环糊精糖基转移酶

广州研创生物技术发展有限公司成功研制和推出了国内唯一工业化生产的国内专利手性液相色谱柱， 手性填料为SCDP 单键合β- 环糊精手性固定相和MCDP多键合 β- 环糊精手性固定相。 环糊精是通过Bacillus Macerans淀粉酶或环糊精糖基转移酶水解淀粉得到的环型低聚糖。通过控制环糊精转移酶的水解反应条件可得到不同尺寸的环糊精。 环糊精主要是α、β、γ三种类型，分别含6、7、8个吡喃葡萄糖单元。环糊精分子成锥筒型，构成一个洞穴，洞穴的孔径由构成环糊精的吡喃葡萄糖的数目决定。环糊精固定相有许多优点，它们可以分离更多的化合物，价格成本有竞争力，对流动相的耐受能力高，使其非常适用于制备色谱。 SCDP单键合β-环糊精手性固定相： 单硫脲共价键键合，全取代羟基，正、反相通用型，分离范围广泛，流动相适应能力强。水相达70%。 MCDP 单键合β-环糊精手性固定相： 多硫脲共价键键合，全取代羟基，正、反相通用型，寿命长，反相分离效果更佳。水相达95%。 www.chiral-se.com

抗衰老剂越来越普遍地使用于美容化妆品工业中，但是其中很重要的活性物质，例如亲油性的维生素系列（例维生素A），对空气、温度和光线非常敏感。环糊精的复合物包接抗衰老的活性成份后，效果比其它普通化妆品更加出色。环糊精领域的生物工程技术工艺已经相当成熟， 众所周知，环糊精有吸附和控制有机分子的能力，这种功能在很多工业领域引起了科技人员广泛的爱好。非凡是在香精、家庭日用品、制药和化妆品工业上，都可以使用环糊精的复合物来充担中介，以改善活性成份的性能。例如，制造商利用抗衰老活性成份来防止皮肤老化，例如维生素A、维生素E和维生素F等，甚至越来越多的在化妆品中添加从一种植物的叶子中提取出来的茶树油。对于以上的有效物质，我们从两个方面进行评价，认为：它们尽管非凡有效，但是它们对紫外线、热和大气的氧化都很敏感，轻易受到破坏。因此必须进行有效的保护才能使化妆品延长货架寿命。但是，这个保护不但不能破坏活性成份，而且不能产生副产品。制造商们根据它们的特性使用一些保护措施。例如，用淀粉、乳糖、甲基纤维素来吸附活性成份，虽然成本很便宜，但保护效果比较差。相类似的，将活性成份塞入脂质体是很昂贵的，脂质体是种细小的介质，对油性皮肤很敏感，而且效果也不好。在环糊精微囊中装入抗衰老物质，微囊就在皮肤表层溶解以释放活性成份。这种微囊包合处理工艺已经很成熟，环糊精将单分子包合起来，此工艺大家都知道叫做“复合”。复合体（或单分子包合）抗衰老物质在皮肤表层通过皮肤湿气释放出来，此机理叫“控释”，复合与拆复合是一个动态平衡的关系。 Villiers在1891年的时候最先发现了环糊精，他从土豆淀粉中用芽胞杆菌通过培养基分离出一种晶状的物质（后来被称为环糊精）。环糊精是以几个葡萄糖分子环接而成的圆柱状分子结构，它的命名基于环中葡萄糖基的数量。如：α-环糊精有6个葡萄糖分子，β-环糊精有7个葡萄糖分子，γ-环糊精有8个葡萄糖分子。细菌是使用一种天然的酶（环糊精葡萄糖转移酶简称CGTase=Cyclodextrin-Glucosyl-Transferase）从淀粉分离出环糊精。CGTase从两端剪断呈螺旋状的淀粉后把它连接起来组成一个环状，由于剪出来的淀粉长度不同，这样就产生了三种不同的环状糊精。环糊精生产商处理和改变细菌，使转移酶（CGTase）更有选择性和更准确地生产出单一的环糊精品种。

