黑曲霉

现在的微生物方法学验证，需要用到黑曲霉菌。由于黑曲霉菌是强致病菌，请问关于黑曲霉菌的管理和使用，以及对实验环境的有关要求有没有国家规定？先谢谢大家！

请教各位大神，现在购买的黑曲霉0代是液体状态的，你们复苏和复壮分别用那些培养基啊？复苏还需要用到SDB吗？

黑曲霉最好保存孢子，可以用斜面培养基培养3-5天，产生黑色孢子后，用生理盐水冲洗下孢子，加入培养基和甘油，用液氮保存，保存个10年没问题。

黑曲霉刚从药检所买来，二代冷冻管，用SDA传代后，只有白色菌丝，就是不黑，SDA的ph值是5.46，灭菌温度121℃（实际腔内温度有122℃），20分钟，每次都是把SDA水浴锅煮沸几分钟，分装在灭菌，从12.10传代到现在都不黑，用了商业PDA斜面管，黑了，只是没有白色菌丝，直接就是黑色孢子，不知道哪个环节出问题了，望老师不吝赐教

请教下大家，黑曲霉的菌种确认是否只是进行菌体生长的形态和显微镜观察？ 大家显微镜的观察中，认为哪种方法比较简单适宜呢？ 显微镜观察后，根据孢子形态辨别？另外，大家做革兰氏染色时候，时间是怎么把握的呢，我按书本里的操作怎么每次做的都不太理想呢？

用黑曲霉第2代斜面上的菌株如何制作甘油冻存管？20%的甘油里面需要有0.05%的吐温80吗？配制20%的甘油是用生理盐水还是用PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液？

加拿大发布允许食品中使用菌黑曲霉派生磷脂酶A2的临时营销售批准来源：厦门WTO工作站 2009年10月21日，加拿大发布G/SPS/N/CAN/399号通报，加拿大卫生署拟制定有关用于生产面包、面粉、全麦粉、非标准面包品、非标准整蛋、非标准蛋黄及转基因蛋黄素内的菌黑曲霉PLA-54[Aspergillus niger (PLA-54)]派生磷脂酶A2的临时营销售批准。 加拿大卫生署收到一份要求准用一种转基因菌黑曲霉杆菌派生的，携带该酶的猪胰基因编码的磷脂酶提案。磷脂酶属粗分类脂肪酶。现有数据评估支持由转基因菌黑曲霉派生的这种磷脂酶A2是安全有效的。因此，加拿大卫生署拟议修改食品药物法规，准许这种黑曲霉派生磷脂酶A2按药品生产质量管理规范(GMP)用于生产面包、面粉、全麦粉、非标准面包品、非标准整蛋、非标准蛋黄及转基因蛋黄素。作为改善协调机制应答能力的手段之一，在履行修改法规协调程序的同时，特发布临时营销许可，准许按GMP要求直接使用这种磷脂酶A2；且准许销售用上述物质制作的食品。 有关此项的最终规定将在12-18个月内批准并生效。通报评议截止日期为2009年12月24日。

跪求强酸性阳离子交换树脂分离纯化黑曲霉发酵液中的柠檬酸方法，使用仪器核酸蛋白检测仪（波长多少？）实验步骤？实验所用洗脱剂？洗脱下来之后怎么检测柠檬酸含量？如何证明是柠檬酸？如何侧柠檬酸含量？。。。无语无助ing。。。目前在用280纳米核酸蛋白检测仪，恒流泵，记录仪，百分之一氨水洗脱，，下一步如何测柠檬酸含量啊啊啊啊，，，，，

求购黑曲霉、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌种。最好能提供培养基配方，感谢！我的邮箱：[email]maxx2007@foxmail.com[/email]

