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真氧产碱菌

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真氧产碱菌相关的论坛

  • 【原创大赛】产气荚膜梭菌初试验

    【原创大赛】产气荚膜梭菌初试验

    1. 适应范围和应用领域1.1. 适应于饮用天然矿泉水中产气荚膜梭菌的测定2. 方法原理2.1. 采用滤膜法。取50ml的水样用孔径为0.22um的滤膜过滤,然后将滤膜移至SPS琼脂培养基上,倒置于36℃±1℃厌氧培养24h,计数黑色菌落,任意挑取3个-5个在滤膜上生长的黑色菌落,分别接种FT培养基,于36℃±1℃厌氧培养18-24h后,将培养物做确证实验,根据实验结果确证产气荚膜梭菌的存在。3. 试剂 3.1. 庖肉培养基 3.2. 亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂(SPS) 3.3. 液体硫乙醇酸盐培养基(FT) 3.4. 动力-硝酸盐培养基(A法) 3.5. 卵黄琼脂培养基4. 仪器及设备 4.1. 恒温培养箱 4.2. 厌氧培养装置 4.3. 滤器5. 操作5.1. 样品测定5.1.1. 安装好过滤装置,在100级洁净工作台进行过滤操作。取50ml水样(若含菌量较多,可用0.1%蛋白胨水将水样按比例稀释)注入装有滤膜的滤器中,打开滤器阀门进行抽滤。5.1.2.结束过滤操作,用无菌镊子将滤膜倒置在SPS琼脂培养基上(或正置于SPS培养基上,在上层覆盖约5mlSPS培养基创建厌氧环境),滤膜应与培养基完全贴紧,两者不留气泡。5.1.3.倒置于厌氧装置中在36℃±1℃厌氧培养24h。计数平板上的黑色菌落数。5.2.确证性试验 挑取可疑黑色菌落3-5个,分别接种FT培养基,于36℃±1℃厌氧培养18-24h 5.2.1. 革兰氏染色镜检:产气荚膜梭菌为革兰氏阳性粗大杆菌,其耐热菌株可能形成卵形芽孢,位于菌体中央或近端,其宽度一般不大于菌体。 5.2.2. 动力硝酸盐试验:接种针穿刺,36℃±1℃厌氧培养24h,观察接种线的生长情况,判断有无动力。然后滴加A液和B液2-3滴,观察硝酸盐是否被还原。产气荚膜梭菌现象:无动力;硝酸盐阳性。 5.2.3. 含铁牛乳培养基试验:取生长旺盛的FT培养液1ml接种含铁牛乳培养基,在46℃培养2h后观察“爆裂发酵”现象。在5h内不发酵为阴性。产气荚膜梭菌为阳性。 5.2.4.卵黄琼脂试验:接种针取FT培养液点种于卵黄琼脂平板,,36℃±1℃厌氧培养24h,观察接种点变化。产气荚膜梭菌会分解卵黄中的卵磷脂,接种点底部及周围形成乳白色浑浊带。5.3.结果表述: 根据黑色菌落计数和确证性试验结果,计算每50ml水样中的产气荚膜梭菌数量,结果以CFU/50ml计。附图:[img=,490,278]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141058_01_3081717_3.png[/img]菌株培养---庖肉培养基(图左), 疱肉斜面培养基(图右)[img=,490,248]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141059_01_3081717_3.png[/img]产气荚膜梭菌在SPS培养基上的现象(图左)及大肠杆菌阴性对照[img=,490,514]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141100_01_3081717_3.png[/img]在FTG培养基上生长旺盛[img=,490,208]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141101_01_3081717_3.png[/img]动力-硝酸盐培养基(+)含铁牛乳培养基(+)含铁牛乳培养基(—)[img=,490,235]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708141102_01_3081717_3.png[/img]产气荚膜梭菌在血平板上的溶血现象。

  • 产气荚膜梭菌检验

    老师们请教一下,产气荚膜梭菌检验公式中的 d 表示稀释因子(第一稀释度)是十分之一还是10?

  • 生活饮用水中的总大肠菌群检测产酸产气问题

    [color=#444444]各位小伙伴国标上说的产酸产气,是同时满足产酸产气,还是产酸或者产气?我从平板上挑的可疑菌落接种乳糖蛋白胨它产酸变黄了,但是没有产气,小导管里没有气泡,这个算是总大肠了吗[/color]

  • 产酸的菌群有哪些?

    我们有一批产品,有酸味。我想咨询下,致使腌制品产酸的微生物菌群有哪些。方便检测以想办法排除

  • 产气荚膜梭菌

    我们以前做产气荚膜梭菌,标准菌在滤膜上会长黑色菌落。用磁珠和庖肉两种方法保存了菌种,过了一段时间从这两种取出再做也是对的。可现在,可能过了大半年吧,两种保存方法接出来的菌都是浅橙色半透明,不是黑色了。革兰氏染色镜检是阳性(紫色)较大的杆菌,和网上的图片很相似。不知道这样正常吗?是否只能是黑色菌落?求高手指点,谢谢!

