疣孢漆斑菌

企业里做沉降菌一般培养皿暴露多久

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包**头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～**5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌，该类群中与食品关系密切的菌属如下。1．芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢，对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧，绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B．anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B．cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B．thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽杆菌(B．subtilis)。此外，也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B．ccrcl2S)：该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中，污染牛乳后可产生卵磷脂酶，破坏脂肪球膜，使得脂肪不能很好地乳化，还可以产生类似凝乳酶的酶，使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃，pH值为4·9～9·3，发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后，可以引起食品腐败变质，并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等，引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B．subtilis)：该菌菌落呈圆形或不规则形状，表面粗糙或有皱纹，呈奶油色或褐色，菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌**面粉后，可以使发酵面团产生液化黏丝状现象，使烤制的面包或馒头出现斑点或斑纹，并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌，但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长，可以使牛乳变稠，有时在不变酸时使牛乳凝固，即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B．megaterium)：该菌可以在含氨的环境中生长，不需要生长因子，无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下，于葡萄糖肉汤中不生长，多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到，可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体，使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B．stearothermophilus)：该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落，表面光滑或粗糙，能在49～65℃范围内生长，对热的抵抗力很强。该菌在pH值5．0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B．coagulans)：该菌菌落为不透明的小菌落，生长温度范围为18～60℃，可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长，产生醋酸、乳酸和CO2**厌氧条件下主要产生乳酸，不产气。该菌能在pH值3．5～4．5的食品中生长，引起食品变质，罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中，通常使乳形成坚实凝结，偶尔呈碎片状凝结，并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2．梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌，只有少数种可在大气条件下生长，但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形，位于菌体中央，使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2．5％～6．5％NaCl浓度的渗透压，对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C．butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇)，在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C．putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸，产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物，在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化，在熟肉上生长使肉变黑，在罐头中生长时，因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c．botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素，当人们食入含有该毒素的食品时，可发生毒素型食物中毒，早期症状为全身无力、头痛、头晕，继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C．terni)是人和动物的破伤风病病原菌。**

如题，采用平板计数琼脂 菌落总数中到底包不包括酵母菌与霉菌？谢谢

阪崎肠杆菌是人和动物肠道内寄生的一种革兰阴性无芽孢杆菌。作为肠杆菌科的一种，一直被称为黄色阴沟肠杆菌，直到1980年才更名为阪崎肠杆菌。该菌是肠道正常菌丛中的一种，在一定条件下可引起人和动物致病，所以称为“条件致病菌”。 　　阪崎肠杆菌自然来源非常广泛，在水、土壤、植物根茎、动物肠道甚至加工食品都可存在，其中婴儿配方奶粉是婴儿感染阪崎肠杆菌的主要渠道。阪崎肠杆菌的繁殖、宿主和感染途径一直是研究人员正在进行的课题。2002年，有研究人员从奶酪、碎牛肉、腊肠和蔬菜中分离到阪崎肠杆菌，但目前仍不能确定该菌的自然宿主到底是什么。 　　2003年又有研究人员从厩螫蝇中肠中分离到阪崎肠杆菌?熏因而认为厩螫蝇幼虫肠道是阪崎肠杆菌的环境宿主之一。而厩螫蝇在世界范围内广泛分布?熏以牛、马、狗、猪和人的血液为食?熏在牛、猪或马的养殖场所可见该蝇?熏在牛棚更常见?熏因而可能污染牛奶。流行病学研究发现厩螫蝇的地理分布和阪崎肠杆菌感染直接相关。 　　同时，美国一家疫情控制公司的技术报告中记载舍蝇中存在阪崎肠杆菌，但没有确切记录该菌究竟是在舍蝇体内还是体外。研究人员推测，昆虫很可能是阪崎肠杆菌的环境宿主。 　　阪崎肠杆菌感染并非是不治之症，用抗生素就可以有效控制。虽然阪崎肠杆菌的毒力因子和致病性现在还不太清楚，但已发现有些阪崎肠杆菌可能产生一种毒力因子——类肠毒素样化合物。而且，组织培养也发现一些菌株可产生细胞毒效应。 　　与肠杆菌属其他细菌相比?熏阪崎肠杆菌对常用的抗菌药更敏感。但是由于阪崎肠杆菌耐药性不断增强?熏近来一些专业人员建议采用碳青霉烯类或新一代头孢霉素和其他药物联合治疗阪崎肠杆菌。不过在临床上，需要根据临床诊断和细菌的药敏试验来找到合理的药物配伍治疗方案。

NYT1331-2007第三部分嗜热需氧芽孢中计数，如果10倍稀释平板计数分别是3和4，按照标准的规定，结果报告是不是为：＜10*1/10？如果平板菌没有菌落生长呢？

枯草芽孢杆菌有没有什么选择性培养基，或显色培养基呢？ 在营养琼脂上培养呈褶皱菌斑，加上革兰氏镜检，是否能初步鉴定为枯草呢？ 有没有什么检测方法是被认可的，或有资料支持的呢？