问：煮沸消毒法中为何加碳酸钠或石碳酸效果更佳? 答：加碳酸钠或碳酸氢钠的目的为提高水的沸点，可以提到到105摄氏度，还可以去污去锈；详细请查阅物理化学或化学手册 石炭酸又名来苏尔，本身就是化学消毒剂，可以加强消毒效果 关键词：煮沸消毒法 碳酸钠或石碳酸 问:对微生物检品取样工具有什么要求？ 答:微生物检品取样工具，1、一次性耗材 2、能够反复使用的耐高温、高压、不易与药品产生反应。关键词: 取样工具 要求 问：黑曲霉的传代是否和其它菌一样?我之前接好的第二代黑曲霉是白白的,呈棉絮状,用普通方法是否能够传代?请问斜面如何保持干燥？答:黑曲霉就是这样的,前7天生长的白色物质是菌丝体,后期培养基中的营养用完了才会产生黑色的孢子～这是正常的生长状态,注意传代时的改良马丁斜面培养基要保持干燥,水分过多的话孢子颜色会偏黄.把培养基放在35℃的恒温培养箱里培养1天，应该可以去掉水分的。 关键词：黑曲霉 传代 干燥 我也没怎么来过 帮大家整理几个吧：问：薄膜过滤法做限度验证，药典中说冲洗量过大有可能会造成微生物的损伤，是说的供试品中的微生物吗？一般冲洗量在什么范围内算是适当呢？ [

可以做细胞个数的精确定量和分选。可以把精确个数的细胞（比如50个细胞）加到特定容器中。实验中遇到一个困难：摇瓶培养发酵时，发酵产物和添加黑曲霉的孢子的个数直接相关，但黑曲霉孢子数很难准确定量。已尝试用紫外分光光度计OD600做孢子定量，非常不准确。不同生长时期的孢子，测得OD600吸收值相同，但孢子数差别很大。有没有一款仪器，可以精确地快速地量出一定体积孢子悬浮液中的孢子数，将含有特定孢子数的孢子悬浮液，加到一个容器中。最后实现，50个摇瓶中（或96孔板的96个孔中），每个摇瓶（每个孔）都可以添加50个孢子。我知道流式细胞仪可以实现这种功能，但太贵了，几十万美元。我们想要一个只做定量的小仪器。

新建微生物实验室，主要做黑曲霉，需要用到生物安全柜。厂家说能做到过滤70%，达到安全。但认证专家说必须直排到室外。生物安全柜必须直排到室外吗？各位有何高见？

我单位现需建立微生物实验室，主要用到的菌种为黑曲霉、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌，因本人经验有限，现向各位求教实验室建设的经验。谢谢！

常用的有琼脂斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、沙土管保藏法、甘油冷冻管保藏法、低温冷冻保藏法等，方法很多。 我选用液体石蜡保存方法，该方法适用于不能分解液体石蜡的酵母菌、某些细菌（如芽孢杆菌属、乙酸杆菌属等）和某些丝状真菌（如：青霉属、曲霉属等），而某些细菌（如：固氮菌、乳酸杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌等）和一些真菌（如：卷霉菌、小克银汉霉、毛霉等）不宜采用此法进行保存。微生物检验常用以下菌种：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌药典也没有要求怎样保存，只说选用适宜的保存方法需要验证。但是肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、铜绿假单胞菌、乙型副伤寒沙门菌、白色念珠菌这些菌种用液体石蜡保存方法适合不？

请问沙氏葡萄糖液体培养基怎样做适用性检查？如果加1ml白色念珠菌菌或者黑曲霉悬液加进多少ml沙氏葡萄糖液体培养基中？

10比较大肠杆菌与黑曲霉的群体生长规律11论述热力对微生物细胞的作用12 海洋生物资源是当今的热点，请你设计一个方案从海洋中来筛选水解蛋白能力强的蛋白酶源。13 请举例谈谈当前食品微生物学的发展方向的认识。14请举例说明分子生物学在微生物遗传育种中的应用

