溜曲霉

做黄曲霉素M1的时候要用到免疫亲和柱，和泵流操作架，有经验的同学知道哪里可以买到泵流操作架么？

求助各位大神，黄曲霉毒素B1在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]上残留严重，怎么解决啊？急、急、急

关于乳中黄曲霉毒素M1的检测，依据GB 5413.17 -2010 《乳和乳制品中黄曲霉毒素M1的测定》中第三法 免疫层析净化荧光分光度法（见附件）。用分子荧光测的话有没有比较成功的事例呢？我用荧光分光光度计进行检测，其中测试条件如下：1、激发360nm，发射450nm2、电压700V，激发和发射狭缝均为5nm3、以0.05mol/L硫酸溶液（相当于0μg/L黄曲霉毒素M1） 以硫酸奎宁溶液（相当于20μg/L黄曲霉毒素M1）请问各位大侠，用以上的条件来测未知样品会不会对测试结果带来很大的误差呢？

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=86887]出口 粮谷 棕曲霉毒素A 残留量 薄层扫描法 [/url]

近期美国、欧盟、日本等国的预警通报显示，我国出口花生及其制品中的黄曲霉毒素存在超标现象，不同国家对黄曲霉毒素残留量的要求不尽相同，我国相关出口企业有必要对此进行关注。近期各国对我国花生及其制品的通报如下：2011年4月27日，德国通报来自中国的带壳花生中发现含有黄曲霉毒素（B1 = 16.4; Tot. = 18.7 / B1 = 18.3; Tot. = 21.1 μg/kg - ppb）；2011年4月27日，西班牙通报来自中国的带壳花生中发现含有黄曲霉毒素（B1 = 30.1; Tot. = 31.90 / B1 = 59.39; Tot. = 68.58μg/kg - ppb）；2011年4月5日，日本通报我国的花生产品黄曲霉毒素超标（37ppb）；2011年3月7日，美国FDA通报我国安徽一厂家的花生产品疑似含黄曲霉毒素，并采取拒绝进口措施；各国对黄曲霉毒素的残留限量要求如下：欧盟要求供人食用的花生及其制品中黄曲霉毒素B1的量不得超过2μg/kg,总量不得超过4μg/kg;加工前或食用前需进行处理的花生中黄曲霉毒素B1的量不得超过8μg/kg,总量不得超过15μg/kg;日本要求花生中黄曲霉毒素的总量不得超过10μg/kg;美国FDA要求花生中黄曲霉毒素总量不得超过20μg/kg;澳大利亚食品标准法典规定花生及其制品中黄曲霉毒素总量不得超过15μg/kg;韩国要求花生中黄曲霉毒素的总量不得超过15μg/kg,黄曲霉毒素B1的量不得超过10μg/kg。

黄曲霉毒素（Aflatoxins）超标是我国食品出口频繁遇到的问题，我国每年食品出口因黄曲霉毒素超标而遭受通报扣留屡屡发生，尤其体现在出口的花生、谷物、果仁中。 黄曲霉毒素是生长在食物及饲料上的黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物，特曲霉也能产生黄曲霉毒素，但产量较少。主要是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 以及由B1和B2在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1、M2等。 黄曲霉毒素主要存在于霉变的花生、谷物、果仁和大米中。因其对人、畜肝脏的剧烈损害而名列毒性之首。各国对黄曲霉毒素在食品中的残留限量均有规定。 我国在食品中真菌毒素限量 GB 2761-2005中，对黄曲霉毒素B1、M1分别在花生、玉米、大米、植物油、豆类、发酵食品、以及乳制品中的限量作出明确规定。 欧盟在委员会条例(EC) No 629/2008、委员会条例(EC) No 1881/2006中，对黄曲霉素在花生、谷类、坚果等食品中的限量作出明确规定. 美国在FDA“遵守政策指南（Compliance Policy Guide）”中对黄曲霉毒素在动物饲料、食品、牛奶、花生及其制品、坚果（包括巴西坚果、阿月浑子果仁）中的限量作出规定。 日本在肯定列表制度中规定，食品中黄曲霉毒素的限量是10ppb。

近期美国、欧盟、日本等国的预警通报显示，我国出口花生及其制品中的黄曲霉毒素存在超标现象，不同国家对黄曲霉毒素残留量的要求不尽相同，我国相关出口企业有必要对此进行关注。 近期各国对我国花生及其制品的通报如下： 2011年4月27日，德国通报来自中国的带壳花生中发现含有黄曲霉毒素（B1 = 16.4; Tot. = 18.7 / B1 = 18.3; Tot. = 21.1 μg/kg - ppb）； 2011年4月27日，西班牙通报来自中国的带壳花生中发现含有黄曲霉毒素（B1 = 30.1; Tot. = 31.90 / B1 = 59.39; Tot. = 68.58μg/kg - ppb）； 2011年4月5日，日本通报我国的花生产品黄曲霉毒素超标（37ppb）； 2011年3月7日，美国FDA通报我国安徽一厂家的花生产品疑似含黄曲霉毒素，并采取拒绝进口措施；

