各位专家、同学、同事你们好: 我现在在做关于酶法生产谷胱甘肽的毕业设计。能不能提供一些关于这方面的资料。紧急使用。谢谢!
谁有土壤硝酸还原酶和亚硝酸还原酶、氧化亚氮还原酶的方法?[email]zhenghaohaida@sina.com[/email] 非常感谢!
各位老师,求助土壤中亚硝酸还原酶的活性及硝酸还原酶的活性测定的实验方法,有好方法的请跟贴!! 邮箱:acd1020@126.com
最近在做谷胱甘肽液相的有关物质方法摸索 根据国标配制流动相 走空白和草酸与亚磺酸定位 都在四分钟以前出峰 空白当中一直有残留 更换流动相比例和PH 空白反而走的更不好了 求大神指点
在酒精发酵三分之二阶段(比重1040左右)使用谷胱甘肽类惰性酵母产品,能有效地抗氧化和发掘白葡萄酒的芳香潜力。强烈推荐使用我们的谷胱甘肽产品FreshArom,它的抗氧化能力是SO2的72倍,在发酵结束一年以后仍有很好的抗氧化效果。
一、原理硝酸还原酶(NR)是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸盐,产生的亚硝酸盐与对–氨基苯磺酸(或对–氨基苯磺酰胺)及α–萘胺(或萘基乙烯二胺)在酸性条件下定量生成红色偶氮化合物。其反应如下: http://tong.dxy.cn/upload/asset/2009/10/26/1256434988.jpg生成的红色偶氮化合物在540nm波长下有最大吸收峰,可用分光光度法测定。硝酸还原酶活性可由产生的亚硝态氮的量表示。一般以Nμg·g-1·h-1为单位。NR的测定可分为活体法和离体法。活体法步骤简单,适合快速、多组测定。离体法复杂,但重复性较好。二、仪器与用具分光光度计;真空抽气泵(或20ml注射器筒);天平;单面刀片;保温箱(或恒温水浴);刻度试管(15ml);移液管(5ml×2,2ml×8,1ml×2)。三、试剂1. 亚硝酸钠标准液 称取分析纯NaNO2 0.1000g水溶后定容至100ml,吸取5ml用水稀释定容至1000ml,即为每ml含NaNO2 5μg(亚硝态氮近似1μg/ml)的标准液。2. 0.1mol/L pH7.5的磷酸缓冲液:K2HPO4 19.24g,KH2PO4 2.2g,加水溶解后定容至1000ml。3. 1%(W/V)对-氨基苯磺酸溶液:称取1.0g加入25ml浓HCl中,用蒸馏水定容至100ml。4. 0.2%(W/V)α-萘胺溶液:称取0.2gα-萘胺溶于25ml冰醋酸中,用蒸馏水定容至100ml。5. 30%三氯乙酸溶液:75.0g三氯乙酸水溶后定容250ml。6. KNO3(0.1mol/L)、异丙醇(1% V/V)、磷酸缓冲液(0.1mol/L)混合液:称3.03g KNO3溶于300ml 0.1mol/L的磷酸缓冲液中,再加3ml异丙醇混匀。四、方法1. 标准曲线制作取7支洁净烘干的15ml刻度试管按表13-1顺序加试剂,即配成0-2.0μg的系列标准亚硝态氮溶液。摇匀后在30℃保温箱或恒温水浴中保温30min,然后在540nm波长下比色。以亚硝态氮(μg)为横坐标,光密度值为纵坐标绘标准曲线或建立回归方程。表13-1 各试剂加入顺序 http://tong.dxy.cn/upload/asset/2009/10/26/1256434989.jpg
谁有相关于血浆中如何除去半胱氨酸和谷胱甘肽的文献?跪求。。
有没有做过植物中硝酸盐还原酶的测定呢?我一个有个问题,弱弱的问下,那就是这个酶可不可以先冻样,之后再测呢?
请问各位高手: 小弟正在做关于生物发酵制取谷胱甘肽方面的毕业设计,请问那里可以查到这方面的资料呀(最好是免费的)~~~谢谢~~~~[em01]
在做体外α-葡萄糖苷酶抑制活性。具体的实验操作如下,110μLpbs(Ph6.8),各样品梯度100-200-400-800-1600-3200μg/mL各20μL,还原型谷胱甘肽(1mg/mL)10μL,20μL酶溶液,37℃反应15min后,加20μLPnpg(2.5mmol/L),继续37℃反应15min,80μL碳酸钠(0.2moL/L)终止反应。每次加完试剂后,谷胱甘肽、酶、pnpg保存在-4°的冰箱。样品组:样品+pbs+酶+底物+碳酸钠+谷胱甘肽 样品空白:不加底物 对照组:无样品 空白对照:无样品无底物。最终实验结果:大多数100-200-400分子比分母大,1减去后是一个负数,没抑制率。后面做了阿卡波糖阳性药物,在100-200-400也很难有抑制率,目前已经做了30次。认为操作没问题,是浓度太低没活性吗?
[b]酶是生物为提高其生化反应效率而产生的生物催化剂,是由生物体合成又可脱离生物体而存在的球形蛋白质,它能改变化学反应的速度,但不影响最终产物的性质,且本身在反应前后也不发生变化。20世纪80年代起,生物工程作为一门新兴高新技术在我国得到了迅速发展,酶的研究与应用领域逐渐扩大,而且取得了可喜的成就。 酶作为催化剂有如下特性: (1)反应的速度比非催化反应的速度高108~1020倍,比其它催化剂催化的反应速度高107~1013倍。 (2)作用缓和,不需要高温高压、强酸、强碱等条件。酶本身无毒,公害少,利于环保。 (3)专一性强,即一种酶只能催化一种或一类反应,例如蛋白酶只能催化蛋白质水解,淀粉酶只能催化淀粉水解。 (4)酶的本质为蛋白质,故一切能导致蛋白质性质发生改变的因素,例如温度、pH值、重金属离子等均能影响酶的催化效能。 [b]酶的来源十分广泛,种类繁多,性能各异,根据其催化反应类型,国际生物化学协会将酶分为6种: 氧化还原酶、裂解酶、异构酶、转移酶、水解酶、合成酶。 其中合成酶是催化合成某些化合物的酶,主要用在生物合成工业中,如谷氨酰胺合成酶、谷胱甘肽合成酶、纤维素合成酶、淀粉合成酶、紫杉醇生物合成酶等。 其中常用于食品加工中的酶主要有淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、葡萄糖氧化等。[/b] [/b]
[font=&][b][color=#ff0000]各位大神,我只能下载到以下两篇论文的CAJ版本,我想求助一下它们的PDF版本,谢谢各位![/color][/b]论文题目:外泌体-S-亚硝基谷胱甘肽-聚己内酯改良复合生物膜的构建及成骨、抗炎功能研究[/font][url=https://www.sciencedirect.com/science/book/9780128205525]作者[/url]:卢海平年月日:[font=NexusSans, Arial, Helvetica, &][color=#2e2e2e]2022[/color][/font]全文链接:https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&dbname=CMFDTEMP&filename=1022554003.nh&uniplatform=NZKPT&v=DG1Qz4tFo86i_-8V7icXdVP8-qN1-0OGm3FJyMmu2Ih50guOYpI-mzxhWuXtWkn-论文题目:双层外泌体复合钛支架调控炎症与促进成骨的体外实验研究作者:赵庆禹年月日:[font=NexusSans, Arial, Helvetica, &][color=#2e2e2e]2022[/color][/font]全文链接:https://kns.cnki.net/kcms/detail/detail.aspx?dbcode=CMFD&dbname=CMFDTEMP&filename=1022554070.nh&uniplatform=NZKPT&v=DG1Qz4tFo840J4BtvcXGB3MUbmg9HQ5IAQ6U8Qsq8KCU5ZlkuKp3MqgKaQzGXwFH
