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棕榈酰天冬氨酸二乙酯

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固定化细胞法固定化细胞法生产L-丙氨酸的基本工艺流程为:菌体培养加入L-天冬氨酸进行酶转化抽滤L-丙氨酸粗品母液稀释脱色过滤真空浓缩干燥。[font='等线'][size=13px][2][/size][/font]可使用卡拉胶进行固定化,通过固定化德阿昆哈假单孢菌和固定化大肠杆菌装柱串联,可达到从富马酸铵经过转化为L-天冬氨酸的过程转化为L-丙氨酸,从而实现连续化生产。其中,大肠杆菌可实现富马酸到L-天冬氨酸的转化过程,德阿昆哈假单孢菌可实现L-天冬氨酸到L-丙氨酸的转化过程。此方法的关键在于防止固定化过程可能带来的酶失活和pH变化带来的酶失活,以及防止丙氨酸消旋酶对L-丙氨酸的外消旋化。3.2 游离细胞法游离细胞法生产L-丙氨酸的基本工艺流程为:菌体培养离心固定化加入L-天冬氨酸进行酶转化脱色、浓缩、结晶干燥。[font='等线'][size=13px][2][/size][/font]此方法的关键在于抑制丙氨酸消旋酶的活性,同时提高酶的活性和稳定性。4. 应用[font='等线'][size=13px][1][/size][/font]4.1 L-丙氨酸在食品工业的使用L-丙氨酸作为一种广泛存在于食品中的氨基酸,可用作食品的添加剂。4.1.1 防腐剂L-丙氨酸与二元羧酸(如乙酸钠、富马酸)、氧化性酸的混合物可用作保存面条的防腐剂,并且能在防腐的同时保持面条的鲜度。L-丙氨酸与辣椒油、山梨酸钾的混合物能够有效抑制酵母菌、大肠杆菌、黑曲霉等细菌的滋生,可适用于水产品、面条、腌制品、海产品、豆制品、畜产品以及饲料、化妆品、药品的保鲜。4.1.2 风味调味料[font='等线'][size=13px][3][/size][/font]L-丙氨酸具有改善风味的效果,属于重要的氨基酸类调味剂,能够与其它氨基酸配合使用加强食品与饮料的风味。L-丙氨酸与其它氨基酸和(如葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、果糖、蔗糖、麦芽糖等)以任意比例混合后可显著改善食品、饲料的风味。目前,L-丙氨酸作为食品增味剂的应用已经有了比较大的发展,但仍需要进一步的开发。4.1.2.1 酱油酱油中L-谷氨酸钠等增味剂的添加量较大以及酱油的咸度太高等问题都限制了酱油的使用市场,如何减少味精等添加剂的用量以及降低酱油的咸味已经逐渐成为人们关注的焦点。在酱油中添加L-丙氨酸后,尤其是对于苦涩味特别严重的三级酱油,随着丙氨酸浓度的增大,酸味、苦味、涩味变得柔和,酱油整体风味得到改善。适量L-丙氨酸的添加对已加工酱油和原油都具有良好的改善风味作用,可使酱油咸度降低,甜度提升,味道持久性增加,整体口感变得柔和。适量L-丙氨酸的添加对已加工酱油和原油都具有良好的改善风味作用,可使酱油咸度降低,甜度提升,味道持久性增加,整体口感变得柔和,尤其是对盐度高、不含L-谷氨酸钠、I+G和酵母抽提物等添加剂的酱油原油的调味效果最为明显。4.1.2.2 鱼露在国外的鱼露的生产中,一般通过添加HVP(植物蛋白水解液,hydrolyzed vegetable protein)补充氨基酸,提高鱼露的鲜味,HVP中含有一种名为3-氯-1, 2-丙二醇(3-MCPD)的物质,这种物质对生殖器官、肾脏和神经均有毒性,同时还存在潜在的致癌和致突变作用,长期食用含有3-MCPD的食品会造成严重身体损伤。针对3-MCPD的安全性和出口限量标准等问题,一些酱油、鱼露生产商对其生产工艺进行了改善,将传统工艺中的HVP替换为丙氨酸、谷氨酸、甘氨酸等的混合溶液,所得鱼露的味道更加醇厚,而且改善后的生产工艺成本与改善前相差不大。4.1.2.3 食用盐国外推出的低钠盐,主要成分为60%~70%氯化钠和20%~30%氯化钾,10%左右的L-丙氨酸、酵母提取物以及I+G,可以实现减盐不减咸,帮助人体钠钾平衡,增加鲜味,尤其是可以减少味精的使用量,对预防及降低高血压均起到了积极的作用。4.1.2.4 鸡精为了提升鸡精的风味,除了增加鸡肉粉的添加量以外,一些生产厂家优选在其鸡精配方中添加丙氨酸,利用丙氨酸的鲜味以及诱发食物风味的作用来 提升鸡精调味料的口感,既起到了协调增鲜的作用,又降低了人体钠的摄入量。鸡精中添加L-丙氨酸后,其鸡肉风味更加醇厚,鲜味增强。4.1.2.5 复配甜味剂许多甜味剂单体都有各自的优点和缺陷,无论哪种甜味剂单体,用量过大时都会产生不良风味和后味,均不能同时满足安全、口感、工艺、成本四项要求。只有对单体甜味剂各自的优点进行利用和发挥,对其缺点进行弥补和改造,用科学合理的方法对多种甜味剂进行复配和改造,才能满足使用要求。在复配甜味剂中加入1%~10%的L-丙氨酸,能提高甜度、柔和甜 味,减少糖精钠等人工合成甜味剂的用量,是制作糖尿病人食品的潜在甜味剂,同时也能满足现代人“低糖”的饮食习惯。4.2 L-丙氨酸在医药上的应用L-丙氨酸作为一种蛋白质的合成原料,能够影响人体的生理活动。40年代起出现第一代氨基酸输液,由水解蛋白制成,含有较多杂质,在临床中出现不良反应;1965年日本出现第二代氨基酸输液,其中含有11种氨基酸,除人体必需氨基酸8种外还存在精氨酸、组氨酸和甘氨酸;1976年开始,多国出现第三代氨基酸输液,在第二代氨基酸输液的基础上加入了L-丙氨酸、脯氨酸和丝氨酸等多种非必需氨基酸。随着临床医学的发展,第四代氨基酸输液不再是营养型输液,而是治疗型输液,通过调整人体的氨基酸代谢水平对部分疾病进行治疗。L-丙氨酸在治疗如肝病引起的蛋白质合成紊乱、糖尿病、急慢性肾功能衰竭以及对维持危急病人的营养、抢救患者的生命方面起到了积极作用。L-丙氨酸可以有效减轻酒精对肝脏的损害。L-丙氨酸可以有效地减轻酒精对肝脏的损害。通过对腹腔注射170mmol/kg体重19%的乙醇的小鼠进行试验表明,投服L-丙氨酸的小鼠的生存率为67%,比不投的高出34%;而L-丙氨酸与鸟氨酸相结合, 则生存率提高到100%。所以可将L-丙氨酸与L-鸟氨酸的混合物按0.01%~10%添加量加到食品中,也可以将L-丙氨酸与谷氨酰胺以 1:0.05~0. 5(摩尔比)混合物制成片剂、胶囊、乳剂、口服液等,能够起到保护肝脏、降低酒精中毒的作用。L-丙氨酸还是血液保存剂的主要成分。目前输血用血液保存方法中除了全血保存外,还有红血球制剂保存。但血液制剂在保存过程中会发生老化,因而保存期有限。为了提高保存期 ,防止老化,采用了添加腺嘌呤、肌苷、蔗糖、乳糖等方法。但这类方法都有缺点,这些添加成分在输血前必须予以除去。例如,在添加蔗糖时,直接将含有蔗糖的血液注射到人体中时,血液中的糖浓度会急剧上升,必须在输液前预先用等渗透压生理盐水洗涤、渗透等方法降低糖浓度后才能输血。而氨基酸既可以降低渗透压又显示与蔗糖相同的抗溶血性,在输血时可 以不必除去,能直接使用,还具有优良的营养效果。5. 限量标准现行标准[font='等线'][size=13px][4][/size][/font]中对L-丙氨酸的功能划分为增味剂,仅用于调味品(食品分类号12.0)生产,对于最大使用量无明确界定,按生产需要适量使用。6. 理化指标及测定方法[font='等线'][size=13px][5][/size][/font]6.1 理化指标现行标准[font='等线'][size=13px][5][/size][/font]中L-丙氨酸的理化指标列于下表。[table][tr][td]项目[/td][td][/td][td]指标[/td][/tr][tr][td]L-丙氨酸(以干基计),w/%[/td][td][/td][td]98.5~101.5[/td][/tr][tr][td]干燥减量,w/%[/td][td]≤[/td][td]0.20[/td][/tr][tr][td]pH(50g/L 水溶液)[/td][td][/td][td]5.7~6.7[/td][/tr][tr][td]砷(As)/(mg/kg)[/td][td]≤[/td][td]1[/td][/tr][tr][td]重金属(以Pb计)/(mg/kg)[/td][td]≤[/td][td]10[/td][/tr][tr][td]灼烧残渣,w/%[/td][td]≤[/td][td]0.20[/td][/tr][tr][td]比旋光度 α[font='等线'][size=13px]m[/size][/font](20℃,D)/[(o)dm2 kg[font='等线'][size=13px]-1[/size][/font]][/td][td][/td][td]+13.5~+15.5[/td][/tr][/table]6.2 测定方法6.2.1 鉴别实验6.2.1.1 茚满三酮试验称取约1g样品,精确至0.1g,溶于1000mL水中,取此溶液5mL,加1mL 20g/L茚满三酮溶液,加热至沸,约3min后显紫色。