莫西沙星去羧基类似物

p 　 strong 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " 一. 生物类似物获批情况 /span /strong /p p 　　从FDA数据库可以查到，截止2018.8.24美国共有12款生物类似物获批。其中部分小分子(如ELI LILLY的甘精胰岛素BASAGLAR)也已获批，但为NDA，因此不作为类似物统计。 /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 446" title=" q.jpg" style=" width: 488px height: 332px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/58c99f7e-92e6-4c9c-8b19-eeacaf8385c2.jpg" / /p p style=" text-align: center " img width=" 598" height=" 236" title=" w.jpg" style=" width: 490px height: 172px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/5391e126-7471-42dd-b508-c9f272d09b28.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　从EMA数据库可以查到，截止2018.8.24欧盟共有45款生物类似物获批： img width=" 599" height=" 388" title=" e.png" style=" width: 498px height: 298px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/d67d7398-bb31-486f-85c7-6056bafefaed.jpg" / /p p style=" text-align: center " & nbsp img width=" 601" height=" 421" title=" r.png" style=" width: 528px height: 358px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/e4f16b4f-f1ba-43ab-a6b2-17e0da5ef487.jpg" / /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 405" title=" t.png" style=" width: 515px height: 298px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/34f42b07-aa1c-4f54-a1bd-89c6c7022f91.jpg" / /p p 　　从获批情况分析，较早批准的产品都已经出现较多类似物，这一点在EMA中体现的尤为明显，如药王adalimumab、infliximab及filgrastim等均已有若干类似物获批。而从生产上来看，Sandoz毫无疑问是生物类似物的最大赢家，其在EMA有9款类似物获批。 /p p 　　对比美国以及欧盟生物类似物批准的情况，可以很明显的发现欧盟批准的生物类似物数量远多于美国，究其原因主要包括以下几点： /p p 　　EMA在2005年便建立生物类似物的申报途径，而FDA则是在2009年才在BPCI法案中提出生物类似物的申报途径，EMA比FDA更早建立生物类似物申报途径 /p p 　　 EMA将甘精胰岛素这类小分子制品也归属为生物制品，EMA批准的生物类似物中多款均为小分子制品。但在FDA这类小分子与化学药一样采用NDA的申报途径，而不是生物制品的BLA申报途径。且在FDA甘精胰岛素审评由CDER负责，而生物制品的审评由CBER负责，这也导致FDA的生物类似物获批清单中未将甘精胰岛素这类小分子纳入 /p p 　　 对于生物制品分析相似性研究，FDA的规定非常严格(如研究的批次数、相似性的标准等)，这直接导致生物相似性研究周期很长，如Amgen申请的贝伐珠单抗MASVI分析相似性研究持续6了年，前后共使用20余批次原研Avastin。这也使得FDA的生物类似物获批更为滞后 /p p 　　从数据中可以看出FDA批准的生物类似物集中于近几年，2015年1款，2016年3款，2017年5款，2018截至目前为3款。有这些基础之后，相信未来FDA批准生物类似物的速度会越来越快。 /p p 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　二. 分析相似性研究 /strong /span /p p 　　分析相似性研究(analytical similarity)在欧盟被称为可比性研究(Comparability exercise)。其是指用于证明用于证明生物类似物与原研高度相似，但允许临床非活性组分存在微小差异的分析研究。一般应使用多批次自研产品与原研在包括结构、理化以及功能属性方面的对比，并使用数据统计方法对各质量属性对比结果进行统计及对比。分析相似性是生物类似物的基础，在生物类似物开发中很重要。 /p p 　 strong 　相关指南 /strong /p p 　　针对生物类似物分析相似性研究，FDA以及欧盟均发布了不少指南。以CMC领域为例，部分重点指南如下： /p p 　　FDA发布的指南有： /p p 　　Quality Considerations in Demonstrating Biosimilarity to a Reference Protein Product /p p 　　Scientific Considerations in Demonstrating Biosimilarity to a Reference Product /p p 　　Reference Product Exclusivity for Biological Products Filed Under Section 351(a) of the PHS Act(Draft guidance) /p p 　　Biosimilars: Questions and Answers Regarding Implementation of the Biologics Price Competition and Innovation Act of 2009 Guidance for Industry(Draft guidance) /p p 　　Considerations in Demonstrating Interchangeability With a Reference Product Guidance for Industry(Draft guidance) /p p 　& nbsp & nbsp Statistical Approaches to Evaluate Analytical Similarity Guidance for Industry(核心指南，目前已撤销) /p p 　　EMA发布的指南有： /p p 　　Similar biological medicinal products /p p 　　Similar biological medicinal products containing biotechnology-derived proteins as active substance: non-clinical and clinical issues /p p 　　Similar biological medicinal products containing biotechnology-derived proteins as active substance: quality issues /p p 　& nbsp & nbsp Guideline on the comparability of Medicinal Products Containing Biotechnology-Derived Proteins as Active Substance: Quality Issues /p p 　　Biosimilar medicinal products containing recombinant granulocyte-colony stimulating factor (Annex to guideline on similar biological medicinal products containing biotechnology-derived proteins as active substance: non-clinical and clinical issues) /p p 　　Non-clinical and clinical development of similar biological medicinal products containing low-molecular-weight heparins /p p 　　Non-clinical and clinical development of similar biological medicinal products containing recombinant human insulin and insulin analogues /p p 　　Similar biological medicinal products containing interferon beta /p p 　　Similar biological medicinal products containing monoclonal antibodies: non-clinical and clinical issues /p p 　　Similar biological medicinal products containing recombinant erythropoietins /p p 　　Similar biological medicinal products containing recombinant follicle-stimulating hormone /p p 　　Similar medicinal products containing somatropin (Annex to guideline on similar biological medicinal products containing biotechnology-derived proteins as active substance: non-clinical and clinical issues) /p p 　　FDA发布的指南都较为宽泛。而EMA针对生物类似物发布的指南既有较为宽泛的指导性文件，也有针对某款产品特异性的指南，同时EMA的部分指南同时适用于变更及类似物可比性研究，这一点也与FDA完全不同。 /p p 　 strong 　分析相似性研究内容 /strong /p p 　　FDA于2017年发布的草案指南对分析相似性进行了详细的规定，虽然该指南目前已被撤销，但其部分思想仍可作为指导。结合目前FDA批准的类似物制品CMC审评报告，可以明显看出该指南的思想融合了已经批准的产品的开发思路，而目前在FDA获批的类似物也都是按照该指南的思路开展分析相似性研究。对该指南，并结合已经获批的类似物审评报告进行总结，分析相似性核心内容包括以下内容： /p p 　　对产品的质量属性进行分层(Tier)，包括Tier 1,2,3。其中tier 3目测对比是风险较低或风险高但无法量化的质量属性 tier 2质量范围是风险程度中等的质量属性 tier 1等同检测则是风险高的质量属性 /p p 　　Tier 3一般为结构、工艺相关杂质(HCD、HCP等)、强降解趋势对比、理化属性、与机理无太大联系的活性项目 Tier 2质量属性一般包括产品相关杂质、糖型(与ADCC、PK等有关)、与机理有关的活性检测、蛋白浓度等 Tier 3则一般为临床机理对应的生物学活性 /p p 　　不同层级设立不同的相似性标准，tier 3主观对比相似即可 tier 2要求自研产品的范围应该在参比的mean± 3SD tier 1则要求更为严格，要求自研与参比的均值差的90%置信区间应在原研的[-1.5SD，1.5SD]范围内。值得注意的是于2017年获批的MASVI分析相似性研究中并按照上述要求对tier 2及3设立标准，而只是对实际的属性范围进行了对比 /p p 　　 对多批次原研及自研进行分析研究，指南推荐至少10批次自研于10批次参比进行比较。2018年该指南撤销时特意提出批次数太多是该指南不合理的地方，但就目前批准的生物类似物来看，tier 1质量属性(与制品机理直接相关的生物学活性)基本都采用了20多批次参比进行对比，后续批次要求降低，有利于加快生物类似物获批上市 /p p 　 strong 　 在研究过程中应该考虑储存时间等对质量属性的影响 /strong /p p 　　从目前已经在FDA获批的类似物来看，没有类似物能在分析相似性方面做到于参比完全类似，而都是通过total of the evidence整体判断相似性。如糖型这一关键属性，几乎没有哪一款类似物做到与参比类似，因此出现不类似的质量属性很正常。由于生物制品本身较为复杂，而其生产工艺也同样复杂，生物类似物开发商对参比的了解难以深入，因此开发出的类似物质量属性难以做到完全与参比相似。即便知道某些质量属性不相似，也不一定能通过前期的工艺优化让该属性于参比相似。同时，这种优化也未必必要，指南中指出出现不相似的情况，给出合理的论述即可。 /p p 　　从已在FDA获批的类似物审评报告中可以知道，当出现不类似的情况时，可以用于论述的思路如： /p p 　　当杂质含量较低时，其风险相对较小，如依那西普类似物进行tier划分时，就规定当属性的量低于2%时，可以降低一个tier /p p 　　该属性虽然有差异，但临床数据显示自研于参比的pK等无明显差异 /p p 　　增加更多批次进行研究，参比批次变多时，其质量属性范围也更可能变宽 /p p 　　考虑储存时间对该属性的影响，加上时间因素重新计算数据 /p p 　　分离相应的组分，进行相应的活性等研究，证明与主成分无明显差异，等。 /p p 　　以下为部分已被FDA批准的类似物相关资料。 /p p 　　 strong ABP501(biosimilar to Humira，Amgen)分析相似性层级制定及对比结果 /strong /p p style=" text-align: center " strong img width=" 600" height=" 392" title=" y.jpg" style=" width: 471px height: 269px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/41be2c4e-9b64-40db-ae1d-a25fe9882a95.jpg" / /strong /p p style=" text-align: center " strong img width=" 599" height=" 395" title=" u.jpg" style=" width: 469px height: 298px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/32fcdb2b-ab55-4c73-921b-74396608c771.jpg" / img width=" 600" height=" 395" title=" i.jpg" style=" width: 470px height: 306px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/4f464c07-86af-4545-8c7f-e7112d5a2b90.jpg" / /strong /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 396" title=" o.jpg" style=" width: 477px height: 285px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/cca82c99-86b6-4366-b832-6e3e99e27023.jpg" / /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 397" title=" p.jpg" style=" width: 481px height: 308px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/a64ec501-90ff-4e20-b06f-60c642d50a0e.jpg" / /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 238" title=" a.jpg" style=" width: 484px height: 205px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/6bdffcaa-a01d-4be4-9f24-f88ca55ac83d.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong br/ /strong /p p strong 　　GP2015(biosimilar to Enbrel，Sandoz)各层级相似性标准 /strong /p p style=" text-align: center " strong img width=" 599" height=" 403" title=" s.jpg" style=" width: 503px height: 332px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/98dcf996-3539-46ef-a27e-255bf4ab3691.jpg" / /strong /p p br/ /p p strong 　　GP2015(biosimilar to Enbrel，Sandoz)分析相似性层级制定 /strong /p p style=" text-align: center " strong br/ /strong /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 315" title=" d.jpg" style=" width: 512px height: 267px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/86ee5d19-be4f-4d61-a45d-31ac4bcef104.jpg" / /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 333" title=" f.jpg" style=" width: 523px height: 305px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/1460d5df-eb35-4c4f-a59f-069b5e934158.jpg" / /p p style=" text-align: center " img width=" 601" height=" 202" title=" g.jpg" style=" width: 524px height: 180px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/2c7e5d6a-fa00-41bb-bf40-a0280e86ea4a.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong br/ /strong /p p 　　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 三、已获批的类似物案例分析 /strong /span /p p 　　目前已经获FDA批准的类似物中，大部分可以获得FDA的审评报告，部分产品的审批报告在Drug@FDA数据库中未发布，但可在FDA网站搜索获得。下面将Amjevita(Adalimumab-atto)分析相似性研究为例，了解这些产品如何开展分析相似性研究，FDA提出了哪些关键缺陷，而申请人又是如何答复这些缺陷的，详细报告可见审评报告。 /p p 　　 strong 1.Amjevita(Adalimumab-atto) /strong /p p 　　Amjevita是FDA药王Adalimumab在FDA获批的第一款类似物(目前已有两款，而EMA则有更多款已经获批)，相信FDA在不久的将来也会批准更多Adalimumab类似物，谁让这款药这么火呢。该类似物生产商为Amgen，其分析相似性研究中研究的项目，质量属性分层级、各层级的标准、各研究项目的批次数以及研究结果(是否相似)均已在上一期已经给出，这里不再赘述，直接看看该类似物在分析相似性方面有哪些主要的缺陷吧。 /p p 　　 strong a.糖基化不同(审评报告201-207页) /strong /p p 　　数据显示自研与参比的糖基化类型相同，但各糖型的比例稍有不同。其中非岩澡糖、高甘露糖、半乳糖、唾液酸均与参比不同。半乳糖及唾液酸如下图所示： /p p style=" text-align: center " br/ /p p style=" text-align: center " img width=" 598" height=" 283" title=" h.jpg" style=" width: 490px height: 230px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/3751fe61-6979-47f7-b717-e29c389a4de8.jpg" / /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 254" title=" j.jpg" style=" width: 497px height: 193px float: none " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/477ad59e-12af-4bb2-85ea-e999b17eb3f1.jpg" / /p p 　　而据报道非岩藻糖(afucosylated forms)可通过影响产品与FcγRIIIa的结合而最终影响ADCC活性，高甘露糖可影响PK及ADCC活性，唾液酸可影响PK，半乳糖可影响CDC活性。生产商将糖基化作为tier2属性，针对糖基化的差异，生产商进行了如下论述，并获得了FDA的认可： /p p 　　· 自研产品与参比相比，PK、FcγRIIIa的对比结果无明显差异，说明糖基化的不同不会产生显著影响 /p p 　　· 在中间产品/中控中控制岩藻糖基化，使得后续生产批次岩藻糖基化水平不超过分析相似性的水平 /p p 　　· 前期研发的批次糖基化相对较高，但后续工艺优化后，糖基化与参比更为接近了 /p p 　　 strong b.FTIR鉴别(审评报告209-211页) /strong /p p 　　生产商Amgen对6批自研及参比进行了FTIR鉴别检测，并通过相应的计算按照tier 2层级对结果进行分析，结果显示两者类似。而FDA认为该质量属性只需要作为tier3属性，提供图谱对比即可。 /p p 　　同时对CD以及DSC检测，Amgen同样按照tier2标准进行分析，但FDA同样认为只需要按照tier3属性进行分析即可。 /p p style=" text-align: center " img width=" 598" height=" 405" title=" k.jpg" style=" width: 471px height: 310px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/dfbdefae-c8e0-4f43-9f96-b48910fa5621.jpg" / /p p 　　 strong c.SE-HPLC纯度不同(审评报告211-213页) /strong /p p 　　Amgen同时提供了自研放行结果与参比的对比(在IR回复中提供的)以及自研在24个月(与参比检测时具有相同的‘寿命’)与参比的SE-HPLC对比结果，结果显示虽然放行时自研的聚体比参比低，但在24个月时自研与参比的聚体类似，如下图： /p p style=" text-align: center " img width=" 598" height=" 340" title=" l.jpg" style=" width: 483px height: 272px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/2dc93b5b-f59f-4edd-9d32-3cdbf2572c1c.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　 span style=" font-size: 14px " 　 strong 自研24个月时的对比结果 /strong /span /p p style=" text-align: center " strong img width=" 599" height=" 336" title=" z.jpg" style=" width: 444px height: 271px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/f245f195-dab3-4c6e-8d35-7b76527acd81.jpg" / /strong /p p style=" text-align: center " strong 　　 span style=" font-size: 14px " 自研放行时的对比结果 /span /strong /p p 　　同时自研的SE-HPLC中低分子物质比参比更低(如下图)，但考虑到低分子物质总量才0.2%，这个小峰预计低于0.1%，无法定量，因此其影响可忽略不计。 /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 371" title=" x.jpg" style=" width: 440px height: 276px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/448f4126-6269-49d1-a738-4b93e4e43ee8.jpg" / /p p 　　 strong d.nrCE-SDS纯度不同(审评报告217页) /strong /p p 　　80%的自研结果在参比的相似性范围内，但有两个数据不在范围内。给出的论述包括：1.不在范围内的批次是早期研发批次 2.nrCE-SDS纯度在98%-99%，已经很高了，检测到的不一致差距很小，可以忽略 3.结合生物学活性无明显差异，认为自研的nrCE-SDS与参比类似。 /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 252" title=" c.jpg" style=" width: 469px height: 198px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/d804bc2b-dff6-42ac-9a86-ae5861013681.jpg" / /p p 　　 strong e.CEX-HPLC不同(审评报告218-221页) /strong /p p 　　考虑储存时间影响时，检测数据显示自研与参比的主峰及碱性峰基本不在参比的相似性范围(如下图)，FDA要求生产商提供合理解释。 /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 372" title=" v.jpg" style=" width: 470px height: 272px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/8b9d2e4b-bb9d-411e-b512-8b574769b706.jpg" / /p p 　　Amgen回复包括： /p p 　　· 提供未调整储存时间的结果(如上图)，显示酸性峰在范围内，但主峰与碱性峰不在范围内 /p p 　　· 收集各个峰进行活性检测，酸性、主峰及碱性峰均不改变活性 /p p 　　· 酸性峰的电荷改变位点不位于影像PK及活性的区域 /p p 　　· 自研与参比的PK及FcRn结合是一致的 /p p 　　· 自研与参比的结合能力、活性、功能检测结果无明显差异 /p p 　　· 使用羧肽酶处理可证明建兴区的不同是由于产品独特的C端赖氨酸引起，其不会对产品的性能产生影响 /p p 　 strong 　f.高温及强降解(审评报告225-226页) /strong /p p 　　由于Amgen的产品与参比的处方不同(具体处方可见审评报告)，因此与预期的一样两者在高温及强降解下降解率不同。而Amgen还将原液配置成与参比一致的处方体系中，与参比进行了对比，结果显示不一致是由于处方体系造成的，而非分子本身造成的。 /p p 　 strong 　g.50° C高温强降解(审评报告226页) /strong /p p 　　降解后的SE-HPLC对比显示在分子大小纯度方面自研比参比更加稳定(如下图)，而rCE-SDS则显示两者趋势相似 电荷异构体纯度自研与参比类似。 /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 181" title=" b.jpg" style=" width: 519px height: 139px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/66117285-d8ef-4644-ba07-0aec7188510a.jpg" / /p p 　　 strong h.生物学活性(审评报告239页起) /strong /p p 　　Amgen开展了大量活性方面的对比研究，如下图。检测结果基本都相似 /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 620" title=" n.jpg" style=" width: 538px height: 573px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/2cd6da55-99b6-4cbf-bfa3-25217b4c451b.jpg" / /p p 　　 strong 2.Zarxio(Filgrastim-Sndz) /strong /p p 　　其分析相似性研究按照3个tier对质量属性分层，各个tier相似性标准同上一期中列出的标准。研究的项目包括：结构、理化、杂质、活性。其杂质分析可以关注一下，包括如脱氨基、N端截短变体、乙酰化、琥珀酰亚胺等，具体如下图： /p p style=" text-align: center " img width=" 601" height=" 578" title=" m.jpg" style=" width: 546px height: 530px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/13b4d351-4b70-49e8-a709-8b9ba0ead58c.jpg" / /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 356" title=" ,,,,.jpg" style=" width: 554px height: 329px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/0c370ddb-4876-46b7-b3b5-22b788c3b876.jpg" / /p p 　　从审评报告中可以较为详细的了解铬各项目的结果以及批次数，如针对生物学活性项目，生产商采用了15批自研以及15批美国参比，蛋白质浓度采用了13批自研以及12批美国参比。 /p p 　　审评报告中需特意指出的包括： /p p 　　a.由于脱氨基为产品相关物质且关键性较低，因此被设置为tier3属性，只对比自研与参比的范围 /p p 　　b.正亮氨酸与参比稍有不同，但已有研究数据显示正亮氨酸变体与产品生物活性无差异，属于产品相关物质。且自研与参比的免疫原性无明显差异，以及毒理数据支持该水平的正亮氨酸变体，基于此FDA认为该差异无影响 /p p 　　 strong 3.Inflectra(Infliximab) /strong /p p 　　在审评中主要的问题有： /p p 　 strong 　a. 翻译后修饰 /strong /p p 　　发现有5个位点的脱氨基以及重链255号位点的氧化水平与参比不同，但给出论述其差异很小，翻译后不足以对产品的生物学活性产生影响。 /p p style=" text-align: center " img width=" 600" height=" 227" title=" ..............................jpg" style=" width: 561px height: 211px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/2db2ebfe-6f44-4f39-913f-f2250640ee06.jpg" / /p p 　　氨基酸分析显示酪氨酸及甲硫氨酸处部分发生了一些变异，因此FDA发IR缺陷信，提出该问题，同时自研的变异性更大，要求生产商回复。 /p p 　　生产商回复总结： /p p 　　1、经调查为合同实验室的错误导致酪氨酸及甲硫氨酸数据变异，同时并不是所有样品都是在相同条件下处理。酪氨酸的变异可能源于检测时的水解操作。随后生产商优化方法，并进行更多批次的研究，数据未出现更多变异。 /p p 　 strong 　b. 蛋白浓度不同 /strong /p p 　　数据显示自研蛋白浓度(9.6mg/ml)与参比(9.3mg/ml)相比，存在约3.2%的差距，而自研的蛋白浓度标准与参比不冲突，PK数据显示自研与参比无明显差异，因此生产上认为该差异无影响。FDA则认为4%的误差虽小，但可能并非由于巧合，而可能实际蛋白浓度确实存在差异，并要求生产商确认该差异，并且如果确实存在差异，生产上准备采取哪些措施来使得蛋白浓度一致。生产商检测多批次后发现，自研的蛋白浓度与参比确实存在4%的差异，因此生产商决定收窄蛋白浓度标准，且变更制剂工艺参数，重新生产3批次确认批，并通过增补递交数据。 /p p 　 strong 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " 四、糖基化研究及计算方式 /span /strong /p p 　　糖基化包括N糖和O糖，而抗体中N糖普遍存在，抗体均具有一个固定的N糖基化位点，也可能存在额外的糖基化位点，目前对N糖基化的研究较为广泛。O糖则在部分产品中可能存在，研究的也相对少一些。对O糖的分析相似性研究可以研究自研与参比的主要糖基化类型(定性)，而对N糖的研究则应更为详尽，除了糖型外，主要糖型的比例也应当进行研究(定量)，这其中主要包括：高甘露糖、半乳糖、非岩藻糖、岩藻糖以及唾液酸。由于这些糖型可能影响ADCC、CDC、PK等关键质量，因此一般作为tier 2属性来研究。从目前批准的产品来看，糖基化与参比不同几乎是常态，此时提供合理的论述即可。 /p p 　　N糖中常见的包括甘露糖(M)、半乳糖(G)、岩藻糖(F)以及唾液酸(S)。在计算糖基化类型时，一般应将甘露糖(M)、半乳糖(G)、非岩藻糖(AF)岩藻糖(F)以及唾液酸(S)作为整体考虑。如： /p p 　　高甘露糖是指仅含甘露糖的糖型，包括M5、M6、M7等 /p p 　　半乳糖是指含半乳糖的糖型，如：G0、G1、G1F等，半乳糖为这些糖基化之和 /p p 　　非岩藻糖是指不含核心岩藻糖的糖型，包括高甘露糖、G0、G1等 /p p 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　五、相似性研究中应该注意的问题 /strong /span /p p 　　a.针对在储存期间会改变的质量属性，如：SEC-HPLC、活性等，应考虑自研及参比的‘年龄’，在相对年龄相同的时间对比，如果无法实现，则可以考虑使用稳定性数据外推其影响 /p p 　　b.当某质量属性较低时，其风险相对较小，可以考虑将其纳入更低的层级 /p p 　　c.同一质量属性有多个方法进行检测评估时，性能最好的方法应放在风险最高的层级，其他方法则放在风险较低的层级 /p p 　　d.某些属性或方法由于本身的特性被排除于数据统计，如定性检测及限度检测可能被层级1或2评估所排除，如氨基酸组成，该属性并非不重要，但其无法按照tier 1/2的标准进行数据统计，因此作为tier3属性 /p p 　　e.可以预见在研发中工艺会出现变更，只要证明其与最终工艺产品可比，则样品均可用于分析相似性研究 /p p 　　f.生物类似物研发时，参比购买是一个制约因素，参比在市场流通的批次相对较少，因此最好趁早多收集参比，为相似性研究积累更多批次样品。 /p p 　　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 六、FDA批准的类似物CMC审评报告 /strong /span /p p 　　下面为可以在FDA上查询到的类似物审评报告，供参考： /p p 　　 strong a.Zarxio (Filgrastim-sndz) ： /strong /p p strong 　　b.Inflectra(Infliximab-dyyb)： /strong /p p strong 　　c.Erelzi(Etanercept-szzs)： /strong /p p strong 　　d.Amjevita(Adalimumab -atto)： /strong /p p 　　另外Retacrit(EPOETIN ALFA ) 以及Nivestym(Filgrastim-aafi)审评报告也可在FDA网站搜索到，有兴趣的可以关注一下。 /p p 　　从CMC审评报告中可以了解到产品主要信息、批准历程(首次递交、历次缺陷等)、分析相似性研究内容。如果你是生物类似物开发者，那建议你一定要学习一下这些报告，相信从中可以获取很多信息。 /p p 　　另外EMA也会针对各个产品发布审评报告，但其侧重点不同，EMA审评报告中会申报资料将各章节进行总结，但不会分析相似性研究。从EMA审评报告中可以获取的重要信息包括产品的详细信息、相似性研究总结、内外源因子控制等。而FDA审评报告中则重点突出分析相似性研究，其他内容大多被覆盖无法知晓确切信息，在审评报告突出分析相似性研究也是为了给后续的类似物开发商提供参考，有利于加快类似物的发展。 /p p 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　七、FDA撤销指南的背景及原因，以及后续指南的修订思路预测 /strong /span /p p 　　近几年美国虽然有一些生物类似物获批，但其获批远少于EMA。美国是医疗大国，每年用于医疗的费用高昂，生物类似物可以为政府及民众降低医疗费用。很显然，目前美国生物类似物获批的数量以及速度没有达到政府的预期，FDA局长Scott Gottlieb也是特意指出了该点。 /p p 　　行业对该指南也是有较大的担忧，指南要求至少十批参比及自研进行分析相似性研究。而事实上，参比的可获得性一直是困扰生物类似物开发商的一大难题，一段时间内在市场上流通的参比较少，要购买10批次参比进行研究将花费较长时间。 /p p 　　在此背景下，FDA于2018.6.21年撤消了该指南，撤销的通知中强调了该指南会提高生物类似物开发的效率及成本(通知原文如下)，包括指南求所要求的参比批次数。 /p p 　　从通知中不难看出，FDA对于加快生物类似物开发及上市的殷切期望。后续分析相似性指南预计会考虑到下面几点： /p p 　　a.参比及自研的批次数要求。不再设立10批的要求 /p p 　　b.数据统计方法将重新确立，不再参考目前的标准 /p p 　　c.新的数据分析方法会考虑到参比的批间变异性 /p p 　　d.突出临床PK数据的对比，而稍微弱化分析相似性研究 /p p 　　通知原文： /p p 　　[6/21/2018] The Food and Drug Administration (FDA or Agency) is announcing the withdrawal of a draft guidance for industry entitled “Statistical Approaches to Evaluate Analytical Similarity,” issued in September 2017. The draft guidance, if finalized as written, was intended to provide advice for sponsors developing biosimilar products regarding the evaluation of analytical similarity between a proposed biosimilar product and the reference product. After considering public comments that the agency received about the draft guidance, the FDA determined it would withdraw the draft guidance as it gives further consideration to the scientific and regulatory issues involved. span style=" color: rgb(146, 208, 80) " Comments submitted to the docket addressed a range of issues that could impact the cost and efficiency of biosimilar development, including the number of reference product lots the draft guidance would recommend biosimilar developers sample in their evaluation of high similarity and the statistical methods for this evaluation. /span The FDA believes that in better addressing these issues in the future, the agency can advance principles that can promote a more efficient pathway for the development of biosimilar products. /p p 　　The agency intends to issue future draft guidance that will reflect state-of-the-art techniques in the evaluation of analytical data to support a demonstration that a proposed biosimilar product is highly similar to a reference product. The goal is for future draft guidance to address potential challenges faced by biosimilar sponsors in designing studies that are intended to demonstrate that a proposed biosimilar product is highly similar to a reference product, including consideration of appropriate methods to analyze analytical data to account for potential lot-to-lot variability of the reference product. Future draft guidance also will focus on providing appropriate flexibility for sponsors in order to help spur the efficient development of biosimilars without compromising the agency’s rigorous scientific standards for evaluating marketing applications for biosimilars. /p p 　　The FDA continues to encourage sponsors of proposed biosimilar products to discuss product development plans with the agency, including the evaluation of analytical data intended to support a demonstration that the proposed biosimilar product is highly similar to a reference product. The FDA will continue to provide development-stage advice to sponsors of proposed biosimilar products or proposed interchangeable products through several types of formal meetings, which are described in more detail in FDA’s guidance for industry,Formal Meetings Between the FDA and Sponsors or Applicants of BsUFA Products. More information about this and other FDA guidance documents related to biosimilar products and interchangeable products, as well as contact information for FDA, is available at /p p 　　The FDA will communicate publicly when new draft guidance is issued in relation to the evaluation of analytical data between a proposed biosimilar product and a reference product. /p p 　 span style=" color: rgb(0, 176, 240) " strong 　八、FDA针对生物类似物实施的BAP(biosimilar action plan)计划 /strong /span /p p 　　为了平衡创新及市场竞争，FDA推出了生物类似物行动计划，以加快生物类似物上市，BAP主要关注4各方面，包括：加快生物类似物/可互换产品的开发及批准效率 最大消毒为生物类似物开发协会提供科学及法规澄清 为提供患者、临床医生等提高对生物类似物的理解建立有效沟通 通过减少不公平的竞争来支持市场竞争。该计划中包括的部分内容有： /p p 　　a.开发及实施新审评工具，如标准模板，以加快审评效率并给公众更多产品信息 /p p 　　b.为类似物开发商提供信息来源及开发工具，以加快类似物开发效率 /p p 　　c.加强橙皮书内容，在其中加入更多已批准产品的信息 /p p 　　d.探索与其他国家药政官方共享数据的可能，以促进在某些研究中使用非US参比 /p p 　　e.为生物类似物设立一个新的机构(OTBB)，以协调及支持生物类似物使用者费用项目 /p p 　　f.发布生物类似物标签指南草案/终稿，以帮助生产上确定在标签上应提供哪些信息 /p p 　　g.就证明等效为生产商提供额外的澄清，如发布新的指南 /p p 　　h.为生物类似物分析相似性研究发布新的指南 /p p 　　i.为生物类似物开发过程中参比的可获得性提供保障 /p p & nbsp /p