序号:1题目:S-亚硝基谷胱甘肽对舱室内大鼠颅脑爆炸伤后继发性脑损伤的作用作者:许明伟; 许民辉; 赖西南; 王丽丽; 张子焕; 崔红;期刊:创伤外科杂志链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=15&recid=&filename=CXWK201006005&dbname=CJFD2010&dbcode=CJFQ&pr=&urlid=&yx=&v=MzExMDFYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMK2ZZT1JwRmlIbVViL1BKalhjWmJHNEg5SE1xWTlGWVlSOGU=序号:2题目:S-亚硝基谷胱甘肽对PGF2α诱导心肌肥大的抑制作用作者:邱红梅期刊:重庆医学链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=21&recid=&filename=CQYX200918021&dbname=CJFD2009&dbcode=CJFQ&pr=&urlid=&yx=&v=MTE4NDBlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTCtmWU9ScEZpSG1VYnZBSmp6U2RyRzRIdGpOcDQ5SFpZUjg=序号:3题目:植物亚硝基谷胱甘肽还原酶(GSNOR)功能的研究进展作者:严金平; 罗义勇; 杨华期刊:热带作物学报链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=1&recid=&filename=RDZX201011037&dbname=CJFD2010&dbcode=CJFQ&pr=&urlid=&yx=&v=MTkyNjRkckc0SDlITnJvOUdZNFI4ZVgxTHV4WVM3RGgxVDNxVHJXTTFGckNVUkwrZllPUnBGaUhsV3JyS055blI=序号:4题目:S-亚硝基谷胱甘肽对冠状血管成形术中血小板活性的抑制作用作者:张永斌期刊:国外医学心血管疾病链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=46&recid=&filename=GWXX199505024&dbname=CJFD9495&dbcode=CJFQ&pr=&urlid=&yx=&v=MTI2MjNMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTCtmWU9ScEZpSGxXN3ZLSWpyVGRyS3hGOVRNcW85SFlJUjhlWDE=序号:5题目:亚硝基化谷胱甘肽还原酶:一个调控炎症反应的新分子作者:吴凯源; 张玉英; 粟文婷; 陈畅期刊:生物化学与生物物理进展链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=55&recid=&filename=SHSW201308005&dbname=CJFD2013&dbcode=CJFQ&pr=&urlid=&yx=&v=Mjc0NDZZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTCtmWU9ScEZpSG1VcjdOTmlYWWViRzRIOUxNcDQ5RllZUjhlWDFMdXg=
重金属,特别是汞、镉、铅、铬等具有显著的生物毒性。它们在水体中不能被微生物降解,而只能发生各种形态相互转化和分散、富集过程(即迁移)。 重金属污染的特点是: (1)除被悬浮物带走的外,会因吸附沉淀作用而富集于排污口附近的底泥中,成为长期的次 生污染源; (2)水中各种无机配位体(氯离子、硫酸离子、氢氧离子等)和有机配位体(腐蚀质等)会与其 生成络合物或螯合物,导致重金属有更大的水溶解度而使已进入底泥的重金属又可能重 新释放出来; (3)重金属的价态不同,其活性与毒性不同。其形态又随pH和氧化还原条件而转化。 (4)在其危害环境方面的特点是:微量浓度即可产生毒性(一般为1~10毫克/升,汞、镉为 0.01~0.001毫克/升);在微生物作用会转化为毒性更强的有机金属化合物(如洋-甲基 汞);可被 生物富集,通过食物链进入人体,造成慢性路线。亲硫重金属元素(汞、 镉、铅、锌、硒、铜、砷等)与人体组织某些酶的巯基(-SH)有特别大的亲合力,能抑制 酶的活性,亲铁元素(铁、镍)可在人体的肾、脾、肝内累积,抑制精氨酶的活性。六价 铬可能是蛋白质和核酸的沉淀剂,可抑制细胞内谷胱甘肽还原酶,导致高铁血红蛋白, 可能致癌,过量的钒和锰(亲岩元素)则能损害神经系统的机能。 重金属对人体的危害由金属元素的化学性质决定,根据十余项指标和九项参数对重金属的潜在毒性进行分类和排序,考评指标和参数如下:第一电离势、熔点、沸点、熔化热、汽化热、电化当量、结合能、离子半径、密度、电荷离子半径比、氧化性、离子奇偶性、挥发性。结论如下: [size=4] [B] 毒性大:[/B][/size]Hg汞 〉Cd镉 〉Tl铊 〉Pb铅 〉Cr铬 〉In铟 〉Sn锡 毒性中等:Ag银〉Sb锑〉Zn锌〉Mn锰〉Au金〉Cu铜〉Pr镨 〉Ce 铈〉Co钴〉Pd钯〉Ni镍〉V钒 〉Os锇〉Lu镥〉Pt铂〉Bi铋〉Yb镱〉Eu铕〉Ga镓〉Fe铁〉Sc钪〉Al铝〉Ti钛〉Ge锗〉Rh铑〉Zr锆 毒性较小:Hf铪〉Ru钌〉Ir铱〉Tc锝〉Mo钼〉Nb铌〉Ta钽〉Re铼〉W钨〉Tm铥〉Dy镝 〉Nd钕〉Er铒〉Ho钬 〉Gd钆〉Tb铽 〉La镧〉Y钇
维生素C在大家心目中,应该是常见化学试剂,也是我们在医院常用的药。但它还有抗氧化、防癌、防贫血等,希望大家平时支持吃点,健康我们化学人!把相关功效摘抄,贴在下面:胶原蛋白的合成 胶原蛋白的合成需要维生素C参加,所以VC缺乏 食用富含维生素C的食物可防晒,胶原蛋白不能正常合成,导致细胞连接障碍。人体由细胞组成,细胞靠细胞间质把它们联系起来,细胞间质的关键成分是胶原蛋白。胶原蛋白占身体蛋白质的1/3,生成结缔组织,构成身体骨架。如骨骼、血管、韧带等,决定了皮肤的弹性,保护大脑,并且有助于人体创伤的愈合。 治疗坏血病 血管壁的强度和VC有很大关系。微血管是所有血管中最细小的,管壁可能只有一个细胞的厚度,其强度、弹性是由负责连接细胞具有胶泥作用的胶原蛋白所决定。当体内VC不足,微血管容易破裂,血液流到邻近组织。这种情况在皮肤表面发生,则产生淤血、紫癍;在体内发生则引起疼痛和关节涨痛。严重情况在胃、肠道、鼻、肾脏及骨膜下面均可有出血现象,乃至死亡。 预防牙龈萎缩、出血 健康的牙床紧紧包住每一颗牙齿。牙龈是软组织,当缺乏蛋白质、钙、VC时易产生牙龈萎缩、出血。 维生素C 略带酸性,作为微量营养素被摄入体内,经体内溶解、消化,其酸碱性对人体的影响是微乎其微的,所以不必过份在意它的酸碱性。安利维生素C有助巩固细胞组织,有助于胶原蛋白的合成,能强健骨骼及牙齿,还可预防牙龈出血,长期服用对牙齿、牙龈无害而且有益。 预防动脉硬化 可促进胆固醇的排泄,防止胆固醇在动脉内壁沉积,甚至可以使沉积的粥样斑块溶解。 抗氧化剂 可以保护其它抗氧化剂,如维生素A、维生素E、不饱和脂肪酸,防止自由基对人体的伤害。治疗贫血 使难以吸收利用的三价铁还原成二价铁,促进肠道对铁的吸收,提高肝脏对铁的利用率,有助于治疗缺铁性贫血。 防癌 丰富的胶原蛋白有助于防止癌细胞的扩散;VC的抗氧化作用可以抵御自由基对细胞的伤害防止细胞的变异;阻断亚硝酸盐和仲胺形成强致癌物亚硝胺。曾有人对因癌症死亡病人解剖发现病人体内的VC含量几乎为零。 保护细胞、解毒,保护肝脏 在人的生命活动中,保证细胞的完整性和代谢的正常进行至关重要。为此,谷胱甘肽和酶起着重要作用。 谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸组成的短肽,在体内有氧化还原作用。它有两种存在形式,即氧化型和还原型,还原型对保证细胞膜的完整性起重要作用。VC是一种强抗氧化剂,其本身被氧化,而使氧化型谷胱甘肽还原为还原型谷胱甘肽,从而发挥抗氧化作用。 酶是生化反应的催化剂,有些酶需要有自由的巯基(-SH)才能保持活性。VC能够使双硫键(-S-S)还原为-SH,从而提高相关酶的活性,发挥抗氧化的作用。 从以上可知,只要VC充足,则VC、谷胱甘肽、-SH形成有力的抗氧化组合拳,清除自由基,阻止脂类过氧化及某些化学物质的毒害作用,保护肝脏的解毒能力和细胞的正常代谢。 提高人体的免疫力 白细胞含有丰富的VC,当机体感染时白细胞内的VC急剧减少。VC可增强中性粒细胞的趋化性和变形能力,提高杀菌能力。 促进淋巴母细胞的生成,提高机体对外来和恶变细胞的识别和杀灭。 参与免疫球蛋白的合成。 提高CI补体酯酶活性,增加补体CI的产生。 促进干扰素的产生,干扰病毒mRNA的转录,抑制病毒的增生。 提高机体的应急能力 人体受到异常的刺激,如剧痛、寒冷、缺氧、精神强刺激,会引发抵御异常刺激的紧张状态。该状态伴有一系列身体,包括交感神经兴奋、肾上腺髓质和皮质激素分泌增多。肾上腺髓质所分泌的肾上腺素和去甲肾上腺素是有酪氨酸转化而来,在此过程需要VC的参与。