  • 【求助】食品中做大肠菌群时,,那么在判定阳性时一定要看是否产气吗?

    大肠菌群判定食品中做大肠菌群时,初发酵试验为接种在LST中培养,产气为阳性,那么在判定阳性时一定要看是否产气吗?有些时候没有产气,但是试管变得浑浊,甚至有白色粘稠物出现,那样可以判定阳性吗?初发酵试验阳性后再接种到BGLB肉汤中,产气则为阳性,那么是否有必要做证实实验呢,在平时检测大肠菌群,这个实验的时间比较紧迫,要快速知道大肠菌群情况,如果做证实实验,那么就没时间了,可不可以只做初发酵试验呢?

  • 解读产志贺毒素大肠杆菌O26

    一、背景信息  近日,据美国食品安全新闻网消息,由美国墨西哥风味连锁餐厅Chipotle食物中毒引发的产志贺毒素大肠杆菌O26疫情在美国蔓延,导致20人住院。美国疾病预防和控制中心(CDC)称,近两年来由产志贺毒素大肠杆菌O26引发的食物中毒事件明显增多,在未来可能引发更多的疫情,尤其是引发溶血性尿毒综合症的病例数量可能会远超过产志贺毒素大肠杆菌O157。二、专家解读  (一)产志贺毒素大肠杆菌是全球最重要的新发高致病性食源性病原菌。  产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,简称STEC)是一类携带了前噬菌体编码一种或两种志贺毒素基因的新发高致病性食源性病原菌,包括大肠杆菌O26,以及O157、O45、O103、O104、O111、O121、O145等150多种其它血清型的大肠杆菌。该菌为革兰氏阴性杆菌,无芽胞,有鞭毛。可以在10—65℃生长,最适生长温度为33—42℃,具有较强的耐酸性(pH 2.5—3.0),可以抵抗胃酸的消化作用。  据不完全统计,美国1983—2002年发生的非O157的STEC感染者中,70%是由O26、O45、O103、O121、O111 和O145血清型所致;2011年9月,美国农业部食品安全检验局曾发布通告,强调大肠杆菌O26是美国最常见的非O157 STEC。爱尔兰对肉和乳制品中非O157 STEC的分布特征研究发现,血清型O26也是引起人类食源性疾病最主要的非O157血清型。STEC O26已逐渐成为美国、日本及部分欧盟发达国家引起暴发事件的主要病原菌。  (二)肉制品是引发食源性STEC感染的主要高危食品。  牛、羊等经济型动物是STEC的天然宿主,国际相关研究发现牛和羊中STEC携带率可高达71%甚至以上。美国农业部(USDA)和欧盟食品安全局(EFSA)也证实养殖场中存在高风险污染的STEC,并且可以通过环境、粪便、野生动物、土壤等在一定范围内循环存在,最终造成肉制品等污染。1982—2006年多个国家STEC暴发事件的归因分析表明,最主要原因是肉制品污染(42.2%),其次是乳制品(12.2%)。除此之外,生鲜果蔬及其制品等也可能是STEC O26重要的传播介质。通过对美国1992—2002年期间24起STEC暴发事件统计发现,67%的疫情是由牛肉制品导致的,其中O26是最主要致病血清型。  (三)国际组织及部分国家和地区已对肉制品中STEC污染给予高度重视。  1999年第32届食品卫生法典委员会(CCFH)会议上,各国政府对食品中的微生物风险应按“食品—病原”组合进行风险管理达成共识,其中就包括“牛肉中大肠杆菌O157”。联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)食品微生物风险评估联合专家组(JEMRA)于2011年发布了风险评估会议报告(Enterohaemorrhagic Escherichia coli in raw beef and beef products: approaches for the provision of scientific advice),为如何控制生牛肉及牛肉制品中的出血性大肠杆菌提供了科学建议。但是,迄今CCFH尚未对如何应用食品卫生通则控制牛肉中的出血性大肠杆菌制定相关科学导则,也未制定相关产品的限量标准。  2012年3月,USDA宣布强制执行在初加工的牛肉制品中不得检出六大类非O157 STEC(O26、O45、O103、O121、O111 和O145)。2011年德国发生STEC O104暴发事件后,欧盟也加强了对STEC的监测和评估工作,已连续5年对食品和病人中的STEC进行监测。

  • 既耐热又产气的菌有哪些呢

    [font=SimSun, STSong, &]蛋液的微生物主要是大肠,金黄色葡萄球菌,沙门氏菌,蛋液里面有耐热又产气的微生物吗[/font]

  • 细菌的生理、生化试验

    微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物检验中常用的生化反应介绍如下:一、糖酵解试验  不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异,或能利用或不能利用,能利用者,或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。  试验方法:以无菌操作,用接种针或环移取纯培养物少许,接种于发酵液体培养基管中,若为半固体培养基,则用接种针作穿刺接种。接种后,置36±1.0°C培养,每天观察结果,检视培养基颜色有无改变(产酸),小倒管中有无气泡,微小气泡亦为产气阳性,若为半固体培养基,则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡,有时还可看出接种菌有无动力,若有动力,培养物可呈弥散生长。本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵能力,从而进行各种细菌的鉴别,因而每次试验,常需同时接种多管。一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫,溴百里蓝和An-drade指示剂。

