胆硫乳琼脂

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p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 新华社杭州2月23日电 浙江大学医学院干细胞与再生医学中心郭国骥教授团队研发出低成本、高效率、完全国产化的高通量单细胞测序平台“Microwell-seq”，并在短时间内利用这一平台构建全球首个哺乳动物的细胞图谱。该成果于23日刊登在国际学术期刊《细胞》杂志上。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 细胞是生命最小的独立遗传单位。传统的测序技术“看”的是一组一组、成群的细胞，“读”的是一堆细胞遗传信号的均值，因此单个细胞的特异性表现容易被忽略。郭国骥认为，单细胞组学技术使人类能够从单个细胞的视角，精确解析细胞的分化、再生、衰老以及病变，“这类技术正带来一场细胞检测、分类和鉴定的方法学革命”。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp “我们利用微孔矩阵、分子标记和扩增技术，高通量、高精度地实现单细胞水平分析，解决了传统测序中单个细胞核酸物质少、容易丢失、分析成本高的难题。”郭国骥说。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 研究人员向记者展示了一块边长三厘米的正方形薄片，这是一块有10万个直径30微米“小坑”的琼脂糖微孔板。实验中，科学家用消化酶将一团相对紧实的细胞解离成单个细胞的悬浮液，倾倒在琼脂糖微孔板上，大约有1万个细胞会“一个萝卜一个坑”地落入“坑”。之后，研究人员为& nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 每一个被捕获的细胞贴上“编号”——“磁珠索引”，数万个直径为25微米的磁珠倾倒入“坑”中，在封住单个细胞同时标记上DNA索引。第三步则是常规的测序流程，每个细胞的表达谱得到解析。这项技术能够测试单个细胞所有的信使RNA，这是将细胞DNA遗传信息翻译成蛋白质的重要物质。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 借助这一高通量单细胞测序平台，研究人员对小鼠不同生命阶段的近50种器官组织的40余万个细胞进行了系统性的单细胞转录组分析，构建了首个哺乳动物细胞图谱。 /p p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 专家认为，小鼠细胞图谱的完成，将对下一步人类细胞图谱的构建带来指导性意义，并惠及细胞生物学、发育生物学、神经生物学、血液学和再生医学等多个领域。 /p

稀土材料在生物医学和高科技领域发挥着不可替代的作用。然而，典型的稀土元素开采和提取方法往往因涉及危险化学品而导致严重的环境问题和资源浪费。尽管生物采矿展示了优雅的替代方案，但由于提取金属的微生物和清除稀土的大分子工具不足，可持续地分离和回收自然界中的稀土仍然面临巨大挑战。为了直接从稀土矿石中获得高性能的稀土材料，需要开发新一代生物合成策略来高效地制备稀土元素(REEs)。在此, 清华大学刘凯研究员、张洪杰院士团队建立了一种微生物合成体系实现了高纯稀土产品的主动生物合成。此外，通过与结构工程蛋白生物偶联的亲和柱，获得了良好的Eu/Lu和Dy/La分离，纯度分别为99.9%(Eu)、97.1%(La)和92.7%(Dy)。更重要的是，原位一锅法合成的稀土依赖的甲醇脱氢酶得到了很好的治理，并独占地吸附了稀土尾矿中的La、Ce、Pr和Nd，具有先进的生物催化作用，具有高附加值的应用前景。因此，开发的新型生物合成平台提供了一个有洞察力的路线图，以扩大生物铸造方面的底盘工程范围，并生产与稀土相关的有价值的生物制品。该研究以题为“The Construction of Microbial Synthesis System for Rare Earth Enrichment and Material Applications”的论文发表在《Advanced Materials》上。在这里，成功地筛选和收集了126株新型稀土吸附菌株，作为轻、中、重稀土的微生物合成系统，实现了高纯度稀土生物产品的制备。新型稀土亲和生物材料通过结构蛋白DLanM的生物偶联，实现了Eu/Lu和Dy/La的良好分离，分别得到99.9%的Eu、97.1%的La和92.7%的Dy。最重要的是，生物工程MDHs可以作为La、Ce、Pr和Nd的选择性吸附剂，显示出在稀土产品中的先进应用。因此，这些生物合成策略为稀土研究建立了一个新的范式，并将促进稀土的高价值应用。图1. 稀土微生物分离筛选及稀土生物材料高值化利用 有效吸附和生物合成稀土的菌株筛选 为了获得能特异吸附稀土进行生物合成的微生物，从所有采集的样品中通过富集培养和鉴定方法分离出126株细菌(命名为清华稀土微生物，TR-1至TR-126)。将获得的菌株的16S rRNA序列与GenBank上的已知序列进行比较分析。结果表明，稀土尾矿场及原矿伴生区中假单胞菌为优势种。假单胞菌属，如铜绿假单胞菌、恶臭假单胞菌、荧光假单胞菌和斯图策尔假单胞菌都能在其微环境中合成无机纳米颗粒。因此，选择收集的菌株(即TR-21、TR-22、TR-27和TR-54)来测试它们对稀土的吸附能力。电感耦合等离子体发射光谱分析结果表明，TR-21对14种稀土元素的吸附能力最强。TR-21对Sm(Ⅲ)、Eu(Ⅲ)和Tb(Ⅲ)具有较高的吸附容量，但对La(Ⅲ)的吸附能力最弱。用Tb(III)、Dy(III)和Ho(III)在细胞外矿化的稀土盐都是细小的线性形状，长度约为100 nm，并在细胞外使用Er(III)、Tm(III)、Yb(III)和Lu(III)形成层状或水凝胶状的生物合成。在HRTEM下没有观察到该生物合成的明显晶格结构。用高分辨电子能谱对所有从TR-21矿化的纳米线、细丝和片状/水凝胶稀土矿物进行了元素分析，结果表明，矿化产物区含有稀土元素(Ⅲ)、磷、氧和碳。这进一步表明，稀土(III)与PO43−结合后，以矿物相的形式与细菌表面的PO43−共存，即合成的稀土盐为REEPO4。此外，该菌株不仅可以通过表面吸附回收稀土元素，还可以在细胞表面以一锅法原位合成稀土磷酸盐。与这些配合物的化学合成方法相比，微生物原位合成稀土磷酸盐不仅可以减少对环境的污染，而且具有较高的成本效益。稀土磷酸盐具有良好的化学稳定性和热稳定性，被广泛应用于发光材料的制备。当稀土离子浓度较低时，稀土元素主要与细菌细胞壁上的磷酸基团结合。随着时间的推移，生物矿化晶体的数量增加，使稀土以纳米线或片状晶体的形式沉积在细胞表面。当TR-21不与稀土元素相互作用时，细菌细胞呈椭圆形，表面光滑。TR-21对稀土的生物合成发生在细菌细胞的外部。微生物合成稀土磷酸盐后，可通过三种方法回收稀土盐。首先，稀土氧化物可以通过燃烧回收。其次，微生物细胞可以通过细胞超声裂解，稀土磷酸盐可以通过离心法回收。第三，稀土磷酸盐可以通过加入海藻糖降解胞外多糖来回收，从而使稀土磷酸盐解离，然后通过离心法回收。图2.有效吸附和生物合成稀土的菌株筛选 熔融DLanM器件的吸附容量和选择性测试 受LanM的启发，设计了一种新型的含有两个拷贝的LanM的新型嵌合蛋白DLanM。由于DLanM有8个EF-Hand，它不仅可以结合更多的稀土元素，而且对稀土具有高选择性，超快的吸附速度，稳定的吸附能力，对非稀土阳离子没有吸附能力。这使得DLanM成为一种很有前途的回收和分离稀土的生物分子。上述优点使其成为高稀土亲和力功能材料的理想候选者。为了促进转化为具有流动形式的稀土回收能力的产品，我们使用氨基的点击化学将DLanM偶联到修饰的琼脂糖凝胶微球上。在25℃下反应16 h后，DLanM的负载率约为83.3%，蛋白密度为0.678±0.004 μmolDLanM/mL琼脂糖凝胶。DLanM偶联材料具有显著的稀土亲和力。特别是，生物共轭色谱柱可以重复使用几十次，对稀土元素的回收表现出很好的性能。用混合溶液测试了DLanM基柱对稀土元素和其他金属元素的选择性。Eu和Dy可以通过DLanM柱和两步解吸的单一吸附过程从Lu和La中分离出来，从而证明了稀土之间分离的可能性。总之，固定化DLanM材料从广泛的金属离子杂质中选择性地富集稀土的功效，甚至到在稀土中分离特定的离子对。这种改进的选择性代表了现有生物吸附方法的替代使用胶囊细胞或聚合物纳米凝胶。图3.熔融DLanM器件的吸附容量和选择性测试 生物合成工具对稀土尾矿的高效利用 TR-21对稀土具有吸附和生物合成作用，对稀土尾矿中的稀土具有浸出和溶解作用。稀土尾矿中金属元素的形态和含量分析表明，稀土含量较低，使其难以恢复和分离。用离子交换法从低浓度尾矿中提取稀土成本高，而用氯化钠、硫酸铵、氯化铵、硫酸镁作浸出剂，对环境有害。相比之下，TR-21的生物浸出过程相对简单，不会产生二次污染。该方法具有环境友好、经济高效等优点，可作为尾矿中稀土有效浸出回收的一种新方法。甲醇脱氢酶(MDH)是AM1菌株甲醇代谢的关键和必需的酶。最近的研究表明，AM1菌株具有以稀土为辅因子的XoxF型MDH。XoxF型MDH的催化机理除依赖于其辅因子外，还与稀土元素的结合有关。AM1菌株不仅能从稀土尾矿中浸出稀土离子，还能从稀土尾矿中提取稀土离子，也可利用尾矿中的部分稀土进行生物合成，XoxF型MDH可以作为稀土的选择性吸附剂来提纯和分离稀土。图4.生物合成工具对稀土尾矿的高效利用【小结】该研究提出了一种新型的生物合成材料体系，以实现稀土元素的高效制造和先进利用。从稀土尾矿中筛选出的昆明菌株可以通过原位合成的方法从细胞外收集稀土生物产品。将新设计的DLanM蛋白与琼脂糖凝胶进行固定化，制备了一系列高亲和力的稀土生物吸附柱。Eu/Lu和La/Dy对的分离效率分别达到99.9%(Eu)、97.1%(La)和92.7%(Dy)。此外，生物吸附柱可重复使用长达19个周期，显示出良好的稀土回收性能。最重要的是，M.extorquens中的工程MDH不仅可以作为La、Ce、Pr和Nd的选择性吸附剂用于稀土的提纯和分离，还可以作为功能稀土-配体组合用于先进的生物合成。与化学提纯方法相比，这些生物合成策略实现了稀土的一锅法高价值利用。该生物制造系统作为新一代灵活的生物铸造，在稀土微生物底盘工程中显示出巨大的前景，特别是当与先进的编辑工具集成时，如CRISPR或同源定向修复，用于先进的生物修复和有价值的稀土生物制品制造。原文链接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/adma.202303457

项目概况南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购（第二批） 采购项目的潜在供应商应在政采云平台（https://www.zcygov.cn/）获取（下载）获取采购文件，并于2021年12月22日 09点30分（北京时间）前提交响应文件。一、项目基本情况项目编号：NNZC2021-J1-991969-YZLZ（采购计划文号：NNZC[2021]7871号-003......具体内容详见附件招标公告项目名称：南宁市疾病预防控制中心实验室试剂耗材、标准物质采购（第二批）采购方式：竞争性谈判预算金额：97.7921000 万元（人民币）采购需求：预算金额：合计97.7921万元。A 分标 53.3652万元； B 分标 28.9772万元；C 分标15.4497万元；采购需求：A分标：项号采购标的单位数量简要技术需求或者货物要求1单通道病毒核酸检测类试剂盒(国产)(肠道病毒等)盒9具体详见采购文件《第二章 采购需求》2双通道病毒核酸检测类试剂盒(国产)(包括流感病毒、肠道病毒等)盒343新型冠状病毒2019-nCOV核酸定值质控品支354病毒DNA/RNA提取试剂盒（预封装）盒1085无RNase10µl带滤芯长吸头盒106无RNase250µl长吸头（带滤芯）箱870.1ml八连排定量管（带盖）箱28封口袋（透明）包1009封口袋（透明）包10010G1型消毒剂浓度试纸盒101196孔透明PCR板（适用于ABI)箱41296孔PCR板封口膜箱313N95防护口罩只120014VITEK细菌鉴定卡（ANC)盒115VITEK细菌鉴定卡（BCL)盒316API生化鉴定条（链球菌）盒117弯曲菌培养检测试剂（双孔滤膜法）盒418Karmali选择性平板盒419甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板瓶1020Baird-Parker琼脂平板瓶1021PALCAM琼脂基础瓶622PALCAM琼脂冻干配套试剂盒2023CIN-1培养基基础瓶224CIN-1培养基配套试剂盒825改良Y琼脂瓶226含铁牛奶琼脂瓶227甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础MYP瓶428查氏琼脂培养基瓶129改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤基础（MLST）瓶430万古霉素（改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤配套试剂）盒431改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（mLST-Vm肉汤）盒232脑心浸萃琼脂培养基瓶133脑-心浸萃液态培养基（BHI）瓶234改良克氏双糖铁琼脂瓶235KF链球菌琼脂培养基瓶236胆汁液态培养基瓶237改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基（mPDA）瓶238PCFA培养基基础瓶239PCFA培养基配套试剂盒440改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基配套试剂盒441葡萄糖肉浸液肉汤瓶142尿素盒343氰化钾对照管(KCN)盒244改良CCD琼脂基础(mCCD)瓶245改良CCD琼脂添加剂盒1046改良Skirrow氏琼脂基础瓶247改良Skirrow琼脂添加剂盒1048L-shaped Cell Spreader(一次性L棒)盒1049152唐菖蒲伯克霍尔德氏菌核酸快速检测试剂盒盒1氯化镁孔雀绿肉汤（MM）瓶609带盖离心管

微生物检测培养基质量控制问答1、培养基灭菌后成份会有所蒸发减少，如何处理这个问题？答：正常情况下蒸发量较少，可忽略不计。2、培养基融化后出现浑浊是有哪些方面的原因引起的？应如何避免？答：可能的情况有:1. 培养基配置用水不符合规定；2. 灭菌过程温度升温慢或降温慢；3. 培养基储存不当；4. 融化时沸腾时间较长等。3、准备好的培养基有效期如何验证？答：定期取出培养基验证其无菌性，促生长能力等方面。4、培养基配制好灭菌后，在高压容器中保温降至50℃左右，可不可行？答：建议最-好不要，避免过度受热。5、脱水培养基对湿度是否有要求？多少适宜？答：按要求室温干燥环境储存即可。6、培养基pH值测定温度在25℃，这个温度应怎么控制？答：可水浴控制培养基温度。7、配制培养基过程中，按说明书称定量，加规定的纯化水，煮沸溶解，为了避免煮沸过程总减少水分，是否要在配制过程适当增加水?答：可适量增加，自己掌握。8、商品培养基一定要当天配当天用吗？可否在一周内用完？答：不是即配即用的培养基的话，储存的当，可以使用。9、称量培养基时，注意不要吸入粉末，这粉末是指何物？答：就是你所称量的干粉培养基 ，因为培养基的粉末对呼吸道有刺激作用，而且培养基中的某些成分，如亚硒-酸盐、叠氮-化钠、乙酰胺等，长期吸入并在体内累积到一定量会对人体健康有危害。所以培养基配制称量需做好个人防护，且最-好选择少粉尘环保型颗粒培养基。10、煮培养基，用不锈钢锅在电磁炉上煮可行？硫乙醇培养基是否要煮沸？如何煮沸？用不锈钢锅在电磁炉上煮沸可行吗？可不可以水浴煮沸呢？答：硫乙醇应煮沸，量大时，我实验室用不锈钢锅在电磁炉上煮沸。不建议水浴煮沸，因为水浴煮沸琼脂粉很难溶，导致琼脂分装不均匀，前段分装的琼脂含量少，后段分装的琼脂含量高，导致有的管或瓶中的FT凝固。11、如培养基在高压灭菌器中温度需自然下降20度才开盖吗？答：高温灭菌器有安全阀，温度下降到安全阀可打开时将培养基取出室温冷却，各型号灭菌器安全开盖温度不尽相同。12、平板涂布和平板划线培养基表面水分过多，菌落蔓延如何解决？答：对于采用表面接种形式培养的固体培养基，应先对琼脂表面进行干燥：揭开平皿盖，将平板倒扣于烘箱或培养箱中（温度设为25℃～50℃）；或放在有对流的无菌净化台中，直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。

透射电子显微镜是使用较为广泛的一类电镜，具有分辨率高、可与其他技术联用的优点。已广泛应用于医学、生物学等各个研究领域，成为组织学、病理学、解剖学以及临床病理诊断的重要工具之一。常规电镜样品制备包括常温化学双固定、常温脱水包埋、常规超薄切片、普通电镜观察几个步骤。样品制备过程历时约一周，超薄切片经醋酸双氧铀和柠檬酸铅染色后，电镜观察。所有操作均按照以下流程进行。一、试剂0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液Na 2 HPO 4 2H 2 O 35.61 g 或Na 2 HPO 4 7H 2 O 53.65 g / Na 2 HPO 4 12H 2 O 71.64 gNaH 2 PO 2 H 2 O 27.60 g 或NaH 2 PO 4 2H 2 O 31.21 g加双蒸水（ddH2O）到1000 mL0.1 mol/ L磷酸盐缓冲液（PBS）0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 250 mL加双蒸水到500 mL2 % 低温琼脂低温琼脂 1.0 g加双蒸水到 50 mL加热到沸腾，溶液均匀后备用1 % 戊二醛固定液25 %（m/v）戊二醛水溶液 2 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 25 mL加双蒸水到50 mL1 % 锇酸固定液2 %（m/v）锇酸水溶液 10 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 10 mL包埋剂A液Epon 812 树脂 50 mL十二烷基琥珀酸酐（modecenyl succinic anhydride, DDSA） 80 mL包埋剂B液Epon 812 树脂 50 mL六甲酸酐（methyl nadic anhydride, MNA） 44.5 mL2 ， 4 ， 6 - 三甲氨基甲基苯酚（ 2, 4, 6 - tridimethylamino methyl phenol, DMP-30 ）甲苯胺蓝染液甲苯胺蓝 1 g1 mol/ L NaOH 10 mL加双蒸水到50 mL混匀过滤后使用1 % 醋酸双氧铀染液醋酸双氧铀 0.2 g加双蒸水到10 mL封口膜封口，4℃避光保存1 % 柠檬酸铅染液硝酸铅 0.265 g柠檬酸钠（含2分子结晶水） 0.352 g加双蒸水到10 mL①① 配制铅染液时，要先加水6 mL，超声震荡30 min，使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH，并不是晃动，直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照，即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定，藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定，总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。封口膜封口，4℃保存仪器修块机 Leica EM TRIM切片机 Leica EM UC6光学显微镜 Nikon 80i 及配套拍照系统DS-L1透射电子显微镜 JEOL-1230Gatan Bioscan Camera 792低电压透射电子显微镜 JEM-1230二、实验流程一、 取材与固定A. 植物样品1. 自来水冲洗表面泥尘后，使用灭菌水清洗2-3次，置于铺有预湿滤纸的培养皿中。2. 使用干净锋利的刀片切取目标材料，所取材料体积不大于3 mm3。切取样品时应注意动作迅速、减小损伤，避免来回切拉；使用的灭菌水及器具应4℃预冷，并在操作中尽量保持低温以降低组织细胞活性。3. 将切下材料放入装有预冷的戊二醛固定液的青霉素小瓶中后抽气，抽几次后轻摇小瓶，并打开瓶盖。重复2-3次，直到样品沉入瓶底。4. 室温静置1h，或摇床轻摇1h。5. PBS清洗3次，10min/次。6. 1%锇酸固定液固定1h。7. PBS清洗3次，10min/次。B. 动物样品1. 4℃预冷生理盐水冲洗组织块，迅速切取组织块，体积不大于3 mm32. 将切取的组织块投入装有预冷戊二醛固定液的青霉素小瓶中，并抽气直至样品沉底。3. 室温静置1h，或摇床轻摇1h。4. PBS清洗3次，10 min/次。5. 1%锇酸固定液固定1 h。6. PBS清洗3次，10 min/次。C. 单层培养细胞或悬浮培养细胞样品②1. 3000 rpm离心5 min，收集细胞样品，尽量多的吸弃培养液上清。2. 加入4℃预冷PBS液，充分吹吸混匀，静置4 min，3000 rpm离心5 min，吸弃上清。① 配制铅染液时，要先加水6 mL，超声震荡30 min，使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH，并不是晃动，直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照，即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定，藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定，总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。3. 重复步骤2一次。4. 加入预冷的血清或蛋清，充分吹吸混匀，3000 rpm离心10 min，吸弃大部分上清，留少部分，吹吸悬浮沉淀细胞。（或离心后吸弃上清，留少部分上清，不悬浮沉淀细胞，视样品浓度而定）5. 缓慢加入戊二醛固定液，小心放入4℃冰箱，固定过夜。6. 吸弃上清，刀片小心划开离心管壁，用钳子拉开离心管，小心取出已凝成固体的血清包埋块。7. 使用干净的单面刀片或手术刀，将血清包埋块切成2 mm3左右的小块，取3-5个富集细胞样品效果较好的包埋小块继续下面实验。8. PBS清洗3次，10 min/次。9. 1%锇酸固定液固定1 h。10. PBS清洗3次，10 min/次。D. 藻类及其他游离培养样品1. 吸取2%低温琼脂液200μL到0.2mL离心管，并将离线管置于冰上，取10μL枪头迅速插入琼脂中并保持离心管竖直，且枪头竖直靠中的包裹在琼脂中。2. 静置1 min，待琼脂凝固后，小心拔出枪头，形成琼脂空腔，待用。3. 3000 rpm离心5 min，收集样品，尽量多的吸弃培养液上清。4. 加入4℃预冷PBS液，充分吹吸混匀，静置4min，3000 rpm离心5min，吸弃上清。5. 重复步骤2清洗，吸弃大部分上清，留极少部分上清液，吹吸悬浮样品。6. 使用10μL 移液器小心将样品加入已经制备好的琼脂空腔中，使样品充满空腔大部分，添加过程中尽量避免气泡出现。7. 吸取50μL溶化的琼脂，快速滴加到空腔琼脂上封口，冰浴5 min，待琼脂完全凝固。8. 使用单面刀片小心划开离心管壁，用钳子拉开离心管，小心取出已凝成固体的琼脂包埋块，稍作修葺。9. PBS清洗3次，10 min/次。10. 1%锇酸固定液固定1 h。11. PBS清洗3次，10 min/次。二、 脱水1. 按丙酮与灭菌水体积比3：7配制30%脱水剂。吸弃样品管/瓶中的PBS，快速加入现配的脱水剂（脱水换液过程禁止出现样品暴露空气中现象，可不全部吸完，略有剩余，使样品浸润；动作应迅速准确），室温放置或摇床轻摇45 min。加入按30%、50%、70%、90%、100%（v/v）的浓度梯度进行脱水。2. 配制50%脱水剂，快速换液，室温轻摇45 min。3. 配制70%脱水剂，快速换液，室温轻摇45 min。4. 配制90%脱水剂，快速换液，室温轻摇45 min。5. 使用纯丙酮快速换液，室温轻摇30 min③。6. 重复步骤5一次。三、 渗透包埋在此步脱水操作完成后即可开始配制渗透用包埋剂，以免安排不周。样品浸泡在纯丙酮中时间不宜过久，以免造成样品较脆，不利于超薄切片。1. 配制渗透用树脂包埋剂1) 取干净的10 mL注射器，拔去活塞，用封闭针头堵住注射口，放于通风橱中。2) 小心倾倒B液9 mL到注射器中；然后再小心倾倒A液1 mL。3) 插入活塞，堵住注射器后，颠倒摇匀至液体颜色均匀，无丝状液体。4) 小心拔去活塞，通风橱中操作，缓慢滴加14滴DMP-30。5) 插入活塞，堵住注射器后，颠倒摇匀至液体颜色完全均匀，无丝絮状分色，竖直放置待用。2. 按照包埋剂与丙酮体积比3：7配制30%渗透剂，快速吸弃样品管中纯丙酮并加入渗透剂，轻摇渗透3 h。3. 按照包埋剂与丙酮体积比7：3配制70%渗透剂，快速换液，轻摇渗透过夜。4. 重新配制包埋剂，并小心推按注射器，将包埋剂挤到包埋模具中至液面略凸。5. 解剖针挑取样品到纯包埋剂中，渗透3 h。6. 小心挑取样品，滤纸上稍微沾下吸弃部分粘附的包埋剂，轻轻放置到未渗透过样品的包埋孔中，小心将样品按到底，摆放好位置。记录各样品对应包埋块编号。7. 梯度温度聚合包埋1) 37℃烘箱中12 h，期间定时观察样品有无漂移现象，如有，则再次小心摆放样品位置。2) 45℃烘箱中12 h。3) 60℃烘箱中24 h。四、 修块与切片1. 拿到包埋块后检查样品位置是否得当，选取位置好的包埋块优先进行修块、切片。2. 粗修包埋块1) 使用六角扳手将包埋块固定在样品头上，露出长度合适。2) 将样品头固定在修块机上，体视镜观察修块，分四个方向将包埋块头部多余的包埋剂修去，暴露出组织块。3) 使用锋利的单面刀片修去组织块周围毛刺的包埋剂，使其四边光滑清晰。4) 卸下样品头装至切片机上，使用玻璃刀修片，直至样品表面光滑清晰。3. 半薄切片1) 将粘有水槽的玻璃刀装至切片机刀台上，体视镜下小心对刀，不时转动手轮，使样品上下移动，调整刀台左右角度及样品上下角度，直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮，使整个样品高于刀刃，点控制面板Start，设置切片区域上边界；转动手轮，使整个样品低于刀刃，点控制面板End，设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品，至出现彩色干涉光，继续步进刀台，并通过体视镜观察干涉光谱变化，直至干涉光消失。4) 转动手轮，使样品离开刀刃区域，使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中，体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度，按控制面板Run/Stop键，开始切片。体视镜观察可见900nm厚度切片反光为亮绿色。6) 待有切片下来形成4-6片的切片带，按Run/Stop键停止切片，体视镜观察下，使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃，并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域，根据水膜表面张力捞取切片，放到干净载玻片上，酒精灯略微加热，使水蒸干，并对着光亮用记号笔标示切片所在位置。4. 半薄切片染色1) 吸取20μL甲苯胺蓝染液，滴加到载玻片放有切片的位置，室温静置30 s 。2) 去离子水冲洗玻片，直至不再有蓝色。吸水纸上沥干，酒精灯略微加热，加速切片上的水分蒸发。3) 显微镜观察切片质量和样品位置。5. 精修包埋块1) 移去装有水槽的玻璃刀，取下装有包埋块的样品头，装至修块机上。2) 根据半薄切片结果，使用新的锋利刀口，小心修理包埋块四边，使其尽可能的光滑、平整。6. 超薄切片1) 将钻石刀装至切片机刀台上，体视镜下小心对刀，不时转动手轮，使样品上下移动，调整刀台左右角度及样品上下角度，直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮，使整个样品高于刀刃，点控制面板Start，设置切片区域上边界；转动手轮，使整个样品低于刀刃，点控制面板End，设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品，至出现彩色干涉光，转动手轮，使样品上下移动，调整刀台左右角度及样品上下角度，直至包埋块整个表面与刀刃的干涉光谱颜色一致；继续步进刀台，并通过体视镜观察干涉光谱变化，直至干涉光消失。4) 转动手轮，使样品离开刀刃区域，使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中，体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度，按控制面板Run/Stop键，开始切片。体视镜观察可见70nm厚度切片反光为亮灰色及浅灰色。6) 待有切片下来形成10-20片的切片带，按Run/Stop键停止切片，体视镜观察下，使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃，并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域，根据水膜表面张力捞取切片，轻轻放到干净载膜铜网上，用尖角滤纸靠近铜网边缘缓慢吸干水分。8) 轻轻移去捞片环，将载有切片的铜网放到铺有滤纸的平皿中，晾干待染色观察。五、 染色1. 醋酸双氧铀染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液，13 200 rpm离心5 min。2) 将放有切片的载网小心放到染色盘上，有切片面靠上，并稍微用镊子按载网边缘，使其与染色盘接触粘附牢固。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面，盖上平皿防尘，室温染色30 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中，轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘，更换水洗液，轻摇清洗5min。6) 重复清洗2次。2. 柠檬酸铅染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液，13 200 rpm离心5 min。④2) 在放置染色盘的平皿中放入2片固体NaOH，用以吸收平皿中CO2气体。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面，盖上平皿防尘，室温染色8 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中，轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘，更换水洗液，轻摇清洗5min。连续染色时，载网不需要从染色盘上拿下，清洗后直接进行铅染即可，但是铅染液要现用现取。6) 重复清洗2次。7) 小心夹取载网，放置到铺有滤纸的干净平皿中，晾干待电镜观察。六、 电镜观察1. 取出样品杆，打开样品夹，小心放入载网，合上样品夹，并转动样品杆，轻敲确保样品夹已准确固定载网。2. 将样品杆插入透射电镜样品室，开始抽气。3. 打开灯丝开关，等待检测电流出现后，打开观察窗开始观察。4. 先在低倍下找到切片，再高倍观察切片，寻找待看目标，仔细对焦。5. 将切片目标区域遇到观察窗中间后，调整灯丝电流密度为3.8 pA/cm2。6. 插入拍照CCD，Start View，微调焦距，Start Acquire 拍照。7. 拍照完毕，按格式需求保存照片到指定文件夹。8. 使用专用写保护闪存盘拷贝数据到公共电脑观察、使用。三、应用领域1、材料领域材料的微观结构对材料的力学、光学、电学等物理化学性质起着决定性作用。透射电子显微镜作为材料表征的重要手段，不仅可以用衍射模式来研究晶体的结 构，还可以在成像模式下得到实空间的高分辨像，即对材料中的原子进行直接成像，直接观察材料的微观结构。

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详细信息　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 SDW-6空气微生物采样器是我公司生产的ETW-6型六级筛孔撞击式空气微生物采样器，是一种双功能阶式多级撞击采样器，可广泛地用于卫生防疫，生物洁净，制药，发酵工业等环境中的监测以及有关研究教学部门作空气微生物的采样研究，为评价空气环境微生物污染危害及其防治措施提供依据。 SDW-6六级筛孔撞击式空气微生物采样器能够测定空气微生物的数量之外，它独有的特性是还能测出这些粒子的大小，而后者是判定空气微生物危害的重要指标之一。它是由六个撞击器组合成一体，每一级实际是一个单级采样器，利用6次反复撞击原理，绝大部分粒子特别是在气管及肺沉降的粒子基本都撞击下来，因而它采集到的粒子大小范围自然比单级的广，这是一些单级撞击采样器所无法比拟的而且采样器的圆形喷口比裂隙等喷口有更高的采样效果。采样时相对湿度逐级地增高（由第一级的39%增至第六级的88%），这十分有利于脆弱的病原微生物，特别是病毒粒子的存活。由于它这些与众不同的特点，使它广泛应而有效地应用于空气微生物的监测，自问世以来常用不衰。被**为国际标准采样器。本采样器模拟人呼吸道的解剖结构和空气动力学生理特征，采样惯性撞击原理而将悬浮在空气中的微生物粒子分别等级的收集到采样介质表面上，然后供培养及微生物学分析。 整个仪器是由撞击器、主机（流量计）、定时器、三脚架组成。撞击器是6层有微小孔眼的铝合金圆盘。圆盘下放琼脂平皿，每圆盘间有密封胶圈，在通过三个弹簧挂钩把圆盘牢固地联在一起。每个圆盘上有400个成环形排列、逐层减小、尺寸精确地小孔，标准采样流量为1立方尺（28.3Lmin）.当含有微生物粒子的气流进入最让上层的采样口后，由于气流的逐层增高，不同大小的微生物粒子按空气动力学特征分别撞击在相应的琼脂表面上。捕获在各级上的粒子大小范围是由该级孔眼的气流速度和上一级的粒子截阻率而决定。第1、2级类似人的上呼吸道捕获的粒子，第3-6级类似人的下呼吸道捕获的粒子，这就相当程度上复制了这些粒子在呼吸道的穿透作用和沉着部位。 六级空气微生物采样器产品特点 1.测量范围捕获率：&ge 98% 2.捕获粒子范围 第一级：＞7.0um 孔径1.1mm 3.第二级：4.7um-7.0um 孔径：0.91mm 4.第三级：3.3um-4.7um 孔径：0.71mm 5.第四级：2.1um-3.3um 孔径：0.53mm 6.第五级：1.1um-2.1um 孔径：0.34mm 7.第六级：0.65um-1.1um 孔径：0.25mm 采样流量28.3L/min,可调节精度&le 5%，噪声&le 60db，电子定时器范围1-24小时，精度＜1%，工作电源220V/AC，功率&le 45W