新西兰乳制品巨头恒天然8月3日发布消息称，在三批次浓缩乳清蛋白粉中检出肉毒杆菌。多美滋、娃哈哈、可口可乐等多家企业涉案，并启动召回工作。　　肉毒杆菌的毒素被用来开发成生化武器，是世界上最毒的物质之一。此次婴儿配方奶粉和运动饮料使用了受肉毒杆菌污染的乳清蛋白粉，会有哪些风险？肉毒杆菌真的有这么恐怖吗？　　艺康(中国)食品安全经理陆有开告诉《第一财经日报》记者，肉毒杆菌(也叫肉毒梭菌)是一种产芽孢的革兰氏阳性杆菌，主要来源于土壤、水、水底沉积物及动物粪便等。　　“肉毒杆菌生长到一定数量时会产生神经毒素，这种神经毒素是世界上最毒的物质之一，可以抑制人体神经信号的传递，让人出现头晕、呼吸困难和肌肉乏力等症状，因此，有些国家把它开发成生化武器。”陆有开称。　　不过，肉毒杆菌对生长条件要求“苛刻”。陆有开说，肉毒杆菌需要在ph值4.6以上的非酸性食品和无氧气或很少氧气的环境下才能生长。肉毒杆菌生长体本身耐热性并不强，通常100℃烹煮过程就能将肉毒杆菌生长体杀死，但其在不良环境下芽孢的抵抗力更强，芽孢是细菌的休眠体，对干燥、热处理和消毒剂等具有很强的抵抗力，121℃热杀菌10秒左右才能杀死90%的肉毒杆菌芽孢。芽孢本身不能进行生长繁殖，也不能导致食品的腐败，但是，一旦碰到合适的条件，芽孢会发芽变成生长体而进行繁殖。肉毒杆菌最适合的生长温度范围为30℃~37℃，大部分菌株在10℃以下不能生长，但有的菌株在3℃以上就能生长。　　肉毒杆菌能在奶粉中生长吗？陆有开说，奶粉中的水分活度较低，因此肉毒杆菌在奶粉中不能生长。但这并不意味着奶粉中就完全不存在肉毒杆菌的芽孢。“在奶粉上检出的应该是肉毒杆菌的芽孢，它的来源估计是由杀菌工艺失效和杀菌后污染引起。”　　肉毒杆菌的中毒路径有两种，一种是对一岁以下的婴儿来说，吞食了含有肉毒杆菌毒素芽孢的食物，由于婴儿肠道内的正常肠道细菌群落还没有建立，肉毒杆菌毒素芽孢发芽生长产生毒素，导致婴儿中毒；另一种是对一岁以上的人群来说，由于他们的肠道菌群已经建立，肉毒杆菌毒素芽孢不可能发芽生长，因此，其致病性就是由于肉毒杆菌先行在食物中生长产生了毒素而使人致病。　　陆有开称，在西方，肉毒杆菌中毒案例主要发生在家庭自制罐头上。　　他说，目前的奶粉没有检测肉毒杆菌的项目和要求，根据风险评估的结果，在婴儿奶粉中，肉毒杆菌的风险要比其他致病菌风险小得多，如沙门氏菌和阪崎肠杆菌，也不可能将所有的致病菌都进行检测，这主要靠良好的操作规范和卫生保持来控制。

