核糖基标准品

此文集收录沃特世实验中心进行中药配方颗粒研究中所有涉及到的药材汤剂实验方法、UPLC分离结果、标准汤剂特征图谱及相似度计算结果等，供大家参考。

《“十三五”国家食品安全规划》结合食品安全实际抽检工作，国家市场监督管理总局每年都会组织制定《国家食品安全监督抽检实施细则》，以此对监督抽检的适用范围、产品种类、检验依据、抽样、检验要求、判定原则与结论提出统一要求。2024年 国家食品安全监督抽检 工作正在如火如荼的进行中，其中食品添加剂 新增赤藓糖醇 检测项目，要求对赤藓糖醇(以C4H10O4计, 以干基计)、核糖醇和丙三醇(以干基计)等进行检测。迪马科技参考 GB 26404-2011 食品安全国家标准 食品添加剂 赤藓糖醇 附录A.3、A.6，使用 Dikma CarboPac H+ 300 x 8.0mm, 6 μm 氢型大孔径阳离子交换树脂填充色谱柱，示差折光检测器对赤鲜糖醇、核糖醇和丙三醇进行检测。

2'-岩藻糖基乳糖（2'-FL）是一种在母乳中含量丰富的低聚糖，属于人乳低聚糖（HMOs）的一种，具有多种生理功能，包括促进益生菌生长、抑制有害菌、免疫调节等作用。它已被美国FDA 批准为“公认安全”（GRAS），并作为食品成分添加到婴儿配方食品中。

人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)ELISA试剂盒试验原理：本试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中指标的浓度呈比例关系。

人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)ELISA试剂盒试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在化物

人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)检测试剂盒人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)抗原、生物素化的人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)检测试剂盒人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)抗原、生物素化的人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗核糖核蛋白抗体(RNP-Ab)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)检测试剂盒人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)抗原、生物素化的人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

重组单克隆抗体治疗药物(mAb) 是最大的一组治疗性蛋白药物。此类治疗性药物的有效性高度依赖于mAb 正确的糖基化模式，且迄今为止，所有批准的治疗性mAb 均为免疫球蛋白G (IgG) 。人类IgG 的每个重链上均含有一个保守的N 连接糖基化位点[2]。N 连接糖基化是一种极为重要且非常复杂的翻译后修饰，需要在糖蛋白药物开发、加工和生产的每个阶段对其进行控制、监测与了解。此外，治疗性蛋白的安全性、有效性和血清半衰期等特性也会因糖基化模式的不同而受到影响。因此，糖基化模式分析是表征治疗性糖蛋白（尤其是mAb）的一个重要部分。虽然已有多种不同的方法用于糖基化分析。但是，大部分的方法均基于酶解蛋白，从 mAb 中释放多糖，然后通过标记试剂（例如2-氨基苯甲酰胺，2-AB）进行进一步的衍生化。由于糖基缺少发色团，所以荧光检测前需先采用2-AB（中性）标签标记。而由于标记后的多糖结构极为亲水，因此将亲水相互作用色谱（通常称为HILIC）作为首选的分离技术。采用配合荧光检测的 HILIC 分离是一种非常稳健的糖基化分析方法，同时 HILIC/LC 还可与质谱联用，以获得重要的质量及结构信息。在本应用简报中，我们介绍了AdvanceBio 糖谱分析色谱柱，这是一种亚2 μ m HPLC 色谱柱，具有新型HILIC 酰胺化学技术，用于高通量糖基化分析。与现有的HPLC 色谱柱技术相比，该色谱柱及方法可增强多糖的分离，且减少了40% 的洗脱时间。为了阐释AdvanceBio 糖谱分析色谱柱的实用性，我们以2-AB 标记后的人类IgG N 连接糖链样品为例进行研究。

“辽宁农业职业技术学院食品药品学院”尝试在低脂鸡肉肠中添加糖基脂肪替代物， 分别为蓝莓渣膳食纤维粉、 糯米粉、 魔芋胶， 研制出一种低脂肪、 低热量、 高膳食纤维的新型肉糜类制品。 本试验以感官评分、 质构特性和蒸煮损失率作为评价指标 ， 采用单因素、 正交和验证试验， 确定鸡肉肠的最佳配方， 该研究将为低脂肉制品的研发和生产提供一定的理论基础和实践指导。

