平下,单功能结合的硅烷与三功能键合的硅烷其稳定性是没有差别的。但是OH-到填料的通道是zui重要的,因此单功能键合的大的异丙基侧链其稳定性是弱于标准键合相的,因为其zui大覆盖率低。如果柱子一直是使用同一种流动相而没有用有机溶剂冲洗,那么键合相的去吸附和分解是非常缓慢的,因此保留时间也没什么改变。但是硅胶在慢慢的分解。导致的结果就是,柱子可能会毫无征兆的突然坍塌。当然,这种情况下填料密度也是很重要的。孔隙体积大的硅胶没有孔隙体积小的硅胶稳定,因为它的骨架更脆弱。硅胶的孔隙一般在40%-70%,但是它的强度是呈10倍变化的。所以可以根据填料密度来推测键合相的差别。另外,随着填料孔径变大,表面积会减少。所以其他条件一致的话,孔径大的填料要比孔径小的稳定。流动相组分的特性对填料的稳定性也是很重要的。pH相同时,有机缓冲液如氨丁三醇缓冲液【Tris:(HOCH2)3CNH2】,柠檬酸缓冲液和羟乙基呱嗪乙硫磺酸(HEPES)缓冲液的攻击性比通常用的磷酸缓冲液要弱。另外硼酸和甘氨酸即使在pH10也是很温和的。要指出的是在已知的关于填料稳定性的理论研究中都是在等度条件下进行的。当你换到有机溶剂去清洗柱子的污染物的时候,那些吸附在填料上没有键合的基团也可能被洗脱掉。所以,清洗过程也会对柱子的稳定性产生影响。上面的都是针对C18和C8柱的研究。很多极性柱如CN基柱即使在正常的操作过程中其稳定性都要小很多。在pH7时,CN基填料的水解速度是C18和C8填料的1000倍。这样,只要合理操作,即使超过推荐的pH范围,柱子的寿命也还是可以的。zui稳定的柱子是使用高密度硅胶的基质,键合了高密度的C18或C8,加末端封尾。流动相组分的性质对柱子的寿命影响很大,要小心选择。但是,如果分析需要,然后柱子寿命也可以接受,那么大胆的挑战柱子的极限吧!
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