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百部直立百部

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  • 【转帖】上海药物所中药百部传统功效的化学物质基础研究获奖

    中科院上海药物所叶阳研究员领衔的课题“中药百部传统功效的化学物质基础研究”近日荣获了上海市药学会颁发的“2007年度药学科技奖”二等奖。 百部为一味传统中药,《本草纲目》等典籍中均记载百部具有止咳、杀虫之功效。自20世纪80年代以来,叶阳课题组从百部中共分离得到生物碱成分95个,其中65个为新生物碱;非生物碱成分93个,其中26个为新的双苄类化合物,并首次实现了利用二维核磁共振等高分辨波谱技术解析百部碱类复杂化学结构的突破,发表的文章被普遍引用,带动了国内外多个研究小组参与到对该类植物的化学结构研究工作,积累了广泛的结构化学信息。课题组所报道的新生物碱数量占目前所有报道的百部生物碱的70%左右,非生物碱类的新化合物绝大多数也由该课题组首次报道,该项系统的化学研究工作使我国在对百部科植物的化学成分研究方面始终处于国际领先地位。本项目的研究成果已经在国内外专业期刊上发表研究论文33篇,申请相关专利3项,并在《天然产物化学》等权威书籍和杂志上撰写综述。上海药物研究所

  • 实验室如何摆布?

    PS:回答各位老师:微生物和生化实验室我们有2000平米,从P1-P3都有,各位同仁只考虑理化实验室即可。现在是这样的,目前理化实验室有1000平方米,大概准备40个房间。单位主要业务是做食品检测(GB5009系列),水质检测(GB5750-2006),职业卫生检测(按照GBZ/T160标准),地方病碘缺乏检测(包括尿碘,水碘和盐碘),需要重新摆布一下实验室,大型设备状况:目前单位有GC 2台;GC-MS 2台;LC2台;AAS 2台;AFS2台;ICS 2台;ICP-MS 1台;紫外3台;电子天平5台;分光光度计3台,其它相关小设备大于20台件(譬如PH计;凯氏定氮仪;脂肪提取仪;快速溶剂萃取仪等);如果要摆布实验室,应该怎样布局比较合理???目前我的布局是:原子吸收室;原子荧光室;紫外可见室;离子色谱室;气相色谱室;液相色谱室;ICP-MS室;GC-MS室;天平室;无机样品前处理室;有机样品前处理室;常规理化一室;常规理化二室;尿碘检测室;水碘检测室;盐碘检测室;超纯水室;供气室;洗涤一室;洗涤二室;样品室;毒品室;试剂室;更衣一室;更衣二室;库房。PS:请各位检测的高手看看,还缺少什么室,我还需要怎么摆布?

  • 【分享】译林出品:世界百部文学名著(pdf高清)

    【书 名】世界文学名著百部【作 者】亦霖,李宇编 【出版社】译林出版社,1999【形态项】100册,独立PDF文件 解压缩 357 MB,高清晰,有书签 【下 载】[url=http://www.namipan.com/d/70a24a0d7fcbd1d281124248f9dfd3f629e0f2b53158540f]世界文学名著百部.rar[/url]001 天方夜谭 (阿拉伯)著 刘可欣 译002 莎士比亚全集003 基督山恩仇记(法国)大仲马004 三剑客(法国)大仲马005 茶花女(法国)小仲马006 圣经故事007 格林童话(德国)格林兄弟008 简• 爱(英国)夏洛蒂• 勃朗特009 呼啸山庄(英国)艾米莉• 勃朗特010 傲慢与偏见(英国)琼• 奥斯汀011 爱玛(英国)简• 奥斯汀012 老人与海(美国)海明威013 钢铁是怎样炼成的(苏联)奥斯特洛夫斯基014 孤星血泪(英国)狄更斯015 雾都孤儿(英国)狄更斯016 双城记(英国)狄更斯017 大卫• 科波菲尔(英国)狄更斯018 悲惨世界(法国)雨果019 巴黎圣母院(法国)雨果020 红与黑(法国)司汤达021 巴马修道院(法国)司汤达022 战争与和平(俄)列夫• 托尔斯泰023 安娜• 卡列尼娜(俄)列夫• 托尔斯泰024 复活(俄)列夫• 托尔斯泰025 克莱采奏鸣曲(俄)列夫• 托尔斯泰026 飘(美国)玛格丽特• 米歇尔027 唐• 吉诃德(西班牙)塞万提斯028 牛虻(爱尔兰)艾塞尔• 丽莲• 伏尼契029 福尔摩斯探案集(英国)柯南道尔030 漂亮朋友(法国)居伊• 德• 莫泊桑031 羊脂球(法国)莫泊桑032 古希腊罗马神话故事033 你往何处去(波兰)亨利克• 显克微支034 磨坊书简(法国)都德035 包法利夫人(法国)福楼拜036 情感教育(法国)福楼拜037 名利场(英国)萨克雷038 欧也尼• 葛朗台(法国)巴尔扎克039 高老头(法国)巴尔扎克040 邦斯舅舅(法国)巴尔扎克041 幽谷百合(法国)巴尔扎克042 两个新嫁娘(法国)巴尔扎克043 罪与罚( 俄 )陀思妥耶夫斯基044 白痴(俄)陀思妥耶夫斯基045 被侮辱与被损害的(俄)陀思妥耶夫斯基046 白夜(俄)陀思妥耶夫斯基047 我的大学(苏联)高尔基048 童年(苏联)高尔基049 在人间(苏联)高尔基050 母亲(苏联)高尔基051 十日谈(意)卜迦丘052 汤姆• 索亚历险记(美国)马克• 吐温053 百万英磅(美国)马克• 吐温054 唐璜(英国)拜伦055 环游世界八十天056 荒野的呼唤(美国)杰克• 伦敦057 安徒生童话(丹麦)安徒生058 猎人笔记(俄)屠格涅夫059 父与子(俄)屠格涅夫060 前夜(俄)屠格涅夫061 贵族之家(俄)屠格涅夫062 木木(俄)屠格涅夫063 罗亭(俄)屠格涅夫064 蝴蝶梦(英国)达芙妮• 杜穆里埃065 鲁宾逊漂流记(英国)丹尼尔• 笛福066 好兵帅克(捷克)雅罗斯拉夫• 哈谢克067 圣女贞德(英国)肖伯纳068 窈窕淑女(英国)肖伯纳069 奥勃洛莫夫(俄)冈察洛夫070 吝啬鬼(法国)莫里哀071 夏伯阳(苏联)富尔曼诺夫072 白鲸(美)赫尔曼• 梅尔维尔073 绿林侠客罗宾汉(英国)074 这里的黎明静悄悄(前苏)鲍• 瓦西里耶夫075 约翰• 克利斯朵夫(法国)罗曼• 罗兰076 苔丝(英国)哈代077 上尉的女儿(俄)普希金078 驿站长(俄)普希金079 黑桃皇后(俄)普希金080 一个陌生女人的来信(奥地利)斯• 茨威格081 情感的迷惘(奥地利)茨威格082 绿野仙踪(美国)鲍姆083 西线无战事(德国)雷马克084 第四十一(前苏)拉夫列尼耶夫085 愤怒的葡萄(美国)约翰• 斯坦培克086 木偶奇遇记(意大利)科洛• 科诺弟087 伊豆的舞女(日本)川端康成088 罗生门(日本)芥川龙之介089 钦差大臣(俄)果戈理090 死魂灵(俄)果戈理091 格列佛游记(英国)乔纳森• 斯威夫特092 斯巴达克思(意大利)拉• 乔万尼奥里093 跳来跳去的女人(俄)契诃夫094 化身博士• 金银岛(英国)史蒂文森095 小妇人(美国)露易莎• 梅• 爱尔科特096 娜娜(法国)左拉097 艾丽丝漫游奇境记(英国)卡洛尔098 嘉尔曼(卡门)(法国)梅里美099 费加罗的婚礼(法国)博马舍100 红字(美国)霍桑