牛奶子,别名:剪子果、甜枣、麦粒子,拉丁文名:Elaeagnus umbellate Thunb.属于胡颓子科、胡颓子属落叶直立灌木,小枝甚开展,多分枝,幼枝密被银白色和少数黄褐色鳞片,有时全被深褐色或锈色鳞片,老枝鳞片脱落,灰黑色;芽银白色或褐色至锈色。叶纸质或膜质,椭圆形至卵状椭圆形或倒卵状披针形,成熟后全部或部分脱落,干燥后淡绿色或黑褐色,下面密被银白色和散生少数褐色鳞片,果实几球形或卵圆形,幼时绿色,被银白色或有时全被褐色鳞片,成熟时红色;果梗直立,花期4-5月,果期7-8月。 果实、叶、根具有治泻痢、消渴、喘咳、祛风、利湿、月经过多和风湿关节等药用价值;此外,还可作为提取香精、工业用油、人造纤维板、植物源农药等的原材料。[align=center][img=,220,186]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/10/201810091442319839_8688_3480584_3.jpg!w220x186.jpg[/img][/align] 落叶直立灌木,高1-4米,具长1-4厘米的刺;小枝甚开展,多分枝,幼枝密被银白色和少数黄褐色鳞片,有时全被深褐色或锈色鳞片,老枝鳞片脱落,灰黑色;芽银白色或褐色至锈色。叶纸质或膜质,椭圆形至卵状椭圆形或倒卵状披针形,长3-8厘米,宽1-3.2厘米,顶端钝形或渐尖,基部圆形至楔形,边缘全缘或皱卷至波状,上面幼时具白色星状短柔毛或鳞片,成熟后全部或部分脱落,干燥后淡绿色或黑褐色,下面密被银白色和散生少数褐色鳞片,侧脉5-7对,两面均略明显;叶柄白色,长5-7毫米。花较叶先开放,黄白色,芳香,密被银白色盾形鳞片,1-7花簇生新枝基部,单生或成对生于幼叶腋;花梗白色,长3-6毫米;萼筒圆筒状漏斗形,稀圆筒形,长5-7毫米,在裂片下面扩展,向基部渐窄狭,在子房上略收缩,裂片卵状三角形,长2-4毫米,顶端钝尖,内面几无毛或疏生白色星状短柔毛;雄蕊的花丝极短,长约为花药的一半,花药矩圆形,长约1.6毫米;花柱直立,疏生少数白色星状柔毛和鳞片,长6.5毫米,柱头侧生。果实几球形或卵圆形,长5-7毫米,幼时绿色,被银白色或有时全被褐色鳞片,成熟时红色;果梗直立,粗壮,长4-10毫米。花期4-5月,果期7-8月。 本种果实可生食,制果酒、果酱等,叶作土农药可杀棉蚜虫;果实、根和叶亦可入药。亦是观赏植物 食用 牛奶子生长地的居民都有生食牛奶子果实的习惯。牛奶子果实味酸甜,富含糖、酸,且富含人体必需的氨基酸及多种矿质元素和维生素,是一种天然的饮料资源,可以开发利用其果实酿酒、配制果汁饮料,并可制作果酱等。研究显示,其果实番茄红素含量丰富,远远大于番茄,为替代番茄工业生产番茄红素提供了资源,并且对开发纯天然饮料风味添加剂具有十分重要的意义。 营分成分:牛奶子果实具有很高的营养价值,其富含糖类、有机酸、矿质营养、粗蛋白、粗脂肪、多种维生素、多种氨基酸、番茄红素及核黄素等营养物质。汪维云等利用氨基酸自动分析仪分析发现,牛奶子丝氨酸含量最高,达到了15.73 mg/100 g;脯氨酸和甲硫氨酸含量分别达到5.9 mg/100 g和5.65 mg/100 g;缬氨酸含量在2.0 mg/100 g 以上。牛奶子矿质元素丰富,其中,钙的含量达到34.65 mg/kg,其他元素含量依次为MnZnFeKCu。牛奶子的微量元素也很丰富。牛奶子果实中的维生素B1 和B2 的含量分别达到2.11。0.17 mg/100 g,超过苹果等水果的几十倍;Vc 含量与苹果等含量相当,达到5.71 mg/100 g 。 药用 牛奶子的根、茎、叶、果实均可入药。其具有活血行气、止咳、止血、祛风等功效,主治肝炎、肺虚、跌打损伤及泻痢等症状。徐裕彬等通过对牛奶子根的化学成分分析与测定,首次从牛奶子中分离得到β-谷甾醇、槲皮素和芦丁这3个化合物。β-谷甾醇具有抗癌和降低胆固醇的作用;槲皮素和芦丁能抑制血小板凝集,抑制胆碱酯酶等,这为牛奶子的活血行气作用提供了证据。牛奶子果核油含有较丰富的不饱和脂肪酸,有益于人体健康。例如从胡颓子中提取的5-羟色胺,可用于治疗风湿性疾病。牛奶子叶的提取液可以杀死棉蚜虫。Sabir等进一步研究证实,牛奶子叶、花等多个组织的提取液不仅能杀死金黄色葡萄球菌、枯草杆菌,还能杀死革兰氏阴性菌包括大肠杆菌和铜绿假单胞菌等。这一研究也为牛奶子提取液在临床医药方面发挥作用奠定了基础。 水土改良:牛奶子的生长适应能力很强,耐逆性强,其根具有固氮作用,而氮是植物生长的重要元素,不同的氮素形态对黄瓜等作物光合作用和果实品质都有着重要的影响。牛奶子还是水土保持和防沙造林的良好树种,其根系发达,造林后2~3 a 即可郁闭成林。每株牛奶子可覆盖地面3 m2,据测定,根水平伸展可达6 m2,能固定30~40 cm深的土壤,可有效地控制水土流失。 牛奶子物种在人造纤维板、工业油、饲料原料加工、香精及植物源农药等方面具有重要的经济价值潜力。牛奶子中类胡萝卜素含量丰富,尤其是番茄红素含量较高。番茄红素是一种天然的抗氧化剂,在维护人体健康方面有着重要的作用,具有防癌、抗癌、延缓皮肤衰老、调节机体代谢等重要功能。2007 年,美国农业部贝兹维尔农业研究中心进一步对不同基因型牛奶子的抗氧化能力研究表明,牛奶子能强效地清除自由基,不同牛奶子品种都可检测到6 种抗氧化酶较强的活性,包括谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶、超氧化物歧化酶、抗坏血酸过氧化物酶、脱氢抗坏血酸还原酶、单脱氢抗坏血酸还原酶。另一项研究表明,牛奶子提取物能够抑制人类白血病HL- 60 癌细胞和人类肺上皮癌细胞的增殖,并能诱导HL 细胞的凋亡。牛奶子树不同部位的多糖对羟基自由基、超氧阴离子自由基均有清除或抑制效果,且存在较好的量效关系。随着牛奶子番茄红素合成代谢相关基因的克隆和积累机制的研究,为利用分子生物学手段挖掘高产类胡萝卜素的新基因及改良番茄品质提供了无限可能。
前几天测了几个紫外,样品是还原型谷胱甘肽溶解在PB缓冲液中,浓度40μg/ml。但是结果很不合适,感觉全是末端吸收,而且在200~214nm透过率直接为0%,减小浓度后作用也不大。是否与比色皿质量有关,空白比色皿吸收http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207031731_375570_1932695_3.jpg谷胱甘肽 透过率 40μg/ml 和1μg/ml http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207031727_375565_1932695_3.jpg谷胱甘肽 吸收 40μg/ml 和1μg/ml http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207031728_375566_1932695_3.jpg求高人解答,是什么问题,做过几个其他样品,结果也都相似,峰型都是逐渐上升状。标准的谷胱甘肽检测貌似是在0.1mM NaOH中进行的,在214及230有两个峰,我也试过,结果与在PB缓冲液中没有区别。