人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)检测试剂盒人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)抗原、生物素化的人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)ELISA试剂盒人不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)抗原、生物素化的人不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)检测试剂盒人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)抗原、生物素化的人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗天然脱氧核糖核酸抗体(n-DNA-Ab)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)检测试剂盒人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)抗原、生物素化的人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

糖基化是最重要的一种翻译后修饰，指的是将糖基部分连接到蛋白质上。糖基化模式的改变对免疫原性和整体生物活性有很大影响。因此，糖基化表征对基于生物医药的应用至关重要。虽然现在已有多种分析技术被应用于分析 N-糖基化，但低水平糖基化的精确测定仍面临着极大的挑战。本应用简报展示了利用毛细管电泳和质谱 (CEMS) 对重组单克隆抗体 (mAb) 糖基化进行分析。此方法包括利用 N-糖苷酶 F (PNGase F) 酶解 mAb 得到多糖，对多糖进行荧光标记（ 8-氨基吡-1,3,6-三磺酸三钠盐，ATPS），并利用 Agilent 7100 CE 串联 Agilent 6520 精确质量 Q-TOF LC/MS 进行分析。从使用的重组 mAb 中，我们共鉴定出 7 种多糖，从每种多糖成分的相对百分比可知，主要及次要糖基化修饰均有存在。本应用简报证明了高分离速度的 CE 与高灵敏度检测限的 MS 相结合，使 CE-MS 成为一种替代 LC/MS 方法对 mAb 或其它糖蛋白进行糖基化表征的有效且最有前景的方法。

糖基化广泛存在于植物的一系列生物过程中，并被认为对人体健康有益，但是有关这一生物过程的研究有限，其主要原因在于缺乏有效的分析方法鉴定植物中丰富多样的糖基化代谢物。本应用简报介绍了 Dai 等人最近报道的一种研究茶叶 (Camellia Sinensis L.) 中糖基化过程的非靶向特异性修饰代谢组学方法。将安捷伦超高效液相色谱 (UHPLC) 与高分辨率四极杆飞行时间质谱 (Q-TOF/MS) 结合使用，在全离子源内碎裂模式下对绿茶进行分析。利用实验室定制的工作流程对采集的数据进行处理，基于特定糖基化修饰的特征性中性丢失模式，选择性地提取与糖基化相关的化合物。直接在数据库中搜索糖基化代谢物或相应的底物，进一步鉴定这些化合物。借助这一策略，同时检测出 202 种糖基化代谢物，包括葡糖基化/半乳糖基化、鼠李糖基化、芦丁糖基化和樱草糖基化，其中在绿茶浸泡液中推断鉴定出 68 种糖基化代谢物。基于 MS/MS 谱图，初步解析出另外 44 种新型糖基化代谢物。此方法使用户能够分析、发现和鉴定植物样品中的新型糖基化代谢物。所述工作流程大大拓展了糖基化代谢物的鉴定范围，并提高了对未知代谢物进行结构解析的能力。该方法可以进一步扩展以分析植物中许多其他重要的修饰。

本申请说明证明了毛细管池和护套用于核糖核酸酶a的热倾斜研究。关键词：圆二色性，毛细管池，微量分析，热变性，核糖核酸酶A，变性蛋白分析软件，变性温度，J-1500

数据中使用资生堂CAPCELL PAK NH2色谱柱对乳糖和蔗糖进行了分析，方法依据“GB 5413.5-2010 食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定”方法下检测的数据。本方法中，为了得到更好的分析结果，因而将流动相改为乙腈/水=75/25（标准中为70/30），乳糖蔗糖峰分离度2.16，峰形良好。

使用示差折光检测器（RI）对三氯蔗糖标准品进行分析。色谱柱同样选择中等极性的普适型色谱柱CAPCELL PAK C18 MGII S5 4.6 mm i.d. × 150 mm，得到结果如图1所示。三氯蔗糖保留时间为12.400min，与标准谱图保留时间基本一致，理论塔板数为12350，不对称因子为0.95，峰形良好。

人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)检测试剂盒人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)抗原、生物素化的人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

