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肌肽对照品

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肌肽对照品相关的论坛

  • 肌肽-Diamonsil C18(2)

    方法:HPLC基质:蜂制品应用编号:103731化合物:丙氨酸、组氨酸、肌肽固定相:Diamonsil C18(2)色谱柱/前处理小柱:Diamonsil 5μm C18(2), 250 x 4.6mm样品前处理:供试品:量取200 μL 组氨酸、丙氨酸、L-肌肽混合溶液,其中组氨酸浓度为310μg/mL(2.0 mmol/L)、丙氨酸浓度为178μg/mL(2.0 mmol/L)、肌肽浓度为2000 μg/mL,置于1.5 mL塑料离心管中,混匀,再加入100 μL 1 mol/L三乙胺-乙腈溶液和100μL 0.2 mol/L异硫氰酸苯酯-乙腈溶液,混匀,室温反应1 h,然后加入400μL正己烷,旋紧盖子后剧烈振荡5~10 s,静置分层,取200 μL下层溶液与800 μL水混合,0.22 μm针式过滤器过滤,待分析。色谱条件:色谱柱: Diamonsil C18(2)250*4.6 mm,5 μm(Cat#:99603) 流动相: 50mM乙酸钠(冰乙酸调节pH值为6.50±0.05):甲醇 =87:13 流速: 1.0 mL/min 柱温: 35℃ 检测器: 254 nm 进样量: 10.0 uL文章出处:天津应用实验室关键字:肌肽、Diamonsil C18(2)、丙氨酸、组氨酸、HPLC摘要:Diamonsil C18(2)检测丙氨酸、组氨酸、肌肽。谱图:http://www.dikma.com.cn/u/image/2016/01/18/1453098679716995.png

  • 【讨论】C18柱检测肌肽纯品两个小时没出峰

    我用C18柱检测肌肽纯品(浓度是560mg/L),流动相是V甲醇:V磷酸缓冲液=60:40,进样量2ml/min,检测波长:210 nm,两个小时没出峰,请教下各位大侠,问题出在哪?应该怎样改进?不胜感激!!!

  • 【肌肽和鹅肌肽】极性太强保留不住分离不开,它在中性条件就轻松做到,你猜是哪款?

    【肌肽和鹅肌肽】极性太强保留不住分离不开,它在中性条件就轻松做到,你猜是哪款?