《美国医学会杂志》11月14日发表的一篇论文研究调查了核苷类似物的使用和乙肝病毒（HBV）相关肝细胞癌肝切除后复发风险。 　　对HBV相关肝癌肝脏切除后的病人来说，肿瘤复发是主要问题。 　　中国台湾的Chun-Ying Wu医生和同事研究了核苷类似物的使用和HBV相关肝细胞癌根治性手术后肿瘤复发风险。 　　研究者对2003年和2010年之间台湾省内（病例）进行队列/群组研究。资料来自于台湾全民健康保险研究资料库。 　　在近期被诊断为肝细胞癌的100938例患者中，研究小组选取了2003至2010年之间4569例进行了根治性肝切除的HBV相关肝细胞癌患者。 　　小组研究成果主要比较了未使用和使用核苷类似物的病人第一次肿瘤复发风险。 　　研究小组发现与非治疗组相比，治疗组有更高的肝硬化的发病率。但其肝细胞癌复发风险和整体死亡（率）较低。 　　研究小组总结道：&ldquo 在HBV相关肝细胞癌病人肝切除后，使用核苷类似物与更低的肝细胞癌复发风险相关。&rdquo

大家好，今天为大家介绍一篇ACS Chemical Biology的文章，标题为“Generation of Potent and Stable GLP-1 Analogues Via ‘Serine Ligation’ ”，文章的通讯作者是来自美国华盛顿大学的David Baker教授。在这项工作中，作者受“Serine Ligation”方法的启发，介绍了一种具有位点特异性的生物偶联策略。该策略依赖于带有 1-氨基-2-羟基官能团的非天然氨基酸的多肽和水杨醛酯之间的偶联，实现多肽上的化学修饰。具体来说，作者利用这个技术对类似于索马鲁肽 (Semaglutide) 的胰高血糖素样肽-1 (GLP-1) 26位的赖氨酸以及18位的丝氨酸分别修饰，得到了GLP-1类似物G1和G2。结果显示，修饰后的G1和G2在基于细胞的激活试验中比GLP-1更有效，同时能提高其在人血清中的稳定性以及体内葡萄糖处理效率。这种方法展示了“Serine Ligation”在化学生物学中各种应用的潜力，特别是发展稳定的多肽治疗剂（图 1）。图 1 基于“Serine Ligation”的GLP-1位点特异性修饰胰高血糖素样肽-1 (GLP-1) 是一类多肽激素，源自于胰高血糖素原肽的组织特异性翻译后加工，具有通过增强胰岛素分泌从而降低血糖水平的能力。二肽基肽酶 (DPP-4)可以切割GLP-1 N端8位的丙氨酸，因此内源GLP-1的半衰期只有2 min左右。虽然有许多旨在于解决稳定性问题的方法，例如在降解位点引入“不可切割”的氨基酸，但这些方法通常以牺牲稳定性为代价来换取多肽的功能和效力。因此人们对开发既能维持效力，又能稳定多肽治疗剂的新技术产生了很大兴趣。另一方面，多肽和蛋白质的偶联彻底改变了人们对于引入各种官能团来扩展新应用的认识。其中便包括蛋白质组学和高分辨率成像技术。由于多肽或蛋白质中存在多个可反应的活性位点，利用传统的共轭策略，例如N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯，会导致产物的异质性，进而引起分离提纯困难以及生物学活性下降等诸多问题。因而具有位点特异性的新修饰方法亟待开发。作者从“Ser/Thr Ligation”(STL) 中获取灵感，发现该偶联主要发生在C 端的水杨醛酯和 N 端含有丝氨酸或苏氨酸的残基之间。因此，作者通过合成和引入带有1-氨基-2羟基的非天然氨基酸，并将其与水杨醛酯的衍生物偶联，实现了多肽位点特异性的化学修饰（图 2）。图 2 “Serine Ligation”与引入非天然氨基酸的位点特异性生物偶联作者首先评估了该方法的普适性，合成了生物素、花青-3、一种棕榈酸类似物，以及单分散PEG 水杨醛酯。然后将这些探针特定地偶联到带有 1-氨基-2-羟基的非天然氨基酸的模型肽 1 上，生成产物 2-5（图 3）。为了代表性地评估产物的转化率和纯度，作者监测了多肽反应物1和生物素水杨醛之间的反应，发现几乎在30 min后实现了定量转换。图 3 对未保护模型肽的位点特异性修饰之后作者探究如何利用该生物偶联技术增强多肽的稳定性。最常用的方法包括聚乙二醇化和脂化。事实上，两种 GLP-1药物，索马鲁肽和利拉鲁肽都是脂化的，目前用于治疗 2 型糖尿病。基于此，作者利用STL合成了两种GLP-1类似物G1和G2。二者都含有一个类似索马鲁肽的杂合 PEG 和脂肪酸侧链。不同之处在于，G1的修饰在26位的赖氨酸上，与索马鲁肽的修饰位置相同。同时，为了增强稳定性，对G1多肽8号位的丙氨酸也进行了修饰，引入了2-氨基异丁酸 (Aib)。G2的修饰则在18位的丝氨酸上。借助于冷冻电镜，发现18位的丝氨酸在GLP-1与GLP-1受体的结合模型中是溶剂暴露的，因此不会干扰多肽激素的天然功能。在这种条件下，我们可以不对G2的8号位丙氨酸引入修饰，因为18号位丝氨酸引入的脂肪链离N端的距离近，可以保护8号位的丙氨酸不被蛋白水解（图 4）。图 4 GLP-1多肽类似物G1, G2的设计许多生化和结构研究表明GLP-1 内的一个扩展的两亲性 α-螺旋是负责与GLP 受体 (GLP-1R) 的细胞外结构域高亲和力结合的。为了去评估这些外加修饰是否会破坏多肽二级结构，作者使用圆二色谱 (CD) 来表征。相对于显示出特征性螺旋折叠的GLP-1，G1 和 G2 也都显示出螺旋结构；然而，它是低于天然GLP-1的。G1与G2的数据与在索马鲁肽上的脂质修饰相一致，说明了二级结构的丢失是脂质修饰引起的。GLP-1 与 GLP-1R 的内源性结合会导致募集G蛋白的细胞内重排，随后刺激cAMP的产生。cAMP来源于ATP并会导致葡萄糖刺激的胰岛素分泌。为了去评估GLP-1 类似物 G1 和 G2 去激活人源GLP-1R的能力，在过表达人 GLP-1R 的 CHO-K1 细胞中去监测cAMP的积累。细胞最初用天然 的GLP-1 和索马鲁肽进行处理。相比之下，G1 和G2 比未加修饰的GLP-1表现更好，并且与 Semaglutide 大致等效，EC50值为 0.97 ± 0.2 和 0.73 ± 0.2 nM（图 5A）。这些数据表明26位的赖氨酸和18位的丝氨酸的脂质修饰不会对其内源功能造成影响。为了补充体外的药理学分析，作者接下来用反向高效液相色谱 (RP-HPLC) 比较GLP-1类似物G1，G2，天然 GLP-1以及索马鲁肽在人血清中的稳定性。在这个测定中，每种肽在人血清中孵育最多48 小时，取出等分试样并通过 RP-HPLC 分析（图 5B）。相对于天然 GLP-1，G1 显示出显著的稳定性曲线，t1/2 ≈ 40 小时。同时G2也非常稳定，相对于天然 GLP-1 稳定性增幅超过了14倍，几乎与索马鲁肽相似。在得到理想的激活和稳定性数据之后，作者接下来使用标准葡萄糖耐量实验 (GTT) 在动物体内进行测试。更具体地说，在禁食 16 小时后，用 10 nmol/kg 剂量向小鼠注射多肽，其次是 2 g/kg 葡萄糖。血糖水平用血糖仪测量，然后在不同的时间长度之后进行定量（图 5C）。在这种急性 GTT 实验中，G1 和 G2 相比于天然的GLP-1显示出具有统计学意义的血糖控制能力，这与他们的体外数据相一致。这些数据表明脂质化修饰能够在不损害效力的前提下显著增加稳定性，从而改善急性高血糖小鼠模型的体内活性。图 5 脂化对细胞活性，蛋白水解的稳定性以及控制血糖能力的影响为了深入了解 G1 和 G2 是如何与GLP-1R相互作用，作者对相应的配体-受体复合物进行了计算建模。GLP-1R 肽结合模型是基于最近发表的GLP-1R 与未修饰的 GLP-1 复合物的Cryo-EM 结构。索马鲁肽、G1 和 G2 模型与 GLP-1R 的复合物表明脂质化18位的丝氨酸或26位的赖氨酸是溶剂暴露的，可能不会干扰与激活有关的相互结合作用（图 6）。图 6 GLP-1R-Semaglutide、GLP-1R-G1 和 GLP-1R-G2 复合物模型总结来看，作者介绍了一种强大的，基于“Serine Ligation”的位点特异性生物偶联策略。作者应用该方法合成了有效且稳定的GLP-1类似物。该类似物具有一个混合聚乙二醇和脂肪酸侧链，类似于广泛使用的糖尿病药物索马鲁肽。这两种化合物在激活GLP-1R的能力上与索马鲁肽等效；相比于天然的GLP-1，G1，G2在人血清中显示出显著改善的稳定性，并且在小鼠体内的改善血糖能力优于天然的GLP-1。在未来，该方法也显示出构建其他GPCRs稳定且有效的类似物潜力。原文：https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acschembio.2c00075

5月15日，欧盟委员会发布(EU)No445/2013号条例，批准硒代蛋氨酸羟基类似物用作动物饲料添加剂。硒代蛋氨酸羟基类似物添加于饲料时，分属的添加剂类型为“营养添加剂”，功能组为“微量元素化合物”，需保证硒元素在12%含水量的饲料成品中的含量不超过0.5mg/kg，有机硒不超过0.2mg/kg。 　　硒代蛋氨酸羟基类似物用作饲料添加剂时，可作为蛋氨酸营养补充剂，促进动物生长发育。但该物对皮肤和眼睛有刺激作用，在使用该产品后，必须用水冲净皮肤。对此，检验检疫部门提醒相关企业：一是根据欧盟委员会发布的法规，严格按照相关要求来用作动物饲料添加剂。二是与相关部门合作，加大检测力度，确保出口产品符合欧盟标准。三是推进生产工序升级和优化，并建立自检自控体系，分析关键控制点并予以重点关注，确保其含量符合法规要求，避免退运或召回。

国家市场监督管理总局发布关于打击食品中非法添加酚汀（酚丁）、酚酞及其脂类衍生物或类似物违法行为的通知，加强了对食品中非法添加的监管。由于酚汀（酚丁）、酚酞及其酯类衍生物或类似物与酚酞具有相同/相似的核心药效团和临床功效，具有类似属性和危害性，因此，添加有上述物质的食品有对人体产生毒副作用的风险，影响人体健康，甚至可危害生命。根据《食品安全法》，食品不得添加药物，而该类原料也从未获得批准作为食品添加剂或新食品原料，以及保健食品原料，因此，在食品中检出酚汀（酚丁）、酚酞及其酯类衍生物或类似物（如4-氯双醋酚丁），均属于非法添加。部分相关产品：了解更多产品或需要定制服务，请联系我们关于我们天津阿尔塔科技有限公司成立于2011年，是国内领先的具有专业研发及生产能力的国产标准品企业，公司坚守“精于科技创新，保障人民健康安全生活”的企业愿景，秉持”致力于成为标准品第一品牌”的企业使命。是国家市场监督管理总局认可的标准物质/标准样品生产者（通过ISO 17034/CNAS-CL04认可)，并通过了ISO9001:2015质量管理体系认证。公司于2022年获批筹建“天津市标准物质与稳定同位素标记技术研究重点实验室”，并被认定为国家高新技术企业、国家级专精特新小巨人企业、天津市专精特新中小企业、天津市瞪羚企业等，成立了博士后科研工作站和院士创新中心，建立了国家食品安全重大专项稳定同位素产业基地，主持完成和参加了多项天津市重大科研支撑项目和国家重点研发计划重大专项，处于我国标准品和稳定同位素标记内标行业的领先地位。经过10余年的努力，阿尔塔科技以其卓越的品质和全方位的技术支持与服务受到全球客户的广泛认可和良好赞誉，成长为行业内国产高端有机标准品的知名品牌。2022年底，阿尔塔成功携手杭州凯莱谱精准医疗检测技术有限公司（迪安诊断旗下子公司），进一步开拓医药和临床检测标准品，为多组学创新技术以及质谱标准化的解决方案提供技术保障，精于标准品科技创新，创造绿色健康品质生活，真正实现From Medicare to Healthcare。

3月17日，记者从美国FDA网站获悉，FDA发布了2011年2月拒绝进口食品情况，2月份共有56款来自中国的食品被拒绝进口，其中有4款食品、1款鱼饲料检出三聚氰胺。 　　根据通报信息，标称合肥“wor-biz trading co.,ltd”公司生产的一款糯玉米(GLUTINOUS CORN)、标称上海“Aipu Food Industry Co Ltd ”生产的水解植物蛋白(HYDROLYZED VEGETABLE PROTEIN)、标称福建“JINJIANG XIEXIANG”公司生产的马铃薯片(POTATO CHIPS)，以及标称广东东莞“Sheng Fa Food Factory”生产的低筋粉蛋糕(SOFT FLOUR CAKE)查出三聚氰胺或其类似物质。 　　而标称来自福建“JINJIANG QIMEI GIFTS AND FAVOURITE”的一款鱼饲料也被检出三聚氰胺或其类似物质。

西沙国家大气背景综合监测站日前动工建设，旨在开展南海环境保护工作，加强军地合作，为维护我国南海领土、领海和海洋权益，行使国家主权和国土事务管理提供所需的环境监测公共服务。 　　据总后勤部基建营房部副部长杜连英介绍，西沙国家大气背景综合监测站建设，填补我国在广阔南海区域的相关环境监测空白，支持开展南海环境保护监管，以实际工作支持维护我国南海的领土、领海和海洋权益。同时，为国家大气背景站发展成为综合性多功能类型监测站(大气、海洋、生态、遥感对照、地表水等综合监测能力)提供实践经验，为生态环境保护军民融合式发展提供良好示范。

由于肝素钠在分子量分布和电荷差异上的异质性，对其进行有效分析一直是一个挑战。而且，这些杂质通常具有与肝素钠相类似的特性，使得在使用分析方法时很难区分肝素钠与其杂质。为了有效将肝素钠从杂质中（包括生产过程产生的杂质如硫酸皮肤素和非法添加的杂质如多硫酸软骨素）分离出来，美国药典（USP）颁布了一种采用离子交换色谱鉴定肝素钠及其杂质的色谱方法（注：中国药典对肝素钠的检测方法和USP相同）。然而，目前市面上的离子交换色谱柱很少能够满足USP的分离度标准，因此，迫切需要有一种新型填料来对其进行改善。赛分科技近日开发了一种离子交换色谱柱&mdash &mdash Glycomix&trade SAX，可对如肝素钠这样的带多电荷聚糖样品实现高效分离。 图1肝素钠、硫酸皮肤素和多硫酸软骨素在Glycomix&trade SAX上的分离色谱图 色谱条件 Column: Glycomix&trade SAX, 4.6 x 250 mm Guard column: Glycomix, 4.6 x 50 mm Mobile phase: A: 0.04% NaH2PO4, pH 3.0 B: 0.04% NaH2PO4+14% NaClO4, pH 3.0 Flow rate: 0.22 mL/min Gradient: 20% - 90% B in 60 minutes Wavelength: 202 nm Column temp: 25 ℃Injection volume: 10 mL Pressures: 9.5 bar Sample: 20 mg/mL Heparin sodium 1 mg/mL Dermatan sulfate (DS) 1mg/mL Oversulfated chondroitin sulfate (OSCS) in H2O 在Glycomix&trade SAX柱上，肝素钠和硫酸皮肤素的分离度为3.8，肝素钠和多硫酸软骨素之间的分离度为5.8，远远超过USP所要求的1.0和1.5。 图2 肝素钠、硫酸皮肤素和多硫酸软骨素的标准曲线 图3 Glycomix&trade SAX的批次重现性 更多信息：http://www.sepax-tech.com.cn/products/tjpz1/lzjh/Glycomix/13.html 《Glycomix&trade SAX产品手册》 点击下载 关于赛分科技 赛分科技有限公司（Sepax Technologies, Inc）总部位于美国特拉华州高新技术开发区，致力于开发和生产药物与生物大分子分离和纯化领域的技术和产品。赛分科技是集研发、生产和全球销售为一体的实业型企业。公司主要产品为液相色谱柱及耗材、固相萃取柱（SPE）及耗材、液相色谱填料以及分离纯化仪器设备。在液相色谱领域里，赛分科技已开发出了100多种不同型号的液相色谱材料，涵盖了反相、正相、超临界（SFC）、手性（Chiral）、离子交换、体积排阻、亲和、HILIC等各种类别，为世界范围内液相色谱产品最为完善的企业之一。 赛分科技的创新技术使之生产出具有最高分辨率及最高效的生物分离产品，包括体积排阻、离子交换、抗体分离、和糖类化合物分离色谱填料和色谱柱，可广泛地应用于单克隆抗体、各种蛋白、DNA、RNA、多肽、多糖和疫苗等生物样品的分析、分离和纯化。赛分科技先进的技术和完善的产品线已使赛分成为全球生物分离的领航者。 公司网站：www.sepax-tech.com.cn www.sepax-tech.com

