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中和琼脂

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  • 西安交通大学第二附属医院314.00万元采购样品前处理
    html,body{-webkit-user-select:text }*{padding:0 margin:0 }.web-box{width:100% text-align:center }.wenshang{margin:0auto width:80% text-align:center padding:20px10px010px }.wenshangh2{display:block color:#900 text-align:center padding-bottom:10px border-bottom:1pxdashed#ccc font-size:16px }.sitea{text-decoration:none }.content-box{text-align:left margin:0auto width:80% margin-top:25px text-indent:2em font-size:14px line-height:25px }.biaoge{margin:0auto /*width:643px */width:100% margin-top:25px }.table_content{border-top:1pxsolid#e0e0e0 border-left:1pxsolid#e0e0e0 font-family:Arial /*width:643px */width:100% margin-top:10px margin-left:15px }.table_contenttrtd{line-height:29px }.table_content.bg{background-color:#f6f6f6 }.table_contenttrtd{border-right:1pxsolid#e0e0e0 border-bottom:1pxsolid#e0e0e0 }.table-left{text-align:left padding-left:20px }详细信息西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次公开招标公告陕西省-西安市-新城区状态:公告更新时间:2022-05-14招标公告公示西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次公开招标公告发布时间:2022-05-1415:44:32西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次公开招标公告项目概况西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次的潜在投标人应在线上获取招标文件,并于2022年6月7日09点30分(北京时间)前递交投标文件。一、项目基本情况项目编号:ZDZC2022030404项目名称:西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次采购需求:本次采购标的标段划分如下:标段号产品组合名称产品名称检测方法使用科室采购预算(万元/年)拟中标家数备注1标段全自动细菌鉴定与药敏检测试剂(进口)革兰氏阴性细菌鉴定卡全自动细菌鉴定与药敏1医学检验科2501家革兰氏阳性细菌鉴定卡酵母菌鉴定卡奈瑟菌、嗜血杆菌鉴定卡革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN09革兰氏阳性细菌药敏卡片肺炎链球菌药敏卡片革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN13VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN16VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-XN04VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN67一次性悬浮液管VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-N334VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-N335VITEK2革兰氏阳性细菌药敏卡片AST-P639β-内酰胺酶快速检测试剂Genbag厌氧产气袋厌氧菌及棒状杆菌鉴定卡片ANC样本稀释液VITEK-COMPACT比浊管细菌质谱鉴定检测试剂(进口)VITEKMS-DS样品板飞行时间质谱细菌鉴定仪质谱样品处理基质溶液质谱样品预处理溶液全自动染色仪检测试剂(进口)革兰染色液(丙酮番红)全自动革兰染色仪革兰染色液(番红)革兰染色液(丙酮品红)革兰染色液(品红)革兰染色液(碘液)革兰染色液(结晶紫)喷嘴清洗液全自动血培养仪检测试剂(进口)需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFA全自动血培养仪1厌氧微生物培养瓶FN需氧微生物培养瓶SA厌氧和兼性厌氧微生物培养瓶SN需氧和兼性厌氧微生物培养瓶PF厌氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFNPlus需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFAPlus需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTPFPlus半自动鉴定及药敏检测试剂(进口)ID32GN革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法)半自动手工鉴定及药敏ID32C酵母菌鉴定试剂盒(比色法)RAPIDID32A厌氧菌鉴定试剂盒(比色法)ID32E肠杆菌科和其它非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法ID32STAPH葡萄球菌鉴定试剂盒(比色法)RAPIDID32STREP链球菌快速鉴定试剂盒(比色法)FUNGUSⅢ酵母样真菌药敏试剂盒(微量稀释法)ATBENTEROC5肠球菌药敏试剂盒(比色法)ATBG-5肠细菌药敏试剂盒(比色法)ATBSTAPH5葡萄球菌药敏试剂盒(比色法)ATBPSE5假单胞菌和非发酵菌药敏试剂盒(比色法)ATBHAEMO嗜血杆菌和布兰汉球菌药敏试剂盒(比色法)肠杆菌药敏试剂盒(比色法)非发酵菌药敏试剂盒(比色法)ATBSTREP5链球菌和肺炎球菌药敏试剂盒(比色法)NaCl0.85#%悬浮液悬浮液(3ml)(100支/盒)ATBMedium肉汤培养基FB(坚固兰)(FASTBLUEBB)JAMES吲哚试剂麦氏比浊管McFarlandStandardAPIMINERALOIL矿物油NIN马尿酸NIT1+NIT2硝酸盐试剂丙酮酸反应检测液(VP1+VP2)STERILEATB无菌加样吸头BCP二甲苯试剂EHR色氨酸试剂XYL溴甲酚紫试剂3标段G实验+GM实验配套试剂及碳青霉烯酶检测试剂、耗材革兰阴性脂多糖检测试剂盒(光度法)显色法551家真菌(1-3)D葡聚糖检测试剂盒曲霉菌半乳甘露聚糖检测试剂盒化学发光法免疫显色试剂(NDM型碳青霉烯酶检测卡)胶体金法免疫显色试剂(KPC型碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(IMP-4型碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(VIM型碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(OXA-23碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(OXA-48碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(NDM、KPC、IMP-4型碳青霉烯酶检测卡)烟曲霉菌硫氧还蛋白还原酶IgG抗体检测试剂盒酶联免疫法念珠菌烯醇化酶IgG抗体检测试剂盒一次性使用小吸头一次性使用大吸头一次性使用真空采血管一次性无热源专用离心管(EP管)一次性使用吸头(IGL-800专用)一次性专用平底试管(IGL-800专用)一次性使用无热源混合瓶(IGL-800专用)一次性接种环4标段进口药敏纸片药敏纸片K-B法(进口)通用药敏实验纸片纸片扩散法31家CT0425B环丙沙星药敏实验纸片CIP5ug头孢吡肟药敏实验纸片(扩散法)CT0043B青霉素药敏实验纸片(扩散法)P10ugCT0647B替考拉宁药敏实验纸片(扩散法)CT0725B哌拉西林/他唑巴坦药敏实验纸片(扩散法)CT0119B头孢西丁药敏实验纸片(扩散法)FOX30ugCT1841B替加环素药敏实验纸片(扩散法)CT0166B头孢噻肟药敏实验纸片(扩散法)CTX30ugCT0030B米诺环素药敏实验纸片(扩散法)MH30ugCT0013B氯霉素药敏实验纸片(扩散法)C30ugCT0064B克林霉素药敏实验纸片(扩散法)DA2ugCT0020B红霉素药敏实验纸片(扩散法)E15ugCT0107B阿米卡星药敏实验纸片(扩散法)AK30ugCT0774B美罗培能药敏实验纸片(扩散法)CT0520B氨苄西林/舒巴坦药敏实验纸片(扩散法)SAM20ugCT1650B利奈唑胺药敏实验纸片(扩散法)LZD30ug头孢他啶药敏实验纸片(扩散法)磷霉素/氨丁三醇药敏实验纸片(扩散法)FOT20ugCT0058B万古霉素药敏实验纸片(扩散法)VA30ugCT0264B氨曲南药敏实验纸片(扩散法)ATM30ugCT0003B氨苄西林药敏实验纸片(扩散法)AMP10ugCT0054B四环素药敏实验纸片(扩散法)TE30ugCT0127B头孢呋辛钠药敏实验纸片(扩散法)CXM30ugCT0159B苯唑西林药敏实验纸片(扩散法)CT0417B头孢曲松药敏实验纸片(扩散法)CRO30ugK6101奥普托欣纸片5ugCT1727B头孢哌酮/舒巴坦药敏实验纸片(扩散法)SCF105ugCT0052B磺胺甲恶唑/甲氧苄啶药敏实验纸片(扩散法)SXTCT1587B左氧氟沙星药敏实验纸片(扩散法)LEV5ugCT0024B庆大霉素药敏实验纸片(扩散法)CN10ugCT0011B头孢唑啉药敏实验纸片(扩散法)CT0455B亚胺培南药敏实验纸片(扩散法)IPM10ug5标段国产药敏纸品+基础培养基微生物肉汤稀释法MIC+其他配套试剂通用药敏试剂(8浓度)细菌药敏试剂(微量肉汤稀释法)31家通用药敏试剂(12浓度)头孢噻肟药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢曲松药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢哌酮药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢他啶药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢呋辛药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢唑啉药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢西丁药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢吡肟药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)哌拉西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)苯唑西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氨苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)羧苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)替卡西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)左氧沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)环丙沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氧氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)洛美沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)加替沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氟罗沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)诺氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)庆大霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)司帕沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)多西环素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)米诺环素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)克拉霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)万古霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)阿奇霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)卡那霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)克林霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)红霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)青霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氯霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)利奈唑胺药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)链霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)四环素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)利福平药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)阿莫西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)替卡西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢他啶/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢噻肟/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢哌酮/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氨苄西林/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)哌拉西林/他唑巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)复方新诺明药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)丁胺卡那药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)呋喃妥因药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氨曲南药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)美罗培南药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)妥布霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)替考拉宁药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢克罗药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢噻肟药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢曲松药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢哌酮药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢他啶药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢呋辛药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢唑啉药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢西丁药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢吡肟药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)哌拉西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)苯唑西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氨苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)羧苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)替卡西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)左氧沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)环丙沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氧氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)洛美沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)加替沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氟罗沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)诺氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)庆大霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)司帕沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)多西环素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)米诺环素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)克拉霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)阿奇霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)卡那霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)克林霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)红霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)青霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氯霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)利奈唑胺药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)链霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)四环素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)利福平药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)阿莫西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)替卡西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢他啶/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢噻肟/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢哌酮/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氨苄西林/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)哌拉西林/他唑巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)复方新诺明药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)丁胺卡那药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)呋喃妥因药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氨曲南药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)亚胺培南药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)美罗培南药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)妥布霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)替考拉宁药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢克罗药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)肠杆菌科细菌药敏试剂盒链球菌药敏试剂盒替加环素药敏试剂MIC多粘菌素B药敏试剂MIC嗜血杆菌药敏试剂盒MIC少见菌药敏试剂盒MIC葡萄球菌药敏试剂盒MIC肠球菌药敏试剂盒MIC万古霉素药敏MIC亚胺培南药敏MIC头孢他啶/阿维巴坦试条药敏接种培养液(CAMHB)真菌药敏试纸KBKB法真菌药敏试纸条ETESTETEST法真菌药敏试剂MIC微量肉汤稀释法非发酵菌药敏试剂盒MIC标准菌株/质控菌株干粉培养基(SS、XLD、麦康凯、MH、厌氧血、嗜血)嗜热芽孢杆菌菌片结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ和IL-2)联合检测ELISA法药敏纸片+手工鉴定配套试剂(国产)细菌药敏纸片(各类抗菌素或抗真菌)KB法国产微生物药敏试纸(扩散法法)卡他莫拉菌检测细菌生化鉴别试剂(氧化酶纸片)呋喃唑酮纸片杆菌肽纸片奥扑拓新纸片多粘菌素BV因子鉴定X因子鉴定X+V因子鉴定氨苄西林(氨苄青霉素)纸片苯唑青霉素纸片哌拉西林纸片头孢呋辛(西力欣.头孢呋肟)纸片头孢唑啉纸片头孢哌酮(先锋必)纸片头孢曲松纸片头孢噻肟纸片头孢他啶纸片利福平纸片链霉素纸片庆大霉素纸片四环素纸片氯霉素纸片红霉素纸片复方新诺明SMZ/TMP纸片万古霉素纸片环丙沙星纸片洛美沙星纸片克拉霉素纸片左氧氟沙星纸片磷霉素纸片氧氟沙星纸片克林霉素纸片阿莫西林/棒酸纸片丁胺卡那纸片头孢哌酮/舒巴坦纸片(舒普深)诺氟沙星纸片氟罗沙星纸片氨曲南纸片亚胺培南纸片多西环素纸片司帕沙星纸片氨苄西林/舒巴坦纸片阿奇霉素纸片米诺环素纸片美罗培南纸片头孢吡肟纸片头孢西丁纸片哌拉西林/他唑巴坦纸片替卡西林/棒酸纸片呋喃妥因纸片妥布霉素纸片替卡西林纸片替考拉宁纸片头孢唑肟纸片头孢噻吩纸片奈替米星纸片Optochin纸片杆菌肽纸片新生霉素纸片呋喃唑酮纸片多粘菌素B纸片林可霉素纸片阿莫西林纸片罗红霉素纸片头孢美唑纸片交沙霉素纸片头孢克罗纸片头孢克肟纸片美洛西林纸片利奈唑胺纸片莫西沙星纸片头孢硫脒纸片头孢拉定纸片头孢氨苄纸片头孢匹安纸片拉氧头孢纸片头孢匹罗纸片阿洛西林纸片壮观霉素纸片夫西地酸纸片萘啶酸纸片头孢布烯纸片替加环素纸片厄他培南纸片头孢孟多纸片头孢丙烯纸片麦迪霉素纸片X因子鉴定纸片头孢他啶/棒酸纸片头孢噻肟/棒酸纸片庆大霉素纸片羧苄青霉素(羧苄西林)纸片加替沙星纸片卡那霉素纸片甲氧苄啶纸片头孢替坦纸片新霉素纸片土霉素纸片恩诺沙星纸片氟苯尼考纸片氨苄西林/棒酸纸片呋喃唑酮(痢特灵)纸片通用药敏纸片ETEST药敏(国产)康泰通用药敏试剂条细菌药敏试条(E试验法)青霉素药敏试剂条头孢呋辛药敏试条庆大霉素药敏试条头孢吡肟药敏试条红霉素药敏试条头孢唑啉药敏试条左氟沙星药敏试条诺氟沙星药敏试条苯唑西林药敏试条利奈唑胺药敏试条克林霉素药敏试条阿莫西林/棒酸药敏试条头孢他啶药敏试条环丙沙星药敏试条头孢曲松药敏试条头孢噻肟药敏试条克拉霉素药敏试条头孢哌酮/舒巴坦药敏试条头孢哌酮药敏试条洛美沙星药敏试条氧氟沙星药敏试条万古霉素药敏试条亚胺培南药敏试条美罗培南药敏试条氯霉素药敏试条氨苄西林药敏试条丁胺卡那药敏试条氨曲南药敏试条哌拉西林药敏试条司帕沙星药敏试条头孢他啶/棒酸药敏试条利福平药敏试条羧苄西林药敏试条氟罗沙星药敏试条加替沙星药敏试条米诺环素药敏试条卡那霉素药敏试条多西环素药敏试条替卡西林药敏试条四环素药敏试条妥布霉素药敏试条替考拉宁药敏试条呋喃妥因药敏试条阿奇霉素药敏试条头孢西丁药敏试条复方新诺明药敏试条哌拉西林/他唑巴坦药敏试条头孢噻肟/棒酸药敏试条替卡西林/棒酸药敏试条氨苄西林/舒巴坦药敏试条两性霉素B伊曲康唑5-氟胞嘧啶酮康唑氟康唑伏立康唑米卡芬净泊沙康唑阿尼芬净急诊粪便常规检测样本采集管(包含稀释液、清洗液等)胶体金法粪便隐血(FOB)多水平非定值质控品便隐血(FOB)检测试剂6标段ETEST+染液+基础培养基ETEST药敏(国产)安图国产ETEST纸条(各类抗菌素)细菌药敏试条(E试验法)31家两性霉素B(E试验品)氟康唑(E试验品)伏立康唑(E试验品)阿米卡星药敏条阿莫西林药敏条氨苄西林药敏条氨曲南药药敏条苯唑西林药敏条红霉素药敏条(E试验法)环丙沙星药敏条(E试验法)卡泊芬净药敏条(E试验法)克林霉素药敏条(E试验法)利奈唑胺药敏条(E试验法)氯霉素药敏条(E试验法)美罗培南药敏条(E试验法)诺氟沙星药敏条(E试验法)青霉素药敏条(E试验法)庆大霉毒药敏条(E试验法)四环素药敏条(E试验法)头孢呋辛药敏条(E试验法)头孢哌酮舒巴坦药敏条(E试验法)头孢曲松药敏条(E试验法)头孢他啶药敏条(E试验法)头孢唑林药敏条(E试验法)万古霉素药敏条(E试验法)亚胺培南药敏条(E试验法)左氧氟沙星药敏条(E试验法)头孢吡肟药敏条(E试验法)头孢噻肟药敏条(E试验法)甲氧苄啶-磺胺甲恶唑药敏条(E试验法)米诺环素药敏条(E试验法)阿奇霉素药敏条(E试验法)微生物染液等革兰染色液(4×250ml)手工试剂革兰染色液(4×100ml)抗酸染色液(4×250ml)抗酸染色液(3×100ml)鞭毛染色液荚膜染色液芽孢染色液异染颗粒染色液瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)(2×250ml)瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)(2×100ml)瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)(4×20ml)瑞氏-吉姆萨染色液网织红细胞染色液(2×100ml)网织红细胞染色液(4×20ml)过氧化酶(POX)染色液铁染色液精子染色液精子稀释液妇科白带涂片染色液苏木素-伊红染色液I苏木素-伊红染色液II(H-E单一)巴氏染色液Ⅰ巴氏染色液Ⅱ巴氏染色液(巴氏试剂盒)快速革兰氏染色液革兰氏染液-快速法-碘溶液革兰氏染液-快速法-脱色液革兰氏染液-快速法-沙黄溶液革兰氏染液-快速法-龙胆紫液新型隐球菌染色液六胺银染色液乳酸酚棉兰染液真菌免疫荧光显色试剂(II型)微生物基础培养基等手工试剂梅毒螺旋体抗体检测试剂盒(凝集法)微生物基础培养基等手工试剂麦康凯琼脂平板乳酸棉酚蓝染液六胺银染液真菌荧光染液(一步法)抗酸荧光染色液(金胺O法)弱抗酸染色液无菌病毒运输液(用于甲流)志贺氏菌属诊断血清(50种)志贺氏菌属诊断血清(22种)沙门氏菌属诊断血清(60种)沙门氏菌属诊断血清(30种)出血性大肠埃希菌O157诊断血清(供科研用)触酶试剂氧化酶试验试剂MH干粉沙保罗培养基干粉XLD培养基干粉营养肉汤干粉R2A培养基干粉变色硅胶含醛类消毒剂中和培养基(9ml)含酚、醇类消毒剂中和培养基(9ml)含氯、碘类消毒剂中和培养基(9ml)含表面活性剂类消毒剂中和培养基(9ml)含醛类消毒剂中和培养基(50ml)含酚、醇类消毒剂中和培养基(50ml)含氯、碘类消毒剂中和培养基(50ml)含表面活性剂类消毒剂中和培养基(50ml)苛养菌药敏琼脂平板血、肠道菌分隔琼脂平板沙保罗琼脂平板营养肉汤培养基(液体)营养琼脂培养基尿道菌显色平板伊红美兰琼脂平板中国蓝琼脂平板物表测试平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌(麦康凯)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌(伊红美兰)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌(中国蓝)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌(SS)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌分隔琼脂平板GBS运送培养基卵黄琼脂培养基环丝氨酸-头孢西丁-果糖琼脂培养基厌氧血琼脂平板/厌氧苯乙酸琼脂培养基厌氧琼脂培养基庖肉培养基巯基乙酸肉汤培养基耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌检测70cm艰难梭菌显色平板70cm不动杆菌显色培养基支原体培养鉴定计数药敏试剂盒(30孔,12种药敏)葡萄糖肉汤培养基磷酸盐缓冲液(PBSpH7.2)SBG增菌液冷冻管冻存管盒液体菌种保存管复方中和增菌培养基(带棉签)注:有名“物表采样管”含复方中和剂的0.04mol/L磷酸盐缓冲液R2A琼脂培养基(干粉)大豆酪蛋白琼脂培养基(干粉)TGE琼脂平板胰蛋白胨大豆培养基(卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆培养基)碱性蛋白胨水培养基Amies采样运送拭子(Amies采样运送培养基含拭子)TSA接触平板样本稀释液中和洗脱液复合中和洗脱液(9ml)复合中和洗脱液(5ml)厌氧指示剂SS琼脂平板MH琼脂培养基哥伦比亚血琼脂平板巧克力琼脂培养基B族链球菌平板专用油镜油含珠菌种保存管(国产)(5颗)含珠菌种保存管(国产)(25颗)病毒采样管(无菌病毒运输液)植绒采样拭子磁珠菌种保存液营养肉汤培养基R2A琼脂培养基(平板)大豆酪蛋白琼脂培养基(平板)半固体琼脂Amies采样运送拭子Cary-blair运送培养基stuart运送培养基弯曲杆菌显色培养基尿培养筛选显色平板沙门氏菌筛选显色平板大肠杆菌显色平板金黄色葡萄球菌显色平板李斯特菌显色平板弧菌显色平板霉菌显色平板O157培养基分枝杆菌菌种保存管含珠菌种保存管(进口)(25颗)脱脂奶粉血琼脂平板念珠菌显色平板耐药菌三联检显色平板真菌快速培养鉴定药敏试剂盒缓冲液(碳青霉烯酶)一次性封闭真菌形态学观察培养基多粘菌素B纸片霍乱弧菌诊断血清01群、0139脑心浸液琼脂GC琼脂平板乙腈甲酸头孢硝噻吩纸片备注:各供应商可选择参投一个或多个标段,但必须对所投标段内全部项目内容进行投标报价,不得缺项、漏项。预算金额:314万元/年。资金性质:自筹资金。项目用途:医用。合同履行期限:2年二、供应商资格要求:1、基本资格条件:符合《政府采购法》第二十二条规定的供应商条件;1.1、提供在中华人民共和国境内注册的营业执照(或事业单位法人证书,或社会团体法人登记证书,或执业许可证)、组织机构代码证和税务登记证复印件【如已办理了多证合一,则仅需提供合证后的营业执照】,如供应商为自然人的需提供自然人身份证明。1.2、提供2020年度的财务报表(至少包括资产负债表、现金流量表和利润表)或具有财务审计资质的单位出具的2020年度财务会计报告或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明(附开户许可证);2021年以后新成立企业提供成立之日至开标前一月的财务报表(至少包括资产负债表、现金流量表和利润表)或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明(附开户许可证)。1.3、提供2021年以来至少一个月的纳税证明或完税证明(提供增值税、企业所得税至少一种),纳税证明或完税证明上应有代收机构或税务机关的公章或业务专用章。依法免税的供应商应提供相关文件证明。1.4、提供2021年以来至少一个月的社会保障资金缴存单据或社保机构开具的社会保险参保缴费情况证明。依法不需要缴纳社会保障资金的供应商应提供相关文件证明。1.5、提供履行合同所必需的设备和专业技术能力的书面声明。1.6、提供参加政府采购活动前3年内在经营活动中没有重大违法记录的书面声明。2、落实政府采购政策需满足的资格要求:本项目非专门面向中小企业采购。3、特定资格条件:3.1、供应商应授权合法的人员参加投标全过程,其中法定代表人直接参加投标的,须出具法人身份证,并与营业执照上信息一致;法定代表人授权代表参加投标的,须出具法定代表人授权书及授权代表身份证。3.2、投标产品纳入医疗器械(或药品)管理的,须提供供应商有效的医疗器械(或药品)经营许可证或经营备案凭证。3.3、投标产品纳入医疗器械(或药品)管理的,须提供产品有效的医疗器械(或药品)注册证或备案凭证。3.4、若投标产品为进口,供应商须提供有效的完整授权链的产品授权书(授权期限不足2年的须附能够提供持续供货的声明材料,英文授权须提供中文翻译版;制造商直接参与投标的不提供此项)。若投标产品为国产且纳入医疗器械(或药品)管理的,供应商须提供投标产品制造商有效的营业执照和生产许可证。3.5、供应商未被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)以下情形之一:①记录失信被执行人;②重大税收违法案件当事人名单。同时,在中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)“政府采购严重违法失信行为信息记录”中查询没有处于禁止参加政府采购活动的记录名单。3.6、单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商,不得参加同一合同项下的政府采购活动。3.7、本项目不接受联合体投标。三、获取招标文件时间:2022年5月16日至2022年5月20日,每天上午9:00至12:00,下午14:00至17:00。(北京时间,法定节假日除外)地点:线上方式:1)根据陕西省人民政府《关于加强新型冠状病毒感染的肺炎防控工作的通告》要求,本次招标文件采用线上发售,供应商在文件发售期以内将单位介绍信、经办人身份证、联系电话及电子邮箱等资料加盖单位公章的彩色扫描件发送至邮箱591330045@qq.com,并及时联系采购代理机构确认(联系人:李工18220810739),获取缴费方式。2)招标文件售价人民币300元/标段,售后不退。采购代理机构在收到邮件并确认文件收费到账后,通过邮箱向供应商发售招标文件,请及时查收。3)受疫情影响,本项目投标文件递交截止时间及开标时间和地点可能会变更,具体另行通知。售价:¥300.0元,本公告包含的招标文件售价总和。