序号试验名称菌种中文名称菌种拉丁文名称菌株编号 51抗微生物效力测试大肠埃希菌Escherichia coliATCC 8739 铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosaATCC 9027 金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureusATCC 6538 白色念珠菌Candida albicansATCC 10231 黑曲霉Aspergillus nigerATCC 16404161非无菌产品的计数测试金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureusATCC 6538 铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosaATCC 9027 枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisATCC 6633 白色念珠菌Candida albicansATCC 10231 黑曲霉Aspergillus nigerATCC 16404 62非无菌产品的控制菌测试金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureusATCC 6538 铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosaATCC 9027 大肠埃希菌Escherichia coliATCC 8739 肠道沙门氏菌Salmonella entericaATCC 14028 白色念珠菌Candida albicansATCC 10231 71无菌测试金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureusATCC 6538 枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisATCC 6633 铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosaATCC 9027 生孢梭菌Clostridium sporogenesATCC 19404 白色念珠菌Candida albicansATCC 10231 黑曲霉Aspergillus nigerATCC 16404

最近要做真菌保藏，主要是生孢梭菌和黑曲霉，不知道哪位能提供相应方法或者是文献（中英文均可）。或者谁有这方面经验提点意见啊！ 大家帮帮忙哦~~~[color=#DC143C]dong3626:你好@！你自己可以在中文数据库里搜索一下之后，在这里求助具体的文章！！[/color]

我想请问2010版的药典上的无菌中的灵敏度的检查，说到了金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌 、枯草芽孢杆菌 、生孢梭菌 、白色念珠菌 、 黑曲霉这5种菌，在实际操作中难道都要做吗？还是选择一个革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌就可以了呢？ 我公司的产品是无菌。

小妹我从2006年5月才开始做微生物实验 ....现在基本上是自己独立完成操作 ...我觉得我是个粗心的女孩子 经常打碎这个那个的 比如试管啊 烧杯啊....真担心如果在无菌间里不小心打碎了菌液或者菌液沾到自己身上 应该怎样处理??加上黑曲霉的孢子很容易飞 实在担心我的小命啊.....请教各位 常用的微生物实验菌对人体伤害大吗?是通过什么途径入侵人体的?怎么处理啊? 啊哈哈 谢谢 [em09]

最近看报纸上报到这方面的问题比较多，感觉将黄曲霉和黄曲霉毒素混为一谈，还说巴氏杀菌不能杀死黄曲霉毒素，哎我个人理解，黄曲霉是一种霉菌，是微生物，黄曲霉毒素是由其产生的一种真菌毒素，是一种化学物质，怎能用杀菌去杀死化学物质呢？

我们公司计划建立微生物实验室，占地大约70平，主要做大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，黑曲霉菌，铜绿和[font=&][color=#414141]白色念珠菌，主要做最小抑菌浓度和复配样品防腐挑战实验，现在我们纠结在无菌室需要建立几间，做这些实验需不需要分开，因为实验室总面积并不大，可不可以一间实验室多放置几个生物安全柜，求大神们帮帮忙[/color][/font]

【内容摘要】赭曲霉毒素是一种无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀的碳酸氢钠水溶液中，微溶于水。该化合物相当稳定，在乙醇中置冰箱避光保存一年以上而不破坏。有较高的耐热性，制罐头的豆子经漂白、加盐及在番茄酱中加热1h后，仍然能存留56％的赭曲霉毒素。赭曲霉毒素A是一种与人类健康密切相关的霉菌毒素，是人类可能的致癌剂。除了潜在的遗传毒性和致癌性外，赭曲霉毒素A也是一种具有免疫抑制、神经毒性以及致畸性的物质。赭曲霉毒素最初是从南非的赭曲霉毒株中分离出来的，由赭曲霉(Asper—gillus ochracets)、洋葱曲霉(Aspergillus alliaceus)、鲜绿青霉(PencillilJⅡlviridicatum)、徘徊青霉等代谢产生，包括7种结构类似的化合物，赭曲霉毒素A是其中毒性最强的物质，是自然界中的主要天然污染物。在一些国家的食品中，赭曲霉毒素A的污染率可达2％～30％。该化合物主要表现为肾脏毒性。在巴尔干地方性肾病流行区，6%～18%人群的血液中能检出赭曲霉毒素A。(1)结构与性质赭曲霉毒素是分子结构类似的一组化合物，包括赭曲霉毒素A、B、C、D和a等，其中赭曲霉毒素A是主要的污染物。赭曲霉毒素是一种无色结晶化合物，溶于极性溶剂和稀的碳酸氢钠水溶液中，微溶于水。在紫外光下赭曲霉毒素A呈绿色荧光。该化合物相当稳定，在乙醇中置冰箱避光保存一年以上而不破坏。有较高的耐热性，制罐头的豆子经漂白、加盐及在番茄酱中加热1h后，仍然能存留56％的赭曲霉毒素，赭曲霉毒素的化学结构如图4—2所示。(2)食品中赭曲霉霉素的来源与分布赭曲霉毒素是曲霉属和青霉属的某些菌种产生的二次代谢产物，产毒菌种见表4—2。[color=#075