[align=left]郑毅宪[/align][align=center][font='宋体'][size=13px]a[/size][/font][font='宋体'][size=13px]-[/size][/font][font='宋体'][size=13px]环糊精在[/size][/font][font='宋体'][size=13px]食品中应用[/size][/font][/align][font='calibri'][size=16px]1[/size][/font][font='calibri'][size=16px]. [/size][/font][font='calibri'][size=16px]摘要[/size][/font] [font='calibri']本文讨论了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精在各种情况下的毒性，介绍了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精基于主-客体化学的，独特的理化性质，归纳了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精在食品与药品领域之中的各种应用，包括：作为增溶剂、可溶性纤维素、益生元、乳化剂、增稠剂、蛋白药物载体、药物缓释剂。[/font][font='calibri'][size=16px]2[/size][/font][font='calibri'][size=16px]. [/size][/font][font='calibri'][size=16px]引言[/size][/font][font='calibri']环糊精是在由6到1[/font][font='calibri']2[/font][font='calibri']个葡萄糖单元所组成寡糖的统称，这种天然产物是在研究芽孢杆菌时发现的，芽孢杆菌通过环糊精葡萄糖基转移酶催化直链淀粉脱水形成环糊精。它们均具有圆锥形的结构，并且羟基均在两端。由于环糊精的结构特征，它具有独特的中心疏水，两端亲水的性质，因此能过作为“主体”去容纳许多“客体”分子，能够结合有机分子、无机离子、甚至是气体分子等物质，因此被广泛应用于保健品与药品加工中，能够作为主体容纳有机药物分子。[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精是由六个葡萄糖单元组成的环糊精，由于它具有优良的理化性质，并且毒性远小于它的同类物质[/font][font='calibri']β-环糊精[/font][font='calibri']，因此近期受到的关注越来越多。[/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107251440033900_1849_1608728_3.jpeg[/img][/align][align=center][font='宋体'][size=13px] [/size][/font][font='宋体'][size=13px]图 [/size][/font][font='宋体'][size=13px]1[/size][/font][font='宋体'][size=13px].[/size][/font][font='宋体'][size=13px] [/size][/font][font='宋体'][size=13px]a[/size][/font][font='宋体'][size=13px]-[/size][/font][font='宋体'][size=13px]环糊精[/size][/font][/align][font='calibri'][size=16px]3[/size][/font][font='calibri'][size=16px]. [/size][/font][font='calibri'][size=16px]正文[/size][/font][font='calibri']3[/font][font='calibri'].1[/font][font='calibri']毒性与安全性[/font][font='calibri']环糊精的毒性已经受到充分的毒理学调研无论是对于雄性与雌性哺乳动物，在进行毒性研究时[/font][font='calibri']([/font][font='calibri']每只大鼠按照7[/font][font='calibri']50 [/font][font='calibri']mg[/font][font='calibri']/[/font][font='calibri']kg静脉注射环糊精溶液[/font][font='calibri'])[/font][font='calibri']，发现个组大鼠均出现了迟缓、立毛与死亡现象，这是由于溶酶体无法分解环糊精造成的肾衰竭引起的死亡，说明环糊精还是具有一定的急性毒性，若一次注射极大量环糊精，还是会引起哺乳动物的死亡。但是研究也表明了对于眼球、皮肤与皮下等区域均无刺激性，也不会引起致敏现象。[/font][font='calibri']短期(28天和90天[/font][font='calibri'])[/font][font='calibri']毒性研究的结果表明，α-环糊精对大鼠或狗口服给药时几乎没有影响。在给予非常高的饮食浓度 (20%) 后，两种物种都观察到盲肠增大和相关变化。这种效应很可能是由于大肠中存在高浓度的渗透活性物质。没有可用的静脉给药研究来比较该化合物与β-和γ-环糊精的全身毒性。[/font][font='calibri']在小鼠、大鼠和兔中进行的研究中，α-环糊精在饮食中的浓度高达20%，没有表明任何致畸作用。类似地，基因毒性测定结果为阴性。尚未对α-环糊精进行毒性、致癌性或生殖毒性的长期研究，但委员会得出结论认为，鉴于该化合物在胃肠道中的已知归宿，此类研究不需要进行评估。[/font][font='calibri']在体外，α-环糊精与β-环糊精一样，隔离红细胞膜的成分，导致溶血。然而这种作用的阈值浓度高于用β-环糊精观察到的浓度。[/font][font='calibri']虽然尚未直接研究α-环糊精与亲脂性维生素可能损害其生物利用度的潜在相互作用，但通过与β-环糊精的研究结果类比，认为这种作用不太可能。脂溶性维生素和β-环糊精之间的复合物已被证明比未复合的形式具有更高的生物利用度。[/font][font='calibri']根据美国 1994-98 年的个人饮食记录和各种食品中建议的最大使用量，消费者预测的α-环糊精平均摄入量为1.7 g/day[/font][font='calibri']([/font][font='calibri']每天 32 毫克/千克体重[/font][font='calibri'])[/font][font='calibri']对整个人口和 1.6 g/day(每天 87 毫克/千克体重[/font][font='calibri'])[/font][font='calibri']2-6岁儿童。α-环糊精总摄入量的主要贡献者可能是豆浆和糖果。