四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点提交投标文件截止时间:2022年6月7日09点30分(北京时间)开标时间:2022年6月7日09点30分(北京时间)地点:西安市新城区长乐中路38号金花新都汇A座7层会议室五、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜需要落实的政府采购政策:1、《三部门联合发布关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》(财库〔2017〕141号);2、《财政部司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知》(财库〔2014〕68号);3、《关于政府采购优先购买福利性企业产品和服务的意见》(陕民发(2015)1号);4、关于印发《政府采购促进中小企业发展管理办法》的通知财库〔2020〕46号;5、《关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》(财库[2019]9号);6、《环境标志产品政府采购实施的意见》(财库[2006]90号);7、《财政部国务院扶贫办关于运用政府采购政策支持脱贫攻坚的通知》(财库〔2019〕27号)。七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。1.采购人信息名称:西安交通大学第二附属医院地址:西安市新城区西五路联系方式:冯女士029-876798612.采购代理机构信息名称:正大鹏安建设项目管理有限公司地址:西安市新城区长乐中路38号金花新都汇A座12层1201室联系方式:李工18220810739,杨工159029482903.项目联系方式项目联系人:李工电话:18220810739×扫码打开掌上仪信通App查看联系方式$('.clickModel').click(function(){$('.modelDiv').show()})$('.closeModel').click(function(){$('.modelDiv').hide()})基本信息关键内容:样品前处理开标时间:2022-06-0709:30预算金额:314.00万元采购单位:西安交通大学第二附属医院采购联系人:点击查看采购联系方式:点击查看招标代理机构:正大鹏安建设项目管理有限公司代理联系人:点击查看代理联系方式:点击查看详细信息西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次公开招标公告陕西省-西安市-新城区状态:公告更新时间:2022-05-14招标公告公示西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次公开招标公告发布时间:2022-05-1415:44:32西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次公开招标公告项目概况西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次的潜在投标人应在线上获取招标文件,并于2022年6月7日09点30分(北京时间)前递交投标文件。一、项目基本情况项目编号:ZDZC2022030404项目名称:西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目(1标段、3标段、4标段、5标段、6标段)二次采购需求:本次采购标的标段划分如下:标段号产品组合名称产品名称检测方法使用科室采购预算(万元/年)拟中标家数备注1标段全自动细菌鉴定与药敏检测试剂(进口)革兰氏阴性细菌鉴定卡全自动细菌鉴定与药敏1医学检验科2501家革兰氏阳性细菌鉴定卡酵母菌鉴定卡奈瑟菌、嗜血杆菌鉴定卡革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN09革兰氏阳性细菌药敏卡片肺炎链球菌药敏卡片革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN13VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN16VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-XN04VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN67一次性悬浮液管VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-N334VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-N335VITEK2革兰氏阳性细菌药敏卡片AST-P639β-内酰胺酶快速检测试剂Genbag厌氧产气袋厌氧菌及棒状杆菌鉴定卡片ANC样本稀释液VITEK-COMPACT比浊管细菌质谱鉴定检测试剂(进口)VITEKMS-DS样品板飞行时间质谱细菌鉴定仪质谱样品处理基质溶液质谱样品预处理溶液全自动染色仪检测试剂(进口)革兰染色液(丙酮番红)全自动革兰染色仪革兰染色液(番红)革兰染色液(丙酮品红)革兰染色液(品红)革兰染色液(碘液)革兰染色液(结晶紫)喷嘴清洗液全自动血培养仪检测试剂(进口)需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFA全自动血培养仪1厌氧微生物培养瓶FN需氧微生物培养瓶SA厌氧和兼性厌氧微生物培养瓶SN需氧和兼性厌氧微生物培养瓶PF厌氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFNPlus需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFAPlus需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTPFPlus半自动鉴定及药敏检测试剂(进口)ID32GN革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法)半自动手工鉴定及药敏ID32C酵母菌鉴定试剂盒(比色法)RAPIDID32A厌氧菌鉴定试剂盒(比色法)ID32E肠杆菌科和其它非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒(比色法ID32STAPH葡萄球菌鉴定试剂盒(比色法)RAPIDID32STREP链球菌快速鉴定试剂盒(比色法)FUNGUSⅢ酵母样真菌药敏试剂盒(微量稀释法)ATBENTEROC5肠球菌药敏试剂盒(比色法)ATBG-5肠细菌药敏试剂盒(比色法)ATBSTAPH5葡萄球菌药敏试剂盒(比色法)ATBPSE5假单胞菌和非发酵菌药敏试剂盒(比色法)ATBHAEMO嗜血杆菌和布兰汉球菌药敏试剂盒(比色法)肠杆菌药敏试剂盒(比色法)非发酵菌药敏试剂盒(比色法)ATBSTREP5链球菌和肺炎球菌药敏试剂盒(比色法)NaCl0.85#%悬浮液悬浮液(3ml)(100支/盒)ATBMedium肉汤培养基FB(坚固兰)(FASTBLUEBB)JAMES吲哚试剂麦氏比浊管McFarlandStandardAPIMINERALOIL矿物油NIN马尿酸NIT1+NIT2硝酸盐试剂丙酮酸反应检测液(VP1+VP2)STERILEATB无菌加样吸头BCP二甲苯试剂EHR色氨酸试剂XYL溴甲酚紫试剂3标段G实验+GM实验配套试剂及碳青霉烯酶检测试剂、耗材革兰阴性脂多糖检测试剂盒(光度法)显色法551家真菌(1-3)D葡聚糖检测试剂盒曲霉菌半乳甘露聚糖检测试剂盒化学发光法免疫显色试剂(NDM型碳青霉烯酶检测卡)胶体金法免疫显色试剂(KPC型碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(IMP-4型碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(VIM型碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(OXA-23碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(OXA-48碳青霉烯酶检测卡)免疫显色试剂(NDM、KPC、IMP-4型碳青霉烯酶检测卡)烟曲霉菌硫氧还蛋白还原酶IgG抗体检测试剂盒酶联免疫法念珠菌烯醇化酶IgG抗体检测试剂盒一次性使用小吸头一次性使用大吸头一次性使用真空采血管一次性无热源专用离心管(EP管)一次性使用吸头(IGL-800专用)一次性专用平底试管(IGL-800专用)一次性使用无热源混合瓶(IGL-800专用)一次性接种环4标段进口药敏纸片药敏纸片K-B法(进口)通用药敏实验纸片纸片扩散法31家CT0425B环丙沙星药敏实验纸片CIP5ug头孢吡肟药敏实验纸片(扩散法)CT0043B青霉素药敏实验纸片(扩散法)P10ugCT0647B替考拉宁药敏实验纸片(扩散法)CT0725B哌拉西林/他唑巴坦药敏实验纸片(扩散法)CT0119B头孢西丁药敏实验纸片(扩散法)FOX30ugCT1841B替加环素药敏实验纸片(扩散法)CT0166B头孢噻肟药敏实验纸片(扩散法)CTX30ugCT0030B米诺环素药敏实验纸片(扩散法)MH30ugCT0013B氯霉素药敏实验纸片(扩散法)C30ugCT0064B克林霉素药敏实验纸片(扩散法)DA2ugCT0020B红霉素药敏实验纸片(扩散法)E15ugCT0107B阿米卡星药敏实验纸片(扩散法)AK30ugCT0774B美罗培能药敏实验纸片(扩散法)CT0520B氨苄西林/舒巴坦药敏实验纸片(扩散法)SAM20ugCT1650B利奈唑胺药敏实验纸片(扩散法)LZD30ug头孢他啶药敏实验纸片(扩散法)磷霉素/氨丁三醇药敏实验纸片(扩散法)FOT20ugCT0058B万古霉素药敏实验纸片(扩散法)VA30ugCT0264B氨曲南药敏实验纸片(扩散法)ATM30ugCT0003B氨苄西林药敏实验纸片(扩散法)AMP10ugCT0054B四环素药敏实验纸片(扩散法)TE30ugCT0127B头孢呋辛钠药敏实验纸片(扩散法)CXM30ugCT0159B苯唑西林药敏实验纸片(扩散法)CT0417B头孢曲松药敏实验纸片(扩散法)CRO30ugK6101奥普托欣纸片5ugCT1727B头孢哌酮/舒巴坦药敏实验纸片(扩散法)SCF105ugCT0052B磺胺甲恶唑/甲氧苄啶药敏实验纸片(扩散法)SXTCT1587B左氧氟沙星药敏实验纸片(扩散法)LEV5ugCT0024B庆大霉素药敏实验纸片(扩散法)CN10ugCT0011B头孢唑啉药敏实验纸片(扩散法)CT0455B亚胺培南药敏实验纸片(扩散法)IPM10ug5标段国产药敏纸品+基础培养基微生物肉汤稀释法MIC+其他配套试剂通用药敏试剂(8浓度)细菌药敏试剂(微量肉汤稀释法)31家通用药敏试剂(12浓度)头孢噻肟药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢曲松药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢哌酮药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢他啶药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢呋辛药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢唑啉药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢西丁药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢吡肟药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)哌拉西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)苯唑西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氨苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)羧苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)替卡西林药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)左氧沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)环丙沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氧氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)洛美沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)加替沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氟罗沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)诺氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)庆大霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)司帕沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)多西环素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)米诺环素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)克拉霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)万古霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)阿奇霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)卡那霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)克林霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)红霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)青霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氯霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)利奈唑胺药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)链霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)四环素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)利福平药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)阿莫西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)替卡西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢他啶/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢噻肟/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢哌酮/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氨苄西林/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)哌拉西林/他唑巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)复方新诺明药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)丁胺卡那药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)呋喃妥因药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)氨曲南药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)美罗培南药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)妥布霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)替考拉宁药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢克罗药敏试剂微量肉汤稀释法(8浓度)头孢噻肟药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢曲松药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢哌酮药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢他啶药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢呋辛药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢唑啉药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢西丁药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢吡肟药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)哌拉西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)苯唑西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氨苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)羧苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)替卡西林药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)左氧沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)环丙沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氧氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)洛美沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)加替沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氟罗沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)诺氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)庆大霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)司帕沙星药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)多西环素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)米诺环素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)克拉霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)阿奇霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)卡那霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)克林霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)红霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)青霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氯霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)利奈唑胺药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)链霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)四环素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)利福平药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)阿莫西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)替卡西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢他啶/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢噻肟/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢哌酮/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氨苄西林/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)哌拉西林/他唑巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)复方新诺明药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)丁胺卡那药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)呋喃妥因药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)氨曲南药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)亚胺培南药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)美罗培南药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)妥布霉素药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)替考拉宁药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)头孢克罗药敏试剂微量肉汤稀释法(12浓度)肠杆菌科细菌药敏试剂盒链球菌药敏试剂盒替加环素药敏试剂MIC多粘菌素B药敏试剂MIC嗜血杆菌药敏试剂盒MIC少见菌药敏试剂盒MIC葡萄球菌药敏试剂盒MIC肠球菌药敏试剂盒MIC万古霉素药敏MIC亚胺培南药敏MIC头孢他啶/阿维巴坦试条药敏接种培养液(CAMHB)真菌药敏试纸KBKB法真菌药敏试纸条ETESTETEST法真菌药敏试剂MIC微量肉汤稀释法非发酵菌药敏试剂盒MIC标准菌株/质控菌株干粉培养基(SS、XLD、麦康凯、MH、厌氧血、嗜血)嗜热芽孢杆菌菌片结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ和IL-2)联合检测ELISA法药敏纸片+手工鉴定配套试剂(国产)细菌药敏纸片(各类抗菌素或抗真菌)KB法国产微生物药敏试纸(扩散法法)卡他莫拉菌检测细菌生化鉴别试剂(氧化酶纸片)呋喃唑酮纸片杆菌肽纸片奥扑拓新纸片多粘菌素BV因子鉴定X因子鉴定X+V因子鉴定氨苄西林(氨苄青霉素)纸片苯唑青霉素纸片哌拉西林纸片头孢呋辛(西力欣.头孢呋肟)纸片头孢唑啉纸片头孢哌酮(先锋必)纸片头孢曲松纸片头孢噻肟纸片头孢他啶纸片利福平纸片链霉素纸片庆大霉素纸片四环素纸片氯霉素纸片红霉素纸片复方新诺明SMZ/TMP纸片万古霉素纸片环丙沙星纸片洛美沙星纸片克拉霉素纸片左氧氟沙星纸片磷霉素纸片氧氟沙星纸片克林霉素纸片阿莫西林/棒酸纸片丁胺卡那纸片头孢哌酮/舒巴坦纸片(舒普深)诺氟沙星纸片氟罗沙星纸片氨曲南纸片亚胺培南纸片多西环素纸片司帕沙星纸片氨苄西林/舒巴坦纸片阿奇霉素纸片米诺环素纸片美罗培南纸片头孢吡肟纸片头孢西丁纸片哌拉西林/他唑巴坦纸片替卡西林/棒酸纸片呋喃妥因纸片妥布霉素纸片替卡西林纸片替考拉宁纸片头孢唑肟纸片头孢噻吩纸片奈替米星纸片Optochin纸片杆菌肽纸片新生霉素纸片呋喃唑酮纸片多粘菌素B纸片林可霉素纸片阿莫西林纸片罗红霉素纸片头孢美唑纸片交沙霉素纸片头孢克罗纸片头孢克肟纸片美洛西林纸片利奈唑胺纸片莫西沙星纸片头孢硫脒纸片头孢拉定纸片头孢氨苄纸片头孢匹安纸片拉氧头孢纸片头孢匹罗纸片阿洛西林纸片壮观霉素纸片夫西地酸纸片萘啶酸纸片头孢布烯纸片替加环素纸片厄他培南纸片头孢孟多纸片头孢丙烯纸片麦迪霉素纸片X因子鉴定纸片头孢他啶/棒酸纸片头孢噻肟/棒酸纸片庆大霉素纸片羧苄青霉素(羧苄西林)纸片加替沙星纸片卡那霉素纸片甲氧苄啶纸片头孢替坦纸片新霉素纸片土霉素纸片恩诺沙星纸片氟苯尼考纸片氨苄西林/棒酸纸片呋喃唑酮(痢特灵)纸片通用药敏纸片ETEST药敏(国产)康泰通用药敏试剂条细菌药敏试条(E试验法)青霉素药敏试剂条头孢呋辛药敏试条庆大霉素药敏试条头孢吡肟药敏试条红霉素药敏试条头孢唑啉药敏试条左氟沙星药敏试条诺氟沙星药敏试条苯唑西林药敏试条利奈唑胺药敏试条克林霉素药敏试条阿莫西林/棒酸药敏试条头孢他啶药敏试条环丙沙星药敏试条头孢曲松药敏试条头孢噻肟药敏试条克拉霉素药敏试条头孢哌酮/舒巴坦药敏试条头孢哌酮药敏试条洛美沙星药敏试条氧氟沙星药敏试条万古霉素药敏试条亚胺培南药敏试条美罗培南药敏试条氯霉素药敏试条氨苄西林药敏试条丁胺卡那药敏试条氨曲南药敏试条哌拉西林药敏试条司帕沙星药敏试条头孢他啶/棒酸药敏试条利福平药敏试条羧苄西林药敏试条氟罗沙星药敏试条加替沙星药敏试条米诺环素药敏试条卡那霉素药敏试条多西环素药敏试条替卡西林药敏试条四环素药敏试条妥布霉素药敏试条替考拉宁药敏试条呋喃妥因药敏试条阿奇霉素药敏试条头孢西丁药敏试条复方新诺明药敏试条哌拉西林/他唑巴坦药敏试条头孢噻肟/棒酸药敏试条替卡西林/棒酸药敏试条氨苄西林/舒巴坦药敏试条两性霉素B伊曲康唑5-氟胞嘧啶酮康唑氟康唑伏立康唑米卡芬净泊沙康唑阿尼芬净急诊粪便常规检测样本采集管(包含稀释液、清洗液等)胶体金法粪便隐血(FOB)多水平非定值质控品便隐血(FOB)检测试剂6标段ETEST+染液+基础培养基ETEST药敏(国产)安图国产ETEST纸条(各类抗菌素)细菌药敏试条(E试验法)31家两性霉素B(E试验品)氟康唑(E试验品)伏立康唑(E试验品)阿米卡星药敏条阿莫西林药敏条氨苄西林药敏条氨曲南药药敏条苯唑西林药敏条红霉素药敏条(E试验法)环丙沙星药敏条(E试验法)卡泊芬净药敏条(E试验法)克林霉素药敏条(E试验法)利奈唑胺药敏条(E试验法)氯霉素药敏条(E试验法)美罗培南药敏条(E试验法)诺氟沙星药敏条(E试验法)青霉素药敏条(E试验法)庆大霉毒药敏条(E试验法)四环素药敏条(E试验法)头孢呋辛药敏条(E试验法)头孢哌酮舒巴坦药敏条(E试验法)头孢曲松药敏条(E试验法)头孢他啶药敏条(E试验法)头孢唑林药敏条(E试验法)万古霉素药敏条(E试验法)亚胺培南药敏条(E试验法)左氧氟沙星药敏条(E试验法)头孢吡肟药敏条(E试验法)头孢噻肟药敏条(E试验法)甲氧苄啶-磺胺甲恶唑药敏条(E试验法)米诺环素药敏条(E试验法)阿奇霉素药敏条(E试验法)微生物染液等革兰染色液(4×250ml)手工试剂革兰染色液(4×100ml)抗酸染色液(4×250ml)抗酸染色液(3×100ml)鞭毛染色液荚膜染色液芽孢染色液异染颗粒染色液瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)(2×250ml)瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)(2×100ml)瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)(4×20ml)瑞氏-吉姆萨染色液网织红细胞染色液(2×100ml)网织红细胞染色液(4×20ml)过氧化酶(POX)染色液铁染色液精子染色液精子稀释液妇科白带涂片染色液苏木素-伊红染色液I苏木素-伊红染色液II(H-E单一)巴氏染色液Ⅰ巴氏染色液Ⅱ巴氏染色液(巴氏试剂盒)快速革兰氏染色液革兰氏染液-快速法-碘溶液革兰氏染液-快速法-脱色液革兰氏染液-快速法-沙黄溶液革兰氏染液-快速法-龙胆紫液新型隐球菌染色液六胺银染色液乳酸酚棉兰染液真菌免疫荧光显色试剂(II型)微生物基础培养基等手工试剂梅毒螺旋体抗体检测试剂盒(凝集法)微生物基础培养基等手工试剂麦康凯琼脂平板乳酸棉酚蓝染液六胺银染液真菌荧光染液(一步法)抗酸荧光染色液(金胺O法)弱抗酸染色液无菌病毒运输液(用于甲流)志贺氏菌属诊断血清(50种)志贺氏菌属诊断血清(22种)沙门氏菌属诊断血清(60种)沙门氏菌属诊断血清(30种)出血性大肠埃希菌O157诊断血清(供科研用)触酶试剂氧化酶试验试剂MH干粉沙保罗培养基干粉XLD培养基干粉营养肉汤干粉R2A培养基干粉变色硅胶含醛类消毒剂中和培养基(9ml)含酚、醇类消毒剂中和培养基(9ml)含氯、碘类消毒剂中和培养基(9ml)含表面活性剂类消毒剂中和培养基(9ml)含醛类消毒剂中和培养基(50ml)含酚、醇类消毒剂中和培养基(50ml)含氯、碘类消毒剂中和培养基(50ml)含表面活性剂类消毒剂中和培养基(50ml)苛养菌药敏琼脂平板血、肠道菌分隔琼脂平板沙保罗琼脂平板营养肉汤培养基(液体)营养琼脂培养基尿道菌显色平板伊红美兰琼脂平板中国蓝琼脂平板物表测试平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌(麦康凯)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌(伊红美兰)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌(中国蓝)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌(SS)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌分隔琼脂平板GBS运送培养基卵黄琼脂培养基环丝氨酸-头孢西丁-果糖琼脂培养基厌氧血琼脂平板/厌氧苯乙酸琼脂培养基厌氧琼脂培养基庖肉培养基巯基乙酸肉汤培养基耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌检测70cm艰难梭菌显色平板70cm不动杆菌显色培养基支原体培养鉴定计数药敏试剂盒(30孔,12种药敏)葡萄糖肉汤培养基磷酸盐缓冲液(PBSpH7.2)SBG增菌液冷冻管冻存管盒液体菌种保存管复方中和增菌培养基(带棉签)注:有名“物表采样管”含复方中和剂的0.04mol/L磷酸盐缓冲液R2A琼脂培养基(干粉)大豆酪蛋白琼脂培养基(干粉)TGE琼脂平板胰蛋白胨大豆培养基(卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆培养基)碱性蛋白胨水培养基Amies采样运送拭子(Amies采样运送培养基含拭子)TSA接触平板样本稀释液中和洗脱液复合中和洗脱液(9ml)复合中和洗脱液(5ml)厌氧指示剂SS琼脂平板MH琼脂培养基哥伦比亚血琼脂平板巧克力琼脂培养基B族链球菌平板专用油镜油含珠菌种保存管(国产)(5颗)含珠菌种保存管(国产)(25颗)病毒采样管(无菌病毒运输液)植绒采样拭子磁珠菌种保存液营养肉汤培养基R2A琼脂培养基(平板)大豆酪蛋白琼脂培养基(平板)半固体琼脂Amies采样运送拭子Cary-blair运送培养基stuart运送培养基弯曲杆菌显色培养基尿培养筛选显色平板沙门氏菌筛选显色平板大肠杆菌显色平板金黄色葡萄球菌显色平板李斯特菌显色平板弧菌显色平板霉菌显色平板O157培养基分枝杆菌菌种保存管含珠菌种保存管(进口)(25颗)脱脂奶粉血琼脂平板念珠菌显色平板耐药菌三联检显色平板真菌快速培养鉴定药敏试剂盒缓冲液(碳青霉烯酶)一次性封闭真菌形态学观察培养基多粘菌素B纸片霍乱弧菌诊断血清01群、0139脑心浸液琼脂GC琼脂平板乙腈甲酸头孢硝噻吩纸片备注:各供应商可选择参投一个或多个标段,但必须对所投标段内全部项目内容进行投标报价,不得缺项、漏项。预算金额:314万元/年。资金性质:自筹资金。项目用途:医用。合同履行期限:2年二、供应商资格要求:1、基本资格条件:符合《政府采购法》第二十二条规定的供应商条件;1.1、提供在中华人民共和国境内注册的营业执照(或事业单位法人证书,或社会团体法人登记证书,或执业许可证)、组织机构代码证和税务登记证复印件【如已办理了多证合一,则仅需提供合证后的营业执照】,如供应商为自然人的需提供自然人身份证明。1.2、提供2020年度的财务报表(至少包括资产负债表、现金流量表和利润表)或具有财务审计资质的单位出具的2020年度财务会计报告或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明(附开户许可证);2021年以后新成立企业提供成立之日至开标前一月的财务报表(至少包括资产负债表、现金流量表和利润表)或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明(附开户许可证)。1.3、提供2021年以来至少一个月的纳税证明或完税证明(提供增值税、企业所得税至少一种),纳税证明或完税证明上应有代收机构或税务机关的公章或业务专用章。依法免税的供应商应提供相关文件证明。1.4、提供2021年以来至少一个月的社会保障资金缴存单据或社保机构开具的社会保险参保缴费情况证明。依法不需要缴纳社会保障资金的供应商应提供相关文件证明。1.5、提供履行合同所必需的设备和专业技术能力的书面声明。1.6、提供参加政府采购活动前3年内在经营活动中没有重大违法记录的书面声明。2、落实政府采购政策需满足的资格要求:本项目非专门面向中小企业采购。3、特定资格条件:3.1、供应商应授权合法的人员参加投标全过程,其中法定代表人直接参加投标的,须出具法人身份证,并与营业执照上信息一致;法定代表人授权代表参加投标的,须出具法定代表人授权书及授权代表身份证。3.2、投标产品纳入医疗器械(或药品)管理的,须提供供应商有效的医疗器械(或药品)经营许可证或经营备案凭证。3.3、投标产品纳入医疗器械(或药品)管理的,须提供产品有效的医疗器械(或药品)注册证或备案凭证。3.4、若投标产品为进口,供应商须提供有效的完整授权链的产品授权书(授权期限不足2年的须附能够提供持续供货的声明材料,英文授权须提供中文翻译版;制造商直接参与投标的不提供此项)。若投标产品为国产且纳入医疗器械(或药品)管理的,供应商须提供投标产品制造商有效的营业执照和生产许可证。3.5、供应商未被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)以下情形之一:①记录失信被执行人;②重大税收违法案件当事人名单。同时,在中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)“政府采购严重违法失信行为信息记录”中查询没有处于禁止参加政府采购活动的记录名单。3.6、单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商,不得参加同一合同项下的政府采购活动。3.7、本项目不接受联合体投标。三、获取招标文件时间:2022年5月16日至2022年5月20日,每天上午9:00至12:00,下午14:00至17:00。(北京时间,法定节假日除外)地点:线上方式:1)根据陕西省人民政府《关于加强新型冠状病毒感染的肺炎防控工作的通告》要求,本次招标文件采用线上发售,供应商在文件发售期以内将单位介绍信、经办人身份证、联系电话及电子邮箱等资料加盖单位公章的彩色扫描件发送至邮箱591330045@qq.com,并及时联系采购代理机构确认(联系人:李工18220810739),获取缴费方式。2)招标文件售价人民币300元/标段,售后不退。采购代理机构在收到邮件并确认文件收费到账后,通过邮箱向供应商发售招标文件,请及时查收。3)受疫情影响,本项目投标文件递交截止时间及开标时间和地点可能会变更,具体另行通知。售价:¥300.0元,本公告包含的招标文件售价总和。四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点提交投标文件截止时间:2022年6月7日09点30分(北京时间)开标时间:2022年6月7日09点30分(北京时间)地点:西安市新城区长乐中路38号金花新都汇A座7层会议室五、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜需要落实的政府采购政策:1、《三部门联合发布关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》(财库〔2017〕141号);2、《财政部司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知》(财库〔2014〕68号);3、《关于政府采购优先购买福利性企业产品和服务的意见》(陕民发(2015)1号);4、关于印发《政府采购促进中小企业发展管理办法》的通知财库〔2020〕46号;5、《关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》(财库[2019]9号);6、《环境标志产品政府采购实施的意见》(财库[2006]90号);7、《财政部国务院扶贫办关于运用政府采购政策支持脱贫攻坚的通知》(财库〔2019〕27号)。七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系。1.采购人信息名称:西安交通大学第二附属医院地址:西安市新城区西五路联系方式:冯女士029-876798612.采购代理机构信息名称:正大鹏安建设项目管理有限公司地址:西安市新城区长乐中路38号金花新都汇A座12层1201室联系方式:李工18220810739,杨工159029482903.项目联系方式项目联系人:李工电话:18220810739