根据国标 GB1886.234-2016的标准分析食品添加剂木糖醇，指定的色谱柱要求为：以聚苯乙烯二乙烯苯树脂为填料的分析柱，300 mm×7.8 mm，或等效色谱柱。国标中要求在重复性条件下获得木糖醇的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值（RSD）的2 %。使用SUGAR SC1211色谱柱进行分析，可以满足国标的各种要求。

依据《GB 5009.279-2016 食品安全国家标准 食品中木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇的测定》第二法，使用资生堂CAPCELL PAK NH2 UG80 S5 4.6 mm i.d. × 250 mm（GQAD 05507）色谱柱，以示差折光检测器进行检测，对木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇和赤藓糖醇标准品能够得到良好分析结果和良好线性关系。

根据国标 GB1886.182-2016的标准分析食品添加剂异麦芽酮糖，指定的色谱柱要求为：氨基柱，250 mm×4.6 mm，或同等分析效果的色谱柱。国标中要求在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值（RSD）的5 %。使用HILICpak VG-50 4E色谱柱进行分析，可以满足国标的各种要求。

?“辽宁农业职业技术学院”将蓝莓渣膳食纤维粉、魔芋胶、糯米粉 3 种糖基脂肪替代物添加到低脂鸡肉丸中，研制出既营养健康又美味的新型肉制品。 通过单因素试验和正交试验， 以感官评分、蒸煮损失率和质构特性作为依据，确定低脂鸡肉丸的最佳配方， 该研究将为研发低脂凝胶类肉制品提供一定的理论依据和实践指导。

综上，依据《GB 5009.279-2016 食品安全国家标准 食品中木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇的测定》第二法，使用资生堂CAPCELL PAK NH2 UG80 S5 4.6mm i.d. × 250mm（GQAD 05507）色谱柱，选择NQAD检测器进行检出，对赤藓糖醇、木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇标准品能够得到良好分析结果；赤藓糖醇在0.14mg/mL~0.49mg/mL浓度范围内，木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇在0.1mg/mL~0.35mg/mL浓度范围内均能够得到良好线性关系，相关系数R^2均在0.99以上。

本文对制备“无核糖核酸酶”水的两个主要过程进行了对比，这种比较给予有关RNA提取、RNA分解、RNA稳定性测试以及核糖核酸酶剂量等几种试验得到的结论。并对比了通过超滤法来清除RNases和利用DEPC化学钝化RNase的两种方案。密理博纯水系统的超滤柱可以有效地替代的DEPC法，提供“无核糖核酸酶”水

综上，依据《GB 5009.279-2016 食品安全国家标准 食品中木糖醇、山梨醇、麦芽糖醇、赤藓糖醇的测定》第二法，使用资生堂CAPCELL PAK NH2 UG80 S5 4.6mm i.d. × 250mm（GQAD 05507）色谱柱，选择NQAD检测器进行检出，对木糖醇标准品能够得到良好分析结果；赤藓糖醇在0.14mg/mL~0.49mg/mL浓度范围内，木糖醇在0.1mg/mL~0.35mg/mL浓度范围内均能够得到良好线性关系，相关系数R^2均在0.99以上。

按照国标《GB 5009.28-2016 食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》方法进行分析，使用CAPCELL PAK C18 MG色谱柱对标准品混合溶液能得到良好分析结果；另一方面，使用SUPERIOREX ODS色谱柱，在原条件基础上微调即可实现乳品中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠及杂质间的良好分离。

HALO 糖柱用于10种普鲁卡因胺标记的葡聚糖标准品(Sigma-Aldrich 1:1 (w/w) of Part numbers 00268 and 00269)（0.5 μg/μL,70/30乙腈/水）的高效分离！每个批次的HALO糖柱均进行此样品分离检测，保证了不同批次之间的重复性及色谱柱性能！

采用循环伏安法对酵母核糖核酸与中性红的相互作用进行了研究。NR在玻碳电极上有一对氧化还原峰, 加入yRNA后, 氧化还原峰电流降低, 但没有新的氧化还原峰出现, 表明NR与yRNA发生了较强的相互作用, 紫外光谱进一步证实该作用方式为静电作用。求得NR与yRNA的结合比为1 ∶2, 建立了一种间接检测酵母核糖核酸的电化学方法, 检测范围为510 ×10 - 3 ～0125 g/L, 检出限达110 ×10 - 5 g/L。