6.2.1.2 氧化试验称取约0.2g实验室样品,溶于10mL (1+30) 硫酸溶液,加入0.1g高锰酸钾,煮沸,有强烈的刺激臭味乙醛产生。6.2.2 L-丙氨酸含量测定称取约0.2g干燥样品,精确至0.0001g,置于250mL干燥的锥形瓶中,加3mL无水甲酸溶解,加50mL冰乙酸,加2滴2g/L结晶紫指示液,用0.1 mol/L高氯酸标准滴定溶液滴定至溶液由蓝色变成蓝绿色为终点。按照相同的步骤,除不加入样品外其它条件不变,进行空白实验。L-丙氨酸的质量分数可通过以下公式计算:式中:w[font='等线'][size=13px]1[/size][/font]表示L-丙氨酸的质量分数,以百分比形式表示;V[font='等线'][size=13px]1[/size][/font]表示样品消耗高氯酸标准滴定溶液的体积(mL);V[font='等线'][size=13px]2[/size][/font]表示空白消耗高氯酸标准滴定溶液的体积(mL);c表示高氯酸标准滴定溶液浓度(molL[font='等线'][size=13px]-1[/size][/font]);m表示样品质量(g);M表示L-丙氨酸的摩尔质量(gmol[font='等线'][size=13px]-1[/size][/font]),M=89.09。6.2.3 干燥减量的测定将电热恒温干燥箱调节至(105±2)℃,之后将称量瓶置于电热恒温干燥箱中干燥,取出后在干燥器中冷却,称量,精确至0.0001g,重复操作至恒重。之后用已恒重的称量瓶称取1g~2g样品,精确至0.0001g。将装有样品的称量瓶和盖子放入电热恒温干燥箱同时干燥2h~4h,之后将称量瓶和盖子迅速移至干燥器中冷却。冷却后盖上盖子进行称量,精确至0.0001g,重复操作至恒重,重复干燥时间为1h。水分质量分数可通过以下公式计算:式中:w[font='等线'][size=13px]2[/size][/font]表示水分的质量分数,以百分比形式表示;m[font='等线'][size=13px]0[/size][/font]表示称量瓶的质量(g);m[font='等线'][size=13px]1[/size][/font]表示称量瓶和干燥前样品质量(g);m[font='等线'][size=13px]2[/size][/font]表示称量瓶和干燥后样品质量(g)。[font='等线'][size=13px][6][/size][/font]6.2.4 pH的测定称取约5g样品,精确至0.01g,加入约20mL无二氧化碳的水溶解并稀释至100mL。将校准后的酸度计的电极用水冲洗一次,之后用样品溶液冲洗一次。调节样品溶液的温度至(25±1)℃,并将酸度计的温度补偿旋钮调至25℃,读取pH值。样品应分为2份进行平行测定,测得的pH值读数稳定1min以上,测得的pH值允许误差绝对值小于等于0.02。[font='等线'][size=13px][7][/size][/font]6.2.5 砷的测定称取0.25g二乙氨基二硫代甲酸银,研碎后用适量三氯甲烷溶解,加入1.0mL三乙醇胺,再用三氯甲烷稀释至100mL,作为吸收液。称取约1g样品,精确至0.01g。吸取一定量的样品溶液和1mL含砷0.001mg的砷标准使用溶液,置于砷发生瓶中,补加硫酸至总量为5mL,加水至50mL。在各瓶中加入3mL 150g/L碘化钾溶液,混匀,放置5min。分别加入1mL 400g/L氯化亚锡溶液,混匀,放置15min。加入5g无砷金属锌,立即塞上装有乙酸铅棉花的导气管,并使管的尖端插入盛有5.0mL吸收液的吸收管中,室温反应1h。取下吸收管,用三氯甲烷将吸收液体积定容至5.0mL。经目视比色或用1cm比色杯,于515nm波长下测定吸收液的吸光度。样品液的色度或吸光度不得超过砷标准吸收液的色度或吸光度。[font='等线'][size=13px][9][/size][/font]6.2.6 重金属的测定准备以下溶液:1. 硫代乙酰胺溶液:称取硫代乙酰胺约4g,精确至0.1g,溶于100mL水中,置于冰箱保存。临用前取此液1.0mL加入预先由15mL 40g/L氢氧化钠溶液、5mL水和20mL甘油组成的混合液5mL,置于水浴上加热20s,冷却后立即使用。2. 乙酸铵缓冲溶液(pH=3.5):称取25.0g乙酸铵,溶于25mL水中,加入45mL 6mol/L盐酸,用稀盐酸或稀氨水调节至pH=3.5,之后用水稀释至100mL。3. 1μg/mL铅标准溶液。临用前配制。称取约10 g样品,精确至0.01g,溶于约60mL无二氧化碳水,之后转移至100mL容量瓶并使用无二氧化碳水定容,摇匀。吸取样品溶液12mL,置于25mL具塞比色管中,即为A 管。吸取10mL铅标准溶液和2mL样品溶液置于25mL具塞比色管中,摇匀,即为B管(标准)。吸取10mL无二氧化碳水和2mL样品溶液置25mL具塞比色管中,摇匀,即为C管(空白)。在 A、B、C 管中,各加入2mL乙酸铵缓冲溶液,摇匀,分别滴加1.2mL硫代乙酰铵溶液,迅速搅拌混合。相对于C管,B管显现了淡棕色。2min后,A管的颜色不应深于B管。6.2.7 灼烧残渣的测定称取约2g~3g样品,精确至0.0001g,置于在800℃±25℃灼烧至恒重的瓷坩埚中,加入适量的(1+8)硫酸溶液将样品完全浸湿,用温火加热,至样品完全炭化,冷却。加入约0.5mL硫酸将残渣完全浸湿,使用相同的方法加热直至硫酸蒸气全部逸散。在(800±25)℃下灼烧45min,之后放入干燥器中冷却至室温,称量残渣的质量。灼烧残渣的质量分数可通过以下公式计算:式中:w3表示灼烧残渣的质量分数,以百分比形式表示;m表示样品质量(g);m1表示残渣质量(g)。6.2.8 比旋光度称取10g样品,精确至0.0001g,加入(1+1)盐酸溶液溶解,转移至100mL容量瓶并使用(1+1)盐酸溶液定容,摇匀。按照仪器的使用说明调整旋光仪,用(1+1)盐酸溶液校正零点。将样品溶液充满洁净、干燥的旋光管,排出气泡,将盖旋紧后放入旋光仪内。调节样品溶液的温度至(20±0.5)℃,按照仪器的使用说明操作并读取旋光角,精确至0.01°。比旋光度可通过以下公式计算:式中:α[font='等线'][size=13px]m[/size][/font](20℃, D)表示20℃钠灯照射下的比旋光度[(°)dm[font='等线'][size=13px]2[/size][/font]kg[font='等线'][size=13px]-1[/size][/font]];α表示旋光角(°);l表示旋光管长度(dm);ρ[font='等线'][size=13px]α[/size][/font]表示溶液中L-丙氨酸的质量浓度(g/mL)。[font='等线'][size=13px][8][/size][/font]参考文献[1] L-丙氨酸的生产及应用. 王雪根, 朱建良, 欧阳平凯. 南京化工大学学报(自然科学版). 1998, 20, 01.[2] 游离细胞法与固定化细胞法生产L-丙氨酸的比较. 徐虹, 王雪根, 范伟平, 欧阳平凯. 工业微生物. 1988, 28, 38-39.[3][font='宋体'][size=24px][color=#333333] [/color][/size][/font]L-丙氨酸在食品工业中的应用潜力. 郭媛, 王丽娟等. 中国调味品[font='宋体'][size=12px][color=#666666]. [/color][/size][/font]2017, 42, 07.[4] GB 2760 - 2014[5] GB 25543 - 2010[6] GB/T 6284 - 2006[7] GB/T 9274 – 2007[8] GB/T 613[9] GB 5009.76 - 2014

