三宝垄根霉

中国奥运有三宝，跳水，体操，乒乓好。棒子奥运有三宝，射箭，姓朴，眼睛小。美国奥运有三宝，篮球，田径，家世好。非洲奥运有三宝，人黑，牙白，巨能跑。呆梨奥运有三宝，击剑，美男，赞助好。巴西奥运有三宝，足球，球迷，金牌少。英国奥运有三宝，小贝，女王，观众吵。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09502.gif形象啊~~~

【三宝养肾糊】【食材】黑豆50克、粳米30克、板粟5枚(此方为两人份,根据实际食用的人数加减调整)。【做法】黑豆和粳米提前浸泡一夜，板栗剥壳。将黑豆和粳米放入豆浆机，加入剥好的板栗，倒入600毫升水，打成豆浆即可。【效果】补肾益气。

虽然听不懂，只感觉文字在音乐面前如此苍白！[flash]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/20056521256_01_0_3.swf[/flash]歌词：小女儿问:"爸爸,太阳 月亮和星星是什么?"爸爸回答:"吉祥三宝".小女儿问:"妈妈,绿叶 花朵和果实是什么?"妈妈回答:"吉祥三宝".小女儿问:"爸爸 妈妈和我是什么?"爸爸:"吉祥三宝".爸爸 妈妈 女儿:吉祥三宝,永远吉祥.[em43] [em43] [em43] [em43] [em43] [em43] [em43]

[b][size=18px][color=#06948c]护胃三宝[/color][/size][/b]“一方、一茶、一习惯”-----护胃三宝。[b]“一方”[/b]即指双盲临床试验所用的组方——[b]半夏泻心汤。[/b]该汤剂由半夏、黄芩、黄连、干姜、炒白术、黄芪、白花蛇舌草、丹参、炒谷芽、炒麦芽等多种药材组成，具有辛开苦降、寒热平调、化湿健脾开胃的功效。[b]“一茶”[/b]则是组方的代茶饮——[b]丹麦饮[/b]。它由丹参、炒麦芽、炒谷芽组成，具有活血化瘀、祛瘀生新的功效，适合作为日常饮品来养护胃部。[b]“一习惯”[/b]则是指“吃里扒外”法，即[b]分餐制和使用公筷。[/b]这是一种餐桌礼仪，也是预防幽门螺旋杆菌感染的重要方法。通过分餐和使用公筷，可以[b]有效减少细菌的传播，降低感染风险。[/b]综上所述，对于萎缩性胃炎的高危人群来说，定期进行胃镜检查、采取中医药治疗以及养成良好的饮食习惯和生活方式都是至关重要的。这些措施有助于早期发现病变、控制病情发展并提高生活质量。

新华网上海11月3日专电（记者 陆文军）题：汽车“召回”法规出台 “三包”再求意见 日前，经国务院常务会议通过的《缺陷汽车产品召回管理条例》向社会全文公布，并确定自明年起正式施行，意味着这项事关全国车主权益的部门规章上升为行政法规。 “召回”新规加大了监管处罚力度，成为千万车主的保障。那么，召回实施中还有哪些挑战？未来中国汽车质量维权将向何处走？车主翘首以盼的“三包”还有多远？ 重罚能否堵漏 在近十年间，中国汽车产业和汽车消费出现了爆发性的增长，汽车保有量增长了１０倍，产销量已超越美国成为全球第一汽车大国。然而当中国汽车保有量迅速突破１亿大关之际，汽车消费热潮也将从做大增量逐步转向延伸消费，后续的维修、服务将备受关注。 在这种背景下，原先国内汽车消费领域“先发展，后治理”的产业思路，已经不能适应现实状况，全球一些汽车发达国家和市场均已通行的消费保障法规，在中国尽快出台完善已是数以千万计的中国车主迫切的夙愿。 正因为如此，作为2004年的《缺陷汽车产品召回管理规定》的“全面升级版”，《缺陷汽车产品召回管理条例》应运而生，对隐瞒汽车产品缺陷、不实施召回等违法行为加大了处罚力度。 实际上，由于汽车维权“铁丝网”不牢，近年来国内屡屡出现了一些汽车厂商隐瞒缺陷产品，实施“暗召”，甚至有车厂采取“歧视性标准”，钻法律空子，在全球召回中有意“忽略”中国市场，严重侵害中国消费者利益。 目前汽车消费投诉维权，已经成为国内消费者权益保护领域的“重灾区”。根据中国消费者协会公布的数据，２０１１年，全国共受理汽车投诉１．６８０５万件，同比增长１９．２％，再创投诉量的新高。在所有汽车消费的投诉中，质量安全问题占５４．７％。一位长期从事汽车消费维权的消保委人士说，“加大对不法行为的监管和处罚力度，就是给消费者撑腰。” 召回成常态 挑战仍不少 磨刀不误砍柴工。不少业内专家认为，中国汽车产业要进一步发展，消费环境的优化是必须步骤，而设立严格的召回制度，则是向行业国际惯例靠拢的举措。 汽车召回制度是全球汽车产业先发国家普遍采用的汽车质量保障法规，每年汽车召回量大于产销量，已经是汽车发达国家的常态。如２００８年美国实施召回７７８次，涉及汽车２２２０万辆次，超过美国市场当年新车销售总量。而中国在２００９年成为全球最大的汽车市场后，当年汽车召回数量为１３０万辆，仅相当于全年１３００多万辆销售总量的十分之一。 即使日前出台了更严格的法规，中国汽车召回依然面临诸多挑战。中国政法大学经济法学系副主任吴景认为，尽管汽车召回制度剑指汽车厂商，但监管问题却落在了政府的肩上，而有效发挥裁判员和监督者的角色作用并非轻而易举。 专家指出，我国整体汽车质量管控体系的完善，并非一蹴而就，恰如汽车召回制度之所以酝酿多年才出台，其中本身隐藏着很多难题。 首先，从目前国内汽车缺陷的认定上来看，就面临难题。比如汽车检测机构少、检测费用昂贵、检测时间长、相关标准不完善。如何准确认定汽车存在质量隐患或设计缺陷而必须召回，确实需要花很大工夫。 其次，由于消费维权体系不完善，汽车消费者与厂商间在出现争议时地位不平等，长期受困于“举证难、求偿难，维权难”。 第三，我国汽车工业起步较晚，自主产品质量还难以与国外大品牌抗衡，如果加大了汽车质量的监管力度，严格实施召回规定，必然对国产汽车带来更大压力。 消费者翘首盼“三包” 盼星盼月，中国消费者终于盼来了汽车召回法规，而另一项汽车消费者权益保障政策——汽车“三包”，也在今年再次向社会征求意见。 记者了解到，目前国内汽车消费投诉几乎涵盖了汽车及零部件质量、合同问题和售后服务问题的所有领域，合资品牌与进口车的投诉均有所增加。但由于缺乏相应的硬性法规制约，企业投诉处理的效率偏低，而且投诉流程繁琐、反复投诉的现象时有发生。 很明显，更严格的质量监管、更有力的消费者保护措施，是中国汽车社会健康发展的必要条件。业内人士普遍认为，从去年开始，国内汽车召回法规加快制定，同时“三包”征求意见再次启动，已经传达了某种信息，即中国汽车消费保护网将越扎越紧。 知名汽车专家杜芳慈指出，《缺陷汽车产品召回管理条例》和“三包”制度，是对消费者不同形式的保护，召回是针对安全缺陷，“三包”是对安全缺陷以外进行规范，“三包”和召回管理的流程范围、企业赔偿都不一样。 汽车业内专家钟师也认为，根据世界上汽车发达国家的相关经验，“三包”也是汽车产业发展的必经之路，虽然有短痛，但无法回避。 “汽车维权领域的空白，是我国发展汽车社会极大的软肋和短板。”钟师说，“更快出台汽车‘三包’，也许是我国发展汽车产业必须迈过的一道‘坎’，也是真正树立品牌质量信心的必然途径。” http://www.cqn.com.cn/news/cjpd/640826.html 汽车召回条例被指存缺陷 有毒气体超标未纳入http://www.instrument.com.cn/news/20121031/084607.shtml 大家觉得这个三包是否靠谱？