  • 138万!庆市疾病预防控制中心实验室试剂耗材采购项目
    项目编号:[230601]QC[TP]20220039项目名称:实验室试剂耗材采购采购方式:竞争性谈判预算金额:1,386,119.00元采购需求:合同包1(实验室试剂耗材采购):合同包预算金额:1,386,119.00元品目号品目名称采购标的数量(单位)技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)1-1化学试剂和助剂结核菌熟练度测试培养基22(套)详见采购文件5,698.00-1-2化学试剂和助剂PBS缓冲液5(瓶)详见采购文件1,170.00-1-3化学试剂和助剂荧光染色液1(套)详见采购文件420.00-1-4化学试剂和助剂高压灭菌器指示条1(盒)详见采购文件37.00-1-5化学试剂和助剂镊子5(把)详见采购文件100.00-1-6化学试剂和助剂罗氏活力型血糖检测试纸+配套采血针(慢病科使用)10(套)详见采购文件2,400.00-1-7化学试剂和助剂强生稳豪信优型血糖检测试纸+配套采血针(慢病科使用)10(套)详见采购文件2,880.00-1-8化学试剂和助剂225mL营养肉汤2(盒)详见采购文件342.00-1-9化学试剂和助剂结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂培养基(VRBGA)1(瓶)详见采购文件215.00-1-10化学试剂和助剂重组胰蛋白酶4(瓶)详见采购文件792.00-1-11化学试剂和助剂麻疹病毒IgM抗体检测试剂盒4(盒)详见采购文件1,728.00-1-12化学试剂和助剂风疹病毒IgM抗体检测试剂盒4(盒)详见采购文件1,080.00-1-13化学试剂和助剂汉坦病毒酶免检测试剂盒4(盒)详见采购文件2,880.00-1-14化学试剂和助剂甲型、乙型流感、新冠PCR试剂盒8(盒)详见采购文件54,000.00-1-15化学试剂和助剂EB病毒PCR试剂盒2(盒)详见采购文件6,300.00-1-16化学试剂和助剂甲型流感试剂6(盒)详见采购文件37,800.00-1-17化学试剂和助剂甲型、乙型通用流感试剂10(盒)详见采购文件63,000.00-1-18化学试剂和助剂乙型流感分型试剂8(盒)详见采购文件50,400.00-1-19化学试剂和助剂流感甲-1 PCR试剂盒6(盒)详见采购文件18,900.00-1-20化学试剂和助剂流感甲-3 PCR试剂盒6(盒)详见采购文件18,900.00-1-21化学试剂和助剂流感甲-5 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-22化学试剂和助剂流感甲- 7 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-23化学试剂和助剂流感甲-9 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-24化学试剂和助剂诺如病毒PCR试剂盒16(盒)详见采购文件100,800.00-1-25化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒(A群)2(盒)详见采购文件6,300.00-1-26化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒(B群)2(盒)详见采购文件6,300.00-1-27化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒(C群)2(盒)详见采购文件6,300.00-1-28化学试剂和助剂大肠菌群纸片1(盒)详见采购文件324.00-1-29化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A166(盒)详见采购文件18,900.00-1-30化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A62(盒)详见采购文件6,300.00-1-31化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A102(盒)详见采购文件6,300.00-1-32化学试剂和助剂HIV质控血清10(支)详见采购文件1,440.00-1-33化学试剂和助剂DPBS30(瓶)详见采购文件3,870.00-1-34化学试剂和助剂两性霉素2(瓶)详见采购文件1,886.00-1-35化学试剂和助剂阿氏液4(瓶)详见采购文件520.00-1-36化学试剂和助剂病毒培养液20(瓶)详见采购文件16,240.00-1-37化学试剂和助剂TPCK胰酶3(盒)详见采购文件2,052.00-1-38化学试剂和助剂胎牛血清1(瓶)详见采购文件3,825.00-1-39化学试剂和助剂0.25%胰蛋白酶-EDTA1(盒)详见采购文件270.00-1-40化学试剂和助剂0.05%胰蛋白酶-EDTA1(盒)详见采购文件340.00-1-41化学试剂和助剂MDCK细胞无血清培养基20(瓶)详见采购文件16,240.00-1-42化学试剂和助剂PALCAM琼脂干粉1(瓶)详见采购文件763.00-1-43化学试剂和助剂PBS30(瓶)详见采购文件1,230.00-1-44化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒(通用)14(盒)详见采购文件44,100.00-1-45化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒EV714(盒)详见采购文件12,600.00-1-46化学试剂和助剂一次性无菌液体石蜡2(盒)详见采购文件1,744.00-1-47化学试剂和助剂一次性无菌厌氧袋5(袋)详见采购文件4,050.00-1-48化学试剂和助剂营养琼脂斜面6(盒)详见采购文件1,428.00-1-49化学试剂和助剂营养琼脂平板50(盒)详见采购文件7,850.00-1-50化学试剂和助剂BPW增菌液30(盒)详见采购文件5,940.00-1-51化学试剂和助剂3% NaCl APW增菌液20(盒)详见采购文件4,340.00-1-52化学试剂和助剂弧菌显色平板20(盒)详见采购文件12,600.00-1-53化学试剂和助剂志贺显色平板20(盒)详见采购文件13,820.00-1-54化学试剂和助剂TSA平板2(盒)详见采购文件314.00-1-55化学试剂和助剂四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液30(盒)详见采购文件6,570.00-1-56化学试剂和助剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)15(盒)详见采购文件3,495.00-1-57化学试剂和助剂沙门显色平板40(盒)详见采购文件22,080.00-1-58化学试剂和助剂沙门氏菌/金黄色葡萄球菌/大肠埃希氏菌O157/单核细胞增生性李斯特菌核酸四重实时荧光PCR检测试剂盒3(盒)详见采购文件45,360.00-1-59化学试剂和助剂5种致泻性大肠埃希氏菌多重实时荧光PCR检测试剂盒12(盒)详见采购文件226,800.00-1-60化学试剂和助剂食源性致病菌核酸多重实时荧光PCR检测试剂盒1(盒)详见采购文件22,680.00-1-61化学试剂和助剂志贺氏菌增菌(肉汤)不含抗生素10(盒)详见采购文件2,740.00-1-62化学试剂和助剂沙门氏菌属诊断血清套装1(套)详见采购文件32,400.00-1-63化学试剂和助剂XLD平板2(盒)详见采购文件476.00-1-64化学试剂和助剂弯曲菌培养检测试剂盒2(盒)详见采购文件4,050.00-1-65化学试剂和助剂225mL LB1增菌液5(盒)详见采购文件3,060.00-1-66化学试剂和助剂10mL生理盐水管(含中和剂)10(盒)详见采购文件6,390.00-1-67化学试剂和助剂EC肉汤1(瓶)详见采购文件194.00-1-68化学试剂和助剂硫代硫酸钠1(瓶)详见采购文件15.00-1-69化学试剂和助剂平板计数琼脂1(瓶)详见采购文件238.00-1-70化学试剂和助剂乳糖胆盐发酵培养基1(瓶)详见采购文件150.00-1-71化学试剂和助剂一次性采水袋2(箱)详见采购文件1,340.00-1-72化学试剂和助剂10mL生理盐水管6(盒)详见采购文件3,834.00-1-73化学试剂和助剂营养琼脂培养基干粉1(瓶)详见采购文件199.00-1-74化学试剂和助剂四硫磺酸钠煌绿增菌液基础(TTB)干粉1(瓶)详见采购文件239.00-1-75化学试剂和助剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC) 干粉1(瓶)详见采购文件367.00-1-76化学试剂和助剂血琼脂基础 干粉1(瓶)详见采购文件239.00-1-77化学试剂和助剂Baird-Parker琼脂基础 干粉1(瓶)详见采购文件456.00-1-78化学试剂和助剂无菌培养容器封口膜12cm*12cm5(包)详见采购文件250.00-1-79化学试剂和助剂无菌培养容器封口膜16cm*16cm10(包)详见采购文件550.00-1-80化学试剂和助剂营养肉汤20(盒)详见采购文件3,420.00-1-81化学试剂和助剂肠道增菌肉汤20(盒)详见采购文件4,500.00-1-82化学试剂和助剂肠道增菌肉汤10(盒)详见采购文件2,150.00-1-83化学试剂和助剂金属浴干式恒温器1(个)详见采购文件3,240.00-1-84化学试剂和助剂拍打式无菌均质机2(个)详见采购文件14,400.00-1-85化学试剂和助剂10mL LB2增菌液5(盒)详见采购文件1,285.00-1-86化学试剂和助剂李斯特氏菌显色平板5(盒)详见采购文件3,555.00-1-87化学试剂和助剂PALCAM琼脂平板5(盒)详见采购文件1,480.00-1-88化学试剂和助剂225mL PBS(磷酸盐缓冲液)10(盒)详见采购文件1,320.00-1-89化学试剂和助剂Baird-Parke 平板10(盒)详见采购文件2,270.00-1-90化学试剂和助剂金黄色葡萄球菌显色平板10(盒)详见采购文件6,650.00-1-91化学试剂和助剂腊样芽孢杆菌显色平板5(盒)详见采购文件3,325.00-1-92化学试剂和助剂大肠杆菌显色平板25(盒)详见采购文件17,275.00-1-93化学试剂和助剂国标法水碘检测试剂盒1(盒)详见采购文件1,300.00-1-94化学试剂和助剂尿碘试剂盒(WS/T107-2016)1(盒)详见采购文件1,300.00-1-95化学试剂和助剂实验室专用洗液2(桶)详见采购文件936.00-1-96化学试剂和助剂大肠菌群/大肠杆菌测试片10(包)详见采购文件7,300.00-1-97化学试剂和助剂50ml塑料离心管200(支)详见采购文件600.00-1-98化学试剂和助剂15ml塑料离心管1(箱)详见采购文件1,306.00-1-99化学试剂和助剂塑料容量瓶100(个)详见采购文件16,200.00-1-100化学试剂和助剂一次性塑料移液管1ml200(支)详见采购文件300.00-1-101化学试剂和助剂一次性塑料移液管2ml200(支)详见采购文件340.00-1-102化学试剂和助剂一次性塑料移液管5ml200(支)详见采购文件480.00-1-103化学试剂和助剂一次性塑料移液管10ml200(支)详见采购文件520.00-1-104化学试剂和助剂电加样排枪枪头3(箱)详见采购文件18,240.00-1-105化学试剂和助剂无菌冻存管1,000(管)详见采购文件3,000.00-1-106化学试剂和助剂50ml无菌离心管(尖底,带架子)1(20包/箱)详见采购文件1,470.00-1-107化学试剂和助剂15ml无菌离心管(尖底)1(10包/箱)详见采购文件1,306.00-1-108化学试剂和助剂Realtime-PCR八连管(带盖)(不透光)30(盒)详见采购文件52,920.00-1-109化学试剂和助剂GenBox厌氧产气包6(盒)详见采购文件3,120.00-1-110化学试剂和助剂2.5L密封厌氧盒6(个)详见采购文件5,760.00-1-111化学试剂和助剂50mL塑料离心管500(支)详见采购文件1,400.00-1-112化学试剂和助剂15mL一次性刻度塑料离心管500(支)详见采购文件1,300.00-1-113化学试剂和助剂研磨机2(台)详见采购文件47,146.00-1-114化学试剂和助剂研磨杯200(个)详见采购文件19,000.00-1-115化学试剂和助剂七氟丁酰基咪唑(HFBI)5(瓶)详见采购文件9,000.00-1-116化学试剂和助剂高效脱水剂5(盒)详见采购文件5,220.00-1-117化学试剂和助剂硅藻土基质固相分散萃取柱专用硅藻土填料5(盒)详见采购文件6,120.00-1-118化学试剂和助剂硅藻土基质固相分散萃取柱5(支)详见采购文件18,540.00-1-119化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-120化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇硬脂酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-121化学试剂和助剂缩水甘油棕榈酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件3,780.00-1-122化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-123化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇硬脂酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-124化学试剂和助剂缩水甘油棕榈酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件3,780.00-1-125化学试剂和助剂氘代同位素d5-3-氯-1.2-丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-126化学试剂和助剂氘代同位素d5-2-氯-1.3-丙二醇硬脂酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-127化学试剂和助剂d5-缩水甘油棕榈酸酯3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-128化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇二七氟丁酸酯(3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物)1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-129化学试剂和助剂2-氯-1.3-丙二醇二七氟丁酸酯(2-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物)1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-130化学试剂和助剂3-溴-1.2丙二醇二七氟丁酸酯(3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物)1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-131化学试剂和助剂d5-3-氯 -1.2-丙二醇七氟丁酰基衍生物1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-132化学试剂和助剂d5-2-氯-1.3-丙二醇七氟丁酰基衍生物1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-133化学试剂和助剂d5-3-溴-1.2丙二醇二七氟丁酸酯(3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物)1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-134化学试剂和助剂3-溴-1.2丙二醇标准物1(瓶)详见采购文件1,487.00-1-135化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇(3-MCPD) 标准品1(支)详见采购文件1,487.00-1-136化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇(2-MCPD)标准品1(支)详见采购文件1,487.00-1-137化学试剂和助剂d5-3-氯-1.2丙二醇(d5-3-MCDP)标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-138化学试剂和助剂d5-2-氯-1.3丙二醇(d5-2-MCPD)标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-139化学试剂和助剂d5-3-溴-1.2丙二醇(d5-3-MBPD)标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-140化学试剂和助剂FAPAS植物油质控质样(含3mcpd,缩水甘油酯,2mcpd)1(瓶)详见采购文件2,268.00-1-141化学试剂和助剂质控用植物油样(未精炼的毛油或不含氯丙醇酯和缩水甘油酯的食用植物油)1(瓶)详见采购文件2,610.001,512.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限:2022年9月1日前
  • 消毒后内镜“滤膜法采样”的那些事儿
    消毒后内镜“滤膜法采样”的那些事儿导 读:内镜消毒质量监测的目的是最大限度地发现可能存在的危险。按照《软式内镜清洗消毒技术规范》(WS507-2016)要求,消毒内镜应每季度进行生物学监测,监测采用轮换抽检的方式,每次按25%的比例抽检,监测方法应遵循GB15982的规定,消毒合格标准为菌落总数≤20 CFU/件,且不能检出致病菌。不同的采样方法有其特点,传统采样法操作简便、不需要特殊的设备,但阳性率较低,在新规范中已经被滤膜法所取代。滤膜法采样敏感性高,但成本贵、需要专用采样设备。在此,我们再次给大家说说消毒后内镜的“滤膜法”采样。规范怎么说?按照我国《医院消毒卫生标准》(GB 15982-2012)附录A 中A.5.3.3的要求,消毒后内镜的采样及检查方法为:“取清洗消毒后内镜,采用无菌注射器抽取50mL含相应中和剂的洗脱液,从活检口注入冲洗内镜管路,并全量收集(可使用蠕动泵)送检。将洗脱液充分混匀,取洗脱液1.0mL接种平皿,将冷至40℃~45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15mL~20mL,36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数(CFU/件)。将剩余洗脱液在无菌条件下采用滤膜(0.45μm)过滤浓缩,将滤膜接种于凝固的营养琼脂平板上(注意不要产生气泡),置36℃士1℃温箱培养48h,计数菌落数。当滤膜法不可计数时,菌落总数(CFU/件)=m(CFU/平板)×50,m为两平行平板的平均菌落数。当滤膜法可计数时,菌落总数(CFU/件)=m(CFU/平板)+m1(CFU/滤膜),m为两平行平板的平均菌落数,m1为滤膜上菌落数。” 什么是滤膜法?滤膜法是使用真空泵负压抽滤,在滤杯内的灭菌微孔滤膜上下面产生压差,使滤杯内的洗脱液由于压差作用通过灭菌微孔滤膜,使得微生物被拦截在灭菌微孔滤膜上。规范中要求使用孔径0.45μm(微米)的滤膜,可拦截直径0.45μm(微米)以上的微生物(绝大多数细菌的直径大小在0.5μm ~5μm(微米)之间),从而高效地拦截微生物,更准确地监测消毒内镜的清洗消毒工作。 滤膜法消毒内镜检测要用到什么试剂耗材?含相应中和剂的洗脱液、蓝盖丝口瓶、真空抽滤装置、0.45μm(微米)滤膜。(1)含相应中和剂的洗脱液”是:醛类消毒剂用甘氨酸浓度为1.0%的洗脱液,其他消毒剂用硫代硫酸钠浓度为0.3%的洗脱液。(2)真空抽滤装置和微生物检测仪大约长这样: (3)0.45μm(微米)滤膜大约长这样: 为什么要用滤膜法?由于内镜独特的结构和工作特点,清洗消毒工作存在一定的难度,国内外都出现过内镜引发患者交叉感染的案例报道。国内有研究显示[1-3],采用滤膜法检测的样本合格率低于传统采样法,其原因包括50mL洗脱液能够比10mL洗脱液更充分地接触到消毒内镜的内表面,滤膜过滤时能够将洗脱液中的微生物高效拦截且对微生物的损伤较小,利于微生物的培养,得到更准确的菌落计数结果。因此,滤膜法能够更加灵敏、可靠地评价内镜的清洗消毒工作,更进一步保护内镜检查患者的安全,提高医疗质量。
  • 变异链球菌的菌落特征与使用范围及培养方法!
    变异链球菌的菌落特征与使用范围及培养方法! 变异链球菌属于甲型溶血性链球菌类,菌体较小,呈圆形或卵圆形,常成双或以短链状排列,革兰染色呈阳性。它在胰蛋白胨培养基中和含有95%氮气及5%二氧化碳混合气体的环境下生长良好。 一、菌种简介平台编号:Bio-53150规格:冻干物拉丁属名:Streptococcus Mutans菌株名称:变异链球菌其他编号:ATCC700610培养基编号:116或114,5% CO2 or 厌氧培养温度:37培养时间:48 小时用途:对红霉素、利福平、利福霉素AMP、壮观霉素、链霉素敏感。血清型C。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)保藏条件:斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20°C 保存。甘油请置于-80°C。 二、培养基TSA+5%脱纤维蛋白羊血(血琼脂平板) 三、菌落特征变异链球菌在血平板培养基上呈旺溶血,菌落较小,呈灰白色、圆形,表面突起,菌落质地较硬,有嵌入培养基内生长的趋势。 四、菌种的培养1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 五、使用范围(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 六、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支平板);2)经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间; 若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根需要转接培养;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;二次接种量要多,固体斜面培养基水分要少才能让菌体长得比较明显,液体培养要静止培养;3)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;4)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;5)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为2-25 年;6)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系;7)如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理;8)打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛;9)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作;10)甘油管使用:使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
  • 97.8万!南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购
    项目概况南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购(第二批) 采购项目的潜在供应商应在政采云平台(https://www.zcygov.cn/)获取(下载)获取采购文件,并于2021年12月22日 09点30分(北京时间)前提交响应文件。一、项目基本情况项目编号:NNZC2021-J1-991969-YZLZ(采购计划文号:NNZC[2021]7871号-003......具体内容详见附件招标公告项目名称:南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购(第二批)采购方式:竞争性谈判预算金额:97.7921000 万元(人民币)采购需求:预算金额:合计97.7921万元。A 分标 53.3652万元; B 分标 28.9772万元;C 分标15.4497万元;采购需求:A分标:项号采购标的单位数量简要技术需求或者货物要求1单通道病毒核酸检测类试剂盒(国产)(肠道病毒等)盒9具体详见采购文件《第二章 采购需求》2双通道病毒核酸检测类试剂盒(国产)(包括流感病毒、肠道病毒等)盒343新型冠状病毒2019-nCOV核酸定值质控品支354病毒DNA/RNA提取试剂盒(预封装)盒1085无RNase10µl带滤芯长吸头盒106无RNase250µl长吸头(带滤芯)箱870.1ml八连排定量管(带盖)箱28封口袋(透明)包1009封口袋(透明)包10010G1型消毒剂浓度试纸盒101196孔透明PCR板(适用于ABI)箱41296孔PCR板封口膜箱313N95防护口罩只120014VITEK细菌鉴定卡(ANC)盒115VITEK细菌鉴定卡(BCL)盒316API生化鉴定条(链球菌)盒117弯曲菌培养检测试剂(双孔滤膜法)盒418Karmali选择性平板盒419甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板瓶1020Baird-Parker琼脂平板瓶1021PALCAM琼脂基础瓶622PALCAM琼脂冻干配套试剂盒2023CIN-1培养基基础瓶224CIN-1培养基配套试剂盒825改良Y琼脂瓶226含铁牛奶琼脂瓶227甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础MYP瓶428查氏琼脂培养基瓶129改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤基础(MLST)瓶430万古霉素(改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤配套试剂)盒431改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm肉汤)盒232脑心浸萃琼脂培养基瓶133脑-心浸萃液态培养基(BHI)瓶234改良克氏双糖铁琼脂瓶235KF链球菌琼脂培养基瓶236胆汁液态培养基瓶237改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基(mPDA)瓶238PCFA培养基基础瓶239PCFA培养基配套试剂盒440改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基配套试剂盒441葡萄糖肉浸液肉汤瓶142尿素盒343氰化钾对照管(KCN)盒244改良CCD琼脂基础(mCCD)瓶245改良CCD琼脂添加剂盒1046改良Skirrow氏琼脂基础瓶247改良Skirrow琼脂添加剂盒1048L-shaped Cell Spreader(一次性L棒)盒1049152唐菖蒲伯克霍尔德氏菌核酸快速检测试剂盒盒1氯化镁孔雀绿肉汤(MM)瓶609带盖离心管
  • 如何检测寨卡病毒
    2014年以来美洲多个国家相继发生寨卡病毒(Zika)感染病例,世界卫生组织近日警告,寨卡病毒正呈现“暴发式传播”,预计美洲地区将有至多400万人感染这种病毒。截至目前,中国大陆尚未发现病例,但疾病预防控制中心指出我国仍存在病例输入风险。  目前关于这种病毒传播的疑问不少,比如怀孕期间感染与造成婴儿小头畸形之间的关联,但由于目前诊断方法的局限性,还很难给出一个答案来。一组研究人员正在攻关,希望能以最快的速度研发出免疫试剂,检测是否感染Zika病毒。  来自德州大学加尔维斯顿医学分校的Nikos Vasilakis表示,“我们正尽全力尽快给临床医师们一些答案。”  目前,检测寨卡病毒的标准检测方法是对样本进行PCR,分析样本中的病毒RNA探针是否存在,虽然这种方法能很好的检测到病毒,但是病原体的RNA很快就会被降解掉。“在患者把样品送入临床时,病毒也许已经消失,或者只能抓住它的尾巴了,这超过了检测时间限制,”Vasilakis说。  临床医师和流行病学家希望能在出生前几个月里就确定婴儿是否感染了寨卡病毒,为此美国疾病控制与预防中心CDC的科学家们进行了一种称为蚀斑减少中和试验(Plaque Reduction Neutralization Test) 的检测,这种方法是检测血清中和抗体的一种敏感性较高的方法,能检测之前的感染。  从原理上说,这一检测方法以使蚀斑数减少50%的血清稀释度作为其中的效价。试验使用定量的病毒(100PFU)与不同稀释度的等量血清混合后感作, 接种预先准备好的单层细胞,再覆盖上营养琼脂置37度二氧化碳培养箱培养,数天后分别统计蚀斑数,用Karber法计算该血清的蚀斑中和效价。  患者的血清中混有病毒,几天时间里研究人员观察病毒是否会感染培养基,如果没有,那么病毒就已经被血清中的抗体中和了,这表明患者曾经接触过寨卡病毒。  CDC甲类病毒实验室主任Ann Powers表示,使用这种方法的问题在于“你必须有活体病毒,和合适安全的环境,”这意味着只有少数几个实验室能进行这种试验。  其它更加方便的血清学测试也能检测特定病原体中的抗体,但是对于寨卡病毒来说,很难判断患者携带的黄病毒是登革热病毒,寨卡病毒还是其它病毒。“而且寨卡病毒出去的区域也正是登革热出现的地区,”来自华盛顿大学圣路易斯分校的免疫学家Mike Diamond说。  Vasilakis 正在尝试ELISA方法,也就是检测体液中微量物质的固相免疫测定的方法,这种方法利用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定,可以在感染后几个星期内检测到Zika病毒。虽然这也有可能会与其它感染发生一定程度的交叉反应,但如果Zika病毒特异性抗体浓度高就能指示出近期发生的Zika病毒感染,Vasilakis说。  Vasilakis预计在未来几周内,Diamond研究组就会有结果,研发出一种针对Zika病毒的单克隆抗体检测方法,这能与ELISA方法结合,检测发生过的感染,“我们很早就开展了这项研究,这个月就能得到结果,”Diamond说,“初步结果表明我们的一些抗体能特异性识别Zika病毒。”  不过即使Diamond研究组的抗体能特异性检测Zika病毒,他们也需要一些时间来建立诊断方法,“这可能还需要几个月的时间。”  与此同时,一些生物公司也开始销售Zika血清学检测,比如MyBioSource 公司已经有售一种针对Zika的IgM ELISA检测,来自加拿大的Biocan 公司也在出售一种检测IgM和IgG抗体(后者比前者在感染后提升水平更高)的扎手指检测方法,能在5到10分钟得到结果。  Diamond表示他们还未接触任何商业产品,Biocan目前还未给出有效数据,但是其销售部总经理Bhavjit Jauhar表示他们已经将实验室和现场检测结果呈递给巴西监管当局,“我们过去几年间一直致力于Zika病毒的研究,因为我们认为这种疫情会暴发。”
  • 微生物检测培养基质量控制问答
    微生物检测培养基质量控制问答1、培养基灭菌后成份会有所蒸发减少,如何处理这个问题?答:正常情况下蒸发量较少,可忽略不计。2、培养基融化后出现浑浊是有哪些方面的原因引起的?应如何避免?答:可能的情况有:1. 培养基配置用水不符合规定;2. 灭菌过程温度升温慢或降温慢;3. 培养基储存不当;4. 融化时沸腾时间较长等。3、准备好的培养基有效期如何验证?答:定期取出培养基验证其无菌性,促生长能力等方面。4、培养基配制好灭菌后,在高压容器中保温降至50℃左右,可不可行?答:建议最-好不要,避免过度受热。5、脱水培养基对湿度是否有要求?多少适宜?答:按要求室温干燥环境储存即可。6、培养基pH值测定温度在25℃,这个温度应怎么控制?答:可水浴控制培养基温度。7、配制培养基过程中,按说明书称定量,加规定的纯化水,煮沸溶解,为了避免煮沸过程总减少水分,是否要在配制过程适当增加水?答:可适量增加,自己掌握。8、商品培养基一定要当天配当天用吗?可否在一周内用完?答:不是即配即用的培养基的话,储存的当,可以使用。9、称量培养基时,注意不要吸入粉末,这粉末是指何物?答:就是你所称量的干粉培养基 ,因为培养基的粉末对呼吸道有刺激作用,而且培养基中的某些成分,如亚硒-酸盐、叠氮-化钠、乙酰胺等,长期吸入并在体内累积到一定量会对人体健康有危害。所以培养基配制称量需做好个人防护,且最-好选择少粉尘环保型颗粒培养基。10、煮培养基,用不锈钢锅在电磁炉上煮可行?硫乙醇培养基是否要煮沸?如何煮沸?用不锈钢锅在电磁炉上煮沸可行吗?可不可以水浴煮沸呢?答:硫乙醇应煮沸,量大时,我实验室用不锈钢锅在电磁炉上煮沸。不建议水浴煮沸,因为水浴煮沸琼脂粉很难溶,导致琼脂分装不均匀,前段分装的琼脂含量少,后段分装的琼脂含量高,导致有的管或瓶中的FT凝固。11、如培养基在高压灭菌器中温度需自然下降20度才开盖吗?答:高温灭菌器有安全阀,温度下降到安全阀可打开时将培养基取出室温冷却,各型号灭菌器安全开盖温度不尽相同。12、平板涂布和平板划线培养基表面水分过多,菌落蔓延如何解决?答:对于采用表面接种形式培养的固体培养基,应先对琼脂表面进行干燥:揭开平皿盖,将平板倒扣于烘箱或培养箱中(温度设为25℃~50℃);或放在有对流的无菌净化台中,直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。
  • 3D细胞培养分析技术微孔板制备的新视角
