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标记混标

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标记混标相关的论坛

  • 荧光标记DNA探针在细胞核混悬液杂交中的应用

    (1)细胞核的分离: 将培养的细胞制成细胞混悬液,或以胰蛋白酶消化法于培养盖上收集培养细胞。应用MgSO4染色分离方法分离细胞核(Van den Engh et al 1986, 在Traok和Van Den Engh 34章 )。细胞混悬液浓度为5×106/ml。利用RNA酶消化后,使核从细胞分离,细胞核混悬液浓度为4~5×106细胞核/ml。(2)细胞固定和酸的处理:在5 ml试管内加冷的100%酒精不断旋转以达到满意的固定。在冰上停留10 min。在4 ℃离心(×150 g)10 min。重复加三次冷的100%酒精入试管内,离心,倾去。置于冰上10 min,再离心。然后加入相当核悬液1/2量的0.1 n HCl , 0.5% Triton X-100。室温停留10 min。加入IBM-0.25%Triton X-100(IBM配方:50 mmol/l KCl, 10 mmol/L MgSO4, 5 mmol/L HEPES pH8.0)。再离心,重复IBM漂洗(这时细胞核可在不染色情况下,以荧光显微镜观察)后,以2×SSC-0.1%Tween漂洗1×3min,继之加入等量2%的多聚甲醛在1×PBS-5 mmol/l MgSO4。在室温静置站立10min。倾去上清液,加IBm -Triton X-100漂洗,离心,使细胞核混悬液最终浓度为108/ml,(可用IBM-Triton X-100稀释约50倍,在血球计数器计数),混悬液镜检应含单个,完整的细胞核。(3)细胞核混悬液杂交①配制杂交混合液:甲酰胺5份,20×SSC1份,50%硫酸葡聚糖2份,pH调至7.0。此原液(stock solution)可贮存在4 ℃冰箱内。应用时加1份10 mg/ml鲱鱼精子DNA(herring sperm DNA)。②混合1 μl的细胞核混悬液(108/ml)与18μl的杂交混合液,充分混匀。将此19 μl混合液移入1.5 ml容积的Eppendorf 管中(核含量约为105)。③加入100 ng/每管的AAF标记DNA探针(如为生物素标记DNA探针浓度为20~40 ng/每管)。④置70 ℃10min使DNA探针和核DNA变性。⑤和组织切片与DNA探针杂交方法相较,不同的是在加热变性后切勿置冰上迅速冷却以终止反应,而应迅速转入37 ℃孵育过夜。(4)杂交后漂洗在每管中加入1.25 ml 50%甲酰胺-2×SSC(pH7.0),在42 ℃静置10~15min。偶尔旋转以助混匀。冷却至室温。加100 μl经dimethylsuberimidate(DEMS)处理的血细胞(107/ml)混匀,离心,室温,10min,轻弹试管使沉淀的小块散开,加入1.25 ml 2×SSC(pH7.0),42 ℃,继之,静置于室温10~15min,如前离心,再加1.25 ml IBM-Triton X-100,室温静置5min,离心。注:DEMS处理红细胞方法:经漂洗并离心去除白细胞和血清的红细胞在盐液如PBS中,细胞含量为108/ml,以K2CO3和DEMS溶液处理3次,第1次:K2CO3为20 mmol/L,DEMS为3 mmol/L,以后2次:K2CO3依然为20 mmol/L,而DEMS为10 mmol/L。在应用前将K2CO3和DEMS液混合加入红细胞混悬液中。在最后2次漂洗液中,应用100 mmol/l K2CO3将pH调至9~10。在25 ℃,15min后,加入50 μl,100 mmol/l 的柠檬酸(citric acid)/每ml细胞混悬液的浓度以达固定红细胞的目的。固定的红细胞离心倾去上清液后,用2×SSC稀释到108/ml,加0.1%叠氮钠可在4 ℃保存至少1年。(5)AFF标记的荧光显示:加200 μl的PBS含0.05%Tween和2%正常血清(NGS),轻轻振荡混匀,室温静置10min,加20 μl 1:100的单克隆抗AFF抗体,37 ℃孵育45min,加1.25 ml的PBS-Tween,室温静置10min,加20间歇性振荡,离心,倾去上清液,加200 μlPBS含0.05%Tween –2%NGS,振荡,室温静置10min,加20 μl的羊抗小鼠–FITC荧光标记抗血清,稀释度1:100~1:300。孵育于37 ℃ 45min,加1.25 ml PBS –Tween,室温静置10min,离心,倾去上清液。(6)生物素标记探针的荧光显示:加200 μl 4×SSC含0.1%Trion X-100 和5%BSA。室温静置10 min后,加20 μl抗生物素标记FITC抗血清15 μg/ml,孵育在37 ℃ 30min,以1.5 ml 4×SSc –0.1% Trion X-100洗1次,加入1.25 ml IBm –Triton X-100,室温静置10~15min,间歇振荡、离心。(7)荧光显微镜观察:将细胞核混悬液稀释于250 μl的IBM-Trion X-100中,轻加振荡混匀。为抗荧光褪色可加等量的抗褪色溶液至载片上的细胞核涂片上,选择适当的激发波长观察。(8)流式细胞计:将750 μl的细胞核混悬液通过流式细胞仪(Flow cytometry, FCM),DEMS处理过的红细胞作为对照(Df 530/30nm, Omega ·Optical Inc, Brattleboro, VT)。

  • 为了不搞混样品,你们是如何给样品做识别标记的?

    为了不搞混样品,你们是如何给样品做识别标记的?

    为了不搞混样品,你们是如何给样品做识别标记的?我们用的是记号笔:(一)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/02/201302280957_427493_1841897_3.jpg(二)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/02/201302280957_427494_1841897_3.jpg(三)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/02/201302280957_427495_1841897_3.jpg(四)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/02/201302280958_427496_1841897_3.jpg(五)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/02/201302280958_427497_1841897_3.jpg你们用的是那种?