  • 【求购】水中大肠菌群(Coliform group)细菌的检测

    1 水中大肠菌群(Coliform group)细菌的检测 1 .1目的和原理 如果水源被粪便污染,则有可能也被肠道病原菌污染而引起肠道传染病。由于肠道病原菌在水中数量较少,故从水中特别是自来水中分离病原菌常常非常困难。大肠菌群细菌是肠道好氧菌中最普遍和数量最多的一类细菌,所以常常将其作为粪便污染的指示菌。即根据水中大肠菌群细菌的数目来判断水源是否受粪便所污染,并间接推测水源受肠道病原菌污染的可能性。一般规定每1000ml自来水中大肠菌群细菌不得超过3个。 大肠菌群细菌是指一类好氧或兼性厌氧,能发酵乳糖,在乳糖培养基中经37℃ 24小时培养,能产酸产气,革兰氏阴性,无芽孢的杆菌。本试验采用多管发酵法,以最近似数的方式来记载,此一数字是根据概率公式来估算,有大于实际数字的倾向,在增加每种稀释度的试管重复数后,可减少偏差。本法除了用于检测水样(淡水或海水)外,尚可用于泥浆、沉积物、污泥等的检测。测定时先将这类固体或半固体样品预先称重,再加水稀释,可取50克样品,置于盛有450ml灭菌磷酸盐缓冲液并装有玻璃珠、石英砂的锥形瓶中,振荡1—2分钟,便成10-1稀释,以用于检验。 1.2 材料与器皿 (1)培养基二倍浓度的乳糖胆汁液体培养基一倍浓度的乳糖胆汁液体培养基伊红——美蓝琼脂(E.M.B.)培养基亮绿乳糖胆汁(B.G.B)液体培养基营养琼脂培养基(2)灭菌移液管、灭菌稀释水、试管、杜汉氏小管、革兰氏染液、灭菌培养皿 1.3 方法与步骤 (1)假定试验①用10ml水样,接种到二倍浓度的乳精胆汁管中去,重复接三支 。②用lml水样,接种到一倍浓度的乳精胆汁管中去,重复接种三支。③制备水样 10-1和 10-2的稀释液。④分别接种lml10-1和 10-2稀释液到一倍浓度的乳糖胆汁管中,每个稀释液接种三支。⑤在35℃中培养48小时,观察有无气体和酸产生。⑥在48小时以内,培养管内倒置的杜汉氏管中有任何量的气体积累,便可断定为阳性假定试验。若培养管内液体清晰而杜氏管中有气泡时,可能为放置不当而残存的空气泡,不可与产气的阳性反应相混同。无气泡着为阴性。产酸者呈黄色。(2) 确信试验①取呈阳性和阳性可疑的初步发酵试管,轻轻振荡或转动,然后以无菌的金属接种环,转移1环培养物至亮绿乳糖胆汁管中,于35C℃培养48小时。如在倒置的杜汉氏管中产气,不论其量多寡,皆为阳性确信试验。②凡初步发酵试验管在24小时之前就显示活跃的发酵(产气量占杜汉氏管10%以上)的试管,应及时转移至确信试验的培养基。(3)完成试验①取上述阳性确信试验管,在伊红一美蓝平板上划线分离,为了确保获得分离的单菌落,须注意以下事项:a.划线间距至少相隔0.5厘米 b.接种针尖端要稍弯曲 c.先对发酵管轻击,并使之倾斜,以免接种针挑取到任何膜状物或浮渣,d.划线时要用针尖的弯曲部分接触琼脂培养基平面,以免刮伤或戳破培养基。划线后培养皿倒置,于35C培养24小时。② 24小时后,观察在EMB平板上出现的单个菌落,具核心及深绿色金属光泽者为较典型的大肠菌群菌落。尽可能挑取典型的或接近典型的大肠菌群菌落,在营养琼脂斜面上划线,置37 ℃培养24小时。挑取斜面培养物制成涂片,进行革兰氏染色,凡属革兰氏阴性杆菌,即确认了大肠菌群细菌的存在。③ 在EMB平板上呈较典型的大肠菌群细菌还可再次转接至乳糖胆汁发酵管中,在37℃下培养48小时,产生气体者即确认了大肠菌群细菌的存在。④ 根据证实有大肠菌群细菌存在的阳性管数查表5-10,以确定大肠菌群数。整个试验的步骤见图5-7所示。 图5-7 大肠菌群细菌的检测 1.4 结果及分析 将上述各个试验阶段的结果列表记录,并最后算出水中所含大肠菌群的最大可能值(表5-10)。 表5-10 最近似数(MPN)指数和95%置信度检索表 出现阳性反应的试管数每100ml中的MPN指数95% 置信度 在3支10ml 试管中在3支1ml 试管中在3支0.1ml 试管中下限 上限 0013 0.59 0103 0.5 13 10040.520 1017121 1107123 11111336 12011336 2009136 20114337 21015344 21120789 22021447 2212810150 300234120 301397130 3026415380 310437210 3117514230 31212030380 3209315380 32115030440 32221035470 330240361300 331460712400 33211001504800 本试验所用的培养基系选择培养基,许多细菌都不能利用培养基中的乳糖来发酵产气产酸,而大肠菌群细菌及少数其它种类的细菌可发酵乳糖产气产酸。培养基中的胆汁(牛、羊或猪的胆酸盐)是表面活性剂,它不会抑制大肠菌群细菌的生长,但能抑制其它革兰氏阳性细菌,如芽孢形成菌的生长。在胆汁缺乏时可用0.1克的十二烷基磺酸钠替代。溴甲酚紫(或亮绿)是pH的指示剂,大肠菌群在发酵乳糖产气外还同时产酸,该指示剂有助于我们判断发酵的进程。在假定试验的初步发酵管中,可能有极少数能发酵乳糖产气的非大肠菌群细菌混在阳性可疑反应管中,通过确信试验和完成试验,对初步发酵中的阳性可疑管进行复发酵试验,并进行革兰氏染色和细菌形态观察,即可将那些少量的非大肠菌群细菌(“假阳性管”)删除去,放在记录时须把三步试验都呈阳性的试管数计入阳性反应管。 1.5 培养基配制 (1)乳糖胆汁液体培养基: 蛋白胨 20.0克 乳糖 5.0克 胆酸钠 5.0克 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1毫升 蒸馏水 1000毫升. 将蛋白胨、乳糖、胆盐加热溶解于1000毫升蒸馏水中,调pH至7.2~7.4,加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1毫升,充分混匀,分装于有倒置杜汉氏小管的试管中,注意小管中不得有气泡,115℃灭菌20分钟。(2)伊红-美蓝琼脂(E.M.B)培养基①蛋白胨琼脂培养基(其成分为蛋白胨10.0克;琼脂18.0克;蒸馏水1000毫升;pH7.6) ②20%乳糖 2毫升 ③2%伊红溶液 2毫升 ④0.5%美蓝溶液 1毫升 将已灭菌的蛋白胨琼脂培养基加热溶化,冷却至60 ℃左右时,将已灭菌的乳糖溶液、伊红溶液及美蓝溶液按上述量以无菌操作加入,摇匀后即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏,故必须严格控制灭菌温度,一般为115℃,20分钟。(3)亮绿乳糖胆汁(B.G.B.)液体培养基蛋白胨 10.0克 乳糖 10.0克 胆酸钠 20.0克 亮绿 0.0133克 蒸馏水 1000毫升 pH 7.4 分装试管后,加入杜汉氏小管,115℃灭菌20分钟。