    阿斯利康中国创新研究中心(ICC)的科学家们开发了一项新技术,利用Tecan 全自动液体处理工作站Freedom EVO® 进行细胞培养微孔板自动化温控制备,进而完成药物候选化合物筛选。该研究团队在BD Matrigel&trade 加样前使用琼脂预涂微孔板,从而顺利地在96孔微孔板上实现3D细胞培养分析。 中国创新研究中心(ICC)是阿斯利康在中国上海张江高科技园区投建的研发基地。该中心于2007年正式投入使用,专注于调查研究影响亚洲人口健康的各类疾病,其中包括:胃癌、肝癌以及肺癌。该中心采用国际一流的先进技术解析这些癌症的遗传机理,并在临床上识别及确证相关的生物标记物和药物靶标。 由Yi Gu博士带领的细胞科学研究部门正在对这些疾病开展一项药物研究项目,希望通过筛选多种化合物来确定候选药物。3D细胞检测分析是该项目组基于采用BD Matrigel (BD Biosciences)作为细胞培养底物进行的二次药筛技术其中的一种。Matrigel是从EHS (Engelbreth-Holm-Swarm)小鼠肉瘤的可溶性基底膜抽提得到的细胞外蛋白凝胶复合物,能够诱导克隆细胞在标准细胞培养基表面通过不同方式生长(图1)。这些非均相构成诱发了克隆体的形成,非常适用于研究肿瘤细胞之间的粘附、生长、迁移及转移。由于克隆细胞很好地模仿了人体组织的生长与成型过程,因此研究人员能够在药筛最初期识别正确的化合物。 手工制板存在着明显的两个缺陷:容易出错且耗费时间,而通过使用全自动液体处理工作站Freedom EVO来提高检测通量并改善结果的一致性,无疑是最好的解决方案。这一自动化平台早已成熟应用于化合物梯度稀释和其他大量细胞检测实验中,可以在保持原有应用的基础上快速且低成本地修改应用程序。 ICC资深自动化科学家William Shi解释说:&ldquo 历来此类3D细胞检测都是在6孔板上进行的,由于样本需求量大且Matrigel底物处理比较复杂,因此手工制板十分困难。并且,这种6孔板型无法与大量试剂需求和大批量化合物筛选工作相匹配,因此我们开始着手不断寻找高性价比的方法。另一点很重要的是,Matrigel的异质组分具有较大表面张力且在微孔内分布不均,其低剂量加样非常困难,因此分析6孔板上的实验结果已经极其困难,更别提在96孔板内检测分析了。为了解决这一问题,我们先在微孔板上预涂一层薄薄的琼脂,然后再进行Matrigel加样。这种方法虽然解决了Matrigel的表面张力问题,却带来了如何平衡在50℃以下琼脂凝固与4℃以上Matrigel过度粘稠这两种物质的复杂加样问题。&rdquo 后来我们选用了全自动化液体处理工作站Freedom EVO,其中选配了多个温控载架,使得盛装琼脂和Matrigel的液槽一直保持适宜的温度,非常便于加样。整个加样过程都是由自动化系统的液体处理机械臂(LiHa)上的单通道完成,通过多次洗液注液循环实现预热或预冷,避免加样针堵塞。加样初期通过机械臂的多次注液将预热琼脂(55℃左右)加入提前预热的96孔板内,这样可以将琼脂冷却的可能性降到最低点,从而减少琼脂的用量,降低实验成本。随后,微孔板在载板架上经室温冷却15-20分钟,使得琼脂在加入Matrigel前得以凝固。 采用这种解决方案后,能在短短90分钟内完成6块微孔板的加样制备,而传统手工处理一天仅能完成3-4块微孔板的加样,两者形成鲜明对比。制备好的微孔板质量在使用自动化加样技术后也有了很大提升,避免了人工制板常出现的批对批、板对板、甚至孔对孔的误差问题。William总结道:&ldquo 这种高度一致性对药物筛选来说至关重要,高质量的实验结果数据有助于我们加快药物研发进程,Freedom EVO自动化平台独具的灵活性使得这一切能够轻松实现!&rdquo 更多关于Tecan Freedom EVO液体处理工作站的信息请访问以下网站或询问当地Tecan员工/经销商:www.tecan.com/freedomevo 更多关于阿斯利康中国创新研究中心的信息,请访问以下网站:en.astrazeneca.com.cn BD和Matrigel是美国BD公司(Becton, Dickinson and Company)的注册商标。 Corining是美国康宁公司(Corining)的注册商标。 关于帝肯: 瑞士帝肯www.tecan.com是全球领先的生命科学与生物制药、法医和临床诊断领域自动化及解决方案供应商。公司成立于1980年,总部设在瑞士Mä nnedorf,分别在瑞士、北美和奥地利设有自己的研发和生产基地,目前公司主要经营的产品有三大类:全自动化液体处理平台( Liquid Handling&Robotics )、多功能酶标仪(Multimode Reader)和OEM组件;销售服务网络遍布世界52个国家,客户覆盖制药企业、生物技术公司、科研院所、法医、医院、血站系统和疾病控制中心(CDC)等。其液体处理技术已拥有行业经验30年,在全球处于领先地位,备受世界领先生命科学实验室的青睐。 帝肯(上海)贸易有限公司是瑞士帝肯集团公司亚太区总部,2008年4月成立于上海浦东。帝肯(上海)目前拥有一支专业的售前和售后服务团队,在科研、医院、血站和CDC领域构建了良好的经销网络,并以&ldquo 力求比客户期望做得更好&rdquo 的服务理念,给广大终端用户提供专业的服务。 欲知更多详情,请联系帝肯上海 市场部:Libby Zhu Tel: 021 2206 3206 / 010 8511 7823 Fax: 021 2206 5260 / 010 8511 8461 helpdesk-cn@tecan.com www.tecan.com
  • 经验分享:透射电子显微镜应用领域及样品制备方法
    透射电子显微镜是使用较为广泛的一类电镜,具有分辨率高、可与其他技术联用的优点。已广泛应用于医学、生物学等各个研究领域,成为组织学、病理学、解剖学以及临床病理诊断的重要工具之一。常规电镜样品制备包括常温化学双固定、常温脱水包埋、常规超薄切片、普通电镜观察几个步骤。样品制备过程历时约一周,超薄切片经醋酸双氧铀和柠檬酸铅染色后,电镜观察。所有操作均按照以下流程进行。一、试剂0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液Na 2 HPO 4 2H 2 O 35.61 g 或Na 2 HPO 4 7H 2 O 53.65 g / Na 2 HPO 4 12H 2 O 71.64 gNaH 2 PO 2 H 2 O 27.60 g 或NaH 2 PO 4 2H 2 O 31.21 g加双蒸水(ddH2O)到1000 mL0.1 mol/ L磷酸盐缓冲液(PBS)0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 250 mL加双蒸水到500 mL2 % 低温琼脂低温琼脂 1.0 g加双蒸水到 50 mL加热到沸腾,溶液均匀后备用1 % 戊二醛固定液25 %(m/v)戊二醛水溶液 2 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 25 mL加双蒸水到50 mL1 % 锇酸固定液2 %(m/v)锇酸水溶液 10 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 10 mL包埋剂A液Epon 812 树脂 50 mL十二烷基琥珀酸酐(modecenyl succinic anhydride, DDSA) 80 mL包埋剂B液Epon 812 树脂 50 mL六甲酸酐(methyl nadic anhydride, MNA) 44.5 mL2 , 4 , 6 - 三甲氨基甲基苯酚( 2, 4, 6 - tridimethylamino methyl phenol, DMP-30 )甲苯胺蓝染液甲苯胺蓝 1 g1 mol/ L NaOH 10 mL加双蒸水到50 mL混匀过滤后使用1 % 醋酸双氧铀染液醋酸双氧铀 0.2 g加双蒸水到10 mL封口膜封口,4℃避光保存1 % 柠檬酸铅染液硝酸铅 0.265 g柠檬酸钠(含2分子结晶水) 0.352 g加双蒸水到10 mL①① 配制铅染液时,要先加水6 mL,超声震荡30 min,使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH,并不是晃动,直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照,即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定,藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定,总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。封口膜封口,4℃保存仪器修块机 Leica EM TRIM切片机 Leica EM UC6光学显微镜 Nikon 80i 及配套拍照系统DS-L1透射电子显微镜 JEOL-1230Gatan Bioscan Camera 792低电压透射电子显微镜 JEM-1230二、实验流程一、 取材与固定A. 植物样品1. 自来水冲洗表面泥尘后,使用灭菌水清洗2-3次,置于铺有预湿滤纸的培养皿中。2. 使用干净锋利的刀片切取目标材料,所取材料体积不大于3 mm3。切取样品时应注意动作迅速、减小损伤,避免来回切拉;使用的灭菌水及器具应4℃预冷,并在操作中尽量保持低温以降低组织细胞活性。3. 将切下材料放入装有预冷的戊二醛固定液的青霉素小瓶中后抽气,抽几次后轻摇小瓶,并打开瓶盖。重复2-3次,直到样品沉入瓶底。4. 室温静置1h,或摇床轻摇1h。5. PBS清洗3次,10min/次。6. 1%锇酸固定液固定1h。7. PBS清洗3次,10min/次。B. 动物样品1. 4℃预冷生理盐水冲洗组织块,迅速切取组织块,体积不大于3 mm32. 将切取的组织块投入装有预冷戊二醛固定液的青霉素小瓶中,并抽气直至样品沉底。3. 室温静置1h,或摇床轻摇1h。4. PBS清洗3次,10 min/次。5. 1%锇酸固定液固定1 h。6. PBS清洗3次,10 min/次。C. 单层培养细胞或悬浮培养细胞样品②1. 3000 rpm离心5 min,收集细胞样品,尽量多的吸弃培养液上清。2. 加入4℃预冷PBS液,充分吹吸混匀,静置4 min,3000 rpm离心5 min,吸弃上清。① 配制铅染液时,要先加水6 mL,超声震荡30 min,使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH,并不是晃动,直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照,即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定,藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定,总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。3. 重复步骤2一次。4. 加入预冷的血清或蛋清,充分吹吸混匀,3000 rpm离心10 min,吸弃大部分上清,留少部分,吹吸悬浮沉淀细胞。(或离心后吸弃上清,留少部分上清,不悬浮沉淀细胞,视样品浓度而定)5. 缓慢加入戊二醛固定液,小心放入4℃冰箱,固定过夜。6. 吸弃上清,刀片小心划开离心管壁,用钳子拉开离心管,小心取出已凝成固体的血清包埋块。7. 使用干净的单面刀片或手术刀,将血清包埋块切成2 mm3左右的小块,取3-5个富集细胞样品效果较好的包埋小块继续下面实验。8. PBS清洗3次,10 min/次。9. 1%锇酸固定液固定1 h。10. PBS清洗3次,10 min/次。D. 藻类及其他游离培养样品1. 吸取2%低温琼脂液200μL到0.2mL离心管,并将离线管置于冰上,取10μL枪头迅速插入琼脂中并保持离心管竖直,且枪头竖直靠中的包裹在琼脂中。2. 静置1 min,待琼脂凝固后,小心拔出枪头,形成琼脂空腔,待用。3. 3000 rpm离心5 min,收集样品,尽量多的吸弃培养液上清。4. 加入4℃预冷PBS液,充分吹吸混匀,静置4min,3000 rpm离心5min,吸弃上清。5. 重复步骤2清洗,吸弃大部分上清,留极少部分上清液,吹吸悬浮样品。6. 使用10μL 移液器小心将样品加入已经制备好的琼脂空腔中,使样品充满空腔大部分,添加过程中尽量避免气泡出现。7. 吸取50μL溶化的琼脂,快速滴加到空腔琼脂上封口,冰浴5 min,待琼脂完全凝固。8. 使用单面刀片小心划开离心管壁,用钳子拉开离心管,小心取出已凝成固体的琼脂包埋块,稍作修葺。9. PBS清洗3次,10 min/次。10. 1%锇酸固定液固定1 h。11. PBS清洗3次,10 min/次。二、 脱水1. 按丙酮与灭菌水体积比3:7配制30%脱水剂。吸弃样品管/瓶中的PBS,快速加入现配的脱水剂(脱水换液过程禁止出现样品暴露空气中现象,可不全部吸完,略有剩余,使样品浸润;动作应迅速准确),室温放置或摇床轻摇45 min。加入按30%、50%、70%、90%、100%(v/v)的浓度梯度进行脱水。2. 配制50%脱水剂,快速换液,室温轻摇45 min。3. 配制70%脱水剂,快速换液,室温轻摇45 min。4. 配制90%脱水剂,快速换液,室温轻摇45 min。5. 使用纯丙酮快速换液,室温轻摇30 min③。6. 重复步骤5一次。三、 渗透包埋在此步脱水操作完成后即可开始配制渗透用包埋剂,以免安排不周。样品浸泡在纯丙酮中时间不宜过久,以免造成样品较脆,不利于超薄切片。1. 配制渗透用树脂包埋剂1) 取干净的10 mL注射器,拔去活塞,用封闭针头堵住注射口,放于通风橱中。2) 小心倾倒B液9 mL到注射器中;然后再小心倾倒A液1 mL。3) 插入活塞,堵住注射器后,颠倒摇匀至液体颜色均匀,无丝状液体。4) 小心拔去活塞,通风橱中操作,缓慢滴加14滴DMP-30。5) 插入活塞,堵住注射器后,颠倒摇匀至液体颜色完全均匀,无丝絮状分色,竖直放置待用。2. 按照包埋剂与丙酮体积比3:7配制30%渗透剂,快速吸弃样品管中纯丙酮并加入渗透剂,轻摇渗透3 h。3. 按照包埋剂与丙酮体积比7:3配制70%渗透剂,快速换液,轻摇渗透过夜。4. 重新配制包埋剂,并小心推按注射器,将包埋剂挤到包埋模具中至液面略凸。5. 解剖针挑取样品到纯包埋剂中,渗透3 h。6. 小心挑取样品,滤纸上稍微沾下吸弃部分粘附的包埋剂,轻轻放置到未渗透过样品的包埋孔中,小心将样品按到底,摆放好位置。记录各样品对应包埋块编号。7. 梯度温度聚合包埋1) 37℃烘箱中12 h,期间定时观察样品有无漂移现象,如有,则再次小心摆放样品位置。2) 45℃烘箱中12 h。3) 60℃烘箱中24 h。四、 修块与切片1. 拿到包埋块后检查样品位置是否得当,选取位置好的包埋块优先进行修块、切片。2. 粗修包埋块1) 使用六角扳手将包埋块固定在样品头上,露出长度合适。2) 将样品头固定在修块机上,体视镜观察修块,分四个方向将包埋块头部多余的包埋剂修去,暴露出组织块。3) 使用锋利的单面刀片修去组织块周围毛刺的包埋剂,使其四边光滑清晰。4) 卸下样品头装至切片机上,使用玻璃刀修片,直至样品表面光滑清晰。3. 半薄切片1) 将粘有水槽的玻璃刀装至切片机刀台上,体视镜下小心对刀,不时转动手轮,使样品上下移动,调整刀台左右角度及样品上下角度,直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮,使整个样品高于刀刃,点控制面板Start,设置切片区域上边界;转动手轮,使整个样品低于刀刃,点控制面板End,设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品,至出现彩色干涉光,继续步进刀台,并通过体视镜观察干涉光谱变化,直至干涉光消失。4) 转动手轮,使样品离开刀刃区域,使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中,体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度,按控制面板Run/Stop键,开始切片。体视镜观察可见900nm厚度切片反光为亮绿色。6) 待有切片下来形成4-6片的切片带,按Run/Stop键停止切片,体视镜观察下,使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃,并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域,根据水膜表面张力捞取切片,放到干净载玻片上,酒精灯略微加热,使水蒸干,并对着光亮用记号笔标示切片所在位置。4. 半薄切片染色1) 吸取20μL甲苯胺蓝染液,滴加到载玻片放有切片的位置,室温静置30 s 。2) 去离子水冲洗玻片,直至不再有蓝色。吸水纸上沥干,酒精灯略微加热,加速切片上的水分蒸发。3) 显微镜观察切片质量和样品位置。5. 精修包埋块1) 移去装有水槽的玻璃刀,取下装有包埋块的样品头,装至修块机上。2) 根据半薄切片结果,使用新的锋利刀口,小心修理包埋块四边,使其尽可能的光滑、平整。6. 超薄切片1) 将钻石刀装至切片机刀台上,体视镜下小心对刀,不时转动手轮,使样品上下移动,调整刀台左右角度及样品上下角度,直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮,使整个样品高于刀刃,点控制面板Start,设置切片区域上边界;转动手轮,使整个样品低于刀刃,点控制面板End,设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品,至出现彩色干涉光,转动手轮,使样品上下移动,调整刀台左右角度及样品上下角度,直至包埋块整个表面与刀刃的干涉光谱颜色一致;继续步进刀台,并通过体视镜观察干涉光谱变化,直至干涉光消失。4) 转动手轮,使样品离开刀刃区域,使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中,体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度,按控制面板Run/Stop键,开始切片。体视镜观察可见70nm厚度切片反光为亮灰色及浅灰色。6) 待有切片下来形成10-20片的切片带,按Run/Stop键停止切片,体视镜观察下,使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃,并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域,根据水膜表面张力捞取切片,轻轻放到干净载膜铜网上,用尖角滤纸靠近铜网边缘缓慢吸干水分。8) 轻轻移去捞片环,将载有切片的铜网放到铺有滤纸的平皿中,晾干待染色观察。五、 染色1. 醋酸双氧铀染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液,13 200 rpm离心5 min。2) 将放有切片的载网小心放到染色盘上,有切片面靠上,并稍微用镊子按载网边缘,使其与染色盘接触粘附牢固。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面,盖上平皿防尘,室温染色30 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中,轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘,更换水洗液,轻摇清洗5min。6) 重复清洗2次。2. 柠檬酸铅染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液,13 200 rpm离心5 min。④2) 在放置染色盘的平皿中放入2片固体NaOH,用以吸收平皿中CO2气体。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面,盖上平皿防尘,室温染色8 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中,轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘,更换水洗液,轻摇清洗5min。连续染色时,载网不需要从染色盘上拿下,清洗后直接进行铅染即可,但是铅染液要现用现取。6) 重复清洗2次。7) 小心夹取载网,放置到铺有滤纸的干净平皿中,晾干待电镜观察。六、 电镜观察1. 取出样品杆,打开样品夹,小心放入载网,合上样品夹,并转动样品杆,轻敲确保样品夹已准确固定载网。2. 将样品杆插入透射电镜样品室,开始抽气。3. 打开灯丝开关,等待检测电流出现后,打开观察窗开始观察。4. 先在低倍下找到切片,再高倍观察切片,寻找待看目标,仔细对焦。5. 将切片目标区域遇到观察窗中间后,调整灯丝电流密度为3.8 pA/cm2。6. 插入拍照CCD,Start View,微调焦距,Start Acquire 拍照。7. 拍照完毕,按格式需求保存照片到指定文件夹。8. 使用专用写保护闪存盘拷贝数据到公共电脑观察、使用。三、应用领域1、材料领域材料的微观结构对材料的力学、光学、电学等物理化学性质起着决定性作用。透射电子显微镜作为材料表征的重要手段,不仅可以用衍射模式来研究晶体的结 构,还可以在成像模式下得到实空间的高分辨像,即对材料中的原子进行直接成像,直接观察材料的微观结构。
  • 琼海市疾病预防控制中心49.50万元采购ATP
    html, body { -webkit-user-select: text } * { padding: 0 margin: 0 } .web-box { width: 100% text-align: center } .wenshang { margin: 0 auto width: 80% text-align: center padding: 20px 10px 0 10px } .wenshang h2 { display: block color: #900 text-align: center padding-bottom: 10px border-bottom: 1px dashed #ccc font-size: 16px } .site a { text-decoration: none } .content-box { text-align: left margin: 0 auto width: 80% margin-top: 25px text-indent: 2em font-size: 14px line-height: 25px } .biaoge { margin: 0 auto /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 25px } .table_content { border-top: 1px solid #e0e0e0 border-left: 1px solid #e0e0e0 font-family: Arial /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 10px margin-left: 15px } .table_content tr td { line-height: 29px } .table_content .bg { background-color: #f6f6f6 } .table_content tr td { border-right: 1px solid #e0e0e0 border-bottom: 1px solid #e0e0e0 } .table-left { text-align: left padding-left: 20px } 基本信息 关键内容: ATP 开标时间: 2021-07-28 10:00 采购金额: 49.50万元 采购单位: 琼海市疾病预防控制中心 采购联系人: 庞女士 采购联系方式: 立即查看 招标代理机构: 海南众诚项目管理有限公司 代理联系人: 蔡工 代理联系方式: 立即查看 详细信息 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 海南省-琼海市 状态:公告 更新时间:2021-07-19 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 2021年07月19日 15:44 公告信息: 采购项目名称 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 品目 货物/医药品/医用材料/其他医用材料 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 行政区域 琼海市 公告时间 2021年07月19日 15:44 获取采购文件的地点 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 获取采购文件时间 2021年07月20日至2021年07月22日每日上午:9:00 至 12:00 下午:14:30 至 17:00(北京时间,法定节假日除外) 预算金额 ¥49.499600万元(人民币) 联系人及联系方式: 项目联系人 蔡工 项目联系电话 0898-32871883 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 采购单位地址 琼海市富海路横南17号 采购单位联系方式 庞女士 0898-62922152 代理机构名称 海南众诚项目管理有限公司 代理机构地址 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 代理机构联系方式 蔡工 0898-32871883 项目概况 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购项目的潜在供应商应在海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房获取采购文件,并于2021年07月28日 10点00分(北京时间)前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号:HNZC2021-006 项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购方式:竞争性谈判 预算金额:49.4996000 万元(人民币) 最高限价(如有):49.4996000 万元(人民币) 采购需求: 2.1项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途:琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额:¥494996.00元(人民币) 2.4资金来源:财政资金 2.5数量:一批,详见《采购需求书》 2.6简要技术要求:详见《采购需求书》 2.7交货时间:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担。 合同履行期限:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 3.本项目的特定资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定; 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证(营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证)加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}; 3.3有依法缴纳税收的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件); 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件); 3.5.财务状况报告(提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件,新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件); 3.6提供参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录的声明函; 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单; 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 三、获取采购文件 时间:2021年07月20日 至 2021年07月22日,每天上午9:00至12:00,下午14:30至17:00。(北京时间,法定节假日除外) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 方式:携以下资料至报名地点现场报名:1.企业法人营业执照(副本)复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明;注:以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司,且必须加盖供应商原始公章。 售价:¥300.0 元(人民币) 四、响应文件提交 截止时间:2021年07月28日 10点00分(北京时间) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 五、开启 时间:2021年07月28日 10点00分(北京时间) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 谈判邀请 海南众诚项目管理有限公司受琼海市疾病预防控制中心委托,就实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目采购进行竞争性谈判采购,欢迎合格的供应商前来谈判。 项目编号:HNZC2021-006 招标项目及范围: 2.1项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途:琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额:¥494996.00元(人民币) 2.4资金来源:财政资金 2.5数量:一批,详见《采购需求书》 2.6简要技术要求:详见《采购需求书》 2.7交货时间:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担。 3. 供应商资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定; 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证(营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证)加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}; 3.3有依法缴纳税收的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件); 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件); 3.5.财务状况报告(提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件,新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件); 3.6提供参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录的声明函; 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单; 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 竞争性谈判文件的获取: 4.1获取竞争性谈判文件的时间:2021年 7 月 20 日 09:00 至 2021年 7 月 22 日17:00 (双休日及法定节假日除外) 4.2获取竞争性谈判文件地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房。获取竞争性谈判文件方式: 携以下资料至报名地点现场报名:1.企业法人营业执照(副本)复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明;注:以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司,且必须加盖供应商原始公章。 4.3获取竞争性谈判文件文件售价:300.00元 响应文件的递交 5.1竞争性谈判时间:2021年 7 月 28 日 10:00 5.2竞争性谈判响应文件递交截止时间:2021年 7 月 28 日 10:00 5.3竞争性谈判响应文件递交地点: 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房。竞争性谈判响应文件开启时间:2021年 7 月 28 日 10:00竞争性谈判响应文件开启地点: 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 其他 7.1公告发布媒介:公告、采购文件修改或澄清等信息,中国政府采购网(http://www.ccgp.gov.cn/)上发布。 7.2采购项目需要落实的政府采购政策:《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 7.3本公告期限为3个工作日。 联系方式 8.1采购人:琼海市疾病预防控制中心 采购人机构所在地点:琼海市富海路横南17号 联系人:庞女士 联系电话: 0898-62922152 8.2代理机构:海南众诚项目管理有限公司 地址:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 项目联系人:蔡工 联系电话:0898-32871883 传 真:0898-32871883 8.3接收质疑函的联系部门、联系电话和通讯地址: 联系部门:项目部 联系电话:0898-32871883 通讯地址:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 八、凡对本次采购提出询问,请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称:琼海市疾病预防控制中心 地址:琼海市富海路横南17号 联系方式:庞女士 0898-62922152 2.采购代理机构信息 名 称:海南众诚项目管理有限公司 地 址:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 联系方式:蔡工 0898-32871883 3.项目联系方式 项目联系人:蔡工 电 话: 0898-32871883 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 $('.clickModel').click(function () { $('.modelDiv').show() }) $('.closeModel').click(function () { $('.modelDiv').hide() }) 基本信息 关键内容:ATP 开标时间:2021-07-28 10:00 预算金额:49.50万元 采购单位:琼海市疾病预防控制中心 采购联系人:点击查看 采购联系方式:点击查看 招标代理机构:海南众诚项目管理有限公司 代理联系人:点击查看 代理联系方式:点击查看 详细信息 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 海南省-琼海市 状态:公告 更新时间: 2021-07-19 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 2021年07月19日 15:44 公告信息: 采购项目名称 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 品目 货物/医药品/医用材料/其他医用材料 采购单位 琼海市疾病预防控制中心行政区域 琼海市 公告时间 2021年07月19日 15:44 获取采购文件的地点 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 获取采购文件时间 2021年07月20日至2021年07月22日每日上午:9:00 至 12:00 下午:14:30 至 17:00(北京时间,法定节假日除外) 预算金额 ¥49.499600万元(人民币) 联系人及联系方式: 项目联系人 蔡工 项目联系电话 0898-32871883 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 采购单位地址 琼海市富海路横南17号 采购单位联系方式 庞女士 0898-62922152 代理机构名称 海南众诚项目管理有限公司 代理机构地址 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 代理机构联系方式 蔡工 0898-32871883 项目概况 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购项目的潜在供应商应在海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房获取采购文件,并于2021年07月28日 10点00分(北京时间)前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号:HNZC2021-006 项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购方式:竞争性谈判 预算金额:49.4996000 万元(人民币) 最高限价(如有):49.4996000 万元(人民币) 采购需求: 2.1项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途:琼海市疾病预防控制中心工作需要2.3预算金额:¥494996.00元(人民币) 2.4资金来源:财政资金 2.5数量:一批,详见《采购需求书》 2.6简要技术要求:详见《采购需求书》 2.7交货时间:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担。 合同履行期限:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求: 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定; 2.落实政府采购政策需满足的资格要求: 《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 3.本项目的特定资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定; 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证(营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证)加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}; 3.3有依法缴纳税收的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件); 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录(提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件); 3.5.财务状况报告(提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件,新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件); 3.6提供参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录的声明函; 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单; 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 三、获取采购文件 时间:2021年07月20日 至 2021年07月22日,每天上午9:00至12:00,下午14:30至17:00。(北京时间,法定节假日除外) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 方式:携以下资料至报名地点现场报名:1.企业法人营业执照(副本)复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明;注:以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司,且必须加盖供应商原始公章。 售价:¥300.0 元(人民币) 四、响应文件提交 截止时间:2021年07月28日 10点00分(北京时间) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 五、开启 时间:2021年07月28日 10点00分(北京时间) 地点:海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 谈判邀请 海南众诚项目管理有限公司受琼海市疾病预防控制中心委托,就实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目采购进行竞争性谈判采购,欢迎合格的供应商前来谈判。 项目编号:HNZC2021-006 招标项目及范围: 2.1项目名称:实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途:琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额:¥494996.00元(人民币) 2.4资金来源:财政资金 2.5数量:一批,详见《采购需求书》 2.6简要技术要求:详见《采购需求书》 2.7交货时间:自合同签订日起1年计算,配送所产生的一切费用均由采购方承担。 3. 供应商资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定; 3.2联系方式:蔡工 0898-32871883 3.项目联系方式 项目联系人:蔡工 电 话: 0898-32871883