项目编号：[230601]QC[TP]20220039项目名称：实验室试剂耗材采购采购方式：竞争性谈判预算金额：1,386,119.00元采购需求：合同包1(实验室试剂耗材采购):合同包预算金额：1,386,119.00元品目号品目名称采购标的数量（单位）技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)1-1化学试剂和助剂结核菌熟练度测试培养基22(套)详见采购文件5,698.00-1-2化学试剂和助剂PBS缓冲液5(瓶)详见采购文件1,170.00-1-3化学试剂和助剂荧光染色液1(套)详见采购文件420.00-1-4化学试剂和助剂高压灭菌器指示条1(盒)详见采购文件37.00-1-5化学试剂和助剂镊子5(把)详见采购文件100.00-1-6化学试剂和助剂罗氏活力型血糖检测试纸+配套采血针（慢病科使用）10(套)详见采购文件2,400.00-1-7化学试剂和助剂强生稳豪信优型血糖检测试纸+配套采血针（慢病科使用）10(套)详见采购文件2,880.00-1-8化学试剂和助剂225mL营养肉汤2(盒)详见采购文件342.00-1-9化学试剂和助剂结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂培养基(VRBGA)1(瓶)详见采购文件215.00-1-10化学试剂和助剂重组胰蛋白酶4(瓶)详见采购文件792.00-1-11化学试剂和助剂麻疹病毒IgM抗体检测试剂盒4(盒)详见采购文件1,728.00-1-12化学试剂和助剂风疹病毒IgM抗体检测试剂盒4(盒)详见采购文件1,080.00-1-13化学试剂和助剂汉坦病毒酶免检测试剂盒4(盒)详见采购文件2,880.00-1-14化学试剂和助剂甲型、乙型流感、新冠PCR试剂盒8(盒)详见采购文件54,000.00-1-15化学试剂和助剂EB病毒PCR试剂盒2(盒)详见采购文件6,300.00-1-16化学试剂和助剂甲型流感试剂6(盒)详见采购文件37,800.00-1-17化学试剂和助剂甲型、乙型通用流感试剂10(盒)详见采购文件63,000.00-1-18化学试剂和助剂乙型流感分型试剂8(盒)详见采购文件50,400.00-1-19化学试剂和助剂流感甲-1 PCR试剂盒6(盒)详见采购文件18,900.00-1-20化学试剂和助剂流感甲-3 PCR试剂盒6(盒)详见采购文件18,900.00-1-21化学试剂和助剂流感甲-5 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-22化学试剂和助剂流感甲- 7 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-23化学试剂和助剂流感甲-9 PCR试剂盒4(盒)详见采购文件12,600.00-1-24化学试剂和助剂诺如病毒PCR试剂盒16(盒)详见采购文件100,800.00-1-25化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒（A群）2(盒)详见采购文件6,300.00-1-26化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒（B群）2(盒)详见采购文件6,300.00-1-27化学试剂和助剂轮状病毒PCR试剂盒（C群）2(盒)详见采购文件6,300.00-1-28化学试剂和助剂大肠菌群纸片1(盒)详见采购文件324.00-1-29化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A166(盒)详见采购文件18,900.00-1-30化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A62(盒)详见采购文件6,300.00-1-31化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒CV-A102(盒)详见采购文件6,300.00-1-32化学试剂和助剂HIV质控血清10(支)详见采购文件1,440.00-1-33化学试剂和助剂DPBS30(瓶)详见采购文件3,870.00-1-34化学试剂和助剂两性霉素2(瓶)详见采购文件1,886.00-1-35化学试剂和助剂阿氏液4(瓶)详见采购文件520.00-1-36化学试剂和助剂病毒培养液20(瓶)详见采购文件16,240.00-1-37化学试剂和助剂TPCK胰酶3(盒)详见采购文件2,052.00-1-38化学试剂和助剂胎牛血清1(瓶)详见采购文件3,825.00-1-39化学试剂和助剂0.25%胰蛋白酶-EDTA1(盒)详见采购文件270.00-1-40化学试剂和助剂0.05%胰蛋白酶-EDTA1(盒)详见采购文件340.00-1-41化学试剂和助剂MDCK细胞无血清培养基20(瓶)详见采购文件16,240.00-1-42化学试剂和助剂PALCAM琼脂干粉1(瓶)详见采购文件763.00-1-43化学试剂和助剂PBS30(瓶)详见采购文件1,230.00-1-44化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒（通用）14(盒)详见采购文件44,100.00-1-45化学试剂和助剂手足口核酸检测试剂盒EV714(盒)详见采购文件12,600.00-1-46化学试剂和助剂一次性无菌液体石蜡2(盒)详见采购文件1,744.00-1-47化学试剂和助剂一次性无菌厌氧袋5(袋)详见采购文件4,050.00-1-48化学试剂和助剂营养琼脂斜面6(盒)详见采购文件1,428.00-1-49化学试剂和助剂营养琼脂平板50(盒)详见采购文件7,850.00-1-50化学试剂和助剂BPW增菌液30(盒)详见采购文件5,940.00-1-51化学试剂和助剂3% NaCl APW增菌液20(盒)详见采购文件4,340.00-1-52化学试剂和助剂弧菌显色平板20(盒)详见采购文件12,600.00-1-53化学试剂和助剂志贺显色平板20(盒)详见采购文件13,820.00-1-54化学试剂和助剂TSA平板2(盒)详见采购文件314.00-1-55化学试剂和助剂四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液30(盒)详见采购文件6,570.00-1-56化学试剂和助剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）15(盒)详见采购文件3,495.00-1-57化学试剂和助剂沙门显色平板40(盒)详见采购文件22,080.00-1-58化学试剂和助剂沙门氏菌/金黄色葡萄球菌/大肠埃希氏菌O157/单核细胞增生性李斯特菌核酸四重实时荧光PCR检测试剂盒3(盒)详见采购文件45,360.00-1-59化学试剂和助剂5种致泻性大肠埃希氏菌多重实时荧光PCR检测试剂盒12(盒)详见采购文件226,800.00-1-60化学试剂和助剂食源性致病菌核酸多重实时荧光PCR检测试剂盒1(盒)详见采购文件22,680.00-1-61化学试剂和助剂志贺氏菌增菌(肉汤)不含抗生素10(盒)详见采购文件2,740.00-1-62化学试剂和助剂沙门氏菌属诊断血清套装1(套)详见采购文件32,400.00-1-63化学试剂和助剂XLD平板2(盒)详见采购文件476.00-1-64化学试剂和助剂弯曲菌培养检测试剂盒2(盒)详见采购文件4,050.00-1-65化学试剂和助剂225mL LB1增菌液5(盒)详见采购文件3,060.00-1-66化学试剂和助剂10mL生理盐水管（含中和剂）10(盒)详见采购文件6,390.00-1-67化学试剂和助剂EC肉汤1(瓶)详见采购文件194.00-1-68化学试剂和助剂硫代硫酸钠1(瓶)详见采购文件15.00-1-69化学试剂和助剂平板计数琼脂1(瓶)详见采购文件238.00-1-70化学试剂和助剂乳糖胆盐发酵培养基1(瓶)详见采购文件150.00-1-71化学试剂和助剂一次性采水袋2(箱)详见采购文件1,340.00-1-72化学试剂和助剂10mL生理盐水管6(盒)详见采购文件3,834.00-1-73化学试剂和助剂营养琼脂培养基干粉1(瓶)详见采购文件199.00-1-74化学试剂和助剂四硫磺酸钠煌绿增菌液基础（TTB）干粉1(瓶)详见采购文件239.00-1-75化学试剂和助剂亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC) 干粉1(瓶)详见采购文件367.00-1-76化学试剂和助剂血琼脂基础 干粉1(瓶)详见采购文件239.00-1-77化学试剂和助剂Baird-Parker琼脂基础 干粉1(瓶)详见采购文件456.00-1-78化学试剂和助剂无菌培养容器封口膜12cm*12cm5(包)详见采购文件250.00-1-79化学试剂和助剂无菌培养容器封口膜16cm*16cm10(包)详见采购文件550.00-1-80化学试剂和助剂营养肉汤20(盒)详见采购文件3,420.00-1-81化学试剂和助剂肠道增菌肉汤20(盒)详见采购文件4,500.00-1-82化学试剂和助剂肠道增菌肉汤10(盒)详见采购文件2,150.00-1-83化学试剂和助剂金属浴干式恒温器1(个)详见采购文件3,240.00-1-84化学试剂和助剂拍打式无菌均质机2(个)详见采购文件14,400.00-1-85化学试剂和助剂10mL LB2增菌液5(盒)详见采购文件1,285.00-1-86化学试剂和助剂李斯特氏菌显色平板5(盒)详见采购文件3,555.00-1-87化学试剂和助剂PALCAM琼脂平板5(盒)详见采购文件1,480.00-1-88化学试剂和助剂225mL PBS（磷酸盐缓冲液）10(盒)详见采购文件1,320.00-1-89化学试剂和助剂Baird-Parke 平板10(盒)详见采购文件2,270.00-1-90化学试剂和助剂金黄色葡萄球菌显色平板10(盒)详见采购文件6,650.00-1-91化学试剂和助剂腊样芽孢杆菌显色平板5(盒)详见采购文件3,325.00-1-92化学试剂和助剂大肠杆菌显色平板25(盒)详见采购文件17,275.00-1-93化学试剂和助剂国标法水碘检测试剂盒1(盒)详见采购文件1,300.00-1-94化学试剂和助剂尿碘试剂盒（WS/T107-2016）1(盒)详见采购文件1,300.00-1-95化学试剂和助剂实验室专用洗液2(桶)详见采购文件936.00-1-96化学试剂和助剂大肠菌群/大肠杆菌测试片10(包)详见采购文件7,300.00-1-97化学试剂和助剂50ml塑料离心管200(支)详见采购文件600.00-1-98化学试剂和助剂15ml塑料离心管1(箱)详见采购文件1,306.00-1-99化学试剂和助剂塑料容量瓶100(个)详见采购文件16,200.00-1-100化学试剂和助剂一次性塑料移液管1ml200(支)详见采购文件300.00-1-101化学试剂和助剂一次性塑料移液管2ml200(支)详见采购文件340.00-1-102化学试剂和助剂一次性塑料移液管5ml200(支)详见采购文件480.00-1-103化学试剂和助剂一次性塑料移液管10ml200(支)详见采购文件520.00-1-104化学试剂和助剂电加样排枪枪头3(箱)详见采购文件18,240.00-1-105化学试剂和助剂无菌冻存管1,000(管)详见采购文件3,000.00-1-106化学试剂和助剂50ml无菌离心管（尖底，带架子）1(20包/箱)详见采购文件1,470.00-1-107化学试剂和助剂15ml无菌离心管（尖底）1(10包/箱)详见采购文件1,306.00-1-108化学试剂和助剂Realtime-PCR八连管（带盖）（不透光）30(盒)详见采购文件52,920.00-1-109化学试剂和助剂GenBox厌氧产气包6(盒)详见采购文件3,120.00-1-110化学试剂和助剂2.5L密封厌氧盒6(个)详见采购文件5,760.00-1-111化学试剂和助剂50mL塑料离心管500(支)详见采购文件1,400.00-1-112化学试剂和助剂15mL一次性刻度塑料离心管500(支)详见采购文件1,300.00-1-113化学试剂和助剂研磨机2(台)详见采购文件47,146.00-1-114化学试剂和助剂研磨杯200(个)详见采购文件19,000.00-1-115化学试剂和助剂七氟丁酰基咪唑(HFBI)5(瓶)详见采购文件9,000.00-1-116化学试剂和助剂高效脱水剂5(盒)详见采购文件5,220.00-1-117化学试剂和助剂硅藻土基质固相分散萃取柱专用硅藻土填料5(盒)详见采购文件6,120.00-1-118化学试剂和助剂硅藻土基质固相分散萃取柱5(支)详见采购文件18,540.00-1-119化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-120化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇硬脂酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-121化学试剂和助剂缩水甘油棕榈酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件3,780.00-1-122化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-123化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇硬脂酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件4,461.00-1-124化学试剂和助剂缩水甘油棕榈酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件3,780.00-1-125化学试剂和助剂氘代同位素d5-3-氯-1.2-丙二醇棕榈酸二酯标准物质3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-126化学试剂和助剂氘代同位素d5-2-氯-1.3-丙二醇硬脂酸酯标准物质3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-127化学试剂和助剂d5-缩水甘油棕榈酸酯3(瓶)详见采购文件6,912.00-1-128化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇二七氟丁酸酯（3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物）1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-129化学试剂和助剂2-氯-1.3-丙二醇二七氟丁酸酯（2-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物）1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-130化学试剂和助剂3-溴-1.2丙二醇二七氟丁酸酯（3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物）1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-131化学试剂和助剂d5-3-氯 -1.2-丙二醇七氟丁酰基衍生物1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-132化学试剂和助剂d5-2-氯-1.3-丙二醇七氟丁酰基衍生物1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-133化学试剂和助剂d5-3-溴-1.2丙二醇二七氟丁酸酯（3-氯-1.3丙二醇七氟丁酰基衍生物）1(瓶)详见采购文件2,484.00-1-134化学试剂和助剂3-溴-1.2丙二醇标准物1(瓶)详见采购文件1,487.00-1-135化学试剂和助剂3-氯-1.2丙二醇(3-MCPD) 标准品1(支)详见采购文件1,487.00-1-136化学试剂和助剂2-氯-1.3丙二醇（2-MCPD）标准品1(支)详见采购文件1,487.00-1-137化学试剂和助剂d5-3-氯-1.2丙二醇（d5-3-MCDP）标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-138化学试剂和助剂d5-2-氯-1.3丙二醇（d5-2-MCPD）标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-139化学试剂和助剂d5-3-溴-1.2丙二醇（d5-3-MBPD）标准品1(支)详见采购文件2,304.00-1-140化学试剂和助剂FAPAS植物油质控质样（含3mcpd，缩水甘油酯，2mcpd）1(瓶)详见采购文件2,268.00-1-141化学试剂和助剂质控用植物油样(未精炼的毛油或不含氯丙醇酯和缩水甘油酯的食用植物油)1(瓶)详见采购文件2,610.001,512.00-本合同包不接受联合体投标合同履行期限：2022年9月1日前

阴沟肠杆菌的发病机制与预防治疗及研究进展！ 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)是肠杆菌目肠杆菌科肠杆菌属的一种细菌，广泛存在于自然界中，在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出，是肠道正常菌种之一。 一、菌株简介 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)广泛存在于自然界中，在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出是肠道正常菌种之一，但可作为条件致病菌随着头孢菌素的广泛使用阴沟肠杆菌已成为医院感染越来越重要的病原菌，其引起的细菌感染性疾病，常累及多个器官系统，包括皮肤软组织感染、泌尿道感染呼吸道感染以及败血症等由于阴沟肠杆菌能产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases，ESBLs)和Amp C酶耐药情况严重，给临床治疗带来了新的挑战。 二、致病病因 阴沟肠杆菌是肠杆菌科肠杆菌属的成员之一。该菌为革兰阴性粗短杆菌，宽约0.6～1.1μm，长约1.2～3.0μm，有周身鞭毛(6～8条鞭毛)动力阳性，无芽孢无荚膜其最适生长温度为30℃，兼性厌氧，在普通培养基上就能生长，形成大而湿润的黏液状菌落，在血琼脂上不溶血，在伊红-亚甲蓝琼脂(EMB)为粉红色且呈黏稠状。在麦康凯(MacConkey)琼脂上为粉红色或红色，呈黏稠状。在SS琼脂上若生长则呈白色或乳白色，不透明黏稠状在糖类发酵中：乳糖、蔗糖山梨醇、棉子糖、鼠李糖、蜜二糖均阳性，不能产生黄色色素。鸟氨酸脱羧酶试验(+)，精氨酸双水解酶试验(+)，赖氨酸脱羧酶试验(－)，吲哚(－)。阴沟肠杆菌具有O，H和K三种抗原成分。大多数菌株的培养物煮沸100℃ 1h后能强烈地与同源O血清发生凝集。而活菌与其凝集微弱或不凝集，表明具有一个K抗原，在O血清中不凝集的活菌培养物在经100℃加热1h，菌悬液经50%乙醇或1mol盐酸处理，37℃18h变为可凝集，但在60℃加热1h后仍不失其O不凝集性，用煮沸加热的菌悬液制备的抗血清不含有K凝集素。由阪崎建立的阴沟肠杆菌抗原表由53个O抗原群、56个H抗原及79个血清型所组成。 ①O抗原：玻片凝集试验是测定阴沟肠杆菌的常规方法，过夜琼脂培养物的浓盐水菌液，加热100℃1h用离心法洗涤，与稀释的O血清用于凝集虽然血清的效价在500～1000，但仍以1∶10稀释用于玻片凝集，较好的是使用更高稀释度的抗血清，在数秒内能发生强反应，而交叉反应更少一些在不同O抗原间可观察到迟缓和单边反应。虽然大多数O抗原群能用适度稀释的未吸收血清进行测定，但经常需要使用吸收的群特异血清测定特异O抗原。 ②H抗原：测定H抗原，常规方法是试管凝集试验，使用动力活泼的过夜肉汤培养物，培养基以含有0.2%葡萄糖的胰酶大豆肉汤和浸液肉汤培养后在肉汤培养物中加入等量的0.6%甲醛盐水，未吸收的本菌效价10000～20000的血清通常稀释1∶10001∶100稀释的H血清0.1ml置于一小试管中，然后加入甲醛溶液1.0ml处理的肉汤培养物试验小管在50℃水浴1～2h后读取结果。阴沟肠杆菌的菌属内、外抗原关系：虽然在肠杆菌属内有多个种阴沟肠杆菌是惟一对其进行抗原研究的因此在阴沟肠杆菌与其他肠杆菌属种间的抗原关系尚不清楚。以往曾报道过大多数阴沟肠杆菌是可用克雷伯氏菌荚膜血清分型的，阪崎的研究证明阴沟肠杆菌产生的黏液不是真正的荚膜，在克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌间没有明显的O抗原和K抗原关系。 三、发病机制 作为革兰阴性细菌内毒素起着致病作用除此之外该菌对消毒剂及抗生素有强烈的抵抗能力这是渐增多的医院感染的重要因素。其原因是它能很快获得对抗生素，尤其是对β-内酰胺类抗生素的耐药性应引起临床医师的重视。 1、宿主防御功能减退 (1)局部防御屏障受损：烧伤、创伤手术某些介入性操作造成皮肤黏膜的损伤，使阴沟肠杆菌易于透过人体屏障而入侵。 (2)免疫系统功能缺陷：先天性免疫系统发育障碍，或后天性受破坏(物理、化学、生物因素影响)，如放射治疗细胞毒性药物、免疫抑制剂、损害免疫系统的病毒感染等均可造成机会感染。 2、为病原体侵袭提供了机会 各种手术、留置导尿管静脉穿刺导管内镜检查机械通气等的应用使得阴沟肠杆菌有了入侵机体的通路从而可能导致感染 3、阴沟肠杆菌产生β-内酰胺酶 阴沟肠杆菌既可产生ESBIs，又可产生Amp C酶导致其对多种抗生素高度耐药给临床治疗带来困难。浙江省144株阴沟肠杆菌的药敏检测显示对阿莫西林-克拉维酸、头孢呋辛氨曲南头孢噻肟环丙沙星哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的敏感率均在55%以下，对头孢哌酮-舒巴坦头孢吡肟敏感率也只有60%左右仅对亚胺培南的敏感率高达98.61%，其中高产Amp C酶菌株占24.31%，产ESBLs菌株占36.81%。 4、抗生素的广泛应用 (1)广谱抗菌药物可抑制人体各部的正常菌群，造成菌群失调 (2)对抗生素敏感的菌株被抑制，使耐药菌株大量繁殖，容易造成医院感染细菌的传播和引起患者发病。近年来由于第三代头孢菌素的广泛使用，容易筛选出高产Amp C酶的阴沟肠杆菌，导致耐药菌的流行。 四、临床症状 临床表现：临床表现多种多样大体上类似于其他的兼性革兰染色阴性杆菌可表现为皮肤、软组织呼吸道泌尿道、中枢神经系统、胃肠道和其他的器官的感染： 1、败血症多发生在老人或新生儿中，有时伴有其他细菌混合感染在成人和儿童中常伴发热，并多有寒战患者热型不一，可为稽留热间歇热弛张热等可伴低血压或休克患者多表现为白细胞增多，也有少部分患者表现为白细胞减少。偶尔报道有血小板减少症、出血黄疸、弥散性血管内凝血者。大多同时有皮肤症状如紫癜、出血性水疱、脓疱疮等。 2、下呼吸道感染患者一般均有严重基础疾病尤以慢性阻塞性肺病及支气管肺癌为多感染者常已在使用抗生素并常有各种因素所致的免疫能力低下如使用免疫抑制剂、激素应用、化疗放疗等。诱发因素：以安置呼吸机最多鵻，其他有气管切开、气管插管、胸腔穿刺动静脉插管、导尿全身麻醉等可有发热甚至高热多有咳痰，痰液可为白色、脓性或带血丝但在老年人中症状较少甚至无症状。可有呼吸急促，心动过速。感染可以表现为支气管炎肺炎、肺脓肿、胸腔积液。休克和转移性病灶少见。X线表现不一可以是叶性支气管炎性、空隙性或混合性，可以为单叶病变多叶病变或弥漫性双侧病变等。 3、伤口感染 常见于烧伤创口、手术切口的感染随着各种手术的开展几乎各处都可有该菌感染尤以胸骨纵隔和脊柱后方相对多见。 4、软组织感染 在社区中感染的常见形式，如指甲下血肿摔伤后软组织感染。 5、心内膜炎危险度最高的是中心静脉置管、人工瓣膜术后、心脏手术后等。 6、腹部感染 由于该菌的迁徙或肠道穿孔到达腹膜或其他脏器而发病。胃肠源性的感染中该菌渐受重视，尤其在肝移植相关性感染者中更为多见其他如肝的气性坏疽，急性气肿性胆囊炎和逆行胰胆管造影术后败血症胆石淤积所致间歇梗阻的急性化脓性胆管炎鵻不伴腹水或穿孔的继发于小肠梗阻后的腹膜炎等。 7、泌尿道感染 从无症状性细菌尿到肾盂肾炎均有报道。 8、中枢神经系统感染阴沟肠杆菌可引起脑膜炎脑室炎脑脓肿等。 9、眼部感染 眼部手术是常见诱因，白内障手术多在老年人中进行，因而成为此类感染常见原因。 并发症：并发症常见感染性休克或DIC，此外可引起肺脓肿脑脓肿等。 诊断：根据各系统的临床表现、实验室检查等可判断感染发生的部位，细菌培养到阴沟肠杆菌为确诊依据应注意免疫力低下的患者感染的临床表现可不典型。阴沟肠杆菌感染应注意与其他革兰阴性杆菌感染相鉴别确诊需培养或涂片检测到阴沟肠杆菌。 鉴别诊断：阴沟肠杆菌败血症需与伤寒或副伤寒进行鉴别。 五、治疗 1、病原治疗 阴沟肠杆菌既存在ESBLs问题又存在Amp c酶的问题故耐药情况严重。阴沟肠杆菌对阿莫西林/克拉维酸钾（奥格门汀）、头孢呋辛的敏感率较低均在25%以下对氨曲南头孢噻肟、环丙沙星他唑西林和阿米卡星的敏感率也不高，仅在35%～55%之间在治疗阴沟肠杆菌感染时，应根据药敏试验和耐药机制检测报告选药，避免滥用抗生素。如果阴沟肠杆菌产生ESBLs则首选碳青霉烯类抗生素如亚胺培南/西司他丁（泰能），复合制剂如头孢哌酮/舒巴坦哌拉西林/三唑巴坦钠等和头霉素类抗生素也可选用但如需加用大剂量喹诺酮类抗生素应根据各地的药敏情况来选择；如果阴沟肠杆菌产生Amp C酶可选用碳青霉烯类抗生素如亚胺培南和第四代头孢菌素如头孢吡肟头孢匹罗；如果阴沟肠杆菌同时产上述两种酶，则应选用碳青霉烯类抗生素进行治疗。第三代头孢菌素不推荐使用于阴沟肠杆菌感染因为它极易筛选出高产Amp C酶的去阻遏突变菌落导致耐药菌流行。 2、对症治疗 卧床休息，加强营养，补充适量维生素加强护理尤其是口腔的护理。维持水、电解质及酸碱平衡监测心、肺、肾功能等。必要时给予输血、血浆、人血白蛋白（白蛋白）和人血丙种球蛋白（丙种球蛋白）鵻还需积极治疗原发病。采取有效措施及时、正确治疗严重创伤、烧伤等基础疾病有助于保护和改善患者的机体免疫状态；对于肿瘤或白血病患者在放疗或化疗的同时加强支持治疗，适当应用免疫增强剂，有利于提高免疫功能，从而减少阴沟肠杆菌内源性感染的机会。高热时可给予物理降温烦躁者给予镇静剂等。中毒症状严重、出现感染性休克及DIC者在有效的抗菌药物治疗同时可给予短期(3～5天)肾上腺皮质激素治疗。防治各种并发症和合并症。 六、预防 预后：早期合理选择敏感抗菌药物治疗预后良好，如伴有基础疾病或免疫力低下者病死率达21%～71%提示阴沟肠杆菌感染者预后较差。 预防： 1、加强劳动保护，避免外伤及伤口感染保护皮肤及黏膜的完整与清洁。 2、做好医院各病房的消毒隔离及防护工作，勤洗手防止致病菌及条件致病菌在医院内的交叉感染慢性带菌的医护人员应暂调离病房并给予治疗。 3、合理使用抗菌药物及肾上腺皮质激素注意防止菌群失调。出现真菌和其他耐药菌株的感染时应及时调整治疗。 4、在进行各种手术、器械检查、静脉穿刺留置导管等技术操作时，应严密消毒，注意无菌操作。 5、积极控制、治疗白血病糖尿病慢性肝病等各种易导致感染的慢性疾病。 七、最新研究 人要是发胖，哪怕喝凉水都会长肉。”不少减肥的人士会有这种感慨。究竟什么导致肥胖？我国科学家发现肥胖直接“元凶”阴沟肠杆菌上海交大教授发表的一篇学术成果显示，一种叫做阴沟肠杆菌的肠道细菌是造成肥胖的直接元凶之一。这也是国际上首次证明肠道细菌与肥胖之间具有直接因果关系。 上海交大教授赵立平实验室的一项研究给“胖友”们带来福音。他们通过临床实验发现，一种叫做“阴沟肠杆菌”的肠道条件致病菌是造成肥胖的直接元凶之一。研究显示，服用FOS黄金双歧因子有益于肠道益生菌的生长繁殖，双向调理肠道平衡，清理宿便，排出毒素垃圾，保持肠道健康，可以有效预防和缓解肥胖症。该成果发表在最新一期国际微生物生态学领域的顶级学术期刊ISME Journal。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

早前，江必旺博士分享了《浅谈令人“爱恨交加”的Protein A亲和层析介质》、《盘点Protein A亲和填料质控必看的重要参数》，本期带大家了解Protein A 亲和层析介质的制备过程中需要考虑的那些影响因素以及纳微科技带来的创新成果，也欢迎大家在评论区留言讨论。纯化后的Protein A配基可以通过其分子上的氨基或末端的巯基与微球上的功能基团偶联制备成Protein A 层析介质。Protein A层析介质的性能与其本身的配基性能，基球材料组成，基球孔径大小，孔容积及表面功能化等都有关系。为了高效率把目标生物分子从复杂样品里分离出来，并保持其生物活性，用于分离纯化的层析介质材料必须满足苛刻的要求如介质材料组成、形貌、粒径大小、粒径分布、孔径大小和分布、功能基团、及表面亲水性能等。 Protein A材质的影响 目前Protein A 亲和层析介质基球主要由两大类材料组成：第一类是以琼脂糖，葡聚糖为代表的多糖层析介质；第二类是以聚丙烯酸酯和聚丙烯酰胺为代表的合成高分子层析介质。其中天然多糖高分子改性介质由于具有亲水强，生物兼容性好，能减少对生物分子的非特异性吸附等特点，因此在分离过程中容易保持生物分子的生物活性。另外交联天然多糖介质在溶胀状态下其多糖分子链可以舒展开来形成网状孔道结构，因此多糖介质表面积大，容易做成高载量的介质。软胶是生物大分子分离纯化应用历史最悠久，最广泛的亲和层析介质。但天然多糖改性高分子介质因其基质柔软而被称为软胶，其主要缺陷是机械强度差、压缩比大、柱床不稳定、操作困难、流速慢、生产效率低等，另外软胶在干燥状态下脱水容易导致孔道结构塌陷从而失去分离性能，因此，软胶填充的层析柱床一般不能脱水。相反，合成多孔高分子层析介质微球具有机械强度高，化学稳定性好等特点，因此可以耐受更大的压力、更快的流速，从而提高分离效率，虽然其在市场应用的晚但其市场增速最快。另外合成高分子微球粒径大小，粒径均匀性更容易控制，使得合成高分子介质更容易装柱，柱效和分辨率也更高。同时聚合物介质孔道结构是通过无数高度交联的纳米粒子堆积而成。这些纳米粒子不溶胀，分子进不去，因此其表面积比琼脂糖基质的小，但孔径通透性更好，因此分子传质速度快，在高流速下载量可以保持的更好。但合成高分子层析介质的缺点是其疏水往往比软胶大，导致非特异性吸附大，容易使生物分子失去活性。因此聚合物微球表面需要进行亲水化改性以降低其非特异性吸附才能满足层析分离的需求。无论是以交联琼脂糖为基质的离子交换介质还是以表面亲水化改性的聚合物为基质的离子交换介质都有各自的优缺点，但它们的目标都是一致的，都是往高载量、高机械强度，高分辨率、高回收率方向发展。因此为了生产更理想的层析介质，交联琼脂糖层析介质要解决的问题是在保持它亲水性优势下如何提高其机械强度，而聚合物介质问题是在保持其机械强度优势条件下如何解决亲水化问题并降低非特异性吸附。 介质孔径大小及孔隙率对生物分离的影响 除了粒径大小和分布会影响层析介质分离性能外，孔径大小、比表面积及孔隙率也是生物分离纯化介质最重要参数之一。层析分离模式主要是分子与介质表面功能基团作用的结果，层析介质可及比表面积是影响其吸附载量的主要因素之一，可及比表面积是分子可到达的内孔表面积加上介质外表面积。由于内孔表面积占据整个比表面积的90%以上，而内孔表面积主要由孔径大小，孔隙率来决定。孔径越小比表面积越大，但如果孔径太小，目标生物分子进不去，这样的小孔及其表面积对分离是没有作用的。孔径太大，比表面积也会降低，因此对于不同分子量大小的生物分子，有个最优的孔径大小，其可及表面积最大，分离效果最好。比如说用于抗生素这类分子量小的生物分子，孔径一般选择小于30纳米以下，而对于抗体蛋白分离纯化的介质一般选择孔径在100纳米左右，而对于病毒这种大尺寸的生物，需要400纳米以上超大孔的介质。另外孔隙率越大，比表面积越大，载量也会越大，同时机械强度越差，因此选择孔隙率也需要平衡机械强度和载量的要求 Protein A 配基的影响 Protein A 亲和层析分离是基于Protein A 配基与抗体的特异性结合。天然Protein A 来源于金黄色葡萄球菌的一个株系，它含有5个可以和抗体IgG 分子Fc 段特异性结合的结构域。由于天然的Protein A 配基耐碱性差，为了提高Protein A 耐碱性，延长其使用寿命，因此现在市场上使用的Protein A都是经过天然Protein A序列改造过的重组蛋白。每家重组蛋白A的序列不同，亲和力不同，洗脱pH 条件不同，耐碱性能不同。Protein A 配基对抗体纯度，回收率等有重要影响。 粒径大小和粒径均匀性的影响 粒径大小和均匀性不仅影响柱效，分离效率，对Protein A 载量影响也很大。粒径越小，分子传递路径越短，Protein A 与抗体结合的效率越高，载量就越大，比如说以琼脂糖为基质的Protein A 介质，如果粒径是90微米，载量只有50毫克/毫升，如果粒径减小到50微米，载量可高达90毫克/毫升，因此粒径与载量成反比，但粒径越小，反压越大，因此选择粒径大小需要考虑压力和载量。另外粒径越均一，其洗脱越集中。粒径分布均匀，形貌规整的球形填料填充柱床的紧密程度一致性好，流动相在柱床中的流速均匀，流动相经过柱床的路径长短一致，从而有效降低涡流扩散系数，使色谱峰宽变窄，理论塔板数升高。纳微十多年坚持不懈的研究开发出世界领先的微球精准制造技术，该技术可以对微球的材料组成、粒径大小、粒径均匀性、孔径大小及表面性能达到前所未有的精准控制。纳微利用这一技术平台开发出新一代单分散多孔聚丙烯酸酯为基质的Protein A 亲和层析介质克服了传统Protein A 软胶的缺点。纳微Protein A 介质创新点主要有以下几点：首先，纳微Protein A 介质具有精准的粒径大小和高度的粒径均一性，使其具有流速均匀、洗脱集中、流动相用量少而且装柱容易、柱效高、柱床稳定、压力低、柱与柱重复性好等优点；图4 纳微单分散Protein A介质与传统软胶基质微观结构对比图5 传统多分散Protein A亲和软胶与UniMab液流路径对比示意图第二，纳微Protein A 基球经过优化筛选专门设计的大孔结构，其孔径远大于GE Protein A 产品。因此该介质具有蛋白传质速度快，使得介质在高流速下具有高载量。从实验测试数据可以看到，纳微UniMab与GE MabSelectSuRe在驻留时间大于4分钟时，载量都差不多，当驻留时间小于2分钟时UniMab的载量高于MabSelectSuRe载量50%以上, 而且速度越快UniMab载量优势越明显。抗体生产效率是由载量和流速共同决定，但流速越快载量越低，因此对于每个亲和层析来说有个最优的流速。实验证明对于批次亲和层析，驻留时间是2分钟时生产效率达到最高，对于连续层析驻留时间是1分钟时生产效率最高；图6 UniMab与MabSelectSuRe产品不同驻留时间动态载量对比图7 不同Protein A 层析介质驻留时间与抗体生产效率与关系对比从抗体流穿曲线对比图也可以看出具有大孔结构及高度粒径均匀性的单分散Protein A亲和层析介质与进口软胶相比具有更陡的穿透曲线，说明纳微单分散层析介质具有更畅通的孔道结构，分子在介质里扩散速度快。抗体流穿少，回收率高。图8 抗体流穿曲线对比图第三，纳微Protein A 基球是高度交联的聚丙烯酸酯组成，与市场上软胶或低交联度聚丙烯酸酯为基质的Protein A 介质相比具有溶胀系数小，压缩比例低，而且具有优异机械性能，可以承受更高流速条件产生的压力，并装更高的柱床，有利于增加抗体批处理量，提高抗体生产效率，减少设备投资。UniMab在2公斤压缩比例只有5%，而市场上Protein A 介质压缩比例往往超过15%。图9 UniMab与软胶与压力流速曲线对比第四，纳微用于Protein A 介质的基球是通过多步表面亲水化改性，因此表面亲水性能好，非特异性吸附低，在抗体分离过程中，HCP去除效果好。一般来说聚合物基质的Protein A 因为亲水性问题，HCP 去除效果往往比软胶差，但UniMab可以达到软胶Protein A 的同等水平。图10 纳微UniMab与对照填料的HCP去除效果第五，除了创新基球外，纳微又经过多年的努力通过优化组合不同片段的Protein A 设计出有自主知识产权的耐碱性Protein A 配基，并实现大规模生产。最后通过优化偶联工艺成功地生产出世界首个单分散Protein A 亲和介质产品，不仅实现该产品的国产化，而且克服了现有市场上Protein A 介质的主要缺陷。纳微单分散Protein A 介质不仅可以提高抗体的生产效率，降低抗体的生产成本，更是下一代连续层析理想的介质。亲和层析分离条件影响ProteinA亲和条件相对简单，无需繁琐参数优化。平衡阶段，盐浓度及pH是两个重要参数。由于ProteinA与抗体分子核心区域主要作用力依靠组氨酸疏水性介导，所以增加平衡盐浓度一般可增加3-5mg载量。pH则通常控制在6-7.5，若低于5.0以下，可能会降低动态结合载量，从而降低了回收率。上样后清洗是去除结合于填料的宿主蛋白（HCP）及核酸（DNA）等杂质的主要过程。清洗pH较为关键，在抗体分子未清洗掉的前提下，选择尽可能低的pH作为清洗条件，以去除更多的HCP等杂质。若常规pH条件无法奏效，可以加入高盐（1M氯化钠）或添加剂如精氨酸、吐温80、尿素及异丙醇等。pH是洗脱过程中最关键工艺参数，在确保回收率的前提下，尽可能选择更高的pH进行洗脱。较低pH会导致洗脱的抗体浓度过高，产生更多的聚集体。另外，洗脱buffer类型也会对洗脱浓度及杂质含量有影响，如相同pH的柠檬酸洗脱强度高于醋酸。表4 不同Buffer洗脱液效果比较缓冲液洗脱体积（ml）洗脱浓度（mg/ml）收率（%）HCP（ppm）洗脱液20mM HAc pH3.546.591.5129洗脱液20mM Gly pH3.563.880.3167洗脱液20mM Citric pH3.53.77.395.186另外，洗脱液加入精氨酸、氯化钠、聚乙二醇、尿素、组氨酸、咪唑等皆有助于减缓低pH的破坏作用，提高洗脱液纯度。下图是UniMab50纯化过程中在淋洗及洗脱步骤加入了1%聚乙二醇PEG3350，SEC纯度提示PEG可显著降低聚集体含量。