  • 拉伸试验中原始标距标记问题

    大家的实验室是如何标记的?一直没找到合适的方法,不知道各位有没有更好的标记方式?我先说一下我这儿的,主要试验对象为板材。对于冷轧板:用卡尺固定标距长度后拧紧,然后在试样上用适当的力套打两个标距。这样对卡尺不好,不是很好的方法。对于热轧板:有手动的打点器。对于视频引伸计的试样,只能识别白色标记,而且记号笔较粗,仨字评价:不好使。。

  • GB/T228.1 关于比例试样标距的计算值和标记值的讨论

    在综合区已经发表该问题,重复发表,请勿见怪。 对于比例试样,如果原始标距的计算值与其标记值之差小于10%L0,可将原始标距的计算值按GB/T8170修约至最接近5mm的倍数。如上,划线部分应该怎么理解?原始标距的计算值能完全理解,标记值能不能理解成标记的原始标距?如果可以这样理解,那么所有的差值应该都是0.以上理解是否正确,请大虾指正。

  • 购买C6-C26 的烷烃混标

    请问购买C6-C26 的烷烃混标在哪里购买,在Aladdin中看了没有,在simga中也搜不到C6-C26的,有6种类型,1.烷烃混标 C8 至 C20 (含有 C8,C9,C10,C11,C12,C13,C14,C15,C16,C17,C18,C19,C20,浓度均为 40 mg/L,溶于己烷)2.C7 - C40 饱和烷烃(定量标准品,适合用作保留指数标记探针。)3.烷烃标准溶液 C21 至 C40(含有 C21,C22,C23,C24,C25,C26,C27,C28,C29,C30,C31,C32,C33,C34,C35,C36,C37,C38,C39,C40 各 40mg/l,溶于甲苯溶液)4.用于 GC 系统性能测试的烷烃标准混合物(含有 C10 以及所有从 C20 至 C40 的偶数正烷烃,浓度均为 50mg/L,溶于正庚烷)5.烷烃类混标,用于 GC 系统性能测试(含有 C10 至 C40 的所有偶数正烷烃,浓度均为 50mg/L,溶于正庚烷)6.正构烷烃混标这些中买那种较好,有没有人买过,有没有链接?

  • 液相色谱峰表标记

    液相色谱峰表标记

    请问这峰表中的标记V、SV、T是什么意思?[img=,690,517]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907301046002535_744_1750127_3.jpg!w690x517.jpg[/img]

  • 标记中的字母代表什么?

    如图所示,标记中的S M 等字母表示什么呢?这是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]图[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/03/202003101717310507_5958_4061307_3.png[/img]

  • 抗体标记是什么?抗体标记类型介绍

    [font=宋体]抗体经过酶标记、铁蛋白标记或通过胶体金标记获得标记抗体,是免疫电镜样品制备的一种方法,用于观察抗原抗体免疫复合物方面研究的手段。免疫标记技术是将一些既易测定又具有高度敏感性的物质标记到特异性抗原或抗体分子上,通过这些标记物的增强放大效应来显示反应系统中抗原或抗体的性质与含量。抗体标记主要是用于抗原的定位分析,在某些情况下,也可以对混杂有大量其他分子的样本中的抗原进行定量检测。由于抗体与其相应抗原具有很高的亲和力,因此带有易识别标记物的抗体可以定位分析抗原,并且是一种理想的快速价廉的定量测定方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]荧光素标记[/b][/font][font=宋体]荧光色素是最常用于标记抗体的标记物之一。荧光素经恰当的激发可发光,从而得知抗体的定位和待测抗原的分布情况,主要用于细胞分选或高分辨率免疫染色,是一种非常好的亚细胞水平精确定位的方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]酶标记[/b][/font][font=宋体]酶标记抗体是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成,其应用范围非常广泛,结果即时可见、敏感性高,但较难应用于定量分析。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]生物素标记[/b][/font][font=宋体]生物素标记反应简单、温和且很少抑制抗体活性,将生物素与抗体共价结合是一种非常简便、直接的标记方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州开发了丰富的[url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记蛋白[/b][/url]产品,拥有[/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]定点标记和化学标记两种类型的生物素标记蛋白,覆盖细胞治疗、抗体药、疫苗等热门靶点。产品具有高批间一致性、高活性等优势,适用于[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Biopanning[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SPR / BLI[/font][font=宋体]等实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]除了为客户提供抗体开发,义翘神州还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url],可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

  • 荧光标记-荧光标记多肽

    荧光标记-荧光标记多肽

    5(6)-FAM,FITC,CY5,RhodamineB,PNA,EDNAS/dabcyl等荧光标记修饰的多肽:荧光标记修饰多肽技术是我们国肽生物的代表性多肽合成技术,我们的这项技术已经相当成熟。[img=,488,412]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904191652029467_5266_3531468_3.jpg!w488x412.jpg[/img]我们主要提供:多肽合成、定制多肽、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目录肽、偶联蛋白(KLH、BSA、OVA等)、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。合肥国肽生物官网:http://www.bankpeptide.com欢迎咨询服务热线:17718122172;17718122684;17730030476;17718122397

  • 什么是抗体标记?高质量的标记抗体有哪些?