一、阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种，1980年由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和茵血症，死亡率高达50％ 以上。目前，微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。阪崎肠杆茵的生物学性状及其对人群的健康危害受到人们的关注并被报告。例如，味全配方奶粉2008年年10月份被检出含有致病菌阪崎肠杆菌。　　阪崎肠杆菌是奶粉(乳)制品中新发现的一种致病菌。由其引发的婴儿、早产儿脑膜炎、败血症及坏死性结肠炎散发和暴发的病例已在全球相继出现。多份研究报告表明婴儿配方奶粉是当前发现致婴儿、早产儿脑膜炎、败血症和坏死性结肠炎的主要感染渠道,在某些情况下，由阪崎肠杆菌引发疾病而导致的死亡率可达40％～80%。阪崎肠杆菌已引起世界多国相关部门的重视。据报道,国外乳业巨头曾因此被召回.在美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后，2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉，阪崎肠杆菌从此成为世界瞩目的焦点。但是国内企业鲜有自查能力,原因是国内以前还没有专门的检测手段,而去买一套以前国内从未有过的检测设备也不是马上就可办到的。目前,国外 奶粉(乳)制品巨头却拥有检测手段,惠氏中国宣称保证在中国销售的每一个产品都经过了阪崎肠杆菌的检测才上市。同样宣称设有此检测设备的企业还有美赞臣中国公司。　　在国外发现的奶粉中的阪崎肠杆菌并非有其特定的区域局限性，中国奶粉企业又面临一项大难题。　　2005年5月20日，由中国检验检疫科学研究院和天津出入境检验检疫局牵头完成的《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准在京通过了审定。这项标准的出台，解决了我国检测婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌无标准、无检测方法的问题。10月该标准被实施。　　该标准建立了阪崎肠杆菌的改进的传统检测方法、普通[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]方法和荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]方法。　　据了解，阪崎肠杆菌是乳制品中近几年新发现的一种致病菌。它是存在自然环境中的一种“条件致病菌”，已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌，可导致任何年龄层人群的疾病，尤其是对早产儿、出生体重轻的婴儿或免疫受损婴儿的威胁最大，严重者可导致败血症、脑膜炎或坏死性小肠结肠炎。　　继美国FDA2002年在本土某一些国际乳业巨头生产的婴儿配方奶粉中检出阪崎肠杆菌后，2003年又一家国际乳业巨头公司主动召回在美国生产的一批检出极微量阪崎肠杆菌的罐装早产儿特殊配方奶粉，此后成为世界关注的焦点。我国在2005年5月通过《奶粉中阪崎肠杆菌检测方法》行业标准的审定，对奶粉严查此菌。　　今年以来，广州、中山、汕头检验检疫部门在食品工业用进口奶粉中已多次检出阪歧肠杆菌。　　二、控制阪崎肠杆菌危险的几点建议 　　（1）制定婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌微生物标准，建立有效控制措施，将其危险性降低到最低。　　（2）制定加工、使用和操作婴幼儿配方食品的导则，研究降低阪崎肠杆菌污染水平的方法，在生产环境和配方奶粉中降低阪崎肠杆菌的浓度和流行的危险性；为高危人群生产较大比例的商业无菌配方替代产品。　　（3）制定有效的环境监测计划，将肠杆菌科而不是大肠杆菌作为工业生产线的卫生指标菌。　　（4）建立实验室监测网络，对阪崎肠杆菌的来源、传播途径等进行调查研究；加强相关学科的基础研究，包括生态学、分类学、菌株毒力等。　　（5）用商业无菌液体或开水冲调配方食品，喂养婴幼儿后剩余的调配食品应放置冰箱保存，并在食用前再加热。我国应根据实际情况制定相应管理办法，加强对阪崎肠杆菌的检测技术及控制技术研究，进一步完善婴幼儿配方食品标准，以保证我国广大婴幼儿群体的健康与安全。　　三、阪崎肠杆菌检测必备仪器--荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪：　　实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测系统也叫实时荧光定量核酸扩增检测系统（英文全名是Real-time Quantitative [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] Detection System），简称实时荧光q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]，q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]的核心是实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪及与其配套的检测分析软件系统。　　聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction简称[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]）原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获1993年诺贝尔化学奖。因其在病原体检测方面的独特优势，因而发达国家在相关方法和仪器方面的研发非常快，成为分子生物学诊断的主流，至今仍处于学术和应用前沿，发展至今已有三代产品：第一代[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]定性检测技术及设备由基因扩增热循环仪（DNA Thermal Cycler）+电泳仪+紫外分析仪+定性试剂构成；第二代[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-DNA终点定量技术及设备（End-point quantitative [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] detection）由基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定量试剂构成，其又分为终点酶免定量（End-point ELISA-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]）和终点荧光定量（End-point Flour-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]）两种；第三代产品为Real-time q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-DNA/RNA实时荧光定量检测。　　q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测灵敏度高，检测线性范围宽，检测精度和重复性好等突出优势，因此被公认为目前世界用于临床及科研的最先进核酸分子诊断技术，被美国FDA承认并推崇。检测项目包括：食物等病原菌以及疾病病毒等病原体如：乙肝病毒HBV DNA，丙肝病毒HCV RNA，艾滋病病毒HIV RNA，沙眼衣原体CT，淋病双球菌NG，巨细胞病毒CMV，结核分支杆菌Mtb、禽流感、阪崎肠杆菌、口蹄疫、新城疫、猪瘟、大肠埃希菌O157∶H7、沙门菌、炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等。　　[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪的应用范围广，几乎所有的生命科学领域都要涉及：食品检测、临床检验、疾病控制、检验检疫、科研实验室、食品安全、化妆品检测、环境卫生等。国内多家试剂厂商生产了包括肝炎、性病、优生优育、呼吸道疾病、禽流感、阪崎肠杆菌、口蹄疫、新城疫、猪瘟、大肠埃希菌O157∶H7、沙门菌、炭疽芽孢杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等在内的数十种荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]试剂盒，购买方便，价格便宜，并获得了国家相关认证。　　值得一提的是鉴于当前流行病的频发以及实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]技术的实际应用，国内外已将实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测技术强制应用于相关行业并相继制定了国际、国家、及行业标准作为法律依据。例如：　　SN/T 1632.3-2005 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 荧光[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]方法　　GB/T 19438.1-2004 禽流感病毒通用荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 检测方法　　GB/T 19438.2-2004 H5 亚型禽流感病毒荧光RT-[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url] 检测方法　　ISO22174-2005 食物病原体[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测方法　　相对于价格十分昂贵的进口仪器，选择质量性能与进口仪器相当而售价只有进口仪器三分之一甚至五分之一的优质国产荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪是国内绝大多数用户的必要选择，也是国家卫生主管部门、国家卫生部临床检验中心以及国家食品药品监督管理局提倡的；使用质量性能与进口仪器相当的国产荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪能为国家节省大量外汇，使更多的用户能够拥有先进的实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]技术和设备，同时还能促进国产仪器的技术进步、民族产业的发展，利国利民。　　西安天隆科技有限公司生产的TL988型实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪经过国家药监局指定的、具有国家质量检验检疫局认定的具有CNAL全球互认检测资质的检测中心检测合格，性能达到同类产品国际先进水平，并通过两家国家药物临床基地临床试验，获得了国家食品药品监督管理局SFDA核发的医疗器械注册证，并符合国家卫生部颁发的《临床基因扩增检验实验室管理规范》和《临床基因扩增检验实验室工作规范》。　　2005年至今我国科研人员围绕着阪崎氏肠杆菌的分类、致病机理、危害评估、减少污染措施、检测方法仪器和标准等进行了研究，相关研究论文包括：　　阪崎肠杆菌的生物学性状与健康危害，裴晓燕，刘秀梅， 中国疾控制中心营养与食品安全所 　　乳制品中的阪崎肠杆菌可致婴儿死亡，中国食品产业网 2008年5月28日10:56 　　乳品检测中实时荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪的研制，彭年才，苏明权，张镇西，中国乳品工业，CN23-1177/TS200705：62-64；　　乳制品中阪崎肠杆菌的快速检测，彭年才，李明，食品安全导刊，CN11-5478/R 2008.07；　　婴儿奶粉中阪崎肠杆菌及其检测，彭年才，张镇西，苏明权，中国乳业，CN 11-4768/S，2008.08。　　浅析乳品中高危害食品源性致病菌阪崎肠杆菌的快速检测，彭年才 内蒙古乳业 P18-20, 2008，03