对于摄入量处于第90个百分位的消费者，预计整个人群的α-环糊精摄入量为3 g/day[/font][font='calibri'] ([/font][font='calibri']每天 67 毫克/千克体重[/font][font='calibri'])[/font][font='calibri']，而对于 2.6 g/day[/font][font='calibri'] ([/font][font='calibri']每天140 毫克/千克体重[/font][font='calibri'])[/font][font='calibri'] 2-6岁的儿童。[/font][font='calibri']尽管膳食摄入量可能很高，但没有[/font][font='calibri']人[/font][font='calibri']向委员会提交人类对α-环糊精耐受性的研究。尽管如此，这种化合物在动物中的毒性相对较低以及它比β-环糊精的毒性小，[/font][font='calibri']而[/font][font='calibri']β-环糊精[/font][font='calibri']已经[/font][font='calibri']可用于人类耐受性研究。此外，它在胃肠道中以类似于β-环糊精的方式发酵这一事实支持了这样的结论，即在实验室动物中，它在被人类吸收之前会被发酵成无害的代谢物。[/font][font='calibri']这些毒性研究数据表明，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的毒性极低，[/font][font='calibri']不在胃肠道中消化，而是由肠道菌群发酵。在无菌大鼠中，α-环糊精几乎完全在粪便中排泄，而γ-环糊精很容易被胃肠道的管腔和/或上皮酶消化成葡萄糖。α-环糊精在小肠中以低水平[/font][font='calibri']([/font][font='calibri']约2%[/font][font='calibri'])[/font][font='calibri']被完整吸收。被吸收的α-环糊精随后在尿液中迅速排出。大部分吸收发生在盲肠中的微生物群代谢后。尽管没有关于人体体内代谢的研究，α-环糊精和β-环糊精与γ-环糊精不同，在体外不能被人唾液和胰淀粉酶水解。[/font][font='calibri']α-环糊精通过腹膜内或静脉内途径给药时的急性毒性表明它可引起渗透性肾病，这可能是因为它不会被溶酶体淀粉酶降解。在高剂量下，这会导致肾功能衰竭。[/font][font='calibri']3[/font][font='calibri'].2[/font][font='calibri']食品中应用[/font][font='symbol']b[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精是目前工业上大量生产且市面上最受关注的环糊精，而[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精是最小的环糊精，相较于[/font][font='symbol']b[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精具有更小的腔体结构，因此更容易与小分子物质形成包合物。并且因为其分子量较小，极性相较于[/font][font='symbol']b[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精更大，因此在水相中具有更好的溶解性，能够应用于需要环糊精具有更高溶解度的场合。因为具有以上这些优势，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精作为一种新兴的食品添加剂在2[/font][font='calibri']004[/font][font='calibri']年获得了GRAS的认可，并且FDA在2[/font][font='calibri']016[/font][font='calibri']年也出台了关于[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的新规定，在使用[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精时不再需要预先获得审批。而我国的GB[/font][font='calibri'] 2760-2014[/font][font='calibri']中规定：[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精可以在各类食品中按需要使用。[/font][font='calibri']3[/font][font='calibri'].2.1[/font][font='calibri']体重调节剂[/font] [font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精作为一种食品添加剂时能够起到改善肠道消化系统环境与减轻体重的作用。2[/font][font='calibri']006[/font][font='calibri']年Artiss等人的研究表明：长期摄入[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的大鼠们身上出现了体重减轻、血清中甘油三酯与瘦素水平降低、对胰岛素的敏感性提高，并且粪便中的脂肪含量变高等现象。由于[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的环状结构能够防止其被人类的唾液淀粉酶与胰淀粉酶水解，在体内[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精不会被消化与吸收，因此不会引起额外的热量摄入；而作为一种具有空腔的两亲性分子，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精能够与肠道中的脂质结合，阻止脂质被肠道所吸收，因此[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精作为一种食品添加剂能够起到有效改善体重的作用。另一方面，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精能够被肠道中的益生菌降解，产生醋酸、乙酸、酪酸等有机酸，这些有机酸能够起到调控肠道菌群的作用，阻止有害微生物的成长，起到预防肠道炎症、癌症等疾病的作用。与排出脂肪酸的方法相似，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精还能够起到改善糖尿病人身体状况的作用，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精虽然属于糖类，但是并不会被人体吸收造成血糖升高，但是[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精能够有效地通过氢键与主体-客体作用结合消化系统中的单糖分子，从而有效地抑制血糖的升高。[/font][font='calibri']3[/font][font='calibri'].2.2[/font][font='calibri']添加剂增溶剂[/font] [font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精环糊精除了因为本身具有上述优良的特性之外，还因其能够与各类有机小分子形成包合物而应用在许多保健食品中。