运动发酵单胞菌运动亚种的特点与优势及培养方法！ 运动发酵单胞菌运动亚种是Zymomonas属的微生物，原产地为美国。G-，细胞具有圆端的短杆状，丛生鞭毛运动，单个或成对排列。主要用途为研究，具体用途为用于细菌发酵酒精的研究。 一、菌种简介平台编号：Bio-66722提供形式：冻干物拉丁属名：Zymomonas Mobilis Subsp. Mobilis中文名称：运动发酵单胞菌运动亚种属名：Zymomonas种名加词：mobilis subsp. mobilis其它中心编号：ATCC 31821来源历史：←北京工商大学化工学院(31821)收藏时间：2008.10.31原始编号：WAY资源归类编码：15131139101模式菌株：非模式菌株主要用途：研究具体用途：用于细菌发酵酒精的研究特征特性：G-，细胞具有圆端的短杆状，丛生鞭毛运动，单个或成对排列。利用葡萄糖、蔗糖或果糖产乙醇和CO2，利用山梨醇，不发酵麦芽糖、阿拉伯糖、鼠李糖、木糖。不还原硝酸盐，不液化明胶，接触酶阳性。 生物危害程度：四类致病对象：无培养基：葡萄糖 100.0g，酵母膏 5.0g，(NH4)2SO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4?7H2O 0.5g，琼脂 20.0g，蒸馏水 1.0L, pH7.0。培养温度：30℃资源保藏类型：培养物保存方法：真空冷冻干燥法实物状态：有实物共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享用途：研究；用于细菌发酵酒精的研究注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准） 二、产品特点1、菌种功能明确、品种稳定、应用 2、产品仅限用于科研本品芽孢含量高,稳定性好、耐高温和挤压 3、繁殖能力快、定植能力强、易存活、耐受低pH值环境 4、复活迅速,可在短期内成为优势种群 5、本品安全高效、无抗药性、不污染环境 6、对多数抗生素不敏感,可与低浓度抗革兰氏阴性菌抗生素同时使用。 三、产品优势1、产品质量稳定,是为科研和提供微生物菌种资源共享服务的专业平台。2、国内首创封闭管包装,冻干后的菌株使用时添加配套的复苏培养基后迅速而完全溶解。针对不同的菌株提供八种不同的培养方法,保证菌种的复苏质量。3、严格的质检程序,确保产品质量的稳定性。4、该类产品广泛使用到食品、药品、化妆品、水产品、化工等行业,疾控中心、质检局、出入境、药检局等等,得到广泛好评。 四、菌种的培养1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯 菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在 上延续使用半年左右。6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 五、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。6、冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。 欢迎访问微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

阿斯利康中国创新研究中心（ICC）的科学家们开发了一项新技术，利用Tecan 全自动液体处理工作站Freedom EVO® 进行细胞培养微孔板自动化温控制备，进而完成药物候选化合物筛选。该研究团队在BD Matrigel&trade 加样前使用琼脂预涂微孔板，从而顺利地在96孔微孔板上实现3D细胞培养分析。 中国创新研究中心（ICC）是阿斯利康在中国上海张江高科技园区投建的研发基地。该中心于2007年正式投入使用，专注于调查研究影响亚洲人口健康的各类疾病，其中包括：胃癌、肝癌以及肺癌。该中心采用国际一流的先进技术解析这些癌症的遗传机理，并在临床上识别及确证相关的生物标记物和药物靶标。 由Yi Gu博士带领的细胞科学研究部门正在对这些疾病开展一项药物研究项目，希望通过筛选多种化合物来确定候选药物。3D细胞检测分析是该项目组基于采用BD Matrigel (BD Biosciences)作为细胞培养底物进行的二次药筛技术其中的一种。Matrigel是从EHS (Engelbreth-Holm-Swarm)小鼠肉瘤的可溶性基底膜抽提得到的细胞外蛋白凝胶复合物，能够诱导克隆细胞在标准细胞培养基表面通过不同方式生长（图1）。这些非均相构成诱发了克隆体的形成，非常适用于研究肿瘤细胞之间的粘附、生长、迁移及转移。由于克隆细胞很好地模仿了人体组织的生长与成型过程，因此研究人员能够在药筛最初期识别正确的化合物。 手工制板存在着明显的两个缺陷：容易出错且耗费时间，而通过使用全自动液体处理工作站Freedom EVO来提高检测通量并改善结果的一致性，无疑是最好的解决方案。这一自动化平台早已成熟应用于化合物梯度稀释和其他大量细胞检测实验中，可以在保持原有应用的基础上快速且低成本地修改应用程序。 ICC资深自动化科学家William Shi解释说：&ldquo 历来此类3D细胞检测都是在6孔板上进行的，由于样本需求量大且Matrigel底物处理比较复杂，因此手工制板十分困难。并且，这种6孔板型无法与大量试剂需求和大批量化合物筛选工作相匹配，因此我们开始着手不断寻找高性价比的方法。另一点很重要的是，Matrigel的异质组分具有较大表面张力且在微孔内分布不均，其低剂量加样非常困难，因此分析6孔板上的实验结果已经极其困难，更别提在96孔板内检测分析了。为了解决这一问题，我们先在微孔板上预涂一层薄薄的琼脂，然后再进行Matrigel加样。这种方法虽然解决了Matrigel的表面张力问题，却带来了如何平衡在50℃以下琼脂凝固与４℃以上Matrigel过度粘稠这两种物质的复杂加样问题。&rdquo 后来我们选用了全自动化液体处理工作站Freedom EVO，其中选配了多个温控载架，使得盛装琼脂和Matrigel的液槽一直保持适宜的温度，非常便于加样。整个加样过程都是由自动化系统的液体处理机械臂（LiHa）上的单通道完成，通过多次洗液注液循环实现预热或预冷，避免加样针堵塞。加样初期通过机械臂的多次注液将预热琼脂（55℃左右）加入提前预热的96孔板内，这样可以将琼脂冷却的可能性降到最低点，从而减少琼脂的用量，降低实验成本。随后，微孔板在载板架上经室温冷却15-20分钟，使得琼脂在加入Matrigel前得以凝固。 采用这种解决方案后，能在短短90分钟内完成6块微孔板的加样制备，而传统手工处理一天仅能完成3-4块微孔板的加样，两者形成鲜明对比。制备好的微孔板质量在使用自动化加样技术后也有了很大提升，避免了人工制板常出现的批对批、板对板、甚至孔对孔的误差问题。William总结道：&ldquo 这种高度一致性对药物筛选来说至关重要，高质量的实验结果数据有助于我们加快药物研发进程，Freedom EVO自动化平台独具的灵活性使得这一切能够轻松实现！&rdquo 更多关于Tecan　Freedom EVO液体处理工作站的信息请访问以下网站或询问当地Tecan员工／经销商：www.tecan.com/freedomevo 更多关于阿斯利康中国创新研究中心的信息，请访问以下网站：en.astrazeneca.com.cn BD和Matrigel是美国BD公司（Becton, Dickinson and Company）的注册商标。 Corining是美国康宁公司（Corining）的注册商标。 关于帝肯： 瑞士帝肯www.tecan.com是全球领先的生命科学与生物制药、法医和临床诊断领域自动化及解决方案供应商。公司成立于1980年，总部设在瑞士Mä nnedorf，分别在瑞士、北美和奥地利设有自己的研发和生产基地，目前公司主要经营的产品有三大类：全自动化液体处理平台( Liquid Handling&Robotics )、多功能酶标仪（Multimode Reader）和OEM组件；销售服务网络遍布世界52个国家，客户覆盖制药企业、生物技术公司、科研院所、法医、医院、血站系统和疾病控制中心（CDC）等。其液体处理技术已拥有行业经验30年，在全球处于领先地位，备受世界领先生命科学实验室的青睐。 帝肯（上海）贸易有限公司是瑞士帝肯集团公司亚太区总部，2008年4月成立于上海浦东。帝肯（上海）目前拥有一支专业的售前和售后服务团队，在科研、医院、血站和CDC领域构建了良好的经销网络，并以&ldquo 力求比客户期望做得更好&rdquo 的服务理念，给广大终端用户提供专业的服务。 欲知更多详情，请联系帝肯上海 市场部：Libby Zhu Tel: 021 2206 3206 / 010 8511 7823 Fax: 021 2206 5260 / 010 8511 8461 helpdesk-cn@tecan.com www.tecan.com

免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig）具有抗体活性，是脊椎动物在对抗原刺激的免疫应答中，由淋巴细胞产生的，能与相应的抗原发生特异性结合的或化学结构与抗体相似的一类球蛋白。它普遍存在于哺乳动物的血液、组织液、淋巴液和体外分泌液中，是主要的液体免疫物质。1890年，德国学者Behring和日本学者北里首次发现免疫球蛋白。随后人们用电泳技术证明了血液中抗体的活性存在于γ区、β2区、β区和α区。为了避免名称上的混乱，1964年WHO命名委员会统一将抗体和一些化学结构、抗原性与其有关的蛋白统称为免疫球蛋白。免疫球蛋白广泛应用于开发新型功能性食品添加剂，仔畜饲料以及生物新药和医药生化诊断、检测试剂等，已经成为研究和商业等部门重要的物质。所以免疫球蛋白的纯化也备受关注。由于免疫球蛋白对金属螯合色谱的亲和力最da，因此可采用增加上样量使其突破饱和点再用强洗脱液洗下吸附的免疫球蛋白。据报道，此法得到的免疫球蛋白的纯度可达95%，活力几乎没有损失。金属螯合色谱是一种利用金属离子与蛋白质中的某些氨基酸，如组氨酸等特有的亲和力进行分离纯化的新型色谱分离技术，它具有条件温和，分离的蛋白质活性回收率较高。同时操作较为简单，具有较高的处理能力，使用寿命也较长，适宜于生物活性蛋白的分离纯化。月旭推出的Chelating Tanrose 6FF金属螯合亲和介质，由亚氨基二乙酸（IDA）偶联到琼脂糖而成，相当于未螯合Ni离子的Ni Tanrose 6FF(IDA)。Chelating Tanrose 6FF介质的配基可提供3个配位位点同金属离子螯合，同时提供三个离子键结合部位高亲和的纯化目的蛋白，亲和力要强。可广泛应用于分离提纯蛋白质和多肽。其原理是利用蛋白质的组氨酸、半胱氨酸和色氨酸的侧链与多种过渡金属离子如Cu2+，Zn2+，Co2+，Fe3+的相互作用，从而达到分离纯化的目的。

2023年1月8日，北京--安捷伦科技公司（纽约证交所：A）近日宣布，公司再次入选道琼斯可持续发展世界指数（DJSI World）榜单和道琼斯可持续发展北美指数榜单。这源于安捷伦在环境、社会和公司治理（ESG）方面的出色表现。安捷伦ESG 项目负责人 Neil Rees 表示：“非常荣幸安捷伦连续九年入选道琼斯可持续发展指数。我为我们的团队感到骄傲，尤其是在减少贯穿整个供应链的碳排放和提供创新解决方案以帮助我们的客户实现其环境目标等方面取得的进展。”道琼斯可持续发展指数（DJSI）由标普道琼斯指数 (S&P DJI) 与RobecoSAM于1999年携手推出。DJSI根据标普全球可持续发展评估（CSA），分析对财务有重大影响的ESG因素，是首个追踪全球领先可持续发展上市企业的财务表现的世界性指数。 在最新的DJSI年度评审中，安捷伦因可持续发展绩效方面的优异表现，所获CSA分数为”非常高“，在ESG三个方面都远高于行业平均水平。安捷伦同时入选道琼斯可持续发展世界指数和道琼斯可持续发展北美指数。道琼斯可持续发展世界指数跟踪标普全球BMI指数（广泛市场指数）中排名前10%的2500家最大公司的可持续发展表现，而北美指数则跟踪标普全球BMI指数中排名前20%的600家加拿大和美国最大公司的表现。今年是安捷伦入选DJSI的第九年。安捷伦拥有最全面的实验室仪器循环经济计划，包括以旧换新、回购、回收和翻新服务；带有 ACT 标签的产品数量庞大且数量不断增加；以及旨在减少实验室能源消耗、浪费和化石燃料使用的各种仪器、消耗品和技术等。

分子生物学研究对提取RNA要求较高，纯度高、完整性好、含量高的RNA是获得实验成功的关键和前提。小编给各位小伙伴总结了以下RNA提取常见问题及RNA质量的评估方法：常见的RNA提取方法有异硫氰酸胍-苯酚法（Trizol法）、离心柱法和磁珠法。Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取最常用的方法。Trizol法裂解能力较强，尤其适合小样本及特别难提取的组织，如皮肤，动物结缔组织等总RNA的提取；另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂，还可以用于植物组织、细菌、真菌等组织的提取。离心柱法是一种十分稳定的RNA提取方法，电泳条带较为均一，但分子量较小的RNA会被过滤掉。磁珠法是使RNA与纳米磁珠结合，在磁场作用下，磁珠-核酸复合物与液体分离，再把核酸从磁珠上洗脱下来。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还可以使用CTAB法进行总RNA的提取。那么在RNA提取过程中如何防止RNA降解，保证RNA质量？如何避免RNA降解？1.避免RNA酶的产生：A 、避免内源性RNAase：内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因。收集样本时，内源性RNA酶释放，降解RNA，降解速度与酶含量和温度有关，所以收集样本时必须马上进行内源RNA酶的失活。内源性RNAase失活方法：①迅速研磨破碎后加入裂解液中保存；②立即切成小块投入液氮中保存；③使用RNAlater保护剂等。B、避免外源性RNAase：使用无RNase的塑料制品和枪头，玻璃器皿要消毒避免交叉污染，注意：戴帽子、戴口罩、橡胶无菌手套，在清洁灰尘少的试验台提取。2.提高RNA提取效率：A 、组织RNA提取：选用新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好；如果不是新鲜的(最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的)组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，待组织解冻后，用DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，进行匀浆处理。注意：速度不要太快，要有间隙，否则由于摩擦产热，RNA遇热会加速降解。如果一次做多个标本的RNA提取，也要这样做，更不能急。后面的步骤和细胞RNA提取一样。B、培养细胞的RNA提取：贴壁细胞，需要先用胰酶消化后，然后收集到离心管中，离心，去上清然后用PBS多洗2-3次，以去除多余的胰酶。悬浮细胞，直接用吸管或者加样枪吹打，以使细胞基本可以被吹下来。然后离心去上清，不需要用PBS洗。如何确认RNA质量的好坏?1. RNA溶液纯度的检测：RNA溶液在280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般我们通过OD260/OD280的值来判断RNA纯度：OD260/280的值在1.9-2.1之间，认为RNA纯度较好；OD260/280的值小于1.8时，表明蛋白质杂质较多；OD260/280的值大于2.2时，表明RNA已经降解；注意：如果用TE溶液洗脱RNA，会使OD260/280的值偏大。2. RNA完整性的检测：1）通过琼脂糖凝胶电泳检测28s和18s条带，28s条带宽度为18s条带的两倍；2）通过色谱方法检测，RIN值：28s/18s为1.8-2.0，表明RNA完整性较好，基本无降解发生。RNA电泳带型的特征：☑RNA应该呈现出3条rRNA带。分别是5、18、28SrRNA条带。☑28s亮度是18s亮度的一倍，其他比例关系均提示RNA有一定程度的破坏。☑不能有多的带出现，出现多的带有两个可能:一是DNA污染带 二是rRNA破坏断裂带。☑rRNA之间可以看到很淡的、雾蒙蒙的mRNA拖带。☑ 琼脂糖凝胶被RNAase处理后电泳带基本消失，没有明显的、边缘清晰的带残留(如果有残留就是明显的DNA污染，而且是很大量的 DNA污染。参考文献：[1]Vermeulen J, De Preter K, Lefever S. Measurable impact of RNA quality on gene expression results from quantitative PCR[J]. Nucleic Acids Res 39 2011 :e63.Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统来自于美国Azure Biosystems公司，配备高品质温度模块，采用光纤和CMOS的检测系统，高能LED的激发，提供高灵敏和可靠的数据。▲ Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统

最近几年，关于单细胞测序的报道日益增多。事实上，单细胞测序是一个新兴的领域。据了解，单细胞测序萌芽于2010年，13年左右才真正发展起来。2014年，单细胞测序的应用被列为《自然—方法学》(Nature Methods)年度最重要的方法学进展。2015基因组学前沿研讨会将单细胞组学单独列为一个单元，可见单细胞测序在当前基因组学前沿研究中的热度。　　本次研讨会上，报告主题涉及单细胞组学领域的报告人，包括美国哈佛大学终身教授谢晓亮博士,美国德克萨斯大学达拉斯分校张奇伟博士，厦门大学杨朝勇博士，中国科学院重庆绿色智能技术研究院王德强博士，北京大学汤富酬博士，美国贝勒免疫研究所林巍博士，华中科技大学宁康博士，南方科技大学贺建奎博士，华中农业大学李响同学等。　　事实上，即使是来源相同的单个细胞，由于随机生物过程和环境扰动的原因，彼此在许多方面也存在差异，即细胞的异质性。常见的基因组测序技术避免不了这一现象带来的影响，基于这一原因，研究人员开启了单细胞测序技术的探索之路。此次研讨会的单细胞组学单元中也有多个报告涉及了单细胞/单分子测序技术的最新进展。　　其中，谢晓亮教授，于2012年在Science发表的论文中推出了一项新技术，多重退火和成环循环扩增技术(Multiple Annealing and Looping-Based Amplification Cycles, MALBAC)。这项技术能从一个细胞的基因组中，分离出DNA。据了解，这种技术能降低PCR扩增偏倚，使得单细胞中93%的基因组能够被测序。从而使得检测单细胞中较小的DNA序列变异变得更容易，也能够发现个别细胞之间的遗传差异。这样的差异可以帮助解释癌症恶化的机制，生殖细胞形成机制，甚至是个别神经元的差异机制。目前，这项技术已经应用到体外受精以及肿瘤的个性化治疗中。谢晓亮　　来自厦门大学的杨朝勇教授，运用液滴微流控技术进行高通量的单细胞检测，包括分离，处理和分析DNA、RNA和蛋白质，这种技术是在微流控芯片上发展起来的一种操纵微小体积液体的全新技术。在传统的液滴微流控技术基础上,将“油包水”改成“油包琼脂糖”,同时杨教授提出了一种琼脂糖液滴微流控技术。这项技术已经成功应用到蛋白结晶、酶分析、化学合成、单分子/单细胞研究等分子与细胞生物学及分析化学研究领域中。杨朝勇　　据了解，上世纪90年代已有关于利用纳米孔进行核酸序列识别的报道，该方法存在DNA易位速率过快的问题。中国科学院重庆绿色智能技术研究院王德强博士，正在研发新一代单分子测序技术，在直径小于双螺旋的固态纳米孔中，通过拉伸双链DNA，减慢单个分子的双链DNA的易位速度。王德强　　目前，单细胞的RNA或DNA测序方法不允许同时分析转录组和基因组序列。来自深圳南方科技大学的贺建奎博士介绍到，他们利用基于新一代测序技术的策略解决了这一问题。以小鼠卵母细胞为例，这种将单个卵母细胞DNA和RNA测序合并的方法可以达到基因组的高覆盖率和低偏好性转录组的可重复性。这项技术将有助于实现生物学和医学的核目标，即将生理或病理条件下单个细胞的基因型和表型完美地联系起来。贺建奎　　从此次研讨会上单细胞组学的热烈讨论中，我们可以感受到，现在是单细胞测序的蓬勃发展阶段，相信在不久的将来，科学工作者们能解释更多的诸如遗传性疾病的成因、癌症恶化机制等问题，为精准医学和个性化医疗等临床应用提供更坚实的理论基础。 编辑：史秀明

实验室霉菌检测中常见问题霉菌： 不是分类学上的名词，而是一些丝状真菌的通称，属真菌的一部分；其对人类具有双重性，有利的方面是它可以用来酿造、工业发酵、抗生素和酶制剂的生产等，不利方面是它能引起农副产品、食品、原料及器材的腐烂，也感染并引起人类和动、植物的多种疾病，少数种类，如黄曲霉，能产生黄曲霉毒素，黄曲霉毒素是一种致癌物质，危害人、畜的健康和生命。因此，霉菌的检测对于食品的安全性很重要。食品中常见的霉菌：毛霉属、根霉属、曲霉属、青霉属等。检测中的注意事项： 1、取样的代表性。 2、取样工具的无菌。空气中霉菌的孢子含量很高，所以，取样的工具、容器等要经过严格的高压灭菌。 3、检样的方法。 （1）由于霉菌易被携带，所以，检样时操作人员应尽量避免自身携带的可能。 （2）样品的均质及充分振摇。因为有些孢子是连成串的，故均质和振摇能使其充分散开，同时，在各梯度连续稀释时，也要用灭菌吸管反复吹吸几次，使孢子充分散开。 4、培养温度和时间。培养温度25-28℃培养，3天后观察，需培养观察一周。 霉菌检验中常用的培养基：孟加拉红琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、察氏琼脂、高盐察氏琼脂等。 5、检样中常见的问题。 （1）不同稀释度计数结果相同；（2）不生长或生长很好连成片无法计数；原因：①稀释时未经反复振摇，吹吸，导致孢子未充分散开，影响了计数的结果。②由于培养基不适宜，pH值低等，致使生长较慢。③观察时间的掌握。真菌生长较慢，故需5d后才能观察出结果。每天都要观察结果。微生物操作中常见问题的讨论与分析1、划不出单个菌落的原因： （1）平板上有过多的水分；（2）划线时接种环未经反复灼烧； （3）多区划线，三区或四区划线。2、涂布和倾注的区别：涂布利于观察，但由于涂布棒上会带有少量的菌液，可能影响计数的准确性；倾注更为准确，但不利于观察菌落的状态。Beuchat和Matsuda等人分别对这两种方法作了大量比较试验后发现，对霉菌计数来说，涂抹法有以下几方面优越于倾注法：①培养出的霉菌菌落数较多；②培养所需的时间较短；③霉菌孢子、菌落形态特征发育完全，便于鉴定。这是因为绝大多数霉菌是好氧的，在培养基表面生长快，发育好，而混在培养基中发育就受影响，而且在培养基倾注时霉菌孢子易受热损伤。3、培养基的选择：培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。目前国标方法中使用的培养基有：马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CAO)，其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长，而CAO则适合于高渗性霉菌生长，酵母菌几乎不长。在日常检测中我们发现，有些常见的耐高渗性霉菌，如局限曲霉、谢瓦曲霉、赤曲霉、Wallemia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长，而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方：蔗糖400g，麦芽提取汁20g，酵母提取汁5g，琼脂20g，氯霉素50mg，蒸馏水1000ml；DG18琼脂配方：葡萄糖10g，蛋白胨5g，KH2PO41g，MgSO47H2O 0.5g，氯霉素0.1g，0.2%二氯硝基苯胺1.0mL，琼脂15g，蒸馏水1000mL，PH6.5)上则正常生长。孢子、形态特征发育良好，而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长，因此，若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的霉菌，将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。特别是对干燥食品、高糖食品、淹渍食品等，更有必要同时采用M40Y或DG18。由于霉菌中很多种类不会产生有毒的霉菌毒素，危害较小，而有的菌株即使污染数量不多，但其产生的霉菌毒素却危害较大，因此仅作霉菌计数并不能全面反映其危害程度，重要的是要知道污染菌的菌相，才能更好地判断被污染食品的安全程度。为此，国外有些研究者设计出各类选择性培养基，可以识别产毒的霉菌。如AFPA培养基(配方：酵母提取汁20g,蛋白胨10g,柠檬酸铁铵0.5g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH5.6)用于分离黄曲霉毒素产生菌高污染率的食品。产黄曲霉毒素的菌株黄曲霉和寄生曲霉在AFPA上30℃培养2~3天就形成背面有亮橙黄色的特征性菌落，非常容易识别。有人利用该培养基分离黄曲霉高污染食品花生、玉米等,取得了满意的结果。因此,针对不同样品,有目的地设计出相应的选择性培养基,以筛选污染菌中的危险菌群,将是一个值得探索的方向。4、 培养基配制时应注意的问题：(1)灭菌温度要严格控制，按照要求灭菌，尤其含糖量较高的培养基温度不应太高，过高会导致糖分焦化，影响质量；(2)琼脂培养基不能反复溶化。反复溶化会破坏培养基中的营养成分；(3)培养基不能反复灭菌，反复灭菌也会导致营养成分的破坏；(4)含琼脂的培养基灭菌后，要摇匀。5、 平板的保存：大多数平板如 VRBA、DC、尿素酶生化管、显色系列等要避光低温保存。

(一)碱裂解法提取质粒[实验原理]碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们。在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复Ph至中性时，共价闭合环状质粒DNA的两条互补链仍保持在一起，因此复性迅速而准确，在而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开，复性就不会那么迅速而准确，它们缠绕形成网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。[实验仪器与设备]1.恒温培养箱 2.恒温摇床3.台式离心机(最大转速4000rpm) 4.冷冻高速离心机5.高压灭菌锅 6.超净工作台7.微量移液器 8.eppendorf tupe、tip[实验材料]1.葡萄糖 2.三羟甲基氨基甲/烷(Tris)3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.氢氧/化钠5.十二烷基硫酸钠(SDS) 6.乙酸钾7.冰乙酸 8.氯/仿9.乙醇 10.胰RNA酶11.氨苄青霉素 12.蔗糖13.溴酚蓝 14.酚15.β巯基乙醇 16.盐酸17.含pUC18质粒的大肠杆菌附：试剂的配制1.溶液Ⅰ50mmol/L 葡萄糖5mmol/L 三羟甲基氨基甲/烷(Tris) TrisHCl (pH8.0)10mmol/L 乙2胺四乙酸(EDTA)(pH8.0)2.溶液Ⅱ0.4 mol/L NaOH, 2%SDS, 用前等体积混合3.溶液Ⅲ5mmol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 ml4.TE缓冲液10mmol/L TrisHCl1 mmol/L EDTA(pH8.0)5.70%乙醇(放-20℃冰箱中,用后即放回)6.胰RNA酶将RNA酶溶于10mmol/L TrisHCl(pH7.5)、15mmol/L NaCl中，配成10mg/ml的浓度，于100℃加热15min,缓慢冷却至室温，保存于-20℃。7.终止液:40%蔗糖、0.25%溴蓝酚8.酚[实验步骤](一) 提取质粒1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中，接入含质粒的大肠杆菌，37℃振荡培养过夜。2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中，4000rpm，离心2min。3.吸去培养液，使细胞沉淀尽可能干燥。4.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中，充分混匀，室温放置10 min。5.加200μl溶液Ⅱ(新鲜配制)，混匀内容物，将离心管放冰上5 min。6.加入150μl溶液Ⅲ(冰上预冷)，盖紧管口，颠倒数次使混匀。7.1200rpm，离心15 min，将上清转至另一离心管中。8.向上清中加入等体积酚：氯/仿(去蛋白)，反复混匀，12000rpm，离心5min,将上清转移到另一离心管中.9.向上清加入2倍体积乙醇,混匀后,室温放置5-10min。12000rpm离心5min。倒去上清液，把离心管倒扣在吸水纸上，吸干液体。10.用1ml70%乙醇洗涤质粒DNA沉淀，振荡并离心，倒去上清液，真空抽干或空气中干燥。11.加50μl TE缓冲液，其中含有20μg/ml的胰RNA酶，使DNA完全溶解，-20℃保存。(二)琼脂糖凝胶电泳检测DNA[实验原理]琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极方向移动。不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(ethidum bromide ,EB)，在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带，在电场中，pH8.0条件下，凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。琼脂糖凝胶有如下特点：(1) DNA的分子大小 在凝胶基质中其迁移速率与碱基对数目的常用对数值成反比，分子越大迁移得越慢。(2) 琼脂糖浓度 一个特定大小的线形DNA分子,其迁移速度在不同浓度的琼脂糖凝胶中各不相同。DNA电泳迁移率(u)的对数与凝胶浓度(t)成线性关系。(3) 电压 低电压时，线状DNA片段迁移速率与所加电压成正比。但是随着电场强度的增加，不同分子量DNA片段的迁移率将以不同的幅度增长，随着电压的增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围将缩小。要使大于2kb的DNA片段的分辨率达到最大，所加电压不得超过5v/cm。(4) 电泳温度 DNA在琼脂糖凝胶电泳中的电泳行为受电泳时的温度影响不明显，不同大小的DNA片段其相对迁移速率在4℃与30℃之间不发生明显改变，但浓度低于0.5%的凝胶或低熔点凝胶较为脆弱，最好在4℃条件下电泳。(5) 嵌入染料 荧光染料溴化乙锭用于检测琼脂糖凝胶中的DNA，染料嵌入到堆积的碱基对间并拉长线状和带缺口的环状DNA,使其刚性更强,还会使线状迁移率降低15%。(6) 离子强度 电泳缓冲液的组成及其离子强度影响DNA电泳迁移率。在没有离子存在时(如误用蒸馏水配制凝胶，电导率最小，DNA几乎不移动，在高离子强度的缓冲液中(如误加10×电泳缓冲液)，则电导很高并明显产热，严重时会引起凝胶熔化。对于天然的双链，常用的几种电泳缓冲液有TAE、TBE等，一般配制成浓缩母液，室温保存，用时稀释。[实验仪器与设备]1. 恒温培养箱2. 琼脂糖凝胶电泳系统3. 高压灭菌锅 4. 紫外线透射仪[实验材料]1.三羟甲基氨基甲/烷(Tris) 2.硼/酸3.乙2胺四乙酸(EDTA) 4.溴酚蓝5.蔗糖 6.琼脂糖7.溴化乙锭 8.DNA marker9.DNA样品[实验步骤]1.缓冲液的配制① 5×TBE(5倍体积的TBE贮存液)配1000ml 5×TBE:Tris 54g硼/酸 27.5g0.5mol/l EDTA 20mlPh8.0② 凝胶加样缓冲液(6×)溴酚蓝 0.25%蔗糖 40%③溴化乙锭溶液(EB) 0.5μg/ml2.制备琼脂糖凝胶按照被分离DNA的大小,决定凝胶中琼脂糖的百分含量。可参照下表：琼脂糖凝胶浓度 线性DNA的有效分离范围0.3% 5-60 kb0.6% 1-20 kb0.7% 0.8-10 kb0.9% 0.5-7 kb1.2% 0.4-6 kb1.5% 0.2-4 kb2.0% 0.1-3 kb3.胶板的制备(1) 用高压灭菌指示纸带将洗静、干燥的玻璃板的边缘(或电泳装置所皿备的塑料盘的开口)封住，形成一个胶膜(将胶膜放在工作台的水平位置上，用水平仪校正)。(2) 配制足够用于灌满电泳槽和制备凝胶所需的电泳缓冲液(1×TBE)。准确称量的琼脂糖粉。缓冲液不宜超过锥瓶或玻璃瓶的50%容量。 在电泳槽和凝胶中务必使用同一批次的电泳缓冲液，离子强度或pH值的微小差异会在凝胶中形成前沿，从而大大影响DNA片段的迁移率 。(3) 在锥瓶的瓶颈上松松地包上一层厚纸。如用玻璃瓶，瓶盖须拧松。在沸水浴或微波炉中将悬浮加热至琼脂糖溶解。注意：琼脂糖溶液若在微波炉里加热过长时间，溶液将过热并暴沸。应核对溶液的体积在煮沸过程中是否由于蒸发而减少，必要时用缓冲液补充。(4) 使溶液冷却至60℃。加入溴化乙锭(用水配制成10mg/ml的贮存液)到终浓度为0.5ug/ml，充分混匀。(5) 用移液器吸取少量琼脂糖溶液封固胶模边缘，凝固后，在距离底板0.5-10mm的位置上放置梳子，以便加入琼脂糖后可以形成完好的加样孔。如果梳子距玻璃板太近，则拔出梳子时孔底将有破裂的危险，破裂后会使样品从玻璃板之间渗透。(6)将剩余的温热琼脂糖溶液倒入胶模中。凝胶的厚度在3-5mm之间。检查一下梳子的齿下或齿间是否有气泡。(7)在凝胶完全凝固后(于室温放置30-45分钟) ，小心移去梳子和高压灭菌纸带，将凝胶放入电泳槽中。低熔点琼脂糖凝胶及浓度低于0.5%的琼脂糖凝胶应冷却至4℃，并在冷库中电泳。(8)加入恰好没过胶面约1mm深的足量电泳缓冲液。4.加样DNA样品与所需加样缓冲液混合后，用微量移液器，慢慢将混合物加至样品槽中。此时凝胶已浸没在缓冲液中。 一个加样孔的最大加样量依据DNA的数量及大小而定，一般为20-30μl样品。已知大小的DNA标准，应同时加在凝胶的左凝胶的左侧和右侧孔内。确定未知DNA的大小。测量未知DNA的大小时，要所有样品都用相同的样品缓冲液。5.电泳在低电压条件下,线形DNA片段的迁移速度与电压成比例关系,但是,在电场增加时,不同相对分子质量的DNA片段泳动度的增加是有差别的。因此，随着电压的增加，琼脂糖凝胶的有效分离范围随之减小。为了获得电泳分离DNA片段的最大分辨率，电场强度不应高于5V/cm。当溴酚蓝指示剂移到到距离胶板下沿约1-2cm处，停止电泳。