  • 【分享】中国古典文学名著百部(已发附件)

    汇总中国古典文学创作的精华全面反映中国古典文学的最高成就,为大家提供中国第一流的文学精品,它以最能代表一个时代文学成就的名家名著为骨干,同时全面地反映其他体裁,如中短篇小说、诗歌、散文、戏剧、童话、寓言、民间故事等各方面最优秀成果,上至诗经、楚辞、诸子百家;中承唐诗、宋词、元曲;下继明清小说,文白交辉,圆融海纳,自成体系。  无论是一代先师孔子、屈原,还是历代文学之扛鼎李白、杜甫、白居易、韩愈、苏轼、柳宗元、欧阳修,现或是各派文学之集成者曹雪芹、冯梦龙、蒲松龄尽收其中。中国古典文学名著百部 1. 山海经 (晋)郭璞注 (西汉)刘歆编 509 KB 2. 红楼梦 (清)曹雪芹 高鄂 9.58 MB 3. 三国演义(明)罗贯中 6.35 MB 4. 水浒传(明)施耐庵 8.65 MB 5. 西游记(明)吴承恩 8.76 MB 6. 隋唐演义(清)褚人获 7.80 MB 7. 东周列国志 (明)冯梦龙(清)蔡元放 8.22 MB 8. 三国志 (西晋)陈寿 4.93 MB 9. 聊斋志异 (清)蒲松龄 5.94 MB 10. 文心雕龙 (南北朝)刘勰著 970 KB 11. 智囊全集(明)冯梦龙 11.60 MB 12. 资治通鉴选(北宋)司马光等 2.29 MB 13. 古文观止 (清)吴楚材 吴调侯 2.02 MB 14. 容斋随笔(宋) 洪迈 17.00 MB 15. 先秦时期官训(现代)唐河 王文祥 33.58 MB 16. 世说新语(南朝宋)刘义庆 5.43 MB 17. 闲情偶寄(清)李渔 5.99 MB 18. 梦溪笔谈(北宋)沈括 1.31 MB 19. 汉书选 (东汉)班固 1.26 MB 20. 周易 (商)姬昌 1.71 MB 21. 史记选(西汉)司马迁 993 KB 22. 史通(唐)刘知几 1.62 MB 23. 左氏春秋(先秦)左丘明 3.28 MB 24. 尚书(先秦)孔子编选 910 KB 25. 国语(先秦)左丘明 3.73 MB 26. 颜氏家训(北齐)颜之推撰 3.03 MB 27. 水经 (汉)桑钦撰 814 KB 28. 阅微草堂笔记(清)纪昀 14.3 MB 29. 屈原全集(先秦)屈原 804 KB 30. 楚辞(西汉)刘向 964 KB 31. 唐诗三百首(清)蘅塘退士 1.02 MB 32. 宋词三百首 (清)朱祖谋 1.75 MB 33. 元曲三百首(现代)任中敏 1.12 MB 34. 古诗源(清)沈德潜 1.55 MB 35. 诗经(东汉)郑玄 2.09 MB 36. 诗品(梁)钟嵘 1.52 MB 37. 词综(清) 朱彝尊 5.06 MB 38. 千家诗 (清)王相 (宋)谢仿得 962 KB 39. 绝妙好词(宋)周密 1.32 MB 40. 十八家诗抄(清)曾国藩 8.69 MB 41. 汉赋 (西汉)司马相如 张衡 等 715 KB 42. 李白全集(唐)李白 2.96 MB 43. 杜甫全集(唐)杜甫 3.82 MB 44. 白居易全集(唐)白居易 7.74 MB 45. 韩愈全集(唐)韩愈 3.28 MB 46. 苏轼全集(宋)苏轼 14.30 MB 47. 陆游全集(宋)陆游 14.00 MB 48. 欧阳修全集(宋)欧阳修 10.30 MB 49. 陶渊明全集(晋)陶渊明 462 KB 50. 柳宗元全集(唐)柳宗元 3.73 MB 51. 唐宋诗醇(清)爱新觉罗弘历 8.89 MB 52. 唐宋文醇(清)爱新觉罗弘历 6.50 MB 53. 扬州十日记(清)王秀楚 669 KB 54. 官场现形记(清)李宝嘉 6.04 MB 55. 二十年目睹之怪现状(清)吴研人 4.43 MB 56. 老残游记(清) 刘鄂 2.47 MB 57. 儒林外史 (清)吴敬梓 3.47 MB 58. 镜花缘(清)李汝珍 4.52 MB 59. 醒世恒言(明) 冯梦龙 5.78 MB 60. 警世通言(明) 冯梦龙 4.51 MB 61. 喻世明言(明) 冯梦龙 4.51 MB 62. 初刻拍案惊奇(明) 凌氵蒙初 4.56 MB 63. 二刻拍案惊奇(明) 凌氵蒙初 4.68 MB 64. 封神演义 (明) 许仲琳 7.12 MB 65. 五虎平西演义(清)无名氏 3.58 MB 66. 杨家将演义(明)熊大木 1.87 MB 67. 万花楼演义(清)李雨堂 3.66 MB 68. 说呼全传 (清)佚名 1.26 MB 69. 说岳全传 (清)钱彩 4.42 MB 70. 三侠五义 (清)石玉昆 5.31 MB 71. 说唐 (清) 佚名 3.66 MB 72. 儿女英雄传(清)文康 5.94 MB 73. 飞龙全传(清)吴璿 4.25 MB 74. 桃花扇 (清)孔尚任 2.22 MB 75. 乐府阳春白雪 (清)李渔著 1.36 MB 76. 西厢记(元) 王实甫 2.67 MB 77. 中山狼(明) 康海 1.25 MB 78. 英烈传(明) 郭勋 3.66 MB 79. 阳春白雪 (宋) 赵闻礼 2.29 MB 80. 玉台新咏(南朝陈) 徐陵 1.23 MB 81. 长生殿(清)洪昇 1.71 MB 82. 幽闺记(元)施惠 1.38 MB 83. 花间集(后蜀)赵崇祚 989 KB 84. 孽海花(清)曾朴 2.80 MB 85. 绿牡丹(明)吴炳 1.33 MB 86. 精忠旗 (明)冯梦龙 1.57 MB 87. 清忠谱 (清)李玉 1.22 MB 88. 粉妆楼 (清)竹溪山人 2.47 MB 89. 风筝误 (明)李渔 1.38 MB 90. 汉宫秋 (元) 马致远 495 KB 91. 窦娥冤(元)关汉卿 911 KB 92. 娇红记(明)孟称舜 1.58 MB 93. 救风尘(元)关汉卿 767 KB 94. 雷峰塔(清)方成培 1.67 MB 95. 李逵负荆(元)康进之 858 KB 96. 琵琶记 (元)高明 1.32 MB 97. 墙头马上(元) 白朴 812 KB 98. 玉簪记 (明)高濂 1.02 MB 99. 赵氏孤儿(元)纪君祥 728 KB 100 看钱奴(元)郑廷玉 1.44 MB[url=http://www.namipan.com/d/6046580bd5ec048ed39e7d937f730f7f925b945fc2821d10]中国古典文学名著百部.rar[/url]呵呵,不逗大家了希望大家喜欢