[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精能够通过形成包合物来稳定一些不稳定的小分子添加剂，例如[/font][font='symbol']b[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']胡萝卜素、叶绿素、叶黄素等天然色素，还有玫瑰油、茴香脑等食用香精。在食品中，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精作为主体，上述有机小分子作为客体进入[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的空腔，能够形成稳定的包合物，增加有机分子的动力学稳定性，减缓其变质的速度。[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精与叶黄素酯形成的包合物即为[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精作为食品添加剂的一种应用。有研究报道[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精与叶黄素酯作用时，叶黄素酯的稳定性明显增强，溶解度也提高为了叶黄素酯原料的六倍以上。值得一提的是，相比于混合环糊精与[/font][font='symbol']b[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的对叶黄素酯的稳定作用于增溶作用均更好，证明了对于叶黄素酯而言，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的性能优于混合环糊精与[/font][font='symbol']b[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精。[/font][font='calibri']而另一项研究表明，共有2[/font][font='calibri']3[/font][font='calibri']中植物精油能够通过[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精进行增溶，被增溶的精油能够加入到果汁等饮料类食品中，这样的方法能够为饮料提升香味[/font][font='calibri']([/font][font='calibri']实验对象为苹果汁[/font][font='calibri'])[/font][font='calibri']，因此可以说[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精极大地拓宽了植物精油在食品工业中的应用。还有的研究者研究了包合物作为水果保鲜剂在水果保鲜领域的应用：研究者利用[/font][font='calibri']1-MCP-α-环糊精[/font][font='calibri']处理了杨梅，并对[/font][font='calibri']杨梅花青素,维生素C,总糖,总酸,水分含量[/font][font='calibri']等多项生理指标进行了监测，研究证明了[/font][font='calibri']1-MCP-α-环糊精[/font][font='calibri']能够有效地抑制呼吸强度，延缓果实衰老，提高果实的保存时间，并且提高果实的品质。[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的优越性能还能让本来难溶于水的有机物成为能够使用的防腐剂，对羟基苯甲酸酯就是一类难溶于水，但是具有抑菌活性的有机化合物，上述研究增溶效应的团队除了报道了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精对2[/font][font='calibri']3[/font][font='calibri']种植物精油具有增溶作用之外，还研究了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精对四种对羟基苯甲酸酯衍生物的增溶作用，并储存在聚乙二醇与玻璃容器中，考察容器对包合物的影响；此研究的结论是被研究化合物在水中的溶解度得到了极大的增加，并且在连续七天的时间内化合物浓度并无明显变化，证明了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精长期稳定有效的增溶作用。这样的研究使得原来不溶于水的对羟基苯甲酸酯的衍生物成为苯甲酸钠可能的替代品。[/font][font='calibri']3[/font][font='calibri'].2.3[/font][font='calibri']乳化剂与增稠剂[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精还是一种性能优越的乳化剂，常常应用在需要将植物油进行分散的场合，例如在奶油、果冻、糕点制品中。[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精在作为乳化剂，提高植物油分散性的同时，还能够作为一种无热量的产品增稠剂，使得低热量的糕点成为现实。用于海产品、肉制品、奶制品与大豆制品加工时，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精能够有效的结合有气味的小分子气体，起到除去腥臭味、保持与优化食品的风味。[/font][font='calibri']3[/font][font='calibri'].3[/font][font='calibri']药物中应用[/font] [font='calibri']除了在食品工业中的应用，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精更广泛的、更受关注的应用是其在药物制作中的应用，例如，一直需要通过注射给药的胰岛素即可通过与[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精形成包合物而防止胰岛素被降解、消化掉，因此能够将胰岛素制作为一种口服药，使得糖尿病患者不需要定期到医院进行胰岛素的注射，减轻了糖尿病患者的负担。这一个例子能够讲述了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精作为药物载体分子的一个应用，它能够将必须要通过注射才能生效的小分子蛋白质变为口服药，这是药物制作上一个重要的里程碑。另一方面，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精-药物的包合物能够实现药物的缓释，含有包合物的药物在进入体内后并不会马上全部被人体吸收，而是在肠道中缓慢的释放出药物分子，前列地尔就是一种应用了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的药物，使用这种技术可以减少需要少量多次服用的药物每次的服用次数，也能够避免药物分子在体内浓度过高，尤其是激素类药物，引起内分泌失调等影响。