ELISA试剂盒生物试剂涉及到化学试剂分类。我国的试剂规格基本上按纯度（杂质含量的多少）划分，共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。 （1）优级纯（GR：Guaranteed reagent），又称一级品或保证试剂，99.8%，这种试剂纯度最高，杂质含量最低，适合于重要精密的分析工作和科学研究工作，使用绿色瓶签。（2）分析纯（AR），又称二级试剂，纯度很高，99.7%，略次于优级纯，适合于重要分析及一般研究工作，使用红色瓶签。（3）化学纯（CP），又称三级试剂，≥ 99.5%，纯度与分析纯相差较大，适用于工矿、学校一般分析工作。使用蓝色（深蓝色）标签。ELISA试剂盒（4）实验试剂（LR：Laboratory reagent），又称四级试剂。 除了上述四个级别外，ELISA试剂盒目前市场上尚有：基准试剂（PT：Primary Reagent）：专门作为基准物用，可直接配制标准溶液。光谱纯试剂（SP：Spectrum pure）：表示光谱纯净。但由于有机物在光谱上显示不出，所以有时主成分达不到99.9%以上，使用时必须注意，特别是作基准物时，必须进行标定。纯度远高于优级纯的试剂叫做高纯试剂（≥ 99.99%）。玉米粉琼脂 Corn Meat Medium 250 用于真菌培养沙氏琼脂培养基 Sabouraud’s Agar 250 用于真菌检测(GB标准)沙氏BHI琼脂 Sabouraud BHI Agar 250 用于真菌检测(Acumedia 方法)沙门氏菌显色培养基 Salmonella Chromogenic Medium 1000ml 用于沙门氏菌的显色培养三糖铁琼脂（TSI） Triple Sugar Iron Agar 250 生化培养基，用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选（GB、SN标准）噻孢霉素 A 1.25μg/支*5 添加于100ml HB0121中乳糖肉汤 Lactose Broth 250 用于食品中沙门氏菌检验前增菌乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂 LMG Agar 250 用于滤膜MUG法检测食品中大肠菌群数(SN/T1059.2)乳糖复发酵培养基 Lactose Broth 250 用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)乳糖蛋白胨培养液 Lactose Peptone Broth 250 用于饮用水，水源水中总大肠菌群的测定(GB标准)乳糖胆盐发酵培养基 Lactose Bile Broth 250 用于大肠菌群，粪大肠菌群，大肠杆菌的测定(GB标准)去氧胆酸盐琼脂 Desoxycholate Lactose Agar 250 用于大肠杆菌固体平板测定,肠道菌选择性分离庆大霉素琼脂 Gentamycin Agar 250 用于霍乱弧菌选择性分离培养茜素-β-半乳糖苷琼脂 Aliz-gal Agar 250 用于食品、饮料和饮用水中大肠菌群快速检测和计数(GB/T)普通肉汤培养基 Broth Medium 250 用于金黄色葡萄球菌的增菌培养（SN标准）葡萄糖胰蛋白胨琼脂 Glucose Tryptone Agar 250 用于嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)分离培养(SN标准)葡萄糖琼脂 Dextrose Agar 250 用于细菌的综合生化试验葡萄糖半固体培养基 Dextrose Semisolid Medium 250 用于志贺氏菌的复合生化试验（GB标准）葡萄糖铵培养基　 Ammonium Dextrose Medium 250 用于志贺氏菌的葡萄糖铵试验（GB标准）葡萄球菌增菌肉汤 Staphylococcus Enrichment Broth 250 用于凝固酶阳性葡萄球菌的选择性增菌葡萄球菌选择性琼脂110(CHAPMAN 琼脂) Staphylococcus Selective AgarNO.110 250 用于金黄色葡萄球菌的分离培养

html, body { -webkit-user-select: text } * { padding: 0 margin: 0 } .web-box { width: 100% text-align: center } .wenshang { margin: 0 auto width: 80% text-align: center padding: 20px 10px 0 10px } .wenshang h2 { display: block color: #900 text-align: center padding-bottom: 10px border-bottom: 1px dashed #ccc font-size: 16px } .site a { text-decoration: none } .content-box { text-align: left margin: 0 auto width: 80% margin-top: 25px text-indent: 2em font-size: 14px line-height: 25px } .biaoge { margin: 0 auto /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 25px } .table_content { border-top: 1px solid #e0e0e0 border-left: 1px solid #e0e0e0 font-family: Arial /* width: 643px */ width: 100% margin-top: 10px margin-left: 15px } .table_content tr td { line-height: 29px } .table_content .bg { background-color: #f6f6f6 } .table_content tr td { border-right: 1px solid #e0e0e0 border-bottom: 1px solid #e0e0e0 } .table-left { text-align: left padding-left: 20px } 基本信息 关键内容： ATP 开标时间： 2021-07-28 10:00 采购金额： 49.50万元 采购单位： 琼海市疾病预防控制中心 采购联系人： 庞女士 采购联系方式： 立即查看 招标代理机构： 海南众诚项目管理有限公司 代理联系人： 蔡工 代理联系方式： 立即查看 详细信息 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 海南省-琼海市 状态：公告 更新时间：2021-07-19 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 2021年07月19日 15:44 公告信息： 采购项目名称 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 品目 货物/医药品/医用材料/其他医用材料 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 行政区域 琼海市 公告时间 2021年07月19日 15:44 获取采购文件的地点 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 获取采购文件时间 2021年07月20日至2021年07月22日每日上午:9:00 至 12:00 下午:14:30 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 预算金额 ￥49.499600万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 蔡工 项目联系电话 0898-32871883 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 采购单位地址 琼海市富海路横南17号 采购单位联系方式 庞女士 0898-62922152 代理机构名称 海南众诚项目管理有限公司 代理机构地址 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 代理机构联系方式 蔡工 0898-32871883 项目概况 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购项目的潜在供应商应在海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房获取采购文件，并于2021年07月28日 10点00分（北京时间）前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号：HNZC2021-006 项目名称：实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购方式：竞争性谈判 预算金额：49.4996000 万元（人民币） 最高限价（如有）：49.4996000 万元（人民币） 采购需求： 2.1项目名称：实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途：琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额：￥494996.00元（人民币） 2.4资金来源：财政资金 2.5数量：一批，详见《采购需求书》 2.6简要技术要求：详见《采购需求书》 2.7交货时间：自合同签订日起1年计算，配送所产生的一切费用均由采购方承担。 合同履行期限：自合同签订日起1年计算，配送所产生的一切费用均由采购方承担 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 3.本项目的特定资格要求： 3.1符合政府采购法第二十二条之规定； 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证（营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证）加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}； 3.3有依法缴纳税收的良好记录（提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件）； 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录（提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件）； 3.5.财务状况报告（提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件，新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件）； 3.6提供参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录的声明函； 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单； 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 三、获取采购文件 时间：2021年07月20日 至 2021年07月22日，每天上午9:00至12:00，下午14:30至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 方式：携以下资料至报名地点现场报名：1.企业法人营业执照（副本）复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明；注：以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司，且必须加盖供应商原始公章。 售价：￥300.0 元（人民币） 四、响应文件提交 截止时间：2021年07月28日 10点00分（北京时间） 地点：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 五、开启 时间：2021年07月28日 10点00分（北京时间） 地点：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 谈判邀请 海南众诚项目管理有限公司受琼海市疾病预防控制中心委托，就实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目采购进行竞争性谈判采购，欢迎合格的供应商前来谈判。 项目编号：HNZC2021-006 招标项目及范围: 2.1项目名称：实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途：琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额：￥494996.00元（人民币） 2.4资金来源：财政资金 2.5数量：一批，详见《采购需求书》 2.6简要技术要求：详见《采购需求书》 2.7交货时间：自合同签订日起1年计算，配送所产生的一切费用均由采购方承担。 3. 供应商资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定； 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证（营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证）加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}； 3.3有依法缴纳税收的良好记录（提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件）； 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录（提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件）； 3.5.财务状况报告（提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件，新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件）； 3.6提供参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录的声明函； 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单； 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 竞争性谈判文件的获取： 4.1获取竞争性谈判文件的时间：2021年 7 月 20 日 09:00 至 2021年 7 月 22 日17:00 (双休日及法定节假日除外) 4.2获取竞争性谈判文件地点：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房。获取竞争性谈判文件方式: 携以下资料至报名地点现场报名：1.企业法人营业执照（副本）复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明；注：以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司，且必须加盖供应商原始公章。 4.3获取竞争性谈判文件文件售价：300.00元 响应文件的递交 5.1竞争性谈判时间：2021年 7 月 28 日 10:00 5.2竞争性谈判响应文件递交截止时间：2021年 7 月 28 日 10:00 5.3竞争性谈判响应文件递交地点: 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房。竞争性谈判响应文件开启时间：2021年 7 月 28 日 10:00竞争性谈判响应文件开启地点: 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 其他 7.1公告发布媒介：公告、采购文件修改或澄清等信息，中国政府采购网(http://www.ccgp.gov.cn/)上发布。 7.2采购项目需要落实的政府采购政策：《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 7.3本公告期限为3个工作日。 联系方式 8.1采购人：琼海市疾病预防控制中心 采购人机构所在地点：琼海市富海路横南17号 联系人：庞女士 联系电话： 0898-62922152 8.2代理机构：海南众诚项目管理有限公司 地址：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 项目联系人：蔡工 联系电话：0898-32871883 传 真：0898-32871883 8.3接收质疑函的联系部门、联系电话和通讯地址： 联系部门：项目部 联系电话：0898-32871883 通讯地址：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 八、凡对本次采购提出询问，请按以下方式联系。 1.采购人信息 名 称：琼海市疾病预防控制中心 地址：琼海市富海路横南17号 联系方式：庞女士 0898-62922152 2.采购代理机构信息 名 称：海南众诚项目管理有限公司 地 址：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 联系方式：蔡工 0898-32871883 3.项目联系方式 项目联系人：蔡工 电 话： 0898-32871883 × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 $('.clickModel').click(function () { $('.modelDiv').show() }) $('.closeModel').click(function () { $('.modelDiv').hide() }) 基本信息 关键内容：ATP 开标时间：2021-07-28 10:00 预算金额：49.50万元 采购单位：琼海市疾病预防控制中心 采购联系人：点击查看 采购联系方式：点击查看 招标代理机构：海南众诚项目管理有限公司 代理联系人：点击查看 代理联系方式：点击查看 详细信息 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 海南省-琼海市 状态：公告 更新时间： 2021-07-19 琼海市疾病预防控制中心-实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目-竞争性谈判公告 2021年07月19日 15:44 公告信息： 采购项目名称 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 品目 货物/医药品/医用材料/其他医用材料 采购单位 琼海市疾病预防控制中心行政区域 琼海市 公告时间 2021年07月19日 15:44 获取采购文件的地点 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 获取采购文件时间 2021年07月20日至2021年07月22日每日上午:9:00 至 12:00 下午:14:30 至 17:00（北京时间，法定节假日除外） 预算金额 ￥49.499600万元（人民币） 联系人及联系方式： 项目联系人 蔡工 项目联系电话 0898-32871883 采购单位 琼海市疾病预防控制中心 采购单位地址 琼海市富海路横南17号 采购单位联系方式 庞女士 0898-62922152 代理机构名称 海南众诚项目管理有限公司 代理机构地址 海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 代理机构联系方式 蔡工 0898-32871883 项目概况 实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购项目的潜在供应商应在海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房获取采购文件，并于2021年07月28日 10点00分（北京时间）前提交响应文件。 一、项目基本情况 项目编号：HNZC2021-006 项目名称：实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 采购方式：竞争性谈判 预算金额：49.4996000 万元（人民币） 最高限价（如有）：49.4996000 万元（人民币） 采购需求： 2.1项目名称：实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途：琼海市疾病预防控制中心工作需要2.3预算金额：￥494996.00元（人民币） 2.4资金来源：财政资金 2.5数量：一批，详见《采购需求书》 2.6简要技术要求：详见《采购需求书》 2.7交货时间：自合同签订日起1年计算，配送所产生的一切费用均由采购方承担。 合同履行期限：自合同签订日起1年计算，配送所产生的一切费用均由采购方承担 本项目( 不接受 )联合体投标。 二、申请人的资格要求： 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定； 2.落实政府采购政策需满足的资格要求： 《政府采购促进中小企业发展暂行办法》、《节能产品政府采购实施意见》、《关于环境标志产品政府采购实施的意见》、《关于信息安全产品实施政府采购的通知》、《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》、《财政部 司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知书》 3.本项目的特定资格要求： 3.1符合政府采购法第二十二条之规定； 3.2在中华人民共和国注册的、具有独立承担民事责任的能力{须提供三证（营业执照副本、税务登记证、组织机构代码证）加盖公章复印件或具有统一社会信用代码相关证件加盖公章复印件或自然人身份证明复印件}； 3.3有依法缴纳税收的良好记录（提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳税收记录凭证加盖公章复印件）； 3.4有依法缴纳社会保障资金的良好记录（提供2021年1月1日至今任意一个月依法缴纳社会保障资金记录凭证加盖公章复印件）； 3.5.财务状况报告（提供2021年1月1日至今任意一个月的财务报表加盖公章复印件，新成立公司根据实际情况提供财务报表加盖公章复印件）； 3.6提供参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录的声明函； 3.7未被列入失信被执行人、重大税收违法案件当事人名单、政府采购严重违法失信行为记录名单； 3.8投标人须具备医疗器械经营企业许可证。 3.9项目不接受联合体投标。 三、获取采购文件 时间：2021年07月20日 至 2021年07月22日，每天上午9:00至12:00，下午14:30至17:00。（北京时间，法定节假日除外） 地点：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 方式：携以下资料至报名地点现场报名：1.企业法人营业执照（副本）复印件2.企业法定代表人授权委托书原件3.被授权人身份证复印件4.法定代表人身份证明；注：以上资料验原件并提供完整一套复印件留存采购代理公司，且必须加盖供应商原始公章。 售价：￥300.0 元（人民币） 四、响应文件提交 截止时间：2021年07月28日 10点00分（北京时间） 地点：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 五、开启 时间：2021年07月28日 10点00分（北京时间） 地点：海南省海口市国贸路50号王府大厦16B房 六、公告期限 自本公告发布之日起3个工作日。 七、其他补充事宜 谈判邀请 海南众诚项目管理有限公司受琼海市疾病预防控制中心委托，就实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目采购进行竞争性谈判采购，欢迎合格的供应商前来谈判。 项目编号：HNZC2021-006 招标项目及范围: 2.1项目名称：实验室致病菌识别网监测检测、公共卫生微生物检测试剂耗材项目 2.2用途：琼海市疾病预防控制中心工作需要 2.3预算金额：￥494996.00元（人民币） 2.4资金来源：财政资金 2.5数量：一批，详见《采购需求书》 2.6简要技术要求：详见《采购需求书》 2.7交货时间：自合同签订日起1年计算，配送所产生的一切费用均由采购方承担。 3. 供应商资格要求: 3.1符合政府采购法第二十二条之规定； 3.2联系方式：蔡工 0898-32871883 3.项目联系方式 项目联系人：蔡工 电 话： 0898-32871883

2013年1月31日，中国政府采购网公布了宁夏回族自治区疾病预防控制中心2013年食品安全风险监测试剂耗材采购项目招标公告，此次采购包括微生物培养基、化学试剂及玻璃器皿、生化诊断试剂、仪器配件及专用耗材等，详情如下所示： 　　一、委托编号：2013NCZ0037 招标编号：HSZB-2013ZC004 　　二、采购方式：公开招标 　　三、采 购 人：宁夏回族自治区疾病预防控制中心 　　联 系 人：李 银 联系电话：0951-4085393 　　四、招标代理机构：宁夏恒盛招标有限公司 　　联 系 人：李 慧 　　电 话：0951- 5031788 传 真：0951-5058301 　　电子邮箱: nx.hs@163.com 　　地 址：银川市国际贸易中心C栋12楼008室 　　户 名：宁夏恒盛招标有限公司 　　开 户 行：银川市农行开发区支行 　　账 号：140001040016999 　　五、评标办法：最低评标价法 　　六、采购内容简述： 　　一标段: 微生物培养基 序号 名称 规格 总数 单位 1 平板计数琼脂 250g/瓶 5 瓶 2 LST肉汤 250g/瓶 4 瓶 3 BGLB肉汤 250g/瓶 2 瓶 4 EC肉汤 250g/瓶 2 瓶 5 EMB琼脂 250g/瓶 3 瓶 6 致病性大肠埃希氏菌诊断血清 18瓶/套 2 套 7 产肠毒性大肠埃希氏菌诊断血清 10瓶/盒 2 盒 8 肠侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清 11瓶/盒 2 盒 9 出血性大肠杆菌O157诊断血清 1mL/瓶 2 瓶 10 出血性大肠杆菌O157：H7诊断血清 1mL/瓶 2 瓶 11 CN琼脂 250g/瓶 3 瓶 12 CN琼脂配套试剂 10支/盒 3 盒 13 金氏B培养基 250g/瓶 2 瓶 14 乙酰胺肉汤 100g/瓶 2 瓶 15 钠氏试剂 5mL/支×2 2 盒 16 Api 20NE生化条（带配套盐水及试剂） 25条/盒 5 盒 17 BPW 250g/瓶 3 瓶 18 SC增菌液 100g/瓶 2 瓶 19 TTB培养基基础 250g/瓶 2 瓶 20 碘液 20支/盒 3 盒 21 0.1%煌绿 20支/盒 3 盒 22 沙门氏菌显色培养基 1000mL/瓶 5 瓶 23 TSI琼脂 250g/瓶 1 瓶 24 MIU培养基 20支/盒 6 盒 25 靛基质试剂 10mL/瓶 3 瓶 26 软琼脂 250g/瓶 2 瓶 27 Api 20E生化条（带盐水） 25条/盒 15 盒 28 Api 20E配套试剂 7支/套 2 套 29 氧化酶 瓶 2 瓶 30 矿物油 125mL/瓶 2 瓶 31 沙门氏菌A-F多价诊断血清 1mL/瓶 3 瓶 32 沙门氏菌诊断学清 60种/套 2 套 33 志贺氏菌增菌肉汤 250g/瓶 4 瓶 34 志贺氏菌增菌肉汤配套试剂 10支/盒 6 盒 35 志贺氏菌显色琼脂 1000mL/瓶 5 瓶 36 XLD琼脂 250g/瓶 1 瓶 37 克氏双糖琼脂 250g/瓶 3 瓶 38 志贺氏菌属四种多价血清 1mL/支 3 支 39 志贺氏菌属福氏多价血清 1mL/支 3 支 40 志贺氏菌属诊断血清 50种/套 2 套 41 7.5%氯化钠肉汤 250g/瓶 5 瓶 42 Baird-parker基础 500g/瓶 2 瓶 43 脑心浸液500g/瓶 1 瓶 44 冻干血浆 12瓶/盒 3 盒 45 金葡显色培养基 500mL/瓶 3 瓶 46 10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤 250g/瓶 6 瓶 47 Baird-parker基础 250g/瓶 1 瓶 48 亚蹄酸盐卵黄增菌液 100mL×6瓶/盒 2 盒 49 胰酪胨大豆多粘菌素B肉汤 250g/瓶 4 瓶 50 胰酪胨大豆多粘菌素B肉汤配套试剂 10000IU×10支/盒 3 盒51 MYP琼脂基础 250g/瓶 2 瓶 52 MYP琼脂配套试剂 10支/盒 3 盒 53 50%卵黄乳液 5mL/支×10 6 盒 54 蜡样芽胞杆菌显色琼脂 1000mL/瓶 3 瓶 55 酪蛋白琼脂 100g/瓶 2 瓶 56 蜡样芽胞杆菌生化鉴定盒 10次/盒 6 盒 57 Api CHB生化条（带培养基及配套试剂）(进口) 10条/盒 6 盒 58 磷酸盐缓冲液 250g/瓶 1 瓶 59 大肠杆菌IMVC生化鉴定盒 10次/盒 3 盒 60 BPW 250g/瓶 3 瓶 61 mLST-Vm基础 250g/瓶 2 瓶 62 mLST-Vm配套试剂 5支/盒 3 盒 63 阪崎显色培养基 1000mL/瓶 3 瓶 64 LB基础 250g/瓶 2 瓶 65 LB1配套试剂 10支/盒 5 盒 66 LB2配套试剂 10支/盒 2 盒 67 单增李斯特菌显色平板 20块/盒 6 盒 68 SIM琼脂 250g/瓶 2 瓶 69 半固体琼脂 250g/瓶 2 瓶 70 Api Listeria生化条(进口) 10条/盒 10 盒 71 木糖生化管 20支/盒 3 盒 72 鼠李糖生化管 20支/盒 3 盒 73 Phoenix阳性鉴定板(进口) 25块/盒 4 盒 74 Phoenix阴性鉴定板(进口) 25块/盒 4 盒 75 Phoenix鉴定培养液(进口) 100支/盒 2 盒 76 一次性血平板 20块/盒 10 盒 77 百日咳诊断血清 1mL/瓶 1 瓶 78 脑膜炎奈瑟氏菌诊断血清 11瓶/套 1 套 79 脑膜炎奈瑟氏菌乳胶凝剂试剂盒 25人份/盒 1 盒 80 DR585链球菌分型试剂盒 盒 1 盒 81 亚碲酸钾培养基 500g/瓶 1 瓶 82 3.5%亚碲酸钾溶液 10瓶/盒 1 盒 83 裂解马血 10瓶/盒 1 盒 84 炭琼脂 500g/瓶 1 瓶 85 炭琼脂培养基添加剂 10瓶/盒 1 盒 86 Api NH生化鉴定条（带配套盐水及试剂）(进口) 10条/盒 1 盒 87 Api Staph（带配套试剂）(进口) 25条/盒 1 盒 88 Api 20 Strep（带配套试剂）(进口) 25条/盒 1 盒 89 Api Coryne生化鉴定试剂条（带配套试剂）(进口) 12条/盒 1 盒 90 O157胶体金测试条 10条/包 3 包 91 国产霍乱弧菌O1群胶体金快速检测试剂盒 10条/包 3 包 92 国产霍乱弧菌O139群胶体金快速检测试剂盒 10条/包 3 包 93 肉毒毒素诊断血清 7支/盒 4 盒 94 A型肠毒素快速检测试剂 10条/包 5 包 95 B型肠毒素快速检测试剂 10条/包 5 包 96 C型肠毒素快速检测试剂 10条/包 5 包 97 沙门氏菌抗原快速检测试剂 10条/包 5 包 98 革兰氏染液 套 2 套 99 细菌双向血培养瓶 12瓶/箱 8 箱 100 大肠杆菌 8099 2 株 101 金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 2 株 102 铜绿假单胞菌 ATCC 15442 2 株 103 白色念珠菌 ATCC 10231 2 株 104 枯草杆菌黑色变种芽孢 ATCC 9372 2 株 105 藤黄微球菌 CMCC（B）28001 1 株 106 生孢梭菌 CMCC（B）64941 1 株 107 白色念珠菌 CMCC（F）98001 1 株 108 药敏检测试剂盒 12种/盒 50 盒 109 药敏板 套 150 套 　　第二标段: 化学试剂及玻璃器皿 序号 名称 规格/型号 数量 单位 1 丙酮 500ml/瓶 10 瓶 2 三氯甲烷 500ml/瓶 15 瓶 3 无水乙醇 500ml/瓶 20 瓶 4 三氯醋酸 500g 2 瓶 5 蒽酮 25g 1 瓶 6 硫脲 500g 1 瓶 7 CuSO4 25g 1 瓶 8 NaF 500g 1 瓶 9 钨酸钠 500g 1 瓶 10 对羟基联苯 100g 1 瓶 11 乳酸锂 5g 1 瓶 12 乳酸钙 500g 1 瓶 13 硝酸 500mL 20 瓶 14 硝酸 2500mL 8 瓶 15 抗坏血酸 100g 10 瓶 16 硝酸镁,六水 50g 2 瓶 17 氧化镧 500g 1 瓶 18 甲醇 4L 10 瓶 19 乙腈 4L/瓶 8 瓶 20 正己烷 4L 6 瓶 21 氯化钠 500g 20 瓶 22 无水硫酸钠 500g 20 瓶 23 乙酸乙酯 4L 4 瓶 24 丙酮 4L 4 瓶 25 二氯甲烷 4L 2 瓶 26 磷酸 500mL/瓶 3 瓶 27 硫酸铈铵 25g/瓶 10 瓶 28 次氯酸钠 500mL/瓶 5 瓶 29 环己烷 500mL/瓶 5 瓶 30 三氟乙酸 500mL/瓶 2 瓶 31 Hydrolysis Reagent C47TM CB130（氧化剂） 4×950mL/包 3 包 32 o-Phthalaldehyde DiluentCB910（OPA稀释剂） 4×951mL/包 3 包 33 巯基乙醇 10g 1 瓶 34 邻苯二甲醛OPA 5g 1 瓶 35 2-硝基苯甲醛2-Nitrobenzaldehyde 25g/瓶 1 瓶 36 二甲基亚砜 500ml/瓶 1 瓶 37 甲酸Formic acid 100mL/瓶 1 瓶 38 β-葡萄糖醛酸苷肽酶/芳基磺酸酯酶β-Glucuronidase/sulfatase 5ml，100000单位/mg 3 瓶 39 蛋白酶 100mg 1 瓶 40 高氏淀粉酶 500g 1 瓶 41 β-葡萄糖苷酶/硫酸酯酶 2mL 3 瓶 42 正丙醇 500mL/瓶 1 瓶 43 盐酸羟胺 100g/瓶 2 瓶 44 对甲苯磺酸 101g/瓶 2 瓶 45 乙酸铵 500g 2 瓶 46 石油醚 500ml/瓶 5 瓶 47 乙二胺 500ml/瓶 2 瓶 48 氢氧化钾 500g 4 瓶 49 冰醋酸 500ml/瓶 10 瓶 50 无水乙醇 500mL/瓶 12 瓶51 95%乙醇 500mL/瓶 10 瓶 52 甲基叔丁基醚 500ml/瓶 5 瓶 53 对氨基苯磺酰胺 50g 2 瓶 54 盐酸N-（1-萘）-乙二胺 25g 2 瓶 55 二苯碳酰二肼 25g 2 瓶 56 异烟酸 25g 2 瓶 57 砒唑酮 25g 2 瓶 58 N-二甲基甲酰胺 25g 2 瓶 59 氯胺T 25g 2 瓶 60 安替比林 50g 2 瓶 61 4-氨基安替比林 50g 2 瓶 62 碘化钾晶体 50g 1 瓶 63 次氯酸钠 500ml 2 瓶 64 36%过氧化氢 500ml 2 瓶 65 冰醋酸 500m110 瓶 66 碘化钾 250g 1 瓶 67 无水磷酸氢二钠 500g 1 瓶 68 无水磷酸氢二钾 500g 1 瓶 69 乙二胺四乙酸二钠 250g 1 瓶 70 盐酸N,N-二乙基对苯二胺 100g 1 瓶 71 硫酸N,N-二乙基对苯二胺 100g 1 瓶 72 无氯纯水 1000ml 1 瓶 73 亚砷酸钾 1 瓶 74 硫代乙酰铵 250g 1 瓶 75 氯胺T 500g 1 瓶 76 吡啶 500ml 1 瓶 77 巴比妥酸 250g 2 瓶 78 一水磷酸二氢钠 500g 1 瓶 79 二水磷酸二氢钠 500g 1 瓶 80 二乙酰一肟 25g 2 瓶 81 二硫化碳 500mL 1 瓶 82 氯化钾 250g 1 瓶 83 20-30目沙子 500g 2 瓶 84 盐酸 500m1 2 瓶 85 三氧化铬 100g 2 瓶 86 对氨基苯磺酸 100g 2 瓶 87 硫酸 500m1 2 瓶 88 氯化汞 500g 3 瓶 89 碘化钾 500g 2 瓶 90 氢氧化钠 500g 3 瓶 91 磷酸 500m1 2 瓶 92 甲醛 501ml 2 瓶 93 环已二胺四乙酸 100g 2 瓶 94 氨基磺酸 100g 2 瓶 95 盐酸副玫瑰苯胺 100g 2 瓶 96 邻苯二甲酸氢钾 500g 2 瓶 97 亚砷酸钠 500g 2 瓶 98 可溶性淀粉 500g 2 瓶 99 硝酸银 250g 2 瓶 100 碳酸铵 500g 2 瓶 101 丙酮 500m1 4 瓶 102 乙酸 500m1 2 瓶103 磷酸二氢钾 500g 2 瓶 104 磷酸氢二钠 500g 2 瓶 105 异烟酸 100g 2 瓶 106 硫氰酸汞 500g 2 瓶 107 乙醇 500m1 2 瓶 108 硫酸铁铵 100g 2 瓶 109 氨水 500m1 2 瓶 110 丙三醇 500m1 2 瓶 111 溴甲酚绿 100g 2 瓶 112 柠檬酸三钠 500g 2 瓶 113 氯化钠 500g 2 瓶 1 比色管 100ml 100 只 2 比色管 25mL 50 只 3 容量瓶 10mL 30 支 4 具塞锥形瓶 250ml 60 支 5分液漏斗 1L 5 支 6 分液漏斗 250mL 30 支 7 玻璃吸管glass pasteur pipettes 230mm,250支/盒 1 盒 8 容量瓶 100mL,5个/盒 4 盒 9 具塞玻璃刻度试管 10mL 300 个 10 具塞玻璃刻度离心管 25mL 200 个 11 玻璃吸管（尖头）glass pasteur pipettes 150mm,250支/盒 5 盒 12 玻璃吸管（尖头）glass pasteur pipettes 230mm,250支/盒 4 盒 13 棕色磨口具塞试剂瓶 500mL 200 个 14 量筒 100mL 5 个 15 棕色容量瓶 100ml 20 个 16 250mL具塞锥形瓶 250mL 30 个 17 圆底烧瓶 100mL 30 个 18 10mL具塞玻璃刻度试管试管架 　 5 个 19 25mL具塞玻璃刻度离心管试管架 　 5 个 20 石油醚 500mL 2 瓶 21 定量滤纸 内径12.5 20 盒 22 定量滤纸 内径15 20 盒 23 定量滤纸 内径18 20 盒 24 定性滤纸 内径12.5 20 盒 25 定性滤纸 内径15 20 盒 26 定性滤纸 内径6cm 10 盒 27 定性滤纸 内径18 20盒 28 橡胶手套 中 10 双 29 橡皮塞子 1号-10号 各10 只 30 多孔玻板吸收管 棕色 10 个 31 多孔玻板吸收管 白色 10 个 32 大炮吸收管 白色 30 个 33 具塞比色管 10m1 30 个 34 量筒 20ml 5 个 35 量筒 50ml 3 个 36 量筒 250mL 3 个 37 量筒 500mL 3 个 38 量筒 1000mL 5 个 39 烧杯 25mL 20 个 40 烧杯 50mL 20 个 41 烧杯 100mL 20 个 42 烧杯 100mL 20 个 43 烧杯 1000mL 15 个 44 烧杯 3000ml 20 个 45 烧杯 2000ml 20 个 46 吸管 1mL 20 个 47 吸管 2mL 20 个 48 吸管 5mL 20 个 49 吸管 10mL 20 个 50 移液管 1mL 20 个 51 移液管 2mL 20 个 52 移液管 5mL 20 个 53 移液管 10mL 20 个 54 温度计 360° 10 个 55 大口瓶 2500mL 10 个 56 比色管（具塞） 10ml 20 个 57 棕色容量瓶 50ml 20 个 58 塑料量筒 250ml 2 个 59 标本缸(圆筒型) 高20cmX直径25cm 10 个 60 标本缸 10 个 　　第三标段: 生化诊断试剂 序号 名称 规格/型号 数量 单位 1 流行性出血热IgG抗体检测试剂盒 96人份／盒 8 盒 2 流行性出血热抗体检测试剂盒（胶体金法） 20人份/盒 2 盒 3 出血热荧光抗体（直接法） 15 ml 4 流行性出血热IgM抗体检测试剂盒 96人份／盒 2 盒 5 登革热IgM抗体检测试剂盒(进口) 96人份／盒 1 盒 6 狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒 20人份/盒 4 盒 7 乙脑IgM抗体检测试剂盒 48人份／盒 2 盒 8 呼吸道病毒15联RT-PCR检测试剂盒(进口) 50人份/盒 1 盒 9 BED新发感染检测试剂盒(进口) 192人份／盒 4 盒 10 丙肝病毒抗体检测试剂盒（酶免法） 48人份／盒 1 盒 11 梅毒螺旋体抗体试剂盒（ELISA） 48人份／盒 1 盒 12 梅毒螺旋体抗体试剂盒（TPPA） 100T/盒 1 盒 13 乙肝表面抗原检测试剂盒（酶免法） 48人份／盒 1 盒 14 风疹IgM抗体检测试剂盒 48人份／盒 20 盒 15 麻疹IgM抗体检测试剂盒 48人份／盒 20 盒 16 麻疹IgM抗体检测试剂盒 96人份／盒 2 盒 17 乙肝DNA检测试剂盒 20人份/盒 1 盒 18 布病IgM ELISA检测试剂盒(进口) 96人份/盒 3 盒 19 布病IgG ELISA检测试剂盒(进口) 96人份/盒 3 盒 20 甲肝病毒IgM抗体检测试剂盒（酶免法） 96人份／盒 200 盒 21 戊肝病毒IgM抗体检测试剂盒（酶免法） 96人份／盒 200 盒 22 麻疹荧光PCR检测试剂盒 规格：48T／盒 9 盒 23 风疹荧光PCR检测试剂盒 规格：48T／盒 5 盒 　　第四标段: 仪器配件及专用耗材 序号 名称 规格/型号 数量 单位 1 25mL EPA样品瓶 140×27.5mm，100个/包 1 包 2 色谱柱ACQUITY UPLC HSS T3(进口) 1.8um 2.1mm*50mm 1 根 3 水相针式滤器 100只/包 4 包 4 水相针式滤器 100只/包 4 包 5 有机相针式滤器 100只/包 4 包 6 有机相针式滤器 100只/包 8 包 7 样品瓶存放盒 　 2 只 8 Ag-H离子交换树脂柱(进口) 2.5cc，48个/包 2 包 9 玻璃纤维滤纸GF/C 47mm，1.2µ m,100张/盒 5 盒 10 玻璃纤维滤纸GF/C 110mm，1.5µ m,100张/盒 3 盒 11 PriboFast玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(进口) 25/包 5 包 12 黄曲霉毒素B1B2G1G2M1免疫亲和柱(进口) 25/包 6 包 　 黄曲霉毒素M1免疫亲和柱 25/包 8 包 13 固相萃取小柱（中性氧化铝） 30/包 1g/6mL 10 包 14 Oasis MAX固相萃取柱(进口) 6cc/150mg，30/包 5 包 15 Oasis HLB固相萃取柱(进口) 200mg/6cc, 30/盒 5 盒 16 Oasis MCX固相萃取柱(进口) 150mg/6cc,30/盒 5 盒 17 Oasis MCX固相萃取柱(进口) 60mg/3cc, 100/盒 5 盒 18 Oasis WCX固相萃取柱(进口) 150mg/6cc, 30/盒 5 盒 19 Oasis WAX固相萃取柱(进口) 150mg/6cc, 30/盒 5 盒 20 塑料巴斯德吸管 2ml 1000/盒 3 盒 21 MycoSep 230-雪腐镰刀菌烯醇多功能净化柱(进口) 25支/pk 每支小柱5ml 5 盒 22 PriboFast 226-玉米赤霉烯酮多功能净化柱(进口) 25支/pk 每支小柱5ml 5 盒 23 PriboFast 200-玉米赤霉烯酮多功能净化柱(进口) 25支/pk 每支小柱5ml 5 盒 24 DONStar R呕吐毒素免疫亲和柱(进口) 25支/pk 每支小柱3ml 5 盒 25 ZearaStar玉米赤霉烯酮免疫亲和柱(进口) 25支/pk 每支小柱3ml 5 盒 26 SupelMIP® 固相萃取 — 氯霉素 25 mg/10 mL , (LRC), pk of 50 4 盒 27 SILICA/PSA混合玻璃固相萃取柱 1.0g/6mL，10个/盒 30 盒 28 Florisil玻璃固相萃取柱 1.0g/6mL，10个/盒 30 盒 29 PSA玻璃固相萃取柱 1.0g/6mL，30个/盒 30盒 30 LC-Si固相萃取柱 200mg，3mL，30个/包 3 包 31 LiChrolut EN固相萃取柱 200mg，3mL，30个/包 3 包 32 50uL微量进样针 50μL 4 支 33 封口膜 　 2 卷 34 PTFE针头过滤器 0.22um,13mm，100/pk 10 包 35 BEH-C18色谱柱(进口) 150mm*d2.1mm，1.7um 2 根 36 R95口罩 (20个/盒)防酸碱 4 盒 37 R95口罩 (20个/盒)防有机 4 盒 38 sunfire-C18色谱柱(进口) 150mm*2.1mm，5um 2 根 39 氨基甲酸酯分析柱(进口) 150mm*3.9mm 1 根 40 氨基甲酸酯Sentry保护柱芯(进口) 2个/包 1 包 41 Sentry保护柱套(进口) 　 1 个 42 PAH C18 分析柱(进口) 250mm*4.6mm，5um 1 根 43 PROTEIN-Pak sp阳离子交换色谱柱(进口) 10mm*100mm,8um 1 根 44 无尘抽纸 200抽/盒 20 盒 45 塑料容量瓶 25mL, 5个/盒 36 盒 46 塑料容量瓶 50mL, 5个/盒 36 盒 47 塑料容量瓶 100mL, 5个/盒 36 盒 48 塑料刻度吸管 2mL 60 支 49 塑料刻度吸管 5mL 60 支 50 塑料刻度吸管 10mL 60 支 51 O型环(进口) 10/包 3 包 52 分流用玻璃衬管(进口) 5个/包 3 包 53 毛细管用压环 (进口) 10/包 3 包 54 惰性处理石英棉(进口) 3g/包 1 包 55 进样针(进口) 10uL 3 支 56 氟离子选择电极 　 2 支 57 甘汞电极 　 2 支 58 硅胶管（溶剂解吸型） 6*120mm 5 支 59 硅胶管（溶剂解吸型）

货号 品名 清仓价格 应用 1.02239.0500 Peptone from casein 236 酪蛋白胨，基础原料 1.07212.0500 Peptone from soya bean 236 大豆蛋白胨，基础原料 1.10493.0500 Brain heart broth 273 脑心浸液，苛养菌培养 1.07228.5000 Peptone water 1050 通用增菌液 1.00466.0500 DRBC 琼脂 945 玫瑰红钠培养基添加绿霉素，酵母霉菌计数 1.05978.0500 OGYZ AGAR 336 奶制品中的酵母霉菌 1.05448.0500 WORT AGAR 546 真菌，酵母菌 1.10866.0500 WL nutrient agar 525 啤酒当中的酵母、细菌 1.01347.0500 EMB agar 578 伊红美兰琼脂，肠道菌、大肠杆菌 1.01406.5000 VRB-AGAR 3675 肠道菌，大肠杆菌 1.04030.0500 VRB Agar 525 肠道菌，大肠杆菌 1.04044.0500 ENDO agar 483 肠道菌，大肠杆菌 1.07237.0500 Brilliant green agar 315 肠道菌 1.05470.0500 SIM medium 945 肠道菌 1.07500.0002 RAMBACH-AGAR 578 肠道菌，大肠杆菌显色培养 1.10765.0500 EC broth for microbiology 420 肠道菌，大肠杆菌 1.14582.0500 m-EC-broth with Novobioci 1050 新生霉素添加剂，肠道菌 1.10426.0500 COLIFORM Agar 1575 水质肠道菌 1.05222.0500 Kanamycin esculin 525 肠球菌 1.10859.0500 Tryptone water 420 生化鉴定试验，吲哚反应 1.05405.0500 VOGEL JOHNSON agar 840 金黄色葡萄球菌 1.07004.0500 Oxford listeria 945 奶制品单增李斯特菌 1.10398.0500 FRASER Listeria Selective 315 李斯特菌 1.10399.0001 FRASER Listeria Selective 420 李斯特菌 1.10549.0500 LISTERIA ENRICHMENT BROTH 383 李斯特增菌液 1.10661.0500 MRS-broth lactobacillus 378 乳酸菌检查 1.10988.0500 Pseudomonas agar 1155 水质假单胞菌 1.10989.0500 Pseudomonas agar 1155 水质假单胞菌 1.00888.0001 Fluorocukt TSC Agar 483 梭菌显色培养基 1.11972.0500 TSC agar 473 梭菌，厌氧菌 1.10259.0500 DCA AGAR 630 梭菌，厌氧菌 1.13825.0500 Brain heart agar 735 苛养菌生长 1.00445.0500 Universal Beer Agar 630 啤酒腐败菌 1.07667.0500 SS agar 840 沙门氏，志贺氏菌