  • 【原创大赛】库存摩擦小白布,还能用吗

    【原创大赛】库存摩擦小白布,还能用吗

    库存摩擦小白布,还能用吗 纺织品是我们生活中最常用的生活用品,是每个人都需要的,也是最常用的生活消费品,也造就了全球纺织企业众多,经久不衰的条件,我国是世界人口最多的国家,那么纺织品的消费更是一个庞大的群体,当然,纺织品也是我们每个人的必备品 纺织品我们很多时候人还是停留在穿着是否漂亮,是否是品牌,用着是否舒服,大多数还是把纺织品用作保暖或者显摆的阶段,是否健康,安全,设计合理还不是很重视,真正的可以说对纺织品安全有所重视还是近十年来才有所提升 纺织品相关的标准应该至少几百上千个,但真正常用的标准并不多,自从有了国家纺织产品基本安全技术规范以来,纺织品的检测才真正的受到重视起来 纺织品耐摩擦色牢度测试也是一个非常重要的测试项目,被写入纺织品基本安全技术规范内,涵盖了绝大部分纺织产品,足以说明摩擦色牢度的重要性 我们主要用国标,采用的是GB/T3920-2008《纺织品色牢度试验,耐摩擦色牢度》标准方法。使用的设备是耐摩擦色牢度试验仪。 纺织品摩擦色牢度测试用的小白布作为常用耗材,我们一般一年采购一次,那么采购回来会抽样做一下技术验收,但是摩擦小白布毕竟放置2年,我们每年会对库存的摩擦小白布做一次验证,国标使用的摩擦小白布是以包为单位,数量不详,这个数量1000片左右一包,供应商说这个是有偏差的,数量仅供参考。 为此我们和供应商达成合同要求,只从以下5方面来做验证验收1. 小白布纤维成分:100%棉2. 小白布不含荧光增白剂3. 梭织小白布, 尺寸4. 小白布毛边不散纱,吸湿性好5. 小白布上机用标准物质验证5.1上机验证作业程序5.1.1干摩擦:将调湿后的摩擦布平放在摩擦头上,使摩擦布的经向与摩擦头的运动方向一致,然后裹在摩擦头上并用夹头夹紧,松开支承,放下包裹试布的摩擦头,按启动按钮,摩擦头在电机的驱动下经过减速器,由曲柄连杆带动摩擦头以1秒/次的速度作往复摩擦循环,摩擦结束后松开试样,取下摩擦布,并去除摩擦布上可能影响评级的任何多余纤维。[img=,254,323]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121028066001_8004_2154459_3.png!w254x323.jpg[/img]5.2.评级,评级时,在每个被评摩擦布的背面放置三层摩擦布[img=,657,566]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909121013255281_6542_2154459_3.png!w657x566.jpg[/img] 验证结果比较满意,小白布一般没有标注有效期,所以一般是用一年两年都有可能,所以我们要阶段性的进行验证,保证库存小白布能正常使用。

  • 【原创大赛】纺织品摩擦色牢度小白布采购

    【原创大赛】纺织品摩擦色牢度小白布采购

    纺织品摩擦色牢度小白布采购色牢度测试是考核纺织品内在质量的重要指标,色牢度在纺织产品使用当中有时是能直观的体现出来,比如水洗时会不会掉色,和白色纺织品一起使用时,会不会沾色,染色等等摩擦色牢度就是用白布和试样进行摩擦,测试各类纺织品耐摩擦沾色牢度,所以摩擦用白布是摩擦色牢度测试准确度的关键。1. 标准摩擦白布尺寸,是实验室摩擦色牢度测试中的标准品,但不是所有的白布都可以作为摩擦白布的,有些印染厂的内部实验室用的是自己生产的小白布,由于其纱支,密度,克重等不同于标准的摩擦布,则测试结果就有了不确定性,测试的结果也只能作为参考。2. 实验室用的标准品摩擦小白布是有相关标准要求的,比如纱支的要求,密度的要求,布种的要求等等,这些要求决定着小白布的质量和标准,同时也是让我们所有实验室有一个标准的要求,不至于因为小白布的原因致使误差的产生。由于实验室的标准耗材规划没有做好,我们实验室的小白布使用到最后一盒,才发现库存为0,为了不影响测试工作,经申请,领导同意,要求采购部直接去市场采购小白布,先买回几盒应急,然后再通过正常渠道进行下面就是我们市场现采的标准品,先看看外观吧!http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408011605_508785_2154459_3.jpg这一批市场现采,包括化学药品,在一个实验室用品店买的,采购直接去买,然后直接抱到实验室,我签字的!然后给财务报销费用的。打开纸箱看看‘庐山真面目’!http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408011606_508787_2154459_3.jpg 接着层层剥皮,看看盒子里面装的是不是和平时用的一样,有没有相关的标准证明!一大盒装,每大盒里面有五小盒,每盒有若干小白布http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408011606_508789_2154459_3.jpg再打开小盒看看,里面的小白布外观怎样,是不是和之前的外观一致http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408011607_508790_2154459_3.jpg外观基本一致,和之前的基本一样,那么看看证明性文件和验证要求是不是规范http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408011607_508791_2154459_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408011608_508793_2154459_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2014/08/201408011608_508794_2154459_3.jpg根据上面的观察,基本判定,此批次现采的小白布,外观和之前所用的标准小白布一致,外观无异常,外观合格。小结:1. 标准品的采购一定要慎重,一定要细致的观察外观,有些假冒的是能看出一点端倪的2. 标准品采购尽量直接从有资质的厂家或者代理商那里采购,并建立长效的合作机制3. 如非特殊情况,尽量不要现采,以免买到不标准的标准品4. 对标准品的辨别,相关采购人员他也要有一定的辨别能力,对于价格偏低,或者以清货的名义折扣很低的时候,要小心慎重的辨别5. 现采和更换供应商时,一定要对标准品进行技术验证。