  • 细菌的生化试验

    微生物生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。因此微生物生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物检验中常用的生化反应介绍如下:   一、糖酵解试验  不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异,或能利用或不能利用,能利用者,或产气或不产气。可用指示剂及发酵管检验。  试验方法:以无菌操作,用接种针或环移取纯培养物少许,接种于发酵液体培养基管中,若为半固体培养基,则用接种针作穿刺接种。接种后,置36±1.0°C培养,每天观察结果,检视培养基颜色有无改变(产酸),小倒管中有无气泡,微小气泡亦为产气阳性,若为半固体培养基,则检视沿穿刺线和管壁及管底有无微小气泡,有时还可看出接种菌有无动力,若有动力,培养物可呈弥散生长。本试验主要是检查细菌对各种糖、醇和糖苷等的发酵能力,从而进行各种细菌的鉴别,因而每次试验,常需同时接种多管。一般常用的指示剂为酚红、溴甲酚紫,溴百里蓝和An-drade指示剂。  二、淀粉水解试验  某些细菌可以产生分解淀粉的酶,把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。淀粉水解后,遇碘不再变蓝色。  试验方法:以18~24h的纯培养物,涂布接种于淀粉琼脂斜面或平板(一个平板可分区接种,试验数种培养物)或直接移种于淀粉肉汤中,于36±1°C培养24~48h,或于20℃培养5天。然后将碘试剂直接滴浸于培养表面,若为液体培养物,则加数滴碘试剂于试管中。立即检视结果,阳性反应(淀粉被分解)为琼脂培养基呈深蓝色、菌落或培养物周围出现无色透明环、或肉汤颜色无变化。阴性反应则无透明环或肉汤呈深蓝色。  淀粉水解系逐步进行的过程,因而试验结果与菌种产生淀粉酶的能力、培养时间,培养基含有淀粉量和pH等均有一定关系。培养基pH必须为中性或微酸性,以pH7.2最适。淀粉琼脂平板不宜保存于冰箱,因而以临用时制备为妥。