[/font][font='calibri']3[/font][font='calibri'].4[/font][font='calibri']检测手段[/font] [font='symbol']检测食品添加剂中的a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精手段有很多，最简便最常用的方法便是高效液相色谱法，由于环糊精在紫外-可见分光光度计上均有吸收，并且吸收峰会互相干扰，因此需要想要准确检出不同环糊精的含量需要通过高效液相色谱仪先进行分离，在进行搜索时并未发现[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的国标检测方法，考虑到[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精仅仅是一种简单的植物纤维，无毒无害且不会被消化，没有对其设立检测标准的必要，但是考虑到需要检测其在不同产品中含量是否符合产品成分表，一种有效准确的检测方法是必要的。查阅文献了解到利用色[/font][font='calibri']谱柱Spherrigel C6H5(5 μm 300×3.9 mm)[/font][font='calibri']能够简便地对混合环糊精进行分离,色谱条件：利用[/font][font='calibri']v(甲醇)[/font][font='cambria math']∶[/font][font='calibri']v(水)(5[/font][font='cambria math']∶[/font][font='calibri']95)溶液[/font][font='calibri']作为流动相[/font][font='calibri']进行洗脱,流速为1.0 mL/min,检测器为示差折光检测器,柱温40[/font][font='cambria math']℃[/font][font='calibri']。α-环糊精[/font][font='calibri']信号[/font][font='calibri']的线性范围为0.1 mg/mL~10 mg/mL,加样回收率[/font][font='calibri'] [/font][font='calibri'](n=6) 为98.46%,RSD (n=6) 0.12%。[/font][font='calibri']作为一种液相色谱方法，此[/font][font='calibri']方法简便、灵敏、准确,可用于α-环糊精的含量测定和质量控制。[/font][font='calibri']3[/font][font='calibri'].5[/font][font='calibri']合成方法简介[/font] [font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的合成则是通过酶法进行的，利用淀粉作为原料，使用上文中提到的，在芽孢杆菌中发现的环糊精糖基转移酶，并且在体系中添加[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']淀粉酶即可得到[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精。具体步骤是先通过[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']淀粉酶液化淀粉，将其分解为较为短链的直链淀粉，然后加入环糊精糖基转化酶进行酶促转化，这样得到的是混合环糊精，还需要进行耗时的色谱分离，在工业生产上这样的方法没有优势，因此发展出了许多通过突变环糊精糖基转移酶位点，提高[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精产率的发酵生产与酶化学方法。[/font][font='calibri'][size=16px]4[/size][/font][font='calibri'][size=16px].[/size][/font][font='calibri'][size=16px]总结[/size][/font] [font='calibri']本文首先讨论了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的安全性，通过归纳得到的实验数据了解到它是一种非常安全、无毒的分子，在安全问题上要优于[/font][font='calibri']β-[/font][font='calibri']环糊精；然后通过举例介绍了它在食品与药品添加剂领域的大量应用，[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精能够作为增溶剂、增色剂、缓释剂添加到食品药品中，通过与有机分子特异性结合，使得食物的品质得到提升。之后介绍了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的检测方法，通过高效液相色谱，利用苯环修饰的固定相即可有效地分离出环糊精，然后可以利用常用于检测糖类的[/font][font='calibri']示差折光检测器[/font][font='calibri']对其进行检测。最后简单介绍了[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精的生物合成方法，因为现有方法太过昂贵，不利于[/font][font='symbol']a[/font][font='calibri']-[/font][font='calibri']环糊精在食品工业中的大量应用，合成方法仍需要进行改进。[/font][font='calibri'][size=16px]5[/size][/font][font='calibri'][size=16px].[/size][/font][font='calibri'][size=16px]参考文献[/size][/font] [font='times new roman'][size=12px][1]Samperio, Boyer, Eigel, et al. Enhancement of Plant Essential Oils' Aqueous Solubility and Stability Using Alpha and Beta Cyclodextrin[J]. J AGR FOOD CHEM, 2010.[/size][/font] [font='times new roman'][size=12px][2]王瑾, 陈均志, 孙根标,等. 1-MCP-α-环糊精和羧甲基β-环糊精对杨梅保鲜的研究[J]. 陕西科技大学学报, 2010, 28(002):30-34.[/size][/font] [font='times new roman'][size=12px][3]毛勇, 邓媛, 李皎. 高效液相色谱法测定混合环糊精中α-环糊精的含量[J]. 中国食品添加剂, 2010(03):237-239.[/size][/font]

