乙酸地塞米松

新年来了，继续开展你究竟有几个好亲戚——有奖征集照片活动，一张不重复的照片奖励十分，如果是网上下载的图片则加1到3分，照片要能看出是什么品牌或者厂家哦，本次有奖征集的是复方醋酸地塞米松乳膏照片。 自己先来几张先。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/01/201201301140_346876_1645752_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/01/201201301141_346877_1645752_3.jpg

[font=宋体]◇[/font][font=宋体]地塞米松[/font][font=宋体]杂质[/font][font=宋体] 地塞米松[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]其英文名为[/font][font=Helvetica][color=#333333]D[/color][/font][font=Helvetica][color=#333333]examethasone，简称[/color][/font][font=宋体][color=#333333]是[/color][/font][font=Helvetica][color=#333333]DXMS[/color][/font][font=宋体][color=#333333]，[/color][/font][font=宋体][color=#333333]它[/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][back=#fdfdfe]是一种重要的肾上腺糖皮质激素，[/back][/color][/font][font=宋体]地塞米松[/font][font=宋体]的[/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][back=#fdfdfe]原理[/back][/color][/font][font=宋体][color=#05073b][back=#fdfdfe]机制[/back][/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][back=#fdfdfe]主要是通过抑制免疫系统，降低毛细血管通透性、减少炎性[/back][/color][/font][font=宋体][color=#05073b][back=#fdfdfe]的[/back][/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][back=#fdfdfe]渗出、抑制组胺及其他毒性物质的形成和释放等[/back][/color][/font][font=宋体][color=#05073b][back=#fdfdfe]。[/back][/color][/font][font=宋体]地塞米松[/font][font=宋体][color=#05073b][back=#fdfdfe]在临床上主要用于[/back][/color][/font][font='Segoe UI'][color=#05073b][back=#fdfdfe]抑制免疫系统的活化，起到抗炎、抗过敏的作用[/back][/color][/font][font=宋体][color=#05073b][back=#fdfdfe]。[/back][/color][/font][font=宋体][font=Calibri] CATO[/font][font=宋体]标准品提供的[/font][/font][font=宋体]地塞米松[/font][font=宋体]杂质用途主要是用于分析化学物质和质量控制的化学物质。[img=,601,521]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/02/202402062133067346_4625_6381607_3.png!w601x521.jpg[/img][/font][font=宋体][font=宋体] 广州佳途科技股份有限公司，[/font][font=Calibri]CATO[/font][font=宋体]标准品厂家，提供[/font][/font][font=宋体]地塞米松[/font][font=宋体]全套[/font][font=宋体]的[/font][font=宋体]杂质，通过全面的检测、高效的沟通、专业的服务和完善的售后，确保所有产品均能现货供应[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]致力于为客户提供高质量的产品和优质的服务，以满足客户在药物研发和质量控制方面的需求。[/font]