央视记者联合研究人员发现，我国地表水中抗生素含量惊人，南京鼓楼区居民家中自来水中甚至检出阿莫西林&hellip &hellip 全国主要河流黄埔江、长江入海口、珠江都检出抗生素，珠江广州段受影响非常严重! 　　央视记者暗访发现，山东鲁抗医药大量偷排抗生素污水，浓度超自然水体10000倍!抗生素乱排滥用并不罕见，南京自来水甚至检出阿莫西林。 　　珠江抗生素超欧美河流 　　中国科学院广州分院的专家介绍，在污水处理厂进出水口、珠江广州河段都检测到了抗生素。珠江水中9种抗生素的总浓度最高超过了每升水2000纳克。红霉素、罗红霉素、弗诺沙星等9种常用抗生素。 　　专家介绍，广州珠江中抗生素的浓度是欧美等国家河流中相应抗生含量的3~4倍，广州污水处理厂排出的处理后的污水中，抗生素含量也显著高于国外污水处理厂。 　　抗生素来自哪里? 　　&ldquo 主要是三大来源：第一是人用。&rdquo 专家解释，进入人体的抗生素不可能完全吸收，近一半会随尿液等排出 被人体利用的部分，也只是转化为代谢产物。抗生素及其代谢产物，被人体排出后，进入废水系统。 　　第二大来源是饲料，动物饲料和水产养殖。动物饲料中常添加抗生素，以帮助动物预防疾病、促进生长，提高产量。&ldquo 有地方水产养殖，一瓶一瓶的抗生素往水里倒，抗生素直接进入水体。&rdquo 　　第三是药厂和医院的医疗废水。据了解，抗生素在人类医用药物使用量占处方药总量的6%以上，在兽药用量中占到70%以上。据不完全统计，我国目前使用和销售量前15位的药品中10种是抗菌药物。(综合央视、大洋网等报道)

他们让欧盟收回成命…… 　　———潍坊检验检疫局抓质量提升成功破解“莫西菌素”悬案纪实 　　2010年3月，欧盟健康和消费者保护总司发出通报，宣布2009年12月发布的针对我国山东潍坊乐港食品股份有限公司出口欧盟熟制鸭肉中检出“莫西菌素”的预警通报有误，正式撤回对该公司“莫西菌素”的预警，允许乐港公司被封存的产品继续销售。 　　至此，历时3个多月的“莫西菌素”悬案终于尘埃落定。潍坊检验检疫局以扎实的基础工作、严谨的科学论据、不懈的拼搏努力打赢了这场应对国外技术性贸易措施的攻坚战。我国出口食品对欧盟预警成功反诉在国内尚属首次。 　　回顾应对预警事件的风雨历程，潍坊检验检疫局党组深感胜利来之不易。没有这些年质检系统自上而下抓质量安全的坚强决心、没有全局干部职工兢兢业业促质量提升的辛勤付出、没有健全的工作机制和过硬的监管工作质量保证，要让欧盟收回成命则无从谈起。 　　预警突发 风云乍起 　　事情还要从2009年12月22日说起。 　　就在那一天，欧盟健康和消费者保护总司发布预警，通报德国官方实验室在我国山东潍坊乐港食品股份有限公司出口欧盟的熟制鸭肉中检出“莫西菌素”，残留量为87.3μg/kg。对潍坊检验检疫局而言，这无异于投下了一颗重磅炸弹，意味着欧盟可能会将“莫西菌素”纳入监控范围，进而对我国出口欧盟的禽肉采取严密检查措施。而事实上，欧盟在发布预警以后，已经对我国禽肉产品实施了“莫西菌素”批批检测。若在欧盟的严密检查下发生多批次检出，封关长达6年半、近7年没有出口业绩、经过多年艰辛努力重新争得的欧盟市场将会再次无情地对我们关紧大门。 　　这对潍坊这样的传统农产品出口大市、特别是出口禽肉占到全国总量近三分之一的出口强市来说，影响更是巨大。 　　欧盟各国对进口农产品的技术限制措施向来极为严格。2002年2月，因在我国出口禽肉、水产品和兔肉中陆续检出六六六、滴滴涕和氯霉素、硝基呋喃等农兽药残留，欧盟对我国动物源性产品采取了全面封关。经过多年的交涉和努力，欧盟官方在数十次来华进行现场考核后，封关长达6年半之久的欧盟市场终于重新对我国开放。欧盟委员会于2008年7月30日通过决议，批准欧盟成员国恢复进口中国9家企业生产的熟制禽肉制品。在欧盟开关的全国9家企业中，潍坊就占5家。开关以来，在国家质检总局和山东检验检疫局的指导下，潍坊检验检疫局按照欧盟法规和指令的相关要求，对饲养场的疫情控制、用药管理、动物福利、加工厂的卫生控制等方面进行了全面指导检查，严格监督企业按照欧盟的要求进行生产加工。从当年12月份开始，全国首批禽肉制品由诸城外贸出口欧盟，潍坊美城、潍坊乐港、昌邑新昌等企业产品紧随其后陆续向欧盟出口。 　　截至目前，欧盟开关以来，全国共向欧盟出口禽肉产品1.3万余吨、价值7000余万美元。其中，潍坊出口禽肉产品1万吨、价值6000万美元，分别占76%和85%。潍坊乐港是全国唯一获得对欧盟注册的肉鸭产品出口企业，开关以来共向欧盟出口鸭肉产品6500吨、价值4875万美元，占全国向欧盟出口禽肉总量的50%和货值的69%。欧盟成员国多、市场潜力大，禽肉制品对欧盟出口恢复正常后，潍坊每年可增加创汇两亿至三亿美元，对出口食品农产品的拉动有着至关重要的作用。 潍坊检验检疫局技术中心完成技术攻关迅速开展莫西菌素检测 加强源头监管，对出口欧盟的鸭肉原料定期取样检测 国外技术专家到潍坊检验检疫局技术中心开展技术交流 潍坊检验检疫局监管人员正在对出口欧盟禽肉产品实施监装 　　为了健全完善出口食品农产品质量安全控制体系，确保出口食品农产品质量安全，几年来，潍坊检验检疫局的领导和一线检验检疫人员殚精竭虑，付出了大量心血，工作卓有成效。该局党组一直把促进食品农产品出口作为“一号工程”，不断加强源头监管，实施全过程质量控制，出口食品农产品质量安全监管水平明显提高。早在2006年，潍坊检验检疫局按照山东检验检疫局工作部署和要求，结合“食品安全年”活动，实施了驻厂检验检疫官制度改革，开展了出口肉类官方兽医体系和出口蔬菜官方食品安全员体系建设。对辖区内注册的肉类加工企业实行官方驻厂兽医制度，以出口蔬菜检验检疫监管模式改革为突破口，实行官方食品安全员制度。在源头管理、官方兽医、官方食品安全员建设和企业自检自控建设上下工夫，确立了官方兽医体系改革和食品安全员体系改革的基本框架，形成了《中国现代出口肉类官方兽医体系建立及应用》、《中国现代出口蔬菜官方食品安全员体系建立及应用》两套理论体系，探索建立了一整套管得准、管得住、促发展的科学有效的出口食品农产品检验检疫管理新模式。新的监管模式注重种植养殖源头管理、实施疫病疫情监控、农兽药残留监控和微生物监控，立足把问题解决在源头和生产加工过程中，实现了从种植养殖源头到生产加工直至产品出口的全过程监管，形成了更加科学有效的质量控制机制，提升了检验检疫监管工作的有效性，促进了食品农产品出口，得到了国家质检总局和山东检验检疫局领导的充分肯定。 　　眼下，在出口兽医体制改革初见成效，禽肉出口稍有转机的情况下，突然出现的“莫西菌素”预警事件，像一团沉重的乌云笼罩在潍坊检验检疫局领导和同志们的心头。震惊、担心、疑虑写在每个人的脸上，但他们很快冷静了下来，立即成立了专门的应对工作组，启动了《进出境农产品和食品质量安全突发事件应急处置预案》，全力投入到事件的排查分析工作当中。问题的根源发生在哪里？是监管工作出现了漏洞？风险分析出现了失误？还是企业存在不诚信行为？ 　　调查核实 提出质疑 　　自爆发国际金融危机以来，国际贸易保护主义亦呈愈演愈烈之势。面对“莫西菌素”预警事件，潍坊检验检疫局党组清醒地认识到，只有积极应对，才能争取主动。他们首先组织相关专家骨干进行了科学的分析。 　　“莫西菌素”是一种新型大环内酯类驱虫抗生素，根据肉鸭的生长习性和以往的临床经验，肉鸭在生长过程中罕有寄生虫病发生，一般不需要使用抗虫类药物。且“莫西菌素”价格高，国内市场鲜有销售，之前也从未发现乐港公司有过采购“莫西菌素”或含有“莫西菌素”成分药品的记录。经过全方位的调查分析，输欧鸭肉产品养殖、生产过程中使用或污染“莫西菌素”的可能性几乎不存在。至此，在潍坊检验检疫局相关人员的脑海里，一种质疑变得越来越清晰起来，难道是欧盟方面的检测结果出现了问题？！ 　　他们的质疑不是毫无根据的，是建立在多年来对出口食品农产品质量安全管理体系的健全完善和科学监管的自信上。 　　近年来，党中央、国务院高度重视食品安全问题，国家质检总局先后对加强产品质量和食品安全做出了一系列的重大决策和部署。潍坊检验检疫局按照国家质检总局、山东检验检疫局的部署要求，立足潍坊农业生产大市和农产品出口基地的特点，以全国产品质量和食品安全专项整治、“质量和安全年”活动等重大行动为契机，积极深化检验检疫监管改革，不断健全完善风险分析工作机制，在实行驻厂检验检疫官制度的基础上，进一步深化和延伸“公司+基地+标准化”管理模式，创新开展了出口食品农产品质量安全区域化管理新模式的改革试点，进一步提升了出口食品农产品质量安全水平。2009年，潍坊检验检疫局被评为国家质检总局“质量和安全年”活动先进单位。 　　在强化检验检疫监管工作上，潍坊检验检疫局不断创新、探索，形成了一套科学有效的农产品质量安全工作新机制： 　　健全风险分析管理机制，制定控制风险的有效措施。潍坊检验检疫局坚持把风险分析管理作为保证产品质量安全、提高把关放行效率的关键因素，一是开展风险评估，制定出口食品安全监控计划。每年年初修改制定出口禽肉、蔬菜的疫病、农兽药残留、微生物监控计划等十几个管理文件，对监控的品种、项目、频率、限量、检测方法等作出详细明确的规定，增强了监管工作的有效性。二是进行风险划分，实施新的监管验放模式。通过风险评估分析，区别不同产品和出口国家及地区，采取不同的监管措施。三是抓好源头管理，提升出口产品质量安全水平。源头监控是风险管理的关键环节，潍坊检验检疫局坚持从源头抓质量，大力推行“公司+基地＋标准化”模式，扩大备案基地建设规模，提高高风险产品的基地备案标准，严格监控农兽药残留及环境污染因子，引导企业建设规模化、高标准种植、养殖基地。同时，认真落实检验检疫官驻厂制度，对7家重点禽肉出口企业派驻辅助兽医，重点出口蔬菜区域设立食品安全员，做到了从源头到成品的全方位监管。四是拓宽监管领域，强化对农兽药源头的管理。农兽药是食品安全风险管理的难点，通过风险评估，潍坊检验检疫局将农兽药的生产流通一并纳入监控范围，实行了“出口企业+农兽药生产供应厂商+检验检疫”的农兽药使用管理新模式，即出口企业与有资质的农兽药生产厂、供应商签订经济责任合同，建立专供渠道；检验检疫局对供应厂商和使用的农兽药实行备案管理，对主要供应商建立业务登记档案和诚信档案，定期公布国外官方农兽药限量要求和禁用药品名录，以及用于生产的农兽药检测结果，实现信息共享。通过三方互动、联合监控，实现了出口食品农产品农兽药源头有效控制。 　　实施“区域化管理”，出口食品农产品质量安全呈现新的局面。时值2007年春夏之交，国务院先后召开了全国质量工作会议、全国产品质量和食品安全专项整治电视电话会议，颁布实施了《国务院关于加强食品等产品安全监督管理的特别规定》。在山东检验检疫局的指导下，潍坊检验检疫局在全面回顾总结多年来出口食品农产品质量安全工作经验的基础上，着力探索研究新形势下进一步抓好出口食品农产品安全质量的工作思路。为继续创新源头管理机制，从根本上解决食品农产品质量安全问题，进一步深化和延伸“公司+基地+标准化”管理模式，开展了出口食品农产品质量安全区域化管理新模式的探索研究，形成了《面向出口的食品农产品质量安全区域化管理体系建设》的理论框架和实施方案。把推行区域化管理作为继实施驻厂检验检疫官制度之后加强出口食品农产品检验检疫监管改革的又一重大战略目标，顺应新形势下检验检疫工作模式改革的再创新，作为贯彻国家质检总局、山东检验检疫局一系列工作部署、开展产品质量和食品安全专项整治行动的有力措施，作为促进社会主义新农村建设的具体实践，迅速付诸实施。 　　出口食品农产品质量安全区域化管理，其核心是建立出口产品质量安全的“政府主导、检验检疫技术支持促进、职能部门通力合作、全社会齐抓共管”的工作机制。即根据地域实际，由政府主导，在一定区域内，整合行政和检测资源，加强区域内农兽药综合管理，推行出口食品农产品标准化种植养殖、生产加工和出口管理，实施良好农业操作规范。通过科学管理、规范生产、以防为主、关口前移，保证出口食品、农产品的安全质量，提高产品质量和食品安全管理水平。依靠山东检验检疫局的大力支持和指导，潍坊检验检疫局在积极宣传、培训的基础上，与地方政府通力协作，建立起了“政府主导、国检指导、龙头带动、部门联动、全民行动”的区域化建设运行模式。健全完善了政府、部门协调控制体系，政策法规控制体系，农业化学投入品控制体系，种植养殖基地标准化建设推进体系，质量安全追溯控制体系，监控、预警、纠偏及评估控制体系，应对重大突发事件控制体系，宣传培训支持体系等八大管理体系。特别是针对影响出口质量安全的关键环节，即农兽药残留控制问题，为形成良好的出口食品农产品生产用药环境，潍坊检验检疫局指导、参与制定出台了农药兽药管理办法，由政府牵头，公安、工商、农业、畜牧等部门组成联合执法队，对生产经营国家明令禁止的农业化学投入品行为进行严打整治。对农业化学投入品生产企业进行考核、实行登记备案，对农业化学投入品销售渠道进行清理，采取连锁加盟、定点直供的经营模式，形成市、镇、村三级专供网络，对最终使用环节加强指导、规范用药。形成农业化学投入品产、销、用全程链式管理模式和有效控制机制，以保证农业化学投入品的规范管理和科学使用。出口食品农产品质量安全区域化综合管理机制的创新建立和试点实践，完全符合国家2009年6月1日颁布的《食品安全法》的要求。 　　区域化管理使潍坊的农业生产大环境治理明显好转，出口食品农产品质量安全得到有效控制，2007年全市食品农产品出口实现了超过10亿美元的历史新突破，并连年保持较大幅度的增长。区域化管理从根本上改变了出口食品农产品监管理念，开创了我国出口食品农产品质量安全监管新模式，得到了各级领导和社会各界的一致好评。全国产品质量和食品安全专项整治第二次现场会期间，时任国务院副总理的吴仪同志到安丘考察时，连连称赞“区域化建设”这个办法好。2008年4月，山东省政府在潍坊召开全省区域化管理现场会，将区域化管理的做法概括为“潍坊经验”，在全省54个县市区进行全面推广，并作为食品安全管理的根本措施写进政府工作纲要。去年4月，国家质检总局局长王勇亲临潍坊安丘考察指导区域化建设，给予充分肯定，并于10月份在潍坊召开全国出口食品农产品质量安全示范区建设经验交流会，向全国推广。会议期间，王勇又亲自带领与会12个省、市的领导到安丘考察了区域化建设现场。截至目前，除西藏之外的全国各省、市、自治区组队到潍坊学习考察区域化建设达9000余人次。今年1月8日，我国首个《初级农产品安全区域化管理要求》国家标准在潍坊安丘通过专家审定。审定委员会专家一致认为，它“是对现有食品安全管理体系标准的自主创新，并经过了实践的检验验证，填补了国内和国际空白，达到了国际先进水平”。并即将由国家标准委以推荐性国家标准发布实施。 　　针对欧盟预警，潍坊检验检疫局及时向山东检验检疫局食品处汇报，食品处领导三下潍坊，与潍坊检验检疫局应对工作组一起，对输欧盟熟制鸭肉的加工生产过程进行了全面的核查分析。结果显示潍坊检验检疫局在整个生产加工过程中实施了科学有效的全程监控，并且基于风险分析，通过检测验证排除了可能存在的安全隐患。一是对生产原料实施了有效控制。企业用于出口加工的肉鸭全部来自经检验检疫局备案的该公司自属饲养场，官方驻厂兽医在每个饲养周期，以及生产、加工的全过程均按规定进行了监管。同时，依据风险分析评估，抽样进行了氯霉素、硝基呋喃代谢物等10种兽药残留项目的检测，均符合安全卫生要求。二是对兽药的使用实施了有效控制。企业严格执行兽药使用管理规定，对每批新购入的兽药均实行先检测后使用的控制管理办法。用于加工该批产品的肉鸭在饲养过程中共使用了浆炎速治和新奇两种兽药，主要成分分别是硫酸安普霉素和阿莫西林。除此之外，未使用或添加任何其他药物。且使用前经中国检验检疫科学研究院综合检测中心进行检测，无禁用成分。三是对辅料的使用实施了有效控制。乐港公司的进货台账及核销表均按照潍坊检验检疫局统一要求的格式建立了完备的电子档案。潍坊检验检疫局对企业购入的新辅料品种，均由驻厂兽医亲自扦样送检验检疫技术中心进行检测，经检测合格后方允许企业用于生产。通过调阅监管记录确认，该批鸭肉熟制品在生产加工过程中共使用了盐、白胡椒粉、麦芽糖和醋四种辅料。在使用前，对可能存在的不安全成分均一一进行了检测，未发现任何安全隐患。四是对加工生产过程实施了有效监控。企业在生产加工过程中严格按照卫生标准操作程序进行控制。生产加工人员进入车间前均经过了洗手消毒，并且戴手套操作，班间定期洗手消毒，可以排除在加工生产人员操作过程中污染“莫西菌素”的可能。 　　技术攻关 掌握证据 　　近年来，世界各国对进口食品农产品均采取了极为严格的限制措施，我国出口产品被国外预警时有发生。但国内对进口国预警特别是欧盟预警提出质疑，进而推翻其预警结果的情况至今还没有先例，对欧盟预警成功反诉似乎是天方夜谭。潍坊检验检疫局慎之又慎：必须掌握更加具有说服力的第一手证据，用事实说话！ 　　多年来，潍坊检验检疫局党组始终坚持“以人为本，科技强检”战略，把检验检疫技术保障作为事业发展的基础和支撑。一是加强基础建设，扩大检测能力。经过多年的努力，潍坊检验检疫局技术中心取得了长足发展，并于2007年11月被确定为国家级蔬菜、禽肉检测重点实验室。在国家质检总局、山东检验检疫局的支持下，几年来通过多渠道争取对检测设备的投入、提高装备利用率来增强检测实力。近年新增加具有国际先进水平的液相色谱串联质谱仪等检测设备30多台套，基础设施建设发生了质的飞跃，基本满足了潍坊市农产品检验检疫的需要。二是强化人才队伍建设，不断提升技术人员素质。潍坊检验检疫局注重吸收高精尖人才，在山东检验检疫局的大力支持下，近年来新招录在编博士研究生3名、硕士研究生5名，招聘合同制硕士研究生3名。同时，采取多种途径加快人才培养步伐，先后派员参加专业培训110多次，选派业务骨干到欧盟基准实验室、烈日大学、日本横滨检疫所、美国安捷伦化学分析中心、新加坡原产局和香港卫生署进行研修和短期培训。先后邀请日本残留分析专家、美国FDA技术官员、智利农业部官员来潍坊举办技术讲座和交流。去年3月11日，技术中心与美国安捷伦科技有限公司签署合作协议，建立合作实验室，进一步提高了新技术开发应用能力和技术服务保障能力，科研能力和检测水平明显增强。技术中心每年新开发检测项目达20余项，获得国家质检总局、山东检验检疫局科技奖项3~5项。 　　潍坊检验检疫局分析认为，这次对乐港出口鸭肉产品的预警通报，欧盟在实施检测中采用的是液相荧光法，该方法虽然符合欧盟相关法规要求，但从技术的角度不能提供分子的结构信息，有可能因为基质干扰而出现假阳性检测结果。“国外能做到的，我们也同样能做到”，“只有靠实力和事实说话，才能争取工作的主动”。潍坊检验检疫局党组决心一下，技术中心迅速行动，成立攻关小组于48小时内完成了质谱条件优化和样品处理方法的开发，建立了“莫西菌素”的液相色谱-串联质谱检测方法，检出限达到0.005mg/kg，准确度、选择性和灵敏度都远远高于欧盟采用的液相荧光法。随即，潍坊检验检疫局技术中心对已发运产品留样、库存产品和原料、辅料共89个样品进行了检测，结果均为阴性。连续检测乐港公司出口欧盟熟制品53批，出口其他国家和地区熟制品6批，结果也均为阴性。 　　据理力争 反诉成功 　　在山东检验检疫局的强力支持和该局食品处的指导下，通过对欧盟预警通报中所用检测方法的分析，综合全面调查情况和各方检测信息，潍坊检验检疫局决定全力支持潍坊乐港公司向欧盟要求仲裁检测。按欧盟的仲裁程序，如果对欧盟官方检测结果有异议，须先向当地欧盟兽医局提出由另外的实验室进行复检的申请，如复检结果与初次检测结果不同，可由第三方中立的检测机构进行最终的仲裁检测。1月5日，乐港公司客户SPS要求汉堡兽医局从检出“莫西菌素”的货柜中重新取样进行复检。1月19日，汉堡兽医官从封存产品中扦取复检样品，经汉堡GBA生物检测实验室检测，结果为阴性！按照有关仲裁程序，又在奥地利AGES实验室进行了仲裁检测，结果仍为阴性！！事实胜于雄辩。在铁的事实面前，德国汉堡兽医局同意对封存的产品解除禁令，允许继续销售。欧盟健康和消费者保护总司于3月8日正式发布了新的通告，正式撤回原对潍坊乐港食品股份有限公司出口欧盟熟制禽肉产品检出“莫西菌素”的预警。至此，标志着潍坊检验检疫局在与欧盟为乐港公司肉鸭产品中存在“莫西菌素”残留问题的交涉中取得完胜。 　　欧盟“莫西菌素”预警事件的成功反诉虽然只是首例突破欧盟技术性贸易措施的典型个案，但它反映出过硬的产品质量要靠强烈的责任意识、健全的工作机制、扎实的基础保障、严谨的科学监管来取得，是多年来基层检验检疫机构在国家质检总局的坚强领导下心系质量提升、改革创新、有效监管、服务发展的具体体现。 　　长风破浪会有时，直挂云帆济沧海。潍坊局全体干部职工正按照国家质检总局、山东检验检疫局的工作部署，认真开展“质量提升”活动，深入落实山东检验检疫局“一个体系，三道防线”的工作要求，进一步夯实基础，科学监管，开拓创新，力争以更加扎实的工作，更加出色的业绩，为检验检疫事业和经济社会发展再立新功。

