羟基十八酸的单酯化物

我是一名新手，最近想用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]测定脂肪酸和三帖酸化合物及脂肪醇类，查阅资料发现三萜酸大部分采用重氮甲烷甲酯，脂肪酸却多种甲酯方式，并且外文中脂肪酸甲酯化也多用重氮甲烷，但是重氮甲烷很危险，为甚么好多人仍倾向于用重氮甲烷，因为我想一次都甲酯化所以想了解清楚一下。并且，甲酯化得混合样品能否继续硅烷化衍生 我还要测定里面的脂肪醇类。求各位老师传授经验，最好有重氮甲烷详细的制造和使用步骤

现在要用gcms测植物叶中有机酸，今天试验了对甲苯磺酸，甲醇和硫酸镁在60℃下酯化1h，发现常见的苹果酸、柠檬酸、苯甲酸等一些常见的不挥发性的有机酸都没有，为什么？且只检索到硬脂酸一种！加硫酸镁（目的是除去生成的水）后，发现过有机膜后，萃取液比较浑浊，然后离心机处理25min，再过有机膜，测试液还是很浑浊，怎么能变澄清呢？条件：安捷伦：GCMS6890/5975，DBFFAP柱子，100℃（5min）-250℃（10℃/min），保持15min，请问我的酯化条件是不是有问题，有更好的酯化条件和催化剂吗？

请问已二酸、丁二酸、戊二酸与甲醇酯化的分析方法？

对于有机酸的酯化衍生物分析，用什么办法好？能用重氮甲烷化吗？

小弟打算蛋中的脂肪酸及游离脂肪酸，需要先甲酯化在用GC检测。可是发现脂肪酸和游离脂肪酸测得的峰数基本相同，想请教一下大侠们这是什么原因呢，脂肪酸和游离脂肪酸是一回事么？还有想请教一下用三氟化硼-甲醇甲酯化时候需要加热么还是在常温下反应就行呀。看国标中测定肉里面的脂肪酸时先皂化以后才甲酯化，这里皂化是起什么作用呢？

请问各位脂肪酸甲酯化大概有多少会被甲酯化啊？？色谱柱上样不能有酸和水？那怎么判断酸和水的残留呢

现在要分离极性很大的化合物，希望得到单体，是硫酸酯化的代谢产物，同分异构体，由于母药的极性比较大了，在柱子上的保留就不好。所以想知道代谢产物用什么样的制备柱分离好啊？谢谢。

我用的三氟化硼甲醇甲酯化，做了一个空白不加样品，一样条件皂化甲酯化提取上机，用CD-2560的柱子跑出来发现有4.5个峰能跟脂肪酸甲酯标品对上，而且响应也很高，这是为什么呢？

1。我想用酸化甲酯化的方法提取脂肪酸，用甲醇－HCL反应物，请问是直接将这两样东西配成体系么？有什么要求么？（不好意思，我是新手，看了很多资料，还是不太明白先后顺利）。请问加入正乙烷、正庚烷的原理是什么？[color=#00008B]谢谢水中月的帮忙，这个我已经弄明白了。[/color]2。有没有人用过微波消解的方法，就是将溶液、原料、内参都配好后，用微波加热，请问一定需要这个步骤么？我看到有人说微波有助于缩短反应时间，那我只要将体系作用的时间延长不就可以了么？[color=#00008B]谢谢sartre的帮忙，这个我也明白了[/color][B]谢谢 水中月 的 帮忙，我吧你的资料仔仔细细的看了一遍，对于我这个菜鸟是很大的帮助啊，真是太感谢了。[/B]Question:1.我用甲醇-盐酸的原因是我看到一篇文章，《脂肪和脂肪酸甲酯化方法的研究》说到：％硫酸一甲醇酯化的主要优点是适用面广，既适于游离脂肪酸，又适合于结合态脂肪酸(脂肪)。碱法甲酯化只适合于脂肪，但其反应时间短，水解、甲酯化一步完成，是一种快捷、简便的分析方法。而我测的是游离脂肪酸，所以我才选择甲醇-盐酸的方法。不知这样选择酸催化或者碱催化甲酯化的方法是否正确？2.请问过程中用到正己烷，有的资料上提到正庚烷，这两个有什么差别么？是一回事么？3.还有，氮气除了做[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]时用到，还有什么地方需要用到吗？请知道的帮帮忙，谢谢！我会继续督促自己好好跟上的，谢谢!