序号:6题目:低氧性肺动脉高压中亚硝基谷胱甘肽还原酶的表达及其调控机制的研究作者:吴西玲期刊:博士论文链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=6&recid=&filename=2010067912.nh&dbname=CDFD0911&dbcode=CDFD&pr=&urlid=&yx=&v=MDY3Mjlkak5yWkViUElSOGVYMUx1eFlTN0RoMVQzcVRyV00xRnJDVVJMK2ZZT1JwRmlIbVVMN1BWMTI2SHJPK0c=序号:7题目:亚硝基谷胱甘肽对大鼠肝微粒体谷胱甘肽转移酶的激活及机制作者:史强; 楼宜嘉;期刊:中国药理学与毒理学杂志链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=7&recid=&filename=YLBS200306007&dbname=CJFD2003&dbcode=CJFQ&pr=&urlid=&yx=&v=MjQzNzBMTXFZOUZZNFI4ZVgxTHV4WVM3RGgxVDNxVHJXTTFGckNVUkwrZllPUnBGaUhtVUwvS1BDSEpmYkc0SHQ=序号:8题目:人参皂苷Rg1对S-亚硝基化谷胱甘肽引起内皮细胞线粒体依赖损伤的保护作用研究作者:严洁萍;吕良忠;期刊:中国药学杂志链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=10&recid=&filename=ZGYX201414007&dbname=CJFD2014&dbcode=CJFQ&pr=&urlid=&yx=&v=MDQ5NjYrZllPUnBGaUhtVUx6SlB5clNkckc0SDlYTnE0OUZZNFI4ZVgxTHV4WVM3RGgxVDNxVHJXTTFGckNVUkw=序号:9题目:GSNO或诱生型NOS激活糖酵解通路及HIF-1α相关机制研究作者:严洁萍期刊:博士论文链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=12&recid=&filename=1013304970.nh&dbname=CDFD1214&dbcode=CDFD&pr=&urlid=&yx=&v=MTUzNTBScEZpSG1VTHpCVkYyNkhiQzRHdGpMcjVFYlBJUjhlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTCtmWU8=序号:10题目:S-亚硝基硫醇的合成及生物活性研究作者:周传兵期刊:硕士论文链接:http://www.cnki.net/KCMS/detail/detail.aspx?QueryID=0&CurRec=5&recid=&filename=2010211436.nh&dbname=CMFD2011&dbcode=CMFD&pr=&urlid=&yx=&v=MDM1NDhIOVhQcVpFYlBJUjhlWDFMdXhZUzdEaDFUM3FUcldNMUZyQ1VSTCtmWU9ScEZpSGxXcjNKVjEyNkhyRzU=
[size=4]【题目】正常成人和癌肿患者的红细胞还原型谷胱甘肽和血清尿酸含量 【作者】蒙松年 陈江 唐建生 【日期】1992-02-002[/size]
看到一年一度的原创大赛又开始了,收到坛主大人的邀请,将自己的一些心得和经历总结出来与大家分享,主要还是希望能够从中得到一些提高~~下面小生就再次献丑了~=====================================写在前面==============================================这次我们一同探究的是肝脏的抗氧化能力,为什么要探究这个问题呢?因为抗氧化和我们人体延缓衰老、解除有害代谢物有很大的关系,那么这个抗氧化又要从哪里说起呢?主要是与以下几个方面有关系: 1. 自由基也称游离基,是指含有奇数价电子并因此在一个轨道上具有一个未成对电子的原子或原子团。其产生途径很多,但一般是通过分子或离子的均裂获得的:具体有辐射诱导;热诱导;单电子氧化还原。它是机体代谢过程中所产生的一种副产品,可使脂类发生过氧化反应,而生成过氧化脂质(LPO),LPO又可使细胞膜脂质组成发生变化,导致细胞内酶和蛋白质变性,而破坏细胞的结构和功能,且LPO还可使机体内重要脏器如心、肝等组织损伤,因而它对机体是有害的。 2. 超氧化物歧化酶(Super Oxide Dismutase,SOD)是一种广泛存在与生物体内与细胞氧化代谢密切相关的蛋白质,它是清除机体细胞中有害物质-氧自由基的功能活性蛋白质。是人体防御内外环中超氧负离子对自身侵害的一类金属活性酶,细胞中SOD以Cd2+、Cu2+等金属为辅基。SOD是人体内一种十分重要的活性物质,起着抗衰老和防止多种疾病的重要作用。它具有抗辐射、消炎、抑制肿瘤和心血管病的功能;可以改善人体自身免疫、延缓衰老;最具明显的功能为抗衰老、抗氧化,对创伤的修复、缺血再灌流损伤的防护有明显效果。 3. 在红细胞等组织中含有一种含硒的谷胱甘肽过氧化酶(GSH—Px),可使氧化脂质(ROOH)和H2O2与还原型谷胱甘肽(GSH)反应,从而将它们转变为无毒的水或醇。所以还原型谷胱甘肽(GSH)可保护红细胞蛋白膜、血红蛋白及酶的巯基等免受氧化剂的毒害,维持细胞的正常功能。测定该酶的活性数量可作为人体衰老和生命活力状况的一个定量指标。 4. Cd2+(或Cu2+)等金属离子都对动物(小白鼠)产生毒害作用,如对小鼠体内抗氧化酶活性产生影响,通过对小鼠体内抗氧化活性在注射前后的变化可以测定外来化合物的毒性强弱。 所以为了探究外来重金属对肝脏的影响,我们就通过分析不同浓度的Cd2+注射对小鼠在不同血液中抗氧化酶的活性的变化来定量测定Cd2+金属对小鼠产生的毒性强弱,以及毒害程度随时间的变化情况,从而为细胞分子水平的毒性机制探讨和环境综合完全性评价提供科学依据。背景介绍完下面就是我们的实验部分了~~========================================实验经过========================================http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191422_305728_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191423_305730_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191424_305731_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191432_305737_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191433_305738_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191434_305740_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191435_305742_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191435_305743_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191439_305744_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191439_305745_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191440_305746_1947624_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/07/201107191442_305747_1947624_3.jpg========================================后记=============================================总的说来这次实验不是特别的满意,但是结论和我预想的是保持一致的,属于验证类的实验,使用的实验方法也比较简单,无非就是一些基本的实验操作~~也没有用什么特殊的仪器,后期数据处理的工作量比较大,因为是自己设计的验证性实验,所以也没有对出局处理仔细推敲,分享出来大家纯属参考下好了~~最后,帮活动宣传下吧,这次活动设计的很好,大家积极参赛,不要让版面落后哦!!