  • 浅读IBM Research–Zurich最新力作——纳流控摇摆布朗马达

    浅读IBM Research–Zurich最新力作——纳流控摇摆布朗马达

    2018年3月,世界知名的科研团队IBM Research-Zurich于 Science 杂志发表了最新力作:Nanofluidic rocking Brownian motors。IBM Research-Zurich原名为IBM Zurich Research Laboratory,曾因重大发明成果在1986年和1987年获得过诺贝尔物理学奖,为大家所熟知。今天,我们带着原文一同品味纳流控摇摆布朗马达的科学探索。[b]浅读纳流控摇摆布朗马达[/b] 大多数物质间的相互作用机制会在物质尺度小至纳米量级时产生不利的缩放效应,因此,在流体中控制、输运纳米尺度的物体是一个巨大的挑战。通过精确控制纳流控器件中狭缝结构的几何参数,同时利用类带电粒子与纳流控器件中墙面结构间的静电作用,M. J. Skaug等人设计了针对纳米颗粒的能级图谱。他们通过将非对称势垒与振荡电磁场结合,获得了一种摇摆布朗马达,从而可以对纳流体中的纳米颗粒的定向输运进行调控。Skaug分析了此种分子马达的物理机制,与理论模型进行对比后,基于分子马达成功制备了一种分类器件。这种器件可以在几秒钟的时间内使两种不同粒径的纳米颗粒(直径分别为60 nm和100 nm)在器件中沿着相反方向运动,从而实现对两种颗粒的分离。后续的模拟分析结果证明:这种新型器件可以有效区分粒径差异在1 nm量级的不同纳米颗粒。 除了在材料、环境科学领域(尺寸分析、过滤、单分散制备)具有应用潜力外,能够对纳米尺度颗粒进行尺寸选择性输运、收集的芯片实验室器件,在床边检测及生化领域(如分子分离、预浓缩)的应用亦被寄予希望。以探测流体中的低浓度物质为例,通过在探测器中引入定向输运机制,可以将浓度极低的被探测物质输运至探测器中的感应区域,并使被探测物质形成集聚,从而克服传统探测方法中存在的各类技术限制,实现对低浓度物质的有效探测。受到生物学中分子马达的启发,Magnasco和Prost等人曾经提出利用人造布朗马达来实现类似的颗粒输运功能,这种布朗马达的物理机制是基于非对称势垒以及非平衡力的调控。前人的实验中,主要都是集中在“闪烁棘轮”型的布朗马达,它是利用周期性非对称势垒以及各向同性扩散机制来实现微米尺度颗粒的定向输运的。在这种布朗马达中,通常是利用外加光场或介电泳产生的力学作用来获得所需的势垒,所以势垒的作用效果会随颗粒尺寸缩小而减弱,因此这类马达很难满足纳米尺度实验的需求。 闪烁棘轮型布朗马达中的颗粒扩散效应依赖于颗粒的尺寸,研究人员对这类马达在颗粒分类方面的应用潜力进行了探究。然而,与连续层式流动器件的情况相似,利用外加力来替代扩散作用会使得尺寸的区分能力变差。摇摆型布朗马达则利用零平均外加力和静态势垒产生直接的定向颗粒运动。这类布朗马达的输运特性与其所传输颗粒的扩散特性,二者之间表现出了一种极其显著的非线性依赖关系,这对纳米颗粒的区分、分离来说具有重要的意义和应用潜力。然而,对于纳米尺度的颗粒来说,如何创造一个能量足够强的静态势垒是一个挑战。 静电俘获可以有效解决这一挑战,具体思路是将类带电颗粒限制在均匀带电的表面之间。在其中一个表面上制备一个凹陷的几何结构,可以降低此处局部的颗粒-表面相互作用能量,从而定义一个侧向的俘获势垒。约束颗粒的能量大约在几个kBT的量级(其中kB是玻尔兹曼常数,T是绝对温度),可以稳定地俘获多种带电颗粒,比如金纳米球与纳米棒(粒径在十几至一百多纳米左右)、囊泡(五十纳米左右)、DNA寡核苷酸(含有十几至六十几个碱基)、蛋白质分子(分子量在十几kDa)。 Skaug等人扩展了利用几何结构诱导静电俘获的思路,以三维结构取代此前简单的二维凹陷结构,从而创造了针对纳米颗粒的复杂二维能级图景。三维结构的构筑是通过利用热扫描探针光刻方法获得的,这种方法在纵向的图形控制精度可以达到纳米量级。[align=center][img=,500,306]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807311347510856_9222_981_3.jpg!w690x423.jpg[/img] [/align][align=center]图1 利用热扫描探针光刻技术制备纳流控布朗马达、定义棘齿形貌:[/align][align=center](A)纳流控器件中的狭缝截面示意图及俯瞰图;[/align][align=center](B)形貌图像;[/align][align=center](C)图(B)中的圆环状棘齿结构的放大形貌图;[/align][align=center](D)图(B)中白线标识区域的剖面轮廓图,即棘齿台阶轮廓图;[/align][align=center](E)被俘获纳米颗粒的光学图像。[/align][align=center][/align][align=center][img=,500,379]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807311348456748_522_981_3.jpg!w690x524.jpg[/img] [/align][align=center]图2 实验测量的平均势垒的决定因素:[/align][align=center](A)四种图形化棘齿的形貌图以及三种控制场的示意图;[/align][align=center](B)棘齿单元的轮廓示意图;[/align][align=center](C)棘齿限制的纳米颗粒的能量曲线(平均实验数据与有限元模拟数据对比);[/align][align=center](D)九种不同间隙距离的棘齿的能量势垒曲线对比;[/align][align=center](E)由因子α确定的棘齿能量势垒通用曲线。[/align][align=center][/align][align=center][img=,500,341]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807311349216951_1045_981_3.jpg!w690x471.jpg[/img] [/align][align=center]图3 粒径60 nm与粒径100 nm的金颗粒的分类:[/align][align=center](A)分类器件的形貌图像;[/align][align=center](B)图(A)白色虚线框内区域的放大图;[/align][align=center](C)上图:金颗粒分类原理简图;下图:相应的静态能量曲线(实现为测量值、虚线为模拟值);[/align][align=center](D)金颗粒在分类器件中不同时刻的光学图像;[/align][align=center](E)颗粒的空间分布图像;[/align][align=center](F)模拟得到的颗粒漂移与粒径的函数关系。[/align] 通过一系列的测试以及相应的理论计算、模拟,Skaug等人展示了在水平表面与带有三维图形修饰的表面之间的电泳可以有效限制纳米颗粒,从而创造一个可以由几何形貌结构定义的、针对纳米颗粒的能量图景。通过精确调节表面之间的间隙,一阶俘获势垒可以简单地按比例缩放,从而提供了一种可以用于优化系统的有效手段。在实验当中,所有与模拟纳流控系统有关的必要物理量都可以原位获取。实验与理论的一致性,证明了对文中系统工作机制的解释以及对系统特性的预测的可靠性。摇摆布朗马达输运特性的非线性特性以及静电作用的非线性特性,是文中器件实现对纳米颗粒高效分离的物理基础。 更进一步,基于文中的模拟分析以及Ruggeri等人关于颗粒俘获研究的结果,Skaug等人预测可以通过比例缩放的手段,将文章中的方法应用于对生物小分子的分离、分类。与基于流动的分离机制相反,采用摇摆布朗马达可以实现纳米颗粒的选择性输运、精确分离、集聚,且不需要电泳净流或热力学梯度这类条件。通过将更小的棘齿形貌参数与更低的外加电场相结合,这类器件将非常适合应用于针对芯片实验室中少量液体的高精度成分分析。 参考文献:Nanofluidic rocking Brownian motors, Skaug et al., Science 359, 1505-1508 (2018)