在肠胃不适时，很多人第一时间想到的是小米粥或南瓜粥，其实，茯苓、芡实、莲子也能起到健脾养胃的作用，可称为养胃三宝，大家应该常吃。 茯苓味甘、淡、性平，有健脾和胃的功效，能除湿利水，还有抗衰老的作用。除了最常见的茯苓饼，还可以将茯苓打磨成粉后放入粥中食用，或拌蜂蜜后抹到糕点上蒸熟食用。　　莲子的药性平和，味道稍微有点甘甜，中医认为它能补脾胃之气，可以起到止泻的作用，另外还有养心安神的功效。需要注意的是，莲子食用前需要去心。 芡实又名鸡头米，性平，味道甜涩，是补脾胃最好的食物之一，同时还有固津的作用它与莲子的功效相似，只不过它的收敛作用比莲子强。如果脾胃虚弱拉肚子，芡实还有助止泻。由于芡实较硬，应该长时间熬煮，也可打成粉放入粥中。

据报道：昨天，中国汽车召回网发布消息，《家用汽车产品修理、更换、退货责任规定》的重要配套标准《汽车三包标准》公布，并于10月1日正式实施。“三包”政策最为吸引人的莫过于“包退”、“包换”成为可能，“三包”包修期限不低于3年或行驶里程6万公里，“三包”有效期限不低于2年或行驶里程5万公里，两者都是以先到者为准。包修期内出现产品质量问题，可以免费修理；在“三包”有效期内，如果符合规定的退货条件、换货条件，消费者可以凭“三包”凭证、购车发票等办理退货或换货手续。 想买车的你，可以等等啦。。。。。。

很多人都有过这样的经历，爱车出现了质量问题，投诉无门。目前，举证难、鉴定难、索赔难已成为汽车维权路上的最大障碍。 近日，记者从多方渠道获悉，困扰汽车“三包”（包修、包换和包退）规定出台的两大难题已基本破解，期待多年的“三包”规定已经进入深入研讨并着手制定可操作细则规范阶段，有望在今年上半年出台。 消费者呼声高涨 有数据显示，2010年前三季度，全国消协接到汽车投诉案件1.3001万件，其中质量问题和安全问题占69.8%，包括发动机漏油、变速箱故障、气囊失灵、刹车失灵等。汽车质量问题是近年来汽车投诉的主要问题。 依据我国相关法律中“谁投诉、谁举证”的原则，在维权路上，消费者的地位是处于劣势的。据中国消费者协会投诉部主任邱建国介绍，消费者对汽车售后服务和汽车“三包”的投诉主要涉及厂家利用技术和信息方面的优势，夸大产品性能，过度承诺售后服务，介绍最低价格，展示最高配置误导消费者；销售合同文本不规范，存在不平等条款；把旧车、故障车当新车卖；汽车搭售、捆绑销售问题严重，对于畅销车型，消费者被迫强制接受厂家搭配的配置等，这些现象在销售过程中都极大地损害了消费者的利益。厂家往往把“三包”变为“一包”，再严重的问题也是只管修，个别厂家隐瞒故障实际情况，多次修不好仍不予退、换。 为此，邱建国呼吁，国家应当尽快出台一些能保护消费者利益的具体规范。如汽车销售和质量担保制度规范，降低检测鉴定门槛。有关部门和行业协会应尽快出台关于汽车销售、售后、维修服务规范，加强对汽车行业降价销售、打包促销、赠品附带、加价提车等明规则、潜规则的监督管理，有效遏制严重损害消费者合法权益的行为。 随着汽车走进百姓家庭，“三包”规定出台的呼声也越来越高涨。记者从国家质检总局缺陷产品管理中心获悉，自2004年信息系统开通至2010年9月30日，投诉总数已经达到19253例，其中2010年前三季度投诉5607例，同比增长71%。用户普遍呼吁汽车“三包”规定尽快推出，规范汽车修、退、换行为。 两大难题已经破解 众所周知，2004年末，国家公布了《家用汽车产品修理、更换、退货责任规定（草案）》，向社会广泛征集意见，时过6年，“三包”法规始终未正式出台，这主要受“合法性”和“操作性”两大难题困扰。 国家质检总局质量司有关负责人在近日召开的汽车售后服务与服务标准化研讨会上介绍说，当时汽车“三包”规定出台主要面临着两个难题，即“合法性”和“操作性”。这位负责人说，汽车“三包”与召回不同，它涉及违约责任、合同契约等民事责任问题，此外还涉及法规出台后的执行力度问题，在解决投诉纠纷时需要一个强有力的技术、专家团队作为执行保证。汽车“三包”主要集中在售后服务上。中国标准化研究院全国服务标准化技术委员会秘书处李涵博士认为，汽车售后服务不能没有标准，保证汽车售后服务质量需要标准。全国服务标准化技术委员会秘书处提出了汽车质量担保服务规范、汽车维修配件供应规范、汽车维修技能鉴定标准等八大重点标准制定的工作思路。其中，汽车质量担保服务规范规定汽车总成（系统）损耗件及其他零部件的“三包”目录和“三包”有效期，可供汽车“三包”规定引用，配合相关政策出台和实施。汽车维修服务规程及质量规范规定汽车维修工作准备、车辆预检接受、车辆修理、质量检查、车辆交付、服务跟踪等通用及重要环节及质量要求，要规范维修服务行为，降低返修率。现在看来，当时困扰汽车“三包”执行的这两个难题伴随着市场环境的成熟和变化都已经不再是问题。 有关专家认为，汽车“三包”也是汽车售后服务的一部分，通过制定汽车售后服务标准，可以加强企业自律。售后服务标准应不像相关法规那样由政府部门主导，标准应充分吸纳企业的意见，鼓励企业自己参与制定标准，这利于企业自律，也利于行政机关依照标准执法，是一项基础性的工作，意义重大。制定标准时要考虑消费者的需要，满足企业的需要，满足行政机关执法和消费者协会调解的需要，要减少随意性，规范执法。从有利于汽车行业发展的角度出发，标准不能过高或过低。 厘清各方法律责任 2010年12月中旬，盖世汽车网针对汽车“三包”规定展开的最新一期业界调查显示，呼吁推出“三包”政策的呼声高达8成以上。各界一致认为，多年来一直悬而未决的汽车“三包”规定应在2011年尽快出台，刻不容缓。 近日，中国质量认证中心产品三处处长谢鹏鸿在一论坛上透露，“三包”规定已经进入深入研讨并着手制定可操作细则规范阶段，“有望在明年上半年出台”。与2004年曾出台的《家用汽车产品修理、更换、退货责任规定（草案）》相比，“三包”规定会有进一步可操作的细则规范。 有专家指出，“三包”规定的主要功能并非完全在于保护消费者，而是在于建立产品责任的法律制度。它将明确生产商、销售商、维修商与消费者之间的权利与义务，制度化、规范化汽车产品的权责关系。明确汽车产生质量问题后，质量问题举证、鉴定机构选择以及索赔流程等一系列在现行制度下无法彻底解决的难题将迎刃而解。 其实，汽车“三包”规定出台不仅仅保护消费者的利益，同时也会促进汽车行业发展。采访中，有汽车企业负责人表示，汽车“三包”规定一旦出台，厂商势必会对质量控制工作重新规划，如何避免因“三包”而产生的额外成本将是众多厂商面临的新问题。这样一定会使汽车产品质量得到整体提高。 《中国质量报》------转自中国质量新闻网。转帖仅仅为传递更多质量信息。