《疫苗纯化 -- 病毒类疫苗纯化》凝胶过滤介质Tanrose 4FF或Tanrose 6FF是经典的病毒类疫苗纯化方法，可以去除培养基中的杂蛋白、处理量大、快速的特点。柱高一般40-70cm，上样量一般为10-15%。目前使用此方法生产的疫苗品种有：乙肝、狂犬、出血热、流感等。《纯化 -- 重组蛋白》His标签重组蛋白可以很方便用镍 IDA琼脂糖凝胶FF（Ni Tanrose 6FF IDA）或镍NTA琼脂糖凝胶FF（Ni Tanrose 6FF NTA）分离，填料已经螯合好了镍离子，使用非常方便，有更高的吸附载量，特异性更强，可以选择多种洗脱方式，是纯化这类融合蛋白的zui佳工具。GST融合蛋白可以用GST琼脂糖凝胶FF（GST Tanrose 4FF）分离，然后再用肠激酶或凝血酶等酶解就得到表达的产物。凝血酶可以用肝素琼脂糖凝胶FF（Heparin Tanrose 6FF）或苯甲脒琼脂糖凝胶FF（Benzamidine Tanrose 4FF）分离。《纯化 -- 血浆蛋白》阴离子交换在血浆蛋白的纯化中应用非常广泛，结合低温乙醇法在丙种球蛋白纯化后期用DEAE-琼脂糖凝胶FF（DEAE Tanrose 6FF）吸附二聚体等杂质从而达到提高产品纯度的目的，同样也可以在白蛋白纯化过程中使用阴离子交换吸附PKA、微量的IgG以及聚体，在凝血VIII因子纯化过程中使用大孔径的Q琼脂糖凝胶（Solid Q）可以增加载量和回收率。《纯化 -- 核酸、病毒》核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子，和质粒DNA一样，可用分离大分子的Tanrose 4FF 凝胶过滤介质去除杂蛋白，再配合离子交换 Q琼脂糖凝胶（Q Tanrose 6FF）分离核酸。也可以用DEAE琼脂糖凝胶FF（DEAE Tanrose 6FF）或Q琼脂糖凝胶FF（Q Tanrose 6FF）富集和分离后再上琼脂糖凝胶6B或6FF得到纯的病毒。《去除 -- 蛋白中的核酸》核酸带阴电荷，在初步纯化时利用阳离子交换介质如 SP 或CM Tanrose FF 结合目标蛋白，可除去大量核酸。核酸在高盐下会和蛋白解离，疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白，在纯化蛋白的同时去除核酸。利用核酸酶将核酸切成小片断，用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。《纯化 -- 中草药有效成分》中药的化学成分极其复杂。传统中药多是煎熬后服用，有效成分多较为亲水，包括生物碱、黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸、多糖、肽和蛋白质。灵活及综合性地利用多种层析方法。如离子交换、分子筛、反相层析，更容易分离到单一活性成分。葡聚糖凝胶LH-20（Tandex LH-20）同时具备吸附性层析和分子筛功能，例如：用甲醇分离黄酮甙，三糖甙先被洗下来，二糖甙其次，单糖甙随后，zui后是甙元。葡聚糖凝胶LH-20（Tandex LH-20）可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂，广泛用于各种天然产物的分离，包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。生物碱在酸性缓冲液中带正电，成为盐，SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反，黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中，在Q阴离子交换柱上分离效果良好。《样品净化 -- 脱盐、小分子去除》使用凝胶过滤介质Tandex G10、G15、G25等去除小分子，效率高，处理量可达床体积30%。只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液，就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子，简单直接。由于只是去除小分子，柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分种至半小时完成。月旭Tandex G25系列介质专为蛋白质脱盐而设计。病毒、DNA疫苗或质粒可以用琼脂糖凝胶6B除盐或交换缓冲液，蛋白、抗体等可以用葡聚糖凝胶G25快速去盐和交换缓冲液。

html,body{-webkit-user-select:text }*{padding:0 margin:0 }.web-box{width:100% text-align:center }.wenshang{margin:0auto width:80% text-align:center padding:20px10px010px }.wenshangh2{display:block color:#900 text-align:center padding-bottom:10px border-bottom:1pxdashed#ccc font-size:16px }.sitea{text-decoration:none }.content-box{text-align:left margin:0auto width:80% margin-top:25px text-indent:2em font-size:14px line-height:25px }.biaoge{margin:0auto /*width:643px */width:100% margin-top:25px }.table_content{border-top:1pxsolid#e0e0e0 border-left:1pxsolid#e0e0e0 font-family:Arial /*width:643px */width:100% margin-top:10px margin-left:15px }.table_contenttrtd{line-height:29px }.table_content.bg{background-color:#f6f6f6 }.table_contenttrtd{border-right:1pxsolid#e0e0e0 border-bottom:1pxsolid#e0e0e0 }.table-left{text-align:left padding-left:20px }详细信息西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次公开招标公告陕西省-西安市-新城区状态：公告更新时间：2022-05-14招标公告公示西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次公开招标公告发布时间：2022-05-1415:44:32西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次公开招标公告项目概况西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次的潜在投标人应在线上获取招标文件，并于2022年6月7日09点30分（北京时间）前递交投标文件。一、项目基本情况项目编号：ZDZC2022030404项目名称：西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次采购需求：本次采购标的标段划分如下：标段号产品组合名称产品名称检测方法使用科室采购预算（万元/年）拟中标家数备注1标段全自动细菌鉴定与药敏检测试剂（进口）革兰氏阴性细菌鉴定卡全自动细菌鉴定与药敏1医学检验科2501家革兰氏阳性细菌鉴定卡酵母菌鉴定卡奈瑟菌、嗜血杆菌鉴定卡革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN09革兰氏阳性细菌药敏卡片肺炎链球菌药敏卡片革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN13VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN16VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-XN04VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN67一次性悬浮液管VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-N334VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-N335VITEK2革兰氏阳性细菌药敏卡片AST-P639β-内酰胺酶快速检测试剂Genbag厌氧产气袋厌氧菌及棒状杆菌鉴定卡片ANC样本稀释液VITEK-COMPACT比浊管细菌质谱鉴定检测试剂（进口）VITEKMS-DS样品板飞行时间质谱细菌鉴定仪质谱样品处理基质溶液质谱样品预处理溶液全自动染色仪检测试剂（进口）革兰染色液（丙酮番红）全自动革兰染色仪革兰染色液（番红）革兰染色液（丙酮品红）革兰染色液（品红）革兰染色液（碘液）革兰染色液（结晶紫）喷嘴清洗液全自动血培养仪检测试剂（进口）需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFA全自动血培养仪1厌氧微生物培养瓶FN需氧微生物培养瓶SA厌氧和兼性厌氧微生物培养瓶SN需氧和兼性厌氧微生物培养瓶PF厌氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFNPlus需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFAPlus需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTPFPlus半自动鉴定及药敏检测试剂（进口）ID32GN革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）半自动手工鉴定及药敏ID32C酵母菌鉴定试剂盒（比色法）RAPIDID32A厌氧菌鉴定试剂盒（比色法）ID32E肠杆菌科和其它非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法ID32STAPH葡萄球菌鉴定试剂盒（比色法）RAPIDID32STREP链球菌快速鉴定试剂盒（比色法）FUNGUSⅢ酵母样真菌药敏试剂盒（微量稀释法）ATBENTEROC5肠球菌药敏试剂盒（比色法）ATBG-5肠细菌药敏试剂盒（比色法）ATBSTAPH5葡萄球菌药敏试剂盒（比色法）ATBPSE5假单胞菌和非发酵菌药敏试剂盒（比色法）ATBHAEMO嗜血杆菌和布兰汉球菌药敏试剂盒（比色法）肠杆菌药敏试剂盒（比色法）非发酵菌药敏试剂盒（比色法）ATBSTREP5链球菌和肺炎球菌药敏试剂盒（比色法）NaCl0.85#％悬浮液悬浮液（3ml）（100支/盒）ATBMedium肉汤培养基FB（坚固兰）(FASTBLUEBB)JAMES吲哚试剂麦氏比浊管McFarlandStandardAPIMINERALOIL矿物油NIN马尿酸NIT1+NIT2硝酸盐试剂丙酮酸反应检测液（VP1+VP2）STERILEATB无菌加样吸头BCP二甲苯试剂EHR色氨酸试剂XYL溴甲酚紫试剂3标段G实验+GM实验配套试剂及碳青霉烯酶检测试剂、耗材革兰阴性脂多糖检测试剂盒（光度法）显色法551家真菌（1-3）D葡聚糖检测试剂盒曲霉菌半乳甘露聚糖检测试剂盒化学发光法免疫显色试剂（NDM型碳青霉烯酶检测卡）胶体金法免疫显色试剂（KPC型碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（IMP-4型碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（VIM型碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（OXA-23碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（OXA-48碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（NDM、KPC、IMP-4型碳青霉烯酶检测卡）烟曲霉菌硫氧还蛋白还原酶IgG抗体检测试剂盒酶联免疫法念珠菌烯醇化酶IgG抗体检测试剂盒一次性使用小吸头一次性使用大吸头一次性使用真空采血管一次性无热源专用离心管（EP管）一次性使用吸头（IGL-800专用）一次性专用平底试管（IGL-800专用）一次性使用无热源混合瓶（IGL-800专用）一次性接种环4标段进口药敏纸片药敏纸片K-B法（进口）通用药敏实验纸片纸片扩散法31家CT0425B环丙沙星药敏实验纸片CIP5ug头孢吡肟药敏实验纸片（扩散法）CT0043B青霉素药敏实验纸片(扩散法)P10ugCT0647B替考拉宁药敏实验纸片（扩散法）CT0725B哌拉西林/他唑巴坦药敏实验纸片(扩散法）CT0119B头孢西丁药敏实验纸片(扩散法)FOX30ugCT1841B替加环素药敏实验纸片(扩散法)CT0166B头孢噻肟药敏实验纸片(扩散法)CTX30ugCT0030B米诺环素药敏实验纸片(扩散法)MH30ugCT0013B氯霉素药敏实验纸片(扩散法)C30ugCT0064B克林霉素药敏实验纸片(扩散法)DA2ugCT0020B红霉素药敏实验纸片（扩散法）E15ugCT0107B阿米卡星药敏实验纸片(扩散法)AK30ugCT0774B美罗培能药敏实验纸片（扩散法）CT0520B氨苄西林/舒巴坦药敏实验纸片(扩散法)SAM20ugCT1650B利奈唑胺药敏实验纸片(扩散法)LZD30ug头孢他啶药敏实验纸片（扩散法）磷霉素/氨丁三醇药敏实验纸片(扩散法)FOT20ugCT0058B万古霉素药敏实验纸片(扩散法)VA30ugCT0264B氨曲南药敏实验纸片(扩散法)ATM30ugCT0003B氨苄西林药敏实验纸片(扩散法)AMP10ugCT0054B四环素药敏实验纸片(扩散法)TE30ugCT0127B头孢呋辛钠药敏实验纸片(扩散法)CXM30ugCT0159B苯唑西林药敏实验纸片(扩散法)CT0417B头孢曲松药敏实验纸片(扩散法)CRO30ugK6101奥普托欣纸片5ugCT1727B头孢哌酮/舒巴坦药敏实验纸片(扩散法)SCF105ugCT0052B磺胺甲恶唑/甲氧苄啶药敏实验纸片(扩散法)SXTCT1587B左氧氟沙星药敏实验纸片(扩散法)LEV5ugCT0024B庆大霉素药敏实验纸片(扩散法)CN10ugCT0011B头孢唑啉药敏实验纸片（扩散法)CT0455B亚胺培南药敏实验纸片(扩散法)IPM10ug5标段国产药敏纸品+基础培养基微生物肉汤稀释法MIC+其他配套试剂通用药敏试剂（8浓度）细菌药敏试剂（微量肉汤稀释法)31家通用药敏试剂（12浓度）头孢噻肟药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢曲松药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢哌酮药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢他啶药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢呋辛药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢唑啉药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢西丁药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢吡肟药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）哌拉西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）苯唑西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氨苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）羧苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）替卡西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）左氧沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）环丙沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氧氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）洛美沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）加替沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氟罗沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）诺氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）庆大霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）司帕沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）多西环素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）米诺环素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）克拉霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）万古霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）阿奇霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）卡那霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）克林霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）红霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）青霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氯霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）利奈唑胺药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）链霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）四环素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）利福平药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）阿莫西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）替卡西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢他啶/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢噻肟/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢哌酮/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氨苄西林/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）哌拉西林/他唑巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）复方新诺明药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）丁胺卡那药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）呋喃妥因药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氨曲南药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）美罗培南药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）妥布霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）替考拉宁药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢克罗药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢噻肟药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢曲松药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢哌酮药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢他啶药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢呋辛药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢唑啉药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢西丁药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢吡肟药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）哌拉西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）苯唑西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氨苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）羧苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）替卡西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）左氧沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）环丙沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氧氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）洛美沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）加替沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氟罗沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）诺氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）庆大霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）司帕沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）多西环素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）米诺环素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）克拉霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）阿奇霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）卡那霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）克林霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）红霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）青霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氯霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）利奈唑胺药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）链霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）四环素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）利福平药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）阿莫西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）替卡西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢他啶/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢噻肟/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢哌酮/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氨苄西林/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）哌拉西林/他唑巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）复方新诺明药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）丁胺卡那药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）呋喃妥因药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氨曲南药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）亚胺培南药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）美罗培南药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）妥布霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）替考拉宁药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢克罗药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）肠杆菌科细菌药敏试剂盒链球菌药敏试剂盒替加环素药敏试剂MIC多粘菌素B药敏试剂MIC嗜血杆菌药敏试剂盒MIC少见菌药敏试剂盒MIC葡萄球菌药敏试剂盒MIC肠球菌药敏试剂盒MIC万古霉素药敏MIC亚胺培南药敏MIC头孢他啶/阿维巴坦试条药敏接种培养液（CAMHB)真菌药敏试纸KBKB法真菌药敏试纸条ETESTETEST法真菌药敏试剂MIC微量肉汤稀释法非发酵菌药敏试剂盒MIC标准菌株/质控菌株干粉培养基（SS、XLD、麦康凯、MH、厌氧血、嗜血）嗜热芽孢杆菌菌片结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ和IL-2)联合检测ELISA法药敏纸片+手工鉴定配套试剂（国产）细菌药敏纸片（各类抗菌素或抗真菌）KB法国产微生物药敏试纸（扩散法法)卡他莫拉菌检测细菌生化鉴别试剂（氧化酶纸片）呋喃唑酮纸片杆菌肽纸片奥扑拓新纸片多粘菌素BV因子鉴定X因子鉴定X+V因子鉴定氨苄西林(氨苄青霉素)纸片苯唑青霉素纸片哌拉西林纸片头孢呋辛(西力欣.头孢呋肟)纸片头孢唑啉纸片头孢哌酮(先锋必)纸片头孢曲松纸片头孢噻肟纸片头孢他啶纸片利福平纸片链霉素纸片庆大霉素纸片四环素纸片氯霉素纸片红霉素纸片复方新诺明SMZ/TMP纸片万古霉素纸片环丙沙星纸片洛美沙星纸片克拉霉素纸片左氧氟沙星纸片磷霉素纸片氧氟沙星纸片克林霉素纸片阿莫西林/棒酸纸片丁胺卡那纸片头孢哌酮/舒巴坦纸片(舒普深)诺氟沙星纸片氟罗沙星纸片氨曲南纸片亚胺培南纸片多西环素纸片司帕沙星纸片氨苄西林/舒巴坦纸片阿奇霉素纸片米诺环素纸片美罗培南纸片头孢吡肟纸片头孢西丁纸片哌拉西林/他唑巴坦纸片替卡西林/棒酸纸片呋喃妥因纸片妥布霉素纸片替卡西林纸片替考拉宁纸片头孢唑肟纸片头孢噻吩纸片奈替米星纸片Optochin纸片杆菌肽纸片新生霉素纸片呋喃唑酮纸片多粘菌素B纸片林可霉素纸片阿莫西林纸片罗红霉素纸片头孢美唑纸片交沙霉素纸片头孢克罗纸片头孢克肟纸片美洛西林纸片利奈唑胺纸片莫西沙星纸片头孢硫脒纸片头孢拉定纸片头孢氨苄纸片头孢匹安纸片拉氧头孢纸片头孢匹罗纸片阿洛西林纸片壮观霉素纸片夫西地酸纸片萘啶酸纸片头孢布烯纸片替加环素纸片厄他培南纸片头孢孟多纸片头孢丙烯纸片麦迪霉素纸片X因子鉴定纸片头孢他啶/棒酸纸片头孢噻肟/棒酸纸片庆大霉素纸片羧苄青霉素（羧苄西林）纸片加替沙星纸片卡那霉素纸片甲氧苄啶纸片头孢替坦纸片新霉素纸片土霉素纸片恩诺沙星纸片氟苯尼考纸片氨苄西林/棒酸纸片呋喃唑酮（痢特灵）纸片通用药敏纸片ETEST药敏（国产）康泰通用药敏试剂条细菌药敏试条（E试验法）青霉素药敏试剂条头孢呋辛药敏试条庆大霉素药敏试条头孢吡肟药敏试条红霉素药敏试条头孢唑啉药敏试条左氟沙星药敏试条诺氟沙星药敏试条苯唑西林药敏试条利奈唑胺药敏试条克林霉素药敏试条阿莫西林/棒酸药敏试条头孢他啶药敏试条环丙沙星药敏试条头孢曲松药敏试条头孢噻肟药敏试条克拉霉素药敏试条头孢哌酮/舒巴坦药敏试条头孢哌酮药敏试条洛美沙星药敏试条氧氟沙星药敏试条万古霉素药敏试条亚胺培南药敏试条美罗培南药敏试条氯霉素药敏试条氨苄西林药敏试条丁胺卡那药敏试条氨曲南药敏试条哌拉西林药敏试条司帕沙星药敏试条头孢他啶/棒酸药敏试条利福平药敏试条羧苄西林药敏试条氟罗沙星药敏试条加替沙星药敏试条米诺环素药敏试条卡那霉素药敏试条多西环素药敏试条替卡西林药敏试条四环素药敏试条妥布霉素药敏试条替考拉宁药敏试条呋喃妥因药敏试条阿奇霉素药敏试条头孢西丁药敏试条复方新诺明药敏试条哌拉西林/他唑巴坦药敏试条头孢噻肟/棒酸药敏试条替卡西林/棒酸药敏试条氨苄西林/舒巴坦药敏试条两性霉素B伊曲康唑5-氟胞嘧啶酮康唑氟康唑伏立康唑米卡芬净泊沙康唑阿尼芬净急诊粪便常规检测样本采集管（包含稀释液、清洗液等）胶体金法粪便隐血（FOB）多水平非定值质控品便隐血（FOB）检测试剂6标段ETEST+染液+基础培养基ETEST药敏（国产）安图国产ETEST纸条（各类抗菌素）细菌药敏试条（E试验法）31家两性霉素B(E试验品)氟康唑(E试验品)伏立康唑(E试验品)阿米卡星药敏条阿莫西林药敏条氨苄西林药敏条氨曲南药药敏条苯唑西林药敏条红霉素药敏条（E试验法）环丙沙星药敏条（E试验法）卡泊芬净药敏条（E试验法）克林霉素药敏条（E试验法）利奈唑胺药敏条（E试验法）氯霉素药敏条（E试验法）美罗培南药敏条（E试验法）诺氟沙星药敏条（E试验法）青霉素药敏条（E试验法）庆大霉毒药敏条（E试验法）四环素药敏条（E试验法）头孢呋辛药敏条（E试验法）头孢哌酮舒巴坦药敏条（E试验法）头孢曲松药敏条（E试验法）头孢他啶药敏条（E试验法）头孢唑林药敏条（E试验法）万古霉素药敏条（E试验法）亚胺培南药敏条（E试验法）左氧氟沙星药敏条（E试验法）头孢吡肟药敏条（E试验法）头孢噻肟药敏条（E试验法）甲氧苄啶-磺胺甲恶唑药敏条（E试验法）米诺环素药敏条（E试验法）阿奇霉素药敏条（E试验法）微生物染液等革兰染色液（4×250ml）手工试剂革兰染色液（4×100ml）抗酸染色液（4×250ml）抗酸染色液（3×100ml）鞭毛染色液荚膜染色液芽孢染色液异染颗粒染色液瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)（2×250ml）瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)（2×100ml）瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)（4×20ml）瑞氏-吉姆萨染色液网织红细胞染色液（2×100ml）网织红细胞染色液（4×20ml）过氧化酶（ＰＯＸ）染色液铁染色液精子染色液精子稀释液妇科白带涂片染色液苏木素－伊红染色液Ｉ苏木素－伊红染色液II(H-E单一)巴氏染色液Ⅰ巴氏染色液Ⅱ巴氏染色液(巴氏试剂盒)快速革兰氏染色液革兰氏染液-快速法-碘溶液革兰氏染液-快速法-脱色液革兰氏染液-快速法-沙黄溶液革兰氏染液-快速法-龙胆紫液新型隐球菌染色液六胺银染色液乳酸酚棉兰染液真菌免疫荧光显色试剂（II型）微生物基础培养基等手工试剂梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（凝集法）微生物基础培养基等手工试剂麦康凯琼脂平板乳酸棉酚蓝染液六胺银染液真菌荧光染液（一步法）抗酸荧光染色液（金胺O法）弱抗酸染色液无菌病毒运输液（用于甲流）志贺氏菌属诊断血清(50种)志贺氏菌属诊断血清(22种)沙门氏菌属诊断血清(60种)沙门氏菌属诊断血清(30种)出血性大肠埃希菌O157诊断血清（供科研用）触酶试剂氧化酶试验试剂MH干粉沙保罗培养基干粉XLD培养基干粉营养肉汤干粉R2A培养基干粉变色硅胶含醛类消毒剂中和培养基（9ml）含酚、醇类消毒剂中和培养基（9ml）含氯、碘类消毒剂中和培养基（9ml）含表面活性剂类消毒剂中和培养基（9ml）含醛类消毒剂中和培养基（50ml）含酚、醇类消毒剂中和培养基（50ml）含氯、碘类消毒剂中和培养基（50ml）含表面活性剂类消毒剂中和培养基（50ml）苛养菌药敏琼脂平板血、肠道菌分隔琼脂平板沙保罗琼脂平板营养肉汤培养基（液体）营养琼脂培养基尿道菌显色平板伊红美兰琼脂平板中国蓝琼脂平板物表测试平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌（麦康凯）分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌（伊红美兰）分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌（中国蓝）分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌（SS)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌分隔琼脂平板GBS运送培养基卵黄琼脂培养基环丝氨酸-头孢西丁-果糖琼脂培养基厌氧血琼脂平板/厌氧苯乙酸琼脂培养基厌氧琼脂培养基庖肉培养基巯基乙酸肉汤培养基耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌检测70cm艰难梭菌显色平板70cm不动杆菌显色培养基支原体培养鉴定计数药敏试剂盒（30孔，12种药敏)葡萄糖肉汤培养基磷酸盐缓冲液（PBSpH7.2)SBG增菌液冷冻管冻存管盒液体菌种保存管复方中和增菌培养基（带棉签)注：有名“物表采样管”含复方中和剂的0.04mol/L磷酸盐缓冲液R2A琼脂培养基(干粉)大豆酪蛋白琼脂培养基(干粉)TGE琼脂平板胰蛋白胨大豆培养基（卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆培养基）碱性蛋白胨水培养基Amies采样运送拭子（Amies采样运送培养基含拭子）TSA接触平板样本稀释液中和洗脱液复合中和洗脱液（9ml）复合中和洗脱液（5ml）厌氧指示剂SS琼脂平板MH琼脂培养基哥伦比亚血琼脂平板巧克力琼脂培养基B族链球菌平板专用油镜油含珠菌种保存管（国产）（5颗）含珠菌种保存管（国产）（25颗）病毒采样管（无菌病毒运输液）植绒采样拭子磁珠菌种保存液营养肉汤培养基R2A琼脂培养基（平板）大豆酪蛋白琼脂培养基（平板）半固体琼脂Amies采样运送拭子Cary-blair运送培养基stuart运送培养基弯曲杆菌显色培养基尿培养筛选显色平板沙门氏菌筛选显色平板大肠杆菌显色平板金黄色葡萄球菌显色平板李斯特菌显色平板弧菌显色平板霉菌显色平板O157培养基分枝杆菌菌种保存管含珠菌种保存管（进口）（25颗）脱脂奶粉血琼脂平板念珠菌显色平板耐药菌三联检显色平板真菌快速培养鉴定药敏试剂盒缓冲液（碳青霉烯酶）一次性封闭真菌形态学观察培养基多粘菌素B纸片霍乱弧菌诊断血清01群、0139脑心浸液琼脂GC琼脂平板乙腈甲酸头孢硝噻吩纸片备注：各供应商可选择参投一个或多个标段，但必须对所投标段内全部项目内容进行投标报价，不得缺项、漏项。预算金额：314万元/年。资金性质：自筹资金。项目用途：医用。合同履行期限：2年二、供应商资格要求：1、基本资格条件：符合《政府采购法》第二十二条规定的供应商条件；1.1、提供在中华人民共和国境内注册的营业执照（或事业单位法人证书，或社会团体法人登记证书，或执业许可证）、组织机构代码证和税务登记证复印件【如已办理了多证合一，则仅需提供合证后的营业执照】，如供应商为自然人的需提供自然人身份证明。1.2、提供2020年度的财务报表（至少包括资产负债表、现金流量表和利润表）或具有财务审计资质的单位出具的2020年度财务会计报告或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明（附开户许可证）；2021年以后新成立企业提供成立之日至开标前一月的财务报表（至少包括资产负债表、现金流量表和利润表）或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明（附开户许可证）。1.3、提供2021年以来至少一个月的纳税证明或完税证明（提供增值税、企业所得税至少一种），纳税证明或完税证明上应有代收机构或税务机关的公章或业务专用章。依法免税的供应商应提供相关文件证明。1.4、提供2021年以来至少一个月的社会保障资金缴存单据或社保机构开具的社会保险参保缴费情况证明。依法不需要缴纳社会保障资金的供应商应提供相关文件证明。1.5、提供履行合同所必需的设备和专业技术能力的书面声明。1.6、提供参加政府采购活动前3年内在经营活动中没有重大违法记录的书面声明。2、落实政府采购政策需满足的资格要求：本项目非专门面向中小企业采购。3、特定资格条件：3.1、供应商应授权合法的人员参加投标全过程，其中法定代表人直接参加投标的，须出具法人身份证，并与营业执照上信息一致；法定代表人授权代表参加投标的，须出具法定代表人授权书及授权代表身份证。3.2、投标产品纳入医疗器械（或药品）管理的，须提供供应商有效的医疗器械（或药品）经营许可证或经营备案凭证。3.3、投标产品纳入医疗器械（或药品）管理的，须提供产品有效的医疗器械（或药品）注册证或备案凭证。3.4、若投标产品为进口，供应商须提供有效的完整授权链的产品授权书（授权期限不足2年的须附能够提供持续供货的声明材料，英文授权须提供中文翻译版；制造商直接参与投标的不提供此项）。若投标产品为国产且纳入医疗器械（或药品）管理的，供应商须提供投标产品制造商有效的营业执照和生产许可证。3.5、供应商未被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)以下情形之一：①记录失信被执行人；②重大税收违法案件当事人名单。同时，在中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)“政府采购严重违法失信行为信息记录”中查询没有处于禁止参加政府采购活动的记录名单。3.6、单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的政府采购活动。3.7、本项目不接受联合体投标。三、获取招标文件时间：2022年5月16日至2022年5月20日，每天上午9:00至12:00，下午14:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：线上方式：1）根据陕西省人民政府《关于加强新型冠状病毒感染的肺炎防控工作的通告》要求，本次招标文件采用线上发售，供应商在文件发售期以内将单位介绍信、经办人身份证、联系电话及电子邮箱等资料加盖单位公章的彩色扫描件发送至邮箱591330045@qq.com，并及时联系采购代理机构确认（联系人：李工18220810739），获取缴费方式。2）招标文件售价人民币300元/标段，售后不退。采购代理机构在收到邮件并确认文件收费到账后，通过邮箱向供应商发售招标文件，请及时查收。3）受疫情影响，本项目投标文件递交截止时间及开标时间和地点可能会变更，具体另行通知。售价：￥300.0元，本公告包含的招标文件售价总和。四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点提交投标文件截止时间：2022年6月7日09点30分（北京时间）开标时间：2022年6月7日09点30分（北京时间）地点：西安市新城区长乐中路38号金花新都汇A座7层会议室五、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜需要落实的政府采购政策：1、《三部门联合发布关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》（财库〔2017〕141号）；2、《财政部司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知》（财库〔2014〕68号）；3、《关于政府采购优先购买福利性企业产品和服务的意见》（陕民发（2015）1号）；4、关于印发《政府采购促进中小企业发展管理办法》的通知财库〔2020〕46号；5、《关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》（财库[2019]9号）；6、《环境标志产品政府采购实施的意见》（财库[2006]90号）；7、《财政部国务院扶贫办关于运用政府采购政策支持脱贫攻坚的通知》（财库〔2019〕27号）。七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名称：西安交通大学第二附属医院地址：西安市新城区西五路联系方式：冯女士029-876798612.采购代理机构信息名称：正大鹏安建设项目管理有限公司地址：西安市新城区长乐中路38号金花新都汇A座12层1201室联系方式：李工18220810739，杨工159029482903.项目联系方式项目联系人：李工电话：18220810739×扫码打开掌上仪信通App查看联系方式$('.clickModel').click(function(){$('.modelDiv').show()})$('.closeModel').click(function(){$('.modelDiv').hide()})基本信息关键内容：样品前处理开标时间：2022-06-0709:30预算金额：314.00万元采购单位：西安交通大学第二附属医院采购联系人：点击查看采购联系方式：点击查看招标代理机构：正大鹏安建设项目管理有限公司代理联系人：点击查看代理联系方式：点击查看详细信息西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次公开招标公告陕西省-西安市-新城区状态：公告更新时间：2022-05-14招标公告公示西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次公开招标公告发布时间：2022-05-1415:44:32西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次公开招标公告项目概况西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次的潜在投标人应在线上获取招标文件，并于2022年6月7日09点30分（北京时间）前递交投标文件。一、项目基本情况项目编号：ZDZC2022030404项目名称：西安交通大学第二附属医院微生物组试剂采购项目（1标段、3标段、4标段、5标段、6标段）二次采购需求：本次采购标的标段划分如下：标段号产品组合名称产品名称检测方法使用科室采购预算（万元/年）拟中标家数备注1标段全自动细菌鉴定与药敏检测试剂（进口）革兰氏阴性细菌鉴定卡全自动细菌鉴定与药敏1医学检验科2501家革兰氏阳性细菌鉴定卡酵母菌鉴定卡奈瑟菌、嗜血杆菌鉴定卡革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN09革兰氏阳性细菌药敏卡片肺炎链球菌药敏卡片革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN13VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN16VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-XN04VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-GN67一次性悬浮液管VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-N334VITEK2革兰氏阴性细菌药敏卡片AST-N335VITEK2革兰氏阳性细菌药敏卡片AST-P639β-内酰胺酶快速检测试剂Genbag厌氧产气袋厌氧菌及棒状杆菌鉴定卡片ANC样本稀释液VITEK-COMPACT比浊管细菌质谱鉴定检测试剂（进口）VITEKMS-DS样品板飞行时间质谱细菌鉴定仪质谱样品处理基质溶液质谱样品预处理溶液全自动染色仪检测试剂（进口）革兰染色液（丙酮番红）全自动革兰染色仪革兰染色液（番红）革兰染色液（丙酮品红）革兰染色液（品红）革兰染色液（碘液）革兰染色液（结晶紫）喷嘴清洗液全自动血培养仪检测试剂（进口）需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFA全自动血培养仪1厌氧微生物培养瓶FN需氧微生物培养瓶SA厌氧和兼性厌氧微生物培养瓶SN需氧和兼性厌氧微生物培养瓶PF厌氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFNPlus需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTFAPlus需氧和兼性厌氧微生物培养瓶BacT/ALERTPFPlus半自动鉴定及药敏检测试剂（进口）ID32GN革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法）半自动手工鉴定及药敏ID32C酵母菌鉴定试剂盒（比色法）RAPIDID32A厌氧菌鉴定试剂盒（比色法）ID32E肠杆菌科和其它非苛养革兰氏阴性杆菌鉴定试剂盒（比色法ID32STAPH葡萄球菌鉴定试剂盒（比色法）RAPIDID32STREP链球菌快速鉴定试剂盒（比色法）FUNGUSⅢ酵母样真菌药敏试剂盒（微量稀释法）ATBENTEROC5肠球菌药敏试剂盒（比色法）ATBG-5肠细菌药敏试剂盒（比色法）ATBSTAPH5葡萄球菌药敏试剂盒（比色法）ATBPSE5假单胞菌和非发酵菌药敏试剂盒（比色法）ATBHAEMO嗜血杆菌和布兰汉球菌药敏试剂盒（比色法）肠杆菌药敏试剂盒（比色法）非发酵菌药敏试剂盒（比色法）ATBSTREP5链球菌和肺炎球菌药敏试剂盒（比色法）NaCl0.85#％悬浮液悬浮液（3ml）（100支/盒）ATBMedium肉汤培养基FB（坚固兰）(FASTBLUEBB)JAMES吲哚试剂麦氏比浊管McFarlandStandardAPIMINERALOIL矿物油NIN马尿酸NIT1+NIT2硝酸盐试剂丙酮酸反应检测液（VP1+VP2）STERILEATB无菌加样吸头BCP二甲苯试剂EHR色氨酸试剂XYL溴甲酚紫试剂3标段G实验+GM实验配套试剂及碳青霉烯酶检测试剂、耗材革兰阴性脂多糖检测试剂盒（光度法）显色法551家真菌（1-3）D葡聚糖检测试剂盒曲霉菌半乳甘露聚糖检测试剂盒化学发光法免疫显色试剂（NDM型碳青霉烯酶检测卡）胶体金法免疫显色试剂（KPC型碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（IMP-4型碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（VIM型碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（OXA-23碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（OXA-48碳青霉烯酶检测卡）免疫显色试剂（NDM、KPC、IMP-4型碳青霉烯酶检测卡）烟曲霉菌硫氧还蛋白还原酶IgG抗体检测试剂盒酶联免疫法念珠菌烯醇化酶IgG抗体检测试剂盒一次性使用小吸头一次性使用大吸头一次性使用真空采血管一次性无热源专用离心管（EP管）一次性使用吸头（IGL-800专用）一次性专用平底试管（IGL-800专用）一次性使用无热源混合瓶（IGL-800专用）一次性接种环4标段进口药敏纸片药敏纸片K-B法（进口）通用药敏实验纸片纸片扩散法31家CT0425B环丙沙星药敏实验纸片CIP5ug头孢吡肟药敏实验纸片（扩散法）CT0043B青霉素药敏实验纸片(扩散法)P10ugCT0647B替考拉宁药敏实验纸片（扩散法）CT0725B哌拉西林/他唑巴坦药敏实验纸片(扩散法）CT0119B头孢西丁药敏实验纸片(扩散法)FOX30ugCT1841B替加环素药敏实验纸片(扩散法)CT0166B头孢噻肟药敏实验纸片(扩散法)CTX30ugCT0030B米诺环素药敏实验纸片(扩散法)MH30ugCT0013B氯霉素药敏实验纸片(扩散法)C30ugCT0064B克林霉素药敏实验纸片(扩散法)DA2ugCT0020B红霉素药敏实验纸片（扩散法）E15ugCT0107B阿米卡星药敏实验纸片(扩散法)AK30ugCT0774B美罗培能药敏实验纸片（扩散法）CT0520B氨苄西林/舒巴坦药敏实验纸片(扩散法)SAM20ugCT1650B利奈唑胺药敏实验纸片(扩散法)LZD30ug头孢他啶药敏实验纸片（扩散法）磷霉素/氨丁三醇药敏实验纸片(扩散法)FOT20ugCT0058B万古霉素药敏实验纸片(扩散法)VA30ugCT0264B氨曲南药敏实验纸片(扩散法)ATM30ugCT0003B氨苄西林药敏实验纸片(扩散法)AMP10ugCT0054B四环素药敏实验纸片(扩散法)TE30ugCT0127B头孢呋辛钠药敏实验纸片(扩散法)CXM30ugCT0159B苯唑西林药敏实验纸片(扩散法)CT0417B头孢曲松药敏实验纸片(扩散法)CRO30ugK6101奥普托欣纸片5ugCT1727B头孢哌酮/舒巴坦药敏实验纸片(扩散法)SCF105ugCT0052B磺胺甲恶唑/甲氧苄啶药敏实验纸片(扩散法)SXTCT1587B左氧氟沙星药敏实验纸片(扩散法)LEV5ugCT0024B庆大霉素药敏实验纸片(扩散法)CN10ugCT0011B头孢唑啉药敏实验纸片（扩散法)CT0455B亚胺培南药敏实验纸片(扩散法)IPM10ug5标段国产药敏纸品+基础培养基微生物肉汤稀释法MIC+其他配套试剂通用药敏试剂（8浓度）细菌药敏试剂（微量肉汤稀释法)31家通用药敏试剂（12浓度）头孢噻肟药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢曲松药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢哌酮药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢他啶药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢呋辛药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢唑啉药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢西丁药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢吡肟药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）哌拉西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）苯唑西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氨苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）羧苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）替卡西林药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）左氧沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）环丙沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氧氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）洛美沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）加替沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氟罗沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）诺氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）庆大霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）司帕沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）多西环素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）米诺环素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）克拉霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）万古霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）阿奇霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）卡那霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）克林霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）红霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）青霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氯霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）利奈唑胺药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）链霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）四环素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）利福平药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）阿莫西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）替卡西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢他啶/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢噻肟/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢哌酮/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氨苄西林/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）哌拉西林/他唑巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）复方新诺明药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）丁胺卡那药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）呋喃妥因药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）氨曲南药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）美罗培南药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）妥布霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）替考拉宁药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢克罗药敏试剂微量肉汤稀释法（8浓度）头孢噻肟药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢曲松药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢哌酮药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢他啶药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢呋辛药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢唑啉药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢西丁药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢吡肟药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）哌拉西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）苯唑西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氨苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）羧苄西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）替卡西林药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）左氧沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）环丙沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氧氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）洛美沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）加替沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氟罗沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）诺氟沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）庆大霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）司帕沙星药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）多西环素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）米诺环素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）克拉霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）阿奇霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）卡那霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）克林霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）红霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）青霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氯霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）利奈唑胺药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）链霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）四环素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）利福平药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）阿莫西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）替卡西林/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢他啶/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢噻肟/棒酸药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢哌酮/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氨苄西林/舒巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）哌拉西林/他唑巴坦药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）复方新诺明药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）丁胺卡那药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）呋喃妥因药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）氨曲南药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）亚胺培南药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）美罗培南药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）妥布霉素药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）替考拉宁药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）头孢克罗药敏试剂微量肉汤稀释法（12浓度）肠杆菌科细菌药敏试剂盒链球菌药敏试剂盒替加环素药敏试剂MIC多粘菌素B药敏试剂MIC嗜血杆菌药敏试剂盒MIC少见菌药敏试剂盒MIC葡萄球菌药敏试剂盒MIC肠球菌药敏试剂盒MIC万古霉素药敏MIC亚胺培南药敏MIC头孢他啶/阿维巴坦试条药敏接种培养液（CAMHB)真菌药敏试纸KBKB法真菌药敏试纸条ETESTETEST法真菌药敏试剂MIC微量肉汤稀释法非发酵菌药敏试剂盒MIC标准菌株/质控菌株干粉培养基（SS、XLD、麦康凯、MH、厌氧血、嗜血）嗜热芽孢杆菌菌片结核分枝杆菌特异性细胞因子(IFN-γ和IL-2)联合检测ELISA法药敏纸片+手工鉴定配套试剂（国产）细菌药敏纸片（各类抗菌素或抗真菌）KB法国产微生物药敏试纸（扩散法法)卡他莫拉菌检测细菌生化鉴别试剂（氧化酶纸片）呋喃唑酮纸片杆菌肽纸片奥扑拓新纸片多粘菌素BV因子鉴定X因子鉴定X+V因子鉴定氨苄西林(氨苄青霉素)纸片苯唑青霉素纸片哌拉西林纸片头孢呋辛(西力欣.头孢呋肟)纸片头孢唑啉纸片头孢哌酮(先锋必)纸片头孢曲松纸片头孢噻肟纸片头孢他啶纸片利福平纸片链霉素纸片庆大霉素纸片四环素纸片氯霉素纸片红霉素纸片复方新诺明SMZ/TMP纸片万古霉素纸片环丙沙星纸片洛美沙星纸片克拉霉素纸片左氧氟沙星纸片磷霉素纸片氧氟沙星纸片克林霉素纸片阿莫西林/棒酸纸片丁胺卡那纸片头孢哌酮/舒巴坦纸片(舒普深)诺氟沙星纸片氟罗沙星纸片氨曲南纸片亚胺培南纸片多西环素纸片司帕沙星纸片氨苄西林/舒巴坦纸片阿奇霉素纸片米诺环素纸片美罗培南纸片头孢吡肟纸片头孢西丁纸片哌拉西林/他唑巴坦纸片替卡西林/棒酸纸片呋喃妥因纸片妥布霉素纸片替卡西林纸片替考拉宁纸片头孢唑肟纸片头孢噻吩纸片奈替米星纸片Optochin纸片杆菌肽纸片新生霉素纸片呋喃唑酮纸片多粘菌素B纸片林可霉素纸片阿莫西林纸片罗红霉素纸片头孢美唑纸片交沙霉素纸片头孢克罗纸片头孢克肟纸片美洛西林纸片利奈唑胺纸片莫西沙星纸片头孢硫脒纸片头孢拉定纸片头孢氨苄纸片头孢匹安纸片拉氧头孢纸片头孢匹罗纸片阿洛西林纸片壮观霉素纸片夫西地酸纸片萘啶酸纸片头孢布烯纸片替加环素纸片厄他培南纸片头孢孟多纸片头孢丙烯纸片麦迪霉素纸片X因子鉴定纸片头孢他啶/棒酸纸片头孢噻肟/棒酸纸片庆大霉素纸片羧苄青霉素（羧苄西林）纸片加替沙星纸片卡那霉素纸片甲氧苄啶纸片头孢替坦纸片新霉素纸片土霉素纸片恩诺沙星纸片氟苯尼考纸片氨苄西林/棒酸纸片呋喃唑酮（痢特灵）纸片通用药敏纸片ETEST药敏（国产）康泰通用药敏试剂条细菌药敏试条（E试验法）青霉素药敏试剂条头孢呋辛药敏试条庆大霉素药敏试条头孢吡肟药敏试条红霉素药敏试条头孢唑啉药敏试条左氟沙星药敏试条诺氟沙星药敏试条苯唑西林药敏试条利奈唑胺药敏试条克林霉素药敏试条阿莫西林/棒酸药敏试条头孢他啶药敏试条环丙沙星药敏试条头孢曲松药敏试条头孢噻肟药敏试条克拉霉素药敏试条头孢哌酮/舒巴坦药敏试条头孢哌酮药敏试条洛美沙星药敏试条氧氟沙星药敏试条万古霉素药敏试条亚胺培南药敏试条美罗培南药敏试条氯霉素药敏试条氨苄西林药敏试条丁胺卡那药敏试条氨曲南药敏试条哌拉西林药敏试条司帕沙星药敏试条头孢他啶/棒酸药敏试条利福平药敏试条羧苄西林药敏试条氟罗沙星药敏试条加替沙星药敏试条米诺环素药敏试条卡那霉素药敏试条多西环素药敏试条替卡西林药敏试条四环素药敏试条妥布霉素药敏试条替考拉宁药敏试条呋喃妥因药敏试条阿奇霉素药敏试条头孢西丁药敏试条复方新诺明药敏试条哌拉西林/他唑巴坦药敏试条头孢噻肟/棒酸药敏试条替卡西林/棒酸药敏试条氨苄西林/舒巴坦药敏试条两性霉素B伊曲康唑5-氟胞嘧啶酮康唑氟康唑伏立康唑米卡芬净泊沙康唑阿尼芬净急诊粪便常规检测样本采集管（包含稀释液、清洗液等）胶体金法粪便隐血（FOB）多水平非定值质控品便隐血（FOB）检测试剂6标段ETEST+染液+基础培养基ETEST药敏（国产）安图国产ETEST纸条（各类抗菌素）细菌药敏试条（E试验法）31家两性霉素B(E试验品)氟康唑(E试验品)伏立康唑(E试验品)阿米卡星药敏条阿莫西林药敏条氨苄西林药敏条氨曲南药药敏条苯唑西林药敏条红霉素药敏条（E试验法）环丙沙星药敏条（E试验法）卡泊芬净药敏条（E试验法）克林霉素药敏条（E试验法）利奈唑胺药敏条（E试验法）氯霉素药敏条（E试验法）美罗培南药敏条（E试验法）诺氟沙星药敏条（E试验法）青霉素药敏条（E试验法）庆大霉毒药敏条（E试验法）四环素药敏条（E试验法）头孢呋辛药敏条（E试验法）头孢哌酮舒巴坦药敏条（E试验法）头孢曲松药敏条（E试验法）头孢他啶药敏条（E试验法）头孢唑林药敏条（E试验法）万古霉素药敏条（E试验法）亚胺培南药敏条（E试验法）左氧氟沙星药敏条（E试验法）头孢吡肟药敏条（E试验法）头孢噻肟药敏条（E试验法）甲氧苄啶-磺胺甲恶唑药敏条（E试验法）米诺环素药敏条（E试验法）阿奇霉素药敏条（E试验法）微生物染液等革兰染色液（4×250ml）手工试剂革兰染色液（4×100ml）抗酸染色液（4×250ml）抗酸染色液（3×100ml）鞭毛染色液荚膜染色液芽孢染色液异染颗粒染色液瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)（2×250ml）瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)（2×100ml）瑞氏-吉姆萨染色液(瑞姬氏复合染色液)（4×20ml）瑞氏-吉姆萨染色液网织红细胞染色液（2×100ml）网织红细胞染色液（4×20ml）过氧化酶（ＰＯＸ）染色液铁染色液精子染色液精子稀释液妇科白带涂片染色液苏木素－伊红染色液Ｉ苏木素－伊红染色液II(H-E单一)巴氏染色液Ⅰ巴氏染色液Ⅱ巴氏染色液(巴氏试剂盒)快速革兰氏染色液革兰氏染液-快速法-碘溶液革兰氏染液-快速法-脱色液革兰氏染液-快速法-沙黄溶液革兰氏染液-快速法-龙胆紫液新型隐球菌染色液六胺银染色液乳酸酚棉兰染液真菌免疫荧光显色试剂（II型）微生物基础培养基等手工试剂梅毒螺旋体抗体检测试剂盒（凝集法）微生物基础培养基等手工试剂麦康凯琼脂平板乳酸棉酚蓝染液六胺银染液真菌荧光染液（一步法）抗酸荧光染色液（金胺O法）弱抗酸染色液无菌病毒运输液（用于甲流）志贺氏菌属诊断血清(50种)志贺氏菌属诊断血清(22种)沙门氏菌属诊断血清(60种)沙门氏菌属诊断血清(30种)出血性大肠埃希菌O157诊断血清（供科研用）触酶试剂氧化酶试验试剂MH干粉沙保罗培养基干粉XLD培养基干粉营养肉汤干粉R2A培养基干粉变色硅胶含醛类消毒剂中和培养基（9ml）含酚、醇类消毒剂中和培养基（9ml）含氯、碘类消毒剂中和培养基（9ml）含表面活性剂类消毒剂中和培养基（9ml）含醛类消毒剂中和培养基（50ml）含酚、醇类消毒剂中和培养基（50ml）含氯、碘类消毒剂中和培养基（50ml）含表面活性剂类消毒剂中和培养基（50ml）苛养菌药敏琼脂平板血、肠道菌分隔琼脂平板沙保罗琼脂平板营养肉汤培养基（液体）营养琼脂培养基尿道菌显色平板伊红美兰琼脂平板中国蓝琼脂平板物表测试平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌（麦康凯）分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌（伊红美兰）分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌（中国蓝）分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌﹒肠道菌（SS)分隔琼脂平板血﹒嗜血杆菌分隔琼脂平板GBS运送培养基卵黄琼脂培养基环丝氨酸-头孢西丁-果糖琼脂培养基厌氧血琼脂平板/厌氧苯乙酸琼脂培养基厌氧琼脂培养基庖肉培养基巯基乙酸肉汤培养基耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌检测70cm艰难梭菌显色平板70cm不动杆菌显色培养基支原体培养鉴定计数药敏试剂盒（30孔，12种药敏)葡萄糖肉汤培养基磷酸盐缓冲液（PBSpH7.2)SBG增菌液冷冻管冻存管盒液体菌种保存管复方中和增菌培养基（带棉签)注：有名“物表采样管”含复方中和剂的0.04mol/L磷酸盐缓冲液R2A琼脂培养基(干粉)大豆酪蛋白琼脂培养基(干粉)TGE琼脂平板胰蛋白胨大豆培养基（卵磷脂吐温胰蛋白胨大豆培养基）碱性蛋白胨水培养基Amies采样运送拭子（Amies采样运送培养基含拭子）TSA接触平板样本稀释液中和洗脱液复合中和洗脱液（9ml）复合中和洗脱液（5ml）厌氧指示剂SS琼脂平板MH琼脂培养基哥伦比亚血琼脂平板巧克力琼脂培养基B族链球菌平板专用油镜油含珠菌种保存管（国产）（5颗）含珠菌种保存管（国产）（25颗）病毒采样管（无菌病毒运输液）植绒采样拭子磁珠菌种保存液营养肉汤培养基R2A琼脂培养基（平板）大豆酪蛋白琼脂培养基（平板）半固体琼脂Amies采样运送拭子Cary-blair运送培养基stuart运送培养基弯曲杆菌显色培养基尿培养筛选显色平板沙门氏菌筛选显色平板大肠杆菌显色平板金黄色葡萄球菌显色平板李斯特菌显色平板弧菌显色平板霉菌显色平板O157培养基分枝杆菌菌种保存管含珠菌种保存管（进口）（25颗）脱脂奶粉血琼脂平板念珠菌显色平板耐药菌三联检显色平板真菌快速培养鉴定药敏试剂盒缓冲液（碳青霉烯酶）一次性封闭真菌形态学观察培养基多粘菌素B纸片霍乱弧菌诊断血清01群、0139脑心浸液琼脂GC琼脂平板乙腈甲酸头孢硝噻吩纸片备注：各供应商可选择参投一个或多个标段，但必须对所投标段内全部项目内容进行投标报价，不得缺项、漏项。预算金额：314万元/年。资金性质：自筹资金。项目用途：医用。合同履行期限：2年二、供应商资格要求：1、基本资格条件：符合《政府采购法》第二十二条规定的供应商条件；1.1、提供在中华人民共和国境内注册的营业执照（或事业单位法人证书，或社会团体法人登记证书，或执业许可证）、组织机构代码证和税务登记证复印件【如已办理了多证合一，则仅需提供合证后的营业执照】，如供应商为自然人的需提供自然人身份证明。1.2、提供2020年度的财务报表（至少包括资产负债表、现金流量表和利润表）或具有财务审计资质的单位出具的2020年度财务会计报告或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明（附开户许可证）；2021年以后新成立企业提供成立之日至开标前一月的财务报表（至少包括资产负债表、现金流量表和利润表）或开标日前三个月内基本存款账户银行出具的资信证明（附开户许可证）。1.3、提供2021年以来至少一个月的纳税证明或完税证明（提供增值税、企业所得税至少一种），纳税证明或完税证明上应有代收机构或税务机关的公章或业务专用章。依法免税的供应商应提供相关文件证明。1.4、提供2021年以来至少一个月的社会保障资金缴存单据或社保机构开具的社会保险参保缴费情况证明。依法不需要缴纳社会保障资金的供应商应提供相关文件证明。1.5、提供履行合同所必需的设备和专业技术能力的书面声明。1.6、提供参加政府采购活动前3年内在经营活动中没有重大违法记录的书面声明。2、落实政府采购政策需满足的资格要求：本项目非专门面向中小企业采购。3、特定资格条件：3.1、供应商应授权合法的人员参加投标全过程，其中法定代表人直接参加投标的，须出具法人身份证，并与营业执照上信息一致；法定代表人授权代表参加投标的，须出具法定代表人授权书及授权代表身份证。3.2、投标产品纳入医疗器械（或药品）管理的，须提供供应商有效的医疗器械（或药品）经营许可证或经营备案凭证。3.3、投标产品纳入医疗器械（或药品）管理的，须提供产品有效的医疗器械（或药品）注册证或备案凭证。3.4、若投标产品为进口，供应商须提供有效的完整授权链的产品授权书（授权期限不足2年的须附能够提供持续供货的声明材料，英文授权须提供中文翻译版；制造商直接参与投标的不提供此项）。若投标产品为国产且纳入医疗器械（或药品）管理的，供应商须提供投标产品制造商有效的营业执照和生产许可证。3.5、供应商未被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)以下情形之一：①记录失信被执行人；②重大税收违法案件当事人名单。同时，在中国政府采购网(www.ccgp.gov.cn)“政府采购严重违法失信行为信息记录”中查询没有处于禁止参加政府采购活动的记录名单。3.6、单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商，不得参加同一合同项下的政府采购活动。3.7、本项目不接受联合体投标。三、获取招标文件时间：2022年5月16日至2022年5月20日，每天上午9:00至12:00，下午14:00至17:00。（北京时间，法定节假日除外）地点：线上方式：1）根据陕西省人民政府《关于加强新型冠状病毒感染的肺炎防控工作的通告》要求，本次招标文件采用线上发售，供应商在文件发售期以内将单位介绍信、经办人身份证、联系电话及电子邮箱等资料加盖单位公章的彩色扫描件发送至邮箱591330045@qq.com，并及时联系采购代理机构确认（联系人：李工18220810739），获取缴费方式。2）招标文件售价人民币300元/标段，售后不退。采购代理机构在收到邮件并确认文件收费到账后，通过邮箱向供应商发售招标文件，请及时查收。3）受疫情影响，本项目投标文件递交截止时间及开标时间和地点可能会变更，具体另行通知。售价：￥300.0元，本公告包含的招标文件售价总和。四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点提交投标文件截止时间：2022年6月7日09点30分（北京时间）开标时间：2022年6月7日09点30分（北京时间）地点：西安市新城区长乐中路38号金花新都汇A座7层会议室五、公告期限自本公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜需要落实的政府采购政策：1、《三部门联合发布关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》（财库〔2017〕141号）；2、《财政部司法部关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知》（财库〔2014〕68号）；3、《关于政府采购优先购买福利性企业产品和服务的意见》（陕民发（2015）1号）；4、关于印发《政府采购促进中小企业发展管理办法》的通知财库〔2020〕46号；5、《关于调整优化节能产品、环境标志产品政府采购执行机制的通知》（财库[2019]9号）；6、《环境标志产品政府采购实施的意见》（财库[2006]90号）；7、《财政部国务院扶贫办关于运用政府采购政策支持脱贫攻坚的通知》（财库〔2019〕27号）。七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名称：西安交通大学第二附属医院地址：西安市新城区西五路联系方式：冯女士029-876798612.采购代理机构信息名称：正大鹏安建设项目管理有限公司地址：西安市新城区长乐中路38号金花新都汇A座12层1201室联系方式：李工18220810739，杨工159029482903.项目联系方式项目联系人：李工电话：18220810739