脂肪酸测定是否一定需要甲酯化？用什么试剂甲酯化比较好？

脂肪酸甲酯化酸法优于碱法，不知道做过的人是否跟我一样的结论，油酸甲酯化后居然有4个以上较大成分峰，不知道是油酸不纯（化学纯）还是有其它的原因？

各位前辈好，本人未接触过[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]，但因实验需要，要测厌氧消化液中的挥发性脂肪酸（乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸等）。查阅的文献上是说酸化后可直接进样，但是我们这的老师说要先酯化后才能进样。我的问题是，不是因为长链脂肪酸沸点高才需要酯化的吗，我测的是短链酸，还需要酯化吗？如果酯化用什么方法好呢？我看了论坛上几篇帖子讨论的方法后还是一头雾水，因为本人底子薄，说得太简略还是不知道具体怎么操作。因为时间紧、样品数量多，请各位前辈能推荐个简单易行的方法，最好有具体操作步骤的，谢谢了！

脂肪酸测定是否一定需要甲酯化？用什么试剂甲酯化比较好？

友友们，请问有人做脂肪酸标准品甲酯化衍生成甲酯的衍生效率吗，我是用2%的硫酸甲醇溶液，70度水浴2小时。大家都是用塑料离心管来做的吗

[~149444~]有机酸本来没有出峰，做了烘干水样，甲酯化，后终于有峰出现，但信号比较微弱，可参加附件文件，请教各位高手峰的信号可能这样微弱吗？有很大影响吗？还有有没有做过甲酯化的，请教甲酯化的产物可能是什么呢？甲酯化具体是和甲醇浓硫酸（10：7）水浴60度加热12个小时，产物不定，觉得要研究起来也非常复杂!

我想对脂肪酸进行酸催化甲酯化再进行[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析，一般用的酸是盐酸或硫酸，我的问题是用盐酸一般是水溶液（浓硫酸也带点水），那么配盐酸甲醇溶液需要除水么？谢谢！

各位大侠，请帮帮我吧。在此万分感谢啊！本人是大四本科生，正在做毕业设计，题目是油脂食品中反式脂肪酸的含量测定，选用的样品是奶油。在计算确切含量时要用到酯化率，请教各位下，酯化率怎么算啊？实验过程中如何操作啊？好像是要用到甘油三酯标样吧还有我选用的是三氟化硼甲醇酯化的方法，指导我的那位研究生说这种方法只适用于一定酸价的脂肪酸，不是普适的，应该先测一下奶油脂肪酸的酸价，怎么测酸价啊？酸价是PH值吗

马兜铃酸和甲醇理论上会发生酯化反应，但是加过浓硫酸，加热至70℃左右和除水剂等都不发生反应，该怎么办

我的样品是纯的游离脂肪酸，我用硫酸甲醇甲酯化后，没信号。请问有其他甲酯化方法？

GB/T17376中脂肪酸甲酯化的三氟化硼法的前处理方法中在皂化、甲酯化之后还有氯化钠水溶液水洗，无水硫酸钠干燥；但是，在GB/T22110中的甲酯化方法中却是加1g一水合硫酸氢钠，没有水洗和干燥的步骤，请问这两种前处理方法对仪器或结果会有什么影响吗？

用对甲苯磺酸做催化剂进行有机酸甲酯化，计算酯化率，添加丙酸苯乙酯（IS）做内标，GC-MS检测后发现酯化后检测不到IS，为什么？难道是发生反应了？如果不能用丙酸苯乙酯做IS，改用什么酯做内标呢？

各位 有机酸酯化的方法有哪些啊？我正在参考脂肪酸甲酯化的方法 不知合适否好友回复：最简单的就是甲酯化

[color=#454545]脂肪酸测定是否一定需要甲酯化？用什么试剂甲酯化比较好？[/color]

