老鼠胰脏多肽

随着生活水平的提升，全世界的肥胖人口正在迅速增加。脂肪过多还会增加心脏病和2型糖尿病（最常见的糖尿病）的风险。近年来研究表明，与肥胖相关的疾病危险性不只是与脂肪总量有关，更与脂肪在体内的分布有关。因此，越来越多的研究将重点放在对脂肪组织的差异性研究中，而不是简单地仅考虑总体肥胖程度。因此净信多样品组织研磨仪JXFSTPRP-24L则轻松结果老鼠脂肪研磨组织。

本文介绍了一个运用inspeXio SMX-100CT观察老鼠股骨的实例观察。针对老鼠股骨的连接膝关节的远端进行CT扫描，得出了干骺端、生长板软骨和骨骺端的CT横截面图像及3D立体图像。并运用TRI/3D-BON软件对CT数据进行分析，对老鼠股骨中的皮质骨、生长板软骨和松质骨进行剥离，使用BMD（骨密度）软件创建标准分析数据，测出皮质骨和松质骨各自不同的厚度。

内源性硫化氢能够调节血管静张度（血管弹性）。基于钙独立机制和钾离子通道机理研究硫化氢对于肠膜小动脉的松弛研究较少，应用unisense微电极系统监测老鼠肠膜小动脉中测试了硫化氢的含量，讨论了硫化氢的含量对于肠膜小动脉血管的松弛的影响。

ChemMatrix® 多肽合成树脂，高效，快速，载样量高，副产物少。我们将会持续使用ChemMatrix树脂或者其他聚乙二醇类树脂，因为它具有更好的溶胀和亲水性。

前言使用液相色谱/三重四极杆质谱仪对蛋白质进行常规的高通量定量分析时，我们将多肽作为相应蛋白质的替代物。选择独特的多肽以及适合每种目标多肽的MRM 离子对是分析成功的关键步骤。考虑到仪器质量数范围限制，分析时通常不会选择具有高 m/z 母离子或子离子的多肽。但是，若要解决生物学问题，此类多肽也许能提供关键信息，甚至可能是唯一的分析选择。此类例子包括具有大型疏水性跨膜结构域的膜蛋白、带有多种翻译后修饰结构的蛋白质，以及内源性多肽等等。

常见的组成多肽的氨基酸有20种，根据其极性和酸碱性可以分为以下几组：非极性（疏水）、极性（不带电荷）、酸性以及碱性（参见图1）。在一条多肽序列中，如果组成该多肽的氨基酸大多为极性氨基酸（图1中粉红色标出部分），如半胱氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸等，那么该多肽可能具有较强的极性，易溶于水。在对该类强极性多肽样品的反相色谱制备纯化过程中，若采用普通的C18分离柱，将会发生疏水坍塌现象（具体请参见三泰科技之前发布的应用案例——《疏水坍塌与AQ反相色谱柱的应用》）。而改良后的C18AQ柱可以很好的适用于强极性或强亲水性样品的分离纯化，在本案例中，利用某强极性多肽作为样品，在C18AQ柱上进行了分离纯化，获得了可用于下一步研究的目标产物。

CEM 的微波多肽合成仪可与 HT 自动树脂装载配合，允许用户排列并自动连续合成多达 24 个多肽。对于队列中的每个多肽，成批的单个树脂被预加载到 HT 上，然后自动转移到 Liberty 合成仪进行肽合成。

本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-8050联用测定大鼠血浆中多肽类药物BNP类似物的方法。血浆样品经蛋白沉淀处理，再经岛津GL离心固相萃取小柱Mono Spin C18进行离心固相萃取，可在6.0 min内快速、准确地测定其中的BNP类似物。该方法采用奥曲肽作为内标定量，方法最低定量限5 ng/mL，BNP类似物线性范围为5~2000 ng/mL，相关系数大于0.997，线性良好。低、中、高浓度质控样品，每个浓度的样品平行处理6份， 其精密度与准确度分别在1.98～6.95 %与87.1~112.7%之间，方法精密度和准确度良好。不同浓度质控样品回收率在93.3%~111.1%之间，基质效应因子在89.1%~98.9%之间，内标归一化基质效应因子在93.4%~103.7%之间。空白大鼠血浆不干扰最低定量限的准确测定，目标物BNP类似物和内标奥曲肽之间无相互干扰，方法选择性良好。高浓度样品（2000 ng/mL）分析完成后进行空白样品分析，BNP类似物和内标奥曲肽的通道中均没有明显的目标化合物干扰。该方法灵敏、稳定，可以用于血浆中新型多肽药物BNP类似物的定量测定。