  • 【原创大赛】纺织品标准摩擦小白布内部验收方法

    【原创大赛】纺织品标准摩擦小白布内部验收方法

    纺织品标准摩擦小白布内部验收方法纺织品是我们生活中最常用的生活用品,是每个人都需要的,也是最常用的生活消费品,也造就了全球纺织企业众多,经久不衰的条件,我国是世界人口最多的国家,那么纺织品的消费更是一个庞大的群体,当然,纺织品也是我们每个人的必备品 纺织品我们很多时候人还是停留在穿着是否漂亮,是否是品牌,用着是否舒服,大多数还是把纺织品用作保暖或者显摆的阶段,是否健康,安全,设计合理还不是很重视,真正的可以说对纺织品安全有所重视还是近十年来才有所提升纺织品相关的标准应该至少好几百个,但真正常用的标准并不多,,纺织品的检测在最近十年才真正的受到重视起来,美国对这方面的重视就比较早,也比较严格。美标的纺织品耐摩擦色牢度测试也是一个非常重要的测试项目,绝大部分纺织产品也都需要进行这个项目的检测,足以说明摩擦色牢度的重要性摩擦色牢度测试主要要两方面比较重要,一个是测试仪器,一个就是摩擦小白布准尺寸,仪器是固定资产,属于耐用品,采购回来验收一次就行了,但摩擦小白布是耗材,需要经常采购,所以每批次都进行验收,那么大家怎么验收的呢,如果按照所有的技术要求,我们做不到,只能在实验室能力范围内进行验收,摩擦小白布的采购流程如下申购-审批-确认-报价-下单-发货方式-汇款-发货-收货收货以后就要进行验证了,一般首先是检查外观的完整性,接着打开外包装盒,看其说明书,验证报告等是否完全,小盒装的数量是否缺少,有没有污染损坏,打开小包装盒,看摩擦小白布边角是否脱散,有没有多边形或者切边不齐http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816132901_01_0_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816133534_01_0_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816134155_01_2154459_3.jpg看不太懂,找人稍微翻译一下http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816134942_01_2154459_3.jpg数数量,每盒多少片http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816135424_01_2154459_3.jpg每片摩擦小白布的尺寸http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816135909_01_2154459_3.jpg重量,以盒为单位求平均克重http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816141315_01_2154459_3.jpg是否是平纹布,目光检定,用经验判断用标准密度镜数密度http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816142063_01_2154459_3.jpg测纱支http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816142706_01_2154459_3.jpg测试成分含量http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509181627_566725_2154459_3.jpg测试PH值http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816260784_01_2154459_3.jpg标样验证:1.引用标准AATCC8-2001《耐摩擦色牢度试验方法》2.设备和材料耐摩擦色牢度试验仪3. 验证程序打开电源开关,电源指示灯亮,显示窗显示000,微机默认次数值为10次。在这种状态下可改变默认值次数3.1干摩擦验证摩擦布将标准试样置于标准衬垫上并铺平,转动手柄偏心夹紧试样。将调湿后的摩擦布平放在摩擦头上,使摩擦布的经向与摩擦头的运动方向一致,然后裹在摩擦头上并用夹头夹紧,松开支承,放下包裹试布的摩擦头,按启动按钮,摩擦头在电机的驱动下经过减速器,由曲柄连杆带动摩擦头以1秒/次的速度作往复摩擦循环,摩擦结束后松开试样,取下摩擦布,并去除摩擦布上可能影响评级的任何多余纤维。纺织品试样进行评级,然后和标准试样的已知摩擦级别进行对比,0.5级内偏差接受。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015091816143926_01_2154459_3.jpg备注:以上的所有检验项目是我们实验室可以进行做的纺织品摩擦小白布的验收项目,有个别的技术指标我们也无法做到,但是我们纺织品实验室所有采购回来的标准品,耗材都会进行最大限度的验收,这是我们检测结果准确性的保证,特别是摩擦小白布,直接决定测试结果是否有效,准确,我们更应该认真仔细的进行验收注意:在标准光源下,评级时,用评定沾色用灰色样卡评定摩擦布的沾色级数,精确到0.5级,建议两人以上评级。

  • 吃药为什么不能用茶叶水服用?