  • 金坛亿通浮游菌微生物采样器在云南鲁甸地震灾区疫情防治中的应用
    2014年8月3日下午,云南鲁甸发生6.5级地震,全国人民全力在帮助灾区恢复生产和重建,但人员伤亡年。灾区的防疫也成为相关部门的重点,消毒和检测,已经成为工作重点。金坛亿通生产的EKC-1浮游菌微生物采样器是一种高效的多孔吸入式尘菌采样器。它根据等速采样理论设计, 采样直接, 采集头口风速与洁净室内风速基本一致, 能更准确地反映洁净室内的微生物浓度。采样时,带尘菌空气高速通过微孔,被均匀撞击在培养皿内的琼脂表面;这些活体微生物在琼脂表面获得营养均匀和充分,在培养过程中,快速发生动态再水化过程,高速生长,从而更快得出结果 浮游菌微生物采样器设计合理,性能稳定,操作方便,其主要性能指标达到了国外同类仪器的先进水平。是药厂、医疗器械厂及其监测部门为贯彻GMP第十五条,对“洁净室(区)内空气的微生物数”进行“定期监测”的理想仪器。使用环境温度:10--35℃,相对湿度:10--90﹪RH,大气压力:80—110kPa,最大风速:1m/s,最大含尘浓度:100000000颗/ m3@0.5μm 或0.2mg/m3浮游菌微生物采样器用途:●室内空气质量 ●过滤器和洁净室的效率研究 ●药用产品●医院环境 ●食品加工厂 ●细菌生长浮游菌采样器参数:采样流量:100L/min。 定流量采样可从1~9999L任意设定。定时采样可从1~9999min,可任意设定使用标准通用培养皿Φ90*15采样头为无数微孔,使微生物均匀分布在琼脂表面,减少了尘菌重叠,降低了微生物计数误差。采样头口流速:0.38m/s 与洁净室内风速基本相同(等速采样)。电源:交直流两用,可充电电池DC7.4V, 充好电后可连续工作4h。浮游菌微生物采样器,微生物采样器,采样器,多孔吸入式尘菌采样器浮游菌微生物采样器配置:主机:一套撞击器:采样头一个 三脚架:一台操作手册:一份 连接管等专用附件:一套铝合金手提箱:一个 充电器 一只
  • 质粒抽提的基本原理及操作流程
    质粒抽提的基本原理及操作流程⒈质粒抽提基本原理在其中采用几种水溶液及其硅酸化学纤维膜(超滤膜柱)。 水溶液Ⅰ:50 mM果糖 / 25 mMTris-HCl/ 10 mMEDTA,pH 8.0;水溶液Ⅱ:0.2 N NaOH / 1%SDS; 水溶液Ⅲ:3 M 醋酸钾/ 2 M 醋酸/75%乙醇。水溶液Ⅰ果糖是使飘浮后的大肠埃希菌不容易迅速堆积到水管的底端;EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属材料正离子的螯合剂,其关键目地是以便鳌合二价金属材料正离子进而达到抑制DNase的特异性;可加上RNase A消化吸收RNA。水溶液Ⅱ此步为碱解决。在其中NaOH关键是以便融解体细胞,释放出来DNA,由于在强偏碱的状况下,细胞质产生了从两层膜结构工程向微囊构造的转变。SDS与NaOH联用,其目地是以便提高NaOH的强偏碱,一起SDS做为阳离子表活剂毁坏脂两层膜。那步要记牢二点:首位,时间不可以太长,由于在那样的偏碱标准下基因组DNA-p段也会渐渐地破裂;其次,务必温柔混和,要不然基因组DNA会破裂。水溶液Ⅲ水溶液III的功效是沉定蛋白质和中和反应。在其中醋酸钾是以便使钾离子换置SDS中的钾离子而产生了PDS,由于十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulfate)碰到钾离子后变为了十二烷基硫酸钾 (potassium dodecylsulfate, PDS),而PDS不是溶水的,一起1个SDS分子结构均值融合2个碳水化合物,钾钠正离子换置所造成的很多沉定大自然就将绝大多数蛋白沉定了。2 M的醋酸是以便中合NaOH。基因组DNA如果产生破裂,要是是50-100 kb尺寸的片段,就没有方法再被 PDS共沉淀了,因此碱解决的时间要短,并且不可猛烈震荡,要不然蕞终获得的质粒上都会有很多的基因组DNA渗入,琼脂糖电泳能够 观查到这条浓浓总DNA条带。75%乙醇关键是以便清理盐分和抑止Dnase;一起水溶液III的强酸碱性都是以便使DNA尽快融合在硅酸化学纤维膜上⒉质粒抽提流程⑴应用质粒提取试剂盒获取质粒时请参照实际试剂盒的操作指南。如Omega企业的E.Z.N.A.? Plasmid Mini Kit I, Q(capless) Spin (质粒提取盒)。⑵碱裂解手提式法:此方式适用少量质粒DNA的获取,获取的质粒DNA可立即用以酶切、PCR测序、银染编码序列分析。方式给出:①接1%含质粒的大肠埃希菌体细胞于2mlLB培养液。②37℃震荡塑造留宿。③取1.5ml菌体于Ep管(离心管),以4000rpm抽滤3min,弃上清液。④加0.lml水溶液I(1%果糖,50mM/LEDTApH8.0,25mM/LTris-HClpH8.0)充足混和。⑤添加0.2ml水溶液II(0.2mM/LNaOH,1%SDS),轻轻地旋转搅拌,放置冰浴5min.⑥添加0.15m1预冷水溶液III(5mol/LKAc,pH4.8),轻轻地旋转搅拌,放置冰浴5min.⑦以10,000rpm抽滤20min,取上清液于另翻新Ep管。⑧添加等容积的异戊醇,搅拌后静放10min.⑨以10,000rpm抽滤20min,弃上清。⑩用70%酒精0.5ml清洗一回,吸干全部液体。待沉定干躁后,溶解50ulTE缓冲液中(或60℃温育双蒸水)。
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    项目编号:ZBL-2022-027项目名称:新建海口市琼山区疾病预防控制中心实验室设备设施采购项目。预算金额:980.20万元,最高限价:980.20万元。采购需求:新建海口市琼山区疾病预防控制中心实验室设备设施采购项目。详见“第五章采购需求”。合同履行期限(交货期):进口产品:自合同签订生效之日起60日历日内交付合同标的设备到货、安装调试并验收合格;国产产品:自合同签订生效之日起30日历日内交付合同标的设备到货、安装调试并验收合格。
  • 活体成像中荧光色素标记细胞的方法举例
    活体光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)技术与荧光(fluorescence)技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,今天,生物发光标记物可以标记到任何一种基因上,使对基因功能的全面细致研究成为现实。而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进行标记,利用荧光蛋白在外源光源或是内源发光照射下被激发产生的荧光作为检测信号。研究人员能够利用一套非常灵敏的光学检测仪器直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为。 该技术可被广泛应用于标记细胞或基因的示踪及检测;基因治疗在活体动物体内直接的观察和检测;基因组、蛋白组学、药学及生物技术在活体动物内的研究;药物及化学合成药物的药物代谢及毒理学监测;食品菌落生长成像;皮肤医学中皮肤疾病的体内成像;法医鉴定;微孔板成像,例如:免疫分析、报告基因、基因探针和嗜菌作用分析等;荧光团的体内成像,例如:Alzheimer疾病研究中结合嗪的β-淀粉沉淀物分析;转基因植物中通过报告基因对生理周期节奏的研究;凝胶成像分析等等。 但在研究过程中,研究者们必须事先用基因技术进行荧光素酶基因标记,或者某种荧光报告基团标记。目前活体光学成像系统的知名制造商,如Berthold、GE、Xenogen、Photometrics、Carestream Health等,不仅为客户提供先进的仪器,也提供具体实验所需的整套解决方案,包括试剂、实验手册、特殊用途的质粒、细胞株、转基因动物、细胞处理和动物处理设施等配套技术支持。出色的多任务处理能力,人性化的整体设计,便捷精确的操作系统,使实验室影像分析领域进入了一个全新的时代。 下面以研究干细胞活体移植后的存活率为例,简介一两种内源性荧光色素标记的实验方法,供专业人士参考。 用荧光色素DiD标记 间充质干细胞 1. 先用胰蛋白酶消化待标记材料,使之成为一定密度的悬浮液; 2. 从细胞培养箱中取出间充质干细胞,吸取含原有培养基的细胞悬浮液进行标记; 3. 用10 ml Mg/Ca-free PBS (不含钙镁离子的磷酸缓冲液)清洗细胞,吸去PBS, 钙镁离子会影响胰蛋白酶的活性,必须小心; 4. 加入预热的0.05% 胰蛋白酶液,加液量以T75型瓶为例,每瓶加5ml, 确保瓶的表面被完全覆盖; 5. 在细胞培养箱中37° C 孵育约 5 分钟; 6. 然后在显微镜下确认细胞已经完全分散,如果有细胞贴壁情况,轻拍若干次或延长孵育时间直至酶解消化完全成功; 7. 加入等量含 10% FCS的培养基中和胰蛋白酶; 8. 用移液器反复吸取几次确保细胞均匀分散; 9. 然后移取细胞悬浮液至15ml 已灭菌的有盖聚丙烯离心管中; 10. 400 RCF离心5 分钟; 11. 小心移去上清液,不要扰动细胞; 12. 将细胞重新悬浮于DMEM 并进行计数; 13. 需要待标记细胞在无血清DMEM溶液中的密度应为1x106 /ml ; 14. 每ml细胞悬浮液加入5 ?L DiD 染色液; 15. 用移液器将染色液与细胞悬浮液混合均匀; 16. 在6孔低附着性细胞板上37 °C 孵育20分钟; 17. 孵育完全后移取细胞悬浮液至15ml 已灭菌的有盖聚丙烯离心管中; 18. 400 RCF离心5 分钟; 19. 小心移去染色液,不要扰动细胞; 20. 用PBS清洗细胞,用移液器反复吸取几次确保细胞均匀分散; 21. 重复洗三次; 22. 细胞重新计数并用台盼蓝染色法检测细胞活性; 23. 可以进行活细胞成像了! 用荧光色素ICG标记 人胚胎干细胞 1. 必须先准备好吲哚菁绿溶液(血容量、心输出量、肝功能测定剂)作为对照品 ,然后使之与转染试剂鱼精蛋白(抗凝血作用)混合; 2. 测出1ml吲哚菁绿溶液的活力,然后在100 ?L DMSO中溶解ICG; 3. 向混合物中加入 400 ?L Dulbecco的改良Eagles 培养基 (DMEM + 10% 胎牛血清), 震荡均匀,吲哚菁绿溶液终浓度为2mg/ml; 4. 加入转染试剂鱼精蛋白,鱼精蛋白作为对照品的载体,使之能够有效进入细胞; 5. 在300 ?L ICG 和 300 ?L 无血清Dulbecco改良 Eagles 培养基中混入 5 ?L 硫酸鱼精蛋白溶液, 使之终浓度为 10mg/ml,; 6. 震荡5分钟使之形成复合物,标记溶液制备完毕; 7. 从 hESC 10mm Petri 培养皿中移去原有培养基; 8. 加入5ml预热的 DMEM; 9. 加入制备好的鱼精蛋白/ICG 溶液, 37 °C下孵育1h; 10. 孵育完全后移去染色液; 11. 用5 ml PBS漂洗培养皿以清除染色液; 12. 移去 PBS 再加入 5ml 0.25 % 胰蛋白酶液,37 °C下孵育5分钟使之酶解,适当震摇培养皿效果会更好; 13. 用移液器反复吸取几次确保细胞均匀分散; 14. 加入等量含 10% KSR的培养基中和胰蛋白酶; 15. 然后移取细胞悬浮液至15ml 已灭菌的有盖聚丙烯离心管中,400 RCF离心5 分钟; 16. 在全培养基中悬浮细胞; 17. 如果还有细胞团块,可以移去原有培养基用10ml预热的全ESC培养基重新悬浮细胞,重复酶解再离心; 18. 在这一点上,鼠源饲喂细胞需从hESCs中分离; 19. 然后将细胞悬浮液移至涂布琼脂的10 cm 培养皿中; 20. 37 °C 孵育 45 分钟,注意不要晃动培养皿,如此鼠源饲喂细胞会贴壁而干细胞保持悬浮; 21. 从Petri 培养皿中移出已标记的单细胞人胚胎干细胞悬浮液; 22. 细胞重新计数并用台盼蓝染色法检测细胞活性; 23. 可进行活细胞成像了!
  • 默克培养基促销,库存有限,售完即止!
    货号 品名 清仓价格 应用 1.02239.0500 Peptone from casein 236 酪蛋白胨,基础原料 1.07212.0500 Peptone from soya bean 236 大豆蛋白胨,基础原料 1.10493.0500 Brain heart broth 273 脑心浸液,苛养菌培养 1.07228.5000 Peptone water 1050 通用增菌液 1.00466.0500 DRBC 琼脂 945 玫瑰红钠培养基添加绿霉素,酵母霉菌计数 1.05978.0500 OGYZ AGAR 336 奶制品中的酵母霉菌 1.05448.0500 WORT AGAR 546 真菌,酵母菌 1.10866.0500 WL nutrient agar 525 啤酒当中的酵母、细菌 1.01347.0500 EMB agar 578 伊红美兰琼脂,肠道菌、大肠杆菌 1.01406.5000 VRB-AGAR 3675 肠道菌,大肠杆菌 1.04030.0500 VRB Agar 525 肠道菌,大肠杆菌 1.04044.0500 ENDO agar 483 肠道菌,大肠杆菌 1.07237.0500 Brilliant green agar 315 肠道菌 1.05470.0500 SIM medium 945 肠道菌 1.07500.0002 RAMBACH-AGAR 578 肠道菌,大肠杆菌显色培养 1.10765.0500 EC broth for microbiology 420 肠道菌,大肠杆菌 1.14582.0500 m-EC-broth with Novobioci 1050 新生霉素添加剂,肠道菌 1.10426.0500 COLIFORM Agar 1575 水质肠道菌 1.05222.0500 Kanamycin esculin 525 肠球菌 1.10859.0500 Tryptone water 420 生化鉴定试验,吲哚反应 1.05405.0500 VOGEL JOHNSON agar 840 金黄色葡萄球菌 1.07004.0500 Oxford listeria 945 奶制品单增李斯特菌 1.10398.0500 FRASER Listeria Selective 315 李斯特菌 1.10399.0001 FRASER Listeria Selective 420 李斯特菌 1.10549.0500 LISTERIA ENRICHMENT BROTH 383 李斯特增菌液 1.10661.0500 MRS-broth lactobacillus 378 乳酸菌检查 1.10988.0500 Pseudomonas agar 1155 水质假单胞菌 1.10989.0500 Pseudomonas agar 1155 水质假单胞菌 1.00888.0001 Fluorocukt TSC Agar 483 梭菌显色培养基 1.11972.0500 TSC agar 473 梭菌,厌氧菌 1.10259.0500 DCA AGAR 630 梭菌,厌氧菌 1.13825.0500 Brain heart agar 735 苛养菌生长 1.00445.0500 Universal Beer Agar 630 啤酒腐败菌 1.07667.0500 SS agar 840 沙门氏,志贺氏菌
  • 实验室安全需知之【废液处理】
    p style=" text-align: justify "   实验室的废液种类多、成分复杂,具有经常性、间歇性、分散性等特点,难于统一处理,这就需要加强实验室安全管理,建立实验室废液污染防治体系。 /p p style=" text-align: justify "    strong 实验室废液主要包括: /strong /p p style=" text-align: justify "   1.实验操作过程中产生的各种强酸、强碱、有机溶液等 /p p style=" text-align: justify "   2.清洗各种实验用具和设备 (各种玻璃容器、进样瓶、制样设备等)时产生的废液 /p p style=" text-align: justify "   3.设备冷却装置(如各种蒸馏冷却装置、仪器设备冷却装置等)产生的废液。 /p p style=" text-align: justify "   这些废液应按其性质、成分等采取不同的处理方式。有的废液可以回收利用其中有用的物质,有的可以直接排至外部排水管网,有的则采用适当方法处理,然后再排外部管网。 /p p style=" text-align: justify "   例如:一般设备冷却水经使用后仅水温有所升高,这类废液不经处理就可排人水体或外部排水管网:有的经简单的处理还可重复使用,用于实验用具的清洗等过程 有的废液含有毒有害物质、放射性物质,则需经适当处理或间收利用其有用的物质后,使之符合国家规定的排放标准,才可排人水体或外部排放管网。 /p p style=" text-align: justify "    strong 实验室废液处理 /strong /p p style=" text-align: justify "   收集的实验室废液应有适当的贮存场所,避免高温、日晒、雨淋以及应有防漏和防渗设施,最好放置在有抽气设备的贮存柜中或存放于有换气设备的房间中。贮存容器应明显标示其种类与性质,不同类型的废液应分别贮存,不同类型废液容器不可混贮。 /p p style=" text-align: justify "   对高浓度废酸、废碱液要经中和至中性时排放。对于含少量被测物和其他试剂的高浓度有机溶剂应回收再用。用于回收的高浓度废液应集中储存,以便回收 低浓度的经处理后排放,应根据废液性质确定储存容器和储存条件,不同废液一般不允许混合,避光、远离热源、以免发生不良化学反应。废液储存容器必须贴上标签、写明种类、储存时间等。 /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " strong 含不同化学物质的废液处理方法 /strong /span /p p style=" text-align: justify "   含 span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 汞、铬、铅、镉、砷、酚、氰 /span 的废液必须经过处理达标后才能排放,实验室处理方法如下: /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " i 含汞、铅、镉废弃物的处理 /i /span /p p style=" text-align: justify "   若不小心将金属汞散落在实验室里(如打碎温度计)必须及时清除。如用滴管或用在硝酸汞的酸性溶液中浸过得薄铜片、铜丝收集与烧杯中用水覆盖。散落在地面上的汞颗粒应撒上硫磺粉,生成毒性较小的硫化汞 或喷上用盐酸酸化过的高锰酸钾溶液(5:1000体积比),过1至2小时后清除 或喷上20%三氯化铁水溶液,干后再清除(但该方法不能用于金属表面,会产生腐蚀)。 /p p style=" text-align: justify "   对于含汞废液的处理,可先将废液调至PH8~10家入过量硫化钠,使其生成硫化汞沉淀,再加入硫酸亚铁作为共沉淀剂,生成硫化铁沉淀可将硫化汞微粒吸附沉淀,然后静止分离,清液可排放,残渣可用焙烧法回收汞或制成汞盐。 /p p style=" text-align: justify "   用碱将废液PH调至8~10,生成Pb(OH)2和Cd(OH)2沉淀,再加入硫酸亚铁作为共沉淀剂,沉淀物可与其他无机物混合进行烧结处理,清液排放。 /p p style=" text-align: justify "   i span style=" color: rgb(0, 112, 192) "  含铬、砷、酚、氰废弃物的处理 /span /i /p p style=" text-align: justify "   含铬废液中加入还原剂,如硫酸亚铁、亚硫酸钠、铁屑,在酸性条件下将六价铬还原成三价铬,然后加入碱,如氢氧化钠、氢氧化钙碳酸钠等,使三价格形成Cr(OH)3沉淀,清液可排放。沉淀干燥后可用焙烧法处理,使其与煤渣一起焙烧,处理后可填埋。 /p p style=" text-align: justify "   加入氧化钙,使PH为8,生成砷酸钙和亚砷酸钙沉淀,在Fe3+存在时共沉淀。或使溶液PH大于10,加入硫化钠,与砷反应生成难容、低毒的硫化砷沉淀。产生含砷气体的试验在通风橱中进行。 /p p style=" text-align: justify "   低浓度含酚废液可加入次氯酸钠或漂白粉,使酚氧化城市和二氧化碳。高浓度可使用丁酸乙脂萃取,在用少量氢氧化钠溶液反复萃取。调解PH后,进行重蒸馏,提纯后使用。 /p p style=" text-align: justify "   低浓度废液可加入氢氧化钠调节PH为10以上,再加入高锰酸钾粉末(3%),使氰化物分解。若是高浓度的,可使用碱性氯化法处理,先用碱调至PH为10以上,加入次氯酸钠或漂白粉。经充分叫板,氢化物分解为二氧化碳和氮气,放置24小时排放。含氰化物费也不得乱倒或与酸混合,生成挥发性氰化氢气体有剧毒。 /p p style=" text-align: justify "    strong 废液的回收使用: /strong /p p style=" text-align: justify "   加强试剂回收利用不仅可以减少实验室废液产生的总量,同时又节省了实验室的费用支出。例如实验室中部分有机溶剂不直接参与化学反应,使用后杂志含量少,可通过蒸馏、萃取、吸附等方法回收提纯,监测后可再次使用。 /p p style=" text-align: justify "   混合废液 /p p style=" text-align: justify "   互不作用的废液可用铁粉处理。调节废液PH3-4,加入铁粉,搅拌半小时,用碱调节PH 9左右,搅拌10分钟,加入高分子混凝剂沉淀,清液可排放,沉淀物作为废渣处理。 /p p style=" text-align: justify "   三氯甲烷的回收 /p p style=" text-align: justify "   将三氯甲烷废液一次用水、浓硫酸(三氯甲烷量的十分之一)、纯水、盐酸羟胺溶液(0.5% AR)洗涤。用重蒸馏水洗涤两次,将洗好的三氯甲烷用污水氯化钙脱水,放置几天,过滤,蒸馏。蒸馏速度为每秒1~2滴,收集沸程为60~62摄氏度的馏出液(标框下),保存于棕色试剂瓶中(不可用橡胶塞)。 /p p style=" text-align: justify "   实验室 strong 废液处理方式: /strong /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 1.焚烧法 /span /p p style=" text-align: justify "   ①将可燃性物质的废液,置于燃烧炉中燃烧。如果数量很少,可把它装入铁制或瓷制容器,选择室外安全的地方把它燃烧。点火时,取一长棒,在其一端扎上沾有油类的破布,或用木片等东西,站在上风方向进行点火燃烧。并且,必须监视至烧完为止。 /p p style=" text-align: justify "   ②对难于燃烧的物质,可把它与可燃性物质混合燃烧,或者把它喷入配备有助燃器的焚烧炉中燃烧。对多氯联苯之类难于燃烧的物质,往往会排出一部份还未焚烧的物质,要加以注意。对含水的高浓度有机类废液,此法亦能进行焚烧。 /p p style=" text-align: justify "   ③对由于燃烧而产生NO2 SO2 或HCl 之类有害气体的废液,必须用配备有洗涤器的焚烧炉燃烧。此时,必须用碱液洗涤燃烧废气,除去其中的有害气体。 /p p style=" text-align: justify "   ④对固体物质亦可将其溶解于可燃性溶剂中然后使之燃烧。 /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 2.溶剂萃取法 /span /p p style=" text-align: justify "   ①对含水的低浓度废液,用与水不相混合的正己烷之类挥发性溶剂进行萃取,分离出溶剂层后,把它进行焚烧。再用吹入空气的方法,将水层中的溶剂吹出。 /p p style=" text-align: justify "   ②对形成乳浊液之类的废液,不能用此法处理,要用焚烧法处理。 /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 3.吸附法 /span /p p style=" text-align: justify "   用活性炭硅藻土矾土层片状织物聚丙烯聚酯片氨基甲酸乙酯泡沫塑料稻草屑及锯末之类能良好吸附溶剂的物质使其充分吸附后与吸附剂一起焚烧。 /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 4.氧化分解法 /span /p p style=" text-align: justify "   在含水的低浓度有机类废液中,对其易氧化分解的废液,用H2O2 KMnO4 NaOCl H2SO4+HNO3 HNO3+HClO4 H2SO4+HClO4 及废铬酸混合液等物质,将其氧化分解。然后,按上述无机类实验废液的处理方法加以处理。 /p p style=" text-align: justify "    span style=" color: rgb(0, 112, 192) " 5.水解法 /span /p p style=" text-align: justify "   对有机酸或无机酸的酯类,以及一部份有机磷化合物等容易发生水解的物质,可加入氢氧化钠或氢氧化钙, 在室温或加热下进行水解。水解后,若废液无毒害时,把它中和、稀释后,即可排放。如果含有有害物质时,用吸附等适当的方法加以处理。 /p p style=" text-align: justify "   span style=" color: rgb(0, 112, 192) "  6.生物化学处理法 /span /p p style=" text-align: justify "   用活性污泥之类东西并吹入空气进行处理。例如,对含有乙醇、乙酸、动植物性油脂、蛋白质及淀粉等的稀溶液,可用此法进行处理。 /p p style=" text-align: justify "  & nbsp strong 含一般有机溶剂的废液: /strong /p p style=" text-align: justify "   一般有机溶剂是指醇类、酯类、有机酸酮及醚等由C、H、O 元素构成的物质。对此类物质的废液中的可燃性物质,用焚烧法处理。对难于燃烧的物质及可燃性物质的低浓度废液,则用溶剂萃取法、吸附法及氧化分解法处理。再者,废液中含有重金属时,要保管好焚烧残渣。但是,对其易被生物分解的物质(即通过微生物的作用而容易分解的物质),其稀溶液经用水稀释后,即可排放。 /p p style=" text-align: justify "   含石油动植物性油脂的废液此类废液包括:苯、已烷、二甲苯、甲苯、煤油、轻油、重油、润滑油、切削油、机器油、动植物性油脂及液体和固体脂肪酸等物质的废液。对其可燃性物质,用焚烧法处理。对其难于燃烧的物质及低浓度的废液,则用溶剂萃取法或吸附法处理。对含机油之类的废液,含有重金属时,要保管好焚烧残渣。 /p p style=" text-align: justify "    strong 生物实验室废液处理: /strong /p p style=" text-align: justify "   生物实验室产生的废液污染主要是化学性污染和生物性污染,另外还有放射性污染。 /p p style=" text-align: justify "   化学性污染包括有机物污染和无机物污染。有机物污染主要是有机试剂污染和有机样品污染。在大多数情况下,实验室中的有机试剂并不直接参与发生反应,仅仅起溶剂作用,因此消耗的有机试剂以各种形式排放到周边的环境中,排放总量大致就相当于试剂的消耗量。日复一日,年复一年,排放量十分可观。有机样品污染包括一些剧毒的有机样品,如农药、苯并(α)芘、黄曲霉毒素、亚硝胺等。无机物污染有强酸、强碱的污染,重金属污染,氰化物污染等。其中汞、砷、铅、镉、铬等重金属的毒性不仅强,且有在人体中有蓄积性。 /p p style=" text-align: justify "   生物性污染包括生物废弃物污染和生物细菌毒素污染。生物废弃物有检验实验室的标本,如血液、尿、粪便、痰液和呕吐物等 检验用品,如实验器材、细菌培养基和细菌阳性标本等。生物实验室的通风设备设计不完善或实验过程个人安全保护漏洞,会使生物细菌毒素扩散传播,带来污染,甚至带来严重不良后果。2003年非典流行肆虐后,许多生物实验室加强对SAS病毒的研究,之后报道的非典感染者,多是科研工作者在实验室研究时被感染的。 /p p style=" text-align: justify "   在对这些污染处理的时候,需要注意以下几个方面: /p p style=" text-align: justify "   废液的浓度超过规定的浓度时,必须进行处理。但处理设施比较齐全时,往往把废液的处理浓度限制放宽。 /p p style=" text-align: justify "   最好先将废液分别处理,如果是贮存后一并处理时,虽然其处理方法将有所不同,但原则上要将可以统一处理的各种化合物收集后进行处理。 /p p style=" text-align: justify "   处理含有络离子、螯合物之类的废液时,如果有干扰成份存在,要把含有这些成份的废液另外收集。 /p p style=" text-align: justify "    strong 下列废液不能互相混合: /strong /p p style=" text-align: justify "   ①过氧化物与有机物 /p p style=" text-align: justify "   ②氰化物、硫化物、次氯酸盐与酸 /p p style=" text-align: justify "   ③盐酸、氢氟酸等挥发性酸与不挥发性酸 /p p style=" text-align: justify "   ④浓硫酸、磺酸、羟基酸、聚磷酸等酸类与其它的酸 /p p style=" text-align: justify "   ⑤铵盐、挥发性胺与碱。 /p p style=" text-align: justify "   要选择没有破损及不会被废液腐蚀的容器进行收集。将所收集的废液的成份及含量,贴上明显的标签,并置于安全的地点保存。特别是毒性大的废液,尤要十分注意。 /p p style=" text-align: justify "   对硫醇、胺等会发出臭味的废液和会发生氰、磷化氢等有毒气体的废液,以及易燃性大的二硫化碳、乙醚之类废液,要把它加以适当的处理,防止泄漏,并应尽快进行处理。含有过氧化物、硝化甘油之类爆炸性物质的废液,要谨慎地操作,并应尽快处理。 含有放射性物质的废弃物,用另外的方法收集,并必须严格按照有关的规定,严防泄漏,谨慎地进行处理。 /p p style=" text-align: justify "    strong 生物类废物: /strong /p p style=" text-align: justify "   生物类废物应根据其病源特性、物理特性选择合适的容器和地点,专人分类收集进行消毒、烧毁处理,日产日清。 /p p style=" text-align: justify "   液体废物一般可加漂白粉进行氯化消毒处理。固体可燃性废物分类收集、处理、一律及时焚烧。固体非可燃性废物分类收集,可加漂白粉进行氯化消毒处理。满足消毒条件后作最终处置。 /p p style=" text-align: justify "   1.一次性使用的制品如手套、帽子、工作物、口罩等使用后放入污物袋内集中烧毁。 /p p style=" text-align: justify "   2.可重复利用的玻璃器材如玻片、吸管、玻瓶等可以用1000-3000mg/L有效氯溶液浸泡2-6h.然后清洗重新使用,或者废弃。 /p p style=" text-align: justify "   3.盛标本的玻璃、塑料、搪瓷容器可煮沸15min.或者用1000mg/L有效氯漂白粉澄清液浸泡2-6h,消毒后用洗涤剂及流水刷洗、沥干 用于微生物培养的,用压力蒸汽灭菌后使用。 /p p style=" text-align: justify "   4.微生物检验接种培养过的琼脂平板应压力灭菌30min,趁热将琼脂倒弃处理。 /p p style=" text-align: justify "   5.尿、唾液、血液等生物样品,加漂白粉搅拌后作用2-4h,倒入化粪池或厕所。或者进行焚烧处理。 /p p style=" text-align: justify "    strong 放射性废弃物: /strong /p p style=" text-align: justify "   一般实验室的放射性废弃物为中低水平放射性废弃物,将实验过程中产生的放射性废物收集在专门的污物桶内,桶的外部标明醒目的标志,根据放射性同位素的半衰期长短,分别采用贮存一定时间使其衰变和化学沉淀浓缩或焚烧后掩埋处理。 /p p style=" text-align: justify "   1.放射性同位素的半衰期短(如:碘131、磷32等)的废弃物,用专门的容器密闭后,放置于专门的贮存室,放置十个半衰期后排放或者焚烧处理。 /p p style=" text-align: justify "   2.放射性同位素的半衰期较长(如:铁59、钻60等)的废弃物,液体可用蒸发、离子交换、混凝剂共沉淀等方法浓缩,装入容器集中埋于放射性废物坑内。 /p p /p
  • 阴沟肠杆菌的发病机制与预防治疗及研究进展!