蜡样芽孢杆菌的培养一般需要注意 哪些呢？

[size=12px][b][b]一、形态学特征[/b][/b] 形态学鉴别菌种是最直接的方法，也是最简单的方法。[b][color=#000000][b][color=#000000][b]1.菌落特征[/b][/color][/b][/color][/b]不同的菌种在不同培养基上菌落形态不同，这是鉴别所有菌种的特征之一。不同的芽孢杆菌，菌落的大小、颜色、凸起、边缘形状等也不同。因此，根据菌落形态可以区分不同的芽孢菌种。有的边缘整齐，有的边缘呈锯齿状，特征非常明显。拿到菌种，记住菌落形态或拍照记录很重要。[b][color=#000000][b]2.芽孢位置[/b][/color][/b]芽孢杆菌，属于革兰氏染色阳性菌，最大的特点就是能够产生芽孢，不同的芽孢杆菌芽孢出现的位置不同，这是鉴别芽孢杆菌的重要特征之一。有的芽孢在菌体的中部、有的在菌体一侧或顶端。可以按照芽孢的位置区分是否属于自己的菌种。观察芽孢可以采用简单染色法也可以采用芽孢染色法。 [b][b]二、生化生化特征[/b][/b] 相比形态学特征，生化特性比较繁琐，但是鉴别芽孢杆菌的重要方法。通过分析芽孢杆菌分泌的代谢产物，比如说酶活、条带的位置、抑菌圈、有机酸等，鉴别是否是目标产物，进而鉴别是否是自己的菌种。 [b][b]三、分子生物学手段[/b][/b] 如果形态学方法和生理生化方法不能鉴别，只能采用分子生物学手段。每个菌种的遗传物质都不同，常采用16S rDNA测序，跟已知序列进行比对后，可以准确地定位芽孢杆菌的种属，这是鉴别菌种最重要的方法。 [/size]

昆虫病原细菌广泛存在自然界，在不同的环境条件下，对昆虫数量的调节起着重要的作用。其中特别是某些芽孢杆菌已发展成为微生物杀虫剂，具有控制农林害虫的巨大潜力，是一种很有发展前途的防治害虫的新途径，在综合防治中越来越引起人们的重视。 自从19世纪末期开始研究家蚕、蜜蜂细菌病害的近一百年间，发现并被描述的昆虫病原细菌约有90多个种和亚种，它们大多属于真细菌纲（Eubacteria）的芽孢杆菌科（Bacilliacene）、假单孢菌科（Pseudomonadacea）和肠杆菌科（Enterobacteriaceae）。从防治害虫的角度来说，在这三科中以芽孢杆菌科最为重要。此科包括有两个属：芽孢杆菌属（Bacillus）和芽孢梭菌属（Clostridium）。在芽孢杆菌属中的乳状病芽孢杆菌（Bac.popillia）、缓死芽孢杆菌（Bac.lentimorbus）、苏云金芽孢杆菌（Bac.thuringiensis）的某些亚种以及球形芽孢杆菌（Bac.spuericus）,目前在国内外均已发展成为防治农林害虫及卫生害虫的微生物杀虫剂。而且，迄今为止，昆虫病原细菌的主要研究力量也仍然集中在这些细菌上。 但是在这些众多的病原细菌中，真正能够开发成为一种具有实际应用价值杀虫剂的却并不多，目前应用最广泛的主要是形成芽孢的病原细菌。如乳状病芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌.[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=64035]苏云金芽孢杆菌[/url]

蜡样芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌的鉴别 是怎么整的啊，国标里面的那种方法 靠谱吗？不好整吧，你是怎么 鉴别的啊，

[font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]（1）菌落长在一起有三种情况：[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]①平板上存在杂菌，杂菌污染造成菌落集中在一起；[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]②配制培养基时没有将样品混匀，使营养物质分布不均匀，导致菌落长在一块；[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]③稀释涂布平板法：在稀释涂布时，未能均匀涂布；平板划线法：划线太重，接种针的原菌种未能分散开来。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]（2）菌落和菌苔有什么区别？[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]①菌落：是由单个细菌细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落。菌落形态包括菌落的大小、形状、边缘、光泽、质地、颜色和透明程度等。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]②菌苔：是细菌在固体培养基接种线上由母细胞繁殖长成的一片密集的、具有一定形态结构特征的细菌群落，一般为大批菌落聚集而成。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]③菌落与菌台的区别：[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]菌落：圆形边缘整齐，表面光滑，半透明，小凸起；在伊红美蓝琼脂平板上：深紫黑色、光滑、湿润、带有金属光泽的圆形菌落。[/color][/size][/font] [font=system-ui, -apple-system, &][size=16px][color=#333333]菌苔：边缘光滑整齐；表面较透明；显出鲜艳的颜色；显得湿润，易被接种环挑起。[/color][/size][/font]