    [font=宋体]抗体标记是一种生物技术,通过将标记物(如酶、荧光素、生物素等)共价连接到抗体上,使其与待检测物(如特定抗原)特异性反应,形成多元复合物。随后,借助相关仪器,可以直接观察试验结果或进行自动化测定,从而对抗原、抗体反应进行定性和定位研究,或进行定性和定量测定。下面为大家介绍几种高质量的标记抗体:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]①荧光色素标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]这种标记方法是将荧光素与相应的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]结合,将荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]与标本中相应的抗原形成荧光标记的抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原复合物,用荧光显微镜观察。在显微镜若存在荧光则意味着存在抗原抗体复合物,因此可根据已知的抗体[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗原[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]推断出另一种未知抗原[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]或抗体[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]②[/b][url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记抗体[/b][/url][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]抗体标记中生物素的引入使整个过程灵敏度大大提高!这种方法可使抗体或其它蛋白质的[/font][font=宋体]ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基与酰化的生物素共价结合,生物素化的分子可以通过酶标记的抗生物素蛋白或荧光染料[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]链霉抗生物素蛋白复合物来检测。小分子水溶性生物素对链霉亲和素的高亲和力是该方法的设计基础。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]③放射性碘标记抗体[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]蛋白质的碘标记方法有很多种,比如我们常用的化学法或酶促法通过氧化对蛋白质分子进行碘化等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]④[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体是指将[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料与特定抗体结合而成的复合物,这种技术常用于生物医学研究中的荧光标记。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]荧光染料是从红藻属藻类中提取得到的一种特殊色素,具有较高的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体主要应用在流式细胞术和免疫组化等实验中。在流式细胞术中,[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞表面标记物的表达情况,如[/font][font=Calibri]CD4[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]CD8[/font][font=宋体]等,可以实现对免疫细胞亚群的研究。在免疫组化和免疫组织化学等实验中,[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]偶联抗体可以用于检测细胞内标记物的表达,如细胞因子、转录因子等,可以深入研究细胞内信号传导通路及相关的生物学功能。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑤[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体是一种荧光标记的二抗,通常是在单抗上进行标记,具有很强的荧光强度和稳定性。[/font][font=Calibri]PerCP-Cy5.5[/font][font=宋体]标记抗体可以与细胞或细胞组分中的特定抗原结合,用于细胞表面标记、蛋白质定量分析、细胞周期和细胞凋亡研究等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]⑥[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体是将[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体](异硫氰酸荧光素)与特异性抗体经适当方法连接而成的复合物。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]是一种荧光染料,能够与各种抗体蛋白结合,并产生强烈的荧光信号。这种标记技术常用于生物医学研究中的荧光标记,特别是在免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州除了为客户提供抗体开发,还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url],可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。更多关于抗体标记及抗体标记方法详情可以参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]

  • 什么是抗体标记-抗体标记技术汇总

    [font=宋体][font=宋体]抗体标记,作为生物学和医学领域的关键技术,它的核心在于将标记物(如酶、荧光素、生物素等)以共价的方式连接到抗体上。这一过程犹如赋予抗体一双[/font][font=宋体]“魔法眼睛”,使其能够精准地识别并结合特定的抗原。抗体与标记物的结合,再与待检测抗原发生特异性反应,形成一种多元复合物。这种复合物的形成,不仅增强了检测的灵敏度,也提高了识别的特异性。这一特性使得抗体标记技术在生物学、医学和生物工程领域中发挥着举足轻重的作用。借助高端的仪器设备,如荧光显微镜、射线测量仪、酶标检测仪、电子显微镜和发光免疫测定仪等,我们能够直接观察或自动化测定试验结果。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]这不仅在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上对抗原、抗体反应进行深入的定性和定位研究,还为各种[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]和固相免疫分析方法提供了强大的技术支持,从而在体液中的半抗原、抗原进行精准的定性和定量测定。如今,抗体标记技术已经成为医学病理学、免疫组织化学、分子生物学、生物制药等领域不可或缺的分析与研究工具。而酶标记法、生物素化标记法、荧光素标记法和胶体金标记法等常见的抗体标记技术,更是推动了相关领域的飞速发展。抗体标记技术,不仅为我们打开了一扇探索生物微观世界的大门,更为相关领域的研究与应用提供了强大的技术支持。在未来的生物学、医学和生物工程研究中,抗体标记技术无疑将继续发挥其无可替代的作用。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]常用的抗体标记技术[/font][/b][font=宋体][b][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]抗体的酶标记法[/font][/b][/font][font=宋体]通过共价键经适当方法将酶联结在抗体上,制成酶标抗体,再借酶对底物的特异催化作用,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,这些有色产物可用肉眼、光学显微镜和电子显微镜观查,也可以用分光光度计测定,呈色反应显示了酶的存在,从而证明发生了相应的免疫反应。[/font][font=宋体][font=宋体]实验中使用偶联剂使酶与抗体结合,即通过应用单、双或多功能试剂,分别与大分子的抗体所存在的功能性基团发生反应,生成酶[/font][font=宋体]—抗体偶联复合物。不同的酶—抗体复合物制备方法中,最广泛应用的戊二醛法,本法与其它偶联方法相比,具有操作简单、反应条件温和,及实用面广等长处。[/font][/font][font=宋体]酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。在制备方法上,宜选用产率高、不影响结合物的活性和不混杂干扰性物质且操作简便易行的方法。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1) [/font][font=宋体]辣根过氧化物酶[/font][font=Calibri](HRP)[/font][/font][font=宋体][font=宋体]辣根过氧化物酶([/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体])标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]的糖基用过碘酸钠氧化成醛基,加入抗体[/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]后该醛基与 [/font][font=Calibri]IgG[/font][font=宋体]氨基结合,形成[/font][font=Calibri]Schiff[/font][font=宋体]氏碱。为了防止[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]中糖的醛基与其自身蛋白氨基发生偶合,在用过碘酸钠氧化前先用二硝基氟苯阻断氨基。氧化反应末了,用硼氢化钠稳定[/font][font=Calibri]Schiff[/font][font=宋体]氏碱。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2) [/font][font=宋体]碱性磷酸酶([/font][font=Calibri]AKP[/font][font=宋体])[/font][/font][font=宋体][font=宋体]碱性磷酸酶([/font][font=Calibri]AKP[/font][font=宋体])用于标记抗体,常用戊二醛一步法,将酶和单抗混合,再加入适量戊二醛,使酶和抗体蛋白的[/font][font=Calibri]NH2[/font][font=宋体]分别与两个醛基结合,制备成结合物。该法简便,但所得产物不均一,抗体活性损失大,酶标记率低。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]抗体的生物素化标记[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]亲和素与生物素都可与蛋白质[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]包括抗原、抗体、酶等[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]、荧光素等分子结合而不影响后者的生物活性,是理想的标记剂。一个抗体分子可偶联数十个生物素或亲和素分子,而亲和素或生物素分子又可与酶或荧光素结合,从而组成一个生物放大系统,显著提高检测的灵敏度。常用的有亲和素–生物素标记法[/font][font=Calibri](Labeled avidin biotin[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]LAB)[/font][font=宋体]、亲和素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]生物素桥法[/font][font=Calibri](bridged avidin biotin, BAB)[/font][font=宋体]和亲和素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]生物素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]过氧化物酶复合物法[/font][font=Calibri](avidin biotin peroxid ase complex[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]ABC)[/font][font=宋体]。本实验可使抗体或其它蛋白质的ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基通过手臂与酰化的生物素共价结合。其后,生物素化的分子可应用酶标[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]亲和素或荧光染料[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]链霉亲和素复合物来检测。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]抗体的荧光标记法[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]荧光抗体标记技术是将荧光素以化学方法与特异性抗体共价结合,形成荧光素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]蛋白质结合物(即荧光标记抗体),此结合物仍保留着抗体活性,同时具有荧光素的示踪作用。当它与相应的抗原特异结合后,借助于荧光显微镜观察呈现明亮的特异荧光。实验中常用异硫氰基荧光黄([/font][font=Calibri]fluorescein isothiocyanate, FITC[/font][font=宋体])作为标记物,在碱性溶液中,[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]上的化学基团异硫氰基([/font][font=Calibri]-N=C=S[/font][font=宋体])与抗体蛋白自由氨基(主要是赖氨酸的ε[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]氨基)结合,形成荧光抗体,以测定细胞相应抗原的存在。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]具有很高的量子产量(发射光与吸收光的比值[/font][font=Calibri],0 .85[/font][font=宋体]),而且形成的偶联物的稳定性很好。[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]是应用最广的荧光染料,流式细胞仪就按[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]的特性,设计了激光波长为[/font][font=Calibri]488 nm,[/font][font=宋体]很接近于[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]的最大激发波长[/font][font=Calibri]492nm[/font][font=宋体])。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]免疫胶体金标记抗体及检测抗原[/font][/b][/font][font=宋体]胶体金是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,有其独特的优点。近年已在各种生物学研究中广泛使用。在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能利用到。[/font][font=宋体][font=宋体]胶体金在光镜和电镜中均为有效的标记物,可以检测单一和多重抗原。胶体金在电解质中不稳定,但被蛋白质包被的胶体金是稳定的。一般常用免疫球蛋白或蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]包被胶体金,可作标记二抗进行免疫检测,本方法应用范围广,染色后的样品可以长期保存。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记[/b][/url]详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

