人体重组型降钙素

依降钙素是以提高降钙素的稳定性为目的而设计的合成多肽（分子量 3363.77）。由包含L-2-氨基辛二酸在内的31个氨基酸构成。 作为此类肽制剂的一种品质评价方法，可以进行氨基酸组成鉴别。 此次，使用L-8900型 日立全自动氨基酸分析仪，以日本药典（＊）规定的分析方法（使用3μm填充剂的色谱柱）得到了依降钙素的氨基酸组成。本次试验所用依降钙素为市售制剂。

人降钙素原(PCT)检测试剂盒人降钙素原(PCT)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人降钙素原(PCT)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人降钙素原(PCT)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人降钙素原(PCT)抗原、生物素化的人降钙素原(PCT)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人降钙素原(PCT)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人降钙素(CT)ELISA试剂盒中文名称 人降钙素(CT)ELISA试剂盒英文名称 Human calcitonin (CT) ELISA kit 规格 96T/48T 生 产 商 进口原装/分装 产品介绍 实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人降钙素(CT)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人降钙素(CT)抗原、生物素化的人降钙素(CT)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人降钙素(CT)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人降钙素(CT)检测试剂盒人降钙素(CT)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人降钙素(CT)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人降钙素(CT)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人降钙素(CT)抗原、生物素化的人降钙素(CT)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人降钙素(CT)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒中文名称 人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒英文名称 People procalcitonin (PCT) ELISA kit 规格 96T/48T 生 产 商 进口原装/分装 产品介绍 实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人降钙素原(PCT)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人降钙素原(PCT)抗原、生物素化的人降钙素原(PCT)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人降钙素原(PCT)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

依降钙素别名益钙宁，由包含L-2-氨基辛二酸在内的31个氨基酸构成，是以提高降钙素的稳定性为目的而设计的合成多肽（分子量3363.77），主要应用于高钙血症、骨质疏松等骨科疾病的治疗。 氨基酸组成鉴别是此类肽制剂的一种品质评价方法。在此我们使用L-8900型日立全自动氨基酸分析仪，以日本药典规定的分析方法（使用3 μm填充剂的色谱柱）得到了依降钙素的氨基酸组成。本次试验所用依降钙素为市售制剂。

人降钙素基因相关肽(CGRP)检测试剂盒人降钙素基因相关肽(CGRP)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人降钙素基因相关肽(CGRP)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人降钙素基因相关肽(CGRP)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人降钙素基因相关肽(CGRP)抗原、生物素化的人降钙素基因相关肽(CGRP)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人降钙素基因相关肽(CGRP)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒中文名称 人降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒英文名称 Human calcitonin gene-related peptide (CGRP) ELISA kit 规格 96T/48T 生 产 商 进口原装/分装 产品介绍 实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人降钙素基因相关肽(CGRP)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人降钙素基因相关肽(CGRP)抗原、生物素化的人降钙素基因相关肽(CGRP)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人降钙素基因相关肽(CGRP)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

随着超重和肥胖问题日益成为公共卫生的重大挑战，北京市卫健委、市体育局和市总工会于7月11日联合发起了"北京市民健康体重行动" ，旨在鼓励市民采取合理饮食和适量运动的健康生活方式。去年试点项目中75.8%的参与者体重有所下降，平均每人减重1.40公斤，但最新数据显示本市18至79岁居民的超重率高达36.3%，肥胖率为22.1%，凸显了持续开展此类行动的紧迫性和重要性。人体能量代谢研究是人类生物学研究的最重要议题之一，研究焦点为人类对不同生态环境条件包括生存限制条件与胁迫的响应（适应）、能量的获取与分配（用于维持性消耗和生产性消耗）、及其对人类福祉健康（包括人类生存与繁衍）的意义。 北京易科泰生态技术有限公司与美国Sable等国际知名能量代谢测量技术公司合作，为国内运动生理学、运动医学、运动经济学，围产营养学、营养与代谢研究、军事医学研究提供全面能量代谢研究技术方案和能量代谢实验室方案，这些技术不仅帮助研究者和教练更好地理解运动员的能量消耗和代谢需求，还为运动员的训练和恢复提供了科学依据。

重组Ⅲ型胶原蛋白是通过生物工程技术将人体胶原蛋白的mRNA逆转录成cDNA并嫁接至载体上，再利用转录酶表达成原始蛋白，经过高密度发酵、分离、复性、纯化、酶切工艺成产的一种高分子生物蛋白。Ⅲ型胶原蛋白主要存在于婴儿皮肤或血管内膜、肠道，与皮肤损伤修复和修复质量密切相关，因此该类医药用品对改善皮肤质量、促进皮肤创伤修复具有重要作用。重组Ⅲ型胶原蛋白的有效含量直接决定了基于其研发的医药用品的效果。本方案给出了利用凯氏定氮法测定重组Ⅲ型胶原蛋白敷料贴、凝胶敷料、液体敷料的蛋白质含量的方法。

采用纳谱分析BioCore WCX色谱柱对重组白介素11进行检测，主峰峰形良好且具有良好的分离度，测定结果不被样品中其他成分干扰。该方法简便准确,专属性强,可用于重组白介素11的含量测定。