方法简介：食品中黄曲霉毒素残留经过提取，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有黄曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化，此抗体对黄曲霉毒素B1　、B2 、Ｇ1 、Ｇ２具有专一性、黄曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。用水将免疫亲和柱上杂质除去，用洗脱剂将其洗脱于点滴扳上，滴加衍生化试剂，在紫外灯下观察。若有蓝紫色荧光说明样品中含有黄曲霉毒素B1　、B2，若显黄绿色荧光，则说明样液中含有黄曲霉毒素Ｇ1 、Ｇ２。 如果需要我给大家发些资料，我的联系电话 010-52029052 贾先生 jiazhizeng@163.com qq 40446052 留下信箱 我给大家发些资料

一、背景信息　　近日，媒体曝光了广西梧州和广东肇庆两地市场所出售的部分散装花生油存在黄曲霉毒素超标情况。黄曲霉毒素是什么?毒性怎样?本期将为您解读。　　二、专家解读　　(一)黄曲霉毒素的污染在世界范围内广泛存在。　　黄曲霉毒素(Aflatoxin，AF)最早被发现于1960年，是黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillusparasiticus)的次级代谢产物，目前已分离鉴定出12种以上，常见的有黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、B2a、G2a、BM2a和GM2a等。黄曲霉毒素的热稳定性非常好，常规烹调和加热法不易分解。　　世界范围内黄曲霉毒素的污染相当广泛，包括谷物、坚果和籽类以及牛乳等，尤以玉米、花生被污染的程度最严重。其主要原因是食物在田间未收获前被黄曲霉等产毒菌浸染，在适宜的气温和湿度等条件下繁殖并产毒，或未经充分干燥，在储藏期间产生大量毒素。食用油也存在容易受黄曲霉毒素污染的问题，但通过原料筛选、碱炼、吸附等控制手段可以使成品油中黄曲霉毒素降到非常低的水平。　　(二)摄入量决定黄曲霉毒素是否引起急性中毒。　　世界范围内曾报道数起人类的黄曲霉毒素急性中毒，如非洲的霉木薯饼中毒，印度的霉玉米中毒等。2004-2005年肯尼亚暴发了迄今史上最大规模的黄曲霉毒素急性中毒事件，中毒千余人，死亡125人，中毒玉米中检出黄曲霉毒素B1的含量高达4400ppb(μg/kg)，是罕见的黄曲霉毒素中毒事件。黄曲霉毒素中毒的症状一般为一过性发烧、呕吐、厌食、黄疸、腹水、下肢浮肿等肝中毒症状，严重者出现暴发性肝功能衰竭、死亡。　　根据我国及世界其他国家的标准规定，黄曲霉毒素的含量如果在安全限量范围之内，并不会对消费者的健康构成风险。　　(三)全球已高度重视对食品中黄曲霉毒素的控制。　　黄曲霉毒素B1是影响人和动物健康的主要真菌毒素之一，也是全球食品安全控制中最主要的真菌毒素。2003年联合国粮农组织(FAO)发布的全世界食品和饲料真菌毒素法规报告中显示，除国际食品法典委员会(CAC)的规定以外，全球100多个国家和地区制定了各类食品中黄曲霉毒素限量标准。食品中黄曲霉毒素B1的限量范围为1-20ppb，黄曲霉毒素总量(AFB1、B2、G1、G2)的限量范围为0-35ppb。　　2011年我国发布的《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》(GB2761-2011)中规定花生及其制品中黄曲霉毒素B1的限量为20ppb。　　(四)“土榨油”看似原生态实存安全隐患。　　近年来，“纯天然”和“原生态”成为部分消费者的追求，除了购买“土榨油”外，也有使用家用榨油机自制油的方式。对于这两种榨油方式，专家认为存在较大安全隐患。除了原料品质是否过关的问题，“土榨油”或自榨油还存在下列问题：未经过精炼加工，杂质多，易氧化变质;榨油设备不易彻底清洗干净，残留的油渍及谷物残渣在氧化后会产生霉变，食品安全隐患很大;此外，资源利用率低，会造成很大浪费。　　三、专家建议　　(一)科研人员应加大“从田间管理到加工过程”对黄曲霉毒素污染及控制手段的研究力度，为保证食品安全提供更加有效的科技支撑。　　(二)以玉米、花生等为主要原料的食品生产、加工企业，特别是“土榨油”生产作坊，应严格执行食品安全国家标准和相关技术规范，积极采取有效措施，重视原料安全，严格把关每一个生产环节，确保产品的质量和安全。　　(三)媒体应注重全面、科学、客观报道，采用相应领域权威专家的专业观点，以正确解读国家相关标准法规，引导消费者理性认识和理解黄曲霉毒素的危害，避免公众过度恐慌。　　(四)消费者应注意培养良好的消费习惯，注意产品的标签、标识，做到在保质期内妥善储藏。特别应注意通过正规可靠渠道购买食用油，不要片面迷信“纯天然”和“原生态”制品。来源：国家食药监局