    [align=center][b]肌肽和鹅肌肽的液相拆分[/b][/align]肌肽(β-丙氨酰-L-组氨酸,L-Carnosine),是由β-丙氨酸和L-组氨酸两种氨基酸组成的二肽;鹅肌肽(β-丙氨酰-1-甲基-L-组氨酸,Anserine),为高度稳定的水溶性二肽,天然存在于脊椎动物的骨骼肌组织和脑组织中。客户提供了肌肽和鹅肌肽单标,希望本实验室建立液相分离方法。由于肌肽和鹅肌肽二者结构只相差一个甲基,极性差异较小,相对分离难度大。 [img=,144,124]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090931580308_6331_2222981_3.gif!w144x124.jpg[/img] [img=,161,101]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090931577848_7200_2222981_3.gif!w161x101.jpg[/img] 肌肽 鹅肌肽 L-Carnosine L-Anserine MW:226.23 MW:240.26首先,尝试使用键合立体笼状结构金刚烷基官能团的高表面极性色谱柱——CAPCELL PAK ADME,在酸性纯水相条件下进行分析,发现肌肽和鹅肌肽出现分离趋势,但由于保留时间较短,无法达到有效分离,结果如图1所示。[align=center][img=,587,336]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090933111788_8226_2222981_3.png!w587x336.jpg[/img][/align][align=center]图1 CAPCELL PAK ADME在酸性条件下分析结果[/align][img=,585,234]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090933114648_9590_2222981_3.png!w585x234.jpg[/img]为了延长保留时间,将0.1%磷酸水溶液更换为0.1%三氟乙酸(TFA)水溶液,使用耐纯水的高极性色谱柱——CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] AQ色谱柱进行分析,希望能在离子对试剂的作用下加强保留。如图2,TFA条件下保留时间延长至4min,但分离趋势减弱;同时我们也将离子对试剂更换为辛烷磺酸钠,进一步延长了保留时间,但同样分离趋势不明显。[align=center][img=,551,310]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090934074804_4574_2222981_3.png!w551x310.jpg[/img][/align][align=center]图2 CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] AQ色谱柱在TFA条件下分析结果[/align][img=,585,240]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090934078134_1337_2222981_3.png!w585x240.jpg[/img]由于在酸性反相条件下保留时间较短未能得到分离,因此也考虑尝试使用HILIC模式加强保留。使用PC HILIC色谱柱在80%乙腈条件下进行分析,结果如图3所示,肌肽保留时间能够延长至10 min以上,但峰形较宽,无法得到二者分离。[align=center][img=,520,287]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090936103468_4971_2222981_3.png!w520x287.jpg[/img][/align][align=center]图3 PC HILIC色谱柱分析结果[/align][img=,584,240]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090936106174_1801_2222981_3.png!w584x240.jpg[/img]综合考虑上述分析结果后,继续尝试在碱性条件(pH 9.0)使用反相色谱柱进行分析。由于流动相条件碱性较强,且不含有机相,因此首先使用了[color=#2E74B5]耐碱性较强的[/color][b][color=#2E74B5]CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] BB[/color][/b][color=#2E74B5]色谱柱[/color]进行尝试,如图4,在碱性条件下肌肽和鹅肌肽保留时间较长,且分离良好。[align=center][img=,643,354]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090936537848_7200_2222981_3.png!w643x354.jpg[/img][/align][align=center]图4 CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] BB在碱性条件下分析结果[/align][align=left][img=,586,240]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090936539754_4627_2222981_3.png!w586x240.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left]然而,考虑到[color=red]碱性的纯水相条件非常苛刻[/color],即使使用耐碱性色谱柱进行分析,仍可能对色谱柱自身[color=red]寿命[/color]造成不良影响,因此我们进一步尝试将流动相条件由碱性调整为中性,同时比较耐碱型色谱柱BB和耐水型色谱柱AQ的分析结果。如图5,在中性条件下,耐水型色谱柱AQ的保留及分离情况要优于BB色谱柱。[/align][align=left][/align][align=center][img=,685,380]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090937301594_4721_2222981_3.png!w685x380.jpg[/img][/align][align=center]图5 中性条件下CAPCELL PAK C[sub]18 [/sub]BB与AQ色谱柱分析结果对比[/align][align=left][img=,644,234]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090937303774_3593_2222981_3.png!w644x234.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left]最终,我们选择CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] AQ色谱柱在中性分析条件下添加5%甲醇,同时优化柱温,得到最终分析结果如图6所示,肌肽与鹅肌肽之间分离度为2.82,能够达到基线分离。[/align][align=left][/align][align=center][img=,690,406]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090937597754_6120_2222981_3.png!w690x406.jpg[/img][/align][align=center]图6 CAPCELL PAK C[sub]18 [/sub]AQ色谱柱优化条件分析结果[/align]注:峰上标数字为分离度。[align=left][img=,690,225]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090937599944_7234_2222981_3.png!w690x225.jpg[/img][/align][align=left][/align][align=left]综上所述,使用[b][color=#2E74B5]CAPCELL PAK C[sub]18[/sub] AQ S5 4.6 mm i.d. × 250 mm[/color][/b]色谱柱在中性高水相条件下可完成肌肽和鹅肌肽的良好保留与基线分离;实际样品分离过程中,客户可根据实际需要再做pH调整等措施来改善分离及保留。[/align][align=left][/align][align=left][/align][align=right][img=,690,127]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808090939079178_5457_2222981_3.png!w690x127.jpg[/img][/align]

  • 食品来袭,你们添了几台光谱仪器?