购买新仪器是否也有三包政策？

一、项目基本情况 项目编号：ZJYZC2024GK-090 项目名称：血液酶免检测试剂 预算金额：100.000000(万元) 最高限价：88.5(万元) 采购需求：第二包：采购复检试剂及质控品，具体参数要求详见招标文件。第三包：采购酶免仪耗材，具体参数要求详见招标文件。 合同履行期限：按合同约定执行 本项目（是/否）接受联合体投标：否 二、申请人的资格要求 1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定；认和履行采购文件中的各项要求：（1）具有独立承担民事责任的能力；（2）具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度；（3）具有履行合同所必需的设备和专业技术能力；（4）有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录；（5）参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录；（6）法律、行政法规规定的其他条件。2.供应商需提供合法有效含统一社会信用代码和二维码标识的营业执照副本扫描件并加盖公章。3.供应商须提供法定代表人资格证明、身份证（法定代表人参与投标时提供），提供附有法定代表人身份证扫描件的授权函，被授权人身份证（非法定代表人参与投标时提供）4.供应商须为未被列入“信用中国”网站（www.creditchina.gov.cn）信用服务中“失信被执行人”或“重大税收违法案件当事人”或“政府采购不良行为记录”查询名单；不处于中国政府采购网（www.ccgp.gov.cn）“政府采购严重违法失信行为记录名单”中的禁止参加政府采购活动期间；（以自招标公告发布之日起至递交《投标文件》截止时间前在“信用中国”网站[www.creditchina.gov.cn]、中国政府采购网[www.ccgp.gov.cn]查询结果为准，如相关失信记录已失效，供应商需提供相关证明资料）。5.本次投标不接受联合体投标。 2.落实政府采购政策需满足的资格要求：（1）供应商在参与本项目投标活动时，应严格按照财政部发布的《政府采购促进中小企业发展管理办法》（财库[2020]46号）及《关于进一步加大政府采购支持中小企业力度的通知》（财库[2022]19号）填写中小企业申明函（货物），如未按其要求执行，对其产生的不利因素由供应商自行承担。（2）根据财政部发布的《关于进一步加大政府采购支持中小企业力度的通知》（财库[2022]19号）规定，货物服务采购项目对小型和微型企业的价格给予10%的扣除。 （3）根据财政部发布的《关于政府采购支持监狱企业发展有关问题的通知》规定，对监狱企业产品的价格给予10%的扣除。 （4）根据财政部、民政部、中国残疾人联合会发布的《关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》规定，对残疾人福利性单位产品的价格给予10%的扣除。 （5）政府采购属于节能清单和环境标志清单中的产品时，在技术、服务等指标同等条件下，应当优先采购节能清单和环境标志清单所列的节能和环境标志产品。（6）根据张掖市财政局《关于进一步做好“政采贷 ”工作的通知》(张财采(2023)16号)规定，本项目可以落实政采贷相关优惠政策。（7）本项目(是/否)面向中小企业采购:是 3.本项目的特定资格要求：第二包段供应商须具有《药品生产许可证》或《药品经营许可证》及《医疗器械经营许可证》 第三包段供应商须具有《医疗器生产许可证》或《医疗器械经营许可证》； 三、获取招标文件 时间：[u]2024-08-14[/u]至[u]2024-09-02[/u]，每天上午[u]00:00[/u]至[u]12:00[/u]，下午[u]12:00[/u]至[u]23:59[/u] 地点：张掖市公共资源交易网 方式：张掖市公共资源交易网在线下载获得。 售价：0.0(元) 四、提交投标文件截止时间、开标时间和地点 时间：2024-09-03 09:00:00 地点：张掖市公共资源交易中心网上开标系统 五、公告期限 自本公告发布之日起5个工作日。 六、其他补充事宜 第二包段：预算金额：41.00万元（大写：肆拾壹万元整），最高限价：33.50万元（大写：叁拾叁万伍仟元整）；第三包段：预算金额：20.00万元（大写：贰拾万元整），最高限价：16.50万元（大写：壹拾陆万伍仟元整） ①张掖市公共资源交易网：http://www.zhangye.gov.cn/ggzy/ ②信用中国”网站：https://www.creditchina.gov.cn ③中国政府采购网网址：http://www.ccgp.gov.cn/ 七、对本次招标提出询问，请按以下方式联系 1.采购人信息 名 称：[u]张掖市中心血站[/u] 地 址：[u]甘肃省张掖市甘州区杏林南路320号卫健大厦[/u] 联系方式：[u]0936-8294155[/u] 2.采购代理机构信息 名 称：[u]银龙兴（北京）咨询有限公司[/u] 地 址：[u]张掖市甘州区滨河新区黑河水电滨河明源小区7号楼沿街向南商铺二层[/u] 联系方式：[u]0936-8225763[/u] 3.项目联系方式 项目联系人：[u]何天宝[/u] 电　话：[u]0936-8294155[/u]