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    【原创大赛】杜马斯定氮仪验收关键环节探究

    [align=center][b]杜马斯定氮仪验收关键环节探究[/b][/align][align=center]山西省产品质量监督检验研究院 何婧芳[/align]摘要:杜马斯定氮仪是利用杜马斯高温燃烧法对样品中氮含量进行检测的一个专用化学分析仪器。本文主要讨论了在验收D100杜马斯定氮仪时,根据仪器生产企业的一般交货验收规定、验收用相关标准、仪器运行稳定性数理统计等,探究了杜马斯定氮仪含氮量检测的相关验收关键技术要求,为今后仪器验收工作探索了一些有益的经验。关键词:杜马斯定氮仪 验收 规定 标准 稳定性1 引言:  目前,杜马斯定氮仪已被广泛应用于食品加工、饲料、烟草、土肥、环境监测、农业、医药、科研等诸多领域的氮与蛋白质的分析研究。随着经济的高速发展以及生活水平的稳步提高,汽车已成为日常生活中必不可少的交通工具,而汽车在使用过程中所衍生出的种种问题早已引起广泛关注,尤其是汽车尾气所引发的环境污染,特别是大气污染。汽车尾气已成为造成空气污染的主要原因,国内城市大气污染中,汽车尾气排放所占比例已超过70%。因此,亟需加强汽车排放控制和治理。据报道,仅占机动车保有量4%左右的重型柴油车,却造成了较大程度的大气污染,对于重型柴油车尾气的处理成为尾气治理的重中之重。  柴油车选择性催化还原系统(SCR),通过将其安装在发动机排气系统中,注入还原剂,将尾气中的氮氧化物催化还原成氮气和水,大大降低了柴油车尾气污染物的排放,成为一种行之有效的解决方法。目前,绝大部分厂家倾向于使用32.5%的尿素水溶液(AUS32)作为还原剂。在这种背景下,D100杜马斯定氮仪作为一种高效便捷的新型定氮仪应用而生。本文主要在验收相关工作的基础上,探究了该定氮仪在使用过程中的稳定性仪器仪器的精密度,为以后的检验工作提供一定的参考。2 实验部分2.1主要试剂N含量为10.52% 天门冬氨酸 99.0% 尿素实验用水为二次蒸馏水,试验所用其他试剂为分析纯2.2主要仪器D100杜马斯定氮仪(山东海能科学仪器有限公司)梅特勒分析天平(MS205Du 梅特勒-托利多仪器有限公司)2.3仪器工作条件输入压力 :1100-1300 mbar CO2流量值:400-700 ml/minCO2设定值 :650 ml/min TCD 温 度:60.00±0.01℃TCD 数 值:1000-10000 燃烧管温度:900 ℃二级燃烧管温度:850 ℃ 还原管温度:800 ℃  测量方式:标准曲线法 信号类型:峰面积2.4样品前处理  将固体样品置于锡箔纸的中心位置,称量时尽量使样品处于同一个位置,在样品包裹过程中尽量在样品位置多层重叠,包裹结束后,使用压片机压片。  将液体样品置于锡箔纸的中心位置,称量时尽量使样品处于同一个位置,而后将大约相同质量的滤纸球置于液体之上,在样品包裹过程中尽量在样品位置多层重叠,包裹结束后,使样品成小球状。2.5仪器标准曲线的绘制 分别称取0、50、100、150、200mg的天门冬氨酸(允许质量误差为±1mg),利用仪器中设置好的检测天门冬氨酸氮含量的方法检验其中的氮含量,绘制仪器标准曲线。2.6 尿素水溶液含氮量的测定  称取质量为3.03g的尿素,将其配制为30%的尿素水溶液,充分混匀之后,静置待测。2.7 对于D100杜马斯定氮仪稳定性的探究  采用相同的方法,再进行两次平行试验,对于尿素的含氮量进行比较,并判断其稳定性。3 试验结果和讨论3.1 D100杜马斯定氮仪仪器的标准曲线  利用D100定氮仪既定的测试方法,分别测量0、50、100、150、200mg的天门冬氨酸,以样品测得的峰面积为横坐标,样品中的氮含量为纵坐标做曲线,即可得到标准曲线。其结果如图1.1所示(该条曲线是由仪器本身计算得到)。由该曲线可知,200mg为该天门冬氨酸为标物时的最大进样量,且N含量的测试范围为10%-20%,即样品含量的最佳测试范围。   [img=,690,411]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807010939035939_4101_2345874_3.jpg!w690x411.jpg[/img]  图1.1 D100杜马斯定氮仪的仪器标准曲线3.2 尿素水溶液含氮量的测定 首先,选择空白加氧的检测方法测试两个空白样品,待样品基线稳定后,开始检测样品。其次,选择测试3个100±0.1 mg的天冬氨酸进行氮日常系数的校正,可得氮日常系数为1.060841,而后测试第4个天冬氨酸的含量,测得样品中的含氮量为10.608 %,由此证明该日常系数可用。确定氮日常系数后,选择150mg天冬氨酸的测试方法对于尿素水溶液中的氮含量进行测试,测得尿素水溶液的氮含量平均值为14.5170 %,RSD值0.29% ,说明该测试结果较为可信。表1尿素含氮量的测试结果 [table][tr][td] [align=center]序号[/align] [/td][td] [align=center]样品名称[/align] [/td][td] [align=center]样品重量(mg)[/align] [/td][td] [align=center]氮含量(%)[/align] [/td][td] [align=center]氮日常系数[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]天冬氨酸[/align] [/td][td] [align=center]151.48[/align] [/td][td] [align=center]10.444[/align] [/td][td] [align=center]1.063194[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]天冬氨酸[/align] [/td][td] [align=center]149.54[/align] [/td][td] [align=center]10.502[/align] [/td][td] [align=center]1.063194[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]天冬氨酸[/align] [/td][td] [align=center]149.97[/align] [/td][td] [align=center]10.684[/align] [/td][td] [align=center]1.063194[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]天冬氨酸[/align] [/td][td] [align=center]150.59[/align] [/td][td] [align=center]10.608[/align] [/td][td] [align=center]1.060841[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]尿素水溶液[/align] [/td][td] [align=center]98.95[/align] [/td][td] [align=center]14.532[/align] [/td][td] [align=center]1.060841[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]6[/align] [/td][td] [align=center]尿素水溶液[/align] [/td][td] [align=center]98.15[/align] [/td][td] [align=center]14.566[/align] [/td][td] [align=center]1.060841[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]7[/align] [/td][td] [align=center]尿素水溶液[/align] [/td][td] [align=center]96.09[/align] [/td][td] [align=center]14.576[/align] [/td][td] [align=center]1.060841[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]8[/align] [/td][td] [align=center]尿素水溶液[/align] [/td][td] [align=center]96.66[/align] [/td][td] [align=center]14.505[/align] [/td][td] [align=center]1.060841[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]9[/align] [/td][td] [align=center]尿素水溶液[/align] [/td][td] [align=center]95.29[/align] [/td][td] [align=center]14.481[/align] [/td][td] 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[align=center]样品重量(mg)[/align] [/td][td] [align=center]氮含量(%)[/align] [/td][td] [align=center]氮日常系数[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]天冬氨酸[/align] [/td][td] [align=center]150.90[/align] [/td][td] [align=center]10.566[/align] [/td][td] [align=center]1.064331[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]天冬氨酸[/align] [/td][td] [align=center]150.16[/align] [/td][td] [align=center]10.593[/align] [/td][td] [align=center]1.064331[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]天冬氨酸[/align] [/td][td] [align=center]149.38[/align] [/td][td] [align=center]10.528[/align] [/td][td] [align=center]1.064331[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]天冬氨酸[/align] [/td][td] [align=center]149.03[/align] [/td][td] [align=center]10.438[/align] [/td][td] [align=center]1.064331[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]天冬氨酸[/align] [/td][td] 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[table][tr][td]序号[/td][td]样品名称[/td][td]样品重量(mg)[/td][td]氮含量(%)[/td][td]氮日常系数[/td][/tr][tr][td]1[/td][td]天冬氨酸[/td][td]150.11[/td][td]10.550[/td][td]1.060841[/td][/tr][tr][td]2[/td][td]天冬氨酸[/td][td]150.32[/td][td]10.452[/td][td]1.060841[/td][/tr][tr][td]3[/td][td]天冬氨酸[/td][td]149.70[/td][td]10.545[/td][td]1.060841[/td][/tr][tr][td]4[/td][td]天冬氨酸[/td][td]149.73[/td][td]10.587[/td][td]1.061278[/td][/tr][tr][td]5[/td][td]尿素水溶液[/td][td]97.07[/td][td]14.340[/td][td]1.061278[/td][/tr][tr][td]6[/td][td]尿素水溶液[/td][td]100.82[/td][td]14.433[/td][td]1.061278[/td][/tr][tr][td]7[/td][td]尿素水溶液[/td][td]96.67[/td][td]14.285[/td][td]1.061278[/td][/tr][tr][td]8[/td][td]尿素水溶液[/td][td]94.55[/td][td]14.488[/td][td]1.061278[/td][/tr][tr][td]9[/td][td]尿素水溶液[/td][td]99.53[/td][td]14.351[/td][td]1.061278[/td][/tr][tr][td]10[/td][td]尿素水溶液[/td][td]100.69[/td][td]14.438[/td][td]1.061278[/td][/tr][tr][td]11[/td][td]尿素水溶液[/td][td]96.11[/td][td]14.378[/td][td]1.061278[/td][/tr][tr][td]12[/td][td]尿素水溶液[/td][td]96.77[/td][td]14.356[/td][td]1.061278[/td][/tr][/table]4 结论 本文主要在对D100杜马斯定氮仪进行开箱,组装,验收等一系列步骤的基础上对于其验收中的关键环节——仪器试运行,这一过程进行了更深层次的探究。通过三组平行实验,对于仪器本身的准确度和稳定性进行验证,由实验结果可知,该定氮仪运行起来较为稳定,且所得到的实验结果可信度高。