关于溶剂效应是HPLC实验过程中经常遇到的问题，不仅影响峰形，而且对柱效的影响也是很明显的。在2010版药典中，地塞米松的检测，溶剂是甲醇，而现在2015版药典中的溶剂是流动相，实验室做了对比，和大家分享一下！！！http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603301354_588606_1987954_3.pnghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603301354_588607_1987954_3.png

10，抽取5个版友）；中奖名单：夏天的雪（注册ID：bingwang228）捌道巴拉巴巴巴（注册ID：v3082413）sixingxing（注册ID：v2889187）yifan1117（注册ID：yifan1117）dahua1981（注册ID：dahua1981）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/10/201610241505_614864_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/10/201610241505_614865_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================地塞米松磷酸钠注射液方法：HPLC基质：药品应用编号：101419化合物：地塞米松磷酸钠固定相：Diamonsil C18色谱柱/前处理小柱：Diamonsil C18, 250 x 4.6mm样品前处理：【有关物质】 取本品，加流动相定量稀释制成每1ml中约含地塞米松磷酸钠0.5mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。另取地塞米松对照品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，精密量取1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。 【含量测定】 精密量取本品适量，用水定量稀释制成每1ml中约含地塞米松磷酸钠0.4mg的溶液，精密量取5ml，置50ml量瓶中，流动相稀释至刻度，摇匀，测定。色谱条件：检测波长：UV 242 nm 流动相：三乙胺溶液（三乙胺7.5ml，加水稀释至1000ml，用磷酸调pH至3.0±0.05）-甲醇-乙腈（55:40:5） 洗脱方式：等度 进样量：20 ul文章出处：迪马科技关键字：地塞米松磷酸钠，钻石二代，diamonsil C18（2），《中国药典》2010版，摘要：地塞米松磷酸钠注射液检测谱图：http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/12334(1).JPG

作者：陈丽娜; 李东; 谢燕贤; 温中明; 廖朝峰; 李惠民;（广东省深圳市宝安区人民医院; 广东省深圳市人民医院; 暨南大学医学院第二临床医学院; 广东省深圳市宝安区石岩医院; 广东省深圳市光明新区公明医院;）摘要：目的采用高效液相色谱法测定复方洛美沙星即型凝胶滴耳剂中地塞米松的含量。方法以Diamonsil C18柱为色谱柱,流动相为乙腈-水(40:60,pH为3.0～3.5),流速为1mL/min,柱温40℃,检测波长240nm,进样量20μL。以峰面积外标法计算。结果洛美沙星质量浓度在0.015～0.036mg/mL范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999(n=5),平均回收率为98.01%,RSD=2.95%(n=9)。结论该法操作简便、快速,结果准确可靠,重现性好,可用于测定复方洛美沙星即型凝胶滴耳剂中地塞米松的含量。谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208271022_386296_1606903_3.jpg

10，抽取5个版友）；中奖名单：WUYUWUQIU（注册ID：wulin321）莫名其妙(注册ID：moyueqiu)玲儿响叮当（注册ID：jshbhh）千层峰（注册ID：jxyan）吕梁山（注册ID：shih20j07）http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/12/201612141537_01_1610895_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/12/201612141537_02_1610895_3.jpg【注意事项】同样的答案，每人只能发一次PS：该贴浏览权限为“回贴仅作者和自己可见”，回复的版友仅能看到版主的题目及自己的回答内容，无法看到其他版友的回复内容。下午3点之后解除，即可看到正确答案、获奖情况及所有版友的回复内容。