用茚三铜显色做还原型谷胱甘肽的鉴别,步骤如下:取本品5mg,加5ml水使溶解,加一滴氨试液和1ml茚三酮试液,水浴加热1至2分钟,即显橙红或红色。我想问一下:为什么要加一滴氨试液呢?多谢啦
1. 聚苯乙烯阳离子和阴离子交换树脂 这是最重要一类离子交换树脂,由苯乙烯和二乙烯苯的共聚物作为骨架,在引入所需要的酸性基或碱性基而成。根据引入的可离解基团的性质又可分为下列两类离子交换树脂: 1)聚苯乙烯阳离子交换树脂 这类交换剂可再分为强酸型、中强酸型及弱酸性三种;2)聚苯乙烯阴离子交换树脂 也可在分为强酸性、中强酸性及弱酸性三类。 2. 聚丙烯酸阳离子交换树脂 是由甲基丙烯酸和二乙烯的聚合而成。这类树脂具高度的交换量,每棵树脂可交换10毫克当量物质。这种高度缔合的非离子化羧基使树脂的表面形成一个亲水平,对极性分子能起一种很有效的吸附作用。 3. 其它离子交换剂 1)选择性离子交换剂 是利用某些特殊的有机溶剂可与某些金属离子起选择性反应的原理而制备的。如用含汞的树脂分离含巯基的化合物(辅酶A,半胱氨酸,谷胱甘肽)。 2)吸附树脂 是一类有很大的表面积,吸附能力强,离子交换的能力很小的树脂。主要用于脱色和除去蛋白质等,也成为"脱色树脂"。 3)电子交换树脂 这类所交换的不是离子而是电子,交换反应是个氧化还原反应,也称"氧化还原树脂"。
长寿老人谈玉米糊玉米中的维生素为稻米、面粉的5~10倍,还含有7种“抗衰剂”:钙、谷胱甘肽、纤维素、镁、硒、维生素E和脂肪酸。常吃玉米,有着惊人的好处:1、降三高降糖:玉米中含有丰富的烟酸,可增强胰岛素作用。所以,用玉米替代主食,有助于血糖的调节。 降胆固醇:玉米中含有丰富的不饱和脂肪酸,它和玉米胚芽中的维生素E协同作用,可降低血液胆固醇浓度并防止其沉积于血管壁。玉米含有丰富的纤维素,防便秘,促进胆固醇的代谢,加速肠内毒素的排出。降压:玉米对冠心病、动脉粥样硬化及高血压,都有一定的预防和辅助治疗作用。2、抗癌玉米中含有多种抗癌因子,如谷胱甘肽、叶黄素和玉米黄质、微量元素硒和镁等;玉米中所含的胡萝卜素,被人体吸收后能转化为维生素A,它也具有防癌作用。3、抗衰老玉米中所含长寿因子谷胱甘肽,在硒的参与下,生成谷胱甘肽氧化酶,具有恢复青春、延缓衰老的功能。4、养胃、护眼玉米有养胃的作用,并且富含胡萝卜素和维生素A,还能提供能量。玉米含有叶黄素和玉米黄质,是强大的抗氧化剂,能够保护眼睛中叫做黄斑的感光区域,预防老年性黄斑变性和白内障的发生。玉米有那么多的作用,难怪长寿地区的人都爱吃它。
原理 美兰还原试验是用来判断原料乳新鲜程度的一种色素还原试验。新鲜乳加入亚甲基兰后染为蓝色。如污染大量微生物产生还原酶使颜色逐渐变浅,直至无色,通过测定颜色变化时间,间接推断出鲜奶的卫生质量。试剂亚甲基蓝水溶液:0.01g/300ml(煮沸后的无CO2的蒸馏水,该试剂需要冷藏)仪器材料试管,20mm×200mm。水浴锅:可恒温到38℃步骤1.使用灭菌吸管吸取10ml牛奶于灭菌试管中,在水浴中加热到38℃,再加入亚甲基兰溶液1ml,混匀。2.将试管放入水浴中,每30min观察一次褪色情况,并记录每个样品褪色时间。结果评估通过溶液的褪色时间可以估算出牛奶中细菌总数。影响因素1.细菌的活性:由于原奶在实验前冷藏时间的延长,传统的适温菌型(产酸菌的牛奶菌丝),逐渐转换为嗜冷菌型(分解蛋白质和脂肪的菌丝),脱色时间和细菌总数之间的相关性变弱。2.溶液的退色时间与染色液的浓度有关3.此方法对体细胞(白细胞)及其他细胞的还原作用也敏感,因此还可检验异常乳(乳房炎及初乳或末乳)裉色时间相当每ml牛乳中的细菌总数注:此方法较适用于原料奶的验收检验,所以一般时间控制在40分钟之内观察为宜。
砷化氢品名砷化氢 砷化三氢 胂 Arsine Aresenic hydride Hydrogen arsenide Arsenic Trihydride CAS:7784-42-1理化性质无色稍有大蒜味气体。分子式AsH3。分子量 77.95。相对密度 2.695(气体)。 熔点-117℃。沸点-55℃。相对密度 2.66。蒸气压 1466.3 kPa (11,000mmHg20℃)。水中溶解度 20ml/100g (20℃);微溶于乙醇、 碱性溶液;溶于氯仿、苯。 水溶液呈中性。 在水中迅速水解生成砷酸和氢化物。 遇明火易燃烧。燃烧呈蓝色火焰并生成三氧化二砷。 加热至300℃,可分解为元素砷。 遇明火、氯气、硝酸、(钾+氨)会爆炸。痕量的砷化氢最好用高锰酸钾溶液或溴水吸收。侵入途径由呼吸道吸入。毒理学简介人吸入TCLo: 3ppm LCLo: 25ppm/30M,300ppm/5M。人(男性)吸入TCLo:325μg/m3。大鼠吸入LC50: 390 mg/m3/10M。小鼠吸入LC50: 250 mg/m3/10M。砷化氢经呼吸道吸入后,随血循环分布至全身各脏器。其中以肝、肺、脑含量较高。人脱离接触后, 砷化氢部分以原形自呼气中排出 如肾功能未受损, 砷- 血红蛋白复合物及砷的氧化物可自尿排出。砷化氢为剧毒,是强烈的溶血性毒物。砷化氢引起的溶血机理尚不十分清楚,一般认为血液中砷化氢90~95%与血红蛋白结合, 形成砷-血红蛋白复合物,通过谷胱甘肽氧化酶的作用,使还原型谷胱甘肽氧化为氧化型谷胱甘肽,红细胞内还原型谷胱甘肽下降,导致红细胞膜钠-钾泵作用破坏, 红细胞膜破裂, 出现急性溶血和黄疸。砷-血红蛋白复合物、砷氧化物、破碎红细胞及血红蛋白管型等可堵塞肾小管, 是造成急性肾损害的主要原因,可造成急性肾功能衰竭。此外砷化物尚对心、肝、肾有直接的毒作用。临床表现主要为不同程度的急性溶血和肾脏损害。中毒程度与吸入砷化氢的浓度密切相关。潜伏期愈短则临床表现也愈严重。轻度中毒有头晕、头痛、乏力、恶心、呕吐、腹痛、关节及腰部酸痛, 皮肤及巩膜轻度黄染。血红细胞及血红蛋白降低。尿呈酱油色, 隐血阳性,蛋白阳性,有红、白细胞。血尿素氮增高。可伴有肝脏损害。重度中毒发病急剧,有寒颤、高热、昏迷、谵妄、抽搐、紫绀、 巩膜及全身重度黄染。少尿或无尿。贫血加重,网织红细胞明显增多。尿呈深酱色,尿隐血强阳性。血尿素氮明显增高,出现急性肾功能衰竭, 并伴有肝脏损害。根据职业接触史, 现场调查, 典型病例诊断并不困难。 早期症状需与急性胃肠炎和急性感染相鉴别。发生溶血后,须与其他原因引起的溶血相鉴别。 在急性中毒尤其在早期,尿砷可正常,早期检查尿常规、尿胆原、黄疸指数,以及网织红细胞等,有助于诊断。 处理立即脱离接触,安静、给氧、保护肝、肾和支持、对症治疗。 为减轻溶血反应及其对机体的危害,应早期使用大剂量肾上腺糖皮质激素,并用碱性药物使尿液碱化,以减少血红蛋白在肾小管的沉积。 也可早期使用甘露醇以防止肾功能衰竭。重度中毒肾功能损害明显者需用透析疗法,应及早使用 根据溶血程度和速度,必要时可采用换血疗法。巯基类解毒药物并不能抑制溶血,反而会加重肾脏负担,所以,驱砷药物应在中毒后数日溶血反应基本停止后才使用。标准车间空气卫生标准:中国MAC 0.3 mg/m^3 美国OSHA PEL-TWA 0.2 mg/m^3中国职业病诊断国家标准:职业性急性砷化氢中毒诊断标准及处理原则GB11511-89 危规:GB2.3类23006。UN NO.2188。IMDG CODE 2019-1页,2类。副危险3类和6. 1类.