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    摘要 文章主要介绍以基因工程构建菌种E. coli (pTH08+prh-T04)/VT418发酵生产L-苏氨酸,在10M3发酵罐中发酵产酸8.5-9.0%;转化率39-41%;周期48-52小时。文章强调在苏氨酸发酵过程中pH值以及溶氧的控制非常重要关键词:基因工程、发酵、苏氨酸一、前言L-苏氨酸是一种必需氨基酸,按世界粮农组织的标准计算,一克食品蛋白质中含苏氨酸40mg,占全部氨基酸的11%。欧美型食品中缺少苏氨酸,补充苏氨酸就能提高食品的营养价值。配合饲料也需要苏氨酸,因此近十年来,苏氨酸生产增长了5.3倍。具统计,1990年全世界苏氨酸产量为700吨/年,1996年增加到4000吨/年,2002年则猛增至35000吨。资料显示,使用植物型饲料,成畜必需添加赖氨酸和苏氨酸,比例为10:1,而幼畜为3:1。按10:1计算,目前全世界苏氨酸的需求量不应低于5万吨/年,缺口为较大。苏氨酸的生物合成途径及代谢调控机理来看,苏氨酸和赖氨酸一样,同属天冬氨酸族氨基酸。是葡萄糖经糖酵解途径生成丙酮酸,再经三羧酸循环CO2固定反应生成四碳二羧酸,后经氨基化反应生成天冬氨酸。国内外通常用传统育种和基因工程方法来获得苏氨酸的高产菌种,传统育种目前最高产酸为2-3%。在基因工程菌方面,木柱等将解除AKⅠ和HDⅡ反馈抑制的突变株HNr59的Etr-1基因导入产苏氨酸25g/L的T-693菌株,选育出具有6种调节变异组合的转导子T-1026,相同条件下可产苏氨酸40g/L。据日本味之素公司报道,用E.coliK12菌株(AHVr+Ile-+Met-+pro-)含苏氨酸合成酶操纵子基因的质粒转化E.coliK12(Thr-),积累苏氨酸13.4g/L(转化率40%),小罐发酵产酸65g/L,转化率48%。前苏联全苏工业微生物遗传育种研究所的Debabov等构建了大肠杆菌基因工程菌E.coli BKIIMB-3996 工程菌,重组质粒Pvic40中含苏氨酸操纵子的三个基因thr A, thrB, thrC,遗传标记为Sac+(能以蔗糖为碳源), thr r (抗苏氨酸)和Hser(抗高丝氨酸),在蔗糖为碳源的流加补料方式,最高产量为85.0 g/L。综上所述,国内外用传统育种方法的菌种产酸水平在30-40g/L;用基因工程方法的菌种产酸水平在80-90g/L。二、材料与方法1. 菌种:E. coli (pTH08+prh-T04)/VT418 (上海新立公司构建)2. 培养基配方2.1 斜面培养基(g/l)葡萄糖 2.0 NH4Cl 1.0 KH2PO4 1.5 Na2HPO4 3.5 MgSO4·7H2O 0.1琼脂 20.0 加蒸馏水溶解,调pH7.0-7.2,定容1000ml,0.8Kg/cm2灭均30分钟,冷却至50℃左右加入氨苄青霉素溶液,最终浓度为50γ/ml。2.2 摇瓶种子培养基(g/l)葡萄糖 40.0 KH2PO4 1.0 MgSO4·7H2O 0.5 (NH4)2SO4 10.0 玉米浆2.0 CaCO3 15 氨苄青霉素 50γ/ml 加自来水溶解,调pH7.0-7.2,定容1000ml,分装至500ml摇瓶,0.8Kg/cm2 灭菌30分钟,接种前加入CaCO3(121℃,60分钟灭菌,烘干)和氨苄青霉素。2.3摇瓶发酵培养基(g/l)葡萄糖 80.0 (NH4)2SO4 25.0 KH2PO4 2.0 MgSO4·7H2O 1.0MnSO4·5H2O 0.5 FeSO4·7H2O 0.5 CaCO3 30.0 加自来水溶解,调pH7.0-7.2,定容1000ml,分装至500ml摇瓶,0.8Kg/cm2 灭菌30分钟,接种前加入CaCO3(121℃,60分钟灭菌,烘干)2.4 种子罐培养基葡萄糖4% (NH4)2SO4 1% KH2PO4 0.1% MgSO4·7H2O 0.05% 玉米浆 0.2% 泡敌0.01%。加水溶解pH自然,121℃灭菌20分钟,消后定容400L。接种前加入无菌氨苄青霉素50ug/L。2.5 发酵罐培养基葡萄糖8% (NH4)2SO4 2.5% KH2PO4 0.2% MgSO4·7H2O 0.1%FeSO4·5H2O 0.05% MnSO4·5H2O 0.05% 泡敌 0.01%。加自来水溶解pH自然,121℃灭菌20分钟,消后定容5.1M3。1.0Kg/cm2灭菌20分钟。