=======================================================================苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜、脱氢乙酸的测定方法：HPLC基质：标准溶液应用编号：101812化合物：苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜、脱氢乙酸固定相：Diamonsil C18(2)色谱柱/前处理小柱：Diamonsil 5μm C18(2), 250 x 4.6mm样品前处理：样品制备 制备方法： 分别取苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜、脱氢乙酸适量，用水溶解，配成浓度为0.02 mg/mL的混合标准溶液。色谱条件：分析条件 色谱柱： Diamonsil C18(2)，250×4.6 mm，5 μm (Cat#：99603) 流动相： 甲醇：0.02 mol/L乙酸铵=6:94 流速： 1.0 mL/min 柱温： 30 ℃ 检测器： UV 230 nm 进样量： 10 μL文章出处：天津迪马实验室关键字：苯甲酸，山梨酸，糖精钠，安赛蜜，脱氢乙酸，Diamonsil C18(2)，99603摘要：苯甲酸、山梨酸、糖精钠、安赛蜜、脱氢乙酸的测定谱图：http://www.dikma.com.cn/Public/Uploads/images/ansaimi3(1).PNG备注：1-安赛蜜 2-苯甲酸 3-山梨酸 4-糖精钠 5-脱氢乙酸

[b]1、引言[/b] 糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜是常用的甜味剂，苯甲酸钠、山梨酸钾、脱氢乙酸钠是常用的防腐剂。按GB 2760-2014，上述6种添加剂在诸多种类食品中都可使用。咖啡因也是一种常见的食品添加剂，并且在含茶、咖啡、可可的饮料和糕点中广泛存在。在实际生产实践中，对上述7种添加剂的测定属于常规需求，实施较为频繁。 按GB 5009系列标准，上述项目均有标准方法，但较为分散。整理如下表[img=,690,753]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/08/202008291644476781_2922_2204387_3.png!w690x753.jpg[/img] 上述7个项目隶属于5个不同的方法，需要分别测定，这就带来了诸多不便。考虑到五个标准方法由较多的相似性，只要确定了合适的色谱分离条件，上述7个项目完全可以整合到一个方法中进行测定。虽然有文献报道了相关的尝试（[color=#33ccff]见：卫星华,李荣,董曼曼,艾芸,张亚锋,高安成.高效液相法同时测定饮品中8种食品添加剂[J].食品研究与开发,2017,38(24):137-140.[/color]），但是开发的方法需要梯度洗脱，单次分析需要40分钟以上，且每次进样之后需重新平衡。其他学者也进行了类似的研究，同样存在梯度洗脱时间长的问题（[color=#33ccff]例如：姚浔平,李小平,姚珊珊,金米聪.高效液相色谱法同时测定食品中10种添加剂[J].中国卫生检验杂志,2009,19(01):9-11.[/color]）。使用超高效液相色谱法可以显著提高分析速度（[color=#33ccff]见：高敬铭,刘莹,姬建生,符锋.超高效液相色谱法同时测定食品中5种添加剂[J].理化检验(化学分册),2016,52(01):29-32.[/color]），但是仪器要求提高，目前尚不普及。 本文的主要目的是通过简便的等度洗脱方法实现上述7个目标物的快速分离，从而实现这7个项目同时测的，提高工作效率。.[b]2、实验方法[/b][align=left][b][font='Times New Roman']2.1 [/font][font=宋体]材料与试剂[/font][/b][/align][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体]安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、咖啡因、阿斯巴甜标准品纯度均不低于[/font][font='Times New Roman']99.5% [/font][font=宋体]上海阿拉丁公司；甲醇（色谱纯）、磷酸二氢铵（分析纯）、氨水（分析纯）[/font][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体]上海国药试剂公司；实验用水为二次蒸馏水。