    茶叶中所含的鞣酸很容易与胃中的生物碱发生作用形成不溶的沉淀物,从而使药不能被人体吸收,发挥不了药效作用。很多中药的有效成分都是生物碱,如麻黄含有麻黄碱和伪麻黄碱,黄连与黄柏都含有小糵碱,百部含有百部碱,其它如元胡、大蓟、小蓟、川牛膝、曼陀罗等的有效成分也主要是生物碱。因此,含有这些成分的药和茶水同服,就会发生沉淀而影响药效的发挥。另外,茶叶中的鞣酸具有收敛作用,会阻止人体对蛋白质营养物质的吸收,因而在服用党参、黄芪、山药等补养药时,饮茶,特别是饮浓茶,也会降低药效。茶、药(特别是中草药)的生物成分很多、很复杂,其间的相互关系还远没有全面清楚地了解,所以不论负面作用有没有、有多大,在吃药时最好是不宜用茶水送服。转载自微信公众号《生活中的化学》

  • 【“仪”起享奥运】薄层色谱鉴别中药配方颗粒

    薄层色谱鉴别是中药配方颗粒的主要鉴别方法。由于中药配方颗粒的制备工艺是由药材经水提、浓缩、干燥、制粒而成,为保证对照药材与样品薄层色谱斑点的对应性,对照药材也应尽量先用水煎煮,得到的水溶液再照样品的制备方法处理。但部分品种标准中规定的对照药材前处理方法缺少水煎煮提取的步骤,如板蓝根配方颗粒,标准中规定取板蓝根对照药材直接用稀乙醇提取浓缩点样。此外,炮制品种的薄层色谱,大多使用未经炮制的原药材作为对照药材,上述情况均有可能导致样品斑点与对照药材的斑点不完全一致,给结果判定造成障碍。此外,还有部分品种的薄层方法需要优化,如蜜百部(对叶百部)配方颗粒使用的显色剂是改良碘化铋钾试液,试验中喷该显色剂后对照药材和样品均未出现斑点,改为喷碘化铋钾试液后,斑点出现;黄柏配方颗粒的薄层展开剂含水,斑点展开效果较差,且在日光下观察,斑点信息较少,建议参考《中华人民共和国药典》2020年版第一部中大补阴丸鉴别的方法对该项目进行修订。

  • 天气日渐炎热带来的是药市的淡季 中药材价格指数平稳下滑

    本月(3.27-4.23)全国中药材价格综合200指数于3月27日开盘维持走平于2625点周围,走平延续至4月7日后,指数出现一定幅度下滑,并于4月17日下滑至2591点,随后再度走平至4月20日,4月23指数上升收复2600点。截至4月23日,中药材价格综合200指数报收2603.21点,月环比下跌0.402%。  中药材天地网点评  在监控的200个品种中,有21个品种市场价格上涨,146个品种市场价格持平,33个品种市场价格下跌。  涨幅前五  辽细辛:该品今年新货量不大,看好商家持续购进货物带动价格上升。  胖大海:今年圆果国外产地来货量不足,多商抢购货物拉动价格骤升。  天麻:因3月有商家到产地大量吃货,导致货源走动加快价格有升。  广藿香:夏季是广藿香消耗旺季,3月有厂家进入拿货使行情有上升。  决明子:该品国内种植减少,进口量也不多,价格略有上调。  跌幅前五  秦艽:云南秦艽市场来货不断增多,行情续显下滑。  川明参:该品种产新持续中,价格不断出现回调。  百部:百部近期整体走销量下降,行情略有下滑。  槐花:该品市场寻货商家不多,价格显微落。  柴胡:3月底柴胡入市量增多,行情走缓使价有下滑。  后市观察  即将进入5月,天气日渐炎热带来的是药市的淡季,近期综合200指数下滑也验证的市场面临淡季的状况,缺少明星大宗品种的支撑,指数后期还有进一步下滑的空间。

  • 【分享】清代百官补服鉴赏

    【分享】清代百官补服鉴赏

    [img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/03/200703161156_45262_1629752_3.jpg[/img]  大家都知道“衣冠禽兽”这个词吧。有人说这个词就是根据官服来的,因为当时的官服文官“补子”的图案是禽类,而武官的图案是兽类,老百姓管穿着官服不给百姓办实事的官员叫“衣冠禽兽”。当然了,这种说法虽不足为据,但却生动地说明了官服上的特点。封建王朝的衣冠之治集中体现在官服上,这在清代又称补服,就是在褂子的前胸后背各缀一块布称为补子,绣上不同的飞禽走兽,以表示官职的差别和道德含义,“补子”的图案根据官员级别的不同也都是不一样的。清朝时期的官服都是由“江南织造局”来完成制作的,一般的裁缝是不能制作官服的。“补子”的绣法复杂多样:线外包金银的叫做平金绣,在夏服上用的叫戳纱绣,只用彩线而线外不包金银的叫彩绣,还有打籽绣等多种方式。

  • 低调,淡定,沉默是金!

    总觉得应该允许别人犯错误,人无完人,自己坐在别人相同的位置上能做得更好更完美吗?如果做不到白壁无瑕,说大一点不都是五十步笑百步吗?唉!真的很无奈。人在江湖,身不由己?

  • 萝卜中百菌清的添加回收

    RT:萝卜中百菌清的添加回收实验有老师在萝卜中添加百菌清之后没有检测到,用了GC-ECD和GC/MS。有没有做过类似实验的版友?

  • 耐热输送带带身弯曲的原因

    当曲折发生时,首先应查看平板硫化机的三个夹持器是不是成一条直线。特别是尼龙芯和E芯有必要二次冷定伸,假如硫化时一次拉伸和二次冷定伸的夹持视点不是90度时,往往会形成弯带。所以操作工人在拉伸时视点不正,或夹持器有一边松一边紧的状况,也有也许形成弯带。此外,带坯摆布厚度差错过大,一边厚一边薄,厚的一边硫化时经紧缩会比薄的一边略长,每板堆集下来,则会形成带坯厚的一边唱,而薄的一边短,因此形成曲折。在生带硫化时,假如放入模框中不正,放偏了,也有也许形成弯带。解决方法:1.成型工序尽量将帆布有布边的并条错开运用,摆布并条要松紧共同,生带不能不能一边薄一边厚。2.经常查看前、中、后三个夹持器运转视点,和夹持的摆布油压是不是共同,是不是有一边松一边紧表象。3[img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_png/1rHJQGicUyIyDAumDXvQpK3Ulg626MPdib3805MI9uYQVGoehbQS19tEy2FesaMPH41lbYg5VDTHZ3qFdw5EJWsA/640?wx_fmt=png&tp=webp&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img].定时调整平板,减小摆布差错。

  • 【实战宝典】如何测定白萝卜中的百菌清?