多肽类药物作用于体内各系统和细胞的生理功能，有良好的疗效和安全性。与传统的药物相比，多肽药物具有活性显著，特异性较强；与蛋白大分子药物相比，多肽类药物免疫原性相对较小，单位活性更高，且其合成和纯化也更容易。因此多肽药物临床治疗领域应用较多，其主要治领域包括治疗肿瘤、糖尿病、骨质疏松、疫苗等等。随着多肽药物的迅猛发展，多肽药物的分析和纯化需求也逐年递增。依利特推出的多肽药物的分析和纯化一站式解决方案，供相关人员参考使用。

CEM专利的环形电磁场结构设计，使氨基酸构成的卷曲肽链充分展开，进行彻底的去保护、耦合和裂解，反应变得极其快速，完全，高纯。Liberty BLUE比传统方法提高了近20倍；标准的10肽 ACP 序列合成纯度竟达到 98%，使得许多合成反应甚至可免去纯化步骤；可以完成传统方法不可能实现的困难合成。实现更多更长的氨基酸耦合，防止长链多肽聚合，消除双重耦合和外消旋现象，同时降低树脂的要求。BLUE 开辟了多肽合成的新纪元，使生物化学和蛋白质研究具备了空前的多肽合成的能力，是以前传统合成方法根本无法想象的。市场上没有任何一台多肽合成仪能与 BLUE相媲美。

随着越来越多的肽类药物的研发和上市，从临床前药物开发阶段获得药代动力学信息，到药物临床研究，再到治疗药物监测阶段，都离不开生物样本中多肽的定量分析技术。此外，具有诊断潜力的内源性肽类生物标志物的定量，以及蛋白特征肽段分析也依赖于多肽的生物分析技术。艾杰尔飞诺美提供多肽生物样本的制备技术，以及从小分子到大分子的色谱柱解决方案，助力多肽生物分析方法的高效开发。

94%）的多肽产品，为此类小分子多肽样品的分离纯化提供了一种高效、快速且成本低廉的解决方案。

本文使用高效液相色谱四极杆质谱联用仪LCMS-2050对泛素（Ubiquitin）多肽进行分子量测定。采用DUIS（ESI+APCI）正离子模式对待测样品进行质谱扫描，以LabSolutions软件对质谱扫描图进行解卷积多电荷分析，各质谱扫描图中均能观测到对应多肽的不同电荷数离子信号。结果显示，8种多电荷离子通过解卷积分析确认了分子量为8564.81，与理论值的偏差为-0.03Da，质量准确度高，体现了LCMS-2050质量范围宽的特点，适合多肽、寡核苷酸等大分子物质的分子量检测（多电荷分析）。

多肽是由多个氨基酸通过肽键连接而形成的一类化合物，通常由10~100个氨基酸分子组成，其连接方式与蛋白质相同，相对分子质量低于10000。多肽普遍存在于生物体内，迄今在生物体内发现的多肽已达数万种，其广泛参与和调节机体内各系统、器官、组织和细胞的功能活动，在生命活动中发挥重要作用。

本文描述一种快速有效的微波辅助固相合成方法，用以合成序列为WDTVRISFK的短肽，使用传统的Fmoc（9-芴氧羰基）/tBu（叔丁基）保护基策略。该合成方法是基于反应中的周期性脉冲微波辐射和间歇性冷却技术，在Fmoc保护基的脱除及偶联反应中均应用此技术。在应用微反应器技术后得到了高纯度和高收率的目标多肽。该反应在一个CEM单模微波反应器中进行，并且使用光纤进行连续测温。

