发色底物

酶底物法相比多管发酵法、滤膜法的优势特点优势特点：酶底物法为GB5750-2006收录的用于大肠杆菌检测标准方法，酶底物法是目前水中大肠杆菌检测的最先进方法，目前以其方便快捷，假阳性低，适用大量样品快速检测等优点正逐步被国内检测部门所认可。相对于多管发酵和滤膜法，酶底物法检测步骤大大减少，而且对实验环境要求不高，检测时间可减少到24小时，在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景，可及时检测，预防，最大限度的减少重大公共安全事故的发生几率。 以GB5750-2006中总大肠菌群测定为例，比较三种方法，如表所示。 多管发酵法 滤膜法 酶底物法 检测时间 3-5天 2-3天 1天 假阳性 — 23-26% 1% 检测范围 2-1600MPN/100mL — 1-2419.6MPN/100mL 环境要求 洁净实验室 洁净实验室 无特殊要求 实验人员要求 有专业基础、操作熟练 有专业基础、操作熟练 简单培训即可 定量标准 MPN表 直接计数 MPN表 定量方法 15管 菌落计数 51或97孔板

酶底物法中用到的科立得试剂，方便携带外出，我想知道科立得一旦加入可以保存多久呢？如果说路程较远，当天来不及回来，我可以放在车载培养箱中，但是回来后还要倒入97孔定量板中，想知道科立得粉末保存时间有没有限制。

环境水体粪大肠菌群用酶底物法和纸片法测量，结果相差较大。请问有比较过的吗？原因是什么？

不知道各位现在使用的是什么方法检测大肠总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌，还是传统的多管发酵还是滤膜法呢，下面我为大家推荐一种新的方法——酶底物法。水质大肠菌群酶底物法检测系统：由LK-2014程控定量封口机、51或97孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物检测试剂四部分组成。检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。该检测方法采用大肠杆菌产生β-半乳糖苷酶分解色源底物-ONPG(Ortho-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside) 使培养液呈黄色。大肠埃希氏菌产生β-葡萄糖醛酸酶（β-glucuronidase）分解MUG（4 - methyl-umbelliferyl-β-glucuronide）使培养液在波长366 nm 紫外光下产生荧光的原理,来定性定量水中总大肠菌群、粪大肠菌群（耐热大肠菌群）及大肠埃希氏菌。序号指标名称技术指标1名称程控定量封口机2用途用于GB5750-2006酶底物法检测水质总大肠菌群、大肠埃希氏菌，粪大肠菌群3可靠性无漏液,无破孔4稳定性可检测40,000个样品以上，使用寿命大于5年5方便性开/关及退格键有定量数显窗口,有保洁窗口6快捷性无需无菌室,24h检测水中总大肠菌群\大肠埃希氏菌\耐热大肠菌群7重量≤16kg8尺寸39cm 长 X 27cm 宽 X 30cm 高9预热时间≤14min10噪音50dba11外罩温度40oC12封口速度 13工作电压AC 220V±10％,50HZ14封口速度51孔、97孔定量检测盘封口时间≤12秒/个15工作环境温度-10oC-50oC16检测范围配合51孔定量检测盘检测范围0-200MPN/100ml(水样不稀释）配合97孔定量检测盘检测范围0-2419MPN/100ml(水样不稀释） 该检测方法是国际上发达国家普遍采用的检测方法,相比我国标准的检测方法,如多管发酵及滤膜法具简便快捷，其选择性培养基具有抑制杂菌的作用，假阳性低，定量准确。由于该方法的方便快速，在实验室日常检测中能提高效率，缩短检测时间，在应急监测中能及时报出数据，避免造成大的公共安全事故。

粪大肠菌群，需用酶底物法的标准，国标、行标或是ＥＰＡ均可

多管发酵法的话直接灭菌就可以了，但是这个纸片法和酶底物法做完过后废弃物都有塑料的，说实话原来就直接扔了，但今天领导提到以后要考虑无害化处理，傻眼中。 大家一般怎么处理呢？难道当医废一样送处理中心？有没有什么办法可以自己做无害化处理呢？纸片法的话用消毒液还有可能，酶底物法那个板子是密封的，怎么搞定呢？

请问各位专业人士,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]测定金属元素时用的是哪些基底物质,我用的是干湿法:用硝酸溶解各种合金,滴定至50ml,然后用0.5g锌溶于盐酸定容至1000ml做为基底溶液,因为都是酸性溶液所以要排除相同酸性环境影响,想问下用其它金属元素做为基底物如Cu等,对它的含量有何明确要求,个人认为是定性的,重量根据自己需要来加入,另外如果不加基底物直接用蒸馏水是否对所测结果有影响

在我们国内免疫学的发展主要经过了三个阶段：放射免疫法（RIA）已经处于衰退期，仍普遍用于县级以上医院，试剂系列化；酶联免疫发（ELISA）普遍用于临床机构，产品成熟，试剂尚未系列化（运用色原ADPS，TOOS，MAOS等同过氧化氢偶联的方法就是属于此类）；化学发光免疫法（CLIA）这个是比较先进的方法，个别较大医院应用，在国外已经比较成熟，但国内尚属于导入期或成长期，主要依赖进口。这里重点介绍下化学发光免疫中的发光底物试剂

想求教各位专家，酶底物法最后得出的结果是和表中数值比对，得出结果是MPN/100ml，但国标上要求的是个/L，这样需要乘10换算成个/L么？这样乘后结果肯定就超过国标限值了，请高手帮忙解决下我的疑惑，谢谢了