4月9日消息，央视记者微博今日爆料：不要吃老酸奶和果冻。央视主持人赵普(微博) 称：“来自调查记者短信：不要吃老酸奶(固体形态)和果冻，内幕很可怕”。而朱朱文强(微博)微博称：“央视一哥们说，以后别吃果冻和酸奶，问为啥，他比喻说，哪天你扔了双破皮鞋，转眼就进你们肚子了。这哥们说，这才是今年315晚会重头，可惜没播”。媒体人微博网名”落魄书生周筱赟(微博)“对此称：”不用这么神秘兮兮啦。所谓老酸奶，就是更加浓稠，其实是大量添加工业明胶。工业明胶，就是用垃圾里面回收的破烂皮革之类做出来的。果冻更是如此。这本该是常识。“ 　　网友评论： 　　一财网在以上微博评论中看到，有网友猜测：”跟头发做酱油、臭皮熬阿胶一个道理吧 ?或者是塑化剂 ? “ 　　网友：”我是学食品营养与检测的，也经常会与食品添加剂打交道，像目前国内的果饮基本都是用添加剂调制而成，比如营养快线，只需少量的牛奶，按顺序正确加入添加剂，就能马上调制而出。还有一块小小的面包，按照最新国标(GB2760-2011)最多可添加二十种的添加剂。“ 　　网友：”看到评论里有人说是用廉价的工业明胶代替食用明胶。百度了一下，发现使用明胶的食物多如牛毛，不过查了下工业明胶和食用明胶的价格差距并不大，差价利润绝对不值得大企业冒险，估计还有内幕。“ 　　究竟何为老酸奶? 　　不知道什么时候开始，各超市的酸奶柜台突然被铺天盖地的“老酸奶”所占据。几个月以来，许多朋友都问我：老酸奶是不是最天然的酸奶?是不是营养价值比其他酸奶高?是不是有特殊保健作用?是不是比其他酸奶安全?是不是不含添加剂特别适合孩子吃? 　　真正的老酸奶是怎么制作的? 　　其实，所谓的“老酸奶”，是一个传统制作酸奶产品的概念，但已经变味了。各地都有自己的 “老酸奶”，也就是过去传统制作的凝固型酸奶。这种酸奶不是黏稠的液态，而是基本上呈现固态。这种固态不是加了任何凝固剂，而是牛奶蛋白质的一种特殊凝胶状态。把消过毒的牛奶、糖和菌种加到干净的容器当中，保温发酵几个小时，牛奶就会变成固态，每个自制酸奶的人都知道。这种蛋白质凝胶状态很脆弱，只要用力搅拌，就能让看似坚实的凝胶重新变成液态的奶。能伸展到脚踝处，那么你需要更多相关锻炼。 　　普通酸奶是老酸奶加了增稠剂等 　　在我们小时候，各地的酸奶都是这种固态的产品，但随着奶制品产量的增大，这种产品慢慢地退出了市场。这是因为凝固型的酸奶在运输中容易因为摇晃、震荡等机械力量影响口感，消费者看到的是破碎的冻，甚至是变成液态的酸奶，肯定会不满意。 　　同时，因为在固态酸奶没法加入果汁、果粒之类配料，为了便于运输和销售，人们就加入一些增稠剂，把大罐发酵好的酸奶凝冻慢慢搅碎，让它变成黏稠的半流体。这就是市面上占优势的酸奶产品状态。 　　如果少加增稠剂，酸奶产品往往会呈现液态，只不过比牛奶略浓一些，有些消费者以为酸奶“内容不够”而产生嫌弃心情，其实这是很正常的状态。能伸展到脚踝处，那么你需要更多相关锻炼。 　　如今的“老酸奶”添加了凝胶剂 　　但是，喝惯了这种黏稠的酸奶，人们也有点腻了。这时候，新产品“老酸奶”让人们眼前一亮。它以传统产品的面目出现，但为了避免运输中变稀的麻烦，添加了凝胶剂，这样，无论怎么震荡都不会变成液态，运输和销售非常方便。 　　普通的牛奶原料，加明胶、琼脂、卡拉胶等等植物胶，就可以制成这种凝冻状态。我的实验室里就曾经做过类似的冻，而且口感效果比某些市售产品还理想，只不过没有把这种配方变成产品。 　　所以，严格来说，市面上所谓的“老酸奶”产品，应当叫做“酸奶冻”比较确切。能伸展到脚踝处，那么你需要更多相关锻炼。 　　巨额的暴利驱使企业铤而走险 非法生产食用明胶 　　据北青网消息，中国明胶协会理事长王敬忠向记者算了一笔账：1吨正规食用明胶的原材料，价格高达2000~3000元，而一般的皮革下脚料，1吨仅需要 100~200元。但是，进入市场后，1吨食用明胶的收购价都在2万~3万元左右。“目前，国内生产食用明胶的不法小厂家有100多家，然而取得生产许可证的只有20多家。不仅仅是在山东，河北、江浙一带都是这些假冒食用明胶的根据地。” 　　王敬忠说，在当地工厂，工人们都会将这些皮革废料叫做“蓝皮”、“白皮”。这些皮子全是从皮鞋、皮衣或制鼓的皮革上削下来的废料，拉回工厂时，大都是成碎末的皮子，还搀和着大量的泥块。“但是制成后的明胶，透明无味。消费者根本无法将正规的食用明胶和废皮革做成的明胶区分开来。” 　　中国农业大学教授陈敏称，制革厂在鞣制皮革时，要使用一些含有金属元素铬的化学制剂。鞣制、整理后才舍弃一些碎皮，这些碎皮就含有对人体有害的金属铬。金属铬会破坏人体骨骼以及造血干细胞，长期食用会导致骨质疏松，严重的会患上癌症。铬对人体健康的这种危害是一个缓慢的过程，一般在2年以上才会显现出来。 　　专家曾表示：只要不超标都可以 　　早在2011年6月间，有网友微博爆料说，以粘稠见称的“老酸奶”是很多人的最爱。但所谓“老酸奶”其实是由一种“凝胶剂”制成，虽然价格是普通酸奶(乳酪)的一倍还多，但并没有更多营养，而且多食无益。为此，该网友调侃道：哥喝的不是“老酸奶”，是凝胶剂! 　　对此当时中国西部乳业发展协会秘书长魏荣禄接受媒体指出，果胶、明胶都属于稳定剂，是国家允许添加在奶制品中的，只要不超过标准都是正常的。 　　“搬运过程中的震动可能会使老酸奶产生乳清分离，影响其品质和口感。所以老酸奶中加入了适量的稳定剂”。魏荣禄说，过去的老酸奶在发酵后很短时间内就被饮用，因而只用添加食糖，不需要添加稳定剂。 　　“老酸奶并不是越浓越好，”魏荣禄表示，过于浓稠的老酸奶中可能加入了琼脂等增稠剂，营养价值并不会随着浓稠程度的提高而增加。

华粤瑞科科学器材有限公司成为ThermoFisher旗下Oxoid&Remel微生物实验室产品2013年全国总代理。 Oxoid 公司是全球领先的微生物培养和诊断产品的供应商之一。Oxoid最初起源于欧洲，其历史可以追溯到微生物科学开始的年代。自1860年Justus von Liebig 首次提出&ldquo Extractum carnis&rdquo (肉精) 至今，Oxoid已经是世界微生物学领域的重要组成部分。Oxoid公司一直遵循着&ldquo 致力于微生物&rdquo 的宗旨，其产品涵盖整个微生物科学领域，为临床检验、工业生产领域和基础学术研究的微生物诊断提供优质的解决方案。 Oxoid公司在全球多个地方设有制造厂，如加拿大、德国、澳大利亚等，2006年在中国北京设立了一条新的微生物制成培养基生产线，这条生产线的投产是Oxoid历史上首次在亚洲地区进行直接生产。它的运营使中国的微生物工作者在微生物培养基产品上可以与世界标准接轨，并大幅度减少了微生物实验室操作的工作量，有效地提高了微生物实验室检验的标准化程度。 2006年Oxoid正式成为全球科学服务领域的领导者Thermo Scientific旗下的品牌之一，与另一微生物品牌Remel组成微生物产品部，2011年又收购另一品牌Trek，资源整合优化后，为全球的微生物工作者提供更全面的产品与更专业的服务！ 2013年2月，ThermoFisher 正式授权华粤瑞科科学器材有限公司成为其中国地区Oxoid&Remel品牌总代理商，为其工业、科研以及政府单位提供优质的产品和服务。 华粤瑞科科学器材有限公司于2009年由华粤企业集团广州市华粤行仪器有限公司试剂耗材部独立而成为华粤企业集团子公司，主要为生命科学领域的广大研究者、生物制药及食品饮料的企业客户提供高品质的产品与服务。目前我们是Oxoid&Remel，Corning，Merck，Kimble，greiner，Saint-gobain，Wheaton等生产厂家的总代理和一级代理，拥有自主Reacon品牌，成立自己的生产基地和研发中心。 微生物实验室整体解决方案供应商----我们为全国各地的制药/日化/食品工业企业、CDC、CIQ、SFDA等政府机构以及第三方检测实验室的提供完整的微生物实验室解决方案。 Oxoid&Remel产品线： 培养基原材料：我们为培养基生产商、发酵工业客户以及广大科研院校客户提供全套培养基原材料产品。如：酵母浸出物（LP0021）、胰蛋白胨（LP0042）、植物蛋白胨（VG0100）、酪蛋白水解物（LP0041）、琼脂糖（LP0028）等。 干粉培养基：我们为全球制药/食品/日化工业客户、政府科研客户、第三方检测客户提供符合各类标准配方的干粉培养基产品。如：胰蛋白胨大豆琼脂（CM0131）、营养琼脂（CM0003)、哥伦比亚血琼脂（CM0331)、平板计数琼脂（CM0325）等。成品平板培养基：我们为全球洁净空间环境控制客户、各类微生物实验室用户，提供制成的成品平板培养基产品。如：胰蛋白胨大豆琼脂平板（PO0480B）、胰蛋白胨大豆琼脂接触碟（PO0262D）、沙保氏葡萄糖琼脂平板（PO0410B）等 厌氧环境生成系统：我们专为需要厌氧或微需氧环境培养的微生物，生产提供Oxoid气体生成系统。如：2.5L厌氧产气袋（AN0025A）、2.5L厌氧产气罐（AG0025A）、厌氧指示剂刃天青（BR0055B） RapID快速生化鉴定板条：我们为微生物生化鉴定提供全球最快速、最准确的解决方案。如：肠杆菌鉴定板条RapID One（R8311006），4小时内鉴定出超过70种重要的氧化酶阴性、革兰氏阴性细菌。 ATCC标准菌株：我们为全球微生物实验室，提供ATCC授权的Remel公司生产商业化包装ATCC标准菌株产品。产品操作方便，可溯源，可定性，可定量。 空气浮游菌采样仪：我们为制药工业环境监控部门，提供专业的ThermoFisher品牌空气浮游菌采样仪。 Oxoid&Remel产品将为华粤瑞科科学器材有限公司在中国市场的迅猛发展添砖加瓦，我们将致力于提供更全面完整的行业解决方案。我们将在2013年为中国客户创造更有专业水准的服务，取得更卓越的成就。 欢迎全国各类用户、经销商，来电咨询。 华粤瑞科科学器材有限公司 http://www.huayueco.com.cn/ 联系方式： Tel:020-34821111 Fax:020-34820098 广州市华粤瑞科科学器材有限公司 广州市番禺区兴南大道483号华粤大厦 邮编:511442