[/font][align=left][b][font='Times New Roman']2.2 [/font][font=宋体]仪器与设备[/font][/b][/align][font='Times New Roman'] iChrom 5100[/font][font=宋体]色谱系统，配[/font][font='Times New Roman']D5115[/font][font=宋体]二极管阵列检测器（[/font][font='Times New Roman']DAD[/font][font=宋体]）[/font][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体]大连依利特公司；[/font][font='Times New Roman'] S210-B pH[/font][font=宋体]计、[/font][font='Times New Roman']XP6[/font][font=宋体]微量天平[/font][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体]瑞士梅特勒公司；[/font][font='Times New Roman'] L400[/font][font=宋体]离心机[/font][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体]湖南长沙湘仪公司。[/font][b][font='Times New Roman']2.3 [/font][font=宋体]方法[/font][font='Times New Roman']2.3.1 [/font][font=宋体]样品处理[/font][/b][font='Times New Roman'] [b]液体样品（饮料类）[/b]：[/font][font=宋体]准确称取试样[/font][font='Times New Roman']1.000 g[/font][font=宋体]置于[/font][font='Times New Roman']15 mL[/font][font=宋体]离心管中，加入[/font][font='Times New Roman']0.1 mol/L[/font][font=宋体]硫酸锌溶液[/font][font='Times New Roman']5 mL[/font][font=宋体]、[/font][font='Times New Roman']0.2 mol/L[/font][font=宋体]氨水[/font][font='Times New Roman']5 mL[/font][font=宋体]，先机械振荡混匀，然后超声[/font][font='Times New Roman']5 min[/font][font=宋体]，[/font][font='Times New Roman']4000 r/min[/font][font=宋体]离心[/font][font='Times New Roman']5 min[/font][font=宋体]。将上清液过滤到[/font][font='Times New Roman']25 mL[/font][font=宋体]容量瓶中，沉淀加色谱流动相（见[/font][font='Times New Roman']2.3.2[/font][font=宋体]）洗涤[/font][font='Times New Roman']2[/font][font=宋体]次、每次[/font][font='Times New Roman']8mL[/font][font=宋体]，洗涤液也滤到同一容量瓶中，用流动相定容。[/font] [b]固体样品（糕点类）[/b]：称取食品试样20~50g（精确至0.01g） ，加水100~200g（精确至0.1g） ，用高速匀浆机充分破碎混匀。然后按液体样品同样方法处理。 [b]含油脂较多的样品[/b]：先按固体试样相同方法进行匀浆。称取匀浆后的样品1.0~2.0g（精确至0.001g）置于15 mL离心管中，加氨水（0.2mol/L）5mL、乙醇0.5mL，混匀后再加正己烷5mL，加盖后剧烈震荡5min，然后4000 r/min离心5 min使样品分层。用吸管吸出大部分正己烷弃去，然后再加正己烷5mL重复萃取一次 。弃去正己烷相，水相用氮气吹扫使残余的正己烷挥发，然后加入硫酸锌溶液（0.1 mol/L）5 mL，混匀并剧烈振荡5 min。4000 r/min离心5 min分离沉淀，将上清液过滤到25 mL容量瓶中，沉淀加色谱流动相洗涤2次、每次8mL，洗涤液也滤到同一容量瓶中，用流动相定容，待色谱测定。[font='Times New Roman'][b]2.3.2 色谱条件[/b][/font][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体]色谱柱：[/font][font='Times New Roman']Thermo Hypersil C18 (4.6 mm × 200 mm, 5 μm)[/font][font=宋体]；流动相：甲醇[/font][font='Times New Roman']/[/font][font=宋体]磷酸盐缓冲液体积比为[/font][font='Times New Roman']20/80[/font][font=宋体]，其中磷酸盐缓冲液为[/font][font='Times New Roman']0.1 mol/L[/font][font=宋体]磷酸二氢铵溶液用氨水调节至[/font][font='Times New Roman']pH = 5.5[/font][font=宋体]；等度洗脱，流速为[/font][font='Times New Roman']1.000 mL/min[/font][font=宋体]；柱温为[/font][font='Times New Roman']30.0 ℃[/font][font=宋体]；进样体积为[/font][font='Times New Roman']10.00 μL[/font][font=宋体]。