黄曲霉毒素（Aflatoxins）超标是我国食品出口频繁遇到的问题，我国每年食品出口因黄曲霉毒素超标而遭受通报扣留屡屡发生，尤其体现在出口的花生、谷物、果仁中。 黄曲霉毒素是生长在食物及饲料上的黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物，特曲霉也能产生黄曲霉毒素，但产量较少。主要是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2 以及由B1和B2在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1、M2等。 黄曲霉毒素主要存在于霉变的花生、谷物、果仁和大米中。因其对人、畜肝脏的剧烈损害而名列毒性之首。各国对黄曲霉毒素在食品中的残留限量均有规定。 我国在食品中真菌毒素限量 GB 2761-2005中，对黄曲霉毒素B1、M1分别在花生、玉米、大米、植物油、豆类、发酵食品、以及乳制品中的限量作出明确规定。 欧盟在委员会条例(EC) No 629/2008、委员会条例(EC) No 1881/2006中，对黄曲霉素在花生、谷类、坚果等食品中的限量作出明确规定. 美国在FDA“遵守政策指南（Compliance Policy Guide）”中对黄曲霉毒素在动物饲料、食品、牛奶、花生及其制品、坚果（包括巴西坚果、阿月浑子果仁）中的限量作出规定。 日本在肯定列表制度中规定，食品中黄曲霉毒素的限量是10ppb。

最近看报纸上报到这方面的问题比较多，感觉将黄曲霉和黄曲霉毒素混为一谈，还说巴氏杀菌不能杀死黄曲霉毒素，哎我个人理解，黄曲霉是一种霉菌，是微生物，黄曲霉毒素是由其产生的一种真菌毒素，是一种化学物质，怎能用杀菌去杀死化学物质呢？

我们平时所吃的很多传统食品，在加工过程中，都有一个霉变的过程，比如豆酱、酱油、霉豆腐、梅干菜等等，如何来避免产生黄曲霉呢，如何避免在食品中留存有黄曲霉毒素呢？我认为在霉变过程中，不可避免的会产生黄曲霉，这样就会有黄曲霉毒素的残留。

GB5009.24-2010 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素M1和B1的测定GB5413.37-2010 食品安全国家标准 乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定GB/T5009.22-2003 食品中黄曲霉毒素B1的测定GB/T5009.23-2006 食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定GB/T8381-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 半定量薄层色谱法GB/T17480-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法GB/T18979-2003 食品中黄曲霉毒素的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法GB/T23212-2008 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2的测定 液相色谱-荧光检测法LS/T6108-2014 粮油检验 谷物中黄曲霉毒素B1的快速测定 免疫层析法NYT1286-2007 花生黄曲霉毒B1的测定 高效液相色谱法NY/T1664-2008 牛乳中黄曲霉毒素M1的快速检测　双流向酶联免疫法NY/T2071-2011 饲料中黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的测定液相色谱-串联质谱法NY/T2548-2014 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 时间分辨荧光免疫层析法NY/T2549-2014 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 免疫亲和荧光光度法NY/T2550-2014 饲料中黄曲霉毒素B1的测定 胶体金法SN/T1664-2005 牛奶和奶粉中黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2含量的测定SN/T1736-2006 进出口蜂蜜中黄曲霉毒素的检验方法 高效液相色谱法SN/T3136-2012 出口花生、谷类及其制品中黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素的测定SN/T3263-2012 出口食品中黄曲霉毒素残留量的测定

蒙牛黄曲霉毒素的超标，让我们看到了乳品行业并不像大家想象的那样，经历了三聚氰胺事件后会凤凰涅槃。在我看来，有顶风作案的嫌疑。也许有人攻击中国的乳品标准有多低，有多差，当然黄曲霉毒素的标准本身也有点问题，但这是后话。在我看来，在现行的乳品行业的体制下，不可能出现成品奶黄曲霉毒素超标的问题。我再强调一下，是成品奶。为什么呢？因为现在国家要求生鲜牛乳，也就是我们常说的生奶，对黄曲霉毒素要求批批检测。也就是说，如果生奶检出黄曲霉超标，不可能通过收奶环节，也就不可能被加工成成品。所以，在现行体制下，是不可能生产出黄曲霉毒素超标的牛奶。而现在这种情况明明就出现在我们的面前，而且是大品牌。我们可以试着推测一下这个问题背后的问题。生产出黄曲霉超标的成品奶，那肯定是原料中含有黄曲霉毒素，因为中间环节污染黄曲霉毒素的可能性很小。原料中含有黄曲霉毒素，那在收奶检测的时候为什么没有发现呢？这是第一个问题所在。 退一万步讲，即使检测人员在检测过程中有疏忽的地方，导致有一两个批次误判，那其他大多数也是合格的呀，讲这少量的放入大量合格的当中，相当于稀释了，其浓度也应该小于0.5才对啊，如果稀释后都超标，那疏忽的也太不应该了，高含量黄曲霉毒素很难被疏忽。我也是一名乳品检测人员，我也很想从检测的角度找到一个合理的答案，但是我分析不下去了。就像动车有那么多安全措施，不可能相撞的，最后不也撞了吗，这个事情我觉得也是一样，不可能发生的事情发生了。不管你信不信，反正黄曲霉毒素已经超标了。 其实我一向秉承的原则是：问题发生了并不可怕，可怕的对问题的隐瞒和对公众的忽悠，而不是去切实的解决问题，防止类似事件再次发生。蒙叉有个头头出来说：产品还没有销售出去。这一点我觉得让公众很难信服。套用很流行的一句话，不管你信不信，反正我不信。十月十八号生产的牛奶，到现在已经十二月份，将近过去了两个月，产品还在库房里面，没有销售。你信吗？不知道是啥产品，如果是百利包的灭菌奶，保质期只有三十到四十天，早就过期了。但从媒体给出的资料看，是盒装的，其保质期可能为六个月到八个月。即使是这样，在库房里面放两个月没有销售一盒，你信吗？ 其实据我了解的情况，在南方一些地方，由于天气比较潮湿，可能会引起饲料的发霉，这样就会产生黄曲霉，进而会产生黄曲霉毒素。牛吃了饲料，在奶里面可能有残留，这一系列的问题，天气原因，完全可能理解。不能理解是如果生奶批批检测了，不可能出现黄曲霉毒素超标的牛奶；更不能理解的是，问题出了，拿出一系列忽悠消费者的言辞，来糊弄消费者和老百姓，呜呼，悲哀！！！

黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株所产生的有毒代谢产物，最主要的4种分别为：B1、B2、G1、G2。黄曲霉毒素具有很强的急性毒性，也有明显的慢性毒性及强致癌性。黄曲霉毒素主要污染粮、油及其制品，其中受污染最严重的是花生、棉籽、玉米及其制品；其次是稻米、小麦、大麦、高粱、芝麻等等【检测步骤】 样品处理：称取1g样品（大米、玉米、小麦、花生及其制品经过磨细其粒度小于2mm）于1瓶提取剂中,振摇2分钟，静置3分钟，用滤纸过滤，收集2mL样液于1个5mL离心管中，备用；萃取：用1mL一次性吸管吸取1mL萃取剂，加入到收集了样液的离心管中，振摇1分钟，静置分层后，取大约0.8mL的下层清液至点滴板的一个孔中，自然挥干或冷风吹干；样品检测：向点滴板上滴4滴缓冲液，使其充分溶解点滴板上的残留物；从检测卡袋中取出检测卡，在卡上做好样品编号标记；用吸管吸取点滴板上全部待检样液，滴入加样孔中，加样后开始计时，5-10分钟内观察结果；本方法是专家根据多次反复试验，开发出来的。可以广泛应用于，畜牧部门、养殖、饲料生产企业的现场快速检测。

针对近日来国家质检总局公布了的蒙牛乳业（眉山）和福建长富纯牛奶抽查的产品被检出黄曲霉毒素M1超标的问题。蒙牛乳业对此向民众进行了致歉申明，反应了民族企业的责任心和对食品安全的重视。对于黄曲霉毒素M1的限量，在之前的相关食品卫生标准中有明确规定，其中：鲜乳及其乳制品（折算为鲜乳汁）不得超过0.5ug/kg;婴儿代乳食品不得检出黄曲霉毒素b1。（GB 2761-2005国家标准—食品中真菌毒素限量 GB 9676-2003国家标准—乳及乳制品中黄曲霉毒素M1限量！黄曲霉毒素主要存在于谷物、坚果、花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中以及一些与人类血液，动物饲料相关的产品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在，因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光，G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2)，还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M，其中毒性最高的M的代谢物为4－羟基化的产物Bs.黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物，也是一种强致癌物质。其危害巨大，人类日常消费食品中如牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时，可导致肝癌甚至死亡。毒性是砒霜的100倍其实主要是指黄曲霉毒素比砒霜毒。目前来讲，Aflatoxin M1的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)，酶联免疫检测法等。液相色谱法可以精确的检测奶制品中黄曲霉毒素的微小含量。而使用黄曲霉毒素M1 ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样品中黄曲霉毒素M1残留。可以帮助企业轻松应对奶中黄曲霉毒素M1的限量检测。高效液相色谱法：根据国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定　实验用前处理：实验仪器和好耗材包括：恒温水浴锅 　溶剂过滤器(带真空泵)1000ml 高速匀质器 黄曲霉毒素免疫M1亲和柱 玻璃纤维滤纸 玻璃注射器 无荧光特性玻璃试管 空气压力泵 超声波清洗机 定量滤纸 量筒 样品瓶 容量瓶 移液器或移液管　　实验用试剂：色谱乙腈 色谱甲醇 氢氧化钠 石油醚 超纯水或去离子水等等HPLC条件： 高效液相色谱仪 色谱柱 C18柱，150*4.6mm，5um 流动相 乙腈－水（25：75） 荧光检测器： 激发波长365nm，发射波长435nm； 柱 温 室温 流速 1.0ml/min 进样量 20ul 出峰时间 10分钟左右 样品取样：真菌毒素分析的最大误差来源是样品的收集和取样过程，所以必需保证样品收集和取样具有代表性。样品前处理：分不同样品牛奶 水浴加热至40度，离心用上清液过柱净化；乳粉和粉状婴幼儿配方食品：称取适量奶粉样品，用于蒸馏水中，混合均匀使其充分溶解，离心离心用上清液过柱净化；发酵乳(包括固体状、半固体状和带果肉型)：称取适量奶粉样品，用于蒸馏水中，调节PH值至微碱性，高速均质器匀浆，水浴加热后离心，取上清液混合均匀使其充分溶解，离心离心用上清液过柱净化；干酪：称取适量切细或粉碎，过筛用加纯水溶解，高速均质器匀浆，超声提取后收集上清液，然后用石油醚进行两次萃取，然后用适宜的有机溶液萃取，取若干上清液过柱净化奶粉样品，用于蒸馏水溶解中，调节PH值至微碱性，水浴加热后离心，取上清液混合均匀使其充分溶解，离心离心用上清液过柱净化；奶油：称取适量加甲醇水溶解，震荡后分页漏斗取下层溶液，蒸干后溶于水用于过柱净化。免疫柱净化步骤：完全符合GB/T 18980-2003┅┅取出免疫亲和层析柱, 恢复至室温，将上方塞子取出斜剪断，再插回