本文参考2015年版《中国药典》注射用重组人白介素-11品种的质量标准，采用岛津生物液相系统Nexera Bio以体积排阻色谱法对注射用重组人白介素-11样品进行了纯度分析。采用岛津Shim-Sen SEC-H 300体积排阻色谱柱，重组人白介素-11主峰与相邻杂质峰分离效果良好且能有效检出样品中所含的杂质。

综上所述，Q-Exactive 拥有超高的灵敏度，在不到500ng 上样量的情况下对人重组干扰素α-2b 的氨基酸序列匹配度达到了98.2%；Q-Exactive 拥有足够高的动态范围，在对人重组干扰素α-2b 的标准品检测中，其动态范围达到了6个数量级，并且线性相关系数达到了0.99 以上。简而言之，Q-Exactive 的超高性能可以很好的应用于大分子药物代谢的研究中去。

LA8080核心技术特点：1、 高度自动化：仅需30秒培训即可独立操作仪器测样，测试结束可自动运行清洗程序2、 标配第三代TDE3衍生技术：使用寿命是反应盘管的25倍以上，衍生效果好，灵敏度提高400%3、 30分钟内可实现18-23种氨基酸分离度大于1.2，节省50%的分析时间4、 标配固定光栅分光技术检测器，标配六元梯度泵，最大耐压与最大流速比可达345、 具有超高速分析程序6、 提供落地式和台式两种款式供选择，同时提供标准性能和高性能供选择7、 具有含硫氨基酸30min标准分析程序和6分钟高速分析程序8、 提供等度洗脱和梯度洗脱等多种洗脱模式9、 标配OpenLAB CDS 2 控制软件，全面符合CFDA和FDA的合规要求10、自动进样器可选配制冷单元，节省食品、饲料等蛋白水解系统用户的购买成本11、检测器光栅分光系统优化，能量相比上代产品提高约30%

钙是人体内最普遍的元素之一，人体中钙的含量占总体重的1.5--2%，其中骨骼和牙齿约占99%，体液和软组织占1%。对于人体代谢、细胞功能、神经系统运作、 蛋白激素合成等起到重要作用。本试验采用AKF-V6卡尔费休水分测定仪，通过直接进样测定钙片中的水分含量。

目前此重组类似物较多的应用在细胞培养中，临床主要作用与IGF-1一样，用于胰岛素抵抗的糖尿病的治疗，促进骨骼生长，还参与创伤愈合过程。局部使用能促进受损坐骨神经的再生，还可以提高人体肌肉生成。以下是赛智科技利用LC-10Tvp高效液相色谱仪对胰岛素样生长因子-1及胰岛素样生长因子重组类似物进行的HPLC检测方案。

重组人生长激素 (recombinant human growth hormone，rhGH) 主要用于治疗儿童及成人身材矮小，发育迟缓等病症。rhGHFc免疫融合蛋白是将rhGH基因与特异位点突变后的人抗体IgG4 Fc段用柔性linker连接，利用CHO-k1细胞进行表达。本应用中作者采用了尺寸排阻色谱柱TSKgel G2000SWXL建立了测定重组人生长激素Fc免疫融合蛋白含量。实验结果表明，利用SEC-HPLC进行蛋白含量检测比Lowry法更加灵敏高效，可缩短检测时间。该方法系统适用性、专属性、精密性良好，准确性较高，有利于为纯化工艺提供数据支持。

离子色谱电导法测定重组人胰岛素中微量乙醇胺杂质的含量，方法灵敏度高，准确度好，可满足该药物对于乙醇胺杂质限度极低的检测要求，可用于控制该药物中乙醇胺杂质的含量。

采用纳谱分析BioCore SEC-150色谱柱对重组白介素11进行检测，主峰峰形良好且具有良好的分离度，测定结果不被样品中其他成分干扰。该方法简便准确,专属性强,可用于重组白介素11的含量测定。

采用纳谱分析ChromCore C8色谱柱对重组人生长激素-肽图进行分离和检测，主峰具有良好的峰形和分离度，主峰与杂质峰具有良好的分离度，该方法操作简单，灵敏度高，重复性好，符合药典要求，可用于重组人生长激素-肽图的分离和测定，为该药物的质量保证提供检测依据。

采用纳谱分析ChromCore 1000 C18-T色谱柱对重组人生长激素进行检测，主峰具有良好的峰形和分离度，该方法操作简单，灵敏度高，重复性好，符合欧洲药典要求，可用于重组人生长激素的测定，为该药物的质量保证提供检测依据。

重组人源胶原蛋白是基于人体皮肤Ⅲ型胶原蛋白的原始基因序列，选择水溶性强、生物活性高的部分进行拼接重组得到的重组蛋白序列的产物，在医用材料、化妆品、食品保健领域具有很大的应用潜力。重组人源胶原蛋白通常与凝胶混合制成高粘度制剂，或通过浓缩的方式制称固体浓缩蛋白，需通过测定其蛋白含量以检验制剂的有效添加量，是其质量检验的重要环节。本方案基于《GB5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》，给出了利用凯氏定氮法测定其蛋白质含量的方法。