  • 【原创】保健品中16种氨基酸的液质联用法测定

    氨基酸是氨基和羧基的一类有机化合物的通称。生物功能大分子蛋白质的基本组成单位,是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物。无色晶体,熔点极高,一般在200℃以上。不同的氨基酸其味不同,有的无味,有的味甜,有的味苦。各种氨基酸在水中的溶解度差别很大,并能溶解于稀酸或稀碱中,但不能溶于有机溶剂。近年来,随着技术的发展,检测氨基酸的种类及含量的方法很多,目前测定氨基酸的方法主要有氨基酸分析仪法、高效液相色谱法、毛细管电泳法及液相色谱-质谱联用法等。本文主要是通过高效液相串联质谱法来对16种氨基酸的含量进行测定,方法简单,快速,不用柱前衍生,节省试剂和成本,为保健品中氨基酸的含量测定提供了新方法。1实验部分1.1 仪器和试剂 16种氨基酸的混合标准品,(包括丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、苏氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丝氨酸)安捷伦;乙腈(色谱纯)CNW;乙酸铵(色谱纯);乙酸(色谱纯)。超声波清洗器(EQ-500);DHG-9240A型电热恒温鼓风干燥箱(上海鸿都电子科技有限公司);BPZ-6090Lc型真空干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司);高效液相色谱仪(安捷伦1260);色谱柱:安捷伦poroshell 120 EC-C18柱(4.6mm×50mm,2.7μm);质谱(API3200)美国AB公司。1.2 色谱条件色谱柱:以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂(柱长15cm,内径4.6mm,粒径2.7μm )或同等性能的色谱柱;柱温:40℃;流速:0.5 ml/min;进样量:5μL ;流动相:流动相A:称取0.386g乙酸铵,加水500mL溶解,用乙酸调pH至3.5;流动相B:乙腈,梯度洗脱:时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)0.0090100.00-5.0090→8010→205.00-9.0080→9020→101.3质谱条件1.3.1以电喷雾电离源(ESI)阳离子模式,气帘气20psi,碰撞气6,喷雾电压5500V,离子源温度600°C,雾化气是50 psi,辅助气是50 psi,时间9min。1.3.2 16种氨基酸的质谱参数,见表1。表1 16氨基酸的质谱参数氨基酸Q1Q3TIMEDPEPCECXP丙氨酸90.144.2353510153精氨酸175.2116353010153天冬氨酸134.474354110153胱氨酸241.174.11002610153谷氨酸148.2102353010153组氨酸156.1110353510163亮氨酸132.386.1352610113异亮氨酸132.286352610113赖氨酸147.3130353010153蛋氨酸150.1104352510103苯丙氨酸166.4120352510143脯氨酸116.270353510143苏氨酸120.174.3354110153酪氨酸182.3136353510153缬氨酸118.272354110153丝氨酸106.160.23530101331.4 标准品溶液的配制量取16种氨基酸的混合标准品1ml,置于50ml容量瓶,加0.1%甲酸水定容,摇匀即得标准品贮备液。1.5 供试品溶液的制备 精密称取样品约0.1g,置于25ml磨口的具塞比色管内,加6mol/L盐酸15ml,加入0.2g苯酚,用旋转混合仪和超声仪使样品充分分散并溶解,充氮气,盖紧塞子,置于110℃±1℃的恒温干燥箱内,水解22小时,取出冷却,过滤,用纯化水冲洗比色管,将水解液全部转移至50mL容量瓶中,用纯化水定容至刻度,摇匀,精密吸取1mL于10mL容量瓶中,置于真空干燥箱内,于40℃~50℃减压干燥(真空干燥箱内放入五氧化二磷作为干燥剂),干燥后残留物用0.1%甲酸水定容至刻度,摇匀,经0.45μm的微孔滤膜过滤,即得。1.6 线性实验将标准品贮备液稀释成0.004nmol/μl,0.008nmol/μl,0.012nmol/μl,0.016nmol/μl,0.020nmol/μl浓度梯度,每个浓度以5μL注入色谱系统。1.7 精密度实验将标准品贮备液稀释至一定的浓度,按色谱、质谱条件进行测定,连续进样6次。1.8 加样回收率实验精密称取五分的供试品,每份加入0.020nmol/μl标准品溶液5ml,定容。以5μL注入色谱系统。1.9供试品的测定 把1.5制备好的供试品溶液,以5μL注入色谱系统。以标准液的峰面积和浓度,通过外标法做曲线算出样品的浓度。2 结果与讨论2.1 色谱行为由于保健品中的氨基酸,用高效液相荧光法要进行柱前衍生,成本很高而采用液质联用法,不需要衍生,可大大节约成本,用流动相(0.35g乙酸铵加水0.5L溶解,然后加入0.5L乙腈,混合,用乙酸调pH=3.5)时,5min就能把16种氨基酸全部流出。采用液质联用法,通过MRM模式进行母离子及相应的子离子进行检测,能达到准确的分离和定量,见图1 。 从左到右,分别为丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、胱氨酸、谷氨酸、组氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、苏氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丝氨酸。图1 16种氨基酸标准品的碎片离子色谱峰2.2 质谱行为在ESI(+)阳离子检测方式下,16种氨基酸的质谱定量分析,在质谱条件下,失去NH3形成+ 峰,或失去HCOOH重排生成+ 峰,从而进行色谱分离。2.3 线性回归方程和最低检测限以标准品的5个梯度浓度与其峰面积进行线性回归,拟合线性回归方程为Y=aX + b,相关系数r2 及最低检测限(S/N(信噪比)=3时,可测得标准品的最低检测限)见表2。表2 16种氨基酸线性回归方程、相关系数、最低检测限氨基酸Y=aX + b相关系数(r2)最低检测限(nmol/μl)丙氨酸Y=3.09e+006X + 6.95e+0030.99810.0013精氨酸Y=2.31e+007X + 1180.99990.0005天冬氨酸Y=3.45e+006X + 1.07e+0040.99760.0008胱氨酸Y=8.44e+005X + 1.72e+0030.99660.0006谷氨酸Y=7.6e+006X + 1.46e+0040.99840.0006组氨酸Y=7.58e+007X + 5.98e+0030.99990.0004亮氨酸Y=6.06e+007X + 5.24e+0040.99880.0001异亮氨酸Y=8.15e+007X + 6.26e+0040.99960.0001赖氨酸Y=1.24e+007X + 2.67e+0040.99780.0003蛋氨酸Y=1.34e+007X + 5.14e+0030.99890.0001苯丙氨酸Y=7.42e+007X + 4.08e+0040.99910.0001脯氨酸Y=7.9e+007X + 5.57e+0040.99970.0003苏氨酸Y=9.67e+006X + 2.49e+0040.99770.0003酪氨酸Y=1.76e+007X + 2.89e+0040.99920.0003缬氨酸Y=2.41e+007X + 3.31e+0040.99740.0003丝氨酸Y=1.06e+007X + 2.63e+0040.99810.00132.4 方法的精密度和重复性 取浓度0.012nmol/μl的16种氨基酸混合标准品连续进样6次。计算峰面积和保留时间的RSD值。结果见表3。表3 16种氨基酸峰面积和保留时间的相对标准偏差氨基酸峰面积RSD(%)保留时间RSD(%)丙氨酸4.480.57精氨酸4.670.34天冬氨酸4.570.44胱氨酸3.780.56谷氨酸3.360.24组氨酸3.330.13亮氨酸2.750.1异亮氨酸2.930.23赖氨酸4.790.43蛋氨酸3.920.09苯丙氨酸2.170.11脯氨酸4.540.28苏氨酸4.110.37酪氨酸3.610.13缬氨酸2.350.23丝氨酸3.280.162.5加样回收率实验,见表4。表4 16种氨基酸峰的回收率实验结果氨基酸平均回收率(%)RSD(%)丙氨酸94.114.05精氨酸82.912.73天冬氨酸82.694.66胱氨酸83.153.95谷氨酸98.234.1组氨酸78.671.61亮氨酸98.284.99异亮氨酸102.713.03赖氨酸98.584.49蛋氨酸95.983.34