什么是黄曲霉毒素　　黄曲霉毒素（Aflatoxins）是生长在食物及饲料中的黄曲霉和寄生曲霉代谢的一组化学结构类似的产物，特曲霉也能产生黄曲霉毒素，但产量较少，目前已分离鉴定出的黄曲霉毒素有17种，主要是黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2以及由B1和B2在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1、M2等。黄曲霉毒素的基本结构为二呋喃环和香豆素，B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮（香豆素），前者为基本毒性结构，后者与致癌性有关。B1的毒性（其毒性比氰化钾毒性高）及致癌性极强且耐热（B1的分解温度为268℃左右，一般烹调加工破坏很少），在天然污染的食品中以B1最为多见。　黄曲霉毒素分布　　黄曲霉毒素主要存在于霉变的花生、谷物、果仁和大米等食物中；在水中的溶解范围为10毫克/升~20毫克/升， 可大量溶解于氯仿、甲醇、二甲基亚砜等中等极性的有机溶剂中，不溶于己烷、石油醚和乙醚；易被碱或强氧化剂破坏；进入人体后主要经消化道吸收，大部分分布 在肝脏、肾脏，少部分分布在血液、肌肉、脂肪组织中，其在体内的代谢过程主要为羟基化作用、去甲基作用和环氧化作用。

怎样提取黄曲霉素??怎样提取黄曲霉素??怎样提取黄曲霉素??怎样提取黄曲霉素??

代版友问:黄曲霉M1测定，需要一种免疫亲和小柱，手里有一种测黄曲霉总量的小柱，能不能代替呢？

各位大侠，我在用柱前衍生，高效液相做黄曲霉检测时，回收率只有百分之七十多，这样子能接受么？请问有用液相，柱前衍生做黄曲霉的前辈，你们的回收率是多少呀？我是用免疫亲和柱净化后再衍生的，能指点一下检测黄曲霉有那些地方是比较关键的控制点么？帮忙提高一下回收率，谢谢

黄曲霉毒素的检测、它的抽排风需要单独管道跟处理吗？可以合并到公用的风管统一处理么？

黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 (aspergillus flavus) 寄生曲霉 (a.parasiticus) 产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。黄曲霉毒素主要有B1,B2 ,G1 ,G2 以及另外两种代谢产物M1 ,M2.其中M1 和M2是从牛奶中分离出来的.B1,B2 ,G1 ,G2 ,M1 和 M2 在分子结构上十分接近.。毒性：远远高于氰化物、砷化物和有机农药的毒性，其中以B1毒性最大。当人摄入量大时，可发生急性中毒，出现急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。当微量持续摄人，可造成慢性中毒，生长障碍，引起纤维性病变，致使纤维组织增生。AFT的致癌力也居首位，是目前已知最强致癌物之一。黄曲霉毒素进入机体后，在肝脏中的量较其他组织器官为高，说明肝脏可能受黄曲霉毒素的影响最大。肾脏、脾脏和肾上腺也可检出，肌肉中一般不能检出。黄曲霉毒素如不连续摄入，一般不在体内积蓄。一次摄入后约1周即经呼吸、尿、粪等将大部分排出。