粮食坚果黄曲霉毒素测定仪主要用于检测食品中的黄曲霉毒素含量，特别是针对粮食和坚果类食品。具体来说，它可以检测的物质主要包括以下几类： 　　黄曲霉毒素(AFT)： 　　黄曲霉毒素是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。它们主要由黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(A. parasiticus)等霉菌产生，存在于土壤、动植物以及各种坚果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品。 　　黄曲霉毒素的种类较多，包括B1、B2、G1、G2等，其中B1的毒性最强，也是最常见的污染物质。 　　其他真菌毒素： 　　除了黄曲霉毒素外，一些粮食坚果黄曲霉毒素测定仪还可以检测其他类型的真菌毒素，如呕吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)等。这些毒素同样可能对食品和饲料造成污染，危害人类和动物的健康。 　　其他有害物质： 　　部分高端的粮食坚果黄曲霉毒素测定仪可能还具备检测其他有害物质的能力，如农药残留、抗生素残留、重金属等。这些检测项目的加入可以进一步提高食品安全检测的全面性和准确性。 　　样品类型： 　　该类测定仪广泛适用于粮食、坚果、食用油、饲料、中药材等多种样品类型的检测。这些样品在储存、加工和运输过程中都可能受到真菌毒素的污染，因此需要进行定期检测以确保食品安全。 　　综上所述，粮食坚果黄曲霉毒素测定仪是一种专门用于检测食品中黄曲霉毒素及其他有害物质的设备。通过采用先进的生物传感技术或化学分析原理，该类仪器能够快速、准确地检测出食品中的有害物质含量，为食品安全监管和质量控制提供重要技术支持。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/08/202408191641007062_938_6238082_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

【内容摘要】赭曲霉毒素是一种无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀的碳酸氢钠水溶液中，微溶于水。该化合物相当稳定，在乙醇中置冰箱避光保存一年以上而不破坏。有较高的耐热性，制罐头的豆子经漂白、加盐及在番茄酱中加热1h后，仍然能存留56％的赭曲霉毒素。赭曲霉毒素A是一种与人类健康密切相关的霉菌毒素，是人类可能的致癌剂。除了潜在的遗传毒性和致癌性外，赭曲霉毒素A也是一种具有免疫抑制、神经毒性以及致畸性的物质。赭曲霉毒素最初是从南非的赭曲霉毒株中分离出来的，由赭曲霉(Asper—gillus ochracets)、洋葱曲霉(Aspergillus alliaceus)、鲜绿青霉(PencillilJⅡlviridicatum)、徘徊青霉等代谢产生，包括7种结构类似的化合物，赭曲霉毒素A是其中毒性最强的物质，是自然界中的主要天然污染物。在一些国家的食品中，赭曲霉毒素A的污染率可达2％～30％。该化合物主要表现为肾脏毒性。在巴尔干地方性肾病流行区，6%～18%人群的血液中能检出赭曲霉毒素A。(1)结构与性质赭曲霉毒素是分子结构类似的一组化合物，包括赭曲霉毒素A、B、C、D和a等，其中赭曲霉毒素A是主要的污染物。赭曲霉毒素是一种无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀的碳酸氢钠水溶液中，微溶于水。在紫外光下赭曲霉毒素A呈绿色荧光。该化合物相当稳定，在乙醇中置冰箱避光保存一年以上而不破坏。有较高的耐热性，制罐头的豆子经漂白、加盐及在番茄酱中加热1h后，仍然能存留56％的赭曲霉毒素，赭曲霉毒素的化学结构如图4—2所示。(2)食品中赭曲霉霉素的来源与分布赭曲霉毒素是曲霉属和青霉属的某些菌种产生的二次代谢产物，产毒菌种见表4—2。[color=#075