    [font=宋体]发帖人:[/font]yyspjczx[font=宋体]链接:[/font][url]https://bbs.instrument.com.cn/topic/3386220[/url][b][font=宋体]问题描述:[/font][/b][font=宋体]用[/font]NY/T761-2008[font=宋体]的检测方法前处理白萝卜测百菌清时,未加磷酸时,白萝卜的百菌清无回收。同时加[/font]0.5mL50%[font=宋体]磷酸水溶液处理后百菌清有回收,同时不影响其它有机氯类农残的检测。[/font]

  • 【“仪”起享奥运】中药配方颗粒特征/指纹图谱的分析难度在哪里

    中药配方颗粒特征/指纹图谱的分析难度相对较大。第一是超高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url](Ultra Performance Liquid Chromatography,UPLC)方法的耐用性不佳,色谱柱型号和色谱仪品牌对分离效果有较大影响。如百部/蜜百部(对叶百部)配方颗粒,使用标准正文中对照特征图谱下标注的参考色谱柱,能得到色谱行为与标准图谱相似的色谱图,但此前尝试使用3种其他型号相似规格的色谱柱,均未能达到理想的分离。而山萸肉/酒萸肉配方颗粒、北柴胡配方颗粒等品种使用参考色谱柱得到的色谱图却很不理想,更换其他型号的色谱柱后才得到与对照图谱类似的色谱图。另外,由于不同品牌色谱仪的死体积与泵混合差异,在小流量梯度洗脱时色谱仪品牌对色谱行为有非常大的影响,如葛根配方颗粒、蛇床子配方颗粒和大黄配方颗粒,使用某品牌超高压[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的分离效果较差,更换另一品牌仪器后,试验结果较为理想。第二是部分品种对照药材的前处理方法与样品前处理方法不完全一致,不能很好地起到随行对照的作用。如苦杏仁(西伯利亚杏)配方颗粒,对照药材直接水煎煮过滤后进样,而样品采用50%甲醇提取,如此制备的对照药材溶液浑浊,且色谱峰峰形不好;防风配方颗粒对照药材直接用50%甲醇提取,缺少水煎煮过程,而样品是用甲醇提取,结果对照药材色谱图中峰5不符合标准规定,建议统一对照药材和样品的前处理方法。第三是缺少法定对照物质。少数炮制品种使用了相应的“对照饮片”为随行对照,如炒桃仁/ 桃仁配方颗粒使用炒桃仁/ 桃仁对照饮片和麸炒苍术配方颗粒使用麸炒苍术对照饮片,但目前尚无法定对照物质的发行,导致相应品种无法全检;白芍配方颗粒中使用的1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷对照品,黄芪(蒙古黄芪)配方颗粒使用的黄芪皂苷Ⅰ和黄芪皂苷Ⅱ对照品也无法定对照物质,检验中使用第三方提供的标准物质,质量和可及性无法保证。

  • 【我们不一YOUNG】+用大丸法进行色泣测试中参比样使用注意事项

    纺织品的色泣测试时日本特有的一个方法,目的是了解印花产品及不同颜色组合制品,因洗涤或被雨淋等原因造成染色部分的染料溶解上移到白底或淡色底部的可能性。测试中通常会用到一块白布,如果试样的一端浸入放有溶有非离子活性剂的水中时,颜色会上移至白布上。但随着检测发现某些产品在测试后不论什么颜色都会有一层黄色的“退潮式”黄色沾污。为了排查是否是由于产品染料引起的于是做了一个空白试验(不缝制样品直接用白布测试),最终发现空白试验中白布上依然有一层黄色的沾污,故怀疑是白色布引起的,于是我建议1. 在进行该方法的日常测试中每一批测试都做一个参比样进行验证;注:该参比样源自同一批测试白布,同时剪取同时间段检测,以确定结果是否是单纯的因为试样而引起。2. 做好测试用白布的储存工作经过对比发现刚开启的白布要比放到塑料包装或抽屉内的白布做出的空白结果要好,也就是说新开启的白布空白无沾污,而储存久了的白布有沾污现象,所以,我怀疑是储存过程中白布收到外界环境灰尘等杂质的影响而造成的。所以,我认为日常的色泣检测中一方面要保证白布储存环境不受外界杂质的影响,另一方面在日常检测中做空白试验以确定试验的效果是否有效。

  • 【求助】暑期【急需】家教!!!

    本人是一名高二的艺术生,家住百步亭,现在急需一位文科家教(最好是数学还行的)有意者详谈QQ:[color=#DC143C]529292571[/color](非诚勿扰!) [color=#00008B]以后请不要将QQ 在论坛上公布。谢谢合作。--小兵[/color]

  • 卫生部禁售牛初乳致奶粉下架 百益康诉乐友返还20万促销费

    生部禁售牛初乳致奶粉下架 百益康诉乐友返还20万促销费中国经济网北京7月31日讯(记者 李方) 因卫生部禁令致生产的牛初乳奶粉下架,已经支付给超市的20万促销费打了水漂,沈阳百益康公司将乐友(中国)超市告上法院,要求返还20万的促销费。近日,通州法院审理了此案。沈阳百益康公司称,2012年,其与乐友(中国)超市连锁有限公司签订《商品购销合同》和《促销服务协议》,约定乐友(中国)超市为其公司的百益康、倍尔滋品牌商品在全国范围内开展促销活动,新商品促销费为20万元。协议刚签订不久,国家发布《卫生部办公厅关于牛初乳产品使用标准问题的复函》,其中第三点答复为:“婴幼儿配方食品中不得添加牛初乳以及用牛初乳为原料生产乳制品”,全国各地相关媒体都对此事进行报道,致使公司旗下的百益康牛初乳奶粉无法销售,合同约定的促销服务也无法进行。此外,乐友(中国)超市也未按合同约定对倍尔滋品牌进行促销活动,故要求超市返还促销支持费20万元。乐友(中国)超市称,沈阳百益康公司的产品下架问题,是由于其自身原因造成的,乐友(超市)已经严格按照合同要求开展促销活动。故不同意沈阳百益康公司返还20万元促销费的诉讼请求。目前,此案仍在进一步审理中,中国经济网记者将继续关注案件进展。