  • 试样不容易标记,怎么办?

    我们的试样是透明的,试样尺寸比较小,所以不是太适合直接在试样表面进行标记,请问这种情况,如何对试样进行唯一性标记?谢谢!

  • 很多ICP仪器出错,都有出错标记

    分享下安捷伦ICP出错标记:个浓度测量结果可能会带有一个字母标记( 'Flag')。下表中列出了可能出现的标记及其优先权,如果可能出现多个错误标记,将按照优先权限优先显示权限较高的标记。标记在分析工作表格中将以红色字体显示,将只显示优先权最高的标记。如果要显示所有标记,可在 编辑菜单中的 编辑编辑各次读数对话框中查看。标记描述o读数超范围QCQC 测试失败S标准加入法失败e结果经筛选c未校正之结果i无内标Nn干扰矫正未实施( IEC 表设置不正确或基体计算未进行)a自动稀释所得u在范围之下 ( 最大浓度)b与干扰物相关的谱线测试结果超范围p (Liberty )谱图重叠m (Liberty )多个峰d (Liberty )未找到峰C重复读数不收敛(fitted 背景矫正未进行)D谱图数据不足

  • 生物素标记蛋白方式有哪些?Avi-Tag+化学标记方式介绍

    [font=宋体][font=宋体]义翘神州开发了丰富的生物素标记蛋白产品,拥有[/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]定点标记和化学标记两种类型的生物素标记蛋白,覆盖细胞治疗、抗体药、疫苗等热门靶点。产品具有高批间一致性、高活性等优势,适用于[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Biopanning[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SPR / BLI[/font][font=宋体]等实验。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Avi-Tag[/font][font=宋体]生物素标记蛋白:[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]重组蛋白融合一个额外的[/font][font=Calibri]15[/font][font=宋体]个氨基酸序列,即[/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体],通常连接至蛋白的[/font][font=Calibri]N-[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]C-[/font][font=宋体]末端。 [/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]肽段被大肠杆菌生物素连接酶[/font][font=Calibri]BirA[/font][font=宋体]所识别,[/font][font=Calibri]BirA[/font][font=宋体]连接酶通过酶促反应将生物素连接到[/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]序列内的单个赖氨酸残基。因此,[/font][font=Calibri]Avi[/font][font=宋体]标签蛋白以特定位点的方式进行生物素化,从而实现标记均一。 这使固定在亲和素包被表面的蛋白方向具有一致性,并且由于[/font][font=Calibri]Avi[/font][font=宋体]标签位于蛋白的末端,因此对蛋白活性的影响通常很小,有助于保持生物素化的蛋白与未标记的蛋白保持相同的特性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]生物素与链霉亲和素[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]亲和素([/font][font=Calibri]SA[/font][font=宋体])之间的强非共价相互作用,具有高灵敏度和高特异性。义翘神州开发了多种[/font][font=Calibri]Avi-tag[/font][font=宋体]生物素标记的重组蛋白。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]产品优势:[/font][font=宋体][font=宋体]? 高生物活性,经[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]BLI[/font][font=宋体]等验证[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 多种属,覆盖细胞治疗、抗体、[/font][font=Calibri]Fc[/font][font=宋体]受体等热门靶点[/font][/font][font=宋体]? 高批间一致性[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]化学标记生物素蛋白:[/font][font=宋体][font=宋体]化学标记法,是将蛋白[/font][font=Calibri]N-[/font][font=宋体]末端游离胺基及内部的赖氨酸侧链上的胺基与生物素分子结合,通常一个蛋白质分子会被标记上多个生物素分子。化学标记法具有灵敏度高、[/font][font=Calibri]tag free[/font][font=宋体]等特点,是常用的生物学方法之一。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]产品优势:[/font][font=宋体]? 高信号强度,每个蛋白分子通常平均含有多个生物素,有助于对其检测。[/font][font=宋体]? 标记方法简单,检测灵敏度高。[/font][font=宋体][font=宋体]? 高生物活性,[/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]SPR[/font][font=宋体]等验证,批间一致性高[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]生物素标记蛋白应用:[/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、用于生物素标记的三种天然产物分子探针的设计与合成研究[/font][/font][font=宋体]从中药中提取分离得到的天然产物具有结构多样、药理作用广泛的特点,常被用来作为先导化合物开发新药,因此需要对其具体作用机制进行研究。天然产物药理作用广泛对应着多靶点的特性,但其靶标蛋白的难以确定也阻碍了人们对其的进一步研究与开发。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]基于亲和性蛋白组学分析方法([/font][font=Calibri]Affinity-based Protein Profiling,ABPP[/font][font=宋体])是基于活性小分子与靶标蛋白之间的亲和作用,在活性小分子上引入报告基团,利用亲和层析技术可以将靶标蛋白进行分离的一种方法,其作为一种十分有效的工具被广泛应用于天然产物靶标蛋白的发现。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]选取三个从中药中提取分离得到的活性天然小分子,设计合成相应的小分子探针,旨在为它们靶标蛋白的发现以及作用机制的研究提供一个有效的工具,具体内容如下:[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、对目前主要的用于天然小分子的靶标蛋白鉴定方法进行了介绍,且着重介绍了[/font][font=Calibri]ABPP[/font][font=宋体]方法及其在天然产物靶标蛋白鉴定的应用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、以薯蓣皂苷元和生物素为原料,经过酯化、酰胺化、取代、水解反应等步骤分别合成含有长臂亲脂性链和亲水性链的薯蓣皂苷元生物素标记探针[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]8,[/font][font=宋体]并以[/font][font=Calibri]MTT[/font][font=宋体]法对其进行抗肿瘤活性评价。实验得到的探针分子、重要中间体用[/font][font=Calibri]MS[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]1H-NMR[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]13C-NMR[/font][font=宋体]表征,确认所得化合物结构与目标化合物一致。细胞活性实验结果表明合成的探针分子[/font][font=Calibri]3[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]8[/font][font=宋体]具有与薯蓣皂苷元相当的抗肿瘤活性,且对探针分子标记的靶标蛋白进行电泳分析,发现了三条薯蓣皂苷元可能特异性作用的蛋白条带,这些结果都为后续薯蓣皂苷元抗肿瘤靶标蛋白的发现奠定基础。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以关注义翘神州[url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记蛋白[/b][/url][/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite[/font][/font]