我想问下，只做了绿脓菌实验，怎么报结果呀？CN板上是淡黄色菌，紫外下有荧光，望老师不吝赐教

一、目的要求 学习并掌握芽孢染色法。 二、基本原理 芽孢染色法是利用细菌的芽孢和菌体对染料的亲合力不同的原理，用不同染料进行着色，使芽孢和菌体呈不同的颜色而便于区别。芽孢壁厚、透性低，着色、脱色均较困难，因此，当先用一弱碱性染料，如孔雀绿（malachite green）或碱性品红（basicfuchsin）在加热条件下进行染色时，此染料不仅可以进入菌体，而且也可以进入芽孢，进入菌体的染料可经水洗脱色，而进入芽孢的染料则难以透出，若再用复染液（如番红液）或衬托溶液（如黑色素溶液）处理，则菌体和芽孢易于区分。三、器材 枯草芽孢杆菌，蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus），生孢梭菌（Clostridium sporogenes）； 孔雀绿染液，番红水溶液，苯酚品红溶液，黑色素溶液等。 四、操作步骤 方法1、 （1）将培养24小时左右的枯草芽孢杆菌或其他芽孢杆菌，作涂片、干燥、固定。 （2）滴加3—5滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。 （3）用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可添加少许染液。加热时间从染液冒蒸汽时开始计算约4—5分钟。这一步也可不加热，改用饱和的孔雀绿水溶液（约7．6％）染10分钟。 （4）倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止。 （5）用番红水溶液复染1分钟，水洗。 （6）待干燥后，置油镜观察，芽孢呈绿色，菌体呈红色。 方法2、 （1）取二支洁净的小试管，分别加入0．2ml无菌水，再往一管中加入1—2接种环的蜡状芽孢杆菌的菌苔，另一管中加入1—2接种环的生孢梭菌的菌苔，两管各自充分混合成浓厚的菌悬液。 （2）在菌悬液中分别加入0．2ml苯酚品红溶液，充分混合后，于沸水浴中加热3—5分钟。 （3）用接种环分别取上述混合液2—3环于两片载玻片上，涂薄，风干后，将载玻片稍倾斜于烧杯上，用95％乙醇冲洗至无红色液流出。 （4）再用自来水冲洗，滤纸吸干。 （5）取1—2接种环黑色素溶液于涂片处，立即展开涂薄，自然干燥后，油镜观察，在淡紫灰色背景的衬托下，菌体为白色，菌体内的芽孢为红色。

枯草芽孢杆菌芽孢的制备，可以直接用固体培养基培养芽孢后离心获取吗

会验证高压灭菌器灭菌效果吗？微生物实验室最少不了的实验仪器之一就是灭菌器，一般实验室常用的是高压蒸汽灭菌器。GB 4789.1-2016中要求：实验设备应定期进行检查和/或检定（加贴标志）、维护和保养，以确保工作性能和操作安全。但你的灭菌器有没有类似的检查呢？如果要做类似的验证，又需要怎么做呢？今天就给大家汇总一下高压蒸汽灭菌器灭菌效果验证的相关内容。高压蒸汽灭菌器灭菌效果验证一般有化学指示剂法、留点温度计法、自制测温管法和生物指示剂法，每种方法的原理都是相似的，主要是通过验证灭菌时灭菌器里的温度能否达到要求。我们可以根据自己实验室的具体情况选择其中一种或多种方法进行验证。一、化学指示剂法原理：化学指示剂在一定温度与作用时间下，会受热变色或变形，根据这一特点来判断是否达到需要的灭菌参数。一般实验室常用的是3M压力灭菌指示胶带，这种指示胶带是利用灭菌前后胶带颜色变化来判断灭菌效果。它是由热敏化学物质与显色剂及漆辅料制成油墨，并将油墨以条纹状印制在特制的一面胶纸带制成。指示胶带可以直接粘贴于包裹外，长度不低于5cm，并轻压胶带以增加粘性和封包效果；在121℃持续20min或130℃持续4min后，胶带上印有的斜行的白色指示线条会完全变黑，成为黑色线条；如变色不均匀或不彻底，可认为该包裹不符合灭菌条件。二、留点温度计法原理：留点温度计法是利用水银温度计不回流的特性，其原理跟传统体温计相似，可以指示灭菌器在灭菌过程中达到的最高温度。验证时把水银温度计放在盛水的大三角瓶里，灭菌时把三角瓶放在灭菌器的上部和下部，灭菌结束后看水银温度计的温度和要求温度是否一致。此法只能验证温度，不能指示灭菌时间是否达到要求，因此是灭菌器验证的最低标准。三、自制测温管法原理：利用一些化学药品受热熔化后再冷却，晶体的外形不同的特性，把化学药品密封在小玻璃管内，灭菌时放在灭菌器里，灭菌完后观察晶体的形状，就可以判断温度是否达标。常用的试剂是苯甲酸，苯甲酸的熔点为121-123℃，跟我们要求的灭菌器的灭菌温度基本吻合，因此灭菌时把固体苯甲酸密封在小玻璃管内放进灭菌器，灭菌结束就可以观察苯甲酸的状态来验证灭菌器是否达到了要求温度。这种方法的局限跟留点温度计法相同，也只能指示灭菌时的温度，对灭菌时间是否达到要求无法判断。四、生物指示剂法原理：利用非致病性的嗜热脂肪杆菌的芽孢作为指示菌，来测定热力灭菌的效果。嗜热脂肪杆菌的芽孢对热的抗性较强，其耐热能力与病原微生物肉毒梭菌芽孢相似，以此为指示菌，验证灭菌器能否达到灭菌要求。生物指示剂分为三种：芽孢悬液、芽胞菌片、菌片和培养基混合指示管。一般放在灭菌容器的5个点：下层的前、中、后和上层、中层的中央点。灭菌后取指示剂接种到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白胨水中，55-60℃培养2-7天，若培养基澄清、颜色没有变化即说明芽孢被杀死，灭菌器灭菌效果良好；如果培养基黄色浑浊，说明芽孢未被杀灭，灭菌器灭菌效果不合格。芽孢悬液和芽孢菌片的验证方法均是如此。目前实验室还常用商品化的生物指示管，其原理与芽孢悬液和芽胞菌片相同，指示管中有嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢和培养液玻璃小管，将指示管放在灭菌容器内的各个点上，高压灭菌后，将管中盛培养液的玻璃管挤碎，培养液从内部的小管中被放出，放入56℃培养箱中培养，同时做阳性对照。若是灭菌器灭菌效果不合格，指示管内的芽孢复活后生长会改变肉汤的颜色是肉汤变为黄色；若是灭菌器灭菌效果良好则管内芽孢被灭活不再生长，肉汤仍旧是原来的紫色。对于灭菌器的效果验证，目前并没有相关标准严格的要求验证的频次，但是实验室应当自行制定验证频次规定，并严格按照要求进行。从操作性和验证结论两个方面出发，小编推荐使用指示胶带和生物指示管，因为这两种方法操作简单，可以对灭菌效果进行全面的验证。希望以上内容对您有所帮助！