使用[/font][font='Times New Roman']DAD[/font][font=宋体]检测器，检测波长分别为：安赛蜜[/font][font='Times New Roman']225 nm[/font][font=宋体]，糖精钠[/font][font='Times New Roman']210 nm[/font][font=宋体]，苯甲酸[/font][font='Times New Roman']222 nm[/font][font=宋体]，山梨酸[/font][font='Times New Roman']250 nm[/font][font=宋体]，脱氢乙酸[/font][font='Times New Roman']228 nm[/font][font=宋体]，咖啡因[/font][font='Times New Roman']272 nm[/font][font=宋体]，阿斯巴甜[/font][font='Times New Roman']210 nm[/font][font=宋体]。[/font][b][font='Times New Roman']2.3.3 [/font][font=宋体]定性与定量方法[/font][/b][font='Times New Roman'] [/font][font=宋体]分别精确称量各标准品[/font][font='Times New Roman']10.00 mg[/font][font=宋体]，定容至[/font][font='Times New Roman']10 mL[/font][font=宋体]，制得浓度分别为[/font][font='Times New Roman']1.000 g/L[/font][font=宋体]的单标储备液，其中安赛蜜、糖精钠、阿斯巴甜的溶剂为纯水，其余的溶剂为甲醇。[/font] 依次准确吸取一定体积的单标储备液混合并用流动相（见1.3.2）稀释至1.00 ~ 50.0 mg/L的浓度范围，得到标准溶液系列。将标准溶液系列按相同色谱条件进行测定，以保留时间和DAD光谱匹配进行定性，以峰面积外标法建立工作曲线进行定量。.[b]3、问题讨论3.1 色谱流动相选择[/b] 原有方法测定7种目标物均采用反相色谱模式、C-18柱，本方法仍然选用C-18柱进行分离，因此实现分离的关键在于流动相的选择。 首先进行了改变有机相比例的实验，但这方面对分离效果的优化并不明显。提高有机相比例时，各目标物的保留时间均减小，分离度也随之减小。降低有机相比例时分离度增加，但各目标物的保留时间都显著延长，总体分析时间太长，不实用。 pH是影响这7种目标物分离的最重要因素。其中[font=宋体]安赛蜜、糖精钠均为强酸盐、苯甲酸钠、山梨酸钾、脱氢乙酸钠均为弱酸盐，咖啡因是弱碱，阿斯巴甜属于两性物质，随着流动相pH的变化，其存在形式会有显著不同，保留能力也随之变化明显。有不少文献也考查了pH的分离的影响（[color=#33ccff]例如：方晓丽.超高效液相色谱同时测定饮料中5种食品添加剂[J].食品工业,2018,39(12):314-318.| 汪辉,曹小彦,陈利国,黄秀明.高效液相色谱法同时测定蜜饯中5种常见食品添加剂[J].分析试验室,2007(11):119-122.| 尤妍,潘辉国,陈盼盼,董琴芳,章萍萍.高效液相色谱法同时测定饮料中5种添加剂[J].食品研究与开发,2016,37(04):164-166.| 姚浔平,李小平,姚珊珊,金米聪.高效液相色谱法同时测定食品中10种添加剂[J].中国卫生检验杂志,2009,19(01):9-11.[/color]），但是数据较为零散，并没有揭示出有用的变化规律，因此缺乏指导意义，实验结果也不易重复。本研究在较宽的范围内考查了各目标物保留时间的变化趋势，并对各目标峰的相对位置进行了对比，结果如下图：[/font][font=宋体].[/font][align=center][font=宋体][color=#ff0000][img=,690,540]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/08/202008291807280222_7045_2204387_3.png!w690x540.jpg[/img][/color][/font][/align][align=center][color=#ff0000]流动相pH对7种目标物保留时间的影响（流动相为甲醇/缓冲液=20/80）[/color][/align][align=left].[/align][align=left] 糖精钠和安赛蜜都是强酸盐，相当于非常弱的碱，咖啡因本身就是极弱的碱，因此他们在弱酸性范围内存在形式不会有显著变化。只有在pH小于2之后，其保留时间才会水pH显著变化，但是通常色谱柱不能承受强酸，因此对pH小于2的情况不予考虑。