  • 常见的抗体标记方法有哪些?

    [font=宋体]什么是[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记[/b][/url]?[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体结合也被称为抗体标记,是一种可将特定标记物共价连接到抗体分子上的抗体修饰技术。这些标记抗体可用于从细胞,组织,或者整个个体的混合物中分离和纯化的目的蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]辣根过氧化酶([/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体])是最常见的抗体酶标记类型。[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]上仅有[/font][font=Calibri]6[/font][font=宋体]个赖氨酸,而且它们的修饰并没有较多的影响酶活性。常见的荧光染料有[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]等,均可用于标记抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]除了为客户提供抗体开发,义翘神州还可以提供抗体标记服务,可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]高质量的标记抗体:[/b][/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/font][font=宋体][font=宋体]②[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/font][font=宋体][font=宋体]③[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/font][font=宋体][font=宋体]④[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/font][font=宋体][font=宋体]⑤[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]标记抗体[/font][/font][font=宋体]⑥生物素标记抗体[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]常见的抗体标记方法:[/b][/font][font=宋体]和所有蛋白质一样,抗体也是由氨基酸组成的。理论上,通过大多数氨基酸可以实现生物偶联。以下内容介绍了几种基于赖氨酸残基的抗体偶联和标记技术。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]①[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体](琥珀酰亚胺)酯法[/font][/font][font=宋体]应用广泛的荧光染料(如罗丹明衍生物)是采用这种方法对抗体进行偶联。通常在磷酸盐缓冲液中进行,随后与未标记的染料在柱上进行分离。该方法的主要缺点是,由于酯类对水分敏感,酯类的稳定性差。因此,反应结束后,标记抗体应立即使用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]吉妥珠单抗([/font][font=Calibri]Gemtuzumab ozogamicin, Mylotarg[/font][font=宋体])是全球范围内首个获批上市的抗体偶联药物([/font][font=Calibri]ADC[/font][font=宋体])。半合成的卡奇霉素衍生物具有[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]酯,以便将卡奇霉素与人源化[/font][font=Calibri]IgG4[/font][font=宋体]的赖氨酸残基偶联。然而,由于患者的临床获益不足,[/font][font=Calibri]Mylotarg[/font][font=宋体]已于[/font][font=Calibri]2010[/font][font=宋体]年退市。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]②异硫氰酸盐法[/font][font=宋体][font=宋体]这种方法主要用于异硫氰酸荧光素([/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体])染料的偶联,广泛用于荧光标记蛋白和抗体的制备。异硫氰酸盐比[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]更稳定,但也更难制备,而且利用该方法,标记的反应效率可能会降低。与[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]法一样,应在反应结束后通过层析法去除多余染料。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]③碳二亚胺法[/font][font=宋体][font=宋体]碳二亚胺衍生化合物将蛋白质上的羧基转换为反应中间体,可与赖氨酸发生反应。碳二亚胺的高反应性意味着它们可用于使用相对惰性的材料(如磁性或金颗粒)标记抗体。最常用的碳二亚胺为[/font][font=Calibri]EDC[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]有时可被添加至反应中,以辅助产生相对稳定的中间体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]该方法操作简单,但与[/font][font=Calibri]NHS[/font][font=宋体]一样,[/font][font=Calibri]EDS[/font][font=宋体]具有吸水性,因此,标记后抗体需立即使用。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④高碘酸盐法[/font][font=宋体][font=宋体]这种方法可用于制备特异性的[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]标记抗体。高碘酸盐通过产生与赖氨酸残基相互作用的醛分子来激活[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]本身只有少量的赖氨酸残基,因此酶聚合的影响不大。[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]和抗体之间的键是可逆的,可通过添加氰基硼氢化钠使其保持稳定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情抗体标记详情可以参看:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]