  • 志贺氏菌检验新国标厌氧增菌装备适用性分析

    志贺氏菌检验新国标厌氧增菌装备适用性分析

    常见的厌氧培养方法1. 厌氧袋培养法:塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后,尽量挤出袋内空气,然后密封袋口。先折断气体发生管,后折断美兰指示剂管,使袋内在半小时内造成无氧环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态,于生化培养箱中培养。厌氧袋对于志贺氏菌厌氧增菌的缺陷:1、很难实现GB4789.5-2012中所需的大量250ml或500ml三角烧瓶的厌氧培养2、无法实现操作过程的厌氧环境,明显降低厌氧菌的检出率3、操作繁琐,易引起实验失败4、培养灵活性较差5、一次性耗材成本高2.厌氧罐培养法:塑料或不锈钢密封罐,内置钯颗粒催化剂,将培养皿、厌氧指示袋(条)以及开封后的厌氧产气袋一同置于罐内,罐盖封闭后抽真空,30分钟后达到厌氧状态,观察厌氧指示袋(条)如无颜色产生,则将厌氧罐于生化培养箱中培养。厌氧罐对于志贺氏菌厌氧增菌的缺陷:1、很难实现GB4789.5-2012中所需的大量250ml或500ml三角烧瓶的厌氧培养2、无法实现操作过程的厌氧环境,明显降低厌氧菌的检出率3、操作繁琐,易引起实验失败4、培养灵活性较差5、一次性耗材成本高3. 传统厌氧培养箱培养法:样品置于传输舱内,抽真空/充氮气3次循环(约26分钟),打开内门进入厌氧操作室。厌氧环境下进行接种等操作后,再转移至培养室内培养。箱内厌氧是在钯催化剂的作用下箱内剩余的O2与混合气中的H2生成水,再通过干燥剂去除多余水分,形成厌氧培养环境。传统厌氧培养箱对于志贺氏菌厌氧增菌的缺陷:1、样品转移所需的抽真空/充氮操作复杂,耗时过多2、无强制对流循环系统,箱内环境很难达到均一稳定,厌氧恢复速度很慢3、无厌氧状态指示,无泄漏报警4、不支持UV紫外消毒,密封材料易老化而产生泄漏5、无生物脱毒能力4. 厌氧增菌培养设备选择建议1、兼具培养与操作功能的厌氧工作站能为增菌所需的三角烧瓶提供宽敞的培养空间;2、内腔强制对流系统,确保箱内环境均一稳定,厌氧氛围快速恢复;3、无抽真空/充氮繁琐操作,有效提高操作效率并节省气体消耗;4、支持UV紫外消毒,抗密封材料而避免泄漏;5、具有生物脱毒能力,保证内腔气体洁净;6、标配厌氧状态指示系统,能随时让用户了解内腔厌氧状态。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207162327_378019_1821047_3.jpg

  • 绝味鸭脖深圳被检出细菌超标

    茶余饭后,很多市民都喜欢到就近的鸭脖店去买个鸭脖啃啃。不过,爱吃鸭脖的市民可要注意了,你吃到的鸭脖很可能大肠菌群超标。 近日,广东省深圳市市场监督管理局对深圳各大市场所销售的熟制鸭脖等食品开展了抽样检验。结果显示,四成多熟制鸭脖不合格,不合格项目主要为大肠菌群和菌落总数超标,绝味、周黑鸭、煌上煌等都位列不合格名单中。 四成多鸭脖被检不合格 深圳市市场监督管理局近日在其官方网站上公布了鸭脖的检测结果:熟制鸭脖共抽检102批次,合格59批次,抽检合格率57.8%.不合格项目主要为大肠菌群和菌落总数超标,不合格产生原因主要是熟制鸭脖以散装称重方式售卖时易受到微生物污染,以及部分门店未在冷藏条件下销售熟制食品。 记者看到,不合格产品批次中菌落总数超标最低者在4倍左右,高者甚至达30倍左右;大肠杆菌超标者更有达到百倍以上。而此次检出的不合格熟制鸭脖中有不少是大家熟悉的品牌,包括绝味鸭脖、煌上煌、周黑鸭等。