今年3月，工商部门就公布了本市流通领域电动自行车及车用动力电池质量监测结果，5批次样品不达标。但是记者调查发现，由于目前我国还没有针对电动自行车的“三包”政策，消费者维权存在一定困难。 新买的电动自行车，商家当时明明说一次充满电可以行驶60公里，可是每次骑不到40公里就没电了。”日前，市民田先生给本报打来电话称，一个月前在商家极力推荐下，自己购买了一款宣称行驶里程更远的48V电动自行车，可谁知实际里程和商家的说法相差这么远，感觉被忽悠了。　　记者注意到，电动自行车里程“打折”的现象并非个例，今年3月，工商部门就公布了本市流通领域电动自行车及车用动力电池质量监测结果，5批次样品不达标。但是记者调查发现，由于目前我国还没有针对电动自行车的“三包”政策，消费者维权存在一定困难。　　现象电动车上路频“偷懒”　　记者走访看到，商家销售电动自行车时都会强调两个重要指标，骑行速度和行驶里程。对于里程“打折”的现象，不少销售人员称，这很常见，不必大惊小怪。并说，影响行驶里程的因素很多，如电池新旧程度、实际负载重量、路面是否平坦、风速风向、启动次数、轮胎是否充足气等。　　有着多年维修电动自行车经验的马师傅透露，目前市面上销售的电动自行车主要为36V、48V和60V三种，如果是正规厂家质量合格的产品，以48V为例，充一次电可以行驶50公里左右。但一些作坊式厂家生产出来的产品质量并不可靠，商家也往往用理论上的最大值和厂家模拟理想状态下得出的测试结果给消费者以承诺，然而在实际行驶中很难实现。“此外，电池分三个等级，新车的电池是一级，周转、备用的电池是二级，维护的电池是三级。备用电池是由旧电池拼凑而成，和新电池的质量没法比。”马师傅说。

[u]白银市红十字中心血站[/u]招标项目的潜在投标人应在[u]白银市公共资源交易中心网站（http://ggzyjy.baiyin.gov.cn/）[/u]获取招标文件，并于[u]2023-02-02 09:00[/u]（北京时间）前递交投标文件。一、项目基本情况项目编号：BGZJ-ZC23007项目名称：血液检验试剂及耗材采购项目（第三包酶免复检诊断、快速诊断等试剂及其他耗材采购项目）预算金额：34.461(万元)最高限价：34.461(万元)采购需求：酶免复检诊断、快速诊断等试剂及其他耗材。合同履行期限：按合同约定执行本项目（是/否）接受联合体投标：否

概念：细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。基本步骤：1、取对数生长期的各组细胞，分别用0.25%胰蛋白酶消化并吹打成单个细胞，并把细胞悬浮在10%胎牛血清的DMEM培养液中备用。2、将细胞悬液作梯度倍数稀释，每组细胞分别以每皿50、100、200个细胞的梯度密度分别接种含10mL 37℃预温培养液的皿中，并轻轻转动，使细胞分散均匀。置37℃ 5% CO2及饱和湿度的细胞培养箱中培养2～3周。3、经常观察，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。4、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜（低倍镜）计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率 =（克隆数/接种细胞数）×100%平板克隆形成试验方法简单，适用于贴壁生长的细胞。适宜底物为玻璃的、塑料瓶皿。试验成功的关键是细胞悬液的制备和接种密度。细胞一定要分散得好，不能有细胞团，接种密度不能过大。

目录 1.2010年质量管理部主要工作回顾2.当前质量管理部存在的问题3.2011年的重点工作同志们：春去冬来，寒暑更替。转眼之间，2010年已经悄然走到尽头，我们又将迈入一个崭新的年头。回首即将成为过去的2010年，在药业公司的正确领导下，我们质量管理部的全体工作人员，团结一致，发奋拼搏，克服了种种困难，确保了GMP的顺利通过及后续生产的有效开展，一年来质量管理部在困境中谋发展，在挑战中寻机遇，各项工作上实现了新的突破，现就一年来的工作总结如下：一、2010年质量管理部主要工作回顾2010年是公司非常不平凡的一年，是难忘的一年，也是质量管理部面临工作任务最为繁重和艰巨的一年，在集团公司，药业公司的正确领导下，质量管理部全体工作人员紧紧围绕GMP认证和产品质量为中心，着力构建公司药品质量监管体系，积极认真履行GMP赋予的职责，努力提高监管和技术服务能力，为公司GMP认证和生产质量管理制度建设发挥了不可替代的作用，药品监管和服务各项工作取得了明显成效。（一）积极推进GMP认证实施。从2月份起公司启动GMP认证工作以来，质量管理部作为认证体系的核心部门，围绕认证大局，积极履行职责，一是对二级反渗透制水系统选型和供货商积极联络和筛选，对其现场安装调试进行全面跟踪和监督，并对水质进行检验，保证了系统良好运行。二是定时检查厂房设施技术改造情况，从2月份至7月份共计各类检查22次，累计各类问题达130个。通过加强现场巡查和监督，加快了硬件的快速改进，对推动GMP认证进程发挥了积极作用。三是有计划地安排和组织验证工作，先后累计完成的验证项目有公用设施验证8个，设备和设备清洁验证各17个，工艺验证3个，累计45个项目。基本达到了共用系统验证、关键的生产工艺设备清洁验证全覆盖的目标要求，为GMP认证检查创造了坚实基础和条件。四是积极参与物料和设备供应商质量审计，2010年4月～5月期间，先后对2家药材供货商和2家提前真空浓缩罐生产商进行实地考察，为公司提供了良好改进建议，并增强了相关部门和工作人员的GMP意识，显示了质量监管的价值和重要性，同时为推进GMP实施做出了积极和正确的引导。五是对公司的GMP文件体系进行了全面修订，技术文件的修订是工作重点，其中修订和审核的文件类别有《质量手册》1个，《程序文件》22个，《工艺规程》11个，《质量标准》文件累计116个，囊括了中药材、原辅料、包装材料、中间体及成品所涉及的所有标准，检验操作规程79个，质量管理文件47个，其中对“十七味补肾膏”、“荣发胶囊”、“感冒退热颗粒”等产品工艺规程进行了反复修订和及时会审，保证各产品工艺与产品批准证明文件所规定的内容相一致；通过对《质量标准》的修订和实施，对进一步健全质量保证体系，控制产品质量起到良好的促进作用。六是开展和参与GMP培训，今年5月份开始协助行政人事部共同制定了系统的人员培训计划，6月～7月份，GMP培训全面展开，培训讲授的内容是《中华人民共和国药品管理法》、《药品管理法及实施条例》、GMP自检、设备清洁验证等相关内容，各相关岗位的人员大部分人员参加了培训，培训成绩合格，培训总计7次，累计时间达10小时。通过培训使员工的法制意识和GMP意识大大提高，为实现质量管理体系的良好运行奠定了基础和前提。 （二）强化药品生产过程监管。GMP认证结束后，工作重心由工艺验证和试生产转移至日常监管能力建设上来，对药材采购活动、检验、生产及产品放行等环节实行全程质量控制。一是先后对鹿茸、红参、淫羊藿、韭菜子进行反复调研，根据存在的含量不稳定和容易掺杂、掺假现象，及时聘用中药鉴定师和制定订采购流程，有效防止和降低了药材以假乱真、以次充好现象发生，从源头上杜绝了不合格药材流入生产环节的可能，确保合格药材用于生产。二是对每味药材和成品按标准进行逐项检验，发现不合格项，绝不放行，并按有关规定进行返工或销毁处理，从今年2月份起至今，先后对荣发胶囊、补肾十七味膏、肾阳胶囊、感冒退热颗粒、夏桑菊颗粒产品所涉及药材42味，累计88批次，药材总重16664.2kg进行检验，对现场验收或经检验后不合格的药材及时通知物料部门，要求供方退货；检验肾阳胶囊3批次，荣发胶囊7批次，补肾十七味膏6批次，感冒退热颗粒4批次，夏桑菊颗粒1批次，及时有效完成了公司安排和下达的检验任务。其中因GMP证书过期原因，需对认证期间的期间试生产的产品进行返工处理，目前已监督处理荣发胶囊1批次，补肾十七味膏1批次；制定成品审核放行流程，确立质量授权人签名放行程序，发挥了受权人技术支撑和服务作用，较好地履行了质量管理的基本职责。三是开展委托加工生产条件现场考察，选择最佳受托方。根据公司会议要求，采用了实地考察的方式，先后参与和协助生产部门及相关技术人员组成的调研小组，对8家药品生产企业进行了现场考察，结果最终确认了符合接受加工条件的受托方，目前和受托方就委托生产相关事宜已签订了合同，待试生产后上报备案申请资料。四是定时开展GMP自检活动，通过纠偏和预防措施落实，促进系统持续改进。五是推动GMP培训工作实施，发挥部门技术优势。根据销售部营销人员培训计划要求，结合药品生产、流通和使用环节实际，及时收集和整理《中华人民共和国药品管理法》《中华人民共和国药品管理法实施条例》《药品召回管理办法》《药品广告审查办法》等9个有关药品法律法规及荣发胶囊产品知识，并开展了培训，该系列法规基本覆盖了药品销售领域相关的主要方面，涉及到药品销售过程中需经常面对和了解的法规知识和执法依据；荣发胶囊产品知识涵盖了脱发的形成、分类、发病机理和治疗方法，通过培训，使业务人员进一步明晰了法律的权利和义务，增强了法治意识和是非观念，为依法售药和维护合法权益提供了思想武器；同时为产品市场交流和推广提供了理论基础。（三）紧盯行业动向，积极开展相关技术活动。一是及时开展药品再注册活动，对公司9个药品品种申请通过了再注册，完成了生产药品品种企业名称变更和药品包装规格变更补充申请，提交了药品生产许可证换发申请资料，积极配合省局有关换证工作要求，确保换证工作顺畅，无障碍，目前该项工作正在办理中。二是积极响应省局关于国家基本药物实施电子监管赋码系统的实施计划，