我有一个甲基转移酶，催化腺苷甲硫氨酸和水杨酸形成水杨酸甲酯，现在想测这个酶的活性，不知道用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法可不可行？我看到有人用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]外标法对水杨酸甲酯进行定量分析的，然后我想的是，先用酶催化底物反应一段时间后，然后再测其中水杨酸甲酯的含量，用单位时间内产生水杨酸甲酯的量来表示酶单位，这样的实验计划有问题么？ 愿各位大家发表一下意见，感激不尽！！！

我们评价环糊精等食品添加剂对人体是否有害，要有严密、科学的依据，环糊精在食品中的使用是建立在一整套严谨、科学的理论基础和实验数据上的。一般来说，评价食品添加剂是否有毒，常见的指标有ADI、LD50和GRAS。环糊精是近年来在国外迅猛发展的新型食品添加剂，是目前许多国家普遍使用的。实际上我国食品厂家也在使用之中。随着人们健康意识的增强和对纯天然食品的崇尚，近年来社会对环糊精作为食品添加剂在食品中应用的安全性越来越受到关注。由于环糊精作为食品添加剂在我国还是新鲜事物，正确地认识环糊精的安全性很有必要。首先，我们应该承认：现代食品工业发展到今天是离不开添加剂的，“没有食品添加剂就没有现代食品工业”，这是千真万确的真理。凡是按照国家规定的品种和含量进行添加，都是允许的，也是安全的。要认识环糊精的安全性，我们首先要明白毒性和安全性是食品添加剂的命脉，各种食品添加剂能否使用、适用范围和最大使用量，各国都有严格的规定，要受到法规和法律的制约，以确保绝对安全使用。这些规定都是建立在一整套科学严密的毒性评价基础上的。目前在国际上公认的食品添加剂安全性指标有ADI、LD50和GRAS。ADI（Acceptable Daily Intakes，ADI）值是每日人体每千克体重允许摄入的毫克数，联合国FAO/WHO所属的食品添加剂专家联合委员会（JECFA）每年依据各国所用食品添加剂的毒性报告提出，由联合国食品添加剂法规委员会（CCFA）每年年会讨论，并对某种食品添加剂的ADI做出评价、修改或撤销，各国对此都已接受。我们通过下列表格的数据可以看到：源于淀粉通过酶转换得到的天然环糊精作为食品添加剂使用是安全可靠的，希望我们的工作有助于国家尽快完善环糊精使用标准的制定和审批。