多肽合成方法可分为生物合成法及化学合成法，随着基因重组技术的发展，多肽生物合成法除传统的天然提取法，酶解法、基因重组法也在多肽合成逐步得到应用；多肽化学合成法通过氨基酸之间的缩合反应来实现氨基酸连接延长，以获得特定序列的多肽。化学合成法具有研发周期短、可快速生产等优点，逐渐成为主流。在多肽药物的开发和生产过程中需要对产品和工艺相关杂质进行检测和评估，以保证药物质量可靠并且安全有效；目前主要的参考指南有国家药品监督管理局（NMPA）药品审评中心于2023年2月颁布的《化学合成多肽药物药学研究技术指导原则（试行）》以及之前发布的《制备工艺和过程控制对合成多肽药物有关物质的影响》、《合成多肽药物质控及杂质谱研究》等，涉及到氨基酸的组成和序列分析、多肽的分子量、含量、纯度和结构表征等质控分析，可利用HPLC、LC-MS、Q-TOF、MALDI-TOF、Edman降解法等进行相关检测分析。

多肽药物是介于大分子蛋白/抗体类药物和小分子药物之间的一类重要的药物分子，因其生物活性高、靶向专一性高、选择性高、毒副作用低等优点而被广泛应用于疾病治疗领域[1]。ThermoObitrap因其超高的分辨率，质量轴稳定性，已经广泛应用在了多肽药物结构表征中。Obitrap 作为高分辩还具有极高灵敏度和线性范围，因此也被越来越多的应用到药物的定量研究中。PTH 是甲状旁腺主细胞分泌的由84个氨基酸组成的多肽类激素，其对于维持钙磷代谢的稳定起着至关重要的作用。特立帕肽（SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNF，4117.7 Da）是一种人工重组合成的人PTH 1-34多肽，是第一个被美国食品药品监督管理局（Food and DrugAdministration，FDA）批准的抗骨质疏松性骨折的骨合成药物。

人组织多肽抗原(TPA)检测试剂盒人组织多肽抗原(TPA)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人组织多肽抗原(TPA)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人组织多肽抗原(TPA)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人组织多肽抗原(TPA)抗原、生物素化的人组织多肽抗原(TPA)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人组织多肽抗原(TPA)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

适用于液质联用 (LC/MS) 分析的蛋白质和多肽样品前处理的工作流程由于依赖于连续的手工操作而效率低下，导致试验方案缺乏通量、可扩展性和可转移性。这类工作流程通常依赖于技能非常娴熟的从业人员以达到可接受的重现性，或者在很多情况下，鉴于工作流程的特殊性，较大的差异是可被勉强接受的。为解决这些问题，可以采用安捷伦 AssayMAP Bravo 平台及其蛋白质组学工具套件实现 LC/MS 蛋白质组学工作流程常规样品处理工作的自动化，使 LC/MS 样品前处理具有可重现性、可扩展性、方案可移植性和易用性。本平台由顶级的液体处理器、一次性微量色谱柱和简单的用户可定制方案组成，可高通量地进行蛋白质酶解和多肽纯化。BSA 经酶解后纯化所得的分析性能数据表明 25 种 BSA 目标多肽的日间重现性良好， % CV 小于 5% 此外，我们还展示了用于多肽纯化的 AssayMAP RP-S 和 C18 反相柱的所有特性。

人胃泌素释放多肽(GRP)检测试剂盒人胃泌素释放多肽(GRP)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人胃泌素释放多肽(GRP)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人胃泌素释放多肽(GRP)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人胃泌素释放多肽(GRP)抗原、生物素化的人胃泌素释放多肽(GRP)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胃泌素释放多肽(GRP)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

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传统的固相法合成多肽是一个十分耗时的反应。为了提高产率，通常在鼓吹N2或涡旋混合的条件下进行。有些实验室将合成的温度提高到60℃左右，而这项措施在降低链聚合现象的同时却会导致新的副反应的发生。最近，生物化学家们发现，微波的介入，解决了多肽合成中维持一定温度和提高馈入能量之间的矛盾。利用微波进行固相多肽合成可以在有效的缩短反应时间的同时，大大提到产物的纯度和产量。