    随着人们对食品越来越重视ZF加大了审查力度这样就要求企业需要配置些光谱去做重金属的检测那么你们添加了几台呢?有图有真相有图者一律奖励5分以上

  • 【第三届原创参赛】C18与丙基酰胺硅胶柱对肌肽分离能力比较

    维权声明:本文为huomeng520原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。本实验建立了一种以牛肉中肌肽为代表,反相分离测定亲水性物质的方法。该方法选用丙基酰胺键合硅胶亲水作用色谱柱,反相分析测定牛肉中亲水性成分—肌肽的含量。该方法操作简单,样品无需衍生处理。通过该法结合 H P L C—M S联用技术确定了保留时间为10.276~10.609min的色谱峰就是肌肽峰。将该色谱柱与常规C18色谱柱进行对比后发现,该色谱柱对L-肌肽的保留能力和分离能力均优于C18柱。此法精密度实验显示其相对标准偏差(RSD%)为1.06%,最低检测限为4.59×10-2mg/L。最后实验结果表明:亲水性色谱柱反相使用时,完全适用强极性物质含量的测定,通过实际样品分析检测,每克牛肉的肌肽含量为0.011克。引言L-肌肽(L-carnosine)是一种水溶性二肽,在1900年由Gulewitsch和Amiradzhibi在牛肉提取物中发现。L-肌肽天然存在于多种脊椎动物的骨骼肌以及新陈代谢旺盛的脑中。它具有广泛的生物活性,如抗氧化、保护膜的完整性、抗糖基化、质子缓冲、调节巨噬细胞活性等,是维持机体正常状态的一种含量很低的物质。L-肌肽的结构为β-丙氨酰—L-组氨酸。L-肌肽的结构如图1所示。从化学结构上看,肌肽由于含有较多的极性基团(-OH、-NH2、-COOH),水溶性特别强。肌肽的正辛醇—水分散系数为-2,远远小于0,理论上说明了L-肌肽的强极性,不溶于任何有机溶剂,属于亲水性成分。近年来,L-肌肽的研究一直受到人们关注。其含量测定方法一直在探索中。目前已报道的L-肌肽的分析方法主要以高效液相色谱法为主,且多采用柱前衍生化法,这种方法试剂成本高,样品预处理繁琐,且分析时间长,不利于对样品的快速检测。也曾有报道将离子色谱和毛细管电泳色谱应用于L-肌肽的测定,但两种方法较为复杂,且仪器操作较为繁琐。将氨基柱应用于反相高效液相色谱,能实现对样品中L-肌肽快速、准确地检测,但氨基柱不耐水解,长时间在反相条件下使用,会缩短氨基柱的使用寿命。所以应选择一款既耐水解,柱效又高的色谱柱对牛肉中L-肌肽进行分析。色谱柱填料通常是以硅胶为载体,在硅胶表面进行修饰。C18色谱填料是在硅胶表面键合非极性的十八烷基碳,属于非极性色谱填料。根据“相似相亲原则”,应选用极性较强的色谱柱分析极性物质,普通的C18反相色谱柱属于非极性色谱柱,对亲水性成分没有保留能力,因此不能满足对此类物质的分析要求。实验中选用丙基酰胺键合硅胶柱,该色谱柱填料以硅胶为载体,表面键合丙基酰胺基团,极性强,耐水解,适用于对极性物质的分离。马婧玮采用此柱,实现了对亲水性井冈霉素A快速准确的定量分析。本次实验从L-肌肽的性质出发,结合色谱柱的性质,将丙烯酰胺键合硅胶色谱柱与常规C18柱进行对比,并借鉴田颖刚等人已发表的L-肌肽质谱分析条件,选择分离效果最好的色谱柱与电喷雾质谱串联使用,对牛肉中肌肽进行了分析鉴定。

  • 对照品峰形变成的平台

    对照品峰形变成的平台

    [color=#444444]求助,高效液相色谱跑对照品标准曲线,前4个浓度均正常,第5个浓度跑出来之后出现平台,求大神指点哇[/color][color=#444444][img=,690,350]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907151542449398_4792_1847709_3.jpg!w690x350.jpg[/img][img=,690,417]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/07/201907151542461529_5144_1847709_3.jpg!w690x417.jpg[/img][/color]

  • ICP室应安装几台空调

    我这ICP单独一个实验室,只有一台空调。现在夏天到了,将空调温度调为17度,仍发现ICP的检测器温度很高。我需要再安装一台空调吗?各位大侠的ICP室有几台空调呀

  • 对照品与试剂级别的关系

    请教一下大家用于HPLC含量测定的对照品和一般说的试剂,两者之间的级别如何看,是不是对照品就是对照品级别,而试剂才有AR,GR,RG等级别的说法?比如某标物网站写的葡萄糖是基准试剂,PT级别,这个就不能作为对照品?

  • 这几台电脑该如何分配?