  • 【原创大赛】对387份食品致病菌检验的结果分析

    【原创大赛】对387份食品致病菌检验的结果分析

    对387份食品致病菌检验的结果分析【生活中的仪器分析】食品安全——“菜”米油盐酱醋茶大检测 食品中致病菌是指可以引起食物中毒或以食品为传播媒介的致病性细菌。致病性细菌直接或间接污染食品及水源,人经口感染可导致肠道传染病的发生及食物中毒以及畜禽传染病的流行。食源性致病菌是导致食品安全问题的中药来源。现将387份食品中致病菌的检验结果报告如下。1.采样类别及数量(见表1)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/12/201312172056_482714_1751239_3.jpg2.设备和试剂2.1设备全自动微生物分析系统(VITEKⅡ)、拍击式均质器、10ml吸管、100ul-1000ul加样枪、A2级生物安全柜、电子秤2.2试剂2.2.1标准菌株购买于上海宝录生物科技有限公司.2.2.2缓冲蛋白胨水(BPW)、志贺氏菌增菌肉汤、7.5%NaCl肉汤、李氏增菌肉汤LB增菌液、鉴定平板、鉴定琼脂及生化鉴定VITEK卡购买于青岛高科园海博生物技术有限公司、郑州博赛生物技术股份有限公司、北京路桥技术有限责任公司、北京威泰克生物技术有限公司。2.2.3沙门氏菌(59种血清型)诊断血清购买于宁波天润生物药业有限公司(多家血清)生产。3.实验程序3.1沙门氏菌检验程序25g(ml)样品加入225ml BPW,拍击式均质器拍打2分钟,36℃培养14小时,轻轻摇动培养过的样品混合物,取1ml加入10ml四硫磺酸钠煌绿增菌液,42℃培养24小时。另取1ml加入10ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液36℃培养24小时。分别用接种环取增菌液1环,划线接种于沙门氏菌属显色培养基平板,于36℃培养24小时。挑取沙门氏菌属显色平板的紫色菌落,接种三糖铁琼脂,先在斜面划线,再于底层穿刺;接种针不要灭菌,直接接种赖氨酸脱羧酶试验培养基和营养琼脂平板,于36℃培养24小时。从营养琼脂平板上挑取菌落,用生理盐水配制成浊度为0.5-0.6的菌悬液,使用VITEKⅡ进行鉴定。然后用A-F多价O血清、8种多价H血清做玻片凝集实验,同时用生理盐水做对照。在生理盐水中自凝者为粗糙型菌株,不能分型。综合以上生化试验和血清学鉴定的结果,报告25g(ml)样品中检出或未检出沙门氏菌。3.2志贺氏菌检验程序25g(ml)样品加入225ml 志贺氏菌增菌肉汤,拍击式均质器拍打2分钟,于42℃厌氧培养20小时,取增菌后的志贺氏增菌液划线接种志贺氏菌显色培养基平板,于36℃培养48小时,,取志贺氏菌显色培养基平板上的紫色菌落,接种三糖铁琼脂,半固体和营养琼脂斜面各一管,置36℃培养24小时。凡是三糖铁琼脂中斜面产碱、底层产酸、不产气(福氏志贺氏菌

  • 【分享】富陽造紙企業三輪“限產減污”換來“三贏” !

    這段時間,杭州市民發現廢報紙的收購價比前陣子每斤降了一毛錢。這與200余家富陽造紙企業今年夏天的“限產減污”有關。 今天上午10時多,在富陽春江街道造紙工業園區內,杭州眾意紙業有限公司的成品倉庫裏已空空蕩蕩,造紙車間裏一條年產10萬噸的紙機生產線也沒有一點動靜,另一條生產線則在進行調試。這是本月的第5個限產日。而在上月中旬,這家企業已經限產10天。因為實行“限產減污”,春江街道目前有70多家造紙企業處于停產狀態。 據了解,今年5月以後,受宏觀環境和市場需求影響,造紙企業呈現淡季趨勢,價格戰一觸即發。富陽市造紙行業協會的主要成員企業提出,寧可限產也不能壓價競爭。30家年產5萬噸以上的企業在6月18日至6月23日率先進行第一輪限產,相當于減少了四成的產能。當地廢紙交易市場內,作為原料紙之一的黃板紙價格“應聲而落”,一下子從每噸1400元掉到1200元。而成品紙的價格則基本穩住。停產,反而保住了企業的利潤空間。 今年6月底,富陽市ZF出臺文件要求造紙企業實行統一限產減污,限產范圍擴大到200余家造紙企業。7月10日到19日,7月20日到29日已分別進行了兩次限產行動,成為第二輪限產。每次涉及約100家規模以上造紙企業,差不多每家企業至少限產10天。從本月開始進入第三輪限產,分別在8月1日至10日及8月11日至20日進行。在限產期內,有的企業開展檢修,有的則進行全員培訓,多數企業員工仍像平常一樣到崗。對于限產可能造成的損失,“眾意紙業”負責人稱,可以通過價格穩定等得到彌補。 數據顯示,今年上半年,富陽造紙行業的產量略有增長,但在高成本壓力下,利潤反而大幅增長,達44.5%。富陽市委常委、副市長陸洪勤說,事實證明,產量多並不能讓銷售、利潤都多起來,企業必須在不擴產基礎上做增效的文章,尤其要牢牢把握價格主動權。 造紙企業的“限產”起到了一舉多得的效果,讓供電、環保部門明顯感到了變化。富陽市原本預計今夏最高用電負荷將超過80萬千瓦,缺口10萬千瓦。但入夏以來,富陽居然還沒拉過一次電。這多虧了造紙企業這些用電大戶騰出了8萬至10萬千瓦用電負荷。環保部門測算,這三輪限產,可使當地化學需氧量排放總量減少3000噸,二氧化硫排放總量減少2000噸左右,相當于幫助完成了富陽全年減排任務的四分之一。