原料奶中芽孢、耐热芽孢、嗜冷菌及抗生素残留的测定，这些企业采购的时候对每批次都检测吗

有没有大佬知道真空包装牛肉贮藏40d后假单胞菌还会不会生长？望老师不吝赐教

国标上说该菌在MYP上呈粉红色菌落，周围有沉淀环，产生卵磷脂酶。我们按照SN标准做了试验，肉汤中培养48h有浑浊，但MYP上培养48h是黄色菌落培养基也成了黄色，没有典型的粉红色菌落，也没有沉淀环。可是室温放置一段时间后，（已超过了规定的培养时间）又出现了粉红色菌落，周围有沉淀环，我们又进一步做了生化试验，生化结果很可疑，也基本符合蜡样芽孢杆菌的特征，请问各位大侠，结果怎么报呀？ 是阴性还是报阳性？

北京商报2月2日报道 日前，国家质检总局公布了去年8月至11月进境的852批不合格食品、化妆品名单。其中，味全食品的三类配方奶粉被检验出含有致病菌阪崎肠杆菌。 去年10月17日，产自台湾的9.624吨配方奶粉从香港进境时被检验出阪崎肠杆菌超标，进口商为深圳市恒利安贸易有限公司。不合格奶粉包括味全婴儿配方奶粉、味全幼儿成长配方奶粉和味全较大婴儿配方奶粉。　　据了解，阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种，能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和茵血症，死亡率高达50%以上，婴儿配方奶粉是目前发现的阪崎肠杆菌主要感染渠道。此外，检验出的不合格婴儿食品还包括产自澳大利亚的宝利氏牛奶菌落总数超标、百乐斯婴儿米粉霉菌超标等。　　此次公布的不合格食品、化妆品产地涉及美国、日本、西班牙等多个国家和地区，包括葡萄酒、冻鱼冻肉、饮用水、饼干等多种产品。如美国产莱萃美品牌叶酸营养素片霉菌数超标、强维牌氨基酸混合食品原料铅和砷超标，韩国的兰芝柔润凝亮修护眼霜和大长今牌黄土美面膜被检出细菌总数超标。 (本文来源：北京商报 作者：李雪)

各位：请问芽孢杆菌的分类！！！！！！！！！

[b]阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种，如果用SN标准检测肠杆菌科还需要再另检阪崎肠杆菌吗？谢谢！[/b]