[color=#fe2419] 最近随着雪迪龙中小板上市，这家公司的种种“前科”，都被曝光出来了。其实这样见怪不怪了。现在市场上有哪家环境监测仪器厂商或者运营商敢说自己没弄虚作假过？[b][size=5] 那就让我们来无情地揭露他们吧？[/size][/b][/color][b] 　雪迪龙有“前科”，上过[/b][url=http://gov.hexun.com/zhb/index.html][b]环保部[/b][/url][b]门“黑名单”[/b]　　不仅如此，雪迪龙还上过环保部门的“黑名单”。据媒体报道，去年11月7日，环保部和[url=http://gov.hexun.com/sdpc/index.html]发改委[/url]一则《关于2010年脱硫设施不正常运行电厂名单及处罚结果的公告》爆出8家电力公司在脱硫和废气排放环节存在严重的弄虚作假问题，被两部委联合查处。　　而雪迪龙作为设备供应方，也上了这份“黑名单”，并成为唯一一家被环保部点名的设备供应商。　　据了解，被列入“黑名单”的湖南华电石门发电有限公司是华电集团的下属企业，其2台300MW发电机组采用湿法脱硫，并全年享受国家脱硫电价补贴政策。　[b]　其采用的监测仪器就是来自雪迪龙，被指“提供的烟气在线监测仪器[/b][url=http://datainfo.stock.hexun.com/][b]数据[/b][/url][b]严重失真，净烟气在线监测系统二氧化硫测量值与 DCS 显示值存在明显差异，人为更改 DCS 数据，弄虚作假”。[/b]　　不过，鉴于正在IPO进程中，去年11月27日，雪迪龙向环保部提交了申诉材料，用了一周不到的时间，12月2日即迅速取得相关主管部门的证明材料： [b]“责任主体是运营商，其作为烟气在线监测系统运行维护的第三方，私自更改设计参数。北京雪迪龙科技股份有限公司作为设备供应商，没有负责烟气在线监测系统的运行维护，与你公司无关。”[/b]

师妹:师兄! 师兄:哎~~ 师妹:我们为什么要做实验啊~? 师兄:因为老板有项目 师妹:那实验为什么做不完哪? 师兄:因为老板还有IDEA~ 师妹:那实验什么时候才能结束啊? 师兄:等我们全累趴下 师妹:师姐! 师姐:哎~ 师妹:你为什么还嫁不出去啊~? 师姐:因为我读了博士了. 师妹:女博士就不用嫁人了么? 师姐:是的 师妹:那你不是变态了嘛? 师姐:读了博士才变的 师兄,师姐:师妹! 师妹:哎~ 师兄,师姐:在实验室不要唱这唱那 师妹:为什么啊? 师兄,师姐:小心被老板抓 师妹:那该怎么办啊? (画外音起:看到老板,我们就一起唱~~) 师兄,师姐,师妹(合):我们大家和老板就是吉祥的一家~~~