生物电化学人类在认识自然、改造自然的社会实践中创立了各门自然科学。随着认识的不断深入,以及深层次解决实际问题的需要,对许多基本问题必须作深入细致的研究。因此,自然科学的各门学科逐渐分化出许多分支学科。特别是进入20世纪以来,分化的速度愈来愈快。各门一级学科已分化出众多的二级、三级、甚至四级、五级学科等等。但是,由于实际要解决的许多问题非常复杂,所涉及的知识又是高度综合性的,如神经细胞跨膜释放神经传递物质的研究,就涉及生物学、化学、物理学、信息科学等多学科的知识,这样,便出现了高度分化的相对狭窄的学科难以解决高度复杂的实际问题的矛盾。从学科自身的发展来看,相对狭窄的研究领域,如不借鉴、利用相关学科的最新研究成果,则很难有大的突破,并可能最终致使学科发展无路可走。因此,无论是从学科自身的发展,还是从实际需要来看,都迫切需要多学科之间相互交叉、相互渗透。深层次交叉的结果是在多学科的界面上通过学科间的“碰撞”而生长出新型的“交叉学科”,或称“边缘学科”。生物电化学便是本世纪70年代由电生物学、生物物理学、生物化学以及电化学等多门学科交叉形成的一门独立的学科。电化学与生物电现象电化学是研究电子导体(或半导体材料)/离子导体(一般为电解质溶液)和离子导体/离子导体的界面结构、界面现象及其变化过程与机理的科学。生命现象最基本的过程是电荷运动。生物电的起因可归结为细胞膜内外两侧的电势差。人和动物的代谢作用以及各种生理现象,处处都有电流和电势的变化产生。人或其它动物的肌肉运动、大脑的信息传递以及细胞膜的结构与功能机制等无不涉及电化学过程的作用。显然,电化学是生命科学的最基础的相关学科。细胞的代谢作用可以借用电化学中的燃料电池的氧化和还原过程来模拟 生物电池是利用电化学方法模拟细胞功能 人造器官植入人体导致血栓与血液和植入器官之间的界面电势差这一基本电化学问题密切相关 心电图、脑电图等则是利用电化学方法模拟生物体内器官的生理规律及其变化过程的实际应用。由以上几个基本例子可见,交叉学科生物电化学的创立具有极其重要的基础理论意义和极强的应用背景。生物电化学由于近20年来生物电化学的发展非常迅速,所涉及的范围很广,要想系统全面地对生物电化学的研究领域进行归纳分类是一件很难的事情。下面仅就其研究领域进行简单介绍。1. 生物膜与生物界面模拟研究 (1) SAM膜模拟生物膜的电化学研究 由于生物电的起因可归结为细胞膜内外两侧的电势差,因此生物膜或模拟生物膜的电化学研究受到人们的广泛关注。LB(Langmuir Blodgett)膜和BLM(BilayerLipidMembrane,双层磷脂膜)是人们了解生物膜结构与功能机制的常用模型体系。但由于LB膜是亚稳态结构,稳定性不好,且LB膜中分子的取向是基于亲水疏水作用而限制了对LB膜外表面性质的选择控制,因此使其电化学研究受到限制。BLM的稳定性也不太好,难以承受高的电场强度。因此在80年代初,迅速发展起来的自组装单分子层(Self AssembledMonolayer,SAM)技术成为膜电化学研究的热点领域之一。 SAM是基于长链有机分子在基底材料表面的强烈化学结合和有机分子链间相互作用自发吸附在固/液或气/固界面,形成的热力学稳定、能量最低的有序膜[3]。组成单分子层的分子定向、有序紧密排列,且单层的结构和性质可以通过改变分子的头基、尾基以及链的类型和长度来控制调节。因此,SAM成为研究界面各种复杂现象,如膜的渗透性、摩擦、磨损、湿润、粘结、腐蚀、生物发酵、表面电荷分布以及电子转移理论的理想模型体系。有关SAM的电化学主要是用电化学方法研究SAM的绝对覆盖量、缺陷分布、厚度、离子通透性、表面电势分布、电子转移等。利用SAM可研究溶液中氧化还原物种与电极间的跨膜(跨SAM)电子转移,以及电活性SAM本身与电极间的电子转移。在膜电化学中,硫醇类化合物在金电极表面形成的SAM是最典型的和研究最多的体系。下面主要介绍与生物电化学有关的SAM研究。 长链硫醇在金电极上形成的SAM这种人工自组装体系对仿生研究有重要意义,因为它在分子尺寸、组织模型和膜的自然形成三方面很类似于天然的生物双层膜[4],同时它具有分子识别功能和选择性响应,且稳定性高。可用SAM表面分子的选择性来研究蛋白质的吸附作用 以烷基硫醇化合物在金上的SAM膜为基体研究氧化还原蛋白质中电子的长程和界面转移机制。如细胞色素c(Cytc)在ω 羧基烷基硫醇化合物修饰金电极(SAM/Au)上的电子转移动力学和电子传递机理的研究,得到Cytc的表面式电势为+215mV(vs.NHE),接近于其在生理膜上的电势值。SAM在酶的固定化及其生物电化学研究中也有很好的应用,Kinnear等利用SAM研究了大肠杆菌延胡索酸还原酶的电化学,Porter和Murray分别报道了卟啉衍生物SAM对氧还原过程的电催化作用,董献堆[3]研究了葡萄糖氧化酶在SAM上的固定化及其催化行为,并研究了DNA与SAM间的相互作用。 在硫醇SAM上沉积磷脂可较容易地构造双层磷脂膜。以SAM来模拟双层磷脂膜的准生物环境和酶的固定化使酶进行直接电子转移已在生物传感器的研究中得到应用。如以胱氨酸或半胱氨酸为SAM,通过缩合反应键合上媒介体(如TCNQ、二茂铁、醌类等)和酶可构成测葡萄糖、谷胱甘肽、胆红素、苹果酸等的多种生物传感器。随着研究的深入,膜模拟电化学将在生命过程的研究中发挥更大的作用。
[font=宋体][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签蛋白纯化原理:[/font][/font][font=宋体][font=宋体]谷胱甘肽[/font][font=Calibri]-S-[/font][font=宋体]转移酶[/font][font=Calibri](GST)[/font][font=宋体]是一个由[/font][font=Calibri]211[/font][font=宋体]个氨基酸组成的大小为[/font][font=Calibri]26kDa[/font][font=宋体]序列,它是另一种广泛使用的可提高靶蛋白的溶解度亲和标签。[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签与固定化的谷胱甘肽具有亲和力,常用于原核表达。它可以与一个蛋白的[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端或[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]端融合。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]谷胱甘肽亲和是一种有效的一步纯化[/font][font=Calibri]GST([/font][font=宋体]谷胱甘肽[/font][font=Calibri]S-[/font][font=宋体]转移酶[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]标签蛋白的方法。[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]可作为一种可溶性蛋白在大肠杆菌细胞质中大量表达,并具有完全的酶活性。此外,许多在大肠杆菌中表达时不溶的真核蛋白,在表达为[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签蛋白时被证明至少部分可溶。