我要做发酵液中有机酸成分分析，有机酸甲酯化方法有哪些，那种出峰效果比较好啊！！求大神指导啊！！急！！！

想求教一下 自己最近在做橡胶中硬脂酸分析 想问一下气相分析的话硬脂酸必须要甲酯化么？看到的甲酯化方法有三种：甲醇加热溶解再滴加浓硫酸放置10min然后萃取的；三氟化硼-甲醇溶液加热的；还有一种氢氧化钾的 哪种效果更好呢？如果用第一种浓硫酸甲醇的话是不是甲酯化不完全呢？实验室有FFAP和INNOWAX和DB-1柱子 查文献都有用的 有做过的哪个柱子更好呢？求有经验的给与指导解答谢谢~

我做脂肪酸，我做了气相，脂肪酸没有进行甲酯化，这样的结果可以吗？

我现在用气相色谱分析短链脂肪酸（甲乙丙丁酸），但我用浓硫酸甲醇酯化的效果不好，做标样的时候峰就很小，那位有高招帮帮忙，我的样特别少，有些冻干的方法还不能用。

有人问到 NHS化的染料蛋白标记我有跟帖简单回答 为了更清楚说明 并让更多人了解 NHS活化的荧光探针标记反应鉴于 荧光分析于毛细管电泳联用的广阔 前景单独发个主题帖 这大都是我的经验和理解 本人不是有机专业 有关合成方面 说错的地方还请拍砖 NHS化的荧光染料 是指 N-羟基琥珀酰亚胺 酯化的荧光染料标记 即N上的羟基与荧光探针上的羧基酯化反应[IMG]http://www.sigmaaldrich.com/structureimages/16/mfcd00005516.gif[/IMG]这些荧光探针与蛋白或者小分子胺偶联的原理很简单 都是 羧基与胺基反应生成酰胺键但是 一般的羧酸更倾向于 与胺基形成 铵盐因此引入个较好的离去基团就可以使羧基活化 促进羧基与胺基的共价键形成那么琥珀酰就是个很好的离去基团将荧光探针 用NHS进行酯化后 既可以相对稳定的保存，也可以直接用于与胺基分子的偶联，降低反应动力学壁垒与蛋白分子 或是 小分子胺 的偶联，原理相同 都是最终NHS基团离去，剩下的活化羧基与蛋白的胺基反应。在了解了原理的基础上，在进行NHS酯化的荧光探针标记策略上，应当着重注意以下几点：不用过多考虑蛋白的等电点，但需记住 胺基作为亲核基团的这个反应一般在 弱碱条件（pH=8~9）下进行 [B]！[/B]考虑到蛋白的特殊性 配制缓冲液注意需要避免 1）极端pH （2）重金属污染 和（3）过大的离子强度 导致的蛋白变性 [B] ！[/B]考虑到NHS酯化物的活泼程度，NHS化的荧光染料需要现配现加，不宜配制后静置过久。 [B] ！[/B]考虑到 反应原理 ，选择缓冲液和反应容器 需要严格避免胺基或者氨基污染，避免与蛋白分子竞争反应掉荧光染料。 e.g. 常用缓冲液 有 borate buffer，NaHCO3，磷酸盐等等此外，还需注意： A.一般 的protocol都是针对 抗体的，抗体是比较 坚强的蛋白 B.虽说暴露在蛋白表面所有的侧链胺基都有可能跟羧基反应 但是 反应动力学最大的还是 Lys的那个长侧链上的e-伯胺基，因此富含lys的蛋白偶联有福啦。 C.一般来说，反应活性 伯胺＞仲胺 D.别忘了 缓冲液选择也要考虑荧光探针自身特性，如果荧光探针自己带一个 很兴奋的胺基，那么由于自体的二聚反应，这个探针用于标记可能会效率很低当然NHS酯化的商品荧光探针有限，也可以用直接用 带油羧基的荧光探针偶联 蛋白，这时一般考虑使用 NHS EDC活化体系其原理就是 EDC先与 羧基形成个 不稳定的活化中间体然后 NHS接力 替代EDC形成 较稳定的 羧基活化体接下来的 就和上述原理一样了至于 标记上的蛋白 和未标记探针的蛋白 相互分离 每家公司各有法宝 我用过 BD公司的葡聚糖柱洗脱回收 也用CZE分离过小分子胺的标记产物其他更先进的方法就要看 论坛各位大神们的功夫啦附件上传的是 Pierce的NHS化荧光素的protocol 以及 Dynal beads羧基化表面偶联抗体的protocol 本文的 参考资料 有：http://en.wikipedia.org/wiki/N-hydroxysuccinimide[~185396~][~185397~]