[size=16px]克隆形成实验[/size][size=16px]及划痕实验[/size][size=16px]、[/size][size=16px]流式细胞术[/size][size=16px]操作步骤[/size]软琼脂克隆形成实验检测单细胞克隆形成能力软琼脂克隆形成实验适用于悬浮生长的细胞。1. 配胶液：用蒸馏水和琼脂糖粉配制浓度为 0.3% 的琼脂糖液，高压灭菌，置于42℃ 水浴锅中，目的是为了使其保持融化状态。2. 配制含 20% FBS 的 2×1640 培养基，用 0.22 ?m 的滤器过滤除菌。3. 铺下层胶：将 0.6% 的琼脂糖胶液与 2×1640 培养基等体积混合，以每孔 1.5mL 加至 6 孔板中，室温等其凝固。4. 细胞计数：将细胞用 PBS 洗一遍，离心，加入新的培养基混匀稀释，计数。H69-NC、H69-shMSI1-1、H69-shMSI1-2、H82-NC、H82-shMSI1-1、H82-shMSI1-2、H526-NC、H526-shMSI1-1、H526-shMSI1-2 均以 1×104/孔铺入 6 孔板。5. 铺上层胶：将 0.3% 的琼脂糖胶液与 2× 培养基 1：1 混合，加入 100 μL 细胞悬液，混匀后，每孔加入 1.5 mL 混合液。6. 放入 37℃，5%CO2 培养箱培养，约 2-3 周后终止培养。7. 比较细胞克隆形成能力的差异，利用 Graphpad prism5 作图计算两种细胞克隆形成能力的差异。平板克隆形成实验检测单细胞克隆形成能力平板克隆形成实验适用于贴壁生长的细胞。1. 细胞处理：将 SW1271-NC、SW1271-shMSI1-1、SW1271-shMSI1-2 细胞，用 PBS洗一遍，用胰酶消化并计数。2. 接种细胞： 将细胞接种于 6 孔板中， SW1271-NC 、SW1271-shMSI1-1 、SW1271-shMSI1-2 接种密度为 3×103/孔，注意一定让细胞均匀分布。于 37℃，隔离CO2 静置培养 2-3 周（终止培养时间以不小于 2 周且克隆之间不发生融合为标准）。3. 出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去旧培养基， 用 PBS 清洗 2 次，用 4% 多聚甲醛固定液固定 20 min，吸除固定液，用蒸馏水清洗 2 次后加适量结晶紫染色15-20 min，用蒸馏水洗去结晶紫，自然风干，用扫描仪扫描成图片。4. 在低倍镜下计数大于 50 个细胞的克隆数。5. 计算克隆形成率。细胞划痕实验1. 用记号笔在 12 孔板底部划两条平行线做为标记。2. 将 SW1271-NC、SW1271-shMSI1-1、SW1271-shMSI1-2 细胞接种至 6 孔板。3. 待细胞汇合度为 90% 左右时，用 10μL 枪头垂直于两条平行标记线进行划痕。4. 吸除培养基，1xPBS 漂洗 2 次，并换用无血清培养基培养。5. 分别在划痕后培养 0h，12h，24h，48h，72h 观察细胞迁移情况并拍照。流式细胞术1. 收集 H69、H82、H526、SW1271 的对照组和实验组细胞(包括培养上清中的细胞)，收集 1 - 10 ×105 个细胞，用预冷 PBS 离心洗涤。用双蒸水稀释 5 ×Binding Buffer为 1 × 工作液，取 500 μl 1 × Binding Buffer 重悬细胞。2. 每管加入 5 μl Annexin V-APC 和 10 μl 7-AAD。3. 轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育 5 分钟。4. 上机进行分析。

新闻资讯新闻资讯中国制造打破国外垄断───美时医疗7T超高场成像磁体实现“零”的突破发布时间：2016-01-25 2016年1月18日，美时医疗技术有限公司的励磁车间内一片欢腾，特斯拉计的读数停留在了激动人心的7.0366T，这标志着全亚洲首台自主研发生产的7T超高场成像磁体的诞生。 http://www.time-medical.com.cn/uploads/7Tesla.png 美时医疗的超高场磁体团队历时多年的研发、设计以及制造，通过大量的模拟和计算，制定了详尽的计划和方案，该款磁体第一次励磁测试便成功达到7T的磁场强度。该磁体通过特殊的磁体设计和精湛的制造工艺，使磁体总重量小于2吨，同时保证了液氦的零消耗，磁场漂移小于0.1ppm/h。 在过去三十年间，超导磁体技术一直被三家外国公司所垄断，尤其是4.7T以上的超高场磁体技术，全球范围内仅有2家企业具备研发和制造能力。而在这之中，用于成像的超高场磁体更是难上加难。核磁共振成像因其对被扫描对象的无创性，及在软组织成像上的高灵敏度，与其他软件平台和数学工具的自然紧密配合等独特优势，在大脑研究中被广泛应用，可以对大脑的代谢、运作、逻辑、语言和思维等各方面进行研究。分子成像可有效地揭示细胞的运作状态，揭示药物在活体细胞中的作用和机理，对于病理学和药理学的研究能起到关键作用。脑功能成像可研究人类的思维活动，了解大脑的运作机制，探索大脑学习和认知的秘密。核磁共振技术对于中风等一些脑部疾病的早期诊断和预防也能起到至关重要的作用。 由于超高场磁体的高度垄断和技术壁垒，使其价格始终居高不下，这严重阻碍了中国磁体技术、脑科学和生物制药等领域的应用研究。美时医疗通过多年的技术积累，经验沉淀和刻苦研发，终于打破了外国公司在超高场磁体领域的垄断，创立了中华第一的自主品牌，为中国科技的发展作出卓越贡献。© 美时医疗控股有限公司 2010‐2015版权所有首页 联系我们

鬼灯笼【别名】虎灯笼、白灯笼（《生草药性备要》），苦灯笼（《岭南采药录》），红灯笼、红羊米青（《陆川本草》），红花路边青、夜鬼灯笼、土羚羊（《南宁市药物志》），岗灯笼（广州部队《常用中草药手册》）。【来源】为马鞭草科植物灯笼草的全株。全年可采。【原形态】灯笼草（《岭南采药录》）小灌木，高0.9～1米。幼枝被黄褐色小柔毛。叶对生；具柄；纸质；矩圆形至狭矩圆状披针形，长5～12厘米，宽2.5～4厘米，先端渐尖，基部阔楔尖，边全缘或略作波浪形，近秃净，背脉明显。聚伞花序腋生，有花5～9朵，密被黑褐色小毛；萼蓝紫色，有棱5，长约10毫米，有白色腺点，裂片阔卵形而尖，结果时略增大；花冠近白色，长约15毫米，管约与花萼等长，裂片5；雄蕊4，短，突出；雌蕊1，花柱突出，柱头2裂，子房不完全的4室。核果球形，直径约5毫米，包藏于萼内。花期7月。【生境分布】生于丘陵地或旷野间。分布我国南部。【化学成份】同属植物的根含贞桐甾醇、蛇麻脂醇、贞桐酮、贞桐二醇烯酮。叶含杀蠕虫成分贞桐定。【性味】《南宁市药物志》：苦微甘，寒。【功能主治】①《南宁市药物志》：清热解毒。治温热病，骨蒸劳热，咳嗽，小儿急惊风。外用治跌打。②《广西植物名录》：根，清热解毒，止咳，祛风。治感冒，咽痛，咳嗽，肺病，胃痛，腹痛，疖肿，跌打，风湿。【用法用量】内服：煎汤，3～5钱。外用：鲜品捣敷。