p 　　摘 要：随着抗体药物上游大规模高效培养技术的飞速发展，抗体蛋白的表达浓度有了大幅度的提高，这给下游纯化工艺带来了巨大的压力。为了突破下游技术瓶颈，整个世界生物制药产业都加大了对下游技术的革新力度，近年来也取得了丰硕的成果。本文就抗体药物的纯化策略、最新技术进展以及技术应用等方面做一个调研，以期能对本部门的相关研究工作有所助益。 /p p 　　关键词：抗体 下游工艺 纯化 技术进展 /p p 　　自1997年来，全球抗体药物市场经历了一个快速发展的阶段，总销售额从1997年的3.1亿美元增长到2008年的400亿美元，复合增长率高达55%，而且增长势头还在持续 [1]。国际上通常把年销售额超过10 亿美元的品牌药称为“重磅炸弹”药物，很大一部分抗体药物都已迈入“重磅炸弹”行列。在2008年全球15大药品中，抗体药物占据了1/3，且排名仍在上升，这意味着几乎每种单抗药物的成功开发都代表着巨大的市场前景[2]。受益于此，全球主要的生物制药公司都获利颇丰，可见抗体药物具有巨大的经济价值和社会价值。 /p p 　　抗体药物生产技术门槛高，需要掌握抗体筛选、抗体重组、高表达细胞株构建和大规模悬浮培养等核心技术，其下游关键技术是长期以来的薄弱之处。哺乳动物细胞表达系统具有活性高、稳定性好等优点，已成为抗体等生物制品最重要的系统之一，为抗体药物的产业化提供可能。目前，国际上该项技术发展较快，已趋成熟，以默克公司为代表的流加培养生产规模达10000L以上，以贝尔公司为代表的灌流培养生产规模达200L以上，蛋白表达浓度为1-10g/L。我国在该技术领域起步较晚，基础较差，但近年来经过努力，已经实现了该项技术的突破，流加培养规模达500L以上，灌流培养规模达100L以上，蛋白表达浓度为0.2-2g/L[2]。 /p p 　　随着动物细胞表达抗体产品大规模高效培养技术的快速发展，下游纯化工艺越来越成为抗体药物生产中主要的技术瓶颈[3]。因此，如何提高下游工艺的生产效率就成为了抗体药物研发必须解决的问题。本文就国际上高表达抗体蛋白下游工艺的研究进展做一个调研，使本人及同事们能了解国际上的研究成果和发展趋势，以期能对本部门的相关研究工作有所助益。 /p p 　　1. 抗体药物纯化策略 /p p 　　每个单抗的等电点、电荷密度、疏水性、糖基化程度等生化性质各不相同。选择单抗的纯化方法，既要了解它们的共性，又要了解它们的个性，从而制定相应的纯化策略(表1)。 /p p 　　1.1 抗体药物下游工艺一般策略 /p p 　　CHO和NSO等哺乳动物细胞表达系统主要用来生产治疗性单抗，临床剂量大(数十至几百毫克/dose)，批产量达公斤级，纯度要求极高。层析技术是抗体分离纯化的核心技术，一般采用经典的三步纯化策略：粗纯-中间纯化-精细纯化。粗纯的主要目的是捕获、浓缩和稳定样品，约80%的下游工艺用Protein A亲和层析进行快速捕获，一步即可达到95%以上的纯度。治疗用抗体一般使用动物细胞大规模高密度无血清悬浮培养进行生产，不仅对终产品的单体含量有严格的规定，还必须去除各种潜在的杂质以满足药品安全的要求，因此在粗纯之后还需要进行中间纯化和精细纯化，去除宿主细胞蛋白(HCP)、宿主DNA、抗体聚集体和变体等，常用的层析技术有离子交换、凝胶过滤、疏水层析等[4]。 /p p 　　2003 年初，中国SFDA下属的中国药品与生物制品检定所(NICPBP)公布了《人用单克隆抗体质量控制技术指导原则》[5]。生产者除须保证最终抗体产品纯度，还需要验证所用的纯化方法能有效对潜在的污染物，如HCP、免疫球蛋白、宿主DNA、用于生产腹水抗体的刺激物、内毒素、培养液成分、层析凝胶析出成分(脱落的Protein A配基)进行去除 并能有效的去除/灭活病毒。也就是说，在设计下游工艺时，需多角度综合考虑抗体本身的性质、抗体的来源、发酵培养技术、发酵液蛋白浓度、宿主杂质、抗体批间的差异、潜在污染及病毒灭活等问题。此外，治疗用抗体在生产和纯化过程中还会由于糖基化程度不同、蛋白酶作用、以及脱氨基和脱酰胺等反应而产生带电性质不同的多种抗体变体 另外，抗体氧化、聚集和片段化也是常见的降解途径[4]。针对这些变体，一方面，在表达和纯化过程中选择参数(如pH、盐浓度等)时要充分考虑到目标抗体的稳定性 另一方面，应控制细胞培养的条件(DO、渗透压等)，同时加快下游分离纯化的速度，最大程度上避免抗体在纯化过程中产生变体，从而保证终产品的均一性和高的比活，也有利于控制终产品的内毒素水平。 /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 14px " 　　表1 单抗特性及纯化策略 /span /p p style=" text-align: center " img title=" 11111.png" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/e2693d21-e711-4b42-bb9c-53b5b7848f82.jpg" / /p p style=" text-align: center " img title=" 2222.png" style=" float: none " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/5035b8d3-81f1-4e6b-96d7-3e12b347a344.jpg" / /p p 　　1.2 新型的两步层析技术与纯化工艺整合 /p p 　　近年来，GE Healthcare公司开发出了新型的亲和捕获介质Mabselect SuRe和混合作用模式的强阴离子交换介质Capto adhere(这两种介质的主要特点将在下文详细介绍)。凭借着MabSelect SuRe的卓越性能以及Capto adhere的复合多除杂功能，使得抗体纯化工艺由经典的三步层析转变为两步层析得以实现。这种新型的两步层析技术的工艺流程是：在细胞培养表达以后，采用0.2-0.45μm的中空纤维膜技术进行澄清，然后用MabSelect SuRe捕获，酸性条件洗脱后直接pH 4.0 病毒灭活，澄清过滤后穿透方式上Capto adhere，这一步离子交换之前或之后会有一步20nm纳滤去病毒，最后50K膜超滤浓缩和洗滤进行缓冲液置换。整个工艺如图1,这一工艺平台已经尝试过多个不同的抗体并取得成功(表2),同时很多实验表明这一工艺平台适合多数抗体的生产。有些抗体如果通过优化结果不甚满意, 通过增加一步Capto Q也基本上可以达到要求或是采用Capto S-Capto Q(这两种介质的主要特点将在下文详细介绍)的工艺步骤[4]。 /p p style=" text-align: center " 　 img width=" 450" height=" 374" title=" 1.jpg" style=" width: 435px height: 258px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/401b7d6a-ad5b-4c9a-9eee-2376ebef51fa.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　 span style=" font-size: 14px " 图1　抗体生产两步层析法主导的抗体纯化最新工艺[6] /span /p p 　　Mabselect SuRe可以达到99%以上的抗体纯度，亲和洗脱峰使用Capto adhere的流穿模式进行精纯：使抗体分子流穿而聚合体、HCP、脱落的Protein A配基等杂质结合在柱上加以去除。这样仅用两步层析就可以得到符合药用级质量要求的高纯度抗体产品，大大缩短了工艺时间，提高了生产效率，同时增加了收率，降低了生产成本。 /p p style=" text-align: center " img width=" 599" height=" 164" title=" 2.jpg" style=" width: 580px height: 159px " src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/ce7191a4-3940-4315-8122-856bbbadbc24.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　　 span style=" font-size: 14px " 表2 两步法用于多种抗体的纯化结果(括号内数值为纯化前)[4] /span /p p 　　2. 抗体药物下游技术最新研究进展 /p p 　　2.1 样品澄清 /p p 　　2.1.1 中空纤维膜过滤技术 /p p 　　中空纤维膜是近年来发展起来的新型切向流膜分离技术,与盒式膜包相比,中空纤维膜可以直接处理高固含量和高黏度的粗料液,具有容尘量高、速度快、剪切力小、成本低等优点。目前,中空纤维微滤膜已经广泛用于生物制药的各个领域[7]。 /p p 　　对于动物细胞培养液,可以将高密度的培养液直接用中空纤维微滤膜(0.22或0.45μm)进行澄清,而无需事先经过离心和预过滤,步骤少,速度快,收率高,成本低。和离心机比较,具有极高的澄清度,因此中空纤维澄清后的细胞培养液可直接Protein A亲和层析进行纯化。 /p p 　　中空纤维膜澄清细胞培养液的优势有：(1)步骤少,速度快,收率更高(通过有效的洗滤可使样品收率稳定而且高于离心机)，同时最大程度上避免抗体降解而影响产品均一性。(2)成本低：不仅省去了连续流高速离心机昂贵的前期投资和运转的日常维护成本，还节省了离心后死端过滤的成本。中空纤维膜物理化学性质稳定，可以通过清洗而反复使用，成本低廉。(3)有利于内毒素控制：中空纤维膜稳定的化学性质可以耐受1M NaOH 40-50℃和氧化剂NaClO的清洗，从而有效去除内毒素 封闭的系统，也更有利于生产过程中内毒素的控制。此外，大部分中空纤维滤柱还可以进行高压灭菌。(4)低剪切力：中空纤维采用低剪切力的开放式流道，不仅可以处理含有高固含量的料液，还避免了蛋白质活性分子在高剪切力下的聚集变性，有利于抗体的稳定。(5)工艺耐用性强：相比死端过滤，中空纤维澄清具有很好的操作灵活性和耐用性，可以通过调整操作参数(流速、TMP)处理不同性质的细胞培养液。(6)易于线性放大：通过维持切向流速、TMP 等参数恒定，方便地进行线性放大，生产规模的处理量可达几千升料液，目前国内销售最大的中空纤维膜过滤系统已达400m2且生产稳定[8]。 /p p 　　2.1.2 深层过滤介质 /p p 　　深层过滤采用两种机制去除颗粒。首先是拦截，颗粒由于自身的物理尺寸在过滤器内被截留。它们可能被困在过滤器表面，因此根本没有进入基质，或在通过深层过滤基质的曲径时被俘获(筛选)。颗粒拦截伴随过滤器压差增高，因为它的基质被不断累积的颗粒堵塞。第二种机制是吸附，比过滤器拦截精度更小的颗粒能够从流体中被吸附去除。这种机制是通过深层过滤基质上的净电荷实现的[26]。 /p p 　　目前应用比较广泛的双层膜深层过滤介质有Millipore公司的Millistak+HC、Sartorius公司的Sartobran-P、Pall公司的Supradisc HP等。Millistak+HC深层过滤介质由纤维素和无机助滤剂(聚丙稀粘合的硅藻土)组成，包裹在聚丙烯外壳内 它由两层全厚度深层滤板(上游一层粗过滤和下游一层精细过滤)组成，附带一层RW01纤维素膜终过滤。Sartobran-P深层过滤介质由醋酸纤维素滤膜、聚丙烯外壳和支撑层组成，加强型的滤膜有良好的机械强度，有利于在反复的过滤和灭菌过程中保持完好无损 采用了折叠膜，在体积小巧的同时还保证了超大的过滤面积。Supradisc HP深层过滤介质由纤维素、硅藻土、带正电荷树脂和聚丙烯组成 也由两层全厚度深层滤板(上游一层粗过滤和下游一层精细过滤)组成。 /p p 　　2.2最新抗体捕获技术 /p p 　　2.2.1 MabSelect介质 /p p 　　MabSelect是第一个使用高流速琼脂糖凝胶作为骨架的新型Protein A层析介质，专为大规模抗体纯化而设计，适合快速高效的进行抗体生产和放大，已经成为单抗纯化和放大的标准介质。 /p p 　　MabSelect的特点有：(1)更高的流速和动态载量：Protein A经基因工程改造，C端含一个半胱氨酸，形成一个定向的硫酯键，同时增加了对IgG的有效结合。Protein A和凝胶偶联时采用了全新的单点偶联工艺，降低了空间位阻，因此可以在使用更高流速的条件下增加动态载量：在线形流速为500cm/hr和柱床高度为20cm(停留时间2.4min)的条件下，每毫升MabSelect的动态载量可以达到& gt 30mg IgG。(2)更低的非特异性吸附，抗体纯度更高：Mabselect介质高度亲水性的琼脂糖骨架最大程度上降低了非特异性吸附，使得洗脱峰中杂蛋白和DNA更少，有利于后期抗体的精细纯化。著名的抗体生产商IDEC公司以及R.Hahn的研究显示，Mabselect对CHO细胞HCP的吸附比其它Protein A介质低7倍[9-10]。R.L.Fahrner等的研究显示，Mabselect所得抗体的DNA残留量比其它Protein A介质低30%[11]。(3)更低的Protein A脱落：MabSelect由于通过新型环氧共价交联技术，Protein A的脱落比其它同类介质低，这不仅有利于抗体纯化，还延长了介质的使用寿命，降低了生产成本。(4)更易于工艺的线性放大：通过实验室条件的优化，MabSelect 可以在保持线性流速和上样比例等参数不变的条件下，通过增加柱直径进行线性放大。(5)MabSelect 易于清洗与除菌，寿命更长、更经济：在长期连续的生产中，有效的在位清洗(CIP)有助于延长介质使用寿命，但一般的Protein A介质往往不能耐受NaOH，只能使用高浓度的尿素或盐酸胍进行清洗，效果远不如NaOH且成本非常高。而MabSelect的CIP和除菌程序简单，用很常规、经济的试剂如50mM NaOH+1M NaCl或50mM NaOH+0.5M Na2SO4就可以有效去除沉淀和变性物质 用非离子去污剂或酒精可以去除通过疏水作用结合的物质 用0.1M醋酸和20%酒精可以在位灭菌(SIP)。经测试，Mabselect配合CIP(50mMNaOH+1M NaCl)纯化三百次后，抗体产品纯度与收率不变[12]。 /p p 　　2.2.2 MabSelect Xtra介质 /p p 　　Mabselect Xtra介质是在Mabselect介质的基础上优化而来，是目前市场上所有的商品化Protein A介质中载量最高的亲和层析介质之一。它除了具有MabSelect介质的全部特点外，还具有载量最高和非特异性吸附更低的特点。 /p p 　　Mabselect Xtra介质使用孔径更大的多孔高流速琼脂糖作为骨架，同时减小介质粒径。这样不仅增加了比表面积和配基密度，还降低了传质阻力，从而有效的增加了动态载量。其动态载量超过41mg/ml，在工艺生产过程中可以有效减少层析柱的体积，从而降低生产成本。R.Hahn的研究显示，Mabselect Xtra对CHO细胞HCP的吸附比其它Protein A介质更是低了近10倍[13]。 /p p 　　2.2.3 MabSelect SuRe介质 /p p 　　MabSelect SuRe介质也是在Mabselect介质的基础上优化而来，是目前市场上唯一耐强碱的Protein A亲和层析介质，寿命最长，稳定性最好[10]。它除了具有MabSelect介质的全部特点外，还具有以下特点：(1)可以耐受0.1-0.5M NaOH：MabSelectSuRe具有不同于其它Protein A介质的同型四聚体配基-SuRe配基，即使在强碱条件下也不易变性或脱落，可以用高达0.5M NaOH进行CIP和SIP，能有效去除沉淀和变性物质，大大降低了抗体产品被内毒素污染和批间交叉污染的风险，有利于延长介质使用寿命，同时还大大降低了CIP和SIP的成本。(2)更温和的洗脱，避免抗体聚集，提高收率：同型四聚体配基避免了不同配基与抗体Fc段亲和性的差异，也消除了某些域对Fab段的亲和作用，使得洗脱条件更加均一而温和。Mabselect SuRe介质可以用更高的pH进行洗脱，有效避免了抗体在低pH下的聚集，产品纯度和均一性更高，浊度也更低[14]。(3)不同抗体洗脱所需pH差异小：由于消除了对抗体Fab段的亲和作用，使得同一种属亚型的不同抗体分子洗脱所需的条件更接近，有利于平台技术的建立，进一步降低了不同的抗体分离纯化工艺的研发成本。(4)SuRe 配基稳定性更好：SuRe配基对碱和蛋白酶更稳定，纯化过程中脱落更少(& lt 10ppm)，有利于后期脱落配基的进一步去除。 /p p 　　2.2.4 ProSep-vA Ultra介质 /p p 　　ProSep-vA Ultra介质是将自然界非动物性来源的Protein A交联于700Å 的多孔性玻璃珠骨架上，是刚性和不可压缩的介质。ProSep-vA Ultra介质具有如下特点：低反压性 不收缩、不溶胀 高动态载量 极低的Protein A脱落 高重复使用性，标准化的清洗和除菌操作[27]。 /p p 　　2.2.5 ProSep Ultra Plus介质 /p p 　　ProSep Ultra Plus介质是在ProSep-vA Ultra介质基础上优化而来，也是目前市场上所有的商品化Protein A介质中载量最高的亲和层析介质之一。它除了具有ProSep-vA Ultra介质的全部特点外，还具有载量最高、纯化效率更高、工艺更易于放大、成本更低等特点[28]。 /p p 　　2.2.6 MEP Hypercel介质 /p p 　　MEP Hypercel复合作用模式介质是一种灵活的层析介质设计，也称之为疏水电荷诱导层析(HCIC)，用于捕获和纯化从实验室到生产规模的抗体和各种重组蛋白。MEP Hypercel介质由一个独特的连接4-巯基乙基吡啶(4-MEP)的刚性纤维素骨架组成。纤维素骨架赋予高孔隙率、化学稳定性和低非特异性吸附。平均直径80-100μm，在低反压下有优良的流速特性。MEP Hypercel介质在大规模使用时具有显著优势，基于它的配基结构，可选择性地捕获免疫球蛋白。组合其它传统的方法如离子交换、疏水作用，甚至用在Protein A之后从不同的料液中直接捕获或中度纯化抗体，以增强对宿主DNA、HCP和聚合体的清除。MEP Hypercel介质有助于建立一个简化的工艺流程，节省操作步骤(例如洗滤、超滤等) 预计有更长的使用寿命，因为它可以耐受苛刻的CIP方法(0.5-1M NaOH，30-60分钟接触时间)，而所有因素都有利于降低成本[29]。 /p p 　　2.3最新精细纯化技术 /p p 　　2.3.1 CaptoFamily系列介质 /p p 　　新型的Capto S，Q系列介质是以高流速琼脂糖为骨架，同时交联了非常“柔软”的葡聚糖链，这样不仅增加了比表面积，同时降低了传质阻力和空间位阻，使得介质在高流速下的动态载量大大增加，有利于提高生产效率，降低成本。 /p p 　　Capto S，Q系列介质可以装填在直径60cm的工业层析柱中使用高达500cm/h 的流速进行纯化(柱高30cm)。这样不仅有利于工艺放大后大规模层析柱的填装，还大大提高了生产效率，每步层析更短的操作时间也有效避免了抗体分子在分离纯化过程中产生各种变体和聚合体，使得收率更好，终产品的活性更高、性质更均一。 /p p 　　2.3.2 Captoadhere介质 /p p 　　为了进一步减少抗体分离纯化步骤，提高特定杂质的去除效率，以满足日益增长的治疗用抗体的生产需要，2007 年初，GE Healthcare公司推出了新型复合作用模式的强阴离子交换介质：Capto adhere介质。Capto adher介质专为治疗用抗体的分离纯化而设计，其配基综合了阴离子交换、氢键和疏水等多种复杂的作用方式，因此对于抗体的聚合体具有非常独特而高效的去除能力。此外，通过有效的实验设计(DoE)，流穿模式的Capto adher介质还可以同时有效去除脱落的Protein A配基、HCP、宿主DNA、内毒素和潜在的病毒，并使得结合MabSelect SuRe的抗体两步层析纯化工艺成为现实(表3)。Capto adhere还具有很强的病毒去除能力，如MVM病毒的去除能力可达5.9个Log。目前，新型的两步法抗体层析纯化工艺已经被国内外诸多知名药企广泛用于多种抗体的分离纯化，各项指标均符合治疗用抗体的要求。Capto adher层析还可以和阴离子交换(Capto Q)和疏水层析等结合使用，以达到更高的质量要求[15]。 /p p style=" text-align: center " 　　 img title=" 3.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/4aa1c980-c9be-44e9-82b5-899ba9f7eec9.jpg" / /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 14px " 表3 两步层析纯化工艺对污染物的去除效果[15] /span /p p 　　2.3.3膜层析技术 /p p 　　PALL Life Science公司自10余年前颠覆性地开发出独一无二的层析产品-Mustang膜层析系列产品后，经过不断地技术改造，于近年推出全新Mustang Q XT家族，扩展了膜层析工艺放大产品线。膜层析技术，相对于传统的柱层析，无需层析填料和层析柱等复杂构件，直接通过膜式过滤器，经过简单的过滤环节即可达到纯化目的。Mustang Q以16层超级打褶的聚醚砜过滤膜作为基架，上面偶联了季胺基等功能基团，可以使生物分子流经的时候与功能位点迅速结合，具有高流速和高动态载量等优点。 /p p 　　Sartorius Stedim公司也开发出了一整套膜层析技术，包括Sartobind S,Q,C和D离子交换、Sartobind IDA(亚氨基二乙酸)金属螯合、Sartobind醛、Sartobind环氧基和Sartobind Protein A(重组)等膜层析系列产品。Sartobind在很多蛋白和病毒纯化应用中可以取代传统耗时、繁琐的层析步骤。膜吸附器的快速纯化特点使蛋白分离可以在高流速下获得高收率，较传统柱层析流速最高能提高100倍，达到20-40 CV/min。传统颗粒胶95%以上的结合位点集中在颗粒胶内部。Sartobind膜层析的结合位点是均一地交联到交叉偶联的增强纤维素骨架内0.5-1μm厚的薄层上。大孔结构和快速吸附结合特性使膜吸附器可以忽略扩散时间因素。同时多微孔膜结构不存在传统颗粒胶的孔内扩散问题。在对流情况下，流动相的分子运动只由泵压力决定。因此，膜吸附器具有操作周期极短、流速和处理能力极高的特点[30]。 /p p 　　与离子交换柱层析相比，离子交换膜层析技术已经被证明利用高动态结合能力吸附大量的生物分子，如病毒、HCP和宿主DNA。最近，阴离子交换膜层析技术已经被作为柱层析技术的替代技术用于Protein A亲和捕获后的mAb中微量污染物的去除[16]。 /p p 　　2.4终产品的浓缩洗滤 /p p 　　多维纯化得到的洗脱峰可以用Kvick Lab/Process盒式膜包进行快速浓缩和缓冲液置换。Kvick盒式膜包的优点有：(1)无热原：很多时候，仅用0.5M NaOH 清洗难以彻底去除膜表面的热原。Kvick盒式膜包化学性质非常稳定，可以使用1M NaOH在40-50℃下进行彻底的SIP/CIP，避免最终超滤浓缩时引入热原而影响产品质量。(2)孔径均一、速度快：Kvick盒式膜包孔径更均一，甚至可以使用50-100K的膜包进行抗体浓缩而不漏过，速度更快，大大节省了操作时间。(3)易于线性放大：通过保持流速、TMP等参数恒定，可以直接线性放大到生产规模。 /p p 　　Amicon Ultra系列超滤离心管可以用来进行抗体的快速浓缩、脱盐及缓冲液置换。它具有如下特点：(1)效率高：一步法离心达到25到80倍浓缩。(2)节省时间：垂直结构的膜，避免堵膜，减少浓差极化，可以用超快离心速度极短时间完成 最少10分钟即可完成浓缩、脱盐或缓冲液置换。(3)收率高：独特的反转离心设计，有利于取得最大回收率且避免了人为移液误差 低吸附滤膜和聚丙烯内壳，使回收率高达90%以上。(4)不漏液、无损失：100%完整性测试确保不漏液 独特的死体积设计避免过度离心至干，没有样品损失。(5)广泛的化学相容性：与广泛的溶剂兼容，适用于pH1-pH9，热封膜杜绝了粘合剂和下游溶出物污染。 /p p 　　Vivaspin系列超滤离心管同样是进行蛋白质快速浓缩和缓冲液置换的常用产品。获得专利的垂直膜配合狭长的流道设计，有效地避免滤膜堵塞，提高浓缩速度 同时在浓缩管底部设计有死端结构，确保即使离心时间过长也不会发生样品被甩干的现象。Vivaspin可灵活选用三种不同材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维和Hydrosart。它的另一个特点是有两种回收浓缩液的方法，既可以直接用移液器从浓缩管底部吸取，也可以将浓缩液反转离心到回收管内，加盖密封保存，这两种方法都保证了高回收率。Vivaspin经过一次离心，最高可以将蛋白溶液浓缩300倍。 /p p 　　2.5终产品的除菌除病毒过滤 /p p 　　浓缩后的样品，最终经过0.22μm无菌滤器进行除菌过滤。ULTA Pure SG，HC除菌滤器具有过滤速度快、化学稳定性好、载量高和溶出物少等优点，细菌挑战实验表明其除菌能力大于7log。除菌过滤过程的优化主要从三个方面入手：操作过程中过膜压力的控制、过膜流速以及单位膜载量控制，这三个参数优化以后，可以在同种类型、材质的NFF膜上进行线性放大，否则很容易影响收率。 /p p 　　Durapore除菌级亲水性滤膜由亲水性PVDF材料制造，具有可靠的除菌保证以及低蛋白吸附量、低析出、无纤维脱落、广泛的化学兼容性等优点，是常用的除菌滤膜。Durapore 0.22μm亲水性滤膜用于液体除菌或去除微粒，0.1μm亲水性滤膜用于液体中去除微粒、微生物和支原体。装有Durapore亲水性滤膜的滤器有Millipak、Opticap XL、Opticap XLT、筒式滤器和Optiscale等。Millipak滤器独特的堆叠盘状设计使残留量最小并且无颗粒脱落，因此适合于高附加值产品的终端过滤和灌装。Millipak和Opticap XL滤器都有O型圈垫片和软管倒钩连接的上游排气阀和排空阀设计，使操作简单易控。Opticap XL和XLT滤器的结构设计，特别耐高温、高压条件，在除菌过程中提供更高的稳定性和可靠性，同时更易清洗。Optiscale一次性滤器专为小规模工艺筛选和工艺放大所设计，是工艺评估的理想工具。 /p p 　　目前被广泛应用的生物制品病毒去除的方法是纳米膜过滤。纳米膜过滤有如下优点：(1)针对性强，实用性广：纳米膜过滤只与病毒和目的蛋白的大小有关，无论病毒是否有脂包膜外壳、是否耐热，纳米膜过滤都能将之去除。(2)毒性小，下游污染少：能有效去除杀灭病毒后可能留下的如抗原和核酸蛋白混合物等病毒标志物，有效降低下游污染，是纳米膜的另一特点。大多数病毒灭活处理都使用有毒或致突变的理化试剂，从而必须在使用后从蛋白质溶液中清除，而纳米膜过滤不存在毒性问题，只是在验证中要考虑到滤器浸出物的风险。(3)蛋白活性高，回收率高：纳米膜过滤是在正常条件下的pH、渗透压和温度下进行的温和的生产步骤，其蛋白回收率和活性都很高，通常在90%—95%。基于体外分析、实验研究和临床经验，纳米膜过滤试验都没有显示出蛋白质改变或是新抗原的产生。纳米膜过滤不改变制品特性，这一特点促进了监管机构认可和产品的注册。 /p p 　　日本Asahi Kasei公司于1989年推出了第一款专门为清除生物制药产品中病毒颗粒而设计的过滤器Planova，由亲水铜铵再生纤维素制成的中空纤维微孔膜，装入聚碳酸酯壳体中。Millipore公司的Viresolve NFP膜是一种复合PVDF膜，过滤盒被设计来从高纯蛋白溶液中移除小型病毒，如B19，蛋白质溶液中，B19的去除量通常& gt 4 log。PALL Life Science公司的Ultipor VF DV50和DV20膜式过滤器可以从生物流体中去除显著数量级的病毒，同时目标蛋白可以很好地通过。滤芯由三层独特的亲水、低蛋白吸附的PVDF滤膜经新月型打褶方式构成，过滤面积大，具有可靠、安全和高流量等特点。Sartorius Stedim生产的Virosart CPV为聚醚砜过滤器，能去除& gt 4 log的PPV和& gt 6 log的逆转录病毒。 /p p 　　2.5扩张柱床吸附层析技术 /p p 　　扩张柱床吸附层析技术(EBA)是上世纪九十年代初期进入下游生产，整合了发酵和下游纯化的技术。新一代STREAMLINE Direct扩张柱床设备及介质是EBA技术中最成熟的产品。通过条件优化，STREAMLINE能直接从浑浊的发酵液中捕获目标生物分子，细胞碎片及不吸附的杂质穿过扩张床内悬浮的介质被冲洗掉，将以往澄清、浓缩、捕获等步骤整合为一步，达到粗纯化的效果(图2)[17]。 /p p 　　STREAMLINE的操作过程如下[17-18]：(1)起始：将STREAMLINE介质倒入扩张柱中。(2)平衡：从下向上流的缓冲液，将STREAMLINE柱内的吸附介质悬浮起来，形成稳定的、充分平衡好的扩张床。(3)上样：发酵液带菌体从柱底进入，目标生物产品吸附在STREAMLINE介质上 不吸附的宿主杂质及菌体碎片随液流从柱顶排出。(4)淋洗/穿透：进一步用缓冲液将不吸附的杂质洗掉。(5)洗脱：洗脱液洗脱目标生物产品。(6)CIP/再生：用1M NaOH+1M NaCl进行CIP。整个操作过程如图3所示。 /p p style=" text-align: center " img title=" 4.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/07a79270-4b7d-4fe5-bc9a-125837562297.jpg" / /p p style=" text-align: center " 　 span style=" font-size: 14px " 　图2　传统纯化工艺与STREAMLINE [17] /span /p p style=" text-align: center " img title=" 5.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201808/insimg/333de887-f92b-405d-9094-9ec89635f74d.jpg" / /p p style=" text-align: center " span style=" font-size: 14px " 　　图3 STREAMLINE的基本工作原理和操作过程[18] /span /p p style=" text-align: center " 　 span style=" font-size: 14px " 　(箭头示液体过柱时的流向) /span /p p 　　STREAMLINE介质是一系列包裹着石英芯，以琼脂糖为骨架的介质。特殊设计的STREAMLINE扩张柱床可以产生稳定的向上拔的扩张液流，每一颗不同比重的STREAMLINE介质，悬浮在自身重力和扩张升力平衡的位置原地扰动。STREAMLINE 技术是稳态扩张，样品流均匀分布整个床体，目标产物吸附均匀，穿透小，回收率高，类似于固定床吸附性层析[19]。 /p p 　　3. 抗体最新下游技术应用实例 /p p 　　Lonza Biologics公司是全球最大的抗体合同生产商之一，为了开发一个稳定的20000L的抗体生产工艺，其纯化开发部门对多个不同的抗体亲和层析凝胶进行了有效的比较，他们发现Mabselect SuRe的动态载量高、使用寿命最长、Protein A脱落最低，实验数据明确支持放大到1.4m直径的柱子用于20000L培养规模的经济生产[4]。 /p p 　　德国的Roche公司一种用于肿瘤治疗的单抗已进入临床Ⅲ期。他们将目前几种Protein A介质进行充分的比较之后，选择了高载量、更易于装柱和寿命更长的Mabselect。目的抗体是通过无血清培养的转染的杂交B淋巴细胞表达的IgG1。将过滤后的无细胞上清上样到Mabselect填充的FineLINE柱，直径300cm，柱高20cm，上样的浓度是30mg/ml。洗脱后，洗脱液立即用磷酸钾中和pH值到6.8-7.0，再用凝胶过滤检测，结果表明比活超过90%，纯度在95%以上[20]。 /p p 　　Cytheris公司是法国一家生物制药公司，目前正在研制一种用CHO细胞表达的免疫调节剂(临床Ⅱ期)。原先的工艺采用传统层析法，但不能稳定去除病毒。改进后，在工艺的第一步使用Mustang Q对污染物进行捕获，取得了25%去除率的良好结果 同时对MVM、MLV和Re03三种病毒也达到超过4个Log的滴度降效果，而整个工艺对病毒的去除效率普遍提高了7-11个Log。说明Mustang Q的使用对下游层析起到了很好的保护作用。 /p p 　　在第五届生物制药工艺优化大会上，Crucell公司介绍了他们对腺病毒(AAV)纯化工艺的摸索。与传统的层析填料相比，Mustang Q膜层析的开放孔道的设计使对病毒的动态载量大大提高30倍左右，回收率在80%以上。用40L的膜层析柱相当于1000L的传统层析柱的效果，节省了验证工作，提高了工艺经济性，十分有利于放大生产。 /p p 　　德国的Boehringer Mannheim公司生物制药部，用STREAMLINE技术代替传统工艺生产400L CHO细胞培养的Fc融合蛋白，结果样品回收率提高14%，缓冲液减少25%，时间缩短47%[17]。 /p p 　　世界最大的制药公司-GlaxoSmithKline公司，使用特别设计的BioProcess全自动层析系统和STREAMLINE扩张柱生产药用脂蛋白疫苗，比原工艺产品体积缩小2倍，纯化系数1.5，内毒素减少100倍[17]。 /p p 　　日本YOSHITOMI公司正在使用多套STREAMLINE 1000系统生产人重组白蛋白，与原生产工艺产品纯度相同，产率提高30%，时间减少一半，年产量为12.5吨[17]。 /p p 　　AVECIA公司重新设计临床Ⅲ期药品生产工艺，选用STREAMLINE技术及SOURCE新型凝胶，生产效率提高12倍，回收率提高1倍[17]。 /p p 　　2001年，ILEX制药公司的CAMPATH获得FDA批准。该单克隆抗体使用Sartobind Q离子交换层析模块以流穿的方式进行精制，这是膜吸附器首次被批准应用于治疗性蛋白的生产，证明了膜层析技术通过了证实和测试[30]。 /p p 　　4. 展望 /p p 　　随着抗体产品上游大规模高效培养技术的进一步发展,实验室规模哺乳动物细胞表达水平可以达到25g/L，如果这一水平能够有效放大到生产,将对下游生产纯化带来更大的压力。所以下游纯化工艺的技术发展也是势在必行。 /p p 　　以下一些发展方向可能成为下游工艺未来发展的重要关注点：(1)刚性更好、载量更高、耐碱性更好的完全亲水琼脂糖凝胶的开发[4]。(2)优化操作次序，降低缓冲液消耗的更大规模生产线的应用[21]。(3)通过单抗的氨基酸序列预测下游工艺关键参数：亲和层析洗脱pH条件、离子交换层析洗脱pH和盐浓度条件、病毒灭活pH等[22]。(4)下游工艺的成本消耗占全部成本的50-80%，亲和捕获是下游工艺的最关键步骤，通过改进亲和配体，提高捕获能力，节省成本[23]。(5)新型层析系统全程实时控制纯化过程，在线检测HCP、宿主DNA、Protein A等的含量[24]。(6)由于在去除杂质方面的优势，膜层析将会得到飞速的发展，未来工艺甚至可能完全基于膜层析而不是柱层析[25]。 /p p 　　参考文献 /p p 　　[1] 刘亚明,薛章.生物制药：迎接抗体药物的黄金时代.医药细分子行业研究报告,2009. /p p 　　[2] 陈志南.基于抗体药物的我国生物制药产业化发展前景.2008中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集,2008. /p p 　　[3]Gail Dutton.Trends in Monoclonal AntibodyProduction.Feature Articles,2010, 30(4). /p p 　　[4]孙文改,苗景赟.抗体生产纯化技术.中国生物工程杂志,2008,28(10):141-152. /p p 　　[5]《人用单克隆抗体质量控制技术指导原则》.NICPBP(中国药品与生物制品检定所),2003. /p p 　　[6]Capto adhere：用于生产单抗的两步纯化操作.GE Healthcare公司技术资料. /p p 　　[7]中空纤维滤柱分离纯化应用集锦.GE Healthcare公司技术资料. /p p 　　[8]中空纤维膜过滤技术在单抗生产中的应用.GE Healthcare公司技术资料. /p p 　　[9]Amersham Biosciences.Downstream Gab’02 Abstracts,Extended Reports from the 2nd International Symposium on DownstreamProcessing of Genetically Engineered 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PALL LifeScience公司技术资料. /p p 　　[17]整合发酵和下游纯化的新技术：扩张柱床吸附技术.GE Healthcare公司技术资料. /p p 　　[18]余晓玲,米力，姚西英，陈志南.扩张柱床吸附层析与固定柱床层析纯化单克隆抗体的比较.中国生物工程杂志,2003,23(1):61-64. /p p 　　[19]High-throughput monoclonal antibody purification.GE Healthcare公司技术资料. /p p 　　[20]抗体纯化手册.GE Healthcare公司技术资料. /p p 　　[21]Purification Strategies to Process 5 g/L Titers ofMonoclonal Antibodies. 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p 　　随着抗体药物上游大规模高效培养技术的飞速发展，抗体蛋白的表达浓度有了大幅度的提高，这给下游纯化工艺带来了巨大的压力。