  • 关于MUG-LST观察产荧光问题的分析

    关于MUG-LST观察产荧光问题的分析

    在GB 4789.36-2016 大肠埃希氏菌0157:H7/NM检测中,需要对可疑菌落在MUG-LST中培养是否产荧光进行判定。标准中规定在MUG-LST中培养不产生荧光的菌株为“大肠埃希氏菌0157:H7/NM”的典型特征;反之为非典型特征。在日常检测中,大家对荧光的判读总是觉得有些许不爽,我个人总结了一下可能有如下原因供大家参考:1、试管的洗刷造成的假阳性,日常试管的洗刷使用洗洁精和洗衣粉的情况较多,但是里面含有荧光增白剂这样一来就会造成试管外面一层亮莹莹假象; 建议:做该实验前对试管进行类似于理化试验的处理,弱碱和弱酸性水先后超声清洗后,再用纯水超声几次即可。2、MUG的质量和含量不足,四甲基伞形酮(MUG)单质价格较高,有些培养基生产厂商加入含量较低,导致荧光效果较差; 建议:对培养基进行验收,并购买合格厂家的产品。3、缺少对照试验,荧光的观察需要一定的经验,尤其是阴性和弱阳性的临界需要准确把握才不会误判; 建议:设立阴性、阳性、空白对照协助诊断。[align=center] 下图为阴性、阳性、空白对照试验请大家参考[/align][align=center][img=,600,600]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/02/201902271108360696_3342_3830199_3.jpg!w600x600.jpg[/img][/align]

  • 【资料】直接显微镜检查真菌在实验室诊断中的应用

    真菌是一类具有典型细胞核和完整细胞器,无根、茎、叶,不含叶绿素的真核细胞型微生物。大多数真菌对人体无害,但少数也可引起感染性、中毒性以及反应型疾病。在临床上以浅部感染真菌的毛癣菌属和深部感染真菌的白假丝酵母菌最为常见。实验室诊断的真菌阳性确诊性报告需要经过采集标本、直接镜检以及分离培养、生化反应,免疫学、分子生物试验鉴定等程序。整个过程复杂,成本高、时间长,从标本采集到报告发出,一般需24~48小时。非常不利于医生在第一时间给病人特别是门诊病人诊断、用药,以致延误病情。因此直接镜检后发出的初步诊断报告就显得尤为重要,对真菌感染性疾病的诊断具有重要意义。而真菌在体积上比细菌大几倍到几十倍,在形态上具有典型的菌丝和孢子,在结构和化学组成上不复杂、易染色,这些都为提高直接显微镜检查后所发出的初步诊断报告的阳性检出率提供了有利条件。近年来,我科室人员经过不断的摸索实验,总结出了不少经验,为临床医生提供了及时可靠的诊断报告,受到了他们的好评。浅部感染真菌的显微镜实验室诊断浅部感染真菌系指主要侵犯人和动物皮肤、毛发、及指(趾)甲,引起癣病的真菌

  • 【金秋计划】“杜氏小管产气”试验

    [b][b]一、杜氏小管产气试验和糖发酵试验[/b][/b] 杜氏小管,一种玻璃小导管。一端封闭,另一端开口,可以插入到试管中。 这两个试验中都需要用到杜氏小管,也都是为了观察产气情况。但糖发酵试验中同时还要加入指示剂观察产酸情况。操作上类似。 [b][b]二、试验原理[/b][/b] 杜氏小管产气试验目的在于检测某些微生物在代谢过程中是否产生气体,气体摸不着看不清,产气量又微弱,在试验中通过在试验试管中放置一个倒置的杜氏小管,微生物一旦产气,气体便会收集到杜氏小管中,就可以直观地观察到微生物(尤其是细菌)是否产气以及产气的量。 [b][b]三、操作步骤[/b][/b] 1.菌种活化 选择合适的培养基活化菌种。 2.培养基制备 配制培养基,分装到合适的试管中,编号,灭菌。 3.接种 待冷却后,用接种环挑取活化好的菌种或菌液转移至试管培养基中,混匀,对照组不接种。 4.放置杜氏小管 首先,用无菌医用注射器吸取培养液,针头朝上排空其中空气,然后将针头伸到杜氏小管底部,慢慢将培养液推入杜氏小管内直到液面凸起,再至过量以至培养液润湿杜氏小管外表。 或者将试管内壁湿润后,用镊子夹起杜氏小管,轻轻放置在试管内壁,让其自动慢慢滑入试管底部。如果不行,可以助推。盖上试管盖。 5.孵育培养 将准备好的试管放置于适宜的恒温培养箱中培养。 6.观察记录 培养结束后,观察杜氏小管内是否有气泡产生。如果有气泡产生,则记录为“+”;如果没有气泡,则记录为“-”。 [b][b]四、注意事项[/b][/b] 1.杜氏小管放置时间 在有关教材中,培养基灭菌前将杜氏小管放入试管中,跟试管一起灭菌。这种方法既不容易染菌也方便操作。但这种方法特别容易有气泡,影响试验结果。 本试验采用杜氏小管跟培养基一起灭菌,接种后将杜氏小管放入试管中,基本不会因为气泡影响实验结果。 2.无菌操作 实验过程中,严格按照无菌操作技术进行。 3.培养条件 这里主要指温度,当然也要考虑湿度、光照等培养条件。这些需要根据微生物种类严格控制,以免影响实验结果。 4.观察记录 在培养之前要观察杜氏小管内是否有气泡,如果有气泡,重新放置杜氏小管,或重新做实验。如果没有气泡再进行培养。