经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。克隆化的阳性杂交瘤细胞，经过一段时期培养之后，也还会因为细胞突变或特定染色体的丢失，使部分细胞丧失产生抗体的能力，所以需要再次或多次克隆化培养。克隆化次数的多少由分泌能力强弱和抗原的免疫性强弱而决定。一般说，免疫性强的抗原克隆次数可少一些，但至少要3～5次克隆才能稳定。克隆化的方法很多，包括有限稀释法、显微操作法、软琼脂平板法及荧光激活分离法等。一、有限稀释法1．材料① 微量培养盘，盘内各孔于克隆化前一天培养小鼠腹腔细胞（即饲养细胞）每孔2万～4万。② HT培养基2．操作方法① 取出抗体阳性孔细胞，用HT培养液制成细胞悬液。并取样进行台盼兰染色，计数。② 用HT培养液将细胞稀释成200个/ml、40个/ml、20个/ml和的悬液。③ 用吸管将细胞悬液分别种入微量培养盘，每孔0.05ml，细胞含量分别为10个/孔、2个/孔、1个/孔和0.5个/孔。④ 5％CO2饱和湿度，37℃培养。⑤ 每天用倒置显微镜观察克隆生长情况，选择只有一个集落生长的孔，弃掉两个以上和没有细胞生长的孔。⑥ 克隆大量繁殖后，布满孔底的1/3～1/2时，测培养液抗体。⑦ 抗体阳性孔细胞，移到有饲养层的组织培养瓶中，并传2～4代就可以脱离饲养细胞，建成克隆株。二、软琼脂克隆化借助撒在软琼脂上单个细胞定位生长，而达到克隆化，具体操作如下：1．配2.5％的琼脂糖30ml，水浴溶化后，移入45℃水浴中。2．将117ml完全DMEM液和3ml 10倍浓度的DMEM液混合，置45℃水浴预热。3．将琼脂糖与DMEM液混合，即为含0.5％琼脂糖的完全DMEM液，并加75×108 脾细胞。4．每块平皿加10ml，于室温中凝固。5．DMEM中的细胞与DMEM―琼脂1:1混合，将细胞琼脂混合物2ml铺于凝固的平板上，使其全部覆盖。6．放入CO2箱饱和湿度，37℃培养10天。7．用PBS配制0.6％琼脂糖，于沸水浴溶解后，置45℃，在保温情况下取一试管，迅速加入0.1ml 25％羊红血球，0.2ml豚鼠补体，2.7ml 0.6％琼脂糖。8．用3ml琼脂糖―羊红血球混合液覆盖克隆。于37℃CO2箱孵育1h~2h。从克隆上部溶解羊红血球的溶血范围，可筛选抗羊红血球Ig。三、显微镜操作法在直径6cm培养皿中，加入1ml 1.0×108 细胞悬液放置5％CO2饱和湿度，37℃温箱中放置30min以上，倒置显微镜下，寻找那些与周围相距甚远的单个细胞，将毛细管口（一头有直角弯头毛细管，一头连接一尺长乳胶管，用口控制液体进入）水平置放于液面上，左右微动，直到看见管口，对准细胞，吸入毛细管，将管中细胞移到预先加有2.0×104~5.0×104 饲养细胞96孔板内，培养后，即可获得单个细胞形成的克隆。四、荧光激活分离法用一种荧光激活细胞分类器（Fluorescein Activafed Cell Sorter，FACS）。其基本原理是：将细胞经荧光抗体染色后，经喷嘴形成单个细胞的线形液滴，在莱塞光激发下，荧光素发射荧光，此信号由光电倍增管接收，再结合细胞形态大小产生光散射信号，经电脑处理，产生信号并与预定的信号对比，根据细胞荧光强度及细胞大小不同，将细胞分成不同级别，在电场中发生偏离，而分别收集于不同容器中。

我想大家也许都吃过鱼吧，市场上面的鱼有很多很多种，数也数不清，还有各种形状的，我还听老前辈说，吃鱼还会变的更聪明呢？今天我们就拿白鱼来说说吧，白鱼的形状和别的小鱼是不同的。它长的也很有意思，白鱼（White Fish）属鲤科鱼类，俗称大白鱼、翘嘴白鱼、白鱼。体形长，甚侧扁，头背平直，头后背部隆起。口上位，下颌很厚，上翘，口裂与体长轴几乎成垂直。眼大，位于头的侧下方。下咽齿末端成钩状。腹鳍基部至肛门有腹棱；背部具强大而光滑的硬刺；尾鳍分叉，下叶稍长于上叶。体背略呈青灰色，两侧银白，各鳍灰黑色，平时多生活在流水及大水体的中上层，游泳迅速，善跳跃，以小鱼为食，是一中凶猛性鱼类。象这种鱼是不是很有意思啊！白鱼生长的很快，个体也比较大，它的肉比较细嫩，味美而不腥，一贯被视为上等佳肴。原为野生品种。好象现在都进行大面积人工饲养。它还也属太湖主要经济鱼类之一，与“太湖三宝”合称“太湖四珍”。少刺多肉，味道鲜美，营养价值较高。你们去市场上看看吧，，多吃点象这样的鱼。

九龙吐珠【英文名】Herb of Fanshaped Umbrellasedge【别名】伞莎草【来源】药材基源：为马鞭草科植物龙吐的珠叶及全株。拉丁植物动物矿物名：Cblerodendrum thomsonae Balf采收和储藏：全年均可采，洗净，切段，晒干；叶，鲜用。【原形态】龙吐珠，攀援状灌木，高2-5m。幼枝四棱形，被黄褐色短柔毛，老时无毛；髓部疏松，干后中空。单叶对生；叶柄长1-2cm；叶片纸质，卵状长圆形或狭卵形，长4-10cm，宽 1.5-4cm；先端渐尖，基部近圆形，全缘，表面被小疣毛，背面近无毛；基脉3出。聚伞花序腋生或假顶生，二歧分枝；苞片狭披针形，长5-10mm；花萼白色，基部合生，中部膨大，具5棱，先端5深裂，裂片白色，三角状卵形，长1.5-2cm，宽1-1.2cm，外面被细毛；花冠先端5裂，深红色，外被细腺毛，裂片5，椭圆形，长约9mm，花冠与花萼近等长；雄蕊4，与花柱均伸出花冠外。核果近球形，直径约1.4cm，棕黑色，萼宿存，红紫色。花、果期7-11月。【生境分布】生态环境：我国庭园及温室栽培。资源分布：原产西非。【化学成份】龙吐珠含美利妥双甙（melittoside），桃叶珊瑚甙（aucubin），8-O-乙酰基哈帕甙（8-O-acetylharpagide），雷朴妥甙（reptoside），筋骨草甙（ajugoside）及8-O-乙酰基米欧坡罗甙（8-O-acetylmioporoside）。【性味】味淡；性平【归经】肝；脾经【功能主治】解毒。主慢性中耳炎；跌打损伤【用法用量】内服：煎烫，6-15g。

大家还记得板蓝根不，03年SARS席卷全中国的时候板蓝根与白醋一时洛阳纸贵，如今随着H7N9禽流感病毒爆发，板蓝根即将再次火爆，今天网报江苏卫生厅说板蓝根冲剂可预防H7N9禽流感，那板蓝根究竟是何方神药，用处这么大？

近日被媒体曝光的今麦郎方便面酸价超标事件出现了乌龙。昨日河南三门峡市疾病预防控制中心发表声明，承认其自身方便面酸价指标检测资质认证不全，此前对今麦郎方便面的三份检测报告予以收回并声明无效.该乌龙事件对于今麦郎乃至整个方便面行业产生了负面影响，让消费者产生了一系列的品牌不良认知，这个责任该由谁负？