    某单位的实验室检验科,盼了N年了,总算昐到了人手一台电脑,但是,当电脑分下来的时候才知道,新旧电脑各半。问题来了,谁用新的,谁用旧的呢?这几台电脑该如何分配?大家有没有好的建议?

  • 主成分自身对照法~对照品峰面积离谱。

    我们方法使用的是主成分自身对照法,1ml供试品溶液定容至100ml,既为对照品溶液。但最近图谱对照品溶液主峰面积仅为供试品溶液主峰面积的1/200。和理论值差了50%。换人,换1ml移液管多次尝试面积还是只有理论值的50%。请教会不会和我的方法设置有问题,一个月前还是正常值。流速和压力过大会不会有影响?谢谢~~

  • 来说说你们的试验箱都有几台压缩机

    据我所知,高低温试验箱的决定因素就是压缩机,压缩机的好坏决定试验箱的成本和制冷技术,风冷合适还是水冷或者液氮制冷,你们使用过的试验箱都有几台压缩机,最低可以降到多少度呢。

  • 对照品领用记录的装订方式

    这个问题可能有些奇怪先说说概况吧:之前我们这边的台帐都是采用活页装订的,就是缺少了可以直接拆了往里面加页。上次检查被专家提出这样有造假嫌疑,建议我们采用固定页数受控发放的台帐。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09501.gif于是我们就准备这么开始做了,但做到对照品领用这一块的时候就发现问题了。对照品的帐都是一页写一个对照品,而很多对照品领用数量不固定,可能用到1页、2页,甚至可能3页或更多。这样的话,页数就无法固定了。想过一个对照品用一本帐,但我们这边对照品实在是太多了,一个一本的话得一大堆帐http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09512.gif。不知道各位都是怎么处理对照品台帐的?

  • Waters 液质联用色谱仪,对照品峰面积、效期不定

    做阿胶中马皮含量实验的时候,马原寡肽A加溶液溶解后效期为1个月。每次配置对照品新开一只,批号不变。但是最近几次陆续变成20天、7天、6天,上机峰面积一直差不多七位数,突然就变成五位数了,第二天重复上机对照品,对照品就已经没有峰了。样品峰面积是正常的,所以应该不是溶液和酶的问题吧有大神遇到过这种问题吗?求解答

  • 对照品前后响应差异大

    最近几次实验发现,外标法测定含量结果差异较大,查看前后实验发现,几次下来的对照品在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]上的响应差异很大,想知道同一台仪器相同色谱条件下,对照品响应不会差异很大吧,为什么会出现这种情况,求助大神,帮忙解决问题

  • 【求助】定氮法测工作对照品的问题?

    有一个自制的多肽类工作对照品(1类新药),目前是用定氮法来测去含量,然后再用于测样品含量。该对照品纯度只有95%左右,也就是说还有5%的未知结构的短肽或缺失肽存在。而定氮法测的总氮,这样算出来的对照品含量应该是高于它的实际含量的,用它测的样品含量也应该是虚高了的。所以我认为用定氮法来测定多肽类的对照品含量不是很准确。请问:我这种理解对吗?如果对,有什么更准确的方法检测多肽产品的含量呢?谢谢[em0801]

  • 【求助】如何由标准品得到对照品的标准值

    现在有标准品为进口丁基橡胶作为测定门尼仪测定校正样品,由于进口标准品价格高,现在用国产丁基橡胶与标准丁基橡胶在相同条件下同一台仪器测定,多少次对比数据,如何把测定值和标准品的标准值转换成对照品的标准值.

  • 【原创】丙谷二肽杂质对照品

    丙谷二肽杂质对照品名称 环-(L-丙氨酰-L-谷氨酰胺) 规格:0.25gL-焦谷氨酰-L-丙氨酸 规格1g"N-(2)-D-丙氨酰-L-谷氨酰胺" 规格:0.25gL-丙氨酰-L-谷氨酸 规格:1gL-焦谷氨酸 规格:125mg

  • 求助同一对照品峰面积差别很大的原因?大家分析一下

    头一段时间配置的对照品,现在再用,峰面积和以前产别很大,是以前的1/3左右(连进几针,平行样挺好)。换台仪器上做时,就没有差别,所以排除对照品降解问题,基本确定仪器问题,灯的能量是低了,但噪音不是很大(不知对峰面积影响如何),压力平稳,所以排除漏液问题,如果进样有问题的话,那那每针的平行能好吗?大家帮分析一下还有什么问题会造成这种现象啊?