什么是黄曲霉毒素　　黄曲霉毒素（Aflatoxins）是生长在食物及饲料中的黄曲霉和寄生曲霉代谢的一组化学结构类似的产物，特曲霉也能产生黄曲霉毒素，但产量较少，目前已分离鉴定出的黄曲霉毒素有17种，主要是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2以及由B1和B2在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1、M2等。黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素），前者为基本毒性结构，后者与致癌性有关。B1的毒性（其毒性比氰化钾毒性高）及致癌性极强且耐热（B1的分解温度为268℃左右，一般烹调加工破坏很少），在天然污染的食品中以B1最为多见。　黄曲霉毒素分布　　黄曲霉毒素主要存在于霉变的花生、谷物、果仁和大米等食物中；在水中的溶解范围为10毫克/升~20毫克/升， 可大量溶解于氯仿、甲醇、二甲基亚砜等中等极性的有机溶剂中，不溶于己烷、石油醚和乙醚；易被碱或强氧化剂破坏；进入人体后主要经消化道吸收，大部分分布 在肝脏、肾脏，少部分分布在血液、肌肉、脂肪组织中，其在体内的代谢过程主要为羟基化作用、去甲基作用和环氧化作用。

怎样提取黄曲霉素??怎样提取黄曲霉素??怎样提取黄曲霉素??怎样提取黄曲霉素??

代版友问:黄曲霉M1测定，需要一种免疫亲和小柱，手里有一种测黄曲霉总量的小柱，能不能代替呢？

山东检验检疫技术中心已经成功申请承办国家认监委（CNCA）2013年实验室能力验证计划B类项目《植物油中黄曲霉毒素的测定》，计划编号CNCA-13-B15。请有意参加单位自行下载并填写《国家认监委（CNCA）能力验证计划报名表》，传真或发电子邮件至我处报名，报名截止日期2013年6月30日。注：发票抬头与单位名称不符情况下请额外注明，请填写详细有效通讯地址保证及时接收样品，拟采用的检测方法请详细注明标准号及名称。国家认监委对能力验证计划实施的时间和进度要求：6月底之前承担单位完成样品的制备和均匀性、稳定性检测；7月底之前完成初次测试样品发放和检测结果的收集、统计、判定；8月底之前完成补测样品发放和检测结果收集、统计、判定；9月底之前完成最后技术总结并上报。联系方式：联系人：赵华梅，吴振兴电话：0532-80885727，0532-80885626传真：0532-80885626E-mail：lilaczhm@163.com，zhxwoo@yahoo.com.cn详细内容：测试项目：黄曲霉毒素B1，黄曲霉毒素总量对应的实验室领域代码：0227对应的PT子领域：食品与农产品中残留物/毒素可能涉及的测试/测量方法：GB/T 18979-2003食品中黄曲霉毒素的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法

各位大侠，我在用柱前衍生，高效液相做黄曲霉检测时，回收率只有百分之七十多，这样子能接受么？请问有用液相，柱前衍生做黄曲霉的前辈，你们的回收率是多少呀？我是用免疫亲和柱净化后再衍生的，能指点一下检测黄曲霉有那些地方是比较关键的控制点么？帮忙提高一下回收率，谢谢

黄曲霉毒素的检测、它的抽排风需要单独管道跟处理吗？可以合并到公用的风管统一处理么？

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 （aspergillus flavus）寄生曲霉 （a.parasiticus）产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。它们存在于土壤、动植物、各种坚果中，特别是容易污染花生、玉米、稻米、大豆、小麦等粮油产品，是霉菌毒素中毒性最大、对人类健康危害极为突出的一类霉菌毒素，对肝脏组织的破坏性极强，生活中一定要小心这些食物中藏着的黄曲霉素。一、发霉的花生玉米黄曲霉素藏在发霉的食物里，特别是淀粉含量高的食物里，花生、玉米等，淀粉在高温和潮湿的环境下会滋生导致肝癌的黄曲霉菌。建议：1.每次少买点，不要“存”，以免霉变。2.如果您发现有一颗花生坏了，那一碗花生米，或者是存放的一袋子的花生米都得扔掉。3.家里有食物残渣的边边角角也要清洗干净。二、变质的米饭别以为做熟了就能放松警惕，变质的米饭是最容易产生黄曲霉毒素的!建议：做饭菜，吃多少、做多少，最好当天吃完，不留剩饭菜。三、发苦的坚果果吃到变苦的瓜子，一定要及时吐掉并且漱口，因为瓜子等坚果的苦味正是来自霉变过程中产生的黄曲霉毒素，经常摄入会增加肝癌风险。建议： 吃到霉变的、发苦的坚果千万别犯懒，一定要马上吐出来。四、没洗干净的筷子我们平时使用来吃花生、玉米等淀粉含量高的食物的筷子里最容易藏淀粉，一来二去霉变了，黄曲霉素就藏在里面了。建议： 1.最佳选择是铁筷子，很难出裂痕，也就不会有食物残渣。2.平时洗筷子的时候要记得先泡一泡，软化上面的食物残渣，以便容易清洗掉。五、劣质芝麻酱你爱吃的芝麻酱、花生酱，有些商家为了降低成本，用糠芝麻、瘪花生甚至变质的芝麻、花生做原料，其中变质的花生中含有黄曲霉毒素。而且这种加工后的产品，可比发霉花生难识别多了。建议：去大超市购买知名品牌。六、小作坊自榨油小作坊的压榨机或家用榨油机工艺简单，缺乏除去有害物质工艺，不能对原材料进行精炼，即使自己选料，也可能会出现农药残留、重金属污染问题，以及存在黄曲霉毒素问题。七、久泡的木耳很多人应该都听过这条一度很火的新闻，浙江瑞安的一位消费者因为食用泡发了三天的黑木耳，导致食物中毒，出现多脏器功能衰竭，一度生命垂危。木耳在泡发过程产生何种细菌或毒素，需要进行进一步的检测和判断。可能有哪些微生物毒素呢？譬如黄曲霉毒素、青霉毒素等。