1月20日，国家药监局（2022年第7号）公布了关于14批次化妆品检出禁用原料的通告，检出氯倍他索丙酸酯、甲硝唑、氯霉素、咪康唑、西替利嗪、林可霉素、克林霉素、地索奈德等激素、抗感染类禁用组分。 激素主要集中在抗皱、美肌修复面膜产品中，而抗感染类药物则主要集中在祛痘类精华、修复液等化妆品中。其中，甲硝唑、氯霉素、咪康唑、林可霉素、克林霉素就是抗感染类药物。针对这类有“奇效”的产品，大家要多多留意，我们要美丽更要安全哦！ 背景小知识给大家简单普及下，目前常见的抗感染类药物有四环素类、喹诺酮类、磺胺类、林可酰胺类、青霉素类等；这些抗感染类药物被纳入处方药管理，严格控制其使用量，如果被非法添加到祛痘、修复等产品中，短期可有立竿见影的效果，但长期使用会刺激皮肤，引起接触性皮炎等不良反应。因此，我国《化妆品禁用原料目录（2021年版）》明确规定此类物质为化妆品禁用成分。针对此类禁用物质检测，主要是参考《化妆品安全技术规范（2015年）》。 表1. 部分抗感染类药物的化合物信息举例接下来盘点：常见的抗感染类化合物检测方法有哪些？ 岛津解决方案岛津拥有丰富的色谱质谱产品，性能优越，操作简便，可以有效应对化妆品中抗感染类化合物的检测。 10种喹诺酮类物质的LC-MS/MS检测方法5.0 μg/L混合标准样品的MRM色谱图（1 依诺沙星；2氟罗沙星；3诺氟沙星；4氧氟沙星；5培氟沙星；6环丙沙星；7恩诺沙星；8沙拉沙星；9双氟沙星；10莫西沙星） 15种磺胺类物质的LC-MS/MS检测方法5.0 μg/L混合标准样品的MRM色谱图（1.磺胺胍、2.磺胺醋酸、3.磺胺嘧啶、4.磺胺噻唑、5.磺胺吡啶、6.磺胺甲基嘧啶、7.磺胺甲噻二唑、 8.磺胺二甲嘧啶、9.磺胺甲氧哒嗪、10.磺胺氯哒嗪、11.磺胺甲噁唑、12.磺胺多辛、13.磺胺间二甲氧嘧啶、14.磺胺喹噁啉、15.磺胺硝苯） 美满霉素等7种物质的LC检测方法10 mg/L 7种抗生素混合标准溶液色谱图（1. 甲硝唑、2.美满霉素、3.土霉素、4.四环素、5.金霉素、6.多西环素、7.氯霉素） 实际样品测试使用LC法测定祛痘除螨类面霜中美满霉素等7种物质，样品中检出多西环素浓度为3.39 mg/kg。对该化合物进行浓度为2.0 mg/kg、10 mg/kg的样品加标，其回收率分别为110%，92.4%。某面霜样品的色谱图 现在，我们将常见抗感染类药物的特色方案汇总如下：结语 抗感染类化合物等禁用物质的检测种类繁多，涉及到液相、液质等仪器，岛津丰富的色谱质谱产品满足检测需要，匹配法规要求，助您“锁定”危害物质，守护您的“美丽事业”。 撰稿人：申玲玲

p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 摘要： /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 1、仿制注册申请回升，一致性评价申请同比基本持平& nbsp /span /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 2、有6家企业提交阿莫西林胶囊一致性评价申请& nbsp /span /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 3、人福药业提交麻醉新药磷丙泊酚二钠上市申请& nbsp /span /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 4、TAF(富马酸替诺福韦艾拉酚胺)首仿申请进入CDE& nbsp /span /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 5、多个印度企业提交5.2类仿制药进口申请& nbsp /span /p p style=" text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 6、华海药业盐酸多奈哌齐片获批上市，视同通过一致性评价 /span /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 总体承办情况：仿制申请回升，一致性评价申请持平 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 据MED中国药品审评数据库2.0统计，2018年10月CDE共承办药品注册申请587个，总体有所下滑，从申请类型看，新增新药申请为17个，同比出现明显下滑，仿制申请和进口申请同比均有所上升，补充申请(一致性评价)有83个，同比基本持平。 /p p br/ /p p style=" text-align: center " strong 图1：2018年1-10月CDE承办药品注册申请情况(按受理号计) /strong /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/71b49a58-8eb0-40f7-a1ea-ed9a4a1bba8d.jpg" title=" 11.png" alt=" 11.png" / /p p br/ /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 一致性评价承办情况： 6家企业申报阿莫西林胶囊一致性评价 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 10月有51个一致性评价品种获CDE承办，同比继续增加(9月有47个品种)，其中注射剂有11个。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 10月再有6家企业的阿莫西林胶囊一致性评价申请进入CDE。据MED中国药品审评数据库2.0统计，截至10月31日，申报阿莫西林一致性评价的企业已达17家，其中胶囊剂有16家，颗粒剂有1家，通过一致性评价目前有2家(珠海联邦制药股份有限公司中山分公司以及浙江金华康恩贝生物制药有限公司的胶囊剂)。 /p p br/ /p p style=" text-align: center " strong 表1：2018年10月CDE补充申请(一致性评价)品种承办情况 /strong /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/0aa13d57-ce0c-4900-b1e1-6bc158267047.jpg" style=" " title=" 22.png" / /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/04cd7b14-7326-47b7-ad29-d4b1ff6ede3a.jpg" style=" " title=" 333.png" / /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/7826c3c2-210a-4ea7-aaa3-0433ee2d17da.jpg" style=" " title=" 444.png" / /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 国内1类新药承办情况：人福药业提交麻醉新药磷丙泊酚二钠上市申请 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 10月共有10个1类新药进入CDE。宜昌人福药业有限责任公司和四川大学华西医院联合提交麻醉新药注射用磷丙泊酚二钠上市申请。据了解，磷丙泊酚二钠是一种水溶性的丙泊酚前药，也是目前国外研究最先进的短效全身静脉麻醉药。其他情况请见下表。 /p p br/ /p p style=" text-align: center " strong 表2：2018年10月国内1类新药承办情况 /strong /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/14349198-d4df-4a72-92a3-54492eff5b0b.jpg" title=" 555.png" alt=" 555.png" / /p p br/ /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 国内仿制申请承办：富马酸替诺福韦艾拉酚胺首仿申请进入CDE /strong /span /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 10月CDE共长湴47个品种的仿制申请，其中有27个品种目前为国内独家品种，6个品种目前已有企业通过一致性评价。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 正大天晴和江西青峰药业在10月先后提交TAF(磷丙替诺福韦片，又称富马酸替诺福韦艾拉酚胺片)的仿制申请。目前福建广生堂药业(临床试验登记号：CTR20181674)、齐鲁制药 (CTR20181971)以及四川科伦药业(CTR20182012)也在布局TAF，生物等效性试验(BE)尚在进行中。 /p p style=" text-indent: 2em text-align: justify " 广东东阳光药业以及齐鲁制药在10月份各有5个仿制药进入CDE。长春西汀注射液(16家)、替格瑞洛片(14家)、他达拉非片(10家)等品种仿制申请在审厂家超过10家，竞争十分激烈。 /p p br/ /p p style=" text-align: center " strong 表3：2018年10月仿制药承办情况 /strong /p p img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/ae968f63-f71f-405d-a31f-7f34f7187e79.jpg" style=" " title=" 666.png" / /p p img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/0da7035f-f263-4b89-bf40-8a4e361bf497.jpg" style=" " title=" 777.png" / /p p img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/7406f7a9-91ba-4b7d-9a6e-60593807a7fc.jpg" style=" " title=" 888.png" / /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 进口申请承办情况：多个印度仿制药申请进口 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 10月CDE共承办35个品种的进口申请，ABTL0812、BAY1895344、BMS-986165、Enzalutamide、Guselkumab、LAE001、LB1148等品种为CDE首次承办品种。印度瑞迪博士实验室、阿拉宾度制药、印度太阳药业等印度企业均有仿制品种提交进口申请，详细情况请见下表。 /p p br/ /p p style=" text-align: center " strong 表4：2018年10月CDE进口品种承办情况 /strong /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/fb2f35a4-0d75-41b6-9860-6e116bb5443c.jpg" style=" " title=" 1111.png" / /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/d281911b-807f-42a1-9fab-b9797f07f120.jpg" style=" " title=" 2222.png" / /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/1f52b092-6fbb-429a-9ed5-12e36d4905c2.jpg" style=" " title=" 3333.png" / /p p span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 获批情况：华海药业盐酸多奈哌齐片获批 /strong /span /p p style=" text-indent: 2em " 据米内网MED中国药品审评数据库2.0显示，10月有多个品种通过仿制药一致性评价。华海药业4类仿制药盐酸多奈哌齐片获批生产，视同通过一致性评价。 /p p style=" text-align: center " strong 表5：2018年10月部分品种获批情况 /strong /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/4d200ab6-4ddd-4ee0-9604-526d91288ba5.jpg" style=" " title=" 4444.png" / /p p style=" text-align: center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/05ebf9af-dfa6-4079-8a85-8ca69686b581.jpg" style=" " title=" 5555.png" / /p p span style=" color: rgb(165, 165, 165) font-size: 14px " strong 文章作者：菜小白& nbsp /strong /span /p

由于地表水、饮用水中抗生素含量相对较低，对仪器的检测灵敏度要求非常高。大多数实验室现有检测方法需要对大量水样进行富集和净化，方可用于大部分液相色谱/质谱系统分析。 而常规液液萃取或固相萃取法富集过程不仅费时费力，还可能对环境造成二次污染，一次分析需要耗时数天。更麻烦的是，一旦使用萃取和富集方法，会导致整体回收率非常低，已经超过了方法学对检测准确度 所能容忍的最差下限。 本文采用高灵敏度的 AB SCIEX Triple Quad 5500 液质联用系统对环境水直接进样分析，省去了繁琐的前处理富集过程。 一次样品分析仅需要几分钟时间，就可测得水中数个纳克每升级别的阿莫西林量。~由于地表水、饮用水中抗生素含量相对较低，对仪器的检测灵敏度要求非常高。大多数实验室现有检测方法需要对大量水样进行富集和净化，方可用于大部分液相色谱/质谱系统分析。 而常规液液萃取或固相萃取法富集过程不仅费时费力，还可能对环境造成二次污染，一次分析需要耗时数天。更麻烦的是，一旦使用萃取和富集方法，会导致整体回收率非常低，已经超过了方法学对检测准确度 所能容忍的最差下限。 本文采用高灵敏度的 AB SCIEX Triple Quad 5500 液质联用系统对环境水直接进样分析，省去了繁琐的前处理富集过程。 一次样品分析仅需要几分钟时间，就可测得水中数个纳克每升级别的阿莫西林量。 附件：采用直接进样LC-MS/MS 检测环境水及饮用水中的阿莫西林.pdf

p style=" text-align: justify " 　　生物药(Biological products)一般是指来源于有生命的生物体的产品，通常来源是疫苗、血液成分、基因治疗、组织和蛋白质。而生物类似药(Biosimilar)是指与已经批准的原研专利药具有生物类似性或者互相替代性的生物制品。 /p p style=" text-align: justify " 　　在过去十年左右，生物制药带来了一系列新疗法, 其中重磅药的每年销售额从十几到几十亿美金不等。随着时间推移许多生物药的专利将过期，根据Evaluate的统计，到2020年，已过专利保护期的生物药将拥有高达近874亿美金的市场规模。这极具吸引力的利润空间，引来各大制药公司的关注。 /p p style=" text-align: justify " 　　美国与生物类似药(Biosimilar)有关的里程碑法案是2010年3月开始实行的The Biologics PriceCompetition and Innovation Act of 2009 (BPCI Act)(生物制品价格竞争和创新法案2009)，简称BPCI法案。这是奥马巴在任时推行的Affordable Care Act(ACA)平价医疗法案的一部分。其为生物类似药提供一个简化审批流程。2012年2月9日，美国FDA颁布了3项与生物类似药产品开发有关的指南草案，为生物类似药进入美国市场建立了一条快速审批通道。 /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 384" title=" timg.jpg" style=" width: 511px height: 321px " alt=" timg.jpg" src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/1ffc9a54-6e65-491c-960b-731aa14755e0.jpg" / /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " strong 图片源于网络 /strong /span /p p style=" text-align: justify " 　　尽管如此，FDA对Biosimilar的审批相当慎重，直到2015年才批准首个生物类似药Zarxio上市。至近日Truxima获批，FDA批准的生物类似物共12个。下面我们将逐一盘点已经获批上市的药物。 /p p style=" text-align: justify " 　　 strong 1、Zarxio /strong /p p style=" text-align: justify " 　　Zarxio(filgrastim -sndz)，由诺华旗下山德士推出，于2015年3月6日获得FDA批准，这是FDA批准的首款生物类似药。 /p p style=" text-align: justify " 　　Zarxio的仿制对象(参考产品)是安进公司(Amgen Inc)的 Neupogen (filgrastim，非格司亭1991年获得批准) 。Zarxio此次获得批准的适应症与Neupogen完全相同，主要包括正在接受骨髓抑制化疗的癌症患者、在接受诱导或巩固性化疗的急性骨髓性白血病患者、在接受骨髓移植的癌症患者、正在进行自体外周血造血干细胞集治疗的患者、严重慢性嗜中性白血球减少症患者。 /p p style=" text-align: justify " 　　FDA批准Zarxio作为Neupogen的生物类似性药物，但并非后者的“可互换药”(interchangeableproduct) 。根据美国法律，如果一种生物制品被批准为某种参考药品的“可互换药”，则意味着无需医生干预可以直接替代参考药品用于临床。 /p p style=" text-align: justify " 　　 strong 2、Inflectra /strong /p p style=" text-align: justify " 　　Inflectra (infliximab-dyyb，英夫利昔单抗)由辉瑞研发，于2016年4月5日获FDA批准。该药是强生和默沙东的重磅品牌药Remicade (类克，通用名：infliximab，英夫利昔单抗)的生物类似药。Remicade曾是全球最畅销的抗炎药，2014年全球销售额高达92.4亿美元，位列《2014年全球销售最好的25个药物》榜单第3名。 /p p style=" text-align: justify " 　　该药是FDA批准的第二个生物类似药，也是FDA批准的首个单克隆抗体生物类似药。用于治疗如下疾病：(1)对常规药物治疗反应不足的成人克罗恩病和儿童克罗恩病(6岁及以上) (2)对常规药物治疗反应不足的中度至重度活动性溃疡性结肠炎 (3)联合甲氨蝶呤用于治疗中度至重度活动性成人类风湿性关节炎 (4)活动性强直性脊柱炎 (5)活动性银屑病关节炎 (6)慢性重度斑块型银屑病。 /p p style=" text-align: justify " 　 strong 　3、Erelzi /strong /p p style=" text-align: justify " 　　2016年8月30日，FDA批准山德士开发的Enbrel (etanercept)生物类似药Erelzi (etanercept-szzs)上市，用于治疗多种炎症疾病，成为FDA批准的第三个生物类似药。 /p p style=" text-align: justify " 　　原研药Enbrel (恩利，通用名：Etanercept，依那西普)是安进的一款超级重磅产品，2014年全球销售额高达90亿美元。目前，Enbrel在美国已获批的适应症包括：中度至重度类风湿性关节炎，中度至重度多关节型幼年特发性关节炎，银屑病关节炎，强直性脊柱炎，中度至重度斑块型银屑病。 /p p style=" text-align: justify " 　　值得注意的是，2016年1月底，由韩国生物制药公司三星Bioepis (Samsung Bioepis)开发的一款依那西普(etanercept)生物类似药Benepali已经获欧盟批准，用于中度至重度类风湿性关节炎、银屑病关节炎、非放射性中轴性脊柱关节炎、银屑病成人患者的治疗。Benepali是欧盟批准的首个依那西普(etanercept)生物类似药，同时也是欧洲市场首个皮下注射剂型抗肿瘤坏死因子(anti-TNF)生物类似药。在欧洲生物制剂市场中，抗肿瘤坏死因子产品是最大的组成部分，年销售额高达100亿美元。 /p p style=" text-align: justify " 　　 strong 4、Amjevita /strong /p p style=" text-align: justify " 　　2016年9月23日， FDA宣布批准安进公司的新药Amjevita (adalimumab-atto)上市。Amjevita是艾伯维拳头产品Humira (修美乐，通用名：adalimumab，阿达木单抗)的生物类似药。 /p p style=" text-align: justify " 　　Amgevita的活性成分是一种抗TNF-α单克隆抗体，与adalimumab具有相同的氨基酸序列，并且具有adalimumab相同的药物剂型和剂量，用于多种炎症性疾病包括：中重度活动性类风湿关节炎 活动性银屑病性关节炎 活动性强直性脊柱炎 中重度活动性克罗恩病 中重度严重性活动性溃疡性结肠炎 中重度斑块状银屑病。 /p p style=" text-align: justify " 　　 strong 5、Renflexis /strong /p p style=" text-align: justify " 　　Renflexis (infliximab-abda，英夫利昔单抗)由默沙东与合作伙伴三星集团旗下生物制药公司三星Bioepis(SamsungBioepis)合作开发的一款生物类似药，于2017年4月21日获FDA批准。 /p p style=" text-align: justify " 　　Renflexis适用于Remicade的全部适应症，包括：成人及儿科克罗恩病，成人溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、银屑病关节炎以及成人斑块型银屑病的治疗。 /p p style=" text-align: justify " strong 　　6、Cyltezo /strong /p p style=" text-align: justify " 　　Cyltezo是由德国制药巨头勃林格殷格翰(Boehringer Ingelheim)开发的阿达木单抗生物类似药。Cyltezo首先于2017年11月13日获得欧盟委员会批准，获批用于艾伯维原研药Humira所有已获批的适应症，后于2017年8月25日FDA批准。 /p p style=" text-align: justify " 　 strong 　7、Mvasi /strong /p p style=" text-align: justify " 　　安进公司的Mvasi (bevacizumab-awwb，贝伐珠单抗)是罗氏旗下基因泰克(Genentech)公司Avastin (bevacizumab)的生物类似药，于2017年9月14日获得FDA批准，被批准用于治疗患有某种结直肠癌、肺癌、脑癌、肾癌及宫颈癌的成人患者。它获批后仍作为批准生物类似药，而非一种可互换的产品。 /p p style=" text-align: justify " 　 strong 　8、Ogivri /strong /p p style=" text-align: justify " 　　FDA于2017年12月1日批准Mylan和Biocon公司两家公司共同开发的Ogivri (trastuzumab-dkst)上市。Ogivri是一款Herceptin (商品名赫赛汀，药物名trastuzumab，曲妥单抗)的生物类似药，被批准用于治疗赫赛汀标签中的所有适应症，包括过度表达HER2的乳腺癌和转移性胃癌(胃或食管胃交界部腺癌)。 /p p style=" text-align: justify " 　　 strong 9、Ixifi /strong /p p style=" text-align: justify " 　　Ixifi(英夫利昔单抗-qbtx)由辉瑞研发的Remicade的生物类似药，于2017年12月13日获批，Ixifi仍作为一种生物类似性药物，而不是一种可互换的产品。 /p p style=" text-align: justify " 　 strong 　10、Retacrit /strong /p p style=" text-align: justify " 　　辉瑞旗下Hospira 公司的Retacrit (epoetin alfa-epbx)作为Epogen/Procrit(epoetin alfa)的生物类似药，于2018年5月15日获FDA批准上市，用于治疗慢性肾病，化疗或使用齐多夫定治疗HIV感染患者的贫血症。Retacrit也被批准在手术前后使用，以降低因手术过程中失血而必须输注红细胞的可能性。 /p p style=" text-align: justify " 　 strong 　11、Fulphila /strong /p p style=" text-align: justify " 　　FDA已于2018年6月批准Fulphila(pegfilgrastim-jmdb)上市。该药是安进Neulasta (pegfilgrastim，培非格司亭)的生物类似药。 /p p style=" text-align: justify " 　　Neulasta是一种“升白”药物，用于提升患者体内的白细胞数量，其活性药物为pegfilgrastim，这是一种重组的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(G-CSF)。G-CSF临床主要用于预防和治疗肿瘤放疗或化疗后引起的白细胞减少症、治疗骨髓造血机能障碍及骨髓增生异常综合征、预防白细胞减少可能导致的感染并发症、以及让感染引起的中性粒细胞减少的恢复加快。肿瘤患者在放疗或化疗后，常会出现白细胞减少、抗感染能力降低等症状。因此，临床上常使用“升白药”提升患者体内的白细胞数量。 /p p style=" text-align: justify " 　 strong 　12、Truxima /strong /p p style=" text-align: justify " 　　Truxima的参考药为罗氏旗下的Rituxan(rituximab，利妥昔单抗)，被批准用于治疗非霍奇金淋巴瘤的生物类似药，由韩国药企CelltrionHealthcare推出，主要用于大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、多血管炎及微小多血管炎型肉芽肿病等癌症的治疗。 /p p style=" text-align: justify " 　　此次，于2018年11月28日获FDA批准用于治疗以下成人患者：1)单药治疗复发或难治性、低度恶性或滤泡型、CD20阳性B细胞滤泡淋巴瘤 2)与一线化疗联合用于以前未经治疗的CD20阳性B细胞滤泡淋巴瘤 3)单药维持治疗用于对利妥昔单抗联合化疗发生完全或部分起效的患者以及在一线环磷酰胺，长春新碱和泼尼松(CVP)化疗后的单药治疗，用于非进展性、低级别CD20阳性B细胞淋巴瘤。 /p p style=" text-align: justify " 　　 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 小结 /strong /span /p p style=" text-align: justify " 　　与常见的小分子不同，生物制剂通常具有高分子复杂性，且对生产过程的变化非常敏感，然而现有的技术尚不能充分表征生物药的结构和其他特性。同时药品生产过程中的细微差异可能对最终产品的质量、纯度、生物学特性及临床效果影响很大。这些因素决定生物类似药不可能与原研药完全一样。 /p p style=" text-align: justify " 　　在美国 ，对于小分子的化学仿制药，一般情况下药剂师可以在不经处方医生允许，直接将处方中的原研药品替换为仿制药。这种替换有利于降低药品费用。但生物类似药必须在FDA已经批准其具可互换性的前提下，药剂师才能在不经处方医生允许的情况进行替换(具体可以参见FDA紫皮书，各州法规还并不完全一致)。由此可见，FDA对生物类似药的获是非常谨慎的。 /p p style=" text-align: justify " 　　FDA对生物类似药提出两个层次的要求，首先是证明生物相似，这是基本要求，而可互换是更高要求。到目前为止，欧盟没有明确提出生物类似药的“可互换性”的概念，但多个国家如英国、法国、意大利，都有明令禁止药剂师对生物类似药直接进行互换。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " 参考与备注： /span /p p style=" text-align: justify " span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " 　　[1] https://en.wikipedia.org/wiki/Biosimilar /span /p p style=" text-align: justify " span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " 　　[2]2015年3月，CFDA在其发布的《生物类似药研发与评价技术指导原则(试行)》文件中首次将biosimilar称为“生物类似药” /span /p p style=" text-align: justify " span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " 　　[3] 胰岛素、生长激素、促卵泡激素、甲状旁腺素未列入其中。 /span /p p style=" text-align: justify " span style=" color: rgb(127, 127, 127) font-size: 14px " 　　[4] 刘培英,黄文慧,田少雷.对美国食品和药物管理局生物类似药可互换性概念和要求的解读.中国新药与临床杂志,2018,37(2):95-98. /span /p