肽图是用于对蛋白质药物一级结构进行鉴定以及检测蛋白质产品批间一致性的常规检测方法。一般进行肽图谱鉴别时往往需要时间较长，如重组人胰岛素肽图测定在中国药典、美国药典、欧洲药典中均采用反相HPLC法，检测时间长达60~86min不等；本公司的重组单克隆抗体肽图的检 测时间也长达52分钟。目前的方法中使用的常规液相色谱仪和液相分析柱，分析时间长，且有机试剂耗用量大，快速液相色谱仪和快速液相分析柱的应运而生，使得分析时间和试剂耗量大大降低。但针对目前基层实验室常规液相色谱仪的普及，与快速液相分析柱的不兼容性，使得快速分析检测很难实现。安捷伦公司最新推出的Poroshell 120系列表面多孔层色谱柱，由于其具有低反压，高柱效的特点，从而真正实现在常规液相色谱仪上进行快速分析的可操作性。本文使用Poroshell 120色谱柱，并采用常规液相色谱仪，对重组单克隆抗体肽图检测方法加以改进，分析时间和试剂耗量均降低了1/2以上，一次分析仅需26分钟；色谱峰的理论塔板数及分离度也优于常规检测方法。

盛瀚实验室长期致力于离子色谱应用领域研究和开发，基于离子色谱技术开发出一种针对人体血清中钠钾钙镁离子的检测方法，该方法准确度高、稳定可靠简单易操作。以外标曲线法测定血清中钠钾钙镁离子的含量，供试品连续进样三针验证方法的稳定性。

二、实验原理：重组子的建立：采用双酶切 质粒 载体pBR322和pUC18,酶切后产生了互补的粘性末端,在T4 DNA 连接酶的作用下,两个质粒片段连接.感受态细胞(Competent cells)：受体细胞经过一些特殊方法(如：CaCl,RuCl等化学试剂法)的处理后, 细胞膜 的通透性发生变化,成为能容许多有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞(competent cell) .转化(transformation)：是将异源DNA分子引入一 细胞株 系,使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段,是基因工程等研究领域的基本实验技术.电转化法：使用低盐缓冲液或水洗制备的感受态细胞,通过高压脉冲的作用将载体DNA分子导入受体细胞.克隆的筛选：主要用不同 抗生素 基因筛选.常用的 抗生素 有：氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素、四环素、链霉素等；重组质粒克隆的鉴定：鉴定带有重组质粒克隆的方法常用的有α -互补、小规模制备质粒DNA进行酶切分析、插入失活、PCR以及杂交筛选的方法.最常用的方法是小规模制备质粒DNA进行酶切分析,对于带有LacZ基因的载体还可以结合α -互补现象来筛选.

尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)是人体重要的II相代谢酶,具有代谢药物和内源性物质的重要作用，其广泛分布于肝、肾、呼吸道、肺、胃、小肠、结肠等多种组织器官中。然而，由于肝脏是发生II相代谢的主要器官，大部分的UGT酶在肝脏中表达。

采用纳谱分析ChromCore 300C8色谱柱对重组人生长激素-肽图进行检测，操作简单，灵敏度高，重复性好，可用于重组人生长激素-肽图的分离和测定，为该药物的质量保证提供检测依据。

L-8900全自动氨基酸分析仪是进行氨基酸分离、衍生和检测的全自动化专用分析仪器，广泛用于医药、食品、饲料、农业、育种、医学研究和地质考察等领域。L-8900全自动氨基酸分析仪是根据柱后衍生原理设计而成，分为水解蛋白分析系统和生理体液分析系统，符合国际标准和国际仲裁标准。L-8900全自动氨基酸分析仪是日立公司推出的新型产品，是集日立公司四十年氨基酸分析仪生产技术和专业知识的巅峰之作。为适应氨基酸分析的需要，L-8900采用专为氨基酸分析研制的微量输液泵、检测器、反应柱、分离柱等部件，这些都极大地提高了氨基酸分析的灵敏度、检出限和重复性。

左炔诺孕酮（Levonorgestrel）是一种常用的长效雌激素类避孕药本方法介绍了用赛默飞世尔科技TSQ Quantum Access分析人体血浆中左炔诺孕酮的检测方法。

质粒具有稳定可靠和操作简便的优点。如果要克隆较小的DNA 片段( ＜10kb) 且结构简单，质粒要比其它任何载体都要好。在质粒载体上进行克隆，从原理上说是很简单的，先用限制性内切酶切割质粒DNA 和目的DNA 片段，然后体外使两者相连接，再用所得到重组质粒转化细菌，即可完成。但在实际工作中，如何区分插入有外源DNA 的重组质粒和无插入而自身环化的载体分子是较为困难的。通过调整连接反应中外源DNA 片段和载体DNA 的浓度比例，可以将载体的自身环化限制在一定程度之下，也可以进一步采取一些特殊的克隆策略，如载体去磷酸化等来最大限度的降低载体的自身环化，还可以利用遗传学手段如α 互补现象等来鉴别重组子和非重组子。