  • 毕赤酵母蛋白不表达的原因

    很多朋友问这样一个问题:为什么毕赤酵母表达困难?他们自己也很纳闷,重组酵母pcr检测也证明目的基因重组了,但是诱导之后就是在表达上清中检测不到目的蛋白,仔细研究操作手册后仍然不知道原因。本人,根据自己的经验,采用倒推的方法,按实验过程从后向前分析,供大家参考:1、诱导之后表达上清中检测不到目的蛋白:分析1:检测的方法是否有问题,要考虑是不是蛋白表达量低而没有检测到? 如果是蛋白表达低,可以选择浓缩蛋白,具体的方法很多,有TCA、丙酮、浓缩柱等等方法,之前在本版已经发过帖,在此不赘述。 2、如果蛋白浓缩N倍之后仍然检测不到,那基本可以确证蛋白并不在上清中。那么蛋白到哪里去了,考虑是否没有分泌出来,而是在胞内,那就需要通过裂解酵母来检 测胞内蛋白,具体的方法很多,在此也不赘述,曾整理过相关破碎的帖子。 3、如果胞内也没有目的蛋白表达,那么基本可以确定蛋白并没有表达。 4、为什么没有表达呢?倒推回来就是诱导的过程了,诱导体系是什么?甲醇浓度是多少?培养问题是多少,转速是多少?这些都要注意。甲醇一般是0.5%-1.0%,本人用的 是0.5%,也有很多人也用1.0%,曾见过一个帖子,说超过1.5%反而会抑制表达,没有验证过,供大家参考。培养问题28-30度比较合适,转速250rpm比较合适,诱导 体系没有固定的体系,说明书上推荐的是BMGY到OD600 2~6,换到BMMY中OD600 为1左右。 5、如果诱导的过程也没有问题,那问题就复杂了,特别是重组酵母PCR检测证明目的基因确实已经发生了重组。这个时候是最郁闷的了,但是郁闷怎么办,还是要找原 因,在此我给的建议是先做RT-PCR证明mRNA水平的情况,也就是说有没有转录。如果转录了,后续的操作也没有问题(本帖的1、2、3、4项),那么只有重新设计实 验,比如换酵母株,有文章上说:用GS115表达不出蛋白,换KM71H后,大部分克隆能表达。 6、有个帖子说的很好,在此和大家分享一下。 1、 菌株:用GS115表达不出蛋白,换KM71H后,大部分克隆能表达。 2、温度: 在28度和室温下诱导表达,表达水平可能都不低。 3、pH:手册上用6.0,pH提高到6.8,不表达的蛋白可能就表达出来。BMMY的pH7.0-7.5比较合适。国内外做的最好的rHSA,最适pH大概5-6左右。pH3的时 候yeast和peptone好像会沉淀的,可以用磷酸和磷酸二氢钾调,具体比例自己去试试。 4、偏爱密码子: codon bias一般不是主要的问题,你要表达的蛋白特性才是主要问题,酵母对分子量大(30KD以上),结构复杂(如一些蛋白酶),二硫键含量多的 蛋白往往不能有效表达,尤其是分泌表达。密码子改造对一些较小的而且结构简单的蛋白表达量的提高可能有一些作用。比如一位战友用Pichia酵母表达一个单链 抗体,29KD,含有2对二硫键,表达量约几毫克每升,选用酵母偏好密码子全基因合成后,表达量没有什么提高。 5、表达时间与空质粒转化对照:诱导时间长了以后,是会有很多蛋白分泌出来的,时间越长杂蛋白就越多,且分子量都比较大。最好做一个空质粒转化的对照, 这样就会比较肯定到底是不是自身的蛋白分泌的结果。 6、污染:每个样品从G418板上挑10个左右单克隆于2ml BMGY摇菌(30ml玻璃管,比LB管大一点),纱布一般用8层,一天左右看着比较浑离心,留样1ml,余 1ml换2ml BMMY诱导表达,3,4层纱布足够了。 污染一般都是跟瓶口覆盖有关的原因造成的,只盖纱布肯定会污染。加盖报纸后,就再没遇到过污染。如果只用6层纱布,污染的可能当然很大,100ml三角瓶, 装量10ml培养液,用橡筋把8层纱布和2层报纸拴紧封口,空气浴摇床。 7、不表达:蛋白有没有表达就要看你的运气了,一般重复2-3次实验都没有表达菌株,这个蛋白就放弃表达了。 8、表达量: 30KD,10mg/L表达量已经很高,最直接的方法是发酵,一般提高5-10倍。大肠杆菌一样出现大团的超表达蛋白。 9、糖基化:酵母分泌表达的N糖基化是可以预测的,有如下序列:N X S/T就是潜在的糖基化位点,X为任意氨基酸,1个糖基化位点会加上1-3KD左右的糖基。另外可 能还有O糖基化话,但是无法预测其位点,不过很少听说表达蛋白有O糖基化的。如果胞内表达,不存在糖基化的问题。 10、表型与表达:重组SalI和BglII酶切产生单交换和双交换,结果就是产生Mut+和Muts表型的菌株;前者在甲醇诱导表达时生长快,消耗的甲醇多,后者生长慢,消耗 的甲醇少,所以诱导表达时Muts表型要求更高的菌体浓度。一般用Mut+表型的较多,但是对某些蛋白Muts菌株可能表达的更好,只有试试才知道你的蛋白用那种菌 株表达较好。 11、培养基 YPD:最基本的培养用;BMGY:诱导表达前培养用;BMMY:诱导表达用;MD:电转化后筛选his+用。 YEPD是不能代替BMGY的,因为有葡萄糖,这样残留的葡萄糖会影响下一步的诱导表达。不过有一种方法是可行的,就是用YPG培养基代替,只是把YEPD中的葡萄糖 用3%的甘油代替,也可以降低成本。摇瓶毕竟不能和发酵罐比,甘油残余会抑制甲醇利用。 BMGY、BMMY灭菌后才能加甲醇、磷酸钾、生物素。配制BMMY时也没必要用5%过滤除菌的甲醇,在灭菌后使用前加100%甲醇至你要的浓度。 YNB可以高压灭菌,没问题的,也可以0.22um过滤处理,天冬氨酸和苏氨酸要待培养基高压灭菌后加入;配YPD时可以加入YPD一起灭菌,但时间不能太长,温度不能 太高,一般121-125度12-15分钟足够了。若时间过长,温度过高,可能导致YPD焦化。glucose和含氮化合物在一起容易产生美拉德反应,这是配制培养基中的禁忌。 颜色很深的话,基本不能使用了。或者含有葡萄糖和/或YNB的培养基108度35min高压灭菌。 小量发酵其实可以把培养基成分中的YNB和生物素去除,培养基价格便宜,操作又方便,可以直接灭菌,效果也很好(效果不比含YNB的差)。 如果是用自己配置的培养基,如玉米浸提液、麦芽浸提液、麦麸浸提液等等,可以不用换液,采取添料来维持酵母对培养基的营养需要。 用无机盐进行大规模发酵,更省钱。更多有关蛋白表达纯化的相关资料,请点击:资料专区

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