p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 从11月2日-8日通过仿制药一致性评价的情况来看，注射剂过评继续处于加速状态，共有7个品种过评/视同过评。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 其中奥赛康的注射用泮托拉唑钠、江西青峰药业的拉考沙胺注射液、正大天晴的注射用艾司奥美拉唑钠为 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 国内首家 /strong /span 过评。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 469px height: 505px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/dac71568-3c15-4310-8fdc-d77c5ccd2b92.jpg" title=" 一致性评价表格.png" alt=" 一致性评价表格.png" width=" 469" vspace=" 0" height=" 505" border=" 0" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 除上述三款注射剂外， span style=" background-color: rgb(255, 255, 0) " 江西亿友药业的吡拉西坦片 /span 和 span style=" background-color: rgb(255, 255, 0) " 湖南华纳大药厂的枸橼酸铋钾胶囊 /span 也为国内首家过评。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 泮托拉唑钠 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 泮托拉唑为质子泵抑制剂（PPI），通过与胃壁细胞的 H sup + /sup -K sup + /sup ATP 酶系统的两个位点共价结合而抑制胃酸产生的最后步骤。该作用呈剂量依赖性并使基础和刺激状态下的胃酸分泌均受抑制。本品与 H sup + /sup -K sup + /sup ATP 酶的结合可导致其抗胃酸分泌作用持续 24 小时以上。注射用泮托拉唑钠的适应症：适用于十二指肠溃疡；胃溃疡；中、重度反流性食管炎；十二指肠溃疡、胃溃疡、急性胃粘膜病变、复合性胃溃疡等引起的急性上消化道出血。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 400px height: 179px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/fc925f8e-c3d4-4b89-b4b3-231afdac646a.jpg" title=" 潘妥洛克.jpg" alt=" 潘妥洛克.jpg" width=" 400" vspace=" 0" height=" 179" border=" 0" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 泮托拉唑钠由 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 德国 Byk Gulden /strong /span 公司首先研制，最早于 1994 年在德国首次上市，商品名为潘妥洛克（Pantoloc sup & reg /sup ），2001 年获 FDA 批准在美国上市。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 176, 80) " strong 奥赛康 /strong /span 开发的注射用泮托拉唑钠于1999 年首批获准上市；2018年 5 月完成本品注射剂质量一致性评价研究，首家递交一致性评价补充申请，为国内首家过评企业。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 据PDB 数据库显示，2019 年销售额达 11.34 亿元，市场规模大。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 拉考沙胺注射液 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 拉考沙胺是一款钠离子通道调节剂，用于成人及青少年（16-18岁）癫痫患者伴有或不伴有继发性全面性发作的部分性发作的联合治疗。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 400px height: 246px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/2b0da405-bf2b-47f5-8839-4cef9362e709.jpg" title=" 拉考沙胺.jpg" alt=" 拉考沙胺.jpg" width=" 400" vspace=" 0" height=" 246" border=" 0" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 本品原研厂商为 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 优时比 /strong /span ，针对该药开发了 span style=" background-color: rgb(255, 255, 0) " 片剂、注射剂和糖浆剂 /span ，目前已经均在我国获批上市。财报显示，优时比拉考沙胺原研2019年全球销售额达到13.22亿欧元。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 176, 80) " strong 青峰药业 /strong /span 的拉考沙胺片于2019年1月获得国家药监局批准上市，成为国内首仿。2019年2月，青峰药业提交的3类仿制药拉考沙胺注射剂上市申请获得CDE承办，同年5月被纳入优先审评，此次获批成为国内首家过评。两款药品并均视同通过一致性评价。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 据悉，目前，国内按 span style=" background-color: rgb(255, 255, 0) " strong 新4类 /strong /span 提交拉考沙胺片仿制药上市申请的厂家还有5家，包括 strong 石药欧意、合肥英太、石家庄四药、四环制药和步长制药 /strong ；按 span style=" background-color: rgb(255, 255, 0) " strong 3类 /strong /span 报产拉考沙胺注射剂的只有青峰药业1家；按 span style=" background-color: rgb(255, 255, 0) " strong 5.2类 /strong /span 提交拉考沙胺糖浆剂的厂家仅有 strong Hetero Labs/深圳市贝美药业 /strong 1家。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 艾司奥美拉唑钠 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 注射用艾司奥美拉唑钠主要用于：口服疗法不适用时，胃食管反流病的替代疗法；急性胃或十二指肠溃疡出血的低危患者。 span style=" color: rgb(227, 108, 9) " strong 注射用艾司奥美拉唑钠已被纳入医保乙类目录。 /strong /span /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 400px height: 287px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/65e6443d-2acd-4ab4-8787-2b83da9225bc.jpg" title=" 艾司奥美拉唑钠.jpg" alt=" 艾司奥美拉唑钠.jpg" width=" 400" vspace=" 0" height=" 287" border=" 0" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 艾司奥美拉唑原研企业为 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 阿斯利康 /strong /span 研发，2000 年其口服制剂在瑞典上市，2003 年推出推出注射剂，据阿斯利康财报显示2019年其艾司奥美拉唑全球销售额为 14.83 亿美元。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 公开数据显示，2019年国内公立医疗机构终端注射用艾司奥美拉唑钠的销售额已超过30 亿元。其中有原研阿斯利康以及仿制药品牌正大天晴。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " span style=" color: rgb(0, 176, 80) " strong 正大天晴 /strong /span 注射用艾司奥美拉唑钠于（艾速平 sup & reg /sup ）2016年5月正式上市，是中国生物制药进军消化领域的首款重磅药物，也是国内首家申报、首批获批的注射用艾司奥美拉唑钠，同时拥有20mg和40mg两种规格。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 吡拉西坦片 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 吡拉西坦片适用于急、慢性脑血管病、脑外伤、各种中毒性脑病等多种原因所致的记忆减退及轻、中度脑功能障碍。也可用于儿童智能发育迟缓。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 400px height: 295px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/9441c38b-802c-4a08-a3a7-0d01b223d8f3.jpg" title=" 吡拉西坦片.jpg" alt=" 吡拉西坦片.jpg" width=" 400" vspace=" 0" height=" 295" border=" 0" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 该药原研厂家为 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 优时比 /strong /span ，2016年销售额为4,600万欧元。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 据医药魔方数据显示，国内生产销售吡拉西坦片的厂家有150余家，但正在申请/视同申请该药一致性评价的厂家仅有 strong 江西亿友药业、华中药业和东北制药 /strong 。 span style=" color: rgb(0, 176, 80) " strong 江西亿友药业 /strong /span 此次通过一致性评价，为国内首家。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " span style=" color: rgb(255, 0, 0) " strong 枸橼酸铋钾胶囊 /strong /span /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 枸橼酸铋钾胶囊用于慢性胃炎及缓解胃酸过多引起的胃痛、胃灼热感（烧心）和反酸。枸橼酸铋钾是内服治疗消化性溃疡药的TOP12品种， /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " 2019年中国公立医疗机构终端销售额突破1.5亿元。领军企业 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 丽珠 /span 一直占据高位，2017-2019年保持在50%以上，2020上半年下滑至47.83%。 /p p style=" text-align: center" img style=" max-width: 100% max-height: 100% width: 400px height: 263px " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/uepic/4eb836f8-818a-4a91-9ffc-b3f85233b6a0.jpg" title=" 枸橼酸铋钾胶囊.jpg" alt=" 枸橼酸铋钾胶囊.jpg" width=" 400" vspace=" 0" height=" 263" border=" 0" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " Insight 数据库显示，目前共有 23 家企业需要开展一致性评价，但是只有 span style=" color: rgb(0, 176, 80) " strong 湖南华纳大药厂 /strong /span 递交一致性评价补充申请并首家通过一致性评价。 /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em " strong In Conclusion： /strong 在这次首次过评的7种药品中，4个品种是对于消化系统的药品，治疗反酸烧心引起的胃溃疡等。还有两种神经系统用药，和一种降脂药。三类药品均为常见病、多发病用药，这些药品通过了一致性评价更加有利于降低药价、改善人民健康状况。 /p p style=" text-align: center margin-top: 10px " img style=" max-width:100% max-height:100% " src=" https://img1.17img.cn/17img/images/202011/noimg/a4f0022d-28a1-449d-b385-8a121286a1eb.gif" title=" 心电图分割线.gif" alt=" 心电图分割线.gif" / /p p style=" text-align: justify text-indent: 2em margin-top: 10px " strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 全国最新过评数据通报： /span /strong /p p style=" text-align: justify text-indent: 0em " strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " /span /strong 目前已有1,264个品规通过一致性评价， span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 127个品规 /strong /span 集齐三家以上（含三家）过评： /p p style=" text-align: left text-indent: 0em margin-top: 10px " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 37个厂家 /strong /span 通过：苯磺酸氨氯地平片（5mg）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 23个厂家 /strong /span 通过：盐酸二甲双胍片（0.25g）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 19个厂家 /strong /span 通过：蒙脱石散（3g）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 17个厂家 /strong /span 通过：阿莫西林胶囊（0.25g）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 16个厂家 /strong /span 通过：对乙酰氨基酚片（0.5g）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 15个厂家 /strong /span 通过：盐酸二甲双胍缓释片（0.5g）、富马酸替诺福韦二吡呋酯片(300mg)； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 14个厂家 /strong /span 通过：瑞舒伐他汀钙片（10mg）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 13个厂家 /strong /span 通过：卡托普利片（25mg）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 11个厂家 /strong /span 通过：瑞舒伐他汀钙片(5mg)、异烟肼片（0.1g）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 10个厂家 /strong /span 通过：吲达帕胺片（2.5mg）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 9个厂家 /strong /span 通过：格列美脲片（2mg）、头孢呋辛酯片（0.25g）、头孢拉定胶囊（0.25g）、头孢氨苄胶囊（0.125g）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 8个厂家 /strong /span 通过：维格列汀片（50mg）、替格瑞洛片（90mg）、盐酸克林霉素胶囊（0.15g）、头孢呋辛酯片（0.125g）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 7个厂家 /strong /span 通过：盐酸左西替利嗪片（5mg）、头孢氨苄胶囊（0.25g）、非那雄胺片（5mg）、盐酸莫西沙星片（0.4g）、阿莫西林胶囊（0.5g）、阿托伐他汀钙片（10mg）、阿哌沙班片（2.5mg）、奥氮平片（5mg）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 6个厂家 /strong /span 通过：碳酸氢钠片（0.5g）、恩替卡韦片（0.5mg）、他达拉非片（20mg）、枸橼酸托法替布片（5mg）、左乙拉西坦片（0.25g/0.5g）、奥氮平片（10mg）、硫酸氢氯吡格雷片（75mg）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 5个厂家 /strong /span 通过：阿托伐他汀钙片（20mg）、恩替卡韦分散片（0.5g）、草酸艾司西酞普兰片（10mg）、盐酸西替利嗪片（10mg）、阿奇霉素片（0.25g）、恩替卡韦胶囊（0.5mg）、吉非替尼片（0.25g）、甲硝唑片（0.2g）、利培酮片（1mg）、奥美沙坦酯片（20mg）、奥氮平口崩片（5mg）、厄贝沙坦片（75mg）、孟鲁司特钠咀嚼片（5mg）、克拉霉素片（0.25g）、利伐沙班片（10mg）、盐酸氨溴索片（30mg）、马来酸依那普利片（5mg/10 mg）、苯甲酸阿格列汀片（25mg）、盐酸二甲双胍片（0.5g）； /p p style=" text-align: left text-indent: 0em " 已有 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 4个厂家 /strong /span 通过：恩替卡韦分散片（0.5mg）、格列美脲片（1mg）、聚乙二醇4000散（10mg）、厄贝沙坦氢氯噻嗪片（厄贝沙坦150mg/氢氯噻嗪12.5mg）、福多司坦片（0.2g）、辛伐他汀片（20mg）、奥美拉唑肠溶胶囊（20mg）、盐酸帕罗西汀片20mg）、维生素 B6 片（10mg）、缬沙坦胶囊（80mg）、布洛芬颗粒（0.2g）、恩替卡韦片（1mg）、盐酸曲美他嗪缓释片（35mg）、盐酸曲美他嗪片（20mg）、醋酸阿比特龙片（250mg）、拉米夫定片（0.1g）、来那度胺胶囊（25mg）、阿卡波糖片（50mg）、盐酸乙胺丁醇片（0.25g）、阿那曲唑片（1mg）、孟鲁司特钠咀嚼片（4mg）、盐酸坦索罗辛缓释胶囊（0.2mg）、左乙拉西坦注射用浓溶液（5ml:500mg）、注射用紫杉醇（白蛋白结合型）（100mg）、布洛芬注射液（4ml:0.4g/8ml:0.8g）、塞来昔布胶囊（0.2g）、苯甲酸阿格列汀片（25mg）、布洛芬片（0.1g）、草酸艾司西酞普兰片（5mg）、左氧氟沙星片（0.5g）、注射用帕瑞昔布钠（40mg(按C sub 19 /sub H sub 18 /sub N sub 2 /sub O sub 4 /sub S计)）、盐酸莫西沙星氯化钠注射液（250ml: 盐酸莫西沙星(按C sub 21 /sub H sub 24 /sub FN sub 3 /sub O sub 4 /sub 计)0.4g与氯化钠2.0g）、注射用硼替佐米（3.5mg）、匹伐他汀钙片（2mg）。 /p

非洲南端的沙漠和半沙漠是荒凉的地方，气候干旱，降雨量少，气温高。 但这里是上奇怪的植物—石头花的产地。同时也是芬兰生物学家University of Eastern Finland Tommi Nyman博士和挪威NIBIO Svanhovd以及南非University of Stellenbosch的植物生态学家Allan Ellis教授从进化论角度研究植物的地方。 石头花的伪装 在恶劣的环境中，所有植物都需要某种伪装以免受动物的侵害。石头花十分擅长伪装：身体大部分埋在土壤中，只将它多汁的叶子平突出到土壤表面，这使得石头花很难被发现。但是由于在南非、纳米比亚和博茨瓦纳的土壤性质差异很大，土壤中的砾石可以是棕色、灰色、黄色、红色或几乎是白色，粒径也可以从细砂到大卵石。随着时间的推移，一些石头花的后代会发现自己得颜色相对应周围的环境十分显眼，处于一个十分容易被天敌发现的环境中。图1 石头花的生长环境 寻找一个准确的颜色测量工具研究者们提到：“在石头花的研究过程中，由于石头花和环境的颜色十分接近，必须寻找一个工具尽可能准确和客观地测量颜色，这也就是我们选择高光谱成像技术的出发点。”高光谱相机非常适合颜色测量，因为它比RGB相机更，而且不像主观的目视检查，可以定义目标的颜色，例如在实验室颜色空间中，精度可达?ESpecim IQ的电池寿命也被认为是一个很大的优势，因为他们的团队有时需要在野外露营了3-4个晚上，才能得到储备和充电的机会。Nyman博士说：“在野外，你需要一整天只使用一个电池的高光谱相机。”Specim IQ相机成像速度也很快，这在恶劣和快速变化的光线条件下是必不可少的。非洲的光线很刺眼，白天太阳直射，阴影是锐而深邃的。当云层遮住太阳时，光照条件会在短时间内发生剧烈变化。因此，在特定的光照条件下，设置好曝光时间，以便在下一个云出现并完全改变光照条件之前完成数据的快速采集。图4 Dr. Tommi NymanThe future?目前，所有关于石头花项目需要的数据都已经采集完成，并且石头花项目团队正在进行进行数据分析，日后也会将研究成果分享给大家。 高光谱成像在生态学研究方面还有很多潜在应用。这是一个广泛的研究领域，有许多与石头花研究问题类似的研究方向。便于运输和现场使用的高光谱设备为生态领域的研究提供了一个新的机遇。 小百科 石头花：石头花又名生石花、象蹄、元宝等，是著名的多年生小型多肉植物。茎很短，常常看不见。叶肉质肥厚，两片对生联结而成为倒圆锥体，有“鞍”、“球”、“足袋”等形状，叶部花纹形如树枝，色彩美丽。生石花品种较多，各具特色。其外型和颜色酷似彩色卵石，故人称为“活石子”或“卵石植物”。更为有趣的是其叶片的颜色会与周围的土壤颜色相仿，来保护自己。多年生肉质植物。高2-3cm，球体卵圆形，球状叶淡灰棕色，面树枝状凹纹，棕色，半透明。茎较短，植株是由2片对生的肉质叶联结而成的圆锥体。花金黄色。

p 　　 strong 总前言 /strong /p p 　　笔者曾在三年前写了多篇有关 a href=" http://www.instrument.com.cn/application/industry-S22.html" target=" _self" title=" " style=" text-decoration: underline " span style=" text-decoration: underline color: rgb(255, 0, 0) " strong 生物类似药 /strong /span /a 的系列文章，主要内容先后发表在《中国科学报》和《中国医药技术经济与管理》，在过去不到三年的时间里，生物类似药领域有了很大发展，尤其是中美两国在生物类似药的监管政策上都取得了很大的进展。笔者在这几年也一直关注生物类似药领域的发展，因此借美中药源和《医药经济报》联合推出“研发热点透视”专栏之际，笔者对此前的系列文章进行了全面更新和补充，以飭读者。 /p p 　　 strong 何为生物类似药? /strong /p p 　　生物类似药近年来依然是国内外制药界的热点领域，尤其在中国更是炙手可热。面对专利保护已经或即将到期的许多生物药以及庞大的市场，中国许多制药公司(尤其是一些原来做化学仿制药的公司)也磨拳插掌，准备大举进军生物类似药市场。根据汤森路透的最新数据：全球在研生物类似药数量最多的国家不是美国，而是中国!另外国内外媒体也已经有过有关生物类似药的大量报道，一些国际大型生物公司和市场调研、咨询公司也发表了不少有关生物类似药的白皮书或者专业报告，比较著名的、在业内有广泛影响的有：全球最大的生物技术公司安进发表的“Biologics and biosimilars: an overview”(生物制品与生物类似药概述)，汤森路透公司发表的An outlook on US biosimilar competition”(美国生物类似药竞争展望)等。 /p p 　　那么到底何为生物类似药? 在介绍什么是生物类似药之前，有必要先说说什么是生物药，什么是生物制药。尤其是生物制药(biopharm, biopharmaceutical)，这是一个非常令人混淆、迷惑的概念。咋一看，或者狭义的说，生物制药是指采用生物技术生产的生物制品(生物药)，它的对应词是小分子、通过化学合成的化学药(也包括采用化学合成方法得到的分子量相对较大的多肽等)，所以两者的根本区别并非药品的分子量大小，比如现在的技术发展已经可以通过化学合成(自动化)的方式合成长达上百个氨基酸的多肽，分子量可达上万，但是这些药(无论是试验性还是临床用的)都算不上生物药，虽然多肽本身听起来是生物制品。所以，这个狭义的生物制药可以说大致等同于生物药。但是采用生物技术生产的药也并非一定是生物药，因为不少小分子化学药也可以采用现代生物工程技术在微生物体内合成出来。 /p p 　　但是，广义的生物制药的概念也包括化学药，这有多种原因导致生物制药概念的外延。一是由于有些药的特点决定的，比如基于ADC技术(Antibody-Drug Conjugates, 抗体药物偶联)的药，这类药尽管归类于抗体药，但是显然不是纯粹的抗体，而是抗体或者抗体片段与化学药通过特别的接头(linker)偶联而成，所以这类药更像生物药与化学药的结合体 (对ADC药感兴趣的读者，可以点击参阅美中药源的一篇力作：开发抗体药物偶联(ADC)药物的技术挑战(一)：申报和监管的一些问题)，因此，从这个意义上说，生物药与化学药并无严格的界限。另外，几乎没有大型国际药企(尤其是top20)只做化学药的，越来越多的原来只做化学药的传统制药公司开始进军生物药领域，其中百事美施贵宝(BMS)公司就是一个典型例子。另外，生物药的重要性和在药品市场中的份额也逐年增大，市场经济的特点也决定更多的制药公司开始研发生物药。 /p p 　　临床应用的生物药可谓是多种多样，至少包括：疫苗(包括预防性和治疗性)、血液及血液制品、基因治疗药(我国和欧洲均已有批准上市)、器官组织、细胞(如用于治疗的干细胞)以及重组治疗性蛋白。在生物药中，最为重要是治疗性蛋白。在欧盟和美国市场，已有上百种各种蛋白质类的生物药获准上市，每年有上千亿美元的市场销售额，其中包括全球第一个生物技术药、美国FDA在1982年批准的Humulin(即在大肠杆菌合成的人胰岛素，用于治疗糖尿病，转让自著名的基因泰克(Genentech)公司)，更多的、至少数以百计的蛋白类药物正在进行临床实验，毫无疑问，以后会有更多的蛋白类药物获批上市。而对于蛋白药物而言，最重要的是抗体类药物，约占蛋白药一半的市场份额，所以，对于生物类似药企业而言，要仿制的首要目标就是抗体药，对于抗体类药物，在本系列文章以后还会专文详谈。 /p p 　　治疗性蛋白类药物又多种多样，根据其药理活性可分为5类：1)替换人体内缺失或者不正常的蛋白 2)增强人体内已经存在的信号通路 3)提供新的功能或者活性 4)干扰人体内的某种分子或者器官组织 5)输送其它化学药或者蛋白。而根据治疗性蛋白的分子类型又可分为：抗体药、Fc(抗体可结晶片段)融合蛋白(此类蛋白也常被归入广义的抗体药类别)、抗凝血因子、血液因子、骨增生蛋白、工程化骨架蛋白、酶、生长因子、激素(荷尔蒙)、干扰素、白细胞介素，溶栓剂等等。 /p p 　　而对于生物类似药(biosimilar)的定义，各国并无统一的、标准的定义和看法。在我国biosimilar至今仍有多种译法，除了生物类似药外，还有生物仿制药，生物类似物等。2015年3月，CFDA在其发布的《生物类似药研发与评价技术指导原则(试行)》文件中首次将biosimilar称为生物类似药，以后我国似乎有必要将biosimilar译名统一规范为生物类似药，笔者个人也认为生物类似药的译法最好。这是由于相比于化学仿制药(generics), 生物类似药和化学仿制药的核心区别是生物类似药只能和原研生物药类似，而不可能完全一样。另外，从国际上看，对生物类似药的定义主要来自如下三个最为重要和有影响力的机构组织。 /p p 　　第一：世卫组织(WHO): “A biotherapeutic product which is similar in terms of quality, safety and efficacy to an already licensed reference biotherapeutic product”。试译如下：和一种已经批准的参比生物治疗产品在质量、安全性和效力方面均相似的生物治疗产品。 /p p 　　第二：欧盟EMA: “A biological medicine that is developed to be similar to an existing biological medicine (the ‘reference medicine’). When approved, a biosimilar’s variability and any differences between it and its reference medicine will have been shown not to affect safety or effectiveness. ”。试译如下：与已经存在的生物药(即：参比药)类似的生物药。在批准时，该生物类似药自身的可变性以及与参考药的任何不同之处均应被证明不影响仿制药的安全性和有效性。 /p p 　　第三：美国FDA: “A biological product that is highly similar to a U.S. licensed reference biological product notwithstanding minor differences in clinically inactive components, and for which there are no clinically meaningful differences between the biological product and the reference product in terms of the safety, purity and potency of the product”. 试译如下：与一种美国批准的参考生物产品高度相似，尽管无活性组分有小的差异 在临床上和参考生物产品相比在安全性、纯度与效力方面没有显著差异。 /p p 　　尽管上述三种定义不尽相同，但是大同小异，并且都强调了生物类似药的安全性的重要性，而这个安全性主要是指病人或健康受试者身上的临床安全表现，这也决定了生物类似药必须要有临床实验来证明与参比原研生物药相比有相似的安全性(当然还必须包括有效性等)。这也是生物类似药和化学仿制药一大不同，对于两者的不同，以后笔者还会专文详谈。 /p p br/ /p