小编为你解忧，采用酶底物法对地表水水样进行不同倍数的稀释后进行培养检测,观察地表水结果变化。结果表明:地表水水样稀释倍数越小,结果越准确。采用酶底物法测定地表水中的粪大肠菌群具有快速、简便的特点,准确掌握水样稀释倍数对测定结果就越准确。【工作原理】加入含有总大肠菌群细菌的水样，放入程控定量封口机中，目标细菌在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃培养，总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMedium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色；同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG，产生特征性荧光。同样原理，耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG，使培养基呈现黄色。程控定量封口机9900Z SEALER PLUS:智能程控定量封口机配合51孔定量盘或97孔定量盘提供简单、快速、准确的定量检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪（耐热）大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案。捷骋牌51孔定量盘和97孔定量盘是基于传统方法最大可能数 (MPN) 统计模型而设计的半自动定量方法。· 通过9900Z sealer PLUS程控定量封口机自动将样品／试剂混合液分配到独立孔中。· 培养结束后，阳性孔数可以转化为 MPN 值。· 51孔定量盘可检测每 100 mL 水样中 1-200MPN 值。· 97孔定量盘可检测每 100 mL 水样中1-2,419 MPN 值。· 整个检测过程手工操作时间小于 1 分钟。【使用方法】定性测试：第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解，36℃培养24h；第二步、结果判读 无色=阴性 黄色=总大肠菌群阳性 黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色为阳性定量检测第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解；第二步、倒入51孔定量检测盘（定量孔板）或97孔定量检测盘（定量孔板）中；第三步、用程控定量封口机对定量检测盘（定量孔板）进行封装，36 ℃培养24h；第四步、51孔定量检测盘（定量孔板）结果判读： 无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数。97孔定量检测盘（定量孔板）结果判读无色=阴性 黄色格子=总大肠菌群阳性黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性查对照MPN表计数注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数

环境标准《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》已编制完成，目前开始征求意见，附件是该标准的征求意见稿。

我要较快的方法检测发酵产生的多酚氧化酶的酶活,底物也是复合型的茶多酚类物质,有较好的思路吗?

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现将该版面第五届原创大赛文章汇总如下，希望有更多的版友发帖，分享经验，参加第五届原创大赛【第五届原创】电子厂绿色供应链管理方法 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120801/4173573/【第五届原创】CPSC新法规解读 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120802/4175299/【第五届原创】由日本奶粉想到的... http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120811/4187878/【第五届原创】 用EDX分析墨水中的铬（CR）http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120905/4226510/【第五届原创】生活中的仪器分析----UV测试油性笔中的六价铬 http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120913/4240201/【第五届原创】新谈：有害物质管理中XRF的作用http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121004/4277986/【第五届原创】细节真的很重要http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20120618/4101938/【第五届原创】记一次第三方有害物质管理审核http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121129/4398592/【第五届原创】送外测新注意事项，你知道了吗？http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121212/4429938/

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据我所知目前只有多管发酵法和膜过滤法两种国标，上一段时间疾控南京会上美国爱德士公司提出一种新的酶底物法，听说很快就会出来的，大家可否有相关消息？

求电子版NY/T 1665-2008 畜禽饮用水中总大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法。谢谢！

为什么大多数酶联免疫试剂盒中的底物缓冲液和底物液不直接放在一起？一般是先加底物缓冲液再加底物液，再震荡混匀后孵育。可是原因是什么呢？缓冲液中含有过氧化物，用于底物液中显色剂的氧化，如果提前放在一起会导致变色反应，很多企业还没研制出可以阻断缓慢氧化的稳定剂，所以只好分开盛放。一些医院检验科为了图方便，提前将两种液体混合，造成的数据错误，在投诉中占有很大比例。一般敞口盛放的底物液放置8个小时后就应该开新瓶了，因为空气中的氧气以及实验室中的消毒水气味也会造成底物液（注意这里说的仅仅是底物液，而非两种的混合液）变色。

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人生中最吓人的五句话：1 .小时候，妈妈说：狼来了。2.上学时，同学说：老师来了。3.工作后，同事说：老板来了。4.结婚后，朋友说：你老婆来了。第五句话是什么，大家发挥一下吧。

[align=left]为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护生态环境，保障人体健康，规范生态环境监测工作，现批准《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》等五项标准为国家环境保护标准，并予发布。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　标准名称、编号如下。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　一、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688590.shtml]《水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法》（HJ 347.1-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　二、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688592.shtml]《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法》（HJ 347.2-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　三、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688594.shtml]《水质 细菌总数的测定 平皿计数法》（HJ 1000-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　四、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688595.shtml]《水质 总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠埃希氏菌的测定 酶底物法》（HJ 1001-2018）；[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　五、[url=http://kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/bzwb/jcffbz/201901/t20190104_688596.shtml]《水质 丁基黄原酸的测定 液相色谱-三重四极杆串联质谱法》（HJ 1002-2018）。[/url][/align][color=#000000][/color][align=left]　　以上标准自2019年6月1日起实施，由中国环境出版集团出版，标准内容可在生态环境部网站（kjs.mee.gov.cn/hjbhbz/）查询。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　自以上标准实施之日起，《水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法（试行）》（HJ/T 347-2007）废止。[/align][color=#000000][/color][align=left]　　特此公告。[/align][color=#000000][/color][align=right]　　生态环境部[/align][color=#000000][/color][align=right]　　2018年12月26日[/align]

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