感受态是指细菌处于容易吸收外源DNA的状态。转化是指质粒DNA或以它为载体构建的重组子导人细菌的过程。其原理是细菌处于0℃，CaCl2低渗溶液中，菌细胞膨胀成球形。转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基—钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经42℃短时间热击处理，促进细胞吸收DNA复合物。将细菌放置在非选择性]培养基[/url]中保温一段时间，促使在转化过程中获得的新的表型(如Amp[sup]r[/sup]等)得到表达，然后将此细菌培养物涂在含有氨苄青霉素的选择性[://]培养基[/url]上。重组质粒转化宿主细胞后，还需对转化菌落进行筛选鉴定。利用α互补现象进行筛选是最常用的一种鉴定方法。现在使用的许多载体都具有一段大肠杆菌β半乳糖苷酶的启动子及其编码α肽链的DNA序列，此结构称为[i]lac[/i]Z'基因。[i]lac[/i]Z'基因编码的α肽链是β半乳糖苷酶的氨基端的短片段(146个氨基酸)。任何携带着[i]lac[/i]Z'基因的质粒载体转化了染色体基因组存在着此种β半乳糖苷酶突变的大肠杆菌细胞后，便会产生出有功能活性的半乳糖苷酶，在IPTG(异丙基β—D—硫代半乳糖苷)诱导后，在含有Xgal(5-溴-4-氯-3-吲哚-6-D-半乳糖苷)的培养基平板上形成蓝色菌落（半乳糖苷酶能将无色的化合物Xgal切割成半乳糖和深蓝色的底物5-溴-4-靛蓝）。而当有外源DNA片段插入到位于[i]lac[/i]Z'中的多克隆位点后，就会破坏α肽链的阅读框，从而不能合成与受体菌内突变的β半乳糖苷酶相互补的活性α肽，而导致不能形成有功能活性的β半乳糖苷酶，也就不能分解Xgal而显蓝色，因此含有重组质粒载体的克隆往往是白色菌落。[仪器、材料与试剂](一) 仪器和材料 超净工作台、低温离心机、恒温摇床、恒温箱、恒温水浴、离心管、试管、培养皿、锥形瓶、接种针、玻璃涂棒、酒精灯、镊子、牙签、大肠杆菌DH5a 、质粒(二) 试剂0.1mol／L CaCl2溶液 LB液体培养基 LB固体培养基 氨苄青霉素(Amp)：用无菌水配制成100mg／mL溶液，置—20℃冰箱保存。Xgal：将Xgal溶于二甲基甲酰胺，配成20mg／mL，不需过滤灭菌，分装小包装，避光贮存于-20℃。IPTG：取2g IPTG溶于8mL双蒸水中，再用双蒸水补至10mL，用0.22um滤膜过滤除菌，每份1mL，贮存于-20℃。[实验步骤](一) 制备感受态细胞1、吸取15µl E.coil菌液，接种于20ml LB液体培养基中，37℃振荡培养过夜，待OD600=0.5左右将该菌悬液以1：50接种量转于50ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20-30min测一次OD600，至OD600=0.6左右，停止培养。2、培养液转入离心管中，在冰浴10min，4℃下5000rpm离心10min。3、弃上清液，用4ml冰预冷的0.1M CaCl2溶液轻轻悬浮菌体至均匀，冰上放置30min。4、4℃下5000rpm离心6min。5、弃上清液，用2ml冰预冷的0.1M CaCl2溶液轻轻悬浮菌体至均匀，冰上放置片刻后即制成感受态细胞悬液。6、以上制好的感受态细胞悬液可在冰上放置，24小时内直接用于转化实验，也可加入15%高压灭菌过的甘油，混匀后，分装于1.5ml离心管中，每管100µ l感受态细胞悬液，置-70℃条件下保存。.(二) 质粒DNA转化大肠杆菌1、取100µl摇匀后的感受态细胞悬浮液（如是冷冻保存液，则需化冻后马上进行下面的操作），加入5µl连接产物，轻轻摇匀，冰上放置30min后，于42 IPTG水浴中保温90s，然后迅速在冰上冷却2min。2、加入900µl LB液体培养基，则总体积约1ml，混匀于37℃振荡培养90分钟使受体菌恢复正常生长状态并使转化体产生抗药性Amp[sup]r[/sup]。3、在预制的LB琼脂平板上，加40uL 20mg／mL的Xgal和4uL 200mg／mL的IPTG溶液，并用灭菌玻璃推子(酒精灯上烧后冷却)，均匀涂布于琼脂凝胶表面，37℃倒置吸收。4、将恢复培养的菌体4000rpm离心5min，移去上层900µl LB培养基，用余下的100µl重悬菌体至均匀。(四) α互补现象的检查将重悬菌体均匀涂布于含X-gal+IPTG+氨苄青霉素的LB平板上，37℃倒置培养12—24h，出现菌落。其中白色菌落从理论上讲为重组克隆。如果进一步验证，可挑取多个白色菌落分别接种到1ml含有氨苄青霉素的LB液体培养基中，37℃振荡培养6-8h，然后提取质粒酶切验证，或进行菌落PCR扩增鉴定。

有了解枯草芽孢杆菌的么 3610和168trpc2两种菌株有什么不同吗

2014年食源性致病菌蜡样芽孢杆菌风险监测分析 人类对蜡样芽孢杆菌致病性的认识过程进展缓慢，但是大量证据证明，从1898年起，就有蜡样芽孢杆菌造成泌尿系统感染及胃肠炎的记载，有些感染的病例很严重，甚至造成死亡，蜡样芽孢杆菌也可以引起牛的口蹄炎。Lubenau 1906年描述了发生在一家医院的严重的食物中毒事件，300名医务人员及病人用餐后出现急性胃肠炎，对剩余的食物进行检验，发现含有大量的好氧芽孢杆菌，尽管从原文中的描述分析，该污染菌应为蜡样芽孢杆菌，但原作者将其定名为B.peptonificans。Seitz 1913年从一例患肠炎和腹泻的病人中分离出蜡样芽孢杆菌。按照当今的流行病学标准来衡量，有关芽孢杆菌引起食物中毒的早起报道很粗略。很少有人对食物等病检标本的污染菌做过计数，对污染菌的鉴定、命名也不确切，从而造成了不少混乱。正是由于分类学的进展，Hauge经过对4起食物中毒事件的认真调查，于1955年首次确认蜡样芽孢杆菌是一种可引起食物中毒的致病菌。因为蜡样芽孢杆菌在自然界分布广泛，常存在于土壤、空气、水和尘埃中，所以不可避免地会进入到食品中。现将2014年本地蜡样芽孢杆菌的检测情况作如下总结。1 材料与方法1.1试剂和仪器 使用的培养基有磷酸盐缓冲液（PBS）、甘露醇卵黄多粘菌素(MYP)琼脂、胰酪胨大豆多粘菌素肉汤、营养琼脂购买于北京路桥公司。主要仪器包括均质器，电子天平:感量0.1g，VITEK-2 Compact 全自动微生物鉴定系统。1.2依据和方法 根据国家食品安全风险评估中心制定的“食源性致病菌监测工作手册”要求进行增菌、分离、鉴定、菌种保存及送上级实验室复核。试验程序见图2。