上一期，主要介绍了抗病毒药物研究的共同靶标相关内容，本文将继续从抗病毒药物研究的共性环节、 抗病毒药物研究的通用策略方面进行阐述与探讨。2 抗病毒药物研究的共性环节2.1 靶向病毒膜融合过程 在包膜病毒的复制周期中，需要病毒和细胞膜融合才能进入细胞。病毒通过受体识别以及膜融合或内吞等步骤进入靶细胞是首要环节。 在该过程中， 介导病毒与细胞受体识别的病毒表面蛋白（surface protein，SP）的 受体结合亚基、介导膜融合的病毒 SP 跨膜亚基、细胞上的受体、切割 SP 所需 的宿主细胞蛋白酶等均是常见的抗病毒靶点[30]。CoV 是 I 型包膜病毒，位于包膜表面的 S 蛋白介导病毒入侵宿主细胞过程，包括受体结合及膜融合等步骤。在膜融合的过程中，形成六螺旋束（six-helix bundle，6-HB）是一个非常保守且关键的机制。目前发现感染人的冠状病毒（HCoV） 中，其 HR1 （heptad repeat- 1）三聚体与 HR2 （heptad repeat-2）作用的表面氨基 酸大都为保守的疏水性氨基酸，因此 HR1 是 CoV S 蛋白上非常保守的药物靶点[30]。2018 年，姜世勃与刘克良团队发现靶向病毒融合蛋白的α-螺旋脂肽具有广 谱抗 MERS-CoV（EC50 = 0.11 μmol L-1 ，CC50 100 μmol L- 1 ）及甲型流感病 毒（influenza A virus，IAV）活性（H1N1 EC50 = 1.73 μmol L- 1，CC50 100 μmol L-1）[31] 。近日，复旦大学姜世勃/陆路团队与上海科技大学杨贝/Wilson 团队合作， 通过系统地筛选与结构修饰，发现了能够广谱抑制多种 HCoV 感染的多肽类融 合抑制剂 EK1 及脂肽 EK1C4，并揭示了其作用靶点与分子机制[32,33] 。该研究同时证明了 CoV 刺突蛋白的 HR1 区域是一个重要且保守的药物靶点， 为后续广谱抗 HCoVs 药物研发提供了思路。2.2 核酸复制 病毒进入靶细胞后， 病毒基因组 DNA/RNA 被释放到细胞中， 作 为模板指导病毒蛋白的合成。 RNA 病毒的基因组复制需要 RNA 依赖的 RNA 或 DNA 聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase ，RdRp ；RNA-dependent DNA polymerase，RdDp），这类酶在人体中不存在且相对保守，成为抗病毒药物研发 的重要靶点。不同病毒聚合酶的结构和功能有许多相似之处，因此针对某一种病 毒聚合酶设计的抑制剂往往对其他病毒也有较好的抑制作用[34,35]。自从 1962 年世界第一个抗病毒药物碘苷被批准上市以来，全球已有众多抗病毒核苷类似物药物获批上市。 在病毒疫情暴发时， 核苷类药物往往成为人们的首选。 早在 2014 年西非暴发的大规模 EBOV 疫情中，部分核苷类似物药物在临床阶段均表现出一定的抗病毒活性——例如日本富山化学的新型抗流感药物法匹拉韦（favipiravir）以及瑞德西韦（remdesivir，图 3），特别是瑞德西韦目前已经完成 EBOV 的试验药物 III 期临床试验。随着研究的深入， 瑞德西韦被发现具有广谱抗病毒活性， 涵盖丝状病毒科病毒（EBOV 和马尔堡病毒等） 、沙粒病毒科病毒（拉沙病毒和胡宁病毒等）、 CoV 科病毒（SARS 、MERS 和猫科冠状病 毒等）和黄病毒科病毒（ZIKV 等） 等，因此也成为了治疗 SARS-CoV-2 的首个 小分子药物[36]。阿兹夫定（azvudine ，FNC，图 3）具有抑制 HIV 、丙型肝炎病毒（hepatitis C virus ，HCV）、肠道病毒 71 型等 RNA 病毒复制的功能，2021 年 7 月， 已在 中国上市用于治疗高病毒载量的成年 HIV- 1 感染者。此外， 阿兹夫定在新冠肺炎 临床研究中也取得显著效果[37]。瑞德西韦进入临床研究后，其抗病毒效果与预期有一定差距，原因可能是： 疾病的病程及动物模型与人体药动学差异、药物之间的相互作用和个体差异。 此 外， CoV 特有的“复制矫正”（proofreading）机制，即将掺入 RNA 产物链的核 苷药物“剔除”，进而逃逸核苷类抗病毒药物的抑制， 可能是此类抗病毒药物效 果不佳的一个重要原因[38]。近日，美国乔治亚州立大学的研究人员报道了一种抑制呼吸道合胞病毒 （respiratory syncytial virus，RSV）、相关 RNA 病毒和 SARS-CoV-2 的广谱抗病 毒核苷分子——4' -氟尿啶（4' -FlU，EIDD-2749，图3），它在细胞和分化良好的 人气道上皮中具有高选择性指数。RSV 和 SARS-CoV-2 体外 RdRp 聚合酶抑制显 示掺入后 i 或 i+3/4 位出现转录暂停。每日一次的口服治疗对 RSV 感染的小鼠或SARS-CoV-2 感染的雪貂非常有效[39]。EIDD- 1931（即NHC，图3），是一种核苷酸类似物。 NHC 上的肟形式模仿 尿苷， 与腺苷匹配， 而另一个互变异构体模仿胞苷， 与鸟苷匹配。它的原理是通 过给病毒 RNA 引入大量的突变，“瘫痪”病毒的基因组，进而导致遗传信 息大量错误使病毒无法存活[40-45]。目前仅有 NHC 及其衍生物能够躲避病毒复制 矫正机制的干扰。 在体外模型中，NHC 对 RSV、流感病毒、CHIKF、EBOV、委内瑞拉马脑炎病毒、东部马脑炎病毒、MERS-CoV、SARS-CoV 以及 SARS-CoV- 2（多数变异毒株）等具有广谱抗病毒活性，无明显细胞毒性[46-48]；但在食蟹猕 猴中口服生物利用度较差。 EIDD-2801（molnupiravir，图 3）是 NHC 的异丙 酯前体药物，旨在改善 NHC 体内药代动力学以及在人类和非人类灵长类动物的 口服生物利用度。Molnupiravir 在雪貂和非人类灵长类动物中具有较好的口服 生物利用度。对感染流感病毒的雪貂进行 molnupiravir 口服治疗，可将大流行 流感和季节性甲型流感的病毒载量降低数个数量级， 并可减轻发热、呼吸道上皮 组织病变和炎症[39,49] 。Molnupiravir 使轻 中度新冠肺炎患者的住院率或死亡风险降低了约 50% 。2021 年 11 月 4 日， 英国药品和保健产品监管局（MHRA）已在英国批准 molnupiravir 上市，用于治疗重症和住院风险较高的轻至中度新冠肺炎成人患者（ http:// www.21jingji.com/article/20211104/herald/f0b15254b2fcc17b70b26b839e32b1c6.html）。除了 molnupiravir 之外，法匹拉韦也可以掺入到病毒 RNA 链，诱发病毒的基因组突变， 并通过累积这种突变，导致病毒失活或失去感染能力[50]。总之， 靶向病毒最为保守的 RdRp 是一种开发广谱抗病毒药物非常有前景的策略。 目前处于临床研究阶段的多个新冠病毒 RdRp 抑制剂类药物结构差异较大，靶向 RdRp 影响病毒复制的机制也不尽相同，特别需要从结构生物学角度解析抑制剂与 RdRp 复合物结构，明确作用机制，为精准开发高效特异的、以 RdRp 为靶标的广谱抗病毒药物提供理论基础。2.3 核糖体移码 (ribosomal frameshifting) 在正常细胞内，核糖体（ribosome） 以 3 个碱基为单位（即密码子codon）由 5 到 3 端单向、连续地读取 mRNA 中的 遗传信息， 合成蛋白质[51]。由于体积的限制， 病毒的基因组通常较小， 所携带的 遗传信息较少。 包括 SARS-CoV-2 在内的各种 RNA 病毒在复制过程中会利用一 些特殊的机制调控病毒基因表达，扩展其所携带遗传信息的利用率， 其中一种常 用的机制是称为程序性“移码”的蛋白质合成重编码机制（programmed ribosomal frameshifting，PRF）[52-54]。即核糖体不遵循常规读取 3 个字母的步骤， 而是会漏 掉一两个 RNA 字母。核糖体发生的这种错位被称为“移码”，会导致核糖体错误读取遗传密码。例如， SARS-CoV-2 严重依赖其 RNA 折叠引起的“移码”来 合成蛋白[52-54]。理论上， 任何通过靶向 RNA 折叠来抑制“移码”的化合物都可能作为一种 治疗感染的药物。 “移码”现象在人类自身基因的表达中极为罕见， 因此靶向读 码框“移码”是一个可行的抗病毒策略。研究者通过运用荧光蛋白报告基因系统联合高通量筛选技术， 鉴定出了一个可以高效抑制读码框“移码”的小分子化合物美拉沙星（merafloxacin，图 4），它能在细胞水平（Vero E6 细胞）显著抑制 SARS-CoV-2 复制[55] 。美拉沙星抑制读码框“移码”的机制尚不清楚，可能直接作用于核糖体与病毒 RNA 的结合，或者抑制内源性调控蛋白。近期， Ahn 等[56]从9689 个小分子中发现了一种新型的呋喃[2,3-b]喹啉类化合物 KCB261770（图 4），它能够抑制 MERS-CoV 的“移码”和细胞水平 MERS-CoV 的复制。此外，该化合物还能抑制 SARS-CoV 和 SARS-CoV-2 的“移码”，具有广谱抗病毒活性。3 抗病毒药物研究的通用策略3.1 细胞纳米“海绵” SARS-CoV-2 的细胞结合和进入是由其刺突糖蛋白（S 蛋 白）介导的， S 蛋白不仅与人类血管紧张素转换酶 2（angiotensin convertingenzyme II，ACE2）受体结合， 还与肝素等糖胺聚糖结合。 近期研究发现细胞膜包被的纳 米颗粒（细胞纳米“海绵”）模拟宿主细胞，通过自然的细胞受体吸引和中和 SARS-CoV-2 ，可作为一种广谱抗病毒策略，还发现增加细胞纳米海绵表面肝素密度可以提高抗 SARS-CoV-2 作用[57]。3.2 抗体募集/杀死细胞 2009 年， 研究者设计了一种新的小分子 ARM-H，有可 能通过两种机制抑制 HIV：①通过招募抗体到 gp120 表达病毒颗粒和受感染的人 类细胞， 从而增强其吸收和人类免疫系统的破坏； ②通过结合病毒糖蛋白 gp120， 抑制其与人 CD4 结合和防止病毒进入。研究人员通过实验证明了 ARM-H 能够 同时结合 gp120 和抗 2,4-二硝基苯抗体（DNP ，存在于人血液中） [58]。抗体、 ARM-H 和 gp120 之间形成的三元复合物具有免疫活性，导致补体介导的表达 env 细胞的破坏。此外， ARM-H 可以阻止病毒进入人类 T 细胞， 因此应该能够通过两种相互强化的机制（抑制病毒进入和抗体介导的杀伤） 来抑制病毒复制。这些研究表明， 通过抗体招募的小分子具有可行的抗艾滋病毒活性， 并有可能启动 HIV 治疗的新范式。2020 年，Low 团队通过将神经氨酸酶抑制剂扎那米韦与高免疫原性半抗原2,4-二硝基苯（DNP）结合， 设计并合成了一种双功能小分子， DNP 专门针对游离病毒和病毒感染细胞的表面。该类分子抑制病毒释放的同时， 通过免疫介导清除游离病毒和病毒感染的细胞，对感染 100 倍 MLD50 病毒的小鼠进行鼻内或腹腔注射单剂量药物，可以根除 A 型和 B 型流感毒株的晚期感染[59]。近期研究发现， 抗生素分子 concanamycin A 可让免疫系统杀死被 HIV 感染的人体细胞[60]。DDX3 抑制剂可以让 HIV- 1 感染的细胞选择性死亡，进而耗竭病毒潜伏库[61] ，为根治艾滋病提供了新思路。3.3 多价结合——靶向病毒表面的非特异作用 细胞表面的糖链是细菌、病毒、 免疫细胞的接触点。病毒进入宿主细胞的过程涉及与不同细胞表面受体稳定但短 暂的多价相互作用。几种病毒的最初接触始于在细胞表面附着硫酸肝素蛋白聚糖， 最终导致病毒进入。已经开发出的广谱抗病毒药物如肝素或类肝素材料模拟细胞 表面糖负责最初的病毒附着， 如硫酸乙酰肝素（heparan sulfate）。高磺化金纳米 粒子具有广谱杀病毒性能。然而， 由于未知的清除机制和潜在的长期毒性是金纳 米颗粒成药性的不利因素。环糊精（cyclodextrins，CDs）是天然的葡萄糖衍生物， 具有一种刚性的环状结构，由α（1-4）连接的吡喃葡萄糖组成。磺化环糊精对HIV 具有可逆及特异的抑制活性。最近，英国曼彻斯特大学研究小组对天然葡萄糖衍生物环糊精进行磺化修饰 开发出了一种能够破坏病毒的外壳且对耐药性病毒也有效的新的广谱抗病毒分 子，其有望治疗 HSV 、RSV 、HCV 、HIV 和 ZIKV 等多种病毒感染[62]。基于多价相互作用的抗病毒药物，如柔性纳米凝胶，通过干扰病毒颗粒和阻 断与细胞受体的初始相互作用已经成为广谱抗病毒药物研究的有效策略。负电荷多硫酸盐可以结合 SARS-CoV-2 受体结合区域（ receptor binding domain，RBD）上的正电荷斑块（patches），阻止病毒与宿主细胞相互作用进而 抑制感染。 与肝素相比， 合成的线型聚甘油硫酸酯（linear polyglycerol sulfate ， 图 5）的抗病毒活性更高，且抗凝血活性较低[63]。巨大球状多价糖富勒烯、糖基化碳纳米管能抑制 EBOV、ZIKV 和 DENV 的 感染， 活性可达皮摩尔水平[64-66]。多价唾液化（sialylated）聚甘油对甲型流感毒 株（含耐药株）具有广谱抑制活性[67]。3.4 基于拓扑匹配的药物设计 IAV 颗粒表面均匀分布血凝素和神经氨酸酶。近 期，Nie 等[68]运用拓扑匹配（topology-matching design）的药物设计理念， 设计了 一种纳米颗粒抑制剂（纳米抑制剂， 图 6A）， 它与 IAV 病毒粒子的纳米拓扑结 构匹配，对血凝素和神经氨酸酶具有多价抑制作用， 可以在细胞外中和病毒颗粒， 阻断其附着和进入宿主细胞。病毒复制显著减少了 6 个数量级， 即使在感染24 h 后使用， 仍能达到 99.999%以上的抑制作用。 2020 年， 该团队用类似的思路， 发现了与 IAV 表面空间匹配的尖峰纳米抑制剂（spiky nanoinhibitor，图 6B），峰 值在 5～10 nm 之间的纳米结构与病毒粒子的结合明显优于平滑的纳米粒子，获 得的红细胞膜（erythrocytemembrane，EM）包覆的纳米结构可以有效地阻止 IAV 病毒粒子与细胞的结合， 并抑制随后的感染。 EM 包覆的纳米结构在细胞无毒剂 量下降低了99.9%的病毒复制[69]。2021 年，该课题组运用拓扑匹配设计理念，基于宿主红细胞膜设计了与病 毒状球面相匹配的碗状纳米结构（“纳米碗”，heteromultivalent nanobowl，Hetero- MNB，图 6C），可作为广谱病毒进入抑制剂。与传统的同多价抑制剂不同， 该 类异多价抑制剂由于协同多价效应和拓扑匹配的形状，其半最大抑制浓度为 32.4 ± 13.7 μg mL- 1 。在不引起细胞毒性的剂量下，可减少99.99%的病毒传播。由 于在 SARS-CoV-2 的 S 蛋白上也发现了多个结合位点， 因此， 异多价纳米结构有 望为开发一种有效的预防 CoV 感染提供新思路[70]。3.5 靶向病毒核酸 病毒 RNA 会折叠成复杂的 RNA 结构，在病毒的生命过程调 控中起重要作用，为开发抗病毒疗法的靶标提供了新的机会。很多研究已经发现 多种病毒的非编码区 RNA 结构可以调控病毒的翻译、复制以及稳定性，它们通常在相关病毒中高度保守[71-73] 。例如，黄病毒中 5' UTR 和 3' UTR 之间的分子内 RNA-RNA 相互作用促进基因组环化并帮助协调复制；HCV 5' UTR 内部核糖体 进入位点的结构对于翻译至关重要；并且 ZIKV 和其他黄病毒的 3' UTR 中的多 假性结构已显示出使 RNA 外切核酸酶 Xrn1 失速，从而产生了亚基因组黄病毒 RNA，有助于病毒逃避细胞抗病毒过程[74,75]。需要指出的是，与蛋白质类药物靶标相比， RNA 结构的动态性与复杂性为药物筛选增加了困难， 往往需要借助于高通量筛选。例如， SARS-CoV-2 的 RNA基因组含有 15 个独立的 RNA 调节元件。 研究者通过基于 NMR 的片段筛选， 从含有 768 个小分子的片段库中发现了 SARS-CoV-2 的 RNA 配体[76]。近日，新加坡科学家使用多种 RNA 分子结构探测方法以及 RNA-RNA 相互作用分析技术， 解析了 SARS-CoV-2 基因组 RNA 的二级结构信息和病毒-宿主之间的 RNA 相互作用；同时发现在 SARS-CoV-2 基因组 RNA 上广泛存在 2' -O- 甲基化修饰， 推测可能有助于新冠病毒逃避宿主免疫攻击，揭示病毒逃避宿主免疫的潜在机制[77]。G- 四链体是由 G-quartet 层叠而形成的 DNA 或 RNA 四链构象， 是最重要的非典型核酸二级结构之一， 因其独特的构象、重要的基因功能和生物学意义而备受关注，是很有前途的药物靶点[78]。中国科学院长春应用化学研究所曲晓刚团队使用多种生物物理技术和分子生物学技术，发现 SARS-CoV-2 基因组中存在 G-四链体结构 RNA ，证实 SARS-CoV-2 中的富 G 序列（位于 SARS-CoV-2 核衣壳 磷酸化蛋白 N 编码序列区域）可以在活细胞中折叠成稳定的单分子 RNA G- 四 链体结构。该 G- 四链体 RNA 可以被 G- 四链体特异结合配体 PDP（图 7）等识别 并稳定，进而影响 G- 四链体 RNA 的生物功能。因此，该 G- 四链体可能是抗 SARS- CoV-2 药物新靶点[79]3.6 超分子配位化学 病毒基因组的未翻译区域（the untranslatedregions，UTR） 包含多种保守和动态结构，这些功能性的 RNA 结构对病毒复制至关重要，为广 谱抗病毒研发提供了药物靶点。 然而， 计算机对接筛选对于具有内在柔性特征的 RNA 结构仍存在较大挑战。 研究者将体外 RNA 分析与分子动力学模拟相结合， 构建 SARS-CoV-2 基因组 5' UTR 关键区域结构和动力学的3D 模型，进而确定了 圆柱形金属超分子螺旋（[Ni2L3]4+ 、[Fe2L3]4+）对这种 RNA 结构的约束。这些纳 米尺寸的金属超分子螺旋分子可以与核酸结合，并且在细胞水平具有抗 SARS- CoV-2 等病毒复制作用[80,81]。3.7 核糖核酸酶靶向嵌合体 核糖核酸酶靶向嵌合体（ ribonuclease targeting chimeras，RIBOTACs）是降解 RNA 的新策略， RIBOTACs 基于小分子选择性结 合 RNA（特别是形成复杂的二级和三级结构的RNA）， 进而激活核糖核酸酶 L（ribonuclease L，RNase L）。RNase L 是一种在脊椎动物细胞中广泛表达、具有单链 RNA 内切活性的蛋白质。该技术已被用于靶向 SARS-CoV-2 的 RNA 基因组，抑制 RNA 的移码，并且募集细胞核糖核酸酶彻底杀死 SARS-CoV-2。该策略有望用于抗其他病毒药物研发[82]。3.8 反义核酸技术 反义核酸（antisense oligonucleotides）可以序列特异性地与靶 标 RNA 结合，实现高效的寻靶和抑制活性。近期，北京大学的研究人员构建了 一类靶向 SARS-CoV-2 包膜蛋白 RNA（E-RNA）和刺突蛋白 RNA（S-RNA）的 单链嵌合反义寡聚核苷酸， 通过在 2' 甲氧基修饰的反义核酸序列 5' 端缀合 RNase L 招募基团 2-5A，可实现有效的病毒 RNA 降解并抑制病毒增殖[83]3.9 核酸适配体技术 核酸适配体（nucleic acid aptamers）是一小段经体外筛选 得到的寡核苷酸序列（单链 DNA 或 RNA 分子），能与相应的配体进行高亲和 力和强特异性的结合[84] 。适配体已经在抗病毒药物开发方面 （含 SARS-CoV-2） 展现出巨大的潜力[85-87]。3.10 基于蛋白自组装的配体发现 动态组合化学（ dynamic combinatorial chemistry，DCC）融合了组合化学和分子自组装过程两个领域的特点， 开辟了使 用相对较小的库组装很多的物质的途径， 而不必单独合成每一个物质。早在 2003 年，研究者通过基于点击化学的蛋白模板诱导片段组装， 发现了高活性的 HIV 蛋 白酶抑制剂[88]。2008 年，研究者通过动态连接筛选（dynamic link screening，DLS） 开发了一种潜在的抗 SARS 药物，其亲核片段通过与醛抑制剂的可逆反应将亲核 片段指向蛋白质的活性位点。它们的抑制作用可以通过与荧光酶底物的竞争检测 到。有了这一概念， 与活性位点特异性结合的低亲和力片段在功能酶分析中迅速 被识别出来[89]。2021 年，基于 Knoevenagel 反应的蛋白模板诱导片段组装策略用 于 Enterovirus D68 蛋白酶抑制剂的发现[90]。总之，动态组合化学在抗病毒药物 发现领域仍具有广阔的前景。参考文献，点击查看《浅谈广谱抗病毒药物研发的普适性策略（一）》文末。