然而，多肽药物也有不可忽视的缺点，其化学与生理稳定性都较差，容易受到体内蛋白水解酶的降解，给多肽药物的研发带来了很多挑战。本文将从多肽类药物的药代动力学层面进行浅析，了解多肽类药物体外ADME研究策略，确定多肽类药物基础体外研究模型，助力多肽类药物早期研发！

生物活性检测有体外（in vitro）及体内（in vivo）两种路径。in vitro 评价方法包括但不限于酶动力学、结合力测定 而生物层干涉技术（BLI）在这篇文章中被提出是结合力测定的方法之一，特别是靶点明确的多肽药物，比如利拉鲁肽（与GLP-1受体）和特立帕肽（与PTH受体）。Octet分子互作仪（原ForteBio）是基于生物层干涉技术（BLI）的实时非标记互作检测设备，具有高通量、高灵敏度、使用简单、成本低等优点，已成为多肽药物研发过程中不可或缺的设备之一。

三氟乙酸常用于多肽的合成、纯化过程，多肽药物中三氟乙酸含量是一项重要的监测指标。本文建立了离子色谱法测定合成多肽药物中三氟乙酸残留含量的方法，获得了满意的结果。本法还可同时测定合成多肽药物中乙酸根、氯离子、磷酸根、硫酸根等无机阴离子。

分子量是评价聚乙二醇修饰多肽或重组蛋白药物的重要指标，本文展示了应用MALDI-TOF检测聚乙二醇化多肽药物及用于修饰反应的多肽、聚乙二醇等原料分子量的应用案例，本方法操作简便、分析速度快，可作为多肽药物修饰产物确认、原料质量控制的参考。

新近研究表明，通过质谱法已建立了多种独特的血清多肽组表达模式库，而血清多肽组表达模式与临床症状密切相关。阐明血清中多肽组成的序列特征及其产生机制，将有助于将血清多肽组表达模式作为可靠的疾病标识而更加广为接受。我们采用一种高度优化的多肽提取方法和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术进行的研究表明，仅靠一套有限的血清多肽表达模式（一个特征），即可将3 种类型的实体肿瘤患者和未患癌的对照受试者准确地区分开来。61 个特征肽段的靶序列识别结果显示，这些肽又可分为密切相关的几个簇，大多数是由于造成肿瘤类型特异性差异的胞外蛋白酶活性影响了体内结合蛋白质的水解过程和补体的降解过程而产生的。这一特征肽段家族成员虽少、但功能极为强大，可精确预测前列腺癌样本的分级，其准确度与其他标准方法可比。总之，本研究表面，疾病的肽段标记物表达谱和蛋白酶活性的差异之间存在直接的相互关联，而且，本文中所描述的几种肽段表达模式在临床上有望用作癌症检出和分级的标记物，同时我们的发现对未来的肽段生物标记物的研究也具有重要的提示意义。

人多肽YY(Peptide-YY)检测试剂盒人多肽YY(Peptide-YY)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人多肽YY(Peptide-YY)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人多肽YY(Peptide-YY)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人多肽YY(Peptide-YY)抗原、生物素化的人多肽YY(Peptide-YY)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人多肽YY(Peptide-YY)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

人转谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)检测试剂盒人转谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)检测试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围： 规格：96T/48T使用目的：本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人转谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)含量。实 验 原 理 本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中人转谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)水平。用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人转谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)抗原、生物素化的人转谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人转谷氨酰胺酶2C多肽(TGM2)呈正相关。 使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度

通常，使用 UV 检测的多肽色谱分离是通过 C18 柱以及三氟乙酸 (TFA) 改性的流动相完成，这种方法可以改善分离度，但同时会抑制质谱 (MS) 信号。甲酸 (FA) 是用于 MS 检测的首选流动相改性剂，但它可能会导致传统 C18 柱无法达到最佳分离效果。本应用简报介绍了通过单一液相色谱方法，采用 Agilent AdvanceBio Peptide Plus 色谱柱分离合成多肽杂质，并使用 UV 或 MS 进行检测。本方法使用 FA 作为流动相改性剂，可以提供足够的分离度以鉴定并定量多肽杂质。