    阴沟肠杆菌的发病机制与预防治疗及研究进展! 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)是肠杆菌目肠杆菌科肠杆菌属的一种细菌,广泛存在于自然界中,在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出,是肠道正常菌种之一。 一、菌株简介 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)广泛存在于自然界中,在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出是肠道正常菌种之一,但可作为条件致病菌随着头孢菌素的广泛使用阴沟肠杆菌已成为医院感染越来越重要的病原菌,其引起的细菌感染性疾病,常累及多个器官系统,包括皮肤软组织感染、泌尿道感染呼吸道感染以及败血症等由于阴沟肠杆菌能产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBLs)和Amp C酶耐药情况严重,给临床治疗带来了新的挑战。 二、致病病因 阴沟肠杆菌是肠杆菌科肠杆菌属的成员之一。该菌为革兰阴性粗短杆菌,宽约0.6~1.1μm,长约1.2~3.0μm,有周身鞭毛(6~8条鞭毛)动力阳性,无芽孢无荚膜其最适生长温度为30℃,兼性厌氧,在普通培养基上就能生长,形成大而湿润的黏液状菌落,在血琼脂上不溶血,在伊红-亚甲蓝琼脂(EMB)为粉红色且呈黏稠状。在麦康凯(MacConkey)琼脂上为粉红色或红色,呈黏稠状。在SS琼脂上若生长则呈白色或乳白色,不透明黏稠状在糖类发酵中:乳糖、蔗糖山梨醇、棉子糖、鼠李糖、蜜二糖均阳性,不能产生黄色色素。鸟氨酸脱羧酶试验(+),精氨酸双水解酶试验(+),赖氨酸脱羧酶试验(-),吲哚(-)。阴沟肠杆菌具有O,H和K三种抗原成分。大多数菌株的培养物煮沸100℃ 1h后能强烈地与同源O血清发生凝集。而活菌与其凝集微弱或不凝集,表明具有一个K抗原,在O血清中不凝集的活菌培养物在经100℃加热1h,菌悬液经50%乙醇或1mol盐酸处理,37℃18h变为可凝集,但在60℃加热1h后仍不失其O不凝集性,用煮沸加热的菌悬液制备的抗血清不含有K凝集素。由阪崎建立的阴沟肠杆菌抗原表由53个O抗原群、56个H抗原及79个血清型所组成。 ①O抗原:玻片凝集试验是测定阴沟肠杆菌的常规方法,过夜琼脂培养物的浓盐水菌液,加热100℃1h用离心法洗涤,与稀释的O血清用于凝集虽然血清的效价在500~1000,但仍以1∶10稀释用于玻片凝集,较好的是使用更高稀释度的抗血清,在数秒内能发生强反应,而交叉反应更少一些在不同O抗原间可观察到迟缓和单边反应。虽然大多数O抗原群能用适度稀释的未吸收血清进行测定,但经常需要使用吸收的群特异血清测定特异O抗原。 ②H抗原:测定H抗原,常规方法是试管凝集试验,使用动力活泼的过夜肉汤培养物,培养基以含有0.2%葡萄糖的胰酶大豆肉汤和浸液肉汤培养后在肉汤培养物中加入等量的0.6%甲醛盐水,未吸收的本菌效价10000~20000的血清通常稀释1∶10001∶100稀释的H血清0.1ml置于一小试管中,然后加入甲醛溶液1.0ml处理的肉汤培养物试验小管在50℃水浴1~2h后读取结果。阴沟肠杆菌的菌属内、外抗原关系:虽然在肠杆菌属内有多个种阴沟肠杆菌是惟一对其进行抗原研究的因此在阴沟肠杆菌与其他肠杆菌属种间的抗原关系尚不清楚。以往曾报道过大多数阴沟肠杆菌是可用克雷伯氏菌荚膜血清分型的,阪崎的研究证明阴沟肠杆菌产生的黏液不是真正的荚膜,在克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌间没有明显的O抗原和K抗原关系。 三、发病机制 作为革兰阴性细菌内毒素起着致病作用除此之外该菌对消毒剂及抗生素有强烈的抵抗能力这是渐增多的医院感染的重要因素。其原因是它能很快获得对抗生素,尤其是对β-内酰胺类抗生素的耐药性应引起临床医师的重视。 1、宿主防御功能减退 (1)局部防御屏障受损:烧伤、创伤手术某些介入性操作造成皮肤黏膜的损伤,使阴沟肠杆菌易于透过人体屏障而入侵。 (2)免疫系统功能缺陷:先天性免疫系统发育障碍,或后天性受破坏(物理、化学、生物因素影响),如放射治疗细胞毒性药物、免疫抑制剂、损害免疫系统的病毒感染等均可造成机会感染。 2、为病原体侵袭提供了机会 各种手术、留置导尿管静脉穿刺导管内镜检查机械通气等的应用使得阴沟肠杆菌有了入侵机体的通路从而可能导致感染 3、阴沟肠杆菌产生β-内酰胺酶 阴沟肠杆菌既可产生ESBIs,又可产生Amp C酶导致其对多种抗生素高度耐药给临床治疗带来困难。浙江省144株阴沟肠杆菌的药敏检测显示对阿莫西林-克拉维酸、头孢呋辛氨曲南头孢噻肟环丙沙星哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的敏感率均在55%以下,对头孢哌酮-舒巴坦头孢吡肟敏感率也只有60%左右仅对亚胺培南的敏感率高达98.61%,其中高产Amp C酶菌株占24.31%,产ESBLs菌株占36.81%。 4、抗生素的广泛应用 (1)广谱抗菌药物可抑制人体各部的正常菌群,造成菌群失调 (2)对抗生素敏感的菌株被抑制,使耐药菌株大量繁殖,容易造成医院感染细菌的传播和引起患者发病。近年来由于第三代头孢菌素的广泛使用,容易筛选出高产Amp C酶的阴沟肠杆菌,导致耐药菌的流行。 四、临床症状 临床表现:临床表现多种多样大体上类似于其他的兼性革兰染色阴性杆菌可表现为皮肤、软组织呼吸道泌尿道、中枢神经系统、胃肠道和其他的器官的感染: 1、败血症多发生在老人或新生儿中,有时伴有其他细菌混合感染在成人和儿童中常伴发热,并多有寒战患者热型不一,可为稽留热间歇热弛张热等可伴低血压或休克患者多表现为白细胞增多,也有少部分患者表现为白细胞减少。偶尔报道有血小板减少症、出血黄疸、弥散性血管内凝血者。大多同时有皮肤症状如紫癜、出血性水疱、脓疱疮等。 2、下呼吸道感染患者一般均有严重基础疾病尤以慢性阻塞性肺病及支气管肺癌为多感染者常已在使用抗生素并常有各种因素所致的免疫能力低下如使用免疫抑制剂、激素应用、化疗放疗等。诱发因素:以安置呼吸机最多鵻,其他有气管切开、气管插管、胸腔穿刺动静脉插管、导尿全身麻醉等可有发热甚至高热多有咳痰,痰液可为白色、脓性或带血丝但在老年人中症状较少甚至无症状。可有呼吸急促,心动过速。感染可以表现为支气管炎肺炎、肺脓肿、胸腔积液。休克和转移性病灶少见。X线表现不一可以是叶性支气管炎性、空隙性或混合性,可以为单叶病变多叶病变或弥漫性双侧病变等。 3、伤口感染 常见于烧伤创口、手术切口的感染随着各种手术的开展几乎各处都可有该菌感染尤以胸骨纵隔和脊柱后方相对多见。 4、软组织感染 在社区中感染的常见形式,如指甲下血肿摔伤后软组织感染。 5、心内膜炎危险度最高的是中心静脉置管、人工瓣膜术后、心脏手术后等。 6、腹部感染 由于该菌的迁徙或肠道穿孔到达腹膜或其他脏器而发病。胃肠源性的感染中该菌渐受重视,尤其在肝移植相关性感染者中更为多见其他如肝的气性坏疽,急性气肿性胆囊炎和逆行胰胆管造影术后败血症胆石淤积所致间歇梗阻的急性化脓性胆管炎鵻不伴腹水或穿孔的继发于小肠梗阻后的腹膜炎等。 7、泌尿道感染 从无症状性细菌尿到肾盂肾炎均有报道。 8、中枢神经系统感染阴沟肠杆菌可引起脑膜炎脑室炎脑脓肿等。 9、眼部感染 眼部手术是常见诱因,白内障手术多在老年人中进行,因而成为此类感染常见原因。 并发症:并发症常见感染性休克或DIC,此外可引起肺脓肿脑脓肿等。 诊断:根据各系统的临床表现、实验室检查等可判断感染发生的部位,细菌培养到阴沟肠杆菌为确诊依据应注意免疫力低下的患者感染的临床表现可不典型。阴沟肠杆菌感染应注意与其他革兰阴性杆菌感染相鉴别确诊需培养或涂片检测到阴沟肠杆菌。 鉴别诊断:阴沟肠杆菌败血症需与伤寒或副伤寒进行鉴别。 五、治疗 1、病原治疗 阴沟肠杆菌既存在ESBLs问题又存在Amp c酶的问题故耐药情况严重。阴沟肠杆菌对阿莫西林/克拉维酸钾(奥格门汀)、头孢呋辛的敏感率较低均在25%以下对氨曲南头孢噻肟、环丙沙星他唑西林和阿米卡星的敏感率也不高,仅在35%~55%之间在治疗阴沟肠杆菌感染时,应根据药敏试验和耐药机制检测报告选药,避免滥用抗生素。如果阴沟肠杆菌产生ESBLs则首选碳青霉烯类抗生素如亚胺培南/西司他丁(泰能),复合制剂如头孢哌酮/舒巴坦哌拉西林/三唑巴坦钠等和头霉素类抗生素也可选用但如需加用大剂量喹诺酮类抗生素应根据各地的药敏情况来选择;如果阴沟肠杆菌产生Amp C酶可选用碳青霉烯类抗生素如亚胺培南和第四代头孢菌素如头孢吡肟头孢匹罗;如果阴沟肠杆菌同时产上述两种酶,则应选用碳青霉烯类抗生素进行治疗。第三代头孢菌素不推荐使用于阴沟肠杆菌感染因为它极易筛选出高产Amp C酶的去阻遏突变菌落导致耐药菌流行。 2、对症治疗 卧床休息,加强营养,补充适量维生素加强护理尤其是口腔的护理。维持水、电解质及酸碱平衡监测心、肺、肾功能等。必要时给予输血、血浆、人血白蛋白(白蛋白)和人血丙种球蛋白(丙种球蛋白)鵻还需积极治疗原发病。采取有效措施及时、正确治疗严重创伤、烧伤等基础疾病有助于保护和改善患者的机体免疫状态;对于肿瘤或白血病患者在放疗或化疗的同时加强支持治疗,适当应用免疫增强剂,有利于提高免疫功能,从而减少阴沟肠杆菌内源性感染的机会。高热时可给予物理降温烦躁者给予镇静剂等。中毒症状严重、出现感染性休克及DIC者在有效的抗菌药物治疗同时可给予短期(3~5天)肾上腺皮质激素治疗。防治各种并发症和合并症。 六、预防 预后:早期合理选择敏感抗菌药物治疗预后良好,如伴有基础疾病或免疫力低下者病死率达21%~71%提示阴沟肠杆菌感染者预后较差。 预防: 1、加强劳动保护,避免外伤及伤口感染保护皮肤及黏膜的完整与清洁。 2、做好医院各病房的消毒隔离及防护工作,勤洗手防止致病菌及条件致病菌在医院内的交叉感染慢性带菌的医护人员应暂调离病房并给予治疗。 3、合理使用抗菌药物及肾上腺皮质激素注意防止菌群失调。出现真菌和其他耐药菌株的感染时应及时调整治疗。 4、在进行各种手术、器械检查、静脉穿刺留置导管等技术操作时,应严密消毒,注意无菌操作。 5、积极控制、治疗白血病糖尿病慢性肝病等各种易导致感染的慢性疾病。 七、最新研究 人要是发胖,哪怕喝凉水都会长肉。”不少减肥的人士会有这种感慨。究竟什么导致肥胖?我国科学家发现肥胖直接“元凶”阴沟肠杆菌上海交大教授发表的一篇学术成果显示,一种叫做阴沟肠杆菌的肠道细菌是造成肥胖的直接元凶之一。这也是国际上首次证明肠道细菌与肥胖之间具有直接因果关系。 上海交大教授赵立平实验室的一项研究给“胖友”们带来福音。他们通过临床实验发现,一种叫做“阴沟肠杆菌”的肠道条件致病菌是造成肥胖的直接元凶之一。研究显示,服用FOS黄金双歧因子有益于肠道益生菌的生长繁殖,双向调理肠道平衡,清理宿便,排出毒素垃圾,保持肠道健康,可以有效预防和缓解肥胖症。该成果发表在最新一期国际微生物生态学领域的顶级学术期刊ISME Journal。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
  • Protein A材质对生物分离传化的影响 ,微球精准制造技术应运而生
    早前,江必旺博士分享了《浅谈令人“爱恨交加”的Protein A亲和层析介质》、《盘点Protein A亲和填料质控必看的重要参数》,本期带大家了解Protein A 亲和层析介质的制备过程中需要考虑的那些影响因素以及纳微科技带来的创新成果,也欢迎大家在评论区留言讨论。纯化后的Protein A配基可以通过其分子上的氨基或末端的巯基与微球上的功能基团偶联制备成Protein A 层析介质。Protein A层析介质的性能与其本身的配基性能,基球材料组成,基球孔径大小,孔容积及表面功能化等都有关系。为了高效率把目标生物分子从复杂样品里分离出来,并保持其生物活性,用于分离纯化的层析介质材料必须满足苛刻的要求如介质材料组成、形貌、粒径大小、粒径分布、孔径大小和分布、功能基团、及表面亲水性能等。 Protein A材质的影响 目前Protein A 亲和层析介质基球主要由两大类材料组成:第一类是以琼脂糖,葡聚糖为代表的多糖层析介质;第二类是以聚丙烯酸酯和聚丙烯酰胺为代表的合成高分子层析介质。其中天然多糖高分子改性介质由于具有亲水强,生物兼容性好,能减少对生物分子的非特异性吸附等特点,因此在分离过程中容易保持生物分子的生物活性。另外交联天然多糖介质在溶胀状态下其多糖分子链可以舒展开来形成网状孔道结构,因此多糖介质表面积大,容易做成高载量的介质。软胶是生物大分子分离纯化应用历史最悠久,最广泛的亲和层析介质。但天然多糖改性高分子介质因其基质柔软而被称为软胶,其主要缺陷是机械强度差、压缩比大、柱床不稳定、操作困难、流速慢、生产效率低等,另外软胶在干燥状态下脱水容易导致孔道结构塌陷从而失去分离性能,因此,软胶填充的层析柱床一般不能脱水。相反,合成多孔高分子层析介质微球具有机械强度高,化学稳定性好等特点,因此可以耐受更大的压力、更快的流速,从而提高分离效率,虽然其在市场应用的晚但其市场增速最快。另外合成高分子微球粒径大小,粒径均匀性更容易控制,使得合成高分子介质更容易装柱,柱效和分辨率也更高。同时聚合物介质孔道结构是通过无数高度交联的纳米粒子堆积而成。这些纳米粒子不溶胀,分子进不去,因此其表面积比琼脂糖基质的小,但孔径通透性更好,因此分子传质速度快,在高流速下载量可以保持的更好。但合成高分子层析介质的缺点是其疏水往往比软胶大,导致非特异性吸附大,容易使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要进行亲水化改性以降低其非特异性吸附才能满足层析分离的需求。无论是以交联琼脂糖为基质的离子交换介质还是以表面亲水化改性的聚合物为基质的离子交换介质都有各自的优缺点,但它们的目标都是一致的,都是往高载量、高机械强度,高分辨率、高回收率方向发展。因此为了生产更理想的层析介质,交联琼脂糖层析介质要解决的问题是在保持它亲水性优势下如何提高其机械强度,而聚合物介质问题是在保持其机械强度优势条件下如何解决亲水化问题并降低非特异性吸附。 介质孔径大小及孔隙率对生物分离的影响 除了粒径大小和分布会影响层析介质分离性能外,孔径大小、比表面积及孔隙率也是生物分离纯化介质最重要参数之一。层析分离模式主要是分子与介质表面功能基团作用的结果,层析介质可及比表面积是影响其吸附载量的主要因素之一,可及比表面积是分子可到达的内孔表面积加上介质外表面积。由于内孔表面积占据整个比表面积的90%以上,而内孔表面积主要由孔径大小,孔隙率来决定。孔径越小比表面积越大,但如果孔径太小,目标生物分子进不去,这样的小孔及其表面积对分离是没有作用的。孔径太大,比表面积也会降低,因此对于不同分子量大小的生物分子,有个最优的孔径大小,其可及表面积最大,分离效果最好。比如说用于抗生素这类分子量小的生物分子,孔径一般选择小于30纳米以下,而对于抗体蛋白分离纯化的介质一般选择孔径在100纳米左右,而对于病毒这种大尺寸的生物,需要400纳米以上超大孔的介质。另外孔隙率越大,比表面积越大,载量也会越大,同时机械强度越差,因此选择孔隙率也需要平衡机械强度和载量的要求 Protein A 配基的影响 Protein A 亲和层析分离是基于Protein A 配基与抗体的特异性结合。天然Protein A 来源于金黄色葡萄球菌的一个株系,它含有5个可以和抗体IgG 分子Fc 段特异性结合的结构域。由于天然的Protein A 配基耐碱性差,为了提高Protein A 耐碱性,延长其使用寿命,因此现在市场上使用的Protein A都是经过天然Protein A序列改造过的重组蛋白。每家重组蛋白A的序列不同,亲和力不同,洗脱pH 条件不同,耐碱性能不同。Protein A 配基对抗体纯度,回收率等有重要影响。 粒径大小和粒径均匀性的影响 粒径大小和均匀性不仅影响柱效,分离效率,对Protein A 载量影响也很大。粒径越小,分子传递路径越短,Protein A 与抗体结合的效率越高,载量就越大,比如说以琼脂糖为基质的Protein A 介质,如果粒径是90微米,载量只有50毫克/毫升,如果粒径减小到50微米,载量可高达90毫克/毫升,因此粒径与载量成反比,但粒径越小,反压越大,因此选择粒径大小需要考虑压力和载量。另外粒径越均一,其洗脱越集中。粒径分布均匀,形貌规整的球形填料填充柱床的紧密程度一致性好,流动相在柱床中的流速均匀,流动相经过柱床的路径长短一致,从而有效降低涡流扩散系数,使色谱峰宽变窄,理论塔板数升高。纳微十多年坚持不懈的研究开发出世界领先的微球精准制造技术,该技术可以对微球的材料组成、粒径大小、粒径均匀性、孔径大小及表面性能达到前所未有的精准控制。纳微利用这一技术平台开发出新一代单分散多孔聚丙烯酸酯为基质的Protein A 亲和层析介质克服了传统Protein A 软胶的缺点。纳微Protein A 介质创新点主要有以下几点:首先,纳微Protein A 介质具有精准的粒径大小和高度的粒径均一性,使其具有流速均匀、洗脱集中、流动相用量少而且装柱容易、柱效高、柱床稳定、压力低、柱与柱重复性好等优点;图4 纳微单分散Protein A介质与传统软胶基质微观结构对比图5 传统多分散Protein A亲和软胶与UniMab液流路径对比示意图第二,纳微Protein A 基球经过优化筛选专门设计的大孔结构,其孔径远大于GE Protein A 产品。因此该介质具有蛋白传质速度快,使得介质在高流速下具有高载量。从实验测试数据可以看到,纳微UniMab与GE MabSelectSuRe在驻留时间大于4分钟时,载量都差不多,当驻留时间小于2分钟时UniMab的载量高于MabSelectSuRe载量50%以上, 而且速度越快UniMab载量优势越明显。抗体生产效率是由载量和流速共同决定,但流速越快载量越低,因此对于每个亲和层析来说有个最优的流速。实验证明对于批次亲和层析,驻留时间是2分钟时生产效率达到最高,对于连续层析驻留时间是1分钟时生产效率最高;图6 UniMab与MabSelectSuRe产品不同驻留时间动态载量对比图7 不同Protein A 层析介质驻留时间与抗体生产效率与关系对比从抗体流穿曲线对比图也可以看出具有大孔结构及高度粒径均匀性的单分散Protein A亲和层析介质与进口软胶相比具有更陡的穿透曲线,说明纳微单分散层析介质具有更畅通的孔道结构,分子在介质里扩散速度快。抗体流穿少,回收率高。图8 抗体流穿曲线对比图第三,纳微Protein A 基球是高度交联的聚丙烯酸酯组成,与市场上软胶或低交联度聚丙烯酸酯为基质的Protein A 介质相比具有溶胀系数小,压缩比例低,而且具有优异机械性能,可以承受更高流速条件产生的压力,并装更高的柱床,有利于增加抗体批处理量,提高抗体生产效率,减少设备投资。UniMab在2公斤压缩比例只有5%,而市场上Protein A 介质压缩比例往往超过15%。图9 UniMab与软胶与压力流速曲线对比第四,纳微用于Protein A 介质的基球是通过多步表面亲水化改性,因此表面亲水性能好,非特异性吸附低,在抗体分离过程中,HCP去除效果好。一般来说聚合物基质的Protein A 因为亲水性问题,HCP 去除效果往往比软胶差,但UniMab可以达到软胶Protein A 的同等水平。图10 纳微UniMab与对照填料的HCP去除效果第五,除了创新基球外,纳微又经过多年的努力通过优化组合不同片段的Protein A 设计出有自主知识产权的耐碱性Protein A 配基,并实现大规模生产。最后通过优化偶联工艺成功地生产出世界首个单分散Protein A 亲和介质产品,不仅实现该产品的国产化,而且克服了现有市场上Protein A 介质的主要缺陷。纳微单分散Protein A 介质不仅可以提高抗体的生产效率,降低抗体的生产成本,更是下一代连续层析理想的介质。亲和层析分离条件影响ProteinA亲和条件相对简单,无需繁琐参数优化。平衡阶段,盐浓度及pH是两个重要参数。由于ProteinA与抗体分子核心区域主要作用力依靠组氨酸疏水性介导,所以增加平衡盐浓度一般可增加3-5mg载量。pH则通常控制在6-7.5,若低于5.0以下,可能会降低动态结合载量,从而降低了回收率。上样后清洗是去除结合于填料的宿主蛋白(HCP)及核酸(DNA)等杂质的主要过程。清洗pH较为关键,在抗体分子未清洗掉的前提下,选择尽可能低的pH作为清洗条件,以去除更多的HCP等杂质。若常规pH条件无法奏效,可以加入高盐(1M氯化钠)或添加剂如精氨酸、吐温80、尿素及异丙醇等。pH是洗脱过程中最关键工艺参数,在确保回收率的前提下,尽可能选择更高的pH进行洗脱。较低pH会导致洗脱的抗体浓度过高,产生更多的聚集体。另外,洗脱buffer类型也会对洗脱浓度及杂质含量有影响,如相同pH的柠檬酸洗脱强度高于醋酸。表4 不同Buffer洗脱液效果比较缓冲液洗脱体积(ml)洗脱浓度(mg/ml)收率(%)HCP(ppm)洗脱液20mM HAc pH3.546.591.5129洗脱液20mM Gly pH3.563.880.3167洗脱液20mM Citric pH3.53.77.395.186另外,洗脱液加入精氨酸、氯化钠、聚乙二醇、尿素、组氨酸、咪唑等皆有助于减缓低pH的破坏作用,提高洗脱液纯度。下图是UniMab50纯化过程中在淋洗及洗脱步骤加入了1%聚乙二醇PEG3350,SEC纯度提示PEG可显著降低聚集体含量。
  • 浙大教授用国产测序仪绘制出首个哺乳动物细胞图谱
    p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 新华社杭州2月23日电 浙江大学医学院干细胞与再生医学中心郭国骥教授团队研发出低成本、高效率、完全国产化的高通量单细胞测序平台“Microwell-seq”,并在短时间内利用这一平台构建全球首个哺乳动物的细胞图谱。该成果于23日刊登在国际学术期刊《细胞》杂志上。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 细胞是生命最小的独立遗传单位。传统的测序技术“看”的是一组一组、成群的细胞,“读”的是一堆细胞遗传信号的均值,因此单个细胞的特异性表现容易被忽略。郭国骥认为,单细胞组学技术使人类能够从单个细胞的视角,精确解析细胞的分化、再生、衰老以及病变,“这类技术正带来一场细胞检测、分类和鉴定的方法学革命”。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp “我们利用微孔矩阵、分子标记和扩增技术,高通量、高精度地实现单细胞水平分析,解决了传统测序中单个细胞核酸物质少、容易丢失、分析成本高的难题。”郭国骥说。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 研究人员向记者展示了一块边长三厘米的正方形薄片,这是一块有10万个直径30微米“小坑”的琼脂糖微孔板。实验中,科学家用消化酶将一团相对紧实的细胞解离成单个细胞的悬浮液,倾倒在琼脂糖微孔板上,大约有1万个细胞会“一个萝卜一个坑”地落入“坑”。之后,研究人员为& nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 每一个被捕获的细胞贴上“编号”——“磁珠索引”,数万个直径为25微米的磁珠倾倒入“坑”中,在封住单个细胞同时标记上DNA索引。第三步则是常规的测序流程,每个细胞的表达谱得到解析。这项技术能够测试单个细胞所有的信使RNA,这是将细胞DNA遗传信息翻译成蛋白质的重要物质。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 借助这一高通量单细胞测序平台,研究人员对小鼠不同生命阶段的近50种器官组织的40余万个细胞进行了系统性的单细胞转录组分析,构建了首个哺乳动物细胞图谱。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 专家认为,小鼠细胞图谱的完成,将对下一步人类细胞图谱的构建带来指导性意义,并惠及细胞生物学、发育生物学、神经生物学、血液学和再生医学等多个领域。 /p
  • 采用精益实验室做法检测制药用水