p 　　国家对医药行业发展大力扶持，国内生物类似药的发展也跟着呈上升趋势。然而，同欧美发达国家相比，中国生物类似药的研发实力仍存在巨大差距。为了改变这种状况，国家也从政策上大力扶持，以促进国内生物类似药研发。2015年2月，CFDA发布了“生物类似药研发和评估技术指南(试行)”，旨在促进生物制药行业的健康发展。该文件详细说明了生物类似药的申请程序，注册要求和类别。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201812/uepic/4a09859f-5ca1-4ba5-b4f6-b0bcc9be9e8c.jpg" title=" 1.jpg" alt=" 1.jpg" / /p p 　　生物类似药具有一些独特的特点。首先是他们的技术要求高，由于它们在细胞中生产，生物类似药的有效性和安全性可能因批次而异。因此，在开发过程中质量控制的关键技术至关重要。许多工艺步骤，包括细胞培养、产品加工和纯化、储存等，都会影响最终产品质量。因此，毫无疑问，监管机构，尤其是欧美的监管机构，在批准之前需要进行大量关于生物类似药的临床数据分析。这最终转化为到相对较高的生产成本。 /p p 　　生产成本的增加又带来新的问题，那就是投资风险。生物类似药的研制周期越长，成本越高，会带来较高的投资风险。一般来说，成功开发生物类似药需要8到10年甚至更长时间，投资或可高达2.5亿美元。相比之下，化学仿制药可能只需要3 - 5年，其投资成本可能在200万至300万美元之间。 /p p 　　目前，一大批生物制剂专利已经或即将到期，包括阿达木单抗，英夫利昔单抗，依那西普，利妥昔单抗，贝伐单抗，曲妥珠单抗等。本文中重点介绍上述品种的国内生物类似药的研发情况。 /p p style=" text-align: center " span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 1 国内生物类似药研发现状 /strong /span /p p 　　 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong Rituximab /strong /span /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 利妥昔单抗 /span ， span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 原研为Rituxan /span /strong ，最初由罗氏公司开发。1997年和1998年，它已获得FDA和EMA的批准。其主要适应症是非霍奇金淋巴瘤，慢性淋巴细胞白血病和类风湿性关节炎。目前，利妥昔单抗是非霍奇金淋巴瘤最有效的CD20靶向治疗方法之一。临床结果表明，联合利妥昔单抗和CHOP联合化疗可使侵袭性NHL患者的总体缓解率提高到83%，完全缓解率分别提高到76%。 /p p 　　到目前为止，欧盟已经批准了两种利妥昔单抗生物类似药，包括Celltrion Healthcare的Truxima和Sandoz的Rixathon和Riximyo。 /p p 　　2008年4月21日，罗氏的Rituxan正式进入中国市场。与此同时，一大批中国生物制药公司正在加大竞争力度。最值得注意的是复星医药旗下的复宏汉霖。复宏汉霖的重组人鼠嵌合抗CD20单克隆抗体注射液，主要适用于非霍奇金淋巴瘤、类风湿性关节炎的治疗。在2018年1月29日被CDE纳入优先审查，有望成为国内首个生物类似药。 /p p 　　此外，信达生物与美国制药巨头Eli Lily共同开发IBI301。其临床前数据表明，在所有的主要特征，包括初级和更高级结构、异质性、生物活性和与工艺相关的杂质都与Rixutan高度相似。在其临床前药理学研究中，其药代动力学和毒性特征也显示出与Rituxan的药代动力学和毒性特征非常相似。11月13日信达生物宣布IBI-301获得国家药品监督管理局(NMPA)受理的新药上市申请。 /p p 　　神州细胞工程有限公司，海正药业，他们的产品也都已进入三期临床试验阶段。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " Adalimumab /span /strong /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　阿达木单抗，原研药为Humira /span /strong ，是Abbvie的明星产品。它连续几年成为畅销药品，于2002年12月31日获FDA批准，并于2003年9月8日获得EMA批准。目前，其主要适应症为类风湿性关节炎和强直性脊柱炎。 /p p 　　目前，美国FDA已经批准了两种阿达木单抗生物类似药，包括Amgen的Amjevita和Boehringer Ingelheim的Cyltezo。同时，有四个在欧盟获得批准，除了Amgevita和Cyltezo，Amgen的Solymbic和Samsung Bioepis的Imraldi也被接受。 /p p 　　2012年2月26日，Humira进入国内市场。目前，近20家中国制药公司在研发此品种。其中，信达生物、百奥泰和海正的已经进入上市申请阶段。 /p p 　　8月17日，百奥泰的阿达木单抗注射液(BAT1406)的上市申请获得CDE承办受理，海正药业于9月14日发出公告的阿达木单抗(HS016)上市申请以特殊审批程序获国家药品监督管理局受理。信达生物11月12日宣布,国家药品监督管理局(NMPA)已受理其在研药物IBI303的新药上市申请(NDA) /p p 　　复宏汉霖于2017年4月29日，它宣布其阿达木单抗生物类似药也被批准在国内进行临床试验。值得注意的是复宏汉霖并没有将目标定位在强直性脊柱炎的指征，相反，它适用于牛皮癣。君实生物的UBP1211、正大天晴的TQ-Z2301。通化东宝、百泰生物、康宁杰瑞、华海药业、齐鲁药业等20多家企业处于临床前到临床II期阶段 /p p 　　Humira在2017 年的全球销售额为 184.3 亿美元。但中国市场的总收入仅为3100万美元，不到全球市场的0.01%。这主要是因为其成本相对较高。然而，随着国内仿制者的出现，预计将会很快就会在看到阿达木单抗的使用量的激增。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " Infliximab /span /strong /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　英夫利昔单抗，原研药品牌为Remicade /span /strong ，由Janssen开发是另一种流行的抗TNF-α单克隆抗体。它分别于1998年8月和1999年8月由FDA和EMA批准。目前，它主要用于治疗炎症相关疾病，包括克罗恩病，溃疡性结肠炎，类风湿性关节炎，强直性脊柱炎，银屑病性关节炎和斑块状银屑病。 /p p 　　到目前为止，美国仅批准了两款英夫利昔单抗生物类似，分别是Pfizer的Inflectra和Samsung Bioepis的Renflexis。EMA已批准三款，包括Pfizer的Inflectra，Celltrion的Remsima和Samsung的Flixabi。 /p p 　　2017年5月17日，Remicade被CFDA正式批准上市。从那时起，国内该品种生物类似药的研发一直在追赶。上海百迈博制药CMAB-008已申报生产并拿到批件。海正药业的HS626处于三期临床，在这场比赛相对另领先，其余在临床早期阶段 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " Etanercept /span /strong /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　依那西普，原研药是Enbrel /span /strong ，最初由Amgen开发，是重组人TNF-α受体和人IgG-Fc的融合蛋白，于1998年11月和2000年2月分别获FDA和EMA批准。它主要用于类风湿性关节炎，幼年型类风湿性关节炎，银屑病性关节炎，斑块状银屑病和强迫性脊椎炎。 /p p 　　目前，FDA已批准Sandoz的仿制药Erelzi，EMA已批准SamsungBioepis的Erelzi和Benepali。 /p p 　　Etanercept于2010年2月26日进入中国市场，与本文中的其他生物制剂相比，相对较晚。然而，它的中国模仿实际上很早就出现了。中信国健的益赛普在2005年上市，另外是上海赛金的强克和海正药业的安佰诺也先后获得批准。从这个角度来看，这些模仿者并不是真正意义上的生物类似药。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " Trastuzumab /span /strong /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　曲妥珠单抗，商品名赫赛汀 /span /strong ，最初由罗氏公司的Genentech开发。它分别于1998年9月和2000年8月首次获得FDA和EMA的批准。 /p p 　　它是抗HER2单克隆抗体，通过与HER2连接，可以阻断人表皮生长因子与HER2的结合，从而减少癌细胞的生长。目前，其主要适应症包括乳腺癌，转移性胃癌和过度表达HER2的转移性食管癌和胃癌。 /p p 　　到目前为止，只有两种曲妥珠单抗生物类似药已进入市场。Mylan和Biocon公司两家公司共同开发的Ogivri Samsung Bioepis的Ontruzant由EMA批准。 /p p 　　曲妥珠单抗于2002年9月5日获得CFDA批准。目前，一大批中国制药公司正争相成为第一个将国内版本推向市场的公司，9月份，国家食药监局受理了三生国健药业递交的注射用重组抗HER2人源化单克隆抗体(赛普汀)的上市申请。复星医药旗下复宏汉霖的HLX02处于国内三期领先地位，并且大举进军海外市场开展海外临床试验，嘉和生物药业有限公司和安科生物也都进入了三期临床研究。 /p p 　　赫赛汀在2017年的总销售额为74.41亿美元，去年在全球15大最畅销药品中排名第五。与此同时，它是中国最畅销的抗肿瘤药物，2016年收入为1.59亿美元，约占其全球市场的2.8%。 /p p 　　 strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " Bevacizumab /span /strong /p p strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 　　贝伐珠单抗，原研药品牌为Avastin /span /strong ，是由罗氏公司开发的抗人血管内皮生长因子(VEGF)的人源化单克隆抗体。它分别于2004年2月26日和2005年1月12日获得FDA和EMA的批准。通过抑制肿瘤血管生成，它干预肿瘤的营养供应，从而使肿瘤生长受到抑制。目前，该药主要用于治疗转移性结肠直肠癌、非小细胞肺癌以及其他转移性癌症。 /p p 　　到目前为止，该品种市场上只有一种生物类似药Mvasi(bevacizumab-awwb)，由Amgen和Allergan共同开发，在美国和欧盟上市。 /p p 　　Avastin于2010年2月26日进入中国市场。目前，国内贝伐珠单抗生物类似药的研发，齐鲁制药和信达发展最快。齐鲁制药QL1101的上市申请已经获得受理，信达的IBI305在进行三期临床试验。复星医药、恒瑞、北京天实都有产品进入三期临床试验。 /p p style=" text-align: center " strong span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 2 中国生物类似药发展中的思考 /span /strong /p p 　　越来越多的海外留学人才归国，促使国内生物制剂的研发迅速成熟。与此同时国家一系列的支持性政策进一步推动了国内生物类似药的发展。 /p p 　　道阻且长，行则将至。生物类似药的发展，国内药企必须解决一系列新的挑战才能有所突破。 /p p 　　第一个亟待讨论的问题，就是定价和销售策略。生物类似物与化学药仿制药不同，其降价幅度一般不会很大。因此，如何提高销量，定价就成为生物制药市场的一个关键问题 /p p 　　另一个重要的问题是如何与原研药竞争。因为生物类似药不同于化学药，可以进行一般的可互换。如何才能被纳入国家医保，将成为影响生物类似药发展的重要问题。 /p p 　　最后2018年4月12日，中国对进口抗癌药物实行零关税，可以预见的是，国外原研药在国内的价格将进一步下降。在这样情况下，国内药企对于生物类似药的投入热情能否延续，这点是值得观察的。 /p

八月二十五日，施工人员在三沙市永兴垃圾污水处理项目开工仪式上。 　　重大工程先启动保护规划再发力 　　三沙倾力卫护一片洁净南海 　　地级海南省三沙市挂牌成立刚“满月”，这个中国最南端的城市，再传新动作。 　　8月25日，在三沙市的政府驻地西沙永兴岛，海南三沙市永兴岛污水处理及管网工程、西沙群岛垃圾收集转运工程正式动工建设 与此同时，《海南省海洋环境保护规划(2011-2020年)》近日获海南省政府批准实施。重大工程、保护规划“双箭齐发”，意味着中国对三沙海洋环境的保护工作正全面提速。 　　6个岛屿建垃圾收集房 　　污水处理厂与垃圾收集转运工程，是三沙市开工建设的第一个基础设施项目。 　　据了解，项目建设周期为一年。污水处理及管网工程主要建设污水处理厂一座，配置中水处理及回用设备一套，铺设污水收集进水管网7.8公里，中水回用管网11.2公里。处理后的水可用于冲厕、清洗打扫、绿地浇洒等城市杂用水及景观用水等。 　　垃圾收集转运工程将在永兴岛建设一座垃圾转运站、8座垃圾收集房，在赵述岛、北岛、羚羊礁、鸭公岛等岛屿建设6个垃圾收集房，同时配置相关设施及道路绿化等。该项目完工后，西沙群岛上述岛屿垃圾将做到日产日清。 　　永兴岛是三沙市政府驻地，人口不足1000人。全岛面积2.1平方千米，是西沙群岛中最大的岛屿。 　　“三沙市旅游资源丰富，不能光考虑本地人口，还应当注意到旅游人口。”北京大学环境科学与工程学院郭怀成教授在接受本报记者采访时指出，永兴岛的自然人口和旅游人口将会越来越多。岛屿四面环水，城市生活污水、垃圾等废弃物的处理问题需要重视。 　　保护西南中沙海域水质 　　值得关注的不只是重大工程，海南国际旅游岛建设的海洋生态环境保护要求以及西、南、中沙海域岛礁的生态保护等促使了新规划出台。 　　《规划》明确了一些环境质量指标。例如，“到2015年，海岸基本功能区海域水质达到或优于二类水质标准的面积达90%以上，维持近海基本功能区及西、南、中沙海域水质的优良状况”。 　　“三沙市的规划从未来的角度考虑，具有前瞻性，值得赞赏。”郭怀成长期关注水体污染控制与治理课题，并参与政府环境规划。他希望三沙市能够在高起点上进行环保规划。 　　《规划》还在三沙海域岛礁的生态保护上提出了“特别要求”“重点保护海岛岛体、海岛自然资源和海岛生态系统。防止海岛岸线侵蚀，稳固海岛形态，对受侵蚀、面积减小的岛礁通过必要的工程措施增加岛礁陆域面积”。 　　中国环境监测总站研究员、中国工程院院士魏复盛接受本报记者采访时指出，南海在中国近海是环境比较好的，“规划有个保护目标，能够有效地促进陆地经济在发展过程中注意保护海岸生态环境和提升经济发展质量。” 　　南海环境监测点有望建立 　　“南海的渔业等生物资源、油气等矿产资源很丰富，如果不合理规划和控制环境污染，后续的发展将会受到影响。”魏复盛说。 　　据中国国家海洋局统计，南海至少蕴藏有367.8亿吨石油、7.5万亿立方米天然气，经济价值高达数十万亿元，能源储备可与“中东油库”波斯湾媲美。 　　近期，我国开发南海海洋资源的活动日趋频繁。首座深水钻井平台5月开钻成功，7月，海南组织渔船船队赴南沙捕鱼作业，对岛礁周边鱼群资源进行探测。 　　海南省水产研究所的调查结果显示，三沙渔业资源的潜在捕获量约为500万吨，每年的可持续捕获量在200万吨，而目前海南每年的捕获量仅为8万吨左右。 　　“相比陆地水循环，人类活动对海洋水资源影响相对小，但应该警惕对海洋资源的破坏。”魏复盛认为，那些垃圾等固体废弃物等对海洋资源的质量、品类将造成很大的破坏。 　　魏复盛表示，中国或将很快在南海建立海洋环境监测点，加强对三沙海洋环境的监测。 　　郭怀成建议，除了在工程和规划上作出努力之外，在海洋环境管理及法规政策的制定上还应当加快步伐。

生物类似药是指在质量、安全性和有效性方面与已获准注册的参照药具有相似性的治疗用生物制品。由于生物类似药可以更好地满足公众对生物治疗产品的需求，有助于提高生物药的可及性和降低价格，许多国家都十分重视生物类似药的研发和管理工作，全球已有20余个国家或组织制定了生物类似药相关指南。 仪器信息网网络讲堂于11月16日举办“生物类似药物研发及评价技术”网络主题研讨会，诚邀董立厚（军科正源（北京）药物研究有限责任公司）、刘冲（新疆维吾尔自治区药物研究所）、史俊霞 液相色谱应用开发工程师（东曹）、孙佳楠（赛默飞）、张歆媛（岛津）等5名老师从多方面普及生物类似药物研发等阶段的知识及技术。本期会议视频已上线，具体报告日程如下：视频地址：http://www.instrument.com.cn/webinar/Meeting/subjectInsidePage/2189近期会议推荐：“化妆品质量安全评价及检测技术”网络主题研讨会 http://www.instrument.com.cn/webinar/Meeting/subjectInsidePage/2191“RoHS相关政策及检测进展”网络主题研讨会 http://www.instrument.com.cn/webinar/Meeting/subjectInsidePage/2233“精准医疗与即时检验POCT技术的临床应用与发展”网络主题研讨会 http://www.instrument.com.cn/webinar/Meeting/subjectInsidePage/2241“大气/烟气挥发性有机物技术”网络主题研讨会 http://www.instrument.com.cn/webinar/Meeting/subjectInsidePage/2251“润滑油检测技术”网络主题研讨会 http://www.instrument.com.cn/webinar/Meeting/subjectInsidePage/2256

5月23日，央视《每周质量报告》对紫砂煲欺骗消费者的行为进行了报道。5月30日，该栏目又以“紫砂真相”为题，报道了有些宣称宜兴原矿紫砂的茶具，居然是用普通泥巴添加化工原料做成的“化工壶”。随后记者走访扬州市场发现，扬州市街头甚至大超市，都有低价垃圾壶充斥市场。诸如紫砂壶、紫砂杯、紫砂炖盅等产品十分普遍。在荷花池茶叶市场，几乎每家茶叶店都可以找到紫砂壶、紫砂杯，价格一般在数百元左右。专家指出，市面上价格低于100元的紫砂壶紫砂含量很少，基本不是正品。 　　在一家茶叶店，记者提出想买紫砂壶送人，营业员向记者推荐了一款400多元的壶。她将壶装满了水，让水顺着壶嘴流出，称水流顺畅，就表明这个壶做得好。记者称要将壶送给一位懂壶的人，营业员立即正色道，送给懂壶的人，就不能买这样的壶了，至少要几千元。她告诉记者，紫的、黑的价格要贵，红的便宜些，“红泥价格便宜，宜兴到处都是。” 　　记者将壶翻转过来，看壶底刻章。营业员好心提醒，买壶没必要太在意壶是谁做的，紫砂壶界不排除大师请人代工的现象。“真正高手出手，至少上万，做得好的，价格更是惊人。”随后，记者来到另外一家店面的门口放了不少紫砂杯，打出的招牌是“宜兴紫砂杯，10元/只”。在某超市，一款由宜兴市清香益人陶瓷工艺厂生产的“宜兴紫砂杯”，原价19.9元，现价只要10.9元。还有一种“海纳百川紫砂杯”，售价25.9元。 　　一位业内人士告诉记者，当下除一些高档紫砂壶外，百元以下的紫砂制品基本是采用类似紫砂泥的陶土制成，而相对贵点的可能含紫砂，但是量也不会太多。“如果容量5L的容器内胆都采用纯紫砂，没个几千块买不来。”对于紫砂本身，目前并没有一个量化的成分标准，无法通过检验辨别真假。消费者在选购时，首先是不能贪便宜，其次是要多观察。一般紫砂产品摸上去，手感应该有细沙的感觉，不可能太滑。

8月23-24日，863计划海洋技术领域办公室在北京组织召开了“十一五”海洋生物类重点项目总结验收会，“新型海洋生物制品研究开发”等9个项目验收会通过专家组验收。 　　通过“海洋生物功能基因工程产品关键技术研究”重点项目的实施，建立了海葵强心肽、重组鲨肝刺激物质类似物、低温脂肪酶等10余种海洋生物基因工程产品中试规模制备技术 基本完成了重组鲨肝刺激物质类似物等3个基因工程产品的临床前成药性评价研究。 　　通过“海洋微生物产品的中试研究”重点项目的实施，开展并完成了2个海洋微生物来源抗肿瘤候选药物、2个具有工业和医用价值的海洋微生物酶以及2个新颖海洋微生物来源农用制剂的中试和主要的临床前研究。 　　通过“新型海洋生物制品研究开发”重点项目的实施，开发了高效制备海藻寡糖、高活性壳聚糖等生产工艺技术，建成了千吨海洋生物农药生产线 以海藻多糖为主要原料研制成功了植物空心胶囊，并获得SFDA颁发的生产批文 以海洋功能性壳聚糖为原料研制获得3个医用止血产品。 　　通过“海洋滩涂耐盐植物开发及集成应用技术研究”重点项目的实施，筛选培育了适于黄河三角洲和苏北滩涂种植的耐盐能源植物、药用植物、蔬菜和饲用植物新品种(品系)21个 建立了30种耐盐植物栽培的技术规程，在黄河三角洲及苏北建立8300亩以上示范区。 　　通过“海洋水产品加工新技术与设备”重点项目的实施，研发了海洋水产品的低温/组合干燥、以低值鱼为原料生产高品质冷冻鱼糜、养殖大黄鱼生物脱脂、低值鱼蛋白酶组合深度水解、参贝类养殖海珍品即食产品的质构控制等关键技术，建立了产业化示范生产线11条。 　　通过“深远海极端微生物及其基因资源开发关键技术”重点项目的实施，初步具备了深海浮游微生物的富集采样能力 研发了实验室高压培养系统 获得了一批宝贵的极端酶和多糖资源 初步建立了一套深海未培养微生物环境基因组研究方法。 　　通过“抗肿瘤海洋药物研究开发”、“抗心脑血管系统海洋药物研究开发”、“抗神经系统疾病海洋药物研究开发”三个重点项目的实施，完成了候选药物971的I期临床研究、D-聚甘酯注射液I期临床重复试验研究、916的Ⅱ期临床研究、注射用海参多糖Ⅲ期临床研究，以及YCP全部临床前研究、抗心律失常候选药物A1998和抗血栓药物GFP的主要临床前研究，已提交K001的III期临床试验计划，推动了我国海洋药物的研发，但由于海洋新药开发难度大、周期长、不可控因素多等原因，海洋药物研发进度和实验结果与预期仍有一定差距。 　　针对这些项目的进展情况和管理经验，专家组成员建议“十二五”应进一步加强项目内各课题组间的交流合作，强化牵头单位和牵头人对项目实施的管理职责，在确保各课题研发任务完成的同时，提升项目层面的系统集成能力。

可比性研究|使用HR-MAM方法对原研药与其生物类似药进行可比性研究关注我们，更多干货和惊喜好礼可比性研究生物类似药通常指与参考分子（原研药）高度类似的治疗性生物产品1。世界各地的监管机构，如美国食品药品监督管理局(United States Food and Drug Administration, USFDA), 欧洲药品管理局（European Medicines Agency, EMA）和中国市场监督管理总局（National Medical Products Administration, NMPA）均发布了指导规则，要求证实生物类似药与原研药之间在药品安全性/功效性等方面的相似度1。 随着高分辨质谱（HRAM MS）逐步成为创新药和生物类似药表征必不可少的分析工具，在氨基酸序列确认和化学/翻译后修饰等鉴定中，均起到不可或缺的作用2。2015年，Rogers 等2在公开发表的文献中提及可将基于肽图分析的Multi-Attribute Method (MAM) 工作流程用于多重PQA的监控与定量，与此同时还可进行新组分检测（new peak detection）2，进而提供更多产品质量相关信息，并提高生产率。由此，MAM在质量控制（QC）实验室中替代传统分析手段的潜力，引起越来越多生物制药行业和监管机构越来越多的关注2 3。2019年，US FDA的Rogstad等在发表的文献中提及可以考虑使用MAM替代一些常规的QC分析方法4。图1 赛默飞HR-MAM工作流程（点击查看大图）本期我们介绍赛默飞HR-MAM (图 1)工作流程的zui新进展：对未经处理/不同强制降解条件下的生物类似药与利妥昔原研药进行可比性研究，对多个选定PQA进行有效的鉴定、相对定量和监控，以减少分析实验所花费的时间，并提高生产率。 多PQA选定助力原研药与生物类似药结构相似性确证： PQA通常在药物安全性与有效性方面起到重要作用，基于肽图分析表征可以选择适合的PQA，如：糖基化（glycosylation），脱酰胺化（deamidation），琥珀酰亚胺化（succinimide formation），异构化（isomerization），氧化（oxidation），重链C-末端赖氨酸截断（C-terminal lysine truncation），N-末端焦谷氨酸环化（N-terminal pyroglutamate）。 所有被选中的PQA可在BioPharma Finder软件中创建为一个包含该PQA肽段保留时间/质荷比/价态/所有电荷态等信息的工作簿，随后此工作簿被导入至变色龙软件中，用于后续的MAM数据分析。使用HR-MAM工作流程，即使是含量约0.1%的组分，也可通过高分辨质谱平台提供的数据获得高重现性的定性与定量结果。在本文的研究中，选定了下列PQA来证实HR-MAM工作流程用于目标肽段定量的能力，进而评估利妥昔原研药与生物类似药之间的结构相似性：重链 N55 脱酰胺化和琥珀酰亚胺化 重链 N388和N393 脱酰胺化 重链 N388和N394 琥珀酰亚胺化 重链 M256 氧化 重链 D284 异构化 重链N-糖基化 重链C-末端赖氨酸截断和轻/重链N-末端焦谷氨酸环化。 PQA相对定量兼具稳健性与重现性，MAM展现独特潜力： 由于C-末端赖氨酸截断与N-末端焦谷氨酸环化等末端修饰会影响单克隆抗体产品的电荷异质性5，所以在结构可比性研究中需要对其进行评估。以本文中涉及的PQA为例，利妥昔原研药和两个不同批次的生物类似药，其重链C-末端赖氨酸截断与轻/重链N-末端焦谷氨酸环化的比率均在可比范围内（图2）。值得注意的是，所有定量结果三针技术重复的变异系数（coefficients of variation, CVs）均小于2%，显示了优异的重现性。图2. 利妥昔原研药/生物类似药在未经强制降解/强制降解条件下常见末端修饰相对定量结果。图中每个条柱均代表三针技术重复的平均值，误差线代表三针技术重复的标准偏差（下同）。（点击查看大图） N-糖基化可能会影响单克隆抗体产品的免疫原性、药效、抗体依赖的细胞介导细胞毒性（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC）、补体依赖的细胞毒性（complement-dependent cytotoxicity, CDC）、血清清除率和药代动力学5。在生物类似药的开发和生产过程中，为了确保产品的安全性和有效性，N-糖基化必须被密切监控并严格控制。对于生物类似药开发厂商而言，生物类似药的糖基化异质性分布必须与其原研药具有可比性，以避免扩大临床试验的规模。 在本方案涉及的实验所用的原研药和生物类似药样品中，总共鉴定到15种不同糖型，这些糖型的相对含量在不同样品之间并没有明显区别（图3）。与传统N-糖链定量方法相比，未发生糖基化修饰的肽段相对含量也可在HR-MAM工作流程中同时被监控，这是传统方法无法做到的，展现了其独到价值。对所有糖型的相对定量结果同样显示了优异的重现性和灵敏度。例如，对于相对含量约0.3%的糖型A2S1G0F ，其技术重复之间的CVzui新应用方案，码上下载想要深入了解详细实验结果、参数设置、MAM优势，立即下载zui新Application Note相关阅读• 客户案例｜辉瑞在多个实验室同时部署MAM• HR Multi-Attribute Method Workflow 化繁为简,有规可循|为生物制药表征和质量控制保驾护航 参考文献：[1] US Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), Center for Biologics Evaluation and Research (CBER). Scientific Considerations in Demonstrating Biosimilarity to a Reference Product. Guidance for Industry. April 2015. [2] Liu, H., et al. A high-resolution accurate mass multi-attribute method for critical quality attribute monitoring and new peak detection. APPLICATION NOTE 72916. [3] Rogstad, S., et al. Multi-Attribute Method for Quality Control of Therapeutic Proteins. Anal. Chem. 2019, 91, 14170−14177.[4] US Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research (CDER), Center for Biologics Evaluation and Research (CBER). Scientific Considerations in Demonstrating Biosimilarity to a Reference Product. Guidance for Industry. April 2015. [5] Beck, A., et.al. Characterization of Therapeutic Antibodies and Related Products. Anal. Chem. 2013, 85,715−736. 如需合作转载本文，请文末留言。扫描下方二维码即可获取赛默飞全行业解决方案，或关注“赛默飞色谱与质谱中国”公众号，了解更多资讯+了解更多的产品及应用资讯，可至赛默飞色谱与质谱展台。https://www.instrument.com.cn/netshow/sh100244/