  • 【求助】哪位大哥帮我读一下红外谱

    【求助】哪位大哥帮我读一下红外谱

    我打了两张红外谱,但我不知道具体的怎么分析,不知道哪位高人能够给我解答。分子结构我知道,就是不知道具体的峰对应的是什么振动峰。一个是L-天冬酰胺,一个是L-天冬氨酸。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/06/200706151537_55094_1299078_3.jpg[/img]

  • 关于人类牙齿内左右旋氨基酸检测的问题

    本人是需要测量人类牙齿内天冬氨酸左右旋含量比值,以作年龄推断研究。样品:为固体,已经粉碎。样品纯度不知道,是人类牙齿内的氨基酸。样品的实验过程大概是:样品清洗……水解……提取氨基酸……衍生化……高效液相色谱仪检测天冬氨酸左右旋含量。请问是否有提供检测服务的公司?联系邮箱:drocean@126.com。

  • 迪马AAA氨基酸柱 这样测半胱氨酸 可以吗??

    迪马AAA氨基酸柱 这样测半胱氨酸 可以吗??

    先简单 介绍——————做氨基酸 检测想了解详细资料,请自己到迪马科技官网自行下载http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09510.gifPITC柱前衍生法18种天然氨基酸分析(异硫氰酸苯酯柱前衍生法)——序列号: D0241 适用范围 该方法适用于氨基酸注射液、动植物性食品和饲料中 Asp(天冬氨酸)、Glu(谷氨酸)、Ser(丝氨酸)、Gly(甘氨酸)、His(组氨酸)、Arg(精氨酸)、Thr(苏氨酸)、Ala(丙氨酸)、Pro(脯氨酸)、Tyr(酪氨酸)、Val(缬氨酸)、Met(蛋氨酸)、Cys(胱氨酸)、Ile(异亮氨酸)、Leu(亮氨酸)、Phe(苯丙氨酸)、Trp(色氨酸)、 Lys(赖氨酸)等 18种天然氨基酸的检测http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203131711_354396_2019107_3.jpg2 溶液配制 氨基酸储备液: 称取一定量氨基酸标准品,用 0.1 mol/L HCl水溶液溶解,胱氨酸为0.01 mol/L,酪氨酸为0.02 mol/L,其他氨基酸为 0.05 mol/L 氨基酸使用液: 将储备液用0.1 mol/L HCl水溶液稀释,得到浓度为 0.002 mol/L 的氨基酸单标和混标 内标液: 以正亮氨酸作为内标物。称取一定量正亮氨酸,溶于 0.1 mol/L HCl水溶液,得到 0.02 mol/L 的正亮氨酸内标液 异硫氰酸苯酯溶液: 将 250 μl 异硫氰酸苯酯用乙腈乙腈定容至 10 ml,得到0.2 mol/L 异硫氰酸苯酯溶液 三乙胺溶液: 将1.4 ml三乙胺用乙腈定容至 10 ml,得到1.0 mol/L 三乙胺溶液 标准溶液衍生化 量取 200 µl氨基酸混合标准溶液(每种组分浓度均为 0.002 mol/L),置于 1.5 ml塑料离心管中,准确加入20 μl正亮氨酸内标溶液、100 µl 1 mol/L三乙胺乙腈溶液和100 µl 0.2 mol/L 异硫氰酸苯酯乙腈溶液,混匀,室温反应 1 小时,然后加入正己烷 400 µl,旋紧盖子后剧烈振荡5~10 s,静置分层,取 200 µl下层溶液与 800 µl水混合,0.22 µm 针式过滤器过滤,待分析。注: 通过控制原始样品质量或稀释等方法,使样品溶液中的氨基酸总量不超过0.04 mol/L 或3.0 g/L(两者中取最小值) 只有采用内标法分析时,才需要加入正亮氨酸作为内标物 衍生得到的样品溶液中含有50%的乙腈,这与流动相溶剂体系存在较大差距,因而需要加水稀释,否则会引起峰前沿或分叉迪马科技AAA氨基酸柱子 洗脱条件 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_646181_2019107_3.gifhttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/04/201104221943_290383_2019107_3.gif

  • 常见蛋白质分子量参考值(单位:dalton)

    蛋白质分子量肌球蛋白甲状腺球蛋白β-半乳糖苷酶副肌球蛋白磷酸化酶a血清白蛋白L-氨基酸氧化酶地氧化氢酶丙酮酸激活酶谷氨酸脱氢酶亮氨酸氨肽酶γ-球蛋白,H链延胡索酸酶(反丁烯二酸酶)卵白蛋白醇脱氢酶(肝)烯醇酶醛缩酶肌酸激酶胃蛋白酶原D-氨基酸氧化酶醇脱氢酶(酵母)甘油醛磷酸脱氢酶原肌球蛋白乳酸脱氢酶胃蛋白酶转磷酸核糖基酶天冬氨酸氨甲酰转移酶,C链羧肽酶 A碳酸酐酶枯草杆菌蛋白酶γ-球蛋白,L链γ-blobulin,L chain糜蛋白酶原(胰凝乳蛋白酶原)木瓜蛋白酶(羧甲基)β-乳球蛋白[font=Tim

  • 【原创】PITC柱前衍生

    PITC 最近做18种氨基酸的测定,采用PITC柱前衍生的方法,以前做的蛮好的,今天做却发现前面的天冬氨酸和谷氨酸,两个峰几乎看不到了,而且他们前面多了一个高峰。实在搞不明白,其它氨基酸都衍生的挺好,换新的标准、色谱柱和衍生剂,并且调整流动相比例使出峰变慢,但问题仍未解决i请各位老师指教!!多谢!!