  • 安捷伦1260对照品进样RSD不合格

    在进芍药苷对照品的时候,主对照连续走7针,前三针2200+,后面四针2000+,对照22针面积基本差不多。同台机子重做,主对照走了6针,第五针比前后几针都大200,对照2,两针面积相差200左右。两次实验,序列中样品面积重复性很好,这是什么原因,新手入坑,大家伙多多指教!

  • 【第二届网络原创作品】小卢推荐:一种标定二级对照品的方法

    【第二届网络原创作品】小卢推荐:一种标定二级对照品的方法

    [size=4][b] 小卢推荐:一种标定二级对照品的方法[/b][/size]对照品作为实验室(制药行业)一种常用的、重要的试剂,根据其类型,可分为:一级对照品,即为从中国药品生物制品检定所(简称:中检所)购买后直接使用的对照品;二级对照品,由一级对照品标定原料药得到的对照品。由于一级对照品的规格小、价格高、购买周期长的缺点,对于实验室对照品用量大的企业来说,使用二级对照品成了实验室的首选。现在,我就介绍一种标定二级对照品的方法,供大家参考一下。[b]第一,选定样品[/b]一般来说,选择自己生产的原料药价格便宜,不需要外购,且取用方便,是我们的首选。如果我们的生产工艺不好、稳定相差,最好选择外购知名企业的原料药。但要注意,要选择作为对照品的原料药一定是相对其他批次各检验项目都比较好的同一批原料药。[b]第二,标定方法[/b]现以高效液相测定法检测含量为例,来表述其测定方法。由于要严格保证所标定原料药的含量,因此采用3人、3份样品的方法进行测定,即:每个人称取2份对照品、3份样品进行测定;共有3人进行测定。如果有条件,3个人可以选择3台不同的液相色谱仪进行实验。在这里要求2份对照品共进样5针,计算校正因子,并求RSD应小于0.5%,3份样品各进1针,求平均值。方法和要求如下表:[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911090939_182733_1622024_3.jpg[/img]按照表格内容,由3人得到的3个不同的含量,最后求得均值,即得样品(二级对照品)的含量,并要求3者的RSD≤1%。[b]第三,分装[/b]使用抗生素瓶分装,装量按照每次使用量(如60mg,则装入80-100mg即可)为标准,即使每个抗生素瓶中的对照品只使用一次。这样既能避免对照品被污染,又能使其少吸潮。如果为了节省抗生素瓶,采用大装量,即一瓶中的对照品可以使用多次,那么,建议在使用3-6次后就报废本瓶对照品。因为每次打开瓶口称取对照品都是对该瓶对照品的一次污染,尤其是空气中水分对它的影响,这样会是对照品的含量发生变化,原来的标定也就失去了意义。分装环境:建议在层流罩下进行,严格控制温湿度(建议温湿度:18-24℃,45-65%)。封口步骤:分装后,用橡胶盖盖紧,再用封口膜封好后,用铝盖压实即可。[b]第四,制定有效期[/b]一般比较稳定的样品制定2年,不是很稳定的样品制定1年。但是这个有效期不能超过该样品本身法定的有效期。[b]第五,贴签[/b]制定好了有效期就可以把样品(二级对照品)的标签贴上去了,标签格式如下:[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911090939_182734_1622024_3.jpg[/img][b]第六,储存[/b]不管原来样品法定的存储温度是多少,都建议保存的温度最好在2-10°,即冰箱中的冷藏温度。根据资料研究,2°是药品的最佳保存温度,因为这个温度下药品的降解速度最慢。[b]第七,复核[/b]我们制定了有效期后,并不是就完成了所有的工作。我们要在有效期的一半时,对二级对照品进行复核,检验方法同本法中第二步骤,所取样品则是从原标定的二级对照品中抽取。如果复核结果没有变化,则继续使用;如果复核结果发生了变化,那就按照复核的含量,从新贴签标示。通过以上7步就完成了对照品的标定工作,大家有什么看法可以回帖说明,我们共同讨论![em09505][em09505](全文完!)

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