  • 【转帖】日本追加二甲嘧菌胺为中国产繁殖洋葱及其加工品命令检查项目

    2009年2月5日,日本厚生劳动省发布食安输发第0205002号通知:近日,根据检疫所的监控检查结果,中国产繁殖洋葱中查出二甲嘧菌胺含量超标。因此,日本厚生劳动省决定在对中国产繁殖洋葱及其加工品(限于简单加工)实行的命令检查的检查项目中追加二甲嘧菌胺。 违反事例: 1.产品名称:加热后食用冷冻食品(冻结之前未加热):繁殖洋葱 进口商:农产开发株式会社 申报数量及重量:800CT,800000kg 检查结果:二甲嘧菌胺 0.04ppm(标准值:0.01ppm) 申报处:大阪检疫所 违反确定日期:2008年7月1日 处理状况:全部销毁 2.产品名称:加热后食用冷冻食品(冻结之前未加热):繁殖洋葱 进口商:农产开发株式会社 申报数量及重量:1900CT,1900000kg 检查结果:二甲嘧菌胺 0.05ppm(标准值:0.01ppm) 申报处:大阪检疫所 违反确定日期:2009年2月4日 处理状况:全部保管中

  • 【转帖】深圳市场监管局曝光:“滕阳”牌豆皮可致癌

    深圳市市场监管局近日对全市流通领域的非发酵性豆制品进行了质量监测。记者昨日从公布的结果中了解到,深圳市面销售的非发酵性豆制品质量问题较多,产品合格率尚不足六成,样品中除了大肠杆菌等微生物指标超标和柠檬黄等添加剂超量超范围使用外,甚至还查出了“吊白块(甲醛次硫酸氢钠)”和“碱性嫩黄O”等工业漂白剂和工业染料等严令禁止的违法添加物。  多个问题样品涉嫌假冒品牌豆制品  本次监测,该局共在全市流通领域的综合市场、商场、超市和个体门店等19家流通场所,共抽取豆腐干、豆浆、腐竹等日常食用的非发酵性豆制品80批次,剔除纯标签不合格外,质量/卫生指标合格产品47批次,合格率仅为58.8%。  在公布的“黑名单”中,记者注意到,其中不少样品标称的生产单位都是深圳的品牌产品,如标称为“深圳市益民食品联合有限公司”产的老豆腐、水豆腐和香干,以及“深圳市祝富食品有限公司”产的水豆腐、烟干、油豆腐和豆皮等。这些样品均为散装,不合格的原因大多是菌落总数、大肠菌群等微生物指标超标。有关执法人员对此表示,这很可能存在不法分子涉嫌假冒的情况,该局还将进一步查实。  不过,一款在华润万家有限公司龙岗店销售、生产企业标称为“深圳旭洋绿色食品有限公司”,于今年9月4日生产的350克/袋装“旭洋”牌麻婆内酯豆腐也被检出大肠菌群超标,且并未被该局备注为“涉嫌假冒”。据统计,此次不合格豆制品大部分都是微生物指标超标问题,市民如食用了这样的食品可能会引发腹泻等肠道疾病,严重的还会出现食物中毒。  两批次样品被检出违法工业添加物  更为严重的是,此次还有两个散装样品被检出添加了国家明令禁止的工业添加物,它们都是在深圳市宝安区观澜投资管理公司观澜综合市场(P4档口)销售,其中,标称商标为“永红”的豆条检出“吊白块”,而标称商标为“滕阳”的豆皮则还同时被检出含有“碱性嫩黄O”。  该局相关人员表示,“吊白块”是甲醛次硫酸钠与甲醛次硫酸氢钠混合物的俗称,是一种工业使用的漂白剂,国家明文规定不能用于食品。不法分子添加这一违法品主要是为了改善豆皮、腐竹等食品的外观和口感,食用了这样的食品,可引起过敏、肠道刺激等不良反应,严重者可出现中毒现象,产生肾脏、肝脏受损等疾病。  而“碱性嫩黄O”则是一种工业染料,主要用于麻、纸、皮革、草编织品、人造丝等的染色,也用于印染棉织品,不能用于食品。该物质对皮肤黏膜有轻度刺激,可引起结膜炎、皮炎和上呼吸道刺激症状,人接触或者吸入都会引起中毒,并且这种染料具有致癌性。  此外,还有一些商品被检出含有日落黄、柠檬黄等豆制品中不得使用的食品添加剂,以及淀粉定性呈阳性,即不法企业为降低生产成本,在豆制品中掺入了米粉、淀粉、木薯粉等。

  • 产气荚膜梭菌

    买的标准菌株(第0代),复苏后接种到庖肉培养基,我能直接用这管庖肉培养基保存在2-8度冰箱吗?还是说再接种到其他的斜面培养基进行保存?另外对下一次传代时间有没有要求,需要间隔多久?

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