  • 蛋白酶的相关知识

    科技名词定义中文名称:蛋白酶英文名称:protease;proteinase其他名称:蛋白水解酶(proteolytic enzyme)定义:催化蛋白质中肽键水解的酶。根据酶的活性中心起催化作用的基团属性,可分为:丝氨酸/苏氨酸蛋白酶(编号:EC 3.4.21.-/EC 3.4.25.-)、巯基蛋白酶(编号:EC 3.4.22.-).、金属蛋白酶(编号:EC 3.4.24.-)和天冬氨酸蛋白酶(编号:EC 3.4.23.-)等。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);酶(二级学科)

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    最近网络上一直在传小孩只喝饮料容易患白血病,谣言一出立刻引起家长们的恐慌。但是事情的真相果真如此么?专家解释,常喝的饮料中含量最多的是一种叫甜味素的添加剂,下面来为您介绍关于甜味素对人体有何危害。甜味素白色粉末,无臭,有强烈甜味。又名天冬甜素(Aspartame),俗名甜味素,别名为阿司帕坦、阿斯巴甜、天冬甜精、依括片。是由L-天冬氨酸和L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐缩合合成而得。化学名为天冬酰苯丙氨酸甲酯,其甜度为蔗糖的180倍,甜味与砂糖十分相似,并有清凉感,无苦味或金属味。0.8%的水溶液PH值为4.5—6。长时间加热或高温可致破坏。在水溶液中不稳定,易分解而失去甜味,低温时和PH值3~5较稳定。用时现配或在降冻食品中使用较为理想。甜味素于1965年被发现。由美国Seark公司开发并取得专利,1974年美国食品药品管理局(FDA)批准用作食品添加剂,甜味素以其无毒、低热、高甜、不致肥胖、不引起龋齿,不致心血管疾病等优点而被广为使用。恒远温馨提示:天冬甜素分解的苯丙氨酸不是含苯环的有机化合物,因此不会致癌。小孩常喝饮料不会导致白血病,但是太依赖饮料可能导致儿童食欲下降、营养状况不良、体质下降,使得免疫力下降。饮料中的添加剂是食用性的,在安全范围内对人体没有太大影响。但是超标超量会对人体的肾脏产生影响,造成人体免疫系统紊乱。

  • 求分析方法

    有哪位大神提供一下聚天冬氨酸的测定方法。除了凝胶色谱以外还有其他的方法可以测定其含量吗

  • 请教各位大神,日立L-8900出的报告呈现的信息如何解读?

    各位大神,我在公司做的对样品的氨基酸成分含量进行分析,给我返回了一个扫描版的报告,想请问各位老师,这个报告怎么看,尤其是有用的信息部分,谢谢各位的帮助!问题描述如下:1. 在样品测试报告中,只有天冬氨酸(Asp)和谷氨酸(Glu)的测试结果为0.01,其他的均小于0.01,我想请问这是说其他的均在检测限以下,我样品中没有的意思吗?但我看在两个图中,Asp的值显示的都是0.00000啊,这是有还是没有呢? 2. 色氨酸在这个报告中用的是高效液相法,我想问的是为什么氨基酸自动分析仪不能检测这种物质,是实验仪器操作的问题还是我样品的问题? 3. 还有它在报告中写的进样量是20μL,但在下面日立输出的报告里却显示10 μL,请问这是什么原因? 4. 文件中的图3是不是我的样品的谱图,而图4为标准品谱图? 4. VIS 1结果和VIS 2结果是什么意思,为什么要分成两个结果? 5. ESTD代表什么意思? 6. 从这个报告中我能得到的样品信息都有哪些呢?问题有点多,但自己实在是搞不明白了,还请各位老师细心指教,感谢!

  • 【第三届原创】类人胶原蛋白的组成

    【第三届原创】类人胶原蛋白的组成

    本论文比较了Ⅰ型Ⅱ型胶原蛋白的纯化工艺以及结果,相比Ⅰ型胶原,溶液的颜色浅,蛋白纤维长,真空冷冻干燥后质地较硬,室温条件下具成胶性,且胶体性质不易发生改变。纯化的类人胶原蛋白经水解后测其氨基酸组成,发现甘氨酸基本占到所有氨基酸的三分之一,且羟脯氨酸为该蛋白的特有氨基酸。含量单位测试项目样品Ⅰ样品Ⅱ摩尔含量(样品Ⅱ)mol/molpro分子量g/mol(g/100g)(g/100g)天冬氨酸133.11.0890.80812.14苏氨酸119.120.2410.366.04丝氨酸105.092.6643.22661.39谷氨酸147.139.18811.38154.69脯氨酸115.135.4386.4111.18甘氨酸75.076.3477.587202.19丙氨酸89.066.21[td=1,1,1

  • 【求助】求DPPC(二棕榈酰磷脂酰胆碱)的分析方法,非常紧急,在线等.......

    各位高手,我最近在做液相检测兔胎中DPPC(二棕榈酰磷脂酰胆碱)含量的检测,具体方法见文献,但是我发现这个方法行不通,试用了两个厂家的硅胶色谱柱,可是都得不出像样一点的峰型,进样浓度达到1mg/ml,进样20ul,可是除了有极高的溶剂峰以外没有见到样品峰,溶剂峰3min左右就出峰了,我的条件是:硅胶柱(250*4.6mm,5um),日立紫外检测器,温度32~37度,进样20ul,流速1.0~1.5ml/min,流动相:乙腈:甲醇:85%磷酸=100:6:0.8;检测波长205nm,标准品溶剂为氯仿:甲醇=2:1(v/v),可是我一直得不到自己要的结果,我想问一下各位高手是用什么方法做磷脂的,希望得到大家的帮助,因为比较急,我在线等,如果有国外的文献,也希望给我传一份,我的QQ是308482760,邮箱是lizn136@126.com,不胜感激.........

  • 棕榈酰三肽-1/棕榈酰寡肽

    棕榈酰三肽-1/棕榈酰寡肽

    棕榈酰三肽-1是一款能有效预防和淡化皱纹、紧致皮肤的化妆品原材料,它能让皮肤变得更年轻、更光滑更有弹性。相关的实验研究显示5PPM的棕榈酰三肽-1和0.05%维生素A在促进胶原蛋白和糖胺聚糖的合成能力上活性相当,但是避免了其刺激和副反应。棕榈酰三肽-1的祛皱效果和活性远远优于常规的维生素A,并且没有任何副作用。这使得棕榈酰三肽-1在祛皱护肤方面更多的优势。【合肥国肽生物】产品参数----棕榈酰三肽-1/棕榈酰寡肽[table][tr][td=2,1][font=仿宋][size=7.5pt]中文名称:棕榈酰三肽-1/基肽3000/棕榈酰寡肽[/size][/font][/td][/tr][tr][td=2,1][font=仿宋][size=7.5pt]英文名称:Palmitoyl Tripeptide-1/Matrixyl 3000 / Pal-GHK[/size][/font][/td][/tr][tr][td][font=仿宋][size=7.5pt]CAS号:147732-56-7[/size][/font][/td][td][font=仿宋][size=7.5pt]纯度:≥97%[/size][/font][/td][/tr][tr][td][font=仿宋][size=7.5pt]分子量 :578.80g/mol[/size][/font][/td][td][font=仿宋][size=7.5pt]分子式 :C[/size][/font][sub][font=仿宋][size=7.5pt]30[/size][/font][/sub][font=仿宋][size=7.5pt]H[/size][/font][sub][font=仿宋][size=7.5pt]54[/size][/font][/sub][font=仿宋][size=7.5pt]N[/size][/font][sub][font=仿宋][size=7.5pt]6[/size][/font][/sub][font=仿宋][size=7.5pt]O[/size][/font][sub][font=仿宋][size=7.5pt]5[/size][/font][/sub][/td][/tr][tr][td][font=仿宋][size=7.5pt]外观:白色粉末[/size][/font][/td][td][font=仿宋][size=7.5pt]储存条件:2 ℃~8 ℃[/size][/font][/td][/tr][tr][td][font=仿宋][size=7.5pt]包装规格(粉末):1g, 10g, 100g[/size][/font][/td][td][font=仿宋][size=7.5pt]应用:化妆品原料[/size][/font][/td][/tr][/table]功效与应用----棕榈酰三肽-1/棕榈酰寡肽抗皱抗衰;改善皮肤质量;面部护理及身体护理;脸部、颈部和手护理品可添加到美容护肤品中,如乳液、早晚霜、眼部精华液等作用机理----棕榈酰三肽-1/棕榈酰寡肽棕榈酰三肽-1是一种matrikine信号肽,它作用于真皮层,能促进细胞外基质如胶原蛋白和糖胺聚糖的合成,加强真皮层,使皮肤变得更厚,紧致,皱纹得到舒缓,对抗紫外线照射的能力更强。[align=center][img=,246,164]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/03/202003261458408347_4102_3531468_3.jpg!w246x164.jpg[/img][/align]国肽生物主要提供:多肽合成、多肽定制、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、美容肽、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。[img=,690,177]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/03/202003261459137937_2159_3531468_3.jpg!w690x177.jpg[/img]

  • 常用有机物俗名化学名对照!