阿斯巴甜是两性物质，在等电点附近呈分子内电离的形态，是保留最弱的。当pH增大或者减小时，其电离程度都是减小，保留时间都会表现为增大，但pH大于8是通常色谱柱不能承受的，因此也不予考虑。苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸都是羧酸，pKa均在5左右，因此其存在形式在pH从4到6变化时会显著不同，其保留时间在这个pH范围内也是变化最为显著的。pH减小时，羧酸形式存在占主导，因此其保留时间变大；pH增大时，盐形式存在的比例变多，因此保留时间减小；并且对于酸性强度不同的物质，其变化幅度和变化发生的pH范围也是显著不同的。相关理论在众多色谱专著中均有讨论（[color=#33ccff]参见：Lloyd R.Snyder，Joseph J.Kirkland ，John W.Dolan，（译者：陈小明 唐雅妍[font=arial, &][/font]），现代液相色谱技术导论，人民卫生出版社，2012.[/color]）。[/align][align=left] 上述讨论也说明，对于酸类物质的色谱分析，一定要精确控制流动相的pH。有些标准中对流动相pH未作明确的说明，这是极为不妥的，试剂的微小差异就会导致分析结果显著不同。例如GB 5009.28-2016中只规定了流动相加入乙酸铵，但实际购买的乙酸铵试剂pH可在6.5~7.5范围内变化，有时候就会导致苯甲酸与糖精钠的峰位置前后互换。[/align][align=left] 在明确了上述变化规律之后，流动相pH选择的问题也迎刃而解：显然在pH=5.5附近对于分离是最为有利的，不仅各目标物分离度较高，而且总的分析时间不太长，只需约15分钟。需要指出的是，由于pH计往往存在误差，实际配置缓冲液时并不一定按图中数值，而需要根据实际情况进行微调。若实测中发现脱氢乙酸与咖啡因分离度较低，说明配置的缓冲液pH略有偏低，应适当调高pH（通常调高0.1单位即可改善）；若实测中发现脱氢乙酸与山梨酸分离度较低，说明配置的缓冲液pH略有偏高，应适当调低pH（通常调低0.1单位即可改善）。[/align][align=left] 在上述讨论的最佳流动相条件下，标样和实际样品的分离效果都很好，见下图：[/align][align=center][img=,690,719]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/08/202008291903133024_5403_2204387_3.png!w690x719.jpg[/img][/align][align=center][color=#ff0000]标样和实际样品的色谱图（流动相为甲醇/缓冲液=20/80，缓冲液为0.1M磷酸二氢铵溶液用氨水调节至pH5.5）[/color][/align][align=center][color=#ff0000].[/color][/align][align=left] 另外要补充说明的是，虽然标准方法中使用的缓存盐常常是乙酸或者甲酸体系，但实际上并不是最佳选择。因为有机酸本身会产生一定的背景吸收，在低波长下尤其明显。而磷酸盐体系的背景吸收要小得多，这对减小背景干扰和基线漂移是有利的。[/align][align=left][b]3.2 检测波长选择[/b][/align][align=left] 7种目标物的的吸收波长各不相同，用DAD检测器可较好解决问题，并且有助于通过吸收光谱图定性。若没有配备DAD检测器，可用一般可变波长紫外检测器的“波长时间程序”功能。[/align][align=left] 通过较高浓度标样测得7种目标物的色谱-光谱图如下，其紫外吸收谱图和最大吸收波长可供参考。[/align][align=left][img=,690,1127]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/08/202008291912345152_2614_2204387_3.png!w690x1127.jpg[/img][/align][align=left] 需要说明的是，糖精钠和阿斯巴甜的最大吸收波长都在较低波段，易受到背景吸收和样品基体的干扰，因此实际选用的是210nm进行检测，灵敏度虽然有所降低，但干扰也明显减轻。实际应用中发现，少数情况下，糖精钠仍然会受到基质干扰，此时可进一步将其检测波长降低到215~220nm，基质干扰基本上就减小到可忽略的程度了。[/align][align=left] 另外，不同文献中报道的各种目标物的最大吸收波长有一些出入，这一方面与不同仪器的波长误差有关，更重要的是因为目标物的离解程度随pH变化，不同pH下测得的最大吸收波长会有明显差异。[/align][align=left][b]3.3 样品前处理[/b][/align][align=left] 本方法参考现有方法，采用了锌盐沉淀的吸附和絮凝作用来净化除杂，但是未使用亚铁氰化钾和乙酸锌，也未采用三氯乙酸沉淀蛋白。因为这几种物质都有末端吸收，在接近210nm处产生的紫外吸收较为明显，而其色谱流出的时间又都与安赛蜜、糖精钠等物质接近（例如，三氯乙酸的流出时间与糖精钠几乎相同）。