为了突破下游技术瓶颈，整个世界生物制药产业都加大了对下游技术的革新力度，近年来也取得了丰硕的成果。本文就抗体药物的纯化策略、最新技术进展以及技术应用等方面做一个调研，以期能对本部门的相关研究工作有所助益。 br/ /p p 　　自1997年来，全球抗体药物市场经历了一个快速发展的阶段，总销售额从1997年的3.1亿美元增长到2008年的400亿美元，复合增长率高达55%，而且增长势头还在持续 [1]。国际上通常把年销售额超过10 亿美元的品牌药称为“重磅炸弹”药物，很大一部分抗体药物都已迈入“重磅炸弹”行列。在2008年全球15大药品中，抗体药物占据了1/3，且排名仍在上升，这意味着几乎每种单抗药物的成功开发都代表着巨大的市场前景[2]。受益于此，全球主要的生物制药公司都获利颇丰，可见抗体药物具有巨大的经济价值和社会价值。 br/ /p p 　　抗体药物生产技术门槛高，需要掌握抗体筛选、抗体重组、高表达细胞株构建和大规模悬浮培养等核心技术，其下游关键技术是长期以来的薄弱之处。哺乳动物细胞表达系统具有活性高、稳定性好等优点，已成为抗体等生物制品最重要的系统之一，为抗体药物的产业化提供可能。目前，国际上该项技术发展较快，已趋成熟，以默克公司为代表的流加培养生产规模达10000L以上，以贝尔公司为代表的灌流培养生产规模达200L以上，蛋白表达浓度为1-10g/L。我国在该技术领域起步较晚，基础较差，但近年来经过努力，已经实现了该项技术的突破，流加培养规模达500L以上，灌流培养规模达100L以上，蛋白表达浓度为0.2-2g/L[2]。 /p p 　　随着动物细胞表达抗体产品大规模高效培养技术的快速发展，下游纯化工艺越来越成为抗体药物生产中主要的技术瓶颈[3]。因此，如何提高下游工艺的生产效率就成为了抗体药物研发必须解决的问题。本文就国际上高表达抗体蛋白下游工艺的研究进展做一个调研，使本人及同事们能了解国际上的研究成果和发展趋势，以期能对本部门的相关研究工作有所助益。 /p p 　　1. 抗体药物纯化策略 /p p 　　每个单抗的等电点、电荷密度、疏水性、糖基化程度等生化性质各不相同。选择单抗的纯化方法，既要了解它们的共性，又要了解它们的个性，从而制定相应的纯化策略(表1)。 /p p 　　1.1 抗体药物下游工艺一般策略 /p p 　　CHO和NSO等哺乳动物细胞表达系统主要用来生产治疗性单抗，临床剂量大(数十至几百毫克/dose)，批产量达公斤级，纯度要求极高。层析技术是抗体分离纯化的核心技术，一般采用经典的三步纯化策略：粗纯-中间纯化-精细纯化。粗纯的主要目的是捕获、浓缩和稳定样品，约80%的下游工艺用Protein A亲和层析进行快速捕获，一步即可达到95%以上的纯度。治疗用抗体一般使用动物细胞大规模高密度无血清悬浮培养进行生产，不仅对终产品的单体含量有严格的规定，还必须去除各种潜在的杂质以满足药品安全的要求，因此在粗纯之后还需要进行中间纯化和精细纯化，去除宿主细胞蛋白(HCP)、宿主DNA、抗体聚集体和变体等，常用的层析技术有离子交换、凝胶过滤、疏水层析等[4]。 /p p 　　2003 年初，中国SFDA下属的中国药品与生物制品检定所(NICPBP)公布了《人用单克隆抗体质量控制技术指导原则》[5]。生产者除须保证最终抗体产品纯度，还需要验证所用的纯化方法能有效对潜在的污染物，如HCP、免疫球蛋白、宿主DNA、用于生产腹水抗体的刺激物、内毒素、培养液成分、层析凝胶析出成分(脱落的Protein A配基)进行去除 并能有效的去除/灭活病毒。也就是说，在设计下游工艺时，需多角度综合考虑抗体本身的性质、抗体的来源、发酵培养技术、发酵液蛋白浓度、宿主杂质、抗体批间的差异、潜在污染及病毒灭活等问题。此外，治疗用抗体在生产和纯化过程中还会由于糖基化程度不同、蛋白酶作用、以及脱氨基和脱酰胺等反应而产生带电性质不同的多种抗体变体 另外，抗体氧化、聚集和片段化也是常见的降解途径[4]。针对这些变体，一方面，在表达和纯化过程中选择参数(如pH、盐浓度等)时要充分考虑到目标抗体的稳定性 另一方面，应控制细胞培养的条件(DO、渗透压等)，同时加快下游分离纯化的速度，最大程度上避免抗体在纯化过程中产生变体，从而保证终产品的均一性和高的比活，也有利于控制终产品的内毒素水平。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/1eb75a7d-0f0f-4f60-8224-a3984ccff0e3.jpg" title=" 表1.png" alt=" 表1.png" / /p p style=" text-align: center " img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/f8ff0f67-6f0b-4295-ab81-05543e5efbd8.jpg" title=" 表2.png" alt=" 表2.png" / br/ strong 表1 单抗特性及纯化策略 /strong /p p 　　1.2 新型的两步层析技术与纯化工艺整合 /p p 　　近年来，GE Healthcare公司开发出了新型的亲和捕获介质Mabselect SuRe和混合作用模式的强阴离子交换介质Capto adhere(这两种介质的主要特点将在下文详细介绍)。凭借着MabSelect SuRe的卓越性能以及Capto adhere的复合多除杂功能，使得抗体纯化工艺由经典的三步层析转变为两步层析得以实现。这种新型的两步层析技术的工艺流程是：在细胞培养表达以后，采用0.2-0.45μm的中空纤维膜技术进行澄清，然后用MabSelect SuRe捕获，酸性条件洗脱后直接pH 4.0病毒灭活，澄清过滤后穿透方式上Capto adhere，这一步离子交换之前或之后会有一步20nm纳滤去病毒，最后50K膜超滤浓缩和洗滤进行缓冲液置换。整个工艺如图1,这一工艺平台已经尝试过多个不同的抗体并取得成功(表2),同时很多实验表明这一工艺平台适合多数抗体的生产。有些抗体如果通过优化结果不甚满意, 通过增加一步Capto Q也基本上可以达到要求或是采用Capto S-Capto Q(这两种介质的主要特点将在下文详细介绍)的工艺步骤[4]。 /p p style=" text-align: center " 　　 img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/a804fe1c-9660-4ab2-8cc4-177870630ce5.jpg" title=" 图1.png" alt=" 图1.png" style=" text-align: center " / /p p style=" text-align: center " strong 图1　抗体生产两步层析法主导的抗体纯化最新工艺[6] /strong /p p 　　Mabselect SuRe可以达到99%以上的抗体纯度，亲和洗脱峰使用Capto adhere的流穿模式进行精纯：使抗体分子流穿而聚合体、HCP、脱落的Protein A配基等杂质结合在柱上加以去除。这样仅用两步层析就可以得到符合药用级质量要求的高纯度抗体产品，大大缩短了工艺时间，提高了生产效率，同时增加了收率，降低了生产成本。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/3ef7b3a2-9f79-4e74-8a71-6a6cbcbea5ec.jpg" title=" 图2.png" alt=" 图2.png" / /p p style=" text-align: center " strong 表2 两步法用于多种抗体的纯化结果(括号内数值为纯化前)[4] /strong /p p 　　2. 抗体药物下游技术最新研究进展 /p p 　　2.1 样品澄清 /p p 　　2.1.1 中空纤维膜过滤技术 /p p 　　中空纤维膜是近年来发展起来的新型切向流膜分离技术,与盒式膜包相比,中空纤维膜可以直接处理高固含量和高黏度的粗料液,具有容尘量高、速度快、剪切力小、成本低等优点。目前,中空纤维微滤膜已经广泛用于生物制药的各个领域[7]。 /p p 　　对于动物细胞培养液,可以将高密度的培养液直接用中空纤维微滤膜(0.22或0.45μm)进行澄清,而无需事先经过离心和预过滤,步骤少,速度快,收率高,成本低。和离心机比较,具有极高的澄清度,因此中空纤维澄清后的细胞培养液可直接Protein A亲和层析进行纯化。 /p p 　　中空纤维膜澄清细胞培养液的优势有：(1)步骤少,速度快,收率更高(通过有效的洗滤可使样品收率稳定而且高于离心机)，同时最大程度上避免抗体降解而影响产品均一性。(2)成本低：不仅省去了连续流高速离心机昂贵的前期投资和运转的日常维护成本，还节省了离心后死端过滤的成本。中空纤维膜物理化学性质稳定，可以通过清洗而反复使用，成本低廉。(3)有利于内毒素控制：中空纤维膜稳定的化学性质可以耐受1M NaOH 40-50℃和氧化剂NaClO的清洗，从而有效去除内毒素 封闭的系统，也更有利于生产过程中内毒素的控制。此外，大部分中空纤维滤柱还可以进行高压灭菌。(4)低剪切力：中空纤维采用低剪切力的开放式流道，不仅可以处理含有高固含量的料液，还避免了蛋白质活性分子在高剪切力下的聚集变性，有利于抗体的稳定。(5)工艺耐用性强：相比死端过滤，中空纤维澄清具有很好的操作灵活性和耐用性，可以通过调整操作参数(流速、TMP)处理不同性质的细胞培养液。(6)易于线性放大：通过维持切向流速、TMP 等参数恒定，方便地进行线性放大，生产规模的处理量可达几千升料液，目前国内销售最大的中空纤维膜过滤系统已达400m2且生产稳定[8]。 /p p 　　2.1.2 深层过滤介质 /p p 　　深层过滤采用两种机制去除颗粒。首先是拦截，颗粒由于自身的物理尺寸在过滤器内被截留。它们可能被困在过滤器表面，因此根本没有进入基质，或在通过深层过滤基质的曲径时被俘获(筛选)。颗粒拦截伴随过滤器压差增高，因为它的基质被不断累积的颗粒堵塞。第二种机制是吸附，比过滤器拦截精度更小的颗粒能够从流体中被吸附去除。这种机制是通过深层过滤基质上的净电荷实现的[26]。 /p p 　　目前应用比较广泛的双层膜深层过滤介质有Millipore公司的Millistak+HC、Sartorius公司的Sartobran-P、Pall公司的Supradisc HP等。Millistak+HC深层过滤介质由纤维素和无机助滤剂(聚丙稀粘合的硅藻土)组成，包裹在聚丙烯外壳内 它由两层全厚度深层滤板(上游一层粗过滤和下游一层精细过滤)组成，附带一层RW01纤维素膜终过滤。Sartobran-P深层过滤介质由醋酸纤维素滤膜、聚丙烯外壳和支撑层组成，加强型的滤膜有良好的机械强度，有利于在反复的过滤和灭菌过程中保持完好无损 采用了折叠膜，在体积小巧的同时还保证了超大的过滤面积。Supradisc HP深层过滤介质由纤维素、硅藻土、带正电荷树脂和聚丙烯组成 也由两层全厚度深层滤板(上游一层粗过滤和下游一层精细过滤)组成。 /p p 　　2.2最新抗体捕获技术 /p p 　　2.2.1 MabSelect介质 /p p 　　MabSelect是第一个使用高流速琼脂糖凝胶作为骨架的新型Protein A层析介质，专为大规模抗体纯化而设计，适合快速高效的进行抗体生产和放大，已经成为单抗纯化和放大的标准介质。 /p p 　　MabSelect的特点有：(1)更高的流速和动态载量：Protein A经基因工程改造，C端含一个半胱氨酸，形成一个定向的硫酯键，同时增加了对IgG的有效结合。Protein A和凝胶偶联时采用了全新的单点偶联工艺，降低了空间位阻，因此可以在使用更高流速的条件下增加动态载量：在线形流速为500cm/hr和柱床高度为20cm(停留时间2.4min)的条件下，每毫升MabSelect的动态载量可以达到& gt 30mg IgG。(2)更低的非特异性吸附，抗体纯度更高：Mabselect介质高度亲水性的琼脂糖骨架最大程度上降低了非特异性吸附，使得洗脱峰中杂蛋白和DNA更少，有利于后期抗体的精细纯化。著名的抗体生产商IDEC公司以及R.Hahn的研究显示，Mabselect对CHO细胞HCP的吸附比其它Protein A介质低7倍[9-10]。R.L.Fahrner等的研究显示，Mabselect所得抗体的DNA残留量比其它Protein A介质低30%[11]。(3)更低的Protein A脱落：MabSelect由于通过新型环氧共价交联技术，Protein A的脱落比其它同类介质低，这不仅有利于抗体纯化，还延长了介质的使用寿命，降低了生产成本。(4)更易于工艺的线性放大：通过实验室条件的优化，MabSelect 可以在保持线性流速和上样比例等参数不变的条件下，通过增加柱直径进行线性放大。(5)MabSelect 易于清洗与除菌，寿命更长、更经济：在长期连续的生产中，有效的在位清洗(CIP)有助于延长介质使用寿命，但一般的Protein A介质往往不能耐受NaOH，只能使用高浓度的尿素或盐酸胍进行清洗，效果远不如NaOH且成本非常高。而MabSelect的CIP和除菌程序简单，用很常规、经济的试剂如50mM NaOH+1M NaCl或50mM NaOH+0.5M Na2SO4就可以有效去除沉淀和变性物质 用非离子去污剂或酒精可以去除通过疏水作用结合的物质 用0.1M醋酸和20%酒精可以在位灭菌(SIP)。经测试，Mabselect配合CIP(50mMNaOH+1M NaCl)纯化三百次后，抗体产品纯度与收率不变[12]。 /p p 　　2.2.2 MabSelect Xtra介质 /p p 　　Mabselect Xtra介质是在Mabselect介质的基础上优化而来，是目前市场上所有的商品化Protein A介质中载量最高的亲和层析介质之一。它除了具有MabSelect介质的全部特点外，还具有载量最高和非特异性吸附更低的特点。 /p p 　　Mabselect Xtra介质使用孔径更大的多孔高流速琼脂糖作为骨架，同时减小介质粒径。这样不仅增加了比表面积和配基密度，还降低了传质阻力，从而有效的增加了动态载量。其动态载量超过41mg/ml，在工艺生产过程中可以有效减少层析柱的体积，从而降低生产成本。R.Hahn的研究显示，Mabselect Xtra对CHO细胞HCP的吸附比其它Protein A介质更是低了近10倍[13]。 /p p 　　2.2.3 MabSelect SuRe介质 /p p 　　MabSelect SuRe介质也是在Mabselect介质的基础上优化而来，是目前市场上唯一耐强碱的Protein A亲和层析介质，寿命最长，稳定性最好[10]。它除了具有MabSelect介质的全部特点外，还具有以下特点：(1)可以耐受0.1-0.5M NaOH：MabSelectSuRe具有不同于其它Protein A介质的同型四聚体配基-SuRe配基，即使在强碱条件下也不易变性或脱落，可以用高达0.5M NaOH进行CIP和SIP，能有效去除沉淀和变性物质，大大降低了抗体产品被内毒素污染和批间交叉污染的风险，有利于延长介质使用寿命，同时还大大降低了CIP和SIP的成本。(2)更温和的洗脱，避免抗体聚集，提高收率：同型四聚体配基避免了不同配基与抗体Fc段亲和性的差异，也消除了某些域对Fab段的亲和作用，使得洗脱条件更加均一而温和。Mabselect SuRe介质可以用更高的pH进行洗脱，有效避免了抗体在低pH下的聚集，产品纯度和均一性更高，浊度也更低[14]。(3)不同抗体洗脱所需pH差异小：由于消除了对抗体Fab段的亲和作用，使得同一种属亚型的不同抗体分子洗脱所需的条件更接近，有利于平台技术的建立，进一步降低了不同的抗体分离纯化工艺的研发成本。(4)SuRe 配基稳定性更好：SuRe配基对碱和蛋白酶更稳定，纯化过程中脱落更少(& lt 10ppm)，有利于后期脱落配基的进一步去除。 /p p 　　2.2.4 ProSep-vA Ultra介质 /p p 　　ProSep-vA Ultra介质是将自然界非动物性来源的Protein A交联于700Å 的多孔性玻璃珠骨架上，是刚性和不可压缩的介质。ProSep-vA Ultra介质具有如下特点：低反压性 不收缩、不溶胀 高动态载量 极低的Protein A脱落 高重复使用性，标准化的清洗和除菌操作[27]。 /p p 　　2.2.5 ProSep Ultra Plus介质 /p p 　　ProSep Ultra Plus介质是在ProSep-vA Ultra介质基础上优化而来，也是目前市场上所有的商品化Protein A介质中载量最高的亲和层析介质之一。它除了具有ProSep-vA Ultra介质的全部特点外，还具有载量最高、纯化效率更高、工艺更易于放大、成本更低等特点[28]。 /p p 　　2.2.6 MEP Hypercel介质 /p p 　　MEP Hypercel复合作用模式介质是一种灵活的层析介质设计，也称之为疏水电荷诱导层析(HCIC)，用于捕获和纯化从实验室到生产规模的抗体和各种重组蛋白。MEP Hypercel介质由一个独特的连接4-巯基乙基吡啶(4-MEP)的刚性纤维素骨架组成。纤维素骨架赋予高孔隙率、化学稳定性和低非特异性吸附。平均直径80-100μm，在低反压下有优良的流速特性。MEP Hypercel介质在大规模使用时具有显著优势，基于它的配基结构，可选择性地捕获免疫球蛋白。组合其它传统的方法如离子交换、疏水作用，甚至用在Protein A之后从不同的料液中直接捕获或中度纯化抗体，以增强对宿主DNA、HCP和聚合体的清除。MEP Hypercel介质有助于建立一个简化的工艺流程，节省操作步骤(例如洗滤、超滤等) 预计有更长的使用寿命，因为它可以耐受苛刻的CIP方法(0.5-1M NaOH，30-60分钟接触时间)，而所有因素都有利于降低成本[29]。 /p p 　　2.3最新精细纯化技术 /p p 　　2.3.1 CaptoFamily系列介质 /p p 　　新型的Capto S，Q系列介质是以高流速琼脂糖为骨架，同时交联了非常“柔软”的葡聚糖链，这样不仅增加了比表面积，同时降低了传质阻力和空间位阻，使得介质在高流速下的动态载量大大增加，有利于提高生产效率，降低成本。 /p p 　　Capto S，Q系列介质可以装填在直径60cm的工业层析柱中使用高达500cm/h 的流速进行纯化(柱高30cm)。这样不仅有利于工艺放大后大规模层析柱的填装，还大大提高了生产效率，每步层析更短的操作时间也有效避免了抗体分子在分离纯化过程中产生各种变体和聚合体，使得收率更好，终产品的活性更高、性质更均一。 /p p 　　2.3.2 Captoadhere介质 /p p 　　为了进一步减少抗体分离纯化步骤，提高特定杂质的去除效率，以满足日益增长的治疗用抗体的生产需要，2007 年初，GE Healthcare公司推出了新型复合作用模式的强阴离子交换介质：Capto adhere介质。Capto adher介质专为治疗用抗体的分离纯化而设计，其配基综合了阴离子交换、氢键和疏水等多种复杂的作用方式，因此对于抗体的聚合体具有非常独特而高效的去除能力。此外，通过有效的实验设计(DoE)，流穿模式的Capto adher介质还可以同时有效去除脱落的Protein A配基、HCP、宿主DNA、内毒素和潜在的病毒，并使得结合MabSelect SuRe的抗体两步层析纯化工艺成为现实(表3)。Capto adhere还具有很强的病毒去除能力，如MVM病毒的去除能力可达5.9个Log。目前，新型的两步法抗体层析纯化工艺已经被国内外诸多知名药企广泛用于多种抗体的分离纯化，各项指标均符合治疗用抗体的要求。Capto adher层析还可以和阴离子交换(Capto Q)和疏水层析等结合使用，以达到更高的质量要求[15]。 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/282961ea-e704-47d1-aabd-f044e108f59c.jpg" title=" 图3.png" alt=" 图3.png" / /p p style=" text-align: center " strong 表3 两步层析纯化工艺对污染物的去除效果[15] /strong /p p 　　2.3.3膜层析技术 /p p 　　PALL Life Science公司自10余年前颠覆性地开发出独一无二的层析产品-Mustang膜层析系列产品后，经过不断地技术改造，于近年推出全新Mustang Q XT家族，扩展了膜层析工艺放大产品线。膜层析技术，相对于传统的柱层析，无需层析填料和层析柱等复杂构件，直接通过膜式过滤器，经过简单的过滤环节即可达到纯化目的。Mustang Q以16层超级打褶的聚醚砜过滤膜作为基架，上面偶联了季胺基等功能基团，可以使生物分子流经的时候与功能位点迅速结合，具有高流速和高动态载量等优点。 /p p 　　Sartorius Stedim公司也开发出了一整套膜层析技术，包括Sartobind S,Q,C和D离子交换、Sartobind IDA(亚氨基二乙酸)金属螯合、Sartobind醛、Sartobind环氧基和Sartobind Protein A(重组)等膜层析系列产品。Sartobind在很多蛋白和病毒纯化应用中可以取代传统耗时、繁琐的层析步骤。膜吸附器的快速纯化特点使蛋白分离可以在高流速下获得高收率，较传统柱层析流速最高能提高100倍，达到20-40 CV/min。传统颗粒胶95%以上的结合位点集中在颗粒胶内部。Sartobind膜层析的结合位点是均一地交联到交叉偶联的增强纤维素骨架内0.5-1μm厚的薄层上。大孔结构和快速吸附结合特性使膜吸附器可以忽略扩散时间因素。同时多微孔膜结构不存在传统颗粒胶的孔内扩散问题。在对流情况下，流动相的分子运动只由泵压力决定。因此，膜吸附器具有操作周期极短、流速和处理能力极高的特点[30]。 /p p 　　与离子交换柱层析相比，离子交换膜层析技术已经被证明利用高动态结合能力吸附大量的生物分子，如病毒、HCP和宿主DNA。最近，阴离子交换膜层析技术已经被作为柱层析技术的替代技术用于Protein A亲和捕获后的mAb中微量污染物的去除[16]。 /p p 　　2.4终产品的浓缩洗滤 /p p 　　多维纯化得到的洗脱峰可以用Kvick Lab/Process盒式膜包进行快速浓缩和缓冲液置换。Kvick盒式膜包的优点有：(1)无热原：很多时候，仅用0.5M NaOH 清洗难以彻底去除膜表面的热原。Kvick盒式膜包化学性质非常稳定，可以使用1M NaOH在40-50℃下进行彻底的SIP/CIP，避免最终超滤浓缩时引入热原而影响产品质量。(2)孔径均一、速度快：Kvick盒式膜包孔径更均一，甚至可以使用50-100K的膜包进行抗体浓缩而不漏过，速度更快，大大节省了操作时间。(3)易于线性放大：通过保持流速、TMP等参数恒定，可以直接线性放大到生产规模。 /p p 　　Amicon Ultra系列超滤离心管可以用来进行抗体的快速浓缩、脱盐及缓冲液置换。它具有如下特点：(1)效率高：一步法离心达到25到80倍浓缩。(2)节省时间：垂直结构的膜，避免堵膜，减少浓差极化，可以用超快离心速度极短时间完成 最少10分钟即可完成浓缩、脱盐或缓冲液置换。(3)收率高：独特的反转离心设计，有利于取得最大回收率且避免了人为移液误差 低吸附滤膜和聚丙烯内壳，使回收率高达90%以上。(4)不漏液、无损失：100%完整性测试确保不漏液 独特的死体积设计避免过度离心至干，没有样品损失。(5)广泛的化学相容性：与广泛的溶剂兼容，适用于pH1-pH9，热封膜杜绝了粘合剂和下游溶出物污染。 /p p 　　Vivaspin系列超滤离心管同样是进行蛋白质快速浓缩和缓冲液置换的常用产品。获得专利的垂直膜配合狭长的流道设计，有效地避免滤膜堵塞，提高浓缩速度 同时在浓缩管底部设计有死端结构，确保即使离心时间过长也不会发生样品被甩干的现象。Vivaspin可灵活选用三种不同材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维和Hydrosart。它的另一个特点是有两种回收浓缩液的方法，既可以直接用移液器从浓缩管底部吸取，也可以将浓缩液反转离心到回收管内，加盖密封保存，这两种方法都保证了高回收率。Vivaspin经过一次离心，最高可以将蛋白溶液浓缩300倍。 /p p 　　2.5终产品的除菌除病毒过滤 /p p 　　浓缩后的样品，最终经过0.22μm无菌滤器进行除菌过滤。ULTA Pure SG，HC除菌滤器具有过滤速度快、化学稳定性好、载量高和溶出物少等优点，细菌挑战实验表明其除菌能力大于7log。除菌过滤过程的优化主要从三个方面入手：操作过程中过膜压力的控制、过膜流速以及单位膜载量控制，这三个参数优化以后，可以在同种类型、材质的NFF膜上进行线性放大，否则很容易影响收率。 /p p 　　Durapore除菌级亲水性滤膜由亲水性PVDF材料制造，具有可靠的除菌保证以及低蛋白吸附量、低析出、无纤维脱落、广泛的化学兼容性等优点，是常用的除菌滤膜。Durapore 0.22μm亲水性滤膜用于液体除菌或去除微粒，0.1μm亲水性滤膜用于液体中去除微粒、微生物和支原体。装有Durapore亲水性滤膜的滤器有Millipak、Opticap XL、Opticap XLT、筒式滤器和Optiscale等。Millipak滤器独特的堆叠盘状设计使残留量最小并且无颗粒脱落，因此适合于高附加值产品的终端过滤和灌装。Millipak和Opticap XL滤器都有O型圈垫片和软管倒钩连接的上游排气阀和排空阀设计，使操作简单易控。Opticap XL和XLT滤器的结构设计，特别耐高温、高压条件，在除菌过程中提供更高的稳定性和可靠性，同时更易清洗。Optiscale一次性滤器专为小规模工艺筛选和工艺放大所设计，是工艺评估的理想工具。 /p p 　　目前被广泛应用的生物制品病毒去除的方法是纳米膜过滤。纳米膜过滤有如下优点：(1)针对性强，实用性广：纳米膜过滤只与病毒和目的蛋白的大小有关，无论病毒是否有脂包膜外壳、是否耐热，纳米膜过滤都能将之去除。(2)毒性小，下游污染少：能有效去除杀灭病毒后可能留下的如抗原和核酸蛋白混合物等病毒标志物，有效降低下游污染，是纳米膜的另一特点。大多数病毒灭活处理都使用有毒或致突变的理化试剂，从而必须在使用后从蛋白质溶液中清除，而纳米膜过滤不存在毒性问题，只是在验证中要考虑到滤器浸出物的风险。(3)蛋白活性高，回收率高：纳米膜过滤是在正常条件下的pH、渗透压和温度下进行的温和的生产步骤，其蛋白回收率和活性都很高，通常在90%—95%。基于体外分析、实验研究和临床经验，纳米膜过滤试验都没有显示出蛋白质改变或是新抗原的产生。纳米膜过滤不改变制品特性，这一特点促进了监管机构认可和产品的注册。 /p p 　　日本Asahi Kasei公司于1989年推出了第一款专门为清除生物制药产品中病毒颗粒而设计的过滤器Planova，由亲水铜铵再生纤维素制成的中空纤维微孔膜，装入聚碳酸酯壳体中。Millipore公司的Viresolve NFP膜是一种复合PVDF膜，过滤盒被设计来从高纯蛋白溶液中移除小型病毒，如B19，蛋白质溶液中，B19的去除量通常& gt 4 log。PALL Life Science公司的Ultipor VF DV50和DV20膜式过滤器可以从生物流体中去除显著数量级的病毒，同时目标蛋白可以很好地通过。滤芯由三层独特的亲水、低蛋白吸附的PVDF滤膜经新月型打褶方式构成，过滤面积大，具有可靠、安全和高流量等特点。Sartorius Stedim生产的Virosart CPV为聚醚砜过滤器，能去除& gt 4 log的PPV和& gt 6 log的逆转录病毒。 /p p 　　2.5扩张柱床吸附层析技术 /p p 　　扩张柱床吸附层析技术(EBA)是上世纪九十年代初期进入下游生产，整合了发酵和下游纯化的技术。新一代STREAMLINE Direct扩张柱床设备及介质是EBA技术中最成熟的产品。通过条件优化，STREAMLINE能直接从浑浊的发酵液中捕获目标生物分子，细胞碎片及不吸附的杂质穿过扩张床内悬浮的介质被冲洗掉，将以往澄清、浓缩、捕获等步骤整合为一步，达到粗纯化的效果(图2)[17]。 /p p 　　STREAMLINE的操作过程如下[17-18]：(1)起始：将STREAMLINE介质倒入扩张柱中。(2)平衡：从下向上流的缓冲液，将STREAMLINE柱内的吸附介质悬浮起来，形成稳定的、充分平衡好的扩张床。(3)上样：发酵液带菌体从柱底进入，目标生物产品吸附在STREAMLINE介质上 不吸附的宿主杂质及菌体碎片随液流从柱顶排出。(4)淋洗/穿透：进一步用缓冲液将不吸附的杂质洗掉。(5)洗脱：洗脱液洗脱目标生物产品。(6)CIP/再生：用1M NaOH+1M NaCl进行CIP。整个操作过程如图3所示。 /p p 　　 /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/dba748ae-d64e-479c-8fb1-ea738ef437da.jpg" title=" 图4.jpg" alt=" 图4.jpg" / /p p style=" text-align: center " strong 图2　传统纯化工艺与STREAMLINE [17] /strong /p p style=" text-align: center" img src=" https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/0f71d1a8-a218-43f5-8c1f-917bd4f432a5.jpg" title=" 图5.png" alt=" 图5.png" / /p p style=" text-align: center " strong 图3 STREAMLINE的基本工作原理和操作过程[18](箭头示液体过柱时的流向) /strong /p p 　　STREAMLINE介质是一系列包裹着石英芯，以琼脂糖为骨架的介质。特殊设计的STREAMLINE扩张柱床可以产生稳定的向上拔的扩张液流，每一颗不同比重的STREAMLINE介质，悬浮在自身重力和扩张升力平衡的位置原地扰动。STREAMLINE技术是稳态扩张，样品流均匀分布整个床体，目标产物吸附均匀，穿透小，回收率高，类似于固定床吸附性层析[19]。 /p p 　　3. 抗体最新下游技术应用实例 /p p 　　Lonza Biologics公司是全球最大的抗体合同生产商之一，为了开发一个稳定的20000L的抗体生产工艺，其纯化开发部门对多个不同的抗体亲和层析凝胶进行了有效的比较，他们发现Mabselect SuRe的动态载量高、使用寿命最长、Protein A脱落最低，实验数据明确支持放大到1.4m直径的柱子用于20000L培养规模的经济生产[4]。 /p p 　　德国的Roche公司一种用于肿瘤治疗的单抗已进入临床Ⅲ期。他们将目前几种Protein A介质进行充分的比较之后，选择了高载量、更易于装柱和寿命更长的Mabselect。目的抗体是通过无血清培养的转染的杂交B淋巴细胞表达的IgG1。将过滤后的无细胞上清上样到Mabselect填充的FineLINE柱，直径300cm，柱高20cm，上样的浓度是30mg/ml。洗脱后，洗脱液立即用磷酸钾中和pH值到6.8-7.0，再用凝胶过滤检测，结果表明比活超过90%，纯度在95%以上[20]。 /p p 　　Cytheris公司是法国一家生物制药公司，目前正在研制一种用CHO细胞表达的免疫调节剂(临床Ⅱ期)。原先的工艺采用传统层析法，但不能稳定去除病毒。改进后，在工艺的第一步使用Mustang Q对污染物进行捕获，取得了25%去除率的良好结果 同时对MVM、MLV和Re03三种病毒也达到超过4个Log的滴度降效果，而整个工艺对病毒的去除效率普遍提高了7-11个Log。说明Mustang Q的使用对下游层析起到了很好的保护作用。 /p p 　　在第五届生物制药工艺优化大会上，Crucell公司介绍了他们对腺病毒(AAV)纯化工艺的摸索。与传统的层析填料相比，Mustang Q膜层析的开放孔道的设计使对病毒的动态载量大大提高30倍左右，回收率在80%以上。用40L的膜层析柱相当于1000L的传统层析柱的效果，节省了验证工作，提高了工艺经济性，十分有利于放大生产。 /p p 　　德国的Boehringer Mannheim公司生物制药部，用STREAMLINE技术代替传统工艺生产400L CHO细胞培养的Fc融合蛋白，结果样品回收率提高14%，缓冲液减少25%，时间缩短47%[17]。 /p p 　　世界最大的制药公司-GlaxoSmithKline公司，使用特别设计的BioProcess全自动层析系统和STREAMLINE扩张柱生产药用脂蛋白疫苗，比原工艺产品体积缩小2倍，纯化系数1.5，内毒素减少100倍[17]。 /p p 　　日本YOSHITOMI公司正在使用多套STREAMLINE 1000系统生产人重组白蛋白，与原生产工艺产品纯度相同，产率提高30%，时间减少一半，年产量为12.5吨[17]。 /p p 　　AVECIA公司重新设计临床Ⅲ期药品生产工艺，选用STREAMLINE技术及SOURCE新型凝胶，生产效率提高12倍，回收率提高1倍[17]。 /p p 　　2001年，ILEX制药公司的CAMPATH获得FDA批准。该单克隆抗体使用Sartobind Q离子交换层析模块以流穿的方式进行精制，这是膜吸附器首次被批准应用于治疗性蛋白的生产，证明了膜层析技术通过了证实和测试[30]。 /p p 　　4. 展望 /p p 　　随着抗体产品上游大规模高效培养技术的进一步发展,实验室规模哺乳动物细胞表达水平可以达到25g/L，如果这一水平能够有效放大到生产,将对下游生产纯化带来更大的压力。所以下游纯化工艺的技术发展也是势在必行。 /p p 　　以下一些发展方向可能成为下游工艺未来发展的重要关注点：(1)刚性更好、载量更高、耐碱性更好的完全亲水琼脂糖凝胶的开发[4]。(2)优化操作次序，降低缓冲液消耗的更大规模生产线的应用[21]。(3)通过单抗的氨基酸序列预测下游工艺关键参数：亲和层析洗脱pH条件、离子交换层析洗脱pH和盐浓度条件、病毒灭活pH等[22]。(4)下游工艺的成本消耗占全部成本的50-80%，亲和捕获是下游工艺的最关键步骤，通过改进亲和配体，提高捕获能力，节省成本[23]。(5)新型层析系统全程实时控制纯化过程，在线检测HCP、宿主DNA、Protein A等的含量[24]。(6)由于在去除杂质方面的优势，膜层析将会得到飞速的发展，未来工艺甚至可能完全基于膜层析而不是柱层析[25]。 /p p 　　参考文献 /p p 　　[1] 刘亚明,薛章.生物制药：迎接抗体药物的黄金时代.医药细分子行业研究报告,2009. /p p 　　[2] 陈志南.基于抗体药物的我国生物制药产业化发展前景.2008中国药学会学术年会暨第八届中国药师周论文集,2008. /p p 　　[3]Gail Dutton.Trends in Monoclonal AntibodyProduction.Feature Articles,2010, 30(4). /p p 　　[4]孙文改,苗景赟.抗体生产纯化技术.中国生物工程杂志,2008,28(10):141-152. /p p 　　[5]《人用单克隆抗体质量控制技术指导原则》.NICPBP(中国药品与生物制品检定所),2003. /p p 　　[6]Capto adhere：用于生产单抗的两步纯化操作.GE Healthcare公司技术资料. /p p 　　[7]中空纤维滤柱分离纯化应用集锦.GE Healthcare公司技术资料. /p p 　　[8]中空纤维膜过滤技术在单抗生产中的应用.GE Healthcare公司技术资料. /p p 　　[9]Amersham Biosciences.Downstream Gab’02 Abstracts,Extended Reports from the 2nd International Symposium on DownstreamProcessing of Genetically Engineered 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在合成生物学与生物技术中，定制基因序列的可靠性和成本效益对于相关应用是至关重要的。尽管脱氧核糖核酸(DNA)微阵列对于基因合成的短寡核苷酸池也是一个划算的来源，但是这些复杂混合物必须经过放大和正确的组装。一项最近的研究描述了一种方法，即将30个基因(或基因变异池)合成在一个单芯片上。美国科学家报告说，一轮的合成与选择能够成功鉴别出那些具有人们所渴望的属性的基因变异，例如最佳的表达水平。 　　在这项新的研究中，美国北卡罗来纳州杜克大学的Jiayuan Quan和同事进行了等温的基因巧合以及链置换扩增反应，以同时扩大和释放60-mer的寡核苷酸，随后他们利用聚合酶循环组装在0.5kb～1kb的基因中建立了重叠产物。为了方便，这些反应都在芯片上以及相同的反应混合物中进行 假性的寡核苷酸杂化通过将芯片细分为针对每个基因的单独的阱而得到最小化。其产物随后通过芯片外聚合酶链反应(PCR)而进一步被放大。 　　研究人员还开发出了一种质量控制程序，从而使错误合成基因(在一次变性复性循环后形成错配的双链单位)的亚族群能够被错配特定内切酶所分开。然而，由于变异的错配可能性，这一程序的一个局限在于它只适用于合成单一基因，而不是一组密切相关的基因变异的混合库。 　　这种基因合成方法随后被应用到优化转基因表达，除了强启动子序列外，这还要求适当的密码子使用。研究人员生成了lacZα基因片断的一个同义“密码子变异”库，并在大肠杆菌细胞中表达了它们。当在包含半乳糖苷的琼脂中生长时，克隆被选择用来使基于其蓝色色度的lacZα表达最大化。相对于野生型序列而言，在这些克隆中，lacZα序列被发现极大提高了lacZα的表达。 　　在一个类似但更有价值的应用中，研究人员生成并测试了74个黑腹果蝇转录因子的密码子变异库。高度表达的变异需要抗体的产生，并且根据绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白标记物的荧光强度，这些变异被成功鉴别出来。 　　研究人员在最近出版的《自然—生物技术》杂志上报告了这一研究成果。 　　研究人员指出，搞清这些光学基因序列是否为基于一些属性，例如mRNA结构和稳定性的功能性选择，以及这种方法是否是更长基因合成的最佳延伸，将令人关注。