    二画二茂铁 二聚环戊二烯铁 Fe2三画山梨酸 己二烯--酸 CH3CH=CHCH=CHCOOH马来酐 顺丁烯二酸酐马来酸 顺丁烯二酸 HOOCCH=CHCOOH四画六氢吡啶 氮杂环己烷 NH-(CH2)5火棉胶 硝化纤维(11~12%N)天冬氨酸 丁氨二酸 HOOCCH2CH(NH2)COOH天冬酰胺 HOOCCH2CH(NH2)CONH2木醇 甲醇木醚 二甲醚 CH3OCH3牙托水 甲基丙烯酸甲酯 CH2=C(CH3)-COOCH3月桂酸 十二酸 CH3(CH2)10COOH月桂醛 十二醛月桂醇 十二醇乌洛托品 环六次甲基四胺双酚A HO-苯-C(CH3)2-苯-OH巴豆酸 丁烯--酸 CH3CH=CHCOOH巴豆醛 丁烯--醛 CH3CH=CHCHO水杨酸 邻羟基苯甲酸五画半胱氨酸 beta-巯基丙氨酸 HSCH2CH(NH2)COOH平平加O 一种非离子表明活性剂,主要成分石聚氧化乙烯脂肪醇醚 RO(CH2CH2O)nCH2CH2OH,其中R为C12~C18的烷基,n为15~16.甘油 丙三醇甘氨酸 氨基乙酸 H2NCH2COOH甘醇 乙二醇甘露醇 己六醇 可的松 11-脱氢-17羟基皮质菑酮,或称皮质酮石炭酸 苯酚龙胆紫 系含义模糊的商业名称,文献上各有其说,一般为甲紫和糊精的等量混和物卡必醇 二甘醇单乙醚 HOCH2CH2OCH2CH2OCH2CH3尼古丁 烟碱,即1-甲基-2-(3-吡啶基)吡咯烷丝氨酸 beta-羟基丙氨酸 HOCH2CH(NH2)COOH

  • 蛋白修饰与蛋白质鉴定

    现在,在实验研究基础上,借助多方面的生物信息学方法,可以快速高通量的预测和进行蛋白质鉴定蛋白翻译后修饰。分泌蛋白和膜相关蛋白附着于细胞膜上的或将被排泄出去的蛋白质是由细胞内质网膜上附着的核糖体合成。附着有核糖体的内质网被称为糙面型内质网。这类蛋白质都含有一个N-末端(或氨基端),我们称之为信号序列或信号肽。这个信号肽通常情况下含有13-36个主要疏水性残基,同时它含有多蛋白复合物,我们称之为信号识别粒子(SRP)。这种信号肽在通过内质网膜之后会被去除。信号肽的去除过程是在信号肽酶催化作用下完成的。含有一个信号肽的蛋白质被称为前蛋白,有别于原蛋白。然而,某些用于分泌的蛋白在分泌之后会进一步被蛋白水解,因此包含有原蛋白的序列。这类蛋白质被称为前原蛋白。蛋白水解性裂解许多蛋白质在翻译之后会经历水解性裂解过程。其中最为简单的形式是去除起始蛋氨酸。许多蛋白质合成了不活跃的前体细胞,这些细胞只能在合适的生理条件下通过限制性蛋白水解过程产生活性。在凝血过程中使用到的胰腺酶和酶类就是后者的例证。多肽去除时产生活性的不活跃的前体蛋白,我们称之为原蛋白。前原蛋白的翻译后加工过程的一个复杂的例子就是脑垂体分泌合成的前阿黑皮素原的裂解过程(有关前阿黑皮素原的讨论,见肽类激素页)。这类前原蛋白经过复杂的裂解,根据合成的前阿黑皮素原的细胞定位而不同,其路径也有所不同。另一个前原蛋白的例子就是胰岛素。由于胰岛素是由胰腺分泌的,因此它有一个前肽。随着含24个氨基酸的信号肽的裂解,这类蛋白也折叠成了胰岛素原。胰岛素原进一步分裂,产生活跃的胰岛素,它包含两个肽链,由二硫键进行连接。但仍有其他的蛋白(酶类)被合成为非活跃的前体细胞,被称为酶原。酶原在蛋白水解性裂解时会产生活性,在凝血串联蛋白质链的若干蛋白质中都会发生这种现象。甲基化作用蛋白翻译后的甲基化过程主要发生在氮原子和氧原子上。活性甲基供体是活性腺苷甲硫胺酸(SAM)。最常见的甲基化作用发生在赖氨酸残基的ε-amine上。脱氧核糖核酸组蛋白中赖氨酸残基的甲基化作用可调节核染色质结构,因此可调节其转录活性。赖氨酸原本被认为是一种常设共价标记,可提供长期信号,甚至包括转录记忆时的组蛋白依赖机制。然而,最近的临床研究表明赖氨酸甲基化作用与其他共价修饰体相似,作用时间短,并能通过反脱甲基化活动进行动态调节。最近的组学研究发现表明,赖氨酸残基的甲基化作用不仅发生在核染色质层面,而且还通过修订转录因子影响基因表达。组氨酸的咪唑环,精氨酸的胍基部分以及谷氨酸盐和天冬氨酸盐的R组酰胺(R-group amides )上,都发现了额外的氮甲基化作用。谷氨酸盐和天冬氨酸盐的R组羧化物也会发生氧甲基化作用并形成甲基酯。蛋白可能在半胱氨酸的R[

  • [实验室建设] 生物实验室常用英文单词

    一、化学试剂1、氨基酸alanine (Ala, A) 丙氨酸valine (Val, V) 缬氨酸leucine (Leu, L) 亮氨酸isoleucine (Ile,I) 异亮氨酸proline (Pro, P) 脯氨酸phenylalanine (Phe, F) 苯丙氨酸tryptophan (Trp, W) 色氨酸methionine (Met, M) 蛋氨酸glycine (Gly, G)甘氨酸serine (Ser, S)丝氨酸threonine (Thr, T)苏氨酸cysteine (Cys, C)半胱氨酸tyrosine (Tyr, Y) 酪氨酸asparagines (Asn, N) 天冬氨酸glutamine (Gln, Q)谷氨酰胺lysine (Lys, K)赖氨酸arginine (Arg, R)精氨酸histidine (His, H) 组氨酸aspartic acid (Asp, D)天冬氨酸glutamic acid (Glu, E)谷氨酸2、核苷酸adenosine 阿糖腺苷guanosine 鸟嘌呤核苷cytidine 胞二磷胆碱thymidine胸腺嘧啶脱氧核苷uridine尿嘧啶核甙deoxy-脱氧3、其他化学试剂Acetic acid glacial 冰乙酸Boric acid (H3BO3,61.83) 硼酸Calcium chloride 2-hydrate (CaCl2.2H2O, 147.02) D(+) Glucose (180.16)EDTA tetrasodium dihydrate (EDTA-Na4.2H2O,416.20)Ethanol absolute 无水乙醇Ethylene diamine tetraacetic acid disodium salt dyhydrate (EDTA-Na2.2H2O,372.24)Sodium acetate trihydrate (3H2O,136.08) 含三个水分子的乙酸钠Sodium chloride 氯化钠Sodium dodecyl sulphate (288.38)十二烷基硫酸钠Tris-(hydroxymethyle)-aminomethane (Tris,121.14)Tryptone 胰蛋白胨Yeast extract 酵母提取物Agar 琼脂Ampicillin 氨苄西林Potassium acetate醋酸钾Isopropanol异丙醇Lithium chloride氯化锂PEG8000 聚乙二醇8000RNAse A RNA酶AHydrochloric acid盐酸Sodium hydroxide氢氧化钠Ammonium acetate醋酸铵Isoamyl alcohol异戊醇Chloroform氯仿

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