本方法采用氨水和硫酸锌生成氢氧化锌絮状沉淀，其吸附与絮凝效果与亚铁氰化钾-乙酸锌体系较为接近，同时不引入干扰离子。[/align][align=left] 对于含油脂较多的试样，本方法仍采用正己烷萃取除脂，与常规方法基本一致。[/align][align=left][b]3.4 方法验证[/b][/align][align=left] 对方法的重现性、线性范围、加标回收率进行了验证，详细数据较多，这里从略，主要结果如下：[/align][align=left] （1）标样7次重复测定的重现性很好，RSD均小于1%。但样品处理的重现性略差，同一样品匀浆后分别进行7次净化和测定，RSD在1%~3%。[/align][align=left] （2）7种目标物在1~50mg/L范围内线性相关系数均大于0.999，以取样1.0g计，测定范围相当于0.025~1.25g/Kg。考虑到添加剂的实际使用情况，未对更高含量水平进行验证。[/align][align=left] （3）按三倍信噪比估算，检出限均低于0.1mg/L，远低于常规检测范围，故未进一步对验证检出限。[/align][align=left] （4）进行了1g/Kg和0.1g/Kg两个水平的加标实验，阿斯巴甜的回收率略低，分别为94.1%和95.7%，其余目标物的回收率均在98%~101%之间。推测可能是阿斯巴甜容易被氢氧化锌沉淀吸附，导致回收率略低。[/align][align=left].[/align][align=left][b]4、结论[/b][/align][align=left] （1）使用C-18色谱柱，使用甲醇与pH=5.5的磷酸盐缓冲液按20/80比例作为流动相，可以在等度洗脱条件下实现[font='Times New Roman'] [/font][font=宋体]安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、咖啡因、阿斯巴甜等[/font]7种物质的完全分离，分析时间约15分钟。[/align][align=left] （2）基于上述色谱分离方法，可以实现7种常见食品添加剂的同时测定，结果较为准确，可以用于生产实践。[/align]

【活动】【原创中秋测】我的中秋月饼中安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸检测故事样品：各类月饼检测项目：山梨酸、苯甲酸、糖精钠、安赛蜜脱氢乙酸仪器条件：Waters e2695 ；色谱柱：Waters T3/250*4.6mm；检测器：PDA 230 nm 柱温：35 ℃；进样量：20 μL 流速：1.0 mL/min流动相：A:甲醇 D:0.02 mol/L醋酸铵水 Time(min) 0.0 10 10.1 15.0 15.1 20.0 A% 8 8 50 50 8 8样品处理：称2.0 g样品于50 mL离心管中，加入30 mL水均质提取1min，转移至50mL比色管中，含蛋白质样品加入5 mL 106 g/L亚铁氰化钾和5 mL 220 g/L乙酸锌沉淀剂（不含蛋白质不必加入沉淀剂）加入5mL甲醇，再加水定容到50 mL，摇匀，倒入50mL离心管，4000r/min离心5min(必要时取少量15000r/min高速离心)，取上清液过0.45μm水系滤膜，上机检测[img=,690,423]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809251348054203_4797_2166779_3.png!w690x423.jpg[/img][img=,690,167]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809251351047260_5339_2166779_3.png!w690x167.jpg[/img]标准使用液配制记录：[img=,690,338]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809251353029794_3597_2166779_3.png!w690x338.jpg[/img]样品空白与混合标液2.0ug/mL堆栈色谱图：[img=,685,497]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809251403147035_9882_2166779_3.png!w685x497.jpg[/img]样品加标与样品堆栈色谱图：[img=,690,492]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809251355184880_1617_2166779_3.png!w690x492.jpg[/img]该样品的脱氢乙酸含量为：0.12g/kg（GB2760-2014规定为小于等于0.5g/kg），合格。