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]谷胱甘肽[/font][font=Calibri]S-[/font][font=宋体]转移酶([/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体])的应用:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]谷胱甘肽[/font][font=Calibri]S-[/font][font=宋体]转移酶([/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体])是具有多基因、多功能的[/font][font=Calibri]II[/font][font=宋体]相代谢酶家族成员,广泛存在于动物、植物、昆虫、真菌、酵母和各种细菌中。能够催化还原型谷胱甘肽与各种亲电化合物进行亲核加成反应,从而使其极性提高,易于从尿液中排出。因此,[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]家族蛋白是一类在外源化合物生物转化、保护机体免受过氧化作用损害和药物代谢过程中的一类极为重要的多功能蛋白质。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]在生物研究领域,来源于日本血吸虫的谷胱甘肽巯基转移酶([/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体])标签,是目前应用最为广泛的融合标签之一。融合标签技术是利用[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]重组技术将某种标签编码基因融合于目的基因的[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]′端或[/font][font=Calibri]5[/font][font=宋体]′端,再通过适宜的宿主来表达融合蛋白。表达的融合蛋白可以通过其融合标签与包被在固相基质上的特异性配基结合,从而纯化出融合蛋白。[/font][font=Calibri]1988[/font][font=宋体]年,[/font][font=Calibri]Smith[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]Johnson[/font][font=宋体]首次提出[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]融合蛋白的亲和纯化法,此后广泛使用。目前,国内外纯化[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]融合蛋白的主要方法是亲和纯化法。[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签蛋白亲和纯化,其配基通常是[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]的底物谷胱甘肽([/font][font=Calibri]GSH[/font][font=宋体]),通过酶与底物的特异性结合来实现[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]蛋白的分离纯化。其原理是:在固相基质上通过巯基结合一个谷胱甘肽,然后利用谷胱甘肽与谷胱甘肽巯基转移酶之间的特异性作用力,使得带[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签的融合蛋白与基质上的谷胱甘肽结合,达到分离纯化的目的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]自[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]融合蛋白亲和纯化法问世以来,[/font][font=Calibri]GST-pull down[/font][font=宋体]技术也随即成为一种研究蛋白质与蛋白质之间相互作用的热门手段。该技术的原理是:利用重组技术将诱饵蛋白与[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签融合表达,融合表达的蛋白经纯化后与待测蛋白共同孵育,并用[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]琼脂糖凝胶或[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]琼脂糖磁珠将其分离下来,再通过[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]鉴定待测蛋白与诱饵蛋白的相互作用。这种方法简单易行,操作简单。此外,[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签还有助于对目标蛋白的检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/gst-tag-protein-expression]GST[/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/gst-tag-protein-expression]标签蛋白纯化[/url]常见问题解答:[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]为什么使用[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签来表达和生产蛋白?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在蛋白[/font][font=Calibri]N[/font][font=宋体]端添加[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签有利于通过[/font][font=Calibri]GSH[/font][font=宋体]亲和树脂对其进行检测、分离和纯化。更重要的是,由于[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]是具有很好的溶解性的高表达的蛋白,将难以表达的蛋白与[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签相融合,有时可以显著提高重组蛋白的表达量和溶解性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]纯化后如何裂解[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]在某些应用(如蛋白的结晶)中需要去除[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签。为了裂解[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签,需要在标签和蛋白之间设计一个蛋白酶裂解位点。在 [/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签后面的[/font][font=Calibri]EK[/font][font=宋体]裂解位点[/font][font=Calibri](GST-EK[/font][font=宋体]位点[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]蛋白结构[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]可以使[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签和裂解位点完全去除,在[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签的特异裂解后不留下任何额外的氨基酸。