[b][size=12px][font=微软雅黑]关于蜡样芽孢杆菌[/font][font=微软雅黑][/font][/size][/b][size=12px][font=微软雅黑]1、蜡样芽胞杆菌[i][/i]为革兰氏阳性大杆菌，大小为1-1.3×3-5μm，兼性需氧，[/font][b][font=微软雅黑]形成芽胞[/font][/b][font=微软雅黑]，芽胞不突出菌体，菌体两端较平整，多数呈链状排列，与炭疽杆菌相似。引起食物中毒的菌株多为周鞭毛，有动力。[/font][font=微软雅黑][/font][/size][size=12px][font=微软雅黑]2、[/font][font=微软雅黑]培养特性　　[/font][b][font=微软雅黑]蜡样芽胞杆菌生长温度为25-37℃，最佳温度30-32℃。在肉汤中生长混浊有菌膜或壁环，振摇易乳化[/font][/b][font=微软雅黑]。在普通琼脂上生成的菌落较大，直径3-10mm，灰白色、不透明，表面粗糙似毛玻璃状或融蜡状，边缘常呈扩展状。[/font][font=微软雅黑][/font][/size][size=12px][font=微软雅黑]3、[/font][font=微软雅黑]耐热性　　蜡杆芽胞杆菌耐热，[/font][b][font=微软雅黑]其37℃16小时的肉汤培养物的D80℃值（在80℃时使细菌数减少90%所需的时间）约为10-15分钟；使肉汤中细菌（2.4×107/mL）转为阴性需100℃20分钟。其游离芽胞能耐受100℃30分钟，而干热灭菌[i][/i]需120℃60分钟才能杀死[/font][/b][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑][/font][/size][font=微软雅黑][size=12px]4、在欧洲大都由甜点、肉饼、色拉和奶、肉类食品引起；在我国主要与受污染的米饭或淀粉类制品有关。　蜡样芽胞杆菌食物中毒通常以夏秋季（6-10月）最高。引起中毒的食品常于食前由于保存温度不当，放置时间较长或食品经加热而残存的芽胞以生长繁殖的条件，因而导致中毒。[font=微软雅黑]（转载自[/font][font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, 'Helvetica Neue', 'PingFang SC', 'Hiragino Sans GB', 'Microsoft YaHei UI', 'Microsoft YaHei', Arial, sans-serif]食品微生物工程师[/font][font=微软雅黑]）[/font][/size][/font]

一、实验原理稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使其成单个细胞存在，否则一个菌落就不只是代表一个细胞，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。此记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数，故又称活菌计数。一般用于某些产品检定，如根瘤菌剂等产品检定，生物制品检验，土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。自然条件下，微生物常以群落状态存在，这种群落往往是不同种类微生物的混合体。为了研究某种微生物的特性或者要大量培养和使用某种微生物，必须从这些混杂的微生物群落中获得纯培养，这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。在自然界中，土壤是微生物生活的良好环境，其中生活的微生物数量和种类都是极其丰富的，因此土壤是人类开发利用微生物资源的重要基地。土壤中的微生物数量、种类与土壤肥力有关，肥沃的土壤中多，贫瘠土壤中少。其生理类群则与土壤的其它理化性质，如通气、pH有关，例如在通气良好的菜园土中，好气性微生物占有绝对优势。本实验以菜园土为材料分离土壤中的好气性细菌，并进行数量测定。分离微生物时，一般是根据该微生物对营养、pH、氧气等要求的不同，供给它们适宜的生活条件，或加入某种抑制剂造成只利于该菌种生长，不利于其它菌种生长的环境，从而淘汰不需要的菌种。分离微生物常用的方法有稀释平板分离法和划线分离法，根据不同的材料，可以采用不同方法，其最终目的是要在培养基上出现欲分离微生物的单个菌落，必要时再对单个菌落进一步分离纯化。在用稀释平板分离微生物时，还可以同时测定待分离的微生物的数量。放线菌与细菌同属原核微生物，是重要的抗生素产生菌，在土壤中的数量仅次于细菌，尤其是在有机质丰富、透气性好的中性到微碱性土壤中的数量较多。本实验采用高氏一号琼脂培养基分离和计数菜园土中的放线菌。真菌在土壤中的数量次于细菌和放线菌，主要在有机质丰富、透气性好的偏酸性土壤中较多。分离土壤中的真菌并不难，但由于其菌落大，容易扩展，计数准确性较低。本实验采用加有氯霉素或庆大霉素和孟加拉红的马丁氏培养基分离及计数菜园土中的真菌。按一般资料介绍为链霉素，但此种抗生素要先配成一定浓度的溶液，且应于倒平板前才加入培养基中。在此培养基上，放线菌和细菌被氯霉素或庆大霉素和孟加拉红所抑制，但大多数真菌能够生存，且其菌落受孟加拉红的抑制而较小，从而避免了某些真菌的扩散蔓延而带来的数量上的误差。