  • 生物素标记抗体:原理、应用与前景

    [b][font=宋体]一、引言[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]在生物学和医学的研究中,抗体标记技术已成为一种重要的研究手段。其中,生物素标记抗体凭借其独特的优势,在许多领域中得到了广泛应用。本文将详细介绍生物素标记抗体的原理、应用及发展前景。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、生物素标记抗体的原理[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]生物素,又称维生素[/font][font=Calibri]H[/font][font=宋体],是一种存在于自然界中的小分子有机物质。它可以通过化学反应与抗体结合,生成生物素标记抗体。这一过程通常是在抗体的氨基基团上连接一个生物素衍生物,形成共价键。这种连接方式不会改变抗体的免疫活性,同时使得生物素标记抗体能够与相应的抗原结合。[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]三、生物素标记抗体的应用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫分析:生物素标记抗体在免疫分析中发挥了重要作用。通过将生物素标记抗体与相应的抗原结合,可以实现对抗原的灵敏检测。这种方法被广泛应用于生物学、医学及食品安全等领域。[/font][font=宋体]蛋白质组学研究:在蛋白质组学研究中,生物素标记抗体可用于蛋白质的分离和纯化。通过生物素标记抗体与抗原的特异性结合,可以从复杂的蛋白质混合物中分离出目标蛋白质。[/font][font=宋体]细胞生物学研究:生物素标记抗体在细胞生物学研究中具有广泛的应用价值。例如,通过生物素标记抗体追踪细胞内蛋白质的分布和动态变化,有助于深入了解细胞的生命活动。[/font][font=宋体]疾病诊断与治疗:生物素标记抗体在疾病诊断和治疗中也发挥了重要作用。例如,针对癌症的免疫治疗中,生物素标记抗体可以用于识别和攻击癌细胞,从而达到治疗目的。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]四、发展前景[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]随着生物学和医学技术的不断进步,生物素标记抗体的应用前景日益广阔。未来,随着技术的不断创新和完善,生物素标记抗体的性能将得到进一步提升,从而推动其在更多领域中的应用。同时,随着人类对生命现象认识的深入,将有更多具有挑战性的研究课题需要借助生物素标记抗体这一强大工具。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]五、结语[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]生物素标记抗体作为一种重要的研究手段,在生物学、医学及其他相关领域中发挥着不可或缺的作用。随着技术的不断进步和应用领域的拓展,我们有理由相信,生物素标记抗体的未来将更加光明,为人类探索生命奥秘提供更多可能性。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite][b]生物素标记蛋白[/b][/url]相关产品,详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/biotinylated-protein-elite[/font][/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 抗体标记技术及其应用