磺基醚β环糊精的简写是什么？还有甲基β环糊精，我写成了M-β-CD不知道对不对

[color=#444444]有葡萄糖 麦芽糖 棉籽糖 环己酮 环糊精 半乳糖物质组成的混合溶液，相用色谱柱分析。请问采用什么色谱柱，分离条件、检测器使用什么？请求指点。[/color]

各位大哥：谁有β-环糊精的C谱和H谱，溶剂用DMSO。谢谢！！

各位请教一个棘手的问题：本人用毛细管环糊精电泳分离中药中的黄酮类物质，用的硼砂，β环糊精体系，ph是9..4左右。分离7个marker,包括槲皮素，芦丁，芹菜素，黄芩苷等。如果直接用缓冲液，对照品可以分开，但是中药样品里的杂峰和待测物分不好，所以参照文献，加入了乙腈作为改性剂，效果很好，峰很尖，并且峰的保留时间延长后能够很好的分离，但是问题出现了：1. 开始做的时候还好，慢慢的峰的重现性就很差，甚至连顺序都有差异。然后峰出现拖尾，变宽。我的乙腈的加入比例是1:4，即缓冲为4份，乙腈为1份。是否太大？2. 出现峰变宽的情况应该如何处理？用高浓度的NAOH冲柱子？我有尝试过，但是发现效果不是很理想。3. 进样的时候，每针之间用什么溶剂冲比较好？坛子里有人说用NAOH，但也有说NAOH不好的 ，到底如何解决？4..如果想改善样品中各个峰的分离度，即优化条件，主要靠调节什么？？（比如想改善峰与峰之间的分离度，在反相液相色谱里面就是加大水相）希望高手能够回答，谢谢

各位板油，有谁知道在哪能买到磺化-B-环糊精呀？

我做环糊精，99%纯的，可是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]给出一大堆峰，重复了好多回，C18column，求救！

各位兄弟姐妹，请问羟丙基-β-环糊精在乙酸乙酯的溶解度是多少？我查了很多文献都找不到答案，打算自己去测定了！但是具体该怎么做？希望各位能指点一下小弟！

各位大神，我想问一下倍他环糊精残留溶剂检测用的内标，二氯乙烯是哪一种呀，CAS号是啥呀

需要买一根R,S-羟丙基-β环糊精为填充剂的色谱柱，以前没用过，大侠给推荐一下哪家的好

各位大虾，问个弱弱的问题，磺化环糊精的最佳溶剂是什么呢？

有人做过倍他环糊精残留溶剂没，怎么感觉环己烷不怎么溶于20%的二甲基亚砜，刚加进去的时候感觉像是油滴加进去似的，剧烈摇晃后感觉有点像乳化，在此请教给位老师是怎么回事。。。

请问，有人做过倍他环糊精中的环己烷吗？你们是怎么做的呀？我按照标准做的，对照品环己烷不溶，求解是怎么回事，谢谢

最近在做乳品的扩项，左旋肉碱测定用了新发布的GB 29989.2013，里面用到乙酰肉碱转移酶。原理中是这样讲的“左旋肉碱与乙酰辅酶A 在乙酰肉碱转移酶的催化下反应生成乙酰肉碱和游离的辅酶A。”操作部分只说“乙酰肉碱转移酶(CAT)溶液：吸取100 μL 乙酰肉碱转移酶悬浮液，经1500 r/min 离心10 min，弃去上层清液，沉淀用2 mL 水溶解。临用时配制。”文中没有提到乙酰肉碱转移酶的浓度信息。因为现在要订购试剂，不知道买多少合适，酶又都很贵。是说这个酶不溶于水吗？作为催化剂的话，是不是要一点点就够了？