目前的研究旨在用脉冲蛋白取代肉蛋白，并确定植物蛋白-肉类似物商业化的加工方法的适用性。采用碱性/等电沉淀法从青豌豆、马豌豆和豇豆中提取脉冲蛋白浓缩物(PPCs)。对PPCs进行物理化学、形态、GC–MS和热分析。将青豌豆、马豌豆与豇豆的PPCs按（20:20:20）T1、（30:15:15）T2和（15:20:15）T3的比例制备油炸肉丸。所有PPC都表现出塌陷和褶皱的表面。马豌豆蛋白浓缩物表现出最高变性温度（Td°C）89.50 ± 2.57和焓（ΔH（J g−1））（287.73 ± 9.64），与其他样品相比，迭代出更好的热稳定性。FTIR光谱表明，羊肉油炸丸子存在O–H伸缩宽带（3321.22 cm−1）和植物油炸肉丸（3288.28 cm−1），而PPC在（3275–3278）cm−1区域）。在1600–1700区域观察到两条C-H带和PPCs的主要二级结构成分，如α-螺旋、β-片状、β-转弯和无规螺旋 cm−1.酰胺N–H弯曲（1400–1500 cm−1）和C–O伸缩带（1000–1300 cm−1）。以20:20:20（T1）的比例配制的植物性油炸肉丸在感官特性（颜色、质地、多汁性和整体可接受性）、颜色特性（L*和b*）以及质地特性（如硬度、粘附性和内聚性）方面与羊肉油炸肉丸密切相关。这些发现将开辟这一领域的新研究视野，并为肉类替代品的商业化铺平道路，这将减少对环境的影响和碳足迹。Penchalaraju，M，Poshadri，A，Swaroopa，G等人。利用印度脉冲蛋白制作植物性模拟肉III：肉类似物的物理化学表征、FTIR光谱和质地特征分析。国际食品科学技术杂志2023。https://doi.org/10.1111/ijfs.16828• 文章来源：Leveraging Indian pulse proteins for plant-based mock meat III: physicochemical characterisation, FTIR spectra and texture profile analysis of meat analogue（利用印度脉冲蛋白制作植物性模拟肉III：人造肉的物理化学表征、FTIR光谱和质地特征分析）. Wiley Online Library供稿：符 斌

据英国广播公司(BBC)6月24日报道，美国科学家将普通沙子涂上便宜且来源丰富的氧化石墨，使其变身为“超级沙”，能有效地除去水中的汞和染料分子，普通沙子过滤10分钟就会饱和，而“超级沙”吸收重金属可超过50分钟，净水能力提高了5倍。这种成本低廉的实用产品可广泛应用于发展中国家，相关论文发表在美国化学学会出版的《应用材料与界面》杂志上。 　　参与此项研究的美国莱斯大学的高薇(音译)表示，当水被病原体、有机污染物和重金属离子污染时，普通粗沙的净化效率比细沙低，但细沙存在过滤速度慢的缺点。他们将具有很强吸附能力的氧化石墨同普通粗沙混合在一起放入水中，然后将混合物加热到105摄氏度，待水挥发掉，就得到了这种水流通过量大、净水效率更高“超级沙”。 　　该研究的领导者、莱斯大学的普利克尔阿加延表示，为了使该“超级沙”能有针对性地吸附污水中的某些有机污染物或特定金属，可对氧化石墨进行修改。 　　澳大利亚莫纳什大学的梅耐克马巨德表示，这项技术的另一优势是便宜，“超级沙”的性能可与市面上的活性炭相媲美，但却使用的是便宜且储量丰富的氧化石墨，如果能在室温下制造，会更具成本优势。 　　世界卫生组织(WHO)表示，撒哈拉以南非洲国家仅有60%的居民、大洋洲仅有50%的居民能方便地获得饮用水。用沙子净化水已有6000多年的历史了，这种涂了氧化石墨的“超级沙”有望让这些国家和地区的人民更方便地获得饮用水。

近日，有关工业明胶非法使用的报道一波接着一波。16日，由于涉嫌使用铬超标的空心胶囊，阿莫西林、诺氟沙星、羚羊感冒等13类受检药物被暂停销售。烟台该类药物是否还存在销售?市民对此反应如何?YMG记者走访发现，市场上已经看不到与被公布厂家、批号相一致的阿莫西林等药物，但批号和产家不同的同名药物仍在销售。 　　现场调查：不同厂家的阿莫西林仍在售 　　“没有蜀中制药的阿莫西林了。”在北马路联生药房，一位销售人员称，药铺一直没有售卖蜀中制药生产厂家的阿莫西林和诺氟沙星，而一般用哈药生产的。记者发现，该药铺售卖的阿莫西林消炎药有很多的生产厂家，包括山东鲁抗、长春海外药业、吉林通化等。 　　随后，记者走访了火车站附近的立健、金康、本草等大药房，得到几乎同样的答复。 　　北马路一家药房销售人员称，自己在网上了解到阿莫西林等药物胶囊铬超标，就第一时间对存有的被公布的药物做下架处理，并将其退回厂家。在走访过程中，记者没有发现和国家食品药品监督管理局公布的同批号、同生产厂家的阿莫西林等药物，但与被公布涉嫌铬超标同名的不同批号、不同厂家药物仍在销售。 　　公众声音：药用胶囊铬超标市民期盼安稳药 　　在北马路汽车站，来自湖北的杨先生近日出差至烟台，期间曾因感咽喉不适，服用过从药店购买的阿莫西林胶囊。“太坑爹了，谁知道里面是否含有毒素?”杨先生得知吃过的药可能含有重金属，非常愤怒，称希望监管部门加大监管力度，让老百姓吃上安稳的药。 　　在火车站附近一家杂货店，一个年轻小伙称已经知道阿莫西林、羚羊感冒胶囊等药中铬金属超标。“我吃过，而且还给老爸买过，一家人都吃过。”他称想起自己吃过这类药，对此倍感恶心，直想吐。 　　北马路汽车站旁餐厅工作的王大爷则表示，药本身是用来治病，现在吃了反而中毒，太缺德。采访中，不少市民已经知道类似药物胶囊铬超标，希望国家有关部门加强监督和管理，让老百姓吃上放心药。 　　市药监局：紧急下发通知停售有毒胶囊 　　昨日下午两点，记者致电市食药监督管理局办公室，就药用胶囊铬超标一事进行采访。一位工作人员称，已接到上级药监部门的通知。当天，市食品药品监督管理局已将此通知转到各县市区相关部门、药品生产和销售企业。 　　据悉，烟台食药监督管理局对此事非常重视，将组织精干力量奔赴各大胶囊生产厂家进行排查。一位工作人员告诉记者，“一旦有新的进展，会第一时间通过媒体告知市民。” 　　医生说法：铬元素超量摄入可致肾衰竭 　　据悉，涉嫌铬超标的药物胶囊取材于工业废弃皮革、废料，皮革的加工过程中使用了含铬的鞣制剂，往往会导致铬残留，使用这种材料加工的工业明胶，重金属铬的含量一般都远远超过食用上限2mg/kg。 　　“药片胶囊应使用食用明胶，一般取材于动物的骨头、皮毛，具有可食用性。”烟台毓璜顶医院药剂科副主任医师赵泉告诉记者，人体本来含有微量的铬、铜、锌、硒等元素，但是相互之间在一定的量上达到平衡，才可维持机体的正常运转。一旦其中任何元素过多或者过少，都会引起一些疾病。 　　“目前所谓‘蓝矾胶囊’(即铬超标胶囊)多含三价铬和六价铬，其毒素巨大。”赵泉告诉记者，长期摄入三价铬导致体内铬元素失去平衡，易破坏体内抗氧化系统，易引起高血压、糖尿病、乃至肿瘤。而六价铬毒性更超三价铬百倍，长期摄入易引起皮炎、肺炎、气管炎，严重者将会破坏人体消化系统，致胃溃疡、肠道溃疡、肾衰竭乃至癌症。 　　“铬中毒多见于慢性中毒，很少发生急性中毒事件。”赵泉称，市民不必过于担心，慢性中毒是个很漫长的时间，一般少量摄入铬元素不至于引发疾病。急性铬中毒事件一般不会发生。 　　延伸阅读：铬中毒表现及处理措施 　　据赵泉介绍，急性中毒分为吸入性中毒和口服性中毒。吸入性中毒临床表现为哮喘，呼吸道炎症 而口服性中毒临床表现为恶心、呕吐、腹泻、便血，严重者会休克、肝功能衰竭，神经上表现为异常惊厥和亢奋。“对于吸入性铬中毒，应尽快脱离有毒环境，呼吸新鲜空气。”对于口服性中毒，也有不少法子可以急用。“喝牛奶、蛋清、有条件的口服氢氧化铝明胶，严重者应立即去医院，可用1%的硫代硫酸钠洗胃。”赵泉建议市民，一旦发生疑似铬中毒情况，除采取紧急措施之外，应立即到医院就诊。

大家好，本周为大家分享一篇来自Angewandte Chemie - International Edition的文章：Infrared Multiphoton Dissociation Enables Top-Down Characterization of Membrane Protein Complexes and G ProteinCoupled Receptors[1]，文章的通讯作者是牛津大学化学系的Carol V. Robinson教授。　　非变性质谱(Native MS)是结构生物学中一个成熟的工具。在电喷雾电离过程中使用非变性缓冲液可以保存多组分蛋白质复合物之间的非共价相互作用，以及它们的配体、辅因子或其他结合蛋白。它可以用于探究蛋白质复合物的相互作用和功能，因为结合事件导致质量变化，可以在质谱仪中跟踪和剖析。然而，由于膜蛋白的疏水性，使得它们在传统的非变性质谱缓冲液中不溶且容易聚集，因此在非变性质谱中呈现出独特的挑战。目前采用的方法是将蛋白质复合物溶解到膜类似物中，例如：去垢剂、纳米脂质盘、两性聚合物等，再将这些膜类似物通过碰撞激活去除。其中去垢剂是应用的最广泛的一种。然而由于碰撞激活的能量在应用中受到限制，该方法并不能在质量分析前很好地去除去垢剂。此外，在非变性质谱条件下，键的断裂也受到非共价相互作用强度的影响(例如蛋白质-蛋白质、蛋白质-去垢剂剂以及去垢剂胶束内的相互作用)。　　基于光子的方法，如紫外光解离(UVPD)和红外多光子解离(IRMPD)已被证明有利于可溶性蛋白质及其复合物的Top-Down质谱分析。与此同时，基于光子的膜蛋白Top-Down模式的应用正在兴起。原理上，激光束路径中的离子被连续地驱动到振动激发态。因此，在基于光子的方法中，能量储蓄通常与前体离子的电荷状态和分子量无关。然而，电荷状态和分子量仍然会影响肽键解离需要的输入能量。先前报道的通过UVPD对79 kDa的五聚体的大电导机械敏感通道(MscL)Top-Down的断裂得到了令人印象深刻的54%的序列覆盖。然而，对于氨通道(AmtB)一个127 kDa的同源三聚体，通过碰撞激活和UVPD两种不同的方式破碎，仅实现了20%的序列覆盖率。事实上，相对较低的序列覆盖率是由于大分子量以及三聚体中增加的非共价相互作用影响的结果。尽管这些工具能够在非变性状态下实现Top-Down质谱分析，但其在膜蛋白表征中的应用仍不广泛。这就要求建立一种能使低电荷密度的高分子量蛋白质稳定地产生蛋白质序列离子的方法，而膜蛋白嵌入异质膜或膜类似物则使这一问题更加复杂。虽然IRMPD之前被用于从去垢剂中释放膜蛋白，但使用IRMPD对非变性的膜蛋白进行测序的研究相对较少。　　图1. (A)改进的Orbitrap Eclipse Tribrid的原理图，其中包括一个红外激光器直接进入四极线性离子阱(QLIT)的高压细胞。离子化的蛋白质胶束被转移到高压QLIT中，在那里整个离子群受到红外光子的照射，然后被转移到Orbitrap进行质量分析。通过调节激光输出功率(W)和照射时间(ms)，可以使膜蛋白从去垢剂胶束中完全解放出来。(B)三聚氨通道(AmtB)在3.0 W输出功率和200ms辐照时间下的非变性质谱。(C)在3.3 W输出功率和200ms辐照时间下AmtB的非变性质谱。　　因此，作者利用改进的Orbitrap Eclipse Tribrid质谱仪，与连续波远红外(IR) CO2激光器连接，使光束聚焦到双四极杆线性离子阱(QLIT)的高压池中(图1A)。红外激活可以有效地去除蛋白质复合物中的去垢剂胶束，随后通过IRMPD使得膜蛋白碎片化。在这种安排下，由纳米电喷雾电离产生的蛋白质复合物被转移到高压池中。在转移到Orbitrap进行检测或m/z分离和随后的碎片化之前，整个离子群将受到943cm-1红外光子的照射。利用红外的方法去除去垢剂胶束，红外激光有两个可调控参数:激光输出功率(高达60瓦)和照射时间(毫秒到秒)。因此，可以更好地控制从蛋白质胶束中释放膜蛋白，确保非变性复合物的保存，同时完全去除包裹复合物中的去垢剂。通过对激光输出功率和照射时间的优化，作者发现红外激活的参数是高度可调的，不同的激光功率和照射时间的组合也可以产生分辨率相当的谱图。其中例如在3.3 W下照射200 ms时，可以得到多个电荷态的三聚体峰(~6500 m/z)，也可以观察到三聚体与脂质结合的峰，而且对于图谱中的单体也能观察到与脂质结合的峰(图1C)。作者还对不同的去垢剂产生分辨率较高的图谱所需要红外参数进行了评估，从而评价了这几种去垢剂得到高分辨率图谱的难易程度(图2)。　　图2. 红外辐射去除膜蛋白离子中的去垢剂是高度可调的。增加激光输出功率对三种常用的MS兼容去垢剂(C8E4,G1和DDM) AmtB三聚体峰外观的影响。辐照时间固定为200 ms，激光输出功率分别为2.1、2.4、3.0和3.6 W。去垢剂在真空中按易去除的顺序显示，这是由完全释放膜蛋白复合物所需的激光输出功率决定的，从而在m/z光谱中产生良好分辨的电荷状态峰。为了探究IRMPD分离蛋白质和去垢剂胶束的机制，作者对三种不同的去垢剂：四聚乙二醇单辛醚(C8E4)、树突状低聚甘油(G1)和十二烷基-β-D-麦芽糖苷(DDM)的溶液相和气相红外光谱进行了表征，并利用密度泛函理论(DFT)计算得到了C8E4头部基团的红外谐波光谱，用来验证所得到的红外吸收光谱会受到振动耦合的影响，对于质子化的去垢剂离子，氢键和富氧去垢剂内的质子共享可以改变观察到的振动频率。结果表明C8E4胶束的溶液相吸收光谱包含一个与预期激光波数943cm-1重叠的显著带，这就解释了为何较低的激光能量可以将去垢剂胶束和蛋白质复合物分离。而在谐波光谱中在预期的激光波数处的确产生了峰，并推测该峰来自于O-H伸缩、C-C伸缩，C-H弯曲和C-O伸缩振动的耦合。而G1和DDM的最大吸收则偏离了943cm-1的预期波数，作者认为这是不同去垢剂氢键作用的结果。而蛋白质在真空中的红外吸收能力较弱，由此推测在IRMPD的过程中，去垢剂是主要的吸收对象。所以仅需要较低的能量就可以使蛋白质从复合物中剥离而不至于破坏蛋白质的非共价作用。完整的蛋白质离子还支持串联质谱的实验，为了得到蛋白质的序列信息，作者分离了m/z在6674处(电荷态为+19)的AmtB三聚体蛋白，并将其置于高激光输出功率(9 W)下照射5 ms，在m/z 1750~4000之间产生密集的多电荷态离子片段，并得到了26%的序列覆盖，这优于之前基于碰撞激活的方法(　　图3. 三聚体AmtB的IRMPD。(A)在m/z 6674处分离19+电荷态离子阱后，IRMPD后观察到的碎片离子MS2谱。多重带电碎片被高亮显示 来自相同地点的重复片段用虚线分组。为了清楚起见，许多指定的离子没有注释 (B)片段丰度相对于裂解原点(残基数)的条形图，其中丰度表示来自每个位点的片段归化一强度之和。条形图的颜色强度表示每个片段的加权平均电荷。将AmtB的拓扑域叠加在条形图上 α-螺旋跨膜区域用黄色方框表示，编号为1到11。跨膜区由质周环和细胞质环连接，用灰色线表示。(C)主干裂解位点覆盖在AmtB (PDB: 1U7G)的结构上。蓝色和红色阴影区域分别代表b型和y型离子。颜色强度对应于所分配片段的丰度。从气相分子动力学模拟中得到的高温(500 K)下的跨膜螺旋快照用虚线圈标出。为了验证这一个推测，作者又对另外两种GPCR蛋白：β -1-肾上腺素能受体(β1AR)和腺苷A2A受体(A2AR)用IRMPD进行了MS2图谱的测定，结果也观察到了片段离子相似的二级结构定位，在跨膜结构区域有着高丰度的片段，但是在二硫键相连的螺旋中并没有观察到丰富的离子片段。并再次利用分子动力学模拟研究了两种GPCR的结构对断裂的影响。在500 K下的最终结构中显示，两种GPCR中都保留了α-螺旋特征，并与观察到的裂解位点密切相关。此外，还对这两种蛋白进行了HCD和IRMPD的比较分析。对于β1AR, IRMPD产生的片段离子平均分子量为8866 Da，高于HCD产生的5843 Da。IRMPD产生的片段离子也保留了更高的平均电荷(4.7 + vs 3.6+ z)。最终，IRMPD的碎片化导致β1AR的序列覆盖率更高，为28%，而HCD为17%。在A2AR中也观察到类似的趋势，IRMPD的覆盖率为19%，而HCD为9%。　　总的来说，作者证明了可以在改进的Orbitrap Eclipse质谱仪的高压QLIT下，通过红外照射可以完全释放一系列去垢剂胶束中的膜蛋白。然后，通过增加激光输出功率，获得直接从膜蛋白及其复合物中释放的序列信息片段离子，证明红外光去除去垢剂是通用的和高度可控的，为保存和鉴定膜蛋白和配体之间脆弱的非共价相互作用构建了一个可靠的方法。而且还对片段离子的产生机制做了阐述，即质子可以通过沿蛋白质骨架迁移来稳定和诱导连续的肽键裂解。　　撰稿：李孟效　　编辑：李惠琳　　文章引用：Infrared Multiphoton Dissociation Enables Top-Down Characterization of Membrane Protein Complexes and G ProteinCoupled Receptors　　参考文献　　Lutomski, C.A., El-Baba, T.J., Hinkle, J.D., et al. Infrared multiphoton dissociation enables top-down characterization of membrane protein complexes and g protein-coupled receptors[J]. Angewandte Chemie-International Edition，2023.

据英国《自然》杂志2日发表的一项研究，科学家用人多能干细胞建立了一个模型，可用来研究人类胚胎植入子宫的过程。人胚状体（blastoid）是模拟早期人类胚胎的结构，在研究中能准确再现人类胚胎早期发育的关键阶段，包括黏附在体外子宫细胞上。该模型或有助于推进我们对人类发育早期阶段的认识，以及开发不孕不育的治疗方法或避孕药。　　在受精后的一周内，人类胚胎会形成名为胚泡的细胞团，胚泡会植入子宫壁。准确模拟这一发育阶段的模型能支持对胚胎植入和早期发育的研究。利用干细胞构建胚泡的类似物是一种很有前景的方法，但此前的尝试遇到了瓶颈，比如会形成与胚泡不匹配的细胞。　　此次，奥地利科学院分子生物技术研究所研究人员尼古拉斯利弗隆及其同事，利用人多能干细胞构建了人胚泡样结构（胚状体）。研究团队鉴定出3个信号通路，抑制它们就能得到有效模拟正常胚泡发育（成功率70%）和能形成正确细胞（成功率97%）的胚状体。　　研究报告称，这种人胚状体能在体外特异性地黏附受激素刺激的子宫内膜细胞，让团队能重现直到第13天的围植入期发育过程。　　由于该模型效率高、可扩展潜力大。研究人员认为，这种方法能为人类胚胎植入和发育研究提供重要帮助。　　干细胞可揭示器官的形成机理，但此前这方面的研究，一直难以帮助我们更深入理解发育胚胎。通常来说，科学家试图培养本身没有干细胞的类器官时，都会用到多能干细胞这种更基本的干细胞类型。科学家既可以从人体胚胎中获得多能干细胞，也可将皮肤细胞或血细胞进行重编程进而培养出干细胞，然后诱导它们模仿特定器官的形成。　　不过，这些结构或者说微型器官，通常只复制了真实器官的某些结构和功能而非全部。

2014年3月10-11日，GE医疗生命科学部出席在厦门日航酒店召开的2014（第四届）抗体药物及新药研发高峰会，并推出抗体药物质量分析与过程控制的整体解决方案。会议期间，GE医疗生命科学部的技术人员与来自抗体药物研究开发、工业生产与质量控制，以及抗体药物临床研究领域的专家和业界相关人士，共同探讨生产质控和临床开发的热点话题，并在当前抗体药物及生物类似药市场蓬勃发展的大气候下，分享抗体药物新趋势，以迎接行业挑战与机遇。 此次，GE医疗生命科学部展示了旗下全面、成熟的整体解决方案，涵盖从抗体研发、生产放大直至产品分析的完整工业流程。随着近年来国内质量法规的日渐升级完善，大量在研新药和仿制药进入临床前和临床阶段，抗体药物的临床安全性评价和生产环节质量控制日益受到重视。尤其对于抗体等生物治疗性药物，其复杂的药物结构和多步的生产流程，更容易导致最终产品在质量、药效甚至安全性方面的差异。因此，采用最先进的技术（State-of-art techniques）对临床阶段的免疫原性进行全面筛查表征，对工艺流程中抗体产品的关键的质量属性（Quality Attributes）进行实时监测和控制的理念逐渐被行业认可和应用。因而在此次峰会上，GE更着重介绍了针对抗体药物质量分析和过程控制的解决方案。 来自GE医疗生命科学部的Biacore产品经理蔡河做了“Biacore技术在抗体药物质量控制与安全性评价环节的应用与进展”的主题报告，详尽地介绍了GE非标记生物物理分析技术，特别是Biacore技术的价值与应用，包括无需标准曲线的抗体活性浓度定量技术（CFCA）、生物活性分析（FcR, C1q）、临床免疫原性、ADA筛查和表征等。尽管众多的研究者和业内专家对包括Biacore在内的GE非标记分析技术在抗体的药物靶点发现与确认、抗体筛选、动力学表征等前期开发领域的标杆应用早有认可，此次还是对其延展的强大的质量分析和安全性评价的技术价值和产品应用表示出了极大的兴趣。另外，随着近几年国内生物类似物（生物仿制药）市场不断加温，GE的非标记生物物理技术也一定会在生物类似药的head-to-head的一致性分析方面发挥不可替代的作用。 本次峰会还对近几年抗体药物研发的新热点，如ADC（抗体-药物偶联物）、双特异性抗体、抗体药物的临床试验等具体策略和问题展开了深入的探讨；在专场访谈中对于抗体研发的合作模式，法规和质量要求，以及如何更有效的开展生物制品的临床试验进行了开放式的讨论。 GE医疗生命科学部作为在抗体和生物制药领域的领先供应商，期望借其抗体研发、生产到分析平台，以及包含企业整体化解决方案在内的先进技术和理念，共同推动国内抗体和生物制药的进步和发展。