哈希总氯跟溴、碘的试剂包为什么是一样的，21056-69。用这个药包，测试的结果怎么区分这三种物质

一直以来都想把自己在基因克隆方面的心得写出来，让更多的刚刚进入生命科学领域的人受益，因为自己刚开始做克隆时也遇到过各种问题，经过较长时间的总结和实践，我的题组现在的基因克隆都是一次到位的，基本不需要重复做。其实我只是一个只有几十万科研经费的小青椒，不过我对科研非常热爱，我喜欢买实验用的各种酶啊，好用的耗材之类的东东超过我对自己的衣服鞋子的热爱，所以我看起来穿的及其普通，可是我的实验花费有点奢华，呵呵，可能像我这样的人不多吧，哈哈，反正无所谓开心就好。下面言归正传（1）是酶切位点的选择。我的实验室有Takara、Promega以及NEB三种公司的常用的酶，这极大的丰富了我们的选择，所以在设计PCR产物的酶切位点之前首先要看看哪两个酶之间是可以进行同时酶切的。因为这三家公司的双酶切表的组合完全不同，最佳的方案是我们能够按照需要去选择合适的酶。有人说这得花很多钱吧，其实不然，Takara几乎每年9月都有一次促销活动，在他们七折的时候我一下买了三千块钱的酶，这一年来有用之不尽的感觉。Promega的酶也非常好用，而且长期五折，我也是常用的酶买了一批放在实验室里。至于NEB的实在是有一点贵的，我一般不批量买了，在NEB买的一般都是不常用的酶，比如FseI、AscI等等。酶的选择是实验成功的关键吆。（2）PCR引物的设计这一点我不想多说，虽然有很多的攻略里面讲到了PCR引物设计的原则等等，大家设计的时候要参考各种原则，我认为不然，因为做过实验的战友都清楚，有的时候很多PCR引物的选择是没有选择的，比如我要扩增一个完整的基因的ORF框，那么它的起始密码子，终止密码子部分都要克隆出来的，不能多也不能少一个碱基，即使起始部位或者终止部位的AT含量很高，高到你难以忍受，那怎么办呢，基本我们没有选择，如果实在是没办法的条件下，只能在PCR引物的5端加入人为设计的碱基而把引物的扩增部分后移或前移来避开难以扩增的部位，我不知道说清楚没有，如果引物序列OK，可以忽略上句话。所以大多数情况下引物我们是没得选择的，那么我们只能从PCR扩增条件上下功夫。（3）PCR扩增对于PCR扩增其实不同的基因可能策略不同，我来说几点相同的。首先很多新手会忽略引物的浓度问题，我在最开始做PCR的时候因为当时的基因非常容易扩增，所以其实我的条件并不是最佳的，但当时把基因扩出来了我也没有在意，直到有一天我需要在基因的5端加入3个HA标签，这样的PCR引物长度差异很大，一支引物100多bp，一支引物只有30bp，于是当我还有以前的条件时我扩不出任何的基因。当时扩了几次都不成功，各种温度都试过了也不成。于是我静下心来，把PCR的实验条件进行了全方位优化，在PCR反应体系中，把引物调整到各种浓度的，把模板调整到各种浓度的，有的加Mg2+，有的加BSA，还使用梯度PCR的条件，试了各种扩增温度的，结果让我很开心，最后我的基因被扩增出来了，而且好亮好亮的那种。记得当时自己高兴地跳了起来。也许这就是科研的魅力吧！在这次试验中我找到了最佳的PCR条件，这是三年前的事了，这个条件让我在三年中屡试不爽，几十个基因的扩增从未失手过。其实体系很简单，50ul体系中buffer 5ul、Mg2+ 1mM、dNTP 0.2mM、引物每支1ul（配成10umol/L浓度)、PCR酶一般是0.5ul、其余部分用水补平，混匀，离心一下，进行PCR扩增。其中引物从公司拿到干粉后我一般用水溶解至100umol/L浓度保存，吸取少量稀释十倍后用于PCR反应，这个浓度是最佳的。所以PCR体系中引物并不是越多越好，同样的模板的量也很关键，一般我都在10ng-100ng之间，太少或太多都会抑制PCR反应。当然，不同的基因其退火温度差异较大，建议第一次做直接做梯度PCR，设置的温度范围宽些，总会有扩出来的。反正把反应体系加好，把温度控制好应该就万事大吉了，如果这样仍然扩不出来，那就直接调整DNA模版的量吧，其他的因素应该不是原因（当然得保证引物，以及酶的质量得前提下）。（4）PCR产物的酶切，这是最简单的一步，一般我都是酶切过夜的。因为我认为PCR产物切得尽可能的充分对克隆很重要，毕竟保护性碱基只有几个。（5）质粒的酶切。虽然质粒的酶切很简单但是却很讲究，决定着克隆的成败。质粒提取我一般都用试剂盒，天根的很便宜了，现在好像一盒已经六折，一盒有200个，可以用很久。质粒提取完毕后我会用紫外分光光度法对质粒进行定量测定，根据A260的值计算出质粒的量，然后再进行酶切，一般酶切体系60ul，60ul体系中我只切总量1ug的质粒，一次切两管，酶切过夜后切胶回收或者不切胶直接回收，这取决于两个限制性内切酶之间的距离，十几bp以内我就直接回收了，如果偏大就要切胶回收。（6）连接 连接我采用的是Promega公司的T4 DNA连接酶，它的特点是22度连接三小时以上几款，这样我就可以在上午把质粒片段以及PCR片段回收后马上做连接，连接一个白天，到下午可以做转化了，涂板，过夜培养第二天早上看结果。然后挑克隆（一般我一个基因就挑四个克隆足已）培养一白天，下午稍晚些提质粒，然后马上酶切鉴定，一般酶切鉴定体系中我都做20ul体系，酶用0.5微升就够了（呵呵，该省的就省点吧），酶切一个小时跑胶就可以知道克隆是否成功了。这样从PCR到克隆鉴定完毕，一共三天。不过从我带学生的经验来看，从一个懵懵懂懂的新手到成功掌握该技术快则半个月，多则一个月，引人而异。各位也试试看吧！以上为本人在基因克隆方面的一家之言，难免有疏漏或过于肯定之处，感谢各位战友多提宝贵意见，多多交流，以后我会陆续贴出各种技术的实验心得，欢迎大家相互交流！

红酒 朦胧的美?????喜欢红酒，不是简单的喜欢它的味道。总觉得红酒酷似一种情感。它迷人，甚至能让人沉醉。????喜欢红酒，似盎然成趣，其意味却引以深思。红酒把女人易碎的感情层层包裹，女人娇柔的一面深深掩埋。红酒与女人相装点，精心与慢散相调和。女人在浪漫中抒发情怀，红酒在静夜中谱写心曲。这是天地合一的莹洁，是心、灵互融的至纯。是一首美到极致的小夜曲！?? 红酒是美丽的，带给人的感觉也是缥缈的朦胧美。爱情则是实实在在的感情之花绽开，红酒与爱情交相辉映。一杯红酒入口，留一香回味。爱情的风暴过后，是平淡的生活，是实实在在的感情投入，品饮红酒的女人是甜蜜的，红酒是寂寞女人的阳光。