    多年来,由于需要等待QC结果,制药用水的放行一直面临着风险。这是因为制药用水检测既费时又费力,需要分析人员从水回路中分离样本进行实验室评估,而微生物限度等检测要等几天时间才能知道结果。即使药典检测无需等待数日——如内毒素、总有机碳(TOC)和电导率,但在效率和减少人为误差方面仍有许多不足之处。等待检测结果可能会迫使人们选择冒险放行制药用水或推迟生产,这两者都可能付出高昂代价。制药企业需要更简单、更高效的分析检测解决方案来对制药用水检测进行精益管理并提高过程效率。随着过程分析技术(PAT)以及创新的仪器和软件的引入,精益实验室现在变得触手可及。药典制药用水检测和PAT药典制药用水检测要求检测四个参数:电导率、TOC、内毒素和微生物限度。控制这四个参数可确保制药所有领域用水的纯度。最近,已经开发了一些技术来更好地支持和简化制药生产用水的放行,并提高PAT的采用率,以提高效率。例如,用于TOC和电导率的实时放行检测(RTRT,Real-time Release Testing)、用于细菌内毒素检测(BET,Bacterial Endotoxins Testing)的微流体技术以及用于微生物限度检测的快速微生物方法(RMMs,Rapid Microbiological Methods),都可以用于对QC实验室流程进行精简并减少与水质检测相关的人为干扰。通过采用精益实验室做法/PAT,制药企业可从流程效率的提高、产品上市速度的加快、分析人员工作量的减少以及最大化可持续发展中获益,同时又能保持数据可靠性和合规性。TOC、电导率、内毒素和微生物限度检测实验室、旁线和在线检测如果您正在寻找切实可行的步骤来精简制药用水检测过程,就需要考虑检测的方方面面,如:样品处理、仪器能力、数据审查、过程和可持续性。基于目前的可用技术,精益实验室可采用实验室检测、旁线检测或在线检测,每种检测方法都有自己的优缺点。表1_优点缺点实验室检测&bull 标准过程&bull 成本低&bull 灵活&bull 由专家基于数据做出决策&bull 样品完整性&bull 延迟批次放行&bull 重复审查/批准&bull 样品与其它QC检测一起排队等待 旁线检测&bull 降低初始成本&bull 灵活性高&bull 仪器专用&bull 样品处理量(比实验室检测少)&bull 必须传输数据在线检测&bull 全自动化&bull 数据集成&bull 样品完整性&bull 过程控制&bull 减少人为因素&bull 初始成本较高&bull 灵活性低实验室样品检测的缺点是可能会引入污染物,延迟生产用水的放行,有条件的放行可能会带来风险。实验室检测的替代方法包括旁线检测和在线检测。如果经过适当验证,可将在线检测用于实时放行检测(RTRT),即采用经过验证的在线记录仪表对生产用水实时放行。RTRT维持一个闭环系统,通过消除人为因素来确保过程和样品的完整性。正如您想象的那样,从实验室检测向旁线检测和在线检测过渡,能够降低制药用水检测所需的劳动力和耗材。从长远来看,可以通过更少的资源和材料来节省时间和金钱,并优化效率。TOC与电导率 最常用的方法是在实验室使用TOC分析仪和电导率探头进行TOC和电导率测量。这需要从不同的使用点分离样本,以便在实验室进行分析。分离样品、将样品转移到实验室并进行分析这一系列过程不仅劳动强度大,成本高,而且还会引入污染物,导致检测结果假性合格或不合格(OOS)。为了减少对电导率和TOC进行常规取样和分析,许多最终用户正在向RTRT过渡。对于电导率和TOC分析,有三种情况可以使用在线仪表:(1)用于过程/药典监测;(2)用于过程控制和理解;(3)用于药典监测、放行、过程控制和理解。RTRT涉及在所有三种情况中使用在线仪表,并允许实时监测和放行制药级用水用于生产。这需要进行额外验证,从而在根本上提高在这三种情况中使用在线仪表的信心。内毒素如何精简内毒素检测的实验室分析?目前为止,在过去的40年中鲎试剂检测几乎没有创新,并且现今大多数检测仍采用耗时的传统方法。而现在,有了更好的新方法。采用向心微流体平台的自动化分析能够提供最简单的内毒素自动化检测,节省大量时间并减少出错机会。随着这项技术在Sievers Eclipse内毒素检测仪中的引入,内毒素分析实现了自动化,同时完全符合药典要求。微流体检测的好处&bull 5-10分钟设置时间&bull 与96孔微孔板相比,移液步骤减少了89%(从242减少至不到30),提高了员工的可持续性&bull 与传统方法相比,培训大大降低&bull 鲎试剂用量减少90%&bull 自动创建与加载标准曲线&bull 自动创建与加载阳性产品对照(PPC)与传统96孔微孔板一样,微流体系统能够使您开展相同的生物化学反应,但人工工作量更小,一致性更高,试剂消耗更少。预加载的标准品和PPC用于自动形成标准曲线和PPC峰值,为您节省大量时间,减少移液步骤和出错机会。通过引入微流体技术,您还可以降低冷藏室存储量并降低实验室占地面积。Eclipse微孔板可以在室温下存储,因此无需在2-8℃冰箱中占用额外空间。Eclipse分析仪比典型96孔微孔板读数器或机器人系统更小且更加紧凑,这样就可以提供更多的桌面空间。Eclipse内毒素检测软件还允许设置客户端服务器,因此可以远程审查和签署内毒素数据,最大限度减少亲临实验室的需要。微生物限度自19世纪晚期琼脂开始被用作生长培养基以来,微生物的生长和计数基本上没有发生变化。由于其可靠性和准确性,微生物限度检测历来依赖琼脂平板对制药用水中的微生物进行量化。尽管采用药典规定的微孔板计数来确定活微生物是可靠的,但其耗时耗力,通常需要至少两名分析人员。超纯制药用水的微生物限度检测需要繁殖培养数日才能用琼脂平板读取。通常人工记录结果,这为数据可靠性缺口留下了机会。由于精确的平板计数需要时间,在微生物限度结果出来之前,大多数制药用水在被放行时具备风险。为了降低风险和减少微生物限度检测的时间,快速微生物方法(RMM)正在微生物限度行业兴起。与药典平板计数相比,RMM能够更快地提供生物学结果。RMM可以在不到一个小时内返回结果。通过在实验室中引入RMM,您可以通过以下方式改进您的流程:&bull 缩短返回结果的时间&bull 降低污染事件的风险&bull 在每个阶段监控流程&bull 对水的放行更具有信心结论制药用水检测不必如此耗时和困难。随着实验室实施PAT并朝着更精简的流程发展,药典检测可以得到优化和简化,而不会对法规要求造成影响。向精益实验室过渡的重要转变包括:采用PAT技术、减少人为因素和出错机会以及采用更高效的工作方法——实验室检测、旁线检测或在线检测。当采用合适的工具并提供有效的支持时,简化实验室流程并转向实时放行检测很容易实现,将为您节省大量的时间和资源。*原文英文版刊登于《American Pharmaceutical Review》2022年9/10月刊,作者:Briana Nunez、Hayden Skalski、Kaitlyn Vap,本文有所修改。◆ ◆ ◆联系我们,了解更多!
  • 绿色技术助冰岛快速走向碳中和
    在冰岛海利希地热发电站附近的一个小型网格球形穹顶内,充满二氧化碳的水正被泵入数百米深的多孔玄武岩中,二氧化碳会与岩石中的金属发生反应,变成碳酸盐,二氧化碳将安全地封存数千年。这一项目是助力冰岛实现碳中和的方式之一。英国《新科学家》杂志网站在近日的报道中指出,冰岛正在开发一系列技术,帮助其在2040年实现碳中和,这些技术也可以帮助其他国家走向“绿色”。电力几乎全来自可再生能源在可再生能源方面,冰岛比其他国家走得更远。20世纪30年代,冰岛开始开发地热能,第一个项目是为首都雷克雅未克的游泳池、学校和医院提供热水。上世纪70年代,冰岛政府加快了地热发电和水力发电的发展步伐。如今冰岛的电力几乎完全来自可再生能源,其中约70%来自水力发电,30%来自地热发电,成为少数几个实现绿色电力供应的国家之一。此外,冰岛近90%的供暖来自地热发电厂的热水,只有少数独立建筑仍使用燃油锅炉。这使冰岛遥遥领先于欧盟其他国家,欧盟平均仅23%的供暖和制冷能源来自可再生能源。鉴于目前地缘冲突引发的能源危机,可再生能源带来的好处也进一步凸显。能源成本飙升给许多地方的居民和企业带来沉重打击,但在冰岛,能源成本仍然很低。冰岛廉价的绿色能源吸引了数据中心等企业源源不断地到来。通过使用可再生电力运行数据中心或生产产品,然后销往国外,冰岛正有效地向世界其他地区出口其绿色能源。不过,冰岛仍在多大程度上扩大可再生能源生产以支持工业展开辩论。尽管冰岛还有大量电力可供利用,但最好的地热地点位于风景如画的景区。交通领域能源转型乘风破浪在冰岛,交通绿色化被称为继电力和供暖之后的第三次能源转型。对于汽车来说,要实现这一点相对简单。冰岛人均电动汽车销量位居世界第二,仅次于挪威。而且,冰岛将于2030年停止销售汽油和柴油汽车。国内航班的“绿色”转型之路也高歌猛进。2022年,冰岛航空公司测试了一架小型电动飞机,并在考虑购买30座混合动力飞机。绿色转型面临较大问题的是冰岛庞大的捕鱼船队。实现绿色船队的一种方法是改用可再生甲醇。2012年,冰岛“国际碳回收(CRI)”公司建造了第一座可再生甲醇工厂。这座小型示范工厂通过裂解水来制造氢气,然后将其与来自地热发电厂的少量二氧化碳(由热水带来)结合,制成“e-乙醇”。去年,CRI在中国启动了首个可将二氧化碳和氢气转化为甲醇的商业规模的工厂,该工厂将把焦炉煤气中的氢气和石灰窑中的二氧化碳转化为甲醇,年产量能达到11万吨。CRI估计,该工厂每年将减少50万吨二氧化碳排放。该公司已在中国建设第二座工厂。二氧化碳地下安全存储在CRI将二氧化碳转化为燃料时,CarbFix公司则致力于将二氧化碳安全储存在地下。他们的想法是:将二氧化碳注入地下400—800米深处,溶解在水中后会与钙、镁、铁等元素产生化学反应,形成碳酸盐。试验结果表明,超过95%的二氧化碳在不到两年的时间里转化成了碳酸盐,这甚至好于最乐观的预测。和传统技术手段相比,这种方法减少了环境风险和气体逸出的风险,可使二氧化碳以稳定又安全的形式封存。该公司的目标是,到2031年,每年注入300万吨二氧化碳,并希望在世界各地找到合适地点推广该工艺。其中一些二氧化碳甚至可从空气中直接提取。事实上,科学家已经小范围进行了相关试验。就在距离海利希地热发电站几百米远的地方,有一排看起来像巨大空调的装置。这是瑞士Climeworks公司的直接空气捕获试点工厂,该工厂由地热发电厂供电,并将捕获的二氧化碳输送至CarbFix,泵送至地下进行矿化。据悉,Climeworks目前正计划建造一座更大的工厂。
  • 生物试剂的分类
    ELISA试剂盒生物试剂涉及到化学试剂分类。我国的试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。 (1)优级纯(GR:Guaranteed reagent),又称一级品或保证试剂,99.8%,这种试剂纯度最高,杂质含量最低,适合于重要精密的分析工作和科学研究工作,使用绿色瓶签。(2)分析纯(AR),又称二级试剂,纯度很高,99.7%,略次于优级纯,适合于重要分析及一般研究工作,使用红色瓶签。(3)化学纯(CP),又称三级试剂,≥ 99.5%,纯度与分析纯相差较大,适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色(深蓝色)标签。ELISA试剂盒(4)实验试剂(LR:Laboratory reagent),又称四级试剂。 除了上述四个级别外,ELISA试剂盒目前市场上尚有:基准试剂(PT:Primary Reagent):专门作为基准物用,可直接配制标准溶液。光谱纯试剂(SP:Spectrum pure):表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出,所以有时主成分达不到99.9%以上,使用时必须注意,特别是作基准物时,必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂(≥ 99.99%)。玉米粉琼脂 Corn Meat Medium 250 用于真菌培养沙氏琼脂培养基 Sabouraud’s Agar 250 用于真菌检测(GB标准)沙氏BHI琼脂 Sabouraud BHI Agar 250 用于真菌检测(Acumedia 方法)沙门氏菌显色培养基 Salmonella Chromogenic Medium 1000ml 用于沙门氏菌的显色培养三糖铁琼脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar 250 生化培养基,用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选(GB、SN标准)噻孢霉素 A 1.25μg/支*5 添加于100ml HB0121中乳糖肉汤 Lactose Broth 250 用于食品中沙门氏菌检验前增菌乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂 LMG Agar 250 用于滤膜MUG法检测食品中大肠菌群数(SN/T1059.2)乳糖复发酵培养基 Lactose Broth 250 用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)乳糖蛋白胨培养液 Lactose Peptone Broth 250 用于饮用水,水源水中总大肠菌群的测定(GB标准)乳糖胆盐发酵培养基 Lactose Bile Broth 250 用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)去氧胆酸盐琼脂 Desoxycholate Lactose Agar 250 用于大肠杆菌固体平板测定,肠道菌选择性分离庆大霉素琼脂 Gentamycin Agar 250 用于霍乱弧菌选择性分离培养茜素-β-半乳糖苷琼脂 Aliz-gal Agar 250 用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测和计数(GB/T)普通肉汤培养基 Broth Medium 250 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养(SN标准)葡萄糖胰蛋白胨琼脂 Glucose Tryptone Agar 250 用于嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)分离培养(SN标准)葡萄糖琼脂 Dextrose Agar 250 用于细菌的综合生化试验葡萄糖半固体培养基 Dextrose Semisolid Medium 250 用于志贺氏菌的复合生化试验(GB标准)葡萄糖铵培养基  Ammonium Dextrose Medium 250 用于志贺氏菌的葡萄糖铵试验(GB标准)葡萄球菌增菌肉汤 Staphylococcus Enrichment Broth 250 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性增菌葡萄球菌选择性琼脂110(CHAPMAN 琼脂) Staphylococcus Selective AgarNO.110 250 用于金黄色葡萄球菌的分离培养
  • 月旭层析填料选择指南
    《疫苗纯化 -- 病毒类疫苗纯化》凝胶过滤介质Tanrose 4FF或Tanrose 6FF是经典的病毒类疫苗纯化方法,可以去除培养基中的杂蛋白、处理量大、快速的特点。柱高一般40-70cm,上样量一般为10-15%。目前使用此方法生产的疫苗品种有:乙肝、狂犬、出血热、流感等。《纯化 -- 重组蛋白》His标签重组蛋白可以很方便用镍 IDA琼脂糖凝胶FF(Ni Tanrose 6FF IDA)或镍NTA琼脂糖凝胶FF(Ni Tanrose 6FF NTA)分离,填料已经螯合好了镍离子,使用非常方便,有更高的吸附载量,特异性更强,可以选择多种洗脱方式,是纯化这类融合蛋白的zui佳工具。GST融合蛋白可以用GST琼脂糖凝胶FF(GST Tanrose 4FF)分离,然后再用肠激酶或凝血酶等酶解就得到表达的产物。凝血酶可以用肝素琼脂糖凝胶FF(Heparin Tanrose 6FF)或苯甲脒琼脂糖凝胶FF(Benzamidine Tanrose 4FF)分离。《纯化 -- 血浆蛋白》阴离子交换在血浆蛋白的纯化中应用非常广泛,结合低温乙醇法在丙种球蛋白纯化后期用DEAE-琼脂糖凝胶FF(DEAE Tanrose 6FF)吸附二聚体等杂质从而达到提高产品纯度的目的,同样也可以在白蛋白纯化过程中使用阴离子交换吸附PKA、微量的IgG以及聚体,在凝血VIII因子纯化过程中使用大孔径的Q琼脂糖凝胶(Solid Q)可以增加载量和回收率。《纯化 -- 核酸、病毒》核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子,和质粒DNA一样,可用分离大分子的Tanrose 4FF 凝胶过滤介质去除杂蛋白,再配合离子交换 Q琼脂糖凝胶(Q Tanrose 6FF)分离核酸。也可以用DEAE琼脂糖凝胶FF(DEAE Tanrose 6FF)或Q琼脂糖凝胶FF(Q Tanrose 6FF)富集和分离后再上琼脂糖凝胶6B或6FF得到纯的病毒。《去除 -- 蛋白中的核酸》核酸带阴电荷,在初步纯化时利用阳离子交换介质如 SP 或CM Tanrose FF 结合目标蛋白,可除去大量核酸。核酸在高盐下会和蛋白解离,疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白,在纯化蛋白的同时去除核酸。利用核酸酶将核酸切成小片断,用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。《纯化 -- 中草药有效成分》中药的化学成分极其复杂。传统中药多是煎熬后服用,有效成分多较为亲水,包括生物碱、黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸、多糖、肽和蛋白质。灵活及综合性地利用多种层析方法。如离子交换、分子筛、反相层析,更容易分离到单一活性成分。葡聚糖凝胶LH-20(Tandex LH-20)同时具备吸附性层析和分子筛功能,例如:用甲醇分离黄酮甙,三糖甙先被洗下来,二糖甙其次,单糖甙随后,zui后是甙元。葡聚糖凝胶LH-20(Tandex LH-20)可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂,广泛用于各种天然产物的分离,包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。生物碱在酸性缓冲液中带正电,成为盐,SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反,黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中,在Q阴离子交换柱上分离效果良好。《样品净化 -- 脱盐、小分子去除》使用凝胶过滤介质Tandex G10、G15、G25等去除小分子,效率高,处理量可达床体积30%。只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液,就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子,简单直接。由于只是去除小分子,柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分种至半小时完成。月旭Tandex G25系列介质专为蛋白质脱盐而设计。病毒、DNA疫苗或质粒可以用琼脂糖凝胶6B除盐或交换缓冲液,蛋白、抗体等可以用葡聚糖凝胶G25快速去盐和交换缓冲液。
  • 远慕总结:质粒DNA的提取方法
    (一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时,共价闭合环状质粒DNA的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,在而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们缠绕形成网状结构,通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。[实验仪器与设备]1.恒温培养箱 2.恒温摇床3.台式离心机(最大转速4000rpm) 4.冷冻高速离心机5.高压灭菌锅 6.超净工作台7.微量移液器 8.eppendorf tupe、tip[实验材料]1.葡萄糖 2.三羟甲基氨基甲/烷(Tris)3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.氢氧/化钠5.十二烷基硫酸钠(SDS) 6.乙酸钾7.冰乙酸 8.氯/仿9.乙醇 10.胰RNA酶11.氨苄青霉素 12.蔗糖13.溴酚蓝 14.酚15.β巯基乙醇 16.盐酸17.含pUC18质粒的大肠杆菌附:试剂的配制1.溶液Ⅰ50mmol/L 葡萄糖5mmol/L 三羟甲基氨基甲/烷(Tris) TrisHCl (pH8.0)10mmol/L 乙2胺四乙酸(EDTA)(pH8.0)2.溶液Ⅱ0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合3.溶液Ⅲ5mmol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 ml4.TE缓冲液10mmol/L TrisHCl1 mmol/L EDTA(pH8.0)5.70%乙醇(放-20℃冰箱中,用后即放回)6.胰RNA酶将RNA酶溶于10mmol/L TrisHCl(pH7.5)、15mmol/L NaCl中,配成10mg/ml的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,保存于-20℃。7.终止液:40%蔗糖、0.25%溴蓝酚8.酚[实验步骤](一) 提取质粒1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中,接入含质粒的大肠杆菌,37℃振荡培养过夜。2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中,4000rpm,离心2min。3.吸去培养液,使细胞沉淀尽可能干燥。4.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中,充分混匀,室温放置10 min。5.加200μl溶液Ⅱ(新鲜配制),混匀内容物,将离心管放冰上5 min。6.加入150μl溶液Ⅲ(冰上预冷),盖紧管口,颠倒数次使混匀。7.1200rpm,离心15 min,将上清转至另一离心管中。8.向上清中加入等体积酚:氯/仿(去蛋白),反复混匀,12000rpm,离心5min,将上清转移到另一离心管中.9.向上清加入2倍体积乙醇,混匀后,室温放置5-10min。12000rpm离心5min。倒去上清液,把离心管倒扣在吸水纸上,吸干液体。10.用1ml70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀,振荡并离心,倒去上清液,真空抽干或空气中干燥。11.加50μl TE缓冲液,其中含有20μg/ml的胰RNA酶,使DNA完全溶解,-20℃保存。(二)琼脂糖凝胶电泳检测DNA[实验原理]琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应,DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,因此它们能以同样的速度向正极方向移动。不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(ethidum bromide ,EB),在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带,在电场中,pH8.0条件下,凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。琼脂糖凝胶有如下特点:(1) DNA的分子大小 在凝胶基质中其迁移速率与碱基对数目的常用对数值成反比,分子越大迁移得越慢。