回收率计算：（称取2.0g样品，加入混合标液100ug/mL1.0mL定容至50mL，加标浓度为0.050g/kg，理论上机浓度为2.0ug/mL）安赛蜜：102.5%、苯甲酸：76.0%、山梨酸：114.5%、糖精钠：96.5%、脱氢乙酸：95.5%；另一月饼的检测：混合标液光谱图：[img=,633,331]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809251413079635_2941_2166779_3.png!w633x331.jpg[/img]月饼检测的光谱图：[img=,690,341]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809251414182969_8069_2166779_3.png!w690x341.jpg[/img]该样品的山梨酸经光谱图验证后不是山梨酸，下面重点说下苯甲酸，该样品苯甲酸为0.03g/kg，依据GB2760-2014规定：月饼及月饼馅料中的苯甲酸均为不得使用，那是不是这个月饼样品就不合格呢？GB2760-2014中是这样规定带入原则的：[b]1.4 带入原则1.4.1在下列情况下食品添加剂可以通过食品配料（含食品添加剂）带入食品中：[/b][color=#1e1e1e]a) 根据本标准，食品配料中允许使用该食品添加剂；[/color][color=#1e1e1e]b) 食品配料中该添加剂的用量不应超过允许的最大使用量；[/color][color=#1e1e1e]c) 应在正常生产工艺条件下使用这些配料，并且食品中该添加剂的含量不应超过由配料带入的水平；[/color][color=#1e1e1e]d) 由配料带入食品中的该添加剂的含量应明显低于直接将其添加到该食品中通常所需要的水平。[/color][b]1.4.2当某食品配料作为特定终产品的原料时，批准用于上述特定终产品的添加剂允许添加到这些食品配料中，同时该添加剂在终产品中的量应符合本标准的要求。在所述特定食品配料的标签上应明确标示该食品配料用于上述特定食品的生产。2 食品添加剂的使用规定[/b][color=#1e1e1e]2.1表A.1列出的同一功能的食品添加剂（相同色泽着色剂、防腐剂、抗氧化剂）在混合使用时，各自用量占其最大使用量的比例之和不应超过1。[/color][color=#1e1e1e]2.2表A.3规定了表A.2所例外的食品类别，这些食品类别使用添加剂时应符合表A.1的规定。同时，这些食品类别不得使用表A.1规定的其上级食品类别中允许使用的食品添加剂。[/color][color=#1e1e1e]那会不会是什么月饼原料带入的呢？[/color][color=#1e1e1e][img=,690,213]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809251422240215_476_2166779_3.png!w690x213.jpg[/img][/color][color=#1e1e1e]那会不会是调味糖浆带入的呢？因为调味糖浆有允许使用的苯甲酸，限量为1.0g/kg，[/color][color=#1e1e1e]向生产企业要月饼生产的配料表：[/color][color=#1e1e1e][img=,489,244]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809251429529344_2683_2166779_3.png!w489x244.jpg[/img][/color][color=#1e1e1e]果然，这个月饼配料中有使用调味糖浆啊，这个GB2760的判定真的是有点防不胜防啊，不仅要会检测，而且还要会知道有哪些可能是由哪些原料带入的啊。[/color][color=#1e1e1e]结论：1、GB 5009.28-2016标准的液相方法样品经水提取,高脂肪样品经正己烷脱脂、高蛋白样品经蛋白沉淀剂沉淀蛋白,GB/T 5009.140-2003标准中对于汽水是先加热出去二氧化碳，然后取2.5mL稀释10倍上机检测，对于可乐、果茶、果汁类饮料是吸取2.5mL加20mL水稀释，离心，上清液过中性氧化铝柱，流动相洗脱、收集25mL作为上机检测液。GB 5009.28-2016液相色谱法采用GB/T 23377-2009法，标准中果蔬汁全部过柱；我们是如果有干扰才过柱。2、标准全部用超声波提取；我们是除去黄油类、果汁类，其他一般用均质提取，效率，回收率都能大大提高。3、过柱步骤，最后用水稀释上机，峰形好，标准方法峰形不好。 2、沉淀剂主要用于需除蛋白的样品，如肉酱，酱油，酱菜等；如上层有油层，则吸取中间清液； 3、四种混合标准中间溶液应用流动相配置（试验中发现用水配置，苯甲酸、山梨酸不稳定） 4、GB 5009.28-2016标准中提到当存在干扰峰或需要辅助定性时,可以采用加入甲酸的流动相来测定,如流动相:甲醇+甲酸-乙酸铵溶液（2mmo l / L甲酸+2 0mmo l / L乙酸铵）=8+92。 [/color][color=#1e1e1e]5、防腐剂在GB2760中的带入原则要慎重考虑，以免误判。[/color][color=#1e1e1e][/color][color=#1e1e1e][/color]