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 (aspergillus flavus) 寄生曲霉 (a.parasiticus) 产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。黄曲霉毒素主要有B1,B2 ,G1 ,G2 以及另外两种代谢产物M1 ,M2.其中M1 和M2是从牛奶中分离出来的.B1,B2 ,G1 ,G2 ,M1 和 M2 在分子结构上十分接近.。毒性：远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性，其中以B1毒性最大。当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄人，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。AFT的致癌力也居首位，是目前已知最强致癌物之一。黄曲霉毒素进入机体后，在肝脏中的量较其他组织器官为高，说明肝脏可能受黄曲霉毒素的影响最大。肾脏、脾脏和肾上腺也可检出，肌肉中一般不能检出。黄曲霉毒素如不连续摄入，一般不在体内积蓄。一次摄入后约1周即经呼吸、尿、粪等将大部分排出。

中药材黄曲霉毒素检测技术方案一、 中药材质量安全现状 中药材是中医防病治病的重要基础。中药材在田间生长、采收加工、储藏运输等各个环节都会因污染霉菌而发生霉变。这些霉菌分泌的有毒代谢产物使中药材发霉变质，直接威胁到群众的用药安全。中药中的霉菌毒素主要有黄曲霉毒素，赭曲霉毒素，玉米赤霉烯酮，展青毒素，伏马毒素等。中药材的种类是影响真菌毒素污染的主要因素,易污染的中药材,在不同的温、湿度条件下均可产生真菌毒素。温度和湿度条件也可以影响真菌毒素的增长,如：黄曲霉毒素在不同的温、湿度条件下均可以产生；赭曲霉毒素需要在湿度较高的条件下才能产生。 近年来,随着中药材在国际市场上的持续升温,其安全性越来越引起人们的关注。真菌毒素残留作为中药材微量外源性有毒有害物质,一般不表现出急性毒性,但通常有较强的蓄积性,致癌、致畸、致突变作用明显,严重影响中药材的安全性。二、 中药材真菌毒素控制相关国家法规 近年来，各级食品药品监管部门不断加大中药监管力度，努力保持中药质量总体稳定。国家食品药品监督管理局关于规范中药生产经营秩序严厉查处违法违规行为的通知（国食药监安187号文件）中 ，要求加强对黄曲霉毒素、重金属及有害元素、农药残留量等安全性指标的检测和控制，切实保证中药材质量和安全，另要求企业具备与生产品种相适应的检验设备和能力，严把质量检验关。 《国家药品安全“十二五”规划》，规划中明确指出“开展药品快速检验技术研究，搭建检验技术共享平台”、“加快推进药品快速检验技术在基层的应用，配置快速检验设备”，“加强县级机构快速检验能力建设”的要求。三、 中药材真菌毒素检测项目及限量标准 国家食品药品监督管理局对柏子仁、莲子、使君子、槟榔、麦芽、肉豆蔻、决明子、远志、薏苡仁、大枣、地龙、蜈蚣、水蛭、全蝎等14味药材及其饮片品种项下增加“黄曲霉毒素”检查项目，限度为“黄曲霉毒素B1不得过5 μg/kg；黄曲霉毒素G2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素B2总量不得过10 μg/kg”。2010 版《药典》附录IX V 黄曲霉毒素测定采用高效液相色谱法，另外增补药典描述该法检测建立增加光化学柱后衍生法。四、 检测方案介绍（一） HPLC仪器分析法 免疫亲和柱-高效液相色谱法：符合2010版《药典》附录IX V中黄曲霉毒素测定高效液相色谱法，另外增补药典描述该法检测建立增加柱后光化学衍生法。1. 设备和耗材配置序号品名规格及参数数量用途1高效液相色谱仪配备荧光检测器一台分析检测2真菌毒素色谱柱150/250mm一支 3黄曲霉毒素总量免疫亲和柱1ml，25支/盒：若干高特异性，纯化样本4KRC光化学柱后衍生反应装置货号：PHRED-KRC-KRC一台适用于黄曲霉毒素检测5高速均质器达到22000rpm以上，一台耐腐蚀，高速6玻璃纤维滤纸100P,110mm，1.5μm一盒霉菌毒素专用过滤7八位泵流操作架货号：EQ-PUMP-8一台用于控制免疫亲和柱过柱流速8黄曲霉毒素混标黄曲霉毒素B1, G1; B2;G2(4/1/4/1),1ml用于定量分析标准品的配制2. 样品前处理:普瑞邦为中药材提供不同的处理方案(详细方案请联系普瑞邦，普瑞邦开发了针对多种中药材基质提供优化的处理方案)3. 免疫亲和柱净化:富集--洗涤--洗脱--收集全部洗脱液供化学衍生检测用。4. 化学衍生为什么使用光化学衍生器？ 由于黄曲霉具有较强的紫外吸收和产生荧光的特性，因此可以进行HPLC-紫外或荧光检测，但是同时黄曲霉毒素中的B1、G1 由于其在含水的流动相中容易产生荧光淬灭，因此在很多的实验中都会采用衍生法测定黄曲霉毒素。衍生的方法也很多：有柱前的，柱后的，在线的，由于在线的柱后光化学衍生有明显的优势，所以现在被增补为药典的检测方法，优势主要在于无需任何化学试剂、对人员无伤害；无需人员直接操作、避免误差; 无需担心衍生液腐蚀检测器。5. 高效液相色谱分析（HPLC）（二）酶联免疫法优点缺点灵敏度高、耗时较短、样本处理比较简单、对技术人员要求不高、检测成本低、可同时检测大批量样本。适用于大量样本快速定量筛查。可能存在一定假阳性率（交叉反应率）。 黄曲霉毒素总量试剂盒具有较高的灵敏度和准确度，适用于大量样本的定量分析。1. 方法原理采用直接竞争酶联免疫法，在微孔板上预包被黄曲霉毒素抗原，加入样本（或黄曲霉毒素标准品溶液）及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素特异抗体。样本或标准品溶液中的抗原与预包被在板孔上的抗原竞争结合酶标抗体。未结合的酶标抗体在洗涤时被除去。再加入TMB显色液，读取吸光值。样品吸光值与其所含黄曲霉毒素总量成负相关，与标准曲线比较即可得出样品中黄曲霉毒素总量的含量。2. 设备和试剂配置：序号品名规格及参数数量用途1黄曲霉毒素总量试剂盒96T，灵敏度：0.1ppb货号：EKT-011一盒定量分析检测2离心小柱25T一盒净化样本3酶标仪（酶联免疫检测仪）滤光片：450nm一台测定结果3. 样本前处理：中药材：粉碎、溶解、离心，取上清液加入PriboSpin离心小柱进行净化。 为什么要用PriboSpin离心小柱？中药材的基质复杂，提取时样本液颜色较深，而且不容易去除。有机试剂提取净化方法繁琐，试剂挥发对环境及人体造成危害，且净化效果不稳定。用PriboSpin离心小柱，则只需提取液离心过柱，即可去除提取液中的杂质，方便快捷，净化效果好，且回收率可以达到85%以上。4. 检测步骤免疫反应30min；洗板5次；显色反应30min；终止反应，酶标仪读OD值。5. 分析结果的表述 用酶标仪判读结果。五、 温馨TIPS1. 中药中真菌生长繁殖的有利条件主要是适宜的温度与水分。如能将中药贮存于10℃以下，水分保持在10％以下，就能有效地防霉。2. 从事真菌毒素科研及检测的人员，必须注意防护，如穿戴隔离衣帽，在进行真菌分离培养工作时，应戴口罩，并尽量防止孢子飞扬。3