    [font=宋体]抗体标记技术是一种广泛应用于生物学、医学及免疫学等领域的重要技术。它通过将特定的标记物与抗体结合,实现对抗体及其所识别的抗原的检测、定位和定量等操作。本文将介绍抗体标记技术的原理、方法及实际应用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]一、抗体标记技术的原理[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]抗体标记技术是将特定的标记物与抗体结合,使抗体带上示踪基团,从而实现对抗体及其所识别的抗原的检测、定位和定量等操作。根据标记物的性质,抗体标记技术可分为放射性标记、荧光标记、化学发光标记和生物发光标记等。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、抗体标记技术的方法[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]放射性标记[/font][font=宋体][font=宋体]放射性标记是将放射性核素与抗体结合,通过放射性衰变产生的射线实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的放射性核素包括[/font][font=Calibri]3H[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]14C[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]35S[/font][font=宋体]等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点,但存在放射性污染的问题。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记[/font][font=宋体][font=宋体]荧光标记是将荧光染料与抗体结合,利用荧光信号实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的荧光染料包括异硫氰酸荧光素([/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体])、藻红蛋白([/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体])和罗丹明等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点,但存在光漂白和光干扰等问题。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]化学发光标记[/font][font=宋体]化学发光标记是将化学发光剂与抗体结合,利用化学反应产生的光信号实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的化学发光剂包括吖啶酯类、过氧化物酶和碱性磷酸酶等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点,但存在化学反应的不稳定性等问题。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]生物发光标记[/font][font=宋体]生物发光标记是将生物发光物质与抗体结合,利用生物发光产生的光信号实现对抗体及其所识别的抗原的检测和定量。常用的生物发光物质包括萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶等。该方法具有灵敏度高、特异性强等优点,但存在生物发光的不稳定性等问题。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三、抗体标记技术的应用[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫组化染色[/font][font=宋体]免疫组化染色是一种用于检测组织中特定抗原的定位和定量技术。通过抗体标记技术将特异性抗体与组织中的抗原结合,再利用组织化学方法显示抗原的位置和分布。该技术可用于诊断疾病、研究组织结构和功能等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]流式细胞术[/font][font=宋体]流式细胞术是一种用于检测细胞表面抗原的表达水平的技术。通过抗体标记技术将特异性抗体与细胞表面抗原结合,再利用流式细胞仪对细胞进行计数和分选。该技术可用于研究细胞分化、免疫应答和肿瘤发生等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫沉淀[/font][font=宋体][font=宋体]免疫沉淀是一种用于分离和纯化特异性抗原的技术。通过抗体标记技术将特异性抗体与抗原结合,再利用蛋白[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]或蛋白[/font][font=Calibri]G[/font][font=宋体]等亲和层析方法将抗原与抗体分离。该技术可用于研究抗原的性质、结构和功能等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]总之,抗体标记技术是一种广泛应用于生物学、医学及免疫学等领域的重要技术。它通过将特定的标记物与抗体结合,实现对抗体及其所识别的抗原的检测、定位和定量等操作。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]同时义翘神州还可以提供[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记服务[/b][/url],可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。详情可以关注[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font]

  • 【原创】做氮谱之前,需要同位素标记吗

    我合成一系列高氮化合物,但是没很好的方法进行结构表征,做质谱没出现分子离子峰,做氢谱含的氢很少。请问能做氮谱吗?但是做氮谱之前,听说需要同位素标记吗?没有标记是否不能做氮谱?

  • 求C13标记菲的质量数

    要用GC-MS检测样品中13C标记的菲(phenanthrene),含量太低,又没有标样。想知道其MS SIm检测的质量数。菲的是178,176,179,理论上是每个加14,检测了一下感觉响应很小,不确定是不是?

  • 抗体标记的方法及注意事项有哪些?

    [font=宋体]什么是抗体结合?抗体结合也被称为[url=https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation][b]抗体标记[/b][/url],是一种可将特定标记物共价连接到抗体分子上的抗体修饰技术。这些标记抗体可用于从细胞,组织,或者整个个体的混合物中分离和纯化的目的蛋白。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]辣根过氧化酶([/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体])是最常见的抗体酶标记类型。[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]上仅有[/font][font=Calibri]6[/font][font=宋体]个赖氨酸,而且它们的修饰并没有较多的影响酶活性。常见的荧光染料有[/font][font=Calibri]FITC[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]PE[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]APC[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]PerCP[/font][font=宋体]等,均可用于标记抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]除了为客户提供抗体开发,义翘神州还可以提供抗体标记服务,可提供的标记物包括[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]、生物素、荧光基团等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]标记方法:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体])标记抗体、抗原:常用于标记抗体的活化生物是[/font][font=Calibri]BNHS[/font][font=宋体];对于偏酸性的抗原,标记时多采用[/font][font=Calibri]BHZ[/font][font=宋体];[/font][/font][font=宋体][font=宋体]([/font][font=Calibri]2[/font][font=宋体])标记酶:以生物素标记[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]为例。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]标记注意事项:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]待标记物的蛋白浓度不能过低,如若浓度过低需经超滤浓缩等手段提高浓度至[/font][font=Calibri]0.1mg/mL[/font][font=宋体]以上。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]一个蛋白质可能被多个生物素标记,标记时,生物素与待标记物应有合适的比例,确保标记后不影响待标记物的活性。推荐生物素:抗原蛋白比例为[/font][font=Calibri]1~3[/font][font=宋体]:[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体],生物素:抗体比例为[/font][font=Calibri]5~20[/font][font=宋体]:[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]或根据标记试剂盒说明书推荐比例。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3. [/font][font=宋体]为减少空间位阻影响,基于检测灵敏度特异性等要求,可在生物素与被标记物之间加入交联臂结构。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4. [/font][font=宋体]如果偶联基团为氨基,待标记物的系统不得含有游离的氨基([/font][font=Calibri]Tris,[/font][font=宋体]氨基酸)、载体蛋白([/font][font=Calibri]BSA[/font][font=宋体])或者其他干扰物,若有干扰物需要用标记缓冲液反复超滤确保其去除干净,若采用其他基团偶联试剂,待标记物系统亦不能有含对应的游离基团的物质。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5. [/font][font=宋体]如果待标记物为分子量较小的物质,在纯化过程中注意超滤管、脱盐柱、透析袋的截留分子量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6. [/font][font=宋体]标记反应后的体积量至少在[/font][font=Calibri]100[/font][font=宋体]μ[/font][font=Calibri]L[/font][font=宋体]以上,以达到纯化时的最小上样量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7. [/font][font=宋体]标记反应完成后(氨基偶联体系),可在体系中加入适量的含游离含氨基小分子物质,中和游离的生物素活化试剂,提高纯化效率,减少后续反应的假阳性和高背景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8. [/font][font=宋体]纯化后的标记蛋白可采用[/font][font=Calibri]A280[/font][font=宋体]或[/font][font=Calibri]BCA[/font][font=宋体]法测定蛋白含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]9. [/font][font=宋体]标记纯化后的蛋白可根据蛋白性质进行分装长期保存,减少冻融次数。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多抗体标记详情可以参考:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/resource/antibody-technical/antibody-conjugation[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