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签纯化蛋白的优劣势?[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]优势:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]适用范围广,可在不同宿主中表达;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]增强外源蛋白可溶性;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]可用不同的蛋白酶进行去除;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]有助于保持蛋白的抗原性与生物活性,提高外源蛋白的稳定性;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5. [/font][font=宋体]特异性好,纯化方便且温和。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]劣势:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]分子量较大,可能会影响蛋白质的功能和下游实验;[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]仅能纯化可溶性蛋白,若蛋白不可溶,则很难用变性的方法纯化。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注:义翘神州[/font][font=Calibri]GST[/font][font=宋体]标签[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/gst-tag-protein-expression[/font][/font]
甲醛(formaldehyde) 在室温下是一种无色有刺激性气味的气体,容易发生聚合反应形成多聚甲醛。甲醛易溶于水、酒精和其它有机溶剂,市售甲醛一般为30/100~50/100的水溶液。37/100的水溶液称福尔马林。由于来源广泛和大量应用,甲醛普遍存在于空气、水、土壤、生物体内以及室内环境中。1、甲醛的来源 环境中的甲醛主要由有机物质的燃烧以及多种自然和人类的活动产生,也可由空气中挥发性有机物通过光化学反应产生。自然界自然界中存在的天然甲醛是多种自然过程的产物。例如在森林火灾时有甲醛产生,腐殖质被阳光照射也能产生甲醛。由于甲醛是一种代谢中间产物,多数生物体内也存在低浓度的甲醛。多种细菌、藻类、浮游生物和植物也能释放甲醛[1 ] 。2、人类活动 甲醛的人类来源包括燃料的燃烧、工业应用、以及装修材料和各种消费品。尽管汽油中不含甲醛,但汽油不完全燃烧时有甲醛产生。根据1997 年加拿大的调查,汽车尾气是甲醛的最大来源,当年由于汽车尾气释放的甲醛估计达11284 吨。其它各种燃烧过程如使用火炉、农作物的燃烧、火力发电、垃圾焚烧、吸烟等都能释放甲醛。在工业生产、应用、储存和运输含甲醛产品的各个环节上都有可能向环境中释放甲醛。加拿大报告1997 年101 家加工厂释放的甲醛总量为142319 吨[2 ] 。人工合成板材、乳胶漆、地毯、织物和树脂等家庭装饰材料和家具也能释放甲醛,并且致使室内甲醛浓度有超过室外甲醛浓度的趋势[3 ] 。由于现代人的一生约有80/100的时间是在室内度过的,所以近来室内甲醛与人体健康关系的研究已成为热点。室内甲醛浓度主要受甲醛释放源的强度、装载度(1m3 室内空间内能散发有机物的材料的表面积) 、装饰材料的使用年限、温度和通风效率等因素的影响。在诸多建筑装饰材料中,甲醛的最主要来源是人工合成板材[4 ] 。人工合成板材主要由脲醛树脂粘合挤压制成。Kelly 等[5 ] 的研究发现,人工合成板材的甲醛释放率一般小于013mgP(m3 h) 。新制成的板材甲醛释放率最高,随着使用年限的增加,甲醛释放率逐渐降低。板材表面的加工处理和良好的密封能降低甲醛的释放率。2 甲醛在实验动物与人体内的代谢由于高度的水溶性和与生物大分子的高度反应性,甲醛主要在直接接触部位被吸收。例如,吸入的甲醛主要在上呼吸道沉积并被吸收。经口进入体内的甲醛主要在口腔粘膜和胃肠道被吸收。在体内甲醛首先被氧化为甲酸,再进一步转化为CO2 和甲酸盐。甲醛代谢为甲酸的过程中最主要的酶类为甲醛脱氢酶,现已发现人类的肝细胞、红细胞以及大鼠的呼吸道上皮细胞、嗅觉上皮细胞和肾、脑中都有甲醛脱氢酶存在。甲醛在甲醛脱氢酶和其它酶的作用下通过利用辅酶Ⅰ(NAD) 和还原型谷胱甘肽形成中间产物S2甲酰谷胱甘肽,然后谷胱甘肽被释放形成甲酸。甲酸经代谢后,以CO2 形式呼出,或以甲酸盐的形式从尿中排出。从甲酸代谢为CO2 的过程是甲醛代谢的限速步骤。这一过程主要通过两个途径,其中主要途径为甲酸与四氢叶酸在胞浆中经甲酸四氢叶酸合成酶的作用被催化生成甲酰四氢叶酸,后者再被氧化为CO2 和水,另一途径是在过氧化物酶作用下的过氧化反应,这一反应依靠生成H2O2 的速度。另外甲酸也可被纳入体内的碳库供甘氨酸、组氨酸和丝氨酸的生物合成[3 ,6 ] 。 甲醛主要沉积在呼吸道并且代谢迅速,人暴露于213mgPm3 甲醛40min、F344 大鼠暴露于1713mgPm3 甲醛2h、猴暴露于甲醛712mgPm3 4 周(每天6h ,每周5 天) 均未发现血液中甲醛浓度显著升高[3 ] 。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=104120]甲醛[/url]
GB 13216-2008《甘油的试验方法》中规定甘油的还原性物质的检验方法如下:称取甘油试样25g,加蒸馏水25mL,加氨化硝酸银溶液1mL,加氨水溶液0.15mL,静置15min,应无颜色产生,在50℃水浴中加热,保持15min,应不产生沉淀或银镜,但可能出现会灰色和棕色。为什么会出现灰色和棕色?如果在水浴加热前就已出现灰色,意味着什么?
苯是芳香族碳氢化合物,主要用于有机溶剂、稀薄剂和化工原料,接触苯的工作主要有炼焦、石油裂化、油漆、染料、塑料、合成橡胶、农药、印刷以及合成洗涤剂等。苯主要以蒸气形式经呼吸道吸入体内,是一种神经细胞毒物,可损害骨髓,破坏造血功能,毒性很大。 (1)苯作业人员在膳食上应首先保证合理的平衡膳食,在此基础上增加优质蛋白质的摄入。动物实验结果表明,在吸收苯蒸气的情况下,饲喂低蛋白饲料的动物其生长发育远比高蛋白组差。苯的解毒过程主要在肝脏进行,一部分系直接与还原型谷胱甘肽结合而解毒,而膳食蛋白质中含硫氨基酸是体内谷胱甘肽的来源,因此富含优质蛋白质的膳食对预防苯中毒有一定作用。 (2)苯作业人员膳食中脂肪含量不宜过高,因为苯属于脂溶性有机溶剂,摄入脂肪过多可促进苯的吸收,增加苯在体内的蓄积,并使机体对苯的敏感性增加。 (3)碳水化合物可以提高机体对苯的耐受性,因为碳水化合物代谢过程中可以提供重要的解毒剂葡萄糖醛酸。在肝、肾等组织内苯与葡萄糖醛酸结合,易于随胆汁排出。 (4)人体负荷试验表明苯作业人员体内维生素c贮量较普通人低。动物实验亦观察到苯中毒时血和尿中维生素c含量均降低,对维生素c的需要量增加,故摄入量应予以提高,有人建议每日补充维生素c150毫克。为预防苯中毒所致的贫血,还应适当增加铁的供给量,并补充一定量的维生素b6、维生素b12及叶酸,上述维生素有促使白细胞回升的作用。