一、概述：黄曲霉毒素主要是两种霉菌黄曲霉及 A.paraticus的二级代谢物。这些霉菌在湿热的环境和耕作土地上污染的植物产生。黄曲霉毒素M1（Aflatoxin M1，AFM1）属于自然界强烈的致癌物质之一，是从牛奶中分离出来的黄曲霉毒素的代谢产物。本试剂盒利用酶联吸附测定法（ELISA）对牛奶和奶粉中的AFM1含量进行快速、定量检测。二、原理本试剂盒是利用直接竞争酶联吸附微孔模式进行检测，灵敏度可达20 ng/kg（ppt）。样品或标准品中游离的黄曲霉毒素M1与酶标抗原竞争结合包被在微孔中的抗体上的结合位点，奶制品黄曲霉毒素M1快速检测，经洗板洗去多余的酶标抗原与黄曲霉毒素M1后加入反应底物，上海佑隆生物科技有限公司,佑隆生物科技,其与酶标物作用而成蓝色，加入反应停止液后颜色由蓝色转变为黄色，黄色越深则表明黄曲霉毒素M1越少，用酶标仪在450 nm处测定光吸收值可准确定量检测样品中的黄曲霉毒素M1的污染水平。三、实验需要但试剂盒不提供的试剂和仪器1、试剂：庚烷，二氯甲烷，甲醇，PBS缓冲液（pH 7.2，奶制品黄曲霉毒素M1快速检测，3.35 g Na2HPO4 ▪ 12H2O，0.2 g KH2PO4，0.2 g KCl，8 g NaCl，加蒸馏水至1000 ml）2、仪器：微孔板酶标仪，涡旋振荡器或超声波粉碎仪或摇床，离心机及离饣心管，20 μL、200 μL、1 mL[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]，氮吹仪或旋转蒸发仪。四、结果判定用酶标仪在450 nm处测得每孔的光吸收值（A）绘制标准曲线。通过标准曲线可准确定量样品中黄曲霉毒素M1的含量。通过标准曲线计算所得值乘以样品处理的稀释因子即为实际样品中黄曲霉毒素M1的含量。标准曲线：横坐标为黄曲霉毒素M1标准品浓度，纵坐标为百分比（即各标准品孔和样品孔光吸收值除以0 ppt标准品孔光吸收值再乘以100%所得）