一、背景信息　　近日，媒体曝光了广西梧州和广东肇庆两地市场所出售的部分散装花生油存在黄曲霉毒素超标情况。黄曲霉毒素是什么?毒性怎样?本期将为您解读。　　二、专家解读　　(一)黄曲霉毒素的污染在世界范围内广泛存在。　　黄曲霉毒素(Aflatoxin，AF)最早被发现于1960年，是黄曲霉(Aspergillus flavus)和寄生曲霉(Aspergillusparasiticus)的次级代谢产物，目前已分离鉴定出12种以上，常见的有黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、B2a、G2a、BM2a和GM2a等。黄曲霉毒素的热稳定性非常好，常规烹调和加热法不易分解。　　世界范围内黄曲霉毒素的污染相当广泛，包括谷物、坚果和籽类以及牛乳等，尤以玉米、花生被污染的程度最严重。其主要原因是食物在田间未收获前被黄曲霉等产毒菌浸染，在适宜的气温和湿度等条件下繁殖并产毒，或未经充分干燥，在储藏期间产生大量毒素。食用油也存在容易受黄曲霉毒素污染的问题，但通过原料筛选、碱炼、吸附等控制手段可以使成品油中黄曲霉毒素降到非常低的水平。　　(二)摄入量决定黄曲霉毒素是否引起急性中毒。　　世界范围内曾报道数起人类的黄曲霉毒素急性中毒，如非洲的霉木薯饼中毒，印度的霉玉米中毒等。2004-2005年肯尼亚暴发了迄今史上最大规模的黄曲霉毒素急性中毒事件，中毒千余人，死亡125人，中毒玉米中检出黄曲霉毒素B1的含量高达4400ppb(μg/kg)，是罕见的黄曲霉毒素中毒事件。黄曲霉毒素中毒的症状一般为一过性发烧、呕吐、厌食、黄疸、腹水、下肢浮肿等肝中毒症状，严重者出现暴发性肝功能衰竭、死亡。　　根据我国及世界其他国家的标准规定，黄曲霉毒素的含量如果在安全限量范围之内，并不会对消费者的健康构成风险。　　(三)全球已高度重视对食品中黄曲霉毒素的控制。　　黄曲霉毒素B1是影响人和动物健康的主要真菌毒素之一，也是全球食品安全控制中最主要的真菌毒素。2003年联合国粮农组织(FAO)发布的全世界食品和饲料真菌毒素法规报告中显示，除国际食品法典委员会(CAC)的规定以外，全球100多个国家和地区制定了各类食品中黄曲霉毒素限量标准。食品中黄曲霉毒素B1的限量范围为1-20ppb，黄曲霉毒素总量(AFB1、B2、G1、G2)的限量范围为0-35ppb。　　2011年我国发布的《食品安全国家标准 食品中真菌毒素限量》(GB2761-2011)中规定花生及其制品中黄曲霉毒素B1的限量为20ppb。　　(四)“土榨油”看似原生态实存安全隐患。　　近年来，“纯天然”和“原生态”成为部分消费者的追求，除了购买“土榨油”外，也有使用家用榨油机自制油的方式。对于这两种榨油方式，专家认为存在较大安全隐患。除了原料品质是否过关的问题，“土榨油”或自榨油还存在下列问题：未经过精炼加工，杂质多，易氧化变质;榨油设备不易彻底清洗干净，残留的油渍及谷物残渣在氧化后会产生霉变，食品安全隐患很大;此外，资源利用率低，会造成很大浪费。　　三、专家建议　　(一)科研人员应加大“从田间管理到加工过程”对黄曲霉毒素污染及控制手段的研究力度，为保证食品安全提供更加有效的科技支撑。　　(二)以玉米、花生等为主要原料的食品生产、加工企业，特别是“土榨油”生产作坊，应严格执行食品安全国家标准和相关技术规范，积极采取有效措施，重视原料安全，严格把关每一个生产环节，确保产品的质量和安全。　　(三)媒体应注重全面、科学、客观报道，采用相应领域权威专家的专业观点，以正确解读国家相关标准法规，引导消费者理性认识和理解黄曲霉毒素的危害，避免公众过度恐慌。　　(四)消费者应注意培养良好的消费习惯，注意产品的标签、标识，做到在保质期内妥善储藏。特别应注意通过正规可靠渠道购买食用油，不要片面迷信“纯天然”和“原生态”制品。来源：国家食药监局