  • 欧洲食品纳米成分标记将写入立法

    欧洲食品纳米成分标记将写入立法来源: WTO检验检疫信息网 时间:2011-06-29 6 月25 日消息,欧洲议会上周通过一条有关食品标签纳米材料成分标记的临时协定。条约要求所有以纳米材料形式存在的食品成分必须清楚列入产品成分之内,并在材料前加标记号。 这条欧盟成员国协议将 engineered nanomaterial (纳米材料)定义为: “任何有意生产的一边或多变维度尺寸在 100纳米左右的物质,或由离散的功能部件组成,不论内部还是表面离散,具有约 100 纳米的一边或多变维度尺寸,包括100纳米尺寸以上但保留纳米级特征属性的的结构、团聚体或聚集物。 ” 协议认定,纳米级特征属性包含以下两种情况: • 涉及特定大表面积材料的属性 • 特定理化属性,有别于非纳米形式的相同材料 该协议将在 7 月通过欧洲议会全体会议投票表决,并在随后正式通过欧盟成员国同意。如果该临时协议最后通过立法,食品生产企业可获得 3 年缓冲期时间以适应新法。

  • 【分享】荧光探针标记样品的过程及注意事项

    [b]对细胞进行荧光标记后,有时会出现影响定量实验的三种情况。[/b]一是所有细胞都能标记上荧光,但样品荧光强度过高,甚至饱和。克服方法是降低标记细胞时胞外荧光探针的浓度;或改变标记样品的条件,例如减少标记探针与样品的反应时间。二是出现“环岛效应”或“边缘效应”,表现为即连成片的细胞最外环的边缘的细胞荧光强度明显高于被包围在中间的细胞的荧光强度。克服办法是①在不影响实验的情况下,尽量减低细胞种植密度;②由于染料浓度过高时,更容易产生边缘效应;③适当延长标记时间,以使染料在细胞间达到充分的平衡时间;④染色后,上机前要进行充分洗涤附着探针(不需要洗涤的探针除外

  • 欧洲食品纳米成分标记将写入立法

    欧洲食品纳米成分标记将写入立法来源: WTO 检验检疫信息网 时间:2011-06-296 月25 日消息,欧洲议会上周通过一条有关食品标签纳米材料成分标记的临时协定。条约要求所有以纳米材料形式存在的食品成分必须清楚列入产品成分之内,并在材料前加标记号。这条欧盟成员国协议将engineered nanomaterial (纳米材料)定义为:“任何有意生产的一边或多变维度尺寸在100纳米左右的物质,或由离散的功能部件组成,不论内部还是表面离散,具有约100 纳米的一边或多变维度尺寸,包括100 纳米尺寸以上但保留纳米级特征属性的的结构、团聚体或聚集物。”协议认定,纳米级特征属性包含以下两种情况:• 涉及特定大表面积材料的属性• 特定理化属性,有别于非纳米形式的相同材料该协议将在7 月通过欧洲议会全体会议投票表决,并在随后正式通过欧盟成员国同意。如果该临时协议最后通过立法,食品生产企业可获得3 年缓冲期时间以适应新法。

  • 荧光标记抗体:原理、应用与进展

    [b][font=宋体]一、引言[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是生物学和医学领域中常用的可视化技术,其中荧光标记抗体凭借其独特的应用优势,在许多研究方向中发挥了重要作用。本文将详细介绍荧光标记抗体的原理、应用及最新进展。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]二、荧光标记抗体的原理[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]荧光标记技术是一种利用荧光物质对目标进行标记,通过特定波长的光激发后发出荧光,从而实现可视化检测的方法。荧光标记抗体则是将荧光物质与特异性抗体结合,形成荧光标记抗体,用于对目标抗原进行特异性结合和荧光标记。常见的荧光物质有荧光素、量子点、上转换纳米颗粒等。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体]三、荧光标记抗体的应用[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫分析:荧光标记抗体在免疫分析中具有广泛的应用,如酶联免疫吸附试验([/font][font=Calibri]ELISA[/font][font=宋体])、流式细胞术、免疫荧光染色等。通过荧光标记抗体与抗原的特异性结合,可以实现对目标抗原的高灵敏度、高特异性检测。例如,利用荧光标记抗体检测肿瘤标志物,有助于肿瘤的早期诊断和治疗监测。[/font][/font][font=宋体]细胞成像:荧光标记抗体在细胞成像中具有重要作用,可以用于观察细胞内特定抗原的表达情况,了解细胞的功能和行为。例如,利用荧光标记抗体对细胞膜抗原进行标记,可以观察细胞迁移、侵袭等行为。[/font][font=宋体]组织切片染色:荧光标记抗体也可用于组织切片染色,对病理组织中的特定抗原进行标记,有助于病理诊断和组织学研究。例如,利用荧光标记抗体对肿瘤组织进行染色,有助于肿瘤类型的鉴别和恶性程度的评估。[/font][font=宋体]药物筛选:荧光标记抗体在药物筛选中具有重要应用,可以用于药物作用靶点的检测和药物作用机制的研究。例如,利用荧光标记抗体对药物作用靶点进行标记,可以观察药物对靶点的影响,评估药物的疗效和安全性。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]四、展望[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]随着荧光标记技术的不断发展,荧光标记抗体在灵敏度、特异性和可视化效果等方面得到了显著提升。同时,新型荧光物质的开发和制备也为荧光标记抗体的应用提供了更多选择。未来,随着荧光标记技术的进一步优化和多色荧光标记技术的发展,荧光标记抗体将在更多领域发挥重要作用,为生物学、医学和其他相关领域的研究提供有力支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光检测服务[/b][/url]:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

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