(2) 琼脂糖浓度 一个特定大小的线形DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率(u)的对数与凝胶浓度(t)成线性关系。(3) 电压 低电压时,线状DNA片段迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加,不同分子量DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长,随着电压的增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大,所加电压不得超过5v/cm。(4) 电泳温度 DNA在琼脂糖凝胶电泳中的电泳行为受电泳时的温度影响不明显,不同大小的DNA片段其相对迁移速率在4℃与30℃之间不发生明显改变,但浓度低于0.5%的凝胶或低熔点凝胶较为脆弱,最好在4℃条件下电泳。(5) 嵌入染料 荧光染料溴化乙锭用于检测琼脂糖凝胶中的DNA,染料嵌入到堆积的碱基对间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状迁移率降低15%。(6) 离子强度 电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶,电导率最小,DNA几乎不移动,在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液),则电导很高并明显产热,严重时会引起凝胶熔化。对于天然的双链,常用的几种电泳缓冲液有TAE、TBE等,一般配制成浓缩母液,室温保存,用时稀释。[实验仪器与设备]1. 恒温培养箱2. 琼脂糖凝胶电泳系统3. 高压灭菌锅 4. 紫外线透射仪[实验材料]1.三羟甲基氨基甲/烷(Tris) 2.硼/酸3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.溴酚蓝5.蔗糖 6.琼脂糖7.溴化乙锭 8.DNA marker9.DNA样品[实验步骤]1.缓冲液的配制① 5×TBE(5倍体积的TBE贮存液)配1000ml 5×TBE:Tris 54g硼/酸 27.5g0.5mol/l EDTA 20mlPh8.0② 凝胶加样缓冲液(6×)溴酚蓝 0.25%蔗糖 40%③溴化乙锭溶液(EB) 0.5μg/ml2.制备琼脂糖凝胶按照被分离DNA的大小,决定凝胶中琼脂糖的百分含量。可参照下表:琼脂糖凝胶浓度 线性DNA的有效分离范围0.3% 5-60 kb0.6% 1-20 kb0.7% 0.8-10 kb0.9% 0.5-7 kb1.2% 0.4-6 kb1.5% 0.2-4 kb2.0% 0.1-3 kb3.胶板的制备(1) 用高压灭菌指示纸带将洗静、干燥的玻璃板的边缘(或电泳装置所皿备的塑料盘的开口)封住,形成一个胶膜(将胶膜放在工作台的水平位置上,用水平仪校正)。(2) 配制足够用于灌满电泳槽和制备凝胶所需的电泳缓冲液(1×TBE)。准确称量的琼脂糖粉。缓冲液不宜超过锥瓶或玻璃瓶的50%容量。 在电泳槽和凝胶中务必使用同一批次的电泳缓冲液,离子强度或pH值的微小差异会在凝胶中形成前沿,从而大大影响DNA片段的迁移率 。(3) 在锥瓶的瓶颈上松松地包上一层厚纸。如用玻璃瓶,瓶盖须拧松。在沸水浴或微波炉中将悬浮加热至琼脂糖溶解。注意:琼脂糖溶液若在微波炉里加热过长时间,溶液将过热并暴沸。应核对溶液的体积在煮沸过程中是否由于蒸发而减少,必要时用缓冲液补充。(4) 使溶液冷却至60℃。加入溴化乙锭(用水配制成10mg/ml的贮存液)到终浓度为0.5ug/ml,充分混匀。(5) 用移液器吸取少量琼脂糖溶液封固胶模边缘,凝固后,在距离底板0.5-10mm的位置上放置梳子,以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。如果梳子距玻璃板太近,则拔出梳子时孔底将有破裂的危险,破裂后会使样品从玻璃板之间渗透。(6)将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶模中。凝胶的厚度在3-5mm之间。检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡。(7)在凝胶完全凝固后(于室温放置30-45分钟) ,小心移去梳子和高压灭菌纸带,将凝胶放入电泳槽中。低熔点琼脂糖凝胶及浓度低于0.5%的琼脂糖凝胶应冷却至4℃,并在冷库中电泳。(8)加入恰好没过胶面约1mm深的足量电泳缓冲液。4.加样DNA样品与所需加样缓冲液混合后,用微量移液器,慢慢将混合物加至样品槽中。此时凝胶已浸没在缓冲液中。 一个加样孔的最大加样量依据DNA的数量及大小而定,一般为20-30μl样品。已知大小的DNA标准,应同时加在凝胶的左凝胶的左侧和右侧孔内。确定未知DNA的大小。测量未知DNA的大小时,要所有样品都用相同的样品缓冲液。5.电泳在低电压条件下,线形DNA片段的迁移速度与电压成比例关系,但是,在电场增加时,不同相对分子质量的DNA片段泳动度的增加是有差别的。因此,随着电压的增加,琼脂糖凝胶的有效分离范围随之减小。为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率,电场强度不应高于5V/cm。当溴酚蓝指示剂移到到距离胶板下沿约1-2cm处,停止电泳。
  • 老酸奶被指添加工业明胶不能吃:或用旧皮鞋熬制
    4月9日消息,央视记者微博今日爆料:不要吃老酸奶和果冻。央视主持人赵普(微博) 称:“来自调查记者短信:不要吃老酸奶(固体形态)和果冻,内幕很可怕”。而朱朱文强(微博)微博称:“央视一哥们说,以后别吃果冻和酸奶,问为啥,他比喻说,哪天你扔了双破皮鞋,转眼就进你们肚子了。这哥们说,这才是今年315晚会重头,可惜没播”。媒体人微博网名”落魄书生周筱赟(微博)“对此称:”不用这么神秘兮兮啦。所谓老酸奶,就是更加浓稠,其实是大量添加工业明胶。工业明胶,就是用垃圾里面回收的破烂皮革之类做出来的。果冻更是如此。这本该是常识。“   网友评论:   一财网在以上微博评论中看到,有网友猜测:”跟头发做酱油、臭皮熬阿胶一个道理吧 ?或者是塑化剂 ? “   网友:”我是学食品营养与检测的,也经常会与食品添加剂打交道,像目前国内的果饮基本都是用添加剂调制而成,比如营养快线,只需少量的牛奶,按顺序正确加入添加剂,就能马上调制而出。还有一块小小的面包,按照最新国标(GB2760-2011)最多可添加二十种的添加剂。“   网友:”看到评论里有人说是用廉价的工业明胶代替食用明胶。百度了一下,发现使用明胶的食物多如牛毛,不过查了下工业明胶和食用明胶的价格差距并不大,差价利润绝对不值得大企业冒险,估计还有内幕。“   究竟何为老酸奶?   不知道什么时候开始,各超市的酸奶柜台突然被铺天盖地的“老酸奶”所占据。几个月以来,许多朋友都问我:老酸奶是不是最天然的酸奶?是不是营养价值比其他酸奶高?是不是有特殊保健作用?是不是比其他酸奶安全?是不是不含添加剂特别适合孩子吃?   真正的老酸奶是怎么制作的?   其实,所谓的“老酸奶”,是一个传统制作酸奶产品的概念,但已经变味了。各地都有自己的 “老酸奶”,也就是过去传统制作的凝固型酸奶。这种酸奶不是黏稠的液态,而是基本上呈现固态。这种固态不是加了任何凝固剂,而是牛奶蛋白质的一种特殊凝胶状态。把消过毒的牛奶、糖和菌种加到干净的容器当中,保温发酵几个小时,牛奶就会变成固态,每个自制酸奶的人都知道。这种蛋白质凝胶状态很脆弱,只要用力搅拌,就能让看似坚实的凝胶重新变成液态的奶。能伸展到脚踝处,那么你需要更多相关锻炼。   普通酸奶是老酸奶加了增稠剂等   在我们小时候,各地的酸奶都是这种固态的产品,但随着奶制品产量的增大,这种产品慢慢地退出了市场。这是因为凝固型的酸奶在运输中容易因为摇晃、震荡等机械力量影响口感,消费者看到的是破碎的冻,甚至是变成液态的酸奶,肯定会不满意。   同时,因为在固态酸奶没法加入果汁、果粒之类配料,为了便于运输和销售,人们就加入一些增稠剂,把大罐发酵好的酸奶凝冻慢慢搅碎,让它变成黏稠的半流体。这就是市面上占优势的酸奶产品状态。   如果少加增稠剂,酸奶产品往往会呈现液态,只不过比牛奶略浓一些,有些消费者以为酸奶“内容不够”而产生嫌弃心情,其实这是很正常的状态。能伸展到脚踝处,那么你需要更多相关锻炼。   如今的“老酸奶”添加了凝胶剂   但是,喝惯了这种黏稠的酸奶,人们也有点腻了。这时候,新产品“老酸奶”让人们眼前一亮。它以传统产品的面目出现,但为了避免运输中变稀的麻烦,添加了凝胶剂,这样,无论怎么震荡都不会变成液态,运输和销售非常方便。   普通的牛奶原料,加明胶、琼脂、卡拉胶等等植物胶,就可以制成这种凝冻状态。我的实验室里就曾经做过类似的冻,而且口感效果比某些市售产品还理想,只不过没有把这种配方变成产品。   所以,严格来说,市面上所谓的“老酸奶”产品,应当叫做“酸奶冻”比较确切。能伸展到脚踝处,那么你需要更多相关锻炼。   巨额的暴利驱使企业铤而走险 非法生产食用明胶   据北青网消息,中国明胶协会理事长王敬忠向记者算了一笔账:1吨正规食用明胶的原材料,价格高达2000~3000元,而一般的皮革下脚料,1吨仅需要 100~200元。但是,进入市场后,1吨食用明胶的收购价都在2万~3万元左右。“目前,国内生产食用明胶的不法小厂家有100多家,然而取得生产许可证的只有20多家。不仅仅是在山东,河北、江浙一带都是这些假冒食用明胶的根据地。”   王敬忠说,在当地工厂,工人们都会将这些皮革废料叫做“蓝皮”、“白皮”。这些皮子全是从皮鞋、皮衣或制鼓的皮革上削下来的废料,拉回工厂时,大都是成碎末的皮子,还搀和着大量的泥块。“但是制成后的明胶,透明无味。消费者根本无法将正规的食用明胶和废皮革做成的明胶区分开来。”   中国农业大学教授陈敏称,制革厂在鞣制皮革时,要使用一些含有金属元素铬的化学制剂。鞣制、整理后才舍弃一些碎皮,这些碎皮就含有对人体有害的金属铬。金属铬会破坏人体骨骼以及造血干细胞,长期食用会导致骨质疏松,严重的会患上癌症。铬对人体健康的这种危害是一个缓慢的过程,一般在2年以上才会显现出来。   专家曾表示:只要不超标都可以   早在2011年6月间,有网友微博爆料说,以粘稠见称的“老酸奶”是很多人的最爱。但所谓“老酸奶”其实是由一种“凝胶剂”制成,虽然价格是普通酸奶(乳酪)的一倍还多,但并没有更多营养,而且多食无益。为此,该网友调侃道:哥喝的不是“老酸奶”,是凝胶剂!   对此当时中国西部乳业发展协会秘书长魏荣禄接受媒体指出,果胶、明胶都属于稳定剂,是国家允许添加在奶制品中的,只要不超过标准都是正常的。   “搬运过程中的震动可能会使老酸奶产生乳清分离,影响其品质和口感。所以老酸奶中加入了适量的稳定剂”。魏荣禄说,过去的老酸奶在发酵后很短时间内就被饮用,因而只用添加食糖,不需要添加稳定剂。   “老酸奶并不是越浓越好,”魏荣禄表示,过于浓稠的老酸奶中可能加入了琼脂等增稠剂,营养价值并不会随着浓稠程度的提高而增加。
  • 杰克琼斯被曝甲醛超标 大连还在卖
    近日,长春市工商部门监测发现杰克琼斯等服装品牌甲醛超标,对此,昨日记者走访大连市场发现,在多个商场的杰克琼斯专卖店内,绫致时装(天津)有限公司生产的杰克琼斯牛仔裤仍在销售。销售员三缄其口消费者茫然不知   昨日,记者登录长春市工商行政管理局官方网站,在网站首页看到有关“一季度流通领域商品质量检测信息”的公示,公示内容为:“为保护消费者合法权益,长春市工商行政管理局依法组织开展了第一季度商品质量监测,在市区20家大型商场、专门店等重点经营场所,监测了服装(牛仔裤)、运动装(卫衣)、内衣、床上用品4种商品质量,共抽取195个品牌、204个批次商品,依据国家标准,检测了甲醛释放量、PH值、色牢度等项目,监测结果有15个批次不合格,不合格率为7.35%。不合格商品有标称绫致时装(天津)有限公司生产的杰克琼斯牌牛仔裤,不合格项目为甲醛超标 上海衍晟服装有限公司生产的HG牌牛仔裤,不合格项目为甲醛超标……”   昨天,记者以消费者身份在西安路附近一家杰克琼斯专卖店询问销售人员有关甲醛超标的问题,销售人员称并不知情,暂时也没有接到下架的通知。而在选购的受访消费者则多数称并不知道该品牌甲醛超标的相关消息。关于此前有消息称,绫致时装(天津)有限公司法务部工作人员否认了产品甲醛超标的说法表示将提出申诉,对产品进行复检等问题,记者昨日致电绫致时装(天津)有限公司,电话却一直无人接听。甲醛能让衣物平整也容易超标   据了解,《国家纺织品基本安全技术规范》将服装产品分作A、B、C三类,分别对应婴幼儿用品、直接接触人体皮肤产品和非直接接触人体皮肤产品,各自规定的甲醛含量上限为20mg/kg、75mg/kg和 300mg/kg。同时,在服装的吊牌上应该对各自类别进行标示,方便消费者鉴别选购。从2010年1月1日起,西服、大衣等10种服装国家标准正式实施,规定甲醛含量必须在服装吊牌上明确标注。   对此,早年曾开过服装厂现在大连经营一家眼镜店的陈先生透露,为了使衣物更平整、抗皱性更高、颜色更牢固,制衣过程中需要添加甲醛,但处理过程中如果不注意控制用量,就可能造成甲醛含量超标。   据介绍,甲醛主要对皮肤黏膜有刺激 皮肤直接接触甲醛可引起过敏性皮炎、色斑等 吸入高浓度甲醛时可诱发支气管哮喘。记者陆瑶链接四类衣物易含甲醛   业内人士说,通常情况下,有四类纺织品容易含甲醛:   [1] 免烫服装   [2] 时髦的牛仔衣裤   [3] 儿童服装   [4] 在人造板家具中存放的服装。提醒新衣服应漂洗后再穿   如果购买的家具和装修中甲醛含量比较高,也会直接污染放在衣柜里的衣物。因此在穿新衣服之前最好用清水充分漂洗,因为甲醛较容易溶解于水,其次充分晾晒。
  • 揭秘:嗜肺军团菌的检测过程
    2012年初,香港新港府总部多处发现退伍军人杆菌,证实是会议厅的厨房和立法会综合大楼3楼茶水间的两个样本,检出嗜肺军团菌。港府大楼求诊的8名员工,基本都是24岁至42岁青壮年,检测结果显示,无须入院,或可能是流感样型。换季时节,是军团菌高发的季节,由嗜肺军团菌引发的军团菌肺炎在非典型肺炎中是病情严重的一种,未经有效治疗的病死率高达20%。   嗜肺军团菌是一种有鞭毛,革兰氏阴性,军团菌属多形态性的短小球杆菌。嗜肺军团菌不抗酸,无孢子,无荚膜,类似于杆菌。不能分解明胶、糖类或尿素,不可参加酵解反应。嗜肺军团菌无色,也非自身荧光。氧化酶与过氧化氢酶测试呈阳性,为β-内酰胺酶阳性。专性需氧,在自然界可长期存活,如在蒸馏水中可存活100d以上,污水中可存活一年,对热和一般消毒剂敏感。菌落特征为灰白色,有光泽,湿润,圆形,凸起,并有特殊臭味。革兰氏染色不明显,多用镀银法或Giemsa法染色。 嗜肺军团菌   卫生部于2006年颁布了《公共场所集空调通风系统卫生管理办法》、《公共场所集中空调通风系统卫生规范》,规定对集中空调系统冷却水和冷凝水作出了嗜肺军团菌“不得检出”的规定。   流行病学研究阐明,冷凝塔、加湿器及风管等是病原体的来源,空气及气溶胶是病原体的传播媒介。夏季和秋季是军团菌最适宜生长的季节,也是发病率最高的季节。   军团菌的检测军团菌因为个体小,生长缓慢,难检出,并具有传染性,对检测实验室和实验人员的操作有相当高的要求。近日,我要测工作人员联系了广州工业微生物检测中心,了解了嗜肺军团菌的检测方法及检测过程:   嗜肺军团菌的检测   国内外的军团菌检测方法主要依据 ISO11731-1:1998 ISO 11731-2:2004(E)、《军团菌的检测和计数》及《公共场所集空调通风系统卫生管理办法》。定性测试两种方法的检测步骤大致相同,基本包括以下步骤:   1. 采样及运送   采样容器可为无菌玻璃瓶,聚乙烯瓶或无菌采样袋,并且瓶口或袋口能密封;采样量一般在300-400ml 左右,如果经过氯或臭氧消毒的水,采样后加入少量硫代硫酸钠溶液,以中和样品中的氧化物;采样至送达实验室最长时间不得超过2天。 嗜肺军团菌取样   2. 样品处理   对含少量军团菌的样品一般用薄膜过滤法来浓缩样品的浓度,如有杂质的样品可静置沉淀或离心过滤去除,并对样品进行热处理和酸处理以减少非军团菌的生长。 嗜肺军团菌样品前处理   3. 接种和培养   军团杆菌在分类学上是一种独特的需氧革兰氏阴性杆菌,无荚膜,在普通培养基上不生长,属于细胞内寄生菌。目前标准培养基为活性碳酵母浸膏琼脂平板,也称军团菌生长平板(BCYE)。接种在 BCYE 平板上的样品在温度为35-37º C,培养10天,在浓度为2.5% CO2 的环境下培养更有利于军团菌的生长。军团菌的菌落通常呈白色、灰色、有荧光。 接种和培养   4. 军团菌的鉴定   挑取至少3个疑似军团菌的菌落接种至军团菌生长 BCYE 平板和半光氨酸缺失的 BCYE-Cys 平板,在35-37º C条件下培养至少5天,凡是在 BCYE 平板上生长而在平板和半光氨酸缺失 BCYE-Cys 平板上不生长,并且血清学阳性的的则判为军团菌。 嗜肺军团菌检测 嗜肺军团菌检出   嗜肺军团菌的预防   第一,,对军团菌主要滋生地 -- 中央空调系统、冷热水循环系统、冷凝脱水盘、空气加湿器等进行定期清洁处理。定期更换冷却水和冷冻水,避免贮存水长期滞留,保证空调系统注入水的洁净,必要时采取杀菌杀藻等消毒措施;定期清洗空调冷却塔及管道,对大型建筑物的中央空调系统要定期使用消毒抑菌剂清洁。   第二,使用空调(包括冬天使用暖空调)的房间应经常开窗通风,经常保持室内环境的卫生和空气流通,有条件的话对室内空气进行净化和杀菌处理。   第三,使用空调期间,一旦出现发烧、咳嗽、胸痛、呼吸不畅,不应只考虑“感冒”,应及时就诊检查,警惕军团菌病。只要早期发现及时治疗,效果较好。   关于广州工业微生物检测中心   广州工业微生物检测中心通过了CNAS实验室认可及广东省CMA计量认证,已为多家星级酒店、商业广场及企业的生活用水、冷却塔、泳池水等水源提供了检测及咨询服务,出具的军团菌检测报告得到国家卫生监督部门的承认。
  • 琼海农产品质量检测站揭牌
    琼海市农产品质量安全检验检测站近日揭牌成立。据悉,这是海南省第二个挂牌成立的市级农产品质量检测站。   琼海市农产品质量安全检验检测站是2008年新增中央投资项目,总投资520万元,建筑面积1468平方米,内设样品处理室、检测室、灭菌室等13个室,目前主要负责琼海市农产品质量安全检验检测工作。   据了解,目前海南省省一级的农产品质检机构有1家———海南省现代农业检验检测预警防控中心,总投资近1.2亿元,现已进入装修阶段,预计今年冬季可以部分投入使用。市县一级的农产品质检机构共建9家,其中即将开工的有5家,在建的有2家,儋州市农产品质量安全检验检测中心和琼海市农产品质量安全检验检测站已挂牌成立。
  • 食品中霉菌检测及微生物检测会遇到哪些问题?又该如何解决?
    实验室霉菌检测中常见问题霉菌: 不是分类学上的名词,而是一些丝状真菌的通称,属真菌的一部分;其对人类具有双重性,有利的方面是它可以用来酿造、工业发酵、抗生素和酶制剂的生产等,不利方面是它能引起农副产品、食品、原料及器材的腐烂,也感染并引起人类和动、植物的多种疾病,少数种类,如黄曲霉,能产生黄曲霉毒素,黄曲霉毒素是一种致癌物质,危害人、畜的健康和生命。因此,霉菌的检测对于食品的安全性很重要。食品中常见的霉菌:毛霉属、根霉属、曲霉属、青霉属等。检测中的注意事项: 1、取样的代表性。 2、取样工具的无菌。空气中霉菌的孢子含量很高,所以,取样的工具、容器等要经过严格的高压灭菌。 3、检样的方法。 (1)由于霉菌易被携带,所以,检样时操作人员应尽量避免自身携带的可能。 (2)样品的均质及充分振摇。因为有些孢子是连成串的,故均质和振摇能使其充分散开,同时,在各梯度连续稀释时,也要用灭菌吸管反复吹吸几次,使孢子充分散开。 4、培养温度和时间。培养温度25-28℃培养,3天后观察,需培养观察一周。 霉菌检验中常用的培养基:孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂等。 5、检样中常见的问题。 (1)不同稀释度计数结果相同;(2)不生长或生长很好连成片无法计数;原因:①稀释时未经反复振摇,吹吸,导致孢子未充分散开,影响了计数的结果。②由于培养基不适宜,pH值低等,致使生长较慢。③观察时间的掌握。真菌生长较慢,故需5d后才能观察出结果。每天都要观察结果。微生物操作中常见问题的讨论与分析1、划不出单个菌落的原因: (1)平板上有过多的水分;(2)划线时接种环未经反复灼烧; (3)多区划线,三区或四区划线。2、涂布和倾注的区别:涂布利于观察,但由于涂布棒上会带有少量的菌液,可能影响计数的准确性;倾注更为准确,但不利于观察菌落的状态。Beuchat和Matsuda等人分别对这两种方法作了大量比较试验后发现,对霉菌计数来说,涂抹法有以下几方面优越于倾注法:①培养出的霉菌菌落数较多;②培养所需的时间较短;③霉菌孢子、菌落形态特征发育完全,便于鉴定。这是因为绝大多数霉菌是好氧的,在培养基表面生长快,发育好,而混在培养基中发育就受影响,而且在培养基倾注时霉菌孢子易受热损伤。3、培养基的选择:培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。目前国标方法中使用的培养基有:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CAO),其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长,而CAO则适合于高渗性霉菌生长,酵母菌几乎不长。在日常检测中我们发现,有些常见的耐高渗性霉菌,如局限曲霉、谢瓦曲霉、赤曲霉、Wallemia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长,而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方:蔗糖400g,麦芽提取汁20g,酵母提取汁5g,琼脂20g,氯霉素50mg,蒸馏水1000ml;DG18琼脂配方:葡萄糖10g,蛋白胨5g,KH2PO41g,MgSO47H2O 0.5g,氯霉素0.1g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH6.5)上则正常生长。孢子、形态特征发育良好,而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长,因此,若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的霉菌,将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。特别是对干燥食品、高糖食品、淹渍食品等,更有必要同时采用M40Y或DG18。由于霉菌中很多种类不会产生有毒的霉菌毒素,危害较小,而有的菌株即使污染数量不多,但其产生的霉菌毒素却危害较大,因此仅作霉菌计数并不能全面反映其危害程度,重要的是要知道污染菌的菌相,才能更好地判断被污染食品的安全程度。为此,国外有些研究者设计出各类选择性培养基,可以识别产毒的霉菌。如AFPA培养基(配方:酵母提取汁20g,蛋白胨10g,柠檬酸铁铵0.5g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH5.6)用于分离黄曲霉毒素产生菌高污染率的食品。产黄曲霉毒素的菌株黄曲霉和寄生曲霉在AFPA上30℃培养2~3天就形成背面有亮橙黄色的特征性菌落,非常容易识别。有人利用该培养基分离黄曲霉高污染食品花生、玉米等,取得了满意的结果。因此,针对不同样品,有目的地设计出相应的选择性培养基,以筛选污染菌中的危险菌群,将是一个值得探索的方向。4、 培养基配制时应注意的问题:(1)灭菌温度要严格控制,按照要求灭菌,尤其含糖量较高的培养基温度不应太高,过高会导致糖分焦化,影响质量;(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分;(3)培养基不能反复灭菌,反复灭菌也会导致营养成分的破坏;(4)含琼脂的培养基灭菌后,要摇匀。5、 平板的保存:大多数平板如 VRBA、DC、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。
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