请问哪里有卖磺酸基-β-环糊精的厂家，山东智源已经没货了，哪里还有存货或者还在生产中请联系我。15735178992，急求，谢谢大家。

请问各位:谁有β-环糊精纯品的红外吸收光谱,在1643 cm－1处的吸收应该是什么基团的吸收？请回复。谢谢！

随着科学发展，在医药、农药等领域越来越讲究有效体的作用，因此提高有效体的含量，降低无效体，减少环境污染，就成为研究的方向。在同一种有机化合物中，往往存在结构异构体和光学异构体，尤其是光学异构体，一般会表现出外消旋现象。目前，大量的商品药物化合物均含有一种或多种手性成分，光学异构体的存在极大的影响了药物的效能。为了能够分析光学异构体，因此人类开始了手性色谱柱的研究。一、什么是手性色谱柱手性色谱柱（Chiral HPLC Columns）是由具有光学活性的单体，固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相（Chiral Stationary Phases）。通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异，从而达到光学异构体拆分的目的。要实现手性识别，手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用。手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果。这些相互作用通过影响包埋复合物的形成，特殊位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。由于这种作用力较微弱，因此需要仔细调节、优化流动相和温度以达到最佳分离效果。在手性拆分中，温度的影响是很显著的。低温增加手性识别能力，但可能引起色谱峰变宽而导致分离变差。因此确定手性分析方法过程中要考虑柱温的影响，确定最优柱温。二、手性色谱柱的分类及应用　　迄今为止，尚没有一种类似十八烷基键合硅胶（ODS）柱的普遍适用的手性柱。不同化学性质的异构体不得不采用不同类型的手性柱，而市售的手性色谱柱通常价格昂贵，因此如何根据化合物的分子结构选择适用的手性色谱柱是非常重要的。根据手性固定相和溶剂的相互作用机制，Irving Wainer首次提出了手性色谱柱的分类体系：第1类：通过氢键、π-π作用、偶级-偶级作用形成复合物。第2类：既有类型1中的相互作用，又存在包埋复合物。此类手性色谱柱中典型的是由纤维素及其衍生物制成的手性色谱柱。第3类：基于溶剂进入手性空穴形成包埋复合物。这类手性色谱柱中最典型的是由Armstrong教授开发的环糊精型手性柱[2]，另外冠醚型手性柱和螺旋型聚合物，如聚（苯基甲基甲基丙烯酸酯）形成的手性色谱柱也属于此类。第4类：基于形成非对映体的金属络合物，是由Davankov开发的手性分离技术，也称为手性配位交换色谱（CLEC）。第5类：蛋白质型手性色谱柱。手性分离是基于疏水相互作用和极性相互作用实现。 但是，随着由于市场上可选择的手性色谱柱越来越多，此分类系统有时很难将一些手性柱归纳进去。因此参考Irving Wainer的分类方法，根据固定相的化学结构，将手性色谱柱分为以下几种：刷（Brush）型或称为Prikle型纤维素（Cellulose）型环糊精（Cyclodextrin）型大环抗生素（Macrocyclic antibiotics）型蛋白质（Protein）型配位交换（|Ligand exchange）型冠醚（Crown ethers）型 1、 刷型：刷型手性色谱柱的出现和发展源于Bill Prikle及其同事的卓越工作。六十年代，Bill Prikle将手性核磁共振中的成果运用到手性HPLC固定相研究中，通过不断实践，发明了应用范围较广、柱效很好的手性色谱柱。刷型手性色谱柱是根据三点识别模式设计的，属于Irving Wainer分类中的第一种类型。刷型手性固定相分为π电子接受型和π电子提供型两类。最常见的π电子接受型固定相是由（R）-N-3，5-二硝基苯甲酰苯基甘氨酸键合到γ-氨丙基硅胶上的制成。此类刷型手性色谱柱可以分离许多可提供π电子的芳香族化合物，或用氯化萘酚等对化合物进行衍生化后进行手性分离。π电子供给型固定相常见的是共价结合到硅胶上的萘基氨基酸衍生物，这种固定相要求被分析物具有π电子接受基团，例如二硝基苯甲酰基。醇类、羧酸类、胺类等，可以用氯化二硝基苯甲酰、异腈酸盐、或二硝基苯胺等进行衍生化后，用π电子供给型固定相达到手性分离。刷型固定相的优势在于其易于合成。合成方法在Bill Prikle的著作中有详细的说明。另外，刷型固定相具有高的容量因子，因此具有高的选择因子。它的不利之处在于它仅对芳香族化合物有效，有时不得不进行衍生化反应。但值得一提的是，这种衍生化反应是非手性衍生反应，所以不存在手性衍生的问题。刷型手性色谱使用的流动相基本是极性弱的有机溶剂，这对于制备色谱来讲未必是缺点。近来，刷型固定相出现了π电子供给和接受基因的混合固定相。如：WHELK-O和BLAMO，及α-BURKE-Ⅱ固定相。α-BURKE-Ⅱ相十分适用于β-阻断剂的手性分离。典型的流动相为二氯甲烷-乙醇-甲醇混合物，比例为85：10：5。加入10mM醋酸铵可以调整保留时间。SS BLAMO Ⅱ，同时具有π电子供体区和受体区，形成手性裂缝，因此对于某些分子具有很高选择性。2、纤维素型：纤维素型手性色谱柱的分离作用包括相互吸引的作用及形成包埋复合物。它们属于Wainer分类中的第2种类型。市售的手性色谱柱为微晶三醋酸基、三安息香酸基、三苯基氨基酸盐纤维素固定相。很多化合物可通过此类型的色谱柱得到分离。这种类型的手性色谱柱种类也很齐全。流动相使用低极性溶剂，典型的流动相为乙醇-己烷混合物。但特别要注意由于氯可以使纤维素从硅胶上脱落，因此要确保流动相中无含氯溶剂。这种类型的手性色谱柱主要的制造商之一是日本的Daicel公司，他们生产的纤维素酯和氨基甲酸纤维素柱可以分离多种生物碱和药物。特别值得一提的是OD柱。在某手性化合物异构体的分离中，分离度超过了25，这意味着载样量可以很高，对于制备十分有利。纤维素固定相的每个单元都为螺旋型，而且这种螺旋结构还存在极性作用、π-π作用及形成包埋复合物等手性分离因素。淀粉代替纤维素制成的此类手性柱显示了和纤维素柱不同的选择性，但是稳定性较差。因为淀粉是水溶性的，因此流动相中必须绝对无水才能保证柱子寿命。目前此类型的柱子能分离80%左右可能面临到的所有手性化合物。此类柱子通常用于正相系统，用正己烷-乙醇，正己烷-异丙醇混合溶剂为流动相。OD柱也可用于反相的情况，但流动相必须含有高浓度的高氯酸盐缓冲液，以防止固定相溶解。即使这样，使用较长时间以后色谱柱也难免要受到损害，但是在某些情况下使用反相系统分离效果要优于使用正相系统。3、环糊精型：环糊精是通过Bacillus Macerans 淀粉酶或环糊精糖基转移酶水解淀粉得到的环型低聚糖。通过控制环糊精转移酶的水解反应条件可得到不同尺寸的环糊精。市售的环糊精主要是α、β、γ三种类型，分别含6、7、8个吡喃葡萄糖单元。环糊精分子成锥筒型，构成一个洞穴，洞穴的孔径由构成环糊精的吡喃葡萄糖的数目决定。环糊精类型及洞穴的孔径等见下表：环糊精糖元数目洞穴孔径可进入洞穴的分子类型，手性中心数目α64.5-6.05-6元环的芳香族化合物 ，30β76.0-8.0联苯或萘 ， 35γ88.0-10.0取代芘和类固醇， 402，3位仲羟基分布在环糊精洞口，6位伯羟基在环糊精分子的外部，这意味着洞穴内部是相对疏水的区域。用环糊精手性固定相产生手性识别要求被拆分物的疏水部分能嵌入环糊精洞穴中，形成可逆的、稳定性不同的包合物，环糊精洞口的羟基和被拆分物的极性基团相互作用。

求助：用什么样的柱子分离定量α、β、γ环糊精，急！

想要验证环糊精吸附异味的功效，可是不知道怎么设计实验。实验室现有的设备有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]和液相，还有化学分析的方法。不知道在这个版发合适不?各位前辈指点一下吧。先谢谢各位了！！

手性毛细管色谱柱里的β-环糊精含量是不是含量越高，对手性样品的分离效果越好？如果是，那现在那些手性柱的β环糊精含量比较高的？

各位老师，我现在要分离s1.2丙二醇和r1.2丙二醇，试过好多β环糊精柱子和一根γ环糊精柱子，现在问题是分开的条件峰型就特别丑，峰特别拖尾，峰型好看的话就完全分不开，各位老师给点帮助或者推荐能分开的柱子或者改善峰型

请教大家一下：各位大哥大姐有自己在实验室做过环糊精的毛细管柱子的么？大家用的是什么工艺或者技术？我都快急死了，做了很久都没有做出来，就快不能毕业了啊～